放射性炭素標識イミダゾール誘導体
【課題】脳血管障害等の診断に有用な陽電子断層撮影診断用の放射性リガンドを提供すること。
【解決手段】式（Ｉ）に示される、放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
（Ｑは、水素原子又はＣ1〜Ｃ4アルキル基であり、ｎは、３〜８の整数であり、Ｒ1は、水素原子、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基又はハロゲン原子であり、Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基であり、Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基である。ただし、Ｒ2又はＲ3は、11Ｃを導入したＣ1〜Ｃ4アルキル基である。）
【解決手段】式（Ｉ）に示される、放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
（Ｑは、水素原子又はＣ1〜Ｃ4アルキル基であり、ｎは、３〜８の整数であり、Ｒ1は、水素原子、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基又はハロゲン原子であり、Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基であり、Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基である。ただし、Ｒ2又はＲ3は、11Ｃを導入したＣ1〜Ｃ4アルキル基である。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射性炭素標識イミダゾール誘導体及びこれを用いた診断薬に関し、特に、陽電子断層撮影（positron emission tomography；ＰＥＴ)診断用の放射性リガンドに関する。
【背景技術】
【０００２】
20-Hydroxyeicosatetraenoic acid（２０−ＨＥＴＥ）は、アラキドン酸から２０−ＨＥＴＥ産生酵素であるチトクロームＰ４５０ ４Ａ又は４Ｆによって代謝される産物であり、腎臓、肝臓、脳血管組織等の主要臓器で産生されることが知られている。アラキドン酸代謝産物である２０−ＨＥＴＥは、上記主要臓器において血管収縮や炎症反応に関与すると考えられており、例えば２０−ＨＥＴＥの産生増大は脳血管障害の病態進行を促進する。したがって、その産生酵素（２０−ＨＥＴＥ産生酵素）の発現量を知ることは脳血管障害等の各種病態の程度や予後を知る上で重要である。
【０００３】
近年、癌の診断、心筋や脳の代謝活動の判定などの臨床目的あるいは生体の代謝活動、脳機能の解明などの基礎科学において、陽電子断層撮影ＰＥＴが広範に利用されるようになっている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第ＷＯ２００１／０３２１６４号パンフレット
【特許文献２】国際公開第ＷＯ２００１／０９６３０９号パンフレット
【特許文献３】国際公開第ＷＯ２００２／０８８０７１号パンフレット
【特許文献４】国際公開第ＷＯ２００４／０２４６７７号パンフレット
【特許文献５】特開２００４−０１０５１３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
２０−ＨＥＴＥ産生酵素に対するＰＥＴは、脳血管障害等の診断や研究に有用であると考えられるが、当該ＰＥＴリガンドの存在は知られていない
２０−ＨＥＴＥ産生酵素阻害活性を有する化合物が報告されているが（特許文献１〜５）、これらの化合物をＰＥＴリガンドとして利用したという報告はない。
【０００６】
本発明の目的は、２０−ＨＥＴＥ産生酵素に結合し、脳血管障害等の診断や研究に有用なＰＥＴリガンドを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは前述した課題を解決する目的で鋭意探索研究した結果、優れた２０−ＨＥＴＥ産生酵素への親和性を示す放射性同位元素で標識した化合物を見出し、本発明を完成した。
【０００８】
すなわち、本発明は、
（１）下記一般式（Ｉ）に示される、放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩、
【０００９】
【化１】
【００１０】
（上記一般式（Ｉ）において、
Ｑは、水素原子又はＣ1〜Ｃ4アルキル基であり、
ｎは、３〜８の整数であり、
Ｒ1は、水素原子、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基又はハロゲン原子であり、
Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基であり、
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基である。
ただし、Ｒ2又はＲ3は、11Ｃを導入したＣ1〜Ｃ4アルキル基である。）
（２）前記一般式（Ｉ）において、Ｑが水素原子であり、ｎが６であり、Ｒ1が水素原子である、（１）に記載の放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩、又は
（３）（１）又は（２）に記載の放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩を含有する、脳血管障害の診断薬である。
【発明の効果】
【００１１】
本発明により、２０−ＨＥＴＥ産生酵素に結合する化合物が見出され、脳、腎臓、肝臓等の各種臓器における２０−ＨＥＴＥ産生酵素の量を可視的に測定することが可能となった。特に本発明の化合物は、脳組織における集積が顕著であり、脳血管障害等の診断や研究のためのリガンドとして有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ラット脳虚血再灌流後２８日にわたる障害半球（虚血側半球）における11Ｃ標識化合物Ａの集積変化を示す図である。
【図２】11Ｃ標識化合物Ａの脳内における集積に対する過剰量非標識化合物Ａ投与の影響を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明において、「Ｃ1〜Ｃ4アルキル基」すなわち「炭素数１〜４のアルキル基」とは、直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基を示し、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、１−メチルプロピル基などである。
【００１４】
本発明において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子である。
【００１５】
本発明において、「脳血管障害」とは、脳梗塞、脳出血、クモ膜下出血、もやもや病、慢性硬膜下血腫等の障害を意味し、本発明の化合物は、例えば脳梗塞において認められる虚血再灌流障害の診断に特に有用である。
【００１６】
本発明における化合物（Ｉ）及びその製薬学的に許容される塩は、特許文献５に記載の方法と同様に製造される化合物を用い、下記反応式で示される方法で製造することができる。式中、Ｑ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3は、前記と同義である。
【００１７】
なお、以下の製造方法の説明において、「不活性溶媒」とは、例えばベンゼン、トルエン、キシレン、ピリジン等の芳香族系溶媒；
ヘキサン、ペンタン、シクロヘキサン等の炭化水素系溶媒；
ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素系溶媒；
テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、１，２−ジメトキシエタン、１，４−ジオキサン等のエーテル系溶媒；
酢酸エチル、酢酸イソプロピル等のエステル系溶媒；
メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、エチレングリコール等のアルコール系溶媒；
アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒；
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ヘキサメチルリン酸トリアミド等のアミド系溶媒；
ジメチルスルホキシド等のスルホキシド系溶媒；
アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル系溶媒；及び
水であり、並びにこれらの均一系及び不均一系混合溶媒等である。これらの不活性溶媒は当業者に公知である種々の反応条件に応じて適宜選択される。
【００１８】
「塩基」とは、例えば水素化ナトリウム、水素化カリウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の水素化物；
ナトリウムアミド、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）、リチウム ２，２，６，６−テトラメチルピペリジド（ＬＴＭＰ）、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ）、カリウムヘキサメチルジシラジド（ＫＨＭＤＳ）等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属のアミド；
ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属のアルコキシド；
ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム、メチルリチウム等のアルキルリチウム；
水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化バリウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の水酸化物；
炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の炭酸塩；
炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の炭酸水素塩；
フッ化カリウム、フッ化セシウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属のフッ化物；
トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）等のアミン；
ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン（ＤＭＡＰ）、２，６−ルチジン、イミダゾール等の塩基性複素環化合物等である。これらの塩基は当業者に公知である種々の反応条件に応じて適宜選択される。
【００１９】
また、「酸」とは、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸；
ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、ギ酸、酢酸等の有機酸；
三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体、三臭化ホウ素、トリメチルシリルヨージド、塩化亜鉛（ＩＩ）、塩化アルミニウム（ＩＩＩ）、塩化チタン（ＩＶ）等のルイス酸である。これらの酸は当業者に公知である種々の反応条件に応じて適宜選択される。
【００２０】
［製造法］
本発明における化合物（Ｉ）は、例えば以下のスキーム１に示される方法で製造することができる。
（スキーム１）
【００２１】
【化２】
【００２２】
上記スキーム１における式中、Ｘは、ハロゲン原子を示す。また、式中、Ｑ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びｎは、前記と同義である。
また、Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基であり、Ａｃはアセチル基である。
【００２３】
以下、スキーム１中の各工程をさらに具体的に説明する。
工程１：不活性溶媒中、塩基存在下又は非存在下、化合物（１）をアセチル化剤とのアセチル化反応に供することにより、化合物（２）を得ることができる。ここで、アセチル化剤とは、例えば無水酢酸、アセチルクロリド等である。
【００２４】
工程２：不活性溶媒中、塩基存在下又は非存在下、添加剤存在下又は非存在下、化合物（２）をハロゲン化アルキルとのアルキル化反応に供することにより、化合物（３）を得ることができる。ここで、ハロゲン化アルキルは、例えばヨウ化メチル等である。
【００２５】
工程３：化合物（３）のアセチル基を当業者に公知である種々の有機合成手法［プロテクティブ グループス イン オーガニック シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第４版、ジョン ウィリー アンド サンズ（John Wiley & Sons, INC.）参照］を用いて除去することにより、化合物（４）を得ることができる。
【００２６】
工程４：不活性溶媒中、化合物（４）と化合物（５）との光延反応に供することにより、化合物（６）を得ることができる。光延反応とは、例えばトリフェニルホスフィン或いはトリブチルホスフィン等の有機リン化合物及び例えばアゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ）、アゾジカルボン酸ジイソプロピル（ＤＩＡＤ）或いはＮ，Ｎ，Ｎ'，Ｎ'−テトラメチルアゾジカルボキサミド（ＴＭＡＤ）等のアゾ化合物を用いる反応、又は、例えばシアノメチレントリブチルホスホラン（ＣＭＢＰ）等のリンイリド試薬を用いる反応である［ケミカル レビューズ（Chemical Reviews）２００９年、第１０９巻、ｐ．２５５１−２６５１参照］。化合物（５）は、市販化合物、公知化合物又は当業者に公知である種々の有機合成手法を用いて市販化合物又は公知化合物より合成した化合物を用いることができる。
【００２７】
工程５：化合物（６）のｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を当業者に公知である種々の有機合成手法［プロテクティブ グループス イン オーガニック シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第４版、ジョン ウィリー アンド サンズ（John Wiley & Sons, INC.）参照］を用いて除去することにより、化合物（７）を得ることができる。
【００２８】
工程６：不活性溶媒中、塩基存在下又は非存在下、添加剤存在下又は非存在下、化合物（７）を11Ｃを導入したハロゲン化アルキルとのアルキル化反応に供することにより、本発明化合物（Ｉ）を得ることができる。
【００２９】
以下、実施例と試験例を挙げて本発明を更に詳しく説明する。
【実施例】
【００３０】
本発明は下記の実施例によって更に詳細に説明されるが、これら実施例は本発明を限定するものではなく、また、本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。
実施例中で言及する「SNAP Cartridge KP-Sil」とはバイオタージ社製のパックドカラムである。また、「Purif-Pack SI30」とは昭光サイエンティフィック社製のパックドカラムである。ＮＨシリカゲルとは富士シリシア社製のクロマトレックスＮＨシリカゲルである。「室温」とは５〜３５℃を意味する。
【００３１】
実施例中記載の各機器データは以下の測定機器で測定した。
ＭＳスペクトル：島津製作所社製ＬＣＭＳ−２０１０ＥＶ
【００３２】
実施例中で使用した略語を以下に示す。
ＡＰＣＩ（大気圧化学イオン化）、ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）、ＥＳＩ（エレクトロスプレーイオン化）、ＭＳ（質量分析）、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）、ｖ／ｖ（容量／容量）。
【００３３】
（参考例１）
６−［４−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ'−ジメチルヘキサン−１−アミン ２塩酸塩（以下、非標識化合物Ａ）の合成
特許文献５に記載の方法に従い合成した。
ESI/APCI MS m/z 288 [M+H]+.
【００３４】
（実施例１）
11Ｃ標識 ６−［４−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ'−ジメチルヘキサン−１−アミン（以下、11Ｃ標識化合物Ａ）の合成
【００３５】
工程１−１：
ｔｅｒｔ−ブチル（６−ヒドロキシへキシル）カーバメート（１５．７ｇ）のピリジン（４７ｍＬ）溶液に、氷冷下、無水酢酸（４７ｍＬ）を加え、室温で１９時間撹拌した。反応混合物を氷冷し、水（１００ｍＬ）を加え、１０分間撹拌した。酢酸エチル（３００ｍＬ）で抽出し、有機層を水（１５０ｍＬ×１、１００ｍＬ×１）及び飽和食塩水（１００ｍＬ）で順次洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥して減圧下、濃縮し、未精製の６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ヘキシルアセテート（１７．７ｇ、無色油状物質）を得た。
ESI/APCI MS m/z 282 [M+Na]+.
【００３６】
工程１−２：
工程１−１で得られた化合物（１７．７ｇ）のＤＭＦ（２００ｍＬ）溶液に、氷冷下、６０％ＮａＨ（４．０８ｇ）を少しずつ加え、同温で３０分間撹拌した。氷冷下、ヨウ化メチル（５．１０ｍＬ）を滴下し、室温で３時間撹拌した。反応混合物を氷冷し、飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液（２５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（４５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（４００ｍＬ×３）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥して減圧下、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（SNAP Cartridge KP-Sil、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝９０／１０〜７０／３０；ｖ／ｖ）及び（Purif-Pack SI30、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝９０／１０〜７０／３０；ｖ／ｖ）×２で精製し、６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ヘキシルアセテート（６．７１ｇ、無色油状物質）を得た。
ESI/APCI MS m/z 296 [M+Na]+.
【００３７】
工程１−３：
工程１−２で得られた化合物（６．７０ｇ）のＭｅＯＨ（６７ｍＬ）溶液に、Ｋ2ＣＯ3（３４０ｍｇ）を加え、室温で１．５時間撹拌した。減圧下、ＭｅＯＨを濃縮し、酢酸エチル（１００ｍＬ）を加え、水（２０ｍＬ）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥して減圧下、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（SNAP Cartridge KP-Sil、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜５０／５０；ｖ／ｖ）で精製した。後処理・精製過程での生成物を再びＭｅＯＨ（６０ｍＬ）溶液に、Ｋ2ＣＯ3（３４０ｍｇ）を加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水（２０ｍＬ）及び飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液（２０ｍＬ）を加え中和し、減圧下、ＭｅＯＨを濃縮した。ＣＨＣｌ3（２００ｍＬ）で抽出後、飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥して減圧下、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（SNAP Cartridge KP-Sil、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜５０／５０；ｖ／ｖ）で精製し、先のカラム精製で得られた目的物と一緒にし、ｔｅｒｔ−ブチル （６−ヒドロキシへキシル）メチルカーバメート（４．６７ｇ、無色油状物質）を得た。
ESI/APCI MS m/z 254 [M+Na]+.
【００３８】
工程１−４：
工程１−３で得られた化合物（２．３２ｇ）、４−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェノール（２．４１ｇ）及びトリフェニルホスフィン（３．９２ｇ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）懸濁液に、氷冷下、４０％アゾジカルボン酸ジイソプロピル／トルエン溶液（７．５８ｇ）を滴下し、室温で６６時間撹拌した。反応混合物にＮＨシリカゲルを加え、減圧下、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＮＨシリカゲル、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０；ｖ／ｖ）、（Purif-Pack SI30、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００；ｖ／ｖ）及び（ＮＨシリカゲル、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０；ｖ／ｖ）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル｛６−［４−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェノキシ］へキシル｝メチルカーバメート（１．３９ｇ、無色油状物質）を得た。
ESI/APCI MS m/z 374 [M+H]+.
【００３９】
工程１−５：
工程１−４で得られた化合物（１．３８ｇ）の酢酸エチル（５ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩酸／酢酸エチル（５ｍＬ）を加え、室温で１．５時間撹拌した。反応混合物に２Ｍ ＮａＯＨ水溶液を加え中和し、水（１０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（７０ｍＬ×２）及びＣＨＣｌ3（７０ｍＬ）で抽出した。水層を減圧下、濃縮し、ＣＨＣｌ3（７０ｍＬ）を加え、室温で１２時間撹拌した。不溶物を濾取し、濾液と先の抽出で得られた有機層を一緒にし、無水ＭｇＳＯ4で乾燥して減圧下、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＮＨシリカゲル、移動相：酢酸エチル〜ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ＝９５／５；ｖ／ｖ）及び再結晶（ヘキサン／酢酸エチル）で順次精製し、６−［４−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェノキシ］−Ｎ−メチルへキサン−１−アミン（３６６ｍｇ、無色固体）を得た。
ESI/APCI MS m/z 274 [M+H]+.
【００４０】
工程１−６：
標識用合成装置として、理化学研究所分子イメージング科学研究センターに設置してある標準型標識用合成装置を用いた。化学薬品は市販のものをそのまま用いた。脱水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（ナカライ社製）、ＨＰＬＣ用アセトニトリル（ナカライ社製）及び酢酸アンモニウム（東京化成社製）を使用した。
11Ｃ核の製造には、住友重機械工業社製サイクロトロンＣＹＰＲＩＳ ＨＭ−１２Ｓを使用し、14Ｎ（ｐ，α）11Ｃの核反応により製造した。［11Ｃ］ヨウ化メチルの合成には、専用の標識用合成装置を用いて、11ＣＯ2ガスを出発物質として、11ＣＯ2→11ＣＨ3ＯＨ→11ＣＨ3Ｉの順に変換して合成した。
一方、工程１−５で得られた化合物（０．５ｍｇ、１．８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．２ｍＬ）を標識用合成装置の反応容器に準備し、室温に設置した（［11Ｃ］ヨウ化メチルを吹き込む１０−２０分前に設置した）。続いて、本反応溶液に［11Ｃ］ヨウ化メチルを６０−８０ｍＬ／ｍｉｎのガス流量で吹き込み、９０℃で５分間加熱した。得られた反応溶液を０．５ｍＬの洗浄液（アセトニトリル：３０ｍＭ酢酸アンモニウム＝２３：７７溶液）で希釈し、分取ＨＰＬＣを用いて11Ｃ標識化合物Ａを分取し、分取したフラクションを、エバポレーターを用いて減圧濃縮した。濃縮液は臨床用投与溶液（生理食塩水：３ｍＬ）を用いて希釈し、無菌バイヤルに入れた。本溶液の一部（２０μＬ）を分析ＨＰＬＣに供して、目的化合物の同定、純度検定、及び比放射能の算出を行った。なお、11Ｃ標識化合物Ａの同定は非標識化合物Ａを用いて行った。
11Ｃ標識化合物Ａの総放射能：１．５〜２．５ＧＢｑ、合成時間：４０分、放射化学純度：９９％以上、化学的純度：９９％以上、比放射能：６０〜１００ＧＢｑ／μｍｏｌ
分取条件：分取用カラムはナカライ社製ＭＳ−ＩＩ １０ｍｍ×２５０ｍｍ、ガードカラムはナカライ社製ＭＳ−ＩＩ １０ｍｍ×２０ｍｍを使用した。流量は６ｍＬ／ｍｉｎで、移動層は３０ｍＭ ＣＨ3ＣＯＯＮＨ4：ＣＨ3ＣＮ（５％Ｈ2Ｏ添加）＝７７：２３を使用した。ＵＶ検出波長２５４ｎｍ及びγ線検出器で測定した結果、11Ｃ標識化合物Ａの保持時間は約１０分であった。
【００４１】
＜試験例＞
（試験方法）
ラット脳虚血モデルは、栓子法（intraluminal filament method）を用いた６０分間の一過性中大脳動脈閉塞（ｔ−ＭＣＡＯ）により作製した。虚血再灌流後３〜２８日に、11Ｃ標識化合物Ａ（放射比活性４０ＧＢｑ／μｍｏｌ）は、１．５％isoflurane麻酔下のラットに対して埋め込まれたカニューレを通して尾静脈に注入された（２００ＭＢｑ／ｋｇ；１．５μｇ／ｋｇ）。Dynamic PETスキャンは、11Ｃ標識化合物Ａ注入直後から小動物用ＰＥＴスキャナー（microPET focus220）を用いて９０分間実施された。11Ｃ標識化合物Ａの結合能（binding potential）は、小脳を参照領域としてmultilinear reference-tissue model 2（ＭＲＴＭ２）（PMOD Technology, version 3.0）により計算された。
【００４２】
（試験結果）
正常ラットで、11Ｃ標識化合物Ａは腎臓、肝臓等の２０−ＨＥＴＥ産生酵素が豊富に存在する臓器において高い集積を示した。当該化合物は脳においても高い集積を示した。
図１（ａ）及び図１（ｂ）は、ラット脳虚血再灌流後２８日にわたる障害半球（虚血側半球）における11Ｃ標識化合物Ａの集積変化（ＰＥＴスキャン結果）を示す図である。図１（ａ）中の白抜き矢印は、障害半球（虚血側半球）を差し示している。
11Ｃ標識化合物Ａを用いたＰＥＴスキャンにより、ラット脳虚血再灌流後２８日にわたる２０−ＨＥＴＥ産生酵素の変動をモニターしたところ、図１（ａ）及び図１（ｂ）に示したように、虚血再灌流後７日及び１０日に障害半球（虚血側半球）において対照半球（非虚血側半球）よりも11Ｃ標識化合物Ａの高い集積が認められた。当該集積は、過剰量の非標識化合物Ａを同時投与（１０ｍｇ／ｋｇ）することによって消失した（図１（ａ）、図１（ｂ）、図２（ａ）及び図２（ｂ））。
図２（ａ）及び図２（ｂ）は、11Ｃ標識化合物Ａの脳内における集積に対する過剰量非標識化合物Ａ投与の影響を示す図である。図２（ａ）中の白抜き矢印は、障害半球（虚血側半球）を差し示している。
このように、11Ｃ標識化合物Ａは、ラット脳虚血障害時の２０−ＨＥＴＥ産生酵素量の時間依存的な変化について定量的な情報を提供した。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明の化合物は、脳血管障害等の早期診断に有用なＰＥＴ用の放射性リガンドとして利用可能である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射性炭素標識イミダゾール誘導体及びこれを用いた診断薬に関し、特に、陽電子断層撮影（positron emission tomography；ＰＥＴ)診断用の放射性リガンドに関する。
【背景技術】
【０００２】
20-Hydroxyeicosatetraenoic acid（２０−ＨＥＴＥ）は、アラキドン酸から２０−ＨＥＴＥ産生酵素であるチトクロームＰ４５０ ４Ａ又は４Ｆによって代謝される産物であり、腎臓、肝臓、脳血管組織等の主要臓器で産生されることが知られている。アラキドン酸代謝産物である２０−ＨＥＴＥは、上記主要臓器において血管収縮や炎症反応に関与すると考えられており、例えば２０−ＨＥＴＥの産生増大は脳血管障害の病態進行を促進する。したがって、その産生酵素（２０−ＨＥＴＥ産生酵素）の発現量を知ることは脳血管障害等の各種病態の程度や予後を知る上で重要である。
【０００３】
近年、癌の診断、心筋や脳の代謝活動の判定などの臨床目的あるいは生体の代謝活動、脳機能の解明などの基礎科学において、陽電子断層撮影ＰＥＴが広範に利用されるようになっている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第ＷＯ２００１／０３２１６４号パンフレット
【特許文献２】国際公開第ＷＯ２００１／０９６３０９号パンフレット
【特許文献３】国際公開第ＷＯ２００２／０８８０７１号パンフレット
【特許文献４】国際公開第ＷＯ２００４／０２４６７７号パンフレット
【特許文献５】特開２００４−０１０５１３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
２０−ＨＥＴＥ産生酵素に対するＰＥＴは、脳血管障害等の診断や研究に有用であると考えられるが、当該ＰＥＴリガンドの存在は知られていない
２０−ＨＥＴＥ産生酵素阻害活性を有する化合物が報告されているが（特許文献１〜５）、これらの化合物をＰＥＴリガンドとして利用したという報告はない。
【０００６】
本発明の目的は、２０−ＨＥＴＥ産生酵素に結合し、脳血管障害等の診断や研究に有用なＰＥＴリガンドを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは前述した課題を解決する目的で鋭意探索研究した結果、優れた２０−ＨＥＴＥ産生酵素への親和性を示す放射性同位元素で標識した化合物を見出し、本発明を完成した。
【０００８】
すなわち、本発明は、
（１）下記一般式（Ｉ）に示される、放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩、
【０００９】
【化１】
【００１０】
（上記一般式（Ｉ）において、
Ｑは、水素原子又はＣ1〜Ｃ4アルキル基であり、
ｎは、３〜８の整数であり、
Ｒ1は、水素原子、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基又はハロゲン原子であり、
Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基であり、
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基である。
ただし、Ｒ2又はＲ3は、11Ｃを導入したＣ1〜Ｃ4アルキル基である。）
（２）前記一般式（Ｉ）において、Ｑが水素原子であり、ｎが６であり、Ｒ1が水素原子である、（１）に記載の放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩、又は
（３）（１）又は（２）に記載の放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩を含有する、脳血管障害の診断薬である。
【発明の効果】
【００１１】
本発明により、２０−ＨＥＴＥ産生酵素に結合する化合物が見出され、脳、腎臓、肝臓等の各種臓器における２０−ＨＥＴＥ産生酵素の量を可視的に測定することが可能となった。特に本発明の化合物は、脳組織における集積が顕著であり、脳血管障害等の診断や研究のためのリガンドとして有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】ラット脳虚血再灌流後２８日にわたる障害半球（虚血側半球）における11Ｃ標識化合物Ａの集積変化を示す図である。
【図２】11Ｃ標識化合物Ａの脳内における集積に対する過剰量非標識化合物Ａ投与の影響を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明において、「Ｃ1〜Ｃ4アルキル基」すなわち「炭素数１〜４のアルキル基」とは、直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基を示し、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、１−メチルプロピル基などである。
【００１４】
本発明において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子である。
【００１５】
本発明において、「脳血管障害」とは、脳梗塞、脳出血、クモ膜下出血、もやもや病、慢性硬膜下血腫等の障害を意味し、本発明の化合物は、例えば脳梗塞において認められる虚血再灌流障害の診断に特に有用である。
【００１６】
本発明における化合物（Ｉ）及びその製薬学的に許容される塩は、特許文献５に記載の方法と同様に製造される化合物を用い、下記反応式で示される方法で製造することができる。式中、Ｑ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3は、前記と同義である。
【００１７】
なお、以下の製造方法の説明において、「不活性溶媒」とは、例えばベンゼン、トルエン、キシレン、ピリジン等の芳香族系溶媒；
ヘキサン、ペンタン、シクロヘキサン等の炭化水素系溶媒；
ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素系溶媒；
テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、１，２−ジメトキシエタン、１，４−ジオキサン等のエーテル系溶媒；
酢酸エチル、酢酸イソプロピル等のエステル系溶媒；
メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、エチレングリコール等のアルコール系溶媒；
アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒；
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ヘキサメチルリン酸トリアミド等のアミド系溶媒；
ジメチルスルホキシド等のスルホキシド系溶媒；
アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル系溶媒；及び
水であり、並びにこれらの均一系及び不均一系混合溶媒等である。これらの不活性溶媒は当業者に公知である種々の反応条件に応じて適宜選択される。
【００１８】
「塩基」とは、例えば水素化ナトリウム、水素化カリウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の水素化物；
ナトリウムアミド、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）、リチウム ２，２，６，６−テトラメチルピペリジド（ＬＴＭＰ）、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬＨＭＤＳ）、カリウムヘキサメチルジシラジド（ＫＨＭＤＳ）等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属のアミド；
ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属のアルコキシド；
ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム、メチルリチウム等のアルキルリチウム；
水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化バリウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の水酸化物；
炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の炭酸塩；
炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属の炭酸水素塩；
フッ化カリウム、フッ化セシウム等のアルカリ金属又はアルカリ土類金属のフッ化物；
トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）等のアミン；
ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−アミノピリジン（ＤＭＡＰ）、２，６−ルチジン、イミダゾール等の塩基性複素環化合物等である。これらの塩基は当業者に公知である種々の反応条件に応じて適宜選択される。
【００１９】
また、「酸」とは、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸；
ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、ギ酸、酢酸等の有機酸；
三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体、三臭化ホウ素、トリメチルシリルヨージド、塩化亜鉛（ＩＩ）、塩化アルミニウム（ＩＩＩ）、塩化チタン（ＩＶ）等のルイス酸である。これらの酸は当業者に公知である種々の反応条件に応じて適宜選択される。
【００２０】
［製造法］
本発明における化合物（Ｉ）は、例えば以下のスキーム１に示される方法で製造することができる。
（スキーム１）
【００２１】
【化２】
【００２２】
上記スキーム１における式中、Ｘは、ハロゲン原子を示す。また、式中、Ｑ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びｎは、前記と同義である。
また、Ｂｏｃはｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基であり、Ａｃはアセチル基である。
【００２３】
以下、スキーム１中の各工程をさらに具体的に説明する。
工程１：不活性溶媒中、塩基存在下又は非存在下、化合物（１）をアセチル化剤とのアセチル化反応に供することにより、化合物（２）を得ることができる。ここで、アセチル化剤とは、例えば無水酢酸、アセチルクロリド等である。
【００２４】
工程２：不活性溶媒中、塩基存在下又は非存在下、添加剤存在下又は非存在下、化合物（２）をハロゲン化アルキルとのアルキル化反応に供することにより、化合物（３）を得ることができる。ここで、ハロゲン化アルキルは、例えばヨウ化メチル等である。
【００２５】
工程３：化合物（３）のアセチル基を当業者に公知である種々の有機合成手法［プロテクティブ グループス イン オーガニック シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第４版、ジョン ウィリー アンド サンズ（John Wiley & Sons, INC.）参照］を用いて除去することにより、化合物（４）を得ることができる。
【００２６】
工程４：不活性溶媒中、化合物（４）と化合物（５）との光延反応に供することにより、化合物（６）を得ることができる。光延反応とは、例えばトリフェニルホスフィン或いはトリブチルホスフィン等の有機リン化合物及び例えばアゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ）、アゾジカルボン酸ジイソプロピル（ＤＩＡＤ）或いはＮ，Ｎ，Ｎ'，Ｎ'−テトラメチルアゾジカルボキサミド（ＴＭＡＤ）等のアゾ化合物を用いる反応、又は、例えばシアノメチレントリブチルホスホラン（ＣＭＢＰ）等のリンイリド試薬を用いる反応である［ケミカル レビューズ（Chemical Reviews）２００９年、第１０９巻、ｐ．２５５１−２６５１参照］。化合物（５）は、市販化合物、公知化合物又は当業者に公知である種々の有機合成手法を用いて市販化合物又は公知化合物より合成した化合物を用いることができる。
【００２７】
工程５：化合物（６）のｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を当業者に公知である種々の有機合成手法［プロテクティブ グループス イン オーガニック シンセシス（Protective Groups in Organic Synthesis）第４版、ジョン ウィリー アンド サンズ（John Wiley & Sons, INC.）参照］を用いて除去することにより、化合物（７）を得ることができる。
【００２８】
工程６：不活性溶媒中、塩基存在下又は非存在下、添加剤存在下又は非存在下、化合物（７）を11Ｃを導入したハロゲン化アルキルとのアルキル化反応に供することにより、本発明化合物（Ｉ）を得ることができる。
【００２９】
以下、実施例と試験例を挙げて本発明を更に詳しく説明する。
【実施例】
【００３０】
本発明は下記の実施例によって更に詳細に説明されるが、これら実施例は本発明を限定するものではなく、また、本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。
実施例中で言及する「SNAP Cartridge KP-Sil」とはバイオタージ社製のパックドカラムである。また、「Purif-Pack SI30」とは昭光サイエンティフィック社製のパックドカラムである。ＮＨシリカゲルとは富士シリシア社製のクロマトレックスＮＨシリカゲルである。「室温」とは５〜３５℃を意味する。
【００３１】
実施例中記載の各機器データは以下の測定機器で測定した。
ＭＳスペクトル：島津製作所社製ＬＣＭＳ−２０１０ＥＶ
【００３２】
実施例中で使用した略語を以下に示す。
ＡＰＣＩ（大気圧化学イオン化）、ＤＭＦ（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）、ＥＳＩ（エレクトロスプレーイオン化）、ＭＳ（質量分析）、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）、ｖ／ｖ（容量／容量）。
【００３３】
（参考例１）
６−［４−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ'−ジメチルヘキサン−１−アミン ２塩酸塩（以下、非標識化合物Ａ）の合成
特許文献５に記載の方法に従い合成した。
ESI/APCI MS m/z 288 [M+H]+.
【００３４】
（実施例１）
11Ｃ標識 ６−［４−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェノキシ］−Ｎ，Ｎ'−ジメチルヘキサン−１−アミン（以下、11Ｃ標識化合物Ａ）の合成
【００３５】
工程１−１：
ｔｅｒｔ−ブチル（６−ヒドロキシへキシル）カーバメート（１５．７ｇ）のピリジン（４７ｍＬ）溶液に、氷冷下、無水酢酸（４７ｍＬ）を加え、室温で１９時間撹拌した。反応混合物を氷冷し、水（１００ｍＬ）を加え、１０分間撹拌した。酢酸エチル（３００ｍＬ）で抽出し、有機層を水（１５０ｍＬ×１、１００ｍＬ×１）及び飽和食塩水（１００ｍＬ）で順次洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ4で乾燥して減圧下、濃縮し、未精製の６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ヘキシルアセテート（１７．７ｇ、無色油状物質）を得た。
ESI/APCI MS m/z 282 [M+Na]+.
【００３６】
工程１−２：
工程１−１で得られた化合物（１７．７ｇ）のＤＭＦ（２００ｍＬ）溶液に、氷冷下、６０％ＮａＨ（４．０８ｇ）を少しずつ加え、同温で３０分間撹拌した。氷冷下、ヨウ化メチル（５．１０ｍＬ）を滴下し、室温で３時間撹拌した。反応混合物を氷冷し、飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液（２５０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（４５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（４００ｍＬ×３）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥して減圧下、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（SNAP Cartridge KP-Sil、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝９０／１０〜７０／３０；ｖ／ｖ）及び（Purif-Pack SI30、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝９０／１０〜７０／３０；ｖ／ｖ）×２で精製し、６−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）（メチル）アミノ］ヘキシルアセテート（６．７１ｇ、無色油状物質）を得た。
ESI/APCI MS m/z 296 [M+Na]+.
【００３７】
工程１−３：
工程１−２で得られた化合物（６．７０ｇ）のＭｅＯＨ（６７ｍＬ）溶液に、Ｋ2ＣＯ3（３４０ｍｇ）を加え、室温で１．５時間撹拌した。減圧下、ＭｅＯＨを濃縮し、酢酸エチル（１００ｍＬ）を加え、水（２０ｍＬ）及び飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥して減圧下、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（SNAP Cartridge KP-Sil、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜５０／５０；ｖ／ｖ）で精製した。後処理・精製過程での生成物を再びＭｅＯＨ（６０ｍＬ）溶液に、Ｋ2ＣＯ3（３４０ｍｇ）を加え、室温で２時間撹拌した。反応混合物に水（２０ｍＬ）及び飽和ＮＨ4Ｃｌ水溶液（２０ｍＬ）を加え中和し、減圧下、ＭｅＯＨを濃縮した。ＣＨＣｌ3（２００ｍＬ）で抽出後、飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ4で乾燥して減圧下、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（SNAP Cartridge KP-Sil、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝７０／３０〜５０／５０；ｖ／ｖ）で精製し、先のカラム精製で得られた目的物と一緒にし、ｔｅｒｔ−ブチル （６−ヒドロキシへキシル）メチルカーバメート（４．６７ｇ、無色油状物質）を得た。
ESI/APCI MS m/z 254 [M+Na]+.
【００３８】
工程１−４：
工程１−３で得られた化合物（２．３２ｇ）、４−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェノール（２．４１ｇ）及びトリフェニルホスフィン（３．９２ｇ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）懸濁液に、氷冷下、４０％アゾジカルボン酸ジイソプロピル／トルエン溶液（７．５８ｇ）を滴下し、室温で６６時間撹拌した。反応混合物にＮＨシリカゲルを加え、減圧下、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＮＨシリカゲル、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０；ｖ／ｖ）、（Purif-Pack SI30、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０〜０／１００；ｖ／ｖ）及び（ＮＨシリカゲル、移動相：ヘキサン／酢酸エチル＝５０／５０；ｖ／ｖ）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル｛６−［４−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェノキシ］へキシル｝メチルカーバメート（１．３９ｇ、無色油状物質）を得た。
ESI/APCI MS m/z 374 [M+H]+.
【００３９】
工程１−５：
工程１−４で得られた化合物（１．３８ｇ）の酢酸エチル（５ｍＬ）溶液に、４Ｍ塩酸／酢酸エチル（５ｍＬ）を加え、室温で１．５時間撹拌した。反応混合物に２Ｍ ＮａＯＨ水溶液を加え中和し、水（１０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（７０ｍＬ×２）及びＣＨＣｌ3（７０ｍＬ）で抽出した。水層を減圧下、濃縮し、ＣＨＣｌ3（７０ｍＬ）を加え、室温で１２時間撹拌した。不溶物を濾取し、濾液と先の抽出で得られた有機層を一緒にし、無水ＭｇＳＯ4で乾燥して減圧下、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＮＨシリカゲル、移動相：酢酸エチル〜ＣＨＣｌ3／ＭｅＯＨ＝９５／５；ｖ／ｖ）及び再結晶（ヘキサン／酢酸エチル）で順次精製し、６−［４−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェノキシ］−Ｎ−メチルへキサン−１−アミン（３６６ｍｇ、無色固体）を得た。
ESI/APCI MS m/z 274 [M+H]+.
【００４０】
工程１−６：
標識用合成装置として、理化学研究所分子イメージング科学研究センターに設置してある標準型標識用合成装置を用いた。化学薬品は市販のものをそのまま用いた。脱水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（ナカライ社製）、ＨＰＬＣ用アセトニトリル（ナカライ社製）及び酢酸アンモニウム（東京化成社製）を使用した。
11Ｃ核の製造には、住友重機械工業社製サイクロトロンＣＹＰＲＩＳ ＨＭ−１２Ｓを使用し、14Ｎ（ｐ，α）11Ｃの核反応により製造した。［11Ｃ］ヨウ化メチルの合成には、専用の標識用合成装置を用いて、11ＣＯ2ガスを出発物質として、11ＣＯ2→11ＣＨ3ＯＨ→11ＣＨ3Ｉの順に変換して合成した。
一方、工程１−５で得られた化合物（０．５ｍｇ、１．８μｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（０．２ｍＬ）を標識用合成装置の反応容器に準備し、室温に設置した（［11Ｃ］ヨウ化メチルを吹き込む１０−２０分前に設置した）。続いて、本反応溶液に［11Ｃ］ヨウ化メチルを６０−８０ｍＬ／ｍｉｎのガス流量で吹き込み、９０℃で５分間加熱した。得られた反応溶液を０．５ｍＬの洗浄液（アセトニトリル：３０ｍＭ酢酸アンモニウム＝２３：７７溶液）で希釈し、分取ＨＰＬＣを用いて11Ｃ標識化合物Ａを分取し、分取したフラクションを、エバポレーターを用いて減圧濃縮した。濃縮液は臨床用投与溶液（生理食塩水：３ｍＬ）を用いて希釈し、無菌バイヤルに入れた。本溶液の一部（２０μＬ）を分析ＨＰＬＣに供して、目的化合物の同定、純度検定、及び比放射能の算出を行った。なお、11Ｃ標識化合物Ａの同定は非標識化合物Ａを用いて行った。
11Ｃ標識化合物Ａの総放射能：１．５〜２．５ＧＢｑ、合成時間：４０分、放射化学純度：９９％以上、化学的純度：９９％以上、比放射能：６０〜１００ＧＢｑ／μｍｏｌ
分取条件：分取用カラムはナカライ社製ＭＳ−ＩＩ １０ｍｍ×２５０ｍｍ、ガードカラムはナカライ社製ＭＳ−ＩＩ １０ｍｍ×２０ｍｍを使用した。流量は６ｍＬ／ｍｉｎで、移動層は３０ｍＭ ＣＨ3ＣＯＯＮＨ4：ＣＨ3ＣＮ（５％Ｈ2Ｏ添加）＝７７：２３を使用した。ＵＶ検出波長２５４ｎｍ及びγ線検出器で測定した結果、11Ｃ標識化合物Ａの保持時間は約１０分であった。
【００４１】
＜試験例＞
（試験方法）
ラット脳虚血モデルは、栓子法（intraluminal filament method）を用いた６０分間の一過性中大脳動脈閉塞（ｔ−ＭＣＡＯ）により作製した。虚血再灌流後３〜２８日に、11Ｃ標識化合物Ａ（放射比活性４０ＧＢｑ／μｍｏｌ）は、１．５％isoflurane麻酔下のラットに対して埋め込まれたカニューレを通して尾静脈に注入された（２００ＭＢｑ／ｋｇ；１．５μｇ／ｋｇ）。Dynamic PETスキャンは、11Ｃ標識化合物Ａ注入直後から小動物用ＰＥＴスキャナー（microPET focus220）を用いて９０分間実施された。11Ｃ標識化合物Ａの結合能（binding potential）は、小脳を参照領域としてmultilinear reference-tissue model 2（ＭＲＴＭ２）（PMOD Technology, version 3.0）により計算された。
【００４２】
（試験結果）
正常ラットで、11Ｃ標識化合物Ａは腎臓、肝臓等の２０−ＨＥＴＥ産生酵素が豊富に存在する臓器において高い集積を示した。当該化合物は脳においても高い集積を示した。
図１（ａ）及び図１（ｂ）は、ラット脳虚血再灌流後２８日にわたる障害半球（虚血側半球）における11Ｃ標識化合物Ａの集積変化（ＰＥＴスキャン結果）を示す図である。図１（ａ）中の白抜き矢印は、障害半球（虚血側半球）を差し示している。
11Ｃ標識化合物Ａを用いたＰＥＴスキャンにより、ラット脳虚血再灌流後２８日にわたる２０−ＨＥＴＥ産生酵素の変動をモニターしたところ、図１（ａ）及び図１（ｂ）に示したように、虚血再灌流後７日及び１０日に障害半球（虚血側半球）において対照半球（非虚血側半球）よりも11Ｃ標識化合物Ａの高い集積が認められた。当該集積は、過剰量の非標識化合物Ａを同時投与（１０ｍｇ／ｋｇ）することによって消失した（図１（ａ）、図１（ｂ）、図２（ａ）及び図２（ｂ））。
図２（ａ）及び図２（ｂ）は、11Ｃ標識化合物Ａの脳内における集積に対する過剰量非標識化合物Ａ投与の影響を示す図である。図２（ａ）中の白抜き矢印は、障害半球（虚血側半球）を差し示している。
このように、11Ｃ標識化合物Ａは、ラット脳虚血障害時の２０−ＨＥＴＥ産生酵素量の時間依存的な変化について定量的な情報を提供した。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明の化合物は、脳血管障害等の早期診断に有用なＰＥＴ用の放射性リガンドとして利用可能である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）に示される、放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
【化１】
（上記一般式（Ｉ）において、
Ｑは、水素原子又はＣ1〜Ｃ4アルキル基であり、
ｎは、３〜８の整数であり、
Ｒ1は、水素原子、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基又はハロゲン原子であり、
Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基であり、
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基である。
ただし、Ｒ2又はＲ3は、11Ｃを導入したＣ1〜Ｃ4アルキル基である。）
【請求項２】
前記一般式（Ｉ）において、Ｑが水素原子であり、ｎが６であり、Ｒ1が水素原子である、請求項１に記載の放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩を含有する、脳血管障害の診断薬。
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）に示される、放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
【化１】
（上記一般式（Ｉ）において、
Ｑは、水素原子又はＣ1〜Ｃ4アルキル基であり、
ｎは、３〜８の整数であり、
Ｒ1は、水素原子、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基又はハロゲン原子であり、
Ｒ2は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基であり、
Ｒ3は、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基である。
ただし、Ｒ2又はＲ3は、11Ｃを導入したＣ1〜Ｃ4アルキル基である。）
【請求項２】
前記一般式（Ｉ）において、Ｑが水素原子であり、ｎが６であり、Ｒ1が水素原子である、請求項１に記載の放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の放射性炭素標識イミダゾール誘導体又はその製薬学的に許容される塩を含有する、脳血管障害の診断薬。
【図１】
【図２】
【図２】
【公開番号】特開２０１２−２１１１１２（Ｐ２０１２−２１１１１２Ａ）
【公開日】平成２４年１１月１日（２０１２．１１．１）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−７８１６０（Ｐ２０１１−７８１６０）
【出願日】平成２３年３月３１日（２０１１．３．３１）
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）平成２１年度、文部科学省、科学技術試験研究委託事業、産業技術力強化法第１９条の適用を受ける特許出願
【出願人】（０００００２８１９）大正製薬株式会社 (437)
【出願人】（５０３３５９８２１）独立行政法人理化学研究所 (1,056)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年１１月１日（２０１２．１１．１）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年３月３１日（２０１１．３．３１）
【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）平成２１年度、文部科学省、科学技術試験研究委託事業、産業技術力強化法第１９条の適用を受ける特許出願
【出願人】（０００００２８１９）大正製薬株式会社 (437)
【出願人】（５０３３５９８２１）独立行政法人理化学研究所 (1,056)
【Ｆターム（参考）】
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