新規チオフェンカルボキサミド誘導体及びその医薬用途
【課題】グルコキナーゼ活性化作用を有する化合物の提供。
【解決手段】下記一般式（Ｉ）:
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］で表される化合物。
【解決手段】下記一般式（Ｉ）:
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］で表される化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規チオフェンカルボキサミド誘導体及びその医薬用途に関する。当該化合物は、グルコキナーゼ活性化剤として様々な医薬用途を有する。
【背景技術】
【０００２】
グルコキナーゼ（ATP:D-glucose 6-phosphotransferae, EC2.7.1.1.）は、哺乳類に存在する４種のヘキソキナーゼのうちの１つ（ヘキソキナーゼIV）である。ヘキソキナーゼはグルコース代謝の最初の段階を触媒する酵素であり、グルコースをグルコース‐６リン酸へ変換する。グルコキナーゼは主に肝臓と膵臓β細胞に発現しており、グルコース代謝の律速酵素として働き、全身のグルコースホメオスタシスに重要な役割を果たしている。
【０００３】
グルコキナーゼはグルコースに対し低い親和性を持ち、生理的な血糖値に近いKm値（8-15mM）をもっている。また、グルコキナーゼは生理的な濃度のグルコース‐６リン酸による阻害を受けない。それゆえ、食事によって正常血糖値（5mM）が10〜15mMに上昇するとグルコキナーゼを介したグルコース代謝が増大する。これらのことから、グルコキナーゼは肝臓や膵臓β細胞においてグルコースセンサーとして働くと考えられた。
【０００４】
動物におけるグルコキナーゼの役割は遺伝子改変動物を用いた研究によって確認された。グルコキナーゼを発現しないマウスは生後まもなく重篤な糖尿病によって死亡し、一方、グルコキナーゼを過剰発現させたマウスは耐糖能を改善することが報告された。これらの研究によって、グルコキナーゼは実際に全身のグルコースホメオスタシスに重要な役割があることが確認された。
【０００５】
若年発症型の成人発症型糖尿病（MODY-2）はグルコキナーゼ遺伝子の機能喪失の突然変異によって引き起こされ、グルコキナーゼ活性の低下が血糖上昇の原因となっている。さらに、グルコキナーゼの活性を上昇させる突然変異を持つ家系も見つかっており、これらの家系では血漿インスリンレベルの上昇によって空腹時低血糖状態を示す。
【０００６】
このように、グルコキナーゼはグルコースセンサーとして働き、血糖調整に重要な役割を果たしており、グルコースセンサーシステムを利用した血糖コントロールは多くのII型糖尿病患者で有用な治療となると考えられる。グルコキナーゼを活性化する物質は、グルコースセンサーの働きを高めることによって、膵臓β細胞ではインスリン分泌を促進する作用、肝細胞では糖取り込みを促進し、糖放出を抑制する作用が期待できるので、II型糖尿病の予防又は治療剤として有用であると考えられる。
【０００７】
これまでにグルコキナーゼ活性化作用を有する化合物は多数報告されている（非特許文献１）。二つの５員環芳香族複素環がアミド結合した化合物としては、特許文献１にピロール環を有する化合物が、特許文献２にインドール環を有する化合物が報告されているが、これらの化合物は、本願発明のチオフェンカルボキサミド誘導体とは構造が異なるものである。
【０００８】
一方、チオフェンカルボキサミド誘導体としては、エナミン社（ウクライナ）より２、５−ジメチルチオフェン−３−カルボン酸 チアゾール−２−イルアミドが試薬として販売されているが、生物活性等に関する報告はなく、チオフェン環にピロリジン環を有する本願発明の化合物とは構造が異なるものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開2008/149382号
【特許文献２】国際公開2004/031179号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Expert Opin. Ther. Patents 18,759-768, 2008
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、グルコキナーゼ活性化作用を有する化合物を提供すること、及び、グルコキナーゼ活性化作用に基づく、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、以上の点に鑑み、前記の課題を解決するための手段として、新たな基本構造を有する化合物が有効であると考え、新規グルコキナーゼ活性化剤の創製を目指して鋭意研究を重ねた。その結果、下記一般式(I)で表される化合物及びその塩が、非常に優れたグルコキナーゼ活性化作用を有し、更に溶解度等の医薬品としての物性面においても優れた性質を有しており、種々の副作用（ｈERGやCYPに対する作用）と薬効の乖離に優れた安全でかつ有用な医薬となることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明によれば、下記一般式(I):
【化１】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩が提供され、これらの化合物は、本明細書中で以後「本発明化合物」と呼ぶ。以下に本発明化合物の様々な実施形態を列挙する。
【００１４】
本発明の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子、C-H、C-F、又はC-Clであり、R1が水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基である化合物である。
【００１５】
本発明の別の一実施形態は、前記一般式(I)において、XがC-H、C-F、又はC-Clであり、R1が水素原子である化合物である。
【００１６】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子であり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基である化合物である。
【００１７】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2である化合物である。
【００１８】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基である化合物である。
【００１９】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である化合物である。
【００２０】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である化合物である。
【００２１】
本発明はまた、前記一般式(I)で表される本発明化合物の中間体である、下記一般式(II)で表される化合物、下記一般式(III)で表される化合物、及び一般式(IV)で表される化合物をも提供する。
【化２】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する］
【化３】
［式中、R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R8は水素原子又はアミノ基の保護基を意味する］
【化４】
［式中、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R9は臭素原子又はヨウ素原子を意味する］
【００２２】
本発明は更に、前記本発明化合物を有効成分として含有する医薬組成物をも提供する。即ち、本発明の医薬組成物は、糖尿病の予防又は治療のために使用される。
【発明の効果】
【００２３】
本発明化合物は、優れたグルコキナーゼ活性化作用を有しており、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。また、本発明は、種々の副作用（ｈERGやCYPに対する作用）と薬効の乖離に優れた安全でかつ有用な医薬を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
以下に、本発明化合物について説明する。
【化５】
【００２５】
上記一般式（I）で表される本発明化合物において、Xは窒素原子又はCR6、R6は水素原子又はハロゲン原子であり、R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基である。これらの中で、Xは窒素原子、C-F、又はC-Clが好ましく、R1は水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基が好ましい。中でも、XがC-F又はC-Clであるときは、R1は水素原子が好ましく、Xが窒素原子であるときは、R1は水素原子又はC1-C3アルキル基が好ましい。
【００２６】
R2は水素原子又はフッ素原子である。また、R3は水素原子又はC1-C6アルキル基であるが、水素原子又はC1-C3アルキル基が好ましい。
【００２７】
R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2である。これらの中で、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2であることが好ましく、中でも、他方はC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基が最適である。
【００２８】
特に好ましい本発明化合物は、一般式（I）において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である。
【００２９】
別の特に好ましい本発明化合物は、一般式（I）において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である。
【００３０】
尚、本発明化合物において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を意味する。
【００３１】
「C1-C6アルキル基」とは、１〜６個の炭素原子から成る直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｉ−ペンチル基、ｎｅｏ−ペンチル基、ｔ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｉ−ヘキシル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、１，２−ジメチルプロピル基等が挙げられる。
【００３２】
「C1-C6アルコキシ基」とは、−Ｏ−（C1-C6アルキル）基を意味し、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｉ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓ−ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ｎ−ペントキシ基、ｉ−ペントキシ基、ｎｅｏ−ペントキシ基、ｔ−ペントキシ基、１−メチルブトキシ基、２−メチルブトキシ基、１，２−ジメチルプロポキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基等が挙げられる。
【００３３】
「C1-C6アルキルチオ基」とは、−Ｓ−（C1-C6アルキル）基を意味する。また、「C1-C6アルキレンカルボン酸」とは、−（C1-C6アルキレン）−ＣＯＯＨを意味し、「C1-C6アルキレン」とは、１〜６個の炭素原子から成る直鎖状のアルキレンを意味し、例えば、メチレン、エチレン、ｎ−プロピレン、ｎ−ブチレン等が挙げられる。
【００３４】
「C1-C6アルキルスルホニル基」とは、−ＳＯ２−（C1-C6アルキル）基を意味する。また、「C1-C6アルキルカルボニル基」とは、−ＣＯ−（C1-C6アルキル）基を意味する。
【００３５】
次に、本発明化合物の中間体である化合物について説明する。
【化６】
上記一般式（II）で表される中間体において、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子である。R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基である。これらの中で、Xは窒素原子、C-F、又はC-Clが好ましく、R1は水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基が好ましい。中でも、XがC-F又はC-Clであるときは、R1は水素原子が好ましく、Xが窒素原子であるときは、R1は水素原子又はC1-C3アルキル基が好ましい。R2は水素原子又はフッ素原子である。
【００３６】
更に別の本発明化合物の中間体である化合物について説明する。
【化７】
上記一般式（II）で表される中間体において、R2は水素原子又はフッ素原子であり、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基であり、R8は水素原子又はアミノ基の保護基である。
【００３７】
更に別の本発明化合物の中間体である化合物について説明する。
【化８】
上記一般式（III）で表される中間体において、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基であり、R9は臭素原子又はヨウ素原子である。
【００３８】
「カルボキシル基の保護基」とは、通常、有機合成上カルボキシル基の保護基として知られている基を意味し、例えば、(1)メチル基、エチル基、ｉ−プロピル基、ｔ−ブチル基のような直鎖状若しくは分岐鎖状の炭素数１〜４の低級アルキル基、(2)２−ヨウ化エチル基、２，２，２−トリクロロエチル基のようなハロゲノ低級アルキル基、(3)メトキシメチル基、エトキシメチル基、ｉ−ブトキシメチル基のような低級アルコキシメチル基、(4)ブチリルオキシメチル基、ピバロイルオキシメチル基のような低級脂肪族アシルオキシメチル基、(5)１−メトキシカルボニルオキシエチル基、１−エトキシカルボニルオキシエチル基のような１−低級アルコキシカルボニルオキシエチル基、(6)ベンジル、ｐ-メトキシベンジル基、ｏ−ニトロベンジル基、ｐ−ニトロベンジル基のようなアラルキル基、(7)ベンズヒドリル基、(8)フタリジル基等が挙げられる。
【００３９】
「アミノ基の保護基」とは、通常、有機合成上アミノ基の保護基として知られている基を意味し、例えば、(1)ホルミル基、アセチル基、クロロアセチル基、ジクロロアセチル基、プロピオニル基、フェニルアセチル基、フェノキシアセチル基、チエニルアセチル基などの置換または非置換の低級アルカノイル基、(2)ベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボニル基、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル基、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基などの置換または非置換の低級アルコキシカルボニル基、(3)メチル基、ｔ−ブチル基、２，２，２−トリクロロエチル基、トリチル基、ｐ−メトキシベンジル基、ｐ−ニトロベンジル基、ジフェニルメチル基、ピバロイルオキシメチル基などの置換低級アルキル基、(4)トリメチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基などの置換シリル基、(5)ベンジリデン基、サリチリデン基、ｐ−ニトロベンジリデン基、ｍ−クロルベンジリデン基、３，５−ジ（ｔ−ブチル）−４−ヒドロキシベンジリデン基、３，５−ジ（ｔ−ブチル）ベンジリデン基などの置換または非置換のベンジリデン基等が挙げられる。
【００４０】
「薬理学的に許容される塩」とは、一般式(I)で表される化合物の生物学的有効性及び特性を保持し、生物学的又はその他の面においても不都合ではない塩を意味する。このような薬理学的に許容される塩は本発明の範囲に含まれる。薬理学的に許容される塩としては、無機酸付加塩（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等との塩）、有機酸付加塩（例えば、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酢酸、シュウ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸との塩）、アミノ酸との塩（例えば、リジン、アルギニン等との塩）、アルカリ金属付加塩（例えば、ナトリウム、カリウム等との塩）、アルカリ土類金属付加塩（例えば、カルシウム、マグネシウム等との塩）、有機アミン付加塩（例えば、ジエチルアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等との塩）等が挙げられる。これらの付加塩の形成反応は、常法に従い行うことができる。
【００４１】
本発明化合物には、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により前記一般式(I)に変換される化合物を意味するプロドラッグも含まれ、種々のプロドラッグが当該技術分野で既知である。例えば、一般式(I)で表される化合物がカルボン酸基を有する場合のプロドラッグとしては、当該カルボン酸基がエステル化又はアミド化された化合物（例えば、エチルエステル化、カルボキシメチルエステル化、ピバロイルオキシメチル化、又はメチルアミド化された化合物）等が挙げられる。一般式(I)で表される化合物がアミノ基を有する場合のプロドラッグとしては、当該アミノ基がアシル化、アルキル化、又はリン酸化された化合物（例えば、エイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、アセトキシメチル化、又はｔ−ブチル化された化合物）等が挙げられる。
【００４２】
また、本発明化合物において、１つ又はそれ以上の不斉炭素が存在する場合、本発明は不斉炭素に基づく異性体及びそれらの任意の組合せの化合物のいずれも包含し、幾何異性又は互変異性が存在する場合、本発明はそれらの幾何異性体又は互変異性体のいずれも包含する。さらに、本発明化合物には、水やエタノール等の医薬品として許容される溶媒との溶媒和物も含まれる。
【００４３】
本発明化合物である一般式(I)で表される化合物は、以下の反応工程式Ｉ〜ＶＩに示す方法、実施例に記載した方法、又は公知の方法を組み合わせて製造することができる。
［反応工程式Ｉ］
【化９】
［式中、R10はアミノ基の保護基であり、R11はC1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2であり、その他の記号は前記一般式と同義である］
【００４４】
［工程Ｉ−１］
一般式(IIIa)で表される化合物を適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン等）中、塩素化剤（例えば、塩化チオニル、塩化オキサリル）を用いて酸塩化物とした後、一般式(V)で表される化合物と適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン等）を用いて反応させることによって、一般式（VI）で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。また、一般式(IIIa)で表される化合物と一般式(V)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによっても一般式(VI)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(V)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００４５】
［工程Ｉ−２］
「Protecting Groups in Organic Synthesis,3rd
Edition,Wiley(1999)」に記載の方法を参考に、一般式(VI)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(II)で表される化合物が得られる。
【００４６】
［工程Ｉ−３］
一般式(II)で表される化合物と一般式(VII)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(Ia)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(VII)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００４７】
［反応工程式ＩＩ］
【化１０】
［式中、R12はC1-C6アルキルスルホニル基又はC1-C6アルキルカルボニル基であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００４８】
［工程ＩＩ−１］
一般式(II)で表される化合物と一般式(VIII)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(IX)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(VIII)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００４９】
［工程ＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(IX)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(X)で表される化合物が得られる。
【００５０】
［工程ＩＩ−３］
一般式(X)で表される化合物と、一般式(XI)で表される化合物を適当な溶媒（例えば塩化メチレン、トルエン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、ピリジン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン等）を用いて反応させることによって、一般式(Ib)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XI)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５１】
［反応工程式ＩＩＩ］
【化１１】
［式中、R13は水素原子又はC1-C6アルキル基であり、R14はカルボキシル基の保護基であり、ｎは１〜６の整数であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００５２】
［工程ＩＩＩ−１］
一般式(II)で表される化合物と一般式(XII)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(XIII)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XII)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５３】
［工程ＩＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XIII)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(XIV)で表される化合物が得られる。
【００５４】
［工程ＩＩＩ−３］
一般式(XIV)で表される化合物と一般式(XV)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(XVI)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XV)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５５】
［工程ＩＩＩ−４］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XVI)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ic)で表される化合物が得られる。
【００５６】
［反応工程式ＩＶ］
【化１２】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００５７】
［工程ＩＶ−１］
一般式(XIV)で表される化合物と一般式(XVII)で表される化合物を適当な溶媒（例えば、エタノール、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（トリエチルアミン、トリトンＢ、水酸化ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(XVIII)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XVII)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５８】
［工程ＩＶ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XVIII)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Id)で表される化合物が得られる。
【００５９】
［反応工程式Ｖ］
【化１３】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００６０】
［工程Ｖ−１］
一般式(II)で表される化合物と一般式(XIX)で表される化合物と適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン、ジ−ｔ−ブチルピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(XX)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XIX)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００６１】
［工程Ｖ−２］
一般式(XX)で表される化合物と一般式(XXI)で表される化合物を適当な溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(XXII)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XXI)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００６２】
［工程Ｖ−３］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XXII)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ie)で表される化合物が得られる。
【００６３】
［反応工程式ＶＩ］
【化１４】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００６４】
［工程ＶＩ−１］
一般式(II)で表される化合物と一般式(XXIII)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(XVI)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XXIII)で表される化合物は、公知の方法、又は参考例６６〜８１に記載した方法を用いて製造することができる。
【００６５】
［工程ＶＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XVI)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ic)で表される化合物が得られる。
【００６６】
前記一般式(I)で表される本発明化合物の中間体である一般式(III)及び一般式(IV)で表される化合物は、以下の反応工程式VII〜IXに示す方法、実施例１〜９に記載した方法、又は公知の方法を組み合わせて製造することが出来る。
［反応工程式ＶＩＩ］
【化１５】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００６７】
［工程ＶＩＩ−１］
一般式(XXIV)で表される化合物とハロゲン化メチルを適当な溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、アミン試薬（ジイソプロピルアミン、ヘキサメチルホスホロアミド、Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ−テトラメチルエチレンジアミンなど）存在下、塩基（ｎ−ブチルリチウム等）を用いて反応させることによって、一般式(XXV)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から室温、反応時間は１０分間から２４時間である。
【００６８】
［工程ＶＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XXV)で表される化合物の保護基R14を導入することによって、一般式(XXVI)で表される化合物が得られる。
【００６９】
［工程ＶＩI−３］
一般式(XXVI)で表される化合物を、適当な溶媒中（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、ジエチルエーテル等）中、臭素化剤又はヨウ素化剤（例えば、Ｎ−ブロモコハク酸イミド、臭素、Ｎ−ヨードコハク酸イミド、ヨウ素等）を用いて反応させることによって、一般式(IVa)で表される化合物が得られる。反応温度は−５０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７０】
［工程ＶＩＩ−４］
一般式(IVa)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、有機リチウム、又は有機マグネシウム試薬（例えば、イソプロピルマグネシウムブロマイド、ｎ−ブチルリチウム等）存在下、一般式(XXVII)で表される化合物と反応させることによって、一般式(XXVIII)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。尚、一般式(XXVII)で表される化合物は、前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、市販の２−ピロリドンに保護基を導入することによって得られる。
【００７１】
［工程ＶＩＩ−５］
一般式(XXVIII)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(XXIX)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７２】
［工程ＶＩＩ−６］
一般式(XXIX)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン等）存在下メタンスルホニルクロライドを用いて環化させることによって、一般式(IIIb)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７３】
［工程ＶＩＩ−７］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(IIIb)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(IIIc)で表される化合物が得られる。
【００７４】
［反応工程式ＶＩＩＩ］
【化１６】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００７５】
［工程ＶＩIＩ−１］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XXVIII)で表される化合物の保護基R10を除去した後、適当な溶媒中（例えば、ｉ−プロパノール、エタノール等）、酸（例えば、塩酸等）の存在下、還元剤（例えば、シアノ水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(IIId)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７６】
［工程ＶＩIＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(IIId)で表される化合物の保護基R10を導入することによって、一般式(IIIb)で表される化合物が得られる。
【００７７】
［工程ＶＩIＩ−３］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(IIIb)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(IIIc)で表される化合物が得られる。
【００７８】
［反応工程式ＩＸ］
【化１７】
［式中、R15は水酸基の保護基であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００７９】
［工程ＩＸ−１］
一般式(IVa)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、有機リチウム、又は有機マグネシウム試薬（例えば、ｉ−プロピルマグネシウムブロマイド、ｎ−ブチルリチウム等）存在下、一般式(XXX)で表される化合物と反応させることによって、一般式(XXXI)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。尚、一般式(XXX)で表される化合物は、前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、市販の４−ヒドロキシピロリジン−2−オンに保護基を導入することによって得られる。
【００８０】
［工程ＩＸ−２］
一般式(XXXI)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(XXXII)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００８１】
［工程ＩＸ−３］
一般式(XXXII)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン等）存在下メタンスルホニルクロライドを用いて環化させることによって、一般式(XXXIII)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００８２】
［工程ＩＸ−４］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XXXIII)で表される化合物の保護基R15を除去することによって、一般式(XXXIV)で表される化合物が得られる。
【００８３】
［工程ＩＸ−５］
一般式(XXXIV)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、フッ素化試薬（例えば、ジメチルアミノサルファトリフルオリド、Ｎ−フルオロ−Ｎ’−クロロメチルトリエチレンジアミン ビス（テトラフルオロボラート）等）と反応させることによって、一般式(IIIe)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００８４】
［工程ＩＸ−６］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(IIIe)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(IIIf)で表される化合物が得られる。
【００８５】
その他に本発明化合物を製造するために必要な出発原料、中間体、又は試薬として用いる化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を参考に製造することができる。
【００８６】
本発明化合物及び当該化合物を製造するために使用される化合物に含まれる置換基（例えば、水酸基、アミノ基、カルボン酸基等）は、当該置換基に原料又は中間体の段階で適当な保護基を導入しておくことが化合物製造上効果的である場合があり、必要に応じて前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の保護基を適宜選択して使用してもよい。
【００８７】
本発明化合物及び当該化合物を製造するために使用される化合物を反応液から単離、精製するには、通常使用される方法を用いることができる。例えば、溶媒抽出、イオン交換樹脂、担体としてシリカゲル、アルミナ等を用いたカラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分取、薄層クロマトグラフィー、スカベンジャー樹脂、再結晶等を用いることができ、これらの単離、精製法は、単独又は組み合わせて行うことができる。単離、精製は、反応毎に行ってもよいし、いくつかの反応終了後に実施してもよい。
【００８８】
本明細書中の化合物が不斉炭素を有し光学異性体が存在する場合、これらの光学異性体は、ラセミ化合物の一般的な光学分割法、例えば、一般的な光学活性な化合物とのジアステレオマー塩として再結晶する分別結晶化又はクロマトグラフィーなどの常法により分割することができる。また、光学活性体分離用カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分取によってもそれぞれの光学異性体を単離することができる。
【００８９】
このようにして製造された本発明化合物は、グルコキナーゼ活性化剤として作用することから、医薬組成物として使用することが出来る。当該医薬組成物は、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。
【００９０】
本発明化合物を医薬として使用する場合の投与形態としては、「日本薬局方」製剤総則記載の各種投与形態が目的に応じて選択できる。例えば、錠剤の形態に成形するに際しては、通例、当該分野で用いられる経口摂取可能な成分を選択すればよい。例えば、乳糖、結晶セルロース、白糖、リン酸カリウム等の賦形剤がそれにあたる。更に、所望により、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、凝集防止剤等、通例製剤分野で常用される種々の添加剤を配合してもよい。
【００９１】
本発明製剤中に有効成分として含有される本発明化合物の量は、特に限定されず、広範囲より適宜選択される。有効成分化合物の投与量は、その用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度により適宜決定されるが、経口投与の場合には、本発明化合物の量が1日体重1kg当り約1μg〜100mgの範囲で、1日に1〜4回に分けて適宜投与することができる。しかしながら、投与量、回数は、治療すべき症状の程度、投与される化合物の選択及び選択された投与経路を含む関連する状況に鑑みて決定されることから、前記の投与量範囲及び回数は本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００９２】
以下に本発明の内容を、実施例、参考例、及び薬理試験例を挙げて、さらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は、その記載内容に限定されるものではない。
以下の実施例及び参考例における核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）スペクトルは、テトラメチルシランを標準物質としてケミカルシフト値をσ値（ｐｐｍ）で記載した。分裂パターンは、一重線を「ｓ」、二重線を「ｄ」、三重線を「ｔ」、四重線を「ｑ」、多重線を「ｍ」、幅広い線を「ｂｒ」で示した。質量分析は、エレクトロスプレーイオン化法（ＥＳＩ）で行った。表中において、メチル基を「Ｍｅ」、エチル基を「Ｅｔ」、ｉ−プロピル基を「ｉ−Ｐｒ」、ｎ−プロピル基を「ｎ−Ｐｒ」、ｉ−ブチル基を「ｉ−Ｂｕ」、ｔ−ブチル基を「ｔ−Ｂｕ」、ｎ−ペンチル基を「ｎ−Ｐｅｎ」、エタンスルホニル基を「Ｅｓ」、メタンスルホニル基を「Ｍｓ」、アセチル基を「Ａｃ」、プロピオニル基を「ＥｔＣＯ」で示した。
【００９３】
参考例１
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）ピロリジン−２−オン
（Ｓ）−４−ヒドロキシピロリジン−２−オン（101g)をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（400mL）に溶解し、イミダゾール（102g）とｔ−ブチルジメチルクロロシラン（158g）を０℃で加え、室温で２１時間撹拌した。反応液を水に加え、析出した白色固体をろ取し、水で洗浄することにより、白色固体として表記化合物（210g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.02(6H,s),0.81(9H,s),2.16-2.22(1H,m),2.42-2.50(1H,m),3.14-3.18(1H,m),3.49-3.54(1H,m),4.46-4.52(1H,m),5.76(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):216(M+H)+.
【００９４】
参考例２
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）ピロリジン−２−オン（210g）と４−ジメチルアミノピリジン（5.90g）をアセトニトリル（500mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（234mL）を０℃で加え、室温で２２時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、４％クエン酸水溶液、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をヘキサンで洗浄することにより、白色固体として表記化合物（271g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.05(6H,s),0.81(9H,s),1.47(9H,s),2.36-2.42(1H,m),2.58-2.67(1H,m),3.56-3.58(1H,m),3.76-3.81(1H,m),4.28-4.34(1H,m).
【００９５】
参考例３
２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−ピロリドン（25.0g）をアセトニトリル（300mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（70.5mL）と４−ジメチルアミノピリジン（1.79g）を加え、室温で５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（51.7g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.53(9H,s),1.96-2.05(2H,m),2.51(2H,t,J=5.5Hz),3.75(2H,t,J=7.1Hz).
【００９６】
参考例４
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸
ジイソプロピルアミン（233g）をテトラヒドロフラン（2.3L）に溶解し、ｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（1.50L）を０℃で滴下した後、４０分間撹拌した。反応液を−６８〜−６０℃に冷却し、チオフェン−３−カルボン酸（223g）のテトラヒドロフラン（500mL）溶液を滴下した後、１時間撹拌した。その後、ヨウ化メチル（254g）を加えて室温に昇温し、更に１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に６Ｎ塩酸を加えてｐＨ＝１とした後、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を水／酢酸で再結晶することにより、表記化合物（209g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.78(3H,s),7.01(1H,d,J=5.5Hz),7.45(1H,d,J=5.5Hz).
ESI/MS(m/z):141(M-H)-.
【００９７】
参考例５
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸（100g）をメタノール（500mL）に溶解し、塩化チオニル（200mL）をゆっくり滴下した後、３時間還流した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に水を加え、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、表記化合物（105g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.74(3H,s),3.85(3H,s),6.98(1H,d,J=5.1Hz),7.38(1H,d,J=5.5Hz).
【００９８】
実施例１
５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（156g）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（750mL）に溶解し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（178g）を加えて室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機相を硫酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、表記化合物（226g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.67(3H,s),3.84(3H,s),7.33(1H,s).
【００９９】
参考例６
(Ｓ）−４−ヒドロキシ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
アルゴン雰囲気下、５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（227g）をテトラヒドロフラン（350mL）に溶解し、０℃に冷却した。イソプロピルマグネシウムブロマイド（1500mL）を１０℃以下で滴下した後、０℃で２時間撹拌した。次に、（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（276g）のテトラヒドロフラン（550mL）溶液を１０℃以下で滴下した後、室温で１．５時間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、３０％クエン酸水溶液を１０℃以下で滴下、ｐＨ＝３とした後、室温で１．５時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、有機相を５％炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、粗生成物（418g）を得た。
アルゴン雰囲気下、（Ｒ）−５，５−ジフェニル−２−メチル−３，４−プロパノ−１，３，２−オキサボロリジン（49.1g）をテトラヒドロフラン（86mL）に溶解し、ボラン-ジメチルスルフィド錯体（886mL）を室温で滴下した後、２０分間撹拌した。その後、上記粗生成物（418g）のテトラヒドロフラン（450mL）溶液を室温で４５分間かけて滴下した後、３０分間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、メタノール／飽和食塩水を滴下した後、酢酸エチルを加え、有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルのショートカラム（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２）に通すことにより、粗生成物（337g）を得た。
アルゴン雰囲気下、上記粗生成物（302g）とトリエチルアミン（265mL）を塩化メチレン（800mL）に溶解し、メタンスルホニルクロライド（73.8mL）の塩化メチレン（295mL）溶液を０℃で滴下した後、３０分間撹拌した。反応液に水を加え、塩化メチレンで抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、粗生成物（304g）を得た。
上記粗生成物（265g）をテトラヒドロフラン（265mL）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリド（565mL）を室温で滴下した後、そのまま１．５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、酢酸エチルで抽出、水、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／５−２／１）にて精製することにより、黄白色固体として表記化合物（128g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.24-1.45(9H,m),1.66(1H,t,J=4.9Hz),2.18(1H,d,J=14.3Hz),2.35-2.51(1H,m),2.71(3H,s),3.51(1H,d,J=11.7Hz),3.66(1H,t,J=7.7Hz),3.83(3H,s),4.48-4.58(1H,m),5.09(1H,br.s),7.16-7.21(1H,m).
ESI/MS(m/z):342(M+H)+,340(M-H)-.
【０１００】
実施例２
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
及び実施例３
（２Ｒ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
(Ｓ）−４−ヒドロキシ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（113g）を塩化メチレン（1130mL）に溶解し、０℃に冷却した。ジエチルアミノサルファトリフルオリド（130mL）を５℃以下で滴下した後、室温で８時間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を滴下した後、塩化メチレンで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２０−１／１）にて精製することにより、黄色固体として表記化合物（２Ｓ，４Ｒ）（55.5g）及び黄色固体として表記化合物（２Ｒ，４Ｒ）（21.5g）を得た。
（２Ｓ，４Ｒ）体の物性データ
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.32-1.47(9H,m),2.05-2.23(1H,m),2.65-2.75(4H,m),3.54-3.70(1H,m),3.82(3H,s),3.90-4.05(1H,m),5.05-5.30(3H,m),7.18(1H,s).
ESI/MS(m/z):344(M+H)+,342(M-H)-.
（２Ｒ，４Ｒ）体の物性データ
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.45(9H,br.d,J=42.1Hz),2.43-2.55(2H,m),2.67(3H,s),3.75-3.85(4H,m),5.12-5.35(2H,m),7.20(1H,s).
ESI/MS(m/z):344(M+H)+,342(M-H)-.
【０１０１】
参考例７
５−（４−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−ヒドロキシブチル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
アルゴン雰囲気下、５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（2.00g）をテトラヒドロフラン（9.47mL）に溶解し、イソプロピルマグネシウムブロマイド（12.9mL）を−４０℃で滴下した後、１．５時間撹拌した。次に、２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.89g）のテトラヒドロフラン（11.2mL）溶液を−４０℃で滴下した後、室温で２４時間撹拌した。反応液を−１０℃に冷却し、メタノール（17.2mL）を加えた後、水素化ホウ素ナトリウム（486mg）を少しづつ加え、１５分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（2.13g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.44(9H,s),1.51-1.69(4H,m),1.79-1.84(1H,m),2.70(3H,s),3.15-3.19(1H,m),3.83(3H,s),4.57-4.87(1H,m),7.26(1H,s).
【０１０２】
実施例４
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
５−（４−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−ヒドロキシブチル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（2.13g）を塩化メチレン（58mL）に溶解し、−６０℃に冷却した。トリエチルアミン（2.58mL）、メタンスルホニルクロライド（530μL）を滴下した後、−６０℃で２時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／０−４／１）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（1.52g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.36-1.46(9H,m),1.95-1.99(3H,m),2.19-2.28(1H,m),2.67(3H,s),3.40-3.59(2H,m),3.82(3H,s),4.95-5.07(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):326(M+H)+,324(M-H)-.
【０１０３】
実施例５
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（132g）をメタノール（500mL）に溶解し、メタンスルホン酸（34.4mL）を滴下した後、室温で１時間撹拌、更に５０℃で７時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣にメタノール（360mL）を加えた後、０℃に冷却した。１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ＝８とし、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、淡赤色油状物として表記化合物（91.4g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.94-1.74(3H,m),2.14-2.18(1H,m),2.68(3H,s),2.98-3.00(1H,m),3.10-3.13(1H,m),3.82(3H,s),4.30(1H,t,J=7.0Hz),7.17(1H,s).
ESI/MS(m/z):226(M+H)+.
【０１０４】
実施例６
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
（−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩
（−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸（35.3g）をメタノール（1.00L）に溶解し、２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（21.1g）のメタノール（400mL）溶液を加え、室温で９時間静置した。析出した結晶をろ取し、メタノールで洗浄することにより、白色結晶として表記化合物（11.8g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.84-1.99(3H,m),2.28-2.21(1H,m),2.62(3H,s),3.13-3.18(2H,m),3.77(3H,s),4.66(1H,t,J=7.7Hz),5.68(2H,s),7.39(1H,d,J=8.4Hz),7.50(4H,t,J=7.7Hz),7.62-7.64(2H,m),7.95(4H,t,J=4.2Hz).
ESI/MS(m/z):226(M+H)+.
【０１０５】
実施例７
（−）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル （−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩（23.7g）をクロロホルム（100mL）に懸濁し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（82.0mL）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液をクロロホルムで抽出し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下濃縮して得られた無色油状物（10.6g）を塩化メチレン（90mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（11.2mL）、トリエチルアミン（6.80mL）を滴下した後、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた淡橙色油状物（17.2g）をメタノール（100mL）に溶解し、水（10mL）、水酸化リチウム１水和物（5.10g）を加え、５０℃で６時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸で中和し、析出した結晶をろ取することにより、白色固体として表記化合物（12.6g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.39(9H,br.d,J=51.6Hz),1.92-2.02(3H,m),2.28(1H,br.s),2.66(3H,s),3.39-3.52(2H,m),4.97(1H,br.d,J=19Hz),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):310(M-H)-.
【０１０６】
実施例８
（２Ｓ，４Ｒ）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）−４−フルオロピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（12.1g）と水酸化リチウム１水和物（4.40g）をメタノール（90mL）と水（30mL）の混合溶媒に溶解し、５０℃で４時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸でｐＨ＝６とし、析出した結晶をろ取した。ろ取した結晶を酢酸エチルに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色固体として表記化合物（11.2g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.34-1.44(9H,m),1.95-2.05(3H,m),2.21-2.32(1H,m),2.66(3H,s),3.42-3.51(2H,m),5.05-5.15(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):328(M-H)-.
【０１０７】
実施例９
２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.52g）をメタノール（14.0mL）に溶解し、０℃で水（2.33mL）と水酸化リチウム１水和物（588mg）を加え、５０℃で１７時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸で中和し、析出した結晶をろ取することにより、白色固体として表記化合物（1.26g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.34-1.44(9H,m),1.95-2.05(3H,m),2.21-2.32(1H,m),2.66(3H,s),3.42-3.51(2H,m),5.05-5.15(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):310(M-H)-.
【０１０８】
参考例８
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.00g）をトルエン（10mL）と塩化メチレン（10mL）の混合溶媒に溶解し、オキサリルクロライド（2.74mL）を滴下した後、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮、得られた残渣をトルエン（10mL）と塩化メチレン（10mL）の混合溶媒に溶解し、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（745mg）とＮ，Ｎ−ジエチルアニリン（1.98mL）を加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１−２／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（1.01g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.35-1.46(9H,m),1.70-1.75(1H,m),1.88-1.97(2H,m),2.19-2.45(1H,m),2.73(3H,s),3.38-3.55(2H,m),4.98(1H,br.t,J=35.3Hz),6.84(1H,br.d,J=36.6Hz),7.05(1H,br.t,J=15.7Hz),10.27(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１０９】
参考例９
（−）−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾール 塩酸塩を用いて参考例８と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.16-1.54(9H,m),1.89-2.12(3H,m),2.23-2.37(1H,m),2.68(3H,s),3.39-3.57(2H,m),5.03(1H,br.s),7.24(1H,br.s),7.33(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１１０】
参考例１０
（−）−２−［５−メチル−４−（［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−１，２,４−チアチアゾールを用いて参考例８と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.32-1.46(9H,m),1.95-2.01(3H,m),2.21-2.34(1H,m),2.78(3H,s),3.38-3.59(2H,m),4.95-5.15(1H,m),7.16-7.20(1H,m),8.28(1H,s).
ESI/MS(m/z):395(M+H)+,393(M-H)-.
【０１１１】
参考例１１
（−）−２−［4−(3−エチル−［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−３−エチル−［１，２，４］−チアチアゾールを用いて参考例８と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):423(M+H)+,421(M-H)-.
【０１１２】
参考例１２
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェンー２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸
ｔ−ブチルエステル
（２Ｓ，４Ｒ）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）−４−フルオロピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（11.0g）をトルエン（180mL）に溶解し、オキサリルクロライド（28.6mL）を０℃で滴下し、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮、得られた残渣をトルエン（150mL）に溶解し、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン（21.3mL）、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（7.75g）を０℃で加えた後、室温で１３時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２０−１／５）にて精製することにより、淡黄白色粉末として表記化合物（11.8g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.26-1.45(9H,m),2.04-2.20(1H,m),2.70-2.75(4H,m),3.57-3.68(1H,m),2.73(3H,s),3.38-3.55(2H,m),4.00(1H,br.s),5.15-5.20(1H,m),6.91(1H,s),7.10(1H,s),10.07(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):430(M+H)+,428(M-H)-.
【０１１３】
参考例１３
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェンー２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸
ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾールを用いて参考例１２と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.37-1.46(9H,m),2.15-2.28(1H,m),2.68-2.78(4H,m),3.58-4.24(2H,m),5.15-5.33(1H,m),5.68-6.02(1H,m),7.34-7.37(2H,m).
ESI/MS(m/z):446(M+H)+,444(M-H)-.
【０１１４】
参考例１４
(２Ｓ，４Ｒ)−２−［4−(3−エチル−［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル)−4−フルオロピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、3−エチル−５−アミノ−［１，２，４］チアジアゾールを用いて参考例１２と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):441(M+H)+,439(M-H)-.
【０１１５】
参考例１５
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［５−メチル−４−（［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに５−アミノ−［１，２，４］−チアチアゾールを用いて参考例１２と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1HNMR(CDCl3)δ(ppm):1.3-1.5(9H,m),2.14(1H,ddt,J=38,3.6,9.6Hz),2.70(1H,m),2.79(3H,s),3.63(1H,ddd,J=38,8.0,3.6Hz),4.00(1H,m),5.0-5.5(2H,m),7.25(1H,br.s),8.31(1H,s),10.7(1H,br.s).
【０１１６】
参考例１６
２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.56g）をトルエン（16mL）に懸濁し、オキサリルクロライド（4.30mL）を０℃で滴下した後、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣をトルエン（16mL）に溶解し、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（1.16g）とＮ，Ｎ−ジエチルアニリン（3.20mL）を０℃で加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝３／２）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（1.62g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.36-1.46(9H,m),1.91-1.99(3H,m),2.21-2.28(1H,m),2.74(3H,s),3.41-3.56(2H,m),4.99-5.09(1H,m),6.98(1H,s),7.06(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１１７】
参考例１７
２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.24-1.46(9H,m),1.93-1.97(3H,m),2.23-2.32(1H,m),2.74(3H,s),3.40-3.56(2H,m),4.95-5.11(1H,m),6.87-7.12(1H,m),7.18(1H,br.s),9.89(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１１８】
参考例１８
２−［５−メチル−４−（チアゾール−２−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］−ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノチアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.24-1.46(9H,m),1.93-1.97(3H,m),2.23-2.32(1H,m),2.74(3H,s),3.40-3.56(2H,m),4.95-5.11(1H,m),6.87-7.12(1H,m),7.18(1H,br.s),9.89(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１１９】
参考例１９
２−［５−メチル−4−(［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］ピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−［１，２，４］チアジアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):395(M+H)+,393(M-H)-.
【０１２０】
参考例２０
２−［4−(3−エチル−［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−３−エチル−［１，２，４］チアジアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):423(M+H)+,421(M-H)-.
【０１２１】
参考例２１
２−［５−メチル−4−［3−メチルスルファニル−［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル］チオフェン−２−イル］ピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−３−メチルスルファニル−［１，２，４］チアジアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):441(M+H)+,439(M-H)-.
【０１２２】
参考例２２
２−［4−［3−メトキシ−［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル］−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−３−メトキシ−［１，２，４］チアジアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):425(M+H)+,423(M-H)-.
【０１２３】
参考例２３
（−）−２−メチルー５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（970mg）を塩化メチレン（10mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（2.72mL）を加えて、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（578mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.70-1.98(3H,m),2.14-2.22(1H,m),2.73(3H,s),2.99-3.05(1H,m),3.11-3.15(1H,m),4.34(1H,t,J=7.1Hz),6.80(1H,d,J=2.6Hz),7.08(1H,s).
ESI/MS(m/z):312(M+H)+,310(M-H)-.
【０１２４】
参考例２３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１に、データを表２に示した。
【化１８】
【０１２５】
【表１】
【０１２６】
【表２】
【０１２７】
参考例３７
５−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−3−カルボン酸 ［１，２，４］チアゾール−５−イルアミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［５−メチルｌ−４−（［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）−チオフェン−２−イル］−ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルを用いて参考例２３と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):313(M+H)+,311(M-H)-.
【０１２８】
参考例３８
エチルアミノ酢酸 ベンジルエステル 塩酸塩
ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ酢酸（152 g）をアセトン（750mL）に溶解し、炭酸カリウム（156g）塩化ベンジル（94.7mL）、ヨウ化ナトリウム（124g）を加え、60℃で4.5時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈した後、不溶物をろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で2回洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣（234 g）を４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液（1.2L）に溶解した後、室温で1.5時間撹拌した。反応液にジエチルエーテルを加えて、析出した固体をろ取した後、ジエチルエーテルで洗浄し、表記化合物（157g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.45-1.49(3H,m),3.18(2H,br.s),3.86(2H,br.s),5.21(2H,s),7.32-7.36(5H,m),9.92(2H,br.s).
【０１２９】
参考例３９
（Ｓ）−２−アミノブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸（2.0g）をＮ,Ｎ-ジメチルホルムアミド（20mＬ）へ溶解し、炭酸カリウム（2.72g）を加え、臭化ベンジル（1.29mＬ）を滴下した。室温で5時間撹拌した後、反応液を酢酸エチル、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）で精製し、（Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸 ベンジルエステル（2.80g）を得た。得られた（Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸 ベンジルエステル（1.0g）へ４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液（5.1mＬ）を加え、室温で3時間撹拌した。減圧濃縮し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で塩基性とし、ジエチルエーテルで抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、無色オイルとして表記化合物（637mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.94(3H,t,J=7.6Hz),1.56(2H,br.s),1.59-1.69(1H,m),1.73-1.84(1H,m),3.45(1H,t,J=6.4Hz),5.16(2H,s),7.31-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):194(M+H)+.
【０１３０】
参考例４０
（Ｒ）−２−アミノブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸の代わりに、（Ｒ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸を用いて参考例３９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm): 0.94(3H,t,J=7.6Hz),1.56(2H,br.s),1.59-1.69(1H,m),1.73-1.84(1H,m),3.45(1H,t,J=6.4Hz),5.16(2H,s),7.31-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):194(M+H)+.
【０１３１】
参考例４１
（Ｒ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸の代わりに、（Ｒ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノプロパン酸を用いて参考例３９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.44(3H,d,J=7.0Hz),4.10-4.21(1H,m),5.25(2H,s),7.32-7.49(5H,m),8.55(1H,br.s).
【０１３２】
参考例４２
（Ｓ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−アミノブタン酸 ベンジルエステル（520mg）、アセトアルデヒド（166μL）をメタノール（5mL）へ溶解させ、シアノホウ酸水素ナトリウム（169mg）を加え、室温で2時間撹拌した。１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えジエチルエーテルで抽出し、有機層を無水硫酸水素ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、得られた残渣をＮＨ−シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝2／1）で精製し、無色オイルとして表記化合物（200mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.6Hz),1.08(3H,t,J=6.8Hz),1.46(1H,br.s),1.64-1.72(2H,m),2.47-2.55(1H,m),2.59-2.67(1H,m),3.25(1H,t,J=6.4Hz),5.17(2H,s),7.30-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):222(M+H)+.
【０１３３】
参考例４３
（Ｒ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−アミノブタン酸 ベンジルエステルの代わりに、（Ｒ）−２−アミノブタン酸 ベンジルエステルを用いて参考例４１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.6Hz),1.08(3H,t,J=7.2Hz),1.64-1.72(2H,m),2.47-2.55(1H,m),2.59-2.67(1H,m),3.25(1H,t,J=6.4Hz),5.17(2H,s),7.31-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):222(M+H)+.
【０１３４】
参考例４４
（Ｓ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル塩酸塩（1.00g）をオルトギ酸トリメチル（20.0mL）に溶解し、Ｎ，Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（798μL）を加え室温で5分間攪拌した。その後アセトアルデヒド（2.64mL）を加えて、室温で５分間撹拌した。その後、氷冷下に冷却して水素化ほう素ナトリウム（704mg）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液に水を加えた後、ジクロロメタンで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し減圧濃縮した。得られた残渣に氷冷下４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液を加え減圧濃縮した後、残渣にジエチルエーテルを加えて固化させた。析出物をろ取しジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥して表記化合物（1.04g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.22(3H,t,J=7.0Hz),1.48(3H,d,J=7.0Hz),2.88-3.09(2H,br.s),4.18-4.29(1H,m),5.28(2H,s),7.36-7.51(5H,m),9.09-9.23(1H,br.s),9.33-9.49(1H,br.s).
【０１３５】
参考例４５
（Ｒ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル塩酸塩の代わりに、（Ｒ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル塩酸塩を用いて参考例４４と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.22(3H,t,J=7.1Hz),1.48(3H,d,J=7.3Hz),2.89-3.08(2H,m),4.18-4.29(1H,m),5.28(2H,s),7.34-7.49(5H,m),9.02-9.40(2H,m).
【０１３６】
参考例４６
（Ｓ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル塩酸塩（1.12g）にメタノール（22mＬ）を加えた。氷冷下に冷却してアセトアルデヒド（906μL）を加えて、そのままの温度で３０分間撹拌した。氷冷下、水素化ほう素ナトリウム（245mg）を加えて、そのままの温度で４５分間撹拌した。反応液に水を加えた後、クロロホルムで抽出した。有機相は無水硫酸ナトリウムで乾燥し減圧濃縮した。得られた残渣に氷冷下４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液（60mL）を加えて、そのままの温度で１時間撹拌した。減圧濃縮した後、残渣にジエチルエーテルを加えて固化させた。析出物をろ取し、ジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥して表記化合物（1.33g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.3Hz),1.25-1.55(2H,m),1.47(3H,t,J=7.2Hz),2.05-2.25(2H,m),3.04
(2H,br.d),3.80(1H,br.s),5.20-5.35(2H,m),7.3-7.45(5H,m).
【０１３７】
参考例４７
（Ｒ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル塩酸塩の代わりに、（Ｒ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル塩酸塩を用いて参考例４６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.3Hz),1.25-1.55(2H,m),1.47(3H,t,J=7.2Hz),2.05-2.25(2H,m),3.04
(2H,br.d),3.80(1H,br.s),5.20-5.35(2H,m),7.3-7.45(5H,m).
【０１３８】
参考例４８
（Ｓ）−２−エチルアミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−アミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩（1.00g）とジイソプロピルエチルアミン（715uL）をメタノール（30mL）に溶解し、氷冷した。ここにアセトアルデヒド（2.3ｍL）を加え、氷冷下で１５分攪拌した後、水素化ホウ素ナトリウム（620mg）を加え、そのまま１時間攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルで抽出し、有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、得られた残渣を酢酸エチル（10ｍL）に溶解し、４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液を加えて再び減圧濃縮した。得られた固体をジエチルエーテルに懸濁し、これをろ取し、減圧下乾燥して白色粉末として表記化合物（1.01g）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):0.89(3H,d,J=7.3Hz),1.01(3H,d,J=7.0Hz),1.23(3H,t,J=7.0Hz),2.32-2.40(1H,m),2.98(2H,br.s),4.04(1H,br.s),5.25(1H,d,J=12.1Hz),5.32(1H,d,J=12.1Hz),7.35-7.46(5H,m),9.10(1H,br.s),9.37(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):236(M+H)+(フリー体).
【０１３９】
参考例４９
（Ｒ）−２−エチルアミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−アミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩の代わりに（Ｒ）−２−アミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例４７と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):0.89(3H,d,J=7.0Hz),1.01(3H,d,J=7.0Hz),1.23(3H,t,J=7.3Hz),2.34-2.40(1H,m),2.97(2H,br.s),4.03(1H,br.s),5.24(1H,d,J=12.1Hz),5.32(1H,d,J=12.1Hz),7.36-7.45(5H,m),9.12(1H,br.s),9.47(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):236(M+H)+(フリー体).
【０１４０】
参考例５０
（Ｓ）−２−（２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ)プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩（1.00g）をテトラヒドロフラン（20mL）に溶解し、炭酸カリウム（3.2g）を加え１時間攪拌した。反応液をろ過し減圧濃縮した後、アクリル酸t-ブチル（20mL）を加え６０℃で６２時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝1／1）により精製し、無色油状物質として表記化合物（832mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.31(3H,d,J=7.0Hz),1.32-1.51(9H,m),2.40(2H,t,J=6.6Hz),2.68-2.75(1H,m),2.82-2.91(1H,m),3.36-3.44(1H,m),5.17(2H,d,J=2.2Hz),7.28-7.41(5H,m).
ESI/MS(m/z):308(M+H)+
.
【０１４１】
参考例５１
（Ｒ）−２−（２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ)プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩の代わりに（Ｒ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５０と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.31(3H,d,J=7.0Hz),1.32-1.50(9H,m),2.40(2H,t,J=6.8Hz),2.66-2.75(1H,m),2.80-2.90(1H,m),3.35-3.42(1H,m),5.17(2H,d,J=2.2Hz),7.28-7.41(5H,m).
ESI/MS(m/z):308(M+H)+
.
【０１４２】
参考例５２
（３−ベンジルオキシカルボニルメチルエチルアミノ）プロパン酸 t−ブチルエステル
アクリル酸 ｔ−ブチル（1.46 mL）をテトラヒドロフラン（10mL）に溶解し、２Ｎエチルアミン／テトラヒドロフラン溶液（25mL）を室温で加えた後、還流下で一晩撹拌した。反応液を室温に冷却後、減圧濃縮し、減圧濃縮し、残渣の内（346.5mg）、トリエチルアミン（557μL）をテトラヒドロフラン（2mL）に溶解し、室温でブロモ酢酸 ベンジルエステル（377μL）を加えた後、１２時間撹拌した。水で希釈したのち、ジエチルエーテルで抽出した。飽和塩化アンモニウム水溶液で３回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下濃縮し、残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝1／5）により精製し、無色オイルとして表記化合物（559mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.03(3H,q,J=7.8Hz),1.43(9H,s),2.38(2H,t,J=7.3Hz),2.65-2.73(2H,m),2.92(2H,t,J=7.3Hz),3.41(2H,s),5.14(2H,s),7.32-7.37(5H,m).
【０１４３】
参考例５３
（３−ベンジルオキシカルボニル−ｉ−プロピルアミノ）プロパン酸 t−ブチルエステル
２Ｎエチルアミン／テトラヒドロフラン溶液の代わりにイソプロピルアミンを用いて参考例５２と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.98-1.02(6H,m),1.43(9H,s),2.37-2.41(2H,m),2.87(2H,t,J=7.3Hz),2.99-3.03(1H,m),3.35(2H,s),5.14(2H,s),7.30-7.38(5H,m).
【０１４４】
参考例５４
（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）酢酸 ベンジルエステル
エチルアミノ酢酸 ベンジルエステル 塩酸塩（157g）をテトラヒドロフラン（1.0L）に懸濁させ、トリエチルアミン（286mL）を室温にて加え、５分間撹拌した。ブロモ酢酸 t−ブチルエステル（120mL）を加え、室温で２２時間撹拌した。ブロモ酢酸 t−ブチルエステル（18.4mL）を追加し、室温で４２時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、不溶物をろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝6 / 1 − 5 / 1) により精製し、表記化合物（180g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.05-1.11(3H,m),1.45(9H,s),2.74-2.81(2H,m),3.45(2H,s),3.61(2H,s),5.15(2H,s),7.33-7.36(5H,m).
【０１４５】
参考例５５
（Ｓ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）ブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステル（200mg）、ブロモ酢酸 t−ブチルエステル（352mg）、炭酸カリウム（250mg）、ヨウ化ナトリウム（136mg）をＮ,Ｎ-ジメチルホルムアミド（4mＬ）へ溶解した。室温で１５時間撹拌した後、水、ジエチルエーテルで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）で精製し、無色オイルとして表記化合物（250mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.95(3H,t,J=7.6Hz),1.04(3H,t,J=7.2Hz),1.44(9H,s),1.61-1.82(2H,m),2.61-2.79(2H,m),3.22(1H,d,J=17.6Hz),3.40(1H,t,J=7.2Hz),3.45(1H,d,J=17.6Hz),5.13(2H,s),7.30-7.40(5H,m).
ESI/MS(m/z):336(M+H)+.
【０１４６】
参考例５６
（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）ブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステルの代わりに（Ｒ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステルを用いて参考例５５と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.95(3H,t,J=7.6Hz),1.04(3H,t,J=7.2Hz),1.44(9H,s),1.61-1.82(2H,m),2.61-2.79(2H,m),3.22(2H,d,J=17.2Hz),3.39(1H,t,J=7.6Hz),3.45(1H,d,J=17.2Hz),5.13(2H,s),7.30-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):336(M+H)+.
【０１４７】
参考例５７
（Ｓ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）−３−メチルブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステルの代わりに（S）−２−エチルアミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５５と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.84(3H,d,J=6.6Hz),1.01(3H,d,J=6.6Hz),1.03(3H,t,J=7.3Hz),1.43(9H,s),1.98(1H,dq,J=10.6,6.6Hz),2.59(1H,dt,J=12.8,7.0Hz),2.75(1H,dt,J=12.8,7.3Hz),2.96(1H,d,J=10.6Hz),3.12(1H,d,J=17.2Hz),3.46(1H,d,J=17.2Hz),5.13(2H,s),7.32-7.37(5H,m).
ESI/MS(m/z):350(M+H)+.
【０１４８】
参考例５８
（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）−３−メチルブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステルの代わりに（Ｒ）−２−エチルアミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５５と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.84(3H,d,J=6.2Hz),1.01(3H,d,J=7.0Hz),1.03(3H,t,J=7.3Hz),1.43(9H,s),1.99(1H,dq,J=10.6,6.6Hz),2.60(1H,dt,J=13.2,7.0Hz),2.75(1H,dt,J=13.2,7.3Hz),2.96(1H,d,J=10.6Hz),3.12(1H,d,J=17.2Hz),3.46(1H,d,J=17.2Hz),5.13(2H,s),7.31-7.37(5H,m).
ESI/MS(m/z):350(M+H)+.
【０１４９】
参考例５９
（Ｓ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩（400mg）にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（4mＬ）、ブロモ酢酸 t-ブチル（481μL）、トリエチルアミン（571μL）を加えて室温で２２時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝７／１）により精製し、表記化合物（169g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.06(3H,t,J=7.1Hz),1.33(3H,d,J=7.3Hz),1.44(9H,s),2.6-2.8(2H,m),3.28-3.48(2H,m),3.69-3.74(1H,m),5.13(2H,s),7.25-7.4(5H,m).
【０１５０】
参考例６０
（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩の代わりに（Ｒ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.06(3H,t,J=7.3Hz),1.33(3H,d,J=7.3Hz),1.44(9H,s),2.6-2.8(2H,m),3.27-3.48(2H,m),3.69-3.74(1H,m),5.13(2H,s),7.25-7.4(5H,m).
【０１５１】
参考例６１
（Ｓ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）ペンタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩の代わりに（Ｓ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.5Hz),1.04(3H,t,J=7.1Hz),1.25-1.55(2H,m),1.44(9H,s),1.55-1.75(2H,m),2.6-2.8(2H,m),3.20-3.48(2H,m),3.48(1H,t,J=7.3Hz),5.13(2H,s),7.3-7.4(5H,m).
【０１５２】
参考例６２
（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）ペンタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩の代わりに（Ｒ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.3Hz),1.04(3H,t,J=7.1Hz),1.25-1.5(2H,m),1.44(9H,s),1.55-1.75(2H,m),2.6-2.8(2H,m),3.20-3.48(2H,m),3.48(1H,t,J=7.5Hz),5.13(2H,s),7.25-7.4(5H,m).
【０１５３】
参考例６３
（Ｓ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルエチルエチルアミノ）プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−（２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ)プロパン酸 ベンジルエステル（782mg）をオルトギ酸トリメチル（15.6mL）に溶解し、アセトアルデヒド（1.43mL）、トリアセトキシ水素化ほう素ナトリウム（2.67g）を加え室温で２０時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え塩化メチレンで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）により精製し、無色油状物質として表記化合物（284mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.02(3H,t,J=7.1Hz),1.30(3H,d,J=7.3Hz),1.44(9H,s),2.34(2H,t,J=7.1Hz),2.49-2.58(1H,m),2.62-2.73(1H,m),2.76-2.85(1H,m),2.92-3.02(1H,m),3.58(1H,q,J=7.2Hz),5.14(2H,s),7.27-7.41(5H,m).
ESI/MS(m/z):336(M+H)+
.
【０１５４】
参考例６４
（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルエチルエチルアミノ）プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−（２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ)プロパン酸 ベンジルエステルの代わりに（Ｒ）−２−（２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ)プロパン酸 ベンジルエステルを用いて参考例６３と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.01(3H,t,J=7.1Hz),1.29(3H,d,J=7.0Hz),1.43(9H,s),2.33(2H,t,J=7.1Hz),2.47-2.58(1H,m),2.61-2.72(1H,m),2.75-2.85(1H,m),2.90-3.02(1H,m),3.57(1H,q,J=7.0Hz),5.12(2H,s),7.21-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):336(M+H)+
.
【０１５５】
参考例６５
（ベンジルオキシカルボニルメチルアミノ）酢酸 t−ブチルエステル
アミノ酢酸 ｔ−ブチルエステル（1.26g）、トリエチルアミン（2.09mＬ）をアセトニトリル（10mL）に溶解し、５分間撹拌し、室温でブロモ酢酸 ベンジルエステル（784μＬ）を加えた後、１７時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液で希釈したのち、酢酸エチルで抽出した。飽和塩化アンモニウム水溶液で３回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／３）により精製し、無色オイルとして表記化合物（984mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.87-0.89(6H,m),1.45(9H,s),1.64-1.75(1H,m),2.47(2H,d,J=7.3Hz),3.42(2H,s),3.58(2H,s),5.14(2H,s),7.30-7.36(5H,m).
【０１５６】
参考例６６
（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）酢酸
（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）酢酸 ベンジルエステル（167g）をエタノール（500mL）に溶解した後、アルゴン雰囲気下、10％−Pd/C（16.7g）を室温で加え、反応容器を水素置換し、室温で２４時間撹拌した。触媒をセライトパッドでろ過しエタノールで洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、白色固体として表記化合物（116g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.09-1.14(3H,m),1.47(9H,s),2.79-2.84(2H,m),3.36(2H,s),3.41(2H,s),9.35(1H,br.s).
【０１５７】
参考例６６の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表３に、データを表４に示した。
【化１９】
【０１５８】
【表３】
【０１５９】
【表４】
【０１６０】
参考例７９
（ｔ−ブトキシカルボニルメチル−ｉ−ブチルアミノ）酢酸
（ベンジルオキシカルボニルメチルアミノ）酢酸 t−ブチルエステル（140mg）、イソブチルアルデヒド（137μＬ）をエタノール（2mＬ）に溶解し、10％−Pd/C（14mg）を加え、水素雰囲気下、５０℃で４時間撹拌した。触媒をセライトパッドでろ過しエタノールで洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、白色固体として表記化合物（89mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.91-0.96(6H,m),1.48(9H,s),1.67-1.79(1H,m),2.47(2H,d,J=7.3Hz),3.35(4H,s).
【０１６１】
参考例８０
（ｔ−ブトキシカルボニルプロピルアミノ）酢酸
アルゴン雰囲気下、水素化ナトリウム（365mg）をテトラヒドロフラン（5mL）に懸濁し、氷冷した。そこに、ｔ−ブトキシカルボニルアミノ酢酸（400mg）、１−ヨードプロパン（892μL）のテトラヒドロフラン（3mL）溶液を滴下した。反応液を室温に戻し、９６時間撹拌した。反応液に更に水素化ナトリウム（91.2mg）、１−ヨードプロパン（223μL）を加え、４０℃で６７時間攪拌した。反応液に水、酢酸エチルを加えて抽出し、水層を１０％クエン酸水溶液でｐＨ＝２−３にした。酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、油状物質として表記化合物（210mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.89(3H,br.t,J=7.3Hz),1.44-1.57(11H,m),3.21-3.28(2H,m),3.95(2H,d,J=21.6Hz).
ESI/MS(m/z):216(M-H)-
.
【０１６２】
参考例８１
（ｔ−ブトキシカルボニルペンチルアミノ）酢酸
１−ヨードプロパンの代わりに１−ヨードペンタンを用いて参考例８１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,br.t,J=6.0Hz),1.22-1.53(15H,m),3.22-3.27(2H,m),3.94(2H,d,J=32.6Hz),9.89(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):244(M-H)-
.
【０１６３】
参考例８２
（−）−（２−［（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）カルバミン酸 ｔ−ブチルエステル
５-（（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロピロリジン−２−イル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（35.0mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（24.0mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール １水和物（20.0mg）とＮ−ｔ−ＢＯＣ−グリシン（23.0mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（0.50ml）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（13.0μL）を加え、室温で一晩撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（54.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):487(M+H)+,485(M-H)-.
【０１６４】
参考例８２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表５、表６に示した。
【化２０】
【０１６５】
【表５】
【０１６６】
【表６】
【０１６７】
参考例８２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表７に、データを表８、表９に示した。
【化２１】
【０１６８】
【表７】
【０１６９】
【表８】
【０１７０】
【表９】
【０１７１】
参考例１３３
５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル)アミド（467mg）を塩化メチレン（5.0mL）に溶解し、０℃でジ−ｔ−ブチルピリジン（663μL）とクロロアセチルクロライド（239μL）を加え、室温で４時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（536mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.97-2.32(4H,m),2.71(3H,s),3.60-3.70(1H,m),3.75-3.78(1H,m),3.83-4.00(1H,m),4.8(2H,s),5.39(1H,d,J=5.5Hz),6.95(1H,s),7.15(1H,s).
ESI/MS(m/z):388(M+H)+,386(M-H)-.
【０１７２】
参考例１３４
５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル)アミドの代わりに、２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル)アミドを用いて参考例５７と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.97-2.42(4H,m),2.71(3H,s),3.60-3.68(1H,m),3.75-3.83(1H,m),3.88-4.05(1H,m),4.12-4.19(2H,m),5.37-5.41(1H,m),7.20(1H,s),7.32(1H,s).
ESI/MS(m/z):404(M+H)+,402(M-H)-.
【０１７３】
参考例１３５
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（２−アミノアセチル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−（２−［（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）カルバミン酸 ｔ−ブチルエステル（54.0mg）を塩化メチレン（0.50mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（0.500mL）を加え、室温で１５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝１５／１−５／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（31.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):387(M+H)+,385(M-H)-.
【０１７４】
参考例１３５の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表１０、表１１に示した。
【化２２】
【０１７５】
【表１０】
【０１７６】
【表１１】
【０１７７】
参考例１６２
（−）−（２−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ）酢酸 t−ブチルエステル
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（２−アミノアセチル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（31.0mg）をテトラヒドロフラン（1.0mL）に溶解し、ブロモ酢酸 t−ブチル（16.0mg）とトリエチルアミン（8.10mg）を加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝３０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（19.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):501(M+H)+,499(M-H)-.
【０１７８】
参考例１６２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１２に、データを表１３に示した。
【化２３】
【０１７９】
【表１２】
【０１８０】
【表１３】
【０１８１】
参考例１７６
（−）−３−［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）メチルアミノ］プロピオン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−メチル−５−［１−（２−メチルアミノアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（425mg）を１，４−ジオキサン（10mL）に溶解し、アクリル酸ブチル（486μL）とトリトンＢ（19.0μL）を室温で加えた後、６０℃で一晩撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝２０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（238mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.43(9H,d,J=8.1Hz),1.96-2.01(2H,m),2.09-2.38(4H,m),2.45(2H,t,J=7.0Hz),2.65-2.87(2H,m),3.11-3.29(2H,m),3.46(3H,d,J=7.3Hz),3.53-3.60(1H,m),3.71-3.88(1H,m),5.47(1H,d,J=7.3Hz),6.83-6.91(1H,m),7.23-7.28(1H,m),11.23(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):511(M+H)+,509(M-H)-.
【０１８２】
参考例１７６の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１４に、データを表１５に示した。
【化２４】
【０１８３】
【表１４】
【０１８４】
【表１５】
【０１８５】
参考例１８０
（２−［２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ）酢酸
ｔ−ブチルエステル
グリシンｔ−ブチルエステル 塩酸塩（210mg）とジイソプロピルエチルアミン（257μL）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（2mL）に溶解し、室温で５分間撹拌した。５０℃にて５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド（101mg）をゆっくりと加えて、５０℃で４時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝１０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（106mg）を得た。
ESI/MS(m/z):499(M+H)+,497(M-H)-.
【０１８６】
参考例１８０の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１６に、データを表１７に示した。
【化２５】
【０１８７】
【表１６】
【０１８８】
【表１７】
【０１８９】
参考例１８３
５−［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステル
２−メチル−５−［１−（２−メチルアミノアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（60.6mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（1.0mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（81.5μL）と５−ブロモ吉草酸メチル（27.0μL）を室温で加えた後、６０℃で一晩撹拌した。反応液を室温に冷却後、水を加え、酢酸エチルで抽出、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール＝９／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（63.0mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.28-1.62(6H,m),2.01-2.49(9H,m),2.67-2.71(3H,m),2.76-2.99(1H,m),3.56-3.85(5H,m),4.25-4.57(1H,m),5.38(1H,d,J=6.9Hz),7.12(1H,t,J=2.3Hz),7.26-7.35(1H,m).
ESI/MS(m/z):497(M+H)+,495(M-H)-.
【０１９０】
参考例１８３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表１８に示した。
【化２６】
【０１９１】
【表１８】
【０１９２】
実施例１０
（−）−２−メチル−５−［１−（２−ウレイドアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（270mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（334mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール １水和物（264mg）とヒダントイン酸（206mg）をテトラヒドロフラン（5.40mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（360μL）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝９／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（287mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.94-2.48(4H,m),2.68-2.70(3H,m),3.55-3.84(2H,m),3.89-4.07(2H,m),5.29-5.37(1H,m),7.11-7.12(1H,m),7.32-7.36(1H,m).
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１９３】
実施例１１
（−）−２−メチル−５−［１−（２−ウレイドアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミドの代わりに（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミドを用いて実施例１０と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.94-2.46(4H,m),2.70-2.72(3H,m),3.54-3.84(2H,m),3.84-4.06(2H,m),5.27-5.37(1H,m),7.34-7.35(1H,m),7.39(1H,s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１９４】
実施例１２
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−１−（２−メタンスルホニルアミノアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
５−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロピロリジン−２−イル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（297mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（345mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール１水和物（276mg）とＮ−メタンスルホニルグリシン（276mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（3.0mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（308μL）を加え、室温で５．５時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、酢酸エチルにて再結晶を行うことにより、白色粉末として表記化合物（291mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.10-2.18(1H,m),2.59(3H,s),3.00(3H,s),3.80-4.02(4H,m),5.26-5.47(2H,m),7.04-7.07(1H,m),7.56(1H,s),9.70(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):465(M+H)+,463(M-H)-.
【０１９５】
実施例１２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１９にデータを表２０に示した。
【化２７】
【０１９６】
【表１９】
【０１９７】
【表２０】
【０１９８】
実施例２２
（−）−２−メチル−５−［１−（（Ｓ）−２−ウレイドプロピオニル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−５−［１−（（Ｓ）−２−アミノプロピオニル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（60.0mg）を水（1.8mL）に溶解し、シアン酸カリウム（62.3mg）と酢酸（79.9μL）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（63.5mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ:1.24-1.40(3H,m),1.85-2.46(4H,m),2.61-2.74(3H,m),3.64-3.92(2H,m),4.45-4.60(1H,m),5.24-5.41(1H,m),7.11-7.12(1H,m),7.24-7.27(1H,s).
ESI/MS(m/z):426(M+H)+,424(M-H)-.
【０１９９】
実施例２３
（−）−５−［（２Ｓ,４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−アセチルアミノプロピオニル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−アミノプロピオニル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（31.8mg）を塩化メチレン（1.0mL）に溶解し、アセチルクロライド（11.3μL）とピリジン（19.3μL）を加えた後、室温で４５分間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（27.8mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.29-1.33(3H,m),2.67(3H,d,J=6.2Hz),2.74-2.79(1H,m),3.85-3.98(1H,m),4.27-4.35(1H,m),4.58-4.66(2H,m),5.31-5.49(2H,m),7.13(1H,d,J=2.5Hz),7.32(1H,s).
ESI/MS(m/z):443(M+H)+,441(M-H)-.
【０２００】
実施例２３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表２１にデータを表２２に示した。
【化２８】
【０２０１】
【表２１】
【０２０２】
【表２２】
【０２０３】
実施例３３
（−）−（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチルアミノ）酢酸
トリフルオロ酢酸塩
（−）−（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチルアミノ）酢酸 ｔ−ブチルエステル（19.0mg）を塩化メチレン（0.25mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（0.25mL）を加え、室温で一晩撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣を水（1.0mL）に溶解後、凍結乾燥することにより、白色粉末として表記化合物（13.0mg）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):2.18-2.42(2H,m),2.64-2.83(4H,m),3.75-3.97(4H,m),4.13-4.23(1H,m),5.30-5.61(2H,m),7.34-7.39(1H,m),7.63(1H,s),9.25(1H,br.s),12.21(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):445(M+H)+,443(M-H)-.
【０２０４】
実施例３３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表２３にデータを表２４に示した。
【化２９】
【０２０５】
【表２３】
【０２０６】
【表２４】
【０２０７】
実施例３８
［（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］酢酸 塩酸塩
［（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］酢酸 ｔ−ブチルエステル（59.0mg）を塩化メチレン（3.0mL）に溶解し、４Ｎ−塩酸／１，４−ジオキサン溶液（3.42mL）を加え、室温で１８時間撹拌した。反応液にジエチルエーテルを加え、析出した結晶をろ取し、ジエチルエーテルで洗浄することにより、白色粉末として表記化合物（52.0mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):2.27-2.43(1H,m),2.68(3H,s),2.75-2.84(1H,m),2.87-3.12(4H,m),3.43-3.52(1H,m),3.73-3.94(2H,m),4.06-4.21(2H,m),5.28-5.51(2H,m),7.16(1H,s),7.39(1H,s).
ESI/MS(m/z):459(M+H)+,457(M-H)-.
【０２０８】
実施例３８の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表２５にデータを表２６〜表２８に示した。
【化３０】
【０２０９】
【表２５】
【０２１０】
【表２６】
【０２１１】
【表２７】
【０２１２】
【表２８】
【０２１３】
実施例７８
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 塩酸塩
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステル（63.0mg）をメタノール（1.0mL）に溶解し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（500μL）を加え、室温で５時間撹拌した。反応液に４Ｎ塩酸／１，４−ジオキサン溶液（500μL）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮後、得られた残渣に塩化メチレンを加え、不溶物をろ去し、ろ液を減圧濃縮することにより、淡黄白色粉末として表記化合物（57.6mg）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ:1.20-1.22(2H,m),1.49-1.69(4H,m),1.91-2.36(6H,m),2.63-2.83(6H,m),3.02-3.18(1H,m),3.56-3.70(1H,m),4.17-4.36(2H,m),5.28(1H,d,J=6.6Hz),7.37(1H,br.s),7.54(1H,br.s),9.62(1H,br.s),12.21(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):483(M+H)+,481(M-H)-.
【０２１４】
実施例７９
５−［（２−｛２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 塩酸塩
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステルの代わりに、５−［（２−｛２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステルを用いて実施例５２と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.60-1.81(4H,m),2.02-2.45(6H,m),2.70(3H,d,J=2.9Hz),2.78(3H,d,J=2.9Hz),3.11-3.25(1H,m),3.58-3.82(2H,m),4.20-4.35(1H,m),5.39(1H,d,J=7.0Hz),7.40-7.48(2H,m).
ESI/MS(m/z):499(M+H)+,497(M-H)-.
【０２１５】
実施例８０
［（２−［（２Ｓ，４Ｒ）−4−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール-2-イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）ペンチルアミノ］酢酸
（２−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）ペンチルアミノ］酢酸
ｔ−ブチルエステル（44.6mg）を氷冷下で撹拌中、４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液（391μL）を加えて室温で一晩撹拌した。さらに、４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液（391μL）を加えて室温で27時間撹拌した。反応液にジエチルエーテル（10mL）を加えて30分間撹拌し析出した結晶をろ取し、ジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥した。固体に水、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ＝１０とし、酢酸エチルで抽出した。水層に１Ｎ塩酸を加えてｐＨ＝５とし、減圧下濃縮した。残渣にクロロホルムを加え、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、白色粉末として表記化合物（9.2mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):0.85-0.89(3H,m),1.22-1.30(5H,m),1.49-1.62(2H,m),2.28-2.38(1H,m),2.66-2.79(4H,m),2.97-3.12(2H,m),3.48-3.66(2H,m),3.82-4.27(3H,m),5.26-5.52(2H,m),7.12(1H,br.s),7.41(1H,d,J=16.8Hz).
ESI/MS(m/z):515(M+H)+,513(M-H)-.
【０２１６】
実施例８１
［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）ペンチルアミノ］酢酸
（２−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）ペンチルアミノ］酢酸
ｔ−ブチルエステルの代わりに、［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）ペンチルアミノ］酢酸 ｔ−ブチルエステルを用いて実施例８０と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):0.86-0.90(3H,m),1.29-1.33(4H,m),1.52-1.70(2H,m),2.02-2.44(4H,m),2.69(3H,br.d,J=16.8Hz),3.04-3.18(2H,m),3.57-3.78(4H,m),4.15-4.21(2H,m),5.37(1H,d,J=7.7Hz),7.12(1H,br.s),7.31(1H,br.d,J=7.3Hz).
ESI/MS(m/z):497(M+H)+,495(M-H)-.
【０２１７】
薬理試験例１
(1)ヒト型グルコキナーゼの発現・精製
pQE-80発現ベクターのEcoRI,HindIIIサイトにヒト型GKのN末欠損（1-15アミノ酸欠損）コード領域に同制限酵素サイトを付加したDNA断片を導入した。このプラスミドを用いてE.coliを形質転換し、ヒト型グルコキナーゼを発現させ、次のように精製を行った。
200mlのE.coli培養液から回収した菌体を回収し、20mlのExtraction buffer A(20mM HEPES、pH8.0、1mM MgCl2、150mM NaCl、2mMメルカプトエタノール、0.25mg/mlリゾチーム、50mg/mlアジ化ナトリウム)に懸濁し室温で5分間、静置した。20mlのExtraction buffer B(1.5M NaCl、100mM CaCl2、100mM MgCl2、0.02mg/ml DNA分解酵素1、プロテアーゼ阻害剤錠剤(Complete(登録商標)1697498):バッファー20mlあたり一錠)を加え、室温で5分間、静置した。そして、抽出液を15,000gで30分間、４℃で遠心し、上清を大腸菌抽出液とした。大腸菌抽出液を0.45μmフィルターでろ過し、20mMイミダゾールを含むバッファー（20mM HEPES pH8.0、0.5M NaCl）で平衡化したNi-NTA agarose 2mL bedにアプライした。約10mlの洗浄バッファーで洗浄し、40から500mMのイミダゾールを含むバッファー（20mM HEPES pH8.0、0.5M NaCl）にて段階的に溶出した。各カラムフラクションをSDSゲル電気泳動を用いて分析し、hGK(MW:52KDa)を含んだフラクションを濃縮した。次に濃縮サンプルをSephacryl S-200HR(11/60)ゲルろ過カラムに通し、バッファーB(20mM HEPES、pH8.0、1mM MgCl2、150mM NaCl、1mM DTT)にて溶出した。溶出フラクションをSDSゲル電気泳動にて分析し、hGKを含んだフラクションを濃縮した。最終的に50％グリセロールを添加して‐20℃にて保存した。
【０２１８】
(2)グルコキナーゼ活性化の測定
UV透過性の96ウェルプレートにGK assay mix（25mM Hepes buffer(pH7.1)、25mM KCl、2mM MgCl2、1mM NADP、1mM dithiotheitol、2unit/mL G6PDH、5mM D-glucose、GK適量）を178μl添加した。DMSOに溶解した試験化合物を2μl添加した後、室温で10分間静置し、その後、20mM ATPを20μl添加して反応をスタートさせた。340nmの吸光度をSpectra Max Plusで5分間、30秒間隔、室温で測定し、最初の3分間の反応で化合物評価を行った。試験化合物の最終濃度１０μＭの時の活性を、それを含まないウェルと比較して算出し表２９に示した。その結果、今回試験を行った本発明化合物は、試験化合物を含まないウェルと比較して１０μＭで６００％以上のヒト型GK活性化作用を持つことがわかった。
【０２１９】
【表２９】
【産業上の利用可能性】
【０２２０】
本発明化合物は、グルコキナーゼ活性化作用を有していることから、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規チオフェンカルボキサミド誘導体及びその医薬用途に関する。当該化合物は、グルコキナーゼ活性化剤として様々な医薬用途を有する。
【背景技術】
【０００２】
グルコキナーゼ（ATP:D-glucose 6-phosphotransferae, EC2.7.1.1.）は、哺乳類に存在する４種のヘキソキナーゼのうちの１つ（ヘキソキナーゼIV）である。ヘキソキナーゼはグルコース代謝の最初の段階を触媒する酵素であり、グルコースをグルコース‐６リン酸へ変換する。グルコキナーゼは主に肝臓と膵臓β細胞に発現しており、グルコース代謝の律速酵素として働き、全身のグルコースホメオスタシスに重要な役割を果たしている。
【０００３】
グルコキナーゼはグルコースに対し低い親和性を持ち、生理的な血糖値に近いKm値（8-15mM）をもっている。また、グルコキナーゼは生理的な濃度のグルコース‐６リン酸による阻害を受けない。それゆえ、食事によって正常血糖値（5mM）が10〜15mMに上昇するとグルコキナーゼを介したグルコース代謝が増大する。これらのことから、グルコキナーゼは肝臓や膵臓β細胞においてグルコースセンサーとして働くと考えられた。
【０００４】
動物におけるグルコキナーゼの役割は遺伝子改変動物を用いた研究によって確認された。グルコキナーゼを発現しないマウスは生後まもなく重篤な糖尿病によって死亡し、一方、グルコキナーゼを過剰発現させたマウスは耐糖能を改善することが報告された。これらの研究によって、グルコキナーゼは実際に全身のグルコースホメオスタシスに重要な役割があることが確認された。
【０００５】
若年発症型の成人発症型糖尿病（MODY-2）はグルコキナーゼ遺伝子の機能喪失の突然変異によって引き起こされ、グルコキナーゼ活性の低下が血糖上昇の原因となっている。さらに、グルコキナーゼの活性を上昇させる突然変異を持つ家系も見つかっており、これらの家系では血漿インスリンレベルの上昇によって空腹時低血糖状態を示す。
【０００６】
このように、グルコキナーゼはグルコースセンサーとして働き、血糖調整に重要な役割を果たしており、グルコースセンサーシステムを利用した血糖コントロールは多くのII型糖尿病患者で有用な治療となると考えられる。グルコキナーゼを活性化する物質は、グルコースセンサーの働きを高めることによって、膵臓β細胞ではインスリン分泌を促進する作用、肝細胞では糖取り込みを促進し、糖放出を抑制する作用が期待できるので、II型糖尿病の予防又は治療剤として有用であると考えられる。
【０００７】
これまでにグルコキナーゼ活性化作用を有する化合物は多数報告されている（非特許文献１）。二つの５員環芳香族複素環がアミド結合した化合物としては、特許文献１にピロール環を有する化合物が、特許文献２にインドール環を有する化合物が報告されているが、これらの化合物は、本願発明のチオフェンカルボキサミド誘導体とは構造が異なるものである。
【０００８】
一方、チオフェンカルボキサミド誘導体としては、エナミン社（ウクライナ）より２、５−ジメチルチオフェン−３−カルボン酸 チアゾール−２−イルアミドが試薬として販売されているが、生物活性等に関する報告はなく、チオフェン環にピロリジン環を有する本願発明の化合物とは構造が異なるものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開2008/149382号
【特許文献２】国際公開2004/031179号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Expert Opin. Ther. Patents 18,759-768, 2008
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、グルコキナーゼ活性化作用を有する化合物を提供すること、及び、グルコキナーゼ活性化作用に基づく、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、以上の点に鑑み、前記の課題を解決するための手段として、新たな基本構造を有する化合物が有効であると考え、新規グルコキナーゼ活性化剤の創製を目指して鋭意研究を重ねた。その結果、下記一般式(I)で表される化合物及びその塩が、非常に優れたグルコキナーゼ活性化作用を有し、更に溶解度等の医薬品としての物性面においても優れた性質を有しており、種々の副作用（ｈERGやCYPに対する作用）と薬効の乖離に優れた安全でかつ有用な医薬となることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明によれば、下記一般式(I):
【化１】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩が提供され、これらの化合物は、本明細書中で以後「本発明化合物」と呼ぶ。以下に本発明化合物の様々な実施形態を列挙する。
【００１４】
本発明の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子、C-H、C-F、又はC-Clであり、R1が水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基である化合物である。
【００１５】
本発明の別の一実施形態は、前記一般式(I)において、XがC-H、C-F、又はC-Clであり、R1が水素原子である化合物である。
【００１６】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子であり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基である化合物である。
【００１７】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2である化合物である。
【００１８】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基である化合物である。
【００１９】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である化合物である。
【００２０】
本発明の更に別の一実施形態は、前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である化合物である。
【００２１】
本発明はまた、前記一般式(I)で表される本発明化合物の中間体である、下記一般式(II)で表される化合物、下記一般式(III)で表される化合物、及び一般式(IV)で表される化合物をも提供する。
【化２】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する］
【化３】
［式中、R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R8は水素原子又はアミノ基の保護基を意味する］
【化４】
［式中、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R9は臭素原子又はヨウ素原子を意味する］
【００２２】
本発明は更に、前記本発明化合物を有効成分として含有する医薬組成物をも提供する。即ち、本発明の医薬組成物は、糖尿病の予防又は治療のために使用される。
【発明の効果】
【００２３】
本発明化合物は、優れたグルコキナーゼ活性化作用を有しており、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。また、本発明は、種々の副作用（ｈERGやCYPに対する作用）と薬効の乖離に優れた安全でかつ有用な医薬を提供する。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
以下に、本発明化合物について説明する。
【化５】
【００２５】
上記一般式（I）で表される本発明化合物において、Xは窒素原子又はCR6、R6は水素原子又はハロゲン原子であり、R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基である。これらの中で、Xは窒素原子、C-F、又はC-Clが好ましく、R1は水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基が好ましい。中でも、XがC-F又はC-Clであるときは、R1は水素原子が好ましく、Xが窒素原子であるときは、R1は水素原子又はC1-C3アルキル基が好ましい。
【００２６】
R2は水素原子又はフッ素原子である。また、R3は水素原子又はC1-C6アルキル基であるが、水素原子又はC1-C3アルキル基が好ましい。
【００２７】
R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2である。これらの中で、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2であることが好ましく、中でも、他方はC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基が最適である。
【００２８】
特に好ましい本発明化合物は、一般式（I）において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である。
【００２９】
別の特に好ましい本発明化合物は、一般式（I）において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R2が水素原子又はフッ素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である。
【００３０】
尚、本発明化合物において、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を意味する。
【００３１】
「C1-C6アルキル基」とは、１〜６個の炭素原子から成る直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｉ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｉ−ブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｉ−ペンチル基、ｎｅｏ−ペンチル基、ｔ−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｉ−ヘキシル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、１，２−ジメチルプロピル基等が挙げられる。
【００３２】
「C1-C6アルコキシ基」とは、−Ｏ−（C1-C6アルキル）基を意味し、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、ｉ−プロポキシ基、ｎ−ブトキシ基、ｉ−ブトキシ基、ｓ−ブトキシ基、ｔ−ブトキシ基、ｎ−ペントキシ基、ｉ−ペントキシ基、ｎｅｏ−ペントキシ基、ｔ−ペントキシ基、１−メチルブトキシ基、２−メチルブトキシ基、１，２−ジメチルプロポキシ基、ｎ−ヘキシルオキシ基等が挙げられる。
【００３３】
「C1-C6アルキルチオ基」とは、−Ｓ−（C1-C6アルキル）基を意味する。また、「C1-C6アルキレンカルボン酸」とは、−（C1-C6アルキレン）−ＣＯＯＨを意味し、「C1-C6アルキレン」とは、１〜６個の炭素原子から成る直鎖状のアルキレンを意味し、例えば、メチレン、エチレン、ｎ−プロピレン、ｎ−ブチレン等が挙げられる。
【００３４】
「C1-C6アルキルスルホニル基」とは、−ＳＯ２−（C1-C6アルキル）基を意味する。また、「C1-C6アルキルカルボニル基」とは、−ＣＯ−（C1-C6アルキル）基を意味する。
【００３５】
次に、本発明化合物の中間体である化合物について説明する。
【化６】
上記一般式（II）で表される中間体において、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子である。R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基である。これらの中で、Xは窒素原子、C-F、又はC-Clが好ましく、R1は水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基が好ましい。中でも、XがC-F又はC-Clであるときは、R1は水素原子が好ましく、Xが窒素原子であるときは、R1は水素原子又はC1-C3アルキル基が好ましい。R2は水素原子又はフッ素原子である。
【００３６】
更に別の本発明化合物の中間体である化合物について説明する。
【化７】
上記一般式（II）で表される中間体において、R2は水素原子又はフッ素原子であり、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基であり、R8は水素原子又はアミノ基の保護基である。
【００３７】
更に別の本発明化合物の中間体である化合物について説明する。
【化８】
上記一般式（III）で表される中間体において、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基であり、R9は臭素原子又はヨウ素原子である。
【００３８】
「カルボキシル基の保護基」とは、通常、有機合成上カルボキシル基の保護基として知られている基を意味し、例えば、(1)メチル基、エチル基、ｉ−プロピル基、ｔ−ブチル基のような直鎖状若しくは分岐鎖状の炭素数１〜４の低級アルキル基、(2)２−ヨウ化エチル基、２，２，２−トリクロロエチル基のようなハロゲノ低級アルキル基、(3)メトキシメチル基、エトキシメチル基、ｉ−ブトキシメチル基のような低級アルコキシメチル基、(4)ブチリルオキシメチル基、ピバロイルオキシメチル基のような低級脂肪族アシルオキシメチル基、(5)１−メトキシカルボニルオキシエチル基、１−エトキシカルボニルオキシエチル基のような１−低級アルコキシカルボニルオキシエチル基、(6)ベンジル、ｐ-メトキシベンジル基、ｏ−ニトロベンジル基、ｐ−ニトロベンジル基のようなアラルキル基、(7)ベンズヒドリル基、(8)フタリジル基等が挙げられる。
【００３９】
「アミノ基の保護基」とは、通常、有機合成上アミノ基の保護基として知られている基を意味し、例えば、(1)ホルミル基、アセチル基、クロロアセチル基、ジクロロアセチル基、プロピオニル基、フェニルアセチル基、フェノキシアセチル基、チエニルアセチル基などの置換または非置換の低級アルカノイル基、(2)ベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボニル基、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル基、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基などの置換または非置換の低級アルコキシカルボニル基、(3)メチル基、ｔ−ブチル基、２，２，２−トリクロロエチル基、トリチル基、ｐ−メトキシベンジル基、ｐ−ニトロベンジル基、ジフェニルメチル基、ピバロイルオキシメチル基などの置換低級アルキル基、(4)トリメチルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基などの置換シリル基、(5)ベンジリデン基、サリチリデン基、ｐ−ニトロベンジリデン基、ｍ−クロルベンジリデン基、３，５−ジ（ｔ−ブチル）−４−ヒドロキシベンジリデン基、３，５−ジ（ｔ−ブチル）ベンジリデン基などの置換または非置換のベンジリデン基等が挙げられる。
【００４０】
「薬理学的に許容される塩」とは、一般式(I)で表される化合物の生物学的有効性及び特性を保持し、生物学的又はその他の面においても不都合ではない塩を意味する。このような薬理学的に許容される塩は本発明の範囲に含まれる。薬理学的に許容される塩としては、無機酸付加塩（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等との塩）、有機酸付加塩（例えば、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酢酸、シュウ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ酸との塩）、アミノ酸との塩（例えば、リジン、アルギニン等との塩）、アルカリ金属付加塩（例えば、ナトリウム、カリウム等との塩）、アルカリ土類金属付加塩（例えば、カルシウム、マグネシウム等との塩）、有機アミン付加塩（例えば、ジエチルアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン等との塩）等が挙げられる。これらの付加塩の形成反応は、常法に従い行うことができる。
【００４１】
本発明化合物には、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により前記一般式(I)に変換される化合物を意味するプロドラッグも含まれ、種々のプロドラッグが当該技術分野で既知である。例えば、一般式(I)で表される化合物がカルボン酸基を有する場合のプロドラッグとしては、当該カルボン酸基がエステル化又はアミド化された化合物（例えば、エチルエステル化、カルボキシメチルエステル化、ピバロイルオキシメチル化、又はメチルアミド化された化合物）等が挙げられる。一般式(I)で表される化合物がアミノ基を有する場合のプロドラッグとしては、当該アミノ基がアシル化、アルキル化、又はリン酸化された化合物（例えば、エイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、アセトキシメチル化、又はｔ−ブチル化された化合物）等が挙げられる。
【００４２】
また、本発明化合物において、１つ又はそれ以上の不斉炭素が存在する場合、本発明は不斉炭素に基づく異性体及びそれらの任意の組合せの化合物のいずれも包含し、幾何異性又は互変異性が存在する場合、本発明はそれらの幾何異性体又は互変異性体のいずれも包含する。さらに、本発明化合物には、水やエタノール等の医薬品として許容される溶媒との溶媒和物も含まれる。
【００４３】
本発明化合物である一般式(I)で表される化合物は、以下の反応工程式Ｉ〜ＶＩに示す方法、実施例に記載した方法、又は公知の方法を組み合わせて製造することができる。
［反応工程式Ｉ］
【化９】
［式中、R10はアミノ基の保護基であり、R11はC1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2であり、その他の記号は前記一般式と同義である］
【００４４】
［工程Ｉ−１］
一般式(IIIa)で表される化合物を適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン等）中、塩素化剤（例えば、塩化チオニル、塩化オキサリル）を用いて酸塩化物とした後、一般式(V)で表される化合物と適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン等）を用いて反応させることによって、一般式（VI）で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。また、一般式(IIIa)で表される化合物と一般式(V)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによっても一般式(VI)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(V)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００４５】
［工程Ｉ−２］
「Protecting Groups in Organic Synthesis,3rd
Edition,Wiley(1999)」に記載の方法を参考に、一般式(VI)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(II)で表される化合物が得られる。
【００４６】
［工程Ｉ−３］
一般式(II)で表される化合物と一般式(VII)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(Ia)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(VII)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００４７】
［反応工程式ＩＩ］
【化１０】
［式中、R12はC1-C6アルキルスルホニル基又はC1-C6アルキルカルボニル基であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００４８】
［工程ＩＩ−１］
一般式(II)で表される化合物と一般式(VIII)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(IX)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(VIII)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００４９】
［工程ＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(IX)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(X)で表される化合物が得られる。
【００５０】
［工程ＩＩ−３］
一般式(X)で表される化合物と、一般式(XI)で表される化合物を適当な溶媒（例えば塩化メチレン、トルエン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、ピリジン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン等）を用いて反応させることによって、一般式(Ib)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XI)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５１】
［反応工程式ＩＩＩ］
【化１１】
［式中、R13は水素原子又はC1-C6アルキル基であり、R14はカルボキシル基の保護基であり、ｎは１〜６の整数であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００５２】
［工程ＩＩＩ−１］
一般式(II)で表される化合物と一般式(XII)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(XIII)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XII)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５３】
［工程ＩＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XIII)で表される化合物の保護基R10を除去することによって、一般式(XIV)で表される化合物が得られる。
【００５４】
［工程ＩＩＩ−３］
一般式(XIV)で表される化合物と一般式(XV)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(XVI)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XV)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５５】
［工程ＩＩＩ−４］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XVI)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ic)で表される化合物が得られる。
【００５６】
［反応工程式ＩＶ］
【化１２】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００５７】
［工程ＩＶ−１］
一般式(XIV)で表される化合物と一般式(XVII)で表される化合物を適当な溶媒（例えば、エタノール、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（トリエチルアミン、トリトンＢ、水酸化ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(XVIII)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XVII)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００５８】
［工程ＩＶ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XVIII)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Id)で表される化合物が得られる。
【００５９】
［反応工程式Ｖ］
【化１３】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００６０】
［工程Ｖ−１］
一般式(II)で表される化合物と一般式(XIX)で表される化合物と適当な溶媒（例えばトルエン、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン、ジ−ｔ−ブチルピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(XX)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XIX)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００６１】
［工程Ｖ−２］
一般式(XX)で表される化合物と一般式(XXI)で表される化合物を適当な溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等）を用いて反応させることによって、一般式(XXII)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XXI)で表される化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を用いて製造することができる。
【００６２】
［工程Ｖ−３］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XXII)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ie)で表される化合物が得られる。
【００６３】
［反応工程式ＶＩ］
【化１４】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００６４】
［工程ＶＩ−１］
一般式(II)で表される化合物と一般式(XXIII)で表される化合物を適当な溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、添加剤（ジイソプロピルエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール等）の存在下又は非存在下、縮合剤（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド、ジシクロヘキシルカルボジイミド等）を用いて反応させることによって、一般式(XVI)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は３０分間から４８時間である。尚、一般式(XXIII)で表される化合物は、公知の方法、又は参考例６６〜８１に記載した方法を用いて製造することができる。
【００６５】
［工程ＶＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XVI)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(Ic)で表される化合物が得られる。
【００６６】
前記一般式(I)で表される本発明化合物の中間体である一般式(III)及び一般式(IV)で表される化合物は、以下の反応工程式VII〜IXに示す方法、実施例１〜９に記載した方法、又は公知の方法を組み合わせて製造することが出来る。
［反応工程式ＶＩＩ］
【化１５】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００６７】
［工程ＶＩＩ−１］
一般式(XXIV)で表される化合物とハロゲン化メチルを適当な溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、アミン試薬（ジイソプロピルアミン、ヘキサメチルホスホロアミド、Ｎ，Ｎ，Ｎ，Ｎ−テトラメチルエチレンジアミンなど）存在下、塩基（ｎ−ブチルリチウム等）を用いて反応させることによって、一般式(XXV)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から室温、反応時間は１０分間から２４時間である。
【００６８】
［工程ＶＩＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XXV)で表される化合物の保護基R14を導入することによって、一般式(XXVI)で表される化合物が得られる。
【００６９】
［工程ＶＩI−３］
一般式(XXVI)で表される化合物を、適当な溶媒中（Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、ジエチルエーテル等）中、臭素化剤又はヨウ素化剤（例えば、Ｎ−ブロモコハク酸イミド、臭素、Ｎ−ヨードコハク酸イミド、ヨウ素等）を用いて反応させることによって、一般式(IVa)で表される化合物が得られる。反応温度は−５０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７０】
［工程ＶＩＩ−４］
一般式(IVa)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、有機リチウム、又は有機マグネシウム試薬（例えば、イソプロピルマグネシウムブロマイド、ｎ−ブチルリチウム等）存在下、一般式(XXVII)で表される化合物と反応させることによって、一般式(XXVIII)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。尚、一般式(XXVII)で表される化合物は、前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、市販の２−ピロリドンに保護基を導入することによって得られる。
【００７１】
［工程ＶＩＩ−５］
一般式(XXVIII)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(XXIX)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７２】
［工程ＶＩＩ−６］
一般式(XXIX)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン等）存在下メタンスルホニルクロライドを用いて環化させることによって、一般式(IIIb)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７３】
［工程ＶＩＩ−７］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(IIIb)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(IIIc)で表される化合物が得られる。
【００７４】
［反応工程式ＶＩＩＩ］
【化１６】
［式中、すべての記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００７５】
［工程ＶＩIＩ−１］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XXVIII)で表される化合物の保護基R10を除去した後、適当な溶媒中（例えば、ｉ−プロパノール、エタノール等）、酸（例えば、塩酸等）の存在下、還元剤（例えば、シアノ水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(IIId)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００７６】
［工程ＶＩIＩ−２］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(IIId)で表される化合物の保護基R10を導入することによって、一般式(IIIb)で表される化合物が得られる。
【００７７】
［工程ＶＩIＩ−３］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(IIIb)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(IIIc)で表される化合物が得られる。
【００７８】
［反応工程式ＩＸ］
【化１７】
［式中、R15は水酸基の保護基であり、その他の記号は前記一般式及び前記反応工程式と同義である］
【００７９】
［工程ＩＸ−１］
一般式(IVa)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、有機リチウム、又は有機マグネシウム試薬（例えば、ｉ−プロピルマグネシウムブロマイド、ｎ−ブチルリチウム等）存在下、一般式(XXX)で表される化合物と反応させることによって、一般式(XXXI)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。尚、一般式(XXX)で表される化合物は、前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、市販の４−ヒドロキシピロリジン−2−オンに保護基を導入することによって得られる。
【００８０】
［工程ＩＸ−２］
一般式(XXXI)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等）中、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム等）を用いて反応させることによって、一般式(XXXII)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００８１】
［工程ＩＸ−３］
一般式(XXXII)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、塩基（例えば、トリエチルアミン、ピリジン等）存在下メタンスルホニルクロライドを用いて環化させることによって、一般式(XXXIII)で表される化合物が得られる。反応温度は−７８℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００８２】
［工程ＩＸ−４］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(XXXIII)で表される化合物の保護基R15を除去することによって、一般式(XXXIV)で表される化合物が得られる。
【００８３】
［工程ＩＸ−５］
一般式(XXXIV)で表される化合物を、適当な溶媒中（例えば、塩化メチレン、テトラヒドロフラン等）中、フッ素化試薬（例えば、ジメチルアミノサルファトリフルオリド、Ｎ−フルオロ−Ｎ’−クロロメチルトリエチレンジアミン ビス（テトラフルオロボラート）等）と反応させることによって、一般式(IIIe)で表される化合物が得られる。反応温度は−２０℃から溶媒の沸点、反応時間は１０分間から４８時間である。
【００８４】
［工程ＩＸ−６］
前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の方法を参考に、一般式(IIIe)で表される化合物の保護基R14を除去することによって、一般式(IIIf)で表される化合物が得られる。
【００８５】
その他に本発明化合物を製造するために必要な出発原料、中間体、又は試薬として用いる化合物は、市販品として入手可能であるか、又は公知の方法を参考に製造することができる。
【００８６】
本発明化合物及び当該化合物を製造するために使用される化合物に含まれる置換基（例えば、水酸基、アミノ基、カルボン酸基等）は、当該置換基に原料又は中間体の段階で適当な保護基を導入しておくことが化合物製造上効果的である場合があり、必要に応じて前記「Protecting Groups in Organic Synthesis」に記載の保護基を適宜選択して使用してもよい。
【００８７】
本発明化合物及び当該化合物を製造するために使用される化合物を反応液から単離、精製するには、通常使用される方法を用いることができる。例えば、溶媒抽出、イオン交換樹脂、担体としてシリカゲル、アルミナ等を用いたカラムクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分取、薄層クロマトグラフィー、スカベンジャー樹脂、再結晶等を用いることができ、これらの単離、精製法は、単独又は組み合わせて行うことができる。単離、精製は、反応毎に行ってもよいし、いくつかの反応終了後に実施してもよい。
【００８８】
本明細書中の化合物が不斉炭素を有し光学異性体が存在する場合、これらの光学異性体は、ラセミ化合物の一般的な光学分割法、例えば、一般的な光学活性な化合物とのジアステレオマー塩として再結晶する分別結晶化又はクロマトグラフィーなどの常法により分割することができる。また、光学活性体分離用カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー（HPLC）分取によってもそれぞれの光学異性体を単離することができる。
【００８９】
このようにして製造された本発明化合物は、グルコキナーゼ活性化剤として作用することから、医薬組成物として使用することが出来る。当該医薬組成物は、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。
【００９０】
本発明化合物を医薬として使用する場合の投与形態としては、「日本薬局方」製剤総則記載の各種投与形態が目的に応じて選択できる。例えば、錠剤の形態に成形するに際しては、通例、当該分野で用いられる経口摂取可能な成分を選択すればよい。例えば、乳糖、結晶セルロース、白糖、リン酸カリウム等の賦形剤がそれにあたる。更に、所望により、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、凝集防止剤等、通例製剤分野で常用される種々の添加剤を配合してもよい。
【００９１】
本発明製剤中に有効成分として含有される本発明化合物の量は、特に限定されず、広範囲より適宜選択される。有効成分化合物の投与量は、その用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度により適宜決定されるが、経口投与の場合には、本発明化合物の量が1日体重1kg当り約1μg〜100mgの範囲で、1日に1〜4回に分けて適宜投与することができる。しかしながら、投与量、回数は、治療すべき症状の程度、投与される化合物の選択及び選択された投与経路を含む関連する状況に鑑みて決定されることから、前記の投与量範囲及び回数は本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【００９２】
以下に本発明の内容を、実施例、参考例、及び薬理試験例を挙げて、さらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は、その記載内容に限定されるものではない。
以下の実施例及び参考例における核磁気共鳴（１Ｈ−ＮＭＲ）スペクトルは、テトラメチルシランを標準物質としてケミカルシフト値をσ値（ｐｐｍ）で記載した。分裂パターンは、一重線を「ｓ」、二重線を「ｄ」、三重線を「ｔ」、四重線を「ｑ」、多重線を「ｍ」、幅広い線を「ｂｒ」で示した。質量分析は、エレクトロスプレーイオン化法（ＥＳＩ）で行った。表中において、メチル基を「Ｍｅ」、エチル基を「Ｅｔ」、ｉ−プロピル基を「ｉ−Ｐｒ」、ｎ−プロピル基を「ｎ−Ｐｒ」、ｉ−ブチル基を「ｉ−Ｂｕ」、ｔ−ブチル基を「ｔ−Ｂｕ」、ｎ−ペンチル基を「ｎ−Ｐｅｎ」、エタンスルホニル基を「Ｅｓ」、メタンスルホニル基を「Ｍｓ」、アセチル基を「Ａｃ」、プロピオニル基を「ＥｔＣＯ」で示した。
【００９３】
参考例１
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）ピロリジン−２−オン
（Ｓ）−４−ヒドロキシピロリジン−２−オン（101g)をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（400mL）に溶解し、イミダゾール（102g）とｔ−ブチルジメチルクロロシラン（158g）を０℃で加え、室温で２１時間撹拌した。反応液を水に加え、析出した白色固体をろ取し、水で洗浄することにより、白色固体として表記化合物（210g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.02(6H,s),0.81(9H,s),2.16-2.22(1H,m),2.42-2.50(1H,m),3.14-3.18(1H,m),3.49-3.54(1H,m),4.46-4.52(1H,m),5.76(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):216(M+H)+.
【００９４】
参考例２
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）ピロリジン−２−オン（210g）と４−ジメチルアミノピリジン（5.90g）をアセトニトリル（500mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（234mL）を０℃で加え、室温で２２時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、４％クエン酸水溶液、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をヘキサンで洗浄することにより、白色固体として表記化合物（271g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.05(6H,s),0.81(9H,s),1.47(9H,s),2.36-2.42(1H,m),2.58-2.67(1H,m),3.56-3.58(1H,m),3.76-3.81(1H,m),4.28-4.34(1H,m).
【００９５】
参考例３
２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−ピロリドン（25.0g）をアセトニトリル（300mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（70.5mL）と４−ジメチルアミノピリジン（1.79g）を加え、室温で５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（51.7g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.53(9H,s),1.96-2.05(2H,m),2.51(2H,t,J=5.5Hz),3.75(2H,t,J=7.1Hz).
【００９６】
参考例４
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸
ジイソプロピルアミン（233g）をテトラヒドロフラン（2.3L）に溶解し、ｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（1.50L）を０℃で滴下した後、４０分間撹拌した。反応液を−６８〜−６０℃に冷却し、チオフェン−３−カルボン酸（223g）のテトラヒドロフラン（500mL）溶液を滴下した後、１時間撹拌した。その後、ヨウ化メチル（254g）を加えて室温に昇温し、更に１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に６Ｎ塩酸を加えてｐＨ＝１とした後、酢酸エチルで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を水／酢酸で再結晶することにより、表記化合物（209g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.78(3H,s),7.01(1H,d,J=5.5Hz),7.45(1H,d,J=5.5Hz).
ESI/MS(m/z):141(M-H)-.
【００９７】
参考例５
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸（100g）をメタノール（500mL）に溶解し、塩化チオニル（200mL）をゆっくり滴下した後、３時間還流した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に水を加え、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、表記化合物（105g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.74(3H,s),3.85(3H,s),6.98(1H,d,J=5.1Hz),7.38(1H,d,J=5.5Hz).
【００９８】
実施例１
５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（156g）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（750mL）に溶解し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（178g）を加えて室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、ヘキサンで抽出した。有機相を硫酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、表記化合物（226g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.67(3H,s),3.84(3H,s),7.33(1H,s).
【００９９】
参考例６
(Ｓ）−４−ヒドロキシ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
アルゴン雰囲気下、５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（227g）をテトラヒドロフラン（350mL）に溶解し、０℃に冷却した。イソプロピルマグネシウムブロマイド（1500mL）を１０℃以下で滴下した後、０℃で２時間撹拌した。次に、（Ｓ）−４−（ｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）−２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（276g）のテトラヒドロフラン（550mL）溶液を１０℃以下で滴下した後、室温で１．５時間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、３０％クエン酸水溶液を１０℃以下で滴下、ｐＨ＝３とした後、室温で１．５時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、有機相を５％炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、粗生成物（418g）を得た。
アルゴン雰囲気下、（Ｒ）−５，５−ジフェニル−２−メチル−３，４−プロパノ−１，３，２−オキサボロリジン（49.1g）をテトラヒドロフラン（86mL）に溶解し、ボラン-ジメチルスルフィド錯体（886mL）を室温で滴下した後、２０分間撹拌した。その後、上記粗生成物（418g）のテトラヒドロフラン（450mL）溶液を室温で４５分間かけて滴下した後、３０分間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、メタノール／飽和食塩水を滴下した後、酢酸エチルを加え、有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルのショートカラム（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２）に通すことにより、粗生成物（337g）を得た。
アルゴン雰囲気下、上記粗生成物（302g）とトリエチルアミン（265mL）を塩化メチレン（800mL）に溶解し、メタンスルホニルクロライド（73.8mL）の塩化メチレン（295mL）溶液を０℃で滴下した後、３０分間撹拌した。反応液に水を加え、塩化メチレンで抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、粗生成物（304g）を得た。
上記粗生成物（265g）をテトラヒドロフラン（265mL）に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリド（565mL）を室温で滴下した後、そのまま１．５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、酢酸エチルで抽出、水、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／５−２／１）にて精製することにより、黄白色固体として表記化合物（128g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.24-1.45(9H,m),1.66(1H,t,J=4.9Hz),2.18(1H,d,J=14.3Hz),2.35-2.51(1H,m),2.71(3H,s),3.51(1H,d,J=11.7Hz),3.66(1H,t,J=7.7Hz),3.83(3H,s),4.48-4.58(1H,m),5.09(1H,br.s),7.16-7.21(1H,m).
ESI/MS(m/z):342(M+H)+,340(M-H)-.
【０１００】
実施例２
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
及び実施例３
（２Ｒ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
(Ｓ）−４−ヒドロキシ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（113g）を塩化メチレン（1130mL）に溶解し、０℃に冷却した。ジエチルアミノサルファトリフルオリド（130mL）を５℃以下で滴下した後、室温で８時間撹拌した。反応液を０℃に冷却し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を滴下した後、塩化メチレンで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２０−１／１）にて精製することにより、黄色固体として表記化合物（２Ｓ，４Ｒ）（55.5g）及び黄色固体として表記化合物（２Ｒ，４Ｒ）（21.5g）を得た。
（２Ｓ，４Ｒ）体の物性データ
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.32-1.47(9H,m),2.05-2.23(1H,m),2.65-2.75(4H,m),3.54-3.70(1H,m),3.82(3H,s),3.90-4.05(1H,m),5.05-5.30(3H,m),7.18(1H,s).
ESI/MS(m/z):344(M+H)+,342(M-H)-.
（２Ｒ，４Ｒ）体の物性データ
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.45(9H,br.d,J=42.1Hz),2.43-2.55(2H,m),2.67(3H,s),3.75-3.85(4H,m),5.12-5.35(2H,m),7.20(1H,s).
ESI/MS(m/z):344(M+H)+,342(M-H)-.
【０１０１】
参考例７
５−（４−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−ヒドロキシブチル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
アルゴン雰囲気下、５−ブロモ−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（2.00g）をテトラヒドロフラン（9.47mL）に溶解し、イソプロピルマグネシウムブロマイド（12.9mL）を−４０℃で滴下した後、１．５時間撹拌した。次に、２−オキソピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.89g）のテトラヒドロフラン（11.2mL）溶液を−４０℃で滴下した後、室温で２４時間撹拌した。反応液を−１０℃に冷却し、メタノール（17.2mL）を加えた後、水素化ホウ素ナトリウム（486mg）を少しづつ加え、１５分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（2.13g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.44(9H,s),1.51-1.69(4H,m),1.79-1.84(1H,m),2.70(3H,s),3.15-3.19(1H,m),3.83(3H,s),4.57-4.87(1H,m),7.26(1H,s).
【０１０２】
実施例４
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
５−（４−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−１−ヒドロキシブチル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（2.13g）を塩化メチレン（58mL）に溶解し、−６０℃に冷却した。トリエチルアミン（2.58mL）、メタンスルホニルクロライド（530μL）を滴下した後、−６０℃で２時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／０−４／１）にて精製することにより、黄色油状物として表記化合物（1.52g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.36-1.46(9H,m),1.95-1.99(3H,m),2.19-2.28(1H,m),2.67(3H,s),3.40-3.59(2H,m),3.82(3H,s),4.95-5.07(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):326(M+H)+,324(M-H)-.
【０１０３】
実施例５
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（132g）をメタノール（500mL）に溶解し、メタンスルホン酸（34.4mL）を滴下した後、室温で１時間撹拌、更に５０℃で７時間撹拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣にメタノール（360mL）を加えた後、０℃に冷却した。１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ＝８とし、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、淡赤色油状物として表記化合物（91.4g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.94-1.74(3H,m),2.14-2.18(1H,m),2.68(3H,s),2.98-3.00(1H,m),3.10-3.13(1H,m),3.82(3H,s),4.30(1H,t,J=7.0Hz),7.17(1H,s).
ESI/MS(m/z):226(M+H)+.
【０１０４】
実施例６
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル
（−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩
（−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸（35.3g）をメタノール（1.00L）に溶解し、２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル（21.1g）のメタノール（400mL）溶液を加え、室温で９時間静置した。析出した結晶をろ取し、メタノールで洗浄することにより、白色結晶として表記化合物（11.8g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.84-1.99(3H,m),2.28-2.21(1H,m),2.62(3H,s),3.13-3.18(2H,m),3.77(3H,s),4.66(1H,t,J=7.7Hz),5.68(2H,s),7.39(1H,d,J=8.4Hz),7.50(4H,t,J=7.7Hz),7.62-7.64(2H,m),7.95(4H,t,J=4.2Hz).
ESI/MS(m/z):226(M+H)+.
【０１０５】
実施例７
（−）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 メチルエステル （−）−ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸塩（23.7g）をクロロホルム（100mL）に懸濁し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（82.0mL）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液をクロロホルムで抽出し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下濃縮して得られた無色油状物（10.6g）を塩化メチレン（90mL）に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（11.2mL）、トリエチルアミン（6.80mL）を滴下した後、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた淡橙色油状物（17.2g）をメタノール（100mL）に溶解し、水（10mL）、水酸化リチウム１水和物（5.10g）を加え、５０℃で６時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸で中和し、析出した結晶をろ取することにより、白色固体として表記化合物（12.6g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.39(9H,br.d,J=51.6Hz),1.92-2.02(3H,m),2.28(1H,br.s),2.66(3H,s),3.39-3.52(2H,m),4.97(1H,br.d,J=19Hz),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):310(M-H)-.
【０１０６】
実施例８
（２Ｓ，４Ｒ）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）−４−フルオロピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（12.1g）と水酸化リチウム１水和物（4.40g）をメタノール（90mL）と水（30mL）の混合溶媒に溶解し、５０℃で４時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸でｐＨ＝６とし、析出した結晶をろ取した。ろ取した結晶を酢酸エチルに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色固体として表記化合物（11.2g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.34-1.44(9H,m),1.95-2.05(3H,m),2.21-2.32(1H,m),2.66(3H,s),3.42-3.51(2H,m),5.05-5.15(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):328(M-H)-.
【０１０７】
実施例９
２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−（４−メトキシカルボニル−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.52g）をメタノール（14.0mL）に溶解し、０℃で水（2.33mL）と水酸化リチウム１水和物（588mg）を加え、５０℃で１７時間撹拌した。反応液を０℃に冷却後、水を加え、１Ｎ塩酸で中和し、析出した結晶をろ取することにより、白色固体として表記化合物（1.26g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.34-1.44(9H,m),1.95-2.05(3H,m),2.21-2.32(1H,m),2.66(3H,s),3.42-3.51(2H,m),5.05-5.15(1H,m),7.12(1H,s).
ESI/MS(m/z):310(M-H)-.
【０１０８】
参考例８
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.00g）をトルエン（10mL）と塩化メチレン（10mL）の混合溶媒に溶解し、オキサリルクロライド（2.74mL）を滴下した後、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮、得られた残渣をトルエン（10mL）と塩化メチレン（10mL）の混合溶媒に溶解し、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（745mg）とＮ，Ｎ−ジエチルアニリン（1.98mL）を加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１−２／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（1.01g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.35-1.46(9H,m),1.70-1.75(1H,m),1.88-1.97(2H,m),2.19-2.45(1H,m),2.73(3H,s),3.38-3.55(2H,m),4.98(1H,br.t,J=35.3Hz),6.84(1H,br.d,J=36.6Hz),7.05(1H,br.t,J=15.7Hz),10.27(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１０９】
参考例９
（−）−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾール 塩酸塩を用いて参考例８と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.16-1.54(9H,m),1.89-2.12(3H,m),2.23-2.37(1H,m),2.68(3H,s),3.39-3.57(2H,m),5.03(1H,br.s),7.24(1H,br.s),7.33(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１１０】
参考例１０
（−）−２−［５−メチル−４−（［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−１，２,４−チアチアゾールを用いて参考例８と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.32-1.46(9H,m),1.95-2.01(3H,m),2.21-2.34(1H,m),2.78(3H,s),3.38-3.59(2H,m),4.95-5.15(1H,m),7.16-7.20(1H,m),8.28(1H,s).
ESI/MS(m/z):395(M+H)+,393(M-H)-.
【０１１１】
参考例１１
（−）−２−［4−(3−エチル−［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−３−エチル−［１，２，４］−チアチアゾールを用いて参考例８と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):423(M+H)+,421(M-H)-.
【０１１２】
参考例１２
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェンー２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸
ｔ−ブチルエステル
（２Ｓ，４Ｒ）−２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）−４−フルオロピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（11.0g）をトルエン（180mL）に溶解し、オキサリルクロライド（28.6mL）を０℃で滴下し、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮、得られた残渣をトルエン（150mL）に溶解し、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン（21.3mL）、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（7.75g）を０℃で加えた後、室温で１３時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／２０−１／５）にて精製することにより、淡黄白色粉末として表記化合物（11.8g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.26-1.45(9H,m),2.04-2.20(1H,m),2.70-2.75(4H,m),3.57-3.68(1H,m),2.73(3H,s),3.38-3.55(2H,m),4.00(1H,br.s),5.15-5.20(1H,m),6.91(1H,s),7.10(1H,s),10.07(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):430(M+H)+,428(M-H)-.
【０１１３】
参考例１３
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェンー２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸
ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾールを用いて参考例１２と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.37-1.46(9H,m),2.15-2.28(1H,m),2.68-2.78(4H,m),3.58-4.24(2H,m),5.15-5.33(1H,m),5.68-6.02(1H,m),7.34-7.37(2H,m).
ESI/MS(m/z):446(M+H)+,444(M-H)-.
【０１１４】
参考例１４
(２Ｓ，４Ｒ)−２−［4−(3−エチル−［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル)−4−フルオロピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、3−エチル−５−アミノ−［１，２，４］チアジアゾールを用いて参考例１２と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):441(M+H)+,439(M-H)-.
【０１１５】
参考例１５
（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［５−メチル−４−（［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに５−アミノ−［１，２，４］−チアチアゾールを用いて参考例１２と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1HNMR(CDCl3)δ(ppm):1.3-1.5(9H,m),2.14(1H,ddt,J=38,3.6,9.6Hz),2.70(1H,m),2.79(3H,s),3.63(1H,ddd,J=38,8.0,3.6Hz),4.00(1H,m),5.0-5.5(2H,m),7.25(1H,br.s),8.31(1H,s),10.7(1H,br.s).
【０１１６】
参考例１６
２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−（４−カルボキシ−５−メチルチオフェン−２−イル）ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（1.56g）をトルエン（16mL）に懸濁し、オキサリルクロライド（4.30mL）を０℃で滴下した後、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣をトルエン（16mL）に溶解し、２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩（1.16g）とＮ，Ｎ−ジエチルアニリン（3.20mL）を０℃で加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順に洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝３／２）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（1.62g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.36-1.46(9H,m),1.91-1.99(3H,m),2.21-2.28(1H,m),2.74(3H,s),3.41-3.56(2H,m),4.99-5.09(1H,m),6.98(1H,s),7.06(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１１７】
参考例１７
２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノ−５−クロロチアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.24-1.46(9H,m),1.93-1.97(3H,m),2.23-2.32(1H,m),2.74(3H,s),3.40-3.56(2H,m),4.95-5.11(1H,m),6.87-7.12(1H,m),7.18(1H,br.s),9.89(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１１８】
参考例１８
２−［５−メチル−４−（チアゾール−２−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］−ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、２−アミノチアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.24-1.46(9H,m),1.93-1.97(3H,m),2.23-2.32(1H,m),2.74(3H,s),3.40-3.56(2H,m),4.95-5.11(1H,m),6.87-7.12(1H,m),7.18(1H,br.s),9.89(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１１９】
参考例１９
２−［５−メチル−4−(［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）チオフェン−２−イル］ピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−［１，２，４］チアジアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):395(M+H)+,393(M-H)-.
【０１２０】
参考例２０
２−［4−(3−エチル−［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−３−エチル−［１，２，４］チアジアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):423(M+H)+,421(M-H)-.
【０１２１】
参考例２１
２−［５−メチル−4−［3−メチルスルファニル−［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル］チオフェン−２−イル］ピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−３−メチルスルファニル−［１，２，４］チアジアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):441(M+H)+,439(M-H)-.
【０１２２】
参考例２２
２−［4−［3−メトキシ−［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル］−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−1−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル
２−アミノ−５−フルオロチアゾール 塩酸塩の代わりに、５−アミノ−３−メトキシ−［１，２，４］チアジアゾールを用いて参考例１６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):425(M+H)+,423(M-H)-.
【０１２３】
参考例２３
（−）−２−メチルー５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステル（970mg）を塩化メチレン（10mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（2.72mL）を加えて、室温で２時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（578mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.70-1.98(3H,m),2.14-2.22(1H,m),2.73(3H,s),2.99-3.05(1H,m),3.11-3.15(1H,m),4.34(1H,t,J=7.1Hz),6.80(1H,d,J=2.6Hz),7.08(1H,s).
ESI/MS(m/z):312(M+H)+,310(M-H)-.
【０１２４】
参考例２３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１に、データを表２に示した。
【化１８】
【０１２５】
【表１】
【０１２６】
【表２】
【０１２７】
参考例３７
５−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−3−カルボン酸 ［１，２，４］チアゾール−５−イルアミド
（−）−２−「４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル」ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルの代わりに、（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［５−メチルｌ−４−（［１，２，４］チアジアゾール−５−イルカルバモイル）−チオフェン−２−イル］−ピロリジン−１−カルボン酸 ｔ−ブチルエステルを用いて参考例２３と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
ESI/MS(m/z):313(M+H)+,311(M-H)-.
【０１２８】
参考例３８
エチルアミノ酢酸 ベンジルエステル 塩酸塩
ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ酢酸（152 g）をアセトン（750mL）に溶解し、炭酸カリウム（156g）塩化ベンジル（94.7mL）、ヨウ化ナトリウム（124g）を加え、60℃で4.5時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈した後、不溶物をろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で2回洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣（234 g）を４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液（1.2L）に溶解した後、室温で1.5時間撹拌した。反応液にジエチルエーテルを加えて、析出した固体をろ取した後、ジエチルエーテルで洗浄し、表記化合物（157g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.45-1.49(3H,m),3.18(2H,br.s),3.86(2H,br.s),5.21(2H,s),7.32-7.36(5H,m),9.92(2H,br.s).
【０１２９】
参考例３９
（Ｓ）−２−アミノブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸（2.0g）をＮ,Ｎ-ジメチルホルムアミド（20mＬ）へ溶解し、炭酸カリウム（2.72g）を加え、臭化ベンジル（1.29mＬ）を滴下した。室温で5時間撹拌した後、反応液を酢酸エチル、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）で精製し、（Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸 ベンジルエステル（2.80g）を得た。得られた（Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸 ベンジルエステル（1.0g）へ４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液（5.1mＬ）を加え、室温で3時間撹拌した。減圧濃縮し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で塩基性とし、ジエチルエーテルで抽出した後、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、無色オイルとして表記化合物（637mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.94(3H,t,J=7.6Hz),1.56(2H,br.s),1.59-1.69(1H,m),1.73-1.84(1H,m),3.45(1H,t,J=6.4Hz),5.16(2H,s),7.31-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):194(M+H)+.
【０１３０】
参考例４０
（Ｒ）−２−アミノブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸の代わりに、（Ｒ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸を用いて参考例３９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm): 0.94(3H,t,J=7.6Hz),1.56(2H,br.s),1.59-1.69(1H,m),1.73-1.84(1H,m),3.45(1H,t,J=6.4Hz),5.16(2H,s),7.31-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):194(M+H)+.
【０１３１】
参考例４１
（Ｒ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノブタン酸の代わりに、（Ｒ）−２−ｔ−ブトキシカルボニルアミノプロパン酸を用いて参考例３９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.44(3H,d,J=7.0Hz),4.10-4.21(1H,m),5.25(2H,s),7.32-7.49(5H,m),8.55(1H,br.s).
【０１３２】
参考例４２
（Ｓ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−アミノブタン酸 ベンジルエステル（520mg）、アセトアルデヒド（166μL）をメタノール（5mL）へ溶解させ、シアノホウ酸水素ナトリウム（169mg）を加え、室温で2時間撹拌した。１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えジエチルエーテルで抽出し、有機層を無水硫酸水素ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、得られた残渣をＮＨ−シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝2／1）で精製し、無色オイルとして表記化合物（200mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.6Hz),1.08(3H,t,J=6.8Hz),1.46(1H,br.s),1.64-1.72(2H,m),2.47-2.55(1H,m),2.59-2.67(1H,m),3.25(1H,t,J=6.4Hz),5.17(2H,s),7.30-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):222(M+H)+.
【０１３３】
参考例４３
（Ｒ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−アミノブタン酸 ベンジルエステルの代わりに、（Ｒ）−２−アミノブタン酸 ベンジルエステルを用いて参考例４１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.6Hz),1.08(3H,t,J=7.2Hz),1.64-1.72(2H,m),2.47-2.55(1H,m),2.59-2.67(1H,m),3.25(1H,t,J=6.4Hz),5.17(2H,s),7.31-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):222(M+H)+.
【０１３４】
参考例４４
（Ｓ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル塩酸塩（1.00g）をオルトギ酸トリメチル（20.0mL）に溶解し、Ｎ，Ｎ-ジイソプロピルエチルアミン（798μL）を加え室温で5分間攪拌した。その後アセトアルデヒド（2.64mL）を加えて、室温で５分間撹拌した。その後、氷冷下に冷却して水素化ほう素ナトリウム（704mg）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液に水を加えた後、ジクロロメタンで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し減圧濃縮した。得られた残渣に氷冷下４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液を加え減圧濃縮した後、残渣にジエチルエーテルを加えて固化させた。析出物をろ取しジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥して表記化合物（1.04g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.22(3H,t,J=7.0Hz),1.48(3H,d,J=7.0Hz),2.88-3.09(2H,br.s),4.18-4.29(1H,m),5.28(2H,s),7.36-7.51(5H,m),9.09-9.23(1H,br.s),9.33-9.49(1H,br.s).
【０１３５】
参考例４５
（Ｒ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル塩酸塩の代わりに、（Ｒ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル塩酸塩を用いて参考例４４と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.22(3H,t,J=7.1Hz),1.48(3H,d,J=7.3Hz),2.89-3.08(2H,m),4.18-4.29(1H,m),5.28(2H,s),7.34-7.49(5H,m),9.02-9.40(2H,m).
【０１３６】
参考例４６
（Ｓ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル塩酸塩（1.12g）にメタノール（22mＬ）を加えた。氷冷下に冷却してアセトアルデヒド（906μL）を加えて、そのままの温度で３０分間撹拌した。氷冷下、水素化ほう素ナトリウム（245mg）を加えて、そのままの温度で４５分間撹拌した。反応液に水を加えた後、クロロホルムで抽出した。有機相は無水硫酸ナトリウムで乾燥し減圧濃縮した。得られた残渣に氷冷下４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液（60mL）を加えて、そのままの温度で１時間撹拌した。減圧濃縮した後、残渣にジエチルエーテルを加えて固化させた。析出物をろ取し、ジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥して表記化合物（1.33g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.3Hz),1.25-1.55(2H,m),1.47(3H,t,J=7.2Hz),2.05-2.25(2H,m),3.04
(2H,br.d),3.80(1H,br.s),5.20-5.35(2H,m),7.3-7.45(5H,m).
【０１３７】
参考例４７
（Ｒ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル塩酸塩の代わりに、（Ｒ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル塩酸塩を用いて参考例４６と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.3Hz),1.25-1.55(2H,m),1.47(3H,t,J=7.2Hz),2.05-2.25(2H,m),3.04
(2H,br.d),3.80(1H,br.s),5.20-5.35(2H,m),7.3-7.45(5H,m).
【０１３８】
参考例４８
（Ｓ）−２−エチルアミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−アミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩（1.00g）とジイソプロピルエチルアミン（715uL）をメタノール（30mL）に溶解し、氷冷した。ここにアセトアルデヒド（2.3ｍL）を加え、氷冷下で１５分攪拌した後、水素化ホウ素ナトリウム（620mg）を加え、そのまま１時間攪拌した。反応液に水を加えジエチルエーテルで抽出し、有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、得られた残渣を酢酸エチル（10ｍL）に溶解し、４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液を加えて再び減圧濃縮した。得られた固体をジエチルエーテルに懸濁し、これをろ取し、減圧下乾燥して白色粉末として表記化合物（1.01g）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):0.89(3H,d,J=7.3Hz),1.01(3H,d,J=7.0Hz),1.23(3H,t,J=7.0Hz),2.32-2.40(1H,m),2.98(2H,br.s),4.04(1H,br.s),5.25(1H,d,J=12.1Hz),5.32(1H,d,J=12.1Hz),7.35-7.46(5H,m),9.10(1H,br.s),9.37(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):236(M+H)+(フリー体).
【０１３９】
参考例４９
（Ｒ）−２−エチルアミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩
（Ｓ）−２−アミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩の代わりに（Ｒ）−２−アミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例４７と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):0.89(3H,d,J=7.0Hz),1.01(3H,d,J=7.0Hz),1.23(3H,t,J=7.3Hz),2.34-2.40(1H,m),2.97(2H,br.s),4.03(1H,br.s),5.24(1H,d,J=12.1Hz),5.32(1H,d,J=12.1Hz),7.36-7.45(5H,m),9.12(1H,br.s),9.47(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):236(M+H)+(フリー体).
【０１４０】
参考例５０
（Ｓ）−２−（２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ)プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩（1.00g）をテトラヒドロフラン（20mL）に溶解し、炭酸カリウム（3.2g）を加え１時間攪拌した。反応液をろ過し減圧濃縮した後、アクリル酸t-ブチル（20mL）を加え６０℃で６２時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝1／1）により精製し、無色油状物質として表記化合物（832mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.31(3H,d,J=7.0Hz),1.32-1.51(9H,m),2.40(2H,t,J=6.6Hz),2.68-2.75(1H,m),2.82-2.91(1H,m),3.36-3.44(1H,m),5.17(2H,d,J=2.2Hz),7.28-7.41(5H,m).
ESI/MS(m/z):308(M+H)+
.
【０１４１】
参考例５１
（Ｒ）−２−（２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ)プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩の代わりに（Ｒ）−２−アミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５０と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.31(3H,d,J=7.0Hz),1.32-1.50(9H,m),2.40(2H,t,J=6.8Hz),2.66-2.75(1H,m),2.80-2.90(1H,m),3.35-3.42(1H,m),5.17(2H,d,J=2.2Hz),7.28-7.41(5H,m).
ESI/MS(m/z):308(M+H)+
.
【０１４２】
参考例５２
（３−ベンジルオキシカルボニルメチルエチルアミノ）プロパン酸 t−ブチルエステル
アクリル酸 ｔ−ブチル（1.46 mL）をテトラヒドロフラン（10mL）に溶解し、２Ｎエチルアミン／テトラヒドロフラン溶液（25mL）を室温で加えた後、還流下で一晩撹拌した。反応液を室温に冷却後、減圧濃縮し、減圧濃縮し、残渣の内（346.5mg）、トリエチルアミン（557μL）をテトラヒドロフラン（2mL）に溶解し、室温でブロモ酢酸 ベンジルエステル（377μL）を加えた後、１２時間撹拌した。水で希釈したのち、ジエチルエーテルで抽出した。飽和塩化アンモニウム水溶液で３回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下濃縮し、残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝1／5）により精製し、無色オイルとして表記化合物（559mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.03(3H,q,J=7.8Hz),1.43(9H,s),2.38(2H,t,J=7.3Hz),2.65-2.73(2H,m),2.92(2H,t,J=7.3Hz),3.41(2H,s),5.14(2H,s),7.32-7.37(5H,m).
【０１４３】
参考例５３
（３−ベンジルオキシカルボニル−ｉ−プロピルアミノ）プロパン酸 t−ブチルエステル
２Ｎエチルアミン／テトラヒドロフラン溶液の代わりにイソプロピルアミンを用いて参考例５２と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.98-1.02(6H,m),1.43(9H,s),2.37-2.41(2H,m),2.87(2H,t,J=7.3Hz),2.99-3.03(1H,m),3.35(2H,s),5.14(2H,s),7.30-7.38(5H,m).
【０１４４】
参考例５４
（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）酢酸 ベンジルエステル
エチルアミノ酢酸 ベンジルエステル 塩酸塩（157g）をテトラヒドロフラン（1.0L）に懸濁させ、トリエチルアミン（286mL）を室温にて加え、５分間撹拌した。ブロモ酢酸 t−ブチルエステル（120mL）を加え、室温で２２時間撹拌した。ブロモ酢酸 t−ブチルエステル（18.4mL）を追加し、室温で４２時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、不溶物をろ過し、減圧濃縮した。得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝6 / 1 − 5 / 1) により精製し、表記化合物（180g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.05-1.11(3H,m),1.45(9H,s),2.74-2.81(2H,m),3.45(2H,s),3.61(2H,s),5.15(2H,s),7.33-7.36(5H,m).
【０１４５】
参考例５５
（Ｓ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）ブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステル（200mg）、ブロモ酢酸 t−ブチルエステル（352mg）、炭酸カリウム（250mg）、ヨウ化ナトリウム（136mg）をＮ,Ｎ-ジメチルホルムアミド（4mＬ）へ溶解した。室温で１５時間撹拌した後、水、ジエチルエーテルで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）で精製し、無色オイルとして表記化合物（250mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.95(3H,t,J=7.6Hz),1.04(3H,t,J=7.2Hz),1.44(9H,s),1.61-1.82(2H,m),2.61-2.79(2H,m),3.22(1H,d,J=17.6Hz),3.40(1H,t,J=7.2Hz),3.45(1H,d,J=17.6Hz),5.13(2H,s),7.30-7.40(5H,m).
ESI/MS(m/z):336(M+H)+.
【０１４６】
参考例５６
（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）ブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステルの代わりに（Ｒ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステルを用いて参考例５５と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.95(3H,t,J=7.6Hz),1.04(3H,t,J=7.2Hz),1.44(9H,s),1.61-1.82(2H,m),2.61-2.79(2H,m),3.22(2H,d,J=17.2Hz),3.39(1H,t,J=7.6Hz),3.45(1H,d,J=17.2Hz),5.13(2H,s),7.30-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):336(M+H)+.
【０１４７】
参考例５７
（Ｓ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）−３−メチルブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステルの代わりに（S）−２−エチルアミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５５と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.84(3H,d,J=6.6Hz),1.01(3H,d,J=6.6Hz),1.03(3H,t,J=7.3Hz),1.43(9H,s),1.98(1H,dq,J=10.6,6.6Hz),2.59(1H,dt,J=12.8,7.0Hz),2.75(1H,dt,J=12.8,7.3Hz),2.96(1H,d,J=10.6Hz),3.12(1H,d,J=17.2Hz),3.46(1H,d,J=17.2Hz),5.13(2H,s),7.32-7.37(5H,m).
ESI/MS(m/z):350(M+H)+.
【０１４８】
参考例５８
（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）−３−メチルブタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノブタン酸 ベンジルエステルの代わりに（Ｒ）−２−エチルアミノ−3−メチルブタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５５と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.84(3H,d,J=6.2Hz),1.01(3H,d,J=7.0Hz),1.03(3H,t,J=7.3Hz),1.43(9H,s),1.99(1H,dq,J=10.6,6.6Hz),2.60(1H,dt,J=13.2,7.0Hz),2.75(1H,dt,J=13.2,7.3Hz),2.96(1H,d,J=10.6Hz),3.12(1H,d,J=17.2Hz),3.46(1H,d,J=17.2Hz),5.13(2H,s),7.31-7.37(5H,m).
ESI/MS(m/z):350(M+H)+.
【０１４９】
参考例５９
（Ｓ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩（400mg）にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（4mＬ）、ブロモ酢酸 t-ブチル（481μL）、トリエチルアミン（571μL）を加えて室温で２２時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝７／１）により精製し、表記化合物（169g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.06(3H,t,J=7.1Hz),1.33(3H,d,J=7.3Hz),1.44(9H,s),2.6-2.8(2H,m),3.28-3.48(2H,m),3.69-3.74(1H,m),5.13(2H,s),7.25-7.4(5H,m).
【０１５０】
参考例６０
（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩の代わりに（Ｒ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.06(3H,t,J=7.3Hz),1.33(3H,d,J=7.3Hz),1.44(9H,s),2.6-2.8(2H,m),3.27-3.48(2H,m),3.69-3.74(1H,m),5.13(2H,s),7.25-7.4(5H,m).
【０１５１】
参考例６１
（Ｓ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）ペンタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩の代わりに（Ｓ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.5Hz),1.04(3H,t,J=7.1Hz),1.25-1.55(2H,m),1.44(9H,s),1.55-1.75(2H,m),2.6-2.8(2H,m),3.20-3.48(2H,m),3.48(1H,t,J=7.3Hz),5.13(2H,s),7.3-7.4(5H,m).
【０１５２】
参考例６２
（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）ペンタン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−エチルアミノプロパン酸 ベンジルエステル 塩酸塩の代わりに（Ｒ）−２−エチルアミノペンタン酸 ベンジルエステル 塩酸塩を用いて参考例５９と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,t,J=7.3Hz),1.04(3H,t,J=7.1Hz),1.25-1.5(2H,m),1.44(9H,s),1.55-1.75(2H,m),2.6-2.8(2H,m),3.20-3.48(2H,m),3.48(1H,t,J=7.5Hz),5.13(2H,s),7.25-7.4(5H,m).
【０１５３】
参考例６３
（Ｓ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルエチルエチルアミノ）プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−（２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ)プロパン酸 ベンジルエステル（782mg）をオルトギ酸トリメチル（15.6mL）に溶解し、アセトアルデヒド（1.43mL）、トリアセトキシ水素化ほう素ナトリウム（2.67g）を加え室温で２０時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え塩化メチレンで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）により精製し、無色油状物質として表記化合物（284mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.02(3H,t,J=7.1Hz),1.30(3H,d,J=7.3Hz),1.44(9H,s),2.34(2H,t,J=7.1Hz),2.49-2.58(1H,m),2.62-2.73(1H,m),2.76-2.85(1H,m),2.92-3.02(1H,m),3.58(1H,q,J=7.2Hz),5.14(2H,s),7.27-7.41(5H,m).
ESI/MS(m/z):336(M+H)+
.
【０１５４】
参考例６４
（Ｒ）−２−（ｔ−ブトキシカルボニルエチルエチルアミノ）プロパン酸 ベンジルエステル
（Ｓ）−２−（２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ)プロパン酸 ベンジルエステルの代わりに（Ｒ）−２−（２−ｔ−ブトキシカルボニルエチルアミノ)プロパン酸 ベンジルエステルを用いて参考例６３と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.01(3H,t,J=7.1Hz),1.29(3H,d,J=7.0Hz),1.43(9H,s),2.33(2H,t,J=7.1Hz),2.47-2.58(1H,m),2.61-2.72(1H,m),2.75-2.85(1H,m),2.90-3.02(1H,m),3.57(1H,q,J=7.0Hz),5.12(2H,s),7.21-7.39(5H,m).
ESI/MS(m/z):336(M+H)+
.
【０１５５】
参考例６５
（ベンジルオキシカルボニルメチルアミノ）酢酸 t−ブチルエステル
アミノ酢酸 ｔ−ブチルエステル（1.26g）、トリエチルアミン（2.09mＬ）をアセトニトリル（10mL）に溶解し、５分間撹拌し、室温でブロモ酢酸 ベンジルエステル（784μＬ）を加えた後、１７時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液で希釈したのち、酢酸エチルで抽出した。飽和塩化アンモニウム水溶液で３回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン＝１／３）により精製し、無色オイルとして表記化合物（984mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.87-0.89(6H,m),1.45(9H,s),1.64-1.75(1H,m),2.47(2H,d,J=7.3Hz),3.42(2H,s),3.58(2H,s),5.14(2H,s),7.30-7.36(5H,m).
【０１５６】
参考例６６
（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）酢酸
（ｔ−ブトキシカルボニルメチルエチルアミノ）酢酸 ベンジルエステル（167g）をエタノール（500mL）に溶解した後、アルゴン雰囲気下、10％−Pd/C（16.7g）を室温で加え、反応容器を水素置換し、室温で２４時間撹拌した。触媒をセライトパッドでろ過しエタノールで洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、白色固体として表記化合物（116g）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.09-1.14(3H,m),1.47(9H,s),2.79-2.84(2H,m),3.36(2H,s),3.41(2H,s),9.35(1H,br.s).
【０１５７】
参考例６６の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表３に、データを表４に示した。
【化１９】
【０１５８】
【表３】
【０１５９】
【表４】
【０１６０】
参考例７９
（ｔ−ブトキシカルボニルメチル−ｉ−ブチルアミノ）酢酸
（ベンジルオキシカルボニルメチルアミノ）酢酸 t−ブチルエステル（140mg）、イソブチルアルデヒド（137μＬ）をエタノール（2mＬ）に溶解し、10％−Pd/C（14mg）を加え、水素雰囲気下、５０℃で４時間撹拌した。触媒をセライトパッドでろ過しエタノールで洗浄した。ろ液を減圧濃縮し、白色固体として表記化合物（89mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.91-0.96(6H,m),1.48(9H,s),1.67-1.79(1H,m),2.47(2H,d,J=7.3Hz),3.35(4H,s).
【０１６１】
参考例８０
（ｔ−ブトキシカルボニルプロピルアミノ）酢酸
アルゴン雰囲気下、水素化ナトリウム（365mg）をテトラヒドロフラン（5mL）に懸濁し、氷冷した。そこに、ｔ−ブトキシカルボニルアミノ酢酸（400mg）、１−ヨードプロパン（892μL）のテトラヒドロフラン（3mL）溶液を滴下した。反応液を室温に戻し、９６時間撹拌した。反応液に更に水素化ナトリウム（91.2mg）、１−ヨードプロパン（223μL）を加え、４０℃で６７時間攪拌した。反応液に水、酢酸エチルを加えて抽出し、水層を１０％クエン酸水溶液でｐＨ＝２−３にした。酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮し、油状物質として表記化合物（210mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.89(3H,br.t,J=7.3Hz),1.44-1.57(11H,m),3.21-3.28(2H,m),3.95(2H,d,J=21.6Hz).
ESI/MS(m/z):216(M-H)-
.
【０１６２】
参考例８１
（ｔ−ブトキシカルボニルペンチルアミノ）酢酸
１−ヨードプロパンの代わりに１−ヨードペンタンを用いて参考例８１と同様の方法で反応を行うことにより、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):0.90(3H,br.t,J=6.0Hz),1.22-1.53(15H,m),3.22-3.27(2H,m),3.94(2H,d,J=32.6Hz),9.89(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):244(M-H)-
.
【０１６３】
参考例８２
（−）−（２−［（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）カルバミン酸 ｔ−ブチルエステル
５-（（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロピロリジン−２−イル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（35.0mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（24.0mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール １水和物（20.0mg）とＮ−ｔ−ＢＯＣ−グリシン（23.0mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（0.50ml）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（13.0μL）を加え、室温で一晩撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（54.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):487(M+H)+,485(M-H)-.
【０１６４】
参考例８２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表５、表６に示した。
【化２０】
【０１６５】
【表５】
【０１６６】
【表６】
【０１６７】
参考例８２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表７に、データを表８、表９に示した。
【化２１】
【０１６８】
【表７】
【０１６９】
【表８】
【０１７０】
【表９】
【０１７１】
参考例１３３
５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル)アミド（467mg）を塩化メチレン（5.0mL）に溶解し、０℃でジ−ｔ−ブチルピリジン（663μL）とクロロアセチルクロライド（239μL）を加え、室温で４時間撹拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（536mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.97-2.32(4H,m),2.71(3H,s),3.60-3.70(1H,m),3.75-3.78(1H,m),3.83-4.00(1H,m),4.8(2H,s),5.39(1H,d,J=5.5Hz),6.95(1H,s),7.15(1H,s).
ESI/MS(m/z):388(M+H)+,386(M-H)-.
【０１７２】
参考例１３４
５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル)アミドの代わりに、２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル)アミドを用いて参考例５７と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.97-2.42(4H,m),2.71(3H,s),3.60-3.68(1H,m),3.75-3.83(1H,m),3.88-4.05(1H,m),4.12-4.19(2H,m),5.37-5.41(1H,m),7.20(1H,s),7.32(1H,s).
ESI/MS(m/z):404(M+H)+,402(M-H)-.
【０１７３】
参考例１３５
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（２−アミノアセチル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−（２−［（２Ｓ,４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）カルバミン酸 ｔ−ブチルエステル（54.0mg）を塩化メチレン（0.50mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（0.500mL）を加え、室温で１５時間撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝１５／１−５／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（31.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):387(M+H)+,385(M-H)-.
【０１７４】
参考例１３５の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表１０、表１１に示した。
【化２２】
【０１７５】
【表１０】
【０１７６】
【表１１】
【０１７７】
参考例１６２
（−）−（２−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ）酢酸 t−ブチルエステル
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（２−アミノアセチル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（31.0mg）をテトラヒドロフラン（1.0mL）に溶解し、ブロモ酢酸 t−ブチル（16.0mg）とトリエチルアミン（8.10mg）を加えた後、室温で一晩撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝３０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（19.0mg）を得た。
ESI/MS(m/z):501(M+H)+,499(M-H)-.
【０１７８】
参考例１６２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１２に、データを表１３に示した。
【化２３】
【０１７９】
【表１２】
【０１８０】
【表１３】
【０１８１】
参考例１７６
（−）−３−［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）メチルアミノ］プロピオン酸 ｔ−ブチルエステル
（−）−２−メチル−５−［１−（２−メチルアミノアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（425mg）を１，４−ジオキサン（10mL）に溶解し、アクリル酸ブチル（486μL）とトリトンＢ（19.0μL）を室温で加えた後、６０℃で一晩撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（塩化メチレン／メタノール＝２０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（238mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.43(9H,d,J=8.1Hz),1.96-2.01(2H,m),2.09-2.38(4H,m),2.45(2H,t,J=7.0Hz),2.65-2.87(2H,m),3.11-3.29(2H,m),3.46(3H,d,J=7.3Hz),3.53-3.60(1H,m),3.71-3.88(1H,m),5.47(1H,d,J=7.3Hz),6.83-6.91(1H,m),7.23-7.28(1H,m),11.23(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):511(M+H)+,509(M-H)-.
【０１８２】
参考例１７６の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１４に、データを表１５に示した。
【化２４】
【０１８３】
【表１４】
【０１８４】
【表１５】
【０１８５】
参考例１８０
（２−［２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチルアミノ）酢酸
ｔ−ブチルエステル
グリシンｔ−ブチルエステル 塩酸塩（210mg）とジイソプロピルエチルアミン（257μL）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（2mL）に溶解し、室温で５分間撹拌した。５０℃にて５−［１−（２−クロロアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド（101mg）をゆっくりと加えて、５０℃で４時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝１０／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（106mg）を得た。
ESI/MS(m/z):499(M+H)+,497(M-H)-.
【０１８６】
参考例１８０の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１６に、データを表１７に示した。
【化２５】
【０１８７】
【表１６】
【０１８８】
【表１７】
【０１８９】
参考例１８３
５−［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステル
２−メチル−５−［１−（２−メチルアミノアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（60.6mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（1.0mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（81.5μL）と５−ブロモ吉草酸メチル（27.0μL）を室温で加えた後、６０℃で一晩撹拌した。反応液を室温に冷却後、水を加え、酢酸エチルで抽出、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノール＝９／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（63.0mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.28-1.62(6H,m),2.01-2.49(9H,m),2.67-2.71(3H,m),2.76-2.99(1H,m),3.56-3.85(5H,m),4.25-4.57(1H,m),5.38(1H,d,J=6.9Hz),7.12(1H,t,J=2.3Hz),7.26-7.35(1H,m).
ESI/MS(m/z):497(M+H)+,495(M-H)-.
【０１９０】
参考例１８３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物とデータを表１８に示した。
【化２６】
【０１９１】
【表１８】
【０１９２】
実施例１０
（−）−２−メチル−５−［１−（２−ウレイドアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（270mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（334mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール １水和物（264mg）とヒダントイン酸（206mg）をテトラヒドロフラン（5.40mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（360μL）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝９／１）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（287mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.94-2.48(4H,m),2.68-2.70(3H,m),3.55-3.84(2H,m),3.89-4.07(2H,m),5.29-5.37(1H,m),7.11-7.12(1H,m),7.32-7.36(1H,m).
ESI/MS(m/z):412(M+H)+,410(M-H)-.
【０１９３】
実施例１１
（−）−２−メチル−５−［１−（２−ウレイドアセチル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミドの代わりに（−）−２−メチル−５−ピロリジン−２−イルチオフェン−３−カルボン酸 （５−クロロチアゾール−２−イル）アミドを用いて実施例１０と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.94-2.46(4H,m),2.70-2.72(3H,m),3.54-3.84(2H,m),3.84-4.06(2H,m),5.27-5.37(1H,m),7.34-7.35(1H,m),7.39(1H,s).
ESI/MS(m/z):428(M+H)+,426(M-H)-.
【０１９４】
実施例１２
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−１−（２−メタンスルホニルアミノアセチル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
５−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロピロリジン−２−イル）−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（297mg）と塩酸１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（345mg）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール１水和物（276mg）とＮ−メタンスルホニルグリシン（276mg）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（3.0mL）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（308μL）を加え、室温で５．５時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、酢酸エチルにて再結晶を行うことにより、白色粉末として表記化合物（291mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):2.10-2.18(1H,m),2.59(3H,s),3.00(3H,s),3.80-4.02(4H,m),5.26-5.47(2H,m),7.04-7.07(1H,m),7.56(1H,s),9.70(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):465(M+H)+,463(M-H)-.
【０１９５】
実施例１２の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表１９にデータを表２０に示した。
【化２７】
【０１９６】
【表１９】
【０１９７】
【表２０】
【０１９８】
実施例２２
（−）−２−メチル−５−［１−（（Ｓ）−２−ウレイドプロピオニル）ピロリジン−２−イル］チオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−５−［１−（（Ｓ）−２−アミノプロピオニル）ピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（60.0mg）を水（1.8mL）に溶解し、シアン酸カリウム（62.3mg）と酢酸（79.9μL）を加え、室温で３時間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮することにより、白色粉末として表記化合物（63.5mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ:1.24-1.40(3H,m),1.85-2.46(4H,m),2.61-2.74(3H,m),3.64-3.92(2H,m),4.45-4.60(1H,m),5.24-5.41(1H,m),7.11-7.12(1H,m),7.24-7.27(1H,s).
ESI/MS(m/z):426(M+H)+,424(M-H)-.
【０１９９】
実施例２３
（−）−５−［（２Ｓ,４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−アセチルアミノプロピオニル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド
（−）−５−［（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（Ｓ）−２−アミノプロピオニル）−４−フルオロピロリジン−２−イル］−２−メチルチオフェン−３−カルボン酸 （５−フルオロチアゾール−２−イル）アミド（31.8mg）を塩化メチレン（1.0mL）に溶解し、アセチルクロライド（11.3μL）とピリジン（19.3μL）を加えた後、室温で４５分間撹拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過した後、ろ液を減圧濃縮し、得られた残渣を薄層シリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル）にて精製することにより、白色粉末として表記化合物（27.8mg）を得た。
1H-NMR(CDCl3)δ(ppm):1.29-1.33(3H,m),2.67(3H,d,J=6.2Hz),2.74-2.79(1H,m),3.85-3.98(1H,m),4.27-4.35(1H,m),4.58-4.66(2H,m),5.31-5.49(2H,m),7.13(1H,d,J=2.5Hz),7.32(1H,s).
ESI/MS(m/z):443(M+H)+,441(M-H)-.
【０２００】
実施例２３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表２１にデータを表２２に示した。
【化２８】
【０２０１】
【表２１】
【０２０２】
【表２２】
【０２０３】
実施例３３
（−）−（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチルアミノ）酢酸
トリフルオロ酢酸塩
（−）−（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチルアミノ）酢酸 ｔ−ブチルエステル（19.0mg）を塩化メチレン（0.25mL）に溶解し、トリフルオロ酢酸（0.25mL）を加え、室温で一晩撹拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残渣を水（1.0mL）に溶解後、凍結乾燥することにより、白色粉末として表記化合物（13.0mg）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ(ppm):2.18-2.42(2H,m),2.64-2.83(4H,m),3.75-3.97(4H,m),4.13-4.23(1H,m),5.30-5.61(2H,m),7.34-7.39(1H,m),7.63(1H,s),9.25(1H,br.s),12.21(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):445(M+H)+,443(M-H)-.
【０２０４】
実施例３３の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表２３にデータを表２４に示した。
【化２９】
【０２０５】
【表２３】
【０２０６】
【表２４】
【０２０７】
実施例３８
［（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］酢酸 塩酸塩
［（２−｛（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］酢酸 ｔ−ブチルエステル（59.0mg）を塩化メチレン（3.0mL）に溶解し、４Ｎ−塩酸／１，４−ジオキサン溶液（3.42mL）を加え、室温で１８時間撹拌した。反応液にジエチルエーテルを加え、析出した結晶をろ取し、ジエチルエーテルで洗浄することにより、白色粉末として表記化合物（52.0mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):2.27-2.43(1H,m),2.68(3H,s),2.75-2.84(1H,m),2.87-3.12(4H,m),3.43-3.52(1H,m),3.73-3.94(2H,m),4.06-4.21(2H,m),5.28-5.51(2H,m),7.16(1H,s),7.39(1H,s).
ESI/MS(m/z):459(M+H)+,457(M-H)-.
【０２０８】
実施例３８の方法を参考に、下記の反応式に従って化合物を合成した。合成した化合物を表２５にデータを表２６〜表２８に示した。
【化３０】
【０２０９】
【表２５】
【０２１０】
【表２６】
【０２１１】
【表２７】
【０２１２】
【表２８】
【０２１３】
実施例７８
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 塩酸塩
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステル（63.0mg）をメタノール（1.0mL）に溶解し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（500μL）を加え、室温で５時間撹拌した。反応液に４Ｎ塩酸／１，４−ジオキサン溶液（500μL）を加え、室温で１時間撹拌した。反応液を減圧濃縮後、得られた残渣に塩化メチレンを加え、不溶物をろ去し、ろ液を減圧濃縮することにより、淡黄白色粉末として表記化合物（57.6mg）を得た。
1H-NMR(DMSO-d6)δ:1.20-1.22(2H,m),1.49-1.69(4H,m),1.91-2.36(6H,m),2.63-2.83(6H,m),3.02-3.18(1H,m),3.56-3.70(1H,m),4.17-4.36(2H,m),5.28(1H,d,J=6.6Hz),7.37(1H,br.s),7.54(1H,br.s),9.62(1H,br.s),12.21(1H,br.s).
ESI/MS(m/z):483(M+H)+,481(M-H)-.
【０２１４】
実施例７９
５−［（２−｛２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 塩酸塩
５−［（２−｛２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステルの代わりに、５−［（２−｛２−［４−（５−クロロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル｝−２−オキソエチル）メチルアミノ］ペンタン酸 メチルエステルを用いて実施例５２と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):1.60-1.81(4H,m),2.02-2.45(6H,m),2.70(3H,d,J=2.9Hz),2.78(3H,d,J=2.9Hz),3.11-3.25(1H,m),3.58-3.82(2H,m),4.20-4.35(1H,m),5.39(1H,d,J=7.0Hz),7.40-7.48(2H,m).
ESI/MS(m/z):499(M+H)+,497(M-H)-.
【０２１５】
実施例８０
［（２−［（２Ｓ，４Ｒ）−4−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール-2-イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）ペンチルアミノ］酢酸
（２−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）ペンチルアミノ］酢酸
ｔ−ブチルエステル（44.6mg）を氷冷下で撹拌中、４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液（391μL）を加えて室温で一晩撹拌した。さらに、４Ｎ塩酸／酢酸エチル溶液（391μL）を加えて室温で27時間撹拌した。反応液にジエチルエーテル（10mL）を加えて30分間撹拌し析出した結晶をろ取し、ジエチルエーテルで洗浄後、減圧下乾燥した。固体に水、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ＝１０とし、酢酸エチルで抽出した。水層に１Ｎ塩酸を加えてｐＨ＝５とし、減圧下濃縮した。残渣にクロロホルムを加え、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、白色粉末として表記化合物（9.2mg）を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):0.85-0.89(3H,m),1.22-1.30(5H,m),1.49-1.62(2H,m),2.28-2.38(1H,m),2.66-2.79(4H,m),2.97-3.12(2H,m),3.48-3.66(2H,m),3.82-4.27(3H,m),5.26-5.52(2H,m),7.12(1H,br.s),7.41(1H,d,J=16.8Hz).
ESI/MS(m/z):515(M+H)+,513(M-H)-.
【０２１６】
実施例８１
［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）ペンチルアミノ］酢酸
（２−［（２Ｓ，４Ｒ）−４−フルオロ−２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）ペンチルアミノ］酢酸
ｔ−ブチルエステルの代わりに、［（２−［２−［４−（５−フルオロチアゾール−２−イルカルバモイル）−５−メチルチオフェン−２−イル］ピロリジン−１−イル］−２−オキソエチル）ペンチルアミノ］酢酸 ｔ−ブチルエステルを用いて実施例８０と同様の方法で反応を行い、表記化合物を得た。
1H-NMR(CD3OD)δ(ppm):0.86-0.90(3H,m),1.29-1.33(4H,m),1.52-1.70(2H,m),2.02-2.44(4H,m),2.69(3H,br.d,J=16.8Hz),3.04-3.18(2H,m),3.57-3.78(4H,m),4.15-4.21(2H,m),5.37(1H,d,J=7.7Hz),7.12(1H,br.s),7.31(1H,br.d,J=7.3Hz).
ESI/MS(m/z):497(M+H)+,495(M-H)-.
【０２１７】
薬理試験例１
(1)ヒト型グルコキナーゼの発現・精製
pQE-80発現ベクターのEcoRI,HindIIIサイトにヒト型GKのN末欠損（1-15アミノ酸欠損）コード領域に同制限酵素サイトを付加したDNA断片を導入した。このプラスミドを用いてE.coliを形質転換し、ヒト型グルコキナーゼを発現させ、次のように精製を行った。
200mlのE.coli培養液から回収した菌体を回収し、20mlのExtraction buffer A(20mM HEPES、pH8.0、1mM MgCl2、150mM NaCl、2mMメルカプトエタノール、0.25mg/mlリゾチーム、50mg/mlアジ化ナトリウム)に懸濁し室温で5分間、静置した。20mlのExtraction buffer B(1.5M NaCl、100mM CaCl2、100mM MgCl2、0.02mg/ml DNA分解酵素1、プロテアーゼ阻害剤錠剤(Complete(登録商標)1697498):バッファー20mlあたり一錠)を加え、室温で5分間、静置した。そして、抽出液を15,000gで30分間、４℃で遠心し、上清を大腸菌抽出液とした。大腸菌抽出液を0.45μmフィルターでろ過し、20mMイミダゾールを含むバッファー（20mM HEPES pH8.0、0.5M NaCl）で平衡化したNi-NTA agarose 2mL bedにアプライした。約10mlの洗浄バッファーで洗浄し、40から500mMのイミダゾールを含むバッファー（20mM HEPES pH8.0、0.5M NaCl）にて段階的に溶出した。各カラムフラクションをSDSゲル電気泳動を用いて分析し、hGK(MW:52KDa)を含んだフラクションを濃縮した。次に濃縮サンプルをSephacryl S-200HR(11/60)ゲルろ過カラムに通し、バッファーB(20mM HEPES、pH8.0、1mM MgCl2、150mM NaCl、1mM DTT)にて溶出した。溶出フラクションをSDSゲル電気泳動にて分析し、hGKを含んだフラクションを濃縮した。最終的に50％グリセロールを添加して‐20℃にて保存した。
【０２１８】
(2)グルコキナーゼ活性化の測定
UV透過性の96ウェルプレートにGK assay mix（25mM Hepes buffer(pH7.1)、25mM KCl、2mM MgCl2、1mM NADP、1mM dithiotheitol、2unit/mL G6PDH、5mM D-glucose、GK適量）を178μl添加した。DMSOに溶解した試験化合物を2μl添加した後、室温で10分間静置し、その後、20mM ATPを20μl添加して反応をスタートさせた。340nmの吸光度をSpectra Max Plusで5分間、30秒間隔、室温で測定し、最初の3分間の反応で化合物評価を行った。試験化合物の最終濃度１０μＭの時の活性を、それを含まないウェルと比較して算出し表２９に示した。その結果、今回試験を行った本発明化合物は、試験化合物を含まないウェルと比較して１０μＭで６００％以上のヒト型GK活性化作用を持つことがわかった。
【０２１９】
【表２９】
【産業上の利用可能性】
【０２２０】
本発明化合物は、グルコキナーゼ活性化作用を有していることから、糖尿病又は糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性神経障害、虚血性心疾患、若しくは動脈硬化等の糖尿病の慢性合併症の予防又は治療剤として有用である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式(I):
【化１】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項２】
前記一般式(I)において、Xが窒素原子、C-F、又はC-Clであり、R1が水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
XがC-F又はC-Clであり、R1が水素原子である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Xが窒素原子であり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基である、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
前記一般式(I)において、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
一般式(II):
【化２】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する］
で表される化合物。
【請求項１０】
一般式(III):
【化３】
［式中、R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R8は水素原子又はアミノ基の保護基を意味する］
で表される化合物。
【請求項１１】
一般式(IV):
【化４】
［式中、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R9は臭素原子又はヨウ素原子を意味する］
で表される化合物。
【請求項１２】
一般式(I):
【化５】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物。
【請求項１３】
有効成分である化合物が前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
有効成分である化合物が前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
糖尿病の予防又は治療のための、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１】
一般式(I):
【化１】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩。
【請求項２】
前記一般式(I)において、Xが窒素原子、C-F、又はC-Clであり、R1が水素原子、C1-C3アルキル基、C1-C3アルコキシ基、又はC1-C3アルキルチオ基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
XがC-F又はC-Clであり、R1が水素原子である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Xが窒素原子であり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基である、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
前記一般式(I)において、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸、C1-C3アルキルスルホニル基、C1-C3アルキルカルボニル基、又はCONH2である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸又はC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
一般式(II):
【化２】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する］
で表される化合物。
【請求項１０】
一般式(III):
【化３】
［式中、R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R8は水素原子又はアミノ基の保護基を意味する］
で表される化合物。
【請求項１１】
一般式(IV):
【化４】
［式中、R7は水素原子又はカルボキシル基の保護基を意味する；R9は臭素原子又はヨウ素原子を意味する］
で表される化合物。
【請求項１２】
一般式(I):
【化５】
［式中、Xは窒素原子又はCR6を、R6は水素原子又はハロゲン原子を意味する；R1は、水素原子、C1-C6アルキル基、C1-C6アルコキシ基、又はC1-C6アルキルチオ基を意味する；R2は水素原子又はフッ素原子を意味する；R3は水素原子又はC1-C6アルキル基を意味する；R4及びR5は、一方が水素原子又はC1-C6アルキル基を意味し、他方がC1-C6アルキレンカルボン酸、C1-C6アルキルスルホニル基、C1-C6アルキルカルボニル基、又はCONH2を意味する］
で表される化合物又はその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物。
【請求項１３】
有効成分である化合物が前記一般式(I)において、XがC-Fであり、R1が水素原子であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子又はC1-C6アルキル基であり、他方がC1-C3アルキレンカルボン酸である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
有効成分である化合物が前記一般式(I)において、Xが窒素原子又はC-Fであり、R1が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R3が水素原子又はC1-C3アルキル基であり、R4及びR5の一方が水素原子であり、他方がC1-C3アルキルスルホニル基である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
糖尿病の予防又は治療のための、請求項１２に記載の医薬組成物。
【公開番号】特開２０１２−６８９９（Ｐ２０１２−６８９９Ａ）
【公開日】平成２４年１月１２日（２０１２．１．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−１５５２８２（Ｐ２０１０−１５５２８２）
【出願日】平成２２年７月７日（２０１０．７．７）
【出願人】（０００１４４５７７）株式会社三和化学研究所 (29)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年１月１２日（２０１２．１．１２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年７月７日（２０１０．７．７）
【出願人】（０００１４４５７７）株式会社三和化学研究所 (29)
【Ｆターム（参考）】
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