抗菌剤として有用なペプチド化合物
本発明は、抗菌剤として使用することができるペプチド化合物に関し、これらの化合物は式（Ｉ）を有す：式中、Ｒ０は分岐（Ｃ８−Ｃ１１）アルキル、ＣＨ３−（ＣＨ２）ｍ−、ＣＨ３−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２−またはフェニル−（ＣＨ２）ｘ−であり；ｍ＝６〜１０；ｘ＝１〜３；Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８は、式ＧＦ−（ＣＨ２）ｎ−（ここで、ｎ＝１〜４；ＧＦ＝−ＮＨ２または−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２である）から独立に選択され；Ｒ２は、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＮＨ２または−ＣＨ２ＯＨであり；Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、直鎖または分岐−（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、−（ＣＨ２）−Ｒ１０、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ３および−ＣＨ−（ＣＨ３）−ＯＨから独立に選択され；Ｒ９は、ＣＯＮＨ２、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）またはＣＯＮＨＲ１１であり；Ｒ１０は、フェニル、３−インドリル、４−イミダゾリル、４−ヒドロキシフェニル、αもしくはβ−ナフチル、または２−、３−もしくは４−ピリジルであり；Ｒ１１は、特定のペプチド配列であり；ｕは、ＣＨ２またはＳであり；ｖは、ＮＨまたはＳであり；ｗはＣＨ２またはＣＯであり、ただし、Ｒ９がＣＯＮＨ２の場合、（ａ）Ｒ５またはＲ６は−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）であるか、または（ｂ）Ｒ５およびＲ６はＨであるか；または（ｃ）Ｒ９と結合したＣの配置はＳ型であるか、または（ｄ）Ｒ５と結合したＣの配置はＲ型であり；また、Ｒ９が−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨである場合、Ｒ８はＧＦ（ＣＨ２）ｎ（ここで、ｎは３であり、ＧＦは−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２である）であり、かつ、Ｒ７はＧＦ（ＣＨ２）ｎ（ここで、ｎは２であり、ＧＦはＮＨ２である）である。これらの化合物は、細菌感染の処置に有用であることが分かった。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グラム陽性および一部のグラム陰性菌に対して活性を有する新規化合物、その製造プロセス、それらを含む医薬組成物、および抗菌剤としてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗生物質を用いる薬物療法に対して耐性を持つようになった病原性微生物が、深刻化する公衆衛生問題となっている。その問題の一部は、ある種の細菌および他の感染性微生物が、抗生物質に対する耐性を発現できる著しい能力を持つことである。その問題のもう一つの原因は、ヒトおよび動物用医薬品、ならびに農業における抗生物質の乱用である。
【０００３】
多剤耐性細菌、例えばメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、バンコマイシン耐性腸球菌(Enterococci)、ならびに特定のグラム陰性菌、例えば、緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa)、アシネトバクター・バウマニー(Acinetobacter baumanii)および肺炎桿菌(Klebsiella pneumoniae)などにより引き起こされる感染の有病率の増大が世界的規模の重大な懸念となっている。このような感染は管理が極めて困難であり、疾患および死亡の一般的な原因である。従来の抗生物質は一般に、１以上の特定の標的タンパク質または標的受容体と相互作用し、遺伝的耐性は、多くの因子、例えばタンパク質または標的受容体の数などによって決まる割合で出現する。
【０００４】
従来の抗生物質に対して耐性を有する細菌株の絶え間ない出現が、細菌の細胞膜を標的とする新規薬物、例えば抗菌性ペプチド（ＡＭＰ：antimicrobial pepitide）などの開発を目的とする集中的な取り組みにつながった。ＡＭＰは主として細胞膜の脂質成分に作用するため、細菌が遺伝的耐性を発現することができない新種の治療薬を提供する。これらの化合物のうち、臨床で承認されている抗生物質ポリミキシンＢ（ＰｘＢ：polymyxin B）は、新しい治療学的関連性を獲得し(adquiring)、多剤耐性細菌に対する抗生物質種に属する代表であると考えられるようになってきている。
【０００５】
ポリミキシン類、および特にポリミキシン(Polymixin)Ｂは、１９４７年に発見され、グラム陰性菌に対し顕著な活性を有する抗生物質種である。ポリミキシンＢは、バチルス・ポリミキサ(Bacillus polymyxa)から単離されたリポペプチド抗生物質である。その基本構造は、ポリカチオン性ペプチド環および脂肪酸テールを有するトリペプチド側鎖からなる。ポリミキシンＢは近年、医療現場において再興してきており、乾燥抗生物質開発パイプライン、および多剤耐性（ＭＤＲ：multidrug-resistant）グラム陰性菌により引き起こされる院内感染の有病率の世界的増加により、その使用は増加を続ける可能性が高い。ポリミキシンＢおよびポリミキシンファミリーのその他のメンバーは、多剤耐性細菌により引き起こされる感染治療の最後の手段の薬物であり、また、時には唯一の利用可能な有効な抗生物質である。加えて、ポリミキシンに対する耐性はまれであり、一般に適応的であり、従って可逆的である。ポリミキシンＢはまた、リピドＡ部分への高親和性結合を介して、細菌リポ多糖類（ＬＰＳ：lipopolysaccharide）の生物学的活性を阻害する能力を有し、ＬＰＳ誘発敗血性ショックの治療に最適な薬剤である。残念ながら、ポリミキシンＢはグラム陽性および嫌気性菌に対する活性は持たない。さらに、ポリミキシンは多少の腎毒性(nefrotoxicity)および神経毒性を示すために、その使用は限定されている。
【０００６】
従って、グラム陰性菌のみならずグラム陽性細菌に対する活性も有する新規の有効な抗菌剤を発見する必要が依然として存在する。
【発明の概要】
【０００７】
発明者らは、細菌膜の脂質成分レベルで機能を果たし、グラム陽性およびグラム陰性菌の両方に対して活性を有する、抗生物質活性を有するいくつかのペプチド化合物を発見した。これらの化合物は、天然ポリミキシンの構造に基づいている。しかしながら、ポリミキシンとは異なり、これらの化合物は、マイクロモルの範囲でグラム陰性菌に対して活性を有するのみならず、グラム陽性菌に対しても活性を有する。このことは、どちらのタイプの細菌により引き起こされる感染に応答して働くことができるため、有利である。
【０００８】
よって、本発明の一態様は、式（Ｉ）：
【化１】
［式中、Ｒ０は、（Ｃ８−Ｃ１１）−分岐アルキル、ＣＨ３−（ＣＨ２）ｍ−、ＣＨ３−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２−、および
【化２】
からなる群から選択される基であり；
ｍは６〜１０の整数であり；ｘは１〜３の整数であり；
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８は次式：ＧＦ−（ＣＨ２）ｎ−（ここで、ｎは１〜４の整数であり；ＧＦは−ＮＨ２および−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２からなる群から選択される基である）を有する、独立に選択される基であり；
Ｒ２は、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＮＨ２および−ＣＨ２ＯＨからなる群から選択される基であり；
Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、−（ＣＨ２）−Ｒ１０、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ３および−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）からなる群から独立に選択される基であり；
Ｒ９は、ＣＯＮＨ２、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）およびＣＯＮＨＲ１１からなる群から選択され；
Ｒ１０は、フェニル、３−インドリル、４−イミダゾリル、４−ヒドロキシフェニル、αまたはβ−ナフチル、および２−、３−または４−ピリジルからなる群から選択される基であり；
Ｒ１１は、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ、Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ、Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ、およびＧｌｕ−（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒからなる群から選択されるペプチド配列であり；
ｕは、ＣＨ２またはＳであり；
ｖは、ＮＨまたはＳであり；
ｗは、ＣＨ２またはＣＯであり、
ただし、Ｒ９がＣＯＮＨ２である場合、以下の条件の１つが当てはまる：（ａ）Ｒ５またはＲ６は−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）である、（ｂ）Ｒ５およびＲ６はＨである；（ｃ）Ｒ９と結合したＣ原子の配置はＳ型である（Ｄ−システインの側鎖）または（ｄ）Ｒ５と結合したＣ原子の配置はＲ型である；また、Ｒ９が−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（トレオニンの側鎖）である場合、Ｒ８はＧＦ（ＣＨ２）ｎ（ここで、ｎは３であり、ＧＦは−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２であり、かつ、Ｒ７はＧＦ（ＣＨ２）ｎ（ここで、ｎは２であり、ＧＦはＮＨ２である）である]
の化合物を提供することである。
【０００９】
好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、Ｒ２が−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）である前記のものである。
【００１０】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ｕがＣＨ２であり、ｖがＮＨであり、ｗがＣＯであり、Ｒ９が−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）であり、かつ、Ｒ９と結合したＣ原子の配置がＳ型であるものである。これらの化合物は式（Ｉａ）を有する。
【化３】
【００１１】
より好ましい実施形態では、式（Ｉａ）の化合物は、ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］（Ｉａ１）である。
【００１２】
シクロ（４−１０）とは、１０位のトレオニンの末端カルボキシ基が４位のＤａｂの側鎖とアミド結合によって結合して大環を形成していることを意味する。
【００１３】
Ｄ−アミノ酸の配置はＤで示されている。配置に関する記載がない場合には、そのアミノ酸の配置はＬ型であると理解される。
【００１４】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ｕがＳであり、ｖがＳであり、かつ、ｗがＣＨ２であるものであり、式（Ｉｂ）を有する。
【化４】
【００１５】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、Ｒ９がＣＯＮＨＲ１１であり、かつ、Ｒ１１がＡｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ、Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ、Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ、Ｇｌｕ（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ、およびＧｌｕ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ）−γ−スペルミドからなる群から選択されるペプチド配列であるものである。
【００１６】
別のいっそうより好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は以下の一覧から選択される：
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｉｂ１）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｉｂ２）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ］（Ｉｂ３）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ（Ｉｂ４）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ（Ｉｂ５）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ（Ｉｂ６）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ（Ｉｂ７）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄａｂ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｉｂ８）；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ(ciclo)（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄａｂ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｕ−（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｉｂ９）。
【００１７】
「シクロ（Ｓ−Ｓ）」とは、大環が両システイン間のジスルフィド結合により形成されていることを意味する。
【００１８】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、以下の一覧から選択される：
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１０）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１１）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１２）；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１３）。
【００１９】
特に良好な結果が、１０位にＤ−システインを含むペプチドで得られた。別のより好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１１）；およびノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１３）から選択される。別のより好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物はノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１３）である。
【００２０】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、Ｒ６が−（ＣＨ）（ＣＨ３）（ＯＨ）であるものである。
【００２１】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、以下の一覧から選択される：
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１４）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１５）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１６）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１７）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１８）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１９）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２０）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２１）；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＴｒｐ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２２）；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２３）；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２４）；および
ドデカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２５）。
【００２２】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、Ｒ５またはＲ６が水素であるものである。
【００２３】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、以下の一覧から選択される：
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２６）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２７）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２８）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２９）；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３０）。
【００２４】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、以下の一覧から選択される：
オクタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３１）；
（Ｓ）−６−メチルヘプタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３２）；
（Ｓ）−６−メチルオクタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］、（Ｉｂ３３）；
オクタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３４）；
（Ｓ）−６−メチルヘプタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３５）；および
（Ｓ）−６−メチルオクタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３６）。
【００２５】
より好ましい式（Ｉ）の化合物は以下の一覧のものである：
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］（Ｉａ１）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ］（Ｉｂ３）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ（Ｉｂ６）；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１３）。
【００２６】
本発明の化合物は、固相Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ合成法により製造することができる。各アミノ酸の合成プロトコールは、以下に示すステップからなる：（ｉ）Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）で数回、樹脂を洗浄；ｉｉ）２０％ピペリジン／ＤＭＦで処理；ｉｉｉ）ＤＭＦで数回洗浄；ｉｖ）ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ保護アミノ酸および２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート／ジイソプロピルエチルアミン（ＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ）でアシル化；ｖ）ＤＭＦで数回、ジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）で数回洗浄；ｖｉ）ＤＭＦで数回洗浄。
【００２７】
前述のプロセスにより得られたペプチドは、分取ＨＰＬＣにより精製することができる。本法により９０％を上回る最終純度を得ることができるが、９５％より高いことが好ましい。
【００２８】
本発明の化合物は、記載された方法に従って化学的合成により容易に製造されるのに対して、市販のポリミキシンは発酵プロセスにより得られる。
【００２９】
本発明のもう一つの態様は、グラム陽性菌に対する抗菌剤としての使用のための式（Ｉ）の化合物である。医療目的に関連するグラム陽性菌では、例えば、バチルス(Bacillus)、リステリア(Listeria)、ブドウ球菌(Staphylococcus)、マイクロコッカス(Micrococcus)、連鎖球菌(Streptococcus)、腸球菌(Enterococcus)、クロストリジウム(Clostridium)、マイコプラズマ(Mycoplasma)および放線菌(Actinobacteria)などのいくつかの属が周知である。
【００３０】
好ましい実施形態では、グラム陽性菌は、マイコバクテリウム・フレイ(Micobacterium phlei)、黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、およびマイクロコッカス・ルテウス(Micrococcus luteus)から選択される。特定の実施形態では、グラム陽性菌はマイコバクテリウム・フレイＡＴＣＣ４１４２３、黄色ブドウ球菌ＡＴＣＣ６５３８、およびマイクロコッカス・ルテウスＡＴＣＣ９３４１から選択される。
【００３１】
本発明のこの態様はまた、ヒトを含む哺乳類においてグラム陽性菌により引き起こされる細菌感染の処置を目的とする薬剤の製造のための、例えば上記に定義される化合物の使用として処方されうる。
【００３２】
本発明はまた、グラム陽性菌により引き起こされる細菌感染、特に、前述の感染のうちの一つに罹患している、または感受性のある、ヒトを含む哺乳類の処置および／または予防の方法に関し、前記方法は前記患者に本発明の化合物の治療上有効な量を薬学上許容される賦形剤または担体とともに投与することを含む。
【００３３】
グラム陰性菌に対する抗菌剤としての使用のための、上記に定義される式（Ｉ）の化合物もまた、本発明の一部である。医学的に関連のあるグラム陰性菌としては、大腸菌(Escherichia coli)、サルモネラ(Salmonella)、腸内細菌科(Enterobacteriaceae)、シュードモナス(Pseudomonas)、モラクセラ(Moraxella)、ヘリコバクター(Helocobacter)、レジオネラ(Legionella)、ヘモフィルス・インフルエンザ(Hemophilus influenza)、肺炎桿菌(Klebsiella pneumoniae)、プロテウス・ミラビリス(Proteus mirabilis)、エンテロバクター・クロアカエ(Enterobacter cloacea)、セラチア・マルセッセンス(Serratia marcescens)、およびアシネトバクター・バウマニー(Acinetobacter baumannii)などが挙げられる。
【００３４】
好ましい実施形態では、グラム陰性菌は、ネズミチフス菌(Salmonella typhimurium)、緑膿菌、大腸菌、およびアシネトバクター種(Acinetobacter sp.)から選択される。特定の実施形態では、グラム陰性菌はネズミチフス菌１４０２８、緑膿菌９０２７、大腸菌８７３９、およびアシネトバクター種ＡＴＣＣ５７９８から選択される。本発明のこの態様はまた、ヒトを含む哺乳類においてグラム陰性菌により引き起こされる細菌感染の処置を目的とする薬剤の製造のための、上記に定義される式（Ｉ）の化合物の使用として処方され得る。
【００３５】
本発明はまた、グラム陰性菌により引き起こされる細菌感染、特に、前述の感染のうちの一つに罹患している、または感受性のある、ヒトを含む哺乳類の処置および／または予防の方法に関し、前記方法は、前記患者に上記に定義される式（Ｉ）の化合物の治療上有効な量を薬学上許容される賦形剤または担体とともに投与することを含んでなる。
【００３６】
本発明の化合物は、他の公知の抗菌剤と同じ方法で使用することができる。それらは単独で、または他の好適な生物活性化合物と組み合わせて用いられてよい。特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、グラム陰性菌またはグラム陽性菌による感染後の菌血症および／または敗血症の処置において使用され、単独で、または従来の抗生物質と組み合わせて投与される。好ましい実施形態では、本発明の式（Ｉ）の化合物は、手術前の消化管の汚染除去(descontamination)のために、局所的または経口で用いられる。
【００３７】
前述のようにこれらの化合物は、広い細菌スペクトルに対し活性を有し、従ってそれらはおそらく膜レベルで作用するために、抗生物質に対する耐性を前にして、特定の受容体または酵素に作用する他の抗生物質よりもいっそう効果的であり得るため、有利である。
【００３８】
本発明のさらなる態様は、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を、適当量の医薬品賦形剤または担体とともに含んでなる医薬組成物に関する。
【００３９】
該医薬組成物は、以下の、標準的な医薬上の慣習に従って、本発明の式（Ｉ）の化合物と固体または液体の薬学上許容される賦形剤または担体とを組み合わせることにより製造されてもよい。
【００４０】
本発明の医薬組成物は、処置が望ましい病状のための標準的な方法、例えば、経口、非経口、吸入、直腸、経皮または局所的投与により投与されてよい。患者、例えば細菌感染と診断され得るヒトおよび他の動物における、細菌感染を処置または細菌感染と対抗するための治療上の使用において、該化合物またはその医薬組成物は、好ましくは、処置を受ける患者における有効成分の量または血液レベルが抗菌効果を示す濃度が得られ、かつ維持するための用量で投与される。一般に、有効成分のこのような抗菌効果を示す用量は、体重／日において約０．１〜約１００ｍｇ／Ｋｇ、より好ましくは、約３．０〜約５０ｍｇ／Ｋｇの範囲である。用量は、患者に必要な量、処置される細菌感染の重篤度、および使用される特定の化合物により異なる場合があると理解すべきである。
【００４１】
明細書および請求項を通して、「含んでなる」という単語およびその単語の変形形態は、他の技術的特徴、添加剤、成分、またはステップを除外することを意図するものではない。本発明のさらなる目的、利点および特徴は、明細書を精読すれば当業者には明らかになるであろうし、また、本発明を実施することで習得することもできる。以下に示す実施例および図は例示として提供され、それらは本発明を制限することを意図するものではない。加えて、本発明は本明細書で示された特定の、かつ好ましい、可能なすべての組合せを対象とする。
【実施例】
【００４２】
略号：Ｂｏｃ、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル；Ｄａｂ：２，４−ジアミノ酪酸；ＤＩＥＡ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン；Ｄｄｅ、Ｎ−［１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘクス−１−イリデン）エチル］；ＤＩＰＣＤＩ、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド；ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；ＥＳ、エレクトロスプレー；Ｆｍｏｃ、９−フルオレニルメトキシカルボニル；ＨＡＴＵ、２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート；ＨＢＴＵ、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート；ＨＯＢｔ、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール；ＨＰＬＣ、高速液体クロマトグラフィー；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、マトリックス支援レーザー脱離イオン化タイム・オブ・フライト；ＭＳ、質量分析；ＭＩＣ、最小阻害濃度；ＭＷ、分子量；Ｐｂｆ、２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル；ＴＦＡ、トリフルオロ酢酸；Ｔｒｔ、トリチル
【００４３】
一般法
実施例の化合物を製造するために、固相Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ合成法の一般的なプロトコールを用いた。
【００４４】
各合成サイクルのＦｍｏｃ／ｔＢｕ合成プロトコールは、以下に示すステップからなる：（ｉ）ＤＭＦで樹脂を洗浄（５×３０秒）；（ｉｉ）２０％ピペリジン／ＤＭＦで処理（１×１分＋２×１０分、Ｆｍｏｃ除去）；（ｉｉｉ）ＤＭＦで洗浄（５×３０秒）；（ｉｖ）ＤＭＦ最小容量中、Ｆｍｏｃ−保護アミノ酸（３倍過剰量）、活性化試薬ＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ（それぞれ３倍および６倍過剰量）でアシル化；（ｖ）ＤＭＦ（５×３０秒）およびＣＨ２Ｃｌ２（５×３０秒）で洗浄；（ｖｉ）Ｋａｉｓｅｒテスト（ペプチド−樹脂サンプルを用いる）；（ｖｉｉ）ＤＭＦで洗浄（５×３０秒）。
【００４５】
ペプチドの一般的な切断および完全な脱保護は、反応槽中でＴＦＡ／チオアニソール／１，２−エタンジチオール／トリイソプロピルシラン／水（７０：１０：１０：１：３．５；３時間）を用いて処理することにより行った。ＴＦＡ溶液を濾過により除去した。樹脂は追加の０．５ｍＬのＴＦＡ混合物で２回洗い流し、その洗液を合わせた。得られた切断溶液を冷エーテル（ＴＦＡ混合物：エーテル１：２０の割合）に加え、ペプチドを沈殿させた。さらに、粗ペプチドをエーテルを用いて洗浄し（３回）、エーテルをデカンテーションし、固形物を風乾させた。
【００４６】
次に粗ペプチドを１ｍＭ濃度または分子内ジスルフィド結合形成にはわずかに低い濃度で水中１０％ＤＭＳＯ溶液に溶解させた。この溶液を開放系で１２〜３６時間撹拌した。空気酸化により環化反応が起こり、ＨＰＬＣおよびＭＳによりモニターリングした。
【００４７】
精製は、分取ＨＰＬＣにより行った。実施例において、自己充填型(self-packed)Ｖａｒｉａｎ Ｌｏａｄ＆ＬｏｃｋＣ１８カラム（２５０×２．５ｍｍ，１０μｍ）を備えたＶａｒｉａｎ Ｐｒｏ−ｓｔａｒ ２００ ｐｒｅｐ−ｓｙｓｔｅｍで、Ｈ２Ｏ−アセトニトリル−０．１％ＴＦＡ勾配混合物を用いて溶出させ、ＵＶ検出は２２０ｎｍで行った。
【００４８】
ペプチドは、ＰｅｒＳｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｖｏｙａｇｅｒ−ＤＥを用いてＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析により特性決定した。
【００４９】
精製ペプチドの均質性は、ＭｅｒｃｋまたはＫｒｏｍａｓｉｌ Ｃ１８逆相カラム（４×２５０ｍｍ、粒子径５μｍおよび細孔径１２０Å）を用いる分析用ＨＰＬＣにより評価した。溶出は、Ｈ２Ｏ−０．１％ＴＦＡおよびＭｅＣＮ−０．１％ＴＦＡの混合物を用いて流速１ｍｌ／分で行い、ＵＶ検出は２２０ｎｍで行った。
【００５０】
例１：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ］（Ｉｂ３）、（Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、およびＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐである式（Ｉｂ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ。
【００５１】
手動ペプチド合成は、ポリエチレンディスクを装着したポリプロピレンシリンジ中で標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。Ｆｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂（６００ｍｇ、０．２８２ミリモル、ｆ＝０．４７ミリモル／ｇ樹脂）を用いた。配列のアミノ酸は、上記のように、Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ固相合成プロトコールに従って加えた。全配列をアセンブルした時点で、最小量のＤＭＦ中でノナン酸（１３４μｌ、０．８４６ミリモル、３倍過剰量）をＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ（それぞれ３および６倍過剰量）とカップリングさせた。反応完了後、樹脂をＤＭＦ（５×３０秒）およびＣＨ２Ｃｌ２（５×３０秒）で洗浄した。
【００５２】
切断およびジスルフィド結合形成後の粗ペプチド重量は３００ｍｇ（収率９０％）であった。ＨＰＬＣによる精製では３０ｍｇの純粋なペプチドが得られた（収率１０％）。
【００５３】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＥＳＩ：ｍ／ｚ５２８．９５（［Ｍ＋５Ｈ＋］５＋）、６６０．９０（［Ｍ＋４Ｈ＋］４＋）、４４０．９５（［Ｍ＋６Ｈ＋］６＋）、８８１．００（［Ｍ＋３Ｈ＋］３＋）。ＭＷ：実測値２６３９．７５（理論値２６３９．３９）。
【００５４】
例２：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ（Ｉｂ６）、（Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、およびＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕである式（Ｉｂ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ。
【００５５】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００５６】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＥＳＩ：ｍ／ｚ５５０．１５（［Ｍ＋４Ｈ＋］４＋）、４４０．１５（［Ｍ＋５Ｈ＋］５＋）、７３３．３５．００（［Ｍ＋３Ｈ＋］３＋）。ＭＷ：実測値２１９６．６（理論値２１９７．０４）。
【００５７】
例３：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１３）、（Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂ側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅ側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）かつＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１かつＲ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＣｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ。
【００５８】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００５９】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１３３６．６８（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）、１３５９．４９（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１７％）。
【００６０】
例４：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１６）、（Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、かつＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１、Ｒ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ。
【００６１】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００６２】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１３２４．２４（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）、１３４７．４５（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１６％）。
【００６３】
例５：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２９）、Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−Ｈ（Ｇｌｙの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、かつＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１かつＲ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ。
【００６４】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００６５】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１２８０．５９（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）、１２８４．４５（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１８％）。
【００６６】
例６：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］（Ｉａ１）、Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、かつＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）である式（Ｉａ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｄｄｅ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ。
【００６７】
手動ペプチド合成は、ポリエチレンディスクを装着したポリプロピレンシリンジ中で標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。クロロトリチルクロリド樹脂（８００ｍｇ，０．４８ミリモル、ｆ＝０．６ミリモル／ｇ樹脂）を用いた。配列のアミノ酸は、上記のように、Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ固相合成プロトコールに従って加えた。架橋Ｄａｂ４は、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｄｄｅ）−ＯＨとして導入した。全配列をアセンブルした時点で、最小量のＤＭＦ中でノナン酸（２２８μｌ、１．４４ミリモル、３倍過剰量）をＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ（それぞれ３および６倍過剰量）とカップリングさせた。反応完了後、樹脂をＤＭＦ（５×３０秒）およびＣＨ２Ｃｌ２（５×３０秒）で洗浄した。
【００６８】
保護ペプチド樹脂は、ヒドラジン（ＤＭＦ中１％）で処理してＤｄｅ保護基を除去した。次にペプチドを穏やかなＴＦＡ処理（ＣＨ２Ｃｌ２中１％）により樹脂から切り離し、このようにして残りの側鎖保護基を保持した（ｔＢｕ−タイプおよびＰｂｆ基）。Ｄａｂ４およびＣ末端Ｔｈｒ１０の間の環化を、ＤＭＦ：ＣＨＣｌ３＝１：１溶液（ペプチド濃度０．３Ｍ）中でＨＡＴＵ：ＨＯＢｔ：ＤＩＥＡ（１．１：１．１：２．２当量）を用いて室温にて４８時間行った。保護された環状粗ペプチドは、残りの側鎖保護基を除去するための最終ＴＦＡ切断前に、シリカカラムで精製した。
【００６９】
粗ペプチド重量は１３０ｍｇ（収率２１％）であった。ＨＰＬＣによる精製では１１ｍｇが得られた（収率８．５％）。
【００７０】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９１．８％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１３１６．８９（［Ｍ＋Ｈ］＋、１００％）、１２９７．９８（［Ｍ＋Ｈ−Ｈ２Ｏ］＋，６８％）、１３３９．６５（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１９％）。
【００７１】
例７：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１２）；Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（Ｐｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１かつＲ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ。
【００７２】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００７３】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１３３６．３０（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）、１３５８．４０（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１５％）。
【００７４】
例８：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３０）、Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝Ｈ（Ｇｌｙの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１かつＲ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ。
【００７５】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００７６】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１２４６’０３（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）。
【００７７】
例９：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２１）、Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（ＤＬｅｕの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１かつＲ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＬｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ。
【００７８】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００７９】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１２９１．７０（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）、１３１２．７６（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１６％）。
【００８０】
例１０：抗菌性試験
リポペプチドの抗菌活性は、滅菌９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｓｔａｒ ３５９８マイクロタイタープレート）中で測定した。最終容量２００μＬのサンプルは以下のように調製した：ｐＨ７．４に調整された培養培地中（ＭＨ、Ｍｕｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ培養液、Ｄｉｆｃｏ、ＵＳＡ）に細菌を濃度１０５コロニー形成単位／ｍＬで含む懸濁液のアリコート（１００μＬ）を、水中でペプチド１ｍｇ／ｍＬの保存溶液を、ｐＨ７．４に調整されたＭＨ培養液中で、連続２倍希釈して調製されたペプチドを含有する１００μＬの溶液に加えた（ＪｏｒｇｅｎｓｅｎおよびＴｕｒｎｉｄｅ、２００３）。
【００８１】
細菌増殖の阻害は、２４〜４８時間、３７℃にてインキュベーション後に、吸光マイクロプレートリーダーＥＬｘ８００（Ｂｉｏ−ｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて４９２ｎｍにて吸光度を測定することにより測定した。抗菌活性は２４〜４８時間のインキュベーション後に増殖が観察されない濃度であるＭＩＣとして表した。
【００８２】
微生物はトリプチケース(Tryptycase)ソイ培養液（Ｐｒｏｎａｄｉｓａ、Ｂａｒｃｅｌｏｎａ）で培養し、細菌増殖が観察されるまで３７℃でインキュベートした。次に、一白金耳量をトリプチケースソイ寒天に画線塗布し（Ｐｒｏｎａｄｉｓａ、Ｂａｒｃｅｌｏｎａ）、コロニー形成がおこるまで３７℃でインキュベートした。微生物は、ｃｒｙｏｂｉｌｌｅｓ中で（ＥＡＳ ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅ、Ｆｒａｎｃｅ）−２０℃で保存した。
【００８３】
抗菌性試験に使用した細菌株は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）から入手した：
大腸菌 ＡＴＣＣ ８７３９
緑膿菌 ＡＴＣＣ ９０２７
ネズミチフス菌 ＡＴＣＣ １４０２８
アシネトバクター種 ＡＴＣＣ ５７９８
黄色ブドウ球菌 ＡＴＣＣ ６５３８
マイコバクテリウム・フレイ ＡＴＣＣ ４１４２３
マイクロコッカス・ルテウス ＡＴＣＣ ９３４１
【００８４】
結果を表１および表２に示す。
【００８５】
【表１】
【００８６】
【表２】
【００８７】
対照（ポリミキシンＢ）：（Ｓ）−６−メチルオクタノイル−Ｄａｂ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄａｂ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］。
【００８８】
本発明の化合物の分子量は、ポリミキシンＢの分子量よりも大きい。この事実は、μｇ／ｍｌの代わりにマイクロモル単位で表される活性もまた高いことを意味する。
【００８９】
従って、結果をさらによく比較するために、上記の活性の結果をマイクロモル単位で表した表を以下に示す。
【００９０】
【表３】
【００９１】
【表４】
【００９２】
さらに、治療活性を有するモデルを用いて最良の結果が得られていることは言及する価値がある。従って、アシネトバクター種ＡＴＣＣ５７９８は、院内感染において最も問題のある細菌の一つであるアシネトバクター・バウマニーのモデルである。黄色ブドウ球菌は抗生物質に対する耐性に関して最も重要な細菌の一つであり、マイコバクテリウム・フレイは結核の病原体である結核菌の非病原性モデルである。
【００９３】
これらの結果は、新規化合物（Ｉ）がグラム陽性菌およびグラム陰性菌の両方において（後者の場合、天然ポリミキシンのＭＩＣよりもわずかに高いが、天然ポリミキシンはグラム陽性菌に対して活性を示さない）マイクロモルレベルで抗菌活性を示すことを表している。従って、市場で入手可能な抗生物質（天然ポリミキシンおよびダプトマイシン(daptomicin)は、それぞれグラム陰性またはグラム陽性どちらか一方のみに対し活性を有するため、新規化合物はより広い活性スペクトルを有している。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グラム陽性および一部のグラム陰性菌に対して活性を有する新規化合物、その製造プロセス、それらを含む医薬組成物、および抗菌剤としてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗生物質を用いる薬物療法に対して耐性を持つようになった病原性微生物が、深刻化する公衆衛生問題となっている。その問題の一部は、ある種の細菌および他の感染性微生物が、抗生物質に対する耐性を発現できる著しい能力を持つことである。その問題のもう一つの原因は、ヒトおよび動物用医薬品、ならびに農業における抗生物質の乱用である。
【０００３】
多剤耐性細菌、例えばメチシリン耐性黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、バンコマイシン耐性腸球菌(Enterococci)、ならびに特定のグラム陰性菌、例えば、緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa)、アシネトバクター・バウマニー(Acinetobacter baumanii)および肺炎桿菌(Klebsiella pneumoniae)などにより引き起こされる感染の有病率の増大が世界的規模の重大な懸念となっている。このような感染は管理が極めて困難であり、疾患および死亡の一般的な原因である。従来の抗生物質は一般に、１以上の特定の標的タンパク質または標的受容体と相互作用し、遺伝的耐性は、多くの因子、例えばタンパク質または標的受容体の数などによって決まる割合で出現する。
【０００４】
従来の抗生物質に対して耐性を有する細菌株の絶え間ない出現が、細菌の細胞膜を標的とする新規薬物、例えば抗菌性ペプチド（ＡＭＰ：antimicrobial pepitide）などの開発を目的とする集中的な取り組みにつながった。ＡＭＰは主として細胞膜の脂質成分に作用するため、細菌が遺伝的耐性を発現することができない新種の治療薬を提供する。これらの化合物のうち、臨床で承認されている抗生物質ポリミキシンＢ（ＰｘＢ：polymyxin B）は、新しい治療学的関連性を獲得し(adquiring)、多剤耐性細菌に対する抗生物質種に属する代表であると考えられるようになってきている。
【０００５】
ポリミキシン類、および特にポリミキシン(Polymixin)Ｂは、１９４７年に発見され、グラム陰性菌に対し顕著な活性を有する抗生物質種である。ポリミキシンＢは、バチルス・ポリミキサ(Bacillus polymyxa)から単離されたリポペプチド抗生物質である。その基本構造は、ポリカチオン性ペプチド環および脂肪酸テールを有するトリペプチド側鎖からなる。ポリミキシンＢは近年、医療現場において再興してきており、乾燥抗生物質開発パイプライン、および多剤耐性（ＭＤＲ：multidrug-resistant）グラム陰性菌により引き起こされる院内感染の有病率の世界的増加により、その使用は増加を続ける可能性が高い。ポリミキシンＢおよびポリミキシンファミリーのその他のメンバーは、多剤耐性細菌により引き起こされる感染治療の最後の手段の薬物であり、また、時には唯一の利用可能な有効な抗生物質である。加えて、ポリミキシンに対する耐性はまれであり、一般に適応的であり、従って可逆的である。ポリミキシンＢはまた、リピドＡ部分への高親和性結合を介して、細菌リポ多糖類（ＬＰＳ：lipopolysaccharide）の生物学的活性を阻害する能力を有し、ＬＰＳ誘発敗血性ショックの治療に最適な薬剤である。残念ながら、ポリミキシンＢはグラム陽性および嫌気性菌に対する活性は持たない。さらに、ポリミキシンは多少の腎毒性(nefrotoxicity)および神経毒性を示すために、その使用は限定されている。
【０００６】
従って、グラム陰性菌のみならずグラム陽性細菌に対する活性も有する新規の有効な抗菌剤を発見する必要が依然として存在する。
【発明の概要】
【０００７】
発明者らは、細菌膜の脂質成分レベルで機能を果たし、グラム陽性およびグラム陰性菌の両方に対して活性を有する、抗生物質活性を有するいくつかのペプチド化合物を発見した。これらの化合物は、天然ポリミキシンの構造に基づいている。しかしながら、ポリミキシンとは異なり、これらの化合物は、マイクロモルの範囲でグラム陰性菌に対して活性を有するのみならず、グラム陽性菌に対しても活性を有する。このことは、どちらのタイプの細菌により引き起こされる感染に応答して働くことができるため、有利である。
【０００８】
よって、本発明の一態様は、式（Ｉ）：
【化１】
［式中、Ｒ０は、（Ｃ８−Ｃ１１）−分岐アルキル、ＣＨ３−（ＣＨ２）ｍ−、ＣＨ３−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２−、および
【化２】
からなる群から選択される基であり；
ｍは６〜１０の整数であり；ｘは１〜３の整数であり；
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８は次式：ＧＦ−（ＣＨ２）ｎ−（ここで、ｎは１〜４の整数であり；ＧＦは−ＮＨ２および−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２からなる群から選択される基である）を有する、独立に選択される基であり；
Ｒ２は、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＮＨ２および−ＣＨ２ＯＨからなる群から選択される基であり；
Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、直鎖または分岐（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、−（ＣＨ２）−Ｒ１０、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ３および−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）からなる群から独立に選択される基であり；
Ｒ９は、ＣＯＮＨ２、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）およびＣＯＮＨＲ１１からなる群から選択され；
Ｒ１０は、フェニル、３−インドリル、４−イミダゾリル、４−ヒドロキシフェニル、αまたはβ−ナフチル、および２−、３−または４−ピリジルからなる群から選択される基であり；
Ｒ１１は、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ、Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ、Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ、およびＧｌｕ−（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒからなる群から選択されるペプチド配列であり；
ｕは、ＣＨ２またはＳであり；
ｖは、ＮＨまたはＳであり；
ｗは、ＣＨ２またはＣＯであり、
ただし、Ｒ９がＣＯＮＨ２である場合、以下の条件の１つが当てはまる：（ａ）Ｒ５またはＲ６は−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）である、（ｂ）Ｒ５およびＲ６はＨである；（ｃ）Ｒ９と結合したＣ原子の配置はＳ型である（Ｄ−システインの側鎖）または（ｄ）Ｒ５と結合したＣ原子の配置はＲ型である；また、Ｒ９が−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（トレオニンの側鎖）である場合、Ｒ８はＧＦ（ＣＨ２）ｎ（ここで、ｎは３であり、ＧＦは−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２であり、かつ、Ｒ７はＧＦ（ＣＨ２）ｎ（ここで、ｎは２であり、ＧＦはＮＨ２である）である]
の化合物を提供することである。
【０００９】
好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、Ｒ２が−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）である前記のものである。
【００１０】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ｕがＣＨ２であり、ｖがＮＨであり、ｗがＣＯであり、Ｒ９が−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）であり、かつ、Ｒ９と結合したＣ原子の配置がＳ型であるものである。これらの化合物は式（Ｉａ）を有する。
【化３】
【００１１】
より好ましい実施形態では、式（Ｉａ）の化合物は、ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］（Ｉａ１）である。
【００１２】
シクロ（４−１０）とは、１０位のトレオニンの末端カルボキシ基が４位のＤａｂの側鎖とアミド結合によって結合して大環を形成していることを意味する。
【００１３】
Ｄ−アミノ酸の配置はＤで示されている。配置に関する記載がない場合には、そのアミノ酸の配置はＬ型であると理解される。
【００１４】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ｕがＳであり、ｖがＳであり、かつ、ｗがＣＨ２であるものであり、式（Ｉｂ）を有する。
【化４】
【００１５】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、Ｒ９がＣＯＮＨＲ１１であり、かつ、Ｒ１１がＡｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ、Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ、Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ、Ｇｌｕ（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ、およびＧｌｕ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ）−γ−スペルミドからなる群から選択されるペプチド配列であるものである。
【００１６】
別のいっそうより好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は以下の一覧から選択される：
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｉｂ１）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｉｂ２）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ］（Ｉｂ３）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ（Ｉｂ４）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ（Ｉｂ５）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ（Ｉｂ６）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ（Ｉｂ７）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄａｂ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｉｂ８）；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ(ciclo)（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄａｂ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｕ−（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ（Ｉｂ９）。
【００１７】
「シクロ（Ｓ−Ｓ）」とは、大環が両システイン間のジスルフィド結合により形成されていることを意味する。
【００１８】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、以下の一覧から選択される：
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１０）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１１）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１２）；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１３）。
【００１９】
特に良好な結果が、１０位にＤ−システインを含むペプチドで得られた。別のより好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１１）；およびノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１３）から選択される。別のより好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物はノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１３）である。
【００２０】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、Ｒ６が−（ＣＨ）（ＣＨ３）（ＯＨ）であるものである。
【００２１】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、以下の一覧から選択される：
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１４）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１５）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１６）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１７）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１８）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１９）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２０）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２１）；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＴｒｐ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２２）；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２３）；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２４）；および
ドデカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２５）。
【００２２】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、Ｒ５またはＲ６が水素であるものである。
【００２３】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、以下の一覧から選択される：
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２６）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２７）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２８）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２９）；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３０）。
【００２４】
別の好ましい実施形態では、式（Ｉｂ）の化合物は、以下の一覧から選択される：
オクタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３１）；
（Ｓ）−６−メチルヘプタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３２）；
（Ｓ）−６−メチルオクタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］、（Ｉｂ３３）；
オクタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３４）；
（Ｓ）−６−メチルヘプタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３５）；および
（Ｓ）−６−メチルオクタノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３６）。
【００２５】
より好ましい式（Ｉ）の化合物は以下の一覧のものである：
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］（Ｉａ１）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ］（Ｉｂ３）；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ（Ｉｂ６）；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１３）。
【００２６】
本発明の化合物は、固相Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ合成法により製造することができる。各アミノ酸の合成プロトコールは、以下に示すステップからなる：（ｉ）Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）で数回、樹脂を洗浄；ｉｉ）２０％ピペリジン／ＤＭＦで処理；ｉｉｉ）ＤＭＦで数回洗浄；ｉｖ）ＤＭＦ中、Ｆｍｏｃ保護アミノ酸および２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート／ジイソプロピルエチルアミン（ＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ）でアシル化；ｖ）ＤＭＦで数回、ジクロロメタン（ＣＨ２Ｃｌ２）で数回洗浄；ｖｉ）ＤＭＦで数回洗浄。
【００２７】
前述のプロセスにより得られたペプチドは、分取ＨＰＬＣにより精製することができる。本法により９０％を上回る最終純度を得ることができるが、９５％より高いことが好ましい。
【００２８】
本発明の化合物は、記載された方法に従って化学的合成により容易に製造されるのに対して、市販のポリミキシンは発酵プロセスにより得られる。
【００２９】
本発明のもう一つの態様は、グラム陽性菌に対する抗菌剤としての使用のための式（Ｉ）の化合物である。医療目的に関連するグラム陽性菌では、例えば、バチルス(Bacillus)、リステリア(Listeria)、ブドウ球菌(Staphylococcus)、マイクロコッカス(Micrococcus)、連鎖球菌(Streptococcus)、腸球菌(Enterococcus)、クロストリジウム(Clostridium)、マイコプラズマ(Mycoplasma)および放線菌(Actinobacteria)などのいくつかの属が周知である。
【００３０】
好ましい実施形態では、グラム陽性菌は、マイコバクテリウム・フレイ(Micobacterium phlei)、黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、およびマイクロコッカス・ルテウス(Micrococcus luteus)から選択される。特定の実施形態では、グラム陽性菌はマイコバクテリウム・フレイＡＴＣＣ４１４２３、黄色ブドウ球菌ＡＴＣＣ６５３８、およびマイクロコッカス・ルテウスＡＴＣＣ９３４１から選択される。
【００３１】
本発明のこの態様はまた、ヒトを含む哺乳類においてグラム陽性菌により引き起こされる細菌感染の処置を目的とする薬剤の製造のための、例えば上記に定義される化合物の使用として処方されうる。
【００３２】
本発明はまた、グラム陽性菌により引き起こされる細菌感染、特に、前述の感染のうちの一つに罹患している、または感受性のある、ヒトを含む哺乳類の処置および／または予防の方法に関し、前記方法は前記患者に本発明の化合物の治療上有効な量を薬学上許容される賦形剤または担体とともに投与することを含む。
【００３３】
グラム陰性菌に対する抗菌剤としての使用のための、上記に定義される式（Ｉ）の化合物もまた、本発明の一部である。医学的に関連のあるグラム陰性菌としては、大腸菌(Escherichia coli)、サルモネラ(Salmonella)、腸内細菌科(Enterobacteriaceae)、シュードモナス(Pseudomonas)、モラクセラ(Moraxella)、ヘリコバクター(Helocobacter)、レジオネラ(Legionella)、ヘモフィルス・インフルエンザ(Hemophilus influenza)、肺炎桿菌(Klebsiella pneumoniae)、プロテウス・ミラビリス(Proteus mirabilis)、エンテロバクター・クロアカエ(Enterobacter cloacea)、セラチア・マルセッセンス(Serratia marcescens)、およびアシネトバクター・バウマニー(Acinetobacter baumannii)などが挙げられる。
【００３４】
好ましい実施形態では、グラム陰性菌は、ネズミチフス菌(Salmonella typhimurium)、緑膿菌、大腸菌、およびアシネトバクター種(Acinetobacter sp.)から選択される。特定の実施形態では、グラム陰性菌はネズミチフス菌１４０２８、緑膿菌９０２７、大腸菌８７３９、およびアシネトバクター種ＡＴＣＣ５７９８から選択される。本発明のこの態様はまた、ヒトを含む哺乳類においてグラム陰性菌により引き起こされる細菌感染の処置を目的とする薬剤の製造のための、上記に定義される式（Ｉ）の化合物の使用として処方され得る。
【００３５】
本発明はまた、グラム陰性菌により引き起こされる細菌感染、特に、前述の感染のうちの一つに罹患している、または感受性のある、ヒトを含む哺乳類の処置および／または予防の方法に関し、前記方法は、前記患者に上記に定義される式（Ｉ）の化合物の治療上有効な量を薬学上許容される賦形剤または担体とともに投与することを含んでなる。
【００３６】
本発明の化合物は、他の公知の抗菌剤と同じ方法で使用することができる。それらは単独で、または他の好適な生物活性化合物と組み合わせて用いられてよい。特定の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、グラム陰性菌またはグラム陽性菌による感染後の菌血症および／または敗血症の処置において使用され、単独で、または従来の抗生物質と組み合わせて投与される。好ましい実施形態では、本発明の式（Ｉ）の化合物は、手術前の消化管の汚染除去(descontamination)のために、局所的または経口で用いられる。
【００３７】
前述のようにこれらの化合物は、広い細菌スペクトルに対し活性を有し、従ってそれらはおそらく膜レベルで作用するために、抗生物質に対する耐性を前にして、特定の受容体または酵素に作用する他の抗生物質よりもいっそう効果的であり得るため、有利である。
【００３８】
本発明のさらなる態様は、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物を、適当量の医薬品賦形剤または担体とともに含んでなる医薬組成物に関する。
【００３９】
該医薬組成物は、以下の、標準的な医薬上の慣習に従って、本発明の式（Ｉ）の化合物と固体または液体の薬学上許容される賦形剤または担体とを組み合わせることにより製造されてもよい。
【００４０】
本発明の医薬組成物は、処置が望ましい病状のための標準的な方法、例えば、経口、非経口、吸入、直腸、経皮または局所的投与により投与されてよい。患者、例えば細菌感染と診断され得るヒトおよび他の動物における、細菌感染を処置または細菌感染と対抗するための治療上の使用において、該化合物またはその医薬組成物は、好ましくは、処置を受ける患者における有効成分の量または血液レベルが抗菌効果を示す濃度が得られ、かつ維持するための用量で投与される。一般に、有効成分のこのような抗菌効果を示す用量は、体重／日において約０．１〜約１００ｍｇ／Ｋｇ、より好ましくは、約３．０〜約５０ｍｇ／Ｋｇの範囲である。用量は、患者に必要な量、処置される細菌感染の重篤度、および使用される特定の化合物により異なる場合があると理解すべきである。
【００４１】
明細書および請求項を通して、「含んでなる」という単語およびその単語の変形形態は、他の技術的特徴、添加剤、成分、またはステップを除外することを意図するものではない。本発明のさらなる目的、利点および特徴は、明細書を精読すれば当業者には明らかになるであろうし、また、本発明を実施することで習得することもできる。以下に示す実施例および図は例示として提供され、それらは本発明を制限することを意図するものではない。加えて、本発明は本明細書で示された特定の、かつ好ましい、可能なすべての組合せを対象とする。
【実施例】
【００４２】
略号：Ｂｏｃ、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル；Ｄａｂ：２，４−ジアミノ酪酸；ＤＩＥＡ、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン；Ｄｄｅ、Ｎ−［１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘクス−１−イリデン）エチル］；ＤＩＰＣＤＩ、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド；ＤＭＦ、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；ＥＳ、エレクトロスプレー；Ｆｍｏｃ、９−フルオレニルメトキシカルボニル；ＨＡＴＵ、２−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート；ＨＢＴＵ、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート；ＨＯＢｔ、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール；ＨＰＬＣ、高速液体クロマトグラフィー；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ、マトリックス支援レーザー脱離イオン化タイム・オブ・フライト；ＭＳ、質量分析；ＭＩＣ、最小阻害濃度；ＭＷ、分子量；Ｐｂｆ、２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル；ＴＦＡ、トリフルオロ酢酸；Ｔｒｔ、トリチル
【００４３】
一般法
実施例の化合物を製造するために、固相Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ合成法の一般的なプロトコールを用いた。
【００４４】
各合成サイクルのＦｍｏｃ／ｔＢｕ合成プロトコールは、以下に示すステップからなる：（ｉ）ＤＭＦで樹脂を洗浄（５×３０秒）；（ｉｉ）２０％ピペリジン／ＤＭＦで処理（１×１分＋２×１０分、Ｆｍｏｃ除去）；（ｉｉｉ）ＤＭＦで洗浄（５×３０秒）；（ｉｖ）ＤＭＦ最小容量中、Ｆｍｏｃ−保護アミノ酸（３倍過剰量）、活性化試薬ＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ（それぞれ３倍および６倍過剰量）でアシル化；（ｖ）ＤＭＦ（５×３０秒）およびＣＨ２Ｃｌ２（５×３０秒）で洗浄；（ｖｉ）Ｋａｉｓｅｒテスト（ペプチド−樹脂サンプルを用いる）；（ｖｉｉ）ＤＭＦで洗浄（５×３０秒）。
【００４５】
ペプチドの一般的な切断および完全な脱保護は、反応槽中でＴＦＡ／チオアニソール／１，２−エタンジチオール／トリイソプロピルシラン／水（７０：１０：１０：１：３．５；３時間）を用いて処理することにより行った。ＴＦＡ溶液を濾過により除去した。樹脂は追加の０．５ｍＬのＴＦＡ混合物で２回洗い流し、その洗液を合わせた。得られた切断溶液を冷エーテル（ＴＦＡ混合物：エーテル１：２０の割合）に加え、ペプチドを沈殿させた。さらに、粗ペプチドをエーテルを用いて洗浄し（３回）、エーテルをデカンテーションし、固形物を風乾させた。
【００４６】
次に粗ペプチドを１ｍＭ濃度または分子内ジスルフィド結合形成にはわずかに低い濃度で水中１０％ＤＭＳＯ溶液に溶解させた。この溶液を開放系で１２〜３６時間撹拌した。空気酸化により環化反応が起こり、ＨＰＬＣおよびＭＳによりモニターリングした。
【００４７】
精製は、分取ＨＰＬＣにより行った。実施例において、自己充填型(self-packed)Ｖａｒｉａｎ Ｌｏａｄ＆ＬｏｃｋＣ１８カラム（２５０×２．５ｍｍ，１０μｍ）を備えたＶａｒｉａｎ Ｐｒｏ−ｓｔａｒ ２００ ｐｒｅｐ−ｓｙｓｔｅｍで、Ｈ２Ｏ−アセトニトリル−０．１％ＴＦＡ勾配混合物を用いて溶出させ、ＵＶ検出は２２０ｎｍで行った。
【００４８】
ペプチドは、ＰｅｒＳｅｐｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｖｏｙａｇｅｒ−ＤＥを用いてＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析により特性決定した。
【００４９】
精製ペプチドの均質性は、ＭｅｒｃｋまたはＫｒｏｍａｓｉｌ Ｃ１８逆相カラム（４×２５０ｍｍ、粒子径５μｍおよび細孔径１２０Å）を用いる分析用ＨＰＬＣにより評価した。溶出は、Ｈ２Ｏ−０．１％ＴＦＡおよびＭｅＣＮ−０．１％ＴＦＡの混合物を用いて流速１ｍｌ／分で行い、ＵＶ検出は２２０ｎｍで行った。
【００５０】
例１：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ］（Ｉｂ３）、（Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、およびＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐである式（Ｉｂ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ。
【００５１】
手動ペプチド合成は、ポリエチレンディスクを装着したポリプロピレンシリンジ中で標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。Ｆｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂（６００ｍｇ、０．２８２ミリモル、ｆ＝０．４７ミリモル／ｇ樹脂）を用いた。配列のアミノ酸は、上記のように、Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ固相合成プロトコールに従って加えた。全配列をアセンブルした時点で、最小量のＤＭＦ中でノナン酸（１３４μｌ、０．８４６ミリモル、３倍過剰量）をＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ（それぞれ３および６倍過剰量）とカップリングさせた。反応完了後、樹脂をＤＭＦ（５×３０秒）およびＣＨ２Ｃｌ２（５×３０秒）で洗浄した。
【００５２】
切断およびジスルフィド結合形成後の粗ペプチド重量は３００ｍｇ（収率９０％）であった。ＨＰＬＣによる精製では３０ｍｇの純粋なペプチドが得られた（収率１０％）。
【００５３】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＥＳＩ：ｍ／ｚ５２８．９５（［Ｍ＋５Ｈ＋］５＋）、６６０．９０（［Ｍ＋４Ｈ＋］４＋）、４４０．９５（［Ｍ＋６Ｈ＋］６＋）、８８１．００（［Ｍ＋３Ｈ＋］３＋）。ＭＷ：実測値２６３９．７５（理論値２６３９．３９）。
【００５４】
例２：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ（Ｉｂ６）、（Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、およびＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕである式（Ｉｂ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ。
【００５５】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００５６】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＥＳＩ：ｍ／ｚ５５０．１５（［Ｍ＋４Ｈ＋］４＋）、４４０．１５（［Ｍ＋５Ｈ＋］５＋）、７３３．３５．００（［Ｍ＋３Ｈ＋］３＋）。ＭＷ：実測値２１９６．６（理論値２１９７．０４）。
【００５７】
例３：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］（Ｉｂ１３）、（Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂ側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅ側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）かつＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１かつＲ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＣｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ。
【００５８】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００５９】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１３３６．６８（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）、１３５９．４９（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１７％）。
【００６０】
例４：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１６）、（Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、かつＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１、Ｒ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ。
【００６１】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００６２】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１３２４．２４（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）、１３４７．４５（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１６％）。
【００６３】
例５：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２９）、Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−Ｈ（Ｇｌｙの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、かつＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１かつＲ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ。
【００６４】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００６５】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１２８０．５９（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）、１２８４．４５（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１８％）。
【００６６】
例６：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］（Ｉａ１）、Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（ＤＰｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、かつＲ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）である式（Ｉａ）の化合物）の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｄｄｅ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ。
【００６７】
手動ペプチド合成は、ポリエチレンディスクを装着したポリプロピレンシリンジ中で標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。クロロトリチルクロリド樹脂（８００ｍｇ，０．４８ミリモル、ｆ＝０．６ミリモル／ｇ樹脂）を用いた。配列のアミノ酸は、上記のように、Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ固相合成プロトコールに従って加えた。架橋Ｄａｂ４は、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｄｄｅ）−ＯＨとして導入した。全配列をアセンブルした時点で、最小量のＤＭＦ中でノナン酸（２２８μｌ、１．４４ミリモル、３倍過剰量）をＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ（それぞれ３および６倍過剰量）とカップリングさせた。反応完了後、樹脂をＤＭＦ（５×３０秒）およびＣＨ２Ｃｌ２（５×３０秒）で洗浄した。
【００６８】
保護ペプチド樹脂は、ヒドラジン（ＤＭＦ中１％）で処理してＤｄｅ保護基を除去した。次にペプチドを穏やかなＴＦＡ処理（ＣＨ２Ｃｌ２中１％）により樹脂から切り離し、このようにして残りの側鎖保護基を保持した（ｔＢｕ−タイプおよびＰｂｆ基）。Ｄａｂ４およびＣ末端Ｔｈｒ１０の間の環化を、ＤＭＦ：ＣＨＣｌ３＝１：１溶液（ペプチド濃度０．３Ｍ）中でＨＡＴＵ：ＨＯＢｔ：ＤＩＥＡ（１．１：１．１：２．２当量）を用いて室温にて４８時間行った。保護された環状粗ペプチドは、残りの側鎖保護基を除去するための最終ＴＦＡ切断前に、シリカカラムで精製した。
【００６９】
粗ペプチド重量は１３０ｍｇ（収率２１％）であった。ＨＰＬＣによる精製では１１ｍｇが得られた（収率８．５％）。
【００７０】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９１．８％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１３１６．８９（［Ｍ＋Ｈ］＋、１００％）、１２９７．９８（［Ｍ＋Ｈ−Ｈ２Ｏ］＋，６８％）、１３３９．６５（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１９％）。
【００７１】
例７：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ１２）；Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝−ＣＨ２Ｐｈ（Ｐｈｅの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１かつＲ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ。
【００７２】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００７３】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１３３６．３０（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）、１３５８．４０（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１５％）。
【００７４】
例８：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ３０）、Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝Ｈ（Ｇｌｙの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（Ｌｅｕの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１かつＲ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ。
【００７５】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００７６】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１２４６’０３（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）。
【００７７】
例９：ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］（Ｉｂ２１）、Ｒｏ＝ＣＨ３（ＣＨ２）７−、Ｒ１＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ２＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ３＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ４＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ５＝ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２（ＤＬｅｕの側鎖）、Ｒ６＝−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ（Ｔｈｒの側鎖）、Ｒ７＝−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（Ａｒｇの側鎖）、Ｒ８＝−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２（Ｄａｂの側鎖）、Ｒ９＝ＣＯＮＨＲ１１かつＲ１１＝Ｈである式（Ｉｂ）の化合物の製造
保護アミノ酸：Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄａｂ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＬｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ。
【００７８】
手動ペプチド合成は、上記の例１に記載したＦｍｏｃ−Ｒｉｎｋ樹脂上での標準的Ｆｍｏｃ／ｔＢｕ法に従って行った。
【００７９】
精製ペプチドの特徴：均質性（ＨＰＬＣ出力の面積積分による）＞９５％；ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ：ｍ／ｚ１２９１．７０（［Ｍ＋Ｈ］＋，１００％）、１３１２．７６（［Ｍ＋Ｎａ］＋，１６％）。
【００８０】
例１０：抗菌性試験
リポペプチドの抗菌活性は、滅菌９６ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｓｔａｒ ３５９８マイクロタイタープレート）中で測定した。最終容量２００μＬのサンプルは以下のように調製した：ｐＨ７．４に調整された培養培地中（ＭＨ、Ｍｕｌｌｅｒ Ｈｉｎｔｏｎ培養液、Ｄｉｆｃｏ、ＵＳＡ）に細菌を濃度１０５コロニー形成単位／ｍＬで含む懸濁液のアリコート（１００μＬ）を、水中でペプチド１ｍｇ／ｍＬの保存溶液を、ｐＨ７．４に調整されたＭＨ培養液中で、連続２倍希釈して調製されたペプチドを含有する１００μＬの溶液に加えた（ＪｏｒｇｅｎｓｅｎおよびＴｕｒｎｉｄｅ、２００３）。
【００８１】
細菌増殖の阻害は、２４〜４８時間、３７℃にてインキュベーション後に、吸光マイクロプレートリーダーＥＬｘ８００（Ｂｉｏ−ｔｅｋ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて４９２ｎｍにて吸光度を測定することにより測定した。抗菌活性は２４〜４８時間のインキュベーション後に増殖が観察されない濃度であるＭＩＣとして表した。
【００８２】
微生物はトリプチケース(Tryptycase)ソイ培養液（Ｐｒｏｎａｄｉｓａ、Ｂａｒｃｅｌｏｎａ）で培養し、細菌増殖が観察されるまで３７℃でインキュベートした。次に、一白金耳量をトリプチケースソイ寒天に画線塗布し（Ｐｒｏｎａｄｉｓａ、Ｂａｒｃｅｌｏｎａ）、コロニー形成がおこるまで３７℃でインキュベートした。微生物は、ｃｒｙｏｂｉｌｌｅｓ中で（ＥＡＳ ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅ、Ｆｒａｎｃｅ）−２０℃で保存した。
【００８３】
抗菌性試験に使用した細菌株は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）から入手した：
大腸菌 ＡＴＣＣ ８７３９
緑膿菌 ＡＴＣＣ ９０２７
ネズミチフス菌 ＡＴＣＣ １４０２８
アシネトバクター種 ＡＴＣＣ ５７９８
黄色ブドウ球菌 ＡＴＣＣ ６５３８
マイコバクテリウム・フレイ ＡＴＣＣ ４１４２３
マイクロコッカス・ルテウス ＡＴＣＣ ９３４１
【００８４】
結果を表１および表２に示す。
【００８５】
【表１】
【００８６】
【表２】
【００８７】
対照（ポリミキシンＢ）：（Ｓ）−６−メチルオクタノイル−Ｄａｂ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄａｂ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］。
【００８８】
本発明の化合物の分子量は、ポリミキシンＢの分子量よりも大きい。この事実は、μｇ／ｍｌの代わりにマイクロモル単位で表される活性もまた高いことを意味する。
【００８９】
従って、結果をさらによく比較するために、上記の活性の結果をマイクロモル単位で表した表を以下に示す。
【００９０】
【表３】
【００９１】
【表４】
【００９２】
さらに、治療活性を有するモデルを用いて最良の結果が得られていることは言及する価値がある。従って、アシネトバクター種ＡＴＣＣ５７９８は、院内感染において最も問題のある細菌の一つであるアシネトバクター・バウマニーのモデルである。黄色ブドウ球菌は抗生物質に対する耐性に関して最も重要な細菌の一つであり、マイコバクテリウム・フレイは結核の病原体である結核菌の非病原性モデルである。
【００９３】
これらの結果は、新規化合物（Ｉ）がグラム陽性菌およびグラム陰性菌の両方において（後者の場合、天然ポリミキシンのＭＩＣよりもわずかに高いが、天然ポリミキシンはグラム陽性菌に対して活性を示さない）マイクロモルレベルで抗菌活性を示すことを表している。従って、市場で入手可能な抗生物質（天然ポリミキシンおよびダプトマイシン(daptomicin)は、それぞれグラム陰性またはグラム陽性どちらか一方のみに対し活性を有するため、新規化合物はより広い活性スペクトルを有している。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
［式中、
Ｒ０は、（Ｃ８−Ｃ１１）−分岐アルキル、ＣＨ３−（ＣＨ２）ｍ−、ＣＨ３−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２−および
【化２】
からなる群から選択される基であり；
ｍは６〜１０の整数であり；
ｘは１〜３の整数であり；
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８は、下式：
ＧＦ−（ＣＨ２）ｎ−
（ここで、ｎは１〜４の整数であり；かつ、ＧＦは−ＮＨ２および−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２からなる群から選択される基である）
を有する、独立に選択される基であり；
Ｒ２は、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＮＨ２および−ＣＨ２ＯＨからなる群から選択される基であり；
Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ４）−直鎖または分岐アルキル、−（ＣＨ２）−Ｒ１０、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ３および−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）からなる群から独立に選択される基であり；
Ｒ９は、ＣＯＮＨ２、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）およびＣＯＮＨＲ１１からなる群から選択され；
Ｒ１０は、フェニル、３−インドリル、４−イミダゾリル、４−ヒドロキシフェニル、αまたはβ−ナフチル、および２−、３−または４−ピリジルからなる群から選択される基であり；
Ｒ１１は、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ、Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ、Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−ＴｈｒおよびＧｌｕ−（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ；ならびにＧｌｕ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ）−γ−スペルミドからなる群から選択されるペプチド配列であり；
ｕはＣＨ２またはＳであり；
ｖはＮＨまたはＳであり；
ｗはＣＨ２またはＣＯであり、
ただし、Ｒ９がＣＯＮＨ２である場合、
（ａ）Ｒ５またはＲ６は−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）であるか、または
（ｂ）Ｒ５およびＲ６はＨであるか；または
（ｃ）Ｒ９と結合したＣ原子の配置がＳ型であるか、または
（ｄ）Ｒ５と結合したＣ原子の配置がＲ型である；
また、Ｒ９が−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨである場合、Ｒ８はＧＦ（ＣＨ２）ｎ（ここで、ｎは３であり、ＧＦは−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２である）であり、かつ、Ｒ７はＧＦ（ＣＨ２）ｎ（ここで、ｎは２であり、ＧＦはＮＨ２である）である]。
【請求項２】
ｕがＣＨ２であり、ｖがＮＨであり、ＺがＣＯであり、Ｒ９が−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）であり、かつ、Ｒ９と結合したＣ原子の配置がＳ型であり、式（Ｉａ）
【化３】
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ｕがＳであり、ｖがＳであり、ｗがＣＨ２であり、式（Ｉｂ）
【化４】
を有する、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１１が、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ、Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ、Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ、Ｇｌｕ（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ、およびＧｌｕ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ）−γ−スペルミドからなる群から選択されるペプチド配列である、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄａｂ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄａｂ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｕ−（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ
から選択される、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］
から選択される、請求項４に記載の化合物。
【請求項８】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］
から選択される、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＴｒｐ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；および
ドデカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］
から選択される、請求項４に記載の化合物。
【請求項１０】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
ヒトを含む哺乳類においてグラム陽性菌により引き起こされる細菌感染の処置を目的とする薬剤の製造のための、請求項１〜１０のいずれか一項に定義される化合物の使用。
【請求項１２】
グラム陽性菌が、マイコバクテリウム・フレイ、黄色ブドウ球菌およびマイクロコッカス・ルテウスからなる群から選択される、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
ヒトを含む哺乳類においてグラム陰性菌により引き起こされる細菌感染の処置を目的とする薬剤の製造のための、請求項１〜１０のいずれか一項に定義される化合物の使用。
【請求項１４】
グラム陰性菌が、ネズミチフス菌、緑膿菌、大腸菌およびアシネトバクター種からなる群から選択される、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
治療上有効な量の請求項１〜１０のいずれか一項に定義される化合物を薬学上許容される賦形剤または担体とともに含んでなる、医薬組成物。
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物：
【化１】
［式中、
Ｒ０は、（Ｃ８−Ｃ１１）−分岐アルキル、ＣＨ３−（ＣＨ２）ｍ−、ＣＨ３−Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２ＣＨ２−および
【化２】
からなる群から選択される基であり；
ｍは６〜１０の整数であり；
ｘは１〜３の整数であり；
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ７およびＲ８は、下式：
ＧＦ−（ＣＨ２）ｎ−
（ここで、ｎは１〜４の整数であり；かつ、ＧＦは−ＮＨ２および−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２からなる群から選択される基である）
を有する、独立に選択される基であり；
Ｒ２は、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＮＨ２および−ＣＨ２ＯＨからなる群から選択される基であり；
Ｒ５およびＲ６は、Ｈ、−（Ｃ１−Ｃ４）−直鎖または分岐アルキル、−（ＣＨ２）−Ｒ１０、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ３および−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）からなる群から独立に選択される基であり；
Ｒ９は、ＣＯＮＨ２、−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）およびＣＯＮＨＲ１１からなる群から選択され；
Ｒ１０は、フェニル、３−インドリル、４−イミダゾリル、４−ヒドロキシフェニル、αまたはβ−ナフチル、および２−、３−または４−ピリジルからなる群から選択される基であり；
Ｒ１１は、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ、Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ、Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−ＴｈｒおよびＧｌｕ−（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ；ならびにＧｌｕ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ）−γ−スペルミドからなる群から選択されるペプチド配列であり；
ｕはＣＨ２またはＳであり；
ｖはＮＨまたはＳであり；
ｗはＣＨ２またはＣＯであり、
ただし、Ｒ９がＣＯＮＨ２である場合、
（ａ）Ｒ５またはＲ６は−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）であるか、または
（ｂ）Ｒ５およびＲ６はＨであるか；または
（ｃ）Ｒ９と結合したＣ原子の配置がＳ型であるか、または
（ｄ）Ｒ５と結合したＣ原子の配置がＲ型である；
また、Ｒ９が−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨである場合、Ｒ８はＧＦ（ＣＨ２）ｎ（ここで、ｎは３であり、ＧＦは−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２である）であり、かつ、Ｒ７はＧＦ（ＣＨ２）ｎ（ここで、ｎは２であり、ＧＦはＮＨ２である）である]。
【請求項２】
ｕがＣＨ２であり、ｖがＮＨであり、ＺがＣＯであり、Ｒ９が−ＣＨ（ＣＨ３）（ＯＨ）であり、かつ、Ｒ９と結合したＣ原子の配置がＳ型であり、式（Ｉａ）
【化３】
を有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ｕがＳであり、ｖがＳであり、ｗがＣＨ２であり、式（Ｉｂ）
【化４】
を有する、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１１が、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ、Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ、Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ、Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ、Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ、Ｇｌｕ（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ、およびＧｌｕ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ）−γ−スペルミドからなる群から選択されるペプチド配列である、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ−Ｏｒｎ；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄａｂ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ｄａｂ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｕ−（γ−スペルミド）−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ
から選択される、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］
から選択される、請求項４に記載の化合物。
【請求項８】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］
から選択される、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＴｒｐ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＬｅｕ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；
デカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｔｒｐ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］；および
ドデカノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］
から選択される、請求項４に記載の化合物。
【請求項１０】
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（４−１０）［Ｄａｂ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｔｈｒ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ｌｅｕ−Ｔｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｓｅｒ−Ｔｒｐ］；
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−Ｃｙｓ］−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−Ｔｒｐ−Ｔｒｐ−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ；および
ノナノイル−Ａｒｇ−Ｔｈｒ−Ｄａｂ−シクロ（Ｓ−Ｓ）［Ｃｙｓ−Ｄａｂ−ＤＰｈｅ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｄａｂ−ＤＣｙｓ］
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
ヒトを含む哺乳類においてグラム陽性菌により引き起こされる細菌感染の処置を目的とする薬剤の製造のための、請求項１〜１０のいずれか一項に定義される化合物の使用。
【請求項１２】
グラム陽性菌が、マイコバクテリウム・フレイ、黄色ブドウ球菌およびマイクロコッカス・ルテウスからなる群から選択される、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
ヒトを含む哺乳類においてグラム陰性菌により引き起こされる細菌感染の処置を目的とする薬剤の製造のための、請求項１〜１０のいずれか一項に定義される化合物の使用。
【請求項１４】
グラム陰性菌が、ネズミチフス菌、緑膿菌、大腸菌およびアシネトバクター種からなる群から選択される、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
治療上有効な量の請求項１〜１０のいずれか一項に定義される化合物を薬学上許容される賦形剤または担体とともに含んでなる、医薬組成物。
【公表番号】特表２０１３−５２１３３０（Ｐ２０１３−５２１３３０Ａ）
【公表日】平成２５年６月１０日（２０１３．６．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５５６５５２（Ｐ２０１２−５５６５５２）
【出願日】平成２３年３月９日（２０１１．３．９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＳ２０１１／０７０１５３
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／１１０７１６
【国際公開日】平成２３年９月１５日（２０１１．９．１５）
【出願人】（５０７００５０１２）ウニベルシダッド・デ・バルセロナ (3)
【氏名又は名称原語表記】ＵＮＩＶＥＲＳＩＤＡＤ ＤＥ ＢＡＲＣＥＬＯＮＡ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年６月１０日（２０１３．６．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年３月９日（２０１１．３．９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＳ２０１１／０７０１５３
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／１１０７１６
【国際公開日】平成２３年９月１５日（２０１１．９．１５）
【出願人】（５０７００５０１２）ウニベルシダッド・デ・バルセロナ (3)
【氏名又は名称原語表記】ＵＮＩＶＥＲＳＩＤＡＤ ＤＥ ＢＡＲＣＥＬＯＮＡ
【Ｆターム（参考）】
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