新規チオフェンカルボキサミド誘導体及びその医薬用途
【課題】グルコキナーゼ活性化作用を有する化合物の提供。
【解決手段】下記一般式（Ｉ）:
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］で表される化合物又はそのプロドラック、或いはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする医薬組成物。
【解決手段】下記一般式（Ｉ）:
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］で表される化合物又はそのプロドラック、或いはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規チオフェンカルボキサミド誘導体及びその医薬用途に関する。当該化合物は、グルコキナーゼ活性化剤として様々な医薬用途を有する。
【背景技術】
【０００２】
グルコキナーゼ（ATP:D-glucose 6-phosphotransferae, EC2.7.1.1.）は、哺乳類に存在する４種のヘキソキナーゼのうちの１つ（ヘキソキナーゼIV）である。ヘキソキナーゼはグルコース代謝の最初の段階を触媒する酵素であり、グルコースをグルコース‐６リン酸へ変換する。グルコキナーゼは主に肝臓と膵臓β細胞に発現しており、グルコース代謝の律速酵素として働き、全身のグルコースホメオスタシスに重要な役割を果たしている。
【０００３】
グルコキナーゼはグルコースに対し低い親和性を持ち、生理的な血糖値に近いKm値（8-15mM）をもっている。また、グルコキナーゼは生理的な濃度のグルコース‐６リン酸による阻害を受けない。それゆえ、食事によって正常血糖値（5mM）が10〜15mMに上昇するとグルコキナーゼを介したグルコース代謝が増大する。これらのことから、グルコキナーゼは肝臓や膵臓β細胞においてグルコースセンサーとして働くと考えられた。
【０００４】
動物におけるグルコキナーゼの役割は遺伝子改変動物を用いた研究によって確認された。グルコキナーゼを発現しないマウスは生後まもなく重篤な糖尿病によって死亡し、一方、グルコキナーゼを過剰発現させたマウスは耐糖能を改善することが報告された。これらの研究によって、グルコキナーゼは実際に全身のグルコースホメオスタシスに重要な役割があることが確認された。
【０００５】
若年発症型の成人発症型糖尿病（MODY-2）はグルコキナーゼ遺伝子の機能喪失の突然変異によって引き起こされ、グルコキナーゼ活性の低下が血糖上昇の原因となっている。さらに、グルコキナーゼの活性を上昇させる突然変異を持つ家系も見つかっており、これらの家系では血漿インスリンレベルの上昇によって空腹時低血糖状態を示す。
【０００６】
このように、グルコキナーゼはグルコースセンサーとして働き、血糖調整に重要な役割を果たしており、グルコースセンサーシステムを利用した血糖コントロールは多くのII型糖尿病患者で有用な治療となると考えられる。グルコキナーゼを活性化する物質は、グルコースセンサーの働きを高めることによって、膵臓β細胞ではインスリン分泌を促進する作用、肝細胞では糖取り込みを促進し、糖放出の抑制する作用が期待できるので、II型糖尿病の予防又は治療剤として有用であると考えられる。
【０００７】
これまでにグルコキナーゼ活性化作用を有する化合物は多数報告されている（非特許文献１）。二つの５員環芳香族複素環がアミド結合した化合物としては、特許文献１にピロール環を有する化合物が、特許文献２にインドール環を有する化合物が報告されているが、これらの化合物は、本願発明のチオフェンカルボキサミド誘導体とは構造が異なるものである。
【０００８】
一方、チオフェンカルボキサミド誘導体としては、エナミン社（ウクライナ）より２，５−ジメチルチオフェン−３−カルボン酸 チアゾール−２−イルアミドが試薬として販売されているが、生物活性等に関する報告はなく、チオフェン環にピロリジン環を有する本願発明の化合物とは構造が異なるものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開2008/149382号
【特許文献２】国際公開2004/031179号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Expert Opin. Ther. Patents 18, 759-768, 2008
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、グルコキナーゼ活性化作用を有する化合物を提供すること、及び、グルコキナーゼ活性化作用に基づく、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、以上の点に鑑み、前記の課題を解決するための手段として、新たな基本構造を有する化合物が有効であると考え、新規グルコキナーゼ活性化剤の創製を目指して鋭意研究を重ねた。その結果、下記一般式(I)で表される化合物及びその塩が、非常に優れたグルコキナーゼ活性化作用を有し、更に溶解度等の医薬品としての物性面においても優れた性質を有しており、種々の副作用（ｈERGやCYPに対する作用）と薬効の乖離に優れた安全でかつ有用な医薬となることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明によれば、下記一般式(I):
【化１】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はそのプロドラッグ、或いはそれらの薬理学的に許容される塩が提供され、これらの化合物は、本明細書中で以後「本発明化合物」と呼ぶ。以下に本発明化合物の様々な実施形態を列挙する。
【００１４】
本発明の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子、C-F、又はC-Clであり、R1が水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基である化合物である。
【００１５】
本発明の別の一実施形態は、前記一般式(I)において、XがC-F又はC-Clであり、R1が水素原子である化合物である。
【００１６】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子であり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基である化合物である。
【００１７】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基である化合物である。
【００１８】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2である化合物である。
【００１９】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基である化合物である。
【００２０】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である化合物である。
【００２１】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である化合物である。
【００２２】
本発明はまた、前記一般式(I)で表される本発明化合物の中間体である、下記一般式(II)で表される化合物及び下記一般式(III)で表される化合物をも提供する。
【化２】
［式中、R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R8は水素原子又はアミノ基の保護基を意味する］
【化３】
［式中、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R9は臭素原子又はヨウ素原子を意味する］
【００２３】
本発明は更に、前記本発明化合物を有効成分とする医薬組成物をも提供する。即ち、本発明の医薬組成物は、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療のために使用される。
【００２４】
本発明を別の表現で記載すると、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤を製造するための本発明化合物の使用となる。
【発明の効果】
【００２５】
本発明化合物は、優れたグルコキナーゼ活性化作用を有しており、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。また、本発明は、種々の副作用（ｈERGやCYPに対する作用）と薬効の乖離に優れた安全でかつ有用な医薬を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下に、本発明化合物について説明する。
【化４】
【００２７】
上記一般式（I）で表される本発明化合物において、Xは窒素原子又はCR6、R6はハロゲン原子であり、R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基である。これらの中で、Xは窒素原子、C-F、又はC-Clが好ましく、R1は水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基が好ましい。中でも、XがC-F又はC-Clであるときは、R1は水素原子が好ましく、Xが窒素原子であるときは、R1は水素原子又はC1-C3アルキル基が好ましい。
【００２８】
R2は水素原子又はフッ素原子である。また、R3は水素原子又はC1-C6アルキル基であるが、水素原子又はC1-C3アルキル基が好ましい。
【００２９】
R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2である。これらの中で、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2であることが好ましく、中でも、他方はC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基が最適である。
【００３０】
特に好ましい本発明化合物は、一般式（I）において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である。
【００３１】
別の特に好ましい本発明化合物は、一般式（I）において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である。
【００３２】
尚、本発明化合物において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を意味する。
【００３３】
「C1-C6アルキル基」とは、１〜６個の炭素原子から成る直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｉ−ペンチル基、ｎｅｏ−ペンチル基、ｔ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｉ−ヘキシル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、１，２−ジメチルプロピル基等が挙げられる。
【００３４】
「C1-C6アルコキシ基」とは、−Ｏ−（C1-C6アルキル）基を意味し、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｉ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓ−ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ｎ−ペントキシ基、ｉ−ペントキシ基、ｎｅｏ−ペントキシ基、ｔ−ペントキシ基、１−メチルブトキシ基、２−メチルブトキシ基、１，２−ジメチルプロポキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基等が挙げられる。
【００３５】
「C1-C6アルキルチオ基」とは、−Ｓ−（C1-C6アルキル）基を意味する。また、「C1-C6アルキレンカルボン酸」とは、−（C1-C6アルキレン）−ＣＯＯＨを意味し、「C1-C6アルキレン」とは、１〜６個の炭素原子から成る直鎖状のアルキレンを意味し、例えば、メチレン、エチレン、ｎ−プロピレン、ｎ−ブチレン等が挙げられる。
【００３６】
「C1-C6アルキルスルホニル基」とは、−ＳＯ２−（C1-C6アルキル）基を意味する。また、「C1-C6アルキルカルボニル基」とは、−ＣＯ−（C1-C6アルキル）基を意味する。
【００３７】
次に、本発明化合物の中間体である化合物について説明する。
【化５】
上記一般式（II）で表される中間体において、R2は水素原子又はフッ素原子であり、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基であり、R8は水素原子又はアミノ基の保護基である。
【００３８】
更に別の本発明化合物の中間体である化合物について説明する。
【化６】
上記一般式（III）で表される中間体において、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基であり、R9は臭素原子又はヨウ素原子である。
【００３９】
「カルボキシル基の保護基」とは、通常、有機合成上カルボキシル基の保護基として知られている基を意味し、例えば、(1)メチル基、エチル基、ｉ−プロピル基、ｔ−ブチル基のような直鎖状若しくは分岐鎖状の炭素数１〜４の低級アルキル基、(2)2-ヨウ化エチル基、2,2,2-トリクロロエチル基のようなハロゲノ低級アルキル基、(3)メトキシメチル基、エトキシメチル基、ｉ−ブトキシメチル基のような低級アルコキシメチル基、(4)ブチリルオキシメチル基、ピバロイルオキシメチル基のような低級脂肪族アシルオキシメチル基、(5)1-メトキシカルボニルオキシエチル基、1-エトキシカルボニルオキシエチル基のような1-低級アルコキシカルボニルオキシエチル基、(6)ベンジル、ｐ-メトキシベンジル基、ｏ-ニトロベンジル基、ｐ-ニトロベンジル基のようなアラルキル基、(7)ベンズヒドリル基、(8)フタリジル基等が挙げられる。
【００４０】
「アミノ基の保護基」とは、通常、有機合成上アミノ基の保護基として知られている基を意味し、例えば、(1)ホルミル基、アセチル基、クロロアセチル基、ジクロロアセチル基、プロピオニル基、フェニルアセチル基、フェノキシアセチル基、チエニルアセチル基などの置換または非置換の低級アルカノイル基、(2)ベンジルオキシカルボニル基、ｔ-ブトキシカルボニル基、ｐ-ニトロベンジルオキシカルボニル基、９-フルオレニルメチルオキシカルボニル基などの置換または非置換の低級アルコキシカルボニル基、(3)メチル基、ｔ-ブチル基、2,2,2-トリクロロエチル基、トリチル基、ｐ-メトキシベンジル基、ｐ-ニトロベンジル基、ジフェニルメチル基、ピバロイルオキシメチル基などの置換低級アルキル基、(4)トリメチルシリル基、ｔ-ブチルジメチルシリル基などの置換シリル基、(5)ベンジリデン基、サリチリデン基、ｐ-ニトロベンジリデン基、ｍ-クロルベンジリデン基、3,5-ジ（ｔ-ブチル）-4-ハイドロキシベンジリデン基、3,5-ジ（ｔ-ブチル）ベンジリデン基などの置換または非置換のベンジリデン基等が挙げられる。
【００４１】
「プロドラッグ」とは、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により前記一般式(I)に変換される化合物を意味する。このようなプロドラッグは本発明の範囲に含まれ、種々のプロドラッグが当該技術分野で既知である。例えば、一般式(I)で表される化合物がカルボン酸基を有する場合のプロドラッグとしては、当該カルボン酸基がエステル化又はアミド化された化合物（例えば、エチルエステル化、カルボキシメチルエステル化、ピバロイルオキシメチル化、又はメチルアミド化された化合物）等が挙げられる。一般式(I)で表される化合物がアミノ基を有する場合のプロドラッグとしては、当該アミノ基がアシル化、アルキル化、又はリン酸化された化合物（例えば、エイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、アセトキシメチル化、又はｔ−ブチル化された化合物）等が挙げられる。
【００４２】
「薬理学的に許容される塩」とは、一般式(I)で表される化合物の生物学的有効性及び特性を保持し、生物学的又はその他の面においても不都合ではない塩を意味する。このような薬理学的に許容される塩は本発明の範囲に含まれる。薬理学的に許容される塩としては、無機酸付加塩（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等との塩）、有機酸付加塩（例えば、メタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、酢酸、シュウ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸との塩）、アミノ酸との塩（例えば、リジン、アルギニン等との塩）、アルカリ金属付加塩（例えば、ナトリウム、カリウム等との塩）、アルカリ土類金属付加塩（例えば、カルシウム、マグネシウム等との塩）、有機アミン付加塩（例えば、ジエチルアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等との塩）等が挙げられる。これらの付加塩の形成反応は、常法に従い行うことができる。
【００４３】
本発明化合物において、１つ又はそれ以上の不斉炭素が存在する場合、本発明は不斉炭素に基づく異性体及びそれらの任意の組合せの化合物のいずれも包含する。また、本発明化合物において、幾何異性又は互変異性が存在する場合、本発明はそれらの幾何異性体又は互変異性体のいずれも包含する。さらに、本発明化合物には、水やエタノール等の医薬品として許容される溶媒との溶媒和物も含まれる。
【００４４】
本発明化合物である一般式(I)で表される化合物は、以下の反応工程式Ｉ〜Ｖに示す方法、実施例に記載した方法、又は公知の方法を組み合わせて製造することができる。
［反応工程式Ｉ］
【化７】
［式中、R10はアミノ基の保護基であり、R11はC1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2であり、その他の記号は前記一般式と同義である］
【００４５】
［工程Ｉ−１］
一般式(ＩＩａ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン等）中、塩素化剤（例えば、塩化チオニル、塩化オキサリル）を用いて酸塩化物とした後、一般式(ＩＶ)で表される化合物と適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン等）を用いて反応させることによって、一般式（Ｖ）で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
また、一般式(ＩＩａ)で表される化合物と一般式(ＩＶ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによっても一般式(Ｖ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＩＶ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００４６】
［工程Ｉ−２］
「Protecting Groups in Organic Synthesis,3rd Edition,Wiley(1999)」に記載の方法を参考に、一般式(Ｖ)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(ＶＩ)で表される化合物が得られる。
【００４７】
［工程Ｉ−３］
一般式(ＶＩ)で表される化合物と一般式(ＶＩＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(Ｉａ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＶＩＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００４８】
［反応工程式ＩＩ］
【化８】
［式中、R12はC1-C6アルキルスルホニル基又はC1-C6アルキルカルボニル基であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００４９】
［工程ＩＩ−１］
一般式(ＶＩ)で表される化合物と一般式(ＶＩＩＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(ＩＸ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＶＩＩＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５０】
［工程ＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＩＸ)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(Ｘ)で表される化合物が得られる。
【００５１】
［工程ＩＩ−３］
一般式(Ｘ)で表される化合物と、一般式(ＸＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えば塩化メチレン、トルエン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、ピリジン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン等）を用いて反応させることによって、一般式(Ｉｂ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５２】
［反応工程式ＩＩＩ］
【化９】
［式中、R13は水素原子又はC1-C6アルキル基であり、R14はカルボキシル基の保護基であり、ｎは１〜６の整数であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００５３】
［工程ＩＩＩ−１］
一般式(ＶＩ)で表される化合物と一般式(ＸＩＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＩＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＩＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５４】
［工程ＩＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＩＩＩ)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(ＸＩＶ)で表される化合物が得られる。
【００５５】
［工程ＩＩＩ−３］
一般式(ＸＩＶ)で表される化合物と一般式(ＸＶ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＶＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＶ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５６】
［工程ＩＩＩ−４］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＶＩ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ｉｃ)で表される化合物が得られる。
【００５７】
［反応工程式ＩＶ］
【化１０】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００５８】
［工程ＩＶ−１］
一般式(ＸＩＶ)で表される化合物と一般式(ＸＶＩＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えば、エタノール、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（トリエチルアミン、トリトンＢ、水酸化ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＶＩＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＶＩＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５９】
［工程ＩＶ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＶＩＩＩ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ｉｄ)で表される化合物が得られる。
【００６０】
［反応工程式Ｖ］
【化１１】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００６１】
［工程Ｖ−１］
一般式(ＶＩ)で表される化合物と一般式(ＸＩＸ)で表される化合物と適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン、ジ−ｔ−ブチルピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＸ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＩＸ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００６２】
［工程Ｖ−２］
一般式(ＸＸ)で表される化合物と一般式(ＸＸＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＸＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＸＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００６３】
［工程Ｖ−３］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＸＩＩ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ｉｅ)で表される化合物が得られる。
【００６４】
反応工程式Ｉで出発原料として用いた一般式(ＩＩａ)で表される化合物は、以下の反応工程式ＶＩ〜ＶＩＩＩに示す方法、参考例に記載した方法、又は公知の方法を組み合わせて製造することが出来る。
［反応工程式ＶＩ］
【化１２】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００６５】
［工程ＶＩ−１］
一般式(ＸＸＩＩＩ)で表される化合物とハロゲン化メチルを適当な溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、アミン試薬（ジイソプロピルアミン、ヘキサメチルホスホロアミド、Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ−テトラメチルエチレンジアミンなど）存在下、塩基（ｎ−ブチルリチウム等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＸＩＶ)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から室温、反応時間は１０分間から２４時間である。
【００６６】
［工程ＶＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＸＩＶ)で表される化合物の保護基R14を導入することによって、一般式(ＸＸＶ)で表される化合物が得られる。
【００６７】
［工程ＶＩ−３］
一般式(ＸＸＶ)で表される化合物を、適当な溶媒中（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、ジエチルエーテル等）中、臭素化剤又はヨウ素化剤（例えば、Ｎ−ブロモコハク酸イミド、臭素、Ｎ−ヨードコハク酸イミド、ヨウ素等）を用いて反応させることによって、一般式(ＩＩＩａ)で表される化合物が得られる。反応温度は−５０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００６８】
［工程ＶＩ−４］
一般式(ＩＩＩａ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、有機リチウム、又は有機マグネシウム試薬（例えば、イソプロピルマグネシウムブロマイド、ｎ−ブチルリチウム等）存在下、一般式(ＸＸＶＩ)で表される化合物と反応させることによって、一般式(ＸＸＶＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００６９】
［工程ＶＩ−５］
一般式(ＸＸＶＩＩ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＸＶＩＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７０】
［工程ＶＩ−６］
一般式(ＸＸＶＩＩＩ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン等）存在下メタンスルホニルクロライドを用いて環化させることによって、一般式(ＩＩｂ)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７１】
［工程ＶＩ−７］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＩＩｂ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(ＩＩｃ)で表される化合物が得られる。
【００７２】
［反応工程式ＶＩＩ］
【化１３】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００７３】
［工程ＶＩＩ−１］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＸＶＩＩ)で表される化合物の保護基R10を除去した後、適当な溶媒中（例えば、ｉ−プロパノール、エタノール等）、酸（例えば、塩酸等）の存在下、還元剤（例えば、シアノ水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(ＩＩｄ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７４】
［工程ＶＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＩＩｄ)で表される化合物の保護基R10を導入することによって、一般式(ＩＩｂ)で表される化合物が得られる。
【００７５】
［工程ＶＩＩ−３］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＩＩｂ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(ＩＩｃ)で表される化合物が得られる。
【００７６】
［反応工程式ＶＩＩＩ］
【化１４】
［式中、R15は水酸基の保護基であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００７７】
［工程ＶＩＩＩ−１］
一般式(ＩＩＩａ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、有機リチウム、又は有機マグネシウム試薬（例えば、イソプロピルマグネシウムブロマイド、ｎ−ブチルリチウム等）存在下、一般式(ＸＸＩＸ)で表される化合物と反応させることによって、一般式(ＸＸＸ)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７８】
［工程ＶＩＩＩ−２］
一般式(ＸＸＸ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＸＸＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７９】
［工程ＶＩＩＩ−３］
一般式(ＸＸＸＩ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン等）存在下メタンスルホニルクロライドを用いて環化させることによって、一般式(ＸＸＸＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００８０】
［工程ＶＩＩＩ−４］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＸＸＩＩ)で表される化合物の保護基R15を除去することによって、一般式(ＸＸＸＩＩＩ)で表される化合物が得られる。
【００８１】
［工程ＶＩＩＩ−５］
一般式(ＸＸＸＩＩＩ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、フッ素化試薬（例えば、ジメチルアミノサルファトリフルオリド、Ｎ−フルオロ−Ｎ’−クロロメチルトリエチレンジアミン
ビス（テトラフルオロボラート）等）と反応させることによって、一般式(ＩＩｅ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００８２】
［工程ＶＩＩＩ−６］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＩＩｅ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(ＩＩｆ)で表される化合物が得られる。
【００８３】
反応工程式ＶＩで出発原料として用いた一般式(ＸＸＶＩ)で表される化合物は、前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、市販の２−ピロリドンに保護基を導入することによって、また、反応工程式ＶＩＩＩで出発原料として用いた一般式(ＸＸＩＸ)で表される化合物は、前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、市販の４−ヒドロキシピロリジン−2−オンに保護基を導入することによって得られる。
【００８４】
その他に本発明化合物を製造するために必要な出発原料、中間体、又は試薬として用いる化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を参考に製造することができる。
【００８５】
本発明化合物及び当該化合物を製造するために使用される化合物に含まれる置換基（例えば、水酸基、アミノ基、カルボン酸基等）は、当該置換基に原料又は中間体の段階で適当な保護基を導入しておくことが化合物製造上効果的である場合があり、必要に応じて前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の保護基を適宜選択して使用してもよい。
【００８６】
本発明化合物及び当該化合物を製造するために使用される化合物を反応液から単離、精製するには、通常使用される方法を用いることができる。例えば、溶媒抽出、イオン交換樹脂、担体としてシリカゲル、アルミナ等を用いたカラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分取、薄層クロマトグラフィー、スカベンジャー樹脂、再結晶等を用いることができ、これらの単離、精製法は、単独又は組み合わせて行うことができる。単離、精製は、反応毎に行ってもよいし、いくつかの反応終了後に実施してもよい。
【００８７】
本明細書中の化合物が不斉炭素を有し光学異性体が存在する場合、これらの光学異性体は、ラセミ化合物の一般的な光学分割法、例えば、一般的な光学活性な化合物とのジアステレオマー塩として再結晶する分別結晶化又はクロマトグラフィーなどの常法により分割することができる。また、光学活性体分離用カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分取によってもそれぞれの光学異性体を単離することができる。
【００８８】
このようにして製造された本発明化合物は、グルコキナーゼ活性化剤として作用することから、医薬組成物として使用することが出来る。当該医薬組成物は、糖尿病、糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。
【００８９】
本発明化合物を医薬として使用する場合の投与形態としては、「日本薬局方」製剤総則記載の各種投与形態が目的に応じて選択できる。例えば、錠剤の形態に成形するに際しては、通例、当該分野で用いられる経口摂取可能な成分を選択すればよい。例えば、乳糖、結晶セルロース、白糖、リン酸カリウム等の賦形剤がそれにあたる。更に、所望により、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、凝集防止剤等、通例製剤分野で常用される種々の添加剤を配合してもよい。
【００９０】
本発明製剤中に有効成分として含有される本発明化合物の量は、特に限定されず、広範囲より適宜選択される。有効成分化合物の投与量は、その用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度により適宜決定されるが、経口投与の場合には、本発明化合物の量が1日体重1kg当り約1μg〜100mgの範囲で、1日に1〜4回に分けて適宜投与することができる。しかしながら、投与量、回数は、治療すべき症状の程度、投与される化合物の選択及び選択された投与経路を含む関連する状況に鑑みて決定されることから、前記の投与量範囲及び回数は本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００９１】
以下に本発明の内容を、実施例、参考例、及び薬理試験例を挙げて、さらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は、その記載内容に限定されるものではない。
以下の実施例及び参考例における核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）スペクトルは、テトラメチルシランを標準物質としてケミカルシフト値をσ値（ｐｐｍ）で記載した。分裂パターンは、一重線を「ｓ」、二重線を「ｄ」、三重線を「ｔ」、多重線を「ｍ」、幅広い線を「ｂｒ」で示した。質量分析は、エレクトロスプレーイオン化法（ＥＳＩ）で行った。表中において、メチル基を「Ｍｅ」、エチル基を「Ｅｔ」、ｉ−プロピル基を「ｉ−Ｐｒ」ｎ−プロピル基を「ｎ−Ｐｒ」、ｔ−ブチル基を「ｔ−Ｂｕ」、エタンスルホニル基を「Ｅｓ」、メタンスルホニル基を「Ｍｓ」、アセチル基を「Ａｃ」、プロピオニル基を「ＥｔＣＯ」で示した。
【００９２】
参考例１
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）ピロリジン−２−オン
（Ｓ）−４−ヒドロキシピロリジン−２−オン（101g)をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（400mL）に溶解し、イミダゾール（102g）とｔ−ブチルジメチルクロロシラン（158g）を０℃で加え、室温で２１時間撹拌した。反応液を水に加え、析出した白色固体をろ取し、水で洗浄することにより、白色固体として表記化合物（210g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.02(6H,s),0.81(9H,s),2.16-2.22(1H,m),2.42-2.50(1H,m),3.14-3.18(1H,m),3.49-3.54(1H,m),4.46-4.52(1H,m),5.76(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):216(M+H)+.
【００９３】
参考例２
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）ピロリジン−２−オン（210g）と４−ジメチルアミノピリジン（5.90g）をアセトニトリル（500mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（234mL）を０℃で加え、室温で２２時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、４％クエン酸水溶液、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をヘキサンで洗浄することにより、白色固体として表記化合物（271g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.05(6H,s),0.81(9H,s),1.47(9H,s),2.36-2.42(1H,m),2.58-2.67(1H,m),3.56-3.58(1H,ｍ),3.76-3.81(1H,m),4.28-4.34(1H,m).
【００９４】
参考例３
２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−ピロリドン（25.0g）をアセトニトリル（300mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（70.5mL）と４−ジメチルアミノピリジン（1.79g）を加え、室温で５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（51.7g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.53(9H,s),1.96−2.05(2H,m),2.51(2H,t,J＝5.5Hz),3.75(2H,t,J＝7.1Hz).
【００９５】
参考例４
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸
ジイソプロピルアミン（233g）をテトラヒドロフラン（2.3L）に溶解し、ｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（1.50L）を０℃で滴下した後、４０分間撹拌した。反応液を−６８〜−６０℃に冷却し、チオフェン−３−カルボン酸（223g）のテトラヒドロフラン（500mL）溶液を滴下した後、１時間撹拌した。その後、ヨウ化メチル（254g）を加えて室温に昇温し、更に１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に６Ｎ塩酸を加えてｐＨ＝１とした後、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を水／酢酸で再結晶することにより、表記化合物（209g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.78(3H,s),7.01(1H,d,J＝5.5Hz),7.45(1H,d,J＝5.5Hz).
ESI/MS(m/z):141(M-H)-.
【００９６】
参考例５
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸（100g）をメタノール（500mL）に溶解し、塩化チオニル（200mL）をゆっくり滴下した後、３時間還流した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に水を加え、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、表記化合物（105g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.74(3H,s),3.85(3H,s),6.98(1H,d,J＝5.1Hz),7.38(1H,d,J＝5.5Hz).
【００９７】
実施例１
５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（156g）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（750mL）に溶解し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（178g）を加えて室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機相を硫酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、表記化合物（226g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.67(3H,s),3.84(3H,s),7.33(1H,s).
【００９８】
参考例６
(Ｓ）−４−ヒドロキシ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
アルゴン雰囲気下、５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（227g）をテトラヒドロフラン（350mL）に溶解し、０℃に冷却した。イソプロピルマグネシウムブロマイド（1500mL）を１０℃以下で滴下した後、０℃で２時間撹拌した。次に、（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（276g）のテトラヒドロフラン（550mL）溶液を１０℃以下で滴下した後、室温で１．５時間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、３０％クエン酸水溶液を１０℃以下で滴下、ｐＨ＝３とした後、室温で１．５時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、有機相を５％炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、粗生成物（418g）を得た。
アルゴン雰囲気下、（Ｒ）−５，５−ジフェニル−２−メチル−３，４−プロパノ−１，３，２−オキサボロリジン（49.1g）をテトラヒドロフラン（86mL）に溶解し、ボラン-ジメチルスルフィド錯体（886mL）を室温で滴下した後、２０分間撹拌した。その後、上記粗生成物（418g）のテトラヒドロフラン（450mL）溶液を室温で４５分間かけて滴下した後、３０分間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、メタノール／飽和食塩水を滴下した後、酢酸エチルを加え、有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルのショートカラム（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２）に通すことにより、粗生成物（337g）を得た。
アルゴン雰囲気下、上記粗生成物（302g）とトリエチルアミン（265mL）を塩化メチレン（800mL）に溶解し、メタンスルホニルクロライド（73.8mL）の塩化メチレン（295mL）溶液を０℃で滴下した後、３０分間撹拌した。反応液に水を加え、塩化メチレンで抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、粗生成物（304g）を得た。
上記粗生成物（265g）をテトラヒドロフラン（265mL）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリド（565mL）を室温で滴下した後、そのまま１．５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、酢酸エチルで抽出、水、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／５−２／１）にて精製することにより、黄白色固体として表記化合物（128g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.24-1.45(9H,m),1.66(1H,t,J=4.9Hz),2.18(1H,d,J=14.3Hz),2.35-2.51(1H,m),2.71(3H,s),3.51(1H,d,J=11.7Hz),3.66(1H,t,J=7.7Hz),3.83(3H,s),4.48-4.58(1H,m),5.09(1H,br.s),7.16-7.21(1H,m).
ESI/MS(m/z):342(M+H)+,340(M-H)-.
【００９９】
実施例２
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
及び実施例３
（２Ｒ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
(Ｓ）−４−ヒドロキシ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（113g）を塩化メチレン（1130mL）に溶解し、０℃に冷却した。ジエチルアミノサルファトリフルオリド（130mL）を５℃以下で滴下した後、室温で８時間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を滴下した後、塩化メチレンで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２０−１／１）にて精製することにより、黄色固体として表記化合物（２Ｓ，４Ｒ）（55.5g）及び黄色固体として表記化合物（２Ｒ，４Ｒ）（21.5g）を得た。
（２Ｓ，４Ｒ）体の物性データ
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.32-1.47(9H,m),2.05-2.23(1H,m),2.65-2.75(4H,m),3.54-3.70(1H,m),3.82(3H,s),3.90-4.05(1H,m),5.05-5.30(3H,m),7.18(1H,s).
ESI/MS(m/z):344(M+H)+,342(M-H)-.
（２Ｒ，４Ｒ）体の物性データ
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.45(9H,br.d,J=42.1Hz),2.43-2.55(2H,m),2.67(3H,ｓ),3.75-3.85(4H,m),5.12-5.35(2H,m),7.20(1H,s).
ESI/MS(m/z):344(M+H)+,342(M-H)-.
【０１００】
参考例７
５−（４−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−ヒドロキシブチル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
アルゴン雰囲気下、５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（2.00g）をテトラヒドロフラン（9.47mL）に溶解し、イソプロピルマグネシウムブロマイド（12.9mL）を−４０℃で滴下した後、１．５時間撹拌した。次に、２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.89g）のテトラヒドロフラン（11.2mL）溶液を−４０℃で滴下した後、室温で２４時間撹拌した。反応液を−１０℃に冷却し、メタノール（17.2mL）を加えた後、水素化ホウ素ナトリウム（486mg）を少しづつ加え、１５分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（2.13g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.44(9H,s),1.51-1.69(4H,m),1.79-1.84(1H,m),2.70(3H,s),3.15-3.19(1H,m),3.83(3H,s),4.57-4.87(1H,m),7.26(1H,s).
【０１０１】
実施例４
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
５−（４−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−ヒドロキシブチル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（2.13g）を塩化メチレン（58mL）に溶解し、−６０℃に冷却した。トリエチルアミン（2.58mL）、メタンスルホニルクロライド（530μL）を滴下した後、−６０℃で２時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／０−４／１）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（1.52g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.36-1.46(9H,m),1.95-1.99(3H,m),2.19-2.28(1H,m),2.67(3H,s),3.40-3.59(2H,m),3.82(3H,s),4.95-5.07(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):326(M+H)+,324(M-H)-.
【０１０２】
実施例５
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（132g）をメタノール（500mL）に溶解し、メタンスルホン酸（34.4mL）を滴下した後、室温で１時間撹拌、更に５０℃で７時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣にメタノール（360mL）を加えた後、０℃に冷却した。１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ＝８とし、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、淡赤色油状物として表記化合物（91.4g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.94-1.74(3H,m),2.14-2.18(1H,m),2.68(3H,s),2.98-3.00(1H,m),3.10-3.13(1H,m),3.82(3H,s),4.30(1H,t,J=7.0Hz),7.17(1H,s).
ESI/MS(m/z):226(M+H)+.
【０１０３】
実施例６
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
（−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩
（−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸（35.3g）をメタノール（1.00L）に溶解し、２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（21.1g）のメタノール（400mL）溶液を加え、室温で９時間静置した。析出した結晶をろ取し、メタノールで洗浄することにより、白色結晶として表記化合物（11.8g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.84-1.99(3H,m),2.28-2.21(1H,m),2.62(3H,s),3.13-3.18(2H,m),3.77(3H,s),4.66(1H,t,J=7.7Hz),5.68(2H,s),7.39(1H,d,J=8.4Hz),7.50(4H,t,J=7.7Hz),7.62-7.64(2H,m),7.95(4H,t,J=4.2Hz).
ESI/MS(m/z):226(M+H)+.
【０１０４】
実施例７
（−）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル （−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩（23.7g）をクロロホルム（100mL）に懸濁し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（82.0mL）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液をクロロホルムで抽出し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下濃縮して得られた無色油状物（10.6g）を塩化メチレン（90mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（11.2mL）、トリエチルアミン（6.80mL）を滴下した後、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた淡橙色油状物（17.2g）をメタノール（100mL）に溶解し、水（10mL）、水酸化リチウム１水和物（5.10g）を加え、５０℃で６時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸で中和し、析出した結晶をろ取することにより、白色固体として表記化合物（12.6g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.39(9H,br.d,J=51.6Hz),1.92-2.02(3H,m),2.28(1H,br.s),2.66(3H,s),3.39-3.52(2H,m),4.97(1H,br.d,J=19Hz),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):310(M-H)-.
【０１０５】
実施例８
（２Ｓ，４Ｒ）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）−４−フルオロピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（12.1g）と水酸化リチウム１水和物（4.40g）をメタノール（90mL）と水（30mL）の混合溶媒に溶解し、５０℃で４時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸でｐＨ＝６とし、析出した結晶をろ取した。ろ取した結晶を酢酸エチルに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色固体として表記化合物（11.2g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.34-1.44(9H,m),1.95-2.05(3H,m),2.21-2.32(1H,m),2.66(3H,s),3.42-3.51(2H,m),5.05-5.15(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):328(M-H)-.
【０１０６】
実施例９
２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.52g）をメタノール（14.0mL）に溶解し、０℃で水（2.33mL）と水酸化リチウム１水和物（588mg）を加え、５０℃で１７時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸で中和し、析出した結晶をろ取することにより、白色固体として表記化合物（1.26g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.34-1.44(9H,m),1.95-2.05(3H,m),2.21-2.32(1H,m),2.66(3H,s),3.42-3.51(2H,m),5.05-5.15(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):310(M-H)-.
【０１０７】
参考例８
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.00g）をトルエン（10mL）と塩化メチレン（10mL）の混合溶媒に溶解し、オキサリルクロライド（2.74mL）を滴下した後、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮、得られた残渣をトルエン（10mL）と塩化メチレン（10mL）の混合溶媒に溶解し、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（745mg）とＮ，Ｎ−ジエチルアニリン（1.98mL）を加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１−２／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（1.01g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.35-1.46(9H,m),1.70-1.75(1H,m),1.88-1.97(2H,m),2.19-2.45(1H,m),2.73(3H,s),3.38-3.55(2H,m),4.98(1H,br.t,J=35.3Hz),6.84(1H,br.d,J=36.6Hz),7.05(1H,br.t,J=15.7Hz),10.27(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１０８】
参考例９
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェンー２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸
ｔ−ブチルエステル
（２Ｓ，４Ｒ）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）−４−フルオロピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（11.0g）をトルエン（180mL）に溶解し、オキサリルクロライド（28.6mL）を０℃で滴下し、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮、得られた残渣をトルエン（150mL）に溶解し、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン（21.3mL）、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（7.75g）を０℃で加えた後、室温で１３時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２０−１／５）にて精製することにより、淡黄白色粉末として表記化合物（11.8g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.26-1.45(9H,m),2.04-2.20(1H,m),2.70-2.75(4H,m),3.57-3.68(1H,m),2.73(3H,s),3.38-3.55(2H,m),4.00(1H,br.s),5.15-5.20(1H,m),6.91(1H,s),7.10(1H,s),10.07(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):430(M+H)+,428(M-H)-.
【０１０９】
参考例１０
２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.56g）をトルエン（16mL）に懸濁し、オキサリルクロライド（4.30mL）を０℃で滴下した後、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣をトルエン（16mL）に溶解し、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（1.16g）とＮ，Ｎ−ジエチルアニリン（3.20mL）を０℃で加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝３／２）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（1.62g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.36-1.46(9H,m),1.91-1.99(3H,m),2.21-2.28(1H,m),2.74(3H,s),3.41-3.56(2H,m),4.99-5.09(1H,m),6.98(1H,s),7.06(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１１０】
参考例１１
（−）−２−メチルー５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（970mg）を塩化メチレン（10mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（2.72mL）を加えて、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（578mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.70-1.98(3H,m),2.14-2.22(1H,m),2.73(3H,s),2.99-3.05(1H,m),3.11-3.15(1H,m),4.34(1H,t,J=7.1Hz),6.80(1H,d,J=2.6Hz),7.08(1H,s).
ESI/MS(m/z):312(M+H)+,310(M-H)-.
【０１１１】
参考例１２
５−（（２Ｓ，４Ｒ−４−フルオロピロリジン−２−イル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルを用いて参考例１１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.83-2.00(1H,m),2.47-2.57(3H,m),2.72(3H,s),3.20-3.37(2H,m),4.67(1H,t,J=7.9Hz),5.22-5.36(1H,m),6.93(1H,s),7.05(1H,s).
ESI/MS(m/z):330(M+H)+,328(M-H)-.
【０１１２】
参考例１３
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルを用いて参考例１１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.74-1.96(3H,m),2.16-2.19(1H,m),2.73(3H,s),2.99-3.05(1H,m),3.10-3.16(1H,m),4.33(1H,t,J=7.0Hz),6.87(1H,d,J=2.6Hz),7.06(1H,s).
ESI/MS(m/z):312(M+H)+,310(M-H)-.
【０１１３】
参考例１４
（−）−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾール 塩酸塩を用いて参考例８と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.16-1.54(9H,m),1.89-2.12(3H,m),2.23-2.37(1H,m),2.68(3H,s),3.39-3.57(2H,m),5.03(1H,br.s),7.24(1H,br.s),7.33(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１１４】
参考例１５
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェンー２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸
ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾール 塩酸塩を用いて参考例９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.37-1.46(9H,m),2.15-2.28(1H,m),2.68-2.78(4H,m),3.58-4.24(2H,m),5.15-5.33(1H,m),5.68-6.02(1H,m),7.34-7.37(2H,m).
ESI/MS(m/z):446(M+H)+,444(M-H)-.
【０１１５】
参考例１６
２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾール 塩酸塩を用いて参考例１０と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.24-1.46(9H,m),1.93-1.97(3H,m),2.23-2.32(1H,m),2.74(3H,s),3.40-3.56(2H,m),4.95-5.11(1H,m),6.87-7.12(1H,m),7.18(1H,br.s),9.89(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１１６】
参考例１７
（−）−２−メチルー５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、（−）−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルを用いて参考例１１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.77-2.03(3H,m),2.18-2.32(1H,m),2.70(3H,s),2.91-3.01(1H,m),3.08-3.17(1H,m),4.27(1H,t,J=7.1Hz),7.30(1H,s),7.31(1H,s).
ESI/MS(m/z):328(M+H)+,326(M-H)-.
【０１１７】
参考例１８
５−（（２Ｓ，４Ｒ−４−フルオロピロリジン−２−イル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェンー２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸
ｔ−ブチルエステルを用いて参考例１１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.83-1.98(1H,m),2.46-2.57(1H,m),2.74(3H,s),3.20-3.37(2H,m),4.64-4.68(1H,m),5.22-5.36(1H,m),5.84-6.05(1H,m),7.09(1H,t,J=3.5Hz),7.10(1H,s).
ESI/MS(m/z):346(M+H)+,344(M-H)-.
【０１１８】
参考例１９
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルを用いて参考例１１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.52-1.61(1H,m),1.73-1.93(3H,m),2.14-2.25(1H,m),2.75(3H,s),2.98-3.15(1H,m),4.34(1H,t,J=7.1Hz),7.03(1H,s),7.21(1H,s).
ESI/MS(m/z):328(M+H)+,326(M-H)-.
【０１１９】
参考例２０
（−）−２−［５−メチル−４−（［1，2，4］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（156mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（192mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール１水和物（153mg）とジイソプロピルエチルアミン（171μL）と１，２，４−チアジアゾール−５−アミン（101mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（2.0mL）に溶解し、６０℃で１８時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）にて精製することにより、黄色粉末として表記化合物（68.9mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.32-1.46(9H,m),1.95-2.01(3H,m),2.21-2.34(1H,m),2.78(3H,s),3.38-3.59(2H,m),4.95-5.15(1H,m),7.16-7.20(1H,m),8.28(1H,s).
ESI/MS(m/z):395(M+H)+,393(M-H)-.
【０１２０】
参考例２０の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表１に示した。
【化１５】
【０１２１】
【表１】
【０１２２】
参考例２７
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 ［１，２，４］チアジアゾール−５−イルアミド
（−）−２−［５−メチル−４−（［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（68.9mg）を塩化メチレン（1.0mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（201μL）を加えて、室温で３時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、黄白色粉末として表記化合物（38.5mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.70-1.96(3H,m),2.16-2.26(1H,m),2.78
(3H,s),3.00-3.07(1H,m),3.13-3.16(1H,m),4.37(1H,t,J=7.0Hz),7.13(1H,s),8.28(1H,s).
ESI/MS(m/z):295(M+H)+,293(M-H)-.
【０１２３】
参考例２７の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表２に、データを表３に示した。
【化１６】
【０１２４】
【表２】
【０１２５】
【表３】
【０１２６】
参考例３４
（−）−（２−［（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）カルバミン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（35.0mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（24.0mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール １水和物（20.0mg）とＮ−ｔ−ＢＯＣ−グリシン（23.0mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（0.50ml）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（13.0μL）を加え、室温で一晩撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（54.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):487(M+H)+,485(M-H)-.
【０１２７】
参考例３４の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表４に示した。
【化１７】
【０１２８】
【表４】
【０１２９】
参考例５７
５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル)アミド（467mg）を塩化メチレン（5.0mL）に溶解し、０℃でジ−ｔ−ブチルピリジン（663μL）とクロロアセチルクロライド（239μL）を加え、室温で４時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（536mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.97-2.32(4H,m),2.71(3H,s),3.60-3.70(1H,m),3.75-3.78(1H,m),3.83-4.00(1H,m),4.8(2H,s),5.39(1H,d,J=5.5Hz),6.95(1H,s),7.15(1H,s).
ESI/MS(m/z):388(M+H)+,386(M-H)-.
【０１３０】
参考例５８
５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル)アミドの代わりに、２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル)アミドを用いて参考例５７と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.97-2.42(4H,m),2.71(3H,s),3.60-3.68(1H,m),3.75-3.83(1H,m),3.88-4.05(1H,m),4.12-4.19(2H,m),5.37-5.41(1H,m),7.20(1H,s),7.32(1H,s).
ESI/MS(m/z):404(M+H)+,402(M-H)-.
【０１３１】
参考例５９
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（２−アミノアセチル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−（２−［（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）カルバミン酸 ｔ−ブチルエステル（54.0mg）を塩化メチレン（0.50mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（0.500mL）を加え、室温で１５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝１５／１−５／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（31.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):387(M+H)+,385(M-H)-.
【０１３２】
参考例５９の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表５に示した。
【化１８】
【０１３３】
【表５】
【０１３４】
参考例８２
（−）−（２−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ）酢酸 t−ブチルエステル
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（２−アミノアセチル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（31.0mg）をテトラヒドロフラン（1.0mL）に溶解し、ブロモ酢酸 t−ブチル（16.0mg）とトリエチルアミン（8.10mg）を加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出、有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝３０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（19.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):501(M+H)+,499(M-H)-.
【０１３５】
参考例８２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表６に、データを表７に示した。
【化１９】
【０１３６】
【表６】
【０１３７】
【表７】
【０１３８】
参考例９２
（−）−３−［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）メチルアミノ］プロピオン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−メチル−５−［１−（２−メチルアミノアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（425mg）を１，４−ジオキサン（10mL）に溶解し、アクリル酸ブチル（486μL）とトリトンＢ（19.0μL）を室温で加えた後、６０℃で一晩撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝２０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（238mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.43(9H,d,J=8.1Hz),1.96-2.01(2H,m),2.09-2.38(4H,m),2.45(2H,t,J=7.0Hz),2.65-2.87(2H,m),3.11-3.29(2H,m),3.46(3H,d,J=7.3Hz),3.53-3.60(1H,m),3.71-3.88(1H,m),5.47(1H,d,J=7.3Hz),6.83-6.91(1H,m),7.23-7.28(1H,m),11.23(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):511(M+H)+,509(M-H)-.
【０１３９】
参考例９２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表８に、データを表９に示した。
【化２０】
【０１４０】
【表８】
【０１４１】
【表９】
【０１４２】
参考例９６
（２−［２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ）酢酸
ｔ−ブチルエステル
グリシンｔ−ブチルエステル 塩酸塩（210mg）とジイソプロピルエチルアミン（257μL）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（2mL）に溶解し、室温で５分間撹拌した。５０℃にて５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド（101mg）をゆっくりと加えて、５０℃で４時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝１０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（106mg）を得た。
ESI/MS(m/z):499(M+H)+,497(M-H)-.
【０１４３】
参考例９６の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１０に、データを表１１に示した。
【化２１】
【０１４４】
【表１０】
【０１４５】
【表１１】
【０１４６】
参考例９９
５−［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステル
２−メチル−５−［１−（２−メチルアミノアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（60.6mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（1.0mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（81.5μL）と５−ブロモ吉草酸メチル（27.0μL）を室温で加えた後、６０℃で一晩撹拌した。反応液を室温に冷却後、水を加え、酢酸エチルで抽出、有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール＝９／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（63.0mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.28-1.62(6H,m),2.01-2.49(9H,m),2.67-2.71(3H,m),2.76-2.99(1H,m),3.56-3.85(5H,m),4.25-4.57(1H,m),5.38(1H,d,J=6.9Hz),7.12(1H,t,J=2.3Hz),7.26-7.35(1H,m).
ESI/MS(m/z):497(M+H)+,495(M-H)-.
【０１４７】
参考例９９の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表１２に示した。
【化２２】
【０１４８】
【表１２】
【０１４９】
実施例１０
（−）−２−メチル−５−［１−（２−ウレイドアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（270mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（334mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール １水和物（264mg）とヒダントイン酸（206mg）をテトラヒドロフラン（5.40mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（360μL）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝９／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（287mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.94-2.48(4H,m),2.68-2.70(3H,m),3.55-3.84(2H,m),3.89-4.07(2H,m),5.29-5.37(1H,m),7.11-7.12(1H,m),7.32-7.36(1H,m)
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１５０】
実施例１１
（−）−２−メチル−５−［１−（２−ウレイドアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミドの代わりに（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミドを用いて実施例１０と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.94-2.46(4H,m),2.70-2.72(3H,m),3.54-3.84(2H,m),3.84-4.06(2H,m),5.27-5.37(1H,m),7.34-7.35(1H,m),7.39(1H,s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１５１】
実施例１２
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−１−（２−メタンスルホニルアミノアセチル）−ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
５−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロピロリジン−２−イル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（297mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（345mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール１水和物（276mg）とＮ−メタンスルホニルグリシン（276mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（3.0mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（308μL）を加え、室温で５．５時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、酢酸エチルにて再結晶を行うことにより、白色粉末として表記化合物（291mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.10-2.18(1H,m),2.59(3H,s),3.00(3H,s),3.80-4.02(4H,m),5.26-5.47(2H,m),7.04-7.07(1H,m),7.56(1H,s),9.70(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):465(M+H)+,463(M-H)-.
【０１５２】
実施例１２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１３にデータを表１４に示した。
【化２３】
【０１５３】
【表１３】
【０１５４】
【表１４】
【０１５５】
実施例２２
（−）−２−メチル−５−［１−（（Ｓ）−２−ウレイドプロピオニル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−５−［１−（（Ｓ）−２−アミノプロピオニル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（60.0mg）を水（1.8mL）に溶解し、シアン酸カリウム（62.3mg）と酢酸（79.9μL）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（63.5mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ:1.24-1.40(3H,m),1.85-2.46(4H,m),2.61-2.74(3H,m),3.64-3.92(2H,m),4.45-4.60(1H,m),5.24-5.41(1H,m),7.11-7.12(1H,m),7.24-7.27(1H,s).
ESI/MS(m/z):426(M+H)+,424(M-H)-.
【０１５６】
実施例２３
（−）−５−［（２Ｓ,４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−アセチルアミノプロピオニル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−アミノプロピオニル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（31.8mg）を塩化メチレン（1.0mL）に溶解し、アセチルクロリド（11.3μL）とピリジン（19.3μL）を加えた後、室温で４５分間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出、有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（27.8mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.29-1.33(3H,m),2.67(3H,d,J=6.2Hz),2.74-2.79(1H,m),3.85-3.98(1H,m),4.27-4.35(1H,m),4.58-4.66(2H,m),5.31-5.49(2H,m),7.13(1H,d,J=2.5Hz),7.32(1H,s).
ESI/MS(m/z):443(M+H)+,441(M-H)-.
【０１５７】
実施例２３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１５にデータを表１６に示した。
【化２４】
【０１５８】
【表１５】
【０１５９】
【表１６】
【０１６０】
実施例３３
（−）−（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチルアミノ）酢酸
トリフルオロ酢酸塩
（−）−（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチルアミノ）酢酸 ｔ−ブチルエステル（19.0mg）を塩化メチレン（0.25mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（0.25mL）を加え、室温で一晩撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣を水（1.0mL）に溶解後、凍結乾燥することにより、白色粉末として表記化合物（13.0mg）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):2.18-2.42(2H,m),2.64-2.83(4H,m),3.75-3.97(4H,m),4.13-4.23(1H,m),5.30-5.61(2H,m),7.34-7.39(1H,m),7.63(1H,s),9.25(1H,br.s),12.21(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):445(M+H)+,443(M-H)-.
【０１６１】
実施例３３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１７にデータを表１８に示した。
【化２５】
【０１６２】
【表１７】
【０１６３】
【表１８】
【０１６４】
実施例３８
［（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］酢酸 塩酸塩
［（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］酢酸 ｔ−ブチルエステル（59.0mg）を塩化メチレン（3.0mL）に溶解し、４Ｎ−塩酸１，４−ジオキサン溶液（3.42mL）を加え、室温で１８時間撹拌した。反応液にジエチルエーテルを加え、析出した結晶をろ取し、ジエチルエーテルで洗浄することにより、白色粉末として表記化合物（52.0mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):2.27-2.43(1H,m),2.68(3H,s),2.75-2.84(1H,m),2.87-3.12(4H,m),3.43-3.52(1H,m),3.73-3.94(2H,m),4.06-4.21(2H,m),5.28-5.51(2H,m),7.16(1H,s),7.39(1H,s).
ESI/MS(m/z):459(M+H)+,457(M-H)-.
【０１６５】
実施例３８の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１９にデータを表２０に示した。
【化２６】
【０１６６】
【表１９】
【０１６７】
【表２０】
【０１６８】
実施例５２
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 塩酸塩
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステル（63.0mg）をメタノール（1.0mL）に溶解し、１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（500μL）を加え、室温で５時間撹拌した。反応液に４Ｎ−塩酸１，４−ジオキサン溶液（500μL）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮後、得られた残渣に塩化メチレンを加え、不溶物をろ去し、ろ液を減圧濃縮することにより、淡黄白色粉末として表記化合物（57.6mg）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ:1.20-1.22(2H,m),1.49-1.69(4H,m),1.91-2.36(6H,m),2.63-2.83(6H,m),3.02-3.18(1H,m),3.56-3.70(1H,m),4.17-4.36(2H,m),5.28(1H,d,J=6.6Hz),7.37(1H,br.s),7.54(1H,br.s),9.62(1H,br.s),12.21(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):483(M+H)+,481(M-H)-.
【０１６９】
実施例５３
５−［（２−｛２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 塩酸塩
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステルの代わりに、５−［（２−｛２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステルを用いて実施例５２と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.60-1.81(4H,m),2.02-2.45(6H,m),2.70(3H,d,J=2.9Hz),2.78(3H,d,J=2.9Hz),3.11-3.25(1H,m),3.58-3.82(2H,m),4.20-4.35(1H,m),5.39(1H,d,J=7.0Hz),7.40-7.48(2H,m).
ESI/MS(m/z):499(M+H)+,497(M-H)-.
【０１７０】
薬理試験例１
(1)ヒト型グルコキナーゼの発現・精製
pQE-80発現ベクターのEcoRI,HindIIIサイトにヒト型GKのN末欠損（1-15アミノ酸欠損）コード領域に同制限酵素サイトを付加したDNA断片を導入した。このプラスミドを用いてE.coliを形質転換し、ヒト型グルコキナーゼを発現させ、次のように精製を行った。
200mlのE.coli培養液から回収した菌体を回収し、20mlのExtraction buffer A(20mM HEPES、pH8.0、1mM MgCl2、150mM NaCl、2mMメルカプトエタノール、0.25mg/mlリゾチーム、50mg/mlアジ化ナトリウム)に懸濁し室温で5分間、静置した。20mlのExtraction buffer B(1.5M NaCl、100mM CaCl2、100mM MgCl2、0.02mg/ml DNA分解酵素1、プロテアーゼ阻害剤錠剤(Complete(登録商標)1697498):バッファー20mlあたり一錠)を加え、室温で5分間、静置した。そして、抽出液を15,000gで30分間、４℃で遠心し、上清を大腸菌抽出液とした。大腸菌抽出液を0.45μmフィルターでろ過し、20mMイミダゾールを含むバッファー（20mM HEPES pH8.0、0.5M NaCl）で平衡化したNi-NTA agarose 2mL bedにアプライした。約10mlの洗浄バッファーで洗浄し、40から500mMのイミダゾールを含むバッファー（20mM HEPES pH8.0、0.5M NaCl）にて段階的に溶出した。
【０１７１】
各カラムフラクションをSDSゲル電気泳動を用いて分析し、hGK(MW:52KDa)を含んだフラクションを濃縮した。次に濃縮サンプルをSephacryl S-200HR(11/60)ゲルろ過カラムに通し、バッファーB(20mM HEPES、pH8.0、1mM MgCl2、150mM NaCl、1mM DTT)にて溶出した。溶出フラクションをSDSゲル電気泳動にて分析し、hGKを含んだフラクションを濃縮した。最終的に50％グリセロールを添加して‐20℃にて保存した。
【０１７２】
(2)グルコキナーゼ活性化の測定
UV透過性の96ウェルプレートにGK assay mix（25mM Hepes buffer(pH7.1)、25mM KCl、2mM MgCl2、1mM NADP、1mM dithiotheitol、2unit/mL G6PDH、5mM D-glucose、GK適量）を178μl添加した。DMSOに溶解した試験化合物を2μl添加した後、室温で10分間静置し、その後、20mM ATPを20μl添加して反応をスタートさせた。340nmの吸光度をSpectra Max Plusで5分間、30秒間隔、室温で測定し、最初の3分間の反応で化合物評価を行った。試験化合物の最終濃度１０μＭの時の活性を、それを含まないウェルと比較して算出し表２１に示した。
【０１７３】
その結果、今回試験を行った本発明化合物は、試験化合物を含まないウェルと比較して１０μＭで６００％以上のヒト型GK活性化作用を持つことがわかった。
【０１７４】
【表２１】
【産業上の利用可能性】
【０１７５】
本発明化合物は、グルコキナーゼ活性化作用を有していることから、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規チオフェンカルボキサミド誘導体及びその医薬用途に関する。当該化合物は、グルコキナーゼ活性化剤として様々な医薬用途を有する。
【背景技術】
【０００２】
グルコキナーゼ（ATP:D-glucose 6-phosphotransferae, EC2.7.1.1.）は、哺乳類に存在する４種のヘキソキナーゼのうちの１つ（ヘキソキナーゼIV）である。ヘキソキナーゼはグルコース代謝の最初の段階を触媒する酵素であり、グルコースをグルコース‐６リン酸へ変換する。グルコキナーゼは主に肝臓と膵臓β細胞に発現しており、グルコース代謝の律速酵素として働き、全身のグルコースホメオスタシスに重要な役割を果たしている。
【０００３】
グルコキナーゼはグルコースに対し低い親和性を持ち、生理的な血糖値に近いKm値（8-15mM）をもっている。また、グルコキナーゼは生理的な濃度のグルコース‐６リン酸による阻害を受けない。それゆえ、食事によって正常血糖値（5mM）が10〜15mMに上昇するとグルコキナーゼを介したグルコース代謝が増大する。これらのことから、グルコキナーゼは肝臓や膵臓β細胞においてグルコースセンサーとして働くと考えられた。
【０００４】
動物におけるグルコキナーゼの役割は遺伝子改変動物を用いた研究によって確認された。グルコキナーゼを発現しないマウスは生後まもなく重篤な糖尿病によって死亡し、一方、グルコキナーゼを過剰発現させたマウスは耐糖能を改善することが報告された。これらの研究によって、グルコキナーゼは実際に全身のグルコースホメオスタシスに重要な役割があることが確認された。
【０００５】
若年発症型の成人発症型糖尿病（MODY-2）はグルコキナーゼ遺伝子の機能喪失の突然変異によって引き起こされ、グルコキナーゼ活性の低下が血糖上昇の原因となっている。さらに、グルコキナーゼの活性を上昇させる突然変異を持つ家系も見つかっており、これらの家系では血漿インスリンレベルの上昇によって空腹時低血糖状態を示す。
【０００６】
このように、グルコキナーゼはグルコースセンサーとして働き、血糖調整に重要な役割を果たしており、グルコースセンサーシステムを利用した血糖コントロールは多くのII型糖尿病患者で有用な治療となると考えられる。グルコキナーゼを活性化する物質は、グルコースセンサーの働きを高めることによって、膵臓β細胞ではインスリン分泌を促進する作用、肝細胞では糖取り込みを促進し、糖放出の抑制する作用が期待できるので、II型糖尿病の予防又は治療剤として有用であると考えられる。
【０００７】
これまでにグルコキナーゼ活性化作用を有する化合物は多数報告されている（非特許文献１）。二つの５員環芳香族複素環がアミド結合した化合物としては、特許文献１にピロール環を有する化合物が、特許文献２にインドール環を有する化合物が報告されているが、これらの化合物は、本願発明のチオフェンカルボキサミド誘導体とは構造が異なるものである。
【０００８】
一方、チオフェンカルボキサミド誘導体としては、エナミン社（ウクライナ）より２，５−ジメチルチオフェン−３−カルボン酸 チアゾール−２−イルアミドが試薬として販売されているが、生物活性等に関する報告はなく、チオフェン環にピロリジン環を有する本願発明の化合物とは構造が異なるものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開2008/149382号
【特許文献２】国際公開2004/031179号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Expert Opin. Ther. Patents 18, 759-768, 2008
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、グルコキナーゼ活性化作用を有する化合物を提供すること、及び、グルコキナーゼ活性化作用に基づく、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、以上の点に鑑み、前記の課題を解決するための手段として、新たな基本構造を有する化合物が有効であると考え、新規グルコキナーゼ活性化剤の創製を目指して鋭意研究を重ねた。その結果、下記一般式(I)で表される化合物及びその塩が、非常に優れたグルコキナーゼ活性化作用を有し、更に溶解度等の医薬品としての物性面においても優れた性質を有しており、種々の副作用（ｈERGやCYPに対する作用）と薬効の乖離に優れた安全でかつ有用な医薬となることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明によれば、下記一般式(I):
【化１】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はそのプロドラッグ、或いはそれらの薬理学的に許容される塩が提供され、これらの化合物は、本明細書中で以後「本発明化合物」と呼ぶ。以下に本発明化合物の様々な実施形態を列挙する。
【００１４】
本発明の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子、C-F、又はC-Clであり、R1が水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基である化合物である。
【００１５】
本発明の別の一実施形態は、前記一般式(I)において、XがC-F又はC-Clであり、R1が水素原子である化合物である。
【００１６】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子であり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基である化合物である。
【００１７】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基である化合物である。
【００１８】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2である化合物である。
【００１９】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基である化合物である。
【００２０】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である化合物である。
【００２１】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である化合物である。
【００２２】
本発明はまた、前記一般式(I)で表される本発明化合物の中間体である、下記一般式(II)で表される化合物及び下記一般式(III)で表される化合物をも提供する。
【化２】
［式中、R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R8は水素原子又はアミノ基の保護基を意味する］
【化３】
［式中、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R9は臭素原子又はヨウ素原子を意味する］
【００２３】
本発明は更に、前記本発明化合物を有効成分とする医薬組成物をも提供する。即ち、本発明の医薬組成物は、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療のために使用される。
【００２４】
本発明を別の表現で記載すると、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤を製造するための本発明化合物の使用となる。
【発明の効果】
【００２５】
本発明化合物は、優れたグルコキナーゼ活性化作用を有しており、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。また、本発明は、種々の副作用（ｈERGやCYPに対する作用）と薬効の乖離に優れた安全でかつ有用な医薬を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下に、本発明化合物について説明する。
【化４】
【００２７】
上記一般式（I）で表される本発明化合物において、Xは窒素原子又はCR6、R6はハロゲン原子であり、R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基である。これらの中で、Xは窒素原子、C-F、又はC-Clが好ましく、R1は水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基が好ましい。中でも、XがC-F又はC-Clであるときは、R1は水素原子が好ましく、Xが窒素原子であるときは、R1は水素原子又はC1-C3アルキル基が好ましい。
【００２８】
R2は水素原子又はフッ素原子である。また、R3は水素原子又はC1-C6アルキル基であるが、水素原子又はC1-C3アルキル基が好ましい。
【００２９】
R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2である。これらの中で、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2であることが好ましく、中でも、他方はC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基が最適である。
【００３０】
特に好ましい本発明化合物は、一般式（I）において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である。
【００３１】
別の特に好ましい本発明化合物は、一般式（I）において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である。
【００３２】
尚、本発明化合物において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を意味する。
【００３３】
「C1-C6アルキル基」とは、１〜６個の炭素原子から成る直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｉ−ペンチル基、ｎｅｏ−ペンチル基、ｔ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｉ−ヘキシル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、１，２−ジメチルプロピル基等が挙げられる。
【００３４】
「C1-C6アルコキシ基」とは、−Ｏ−（C1-C6アルキル）基を意味し、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｉ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓ−ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ｎ−ペントキシ基、ｉ−ペントキシ基、ｎｅｏ−ペントキシ基、ｔ−ペントキシ基、１−メチルブトキシ基、２−メチルブトキシ基、１，２−ジメチルプロポキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基等が挙げられる。
【００３５】
「C1-C6アルキルチオ基」とは、−Ｓ−（C1-C6アルキル）基を意味する。また、「C1-C6アルキレンカルボン酸」とは、−（C1-C6アルキレン）−ＣＯＯＨを意味し、「C1-C6アルキレン」とは、１〜６個の炭素原子から成る直鎖状のアルキレンを意味し、例えば、メチレン、エチレン、ｎ−プロピレン、ｎ−ブチレン等が挙げられる。
【００３６】
「C1-C6アルキルスルホニル基」とは、−ＳＯ２−（C1-C6アルキル）基を意味する。また、「C1-C6アルキルカルボニル基」とは、−ＣＯ−（C1-C6アルキル）基を意味する。
【００３７】
次に、本発明化合物の中間体である化合物について説明する。
【化５】
上記一般式（II）で表される中間体において、R2は水素原子又はフッ素原子であり、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基であり、R8は水素原子又はアミノ基の保護基である。
【００３８】
更に別の本発明化合物の中間体である化合物について説明する。
【化６】
上記一般式（III）で表される中間体において、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基であり、R9は臭素原子又はヨウ素原子である。
【００３９】
「カルボキシル基の保護基」とは、通常、有機合成上カルボキシル基の保護基として知られている基を意味し、例えば、(1)メチル基、エチル基、ｉ−プロピル基、ｔ−ブチル基のような直鎖状若しくは分岐鎖状の炭素数１〜４の低級アルキル基、(2)2-ヨウ化エチル基、2,2,2-トリクロロエチル基のようなハロゲノ低級アルキル基、(3)メトキシメチル基、エトキシメチル基、ｉ−ブトキシメチル基のような低級アルコキシメチル基、(4)ブチリルオキシメチル基、ピバロイルオキシメチル基のような低級脂肪族アシルオキシメチル基、(5)1-メトキシカルボニルオキシエチル基、1-エトキシカルボニルオキシエチル基のような1-低級アルコキシカルボニルオキシエチル基、(6)ベンジル、ｐ-メトキシベンジル基、ｏ-ニトロベンジル基、ｐ-ニトロベンジル基のようなアラルキル基、(7)ベンズヒドリル基、(8)フタリジル基等が挙げられる。
【００４０】
「アミノ基の保護基」とは、通常、有機合成上アミノ基の保護基として知られている基を意味し、例えば、(1)ホルミル基、アセチル基、クロロアセチル基、ジクロロアセチル基、プロピオニル基、フェニルアセチル基、フェノキシアセチル基、チエニルアセチル基などの置換または非置換の低級アルカノイル基、(2)ベンジルオキシカルボニル基、ｔ-ブトキシカルボニル基、ｐ-ニトロベンジルオキシカルボニル基、９-フルオレニルメチルオキシカルボニル基などの置換または非置換の低級アルコキシカルボニル基、(3)メチル基、ｔ-ブチル基、2,2,2-トリクロロエチル基、トリチル基、ｐ-メトキシベンジル基、ｐ-ニトロベンジル基、ジフェニルメチル基、ピバロイルオキシメチル基などの置換低級アルキル基、(4)トリメチルシリル基、ｔ-ブチルジメチルシリル基などの置換シリル基、(5)ベンジリデン基、サリチリデン基、ｐ-ニトロベンジリデン基、ｍ-クロルベンジリデン基、3,5-ジ（ｔ-ブチル）-4-ハイドロキシベンジリデン基、3,5-ジ（ｔ-ブチル）ベンジリデン基などの置換または非置換のベンジリデン基等が挙げられる。
【００４１】
「プロドラッグ」とは、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により前記一般式(I)に変換される化合物を意味する。このようなプロドラッグは本発明の範囲に含まれ、種々のプロドラッグが当該技術分野で既知である。例えば、一般式(I)で表される化合物がカルボン酸基を有する場合のプロドラッグとしては、当該カルボン酸基がエステル化又はアミド化された化合物（例えば、エチルエステル化、カルボキシメチルエステル化、ピバロイルオキシメチル化、又はメチルアミド化された化合物）等が挙げられる。一般式(I)で表される化合物がアミノ基を有する場合のプロドラッグとしては、当該アミノ基がアシル化、アルキル化、又はリン酸化された化合物（例えば、エイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、アセトキシメチル化、又はｔ−ブチル化された化合物）等が挙げられる。
【００４２】
「薬理学的に許容される塩」とは、一般式(I)で表される化合物の生物学的有効性及び特性を保持し、生物学的又はその他の面においても不都合ではない塩を意味する。このような薬理学的に許容される塩は本発明の範囲に含まれる。薬理学的に許容される塩としては、無機酸付加塩（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等との塩）、有機酸付加塩（例えば、メタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、酢酸、シュウ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸との塩）、アミノ酸との塩（例えば、リジン、アルギニン等との塩）、アルカリ金属付加塩（例えば、ナトリウム、カリウム等との塩）、アルカリ土類金属付加塩（例えば、カルシウム、マグネシウム等との塩）、有機アミン付加塩（例えば、ジエチルアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等との塩）等が挙げられる。これらの付加塩の形成反応は、常法に従い行うことができる。
【００４３】
本発明化合物において、１つ又はそれ以上の不斉炭素が存在する場合、本発明は不斉炭素に基づく異性体及びそれらの任意の組合せの化合物のいずれも包含する。また、本発明化合物において、幾何異性又は互変異性が存在する場合、本発明はそれらの幾何異性体又は互変異性体のいずれも包含する。さらに、本発明化合物には、水やエタノール等の医薬品として許容される溶媒との溶媒和物も含まれる。
【００４４】
本発明化合物である一般式(I)で表される化合物は、以下の反応工程式Ｉ〜Ｖに示す方法、実施例に記載した方法、又は公知の方法を組み合わせて製造することができる。
［反応工程式Ｉ］
【化７】
［式中、R10はアミノ基の保護基であり、R11はC1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2であり、その他の記号は前記一般式と同義である］
【００４５】
［工程Ｉ−１］
一般式(ＩＩａ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン等）中、塩素化剤（例えば、塩化チオニル、塩化オキサリル）を用いて酸塩化物とした後、一般式(ＩＶ)で表される化合物と適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン等）を用いて反応させることによって、一般式（Ｖ）で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
また、一般式(ＩＩａ)で表される化合物と一般式(ＩＶ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによっても一般式(Ｖ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＩＶ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００４６】
［工程Ｉ−２］
「Protecting Groups in Organic Synthesis,3rd Edition,Wiley(1999)」に記載の方法を参考に、一般式(Ｖ)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(ＶＩ)で表される化合物が得られる。
【００４７】
［工程Ｉ−３］
一般式(ＶＩ)で表される化合物と一般式(ＶＩＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(Ｉａ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＶＩＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００４８】
［反応工程式ＩＩ］
【化８】
［式中、R12はC1-C6アルキルスルホニル基又はC1-C6アルキルカルボニル基であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００４９】
［工程ＩＩ−１］
一般式(ＶＩ)で表される化合物と一般式(ＶＩＩＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(ＩＸ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＶＩＩＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５０】
［工程ＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＩＸ)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(Ｘ)で表される化合物が得られる。
【００５１】
［工程ＩＩ−３］
一般式(Ｘ)で表される化合物と、一般式(ＸＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えば塩化メチレン、トルエン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、ピリジン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン等）を用いて反応させることによって、一般式(Ｉｂ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５２】
［反応工程式ＩＩＩ］
【化９】
［式中、R13は水素原子又はC1-C6アルキル基であり、R14はカルボキシル基の保護基であり、ｎは１〜６の整数であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００５３】
［工程ＩＩＩ−１］
一般式(ＶＩ)で表される化合物と一般式(ＸＩＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＩＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＩＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５４】
［工程ＩＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＩＩＩ)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(ＸＩＶ)で表される化合物が得られる。
【００５５】
［工程ＩＩＩ−３］
一般式(ＸＩＶ)で表される化合物と一般式(ＸＶ)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＶＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＶ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５６】
［工程ＩＩＩ−４］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＶＩ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ｉｃ)で表される化合物が得られる。
【００５７】
［反応工程式ＩＶ］
【化１０】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００５８】
［工程ＩＶ−１］
一般式(ＸＩＶ)で表される化合物と一般式(ＸＶＩＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えば、エタノール、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（トリエチルアミン、トリトンＢ、水酸化ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＶＩＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＶＩＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５９】
［工程ＩＶ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＶＩＩＩ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ｉｄ)で表される化合物が得られる。
【００６０】
［反応工程式Ｖ］
【化１１】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００６１】
［工程Ｖ−１］
一般式(ＶＩ)で表される化合物と一般式(ＸＩＸ)で表される化合物と適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン、ジ−ｔ−ブチルピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＸ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＩＸ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００６２】
［工程Ｖ−２］
一般式(ＸＸ)で表される化合物と一般式(ＸＸＩ)で表される化合物を適当な溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＸＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。
ここで、一般式(ＸＸＩ)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００６３】
［工程Ｖ−３］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＸＩＩ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ｉｅ)で表される化合物が得られる。
【００６４】
反応工程式Ｉで出発原料として用いた一般式(ＩＩａ)で表される化合物は、以下の反応工程式ＶＩ〜ＶＩＩＩに示す方法、参考例に記載した方法、又は公知の方法を組み合わせて製造することが出来る。
［反応工程式ＶＩ］
【化１２】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００６５】
［工程ＶＩ−１］
一般式(ＸＸＩＩＩ)で表される化合物とハロゲン化メチルを適当な溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、アミン試薬（ジイソプロピルアミン、ヘキサメチルホスホロアミド、Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ−テトラメチルエチレンジアミンなど）存在下、塩基（ｎ−ブチルリチウム等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＸＩＶ)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から室温、反応時間は１０分間から２４時間である。
【００６６】
［工程ＶＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＸＩＶ)で表される化合物の保護基R14を導入することによって、一般式(ＸＸＶ)で表される化合物が得られる。
【００６７】
［工程ＶＩ−３］
一般式(ＸＸＶ)で表される化合物を、適当な溶媒中（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、ジエチルエーテル等）中、臭素化剤又はヨウ素化剤（例えば、Ｎ−ブロモコハク酸イミド、臭素、Ｎ−ヨードコハク酸イミド、ヨウ素等）を用いて反応させることによって、一般式(ＩＩＩａ)で表される化合物が得られる。反応温度は−５０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００６８】
［工程ＶＩ−４］
一般式(ＩＩＩａ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、有機リチウム、又は有機マグネシウム試薬（例えば、イソプロピルマグネシウムブロマイド、ｎ−ブチルリチウム等）存在下、一般式(ＸＸＶＩ)で表される化合物と反応させることによって、一般式(ＸＸＶＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００６９】
［工程ＶＩ−５］
一般式(ＸＸＶＩＩ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＸＶＩＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７０】
［工程ＶＩ−６］
一般式(ＸＸＶＩＩＩ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン等）存在下メタンスルホニルクロライドを用いて環化させることによって、一般式(ＩＩｂ)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７１】
［工程ＶＩ−７］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＩＩｂ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(ＩＩｃ)で表される化合物が得られる。
【００７２】
［反応工程式ＶＩＩ］
【化１３】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００７３】
［工程ＶＩＩ−１］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＸＶＩＩ)で表される化合物の保護基R10を除去した後、適当な溶媒中（例えば、ｉ−プロパノール、エタノール等）、酸（例えば、塩酸等）の存在下、還元剤（例えば、シアノ水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(ＩＩｄ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７４】
［工程ＶＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＩＩｄ)で表される化合物の保護基R10を導入することによって、一般式(ＩＩｂ)で表される化合物が得られる。
【００７５】
［工程ＶＩＩ−３］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＩＩｂ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(ＩＩｃ)で表される化合物が得られる。
【００７６】
［反応工程式ＶＩＩＩ］
【化１４】
［式中、R15は水酸基の保護基であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００７７】
［工程ＶＩＩＩ−１］
一般式(ＩＩＩａ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、有機リチウム、又は有機マグネシウム試薬（例えば、イソプロピルマグネシウムブロマイド、ｎ−ブチルリチウム等）存在下、一般式(ＸＸＩＸ)で表される化合物と反応させることによって、一般式(ＸＸＸ)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７８】
［工程ＶＩＩＩ−２］
一般式(ＸＸＸ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(ＸＸＸＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７９】
［工程ＶＩＩＩ−３］
一般式(ＸＸＸＩ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン等）存在下メタンスルホニルクロライドを用いて環化させることによって、一般式(ＸＸＸＩＩ)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００８０】
［工程ＶＩＩＩ−４］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＸＸＸＩＩ)で表される化合物の保護基R15を除去することによって、一般式(ＸＸＸＩＩＩ)で表される化合物が得られる。
【００８１】
［工程ＶＩＩＩ−５］
一般式(ＸＸＸＩＩＩ)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、フッ素化試薬（例えば、ジメチルアミノサルファトリフルオリド、Ｎ−フルオロ−Ｎ’−クロロメチルトリエチレンジアミン
ビス（テトラフルオロボラート）等）と反応させることによって、一般式(ＩＩｅ)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００８２】
［工程ＶＩＩＩ−６］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(ＩＩｅ)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(ＩＩｆ)で表される化合物が得られる。
【００８３】
反応工程式ＶＩで出発原料として用いた一般式(ＸＸＶＩ)で表される化合物は、前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、市販の２−ピロリドンに保護基を導入することによって、また、反応工程式ＶＩＩＩで出発原料として用いた一般式(ＸＸＩＸ)で表される化合物は、前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、市販の４−ヒドロキシピロリジン−2−オンに保護基を導入することによって得られる。
【００８４】
その他に本発明化合物を製造するために必要な出発原料、中間体、又は試薬として用いる化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を参考に製造することができる。
【００８５】
本発明化合物及び当該化合物を製造するために使用される化合物に含まれる置換基（例えば、水酸基、アミノ基、カルボン酸基等）は、当該置換基に原料又は中間体の段階で適当な保護基を導入しておくことが化合物製造上効果的である場合があり、必要に応じて前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の保護基を適宜選択して使用してもよい。
【００８６】
本発明化合物及び当該化合物を製造するために使用される化合物を反応液から単離、精製するには、通常使用される方法を用いることができる。例えば、溶媒抽出、イオン交換樹脂、担体としてシリカゲル、アルミナ等を用いたカラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分取、薄層クロマトグラフィー、スカベンジャー樹脂、再結晶等を用いることができ、これらの単離、精製法は、単独又は組み合わせて行うことができる。単離、精製は、反応毎に行ってもよいし、いくつかの反応終了後に実施してもよい。
【００８７】
本明細書中の化合物が不斉炭素を有し光学異性体が存在する場合、これらの光学異性体は、ラセミ化合物の一般的な光学分割法、例えば、一般的な光学活性な化合物とのジアステレオマー塩として再結晶する分別結晶化又はクロマトグラフィーなどの常法により分割することができる。また、光学活性体分離用カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分取によってもそれぞれの光学異性体を単離することができる。
【００８８】
このようにして製造された本発明化合物は、グルコキナーゼ活性化剤として作用することから、医薬組成物として使用することが出来る。当該医薬組成物は、糖尿病、糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。
【００８９】
本発明化合物を医薬として使用する場合の投与形態としては、「日本薬局方」製剤総則記載の各種投与形態が目的に応じて選択できる。例えば、錠剤の形態に成形するに際しては、通例、当該分野で用いられる経口摂取可能な成分を選択すればよい。例えば、乳糖、結晶セルロース、白糖、リン酸カリウム等の賦形剤がそれにあたる。更に、所望により、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、凝集防止剤等、通例製剤分野で常用される種々の添加剤を配合してもよい。
【００９０】
本発明製剤中に有効成分として含有される本発明化合物の量は、特に限定されず、広範囲より適宜選択される。有効成分化合物の投与量は、その用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度により適宜決定されるが、経口投与の場合には、本発明化合物の量が1日体重1kg当り約1μg〜100mgの範囲で、1日に1〜4回に分けて適宜投与することができる。しかしながら、投与量、回数は、治療すべき症状の程度、投与される化合物の選択及び選択された投与経路を含む関連する状況に鑑みて決定されることから、前記の投与量範囲及び回数は本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００９１】
以下に本発明の内容を、実施例、参考例、及び薬理試験例を挙げて、さらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は、その記載内容に限定されるものではない。
以下の実施例及び参考例における核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）スペクトルは、テトラメチルシランを標準物質としてケミカルシフト値をσ値（ｐｐｍ）で記載した。分裂パターンは、一重線を「ｓ」、二重線を「ｄ」、三重線を「ｔ」、多重線を「ｍ」、幅広い線を「ｂｒ」で示した。質量分析は、エレクトロスプレーイオン化法（ＥＳＩ）で行った。表中において、メチル基を「Ｍｅ」、エチル基を「Ｅｔ」、ｉ−プロピル基を「ｉ−Ｐｒ」ｎ−プロピル基を「ｎ−Ｐｒ」、ｔ−ブチル基を「ｔ−Ｂｕ」、エタンスルホニル基を「Ｅｓ」、メタンスルホニル基を「Ｍｓ」、アセチル基を「Ａｃ」、プロピオニル基を「ＥｔＣＯ」で示した。
【００９２】
参考例１
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）ピロリジン−２−オン
（Ｓ）−４−ヒドロキシピロリジン−２−オン（101g)をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（400mL）に溶解し、イミダゾール（102g）とｔ−ブチルジメチルクロロシラン（158g）を０℃で加え、室温で２１時間撹拌した。反応液を水に加え、析出した白色固体をろ取し、水で洗浄することにより、白色固体として表記化合物（210g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.02(6H,s),0.81(9H,s),2.16-2.22(1H,m),2.42-2.50(1H,m),3.14-3.18(1H,m),3.49-3.54(1H,m),4.46-4.52(1H,m),5.76(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):216(M+H)+.
【００９３】
参考例２
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）ピロリジン−２−オン（210g）と４−ジメチルアミノピリジン（5.90g）をアセトニトリル（500mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（234mL）を０℃で加え、室温で２２時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、４％クエン酸水溶液、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をヘキサンで洗浄することにより、白色固体として表記化合物（271g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.05(6H,s),0.81(9H,s),1.47(9H,s),2.36-2.42(1H,m),2.58-2.67(1H,m),3.56-3.58(1H,ｍ),3.76-3.81(1H,m),4.28-4.34(1H,m).
【００９４】
参考例３
２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−ピロリドン（25.0g）をアセトニトリル（300mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（70.5mL）と４−ジメチルアミノピリジン（1.79g）を加え、室温で５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（51.7g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.53(9H,s),1.96−2.05(2H,m),2.51(2H,t,J＝5.5Hz),3.75(2H,t,J＝7.1Hz).
【００９５】
参考例４
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸
ジイソプロピルアミン（233g）をテトラヒドロフラン（2.3L）に溶解し、ｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（1.50L）を０℃で滴下した後、４０分間撹拌した。反応液を−６８〜−６０℃に冷却し、チオフェン−３−カルボン酸（223g）のテトラヒドロフラン（500mL）溶液を滴下した後、１時間撹拌した。その後、ヨウ化メチル（254g）を加えて室温に昇温し、更に１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に６Ｎ塩酸を加えてｐＨ＝１とした後、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を水／酢酸で再結晶することにより、表記化合物（209g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.78(3H,s),7.01(1H,d,J＝5.5Hz),7.45(1H,d,J＝5.5Hz).
ESI/MS(m/z):141(M-H)-.
【００９６】
参考例５
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸（100g）をメタノール（500mL）に溶解し、塩化チオニル（200mL）をゆっくり滴下した後、３時間還流した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に水を加え、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、表記化合物（105g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.74(3H,s),3.85(3H,s),6.98(1H,d,J＝5.1Hz),7.38(1H,d,J＝5.5Hz).
【００９７】
実施例１
５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（156g）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（750mL）に溶解し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（178g）を加えて室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機相を硫酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、表記化合物（226g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.67(3H,s),3.84(3H,s),7.33(1H,s).
【００９８】
参考例６
(Ｓ）−４−ヒドロキシ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
アルゴン雰囲気下、５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（227g）をテトラヒドロフラン（350mL）に溶解し、０℃に冷却した。イソプロピルマグネシウムブロマイド（1500mL）を１０℃以下で滴下した後、０℃で２時間撹拌した。次に、（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（276g）のテトラヒドロフラン（550mL）溶液を１０℃以下で滴下した後、室温で１．５時間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、３０％クエン酸水溶液を１０℃以下で滴下、ｐＨ＝３とした後、室温で１．５時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、有機相を５％炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、粗生成物（418g）を得た。
アルゴン雰囲気下、（Ｒ）−５，５−ジフェニル−２−メチル−３，４−プロパノ−１，３，２−オキサボロリジン（49.1g）をテトラヒドロフラン（86mL）に溶解し、ボラン-ジメチルスルフィド錯体（886mL）を室温で滴下した後、２０分間撹拌した。その後、上記粗生成物（418g）のテトラヒドロフラン（450mL）溶液を室温で４５分間かけて滴下した後、３０分間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、メタノール／飽和食塩水を滴下した後、酢酸エチルを加え、有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルのショートカラム（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２）に通すことにより、粗生成物（337g）を得た。
アルゴン雰囲気下、上記粗生成物（302g）とトリエチルアミン（265mL）を塩化メチレン（800mL）に溶解し、メタンスルホニルクロライド（73.8mL）の塩化メチレン（295mL）溶液を０℃で滴下した後、３０分間撹拌した。反応液に水を加え、塩化メチレンで抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、粗生成物（304g）を得た。
上記粗生成物（265g）をテトラヒドロフラン（265mL）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリド（565mL）を室温で滴下した後、そのまま１．５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、酢酸エチルで抽出、水、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／５−２／１）にて精製することにより、黄白色固体として表記化合物（128g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.24-1.45(9H,m),1.66(1H,t,J=4.9Hz),2.18(1H,d,J=14.3Hz),2.35-2.51(1H,m),2.71(3H,s),3.51(1H,d,J=11.7Hz),3.66(1H,t,J=7.7Hz),3.83(3H,s),4.48-4.58(1H,m),5.09(1H,br.s),7.16-7.21(1H,m).
ESI/MS(m/z):342(M+H)+,340(M-H)-.
【００９９】
実施例２
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
及び実施例３
（２Ｒ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
(Ｓ）−４−ヒドロキシ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（113g）を塩化メチレン（1130mL）に溶解し、０℃に冷却した。ジエチルアミノサルファトリフルオリド（130mL）を５℃以下で滴下した後、室温で８時間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を滴下した後、塩化メチレンで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２０−１／１）にて精製することにより、黄色固体として表記化合物（２Ｓ，４Ｒ）（55.5g）及び黄色固体として表記化合物（２Ｒ，４Ｒ）（21.5g）を得た。
（２Ｓ，４Ｒ）体の物性データ
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.32-1.47(9H,m),2.05-2.23(1H,m),2.65-2.75(4H,m),3.54-3.70(1H,m),3.82(3H,s),3.90-4.05(1H,m),5.05-5.30(3H,m),7.18(1H,s).
ESI/MS(m/z):344(M+H)+,342(M-H)-.
（２Ｒ，４Ｒ）体の物性データ
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.45(9H,br.d,J=42.1Hz),2.43-2.55(2H,m),2.67(3H,ｓ),3.75-3.85(4H,m),5.12-5.35(2H,m),7.20(1H,s).
ESI/MS(m/z):344(M+H)+,342(M-H)-.
【０１００】
参考例７
５−（４−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−ヒドロキシブチル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
アルゴン雰囲気下、５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（2.00g）をテトラヒドロフラン（9.47mL）に溶解し、イソプロピルマグネシウムブロマイド（12.9mL）を−４０℃で滴下した後、１．５時間撹拌した。次に、２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.89g）のテトラヒドロフラン（11.2mL）溶液を−４０℃で滴下した後、室温で２４時間撹拌した。反応液を−１０℃に冷却し、メタノール（17.2mL）を加えた後、水素化ホウ素ナトリウム（486mg）を少しづつ加え、１５分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（2.13g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.44(9H,s),1.51-1.69(4H,m),1.79-1.84(1H,m),2.70(3H,s),3.15-3.19(1H,m),3.83(3H,s),4.57-4.87(1H,m),7.26(1H,s).
【０１０１】
実施例４
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
５−（４−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−ヒドロキシブチル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（2.13g）を塩化メチレン（58mL）に溶解し、−６０℃に冷却した。トリエチルアミン（2.58mL）、メタンスルホニルクロライド（530μL）を滴下した後、−６０℃で２時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／０−４／１）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（1.52g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.36-1.46(9H,m),1.95-1.99(3H,m),2.19-2.28(1H,m),2.67(3H,s),3.40-3.59(2H,m),3.82(3H,s),4.95-5.07(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):326(M+H)+,324(M-H)-.
【０１０２】
実施例５
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（132g）をメタノール（500mL）に溶解し、メタンスルホン酸（34.4mL）を滴下した後、室温で１時間撹拌、更に５０℃で７時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣にメタノール（360mL）を加えた後、０℃に冷却した。１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ＝８とし、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、淡赤色油状物として表記化合物（91.4g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.94-1.74(3H,m),2.14-2.18(1H,m),2.68(3H,s),2.98-3.00(1H,m),3.10-3.13(1H,m),3.82(3H,s),4.30(1H,t,J=7.0Hz),7.17(1H,s).
ESI/MS(m/z):226(M+H)+.
【０１０３】
実施例６
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
（−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩
（−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸（35.3g）をメタノール（1.00L）に溶解し、２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（21.1g）のメタノール（400mL）溶液を加え、室温で９時間静置した。析出した結晶をろ取し、メタノールで洗浄することにより、白色結晶として表記化合物（11.8g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.84-1.99(3H,m),2.28-2.21(1H,m),2.62(3H,s),3.13-3.18(2H,m),3.77(3H,s),4.66(1H,t,J=7.7Hz),5.68(2H,s),7.39(1H,d,J=8.4Hz),7.50(4H,t,J=7.7Hz),7.62-7.64(2H,m),7.95(4H,t,J=4.2Hz).
ESI/MS(m/z):226(M+H)+.
【０１０４】
実施例７
（−）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル （−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩（23.7g）をクロロホルム（100mL）に懸濁し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（82.0mL）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液をクロロホルムで抽出し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下濃縮して得られた無色油状物（10.6g）を塩化メチレン（90mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（11.2mL）、トリエチルアミン（6.80mL）を滴下した後、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた淡橙色油状物（17.2g）をメタノール（100mL）に溶解し、水（10mL）、水酸化リチウム１水和物（5.10g）を加え、５０℃で６時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸で中和し、析出した結晶をろ取することにより、白色固体として表記化合物（12.6g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.39(9H,br.d,J=51.6Hz),1.92-2.02(3H,m),2.28(1H,br.s),2.66(3H,s),3.39-3.52(2H,m),4.97(1H,br.d,J=19Hz),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):310(M-H)-.
【０１０５】
実施例８
（２Ｓ，４Ｒ）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）−４−フルオロピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（12.1g）と水酸化リチウム１水和物（4.40g）をメタノール（90mL）と水（30mL）の混合溶媒に溶解し、５０℃で４時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸でｐＨ＝６とし、析出した結晶をろ取した。ろ取した結晶を酢酸エチルに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色固体として表記化合物（11.2g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.34-1.44(9H,m),1.95-2.05(3H,m),2.21-2.32(1H,m),2.66(3H,s),3.42-3.51(2H,m),5.05-5.15(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):328(M-H)-.
【０１０６】
実施例９
２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.52g）をメタノール（14.0mL）に溶解し、０℃で水（2.33mL）と水酸化リチウム１水和物（588mg）を加え、５０℃で１７時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸で中和し、析出した結晶をろ取することにより、白色固体として表記化合物（1.26g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.34-1.44(9H,m),1.95-2.05(3H,m),2.21-2.32(1H,m),2.66(3H,s),3.42-3.51(2H,m),5.05-5.15(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):310(M-H)-.
【０１０７】
参考例８
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.00g）をトルエン（10mL）と塩化メチレン（10mL）の混合溶媒に溶解し、オキサリルクロライド（2.74mL）を滴下した後、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮、得られた残渣をトルエン（10mL）と塩化メチレン（10mL）の混合溶媒に溶解し、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（745mg）とＮ，Ｎ−ジエチルアニリン（1.98mL）を加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１−２／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（1.01g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.35-1.46(9H,m),1.70-1.75(1H,m),1.88-1.97(2H,m),2.19-2.45(1H,m),2.73(3H,s),3.38-3.55(2H,m),4.98(1H,br.t,J=35.3Hz),6.84(1H,br.d,J=36.6Hz),7.05(1H,br.t,J=15.7Hz),10.27(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１０８】
参考例９
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェンー２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸
ｔ−ブチルエステル
（２Ｓ，４Ｒ）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）−４−フルオロピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（11.0g）をトルエン（180mL）に溶解し、オキサリルクロライド（28.6mL）を０℃で滴下し、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮、得られた残渣をトルエン（150mL）に溶解し、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン（21.3mL）、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（7.75g）を０℃で加えた後、室温で１３時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２０−１／５）にて精製することにより、淡黄白色粉末として表記化合物（11.8g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.26-1.45(9H,m),2.04-2.20(1H,m),2.70-2.75(4H,m),3.57-3.68(1H,m),2.73(3H,s),3.38-3.55(2H,m),4.00(1H,br.s),5.15-5.20(1H,m),6.91(1H,s),7.10(1H,s),10.07(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):430(M+H)+,428(M-H)-.
【０１０９】
参考例１０
２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.56g）をトルエン（16mL）に懸濁し、オキサリルクロライド（4.30mL）を０℃で滴下した後、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣をトルエン（16mL）に溶解し、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（1.16g）とＮ，Ｎ−ジエチルアニリン（3.20mL）を０℃で加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝３／２）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（1.62g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.36-1.46(9H,m),1.91-1.99(3H,m),2.21-2.28(1H,m),2.74(3H,s),3.41-3.56(2H,m),4.99-5.09(1H,m),6.98(1H,s),7.06(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１１０】
参考例１１
（−）−２−メチルー５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（970mg）を塩化メチレン（10mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（2.72mL）を加えて、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（578mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.70-1.98(3H,m),2.14-2.22(1H,m),2.73(3H,s),2.99-3.05(1H,m),3.11-3.15(1H,m),4.34(1H,t,J=7.1Hz),6.80(1H,d,J=2.6Hz),7.08(1H,s).
ESI/MS(m/z):312(M+H)+,310(M-H)-.
【０１１１】
参考例１２
５−（（２Ｓ，４Ｒ−４−フルオロピロリジン−２−イル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルを用いて参考例１１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.83-2.00(1H,m),2.47-2.57(3H,m),2.72(3H,s),3.20-3.37(2H,m),4.67(1H,t,J=7.9Hz),5.22-5.36(1H,m),6.93(1H,s),7.05(1H,s).
ESI/MS(m/z):330(M+H)+,328(M-H)-.
【０１１２】
参考例１３
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルを用いて参考例１１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.74-1.96(3H,m),2.16-2.19(1H,m),2.73(3H,s),2.99-3.05(1H,m),3.10-3.16(1H,m),4.33(1H,t,J=7.0Hz),6.87(1H,d,J=2.6Hz),7.06(1H,s).
ESI/MS(m/z):312(M+H)+,310(M-H)-.
【０１１３】
参考例１４
（−）−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾール 塩酸塩を用いて参考例８と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.16-1.54(9H,m),1.89-2.12(3H,m),2.23-2.37(1H,m),2.68(3H,s),3.39-3.57(2H,m),5.03(1H,br.s),7.24(1H,br.s),7.33(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１１４】
参考例１５
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェンー２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸
ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾール 塩酸塩を用いて参考例９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.37-1.46(9H,m),2.15-2.28(1H,m),2.68-2.78(4H,m),3.58-4.24(2H,m),5.15-5.33(1H,m),5.68-6.02(1H,m),7.34-7.37(2H,m).
ESI/MS(m/z):446(M+H)+,444(M-H)-.
【０１１５】
参考例１６
２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾール 塩酸塩を用いて参考例１０と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.24-1.46(9H,m),1.93-1.97(3H,m),2.23-2.32(1H,m),2.74(3H,s),3.40-3.56(2H,m),4.95-5.11(1H,m),6.87-7.12(1H,m),7.18(1H,br.s),9.89(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１１６】
参考例１７
（−）−２−メチルー５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、（−）−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルを用いて参考例１１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.77-2.03(3H,m),2.18-2.32(1H,m),2.70(3H,s),2.91-3.01(1H,m),3.08-3.17(1H,m),4.27(1H,t,J=7.1Hz),7.30(1H,s),7.31(1H,s).
ESI/MS(m/z):328(M+H)+,326(M-H)-.
【０１１７】
参考例１８
５−（（２Ｓ，４Ｒ−４−フルオロピロリジン−２−イル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェンー２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸
ｔ−ブチルエステルを用いて参考例１１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.83-1.98(1H,m),2.46-2.57(1H,m),2.74(3H,s),3.20-3.37(2H,m),4.64-4.68(1H,m),5.22-5.36(1H,m),5.84-6.05(1H,m),7.09(1H,t,J=3.5Hz),7.10(1H,s).
ESI/MS(m/z):346(M+H)+,344(M-H)-.
【０１１８】
参考例１９
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルを用いて参考例１１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.52-1.61(1H,m),1.73-1.93(3H,m),2.14-2.25(1H,m),2.75(3H,s),2.98-3.15(1H,m),4.34(1H,t,J=7.1Hz),7.03(1H,s),7.21(1H,s).
ESI/MS(m/z):328(M+H)+,326(M-H)-.
【０１１９】
参考例２０
（−）−２−［５−メチル−４−（［1，2，4］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（156mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（192mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール１水和物（153mg）とジイソプロピルエチルアミン（171μL）と１，２，４−チアジアゾール−５−アミン（101mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（2.0mL）に溶解し、６０℃で１８時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）にて精製することにより、黄色粉末として表記化合物（68.9mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.32-1.46(9H,m),1.95-2.01(3H,m),2.21-2.34(1H,m),2.78(3H,s),3.38-3.59(2H,m),4.95-5.15(1H,m),7.16-7.20(1H,m),8.28(1H,s).
ESI/MS(m/z):395(M+H)+,393(M-H)-.
【０１２０】
参考例２０の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表１に示した。
【化１５】
【０１２１】
【表１】
【０１２２】
参考例２７
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 ［１，２，４］チアジアゾール−５−イルアミド
（−）−２−［５−メチル−４−（［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（68.9mg）を塩化メチレン（1.0mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（201μL）を加えて、室温で３時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、黄白色粉末として表記化合物（38.5mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.70-1.96(3H,m),2.16-2.26(1H,m),2.78
(3H,s),3.00-3.07(1H,m),3.13-3.16(1H,m),4.37(1H,t,J=7.0Hz),7.13(1H,s),8.28(1H,s).
ESI/MS(m/z):295(M+H)+,293(M-H)-.
【０１２３】
参考例２７の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表２に、データを表３に示した。
【化１６】
【０１２４】
【表２】
【０１２５】
【表３】
【０１２６】
参考例３４
（−）−（２−［（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）カルバミン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（35.0mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（24.0mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール １水和物（20.0mg）とＮ−ｔ−ＢＯＣ−グリシン（23.0mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（0.50ml）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（13.0μL）を加え、室温で一晩撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（54.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):487(M+H)+,485(M-H)-.
【０１２７】
参考例３４の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表４に示した。
【化１７】
【０１２８】
【表４】
【０１２９】
参考例５７
５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル)アミド（467mg）を塩化メチレン（5.0mL）に溶解し、０℃でジ−ｔ−ブチルピリジン（663μL）とクロロアセチルクロライド（239μL）を加え、室温で４時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（536mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.97-2.32(4H,m),2.71(3H,s),3.60-3.70(1H,m),3.75-3.78(1H,m),3.83-4.00(1H,m),4.8(2H,s),5.39(1H,d,J=5.5Hz),6.95(1H,s),7.15(1H,s).
ESI/MS(m/z):388(M+H)+,386(M-H)-.
【０１３０】
参考例５８
５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル)アミドの代わりに、２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル)アミドを用いて参考例５７と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.97-2.42(4H,m),2.71(3H,s),3.60-3.68(1H,m),3.75-3.83(1H,m),3.88-4.05(1H,m),4.12-4.19(2H,m),5.37-5.41(1H,m),7.20(1H,s),7.32(1H,s).
ESI/MS(m/z):404(M+H)+,402(M-H)-.
【０１３１】
参考例５９
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（２−アミノアセチル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−（２−［（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）カルバミン酸 ｔ−ブチルエステル（54.0mg）を塩化メチレン（0.50mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（0.500mL）を加え、室温で１５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝１５／１−５／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（31.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):387(M+H)+,385(M-H)-.
【０１３２】
参考例５９の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表５に示した。
【化１８】
【０１３３】
【表５】
【０１３４】
参考例８２
（−）−（２−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ）酢酸 t−ブチルエステル
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（２−アミノアセチル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（31.0mg）をテトラヒドロフラン（1.0mL）に溶解し、ブロモ酢酸 t−ブチル（16.0mg）とトリエチルアミン（8.10mg）を加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出、有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝３０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（19.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):501(M+H)+,499(M-H)-.
【０１３５】
参考例８２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表６に、データを表７に示した。
【化１９】
【０１３６】
【表６】
【０１３７】
【表７】
【０１３８】
参考例９２
（−）−３−［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）メチルアミノ］プロピオン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−メチル−５−［１−（２−メチルアミノアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（425mg）を１，４−ジオキサン（10mL）に溶解し、アクリル酸ブチル（486μL）とトリトンＢ（19.0μL）を室温で加えた後、６０℃で一晩撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝２０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（238mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.43(9H,d,J=8.1Hz),1.96-2.01(2H,m),2.09-2.38(4H,m),2.45(2H,t,J=7.0Hz),2.65-2.87(2H,m),3.11-3.29(2H,m),3.46(3H,d,J=7.3Hz),3.53-3.60(1H,m),3.71-3.88(1H,m),5.47(1H,d,J=7.3Hz),6.83-6.91(1H,m),7.23-7.28(1H,m),11.23(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):511(M+H)+,509(M-H)-.
【０１３９】
参考例９２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表８に、データを表９に示した。
【化２０】
【０１４０】
【表８】
【０１４１】
【表９】
【０１４２】
参考例９６
（２−［２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ）酢酸
ｔ−ブチルエステル
グリシンｔ−ブチルエステル 塩酸塩（210mg）とジイソプロピルエチルアミン（257μL）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（2mL）に溶解し、室温で５分間撹拌した。５０℃にて５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド（101mg）をゆっくりと加えて、５０℃で４時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝１０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（106mg）を得た。
ESI/MS(m/z):499(M+H)+,497(M-H)-.
【０１４３】
参考例９６の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１０に、データを表１１に示した。
【化２１】
【０１４４】
【表１０】
【０１４５】
【表１１】
【０１４６】
参考例９９
５−［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステル
２−メチル−５−［１−（２−メチルアミノアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（60.6mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（1.0mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（81.5μL）と５−ブロモ吉草酸メチル（27.0μL）を室温で加えた後、６０℃で一晩撹拌した。反応液を室温に冷却後、水を加え、酢酸エチルで抽出、有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール＝９／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（63.0mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.28-1.62(6H,m),2.01-2.49(9H,m),2.67-2.71(3H,m),2.76-2.99(1H,m),3.56-3.85(5H,m),4.25-4.57(1H,m),5.38(1H,d,J=6.9Hz),7.12(1H,t,J=2.3Hz),7.26-7.35(1H,m).
ESI/MS(m/z):497(M+H)+,495(M-H)-.
【０１４７】
参考例９９の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表１２に示した。
【化２２】
【０１４８】
【表１２】
【０１４９】
実施例１０
（−）−２−メチル−５−［１−（２−ウレイドアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（270mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（334mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール １水和物（264mg）とヒダントイン酸（206mg）をテトラヒドロフラン（5.40mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（360μL）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝９／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（287mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.94-2.48(4H,m),2.68-2.70(3H,m),3.55-3.84(2H,m),3.89-4.07(2H,m),5.29-5.37(1H,m),7.11-7.12(1H,m),7.32-7.36(1H,m)
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１５０】
実施例１１
（−）−２−メチル−５−［１−（２−ウレイドアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミドの代わりに（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミドを用いて実施例１０と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.94-2.46(4H,m),2.70-2.72(3H,m),3.54-3.84(2H,m),3.84-4.06(2H,m),5.27-5.37(1H,m),7.34-7.35(1H,m),7.39(1H,s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１５１】
実施例１２
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−１−（２−メタンスルホニルアミノアセチル）−ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
５−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロピロリジン−２−イル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（297mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（345mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール１水和物（276mg）とＮ−メタンスルホニルグリシン（276mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（3.0mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（308μL）を加え、室温で５．５時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、酢酸エチルにて再結晶を行うことにより、白色粉末として表記化合物（291mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.10-2.18(1H,m),2.59(3H,s),3.00(3H,s),3.80-4.02(4H,m),5.26-5.47(2H,m),7.04-7.07(1H,m),7.56(1H,s),9.70(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):465(M+H)+,463(M-H)-.
【０１５２】
実施例１２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１３にデータを表１４に示した。
【化２３】
【０１５３】
【表１３】
【０１５４】
【表１４】
【０１５５】
実施例２２
（−）−２−メチル−５−［１−（（Ｓ）−２−ウレイドプロピオニル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−５−［１−（（Ｓ）−２−アミノプロピオニル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（60.0mg）を水（1.8mL）に溶解し、シアン酸カリウム（62.3mg）と酢酸（79.9μL）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（63.5mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ:1.24-1.40(3H,m),1.85-2.46(4H,m),2.61-2.74(3H,m),3.64-3.92(2H,m),4.45-4.60(1H,m),5.24-5.41(1H,m),7.11-7.12(1H,m),7.24-7.27(1H,s).
ESI/MS(m/z):426(M+H)+,424(M-H)-.
【０１５６】
実施例２３
（−）−５−［（２Ｓ,４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−アセチルアミノプロピオニル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−アミノプロピオニル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（31.8mg）を塩化メチレン（1.0mL）に溶解し、アセチルクロリド（11.3μL）とピリジン（19.3μL）を加えた後、室温で４５分間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出、有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（27.8mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.29-1.33(3H,m),2.67(3H,d,J=6.2Hz),2.74-2.79(1H,m),3.85-3.98(1H,m),4.27-4.35(1H,m),4.58-4.66(2H,m),5.31-5.49(2H,m),7.13(1H,d,J=2.5Hz),7.32(1H,s).
ESI/MS(m/z):443(M+H)+,441(M-H)-.
【０１５７】
実施例２３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１５にデータを表１６に示した。
【化２４】
【０１５８】
【表１５】
【０１５９】
【表１６】
【０１６０】
実施例３３
（−）−（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチルアミノ）酢酸
トリフルオロ酢酸塩
（−）−（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチルアミノ）酢酸 ｔ−ブチルエステル（19.0mg）を塩化メチレン（0.25mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（0.25mL）を加え、室温で一晩撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣を水（1.0mL）に溶解後、凍結乾燥することにより、白色粉末として表記化合物（13.0mg）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):2.18-2.42(2H,m),2.64-2.83(4H,m),3.75-3.97(4H,m),4.13-4.23(1H,m),5.30-5.61(2H,m),7.34-7.39(1H,m),7.63(1H,s),9.25(1H,br.s),12.21(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):445(M+H)+,443(M-H)-.
【０１６１】
実施例３３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１７にデータを表１８に示した。
【化２５】
【０１６２】
【表１７】
【０１６３】
【表１８】
【０１６４】
実施例３８
［（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］酢酸 塩酸塩
［（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］酢酸 ｔ−ブチルエステル（59.0mg）を塩化メチレン（3.0mL）に溶解し、４Ｎ−塩酸１，４−ジオキサン溶液（3.42mL）を加え、室温で１８時間撹拌した。反応液にジエチルエーテルを加え、析出した結晶をろ取し、ジエチルエーテルで洗浄することにより、白色粉末として表記化合物（52.0mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):2.27-2.43(1H,m),2.68(3H,s),2.75-2.84(1H,m),2.87-3.12(4H,m),3.43-3.52(1H,m),3.73-3.94(2H,m),4.06-4.21(2H,m),5.28-5.51(2H,m),7.16(1H,s),7.39(1H,s).
ESI/MS(m/z):459(M+H)+,457(M-H)-.
【０１６５】
実施例３８の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１９にデータを表２０に示した。
【化２６】
【０１６６】
【表１９】
【０１６７】
【表２０】
【０１６８】
実施例５２
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 塩酸塩
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステル（63.0mg）をメタノール（1.0mL）に溶解し、１Ｎ−水酸化ナトリウム水溶液（500μL）を加え、室温で５時間撹拌した。反応液に４Ｎ−塩酸１，４−ジオキサン溶液（500μL）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮後、得られた残渣に塩化メチレンを加え、不溶物をろ去し、ろ液を減圧濃縮することにより、淡黄白色粉末として表記化合物（57.6mg）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ:1.20-1.22(2H,m),1.49-1.69(4H,m),1.91-2.36(6H,m),2.63-2.83(6H,m),3.02-3.18(1H,m),3.56-3.70(1H,m),4.17-4.36(2H,m),5.28(1H,d,J=6.6Hz),7.37(1H,br.s),7.54(1H,br.s),9.62(1H,br.s),12.21(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):483(M+H)+,481(M-H)-.
【０１６９】
実施例５３
５−［（２−｛２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 塩酸塩
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステルの代わりに、５−［（２−｛２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステルを用いて実施例５２と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.60-1.81(4H,m),2.02-2.45(6H,m),2.70(3H,d,J=2.9Hz),2.78(3H,d,J=2.9Hz),3.11-3.25(1H,m),3.58-3.82(2H,m),4.20-4.35(1H,m),5.39(1H,d,J=7.0Hz),7.40-7.48(2H,m).
ESI/MS(m/z):499(M+H)+,497(M-H)-.
【０１７０】
薬理試験例１
(1)ヒト型グルコキナーゼの発現・精製
pQE-80発現ベクターのEcoRI,HindIIIサイトにヒト型GKのN末欠損（1-15アミノ酸欠損）コード領域に同制限酵素サイトを付加したDNA断片を導入した。このプラスミドを用いてE.coliを形質転換し、ヒト型グルコキナーゼを発現させ、次のように精製を行った。
200mlのE.coli培養液から回収した菌体を回収し、20mlのExtraction buffer A(20mM HEPES、pH8.0、1mM MgCl2、150mM NaCl、2mMメルカプトエタノール、0.25mg/mlリゾチーム、50mg/mlアジ化ナトリウム)に懸濁し室温で5分間、静置した。20mlのExtraction buffer B(1.5M NaCl、100mM CaCl2、100mM MgCl2、0.02mg/ml DNA分解酵素1、プロテアーゼ阻害剤錠剤(Complete(登録商標)1697498):バッファー20mlあたり一錠)を加え、室温で5分間、静置した。そして、抽出液を15,000gで30分間、４℃で遠心し、上清を大腸菌抽出液とした。大腸菌抽出液を0.45μmフィルターでろ過し、20mMイミダゾールを含むバッファー（20mM HEPES pH8.0、0.5M NaCl）で平衡化したNi-NTA agarose 2mL bedにアプライした。約10mlの洗浄バッファーで洗浄し、40から500mMのイミダゾールを含むバッファー（20mM HEPES pH8.0、0.5M NaCl）にて段階的に溶出した。
【０１７１】
各カラムフラクションをSDSゲル電気泳動を用いて分析し、hGK(MW:52KDa)を含んだフラクションを濃縮した。次に濃縮サンプルをSephacryl S-200HR(11/60)ゲルろ過カラムに通し、バッファーB(20mM HEPES、pH8.0、1mM MgCl2、150mM NaCl、1mM DTT)にて溶出した。溶出フラクションをSDSゲル電気泳動にて分析し、hGKを含んだフラクションを濃縮した。最終的に50％グリセロールを添加して‐20℃にて保存した。
【０１７２】
(2)グルコキナーゼ活性化の測定
UV透過性の96ウェルプレートにGK assay mix（25mM Hepes buffer(pH7.1)、25mM KCl、2mM MgCl2、1mM NADP、1mM dithiotheitol、2unit/mL G6PDH、5mM D-glucose、GK適量）を178μl添加した。DMSOに溶解した試験化合物を2μl添加した後、室温で10分間静置し、その後、20mM ATPを20μl添加して反応をスタートさせた。340nmの吸光度をSpectra Max Plusで5分間、30秒間隔、室温で測定し、最初の3分間の反応で化合物評価を行った。試験化合物の最終濃度１０μＭの時の活性を、それを含まないウェルと比較して算出し表２１に示した。
【０１７３】
その結果、今回試験を行った本発明化合物は、試験化合物を含まないウェルと比較して１０μＭで６００％以上のヒト型GK活性化作用を持つことがわかった。
【０１７４】
【表２１】
【産業上の利用可能性】
【０１７５】
本発明化合物は、グルコキナーゼ活性化作用を有していることから、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式(I):
【化１】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はそのプロドラック、或いはそれらの薬理学的に許容される塩。
【請求項２】
前記一般式(I)において、Xが窒素原子、C-F、又はC-Clであり、R1が水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
XがC-F又はC-Clであり、R1が水素原子である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Xが窒素原子であり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基である、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
前記一般式(I)において、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
前記一般式(I)において、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
一般式(II):
【化２】
［式中、R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R8は水素原子又はアミノ基の保護基を意味する］
で表される化合物。
【請求項１１】
一般式(III):
【化３】
［式中、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R9は臭素原子又はヨウ素原子を意味する］
で表される化合物。
【請求項１２】
一般式(I):
【化４】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はそのプロドラック、或いはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする医薬組成物。
【請求項１３】
有効成分である化合物が前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
有効成分である化合物が前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
糖尿病の予防又は治療のための、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１】
一般式(I):
【化１】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はそのプロドラック、或いはそれらの薬理学的に許容される塩。
【請求項２】
前記一般式(I)において、Xが窒素原子、C-F、又はC-Clであり、R1が水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
XがC-F又はC-Clであり、R1が水素原子である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Xが窒素原子であり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基である、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
前記一般式(I)において、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
前記一般式(I)において、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
一般式(II):
【化２】
［式中、R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R8は水素原子又はアミノ基の保護基を意味する］
で表される化合物。
【請求項１１】
一般式(III):
【化３】
［式中、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R9は臭素原子又はヨウ素原子を意味する］
で表される化合物。
【請求項１２】
一般式(I):
【化４】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はそのプロドラック、或いはそれらの薬理学的に許容される塩を有効成分とする医薬組成物。
【請求項１３】
有効成分である化合物が前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
有効成分である化合物が前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
糖尿病の予防又は治療のための、請求項１２に記載の医薬組成物。
【公開番号】特開２０１１−６３６６（Ｐ２０１１−６３６６Ａ）
【公開日】平成２３年１月１３日（２０１１．１．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１５２７４１（Ｐ２００９−１５２７４１）
【出願日】平成２１年６月２６日（２００９．６．２６）
【出願人】（０００１４４５７７）株式会社三和化学研究所 (29)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年１月１３日（２０１１．１．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年６月２６日（２００９．６．２６）
【出願人】（０００１４４５７７）株式会社三和化学研究所 (29)
【Ｆターム（参考）】
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