微粒子
【課題】微粒子及びそれらの形成方法及びそれらの治療における使用方法、特に無針注入システムを使用する皮膚を通して有効成分を送達する方法を提供する。
【解決手段】治療用薬剤を含んでなる微粒子、または治療用薬剤からなるそのような微粒子であって、粒子密度が固体薬剤の少なくとも８０％であり、かつ形状関数が１〜５である微粒子を用いる。該微粒子は噴霧乾燥により製造されてよく、かつ無針注入に使用されてよい。
【解決手段】治療用薬剤を含んでなる微粒子、または治療用薬剤からなるそのような微粒子であって、粒子密度が固体薬剤の少なくとも８０％であり、かつ形状関数が１〜５である微粒子を用いる。該微粒子は噴霧乾燥により製造されてよく、かつ無針注入に使用されてよい。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
発明の分野
本発明は微粒子、それらの形成方法およびそれらの治療における使用法、特に無針注入システムを使用する、皮膚を通しての有効成分の送達のための方法に関する。
【０００２】
背景技術
無針注入器は、粒子を皮膚および粘膜バリアに浸透できる速度に加速するために圧縮ガスを使用する。そのような装置はＷＯ−Ａ−９４／２４２６３に記載されている。該粒子は機械的強度を有することが求められ、高密度であることが有利である。同一形状、好ましくは球形で、制御された粒径分布の粒子を用いるのも有益である。これらの因子は該粒子の空気力学的挙動および浸透に影響し、そのため有効成分の送達の効能にも影響する。有用な粒子の粒径は、典型的には１０〜５００μｍの範囲である。
【０００３】
固体または高密度の微粒子は、例えばより大きな粒子の微小化、結晶化、沈殿または他の溶液ベースの微粒子生成技術のような、ミリング（milling）により製造できる。しかし、典型的には、これらの技術により球状微粒子は製造されない。
【０００４】
通常は固体微粒子を製造しない技術には、しばしば低密度微粒子および凝集塊を形成する噴霧乾燥がある。高密度の製品が重要となる主な産業は、スキムミルクパウダーを製造する乳製品産業である（Spray Drying Handbook, K. Masters, 5th Edition, 1991, Longman Scientific and Technical, Pages 330-336)。この節では、通常の噴霧乾燥により製造された生成物を顕微鏡写真で示し、それらは「空胞」を含み、「低密度」であり、壁が薄く、「機械的な取り扱いには耐えられず、容易に断片化し」、かつ多量および少量の空気を吸蔵すると述べられている。密度がいく分増加するのは、ゆがめられ、縮められた粒子を製造する、より複雑な２段階の噴霧乾燥工程が用いられるためである。Charlesworth and Marshall, J. Appl. Chem. Eng., 6 No. 1, 9(1960)には、崩壊、水泡、気泡または膨張の結果として、総ての粒子が多孔性、スポンジ様、または空気を吸蔵する構造となる、噴霧乾燥により製造された粒子の形態学について記載されている。噴霧乾燥工程において空気の吸蔵が最適化された工程の例がＷＯ−Ａ−９２／１８１６４、ＷＯ−Ａ−９６／０９１８４およびＷＯ−Ａ−９６／１８３８８に記載されている。
【発明の概要】
【０００５】
驚くべきことに、慎重に制御された噴霧乾燥条件を用いれば、物質から固体または半固体の密度の高い小球を製造できることが見出された。これらの小球は特に、その密度と球状性のために、無針注入システムにおける使用に適している。より詳細には、相対性粒子密度が固体物質の少なくとも８０％であってよく、しばしば少なくとも９０％、また１００％であってもよい。球状であるとは通常、形状関数が１〜５のものをいう。
【０００６】
従って、本発明の第１の態様は、治療用薬剤を含んでなる、またはそのような治療用薬剤からなる微粒子であって、相対的粒子密度が固体薬剤の少なくとも８０％であり、かつ、形状関数が１〜５である微粒子を包含する。
【０００７】
本発明の第２の態様は、無針注入による投与用の、本発明の微粒子の形態の薬剤の製造のための、治療用薬剤の使用を提供する。
【０００８】
本発明の第３の態様は、本発明の微粒子を含んでなる無針注射器である。
【０００９】
第４の態様において本発明は、無針注射器を使用する、本発明の微粒子の経皮、経粘膜または皮下送達を含んでなる治療処置法を提供する。
【００１０】
本発明の第５の態様においては、治療用薬剤を含む溶液または懸濁液の噴霧乾燥を含んでなる、本発明の微粒子の製造法を提供する。
【発明の具体的説明】
【００１１】
本明細書で微粒子とも称される、本発明により製造される固体または半固体の小球は、様々な形態をとることが可能で、その例を図１に示す。（ａ）の固形球体、半固形球体に加えて；それらは、（ｂ）小さな空気ポケットが中心に吸蔵されている球体、（ｃ）吸蔵体が中心をはずれている球体、または（ｄ）吸蔵体が小球体を破り、はみ出ているものも形成できる。
【００１２】
噴霧乾燥ハンドブックを含む多くの参照文献が、一般に、所与の占有質量である体積から計算されるかさ密度について言及している。本発明に関連して、粒子密度はより重要である；これは、閉じた構造の封入体のいずれかを含むが、開放構造を含まない粒子の体積に基づいている。従って、図１（ａ）および（ｄ）に示された形態は同一の粒子密度を有するが（ｂ）および（ｃ）は低い（かつ同一の）粒子密度を有する。
【００１３】
固体小球は形成材料と同一の粒子密度を有し、かつ相対的粒子密度は１００％である。もし小さな空気封入体が存在する場合、相対的粒子密度は１００％以下である。平均粒子密度は、液体またはガスピクノメトリーにより測定できるか、または光学顕微鏡による測定値を用いて個々の小球について計算できる。治療用薬剤の密度は２５℃にて測定する、これらの測定値から、本発明の小球は少なくとも元の物質の８０％の相対的粒子密度、かつ好ましくは９０％、９５％、９９％または１００％以上の相対的粒子密度を有する。無針注入システムに適用するためには、機械的強度を与えるために高い相対的粒子密度が要求されるが、与えられた相対的密度はこれに適する。特に該小球は、引用することにより本明細書の一部とされるＷＯ−Ａ−９４／２４２６３中に無針注射器に関して述べられている必要条件を満たし得る。
【００１４】
本発明の該微粒子が含んでなるか、またはそれにより構成され、かつ無針注入により送達されてよい有効物質は、薬理学的有効物質を含有する治療用薬剤であり、一般に固体である。送達されてよい治療用薬剤には、例えばタンパク質をはじめとする、ペプチド、核酸、ならびに例えば局所麻酔薬（コカイン、プロカインおよびリドカイン）、催眠および鎮静薬（バルビツレート、ベンゾジアゼピン、およびクロラール誘導体）、精神薬（フェノチアジン、三環性抗うつ薬およびモノアミンオキシダーゼ阻害剤）、抗てんかん薬（ヒダントイン）、Ｌ−ドーパ、アヘンアルカロイド、鎮痛薬、抗炎症薬、アロプリノール、癌化学療法薬、抗コリンエステラーゼ薬、交感神経様作用薬（エピネフリン、サルブタモールおよびエフェドリン）、抗ムスカリン薬（アトロピン）、α−アドレナリン作用阻害薬（フェントールアミン）、β−アドレナリン作用阻害薬（プロプラノロール）、神経節刺激および阻害薬（ニコチン）、神経筋阻害薬、オータコイド（抗ヒスタミン薬および５−ＨＴ拮抗薬）、プロスタグランジン、血漿キニン（ブラジキニン）、心臓血管薬（ジギタリス）、抗不整脈薬、抗高血圧薬、血管拡張薬（硝酸アミルおよびニトログリセリン）、利尿薬、オキシトシン、抗生物質、駆虫薬、殺真菌薬、抗ウイルス化合物（アシクロビル）、抗トリパノソーマ薬、抗凝固薬、性ホルモン（例えば、ＨＲＴまたは避妊用）、インスリン、アルプロスチジル、血液凝固因子、カルシトニン、成長ホルモン、ワクチン、遺伝子療法のための構築体、およびステロイドのような小さな有機分子が挙げられる。そのレシピエントはヒトまたは他のいずれの脊椎動物であってもよく、例えば、ウシ、ヒツジ、ウマ、ブタ、ニワトリ、シチメンチョウ、イヌ、ネコ、もしくはサケなどの哺乳動物、鳥類または魚類、または特にＤＮＡ形質転換のための植物が好ましい。ＤＮＡは一般にプラスミドとして提示され、例えばそれは、Vanrompay et al(1999) Vaccine 17, 2628-2635で開示された抗クラミジア抗原をコードするＤＮＡであってよい。ワクチンはタンパク質または他のポリペプチドもしくはオリゴペプチドの形態をとってよく、また、例えばＨＩＶもしくはＢ型肝炎抗原をコードするＤＮＡのように、抗原をコードするＤＮＡであってよい。該小球は有効物質のみから形成されてよく、またはそれらはタンパク質、糖、防腐剤、保存剤および緩衝剤を含む１以上の賦形剤もしくは安定剤を含有してよい。炭水化物および他のガラス−形成物質を安定剤または賦形剤として用いてよい。賦形剤は非経口的に許容されるものが好ましい。賦形剤が存在する場合は、有効化合物は均一に分布するか、図１（ｅ）に示したように基質中に捕らえられたより小さな粒子の形態であってよい。使用してよい好適な炭水化物はＷＯ９６／０３９７８に開示されている。ＷＯ９６／０３９７８に開示されているような、疎水性となるよう誘導体化された炭水化物を用いて徐放型粒子を提供してもよい。
【００１５】
本発明のさらなる実施形態は、有効物質よりも高密度の賦形剤もしくは添加剤、またはより高密度の小球を形成するための賦形剤の使用である。
【００１６】
本発明の小球は典型的には定められた範囲の粒径で、９５重量％またはそれ以上の粒子が１０〜５００μｍの範囲の粒径、好ましくは２０〜２００μｍ、および最も好ましくは３０〜１００μｍの粒径の範囲である。モード分布は１０μｍバンド、すなわち３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、および１００μｍに集中してよい。好ましくは、単一モードサンプルにおいて、８０重量％の粒子が、より小さい粒径の粒子は１０μｍから、より大きい粒径の粒子が２５μｍの粒径範囲であり、より好ましくは９０％の粒子が１５μｍ（より小さい粒子）〜３０μｍ（より大きい粒子）の粒径範囲である。
【００１７】
本発明の小球は、二方式の粒径分布で形成されてよい。典型的には、回転噴霧器を使用する際に少なくとも６０重量％、７５重量％以上の粒子が単一モード粒径の粒径分布を示し、残りの粒子はより小さいモード粒径の分布を示す。単一モード粒径分布が望まれる時には、より小さい粒子は、例えば篩い分けのような常法により、より大きい粒子から分離されてよい。他の粒径分布を持つ微粒子もまた、本発明により得ることができる。
【００１８】
粒子の球状性もまた重要であり、真の表面積を粒子体積に対する等価の球状面積で割った形状関数により定義される。この粒子表面積は、窒素吸着の標準技術に続いてＢＥＴ分析を行うことにより得られる。本発明の小球は典型的には、形状関数１〜５であり、好ましくは１〜２である。形状を評価する別法は、形状関数と類似した値を与える円形性および伸び率を測定するための画像分析により補助される光学顕微鏡検査により行える。
【００１９】
該小球は一般に該物質の溶液または懸濁液の噴霧乾燥により作製される。ほとんどの薬理学的有効物質に関して好適な溶媒は公知である。水は好ましい溶媒である。所望の固体微粒子を製造するために該物質の濃度を変化させてもよいが、０．１〜７０％溶液、好ましくは１０〜３０％溶液が好適であり得る。もし微粒子が有効物質を含まない場合は、比較的不活性なタンパク質（好ましくはｒＤＮＡ技術により製造されたヒト血清アルブミン）、または糖（トレハロースのような）のような前記の担体から使用してよい。水がさらに好ましい溶媒である。
【００２０】
噴霧された溶液または懸濁液中の有効成分の濃度および、有効成分の担体物質に対する比（存在する場合）は一般に、注入器により送達される粒子の量および所望の有効成分の用量に支配される。
【００２１】
回転式噴霧器が好ましいが、例えば圧力ノズルまたは２つの液体の噴霧化のいずれかによる、液体供給溶液または懸濁液を噴霧するパイロットスケール噴霧乾燥器のような、通常の噴霧乾燥器を使用してよい。ある種の治療用薬剤または治療用薬剤と賦形剤の混合物に関しては、好適な固体または半固体小球の形成は乾燥工程における排出温度の低さに依存するであろう。いずれの所与の治療用薬剤または治療用薬剤と賦形剤の混合物に対しても好適な排出温度は、当業者ならば容易に決定できる。注入口の温度は、使用される噴霧化のタイプや、乾燥気流速度のような他の変数に基づき、所望の排出口温度を与えるように設定する；例えば５０〜２７０℃であってよい。粒径は、所与の供給濃度で使用された噴霧器に関する標準パラメーターにより制御される。
【００２２】
噴霧乾燥による形成に続いて、熱を用いておよび／または真空下で残っている水分または溶媒を除去して、該小球をさらに乾燥させる。このさらなる乾燥工程に関する好適な乾燥技術には、例えば、流動層乾燥法が含まれる。このさらなる乾燥工程での流動層の使用は、小球が二方式の粒子分布を示す場合に、小さい粒子はより大きな粒子から水により（洗って軽いものと重いものに分ける）分離されるので有益である。結晶の形成は避けるべきである。
【００２３】
該小球はまた、例えば図１（ｅ）に示したようなさらなる層または放出プロフィールを変化させるための層、もしくは有効化合物を保護するための層を付け加えるために、例えば、流動層被覆のような標準技術を用いて被覆してもよい。生成された粒径分布はまた、特定の粒径範囲を選択するために、篩い分けまたはさらに粒子分布を明らかにするための他の市販の分類技術を用いて改変されてよい。
【００２４】
該小球はその適用により滅菌してよい。無菌製品は、無菌的製造または例えばγ線照射による最終滅菌のいずれかにより製造できる。
【００２５】
本発明の微粒子を送達するために使用してよい無針注射器の例およびそれらの構成部分は、ＷＯ９４／２４２６３（米国特許第５，８９９，８８０号および同第５，６３０，７９６号として発行、引用することにより本明細書の一部とされる）に示されている。
【００２６】
この注射器は典型的には、小さくても大きくてもよいが約１８ｃｍの長さで、親指を上端に添えたまま手のひらに持てるように調整されている。
【００２７】
注入を行うために、該装置のスペーサーシュラウドの幅広い方の端を患者の皮膚に向けて押す。貯蔵部からチャンバー中に放出されたガスが２枚の膜を破るに十分な圧力をチャンバー内で発生させ、ガスがノズルを通って移動し、それにより粒子を患者の皮膚中に送達する。
【００２８】
チャンバーにはヘリウムのようなガスを大気圧より高い気圧、例えば２〜４バールであらかじめ充填してよいが、あるいは１０バールよりも高くてもよい。
本発明の粒子は、送達の際にはこのようにヘリウムのようなガスに乗せる（すなわち懸濁する）。
【実施例】
【００２９】
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。
例１
２回濾過した水性２０％ｗ／ｖ（重量／体積）ＨＳＡ溶液（薬理学的に有効なタンパク質のモデルとして、また薬理学的に有効な化合物の担体として）１００ｍｌを、以下の条件下においてＮＴ２回転噴霧器（Newland Design, Lancaster）を用いるNiro Mobile Minor噴霧乾燥器で噴霧乾燥させる：
注入口の温度 ２４５℃
排出口の温度 ３５℃
注入速度 １０ｇ／分
回転速度 ３０，０００ｒｐｍ
【００３０】
乾燥チャンバー内に小滴を導くために追加の空気が供給されるので、排出口の温度は低い。
【００３１】
得られた水溶性の生成物の顕微鏡写真を図２に示した。これらは、小球の６５％以上が５０μｍ付近の粒径の一様な固体であることを示している。少量の空気を含有している類似粒径の小球は厚い壁を持ち、計算された密度は小球を形成している元の物質の９０％以上であった。この微粒子が球形であることは明らかである。
【００３２】
さらなる粒径分析のために、噴霧乾燥されたマイクロカプセル５ｇを、１７６℃の熱空気オーブン中で５５分間加熱することにより不溶解化した。Coulter Multisizer 2E（商標）および２００μｍの開口管を取り付けたＴＡIIサンプリングスタンドを用いて、小球の大きさの選別を行い、小球の体積メジアン径は７１μｍであり、モード粒径は６１μｍであった。この粒径分布を図３に示した。Colterカウンターにより計測された粒径がより大きかったのは、水性環境中で小球が膨張したためである。
【００３３】
例２
２回濾過した３１％ｗ／ｖＨＳＡ溶液１００ｍｌを（再度モデルまたは担体として）、以下の条件下でNitro Mobile Minor噴霧乾燥器を用いて噴霧乾燥させた：
注入口の温度 ８０℃
排出口の温度 ４８℃
噴霧圧力 １.０ｂａｒｇ
注入速度 １３.３ｇ／分
噴霧タイプ ２本の液体ノズル
【００３４】
可溶性の噴霧乾燥生成物の顕微鏡写真を図４に示す。小球はほぼ全部固体であり、例１の生成物より小さい。空気を含有している少数の小球は高度な機械的強度を付与する厚い壁を有している。
【００３５】
例３
３９％ｗ／ｖトレハロース溶液（６４ｇのトレハロース二水和物（Sigma Aldrich Company Ltd, Poole, Dorset）水に溶解させて１５０ｍｌとしたものと等価）１５０ｍｌを、ＮＴ２回転噴霧器（Newland Design, Lancaster）を用いるNitro Mobile Minor噴霧乾燥器により以下の条件下で噴霧乾燥させた：
注入口の温度 ２００℃
排出口の温度 １０８℃
注入速度 ６ｇ／分
回転速度 １３，５００ｒｐｍ
【００３６】
この工程条件下では生成物の収率は８１％であった。得られた生成物（バッチＮＴ２ＴＲＥ１）を野菜油に懸濁させて顕微鏡で検査したところ、９９％以上の固体集団が空気を含まない固体で二方式の粒径分布を示した。強い剪断力、媒体注入速度および１.５６g／ｃｍ３の粒子密度を用いるエーロディスペンサー(Amherst Process Instruments Inc, Hadley, MA)を取り付けたＡＰＩエーロサイザーによって幾何学的粒径分布を求めた。この分析の結果から、分布の主要大ピークはモード粒径５６μｍであり、より小さい分画のモード粒径は２８μｍであった。エーロサイザーを用いて得られた粒径分布を図５に示す。
【００３７】
例４
同じ注入濃度で、ＮＴ２噴霧器は１６，４００ｒｐｍ（バッチＮＴ２ＴＲＥ２）および１９，０００ｒｐｍ（バッチＮＴ２ＴＲＥ３）の、より早い回転スピードを用いて、同様の噴霧乾燥条件下で例３を繰り返した。引き続いて行う顕微鏡検査およびエーロサイザーを用いる粒径分析により、以下の結果が得られた（表１）。この工程の収率はそれぞれ９４および８９％あった。
【００３８】
【表１】
【００３９】
例５
例３および４で得られた３つの生成物を篩い分けして二方式分布の２つのピークを分離した。バッチＮＴ２ＴＲＥ１の５ｇを直径２００ｍｍ、開口径３８μｍのステンレス鋼製テスト篩（Endecotts, London）に入れた。この篩にはふたと受け皿が取り付けられており、手動で５分間揺するようになっている。残存した物質と、篩を通過した物質を評価のために回収した。同様に、バッチＮＴ２ＴＲＥ２およびＮＴ２ＴＥＲ３の生成物の各５ｇを、それぞれ３８および３２μｍの篩にかけた。篩上に残った多い分画からの収量は、総ての場合において６０％よりも多かった。顕微鏡検査では、狭い粒径分布、および二方式粒径分布の２つのピークの効果的な分離が行われたことが示された。３２μｍ篩上に残った分画の顕微鏡写真を図６に示す。３つのバッチから篩い分けによって得られた６つの分画を、エーロサイザーを用いて粒径選別し、その結果を表２に示す。
【００４０】
【表２】
【００４１】
粒径が大きくなる順番に、バッチＮＴ２ＴＲＥ３およびＮＴ２ＴＲＥ１に関して篩を通過した小球、引き続いてバッチＮＴ２ＴＲＥ３、ＮＴ２ＴＲＥ２およびＮＴ２ＴＲＥ１に関して篩に残った小球のエーロサイザー粒径分布を図７に示す。
【００４２】
幾何学的粒径分布のさらなる分析において、粒子固体集団の百分率を表３に示すように計算した。
【００４３】
【表３】
【００４４】
４０μｍの粒径の生成物も、７５％の粒子が１７μｍの粒径範囲内であり、同様に８０％の粒子が１９μｍの範囲内であった。
【００４５】
例６
注入する溶液は、７ｇのオクタ酢酸トレハロース（Sigma Aldrich Company Ltd, Poole, Dorset）および３gのニフェジピン（Seloc France, Limay）をアセトンに溶解させて５０ｍｌとして調製した。得られた溶液の装填固体総量は２０％ｗ／ｖであった。この注入溶液を以下の条件下で、ＮＴ２回転式噴霧器を用いるNitro Mobile Minor噴霧乾燥器で噴霧乾燥させた：
注入口の温度 ６５℃
排出口の温度 ４６℃
注入速度 １０ｇ／分
回転速度 １４，６００ｒｐｍ
【００４６】
これらの工程条件下で得られた生成物の収率は７８％であった。この生成物を光学顕微鏡で評価したところ、基準目盛りと比較して、固体小球はモード粒径が約４４μｍおよび２０μｍの二方式粒径分布を示した。
【００４７】
例７
１４％ｗ／ｖのラフィノース５水和物溶液（１４ｇのラフィノース５水和物（Pfanstiehl, Wankegan, IL）水に溶解させて１００ｍｌとする）１００ｍｌを、ＮＴ２回転噴霧器を用いるNitro Mobile Minor噴霧乾燥器で、以下の条件下で噴霧乾燥させた：
注入口の温度 １７０℃
排出口の温度 ８２℃
注入速度 １０ｇ／分
回転速度 １３，５００ｒｐｍ
【００４８】
工程収量が６８％である、得られた生成物の顕微鏡検査において、固体小球は二方式粒径分布を示し、空気は吸蔵していなかった。例３の分析条件と同じ条件下でエーロサイザーを用いて粒径分布を測定し、粒子密度は１.４７ｇ／ｃｍ３であった。この分析で得られた結果から、図８に示すような、モード粒径３６μｍの主要な大きい分布とモード粒径が１８μｍの非常に小さな分画が得られた。分布の分析において、小球の７０％が２６〜４３μｍの間の１７μｍの粒径範囲に存在することが認められた。このラフィノース５水和物は薬理学的に有効な化合物の担体である。
【００４９】
例８
アセトン中３１％ｗ／ｖリドカイン溶液（リドカイン２１.５ｇ（Sigma））７０ｍｌをＮＴ２回転噴霧器を用いるNitro Mobile Minor噴霧乾燥器で、以下の条件下で噴霧乾燥させた：
注入口の温度 ６５℃
排出口の温度 ４５℃
注入速度 １０ｇ／分
回転速度 １３，５００ｒｐｍ
【００５０】
光学顕微鏡による評価では、この生成物は球状であった。粒径分布はモード粒径４１μｍおよび２０μｍの、球状固体小球の二方式分布であった。
【００５１】
例９
３８ｇのトレハロース２水和物および２ｇの塩酸ジルチアゼム（Lusochimica spa, Milan, Italy）を水に溶解させて総量を１００ｍｌとし、溶液を調製した。この溶液を、ＮＴ２噴霧器およびNitro Mobile Minor噴霧乾燥器を用いて、以下の条件下で噴霧乾燥させた：
注入口の温度 ２００℃
排出口の温度 １０５℃
注入速度 １１ｇ／分
回転速度 １３，５００ｒｐｍ
【００５２】
この工程の収量は９４％であった。顕微鏡検査では、生成された滑らかで球状の粒子が二方式の粒径分布を示し、２％以下の粒子が少量の空気を吸蔵していた。これは、例３に記載の条件および密度に従ってエーロサイザーを用いて粒径選別した際に確認された。このことより、より大きな小球を含む主要ピークはモード粒径４３μｍであり、より小さいピークのモード値は２０μｍであった。幾何学的粒径分布から、粒子集団の７０％が３６〜５６μｍの範囲、すなわち２０μｍの粒径範囲中にあることが示された。
【００５３】
例１０
３８ｇのトレハロース２水和物および２ｇのヒト血清アルブミンの形態モデルタンパク質（Sigma）を水に溶解させて総量を１００ｍｌとし、溶液を調製した。この溶液を例９に記載した方法で噴霧乾燥させた。例９と同様に、類似の工程収量と粒子特性が得られた。噴霧乾燥がアルブミンを分解させるか、または重合させるかどうかを評価するために、基準凍結乾燥アルブミンおよび分子マーカーを用いて非還元条件下でゲル電気泳動を行った。これにより、アルブミンは噴霧乾燥工程により影響されないことが示された。このことはまた、付加的な二量体化または重合作用は起こらないことを示すゲル透過クロマトグラフィーにより確認された。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
本発明の態様は、単に例示のためのものであるが、以下の図面を参照して説明される：
【図１】本発明の微粒子を模式的に示したものである。
【図２ａ】例１の生成物の顕微鏡写真である。
【図２ｂ】例１の生成物の顕微鏡写真である。
【図３】例１の生成物の粒径分布を示す。
【図４ａ】例２の生成物の顕微鏡写真である。
【図４ｂ】例２の生成物の顕微鏡写真である。
【図５】例３の生成物であるＮＴ２ＴＲＥ１の粒径分布を示す。
【図６】篩い分けのあとに篩上に残った例５の生成物ＮＴ２ＴＲＥ３の光学顕微鏡写真である。
【図７】篩い分けされた例５の生成物の粒径分布を示す。
【図８】例７の生成物の粒径分布を示す。
【発明の背景】
【０００１】
発明の分野
本発明は微粒子、それらの形成方法およびそれらの治療における使用法、特に無針注入システムを使用する、皮膚を通しての有効成分の送達のための方法に関する。
【０００２】
背景技術
無針注入器は、粒子を皮膚および粘膜バリアに浸透できる速度に加速するために圧縮ガスを使用する。そのような装置はＷＯ−Ａ−９４／２４２６３に記載されている。該粒子は機械的強度を有することが求められ、高密度であることが有利である。同一形状、好ましくは球形で、制御された粒径分布の粒子を用いるのも有益である。これらの因子は該粒子の空気力学的挙動および浸透に影響し、そのため有効成分の送達の効能にも影響する。有用な粒子の粒径は、典型的には１０〜５００μｍの範囲である。
【０００３】
固体または高密度の微粒子は、例えばより大きな粒子の微小化、結晶化、沈殿または他の溶液ベースの微粒子生成技術のような、ミリング（milling）により製造できる。しかし、典型的には、これらの技術により球状微粒子は製造されない。
【０００４】
通常は固体微粒子を製造しない技術には、しばしば低密度微粒子および凝集塊を形成する噴霧乾燥がある。高密度の製品が重要となる主な産業は、スキムミルクパウダーを製造する乳製品産業である（Spray Drying Handbook, K. Masters, 5th Edition, 1991, Longman Scientific and Technical, Pages 330-336)。この節では、通常の噴霧乾燥により製造された生成物を顕微鏡写真で示し、それらは「空胞」を含み、「低密度」であり、壁が薄く、「機械的な取り扱いには耐えられず、容易に断片化し」、かつ多量および少量の空気を吸蔵すると述べられている。密度がいく分増加するのは、ゆがめられ、縮められた粒子を製造する、より複雑な２段階の噴霧乾燥工程が用いられるためである。Charlesworth and Marshall, J. Appl. Chem. Eng., 6 No. 1, 9(1960)には、崩壊、水泡、気泡または膨張の結果として、総ての粒子が多孔性、スポンジ様、または空気を吸蔵する構造となる、噴霧乾燥により製造された粒子の形態学について記載されている。噴霧乾燥工程において空気の吸蔵が最適化された工程の例がＷＯ−Ａ−９２／１８１６４、ＷＯ−Ａ−９６／０９１８４およびＷＯ−Ａ−９６／１８３８８に記載されている。
【発明の概要】
【０００５】
驚くべきことに、慎重に制御された噴霧乾燥条件を用いれば、物質から固体または半固体の密度の高い小球を製造できることが見出された。これらの小球は特に、その密度と球状性のために、無針注入システムにおける使用に適している。より詳細には、相対性粒子密度が固体物質の少なくとも８０％であってよく、しばしば少なくとも９０％、また１００％であってもよい。球状であるとは通常、形状関数が１〜５のものをいう。
【０００６】
従って、本発明の第１の態様は、治療用薬剤を含んでなる、またはそのような治療用薬剤からなる微粒子であって、相対的粒子密度が固体薬剤の少なくとも８０％であり、かつ、形状関数が１〜５である微粒子を包含する。
【０００７】
本発明の第２の態様は、無針注入による投与用の、本発明の微粒子の形態の薬剤の製造のための、治療用薬剤の使用を提供する。
【０００８】
本発明の第３の態様は、本発明の微粒子を含んでなる無針注射器である。
【０００９】
第４の態様において本発明は、無針注射器を使用する、本発明の微粒子の経皮、経粘膜または皮下送達を含んでなる治療処置法を提供する。
【００１０】
本発明の第５の態様においては、治療用薬剤を含む溶液または懸濁液の噴霧乾燥を含んでなる、本発明の微粒子の製造法を提供する。
【発明の具体的説明】
【００１１】
本明細書で微粒子とも称される、本発明により製造される固体または半固体の小球は、様々な形態をとることが可能で、その例を図１に示す。（ａ）の固形球体、半固形球体に加えて；それらは、（ｂ）小さな空気ポケットが中心に吸蔵されている球体、（ｃ）吸蔵体が中心をはずれている球体、または（ｄ）吸蔵体が小球体を破り、はみ出ているものも形成できる。
【００１２】
噴霧乾燥ハンドブックを含む多くの参照文献が、一般に、所与の占有質量である体積から計算されるかさ密度について言及している。本発明に関連して、粒子密度はより重要である；これは、閉じた構造の封入体のいずれかを含むが、開放構造を含まない粒子の体積に基づいている。従って、図１（ａ）および（ｄ）に示された形態は同一の粒子密度を有するが（ｂ）および（ｃ）は低い（かつ同一の）粒子密度を有する。
【００１３】
固体小球は形成材料と同一の粒子密度を有し、かつ相対的粒子密度は１００％である。もし小さな空気封入体が存在する場合、相対的粒子密度は１００％以下である。平均粒子密度は、液体またはガスピクノメトリーにより測定できるか、または光学顕微鏡による測定値を用いて個々の小球について計算できる。治療用薬剤の密度は２５℃にて測定する、これらの測定値から、本発明の小球は少なくとも元の物質の８０％の相対的粒子密度、かつ好ましくは９０％、９５％、９９％または１００％以上の相対的粒子密度を有する。無針注入システムに適用するためには、機械的強度を与えるために高い相対的粒子密度が要求されるが、与えられた相対的密度はこれに適する。特に該小球は、引用することにより本明細書の一部とされるＷＯ−Ａ−９４／２４２６３中に無針注射器に関して述べられている必要条件を満たし得る。
【００１４】
本発明の該微粒子が含んでなるか、またはそれにより構成され、かつ無針注入により送達されてよい有効物質は、薬理学的有効物質を含有する治療用薬剤であり、一般に固体である。送達されてよい治療用薬剤には、例えばタンパク質をはじめとする、ペプチド、核酸、ならびに例えば局所麻酔薬（コカイン、プロカインおよびリドカイン）、催眠および鎮静薬（バルビツレート、ベンゾジアゼピン、およびクロラール誘導体）、精神薬（フェノチアジン、三環性抗うつ薬およびモノアミンオキシダーゼ阻害剤）、抗てんかん薬（ヒダントイン）、Ｌ−ドーパ、アヘンアルカロイド、鎮痛薬、抗炎症薬、アロプリノール、癌化学療法薬、抗コリンエステラーゼ薬、交感神経様作用薬（エピネフリン、サルブタモールおよびエフェドリン）、抗ムスカリン薬（アトロピン）、α−アドレナリン作用阻害薬（フェントールアミン）、β−アドレナリン作用阻害薬（プロプラノロール）、神経節刺激および阻害薬（ニコチン）、神経筋阻害薬、オータコイド（抗ヒスタミン薬および５−ＨＴ拮抗薬）、プロスタグランジン、血漿キニン（ブラジキニン）、心臓血管薬（ジギタリス）、抗不整脈薬、抗高血圧薬、血管拡張薬（硝酸アミルおよびニトログリセリン）、利尿薬、オキシトシン、抗生物質、駆虫薬、殺真菌薬、抗ウイルス化合物（アシクロビル）、抗トリパノソーマ薬、抗凝固薬、性ホルモン（例えば、ＨＲＴまたは避妊用）、インスリン、アルプロスチジル、血液凝固因子、カルシトニン、成長ホルモン、ワクチン、遺伝子療法のための構築体、およびステロイドのような小さな有機分子が挙げられる。そのレシピエントはヒトまたは他のいずれの脊椎動物であってもよく、例えば、ウシ、ヒツジ、ウマ、ブタ、ニワトリ、シチメンチョウ、イヌ、ネコ、もしくはサケなどの哺乳動物、鳥類または魚類、または特にＤＮＡ形質転換のための植物が好ましい。ＤＮＡは一般にプラスミドとして提示され、例えばそれは、Vanrompay et al(1999) Vaccine 17, 2628-2635で開示された抗クラミジア抗原をコードするＤＮＡであってよい。ワクチンはタンパク質または他のポリペプチドもしくはオリゴペプチドの形態をとってよく、また、例えばＨＩＶもしくはＢ型肝炎抗原をコードするＤＮＡのように、抗原をコードするＤＮＡであってよい。該小球は有効物質のみから形成されてよく、またはそれらはタンパク質、糖、防腐剤、保存剤および緩衝剤を含む１以上の賦形剤もしくは安定剤を含有してよい。炭水化物および他のガラス−形成物質を安定剤または賦形剤として用いてよい。賦形剤は非経口的に許容されるものが好ましい。賦形剤が存在する場合は、有効化合物は均一に分布するか、図１（ｅ）に示したように基質中に捕らえられたより小さな粒子の形態であってよい。使用してよい好適な炭水化物はＷＯ９６／０３９７８に開示されている。ＷＯ９６／０３９７８に開示されているような、疎水性となるよう誘導体化された炭水化物を用いて徐放型粒子を提供してもよい。
【００１５】
本発明のさらなる実施形態は、有効物質よりも高密度の賦形剤もしくは添加剤、またはより高密度の小球を形成するための賦形剤の使用である。
【００１６】
本発明の小球は典型的には定められた範囲の粒径で、９５重量％またはそれ以上の粒子が１０〜５００μｍの範囲の粒径、好ましくは２０〜２００μｍ、および最も好ましくは３０〜１００μｍの粒径の範囲である。モード分布は１０μｍバンド、すなわち３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、および１００μｍに集中してよい。好ましくは、単一モードサンプルにおいて、８０重量％の粒子が、より小さい粒径の粒子は１０μｍから、より大きい粒径の粒子が２５μｍの粒径範囲であり、より好ましくは９０％の粒子が１５μｍ（より小さい粒子）〜３０μｍ（より大きい粒子）の粒径範囲である。
【００１７】
本発明の小球は、二方式の粒径分布で形成されてよい。典型的には、回転噴霧器を使用する際に少なくとも６０重量％、７５重量％以上の粒子が単一モード粒径の粒径分布を示し、残りの粒子はより小さいモード粒径の分布を示す。単一モード粒径分布が望まれる時には、より小さい粒子は、例えば篩い分けのような常法により、より大きい粒子から分離されてよい。他の粒径分布を持つ微粒子もまた、本発明により得ることができる。
【００１８】
粒子の球状性もまた重要であり、真の表面積を粒子体積に対する等価の球状面積で割った形状関数により定義される。この粒子表面積は、窒素吸着の標準技術に続いてＢＥＴ分析を行うことにより得られる。本発明の小球は典型的には、形状関数１〜５であり、好ましくは１〜２である。形状を評価する別法は、形状関数と類似した値を与える円形性および伸び率を測定するための画像分析により補助される光学顕微鏡検査により行える。
【００１９】
該小球は一般に該物質の溶液または懸濁液の噴霧乾燥により作製される。ほとんどの薬理学的有効物質に関して好適な溶媒は公知である。水は好ましい溶媒である。所望の固体微粒子を製造するために該物質の濃度を変化させてもよいが、０．１〜７０％溶液、好ましくは１０〜３０％溶液が好適であり得る。もし微粒子が有効物質を含まない場合は、比較的不活性なタンパク質（好ましくはｒＤＮＡ技術により製造されたヒト血清アルブミン）、または糖（トレハロースのような）のような前記の担体から使用してよい。水がさらに好ましい溶媒である。
【００２０】
噴霧された溶液または懸濁液中の有効成分の濃度および、有効成分の担体物質に対する比（存在する場合）は一般に、注入器により送達される粒子の量および所望の有効成分の用量に支配される。
【００２１】
回転式噴霧器が好ましいが、例えば圧力ノズルまたは２つの液体の噴霧化のいずれかによる、液体供給溶液または懸濁液を噴霧するパイロットスケール噴霧乾燥器のような、通常の噴霧乾燥器を使用してよい。ある種の治療用薬剤または治療用薬剤と賦形剤の混合物に関しては、好適な固体または半固体小球の形成は乾燥工程における排出温度の低さに依存するであろう。いずれの所与の治療用薬剤または治療用薬剤と賦形剤の混合物に対しても好適な排出温度は、当業者ならば容易に決定できる。注入口の温度は、使用される噴霧化のタイプや、乾燥気流速度のような他の変数に基づき、所望の排出口温度を与えるように設定する；例えば５０〜２７０℃であってよい。粒径は、所与の供給濃度で使用された噴霧器に関する標準パラメーターにより制御される。
【００２２】
噴霧乾燥による形成に続いて、熱を用いておよび／または真空下で残っている水分または溶媒を除去して、該小球をさらに乾燥させる。このさらなる乾燥工程に関する好適な乾燥技術には、例えば、流動層乾燥法が含まれる。このさらなる乾燥工程での流動層の使用は、小球が二方式の粒子分布を示す場合に、小さい粒子はより大きな粒子から水により（洗って軽いものと重いものに分ける）分離されるので有益である。結晶の形成は避けるべきである。
【００２３】
該小球はまた、例えば図１（ｅ）に示したようなさらなる層または放出プロフィールを変化させるための層、もしくは有効化合物を保護するための層を付け加えるために、例えば、流動層被覆のような標準技術を用いて被覆してもよい。生成された粒径分布はまた、特定の粒径範囲を選択するために、篩い分けまたはさらに粒子分布を明らかにするための他の市販の分類技術を用いて改変されてよい。
【００２４】
該小球はその適用により滅菌してよい。無菌製品は、無菌的製造または例えばγ線照射による最終滅菌のいずれかにより製造できる。
【００２５】
本発明の微粒子を送達するために使用してよい無針注射器の例およびそれらの構成部分は、ＷＯ９４／２４２６３（米国特許第５，８９９，８８０号および同第５，６３０，７９６号として発行、引用することにより本明細書の一部とされる）に示されている。
【００２６】
この注射器は典型的には、小さくても大きくてもよいが約１８ｃｍの長さで、親指を上端に添えたまま手のひらに持てるように調整されている。
【００２７】
注入を行うために、該装置のスペーサーシュラウドの幅広い方の端を患者の皮膚に向けて押す。貯蔵部からチャンバー中に放出されたガスが２枚の膜を破るに十分な圧力をチャンバー内で発生させ、ガスがノズルを通って移動し、それにより粒子を患者の皮膚中に送達する。
【００２８】
チャンバーにはヘリウムのようなガスを大気圧より高い気圧、例えば２〜４バールであらかじめ充填してよいが、あるいは１０バールよりも高くてもよい。
本発明の粒子は、送達の際にはこのようにヘリウムのようなガスに乗せる（すなわち懸濁する）。
【実施例】
【００２９】
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。
例１
２回濾過した水性２０％ｗ／ｖ（重量／体積）ＨＳＡ溶液（薬理学的に有効なタンパク質のモデルとして、また薬理学的に有効な化合物の担体として）１００ｍｌを、以下の条件下においてＮＴ２回転噴霧器（Newland Design, Lancaster）を用いるNiro Mobile Minor噴霧乾燥器で噴霧乾燥させる：
注入口の温度 ２４５℃
排出口の温度 ３５℃
注入速度 １０ｇ／分
回転速度 ３０，０００ｒｐｍ
【００３０】
乾燥チャンバー内に小滴を導くために追加の空気が供給されるので、排出口の温度は低い。
【００３１】
得られた水溶性の生成物の顕微鏡写真を図２に示した。これらは、小球の６５％以上が５０μｍ付近の粒径の一様な固体であることを示している。少量の空気を含有している類似粒径の小球は厚い壁を持ち、計算された密度は小球を形成している元の物質の９０％以上であった。この微粒子が球形であることは明らかである。
【００３２】
さらなる粒径分析のために、噴霧乾燥されたマイクロカプセル５ｇを、１７６℃の熱空気オーブン中で５５分間加熱することにより不溶解化した。Coulter Multisizer 2E（商標）および２００μｍの開口管を取り付けたＴＡIIサンプリングスタンドを用いて、小球の大きさの選別を行い、小球の体積メジアン径は７１μｍであり、モード粒径は６１μｍであった。この粒径分布を図３に示した。Colterカウンターにより計測された粒径がより大きかったのは、水性環境中で小球が膨張したためである。
【００３３】
例２
２回濾過した３１％ｗ／ｖＨＳＡ溶液１００ｍｌを（再度モデルまたは担体として）、以下の条件下でNitro Mobile Minor噴霧乾燥器を用いて噴霧乾燥させた：
注入口の温度 ８０℃
排出口の温度 ４８℃
噴霧圧力 １.０ｂａｒｇ
注入速度 １３.３ｇ／分
噴霧タイプ ２本の液体ノズル
【００３４】
可溶性の噴霧乾燥生成物の顕微鏡写真を図４に示す。小球はほぼ全部固体であり、例１の生成物より小さい。空気を含有している少数の小球は高度な機械的強度を付与する厚い壁を有している。
【００３５】
例３
３９％ｗ／ｖトレハロース溶液（６４ｇのトレハロース二水和物（Sigma Aldrich Company Ltd, Poole, Dorset）水に溶解させて１５０ｍｌとしたものと等価）１５０ｍｌを、ＮＴ２回転噴霧器（Newland Design, Lancaster）を用いるNitro Mobile Minor噴霧乾燥器により以下の条件下で噴霧乾燥させた：
注入口の温度 ２００℃
排出口の温度 １０８℃
注入速度 ６ｇ／分
回転速度 １３，５００ｒｐｍ
【００３６】
この工程条件下では生成物の収率は８１％であった。得られた生成物（バッチＮＴ２ＴＲＥ１）を野菜油に懸濁させて顕微鏡で検査したところ、９９％以上の固体集団が空気を含まない固体で二方式の粒径分布を示した。強い剪断力、媒体注入速度および１.５６g／ｃｍ３の粒子密度を用いるエーロディスペンサー(Amherst Process Instruments Inc, Hadley, MA)を取り付けたＡＰＩエーロサイザーによって幾何学的粒径分布を求めた。この分析の結果から、分布の主要大ピークはモード粒径５６μｍであり、より小さい分画のモード粒径は２８μｍであった。エーロサイザーを用いて得られた粒径分布を図５に示す。
【００３７】
例４
同じ注入濃度で、ＮＴ２噴霧器は１６，４００ｒｐｍ（バッチＮＴ２ＴＲＥ２）および１９，０００ｒｐｍ（バッチＮＴ２ＴＲＥ３）の、より早い回転スピードを用いて、同様の噴霧乾燥条件下で例３を繰り返した。引き続いて行う顕微鏡検査およびエーロサイザーを用いる粒径分析により、以下の結果が得られた（表１）。この工程の収率はそれぞれ９４および８９％あった。
【００３８】
【表１】
【００３９】
例５
例３および４で得られた３つの生成物を篩い分けして二方式分布の２つのピークを分離した。バッチＮＴ２ＴＲＥ１の５ｇを直径２００ｍｍ、開口径３８μｍのステンレス鋼製テスト篩（Endecotts, London）に入れた。この篩にはふたと受け皿が取り付けられており、手動で５分間揺するようになっている。残存した物質と、篩を通過した物質を評価のために回収した。同様に、バッチＮＴ２ＴＲＥ２およびＮＴ２ＴＥＲ３の生成物の各５ｇを、それぞれ３８および３２μｍの篩にかけた。篩上に残った多い分画からの収量は、総ての場合において６０％よりも多かった。顕微鏡検査では、狭い粒径分布、および二方式粒径分布の２つのピークの効果的な分離が行われたことが示された。３２μｍ篩上に残った分画の顕微鏡写真を図６に示す。３つのバッチから篩い分けによって得られた６つの分画を、エーロサイザーを用いて粒径選別し、その結果を表２に示す。
【００４０】
【表２】
【００４１】
粒径が大きくなる順番に、バッチＮＴ２ＴＲＥ３およびＮＴ２ＴＲＥ１に関して篩を通過した小球、引き続いてバッチＮＴ２ＴＲＥ３、ＮＴ２ＴＲＥ２およびＮＴ２ＴＲＥ１に関して篩に残った小球のエーロサイザー粒径分布を図７に示す。
【００４２】
幾何学的粒径分布のさらなる分析において、粒子固体集団の百分率を表３に示すように計算した。
【００４３】
【表３】
【００４４】
４０μｍの粒径の生成物も、７５％の粒子が１７μｍの粒径範囲内であり、同様に８０％の粒子が１９μｍの範囲内であった。
【００４５】
例６
注入する溶液は、７ｇのオクタ酢酸トレハロース（Sigma Aldrich Company Ltd, Poole, Dorset）および３gのニフェジピン（Seloc France, Limay）をアセトンに溶解させて５０ｍｌとして調製した。得られた溶液の装填固体総量は２０％ｗ／ｖであった。この注入溶液を以下の条件下で、ＮＴ２回転式噴霧器を用いるNitro Mobile Minor噴霧乾燥器で噴霧乾燥させた：
注入口の温度 ６５℃
排出口の温度 ４６℃
注入速度 １０ｇ／分
回転速度 １４，６００ｒｐｍ
【００４６】
これらの工程条件下で得られた生成物の収率は７８％であった。この生成物を光学顕微鏡で評価したところ、基準目盛りと比較して、固体小球はモード粒径が約４４μｍおよび２０μｍの二方式粒径分布を示した。
【００４７】
例７
１４％ｗ／ｖのラフィノース５水和物溶液（１４ｇのラフィノース５水和物（Pfanstiehl, Wankegan, IL）水に溶解させて１００ｍｌとする）１００ｍｌを、ＮＴ２回転噴霧器を用いるNitro Mobile Minor噴霧乾燥器で、以下の条件下で噴霧乾燥させた：
注入口の温度 １７０℃
排出口の温度 ８２℃
注入速度 １０ｇ／分
回転速度 １３，５００ｒｐｍ
【００４８】
工程収量が６８％である、得られた生成物の顕微鏡検査において、固体小球は二方式粒径分布を示し、空気は吸蔵していなかった。例３の分析条件と同じ条件下でエーロサイザーを用いて粒径分布を測定し、粒子密度は１.４７ｇ／ｃｍ３であった。この分析で得られた結果から、図８に示すような、モード粒径３６μｍの主要な大きい分布とモード粒径が１８μｍの非常に小さな分画が得られた。分布の分析において、小球の７０％が２６〜４３μｍの間の１７μｍの粒径範囲に存在することが認められた。このラフィノース５水和物は薬理学的に有効な化合物の担体である。
【００４９】
例８
アセトン中３１％ｗ／ｖリドカイン溶液（リドカイン２１.５ｇ（Sigma））７０ｍｌをＮＴ２回転噴霧器を用いるNitro Mobile Minor噴霧乾燥器で、以下の条件下で噴霧乾燥させた：
注入口の温度 ６５℃
排出口の温度 ４５℃
注入速度 １０ｇ／分
回転速度 １３，５００ｒｐｍ
【００５０】
光学顕微鏡による評価では、この生成物は球状であった。粒径分布はモード粒径４１μｍおよび２０μｍの、球状固体小球の二方式分布であった。
【００５１】
例９
３８ｇのトレハロース２水和物および２ｇの塩酸ジルチアゼム（Lusochimica spa, Milan, Italy）を水に溶解させて総量を１００ｍｌとし、溶液を調製した。この溶液を、ＮＴ２噴霧器およびNitro Mobile Minor噴霧乾燥器を用いて、以下の条件下で噴霧乾燥させた：
注入口の温度 ２００℃
排出口の温度 １０５℃
注入速度 １１ｇ／分
回転速度 １３，５００ｒｐｍ
【００５２】
この工程の収量は９４％であった。顕微鏡検査では、生成された滑らかで球状の粒子が二方式の粒径分布を示し、２％以下の粒子が少量の空気を吸蔵していた。これは、例３に記載の条件および密度に従ってエーロサイザーを用いて粒径選別した際に確認された。このことより、より大きな小球を含む主要ピークはモード粒径４３μｍであり、より小さいピークのモード値は２０μｍであった。幾何学的粒径分布から、粒子集団の７０％が３６〜５６μｍの範囲、すなわち２０μｍの粒径範囲中にあることが示された。
【００５３】
例１０
３８ｇのトレハロース２水和物および２ｇのヒト血清アルブミンの形態モデルタンパク質（Sigma）を水に溶解させて総量を１００ｍｌとし、溶液を調製した。この溶液を例９に記載した方法で噴霧乾燥させた。例９と同様に、類似の工程収量と粒子特性が得られた。噴霧乾燥がアルブミンを分解させるか、または重合させるかどうかを評価するために、基準凍結乾燥アルブミンおよび分子マーカーを用いて非還元条件下でゲル電気泳動を行った。これにより、アルブミンは噴霧乾燥工程により影響されないことが示された。このことはまた、付加的な二量体化または重合作用は起こらないことを示すゲル透過クロマトグラフィーにより確認された。
【図面の簡単な説明】
【００５４】
本発明の態様は、単に例示のためのものであるが、以下の図面を参照して説明される：
【図１】本発明の微粒子を模式的に示したものである。
【図２ａ】例１の生成物の顕微鏡写真である。
【図２ｂ】例１の生成物の顕微鏡写真である。
【図３】例１の生成物の粒径分布を示す。
【図４ａ】例２の生成物の顕微鏡写真である。
【図４ｂ】例２の生成物の顕微鏡写真である。
【図５】例３の生成物であるＮＴ２ＴＲＥ１の粒径分布を示す。
【図６】篩い分けのあとに篩上に残った例５の生成物ＮＴ２ＴＲＥ３の光学顕微鏡写真である。
【図７】篩い分けされた例５の生成物の粒径分布を示す。
【図８】例７の生成物の粒径分布を示す。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療用薬剤からなる、または治療用薬剤と所望により賦形剤とを含んでなる物質の微粒子であって、賦形剤が存在する場合、該治療用薬剤が微粒子中で均一に分布するか、または賦形剤マトリックス中でより小さな粒子の形態で捕捉された形態をとり、相対的粒子密度が少なくとも物質の８０％、形状関数が１〜５であり、かつ少なくとも９５％の粒子が直径２０〜２００μｍである物質の微粒子。
【請求項２】
溶液または懸濁液から噴霧乾燥により得ることができる、請求項１に記載の微粒子。
【請求項３】
相対的粒子密度が少なくとも９０％である、請求項１または２に記載の微粒子。
【請求項４】
少なくとも９５重量％の粒子が直径３０〜１００μｍである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の微粒子。
【請求項５】
形状関数が１〜２である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の微粒子。
【請求項６】
相対的粒子密度が少なくとも物質の８０％であり、かつ形状関数が１〜５である、治療用薬剤からなる微粒子。
【請求項７】
溶液または懸濁液から噴霧乾燥により得ることができる、請求項６に記載の微粒子。
【請求項８】
相対的粒子密度が少なくとも９０％である、請求項６または７に記載の微粒子。
【請求項９】
少なくとも９５重量％の粒子が直径１０〜５００μｍである、請求項６〜８のいずれか一項に記載の微粒子。
【請求項１０】
治療用薬剤がワクチンである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の微粒子。
【請求項１】
治療用薬剤からなる、または治療用薬剤と所望により賦形剤とを含んでなる物質の微粒子であって、賦形剤が存在する場合、該治療用薬剤が微粒子中で均一に分布するか、または賦形剤マトリックス中でより小さな粒子の形態で捕捉された形態をとり、相対的粒子密度が少なくとも物質の８０％、形状関数が１〜５であり、かつ少なくとも９５％の粒子が直径２０〜２００μｍである物質の微粒子。
【請求項２】
溶液または懸濁液から噴霧乾燥により得ることができる、請求項１に記載の微粒子。
【請求項３】
相対的粒子密度が少なくとも９０％である、請求項１または２に記載の微粒子。
【請求項４】
少なくとも９５重量％の粒子が直径３０〜１００μｍである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の微粒子。
【請求項５】
形状関数が１〜２である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の微粒子。
【請求項６】
相対的粒子密度が少なくとも物質の８０％であり、かつ形状関数が１〜５である、治療用薬剤からなる微粒子。
【請求項７】
溶液または懸濁液から噴霧乾燥により得ることができる、請求項６に記載の微粒子。
【請求項８】
相対的粒子密度が少なくとも９０％である、請求項６または７に記載の微粒子。
【請求項９】
少なくとも９５重量％の粒子が直径１０〜５００μｍである、請求項６〜８のいずれか一項に記載の微粒子。
【請求項１０】
治療用薬剤がワクチンである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の微粒子。
【図１】
【図２ａ】
【図２ｂ】
【図３】
【図４ａ】
【図４ｂ】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図２ａ】
【図２ｂ】
【図３】
【図４ａ】
【図４ｂ】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【公開番号】特開２００６−９６７５５（Ｐ２００６−９６７５５Ａ）
【公開日】平成１８年４月１３日（２００６．４．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−２７８３７５（Ｐ２００５−２７８３７５）
【出願日】平成１７年９月２６日（２００５．９．２６）
【分割の表示】特願２０００−５６８４７７（Ｐ２０００−５６８４７７）の分割
【原出願日】平成１１年９月３日（１９９９．９．３）
【出願人】（５０２４０９６０６）エラン・ドラッグ・デリバリー・リミテッド (4)
【氏名又は名称原語表記】Ｅｌａｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｌｉｍｉｔｅｄ
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１８年４月１３日（２００６．４．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年９月２６日（２００５．９．２６）
【分割の表示】特願２０００−５６８４７７（Ｐ２０００−５６８４７７）の分割
【原出願日】平成１１年９月３日（１９９９．９．３）
【出願人】（５０２４０９６０６）エラン・ドラッグ・デリバリー・リミテッド (4)
【氏名又は名称原語表記】Ｅｌａｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｌｉｍｉｔｅｄ
【Ｆターム（参考）】
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