新規なチアゾール誘導体、及びその製造方法
【課題】 免疫グロブリンの分析または精製のための低分子化合物を提供すること。
【解決手段】 免疫グロブリンの分析または精製に有用な、一般式（１）
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３はフタルイミド基、アミノ基又はアンモニウム塩であることを表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表す。）で表されるチアゾール誘導体を提供するものである。
【解決手段】 免疫グロブリンの分析または精製に有用な、一般式（１）
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３はフタルイミド基、アミノ基又はアンモニウム塩であることを表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表す。）で表されるチアゾール誘導体を提供するものである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タンパク質、特に免疫グロブリンの分析または精製に利用可能なチアゾール誘導体、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、医療用タンパク質の需要は拡大しつつあり、その簡便で大規模に実施できる工業的精製技術の確立が切望されている。一般にタンパク質精製技術には、ゲル透過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、およびアフィニティークロマトグラフィーのようなクロマトグラフィー分離技術があるが、医療用タンパク質の精製を工業的に実施する場合には、実験室で用いられるような分離剤や装置を使用したのでは経済性に乏しく、実用的とは言い難い。また、医療用タンパク質を工業的に製造する過程では多種類のタンパク質が混在しているため、上記の中の一つの精製技術を用いて目的とするタンパク質を純粋に得ることは極めて困難である。そのため通常はいくつかの技術を複合させた精製プロセスが採用されている（特許文献１）。
【０００３】
近年、医療用タンパク質の一つである免疫グロブリンを精製するための低分子化合物とそれらが結合したマトリックスが数多く開示されており、スルホン誘導体（特許文献２）、トリアジン誘導体（特許文献３）、メルカプト複素環式化合物（特許文献４）、４−ピリジルエチルチオアルキル誘導体（非特許文献１）等の低分子やそれらが結合したマトリックスが知られている。しかしながら、本発明のチアゾール誘導体（１）が免疫グロブリンを精製するための低分子化合物として有用であるとの報告はない。また、特許文献５や非特許文献２に本発明のチアゾール誘導体（１）に類似の化学構造を有するチアゾール誘導体が報告されているものの、これらの文献に記載のチアゾール誘導体の化学構造は、チアゾール環の２位がアミノ基あるいはアルキル基に限定されており、本発明のチアゾール誘導体（１）のように２位にベンゾイルアミノ基が置換した化合物についての記載はない。とりわけ非特許文献２に記載の化合物は、本発明のチアゾール誘導体（１）に類似のチアゾール誘導体ではあるものの、それらの用途はヒスタミンＨ２レセプターアゴニストとしての用途に限定されており、免疫グロブリンを精製するための用途についての記載はない。
【０００４】
なお、特許文献６には２位にベンゾイルアミノ基が置換したチアゾール誘導体が記載されているが、これらの化合物の４位の置換基はカルボニル、５位は無置換にそれぞれ限定されている。それらの用途としては消化管運動改善作用を有する医薬の有効成分に言及されており、免疫グロブリンを精製するための用途についての記載はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】ＷＯ２００４／０８７７６１号
【特許文献２】米国特許４６９６９８０号
【特許文献３】米国特許６１１７９９６号
【特許文献４】特許第３８４４４９６号
【特許文献５】ＷＯ１９９１／１０６５６号
【特許文献６】ＷＯ１９９８／１７６５４号
【特許文献７】ＷＯ１９８９／１０３６０号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｂｉｏｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，９（４），２１１−２２１，２０００
【非特許文献２】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３５（１７），３２３９−３２４６，１９９２
【非特許文献３】はじめてのリガンドカップリングハンドブック、アマシャムバイオサイエンス株式会社刊、２００５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明が解決しようとする課題は、免疫グロブリンの分析または精製に有用なチアゾール誘導体、及びその製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、本発明の下記一般式（１）で示されるチアゾール誘導体が、免疫グロブリンと選択的に相互作用することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
本発明は、一般式（１）
【００１０】
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３はフタルイミド基、アミノ基又はアンモニウム塩であることを表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表す。）で表されるチアゾール誘導体に関するものである。
【００１１】
また本発明は、一般式（２）
【００１２】
【化２】
（式中、Ｒ１及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｙは脱離基を表す。）で表されるフタルイミド誘導体と、一般式（３）
【００１３】
【化３】
（式中、Ｒ２及びＡｒは前記と同じ意味を表す。）で表されるアシルチオウレア誘導体を反応させることを特徴とする、一般式（１ａ）
【００１４】
【化４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法に関するものである。
【００１５】
また本発明は、一般式（４）
【００１６】
【化５】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びｎは前記と同じ意味を表す。）で表されるチアゾール誘導体と一般式（５）
【００１７】
【化６】
（式中、Ａｒは前記と同じ意味を表し、Ｗはハロゲン原子を表す。）で示される酸ハロゲン化物を塩基存在下にて反応させ、一般式（１ａ）
【００１８】
【化７】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法に関するものである。
【００１９】
また本発明は、一般式（１ａ）
【００２０】
【化８】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で表されるチアゾール誘導体を塩基によって処理し、一般式（１ａ’）
【００２１】
【化９】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）を得た後、酸によって処理することを特徴とする、一般式（１ａ’’）
【００２２】
【化１０】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｚ−は共役塩基を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法に関するものである。
【００２３】
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
【００２４】
本発明のチアゾール誘導体における、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びＹで表される置換基、並びにＲ３で表されるアンモニウム塩（Ｚ−Ｈ３＋Ｎ）の定義を以下に示す。
【００２５】
Ｒ１及びＲ２で表される炭素数１から６のアルキル基としては、直鎖状もしくは分枝状のいずれであってもよく、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソアミル基、ネオペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基を例示することができる。また、これらの炭素数１から６のアルキル基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、さらに具体的にはジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、パーフルオロブチル基、ヒドロキシメチル基、カルボキシメチル基、４−モルホリノカルボニルメチル基等を例示することができる。なお、性能が良い点で、Ｒ１はメチル基が好ましく、Ｒ２は水素原子が好ましい。
【００２６】
Ｒ３で表されるアンモニウム塩はＺ−Ｈ３＋Ｎ（Ｚ−は共役塩基を表す。）で表され、具体的にはＣｌ−Ｈ３＋Ｎ、Ｂｒ−Ｈ３＋Ｎ、Ｆ−Ｈ３＋Ｎ、Ｉ−Ｈ３＋Ｎ、ＮＯ３−Ｈ３＋Ｎ、１／２（ＳＯ４２−）Ｈ３＋Ｎ、１／３（ＰＯ４３−）Ｈ３＋Ｎ、ＣＨ３ＳＯ３−Ｈ３＋Ｎ、４−ＣＨ３Ｃ６Ｈ４ＳＯ３−Ｈ３＋Ｎ、ＣＨ３ＣＯＯ−Ｈ３＋Ｎ、ＣＦ３ＣＯＯ−Ｈ３＋Ｎ等を例示することができるが、反応の操作性や化合物の単離が簡便な点でＣｌ−Ｈ３＋Ｎ又はＢｒ−Ｈ３＋Ｎが好ましい。
【００２７】
Ａｒで表される芳香族基は特に制限はないが、フラン−２−イル基、フリル基、チエニル基、チオフェン−３−イル基、ピロール−２−イル基、ピロール−３−イル基、ピラゾール−３−イル基、ピラゾール−４−イル基、イソチアゾール−３−イル基、イソチアゾール−４−イル基、イソキサゾール−３−イル基、イソキサゾール−４−イル基、イミダゾール−２−イル基、イミダゾール−４−イル基、イミダゾール−５−イル基、オキサゾール−２−イル基、オキサゾール−４−イル基、オキサゾール−５−イル基、チアゾール−２−イル基、チアゾール−４−イル基、チアゾール−５−イル基、１，２，４−トリアゾール−３−イル基、フェニル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基、２−ピリミジル基、４−ピリミジル基、５−ピリミジル基、１，２，４−トリアジン−３−イル基、１，２，４−トリアジン−５−イル基、１，２，４−トリアジン−６−イル基、ベンゾジオキソラン−３−イル基、ベンゾフラン−２−イル基、ベンゾフラン−３−イル基、ベンゾフラン−４−イル基、ベンゾフラン−５−イル基、ベンゾフラン−６−イル基、ベンゾフラン−７−イル基、ベンゾチオフェン−２−イル基、ベンゾチオフェン−３−イル基、ベンゾチオフェン−４−イル基、ベンゾチオフェン−５−イル基、ベンゾチオフェン−６−イル基、ベンゾチオフェン−７−イル基、インドール−２−イル基、インドール−３−イル基、インドール−４−イル基、インドール−５−イル基、インドール−６−イル基、インドール−７−イル基、ベンゾチアゾール−２−イル基、ベンゾチアゾール−４−イル基、ベンゾチアゾール−５−イル基、ベンゾチアゾール−６−イル基、ベンゾチアゾール−７−イル基、インダゾール−３−イル基、インダゾール−４−イル基、インダゾール−５−イル基、インダゾール−６−イル基、インダゾール−７−イル基、ベンズイソキサゾール−３−イル基、ベンズイソキサゾール−４−イル基、ベンズイソキサゾール−５−イル基、ベンズイソキサゾール−６−イル基、ベンズイソキサゾール−７−イル基、ナフタレン−１−イル基、ナフタレン−２−イル基、キノリン−２−イル基、キノリン−３−イル基、キノリン−４−イル基、キノリン−５−イル基、キノリン−６−イル基、キノリン−７−イル基、キノリン−８−イル基、キノキサリニル基、キノキサリン−５−イル基、キノキサリン−６−イル基、キナゾリニル基、キナゾリン−４−イル基、キナゾリン−５−イル基、キナゾリン−６−イル基、キナゾリン−７−イル基、キナゾリン−８−イル基、ベンゾオキサジン−５−イル基、ベンゾオキサジン−６−イル基、ベンゾオキサジン−７−イル基、ベンゾオキサジン−８−イル基、ベンゾチアジン−５−イル基、ベンゾチアジン−６−イル基、ベンゾチアジン−７−イル基、ベンゾチアジン−８−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−６−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−７−イル基、アントラセン−１−イル基を例示できる。特に、免疫グロブリンの分析または精製において良好な性能を示す点で、Ａｒはフェニル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基あるいは４−ピリジル基が好ましい。
【００２８】
Ａｒで表される置換されていてもよい芳香族基の置換基としては、特に制限はないが、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、水酸基又はシアノ基が好ましい。
【００２９】
ハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子あるいはヨウ素原子を例示することができる。
【００３０】
置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基としては、直鎖状、分枝状もしくは環状のいずれであってもよく、メチル基、エチル基、シクロプロピル基、プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソアミル基、ネオペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、２−メチルブチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基を例示することができる。また、これらの炭素数１から６のアルキル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アシル基、置換されていてもよい芳香族基で１個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチル基、３−クロロプロピル基、ジフルオロメチル基、３−フルオロプロピル基、メトキシメチル基、２−エトキシエチル基、シクロプロピルメチル基、シクロペンチルメチル基、シクロヘキシルメチル基、２−メチルチオエチル基、２−エチルチオエチル基、２−アリルチオエチル基、２−プロパルギルチオエチル基、２−ベンジルチオエチル基、２−（２−クロロベンジル）チオエチル基、２−（２，４−ジクロロベンジル）チオエチル基、２−メチルスルフィニルエチル基、２−メチルスルホニルエチル基、エトキシメチル基、２−メトキシエチル基、２−クロロエトキシメチル基、メトキシカルボニルメチル基、エトキシカルボニルメチル基、１−メトキシカルボニルエチル基、１−エトキシカルボニルエチル基、２−エトキシカルボニルエチル基、カルボキシメチル基、アセトニル基、１−アセチルエチル基、３−アセチルプロピル基、フェナシル基、４−クロロフェナシル基、２，４−ジフルオロフェナシル基、４−メチルフェナシル基、４−イソプロピルフェナシル基、４−イソブチルフェナシル基、４−シクロヘキシルフェナシル基、４−シアノフェナシル基、４−ニトロフェナシル基、チエニル基、２−（チオフェン−２−イル）エチル基、２−（チオフェン−３−イル）エチル基、フルフリル基、（５−メチルフラン−２−イル）メチル基、（５−エチルフラン−２−イル）メチル基、（５−クロロフラン−２−イル）メチル基、２−（５−フルオロフラン−２−イル）エチル基、テトラヒドロフルフリル基、２−ピリジルメチル基、３−ピリジルメチル基、４−ピリジルメチル基、２−（ピリジン−２−イル）エチル基、２−（ピリジン−３−イル）エチル基、２−（ピリジン−４−イル）エチル基、３−（ピリジン−２−イル）プロピル基、３−（ピリジン−３−イル）プロピル基、３−（ピリジン−４−イル）プロピル基を例示することができる。
【００３１】
置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基としては、直鎖状もしくは分枝状のいずれであってもよく、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブトキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ−ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソアミルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、２−ペンチルオキシ基、３−ペンチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシルオキシ基、デセニルオキシ基を例示することができる。また、これらのアルコキシ基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アシル基、置換されていてもよい芳香族基等で１個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエトキシ基、３−クロロプロピルオキシ基、ジフルオロメトキシ基、４−トリフルオロメトキシ基、３−フルオロプロピルオキシ基、シクロプロピルメトキシ基、シクロペンチルメトキシ基、シクロヘキシルメトキシ基、２−メチルチオエトキシ基、２−エチルチオエトキシ基、２−アリルチオエトキシ基、２−プロパルギルチオエトキシ基、２−ベンジルチオエトキシ基、２−（２−クロロベンジル）チオエトキシ基、２−（２，４−ジクロロベンジル）チオエトキシ基、２−メチルスルフィニルエトキシ基、２−メチルスルホニルエトキシ基、メトキシメトキシ基、エトキシメトキシ基、２−メトキシエトキシ基、２−クロロエトキシメトキシ基、メトキシカルボニルメトキシ基、エトキシカルボニルメトキシ基、１−メトキシカルボニルエトキシ基、１−エトキシカルボニルエトキシ基、２−エトキシカルボニルエトキシ基、カルボキシメトキシ基、１−アセチルエトキシ基、３−アセチルプロポキシ基、２−ピリジルメトキシ基、３−ピリジルメトキシ基、４−ピリジルメトキシ基、２−（ピリジン−２−イル）エトキシ基、２−（ピリジン−３−イル）エトキシ基、２−（ピリジン−４−イル）エトキシ基、３−（ピリジン−２−イル）プロポキシ基、３−（ピリジン−３−イル）プロポキシ基、ベンジルオキシ基を例示することができる。
【００３２】
置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基としては、シクロプロピルオキシ基、シクロブチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、２−メチルシクロブチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、２−メチルシクロペンチルオキシ基、３−メチルシクロペンチルオキシ基、４−メチルシクロペンチルオキシ基、シクロオクチルオキシ基を例示することができる。
【００３３】
置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基としては、アリルオキシ基、２−メチル−２−プロペニルオキシ基、２−ブテニルオキシ基、１−ブテン−３−イルオキシ基、３−ブテニルオキシ基、４−ペンテニルオキシ基、５−ヘキセニルオキシ基を例示することができる。また、これらの炭素数３から６のアルケニルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、３，３−ジフルオロアリルオキシ基、３，３−ジクロロアリルオキシ基、３，３−ジブロモアリルオキシ基を例示することができる。
【００３４】
置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基としては、プロパルギルオキシ基、１−ブチン−３−イルオキシ基、２−ブチニルオキシ基、３−ブチニルオキシ基、２−ペンチニルオキシ基、３−ペンチニルオキシ基、４−ペンチニルオキシ基、２−ヘキシニルオキシ基、３−ヘキシニルオキシ基、４−ヘキシニルオキシ基、５−ヘキシニルオキシ基を例示することができる。また、これらの置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、４，４，４−トリフルオロブチン−２−イル基等を例示することができる。
【００３５】
置換されていてもよいアシルオキシ基としては、アセトキシ基、プロピオニルオキシ基を例示することができる。また、これらの置換されていてもよいアシルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、トリフルオロアセトキシ基や２，２，２−トリフルオロプロピオニルオキシ基等を例示することができる。
【００３６】
置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基としては、メチルチオ基、エチルチオ基、プロピルチオ基、イソプロピルチオ基、ブチルチオ基、イソブチルチオ基、ｓｅｃ−ブチルチオ基、ペンチルチオ基、イソアミルチオ基、ネオペンチルチオ基、２−ペンチルチオ基、３−ペンチルチオ基、２−メチルブチルチオ基、ヘキシルチオ基、イソヘキシルチオ基、３−メチルペンチルチオ基、２−メチルペンチルチオ基を例示することができる。また、これらのアルキルチオ基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルチオ基、３−クロロプロピルチオ基、ジフルオロメチルチオ基、３−フルオロプロピルチオ基、シクロプロピルメチルチオ基、シクロペンチルメチルチオ基、シクロヘキシルメチルチオ基を例示することができる。
【００３７】
置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基としては、メチルスルフィニル基、エチルスルフィニル基、プロピルスルフィニル基、イソプロピルスルフィニル基、ブチルスルフィニル基、イソブチルスルフィニル基、ｓｅｃ−ブチルスルフィニル基、ペンチルスルフィニル基、イソアミルスルフィニル基、ネオペンチルスルフィニル基、２−ペンチルスルフィニル基、３−ペンチルスルフィニル基、２−メチルブチルスルフィニル基、ヘキシルスルフィニル基、イソヘキシルスルフィニル基、３−メチルペンチルスルフィニル基、２−メチルペンチルスルフィニル基を例示することができる。また、これらのアルキルスルフィニル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルスルフィニル基、３−クロロプロピルスルフィニル基、ジフルオロメチルスルフィニル基、３−フルオロプロピルスルフィニル基、シクロプロピルメチルスルフィニル基、シクロペンチルメチルスルフィニル基、シクロヘキシルメチルスルフィニル基を例示することができる。
【００３８】
置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基としては、メチルスルホニル基、エチルスルホニル基、プロピルスルホニル基、イソプロピルスルホニル基、ブチルスルホニル基、イソブチルスルホニル基、ｓｅｃ−ブチルスルホニル基、ペンチルスルホニル基、イソアミルスルホニル基、ネオペンチルスルホニル基、２−ペンチルスルホニル基、３−ペンチルスルホニル基、２−メチルブチルスルホニル基、ヘキシルスルホニル基、イソヘキシルスルホニル基、３−メチルペンチルスルホニル基、２−メチルペンチルスルホニル基を例示することができる。また、これらのアルキルスルホニル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルスルホニル基、３−クロロプロピルスルホニル基、ジフルオロメチルスルホニル基、３−フルオロプロピルスルホニル基、シクロプロピルメチルスルホニル基、シクロペンチルメチルスルホニル基、シクロヘキシルメチルスルホニル基を例示することができる。
【００３９】
置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基としては、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、ヘキシルオキシカルボニル基、ドデシルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を例示することができる。また、これらのアルコキシカルボニル基はハロゲン原子等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的にはトリフルオロメトキシカルボニル基、２，２，２−トリフルオロエトキシカルボニル基等を例示することができる。
【００４０】
置換されていてもよいアミノ基としては、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、ジエチルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−プロピルアミノ基、２，２，２−トリフルオロエチルアミノ基、ジプロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−イソプロピルアミノ基、ブチルアミノ基、Ｎ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、イソブチルアミノ基、ｓｅｃ−ブチルアミノ基、ペンチルアミノ基、イソアミルアミノ基、ネオペンチルアミノ基、２−ペンチルアミノ基、３−ペンチルアミノ基、２−メチルブチルアミノ基、ヘキシルアミノ基、イソヘキシルアミノ基、４−メチルペンチルアミノ基、ベンゼンスルホニルアミノ基、Ｎ−ベンゼンスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、ｐ−トルエンスルホニルアミノ基、４−クロロベンゼンスルホニルアミノ基、４−ニトロベンゼンスルホニルアミノ基、メチルスルホニルアミノ基、クロロメチルスルホニルアミノ基、トリフルオロメチルスルホニルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−エチルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−プロピルアミノ基、エチルスルホニルアミノ基、Ｎ−エチルスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−エチルスルホニル−Ｎ−エチルアミノ基、メトキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基を例示することができる。
【００４１】
Ａｒで表される置換されていてもよい芳香族基としては、特に制限はないが、フラン−２−イル基、５−ブロモフラン−２−イル基、５−メチルフラン−２−イル基、フリル基、チエニル基、５−クロロチエニル基、５−ブロモチエニル基、５−メチルチエニル基、５−メトキシチエニル基、５−エトキシチエニル基、チオフェン−３−イル基、５−メチルチオフェン−３−イル基、５−メトキシチオフェン−３−イル基、５−エトキシチオフェン−３−イル基、１−メチルピロール−２−イル基、１−メチルピロール−３−イル基、１−エチルピラゾール−３−イル基、ピラゾール−２−イル基、３−エトキシ−１−メチルピラゾール−２−イル基、１−エチル−４−メトキシピラゾール−３−イル基、イソチアゾール−３−イル基、５−メトキシイソチアゾール−３−イル基、イソチアゾール−４−イル基、イソキサゾール−３−イル基、イソキサゾール−４−イル基、１−メチルイミダゾール−２−イル基、１−メチルイミダゾール−４−イル基、１−メチルイミダゾール−５−イル基、オキサゾール−２−イル基、オキサゾール−４−イル基、オキサゾール−５−イル基、チアゾール−２−イル基、３−メトキシチアゾール−２−イル基、４−メトキシチアゾール−２−イル基、チアゾール−４−イル基、チアゾール−５−イル基、１，２，４−トリアゾール−３−イル基、１，２，４−トリアゾール−５−イル基、フェニル基、２−フルオロフェニル基、３−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、２，３−ジフルオロフェニル基、３，５−ジフルオロフェニル基、３，４，５−トリフルオロフェニル基、２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル基、３−フロオロ−４−メチルフェニル基、４−トリフルオロメトキシフェニル基、２−クロロフェニル基、３−クロロフェニル基、４−クロロフェニル基、４−クロロ−３−メチルフェニル基、４−クロロ−３−エチルフェニル基、４−クロロ−３−メトキシフェニル基、４−クロロ−３−エトキシフェニル基、２，３−ジクロロフェニル基、３，５−ジクロロフェニル基３，４，５−トリクロロフェニル基、３−トリフルオロメチルフェニル基、４−トリフルオロメチルフェニル基、３−ブロモフェニル基、４−ブロモフェニル基、４−ブロモ−３−メチルフェニル基、４−ブロモ−３−エチルフェニル基、４−ブロモ−３−メトキシフェニル基、４−ブロモ−３−エトキシフェニル基、３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル基、３−ヨードフェニル基、４−ヨードフェニル基、４−ヨード−３−メチルフェニル基、４−ヨード−３−エチルフェニル基、４−ヨード−３−メトキシフェニル基、４−ヨード−３−エトキシフェニル基、２−メチルフェニル基、３−メチルフェニル基、４−メチルフェニル基、３，４−ジメチルフェニル基、３，４，５−トリメチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル基、２−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、３−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、４−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、４−メトキシメチルフェニル基、３，４−ジエトキシフェニル基、３−エチル−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、３，４−ジエチルフェニル基、４−プロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、３−ブチルフェニル基、４−ブチルフェニル基、４−イソブチルフェニル基、４−（ｓｅｃ−ブチル）フェニル基、４−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル基、４−ペンチルフェニル基、４−イソアミルフェニル基、４−ネオペンチルフェニル基、４−（２−ペンチル）フェニル基、４−（３−ペンチル）フェニル基、４−（２−メチルブチル）フェニル基、４−（ｔｅｒｔ−ペンチル）フェニル基、４−ヘキシルフェニル基、４−イソヘキシルフェニル基、４−（２−クロロエチル）フェニル基、４−（３−クロロプロピル）フェニル基、４−（ジフルオロメチル）フェニル基、４−（３−フルオロプロピル）フェニル基、４−メトキシメチルフェニル基、４−エトキシメチルフェニル基、４−シクロプロピルメチルフェニル基、４−シクロペンチルメチルフェニル基、シクロヘキシルメチルフェニル基、４−（２−メチルチオエチル）フェニル基、４−（２−エチルチオエチル）フェニル基、４−（２−アリルチオエチル）フェニル基、４−（２−プロパルギルチオエチル）フェニル基、４−（２−ベンジルチオエチル）フェニル基、３−メトキシフェニル基、３−メトキシ−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メトキシフェニル基、３−メトキシ−４−プロピルフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−メトキシ−３−メトキシフェニル基、３，４−ジメトキシフェニル基、３−エトキシ−４−メトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メトキシフェニル基、４−イソプロピルオキシ−３−メトキシフェニル基、３−イソプロピルオキシ−４−メトキシフェニル基、３−エトキシフェニル基、４−エトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メチルフェニル基、４−エトキシ−３−エチルフェニル基、４−エトキシ−３−プロピルフェニル基、４−エトキシ−３−イソプロピルフェニル基、４−プロピルオキシフェニル基、４−イソプロピルオキシフェニル基、４−ブトキシフェニル基、４−イソブチルオキシフェニル基、４−（ｓｅｃ−ブチルオキシ）フェニル基、３−（２−クロロエトキシ）フェニル基、３−（２−クロロエトキシ）フェニル基、４−（２−クロロエトキシ）フェニル基、３−（３−クロロプロピルオキシ）フェニル基、４−（３−クロロプロピルオキシ）フェニル基、３−ジフルオロメトキシフェニル基、４−ジフルオロメトキシフェニル基、４−（３−フルオロプロピルオキシフェニル基）、４−シクロプロピルメトキシフェニル基、４−シクロペンチルメトキシ基、４−シクロヘキシルメトキシ基、３−シクロプロピルオキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシ−３−メトキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシ−３−メチルフェニル基、４−シクロブチルオキシフェニル基、４−シクロペンチルオキシフェニル基、４−（２−メチルシクロブチルオキシ）フェニル基、４−シクロヘキシルオキシフェニル、４−アリルオキシフェニル基、４−（３，３−ジクロロアリルオキシ）フェニル基、４−プロパルギルオキシフェニル基、３−メチル−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−エチル−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−メトキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−エトキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−プロポキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、４−（１−ブチン−３−イルオキシ）フェニル基、４−（２−ブチニルオキシ）フェニル基、３−メチルチオフェニル基、４−メチルチオフェニル基、４−メチル−３−メチルチオフェニル基、３−メチル−４−メチルチオフェニル基、４−メトキシ−３−メチルチオフェニル基、３−エトキシ−４−メチルチオフェニル基、４−エトキシ−３−メチルチオフェニル基、３−プロポキシ−４−メチルチオフェニル基、４−エチルチオフェニル基、３−プロピルチオフェニル基、４−イソプロピルチオフェニル基、４−ブチルチオフェニル基、４−イソブチルチオフェニル基、２−（ｓｅｃ−ブチルチオ）フェニル基、２−ペンチルチオフェニル基、２−イソアミルチオフェニル基、４−ネオペンチルチオフェニル基、４−（２−クロロエチルチオ）フェニル基、３−（３−クロロプロピルチオ）フェニル基、ジフルオロメチルチオフェニル基、３−アセトキシフェニル基、４−アセトキシフェニル基、３−メチルスルフィニルフェニル基、４−メチルスルフィニルフェニル基、４−メトキシ−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−メトキシ−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−エトキシ−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−エトキシ−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−メチル−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−エチル−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−（２−クロロエチルスル）フィニルフェニル基、４−（３−クロロプロピルスルフィニル）フェニル基、４−（ジフルオロメチルスルフィニル）フェニル基、３−メチルスルホニルフェニル基、４−メチルスルホニルフェニル基、４−メチル−３−メチルスルホニルフェニル基、４−エチル−３−メチルスルホニルフェニル基、４−メトキシ−３−メチルスルホニルフェニル基、４−エトキシ−３−メチルスルホニルフェニル基、３−メトキシ−４−メチルスルホニルフェニル基、３−エトキシ−４−メチルスルホニルフェニル基、エチルスルホニルフェニル基、プロピルスルホニルフェニル基、イソプロピルスルホニルフェニル基、ブチルスルホニルフェニル基、２−クロロエチルスルホニルフェニル基、３−クロロプロピルスルホニルフェニル基、ジフルオロメチルスルホニルフェニル基、４−カルボキシフェニル基、４−メトキシカルボニルフェニル基、４−エトキシカルボニルフェニル基、３−メチルアミノフェニル基、４−メチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−メチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−メチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−メチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−メチルアミノフェニル基、４−メチル−３−メチルアミノフェニル基、３−メチル−４−メチルアミノフェニル基、４−エチル−３−メチルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノフェニル基、４−ジメチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−ジメチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−ジメチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−ジメチルアミノフェニル基、４−メチル−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジメチルアミノフェニル基、４−エチル−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジメチルアミノフェニル基、３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−メトキシ−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メトキシ−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−エトキシ−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−エトキシ−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−メチル−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メチル−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−エチル−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メチル−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−ジエチルアミノフェニル基、４−ジエチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−ジエチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−ジエチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−ジエチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−ジエチルアミノフェニル基、４−メチル−３−ジエチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジエチルアミノフェニル基、４−エチル−３−ジエチルアミノフェニル基、４−メチルスルホニルアミノフェニル基、４−トリフルオロメチルスルホニルアミノフェニル基、４−アセチルアミノフェニル基、２−ヒドロキシフェニル基、３−ヒドロキシフェニル基、４−ヒドロキシフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−エチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル基、４−ヒドロキシ−３−メチルフェニル基、４−ヒドロキシ−３−エチルフェニル基、４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル基、２−シアノフェニル基、３−シアノフェニル基、４−シアノフェニル基、２−ニトロフェニル基、３−ニトロフェニル基、３−ニトロ−４−メチルフェニル基、４−ニトロフェニル基、ピリジン−２−イル基、５−クロロピリジン−２−イル基、５−メチルピリジン−２−イル基、５−エチルピリジン−２−イル基、５−メトキシピリジン−２−イル基、５−エトキシピリジン−２−イル基、２，３−ジメチルピリジン−６−イル基、２，３−ジメトキシピリジン−６−イル基、ピリジル−３−イル基、２−クロロピリジン−５−イル基、２−メチルピリジン−５−イル基、２−エチルピリジン−５−イル基、２−メトキシピリジン−５−イル基、２−
エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、ピリジル−４−イル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、２−ピリミジル基、５−メチルピリミジン−２−イル基、５−エチルピリミジン−２−イル基、２−エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、５−クロロピリミジン−２−イル基、５−ブロモピリミジン−２−イル基、５−メトキシピリミジン−２−イル基、ピリミジル−４−イル基、ピリミジル−５−イル基、１，２，４−トリアジン−３−イル基、１，２，４−トリアジン−５−イル基、１，２，４−トリアジン−６−イル基、ベンゾジオキソラン−３−イル基、ベンゾフラン−２−イル基、ベンゾフラン−３−イル基、ベンゾフラン−４−イル基、ベンゾフラン−５−イル基、ベンゾフラン−６−イル基、ベンゾフラン−７−イル基、ベンゾチオフェン−２−イル基、ベンゾチオフェン−３−イル基、ベンゾチオフェン−４−イル基、ベンゾチオフェン−５−イル基、ベンゾチオフェン−６−イル基、ベンゾチオフェン−７−イル基、１−メチルインドール−２−イル基、ベンゾチアゾール−２−イル基、ベンゾチアゾール−４−イル基、ベンゾチアゾール−５−イル基、ベンゾチアゾール−６−イル基、ベンゾチアゾール−７−イル基、ベンズイソキサゾール−３−イル基、ベンズイソキサゾール−４−イル基、ベンズイソキサゾール−５−イル基、ベンズイソキサゾール−６−イル基、ベンズイソキサゾール−７−イル基、ナフタレン−１−イル基、ナフタレン−２−イル基、キノリン−２−イル基、キノリン−３−イル基、キノリン−４−イル基、キノリン−５−イル基、キノリン−６−イル基、キノリン−７−イル基、キノリン−８−イル基、キノキサリン−５−イル基、キノキサリン−６−イル基、キナゾリン−４−イル基、キナゾリン−５−イル基、キナゾリン−６−イル基、キナゾリン−７−イル基、キナゾリン−８−イル基、ベンゾオキサジン−５−イル基、ベンゾオキサジン−６−イル基、ベンゾオキサジン−７−イル基、ベンゾオキサジン−８−イル基、ベンゾチアジン−５−イル基、ベンゾチアジン−６−イル基、ベンゾチアジン−７−イル基、ベンゾチアジン−８−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−６−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−７−イル基、アントラセン−１−イル基等を例示することができる。
【００４２】
特に免疫グロブリンの分析または精製において良好な性能を示す点で、Ａｒは４−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、３，４−ジメチルフェニル基、３−エチル−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メチルフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−エトキシフェニル基、３，４−ジメトキシフェニル基、３，４−ジエトキシフェニル基、３−エトキシ−４−メトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メトキシフェニル基、４−メトキシ−３−メチルフェニル基、４−メチル−３−エトキシフェニル基、４−ジメチルアミノフェニル基、２−メトキシピリジン−５−イル基、２−エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、４−ピリジル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、２−クロロピリジン−５−イル基、３−メトキシ−４−メチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル基、４−メチルチオフェニル基のいずれかが好ましい。
【００４３】
Ｙで表される脱離基としては、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、メチルスルホニルオキシ基、トシル基等を挙げることができる。目的物の収率が良い点で、臭素原子が好ましい。
【００４４】
ｎについては、１から１２の整数から適宜選択することができるが、特に本発明のチアゾール誘導体としては、ｎが３，４又は５が好ましい。
【００４５】
次に、本発明のチアゾール誘導体の製造方法を詳細に説明する。
【００４６】
製造方法１
【００４７】
【化１１】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｙは脱離基を表す。）
工程１はフタルイミド誘導体（２）をアシルチオウレア誘導体（３）と反応させ、チアゾール誘導体（１ａ）を製造する方法である。フタルイミド誘導体（２）は非特許文献２や特許文献７等を参考に調製することができる。
【００４８】
工程１の反応では、反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができ、例えば、ジエチルエ−テル、テトラヒドロフラン（以下ＴＨＦ）、１，２−ジメトキシエタン（以下ＤＭＥ）、１，４−ジオキサン等のエ−テル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（以下ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド系溶媒、メタノール、エタノール等のアルコール系溶媒、ジメチルスルホキシド（以下ＤＭＳＯ）、水あるいはこれらの混合溶媒を用いることができ、収率が良い点でＤＭＦを用いるのが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができ、収率が良い点で６０℃から１５０℃の範囲で反応させるのが好ましい。本工程では、塩基存在下に行なうこともでき、塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、トリエチルアミン、トリブチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、ジメチルアニリン等の有機アミン類を用いることができる。塩基の使用量は特に制限はないが、反応基質に対して等量以上用いて反応を実施することにより、収率良く目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィーあるいは再結晶等の方法により精製することもできる。
【００４９】
工程２はチアゾール誘導体（１ａ）を塩基で処理し、本発明のチアゾール誘導体（１）を製造する方法である。塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、メチルアミン、エチルアミン、ジメチルアミン等の有機アミン類、ヒドラジン類を用いることができる。収率が良い点でヒドラジンあるいはメチルアミンが好ましい。塩基の使用量は反応基質に対して２等量以上用いて反応を実施することにより、収率良く目的物を得ることができる。本反応では、反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができ、例えば、ジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド系溶媒、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール系溶媒、ＤＭＳＯ、水あるいはこれらの混合溶媒を用いることができ、収率が良い点や後処理が簡便である点でメタノールやエタノール等のアルコール系溶媒を用いることが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィーあるいは再結晶等の方法により精製することもできる。また、反応終了後、酸で処理しアンモニウム塩として単離することもできる。反応に害を及ぼさない酸であれば使用することができ、例えば、塩酸、臭化水素酸、フッ酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸、メタンスルホン酸やトルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸等の有機酸を用いることができるが、目的物の単離が容易であることから塩酸を用いるのが好ましい。
【００５０】
製造方法２
【００５１】
【化１２】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｗはハロゲン原子を表す。）
製造方法２は２−置換アミノチアゾール誘導体（４）と酸ハロゲン化物（５）を反応させ、チアゾール誘導体（１ａ）を製造する方法である。当該方法の反応では、反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができ、例えば、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒、ジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド系溶媒、ＤＭＳＯ、水あるいはこれらの混合溶媒を用いることができ、収率が良い点でジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒を用いるのが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができ、収率が良い点で０℃から１００℃の範囲で反応させるのが好ましい。本工程では、塩基存在下に行なうこともでき、塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、トリエチルアミン、トリブチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、ジメチルアニリン等の有機アミン類を用いることができる。塩基の使用量は特に制限はないが、反応基質に対して等量以上用いて反応を実施することにより、収率良く目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィーあるいは再結晶等により精製することもできる。当該方法で合成されたチアゾール誘導体（１ａ）は、製造方法１の工程２を経由することによって、チアゾール誘導体（１）へと導くことができる。
【００５２】
上記の工程にて製造された新規なチアゾール誘導体（１）は、チアゾール誘導体（１）が固定化できる活性化基を有するマトリックスに固定して、タンパク質、特に免疫グロブリンＧの精製に用いることかできる。ここで言う活性化基とは、一般式（１）のＲ３で定義されるアミノ基やそのアンモニウム塩を場合によっては塩基存在下にて反応させた時に容易に共有結合を形成できる官能基のことで、例えば、スクシンイミドオキシカルボニル基、ホルミル基、カルボキシル基、２，２，２−トリフルオロエチルスルホニルオキシ基（トレシル基）、塩化スルホニル基、トシル基、ビニルスルホニル基、エポキシ基をあげることができる。また、チアゾール誘導体（１）を固定化できるマトリックスの材質としては特に限定はなく、例えば、架橋結合アルブミンなどのポリペプチドまたはタンパク質、アガロース、アルギネート、カラゲナン、キチン、セルロース、デキストリン、デキストラン、澱粉などの多糖、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリアクロレイン、ポリビニルアルコール、ポリメタクリレート、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリウレタンなどの合成高分子、シリカ、ガラス、多孔質珪藻土、アルミナ、ジルコニア、酸化鉄または他の金属酸化物などの無機化合物、上記物質を２つまたはそれ以上任意に組み合わせて構成される共重合体などのマトリックスをあげることができる。さらにそれらは、液相分配で使用されるデキストラン、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコールまたは加水分解澱粉などの水溶性の高分子を包含するマトリックス、またはエマルジョンを形成するのに使用されるペルフルオロデカリンなどの化合物を包含するマトリックスも含まれる。特に、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックス製造におけるマトリックスの材質としては、トヨパール（商品名）（東ソー株式会社製）などのビニルポリマー、アガロース、キトサン、デキストラン、セルロース、シリカ、ポリスチレンが好ましい。
【００５３】
ここでいうビニルポリマーとは、ビニル基などを持ったモノマーをビニル重合して得られたものを指し、モノマーとしてはメタアクリル酸メチル、２−ヒドロキシエチルメタクリレート、アクリルアミド、ビニルエステルなどが含まれる。さらに、ここでいうビニルポリマーとしては前記モノマーを２種類以上用いた共重合体や、架橋したものなどが含まれる。
【００５４】
また、マトリックスは、粒状物または非粒状物、水性溶媒に対して可溶性または不溶性、多孔性または非多孔性、いずれであっても良い。
【発明の効果】
【００５５】
本発明のチアゾール誘導体は、免疫グロブリンの分析および精製に有用であり、特に当該誘導体を固定化したマトリックスの形態で用いることにより免疫グロブリンの工業的な精製において極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物２８６の結果）。
【図２】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物３０４の結果）。
【図３】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物３２０の結果）。
【図４】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物３２９の結果）。
【図５】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物３８４の結果）。
【図６】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物４２３の結果）
【図７】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物２８６の結果）
【図８】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物３０４の結果）
【図９】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物３２０の結果）
【図１０】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物３２９の結果）
【図１１】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物３８４の結果）
【図１２】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物４２３の結果）
【図１３】化合物２８６固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたリボヌクレア−ゼＡ、リゾチ−ム、αキモトリプシノ−ゲンＡの混合液のクロマトグラフィー結果
【発明を実施するための形態】
【００５７】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明がこれらに限定されるものではない。
【００５８】
実施例１ チアゾール誘導体の合成
（合成例１）
【００５９】
【化１３】
６−フタルイミド−１−ヘキサナール（４．９５ｇ，２０．２ｍｍｏｌ）を四塩化炭素（１００ｍＬ）に溶解し臭素（１．０３ｍＬ，２０．２ｍｍｏｌ）の四塩化炭素溶液（１００ｍＬ）を滴下し２時間反応した。反応液を水（１００ｍＬ）、飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去し油状物を得た。得られた油状物をＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解し、４−メチルベンゾイルチオウレア（５．８７ｇ，２６．３ｍｍｏｌ）を加え、１０時間加熱還流した。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（３００ｍＬ）を加え酢酸エチル（３００ｍＬ）で二回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３００ｍＬ）で二回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製することによって、４−メチル−Ｎ−［５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（０．４２４ｇ，５％）を得た。ｍ．ｐ．２０３から２０５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．５８から１．８２（ｍ，４Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９７（ｓ，１Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６９から７．８６（ｍ，４Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００６０】
（合成例２）
【００６１】
【化１４】
２−アミノ−４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール（０．５０ｇ，１．６６ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液に、４−メチルベンゾイルクロリド（０．３１ｇ，１．９９ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１ｍＬ）を加え、２日間撹拌した。反応終了後、反応液を水（１０ｍＬ）で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン＝１：２）で精製し、４−メチル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（０．４０ｇ，５６％）を得た。ｍ．ｐ．１７８から１８０℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．５８から１．６６（ｍ，４Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ）， ２．４１（ｓ，３Ｈ），２．７３（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７６から７．８６（ｍ，６Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００６２】
（合成例３）
【００６３】
【化１５】
Ｎ−（５−ブロモ−６−オキソヘプチル）フタルイミド（１．３０ｇ，３．８５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に、Ｎ−（３−アセトキシ−４−メチルベンゾイル）チオウレアを加え、８０℃で７時間反応させた。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（３０ｍＬ）を加え酢酸エチル（５０ｍＬ）で二回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で二回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製；Ｒｆ＝０．３２：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で精製し、得られた褐色固体を酢酸エチル／ヘキサンの混合溶媒で洗浄することによって、白色固体の３−アセトキシ−４−メチル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．８２３ｇ，４９％）を得た。：ｍ．ｐ．１７０から１７２℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６０から１．６６（ｍ，４Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．７２から２．７４（ｍ，２Ｈ），３．５３から３．６４（ｍ，２Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７９から７．９３（ｍ，６Ｈ），１２．４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。
【００６４】
（合成例４）
【００６５】
【化１６】
モノテレフタル酸メチルクロリド（１．４１ｇ，７．１０ｍｍｏｌ）のクロロホルム（３０ｍＬ）溶液に、氷冷下にて２−アミノ−４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール（１．５６ｇ，４．７４ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１．２０ｍＬ，７．９８ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液を加え、一晩反応させた。反応終了後、反応混合物を水（２０ｍＬ）、飽和食塩水（２０ｍＬ）で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製；Ｒｆ＝０．１６：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）で精製し、４−メトキシカルボニル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（０．８１５ｇ，３３％）を得た。：ｍ．ｐ．１７３から１７４℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６０から１．６７（ｍ，４Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），２．７２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９０（ｄ，３Ｈ），７．８０から７．９０（ｍ，４Ｈ），８．０６から８．２０（ｍ，４Ｈ），１２．７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。
【００６６】
（合成例５）
【００６７】
【化１７】
２−アミノ−４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール（１．０ｇ，３．１７ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液に、３−シアノベンゾイルクロリド（０．７９ｇ，４．７５ｍｍｏｌ）を氷冷下にて加えた。次いでトリエチルアミン（０．７２ｍＬ，４．７９ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液を滴下し、一晩反応させた。反応終了後、反応混合物を水（２０ｍＬ）、飽和食塩水（２０ｍＬ）で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２）で精製し、３−シアノ−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（０．５７ｇ，４０％）を得た。ｍ．ｐ．１７０から１７２℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．６９から１．７０（ｍ，４Ｈ），１．９７（ｓ，３Ｈ），２．７４（ｔ，Ｊ＝６．５，２Ｈ），３．７３（ｔ，Ｊ＝６．８，２Ｈ），７．５６（ｄｄ，Ｊ＝８．０ ａｎｄ ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７１から７．８６（ｍ，５Ｈ），８．０５（ｍ，１Ｈ），８．１６（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００６８】
（参考合成例１）
アルゴン雰囲気下、４−メチル−Ｎ−｛５−（４−フタルイミドブチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド（０．１０５ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）とフェロセン（０．０２３ｇ，０．１２５ｍｍｏｌ）に、ＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）、３Ｍ−ヨウ化トリフルオロメチル／ＤＭＳＯ溶液（０．２５ｍＬ，０．７５ｍｍｏｌ）、１Ｍ−硫酸／ＤＭＳＯ溶液（０．２５ｍＬ，０．２５ｍｍｏｌ）を加えて撹拌した。この溶液に、室温下で３１％過酸化水素水（７５μＬ，０．７５ｍｍｏｌ）を滴下した。反応終了後、反応溶液を水（２００ｍＬ）にあけ、しばらく撹拌した。クロロホルムで抽出し、得られた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、４−メチル−Ｎ−｛４−トリフルオロメチル−５−（４−フタルイミドブチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドの白色固体（０．０２３ｇ，１９％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．７９から１．８２（ｍ，４Ｈ），２．４７（ｓ，３Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７２から７．９０（ｍ，６Ｈ），９．３７（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：−６０．８７。
【００６９】
（合成例６から８１）
合成例１または２の方法に準じて、表１から１２に記載したチアゾール誘導体を得た。
【００７０】
【表１】
【００７１】
【表２】
【００７２】
【表３】
【００７３】
【表４】
【００７４】
【表５】
【００７５】
【表６】
【００７６】
【表７】
【００７７】
【表８】
【００７８】
【表９】
【００７９】
【表１０】
【００８０】
【表１１】
【００８１】
【表１２】
（合成例８２）
【００８２】
【化１８】
４−メチル−Ｎ−｛５−（４−フタルイミドブチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド（０．６０ｇ，１．４３ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍＬ）溶液に、ヒドラジン一水和物（０．３５ｍＬ、７．１２ｍｍｏｌ）を室温にて加え、一晩撹拌した。反応終了後、反応溶液を減圧留去し、１Ｍ 塩酸（６ｍＬ）を加えた。析出した固体を濾別し、濾液を酢酸エチルで洗浄し、水層を減圧留去した。得られた固体にエタノールとトルエンを加え共沸し十分に乾燥し、固体を瀘取した。得られた固体を酢酸エチルにて洗浄することによって、４−｛２−（４−メチルベンゾイル）アミノチアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．４４ｇ，収率：９５％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６４から１．６７（ｍ，４Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ），２．７７から２．８０（ｍ，４Ｈ），７．３２（ｓ，１Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），８．０１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），８．０７（ｂｒ ｓ，３Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８３】
（合成例８３）
【００８４】
【化１９】
２−クロロ−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．２２ｇ，０．４８ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、０．０５Ｍのヒドラジンエタノール溶液（３４ｍＬ）を室温にて加え、一晩撹拌した。反応終了後、反応溶液を減圧留去し、１Ｍ 塩酸（３ｍＬ）を加えた。析出した固体を濾別し、濾液を減圧留去した。得られた固体をエタノール並びに酢酸エチルを用いて固体を洗浄することにより、４−｛２−（２−クロロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の褐色固体（０．０５０ｇ，収率：２１％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．４２から１．７７（ｍ，４Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），２．６３から２．９２（ｍ，４Ｈ），７．３３から７．６７（ｍ，４Ｈ），７．６８から８．１６（ｍ，３Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８５】
（合成例８４）
【００８６】
【化２０】
３，４−ジクロロ−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．２５ｇ，０．５１ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、ヒドラジン一水和物（０．０７ｍＬ，１．５３ｍｍｏｌ）を室温にて加え、一晩撹拌した。反応終了後、反応溶液を留去し、１Ｍ 塩酸（３ｍＬ）を加え、室温で一晩撹拌した。析出した固体を濾別し、濾液を減圧留去した。得られた固体をエタノール並びに酢酸エチルを用いて洗浄することにより、４−｛２−（３，４−ジクロロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．１０ｇ， 収率：５０％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．４６から１．７４（ｍ，４Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ）， ２．６２から２．９１（ｍ，４Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８５から７．９９（ｍ，３Ｈ），８．０３から８．１３（ｍ，１Ｈ），８．０４（ｄｄ，Ｊ＝２．０ ａｎｄ ８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．３３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）。
【００８７】
（合成例８５）
【００８８】
【化２１】
４−メチル−Ｎ−［４−メチル−５-｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．２３ｇ，０．５３ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、ヒドラジン一水和物（０．２３ｍＬ，５．３０ｍｍｏｌ）を加え３時間還流した。反応終了後、反応溶液を留去し、残渣に１Ｍ 塩酸（５ｍＬ）を加え、撹拌した。析出した固体を濾別し、濾液を減圧留去した。得られた固体をエタノール並びに酢酸エチルを用いて洗浄することにより、４−｛４−メチル−２−（４−メチルベンゾイルアミノ）チアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．０４３ｇ，収率：２４％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．５５から１．８０（ｍ，４Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ），２．６４から２．９２（ｍ，４Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．７８から８．０５（ｍ，３Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８９】
（合成例８６）
【００９０】
【化２２】
４−トリフルオロメチル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．３０ｇ，０．６２ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、０．０５Ｍ ヒドラジンエタノール溶液（３０ｍＬ）を室温にて加え、２時間還流した。反応終了後、反応溶液を留去し、１Ｍ 塩酸（３ｍＬ）を加え、室温で２時間撹拌した。析出した固体を濾別し、濾液を減圧留去した。得られた固体をエタノール並びに酢酸エチルを用いて洗浄することにより、４−｛４−メチル−２−（４−トリフルオロメチルベンゾイルアミノ）チアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．１０ｇ，収率：４１．７％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．４９から１．７３（ｍ，４Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），２．６０から２．９０（ｍ，４Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．９７から８．１９（ｍ，３Ｈ），８．２６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００９１】
（合成例８７）
【００９２】
【化２３】
４−メトキシカルボニル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］−ベンズアミド（０．５３５ｇ，１．１２ｍｍｏｌ）に０．５Ｍヒドラジンエタノール溶液（１３．５ｍＬ）を加え常温で一晩反応させた。反応終了後、溶液を減圧留去した。残渣に１Ｍ塩酸を加え超音波で懸濁し、セライトを敷いたガラスフィルターで固体を濾別した。濾液を減圧留去し固体を再度析出させ、少量の熱エタノールを加え洗浄することによって、４−［２−｛４−（メトキシカルボニル）ベンゾイルアミノ｝−４−メチルチアゾール−５−イル］ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．３６ｇ，収率：８４％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６０から１．７０（ｍ，４Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．７２から２．８０（ｍ，４Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），７．９７（ｂｒ ｓ，３Ｈ），８．０７から８．２１（ｍ，４Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００９３】
（合成例８８）
【００９４】
【化２４】
３−アセトキシ−４−メチル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．８０ｇ，１．６２ｍｍｏｌ）に０．５Ｍヒドラジンエタノール溶液（１０ｍＬ）を加え常温で一晩反応させた。反応終了後、溶液を減圧留去した後、残渣に１Ｍ塩酸を加え超音波で懸濁し、セライトを敷いたガラスフィルターで固体を濾別した。濾液を減圧留去し固体を再度析出させ、少量の熱エタノールを加え洗浄することによって、４−｛２−（３−ヒドロキシ４−メチルベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．４８ｇ，収率：７５％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６０から１．７０（ｍ，４Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．２３（ｓ，３Ｈ），２．７２から２．８１（ｍ，４Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４４から７．５０（ｍ，２Ｈ），７．９４（ｂｒ ｓ，３Ｈ）９．８０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００９５】
（合成例８９）
【００９６】
【化２５】
３−シアノ−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドに０．５Ｍヒドラジンエタノール溶液（７ｍＬ）を加え常温で一晩反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去し、残渣に１Ｍ塩酸を加え超音波で懸濁し、セライトを敷いたガラスフィルターで濾過した。溶媒を減圧留去し、少量のエタノールを加え溶解した後、酢酸エチルで再沈殿させて精製し、４−｛２−（３−シアノベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．２５ｇ，収率：４６％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６２から１．６５（ｍ，４Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），３．４３から３．４６（ｍ，４Ｈ），７．５６（ｄｄ，Ｊ＝８．０ ａｎｄ ８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．１０から８．２２（ｍ，４Ｈ），８．４９（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００９７】
（合成例９０から１７９）
合成例８９の方法に準じて、表１３から２６に記載したチアゾール誘導体を得た。
【００９８】
【表１３】
【００９９】
【表１４】
【０１００】
【表１５】
【０１０１】
【表１６】
【０１０２】
【表１７】
【０１０３】
【表１８】
【０１０４】
【表１９】
【０１０５】
【表２０】
【０１０６】
【表２１】
【０１０７】
【表２２】
【０１０８】
【表２３】
【０１０９】
【表２４】
【０１１０】
【表２５】
【０１１１】
【表２６】
合成例１から８１に例示した方法によって合成した本発明に関わるチアゾール誘導体（１ａ）を表２７から３２にまとめて例示した。
【０１１２】
【化２６】
【０１１３】
【表２７】
【０１１４】
【表２８】
【０１１５】
【表２９】
【０１１６】
【表３０】
【０１１７】
【表３１】
【０１１８】
【表３２】
また、合成例８２から１７９に例示した方法によって合成した本発明に関わるチアゾール誘導体（１）を表３３から４１にまとめて例示した。
【０１１９】
【化２７】
【０１２０】
【表３３】
【０１２１】
【表３４】
【０１２２】
【表３５】
【０１２３】
【表３６】
【０１２４】
【表３７】
【０１２５】
【表３８】
【０１２６】
【表３９】
【０１２７】
【表４０】
【０１２８】
【表４１】
参考例１ チアゾール誘導体のアガロースゲルへの固定化（その１）
チアゾール誘導体を４０μｍｏｌ／ｍＬになるようＤＭＳＯに溶解し、これに等量の０．５Ｍ 塩化ナトリウムを含む０．２Ｍ 炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．３）を加えて濃度２０μｍｏｌ／ｍＬのチアゾール誘導体溶液を調製した。Ｎ−ヒドロキシスクシニミド（ＮＨＳ）にて活性化されたアガロースゲルであるＨｉＴｒａｐ ＮＨＳ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ ＨＰ １ｍＬ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス株式会社製；以下ＨｉＴｒａｐカラムと略記する）に、非特許文献３に記載された方法に従って前記チアゾール誘導体溶液を２ｍＬ通液することによって固定化を行なった。未反応のスクシンイミドオキシカルボニル基のブロッキングは、非特許文献３に記載された方法に従って行なった。固定化量は非特許文献３に記載された方法のうち「Ｂ．酸性条件法」に従って、ＨｉＴｒａｐカラム通液前後のリガンド（チアゾール誘導体）溶液の紫外吸収極大波長（３００ｎｍ付近）における吸光度をＵ−２９００スペクトロフォトメーター（日立製作所製）で測定することにより算出した。当該方法で固定化した各化合物の固定化リガンド密度を表４２に示す。なお、本実施例以降で記載の化合物番号は表３３から４１記載の化合物番号に対応する。
【０１２９】
【表４２】
参考例２ チアゾール誘導体のアガロースゲルへの固定化（その２）
チアゾール誘導体を２０μｍｏｌ／ｍＬ、トリエチルアミンを４０μｍｏｌ／ｍＬ含むＤＭＳＯ溶液を調製した。ＨｉＴｒａｐカラムをＤＭＳＯで置換後、これに前記チアゾール誘導体−トリエチルアミンのＤＭＳＯ溶液を２ｍＬ通液した。一時間放置した後、ＨｉＴｒａｐカラムに３ｍＬのＤＭＳＯを通液して、さらに５ｍＬの０．５Ｍ 塩化ナトリウムを含む０．２Ｍ 炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．３）を通液した。未反応のスクシンイミドオキシカルボニル基のブロッキングは、非特許文献３に記載された方法に従って行なった。固定化量は非特許文献３に記載された方法のうち「Ｂ．酸性条件法」に従って、ＨｉＴｒａｐカラム通液前後のリガンド（チアゾール誘導体）溶液の紫外吸収極大波長（３００ｎｍ付近）における吸光度をＵ−２９００スペクトロフォトメーター（日立製作所製）で測定することにより算出した。当該方法で固定化した化合物３０４の固定化リガンド密度を表４３に示す。
【０１３０】
【表４３】
参考例３ チアゾール誘導体固定化アガロースゲルを用いたタンパク質の吸脱着（その１）
参考例１あるいは２に記載の方法にて調製したチアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムをＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス株式会社製クロマトグラフィー装置）に取り付け、０．７Ｍ 硫酸ナトリウムを含む１０ｍＭ リン酸ナトリウム−１０ｍＭ クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）（以下平衡化緩衝液と呼ぶ）を２０ｍＬ通液し平衡化した。ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓを流速１ｍＬ／ｍｉｎで自動運転し、平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、同緩衝液に溶解したヒト血漿由来免疫グロブリン製剤（化血研製、本製剤の免疫グロブリンは免疫グロブリンＧである）０．５ｍｇ（ＯＤ２８０＝０．７）を添加してカラムに通液した。さらに平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、平衡化緩衝液から１０ｍＭ リン酸ナトリウム−１０ｍＭ クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）への硫酸ナトリウムに関する直線濃度勾配クロマトグラフィーを行なった。免疫グロブリンのカラムからの溶出は２８０ｎｍにおける吸光度をモニターして検出した。溶出液は１ｍＬずつ分画し、各フラクションの２８０ｎｍにおける吸光度をＵ−２９００スペクトロフォトメーター（日立製作所製）で測定し回収率を算出した。チアゾール誘導体を固定化したＨｉＴｒａｐカラムを用いて行なったクロマトグラフィーの結果を図１から図６に示し、これらのクロマトグラフィーにおける免疫グロブリンの回収率を表４４に示す。いずれのチアゾール誘導体を用いたときも免疫グロブリンは５０％以上の回収率で回収され、チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムによる免疫グロブリンの吸脱着が確認された。特に化合物２８６、３０４、３２９を用いた場合の回収率は９０％以上と極めて高かった。
【０１３１】
【表４４】
それぞれの吸脱着操作後には１００ｍＭ 水酸化ナトリウム水溶液を１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。前記のチアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムはいずれもこの再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【０１３２】
参考例４ チアゾール誘導体固定化アガロースゲルを用いたタンパク質の吸脱着（その２）
参考例１あるいは２に記載の方法にて調製したチアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムをＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス株式会社製クロマトグラフィー装置）に取り付け、前記平衡化緩衝液を２０ｍＬ通液し平衡化した。ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓを流速１ｍＬ／ｍｉｎで自動運転し、平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、同緩衝液に溶解したウシ血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）０．５ｍｇ（ＯＤ２８０＝０．３）を添加してカラムに通液した。さらに平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、平衡化緩衝液から１０ｍＭ リン酸ナトリウム−１０ｍＭ クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）への硫酸ナトリウムに関する直線濃度勾配クロマトグラフィーを行なった。ウシ血清アルブミンのカラムからの溶出は２８０ｎｍにおける吸光度をモニターして検出した。溶出液は１ｍＬずつ分画し、各フラクションの２８０ｎｍにおける吸光度をＵ−２９００スペクトロフォトメーター（日立製作所製）で測定し回収率を算出した。各種チアゾール誘導体を固定化したＨｉＴｒａｐカラムを用いて行なったクロマトグラフィーの結果を図７から１２に示す。また、これらのクロマトグラフィーにおけるウシ血清アルブミンの回収率を表４５に示す。いずれのチアゾール誘導体を用いたときもウシ血清アルブミンは１０番目の画分までに溶出しており、カラムへの吸着はほとんど見られなかった。また、図１から６に示した免疫グロブリンを通液したときの結果とは大きく異なっていた。よって、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスを用いることで、試料中の免疫グロブリンとウシ血清アルブミンとの分離が可能であることが示された。
【０１３３】
【表４５】
それぞれの吸脱着操作後には１００ｍＭ 水酸化ナトリウム水溶液を１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。前記のチアゾール誘導体を固定化ＨｉＴｒａｐカラムはいずれもこの再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【０１３４】
参考例５ チアゾール誘導体固定化アガロースゲルを用いたタンパク質の吸脱着（その３）
参考例１に記載の方法にて調製した化合物２８６を固定化したＨｉＴｒａｐカラムをＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス株式会社製クロマトグラフィー装置）に取り付け、前記平衡化緩衝液を２０ｍＬ通液し平衡化した。ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓを流速１ｍＬ／ｍｉｎで自動運転し、平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、同緩衝液に溶解したリボヌクレア−ゼＡ、リゾチ−ム、αキモトリプシノ−ゲンＡの混合液（リボヌクレア−ゼＡ ０．１５ｍｇ、リゾチ−ム ０．０３ｍｇ、αキモトリプシノ−ゲンＡ ０．０４ｍｇ）（ＯＤ２８０＝０．２４）を添加してカラムに通液した。さらに平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、平衡化緩衝液から１０ｍＭ リン酸ナトリウム−１０ｍＭ クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）への硫酸ナトリウムに関する直線濃度勾配クロマトグラフィーを行なった。タンパク質のカラムからの溶出は２８０ｎｍにおける吸光度の吸光度をモニターして検出した。溶出液は１ｍＬずつ分画し、各フラクションの２８０ｎｍにおける吸光度をＵ−２９００スペクトロフォトメーター（日立製作所製）で測定し回収率を算出した。化合物２８６を固定化したＨｉＴｒａｐカラムを用いて行なったクロマトグラフィーの結果を図１３に示し、このクロマトグラフィーにおけるタンパク質の回収率を表４６に示す。いずれのタンパク質も１０番目の画分以内に溶出しており、免疫グロブリン（２５番目から４５番目までの画分に溶出、図１参照）とは異なる画分となった。このことから、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスを用いることで、試料中の免疫グロブリンとリボヌクレア−ゼＡ、リゾチ−ム、αキモトリプシノ−ゲンＡとの分離が可能であることが示された。
【０１３５】
【表４６】
吸脱着操作後には１００ｍＭ 水酸化ナトリウム水溶液を１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。前記のチアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムはこの再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タンパク質、特に免疫グロブリンの分析または精製に利用可能なチアゾール誘導体、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、医療用タンパク質の需要は拡大しつつあり、その簡便で大規模に実施できる工業的精製技術の確立が切望されている。一般にタンパク質精製技術には、ゲル透過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、およびアフィニティークロマトグラフィーのようなクロマトグラフィー分離技術があるが、医療用タンパク質の精製を工業的に実施する場合には、実験室で用いられるような分離剤や装置を使用したのでは経済性に乏しく、実用的とは言い難い。また、医療用タンパク質を工業的に製造する過程では多種類のタンパク質が混在しているため、上記の中の一つの精製技術を用いて目的とするタンパク質を純粋に得ることは極めて困難である。そのため通常はいくつかの技術を複合させた精製プロセスが採用されている（特許文献１）。
【０００３】
近年、医療用タンパク質の一つである免疫グロブリンを精製するための低分子化合物とそれらが結合したマトリックスが数多く開示されており、スルホン誘導体（特許文献２）、トリアジン誘導体（特許文献３）、メルカプト複素環式化合物（特許文献４）、４−ピリジルエチルチオアルキル誘導体（非特許文献１）等の低分子やそれらが結合したマトリックスが知られている。しかしながら、本発明のチアゾール誘導体（１）が免疫グロブリンを精製するための低分子化合物として有用であるとの報告はない。また、特許文献５や非特許文献２に本発明のチアゾール誘導体（１）に類似の化学構造を有するチアゾール誘導体が報告されているものの、これらの文献に記載のチアゾール誘導体の化学構造は、チアゾール環の２位がアミノ基あるいはアルキル基に限定されており、本発明のチアゾール誘導体（１）のように２位にベンゾイルアミノ基が置換した化合物についての記載はない。とりわけ非特許文献２に記載の化合物は、本発明のチアゾール誘導体（１）に類似のチアゾール誘導体ではあるものの、それらの用途はヒスタミンＨ２レセプターアゴニストとしての用途に限定されており、免疫グロブリンを精製するための用途についての記載はない。
【０００４】
なお、特許文献６には２位にベンゾイルアミノ基が置換したチアゾール誘導体が記載されているが、これらの化合物の４位の置換基はカルボニル、５位は無置換にそれぞれ限定されている。それらの用途としては消化管運動改善作用を有する医薬の有効成分に言及されており、免疫グロブリンを精製するための用途についての記載はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】ＷＯ２００４／０８７７６１号
【特許文献２】米国特許４６９６９８０号
【特許文献３】米国特許６１１７９９６号
【特許文献４】特許第３８４４４９６号
【特許文献５】ＷＯ１９９１／１０６５６号
【特許文献６】ＷＯ１９９８／１７６５４号
【特許文献７】ＷＯ１９８９／１０３６０号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｂｉｏｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，９（４），２１１−２２１，２０００
【非特許文献２】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３５（１７），３２３９−３２４６，１９９２
【非特許文献３】はじめてのリガンドカップリングハンドブック、アマシャムバイオサイエンス株式会社刊、２００５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明が解決しようとする課題は、免疫グロブリンの分析または精製に有用なチアゾール誘導体、及びその製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、本発明の下記一般式（１）で示されるチアゾール誘導体が、免疫グロブリンと選択的に相互作用することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
本発明は、一般式（１）
【００１０】
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３はフタルイミド基、アミノ基又はアンモニウム塩であることを表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表す。）で表されるチアゾール誘導体に関するものである。
【００１１】
また本発明は、一般式（２）
【００１２】
【化２】
（式中、Ｒ１及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｙは脱離基を表す。）で表されるフタルイミド誘導体と、一般式（３）
【００１３】
【化３】
（式中、Ｒ２及びＡｒは前記と同じ意味を表す。）で表されるアシルチオウレア誘導体を反応させることを特徴とする、一般式（１ａ）
【００１４】
【化４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法に関するものである。
【００１５】
また本発明は、一般式（４）
【００１６】
【化５】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びｎは前記と同じ意味を表す。）で表されるチアゾール誘導体と一般式（５）
【００１７】
【化６】
（式中、Ａｒは前記と同じ意味を表し、Ｗはハロゲン原子を表す。）で示される酸ハロゲン化物を塩基存在下にて反応させ、一般式（１ａ）
【００１８】
【化７】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法に関するものである。
【００１９】
また本発明は、一般式（１ａ）
【００２０】
【化８】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で表されるチアゾール誘導体を塩基によって処理し、一般式（１ａ’）
【００２１】
【化９】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）を得た後、酸によって処理することを特徴とする、一般式（１ａ’’）
【００２２】
【化１０】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｚ−は共役塩基を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法に関するものである。
【００２３】
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
【００２４】
本発明のチアゾール誘導体における、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びＹで表される置換基、並びにＲ３で表されるアンモニウム塩（Ｚ−Ｈ３＋Ｎ）の定義を以下に示す。
【００２５】
Ｒ１及びＲ２で表される炭素数１から６のアルキル基としては、直鎖状もしくは分枝状のいずれであってもよく、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソアミル基、ネオペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基を例示することができる。また、これらの炭素数１から６のアルキル基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、さらに具体的にはジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、パーフルオロブチル基、ヒドロキシメチル基、カルボキシメチル基、４−モルホリノカルボニルメチル基等を例示することができる。なお、性能が良い点で、Ｒ１はメチル基が好ましく、Ｒ２は水素原子が好ましい。
【００２６】
Ｒ３で表されるアンモニウム塩はＺ−Ｈ３＋Ｎ（Ｚ−は共役塩基を表す。）で表され、具体的にはＣｌ−Ｈ３＋Ｎ、Ｂｒ−Ｈ３＋Ｎ、Ｆ−Ｈ３＋Ｎ、Ｉ−Ｈ３＋Ｎ、ＮＯ３−Ｈ３＋Ｎ、１／２（ＳＯ４２−）Ｈ３＋Ｎ、１／３（ＰＯ４３−）Ｈ３＋Ｎ、ＣＨ３ＳＯ３−Ｈ３＋Ｎ、４−ＣＨ３Ｃ６Ｈ４ＳＯ３−Ｈ３＋Ｎ、ＣＨ３ＣＯＯ−Ｈ３＋Ｎ、ＣＦ３ＣＯＯ−Ｈ３＋Ｎ等を例示することができるが、反応の操作性や化合物の単離が簡便な点でＣｌ−Ｈ３＋Ｎ又はＢｒ−Ｈ３＋Ｎが好ましい。
【００２７】
Ａｒで表される芳香族基は特に制限はないが、フラン−２−イル基、フリル基、チエニル基、チオフェン−３−イル基、ピロール−２−イル基、ピロール−３−イル基、ピラゾール−３−イル基、ピラゾール−４−イル基、イソチアゾール−３−イル基、イソチアゾール−４−イル基、イソキサゾール−３−イル基、イソキサゾール−４−イル基、イミダゾール−２−イル基、イミダゾール−４−イル基、イミダゾール−５−イル基、オキサゾール−２−イル基、オキサゾール−４−イル基、オキサゾール−５−イル基、チアゾール−２−イル基、チアゾール−４−イル基、チアゾール−５−イル基、１，２，４−トリアゾール−３−イル基、フェニル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基、２−ピリミジル基、４−ピリミジル基、５−ピリミジル基、１，２，４−トリアジン−３−イル基、１，２，４−トリアジン−５−イル基、１，２，４−トリアジン−６−イル基、ベンゾジオキソラン−３−イル基、ベンゾフラン−２−イル基、ベンゾフラン−３−イル基、ベンゾフラン−４−イル基、ベンゾフラン−５−イル基、ベンゾフラン−６−イル基、ベンゾフラン−７−イル基、ベンゾチオフェン−２−イル基、ベンゾチオフェン−３−イル基、ベンゾチオフェン−４−イル基、ベンゾチオフェン−５−イル基、ベンゾチオフェン−６−イル基、ベンゾチオフェン−７−イル基、インドール−２−イル基、インドール−３−イル基、インドール−４−イル基、インドール−５−イル基、インドール−６−イル基、インドール−７−イル基、ベンゾチアゾール−２−イル基、ベンゾチアゾール−４−イル基、ベンゾチアゾール−５−イル基、ベンゾチアゾール−６−イル基、ベンゾチアゾール−７−イル基、インダゾール−３−イル基、インダゾール−４−イル基、インダゾール−５−イル基、インダゾール−６−イル基、インダゾール−７−イル基、ベンズイソキサゾール−３−イル基、ベンズイソキサゾール−４−イル基、ベンズイソキサゾール−５−イル基、ベンズイソキサゾール−６−イル基、ベンズイソキサゾール−７−イル基、ナフタレン−１−イル基、ナフタレン−２−イル基、キノリン−２−イル基、キノリン−３−イル基、キノリン−４−イル基、キノリン−５−イル基、キノリン−６−イル基、キノリン−７−イル基、キノリン−８−イル基、キノキサリニル基、キノキサリン−５−イル基、キノキサリン−６−イル基、キナゾリニル基、キナゾリン−４−イル基、キナゾリン−５−イル基、キナゾリン−６−イル基、キナゾリン−７−イル基、キナゾリン−８−イル基、ベンゾオキサジン−５−イル基、ベンゾオキサジン−６−イル基、ベンゾオキサジン−７−イル基、ベンゾオキサジン−８−イル基、ベンゾチアジン−５−イル基、ベンゾチアジン−６−イル基、ベンゾチアジン−７−イル基、ベンゾチアジン−８−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−６−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−７−イル基、アントラセン−１−イル基を例示できる。特に、免疫グロブリンの分析または精製において良好な性能を示す点で、Ａｒはフェニル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基あるいは４−ピリジル基が好ましい。
【００２８】
Ａｒで表される置換されていてもよい芳香族基の置換基としては、特に制限はないが、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、水酸基又はシアノ基が好ましい。
【００２９】
ハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子あるいはヨウ素原子を例示することができる。
【００３０】
置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基としては、直鎖状、分枝状もしくは環状のいずれであってもよく、メチル基、エチル基、シクロプロピル基、プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソアミル基、ネオペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、２−メチルブチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基を例示することができる。また、これらの炭素数１から６のアルキル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アシル基、置換されていてもよい芳香族基で１個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチル基、３−クロロプロピル基、ジフルオロメチル基、３−フルオロプロピル基、メトキシメチル基、２−エトキシエチル基、シクロプロピルメチル基、シクロペンチルメチル基、シクロヘキシルメチル基、２−メチルチオエチル基、２−エチルチオエチル基、２−アリルチオエチル基、２−プロパルギルチオエチル基、２−ベンジルチオエチル基、２−（２−クロロベンジル）チオエチル基、２−（２，４−ジクロロベンジル）チオエチル基、２−メチルスルフィニルエチル基、２−メチルスルホニルエチル基、エトキシメチル基、２−メトキシエチル基、２−クロロエトキシメチル基、メトキシカルボニルメチル基、エトキシカルボニルメチル基、１−メトキシカルボニルエチル基、１−エトキシカルボニルエチル基、２−エトキシカルボニルエチル基、カルボキシメチル基、アセトニル基、１−アセチルエチル基、３−アセチルプロピル基、フェナシル基、４−クロロフェナシル基、２，４−ジフルオロフェナシル基、４−メチルフェナシル基、４−イソプロピルフェナシル基、４−イソブチルフェナシル基、４−シクロヘキシルフェナシル基、４−シアノフェナシル基、４−ニトロフェナシル基、チエニル基、２−（チオフェン−２−イル）エチル基、２−（チオフェン−３−イル）エチル基、フルフリル基、（５−メチルフラン−２−イル）メチル基、（５−エチルフラン−２−イル）メチル基、（５−クロロフラン−２−イル）メチル基、２−（５−フルオロフラン−２−イル）エチル基、テトラヒドロフルフリル基、２−ピリジルメチル基、３−ピリジルメチル基、４−ピリジルメチル基、２−（ピリジン−２−イル）エチル基、２−（ピリジン−３−イル）エチル基、２−（ピリジン−４−イル）エチル基、３−（ピリジン−２−イル）プロピル基、３−（ピリジン−３−イル）プロピル基、３−（ピリジン−４−イル）プロピル基を例示することができる。
【００３１】
置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基としては、直鎖状もしくは分枝状のいずれであってもよく、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブトキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ−ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソアミルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、２−ペンチルオキシ基、３−ペンチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシルオキシ基、デセニルオキシ基を例示することができる。また、これらのアルコキシ基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アシル基、置換されていてもよい芳香族基等で１個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエトキシ基、３−クロロプロピルオキシ基、ジフルオロメトキシ基、４−トリフルオロメトキシ基、３−フルオロプロピルオキシ基、シクロプロピルメトキシ基、シクロペンチルメトキシ基、シクロヘキシルメトキシ基、２−メチルチオエトキシ基、２−エチルチオエトキシ基、２−アリルチオエトキシ基、２−プロパルギルチオエトキシ基、２−ベンジルチオエトキシ基、２−（２−クロロベンジル）チオエトキシ基、２−（２，４−ジクロロベンジル）チオエトキシ基、２−メチルスルフィニルエトキシ基、２−メチルスルホニルエトキシ基、メトキシメトキシ基、エトキシメトキシ基、２−メトキシエトキシ基、２−クロロエトキシメトキシ基、メトキシカルボニルメトキシ基、エトキシカルボニルメトキシ基、１−メトキシカルボニルエトキシ基、１−エトキシカルボニルエトキシ基、２−エトキシカルボニルエトキシ基、カルボキシメトキシ基、１−アセチルエトキシ基、３−アセチルプロポキシ基、２−ピリジルメトキシ基、３−ピリジルメトキシ基、４−ピリジルメトキシ基、２−（ピリジン−２−イル）エトキシ基、２−（ピリジン−３−イル）エトキシ基、２−（ピリジン−４−イル）エトキシ基、３−（ピリジン−２−イル）プロポキシ基、３−（ピリジン−３−イル）プロポキシ基、ベンジルオキシ基を例示することができる。
【００３２】
置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基としては、シクロプロピルオキシ基、シクロブチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、２−メチルシクロブチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、２−メチルシクロペンチルオキシ基、３−メチルシクロペンチルオキシ基、４−メチルシクロペンチルオキシ基、シクロオクチルオキシ基を例示することができる。
【００３３】
置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基としては、アリルオキシ基、２−メチル−２−プロペニルオキシ基、２−ブテニルオキシ基、１−ブテン−３−イルオキシ基、３−ブテニルオキシ基、４−ペンテニルオキシ基、５−ヘキセニルオキシ基を例示することができる。また、これらの炭素数３から６のアルケニルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、３，３−ジフルオロアリルオキシ基、３，３−ジクロロアリルオキシ基、３，３−ジブロモアリルオキシ基を例示することができる。
【００３４】
置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基としては、プロパルギルオキシ基、１−ブチン−３−イルオキシ基、２−ブチニルオキシ基、３−ブチニルオキシ基、２−ペンチニルオキシ基、３−ペンチニルオキシ基、４−ペンチニルオキシ基、２−ヘキシニルオキシ基、３−ヘキシニルオキシ基、４−ヘキシニルオキシ基、５−ヘキシニルオキシ基を例示することができる。また、これらの置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、４，４，４−トリフルオロブチン−２−イル基等を例示することができる。
【００３５】
置換されていてもよいアシルオキシ基としては、アセトキシ基、プロピオニルオキシ基を例示することができる。また、これらの置換されていてもよいアシルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、トリフルオロアセトキシ基や２，２，２−トリフルオロプロピオニルオキシ基等を例示することができる。
【００３６】
置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基としては、メチルチオ基、エチルチオ基、プロピルチオ基、イソプロピルチオ基、ブチルチオ基、イソブチルチオ基、ｓｅｃ−ブチルチオ基、ペンチルチオ基、イソアミルチオ基、ネオペンチルチオ基、２−ペンチルチオ基、３−ペンチルチオ基、２−メチルブチルチオ基、ヘキシルチオ基、イソヘキシルチオ基、３−メチルペンチルチオ基、２−メチルペンチルチオ基を例示することができる。また、これらのアルキルチオ基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルチオ基、３−クロロプロピルチオ基、ジフルオロメチルチオ基、３−フルオロプロピルチオ基、シクロプロピルメチルチオ基、シクロペンチルメチルチオ基、シクロヘキシルメチルチオ基を例示することができる。
【００３７】
置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基としては、メチルスルフィニル基、エチルスルフィニル基、プロピルスルフィニル基、イソプロピルスルフィニル基、ブチルスルフィニル基、イソブチルスルフィニル基、ｓｅｃ−ブチルスルフィニル基、ペンチルスルフィニル基、イソアミルスルフィニル基、ネオペンチルスルフィニル基、２−ペンチルスルフィニル基、３−ペンチルスルフィニル基、２−メチルブチルスルフィニル基、ヘキシルスルフィニル基、イソヘキシルスルフィニル基、３−メチルペンチルスルフィニル基、２−メチルペンチルスルフィニル基を例示することができる。また、これらのアルキルスルフィニル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルスルフィニル基、３−クロロプロピルスルフィニル基、ジフルオロメチルスルフィニル基、３−フルオロプロピルスルフィニル基、シクロプロピルメチルスルフィニル基、シクロペンチルメチルスルフィニル基、シクロヘキシルメチルスルフィニル基を例示することができる。
【００３８】
置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基としては、メチルスルホニル基、エチルスルホニル基、プロピルスルホニル基、イソプロピルスルホニル基、ブチルスルホニル基、イソブチルスルホニル基、ｓｅｃ−ブチルスルホニル基、ペンチルスルホニル基、イソアミルスルホニル基、ネオペンチルスルホニル基、２−ペンチルスルホニル基、３−ペンチルスルホニル基、２−メチルブチルスルホニル基、ヘキシルスルホニル基、イソヘキシルスルホニル基、３−メチルペンチルスルホニル基、２−メチルペンチルスルホニル基を例示することができる。また、これらのアルキルスルホニル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルスルホニル基、３−クロロプロピルスルホニル基、ジフルオロメチルスルホニル基、３−フルオロプロピルスルホニル基、シクロプロピルメチルスルホニル基、シクロペンチルメチルスルホニル基、シクロヘキシルメチルスルホニル基を例示することができる。
【００３９】
置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基としては、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、ヘキシルオキシカルボニル基、ドデシルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を例示することができる。また、これらのアルコキシカルボニル基はハロゲン原子等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的にはトリフルオロメトキシカルボニル基、２，２，２−トリフルオロエトキシカルボニル基等を例示することができる。
【００４０】
置換されていてもよいアミノ基としては、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、ジエチルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−プロピルアミノ基、２，２，２−トリフルオロエチルアミノ基、ジプロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−イソプロピルアミノ基、ブチルアミノ基、Ｎ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、イソブチルアミノ基、ｓｅｃ−ブチルアミノ基、ペンチルアミノ基、イソアミルアミノ基、ネオペンチルアミノ基、２−ペンチルアミノ基、３−ペンチルアミノ基、２−メチルブチルアミノ基、ヘキシルアミノ基、イソヘキシルアミノ基、４−メチルペンチルアミノ基、ベンゼンスルホニルアミノ基、Ｎ−ベンゼンスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、ｐ−トルエンスルホニルアミノ基、４−クロロベンゼンスルホニルアミノ基、４−ニトロベンゼンスルホニルアミノ基、メチルスルホニルアミノ基、クロロメチルスルホニルアミノ基、トリフルオロメチルスルホニルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−エチルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−プロピルアミノ基、エチルスルホニルアミノ基、Ｎ−エチルスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−エチルスルホニル−Ｎ−エチルアミノ基、メトキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基を例示することができる。
【００４１】
Ａｒで表される置換されていてもよい芳香族基としては、特に制限はないが、フラン−２−イル基、５−ブロモフラン−２−イル基、５−メチルフラン−２−イル基、フリル基、チエニル基、５−クロロチエニル基、５−ブロモチエニル基、５−メチルチエニル基、５−メトキシチエニル基、５−エトキシチエニル基、チオフェン−３−イル基、５−メチルチオフェン−３−イル基、５−メトキシチオフェン−３−イル基、５−エトキシチオフェン−３−イル基、１−メチルピロール−２−イル基、１−メチルピロール−３−イル基、１−エチルピラゾール−３−イル基、ピラゾール−２−イル基、３−エトキシ−１−メチルピラゾール−２−イル基、１−エチル−４−メトキシピラゾール−３−イル基、イソチアゾール−３−イル基、５−メトキシイソチアゾール−３−イル基、イソチアゾール−４−イル基、イソキサゾール−３−イル基、イソキサゾール−４−イル基、１−メチルイミダゾール−２−イル基、１−メチルイミダゾール−４−イル基、１−メチルイミダゾール−５−イル基、オキサゾール−２−イル基、オキサゾール−４−イル基、オキサゾール−５−イル基、チアゾール−２−イル基、３−メトキシチアゾール−２−イル基、４−メトキシチアゾール−２−イル基、チアゾール−４−イル基、チアゾール−５−イル基、１，２，４−トリアゾール−３−イル基、１，２，４−トリアゾール−５−イル基、フェニル基、２−フルオロフェニル基、３−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、２，３−ジフルオロフェニル基、３，５−ジフルオロフェニル基、３，４，５−トリフルオロフェニル基、２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル基、３−フロオロ−４−メチルフェニル基、４−トリフルオロメトキシフェニル基、２−クロロフェニル基、３−クロロフェニル基、４−クロロフェニル基、４−クロロ−３−メチルフェニル基、４−クロロ−３−エチルフェニル基、４−クロロ−３−メトキシフェニル基、４−クロロ−３−エトキシフェニル基、２，３−ジクロロフェニル基、３，５−ジクロロフェニル基３，４，５−トリクロロフェニル基、３−トリフルオロメチルフェニル基、４−トリフルオロメチルフェニル基、３−ブロモフェニル基、４−ブロモフェニル基、４−ブロモ−３−メチルフェニル基、４−ブロモ−３−エチルフェニル基、４−ブロモ−３−メトキシフェニル基、４−ブロモ−３−エトキシフェニル基、３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル基、３−ヨードフェニル基、４−ヨードフェニル基、４−ヨード−３−メチルフェニル基、４−ヨード−３−エチルフェニル基、４−ヨード−３−メトキシフェニル基、４−ヨード−３−エトキシフェニル基、２−メチルフェニル基、３−メチルフェニル基、４−メチルフェニル基、３，４−ジメチルフェニル基、３，４，５−トリメチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル基、２−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、３−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、４−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、４−メトキシメチルフェニル基、３，４−ジエトキシフェニル基、３−エチル−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、３，４−ジエチルフェニル基、４−プロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、３−ブチルフェニル基、４−ブチルフェニル基、４−イソブチルフェニル基、４−（ｓｅｃ−ブチル）フェニル基、４−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル基、４−ペンチルフェニル基、４−イソアミルフェニル基、４−ネオペンチルフェニル基、４−（２−ペンチル）フェニル基、４−（３−ペンチル）フェニル基、４−（２−メチルブチル）フェニル基、４−（ｔｅｒｔ−ペンチル）フェニル基、４−ヘキシルフェニル基、４−イソヘキシルフェニル基、４−（２−クロロエチル）フェニル基、４−（３−クロロプロピル）フェニル基、４−（ジフルオロメチル）フェニル基、４−（３−フルオロプロピル）フェニル基、４−メトキシメチルフェニル基、４−エトキシメチルフェニル基、４−シクロプロピルメチルフェニル基、４−シクロペンチルメチルフェニル基、シクロヘキシルメチルフェニル基、４−（２−メチルチオエチル）フェニル基、４−（２−エチルチオエチル）フェニル基、４−（２−アリルチオエチル）フェニル基、４−（２−プロパルギルチオエチル）フェニル基、４−（２−ベンジルチオエチル）フェニル基、３−メトキシフェニル基、３−メトキシ−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メトキシフェニル基、３−メトキシ−４−プロピルフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−メトキシ−３−メトキシフェニル基、３，４−ジメトキシフェニル基、３−エトキシ−４−メトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メトキシフェニル基、４−イソプロピルオキシ−３−メトキシフェニル基、３−イソプロピルオキシ−４−メトキシフェニル基、３−エトキシフェニル基、４−エトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メチルフェニル基、４−エトキシ−３−エチルフェニル基、４−エトキシ−３−プロピルフェニル基、４−エトキシ−３−イソプロピルフェニル基、４−プロピルオキシフェニル基、４−イソプロピルオキシフェニル基、４−ブトキシフェニル基、４−イソブチルオキシフェニル基、４−（ｓｅｃ−ブチルオキシ）フェニル基、３−（２−クロロエトキシ）フェニル基、３−（２−クロロエトキシ）フェニル基、４−（２−クロロエトキシ）フェニル基、３−（３−クロロプロピルオキシ）フェニル基、４−（３−クロロプロピルオキシ）フェニル基、３−ジフルオロメトキシフェニル基、４−ジフルオロメトキシフェニル基、４−（３−フルオロプロピルオキシフェニル基）、４−シクロプロピルメトキシフェニル基、４−シクロペンチルメトキシ基、４−シクロヘキシルメトキシ基、３−シクロプロピルオキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシ−３−メトキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシ−３−メチルフェニル基、４−シクロブチルオキシフェニル基、４−シクロペンチルオキシフェニル基、４−（２−メチルシクロブチルオキシ）フェニル基、４−シクロヘキシルオキシフェニル、４−アリルオキシフェニル基、４−（３，３−ジクロロアリルオキシ）フェニル基、４−プロパルギルオキシフェニル基、３−メチル−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−エチル−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−メトキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−エトキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−プロポキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、４−（１−ブチン−３−イルオキシ）フェニル基、４−（２−ブチニルオキシ）フェニル基、３−メチルチオフェニル基、４−メチルチオフェニル基、４−メチル−３−メチルチオフェニル基、３−メチル−４−メチルチオフェニル基、４−メトキシ−３−メチルチオフェニル基、３−エトキシ−４−メチルチオフェニル基、４−エトキシ−３−メチルチオフェニル基、３−プロポキシ−４−メチルチオフェニル基、４−エチルチオフェニル基、３−プロピルチオフェニル基、４−イソプロピルチオフェニル基、４−ブチルチオフェニル基、４−イソブチルチオフェニル基、２−（ｓｅｃ−ブチルチオ）フェニル基、２−ペンチルチオフェニル基、２−イソアミルチオフェニル基、４−ネオペンチルチオフェニル基、４−（２−クロロエチルチオ）フェニル基、３−（３−クロロプロピルチオ）フェニル基、ジフルオロメチルチオフェニル基、３−アセトキシフェニル基、４−アセトキシフェニル基、３−メチルスルフィニルフェニル基、４−メチルスルフィニルフェニル基、４−メトキシ−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−メトキシ−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−エトキシ−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−エトキシ−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−メチル−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−エチル−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−（２−クロロエチルスル）フィニルフェニル基、４−（３−クロロプロピルスルフィニル）フェニル基、４−（ジフルオロメチルスルフィニル）フェニル基、３−メチルスルホニルフェニル基、４−メチルスルホニルフェニル基、４−メチル−３−メチルスルホニルフェニル基、４−エチル−３−メチルスルホニルフェニル基、４−メトキシ−３−メチルスルホニルフェニル基、４−エトキシ−３−メチルスルホニルフェニル基、３−メトキシ−４−メチルスルホニルフェニル基、３−エトキシ−４−メチルスルホニルフェニル基、エチルスルホニルフェニル基、プロピルスルホニルフェニル基、イソプロピルスルホニルフェニル基、ブチルスルホニルフェニル基、２−クロロエチルスルホニルフェニル基、３−クロロプロピルスルホニルフェニル基、ジフルオロメチルスルホニルフェニル基、４−カルボキシフェニル基、４−メトキシカルボニルフェニル基、４−エトキシカルボニルフェニル基、３−メチルアミノフェニル基、４−メチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−メチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−メチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−メチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−メチルアミノフェニル基、４−メチル−３−メチルアミノフェニル基、３−メチル−４−メチルアミノフェニル基、４−エチル−３−メチルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノフェニル基、４−ジメチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−ジメチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−ジメチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−ジメチルアミノフェニル基、４−メチル−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジメチルアミノフェニル基、４−エチル−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジメチルアミノフェニル基、３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−メトキシ−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メトキシ−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−エトキシ−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−エトキシ−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−メチル−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メチル−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−エチル−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メチル−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−ジエチルアミノフェニル基、４−ジエチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−ジエチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−ジエチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−ジエチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−ジエチルアミノフェニル基、４−メチル−３−ジエチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジエチルアミノフェニル基、４−エチル−３−ジエチルアミノフェニル基、４−メチルスルホニルアミノフェニル基、４−トリフルオロメチルスルホニルアミノフェニル基、４−アセチルアミノフェニル基、２−ヒドロキシフェニル基、３−ヒドロキシフェニル基、４−ヒドロキシフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−エチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル基、４−ヒドロキシ−３−メチルフェニル基、４−ヒドロキシ−３−エチルフェニル基、４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル基、２−シアノフェニル基、３−シアノフェニル基、４−シアノフェニル基、２−ニトロフェニル基、３−ニトロフェニル基、３−ニトロ−４−メチルフェニル基、４−ニトロフェニル基、ピリジン−２−イル基、５−クロロピリジン−２−イル基、５−メチルピリジン−２−イル基、５−エチルピリジン−２−イル基、５−メトキシピリジン−２−イル基、５−エトキシピリジン−２−イル基、２，３−ジメチルピリジン−６−イル基、２，３−ジメトキシピリジン−６−イル基、ピリジル−３−イル基、２−クロロピリジン−５−イル基、２−メチルピリジン−５−イル基、２−エチルピリジン−５−イル基、２−メトキシピリジン−５−イル基、２−
エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、ピリジル−４−イル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、２−ピリミジル基、５−メチルピリミジン−２−イル基、５−エチルピリミジン−２−イル基、２−エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、５−クロロピリミジン−２−イル基、５−ブロモピリミジン−２−イル基、５−メトキシピリミジン−２−イル基、ピリミジル−４−イル基、ピリミジル−５−イル基、１，２，４−トリアジン−３−イル基、１，２，４−トリアジン−５−イル基、１，２，４−トリアジン−６−イル基、ベンゾジオキソラン−３−イル基、ベンゾフラン−２−イル基、ベンゾフラン−３−イル基、ベンゾフラン−４−イル基、ベンゾフラン−５−イル基、ベンゾフラン−６−イル基、ベンゾフラン−７−イル基、ベンゾチオフェン−２−イル基、ベンゾチオフェン−３−イル基、ベンゾチオフェン−４−イル基、ベンゾチオフェン−５−イル基、ベンゾチオフェン−６−イル基、ベンゾチオフェン−７−イル基、１−メチルインドール−２−イル基、ベンゾチアゾール−２−イル基、ベンゾチアゾール−４−イル基、ベンゾチアゾール−５−イル基、ベンゾチアゾール−６−イル基、ベンゾチアゾール−７−イル基、ベンズイソキサゾール−３−イル基、ベンズイソキサゾール−４−イル基、ベンズイソキサゾール−５−イル基、ベンズイソキサゾール−６−イル基、ベンズイソキサゾール−７−イル基、ナフタレン−１−イル基、ナフタレン−２−イル基、キノリン−２−イル基、キノリン−３−イル基、キノリン−４−イル基、キノリン−５−イル基、キノリン−６−イル基、キノリン−７−イル基、キノリン−８−イル基、キノキサリン−５−イル基、キノキサリン−６−イル基、キナゾリン−４−イル基、キナゾリン−５−イル基、キナゾリン−６−イル基、キナゾリン−７−イル基、キナゾリン−８−イル基、ベンゾオキサジン−５−イル基、ベンゾオキサジン−６−イル基、ベンゾオキサジン−７−イル基、ベンゾオキサジン−８−イル基、ベンゾチアジン−５−イル基、ベンゾチアジン−６−イル基、ベンゾチアジン−７−イル基、ベンゾチアジン−８−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−６−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−７−イル基、アントラセン−１−イル基等を例示することができる。
【００４２】
特に免疫グロブリンの分析または精製において良好な性能を示す点で、Ａｒは４−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、３，４−ジメチルフェニル基、３−エチル−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メチルフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−エトキシフェニル基、３，４−ジメトキシフェニル基、３，４−ジエトキシフェニル基、３−エトキシ−４−メトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メトキシフェニル基、４−メトキシ−３−メチルフェニル基、４−メチル−３−エトキシフェニル基、４−ジメチルアミノフェニル基、２−メトキシピリジン−５−イル基、２−エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、４−ピリジル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、２−クロロピリジン−５−イル基、３−メトキシ−４−メチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル基、４−メチルチオフェニル基のいずれかが好ましい。
【００４３】
Ｙで表される脱離基としては、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、メチルスルホニルオキシ基、トシル基等を挙げることができる。目的物の収率が良い点で、臭素原子が好ましい。
【００４４】
ｎについては、１から１２の整数から適宜選択することができるが、特に本発明のチアゾール誘導体としては、ｎが３，４又は５が好ましい。
【００４５】
次に、本発明のチアゾール誘導体の製造方法を詳細に説明する。
【００４６】
製造方法１
【００４７】
【化１１】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｙは脱離基を表す。）
工程１はフタルイミド誘導体（２）をアシルチオウレア誘導体（３）と反応させ、チアゾール誘導体（１ａ）を製造する方法である。フタルイミド誘導体（２）は非特許文献２や特許文献７等を参考に調製することができる。
【００４８】
工程１の反応では、反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができ、例えば、ジエチルエ−テル、テトラヒドロフラン（以下ＴＨＦ）、１，２−ジメトキシエタン（以下ＤＭＥ）、１，４−ジオキサン等のエ−テル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（以下ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド系溶媒、メタノール、エタノール等のアルコール系溶媒、ジメチルスルホキシド（以下ＤＭＳＯ）、水あるいはこれらの混合溶媒を用いることができ、収率が良い点でＤＭＦを用いるのが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができ、収率が良い点で６０℃から１５０℃の範囲で反応させるのが好ましい。本工程では、塩基存在下に行なうこともでき、塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、トリエチルアミン、トリブチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、ジメチルアニリン等の有機アミン類を用いることができる。塩基の使用量は特に制限はないが、反応基質に対して等量以上用いて反応を実施することにより、収率良く目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィーあるいは再結晶等の方法により精製することもできる。
【００４９】
工程２はチアゾール誘導体（１ａ）を塩基で処理し、本発明のチアゾール誘導体（１）を製造する方法である。塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、メチルアミン、エチルアミン、ジメチルアミン等の有機アミン類、ヒドラジン類を用いることができる。収率が良い点でヒドラジンあるいはメチルアミンが好ましい。塩基の使用量は反応基質に対して２等量以上用いて反応を実施することにより、収率良く目的物を得ることができる。本反応では、反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができ、例えば、ジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド系溶媒、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール系溶媒、ＤＭＳＯ、水あるいはこれらの混合溶媒を用いることができ、収率が良い点や後処理が簡便である点でメタノールやエタノール等のアルコール系溶媒を用いることが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィーあるいは再結晶等の方法により精製することもできる。また、反応終了後、酸で処理しアンモニウム塩として単離することもできる。反応に害を及ぼさない酸であれば使用することができ、例えば、塩酸、臭化水素酸、フッ酸、硝酸、硫酸、リン酸等の無機酸、メタンスルホン酸やトルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸等の有機酸を用いることができるが、目的物の単離が容易であることから塩酸を用いるのが好ましい。
【００５０】
製造方法２
【００５１】
【化１２】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｗはハロゲン原子を表す。）
製造方法２は２−置換アミノチアゾール誘導体（４）と酸ハロゲン化物（５）を反応させ、チアゾール誘導体（１ａ）を製造する方法である。当該方法の反応では、反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができ、例えば、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒、ジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド系溶媒、ＤＭＳＯ、水あるいはこれらの混合溶媒を用いることができ、収率が良い点でジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒を用いるのが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができ、収率が良い点で０℃から１００℃の範囲で反応させるのが好ましい。本工程では、塩基存在下に行なうこともでき、塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、トリエチルアミン、トリブチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、ジメチルアニリン等の有機アミン類を用いることができる。塩基の使用量は特に制限はないが、反応基質に対して等量以上用いて反応を実施することにより、収率良く目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィーあるいは再結晶等により精製することもできる。当該方法で合成されたチアゾール誘導体（１ａ）は、製造方法１の工程２を経由することによって、チアゾール誘導体（１）へと導くことができる。
【００５２】
上記の工程にて製造された新規なチアゾール誘導体（１）は、チアゾール誘導体（１）が固定化できる活性化基を有するマトリックスに固定して、タンパク質、特に免疫グロブリンＧの精製に用いることかできる。ここで言う活性化基とは、一般式（１）のＲ３で定義されるアミノ基やそのアンモニウム塩を場合によっては塩基存在下にて反応させた時に容易に共有結合を形成できる官能基のことで、例えば、スクシンイミドオキシカルボニル基、ホルミル基、カルボキシル基、２，２，２−トリフルオロエチルスルホニルオキシ基（トレシル基）、塩化スルホニル基、トシル基、ビニルスルホニル基、エポキシ基をあげることができる。また、チアゾール誘導体（１）を固定化できるマトリックスの材質としては特に限定はなく、例えば、架橋結合アルブミンなどのポリペプチドまたはタンパク質、アガロース、アルギネート、カラゲナン、キチン、セルロース、デキストリン、デキストラン、澱粉などの多糖、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリアクロレイン、ポリビニルアルコール、ポリメタクリレート、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリウレタンなどの合成高分子、シリカ、ガラス、多孔質珪藻土、アルミナ、ジルコニア、酸化鉄または他の金属酸化物などの無機化合物、上記物質を２つまたはそれ以上任意に組み合わせて構成される共重合体などのマトリックスをあげることができる。さらにそれらは、液相分配で使用されるデキストラン、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコールまたは加水分解澱粉などの水溶性の高分子を包含するマトリックス、またはエマルジョンを形成するのに使用されるペルフルオロデカリンなどの化合物を包含するマトリックスも含まれる。特に、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックス製造におけるマトリックスの材質としては、トヨパール（商品名）（東ソー株式会社製）などのビニルポリマー、アガロース、キトサン、デキストラン、セルロース、シリカ、ポリスチレンが好ましい。
【００５３】
ここでいうビニルポリマーとは、ビニル基などを持ったモノマーをビニル重合して得られたものを指し、モノマーとしてはメタアクリル酸メチル、２−ヒドロキシエチルメタクリレート、アクリルアミド、ビニルエステルなどが含まれる。さらに、ここでいうビニルポリマーとしては前記モノマーを２種類以上用いた共重合体や、架橋したものなどが含まれる。
【００５４】
また、マトリックスは、粒状物または非粒状物、水性溶媒に対して可溶性または不溶性、多孔性または非多孔性、いずれであっても良い。
【発明の効果】
【００５５】
本発明のチアゾール誘導体は、免疫グロブリンの分析および精製に有用であり、特に当該誘導体を固定化したマトリックスの形態で用いることにより免疫グロブリンの工業的な精製において極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物２８６の結果）。
【図２】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物３０４の結果）。
【図３】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物３２０の結果）。
【図４】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物３２９の結果）。
【図５】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物３８４の結果）。
【図６】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物４２３の結果）
【図７】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物２８６の結果）
【図８】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物３０４の結果）
【図９】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物３２０の結果）
【図１０】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物３２９の結果）
【図１１】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物３８４の結果）
【図１２】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたウシ血清アルブミンのクロマトグラフィー結果（化合物４２３の結果）
【図１３】化合物２８６固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いたリボヌクレア−ゼＡ、リゾチ−ム、αキモトリプシノ−ゲンＡの混合液のクロマトグラフィー結果
【発明を実施するための形態】
【００５７】
以下、実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明がこれらに限定されるものではない。
【００５８】
実施例１ チアゾール誘導体の合成
（合成例１）
【００５９】
【化１３】
６−フタルイミド−１−ヘキサナール（４．９５ｇ，２０．２ｍｍｏｌ）を四塩化炭素（１００ｍＬ）に溶解し臭素（１．０３ｍＬ，２０．２ｍｍｏｌ）の四塩化炭素溶液（１００ｍＬ）を滴下し２時間反応した。反応液を水（１００ｍＬ）、飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去し油状物を得た。得られた油状物をＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解し、４−メチルベンゾイルチオウレア（５．８７ｇ，２６．３ｍｍｏｌ）を加え、１０時間加熱還流した。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（３００ｍＬ）を加え酢酸エチル（３００ｍＬ）で二回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３００ｍＬ）で二回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製することによって、４−メチル−Ｎ−［５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（０．４２４ｇ，５％）を得た。ｍ．ｐ．２０３から２０５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．５８から１．８２（ｍ，４Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９７（ｓ，１Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６９から７．８６（ｍ，４Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００６０】
（合成例２）
【００６１】
【化１４】
２−アミノ−４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール（０．５０ｇ，１．６６ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液に、４−メチルベンゾイルクロリド（０．３１ｇ，１．９９ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１ｍＬ）を加え、２日間撹拌した。反応終了後、反応液を水（１０ｍＬ）で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン＝１：２）で精製し、４−メチル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（０．４０ｇ，５６％）を得た。ｍ．ｐ．１７８から１８０℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．５８から１．６６（ｍ，４Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ）， ２．４１（ｓ，３Ｈ），２．７３（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），３．７２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７６から７．８６（ｍ，６Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００６２】
（合成例３）
【００６３】
【化１５】
Ｎ−（５−ブロモ−６−オキソヘプチル）フタルイミド（１．３０ｇ，３．８５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液に、Ｎ−（３−アセトキシ−４−メチルベンゾイル）チオウレアを加え、８０℃で７時間反応させた。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（３０ｍＬ）を加え酢酸エチル（５０ｍＬ）で二回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で二回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製；Ｒｆ＝０．３２：ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）で精製し、得られた褐色固体を酢酸エチル／ヘキサンの混合溶媒で洗浄することによって、白色固体の３−アセトキシ−４−メチル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．８２３ｇ，４９％）を得た。：ｍ．ｐ．１７０から１７２℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６０から１．６６（ｍ，４Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｓ，３Ｈ），２．７２から２．７４（ｍ，２Ｈ），３．５３から３．６４（ｍ，２Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７９から７．９３（ｍ，６Ｈ），１２．４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。
【００６４】
（合成例４）
【００６５】
【化１６】
モノテレフタル酸メチルクロリド（１．４１ｇ，７．１０ｍｍｏｌ）のクロロホルム（３０ｍＬ）溶液に、氷冷下にて２−アミノ−４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール（１．５６ｇ，４．７４ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１．２０ｍＬ，７．９８ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液を加え、一晩反応させた。反応終了後、反応混合物を水（２０ｍＬ）、飽和食塩水（２０ｍＬ）で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製；Ｒｆ＝０．１６：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）で精製し、４−メトキシカルボニル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（０．８１５ｇ，３３％）を得た。：ｍ．ｐ．１７３から１７４℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６０から１．６７（ｍ，４Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），２．７２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９０（ｄ，３Ｈ），７．８０から７．９０（ｍ，４Ｈ），８．０６から８．２０（ｍ，４Ｈ），１２．７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。
【００６６】
（合成例５）
【００６７】
【化１７】
２−アミノ−４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール（１．０ｇ，３．１７ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液に、３−シアノベンゾイルクロリド（０．７９ｇ，４．７５ｍｍｏｌ）を氷冷下にて加えた。次いでトリエチルアミン（０．７２ｍＬ，４．７９ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液を滴下し、一晩反応させた。反応終了後、反応混合物を水（２０ｍＬ）、飽和食塩水（２０ｍＬ）で順次洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２）で精製し、３−シアノ−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（０．５７ｇ，４０％）を得た。ｍ．ｐ．１７０から１７２℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．６９から１．７０（ｍ，４Ｈ），１．９７（ｓ，３Ｈ），２．７４（ｔ，Ｊ＝６．５，２Ｈ），３．７３（ｔ，Ｊ＝６．８，２Ｈ），７．５６（ｄｄ，Ｊ＝８．０ ａｎｄ ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７１から７．８６（ｍ，５Ｈ），８．０５（ｍ，１Ｈ），８．１６（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００６８】
（参考合成例１）
アルゴン雰囲気下、４−メチル−Ｎ−｛５−（４−フタルイミドブチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド（０．１０５ｇ，０．２５ｍｍｏｌ）とフェロセン（０．０２３ｇ，０．１２５ｍｍｏｌ）に、ＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）、３Ｍ−ヨウ化トリフルオロメチル／ＤＭＳＯ溶液（０．２５ｍＬ，０．７５ｍｍｏｌ）、１Ｍ−硫酸／ＤＭＳＯ溶液（０．２５ｍＬ，０．２５ｍｍｏｌ）を加えて撹拌した。この溶液に、室温下で３１％過酸化水素水（７５μＬ，０．７５ｍｍｏｌ）を滴下した。反応終了後、反応溶液を水（２００ｍＬ）にあけ、しばらく撹拌した。クロロホルムで抽出し、得られた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、４−メチル−Ｎ−｛４−トリフルオロメチル−５−（４−フタルイミドブチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドの白色固体（０．０２３ｇ，１９％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．７９から１．８２（ｍ，４Ｈ），２．４７（ｓ，３Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７２から７．９０（ｍ，６Ｈ），９．３７（ｓ，１Ｈ）；１９Ｆ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：−６０．８７。
【００６９】
（合成例６から８１）
合成例１または２の方法に準じて、表１から１２に記載したチアゾール誘導体を得た。
【００７０】
【表１】
【００７１】
【表２】
【００７２】
【表３】
【００７３】
【表４】
【００７４】
【表５】
【００７５】
【表６】
【００７６】
【表７】
【００７７】
【表８】
【００７８】
【表９】
【００７９】
【表１０】
【００８０】
【表１１】
【００８１】
【表１２】
（合成例８２）
【００８２】
【化１８】
４−メチル−Ｎ−｛５−（４−フタルイミドブチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド（０．６０ｇ，１．４３ｍｍｏｌ）のエタノール（１０ｍＬ）溶液に、ヒドラジン一水和物（０．３５ｍＬ、７．１２ｍｍｏｌ）を室温にて加え、一晩撹拌した。反応終了後、反応溶液を減圧留去し、１Ｍ 塩酸（６ｍＬ）を加えた。析出した固体を濾別し、濾液を酢酸エチルで洗浄し、水層を減圧留去した。得られた固体にエタノールとトルエンを加え共沸し十分に乾燥し、固体を瀘取した。得られた固体を酢酸エチルにて洗浄することによって、４−｛２−（４−メチルベンゾイル）アミノチアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．４４ｇ，収率：９５％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６４から１．６７（ｍ，４Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ），２．７７から２．８０（ｍ，４Ｈ），７．３２（ｓ，１Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），８．０１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），８．０７（ｂｒ ｓ，３Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８３】
（合成例８３）
【００８４】
【化１９】
２−クロロ−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．２２ｇ，０．４８ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、０．０５Ｍのヒドラジンエタノール溶液（３４ｍＬ）を室温にて加え、一晩撹拌した。反応終了後、反応溶液を減圧留去し、１Ｍ 塩酸（３ｍＬ）を加えた。析出した固体を濾別し、濾液を減圧留去した。得られた固体をエタノール並びに酢酸エチルを用いて固体を洗浄することにより、４−｛２−（２−クロロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の褐色固体（０．０５０ｇ，収率：２１％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．４２から１．７７（ｍ，４Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），２．６３から２．９２（ｍ，４Ｈ），７．３３から７．６７（ｍ，４Ｈ），７．６８から８．１６（ｍ，３Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８５】
（合成例８４）
【００８６】
【化２０】
３，４−ジクロロ−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．２５ｇ，０．５１ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、ヒドラジン一水和物（０．０７ｍＬ，１．５３ｍｍｏｌ）を室温にて加え、一晩撹拌した。反応終了後、反応溶液を留去し、１Ｍ 塩酸（３ｍＬ）を加え、室温で一晩撹拌した。析出した固体を濾別し、濾液を減圧留去した。得られた固体をエタノール並びに酢酸エチルを用いて洗浄することにより、４−｛２−（３，４−ジクロロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．１０ｇ， 収率：５０％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．４６から１．７４（ｍ，４Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ）， ２．６２から２．９１（ｍ，４Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８５から７．９９（ｍ，３Ｈ），８．０３から８．１３（ｍ，１Ｈ），８．０４（ｄｄ，Ｊ＝２．０ ａｎｄ ８．４Ｈｚ，１Ｈ），８．３３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）。
【００８７】
（合成例８５）
【００８８】
【化２１】
４−メチル−Ｎ−［４−メチル−５-｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．２３ｇ，０．５３ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、ヒドラジン一水和物（０．２３ｍＬ，５．３０ｍｍｏｌ）を加え３時間還流した。反応終了後、反応溶液を留去し、残渣に１Ｍ 塩酸（５ｍＬ）を加え、撹拌した。析出した固体を濾別し、濾液を減圧留去した。得られた固体をエタノール並びに酢酸エチルを用いて洗浄することにより、４−｛４−メチル−２−（４−メチルベンゾイルアミノ）チアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．０４３ｇ，収率：２４％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．５５から１．８０（ｍ，４Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ），２．６４から２．９２（ｍ，４Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），７．７８から８．０５（ｍ，３Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８９】
（合成例８６）
【００９０】
【化２２】
４−トリフルオロメチル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．３０ｇ，０．６２ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、０．０５Ｍ ヒドラジンエタノール溶液（３０ｍＬ）を室温にて加え、２時間還流した。反応終了後、反応溶液を留去し、１Ｍ 塩酸（３ｍＬ）を加え、室温で２時間撹拌した。析出した固体を濾別し、濾液を減圧留去した。得られた固体をエタノール並びに酢酸エチルを用いて洗浄することにより、４−｛４−メチル−２−（４−トリフルオロメチルベンゾイルアミノ）チアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．１０ｇ，収率：４１．７％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．４９から１．７３（ｍ，４Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），２．６０から２．９０（ｍ，４Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．９７から８．１９（ｍ，３Ｈ），８．２６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００９１】
（合成例８７）
【００９２】
【化２３】
４−メトキシカルボニル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］−ベンズアミド（０．５３５ｇ，１．１２ｍｍｏｌ）に０．５Ｍヒドラジンエタノール溶液（１３．５ｍＬ）を加え常温で一晩反応させた。反応終了後、溶液を減圧留去した。残渣に１Ｍ塩酸を加え超音波で懸濁し、セライトを敷いたガラスフィルターで固体を濾別した。濾液を減圧留去し固体を再度析出させ、少量の熱エタノールを加え洗浄することによって、４−［２−｛４−（メトキシカルボニル）ベンゾイルアミノ｝−４−メチルチアゾール−５−イル］ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．３６ｇ，収率：８４％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６０から１．７０（ｍ，４Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．７２から２．８０（ｍ，４Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），７．９７（ｂｒ ｓ，３Ｈ），８．０７から８．２１（ｍ，４Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００９３】
（合成例８８）
【００９４】
【化２４】
３−アセトキシ−４−メチル−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．８０ｇ，１．６２ｍｍｏｌ）に０．５Ｍヒドラジンエタノール溶液（１０ｍＬ）を加え常温で一晩反応させた。反応終了後、溶液を減圧留去した後、残渣に１Ｍ塩酸を加え超音波で懸濁し、セライトを敷いたガラスフィルターで固体を濾別した。濾液を減圧留去し固体を再度析出させ、少量の熱エタノールを加え洗浄することによって、４−｛２−（３−ヒドロキシ４−メチルベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．４８ｇ，収率：７５％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６０から１．７０（ｍ，４Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．２３（ｓ，３Ｈ），２．７２から２．８１（ｍ，４Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４４から７．５０（ｍ，２Ｈ），７．９４（ｂｒ ｓ，３Ｈ）９．８０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００９５】
（合成例８９）
【００９６】
【化２５】
３−シアノ−Ｎ−［４−メチル−５−｛４−（フタルイミド）ブチル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドに０．５Ｍヒドラジンエタノール溶液（７ｍＬ）を加え常温で一晩反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去し、残渣に１Ｍ塩酸を加え超音波で懸濁し、セライトを敷いたガラスフィルターで濾過した。溶媒を減圧留去し、少量のエタノールを加え溶解した後、酢酸エチルで再沈殿させて精製し、４−｛２−（３−シアノベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル｝ブチルアミン塩酸塩の白色固体（０．２５ｇ，収率：４６％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，ＤＭＳＯ，ｐｐｍ）：δ １．６２から１．６５（ｍ，４Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），３．４３から３．４６（ｍ，４Ｈ），７．５６（ｄｄ，Ｊ＝８．０ ａｎｄ ８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），８．１０から８．２２（ｍ，４Ｈ），８．４９（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００９７】
（合成例９０から１７９）
合成例８９の方法に準じて、表１３から２６に記載したチアゾール誘導体を得た。
【００９８】
【表１３】
【００９９】
【表１４】
【０１００】
【表１５】
【０１０１】
【表１６】
【０１０２】
【表１７】
【０１０３】
【表１８】
【０１０４】
【表１９】
【０１０５】
【表２０】
【０１０６】
【表２１】
【０１０７】
【表２２】
【０１０８】
【表２３】
【０１０９】
【表２４】
【０１１０】
【表２５】
【０１１１】
【表２６】
合成例１から８１に例示した方法によって合成した本発明に関わるチアゾール誘導体（１ａ）を表２７から３２にまとめて例示した。
【０１１２】
【化２６】
【０１１３】
【表２７】
【０１１４】
【表２８】
【０１１５】
【表２９】
【０１１６】
【表３０】
【０１１７】
【表３１】
【０１１８】
【表３２】
また、合成例８２から１７９に例示した方法によって合成した本発明に関わるチアゾール誘導体（１）を表３３から４１にまとめて例示した。
【０１１９】
【化２７】
【０１２０】
【表３３】
【０１２１】
【表３４】
【０１２２】
【表３５】
【０１２３】
【表３６】
【０１２４】
【表３７】
【０１２５】
【表３８】
【０１２６】
【表３９】
【０１２７】
【表４０】
【０１２８】
【表４１】
参考例１ チアゾール誘導体のアガロースゲルへの固定化（その１）
チアゾール誘導体を４０μｍｏｌ／ｍＬになるようＤＭＳＯに溶解し、これに等量の０．５Ｍ 塩化ナトリウムを含む０．２Ｍ 炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．３）を加えて濃度２０μｍｏｌ／ｍＬのチアゾール誘導体溶液を調製した。Ｎ−ヒドロキシスクシニミド（ＮＨＳ）にて活性化されたアガロースゲルであるＨｉＴｒａｐ ＮＨＳ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ ＨＰ １ｍＬ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス株式会社製；以下ＨｉＴｒａｐカラムと略記する）に、非特許文献３に記載された方法に従って前記チアゾール誘導体溶液を２ｍＬ通液することによって固定化を行なった。未反応のスクシンイミドオキシカルボニル基のブロッキングは、非特許文献３に記載された方法に従って行なった。固定化量は非特許文献３に記載された方法のうち「Ｂ．酸性条件法」に従って、ＨｉＴｒａｐカラム通液前後のリガンド（チアゾール誘導体）溶液の紫外吸収極大波長（３００ｎｍ付近）における吸光度をＵ−２９００スペクトロフォトメーター（日立製作所製）で測定することにより算出した。当該方法で固定化した各化合物の固定化リガンド密度を表４２に示す。なお、本実施例以降で記載の化合物番号は表３３から４１記載の化合物番号に対応する。
【０１２９】
【表４２】
参考例２ チアゾール誘導体のアガロースゲルへの固定化（その２）
チアゾール誘導体を２０μｍｏｌ／ｍＬ、トリエチルアミンを４０μｍｏｌ／ｍＬ含むＤＭＳＯ溶液を調製した。ＨｉＴｒａｐカラムをＤＭＳＯで置換後、これに前記チアゾール誘導体−トリエチルアミンのＤＭＳＯ溶液を２ｍＬ通液した。一時間放置した後、ＨｉＴｒａｐカラムに３ｍＬのＤＭＳＯを通液して、さらに５ｍＬの０．５Ｍ 塩化ナトリウムを含む０．２Ｍ 炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．３）を通液した。未反応のスクシンイミドオキシカルボニル基のブロッキングは、非特許文献３に記載された方法に従って行なった。固定化量は非特許文献３に記載された方法のうち「Ｂ．酸性条件法」に従って、ＨｉＴｒａｐカラム通液前後のリガンド（チアゾール誘導体）溶液の紫外吸収極大波長（３００ｎｍ付近）における吸光度をＵ−２９００スペクトロフォトメーター（日立製作所製）で測定することにより算出した。当該方法で固定化した化合物３０４の固定化リガンド密度を表４３に示す。
【０１３０】
【表４３】
参考例３ チアゾール誘導体固定化アガロースゲルを用いたタンパク質の吸脱着（その１）
参考例１あるいは２に記載の方法にて調製したチアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムをＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス株式会社製クロマトグラフィー装置）に取り付け、０．７Ｍ 硫酸ナトリウムを含む１０ｍＭ リン酸ナトリウム−１０ｍＭ クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）（以下平衡化緩衝液と呼ぶ）を２０ｍＬ通液し平衡化した。ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓを流速１ｍＬ／ｍｉｎで自動運転し、平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、同緩衝液に溶解したヒト血漿由来免疫グロブリン製剤（化血研製、本製剤の免疫グロブリンは免疫グロブリンＧである）０．５ｍｇ（ＯＤ２８０＝０．７）を添加してカラムに通液した。さらに平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、平衡化緩衝液から１０ｍＭ リン酸ナトリウム−１０ｍＭ クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）への硫酸ナトリウムに関する直線濃度勾配クロマトグラフィーを行なった。免疫グロブリンのカラムからの溶出は２８０ｎｍにおける吸光度をモニターして検出した。溶出液は１ｍＬずつ分画し、各フラクションの２８０ｎｍにおける吸光度をＵ−２９００スペクトロフォトメーター（日立製作所製）で測定し回収率を算出した。チアゾール誘導体を固定化したＨｉＴｒａｐカラムを用いて行なったクロマトグラフィーの結果を図１から図６に示し、これらのクロマトグラフィーにおける免疫グロブリンの回収率を表４４に示す。いずれのチアゾール誘導体を用いたときも免疫グロブリンは５０％以上の回収率で回収され、チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムによる免疫グロブリンの吸脱着が確認された。特に化合物２８６、３０４、３２９を用いた場合の回収率は９０％以上と極めて高かった。
【０１３１】
【表４４】
それぞれの吸脱着操作後には１００ｍＭ 水酸化ナトリウム水溶液を１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。前記のチアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムはいずれもこの再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【０１３２】
参考例４ チアゾール誘導体固定化アガロースゲルを用いたタンパク質の吸脱着（その２）
参考例１あるいは２に記載の方法にて調製したチアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムをＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス株式会社製クロマトグラフィー装置）に取り付け、前記平衡化緩衝液を２０ｍＬ通液し平衡化した。ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓを流速１ｍＬ／ｍｉｎで自動運転し、平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、同緩衝液に溶解したウシ血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ社製）０．５ｍｇ（ＯＤ２８０＝０．３）を添加してカラムに通液した。さらに平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、平衡化緩衝液から１０ｍＭ リン酸ナトリウム−１０ｍＭ クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）への硫酸ナトリウムに関する直線濃度勾配クロマトグラフィーを行なった。ウシ血清アルブミンのカラムからの溶出は２８０ｎｍにおける吸光度をモニターして検出した。溶出液は１ｍＬずつ分画し、各フラクションの２８０ｎｍにおける吸光度をＵ−２９００スペクトロフォトメーター（日立製作所製）で測定し回収率を算出した。各種チアゾール誘導体を固定化したＨｉＴｒａｐカラムを用いて行なったクロマトグラフィーの結果を図７から１２に示す。また、これらのクロマトグラフィーにおけるウシ血清アルブミンの回収率を表４５に示す。いずれのチアゾール誘導体を用いたときもウシ血清アルブミンは１０番目の画分までに溶出しており、カラムへの吸着はほとんど見られなかった。また、図１から６に示した免疫グロブリンを通液したときの結果とは大きく異なっていた。よって、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスを用いることで、試料中の免疫グロブリンとウシ血清アルブミンとの分離が可能であることが示された。
【０１３３】
【表４５】
それぞれの吸脱着操作後には１００ｍＭ 水酸化ナトリウム水溶液を１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。前記のチアゾール誘導体を固定化ＨｉＴｒａｐカラムはいずれもこの再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【０１３４】
参考例５ チアゾール誘導体固定化アガロースゲルを用いたタンパク質の吸脱着（その３）
参考例１に記載の方法にて調製した化合物２８６を固定化したＨｉＴｒａｐカラムをＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス株式会社製クロマトグラフィー装置）に取り付け、前記平衡化緩衝液を２０ｍＬ通液し平衡化した。ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓを流速１ｍＬ／ｍｉｎで自動運転し、平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、同緩衝液に溶解したリボヌクレア−ゼＡ、リゾチ−ム、αキモトリプシノ−ゲンＡの混合液（リボヌクレア−ゼＡ ０．１５ｍｇ、リゾチ−ム ０．０３ｍｇ、αキモトリプシノ−ゲンＡ ０．０４ｍｇ）（ＯＤ２８０＝０．２４）を添加してカラムに通液した。さらに平衡化緩衝液を１０ｍＬ通液後、平衡化緩衝液から１０ｍＭ リン酸ナトリウム−１０ｍＭ クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）への硫酸ナトリウムに関する直線濃度勾配クロマトグラフィーを行なった。タンパク質のカラムからの溶出は２８０ｎｍにおける吸光度の吸光度をモニターして検出した。溶出液は１ｍＬずつ分画し、各フラクションの２８０ｎｍにおける吸光度をＵ−２９００スペクトロフォトメーター（日立製作所製）で測定し回収率を算出した。化合物２８６を固定化したＨｉＴｒａｐカラムを用いて行なったクロマトグラフィーの結果を図１３に示し、このクロマトグラフィーにおけるタンパク質の回収率を表４６に示す。いずれのタンパク質も１０番目の画分以内に溶出しており、免疫グロブリン（２５番目から４５番目までの画分に溶出、図１参照）とは異なる画分となった。このことから、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスを用いることで、試料中の免疫グロブリンとリボヌクレア−ゼＡ、リゾチ−ム、αキモトリプシノ−ゲンＡとの分離が可能であることが示された。
【０１３５】
【表４６】
吸脱着操作後には１００ｍＭ 水酸化ナトリウム水溶液を１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。前記のチアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムはこの再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３はフタルイミド基、アミノ基又はアンモニウム塩であることを表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表す。）で表されるチアゾール誘導体。
【請求項２】
Ａｒの置換基が、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、水酸基又はシアノ基である請求項１に記載のチアゾール誘導体。
【請求項３】
Ａｒが、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、水酸基又はシアノ基から選ばれた１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である請求項１に記載のチアゾール誘導体。
【請求項４】
一般式（２）
【化２】
（式中、Ｒ１及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｙは脱離基を表す。）で表されるフタルイミド誘導体と、一般式（３）
【化３】
（式中、Ｒ２及びＡｒは前記と同じ意味を表す。）で表されるアシルチオウレア誘導体を反応させることを特徴とする、一般式（１ａ）
【化４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法。
【請求項５】
一般式（４）
【化５】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びｎは前記と同じ意味を表す。）で表されるチアゾール誘導体と一般式（５）
【化６】
（式中、Ａｒは前記と同じ意味を表し、Ｗはハロゲン原子を表す。）で示される酸ハロゲン化物を塩基存在下にて反応させ、一般式（１ａ）
【化７】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法。
【請求項６】
一般式（１ａ）
【化８】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で表されるチアゾール誘導体を塩基によって処理し、一般式（１ａ’）
【化９】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）を得た後、酸によって処理することを特徴とする、一般式（１ａ’’）
【化１０】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｚ−は共役塩基を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法。
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３はフタルイミド基、アミノ基又はアンモニウム塩であることを表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表す。）で表されるチアゾール誘導体。
【請求項２】
Ａｒの置換基が、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、水酸基又はシアノ基である請求項１に記載のチアゾール誘導体。
【請求項３】
Ａｒが、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、水酸基又はシアノ基から選ばれた１つ以上の置換基で置換されていてもよい芳香族基である請求項１に記載のチアゾール誘導体。
【請求項４】
一般式（２）
【化２】
（式中、Ｒ１及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｙは脱離基を表す。）で表されるフタルイミド誘導体と、一般式（３）
【化３】
（式中、Ｒ２及びＡｒは前記と同じ意味を表す。）で表されるアシルチオウレア誘導体を反応させることを特徴とする、一般式（１ａ）
【化４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法。
【請求項５】
一般式（４）
【化５】
（式中、Ｒ１、Ｒ２及びｎは前記と同じ意味を表す。）で表されるチアゾール誘導体と一般式（５）
【化６】
（式中、Ａｒは前記と同じ意味を表し、Ｗはハロゲン原子を表す。）で示される酸ハロゲン化物を塩基存在下にて反応させ、一般式（１ａ）
【化７】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法。
【請求項６】
一般式（１ａ）
【化８】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）で表されるチアゾール誘導体を塩基によって処理し、一般式（１ａ’）
【化９】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）を得た後、酸によって処理することを特徴とする、一般式（１ａ’’）
【化１０】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｚ−は共役塩基を表す。）で示されるチアゾール誘導体の製造方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【公開番号】特開２０１０−１５９２３９（Ｐ２０１０−１５９２３９Ａ）
【公開日】平成２２年７月２２日（２０１０．７．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−７０９３（Ｐ２００９−７０９３）
【出願日】平成２１年１月１５日（２００９．１．１５）
【出願人】（０００１７３７６２）公益財団法人相模中央化学研究所 (151)
【出願人】（０００００３３００）東ソー株式会社 (1,901)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年７月２２日（２０１０．７．２２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１月１５日（２００９．１．１５）
【出願人】（０００１７３７６２）公益財団法人相模中央化学研究所 (151)
【出願人】（０００００３３００）東ソー株式会社 (1,901)
【Ｆターム（参考）】
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