抗肥満活性剤
【課題】安価で大量に取得することができる抗肥満活性剤を提供する。
【解決手段】 アレン構造を有し、かつ極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有するネオキサンチンは顕著な抗肥満活性を示し、本発明のアレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）を有効成分としてなる抗肥満活性剤は安価で大量に取得することができ、しかも絶大な抗肥満活性効果を得ることができる。
【解決手段】 アレン構造を有し、かつ極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有するネオキサンチンは顕著な抗肥満活性を示し、本発明のアレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）を有効成分としてなる抗肥満活性剤は安価で大量に取得することができ、しかも絶大な抗肥満活性効果を得ることができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は抗肥満活性剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
肥満はメタボリックシンドロームの原因となることから、抗肥満活性を有する機能成分の発見が強く求められている。
従来よりカテキンやフラバンジェノールなどのポリフェノール類がすでに実用化、製品化されている。
【０００３】
またワカメなどに含まれるカロテノイド（フコキサンチン）とホヤに含まれるカロテノイド（フコキサンチンール）が、モデル動物の内臓脂肪（白色脂肪）中に脱共役タンパク質（ＵＣＰ１）を発現させ、これにより脂肪を分解して体熱として発散させ、強い抗肥満活性があることが報告されている（非特許文献１、非特許文献２）。
【０００４】
非特許文献２によれば、フコキサンチンが脂肪細胞に対する分化抑制作用を示すことが明らかになり、ワカメ油投与による動物実験での体重及びＷＡＴ（白色脂肪組織）の減少は、フコキサンチンによる脂肪細胞への分化の抑制と、ＷＡＴ中のＰＰＡＲγに支配されたＵＣＰ１（脱共役蛋白質）の発現による脂肪燃焼に拠ることが明らかになった。
【０００５】
以上の知見に基づき、本出願人は特許文献１においてフコキサンチノールを有効成分として成ることを特徴とする抗肥満活性剤を開示した。
【０００６】
【非特許文献１】Ｈａｙａｔｏ Ｍａｅｄａ， Ｍａｓａｓｈｉ Ｈｏｓｏｋａｗａ， Ｔｏｋｕｔａｋｅ Ｓａｓｈｉｍａ， Ｋａｔｓｕｒａ Ｆｕｎａｙａｍａ， Ｋａｚｕｏ Ｍｉｙａｓｈｉｔａ， “Ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ ｆｒｏｍ ｅｄｉｂｌｅ ｓｅａｗｅｅｄ， Ｕｎｄａｒｉａ ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄａ， ｓｈｏｗｓ ａｎｔｉｏｂｅｓｉｔｙ ｅｆｆｅｃｔ ｔｈｒｏｕｇｈ ＵＣＰ１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｗｈｉｔｅ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅｓ”， Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍｍ．， ３３２， ３９２−３９７ （２００５）．
【非特許文献２】Ｈａｙａｔｏ Ｍａｅｄａ， Ｍａｓａｓｈｉ Ｈｏｓｏｋａｗａ， Ｔｏｋｕｔａｋｅ Ｓａｓｈｉｍａ， Ｎｏｂｕｙｕｋｉ Ｔａｋａｈａｓｈｉ， Ｔｅｒｕｏ Ｋａｗａｄａ， Ｋａｚｕｏ Ｍｙａｓｈｉｔａ， “Ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ ａｎｄ ｉｔｓ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ， ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎｏｌ， ｓｕｐｐｒｅｓｓ ａｄｉｐｏｃｙｔｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ３Ｔ３−Ｌ１ ｃｅｌｌｓ”， Ｉｎｔ． Ｊ． Ｍｏｌｅ． Ｍｅｄ．， １８， １４７−１５２ （２００６）．
【特許文献１】ＷＯ／２００６／１２６３２５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
前述したように、フコキサンチン及びフコキサンチノールは抗肥満活性剤として有効であるが、褐藻類の成熟体に含まれるフコキサンチンの量は少なく、実用的な量を得るには時間と費用がかかるという問題点があった。また、抗肥満活性剤としての効果も更に強い効果を示すものが要望されていた。
【０００８】
本発明は以上の従来技術の問題点に鑑み、安価で大量に取得することができる抗肥満活性剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、海藻類以外にも抗肥満活性を呈する機能性食品素材が見い出される可能性は十分に有り、また、抗肥満活性を有するカロテノイドと抗肥満活性を示さないカロテノイドの構造的な差異を明確にすることができればより効率的な抗肥満剤の開発が可能になるという見地から精力的な研究を行った。
係る研究として野菜くずやビート大根の葉部などのように、大量に廃棄されている植物資源に着目し、これらに含まれる主要カロテノイドについて抗肥満活性を検討したところ、ネオキサンチンが活性を示すが、植物に含まれるその他の極性基を持たないβ−カロテン、ＯＨ基を有するルテイン、エポキシド基を有するビオラキサンチンなど１２種類のカロテノイドは抗肥満活性を示さないことを確認した。
係る事実に基づき本発明者らは、ネオキサンチン、フコキサンチン、フコキサンチノールに共通するアレン構造（＝Ｃ＝）がカロテノイドの抗肥満活性発現に必須な構造であるという着想を得て本発明に想到した。
【００１０】
すなわち本発明の抗肥満活性剤は、アレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）を有効成分としてなることを特徴とする。
【００１１】
さらに本発明の抗肥満活性剤は、アレン構造を有するカロテノイドを食品及び飲料及びサプリメント及びペット用食餌及び化粧品及びサニタリー製品及び薬剤のうちのいずれかに添加あるいは混合してなることを特徴とする。
【００１２】
アレン構造を有するカロテノイドが極性基を有することが望ましい。
【００１３】
アレン構造を有するカロテノイドが、粉末状態、ゲル状態、ゾル状態又は固体状態又はこれらを組み合わせたものである様にしてもよい。
【００１４】
アレン構造を有するカロテノイドが、有機溶媒可溶化又は乳剤化したものである様にしてもよい。
【００１５】
アレン構造を有するカロテノイドが、天然物から抽出し精製された成分及び有機合成によって得られた成分及び微生物を介して合成された成分の中から選ばれた少なくとも一種以上の組み合わせによって得られたものである様にしてもよい。
【００１６】
カロテノイドがネオキサンチンである様にしてもよい。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の抗肥満活性剤は安価で大量に取得することができ、しかも絶大な抗肥満活性効果を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
図１は本発明の抗肥満活性剤を構成するカロテノイドであるネオキサンチン１が有するアレン構造２及び極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）３や有機化合物中の橋かけ構造を有するエポキシド基４をネオキサンチン１の構造式との関係で示す。
図１にアレン構造２として示す様に１個の炭素を共有している二重結合を含む化合物をアレンといい、こうした二重結合のことを集積二重結合という。すなわち、本発明の抗肥満活性剤を構成するカロテノイドが有するアレン構造２は図１に示す集積二重結合である。
【００１９】
本発明の抗肥満活性剤を構成するアレン構造２を有するカロテノイドの抗肥満活性あるいは抗糖尿病活性は、これらのカロテノイドが細胞の核内に移動し、遺伝子の働きを制御するために発現する。したがって、細胞膜を通過するためにアレン構造２だけではなく、膜のリン脂質構造と親和性の高いカロテノイド構造を必要とする。
【００２０】
さらに本発明の抗肥満活性剤を構成するアレン構造を有するカロテノイドは極性基３，４を有することが望ましい。
この極性基は、結合するための「手」として機能し、例えば図１に示す有機化合物中の特性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）３や有機化合物中の橋かけ構造を有するエポキシド基４である。
特にこのＯＨ基３やエポキシド基４といった極性基が存在する場合に顕著な抗肥満活性あるいは抗糖尿病活性が認められる。
【００２１】
このようにアレン構造２を有し、かつＯＨ基３やエポキシド基４を有するカロテノイドには図２、図３、図４、図５に示すように、Ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ（フコキサンチン；褐藻）、Ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎｏｌ（フコキサンチノール；褐藻；ホヤなど）、Ｉｓｏｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ（アイソフコキサンチン；海藻）、Ｉｓｏｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎｏｌ（アイソフコキサンチノール；海藻）、Ａｍａｒｏｕｃｉａｘａｎｔｈｉｎ Ａ（アマロシアキサンチンＡ；ホヤなど）、Ｄｉｎｏｘａｎｔｈｉｎ（ダイノキサンチン；藻類）、Ｐａｒａｃｅｎｔｙｒｏｎｅ（パラセンティロン；ウニ；海藻を餌にした鶏卵脂質中）、Ｖａｕｃｈｅｒｉａｘａｎｔｈｉｎ（バーチャライアキサンチン；藻類）、Ｐ４５７（赤潮）、Ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎｏｌ ３’−ｓｕｌｐｈａｔｅ（フコキサンチノール３硫酸塩；海藻を投与した鶏）、１９’−Ｈｙｄｒｏｘｙｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎｏｌ （１９‘ヒドロキシフコキサンチノール；藻類を摂取したイガイ）、１９’−Ｈｙｄｒｏｘｙｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ （１９‘ヒドロキシフコキサンチン；海藻：酪酸エステルとして存在）、１９’−Ｈｙｄｒｏｘｙｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ ［１９’−ｂｕｔａｎｏａｔｅ］ （１９’ヒドロキシフコキサンチン酪酸エステル；藻類）、Ｍｕｒｉｃｅｌｌａｘａｎｔｈｉｎ（ムリスラキサンチン；サンゴ虫）、Ｐｅｒｉｄｉｎｉｎ（ペリジニン；藻類）、Ｐｅｒｉｄｉｎｉｎｏｌ（ペリジノール；藻類）、Ｐｉｔｔｏｓｐｏｒｕｍｘａｎｔｈｉｎ Ｃ（ピトスポラムキサンチンＣ；種子）、Ｎｅｏｘａｎｔｈｉｎ（ネオキサンチン；緑色野菜）、Ｎｅｏｆｌｏｒ（ネオフラー；花）、Ｃａｐｓｏｎｅｏｘａｎｔｈｉｎ（カプソネオキサンチン；アスパラガス）、Ｎｅｏｃｈｒｏｍｅ（ネオクロム；緑色野菜・藻類）、Ｍｉｍｕｌａｘａｎｔｈｉｎ（マイムラキサンチン；花）、Ｄｅｅｐｏｘｙｎｅｏｘａｎｔｈｉｎ（ディープオキシネオキサンチン；花弁）がある。
【００２２】
以上のアレン構造２を有し、かつＯＨ基３やエポキシド基４を有するカロテノイドにあって、ネオキサンチン１は陸上植物に広く存在するカロテノイドの一種である。すなわちネオキサンチン１は、陸上植物から抽出することができ、野菜くずやビート大根の葉部などのように、大量に廃棄される植物資源から抽出することができる。この陸上植物から抽出したネオキサンチンを食品、肥料、農薬、化粧品又は医薬品に添加することで、抗肥満活性の機能性食品素材、抗肥満活性の肥料、抗肥満活性の医薬品などを構成することが出来る。
［実施例］
【００２３】
次に本発明例の抗肥満活性剤を構成するアレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）であるネオキサンチンと、参照例としてホヤから抽出したフコキサンチノールとフコキサンチンと、比較例として図６と図７で示す野菜などに含まれる他のカロテノイドを用い抗肥満活性を調査した結果を説明する。
図６と図７で示すカロテノイドはＶｉｏｌａｘａｎｔｈｉｎ（ビオラキサンチン）、Ｒｈｏｄｏｘａｎｔｈｉｎ（ロドキサンチン）、Ｃａｐｓｏｒｕｂｉｎ（カプソルビン）、Ａｎｔｈｅｒａｘａｎｔｈｉｎ（アンサラキサンチン）、Ｌｕｔｅｉｎ ｅｐｏｘｉｄｅ（ルテインエポキサイド）、Ｃｉｔｒａｎａｘａｎｔｈｉｎ（シトラナキサンチン）、β−Ｃｒｙｐｔｏｘａｎｔｈｉｎ（ベータクリプトキサンチン）、Ｌｕｔｅｉｎ（ルテイン）、Ｍｕｔａｔｏｘａｎｔｈｉｎ（ムタトキサンチン）、（９Ｚ）−Ｃａｎｔｈａｘａｎｔｈｉｎ（カンタキサンチン）、（１３Ｚ）−Ｃａｎｔｈａｘａｎｔｈｉｎ（カンタキサンチン）、β−Ｃａｒｏｔｅｎｅ ｅｐｏｘｉｄｅ（ベータカロテインエポキサイド）であって、いずれも極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有するがアレン構造を有しない。
【００２４】
一方本発明の抗肥満活性剤を構成するアレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）であるネオキサンチン及び参照例のフコキサンチン及びフコキサンチノールはいずれもアレン構造を有し、かつ極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有する。
【００２５】
先ずネオキサンチンの抽出方法を説明する。
ビートの葉部は根部の利用の際に廃棄される。そこで、北海道十勝地方で廃棄されたビート葉をネオキサンチン給源とした。ビート葉から生のままエタノールで脂質を抽出するとクロロフィルをはじめキサントフィル以外の多くの不純物が混入した。
そこで、図８に示す様に、生ビート葉部分を真空低温乾燥した300 gの乾燥ビート葉を粉末化（フードミキサー）し、600 mLのエタノールを用いて脂溶性成分を３回抽出した。この操作によりクロロフィル量が少なく、ネオキサンチン、ルテイン、β−カロテンを含むビート由来脂溶性成分である粗精製ビート油 6 gが得られた。この粗精製ビート油を充填剤にシリカゲルを用い、展開溶媒としてi２５％アセトン含有ヘキサンとii５０％アセトン含有ヘキサンとを用いてカラムクロマトグラフィーで分別することにより、ネオキサンチン画分が得られた。
【００２６】
以上の工程により、ネオキサンチンのみを含む画分を得ることができた。ビート葉中のネオキサンチン含量は、これまで報告のあったホウレンソウに比べても高く、ビート葉はネオキサンチンの給源として優れていることがわかった。なお、細胞実験に用いるネオキサンチンはカラムクロマトグラフィーで得られたものを高速液体クロマトグラフィーで精製して用いた。
【００２７】
参照例であるフコキサンチノールとフコキサンチンの抽出は次のようにして行った。
まず、ホヤの内臓と殻を取り出し、その内臓と殻の全重量に対して２倍量のアセトンを用いて４日間抽出する。この操作を２回繰り返す。
【００２８】
ホヤのアセトン抽出物をシリカゲルカラムに供し、ｎ−ヘキサンとジエチルエーテルを体積比で９５：５で混合したものを使って中性脂質、主にトリアシルグリセロールを除去した後、アセトンを用いて粗カロテノイド画分を溶出する。
【００２９】
粗カロテノイド画分をシリカゲル薄層クロマトグラフィープレートにスポットし、アセトンとｎ−ヘキサンを体積比で４：６に混合したもので展開し、黄色や橙色を呈したスポットを目印に、大まかに５つの画分に分け、アセトンを用いてシリカゲルから溶出した。
【００３０】
図９に、ホヤ抽出物の薄相クロマトグラムを示す。写真撮影した薄相クロマトグラムを模式的に描写した。Ｆｒａｃｔｉｏｎ１から５に、各種カロテノイドが抽出されている。具体的には、Ｆｒａｃｔｉｏｎ３にハロシンチアキサンチン、Ｆｒａｃｔｉｏｎ４にフコキサンチノールが含まれていた。それ故、細胞試験及び構造分析をするために、更に下記の精製を行った。
【００３１】
Ｆｒａｃｔｉｏｎ３（ハロシンチアキサンチン）の精製：ＲＰ−８逆相薄層クロマトグラフィープレート（ＲＰ−８：オクチルシランという分離用の担体）にスポットし、メタノールと水を体積比で９：１に混合したもので展開後、橙色の画分を分離し、アセトンで溶出した。
【００３２】
Ｆｒａｃｔｉｏｎ ４（フコキサンチノール）の精製：ＲＰ−８逆相薄層クロマトグラフィープレート（ＲＰ−１８：オクタデシルシランという分離用の担体）にスポットし、メタノールとアセトンと水を体積比で４：６：２で混合したもので展開後、橙色の画分を分離し、アセトンで溶出した。
【００３３】
ハロシンチアキサンチン及びフコキサンチノールの構造は、質量分析及びＮＭＲ分析により同定した。図１０は、同定したフコキサンチノール５の構造式をアレン構造２及び極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）３や有機化合物中の橋かけ構造を有するエポキシド基４との関係で示す。
【００３４】
次いで、以上のようにして抽出したネオキサンチンと、フコキサンチノール及びフコキサンチンと、図６と図７で示す野菜などに含まれる他のカロテノイドの抗肥満活性について検証した。
【００３５】
細胞培養：３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞はＦＢＳを１０％（体積比）含むＤＭＥＭ培地を用いて３７℃、ＣＯ２（５％）存在下で培養した。なお、ＦＢＳは５６℃で３０分間非働化したものを用いた。
【００３６】
また、細胞は実験ごとに液体窒素中に保存した新しい細胞を使用した。９６穴マイクロプレートに１ｗｅｌｌに対して、３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞を５×１０４ ｃｅｌｌｓまき、４８時間前培養した。
次に、培地をｗｅｌｌから取り除き、Ｉｎｓｕｌｉｎ（１０μｇ／ｍＬ）、Ｄｅｘａｍｅｔａｚｏｎｅ（０．２５μｇ／ｍＬ）、ＩＢＭＸ（０．５ｍＭ）を含むＤＭＥＭ培地を加え、さらに４８時間培養した。その後、Ｉｎｓｕｌｉｎのみを５μｇ／ｍＬ含むＤＭＥＭ培地を用いて培地交換を４日間隔で培地交換を繰り返しながら、脂肪細胞への分化誘導を行った。その際、培地にネオキサンチンを添加し分化誘導に及ぼす影響を調べた。
【００３７】
（１）オイルレッド０による細胞内脂質の定量
９６穴マイクロプレート中で培養した細胞をホルマリンにより固定後、オイルレッド０液を加え、細胞内の脂質を染色した。染色後、蒸留水で３回洗浄し、細胞観察を行った。次いで、イソプロパノ−ルを各ｗｅｌｌに加え、色素を溶出させマイクロプレートリーダーを用いて４９０ｎｍの吸光値を測定した。
【００３８】
（２）ＧＰＤＨ活性測定
ＧＰＤＨ （ｇｌｙｃｅｒｏｌ−３−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｄｅｈｙｄｒｏ− ｇｅｎａｓｅ ）活性の測定にはＧＰＤＨ活性測定キット（ホクドー（株））を用いた。即ち、３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞を４８時間、２４ｗｅｌｌプレートにて前培養後、上記と同様の方法で脂肪細胞への分化誘導を行った。培養後培地を取り除き、ＰＢＳにてｗｅｌｌを洗浄後、酵素抽出溶液をｗｅｌｌに加え細胞を回収した。次に細胞を超音波破砕機にて破砕後、１２８００ｇで遠心分離し、上清を回収し、酵素活性を測定した。
【００３９】
以下、得られた結果について図１１〜図１４を用いて詳述する。
図１１、図１２は、各々３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴う脂肪蓄積に及ぼすネオキサンチン、フコキサンチノールの影響を示した説明図である。縦軸は、オイルレッド０による細胞内脂質の定量の際のマイクロプレートリーダーを用いて測定される４９０ｎｍの吸光値であり、この値が高いほど脂肪細胞が多いことを意味する。
図１１から明らかなように、前駆脂肪細胞（３Ｔ３−Ｌ１）は分化することより細胞内には多くの脂肪が蓄積されている。これに対して、ネオキサンチン添加又はフコキサンチノール添加によりその蓄積は有意に抑制されていることが解かる。ネオキサンチン添加又はフコキサンチノール添加量に比例して、その抑制効果が如実に現れている。この結果は、細胞レベルでのネオキサンチン又はフコキサンチノールの抗肥満作用を示すものである。従って、ネオキサンチン又はフコキサンチノールを添加することは、ネオキサンチン又はフコキサンチノールを抗肥満活性剤として添加していることと同じ意味を有する。
【００４０】
図１３、図１４は、それぞれ３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴うＧＰＤＨ活性増大に及ぼすネオキサンチン及びフコキサンチンとフコキサンチノールの影響を示した説明図である。縦軸は、前駆脂肪細胞を１とした時の相対ＧＰＤＨ活性であり、その値が大きい程活性が大きいことを意味する。
図１３、図１４より、細胞内での脂肪蓄積に関与する酵素（ＧＰＤＨ）活性は、ネオキサンチン添加、フコキサンチノール添加により低下していることが明らかである。この結果は、ネオキサンチン、フコキサンチノールの脂肪蓄積抑制効果の少なくとも一部が、こうした脂肪合成酵素活性の阻害によることを示すものである。
【００４１】
これに対し図６と図７で示した野菜などに含まれる極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有するがアレン構造を有しない他のカロテノイド添加では、脂肪蓄積とＧＰＤＨ活性共にコントロールと有意な差は認められなかった。
【００４２】
以上のようにアレン構造を有し、かつ極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有するネオキサンチン及び参照例のフコキサンチン及びフコキサンチノールはいずれも顕著な抗肥満活性を示し、これに対し極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有するがアレン構造を有しない他のカロテノイド添加では特には抗肥満活性が示されないことからカロテノイドの抗肥満活性にはアレン構造が必須であり、本発明のアレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）を有効成分としてなる抗肥満活性剤が有効に機能することが示された。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明は、産業上は食品、とりわけ機能性食品素材の分野で活用することが可能であり、その他にも医学、農業の分野で応用することが可能である。このネオキサンチンを食品、肥料、農薬、化粧品又は医薬品に添加することで、抗肥満活性の機能性食品素材、抗肥満活性の肥料、抗肥満活性の医薬品などを構成することが出来るので、とりわけ機能性食品素材の市場を拡大することに大きく寄与することが予想される。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】本発明の抗肥満活性剤を構成するカロテノイドが有するアレン構造及び極性基をネオキサンチンの構造式との関係で示す説明図。
【図２】アレン構造を有するカロテノイドを例示し、構造式を示した説明図
【図３】アレン構造を有するカロテノイドを例示し、構造式を示した他の説明図
【図４】アレン構造を有するカロテノイドを例示し、構造式を示した別の説明図
【図５】アレン構造を有するカロテノイドを例示し、構造式を示したまた別の説明図
【図６】本発明例の比較例として抗肥満活性を検討したアレン構造を有しないカロテノイドを例示して構造式を示す説明図。
【図７】本発明例の比較例として抗肥満活性を検討したアレン構造を有しないカロテノイドを例示して構造式を示す他の説明図。
【図８】ビート葉からのネオキサンチンの分離方法を示すフローチャート。
【図９】本発明の参照例であるホヤ抽出物のフコキサンチノールの薄相クロマトグラムを示す。
【図１０】本発明の参照例で同定したフコキサンチノールの構造式をアレン構造及び極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）や有機化合物中の橋かけ構造を有するエポキシド基との関係で示す説明図。
【図１１】本発明のネオキサンチンの３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴う脂肪蓄積に及ぼす影響を示した説明図である。
【図１２】本発明の参照例におけるフコキサンチノールの３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴う脂肪蓄積に及ぼす影響を示した説明図である。
【図１３】本発明の３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴うＧＰＤＨ活性増大に及ぼす影響を示した説明図である。
【図１４】本発明の参照例であるフコキサンチノールの３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴うＧＰＤＨ活性増大に及ぼす影響を示した説明図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は抗肥満活性剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
肥満はメタボリックシンドロームの原因となることから、抗肥満活性を有する機能成分の発見が強く求められている。
従来よりカテキンやフラバンジェノールなどのポリフェノール類がすでに実用化、製品化されている。
【０００３】
またワカメなどに含まれるカロテノイド（フコキサンチン）とホヤに含まれるカロテノイド（フコキサンチンール）が、モデル動物の内臓脂肪（白色脂肪）中に脱共役タンパク質（ＵＣＰ１）を発現させ、これにより脂肪を分解して体熱として発散させ、強い抗肥満活性があることが報告されている（非特許文献１、非特許文献２）。
【０００４】
非特許文献２によれば、フコキサンチンが脂肪細胞に対する分化抑制作用を示すことが明らかになり、ワカメ油投与による動物実験での体重及びＷＡＴ（白色脂肪組織）の減少は、フコキサンチンによる脂肪細胞への分化の抑制と、ＷＡＴ中のＰＰＡＲγに支配されたＵＣＰ１（脱共役蛋白質）の発現による脂肪燃焼に拠ることが明らかになった。
【０００５】
以上の知見に基づき、本出願人は特許文献１においてフコキサンチノールを有効成分として成ることを特徴とする抗肥満活性剤を開示した。
【０００６】
【非特許文献１】Ｈａｙａｔｏ Ｍａｅｄａ， Ｍａｓａｓｈｉ Ｈｏｓｏｋａｗａ， Ｔｏｋｕｔａｋｅ Ｓａｓｈｉｍａ， Ｋａｔｓｕｒａ Ｆｕｎａｙａｍａ， Ｋａｚｕｏ Ｍｉｙａｓｈｉｔａ， “Ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ ｆｒｏｍ ｅｄｉｂｌｅ ｓｅａｗｅｅｄ， Ｕｎｄａｒｉａ ｐｉｎｎａｔｉｆｉｄａ， ｓｈｏｗｓ ａｎｔｉｏｂｅｓｉｔｙ ｅｆｆｅｃｔ ｔｈｒｏｕｇｈ ＵＣＰ１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｗｈｉｔｅ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅｓ”， Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍｍ．， ３３２， ３９２−３９７ （２００５）．
【非特許文献２】Ｈａｙａｔｏ Ｍａｅｄａ， Ｍａｓａｓｈｉ Ｈｏｓｏｋａｗａ， Ｔｏｋｕｔａｋｅ Ｓａｓｈｉｍａ， Ｎｏｂｕｙｕｋｉ Ｔａｋａｈａｓｈｉ， Ｔｅｒｕｏ Ｋａｗａｄａ， Ｋａｚｕｏ Ｍｙａｓｈｉｔａ， “Ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ ａｎｄ ｉｔｓ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ， ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎｏｌ， ｓｕｐｐｒｅｓｓ ａｄｉｐｏｃｙｔｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ３Ｔ３−Ｌ１ ｃｅｌｌｓ”， Ｉｎｔ． Ｊ． Ｍｏｌｅ． Ｍｅｄ．， １８， １４７−１５２ （２００６）．
【特許文献１】ＷＯ／２００６／１２６３２５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
前述したように、フコキサンチン及びフコキサンチノールは抗肥満活性剤として有効であるが、褐藻類の成熟体に含まれるフコキサンチンの量は少なく、実用的な量を得るには時間と費用がかかるという問題点があった。また、抗肥満活性剤としての効果も更に強い効果を示すものが要望されていた。
【０００８】
本発明は以上の従来技術の問題点に鑑み、安価で大量に取得することができる抗肥満活性剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、海藻類以外にも抗肥満活性を呈する機能性食品素材が見い出される可能性は十分に有り、また、抗肥満活性を有するカロテノイドと抗肥満活性を示さないカロテノイドの構造的な差異を明確にすることができればより効率的な抗肥満剤の開発が可能になるという見地から精力的な研究を行った。
係る研究として野菜くずやビート大根の葉部などのように、大量に廃棄されている植物資源に着目し、これらに含まれる主要カロテノイドについて抗肥満活性を検討したところ、ネオキサンチンが活性を示すが、植物に含まれるその他の極性基を持たないβ−カロテン、ＯＨ基を有するルテイン、エポキシド基を有するビオラキサンチンなど１２種類のカロテノイドは抗肥満活性を示さないことを確認した。
係る事実に基づき本発明者らは、ネオキサンチン、フコキサンチン、フコキサンチノールに共通するアレン構造（＝Ｃ＝）がカロテノイドの抗肥満活性発現に必須な構造であるという着想を得て本発明に想到した。
【００１０】
すなわち本発明の抗肥満活性剤は、アレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）を有効成分としてなることを特徴とする。
【００１１】
さらに本発明の抗肥満活性剤は、アレン構造を有するカロテノイドを食品及び飲料及びサプリメント及びペット用食餌及び化粧品及びサニタリー製品及び薬剤のうちのいずれかに添加あるいは混合してなることを特徴とする。
【００１２】
アレン構造を有するカロテノイドが極性基を有することが望ましい。
【００１３】
アレン構造を有するカロテノイドが、粉末状態、ゲル状態、ゾル状態又は固体状態又はこれらを組み合わせたものである様にしてもよい。
【００１４】
アレン構造を有するカロテノイドが、有機溶媒可溶化又は乳剤化したものである様にしてもよい。
【００１５】
アレン構造を有するカロテノイドが、天然物から抽出し精製された成分及び有機合成によって得られた成分及び微生物を介して合成された成分の中から選ばれた少なくとも一種以上の組み合わせによって得られたものである様にしてもよい。
【００１６】
カロテノイドがネオキサンチンである様にしてもよい。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の抗肥満活性剤は安価で大量に取得することができ、しかも絶大な抗肥満活性効果を得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
図１は本発明の抗肥満活性剤を構成するカロテノイドであるネオキサンチン１が有するアレン構造２及び極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）３や有機化合物中の橋かけ構造を有するエポキシド基４をネオキサンチン１の構造式との関係で示す。
図１にアレン構造２として示す様に１個の炭素を共有している二重結合を含む化合物をアレンといい、こうした二重結合のことを集積二重結合という。すなわち、本発明の抗肥満活性剤を構成するカロテノイドが有するアレン構造２は図１に示す集積二重結合である。
【００１９】
本発明の抗肥満活性剤を構成するアレン構造２を有するカロテノイドの抗肥満活性あるいは抗糖尿病活性は、これらのカロテノイドが細胞の核内に移動し、遺伝子の働きを制御するために発現する。したがって、細胞膜を通過するためにアレン構造２だけではなく、膜のリン脂質構造と親和性の高いカロテノイド構造を必要とする。
【００２０】
さらに本発明の抗肥満活性剤を構成するアレン構造を有するカロテノイドは極性基３，４を有することが望ましい。
この極性基は、結合するための「手」として機能し、例えば図１に示す有機化合物中の特性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）３や有機化合物中の橋かけ構造を有するエポキシド基４である。
特にこのＯＨ基３やエポキシド基４といった極性基が存在する場合に顕著な抗肥満活性あるいは抗糖尿病活性が認められる。
【００２１】
このようにアレン構造２を有し、かつＯＨ基３やエポキシド基４を有するカロテノイドには図２、図３、図４、図５に示すように、Ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ（フコキサンチン；褐藻）、Ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎｏｌ（フコキサンチノール；褐藻；ホヤなど）、Ｉｓｏｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ（アイソフコキサンチン；海藻）、Ｉｓｏｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎｏｌ（アイソフコキサンチノール；海藻）、Ａｍａｒｏｕｃｉａｘａｎｔｈｉｎ Ａ（アマロシアキサンチンＡ；ホヤなど）、Ｄｉｎｏｘａｎｔｈｉｎ（ダイノキサンチン；藻類）、Ｐａｒａｃｅｎｔｙｒｏｎｅ（パラセンティロン；ウニ；海藻を餌にした鶏卵脂質中）、Ｖａｕｃｈｅｒｉａｘａｎｔｈｉｎ（バーチャライアキサンチン；藻類）、Ｐ４５７（赤潮）、Ｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎｏｌ ３’−ｓｕｌｐｈａｔｅ（フコキサンチノール３硫酸塩；海藻を投与した鶏）、１９’−Ｈｙｄｒｏｘｙｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎｏｌ （１９‘ヒドロキシフコキサンチノール；藻類を摂取したイガイ）、１９’−Ｈｙｄｒｏｘｙｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ （１９‘ヒドロキシフコキサンチン；海藻：酪酸エステルとして存在）、１９’−Ｈｙｄｒｏｘｙｆｕｃｏｘａｎｔｈｉｎ ［１９’−ｂｕｔａｎｏａｔｅ］ （１９’ヒドロキシフコキサンチン酪酸エステル；藻類）、Ｍｕｒｉｃｅｌｌａｘａｎｔｈｉｎ（ムリスラキサンチン；サンゴ虫）、Ｐｅｒｉｄｉｎｉｎ（ペリジニン；藻類）、Ｐｅｒｉｄｉｎｉｎｏｌ（ペリジノール；藻類）、Ｐｉｔｔｏｓｐｏｒｕｍｘａｎｔｈｉｎ Ｃ（ピトスポラムキサンチンＣ；種子）、Ｎｅｏｘａｎｔｈｉｎ（ネオキサンチン；緑色野菜）、Ｎｅｏｆｌｏｒ（ネオフラー；花）、Ｃａｐｓｏｎｅｏｘａｎｔｈｉｎ（カプソネオキサンチン；アスパラガス）、Ｎｅｏｃｈｒｏｍｅ（ネオクロム；緑色野菜・藻類）、Ｍｉｍｕｌａｘａｎｔｈｉｎ（マイムラキサンチン；花）、Ｄｅｅｐｏｘｙｎｅｏｘａｎｔｈｉｎ（ディープオキシネオキサンチン；花弁）がある。
【００２２】
以上のアレン構造２を有し、かつＯＨ基３やエポキシド基４を有するカロテノイドにあって、ネオキサンチン１は陸上植物に広く存在するカロテノイドの一種である。すなわちネオキサンチン１は、陸上植物から抽出することができ、野菜くずやビート大根の葉部などのように、大量に廃棄される植物資源から抽出することができる。この陸上植物から抽出したネオキサンチンを食品、肥料、農薬、化粧品又は医薬品に添加することで、抗肥満活性の機能性食品素材、抗肥満活性の肥料、抗肥満活性の医薬品などを構成することが出来る。
［実施例］
【００２３】
次に本発明例の抗肥満活性剤を構成するアレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）であるネオキサンチンと、参照例としてホヤから抽出したフコキサンチノールとフコキサンチンと、比較例として図６と図７で示す野菜などに含まれる他のカロテノイドを用い抗肥満活性を調査した結果を説明する。
図６と図７で示すカロテノイドはＶｉｏｌａｘａｎｔｈｉｎ（ビオラキサンチン）、Ｒｈｏｄｏｘａｎｔｈｉｎ（ロドキサンチン）、Ｃａｐｓｏｒｕｂｉｎ（カプソルビン）、Ａｎｔｈｅｒａｘａｎｔｈｉｎ（アンサラキサンチン）、Ｌｕｔｅｉｎ ｅｐｏｘｉｄｅ（ルテインエポキサイド）、Ｃｉｔｒａｎａｘａｎｔｈｉｎ（シトラナキサンチン）、β−Ｃｒｙｐｔｏｘａｎｔｈｉｎ（ベータクリプトキサンチン）、Ｌｕｔｅｉｎ（ルテイン）、Ｍｕｔａｔｏｘａｎｔｈｉｎ（ムタトキサンチン）、（９Ｚ）−Ｃａｎｔｈａｘａｎｔｈｉｎ（カンタキサンチン）、（１３Ｚ）−Ｃａｎｔｈａｘａｎｔｈｉｎ（カンタキサンチン）、β−Ｃａｒｏｔｅｎｅ ｅｐｏｘｉｄｅ（ベータカロテインエポキサイド）であって、いずれも極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有するがアレン構造を有しない。
【００２４】
一方本発明の抗肥満活性剤を構成するアレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）であるネオキサンチン及び参照例のフコキサンチン及びフコキサンチノールはいずれもアレン構造を有し、かつ極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有する。
【００２５】
先ずネオキサンチンの抽出方法を説明する。
ビートの葉部は根部の利用の際に廃棄される。そこで、北海道十勝地方で廃棄されたビート葉をネオキサンチン給源とした。ビート葉から生のままエタノールで脂質を抽出するとクロロフィルをはじめキサントフィル以外の多くの不純物が混入した。
そこで、図８に示す様に、生ビート葉部分を真空低温乾燥した300 gの乾燥ビート葉を粉末化（フードミキサー）し、600 mLのエタノールを用いて脂溶性成分を３回抽出した。この操作によりクロロフィル量が少なく、ネオキサンチン、ルテイン、β−カロテンを含むビート由来脂溶性成分である粗精製ビート油 6 gが得られた。この粗精製ビート油を充填剤にシリカゲルを用い、展開溶媒としてi２５％アセトン含有ヘキサンとii５０％アセトン含有ヘキサンとを用いてカラムクロマトグラフィーで分別することにより、ネオキサンチン画分が得られた。
【００２６】
以上の工程により、ネオキサンチンのみを含む画分を得ることができた。ビート葉中のネオキサンチン含量は、これまで報告のあったホウレンソウに比べても高く、ビート葉はネオキサンチンの給源として優れていることがわかった。なお、細胞実験に用いるネオキサンチンはカラムクロマトグラフィーで得られたものを高速液体クロマトグラフィーで精製して用いた。
【００２７】
参照例であるフコキサンチノールとフコキサンチンの抽出は次のようにして行った。
まず、ホヤの内臓と殻を取り出し、その内臓と殻の全重量に対して２倍量のアセトンを用いて４日間抽出する。この操作を２回繰り返す。
【００２８】
ホヤのアセトン抽出物をシリカゲルカラムに供し、ｎ−ヘキサンとジエチルエーテルを体積比で９５：５で混合したものを使って中性脂質、主にトリアシルグリセロールを除去した後、アセトンを用いて粗カロテノイド画分を溶出する。
【００２９】
粗カロテノイド画分をシリカゲル薄層クロマトグラフィープレートにスポットし、アセトンとｎ−ヘキサンを体積比で４：６に混合したもので展開し、黄色や橙色を呈したスポットを目印に、大まかに５つの画分に分け、アセトンを用いてシリカゲルから溶出した。
【００３０】
図９に、ホヤ抽出物の薄相クロマトグラムを示す。写真撮影した薄相クロマトグラムを模式的に描写した。Ｆｒａｃｔｉｏｎ１から５に、各種カロテノイドが抽出されている。具体的には、Ｆｒａｃｔｉｏｎ３にハロシンチアキサンチン、Ｆｒａｃｔｉｏｎ４にフコキサンチノールが含まれていた。それ故、細胞試験及び構造分析をするために、更に下記の精製を行った。
【００３１】
Ｆｒａｃｔｉｏｎ３（ハロシンチアキサンチン）の精製：ＲＰ−８逆相薄層クロマトグラフィープレート（ＲＰ−８：オクチルシランという分離用の担体）にスポットし、メタノールと水を体積比で９：１に混合したもので展開後、橙色の画分を分離し、アセトンで溶出した。
【００３２】
Ｆｒａｃｔｉｏｎ ４（フコキサンチノール）の精製：ＲＰ−８逆相薄層クロマトグラフィープレート（ＲＰ−１８：オクタデシルシランという分離用の担体）にスポットし、メタノールとアセトンと水を体積比で４：６：２で混合したもので展開後、橙色の画分を分離し、アセトンで溶出した。
【００３３】
ハロシンチアキサンチン及びフコキサンチノールの構造は、質量分析及びＮＭＲ分析により同定した。図１０は、同定したフコキサンチノール５の構造式をアレン構造２及び極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）３や有機化合物中の橋かけ構造を有するエポキシド基４との関係で示す。
【００３４】
次いで、以上のようにして抽出したネオキサンチンと、フコキサンチノール及びフコキサンチンと、図６と図７で示す野菜などに含まれる他のカロテノイドの抗肥満活性について検証した。
【００３５】
細胞培養：３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞はＦＢＳを１０％（体積比）含むＤＭＥＭ培地を用いて３７℃、ＣＯ２（５％）存在下で培養した。なお、ＦＢＳは５６℃で３０分間非働化したものを用いた。
【００３６】
また、細胞は実験ごとに液体窒素中に保存した新しい細胞を使用した。９６穴マイクロプレートに１ｗｅｌｌに対して、３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞を５×１０４ ｃｅｌｌｓまき、４８時間前培養した。
次に、培地をｗｅｌｌから取り除き、Ｉｎｓｕｌｉｎ（１０μｇ／ｍＬ）、Ｄｅｘａｍｅｔａｚｏｎｅ（０．２５μｇ／ｍＬ）、ＩＢＭＸ（０．５ｍＭ）を含むＤＭＥＭ培地を加え、さらに４８時間培養した。その後、Ｉｎｓｕｌｉｎのみを５μｇ／ｍＬ含むＤＭＥＭ培地を用いて培地交換を４日間隔で培地交換を繰り返しながら、脂肪細胞への分化誘導を行った。その際、培地にネオキサンチンを添加し分化誘導に及ぼす影響を調べた。
【００３７】
（１）オイルレッド０による細胞内脂質の定量
９６穴マイクロプレート中で培養した細胞をホルマリンにより固定後、オイルレッド０液を加え、細胞内の脂質を染色した。染色後、蒸留水で３回洗浄し、細胞観察を行った。次いで、イソプロパノ−ルを各ｗｅｌｌに加え、色素を溶出させマイクロプレートリーダーを用いて４９０ｎｍの吸光値を測定した。
【００３８】
（２）ＧＰＤＨ活性測定
ＧＰＤＨ （ｇｌｙｃｅｒｏｌ−３−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ−ｄｅｈｙｄｒｏ− ｇｅｎａｓｅ ）活性の測定にはＧＰＤＨ活性測定キット（ホクドー（株））を用いた。即ち、３Ｔ３−Ｌ１前駆脂肪細胞を４８時間、２４ｗｅｌｌプレートにて前培養後、上記と同様の方法で脂肪細胞への分化誘導を行った。培養後培地を取り除き、ＰＢＳにてｗｅｌｌを洗浄後、酵素抽出溶液をｗｅｌｌに加え細胞を回収した。次に細胞を超音波破砕機にて破砕後、１２８００ｇで遠心分離し、上清を回収し、酵素活性を測定した。
【００３９】
以下、得られた結果について図１１〜図１４を用いて詳述する。
図１１、図１２は、各々３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴う脂肪蓄積に及ぼすネオキサンチン、フコキサンチノールの影響を示した説明図である。縦軸は、オイルレッド０による細胞内脂質の定量の際のマイクロプレートリーダーを用いて測定される４９０ｎｍの吸光値であり、この値が高いほど脂肪細胞が多いことを意味する。
図１１から明らかなように、前駆脂肪細胞（３Ｔ３−Ｌ１）は分化することより細胞内には多くの脂肪が蓄積されている。これに対して、ネオキサンチン添加又はフコキサンチノール添加によりその蓄積は有意に抑制されていることが解かる。ネオキサンチン添加又はフコキサンチノール添加量に比例して、その抑制効果が如実に現れている。この結果は、細胞レベルでのネオキサンチン又はフコキサンチノールの抗肥満作用を示すものである。従って、ネオキサンチン又はフコキサンチノールを添加することは、ネオキサンチン又はフコキサンチノールを抗肥満活性剤として添加していることと同じ意味を有する。
【００４０】
図１３、図１４は、それぞれ３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴うＧＰＤＨ活性増大に及ぼすネオキサンチン及びフコキサンチンとフコキサンチノールの影響を示した説明図である。縦軸は、前駆脂肪細胞を１とした時の相対ＧＰＤＨ活性であり、その値が大きい程活性が大きいことを意味する。
図１３、図１４より、細胞内での脂肪蓄積に関与する酵素（ＧＰＤＨ）活性は、ネオキサンチン添加、フコキサンチノール添加により低下していることが明らかである。この結果は、ネオキサンチン、フコキサンチノールの脂肪蓄積抑制効果の少なくとも一部が、こうした脂肪合成酵素活性の阻害によることを示すものである。
【００４１】
これに対し図６と図７で示した野菜などに含まれる極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有するがアレン構造を有しない他のカロテノイド添加では、脂肪蓄積とＧＰＤＨ活性共にコントロールと有意な差は認められなかった。
【００４２】
以上のようにアレン構造を有し、かつ極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有するネオキサンチン及び参照例のフコキサンチン及びフコキサンチノールはいずれも顕著な抗肥満活性を示し、これに対し極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）及び／又はエポキシド基を有するがアレン構造を有しない他のカロテノイド添加では特には抗肥満活性が示されないことからカロテノイドの抗肥満活性にはアレン構造が必須であり、本発明のアレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）を有効成分としてなる抗肥満活性剤が有効に機能することが示された。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明は、産業上は食品、とりわけ機能性食品素材の分野で活用することが可能であり、その他にも医学、農業の分野で応用することが可能である。このネオキサンチンを食品、肥料、農薬、化粧品又は医薬品に添加することで、抗肥満活性の機能性食品素材、抗肥満活性の肥料、抗肥満活性の医薬品などを構成することが出来るので、とりわけ機能性食品素材の市場を拡大することに大きく寄与することが予想される。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】本発明の抗肥満活性剤を構成するカロテノイドが有するアレン構造及び極性基をネオキサンチンの構造式との関係で示す説明図。
【図２】アレン構造を有するカロテノイドを例示し、構造式を示した説明図
【図３】アレン構造を有するカロテノイドを例示し、構造式を示した他の説明図
【図４】アレン構造を有するカロテノイドを例示し、構造式を示した別の説明図
【図５】アレン構造を有するカロテノイドを例示し、構造式を示したまた別の説明図
【図６】本発明例の比較例として抗肥満活性を検討したアレン構造を有しないカロテノイドを例示して構造式を示す説明図。
【図７】本発明例の比較例として抗肥満活性を検討したアレン構造を有しないカロテノイドを例示して構造式を示す他の説明図。
【図８】ビート葉からのネオキサンチンの分離方法を示すフローチャート。
【図９】本発明の参照例であるホヤ抽出物のフコキサンチノールの薄相クロマトグラムを示す。
【図１０】本発明の参照例で同定したフコキサンチノールの構造式をアレン構造及び極性基であるヒドロキシル基（ＯＨ基）や有機化合物中の橋かけ構造を有するエポキシド基との関係で示す説明図。
【図１１】本発明のネオキサンチンの３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴う脂肪蓄積に及ぼす影響を示した説明図である。
【図１２】本発明の参照例におけるフコキサンチノールの３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴う脂肪蓄積に及ぼす影響を示した説明図である。
【図１３】本発明の３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴うＧＰＤＨ活性増大に及ぼす影響を示した説明図である。
【図１４】本発明の参照例であるフコキサンチノールの３Ｔ３−Ｌ１脂肪細胞の分化に伴うＧＰＤＨ活性増大に及ぼす影響を示した説明図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）を有効成分としてなることを特徴とする抗肥満活性剤。
【請求項２】
アレン構造を有するカロテノイドを食品及び飲料及びサプリメント及びペット用食餌及び化粧品及びサニタリー製品及び薬剤のうちのいずれかに添加あるいは混合してなることを特徴とする抗肥満活性剤。
【請求項３】
アレン構造を有するカロテノイドが極性基を有する請求項１又は請求項２に記載の抗肥満活性剤。
【請求項４】
アレン構造を有するカロテノイドが、粉末状態、ゲル状態、ゾル状態又は固体状態又はこれらを組み合わせたものである請求項１〜請求項３のいずれか一に記載の抗肥満活性剤。
【請求項５】
アレン構造を有するカロテノイドが、有機溶媒可溶化又は乳剤化したものである請求項１〜請求項４のいずれか一に記載の抗肥満活性剤。
【請求項６】
アレン構造を有するカロテノイドが、天然物から抽出し精製された成分及び有機合成によって得られた成分及び微生物を介して合成された成分の中から選ばれた少なくとも一種以上の組み合わせによって得られたものである請求項１〜請求項５の何れか一に記載の抗肥満活性剤。
【請求項７】
カロテノイドがネオキサンチンである請求項１乃至請求項６のいずれか一に記載の抗肥満活性剤。
【請求項１】
アレン構造を有するカロテノイド（但し、フコキサンチン及びフコキサンチノールを除く。）を有効成分としてなることを特徴とする抗肥満活性剤。
【請求項２】
アレン構造を有するカロテノイドを食品及び飲料及びサプリメント及びペット用食餌及び化粧品及びサニタリー製品及び薬剤のうちのいずれかに添加あるいは混合してなることを特徴とする抗肥満活性剤。
【請求項３】
アレン構造を有するカロテノイドが極性基を有する請求項１又は請求項２に記載の抗肥満活性剤。
【請求項４】
アレン構造を有するカロテノイドが、粉末状態、ゲル状態、ゾル状態又は固体状態又はこれらを組み合わせたものである請求項１〜請求項３のいずれか一に記載の抗肥満活性剤。
【請求項５】
アレン構造を有するカロテノイドが、有機溶媒可溶化又は乳剤化したものである請求項１〜請求項４のいずれか一に記載の抗肥満活性剤。
【請求項６】
アレン構造を有するカロテノイドが、天然物から抽出し精製された成分及び有機合成によって得られた成分及び微生物を介して合成された成分の中から選ばれた少なくとも一種以上の組み合わせによって得られたものである請求項１〜請求項５の何れか一に記載の抗肥満活性剤。
【請求項７】
カロテノイドがネオキサンチンである請求項１乃至請求項６のいずれか一に記載の抗肥満活性剤。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【公開番号】特開２００８−２８０２８１（Ｐ２００８−２８０２８１Ａ）
【公開日】平成２０年１１月２０日（２００８．１１．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−１２５２３１（Ｐ２００７−１２５２３１）
【出願日】平成１９年５月１０日（２００７．５．１０）
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）平成１８年度 農林水産省 農業・食品産業技術総合研究機構 生物系特定産業技術研究支援センター委託「生物系産業創出のための異分野融合研究支援事業」および平成１８年度 文部科学省 科学技術総合研究委託 「戦略的研究拠点育成北大リサーチ＆ビジネスパーク構想（北海道大学創成科学共同研究機構）」、産業再生法第３０条の適用を受ける特許出願
【出願人】（５０４１７３４７１）国立大学法人 北海道大学 (971)
【出願人】（５０５１５２７５６）協同組合マリンテック釜石 (7)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年１１月２０日（２００８．１１．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年５月１０日（２００７．５．１０）
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）平成１８年度 農林水産省 農業・食品産業技術総合研究機構 生物系特定産業技術研究支援センター委託「生物系産業創出のための異分野融合研究支援事業」および平成１８年度 文部科学省 科学技術総合研究委託 「戦略的研究拠点育成北大リサーチ＆ビジネスパーク構想（北海道大学創成科学共同研究機構）」、産業再生法第３０条の適用を受ける特許出願
【出願人】（５０４１７３４７１）国立大学法人 北海道大学 (971)
【出願人】（５０５１５２７５６）協同組合マリンテック釜石 (7)
【Ｆターム（参考）】
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