新規テクネチウム及びレニウム錯体
本発明は、三脚型リガンドを含む新規放射性テクネチウム及びレニウム錯体を提供する。本発明は、特にＴｃ（Ｉ）錯体を提供する。本発明の放射性テクネチウム及びレニウム錯体の調製に適した新規リガンド、並びに錯体を含む放射性医薬品、その調製用キットも提供する。本発明は、ＳＰＥＣＴイメージングのための本発明の９９ｍＴｃ放射性医薬品の使用にも関する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射性テクネチウム（Ｔｃ）及びレニウム（Ｒｅ）錯体、特にテクネチウム（Ｉ）［Ｔｃ（Ｉ）］系Ｔｃ錯体に関する。本発明では、新規Ｔｃ及びＲｅ錯体だけでなく、錯体の形成に用いるのに適した複数の新規リガンドも提供する。本発明はさらに、新規Ｔｃ及びＲｅ錯体を含む放射性医薬製品、及び放射性医薬品の簡便な調製用のキットに関する。これらの放射性医薬製品の様々な使用も本発明に包含される。
【背景技術】
【０００２】
Ｔｃ及びＲｅの配位化学は、核医学のための新規放射性医薬品の設計及び合成において重要な役割を果たす。９９ｍＴｃ放射性医薬品は核医学の分野で広範な用途を有している。これは、９９ｍＴｃの物理的特性によって外部イメージングのための最も望ましい放射性核種の１つとなっている。９９ｍＴｃは、９９Ｍｏ−９９ｍＴｃジェネレータから容易に得ることができ、６時間の半減期と１４０ｋｅＶの最適エネルギーガンマ放射を有している。その同族化合物が非常に類似した配位パラメータと物理的特性を示すので、Ｒｅ錯体はＴｃ錯体の構造的モデルとなっている。さらに、核１８６Ｒｅ及び１８８Ｒｅは、治療上有用なエネルギーを有するβ−エミッターであるので、それらを有するＲｅ錯体は魅力的な特性を有している。これらの金属との広範囲の錯体が報告されており、そのいくつが現在核医学で用いられている。
【０００３】
ｄ６−低スピンＴｃ（Ｉ）イオンは動力学的に不活性である、すなわち、そうした放射性医薬品はインビボで非常に安定であるので、Ｔｃ（Ｉ）系放射性医薬品は望ましいものである。長年、低酸化状態でＴｃを有する唯一の重要な放射性医薬品は９９ｍＴｃ［ＭＩＢＩ］６＋であった。これは、インビボで安定であるが、化学的置換に適しているとは言いがたい。さらに最近、反応性Ｔｃ（Ｉ）部分の調製のための簡単で迅速な手順が解明され、それにより広範な有機金属化学が容易になることによって、他のＴｃ（Ｉ）放射性医薬品の開発が促されている。この反応性Ｔｃ（Ｉ）部分は［Ｔｃ（ＣＯ）３（Ｈ２Ｏ）３］＋であり、Ａｌｂｅｒｔｏ ｅｔ ａｌ［Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２０ ｐｐ７９８７−８（１９９８）］によって報告されている。高度に不活性なｆａｃ−［Ｔｃ（ＣＯ３）］＋コアと結合した３つの水分子は、複数の官能基によって容易に置換されて、Ｔｃ（Ｉ）イオンの１つの面を封鎖し、Ｔｃ（ＣＯ）３部分を含む安定した錯体を生成することができる。例えば、Ｋｏｔｈａｒｉ ｅｔ ａｌ［Ａｐｐｌ．Ｒａｄ．Ｉｓｏｔ．５８ ｐ５４３−９（２００３）］は、ＮＰ２リガンドが［Ｔｃ（ＣＯ）３（Ｈ２Ｏ）３］＋と反応して安定なキレートを生成することを実証している。
【０００４】
（ｉ）ある範囲の生物学的ベクターと容易に結合し、（ｉｉ）簡単に改変されて中性金属錯体と、一価の正電荷を有する金属錯体の両方を生成し、且つ、（ｉｉｉ）金属錯体の電子特性と溶解性の両方を改変するために、容易に誘導化される安定した金属錯体をもたらすテクネチウム及びレニウム放射性医薬品がさらに開発されると有利である。
【０００５】
三脚型リガンドトリス（２−ピリジル）メチルアミンと、その誘導体のいくつかが、Ａｒｎｏｌｄ ｅｔ ａｌ［ＪＣＳ Ｄａｌｔｏｎ Ｔｒａｎｓ．ｐｐ７３６−４６（２００１）］により報告されている。この報告は、リガンドの銅（ＩＩ）及び亜鉛（ＩＩ）との錯体を、様々な錯体の配位様式を示すための結晶構造と合わせて開示している。しかし、開示されたリガンドが放射性テクネチウム及びレニウム錯体の提供に有用であるとはＡｒｎｏｌｄによって示唆されていない。
【非特許文献１】Ａｌｂｅｒｔｏ ｅｔ ａｌ， Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２０ ｐｐ７９８７−８（１９９８）
【非特許文献２】Ｋｏｔｈａｒｉ ｅｔ ａｌ， Ａｐｐｌ．Ｒａｄ．Ｉｓｏｔ．５８ ｐ５４３−９（２００３）
【非特許文献３】Ａｒｎｏｌｄ ｅｔ ａｌ， ＪＣＳ Ｄａｌｔｏｎ Ｔｒａｎｓ．ｐｐ７３６−４６（２００１）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、三脚型リガンドを含む新規テクネチウム及びレニウム錯体を提供する。本発明で用いる三脚型リガンドは、従来技術の金属錯体を凌駕する優れた特性を示す金属錯体を形成する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
第１の態様では、本発明は式Ｉのリガンドの金属錯体を提供する。
【０００８】
【化１】
式中、
Ｒ１はＥ基又は−ＣＨ２（ＡＲ５）であり（ＡはＳ又はＯであり、Ｒ５はＨ又はＣ１〜６アルキルである。）、
Ｒ２及びＲ３は各々独立にＥ基であり、
Ｅは適宜置換Ｃ３〜１０窒素含有ヘテロアリール環であり、
Ｒ４は−（Ｚ）ｑ−Ｙであり
（式中、各Ｚは独立に、−ＣＱ２−、−ＣＱ＝ＣＱ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＱ２ＣＯ２−、−ＣＯ２ＣＱ２−、−ＮＱ−、−ＮＱＣＯ−、−ＣＯＮＱ−、−ＮＱ（Ｃ＝Ｏ）ＮＱ−、−ＮＱ（Ｃ＝Ｓ）ＮＱ−、−ＳＯ２ＮＱ−、−ＮＱＳＯ２−、−ＣＱ２ＯＣＱ２−、−ＣＱ２ＳＣＱ２−、−ＣＱ２（ＮＱ）ＣＱ２−、Ｃ４〜８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４〜８シクロアルキレン基、Ｃ５〜１２アリーレン基又はＣ３〜１２ヘテロアリーレン基、アミノ酸若しくは単分散ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロックであり、但し、各Ｑは独立に、Ｈ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４アルコキシアルキル又はＣ１〜４ヒドロキシアルキルから選択され、
ｑは０〜１０の値の整数であり、
ＹはＨ、アミノ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ３〜２０アルキルアリール、Ｃ６〜１４アリール、Ｃ３〜１２複素環、Ｃ２〜１０アルコキシアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０アミノアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０アルコキシ、Ｃ１〜１０アシルオキシ、Ｃ６〜１０アリールオキシ又はＣ６〜１０アロイルオキシであるか、或いはＹは生体ターゲティング部分である。）、
上記金属がテクネチウム又はレニウムの放射性同位体であり、上記リガンドの５つの可能な原子のうちの３つ以下が錯化に関与する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明における「金属錯体」は、そのリガンドが式Ｉからなり、その中央の金属がＴｃ又はＲｅの同位体である比較的安定した配位錯体を意味する。その金属がＴｃの同位体である場合、９９ｍＴｃ又は９４ｍＴｃであることが好ましく、その場合本発明のＴｃ錯体は、各々単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）又は陽電子放出型断層撮影法（ＰＥＴ）によるインビボでの診断用イメージングに適している。金属がＲｅの同位体である場合、好ましくは１８６Ｒｅ又は１８８Ｒｅであり、したがって治療に適している。金属錯体が「トランスキレーション耐性」、すなわち、金属配位部位について他の潜在的に競合するリガンドとのリガンド交換を容易には起こさないことが非常に好ましい。
【００１０】
本発明の「窒素含有ヘテロアリール環」は、１個以上の窒素原子、好ましくは１個又は２個のＮ原子、最も好ましくは１つのＮ原子を含む任意の単環式又は縮合型芳香族環構造である。本発明の好ましい窒素ヘテロアリール基は、５員及び６員の窒素含有環構造を含み、その例は、ピリジル、イミダゾイル、ピリミジン、ピロール、オキサゾール及びピラゾイル環、さらにはキノリンなどのその縮合環類似体である。窒素含有ヘテロアリール環の関連では、「置換」という用語は、１つ以上の有機置換基が、窒素において或いは環内のどこかで窒素含有ヘテロアリール環と結合していることを意味する。適切な有機置換基の例には、Ｃ１〜６アルキル、アミノ、ニトロ、ハロ、カルボキシ、スルホネート及びＣ６〜１４アリールが含まれる。
【００１１】
「生体ターゲティング部分」は、本発明では、金属錯体を哺乳動物の体内の特定の部位へ移送するための手段として機能する分子として定義される。その場合、金属錯体は放射性医薬品である。哺乳動物の体内の部位は特定の病態の部位であるのが好ましい。適切な生体ターゲティング部分には、直鎖ペプチド若しくは環状ペプチド又はその組合せであってよい３−１００ｍｅｒペプチド又はプチド類似体；モノクローナル抗体又はその断片；或いは、酵素基質又は阻害剤；合成による受容体結合化合物；オリゴヌクレオチド又はオリゴ−ＤＮＡ若しくはオリゴ−ＲＮＡ断片が含まれる。生体ターゲティング部分は、合成由来のものでも天然由来のものでもよいが、合成由来のものが好ましい。「合成」という用語は慣用的な意味の用語、すなわち天然資源、例えば哺乳動物の身体から単離されるものに対抗する人工的なものを意味する。そうした化合物は、その製造及び純度プロファイルを完全に制御できるという利点を有している。「環状ペプチド」という用語は、ペプチド若しくはジスルフィド結合、又はチオエーテル、ホスホジエステル、ジシロキサン若しくはウレタン結合などの合成の非ペプチド結合であってよい共有結合によって、２つの末端アミノ酸が互いに結合している５〜１５個の配列のアミノ酸を意味する。
【００１２】
「アミノ酸」という用語は、Ｌ−アミノ酸若しくはＤ−アミノ酸、アミノ酸類似体又はアミノ酸模倣体を意味し、それらは天然由来であっても純粋に合成由来であってもよく、光学的に高純度であるすなわち単一の光学異性体、したがってキラルであるか、また、光学異性体の混合物であってもよい。本発明のアミノ酸は光学的に高純度であるのが好ましい。「アミノ酸模倣体」という用語は、それが同配体である、すなわち天然化合物の立体的構造及び電子的構造を模倣するように設計された天然由来のアミノ酸の合成類似体を意味する。そうした同配体は、当業者に周知であり、これらに限定されないが、デプシペプチド、レトロインベルソペプチド、チオアミド、シクロアルカン又は１，５−二置換テトラゾールを含む［Ｍ．Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，２４，１３７，（１９８５）を参照されたい］。
【００１３】
本発明での使用に適したペプチドとしては、以下のものが挙げられる。
・ソマトスタチン、オクトレオチド及び類似体。
・ＳＴ受容体に結合するペプチド。ここで、ＳＴとは大腸菌その他の微生物の産生する熱安定性毒素をいう。
・ラミニン断片、例えばＹＩＧＳＲ、ＰＤＳＧＲ、ＩＫＶＡＶ、ＬＲＥ及びＫＣＱＡＧＴＦＡＬＲＧＤＰＱＧ。
・白血球集積のターゲティング部位用のＮ−ホルミルペプチド。
・血小板因子４（ＰＦ４）及びその断片。
・ＲＧＤ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）含有ペプチド。これは例えば血管新生をターゲティングし得る（Ｒ．Ｐａｓｑｕａｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１９９７ Ｊｕｎ；１５（６）：５４２−６；Ｅ．Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ， Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ． １９９７ Ｍａｙ；５１（５）：１４１３−７）。
・α２−抗プラスミン若しくはフィブロネクチン若しくはβ−カゼイン、フィブリノーゲン又はトロンボスポンジンのペプチド断片。α２−抗プラスミン、フィブロネクチン、β−カゼイン、フィブリノーゲン及びトロンボスポンジンのアミノ酸配列は以下の引用文献に記載されている：α２−抗プラスミン前駆体（Ｍ．Ｔｏｎｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅｍ，１０２，１０３３，（１９８７））；β−カゼイン（Ｌ．Ｈａｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ， Ｇｅｎｅ，１３９，１９３，（１９９４））；フィブロネクチン（Ａ．Ｇｕｔｍａｎ ｅｔ ａｌ， ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．，２０７，１４５，（１９９６））；トロンボスポンジン−１前駆体（Ｖ．Ｄｉｘｉｔ ｅｔ ａｌ， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，８３，５４４９，（１９８６））；Ｒ．Ｆ．Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ， Ａｎｎ． Ｒｅｖ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５３，１９５，（１９８４）。
・アンジオテンシンＩＩ：Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（Ｅ．Ｃ．Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．，１９７９，Ｖｏｌ ２２，９，１０３８−１０４４）、［Ｓａｒ，Ｉｌｅ］アンジオテンシンＩＩ：Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ（Ｒ．Ｋ．Ｔｕｒｋｅｒ ｅｔ ａｌ， Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７２，１７７，１２０３）のようなアンジオテンシンの基質又は阻害剤であるペプチド。
・アンジオテンシンＩ：Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ。
【００１４】
好ましくは、本発明のペプチドは抗プラスミン又はアンジオテンシンＩＩペプチドを含む。抗プラスミンペプチドは、Ｎ末端からみて以下のアミノ酸配列を含む。
（ｉ）α２−抗プラスミン
ＮＨ２−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−ＯＨ、又はその変異体で１以上のアミノ酸が交換、付加又は除去されたもの、例えば、
ＮＨ２−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
ＮＨ２−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
ＮＨ２−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨなど、或いは
（ｉｉ）カゼイン
Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ。
【００１５】
本発明の合成ペプチドは、Ｐ．Ｌｌｏｙｄ−Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｆ．Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ ａｎｄ Ｅ．Ｇｉｒａｌｄ； Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｔｈｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９９７に記載されているように、通常の固相合成法で得ることができる。
【００１６】
適当な酵素の基質、アンタゴニスト又は阻害剤としては、グルコース並びにフルオロデオキシグルコースのようなグルコース類似体、脂肪酸、又はエラスターゼ若しくはアンジオテンシンＩＩ若しくはメタロプロテアーゼ阻害剤が挙げられる。好ましい非ペプチド系アンジオテンシンＩＩアンタゴニストはロサルタンである。
【００１７】
適当な受容体結合性化合物としては、エストラジオール、エストロゲン、プロゲスチン、プロゲストロンその他のステロイドホルモン、ドーパミンＤ−１若しくはＤ−２受容体、又はトロパンのようなドーパミン輸送体、並びにセロトニン受容体に対するリガンドが挙げられる。
【００１８】
生体ターゲティング部分は好ましくは分子量５０００未満のもの、最も好ましくは４０００未満のもの、理想的には３０００未満のものである。好ましい生体ターゲティング部分は３〜２０量体ペプチド又は酵素基質、酵素アンタゴニスト若しくは酵素阻害剤である。
【００１９】
錯体を放射性医薬品として用いる場合、リンカー基（Ｚ）ｑの性状は金属錯体の生体内分布を変化させるためにも使用できる。例えば、（Ｚ）ｑにエーテル基を導入すると、血漿タンパク質の結合を最小限にすることが容易になる。（Ｚ）ｑがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロック又はアミノ酸残基１〜１０個のペプチド鎖を含むと、リンカー基はインビボでの造影剤の薬物動態及び血液クリアランス速度を変化させる機能をもつことができる。かかる「バイオモディファイアー」のリンカー基はバックグラウンド組織、例えば筋肉又は肝臓及び／又は血液からの放射性金属造影剤のクリアランスを加速し、バックグラウンドの干渉の低減による良好な診断画像をもたらす。バイオモディファイヤーリンカー基は、肝臓経由ではなく、例えば腎臓経由での特定の排出経路に好都合なように用いることもできる。（Ｚ）ｑがアミノ酸残基のペプチド鎖を含む場合、アミノ酸残基はグリシン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸又はセリンから選択されるのが好ましい。ペプチド鎖中のアミノ酸の数は、好ましくは１〜１０個、最も好ましくは１〜３個である。（Ｚ）ｑがＰＥＧ部分を含む場合、それは式（−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）Ｗの基を含むのが好ましい。但し、ｗは３〜２５の値の整数である。整数ｗは６〜２２であるのが好ましい。特に好ましいＰＥＧ−含有（Ｚ）ｑ基は、単分散ＰＥＧ様構造の重合により得られる単位、１７−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５−テトラオキサヘプタデカン酸式Ｉａである。
【００２０】
【化２】
式中、ｐは１〜１０の整数である。
【００２１】
各Ｅ基は適宜置換Ｃ３〜６の窒素含有ヘテロアリール環であるのが好ましい。好ましいＥ基はピリジル、イミダゾイル及びピラゾイルから選択され、２−ピリジルが特に好ましい。
【００２２】
式Ｉの好ましい実施形態は、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の各々がＥ基であり、好ましいＥ基は上記記載と同様である。この実施形態では、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々対称性三脚型リガンドをもたらす同一Ｅ基であることが好ましく、各々が２−ピリジルであることが最も好ましい。
【００２３】
Ｒ４は式−ＮＨ（ＣＯ）−（Ｚ）ｘ−Ｙ（ｘは０〜９の値の整数である。）の官能化アシル置換基であるのが好ましい。Ｒ４位におけるリガンドの簡便な官能化を可能にし、アシル基がＲ１、Ｒ２及びＲ３基の供与体原子と競合しないので、そうしたアシル置換基が好ましい。このような競合は、Ｒ４がアミノ（すなわちｑ＝０であり、Ｙはアミノである。）である場合、金属配位の際、アミン基が５環指向のキレートを形成することもできるので、問題となる可能性がある。
【００２４】
式Ｉのリガンドの好ましい金属錯体では、金属はＲ１基のＡ原子とＥ基のヘテロアリール環の窒素原子を介して配位し、それによってリガンドは三脚型キレート剤として作用する。
【００２５】
上記に概要を示した本発明の第１の態様の好ましい実施形態は、＋１の酸化状態を有する金属錯体である。これらの錯体は、ｄ６−低スピンＴｃ（Ｉ）イオンの動力学的不活性度が低いので、金属がテクネチウムである場合が特に興味深い。さらに、リガンドをある範囲の生体ターゲティング分子で誘導化して、得られる錯体をある範囲の応用分野で使用できるようにすることが可能である。合成手順の重要な利点は、三脚型リガンドを容易に改変して、中性錯体と荷電錯体の両方を生成できるという点である。したがって、式（Ｉ）では、Ｒ１が−ＣＨ２（ＡＲ５）である場合、ＡはＳであるのが好ましい。Ｒ１が−ＣＨ２（ＳＲ５）である場合、荷電されていないリガンドが望ましく、Ｒ５は好ましくはＣ１〜３アルキルであり、−ＣＨ２（ＳＣＨ３）、−ＣＨ２（ＳＣ２Ｈ５）又は−ＣＨ２（ＳＣ３Ｈ７）であることが最も好ましい。Ｒ１がＣＨ２（ＳＲ５）である場合、負に荷電したリガンドが望ましく、Ｒ５はＨ、すなわちＲ１は−ＣＨ２ＳＨであるのが好ましい。
【００２６】
本発明の放射性金属錯体は、適切な酸化状態のもと、適切なｐＨで放射性金属の溶液を式Ｉのリガンドと反応させることによって調製することができる。その溶液は、好ましくは、金属と弱く錯体をつくるリガンド（グルコン酸塩又はクエン酸塩など）を含む、すなわち、放射性金属錯体はリガンド交換又はトランスキレーションにより調製する。そうした状態は、金属イオンの加水分解などの望ましくない副反応を抑制するのに有用である。放射性金属イオンが９９ｍＴｃである場合、出発材料は通常９９Ｍｏジェネレータからの過テクネチウム酸ナトリウムである。テクネチウムは、比較的反応性が低いＴｃ（ＶＩＩ）酸化状態の過テクネチウム酸９９ｍＴｃで存在する。したがって、より低い酸化状態のＴｃ（Ｉ）〜Ｔｃ（Ｖ）のテクネチウム錯体の調製は、通常、亜ジチオン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）などの適切な薬学的に許容される還元剤を加えて、錯化を容易にさせる必要がある。薬学的に許容される還元剤は、好ましくはスズ塩、最も好ましくは塩化スズ、フッ化スズ又は酒石酸スズである。
【００２７】
９９ｍＴｃ金属錯体の調製のさらなる詳細はＭｅａｓｅ ｅｔ ａｌ［Ｓｅｍｉｎ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，３１（４），２７８−２８５（２００１）］に記載されている。放射性レニウム金属錯体の調製のさらなる詳細はＨａｓｈｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ［Ｃｈａｐｔｅｒ ９ ｐａｇｅｓ２７５−２９１ ｉｎ “Ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ ａｎｄ Ｒｈｅｎｉｕｍ：Ｔｈｅｉｒ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ｉｔｓ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”，Ｙｏｓｈｉｈａｒａ ａｎｄ Ｏｍｏｒｉ（Ｅｄｓ），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｂｅｒｌｉｎ（１９９６）］に記載されている。本発明の９９ｍＴｃ錯体の好ましい調製方法は、以下の第５の実施形態で述べる凍結乾燥キットの使用によるものである。
【００２８】
第２の態様では、本発明は式ＩＩの金属錯体を提供する。
【００２９】
［ＬＭＸ３］ｎ （ＩＩ）
式中、Ｌは第１の実施形態で定義した式Ｉのリガンドであり、
Ｍはテクネチウム又はレニウムの放射性同位体であり、
ＸはＣＯ、ハロゲン、ホスフィン又はイソニトリルから選択され、
ｎは金属錯体の電荷であり、−１、０、＋１又は＋２であってよい。
【００３０】
Ｘがイソニトリルである場合、それは単座イソニトリルであることが適切である。３つのすべてのＸ基がホスフィンである場合、その３つのＸ供与体原子は、３つの単座ホスフィン、単一の三座ホスフィン又は単座ホスフィンと二座ホスフィンの混合物からなることができる。
【００３１】
式ＩＩの金属錯体（ｎ）の電荷は、リガンド（Ｌ）に存在する供与体原子とＸの実体によることになる。したがって、例えばＸがＣＯ、ホスフィン又はイソニトリルである場合、これらは中性の供与体であり、電荷に影響を及ぼさない。しかし、Ｘがハロゲンである場合、これらは負に荷電した供与体である。式ＩのリガンドのＲ１が−ＣＨ２ＳＨである場合、チオールアニオンを介して金属錯化が起こる、すなわち、チオールが脱プロトン化され、それによってリガンドが単一の負の電荷を担持することが予想される。
【００３２】
式ＩＩの金属錯体は、第１の実施形態（上記）に加えて、Ｂａｒｒｅｒａ ｅｔ ａｌ［Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３５，３３５−３４１（１９９６）］の方法で調製することができる。
【００３３】
式ＩＩの好ましいＸ基はＣＯ（すなわちカルボニル基）である。これは、以下に述べる式ＩＩａの荷電錯体及び式ＩＩｂの中性錯体に相当する。
【００３４】
［ＬＭ（ＣＯ）３］ｎ （ＩＩａ）
式中、Ｍは式ＩＩの定義と同様であり、
Ｌは上記定義と同様の式Ｉのリガンドであり、
但し、Ｒ１はＥ基又は−ＣＨ２（ＡＲ５）（Ｒ５はＣ１〜６アルキルである。）であり、
Ｒ４はアミノ又は−（Ｚ）ｑ−Ｙ（Ｚ、ｑ及びＹは請求項１で定義した通りである。）であり、
ｎは＋１又は＋２である。
【００３５】
式ＩＩａの好ましい金属錯体は第１の実施形態（上記）で述べた好ましいリガンドを含む。ｎは＋１であるのが好ましい。式ＩＩａのＲ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジルであり、Ｒ４が式−ＮＨ（ＣＯ）−（Ｚ）ｘ−Ｙ（式ＩＩについて上記したのと同様にｘは０〜９の値の整数である。）の官能化アシル置換基であるのが好ましい。Ｙが生体ターゲティング部分でない場合、Ｙは好ましくはアミノ、フェニル、ピリジル、ピペリジニル又はイミダゾイルである。Ｒ４は−ＮＨ（ＣＯ）Ｐｈ、−ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）３−（ＣＯ）ＮＨＣＨ２Ｐｈ、−ＮＨ（ＣＯ）（３−ピリジル）、−ＮＨ（ＣＯ）（４−ピリジル）、−ＮＨ（ＣＯ）ＣＨ２−ピペリジニル、−ＮＨ（ＣＯ）ＮＨ２又は−ＮＨ（ＣＯ）（２，４−イミダゾイル）であることが最も好ましい。
【００３６】
式ＩＩの他の好ましい金属錯体はＩＩｂの中性錯体である。
【００３７】
ＬＭ（ＣＯ）３ （ＩＩｂ）
式中、Ｍは式ＩＩの定義と同様であり、
ＬはＲ１が−ＣＨ２ＳＨ又は−ＣＨ２ＯＨである式Ｉのリガンドであり、
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は式Ｉで定義した通りである。
【００３８】
式ＩＩｂのＲ１は−ＣＨ２ＳＨであり、ＬのＲ２及びＲ３は各々２−ピリジルであるのが好ましい。
【００３９】
金属に配位した際、−ＣＨ２ＳＨ又は−ＣＨ２ＯＨが脱プロトン化される結果、金属錯体は中性である。
【００４０】
式ＩＩ、ＩＩａ及びＩＩｂでは、Ｍは９４ｍＴｃ、９９ｍＴｃ、１８６Ｒｅ又は１８６Ｒｅであることが好ましく、９９ｍＴｃであることが最も好ましい。
【００４１】
各ＸがＣＯであり、Ｍが９９ｍＴｃである場合、本発明の第２の態様の錯体は、Ｓｃｈｉｂｌｉ ｅｔ ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，１１，ｐ３４５−３５１（２０００）］及びＫｏｔｈａｒｉ ｅｔ ａｌ［Ａｐｐｌ．Ｒａｄ．Ｉｓｏｔｏｐ．，５８，５４３−５４９（２００３）］に記載されている９９ｍＴｃ（ＣＯ）３（（Ｈ２Ｏ）３＋前駆体から好都合に調製することができる。本発明のＴｃ錯体を形成させるために、前駆体の３つの水分子を、式Ｉのリガンドの供与体原子で容易に置き換えることができる。非臨床用の使用のための９９ｍＴｃ（ＣＯ３）（Ｈ２Ｏ）３＋前駆体は、Ｉｓｏｌｉｎｋ（商標）キット（Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｐｅｔｔｅｎ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）を用いても得ることができる。続く、本発明のリガンドとの［９９ｍＴｃ（ＣＯ３）（Ｈ２Ｏ）３］＋の反応により、本発明の９９ｍＴｃ錯体が形成される。対応するレニウム金属錯体はＰｉｅｔｚｓｃｈ ｅｔ ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，１１，ｐ４１４−４２４（２０００）］の方法で調製することができる。
【００４２】
式ＩＩａの金属錯体のいくつかの例を図１に示す。
【００４３】
第３の態様では、本発明は、Ｒ１が、−ＣＨ２ＳＣＨ３であるか、又は２−ピリジル若しくは２−キノリン環を含み、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル環を含む場合、Ｒ４はＨ、−ＣＨ２ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ２又は−ＮＨ（ＣＯ）ＲＸ（ＲＸはＣ１〜１２アルキル、Ｃ１〜４カルボキシアルキル又は−Ｃ６Ｈ４ＳＯ３Ｈである。）ではない前提で、式Ｉで定義したリガンドを提供する。
【００４４】
第３の実施形態の１つの好ましい部類のリガンドは、Ｒ１が−ＣＨ２ＳＨ又は−ＣＨ２ＯＨであるものである。そうしたリガンドは、（ｉ）Ｒ１が−ＣＨ２ＳＨであり、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含むか、或いは（ｉｉ）Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含むものであることがより好ましい。最も好ましいリガンドはＲ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含むものである。
【００４５】
第３の実施形態の好ましいＲ４基は、Ｙが−（ＣＨ２）ｍＮＨ２（ｍは１〜６、好ましくは２〜４の値の整数である。）であるか、或いは生体ターゲティング部分、すなわちリガンドの生体ターゲティング部分とのコンジュゲートであるものである。他の好ましいＲ４基は、Ｙがアミノ置換フェニル、ピリジル、ピペリジル又はイミダゾイルであるものである。
【００４６】
本発明のリガンドはＡｒｎｏｌｄ ｅｔ ａｌ［ＪＣＳ Ｄａｌｔｏｎ Ｔｒａｎｓ．，７３６−７４６（２００１）］の方法によって調製することができる。Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含み、Ｒ４がＨである場合、Ｋｏｄｅｒａ ｅｔ ａｌ［Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４２，１１９３−１２０３（２００３）］に教示されているように、橋頭プロトン（Ｒ４基）をブチルリチウムで脱プロトン化し、続いてアルキルハライドでアルキル化することができる。生体ターゲティング部分とのコンジュゲートを含むその官能化タイプも、二官能性キレートのアプローチで調製することができる。したがって、それに官能基（それぞれ「二官能性リンカー」又は「二官能性キレート」）が結合しているリガンド又はキレート剤を調製することはよく知られている。結合される官能基には、アミン、チオシアネート、マレイミド、及びＮ−ヒドロキシスクシンイミドなどの活性エステル又はペンタフルオロフェノールが含まれる。本発明のリガンド１はアミン官能化二官能性キレートの例である。テクネチウム又はレニウムのトリカルボニルコアへの錯化に適した二官能性キレートは、Ｓｔｉｃｈｅｌｂｅｒｇｅｒ ｅｔ．ａｌ［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．，３０，４６５−４７０（２００３）］に記載されている。かかる二官能性キレートは、生体ターゲティング部分の適当な対応官能基と反応して所望のコンジュゲートを形成する。結合する化合物の適当な官能基としては、（アミン官能化二官能性キレーターとのアミド結合形成のための）カルボキシル、（カルボキシル又は活性エステル官能化二官能性キレーターとのアミド結合形成のための）アミン、（アミン官能化二官能性キレーターのＮアルキル化のための）ハロゲン、メシレート及びトシレート、並びに（マレイミド官能化二官能性キレーターとの反応のための）チオールが挙げられる。
【００４７】
本発明のリガンドの合成の詳細は、実施例１〜４に記載されている。
【００４８】
第４の態様では、本発明は、上述のいずれかの態様及び実施形態の本発明の金属錯体を生体適合性担体と共に哺乳動物、特にヒトへの投与に適した形態で含む放射性医薬品を提供する。「生体適合性担体」とは、造影剤を懸濁又は溶解できる流体、特に液体であって、組成物が生理学的に認容できるもの、つまり毒性も耐え難い不快感も伴わずに哺乳類の身体に投与することができるものである。生体適合性担体は好適には注射可能な担体液であり、例えば、発熱物質を含まない注射用の滅菌水、食塩液のような水溶液（これは注射用の最終製剤が等張性又は非低張性となるように調整するのに都合がよい）、１種以上の張度調節物質（例えば血漿カチオンと生体適合性対イオンとの塩）、糖類（例えばグルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えばソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えばグリセロール）その他の非イオン性ポリオール材料（例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液である。
【００４９】
かかる放射性医薬品は、好適には、無菌状態を維持しながら皮下注射針で一回又は複数回穿刺するのに適したシール（例えばクリンプオン式セプタムシール蓋）を備えた容器に入れて供給される。かかる容器には、１回又は複数回分の用量を入れることができる。好ましい多用量容器は、複数回分の用量を収容した単一バルクバイアル（例えば容積１０〜３０ｃｍ３のもの）からなり、臨床症状に応じて製剤の有効期間中様々な時間間隔で１回分の用量を臨床グレードの注射器に引き出すことができる。プレフィルド型注射器は１回分の用量を収容するように設計され、そのため好ましくは使い捨て又はその他臨床用に適した注射器である。プレフィルド型注射器は、適宜、オペレーターを放射能から保護するため、注射器シールドを備えていてもよい。かかる適当な放射性医薬品注射器シールドは当技術分野で公知であり、好ましくは鉛又はタングステンからなる。
【００５０】
本発明の好ましい放射性医薬品はテクネチウム放射性同位体９９ｍＴｃ又は９４ｍＴｃを含み、最も好ましくは９９ｍＴｃを含む。テクネチウム同位体が９９ｍＴｃである場合、画像診断用放射性医薬品に適した放射能含量は、生体内の撮像部位、取込み量及び標的／バックグラウンド比に応じて、１８０〜１５００ＭＢｑの９９ｍＴｃである。
【００５１】
式ＩＩのＸがＣＯである場合、本発明の９９ｍＴｃ放射性医薬品の調製は、まず［９９ｍＴｃ（ＣＯ３）（Ｈ２Ｏ）３］＋を上述の通り調製する。続いて、［９９ｍＴｃ（ＣＯ３）（Ｈ２Ｏ）３］＋を本発明のリガンドと反応させると本発明の９９ｍＴｃ錯体が得られる。いずれの段階も無菌条件下で実施するか、或いは最終的に滅菌する。
【００５２】
第５の態様では、本発明は、上述の放射性医薬組成物を調製するための非放射性キットであって、第１の実施形態で定義した式（Ｉ）のリガンドを含むキットを提供する。放射性金属が９９ｍＴｃである場合、キットは好適には生体適合性還元剤をさらに含む。かかるキットは、例えば血流への直接注射によるヒトへの投与に適した無菌放射性医薬製剤を与えるように設計される。９９ｍＴｃ用には、キットは好ましくは凍結乾燥したもので、９９ｍＴｃ放射性同位体ジェネレータからの無菌９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸（ＴｃＯ４−）で再構成すればそれ以上操作しなくてもヒトへの投与に適した溶液が得られるように設計される。適当なキットは、遊離塩基又は酸塩の形態のキレーターコンジュゲートを亜ジチオン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、第一スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）のような生体適合性還元剤と共に収容した容器（例えばセプタムシールバイアル）を備える。生体適合性還元剤は、好ましくは塩化第一スズや酒石酸第一スズのような第一スズ塩である。或いは、キットは、放射性金属を添加するとトランスメタレーション（金属交換）を起こして所望の生成物を与える金属錯体を適宜含んでいてもよい。
【００５３】
非放射性キットはさらに、トランスキレーター、放射線防護剤、抗菌保存剤、ｐＨ調節剤又は充填剤のような追加成分を適宜含んでいてもよい。「トランスキレーター」とは、テクネチウムと迅速に反応して弱い錯体を形成し、次に上記リガンドで置換される化合物である。これはテクネチウム錯化と競合する過テクネチウム酸塩の迅速な還元に起因した還元型加水分解テクネチウム（ＲＨＴ）が形成するおそれを最小限に抑制する。かかる適当なトランスキレーターは、弱有機酸（つまりｐＫａが３〜７の範囲内にある有機酸）と生体適合性カチオンとの塩である。適当な弱有機酸は、酢酸、クエン酸、酒石酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、フェノール又はホスホン酸である。従って、適当な塩は、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩、フェノラート又はホスホン酸塩である。好ましい塩は、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩又はホスホン酸塩であり、最も好ましくはホスホン酸塩、特にジホスホン酸塩である。好ましいトランスキレーターは、ＭＤＰ（メチレンジホスホン酸）と生体適合性カチオンとの塩である。
【００５４】
「放射線防護剤」という用語は、水の放射線分解で生成する含酸素フリーラジカルのような反応性の高いフリーラジカルを捕捉することによって、酸化還元プロセスのような分解反応を阻害する化合物をいう。本発明の放射線防護剤は、好適には、アスコルビン酸、パラアミノ安息香酸（即ち４−アミノ安息香酸）、ゲンチシン酸（即ち２，５−ジヒドロキシ安息香酸）並びにこれらと上述の生体適合性カチオンとの塩から選択される。
【００５５】
「抗菌保存剤」という用語は、細菌、酵母又はカビなどの有害微生物の増殖を阻害する薬剤を意味する。抗菌保存剤は、濃度に応じてある程度の殺菌作用を示すこともある。本発明の抗菌保存剤の主な役割は、再構成後の放射線医薬組成物（つまり、放射性診断薬自体）における微生物の増殖を阻害することである。ただし、抗菌保存剤は、再構成前の本発明の非放射性キットの１以上の成分における有害微生物の増殖の防止にも適宜使用できる。適当な抗菌保存剤としては、パラベン類、即ちメチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン又はこれらの混合物、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオメルサールが挙げられる。好ましい抗菌保存剤はパラベンである。「ｐＨ調節剤」という用語は、再構成したキットのｐＨが、ヒト又は哺乳類の投与に関する許容範囲（約ｐＨ４．０〜１０．５）内に収まるようにするのに有用な化合物又は化合物の混合物を意味する。かかる適当なｐＨ調節剤としては、トリシン、リン酸塩又はＴＲＩＳ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）のような薬学的に許容される緩衝剤、並びに炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はこれらの混合物などの薬学的に許容される塩基が挙げられる。コンジュゲートを酸塩の形態で用いる場合、キットのユーザーが多段階法の一部としてｐＨを調節できるようにｐＨ調節剤を適宜別のバイアル又は容器で提供してもよい。
【００５６】
「充填剤」という用語は、製造時及び凍結乾燥時の材料の取扱いを容易にする薬学的に許容される増量剤を意味する。適当な充填剤としては、塩化ナトリウムのような無機塩並びに水溶性糖類又は糖アルコール、例えばスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースが挙げられる。
【００５７】
第６の態様では、本発明は、ＳＰＥＣＴイメージングのための放射性金属がガンマエミッターである本発明の放射性医薬品の使用に関する。対象への放射性医薬品の投与に続いて、対象内での放射性医薬品の分配がガンマカメラで検出される。それによって分配を示す画像が得られる。
【実施例】
【００５８】
本発明を以下に詳述する非限定的実施例により説明する。実施例１〜４ではリガンド２〜８の合成を提供する。実施例５はリガンド６の９９ｍＴｃ−トリカルボニル錯体の調製方法を提供する。放射線化学的純度（ＲＣＰ）は９８％であった。実施例４はリガンド１、２、４、５及び６の９９ｍＴｃ−トリカルボニル錯体の調製方法を提供する。
【００５９】
実験
リガンド１［すなわち１，１，１−トリス（ピリジン−２−イル）メチルアミン］をＡｒｎｏｌｄ ｅｔ ａｌ［ＪＣＳ Ｄａｌｔｏｎ Ｔｒａｎｓ．，７３６−７４６（２００１）］の方法で調製した。
【００６０】
実施例１： リガンド２の合成
無水安息香酸（２８０ｍｇ、１．２４ミリモル）を、ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍｌ）中のリガンド１（２５０ｍｇ０．９５ミリモル）の撹拌溶液に、室温で一括して加えた。撹拌を２４時間続行し、反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１８ｍｌ）で希釈した。この溶液を飽和重炭酸ナトリウム液（２０ｍｌ×２）及び水（２０ｍｌ×２）で洗浄し、次いで脱水し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を蒸発させて黄色残留物を得た。この材料を、ＣＨ２Ｃｌ２／ペンタン混合液から再結晶化させて生成物（１８０ｍｇ、５２％）を黄色粉末、ｍｐ２３３〜２３４℃として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δＨ ７．１０〜７．１７（３Ｈ，ｍ，５−Ｈ）、７．４１〜７．５１（３Ｈ，ｍ，４−Ｈ）、７．５９〜７．６４（６Ｈ，ｍ，３−Ｈ［ｘ２］，メタ−Ｈ［ｘ２］，パラ−Ｈ）、８．０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７及び２Ｈｚ，オルト−Ｈ［ｘ２］）、８．５３（３Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，６−Ｈ［ｘ３］）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２３Ｈ１９Ｎ４Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３６７ 実測値：３６７
実施例２： リガンド３及び４の合成
塩化チオニル（５．０ｇ、４２ミリモル）とニコチン酸（６２０ｍｇ、５．０ミリモル）を還流下で３時間加熱し、次いで過剰の試薬を減圧下で除去して白色残留物を得た。この残留物を、減圧下でトルエン（２５ｍｌ×２）と共蒸発させて白色粉末を得た。得られた固体を５０ｍｇに分割して、トリエチルアミン（１．１０ｇ、１０．０ミリモル）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）中のリガンド１（２５０ｍｇ、０．９５ミリモル）の溶液に撹拌しながら加えた。室温で１６時間撹拌した後、溶液を水（２０ｍｌ×２）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で除去して暗褐色の残留物を得た。この残留物を、シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにより、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ混合液（２０：１）で溶出させて精製した。所要の生成物を黄色固体（ｒｆ＝０．２５）として単離し、これをＣＨ２Ｃｌ２／ペンタンから再結晶化して淡黄色粉末（収量２１０ｍｇ、６０．０％）、ｍｐ２０６〜２０７℃を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δＨ ７．１４（３Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝５．０及び２．７Ｈｚ，５−Ｈ［ｘ３］，７．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０及び５．０Ｈｚ，５’−Ｈ）、７．５８〜７．６１（３Ｈ，ｍ ４−Ｈ［ｘ３］）、７．６２（３Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝８．２及び１．５Ｈｚ，３−Ｈ［ｘ３］）、８．２３（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝８．０及び２．０Ｈｚ，４’−Ｈ）、８．５１（３Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，６−Ｈ［ｘ３］）、８．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．０及び１．５Ｈｚ，６’−Ｈ）、９．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２’−Ｈ）、１０．４（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２２Ｈ１８Ｎ５Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３６８ 実測値：３６８
リガンド４を出発材料として、同様の方法で、イソニコチン酸から調製して淡黄色粉末（１４０ｍｇ、４０．０％）、ｍｐ１８３〜１８５℃を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δＨ ７．１５（３Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝５．０及び１．５Ｈｚ，５−Ｈ［ｘ３］，７．５７〜７．６６（６Ｈ，ｍ ４−Ｈ［ｘ３］，３−Ｈ［ｘ３］，７．８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５，９Ｈｚ，２’−Ｈ，６’−Ｈ）８．５１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，６−Ｈ［ｘ３］，８．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３’−Ｈ，５’−Ｈ）、１０．４５（１Ｈ，ｂｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２２Ｈ１８Ｎ５Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３６８ 実測値：３６８。
【００６１】
実施例３： リガンド５の合成
段階（ａ）：エチル２−（ピペリジン−１−イル）−アセテート
ブロモ酢酸エチル（８．５ｇ、５０．９ミリモル）を、クロロホルム（２０ｍｌ）中のピペリジン（４．３ｇ、５０．５ミリモル）とトリエチルアミン（５．５ｇ、５４．４ミリモル）の撹拌溶液に、弱い還流が維持される速度で滴下した。添加が完了したら撹拌を２時間続行し、反応混合物を水（２０ｍｌ×３）で洗浄した。クロロホルム層を脱水し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を蒸発させて黄色のオイル状物を得た。このオイル状物を、シリカの短いカラムにＣＨ２Ｃｌ２／石油エーテル（Ｐｅｔ Ｅｔｈｅｒ）４０：６０混合液（１：１）で溶出させて通過させた。得られた溶液から溶媒を除去して所要の生成物を淡黄色オイル状物（収量５．５ｇ、６４％）として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：−δＨ １．２０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ３）、１．４０（２Ｈ，ｍ，４’−Ｈ）、１．５５（４Ｈ，ｍ，３’−Ｈ ５’−Ｈ）、２，４２（４Ｈ，ｍ，２’−Ｈ ６’−Ｈ）、３．１０（２Ｈ，ｓ，ＮＣＨ２ＣＯ）４．１０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＯＣＨ２）。
【００６２】
段階（ｂ）：ピペリジン−１−イル酢酸ヒドロクロリド
エチル２−（ピペリジン−１−イル）−アセテート（５．５ｇ、３２．２ミリモル）、水（１２ｍｌ）及びｃＨＣｌ（３ｍｌ）を還流下で２０時間加熱した。揮発性成分を減圧下で蒸発させて灰白色の固体を得た。この固体をトルエン（５０ｍｌ×３）と共蒸発させ、真空下で乾燥して灰白色の粉末（収量４．８ｇ、８３％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）；−δＨ １．４２〜１．４６（１Ｈ，ｍ，４’−Ｈ）、１．７３〜１．８６（５Ｈ，ｍ，２’−Ｈ ３’−Ｈ ４’−Ｈ）、２．９７〜３．０５（２Ｈ，ｍ，２’−Ｈ ６’−Ｈ）、３．５２〜３．５７（２Ｈ，ｍ，２’−Ｈ ６’−Ｈ）、４．０２（２Ｈ，ｓ，ＮＣＨ２ＣＯ）。
【００６３】
段階（ｃ）：２−（ピペリジン−１−イル）−Ｎ−［１，１，１？トリス（ピリジル−２−イル）メチル］−アセトアミド
水酸化リチウム（８５ｍｇ、３．５ミリモル）とピペリジン−１−イル酢酸ヒドロクロリド（３００ｍｇ、１．６８ミリモル）をメタノール（１０ｍｌ）溶解して無色の溶液を得た。次いで、減圧下でメタノールを除去し、無色固体を、自由流動性の粉末が得られるまでトルエンと一緒に共蒸発させた。このリチウム塩に、無水ＤＭＦ（１０ｍｌ）、リガンド１（２５０ｍｇ、０．９５ミリモル）、Ｐｙｂｏｐ（５１０ｍｇ、０．９８ミリモル）を加え、透明な溶液が得られるまで混合物を加温した。加熱を止め、撹拌を１６時間続行した。減圧下で揮発性成分を除去して橙色残留物を得た。これをＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）中に溶解し、水（２０ｍｌ×３）で洗浄した。有機層を脱水し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を蒸発させて橙色オイル状物を得た。この残留物を、シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにより、ＣＨ３ＣＮ／ＭｅＯＨ混合液（２００：５）で溶出させて精製した。所要の生成物を淡黄色のオイル状物として単離した（ｒｆ＝０．２）。これは放置すると固化した（１００ｍｇ２７％）。ｍｐ１２３〜１２５℃。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：−δ１．４５〜１．５０（２Ｈ，ｍ，４’−Ｈ））、１．６５〜１．６３（４Ｈ，ｍ，３’−Ｈ ５’−Ｈ）、２．５４〜２．５７（４Ｈ，ｍ，２’−Ｈ ６’−Ｈ）、３．０１（２Ｈ，ｓ，ＮＣＨ２ＣＯ）、７．１２（３Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．５，５．０及び１．０Ｈｚ，５−Ｈ，［ｘ３］）７．４６〜７．５０（３Ｈ，ｍ，３−Ｈ［ｘ３］）、７．６０（３Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．５及び５．０Ｈｚ，４−Ｈ［ｘ３］）、８．５０〜８．５３（３Ｈ，ｍ，６−Ｈ［ｘ３］）、１０．６１（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２３Ｈ２６Ｎ５Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３８８ 実測値：３８８
実施例４： リガンド６、７及び８の合成
１Ｈ−イミダゾール−４−カルボン酸（２００ｍｇ、１．８ミリモル）と水酸化リチウム（４５ｍｇ、１．９ミリモル）をメタノール（１０ｍｌ）中に溶解して透明な溶液を得た。減圧下で揮発性成分を除去し、残留物を、自由流動性の粉末が得られるまでトルエンと一緒に共蒸発させた。リチウム塩に、無水ＤＭＦ（１０ｍｌ）、リガンド１（２５０ｍｇ、０．９５ミリモル）及びＰｙｂｏｐ（５１０ｍｇ、０．９８ミリモル）を加えた。透明な有機溶液が得られるまで混合物を加温した。次いで加熱を止め、溶液を１６時間撹拌した。溶媒をロータリーエバポレータで除去して粘性の橙色残留物を得た。これを、シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにより、ＣＨ３ＣＮ／ＭｅＯＨ（９５：５）で溶出させて精製した。表記化合物（１００ｍｇ、２９％）を白色粉末ｍｐ＞２５０℃として単離した（ｒｆ＝０．３）。
１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６ ＤＭＳＯ）：−δＨ ５．７６（１Ｈ，ｓ，ＮＨイミド）、７．２３〜７．２８（３Ｈ，ｍ，５−Ｈ［ｘ３］，７．４４〜７．４７（３Ｈ，ｍ，３−Ｈ［ｘ３］，７．５３（１Ｈ，ｓ，Ｃ−Ｈ，イミド）、７．７２（３Ｈ，ｂｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，４−Ｈ［ｘ３］，７，８２（１Ｈ，ｓ，Ｃ−Ｈイミド）、８．５０（３Ｈ，ｍ，６−Ｈ［ｘ３］，）、１０．４６（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２０Ｈ１７Ｎ６Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３５７ 実測値：３５７。
【００６４】
同様の方法で、リガンド７を４−ピリジル酢酸ヒドロクロリドから調製して無色の粉末（収量４０ｍｇ、１１％）、ｍ ｐｔ１３４〜１３５℃を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δＨ ３．７０（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）、７．１３（３Ｈ，ｍ，５−Ｈ［ｘ３］，７．２６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０ ３−Ｈ，５−Ｈ）、７．４３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ ３−Ｈ［ｘ３］，７．５７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ ４−Ｈ［ｘ３］， ８．４７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，６−Ｈ［ｘ３］，８．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２−Ｈ，６−Ｈ）、９．４９（１Ｈ，ｂｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２３Ｈ２０Ｎ５Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３８２ 実測値：３８２
同様の方法で、リガンド８を３−ピリジル酢酸ヒドロクロリドから調製して淡黄褐色の粉末（１８０ｍｇ、５４％）、ｍｐ１６５〜１６６℃を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δＨ ３．６８（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）７．０８（３Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．５，５．０及び１．０Ｈｚ，５−Ｈ［ｘ３］，７．１９（１Ｈ ｄｄ，Ｊ＝７．５及び５．０Ｈｚ ５’−Ｈ）、７．４３（３Ｈ，ｍ，３−Ｈ［ｘ３］）、７．５３（３Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．５及び５．０ ４−Ｈ［ｘ３］，７．６４（１Ｈ，ｂｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ ４’−Ｈ）、８．４３（３Ｈ，ｍ，６−Ｈ［ｘ３］，８．４６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５及び１．５Ｈｚ，６’−Ｈ）、８．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，２’−Ｈ）、９．４９（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２３Ｈ２０Ｎ５Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３８２ 実測値：３８２。
【００６５】
実施例５： リガンド６の９９ｍＴｃトリカルボニル錯体の調製
ジェネレータから溶出した１ｍＬのＴｃＯ４−をＴｃ−カルボニルキット（Ｉｓｏｌｉｎｋ（商標），Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｐｅｔｔｅｎ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）に加えた。活性度を９８３ＭＢｑで測定した。バイアルから約４ｍＬのヘッドスペースを取り出し、次いでこれを約１００℃に３０分間加熱した。バイアルを冷却し、抜出用ニードルで均圧化した。５０〜１００ｕｇのリガンド６を加え、続いて４ｍＬヘッドスペースを取り出した。バイアルを約１００℃に３０分間加熱し、次いで冷却し、抜出用ニードルでバイアルを均圧化した。ｐＨは約１１．５と測定された。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で測定した放射線化学的純度（ＲＣＰ）は９８％であった。
【００６６】
以下のように２つのＨＰＬＣ法を用いた。
【００６７】
方法Ａ
溶媒Ａ＝水の中に０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル中に０．１％ＴＦＡ
方法Ｂ
溶媒Ａ＝０．２％８８０アンモニア溶液、溶媒Ｂ＝アセトニトリル
両方の方法について以下の勾配を用いた。
【００６８】
【表１】
実施例６： リガンド１、２、４、５及び６の９９ｍＴｃトリカルボニル錯体の調製
ジェネレータから溶出した１ｍＬのＴｃＯ４−をＴｃ−カルボニルキット（Ｉｓｏｌｉｎｋ（商標），Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｐｅｔｔｅｎ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）に加えた。活性度の測定値は２．８８Ｇｑであった。バイアルから約４ｍＬヘッドスペースを取り出し、次いでこれを約１００℃に３０分間加熱した。バイアルを冷却し、抜出用ニードルで均圧化した。
【００６９】
５０〜１００ｕｇ（０．１ｍＬのＭｅＯＨ中に）のリガンドを、窒素を充てんしたバイアルに加え、続いて０．７ｍＬ０．４Ｍホスフェート緩衝剤（ｐＨ約７．５）を加えた。次いでキットから調製した０．２ｍＬのＴｃ（ＣＯ）３（Ｈ２Ｏ）３］＋を加え、活性度の測定値は５９３Ｍｑであった。バイアルを約１００℃に３０分間加熱し、続いて冷却し、抜出用ニードルで均圧化した。ｐＨは約８．５であった。各錯体についてのＲＣＰはＨＰＬＣで測定して（実施例５に記載）以下の通りであった。
【００７０】
【表２】
【図面の簡単な説明】
【００７１】
【図１】本発明のいくつかの金属錯体を示す図である。
【図２】各実施例のリガンドの化学構造をまとめた図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、放射性テクネチウム（Ｔｃ）及びレニウム（Ｒｅ）錯体、特にテクネチウム（Ｉ）［Ｔｃ（Ｉ）］系Ｔｃ錯体に関する。本発明では、新規Ｔｃ及びＲｅ錯体だけでなく、錯体の形成に用いるのに適した複数の新規リガンドも提供する。本発明はさらに、新規Ｔｃ及びＲｅ錯体を含む放射性医薬製品、及び放射性医薬品の簡便な調製用のキットに関する。これらの放射性医薬製品の様々な使用も本発明に包含される。
【背景技術】
【０００２】
Ｔｃ及びＲｅの配位化学は、核医学のための新規放射性医薬品の設計及び合成において重要な役割を果たす。９９ｍＴｃ放射性医薬品は核医学の分野で広範な用途を有している。これは、９９ｍＴｃの物理的特性によって外部イメージングのための最も望ましい放射性核種の１つとなっている。９９ｍＴｃは、９９Ｍｏ−９９ｍＴｃジェネレータから容易に得ることができ、６時間の半減期と１４０ｋｅＶの最適エネルギーガンマ放射を有している。その同族化合物が非常に類似した配位パラメータと物理的特性を示すので、Ｒｅ錯体はＴｃ錯体の構造的モデルとなっている。さらに、核１８６Ｒｅ及び１８８Ｒｅは、治療上有用なエネルギーを有するβ−エミッターであるので、それらを有するＲｅ錯体は魅力的な特性を有している。これらの金属との広範囲の錯体が報告されており、そのいくつが現在核医学で用いられている。
【０００３】
ｄ６−低スピンＴｃ（Ｉ）イオンは動力学的に不活性である、すなわち、そうした放射性医薬品はインビボで非常に安定であるので、Ｔｃ（Ｉ）系放射性医薬品は望ましいものである。長年、低酸化状態でＴｃを有する唯一の重要な放射性医薬品は９９ｍＴｃ［ＭＩＢＩ］６＋であった。これは、インビボで安定であるが、化学的置換に適しているとは言いがたい。さらに最近、反応性Ｔｃ（Ｉ）部分の調製のための簡単で迅速な手順が解明され、それにより広範な有機金属化学が容易になることによって、他のＴｃ（Ｉ）放射性医薬品の開発が促されている。この反応性Ｔｃ（Ｉ）部分は［Ｔｃ（ＣＯ）３（Ｈ２Ｏ）３］＋であり、Ａｌｂｅｒｔｏ ｅｔ ａｌ［Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２０ ｐｐ７９８７−８（１９９８）］によって報告されている。高度に不活性なｆａｃ−［Ｔｃ（ＣＯ３）］＋コアと結合した３つの水分子は、複数の官能基によって容易に置換されて、Ｔｃ（Ｉ）イオンの１つの面を封鎖し、Ｔｃ（ＣＯ）３部分を含む安定した錯体を生成することができる。例えば、Ｋｏｔｈａｒｉ ｅｔ ａｌ［Ａｐｐｌ．Ｒａｄ．Ｉｓｏｔ．５８ ｐ５４３−９（２００３）］は、ＮＰ２リガンドが［Ｔｃ（ＣＯ）３（Ｈ２Ｏ）３］＋と反応して安定なキレートを生成することを実証している。
【０００４】
（ｉ）ある範囲の生物学的ベクターと容易に結合し、（ｉｉ）簡単に改変されて中性金属錯体と、一価の正電荷を有する金属錯体の両方を生成し、且つ、（ｉｉｉ）金属錯体の電子特性と溶解性の両方を改変するために、容易に誘導化される安定した金属錯体をもたらすテクネチウム及びレニウム放射性医薬品がさらに開発されると有利である。
【０００５】
三脚型リガンドトリス（２−ピリジル）メチルアミンと、その誘導体のいくつかが、Ａｒｎｏｌｄ ｅｔ ａｌ［ＪＣＳ Ｄａｌｔｏｎ Ｔｒａｎｓ．ｐｐ７３６−４６（２００１）］により報告されている。この報告は、リガンドの銅（ＩＩ）及び亜鉛（ＩＩ）との錯体を、様々な錯体の配位様式を示すための結晶構造と合わせて開示している。しかし、開示されたリガンドが放射性テクネチウム及びレニウム錯体の提供に有用であるとはＡｒｎｏｌｄによって示唆されていない。
【非特許文献１】Ａｌｂｅｒｔｏ ｅｔ ａｌ， Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２０ ｐｐ７９８７−８（１９９８）
【非特許文献２】Ｋｏｔｈａｒｉ ｅｔ ａｌ， Ａｐｐｌ．Ｒａｄ．Ｉｓｏｔ．５８ ｐ５４３−９（２００３）
【非特許文献３】Ａｒｎｏｌｄ ｅｔ ａｌ， ＪＣＳ Ｄａｌｔｏｎ Ｔｒａｎｓ．ｐｐ７３６−４６（２００１）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、三脚型リガンドを含む新規テクネチウム及びレニウム錯体を提供する。本発明で用いる三脚型リガンドは、従来技術の金属錯体を凌駕する優れた特性を示す金属錯体を形成する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
第１の態様では、本発明は式Ｉのリガンドの金属錯体を提供する。
【０００８】
【化１】
式中、
Ｒ１はＥ基又は−ＣＨ２（ＡＲ５）であり（ＡはＳ又はＯであり、Ｒ５はＨ又はＣ１〜６アルキルである。）、
Ｒ２及びＲ３は各々独立にＥ基であり、
Ｅは適宜置換Ｃ３〜１０窒素含有ヘテロアリール環であり、
Ｒ４は−（Ｚ）ｑ−Ｙであり
（式中、各Ｚは独立に、−ＣＱ２−、−ＣＱ＝ＣＱ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＱ２ＣＯ２−、−ＣＯ２ＣＱ２−、−ＮＱ−、−ＮＱＣＯ−、−ＣＯＮＱ−、−ＮＱ（Ｃ＝Ｏ）ＮＱ−、−ＮＱ（Ｃ＝Ｓ）ＮＱ−、−ＳＯ２ＮＱ−、−ＮＱＳＯ２−、−ＣＱ２ＯＣＱ２−、−ＣＱ２ＳＣＱ２−、−ＣＱ２（ＮＱ）ＣＱ２−、Ｃ４〜８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４〜８シクロアルキレン基、Ｃ５〜１２アリーレン基又はＣ３〜１２ヘテロアリーレン基、アミノ酸若しくは単分散ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロックであり、但し、各Ｑは独立に、Ｈ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４アルコキシアルキル又はＣ１〜４ヒドロキシアルキルから選択され、
ｑは０〜１０の値の整数であり、
ＹはＨ、アミノ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ３〜２０アルキルアリール、Ｃ６〜１４アリール、Ｃ３〜１２複素環、Ｃ２〜１０アルコキシアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０アミノアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０アルコキシ、Ｃ１〜１０アシルオキシ、Ｃ６〜１０アリールオキシ又はＣ６〜１０アロイルオキシであるか、或いはＹは生体ターゲティング部分である。）、
上記金属がテクネチウム又はレニウムの放射性同位体であり、上記リガンドの５つの可能な原子のうちの３つ以下が錯化に関与する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
本発明における「金属錯体」は、そのリガンドが式Ｉからなり、その中央の金属がＴｃ又はＲｅの同位体である比較的安定した配位錯体を意味する。その金属がＴｃの同位体である場合、９９ｍＴｃ又は９４ｍＴｃであることが好ましく、その場合本発明のＴｃ錯体は、各々単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）又は陽電子放出型断層撮影法（ＰＥＴ）によるインビボでの診断用イメージングに適している。金属がＲｅの同位体である場合、好ましくは１８６Ｒｅ又は１８８Ｒｅであり、したがって治療に適している。金属錯体が「トランスキレーション耐性」、すなわち、金属配位部位について他の潜在的に競合するリガンドとのリガンド交換を容易には起こさないことが非常に好ましい。
【００１０】
本発明の「窒素含有ヘテロアリール環」は、１個以上の窒素原子、好ましくは１個又は２個のＮ原子、最も好ましくは１つのＮ原子を含む任意の単環式又は縮合型芳香族環構造である。本発明の好ましい窒素ヘテロアリール基は、５員及び６員の窒素含有環構造を含み、その例は、ピリジル、イミダゾイル、ピリミジン、ピロール、オキサゾール及びピラゾイル環、さらにはキノリンなどのその縮合環類似体である。窒素含有ヘテロアリール環の関連では、「置換」という用語は、１つ以上の有機置換基が、窒素において或いは環内のどこかで窒素含有ヘテロアリール環と結合していることを意味する。適切な有機置換基の例には、Ｃ１〜６アルキル、アミノ、ニトロ、ハロ、カルボキシ、スルホネート及びＣ６〜１４アリールが含まれる。
【００１１】
「生体ターゲティング部分」は、本発明では、金属錯体を哺乳動物の体内の特定の部位へ移送するための手段として機能する分子として定義される。その場合、金属錯体は放射性医薬品である。哺乳動物の体内の部位は特定の病態の部位であるのが好ましい。適切な生体ターゲティング部分には、直鎖ペプチド若しくは環状ペプチド又はその組合せであってよい３−１００ｍｅｒペプチド又はプチド類似体；モノクローナル抗体又はその断片；或いは、酵素基質又は阻害剤；合成による受容体結合化合物；オリゴヌクレオチド又はオリゴ−ＤＮＡ若しくはオリゴ−ＲＮＡ断片が含まれる。生体ターゲティング部分は、合成由来のものでも天然由来のものでもよいが、合成由来のものが好ましい。「合成」という用語は慣用的な意味の用語、すなわち天然資源、例えば哺乳動物の身体から単離されるものに対抗する人工的なものを意味する。そうした化合物は、その製造及び純度プロファイルを完全に制御できるという利点を有している。「環状ペプチド」という用語は、ペプチド若しくはジスルフィド結合、又はチオエーテル、ホスホジエステル、ジシロキサン若しくはウレタン結合などの合成の非ペプチド結合であってよい共有結合によって、２つの末端アミノ酸が互いに結合している５〜１５個の配列のアミノ酸を意味する。
【００１２】
「アミノ酸」という用語は、Ｌ−アミノ酸若しくはＤ−アミノ酸、アミノ酸類似体又はアミノ酸模倣体を意味し、それらは天然由来であっても純粋に合成由来であってもよく、光学的に高純度であるすなわち単一の光学異性体、したがってキラルであるか、また、光学異性体の混合物であってもよい。本発明のアミノ酸は光学的に高純度であるのが好ましい。「アミノ酸模倣体」という用語は、それが同配体である、すなわち天然化合物の立体的構造及び電子的構造を模倣するように設計された天然由来のアミノ酸の合成類似体を意味する。そうした同配体は、当業者に周知であり、これらに限定されないが、デプシペプチド、レトロインベルソペプチド、チオアミド、シクロアルカン又は１，５−二置換テトラゾールを含む［Ｍ．Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，２４，１３７，（１９８５）を参照されたい］。
【００１３】
本発明での使用に適したペプチドとしては、以下のものが挙げられる。
・ソマトスタチン、オクトレオチド及び類似体。
・ＳＴ受容体に結合するペプチド。ここで、ＳＴとは大腸菌その他の微生物の産生する熱安定性毒素をいう。
・ラミニン断片、例えばＹＩＧＳＲ、ＰＤＳＧＲ、ＩＫＶＡＶ、ＬＲＥ及びＫＣＱＡＧＴＦＡＬＲＧＤＰＱＧ。
・白血球集積のターゲティング部位用のＮ−ホルミルペプチド。
・血小板因子４（ＰＦ４）及びその断片。
・ＲＧＤ（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ）含有ペプチド。これは例えば血管新生をターゲティングし得る（Ｒ．Ｐａｓｑｕａｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１９９７ Ｊｕｎ；１５（６）：５４２−６；Ｅ．Ｒｕｏｓｌａｈｔｉ， Ｋｉｄｎｅｙ Ｉｎｔ． １９９７ Ｍａｙ；５１（５）：１４１３−７）。
・α２−抗プラスミン若しくはフィブロネクチン若しくはβ−カゼイン、フィブリノーゲン又はトロンボスポンジンのペプチド断片。α２−抗プラスミン、フィブロネクチン、β−カゼイン、フィブリノーゲン及びトロンボスポンジンのアミノ酸配列は以下の引用文献に記載されている：α２−抗プラスミン前駆体（Ｍ．Ｔｏｎｅ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅｍ，１０２，１０３３，（１９８７））；β−カゼイン（Ｌ．Ｈａｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ， Ｇｅｎｅ，１３９，１９３，（１９９４））；フィブロネクチン（Ａ．Ｇｕｔｍａｎ ｅｔ ａｌ， ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．，２０７，１４５，（１９９６））；トロンボスポンジン−１前駆体（Ｖ．Ｄｉｘｉｔ ｅｔ ａｌ， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，８３，５４４９，（１９８６））；Ｒ．Ｆ．Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ， Ａｎｎ． Ｒｅｖ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．，５３，１９５，（１９８４）。
・アンジオテンシンＩＩ：Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ（Ｅ．Ｃ．Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ， Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．，１９７９，Ｖｏｌ ２２，９，１０３８−１０４４）、［Ｓａｒ，Ｉｌｅ］アンジオテンシンＩＩ：Ｓａｒ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ（Ｒ．Ｋ．Ｔｕｒｋｅｒ ｅｔ ａｌ， Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７２，１７７，１２０３）のようなアンジオテンシンの基質又は阻害剤であるペプチド。
・アンジオテンシンＩ：Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ。
【００１４】
好ましくは、本発明のペプチドは抗プラスミン又はアンジオテンシンＩＩペプチドを含む。抗プラスミンペプチドは、Ｎ末端からみて以下のアミノ酸配列を含む。
（ｉ）α２−抗プラスミン
ＮＨ２−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−ＯＨ、又はその変異体で１以上のアミノ酸が交換、付加又は除去されたもの、例えば、
ＮＨ２−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
ＮＨ２−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｔｈｒ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−ＯＨ、
ＮＨ２−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＨなど、或いは
（ｉｉ）カゼイン
Ａｃ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｉｌｅ−Ｇｌｙ。
【００１５】
本発明の合成ペプチドは、Ｐ．Ｌｌｏｙｄ−Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｆ．Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ ａｎｄ Ｅ．Ｇｉｒａｌｄ； Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ｔｈｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，１９９７に記載されているように、通常の固相合成法で得ることができる。
【００１６】
適当な酵素の基質、アンタゴニスト又は阻害剤としては、グルコース並びにフルオロデオキシグルコースのようなグルコース類似体、脂肪酸、又はエラスターゼ若しくはアンジオテンシンＩＩ若しくはメタロプロテアーゼ阻害剤が挙げられる。好ましい非ペプチド系アンジオテンシンＩＩアンタゴニストはロサルタンである。
【００１７】
適当な受容体結合性化合物としては、エストラジオール、エストロゲン、プロゲスチン、プロゲストロンその他のステロイドホルモン、ドーパミンＤ−１若しくはＤ−２受容体、又はトロパンのようなドーパミン輸送体、並びにセロトニン受容体に対するリガンドが挙げられる。
【００１８】
生体ターゲティング部分は好ましくは分子量５０００未満のもの、最も好ましくは４０００未満のもの、理想的には３０００未満のものである。好ましい生体ターゲティング部分は３〜２０量体ペプチド又は酵素基質、酵素アンタゴニスト若しくは酵素阻害剤である。
【００１９】
錯体を放射性医薬品として用いる場合、リンカー基（Ｚ）ｑの性状は金属錯体の生体内分布を変化させるためにも使用できる。例えば、（Ｚ）ｑにエーテル基を導入すると、血漿タンパク質の結合を最小限にすることが容易になる。（Ｚ）ｑがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロック又はアミノ酸残基１〜１０個のペプチド鎖を含むと、リンカー基はインビボでの造影剤の薬物動態及び血液クリアランス速度を変化させる機能をもつことができる。かかる「バイオモディファイアー」のリンカー基はバックグラウンド組織、例えば筋肉又は肝臓及び／又は血液からの放射性金属造影剤のクリアランスを加速し、バックグラウンドの干渉の低減による良好な診断画像をもたらす。バイオモディファイヤーリンカー基は、肝臓経由ではなく、例えば腎臓経由での特定の排出経路に好都合なように用いることもできる。（Ｚ）ｑがアミノ酸残基のペプチド鎖を含む場合、アミノ酸残基はグリシン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸又はセリンから選択されるのが好ましい。ペプチド鎖中のアミノ酸の数は、好ましくは１〜１０個、最も好ましくは１〜３個である。（Ｚ）ｑがＰＥＧ部分を含む場合、それは式（−ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）Ｗの基を含むのが好ましい。但し、ｗは３〜２５の値の整数である。整数ｗは６〜２２であるのが好ましい。特に好ましいＰＥＧ−含有（Ｚ）ｑ基は、単分散ＰＥＧ様構造の重合により得られる単位、１７−アミノ−５−オキソ−６−アザ−３，９，１２，１５−テトラオキサヘプタデカン酸式Ｉａである。
【００２０】
【化２】
式中、ｐは１〜１０の整数である。
【００２１】
各Ｅ基は適宜置換Ｃ３〜６の窒素含有ヘテロアリール環であるのが好ましい。好ましいＥ基はピリジル、イミダゾイル及びピラゾイルから選択され、２−ピリジルが特に好ましい。
【００２２】
式Ｉの好ましい実施形態は、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の各々がＥ基であり、好ましいＥ基は上記記載と同様である。この実施形態では、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々対称性三脚型リガンドをもたらす同一Ｅ基であることが好ましく、各々が２−ピリジルであることが最も好ましい。
【００２３】
Ｒ４は式−ＮＨ（ＣＯ）−（Ｚ）ｘ−Ｙ（ｘは０〜９の値の整数である。）の官能化アシル置換基であるのが好ましい。Ｒ４位におけるリガンドの簡便な官能化を可能にし、アシル基がＲ１、Ｒ２及びＲ３基の供与体原子と競合しないので、そうしたアシル置換基が好ましい。このような競合は、Ｒ４がアミノ（すなわちｑ＝０であり、Ｙはアミノである。）である場合、金属配位の際、アミン基が５環指向のキレートを形成することもできるので、問題となる可能性がある。
【００２４】
式Ｉのリガンドの好ましい金属錯体では、金属はＲ１基のＡ原子とＥ基のヘテロアリール環の窒素原子を介して配位し、それによってリガンドは三脚型キレート剤として作用する。
【００２５】
上記に概要を示した本発明の第１の態様の好ましい実施形態は、＋１の酸化状態を有する金属錯体である。これらの錯体は、ｄ６−低スピンＴｃ（Ｉ）イオンの動力学的不活性度が低いので、金属がテクネチウムである場合が特に興味深い。さらに、リガンドをある範囲の生体ターゲティング分子で誘導化して、得られる錯体をある範囲の応用分野で使用できるようにすることが可能である。合成手順の重要な利点は、三脚型リガンドを容易に改変して、中性錯体と荷電錯体の両方を生成できるという点である。したがって、式（Ｉ）では、Ｒ１が−ＣＨ２（ＡＲ５）である場合、ＡはＳであるのが好ましい。Ｒ１が−ＣＨ２（ＳＲ５）である場合、荷電されていないリガンドが望ましく、Ｒ５は好ましくはＣ１〜３アルキルであり、−ＣＨ２（ＳＣＨ３）、−ＣＨ２（ＳＣ２Ｈ５）又は−ＣＨ２（ＳＣ３Ｈ７）であることが最も好ましい。Ｒ１がＣＨ２（ＳＲ５）である場合、負に荷電したリガンドが望ましく、Ｒ５はＨ、すなわちＲ１は−ＣＨ２ＳＨであるのが好ましい。
【００２６】
本発明の放射性金属錯体は、適切な酸化状態のもと、適切なｐＨで放射性金属の溶液を式Ｉのリガンドと反応させることによって調製することができる。その溶液は、好ましくは、金属と弱く錯体をつくるリガンド（グルコン酸塩又はクエン酸塩など）を含む、すなわち、放射性金属錯体はリガンド交換又はトランスキレーションにより調製する。そうした状態は、金属イオンの加水分解などの望ましくない副反応を抑制するのに有用である。放射性金属イオンが９９ｍＴｃである場合、出発材料は通常９９Ｍｏジェネレータからの過テクネチウム酸ナトリウムである。テクネチウムは、比較的反応性が低いＴｃ（ＶＩＩ）酸化状態の過テクネチウム酸９９ｍＴｃで存在する。したがって、より低い酸化状態のＴｃ（Ｉ）〜Ｔｃ（Ｖ）のテクネチウム錯体の調製は、通常、亜ジチオン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）などの適切な薬学的に許容される還元剤を加えて、錯化を容易にさせる必要がある。薬学的に許容される還元剤は、好ましくはスズ塩、最も好ましくは塩化スズ、フッ化スズ又は酒石酸スズである。
【００２７】
９９ｍＴｃ金属錯体の調製のさらなる詳細はＭｅａｓｅ ｅｔ ａｌ［Ｓｅｍｉｎ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，３１（４），２７８−２８５（２００１）］に記載されている。放射性レニウム金属錯体の調製のさらなる詳細はＨａｓｈｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ［Ｃｈａｐｔｅｒ ９ ｐａｇｅｓ２７５−２９１ ｉｎ “Ｔｅｃｈｎｅｔｉｕｍ ａｎｄ Ｒｈｅｎｉｕｍ：Ｔｈｅｉｒ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ｉｔｓ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ”，Ｙｏｓｈｉｈａｒａ ａｎｄ Ｏｍｏｒｉ（Ｅｄｓ），Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｂｅｒｌｉｎ（１９９６）］に記載されている。本発明の９９ｍＴｃ錯体の好ましい調製方法は、以下の第５の実施形態で述べる凍結乾燥キットの使用によるものである。
【００２８】
第２の態様では、本発明は式ＩＩの金属錯体を提供する。
【００２９】
［ＬＭＸ３］ｎ （ＩＩ）
式中、Ｌは第１の実施形態で定義した式Ｉのリガンドであり、
Ｍはテクネチウム又はレニウムの放射性同位体であり、
ＸはＣＯ、ハロゲン、ホスフィン又はイソニトリルから選択され、
ｎは金属錯体の電荷であり、−１、０、＋１又は＋２であってよい。
【００３０】
Ｘがイソニトリルである場合、それは単座イソニトリルであることが適切である。３つのすべてのＸ基がホスフィンである場合、その３つのＸ供与体原子は、３つの単座ホスフィン、単一の三座ホスフィン又は単座ホスフィンと二座ホスフィンの混合物からなることができる。
【００３１】
式ＩＩの金属錯体（ｎ）の電荷は、リガンド（Ｌ）に存在する供与体原子とＸの実体によることになる。したがって、例えばＸがＣＯ、ホスフィン又はイソニトリルである場合、これらは中性の供与体であり、電荷に影響を及ぼさない。しかし、Ｘがハロゲンである場合、これらは負に荷電した供与体である。式ＩのリガンドのＲ１が−ＣＨ２ＳＨである場合、チオールアニオンを介して金属錯化が起こる、すなわち、チオールが脱プロトン化され、それによってリガンドが単一の負の電荷を担持することが予想される。
【００３２】
式ＩＩの金属錯体は、第１の実施形態（上記）に加えて、Ｂａｒｒｅｒａ ｅｔ ａｌ［Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３５，３３５−３４１（１９９６）］の方法で調製することができる。
【００３３】
式ＩＩの好ましいＸ基はＣＯ（すなわちカルボニル基）である。これは、以下に述べる式ＩＩａの荷電錯体及び式ＩＩｂの中性錯体に相当する。
【００３４】
［ＬＭ（ＣＯ）３］ｎ （ＩＩａ）
式中、Ｍは式ＩＩの定義と同様であり、
Ｌは上記定義と同様の式Ｉのリガンドであり、
但し、Ｒ１はＥ基又は−ＣＨ２（ＡＲ５）（Ｒ５はＣ１〜６アルキルである。）であり、
Ｒ４はアミノ又は−（Ｚ）ｑ−Ｙ（Ｚ、ｑ及びＹは請求項１で定義した通りである。）であり、
ｎは＋１又は＋２である。
【００３５】
式ＩＩａの好ましい金属錯体は第１の実施形態（上記）で述べた好ましいリガンドを含む。ｎは＋１であるのが好ましい。式ＩＩａのＲ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジルであり、Ｒ４が式−ＮＨ（ＣＯ）−（Ｚ）ｘ−Ｙ（式ＩＩについて上記したのと同様にｘは０〜９の値の整数である。）の官能化アシル置換基であるのが好ましい。Ｙが生体ターゲティング部分でない場合、Ｙは好ましくはアミノ、フェニル、ピリジル、ピペリジニル又はイミダゾイルである。Ｒ４は−ＮＨ（ＣＯ）Ｐｈ、−ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）３−（ＣＯ）ＮＨＣＨ２Ｐｈ、−ＮＨ（ＣＯ）（３−ピリジル）、−ＮＨ（ＣＯ）（４−ピリジル）、−ＮＨ（ＣＯ）ＣＨ２−ピペリジニル、−ＮＨ（ＣＯ）ＮＨ２又は−ＮＨ（ＣＯ）（２，４−イミダゾイル）であることが最も好ましい。
【００３６】
式ＩＩの他の好ましい金属錯体はＩＩｂの中性錯体である。
【００３７】
ＬＭ（ＣＯ）３ （ＩＩｂ）
式中、Ｍは式ＩＩの定義と同様であり、
ＬはＲ１が−ＣＨ２ＳＨ又は−ＣＨ２ＯＨである式Ｉのリガンドであり、
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は式Ｉで定義した通りである。
【００３８】
式ＩＩｂのＲ１は−ＣＨ２ＳＨであり、ＬのＲ２及びＲ３は各々２−ピリジルであるのが好ましい。
【００３９】
金属に配位した際、−ＣＨ２ＳＨ又は−ＣＨ２ＯＨが脱プロトン化される結果、金属錯体は中性である。
【００４０】
式ＩＩ、ＩＩａ及びＩＩｂでは、Ｍは９４ｍＴｃ、９９ｍＴｃ、１８６Ｒｅ又は１８６Ｒｅであることが好ましく、９９ｍＴｃであることが最も好ましい。
【００４１】
各ＸがＣＯであり、Ｍが９９ｍＴｃである場合、本発明の第２の態様の錯体は、Ｓｃｈｉｂｌｉ ｅｔ ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，１１，ｐ３４５−３５１（２０００）］及びＫｏｔｈａｒｉ ｅｔ ａｌ［Ａｐｐｌ．Ｒａｄ．Ｉｓｏｔｏｐ．，５８，５４３−５４９（２００３）］に記載されている９９ｍＴｃ（ＣＯ）３（（Ｈ２Ｏ）３＋前駆体から好都合に調製することができる。本発明のＴｃ錯体を形成させるために、前駆体の３つの水分子を、式Ｉのリガンドの供与体原子で容易に置き換えることができる。非臨床用の使用のための９９ｍＴｃ（ＣＯ３）（Ｈ２Ｏ）３＋前駆体は、Ｉｓｏｌｉｎｋ（商標）キット（Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｐｅｔｔｅｎ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）を用いても得ることができる。続く、本発明のリガンドとの［９９ｍＴｃ（ＣＯ３）（Ｈ２Ｏ）３］＋の反応により、本発明の９９ｍＴｃ錯体が形成される。対応するレニウム金属錯体はＰｉｅｔｚｓｃｈ ｅｔ ａｌ［Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，１１，ｐ４１４−４２４（２０００）］の方法で調製することができる。
【００４２】
式ＩＩａの金属錯体のいくつかの例を図１に示す。
【００４３】
第３の態様では、本発明は、Ｒ１が、−ＣＨ２ＳＣＨ３であるか、又は２−ピリジル若しくは２−キノリン環を含み、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル環を含む場合、Ｒ４はＨ、−ＣＨ２ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ２又は−ＮＨ（ＣＯ）ＲＸ（ＲＸはＣ１〜１２アルキル、Ｃ１〜４カルボキシアルキル又は−Ｃ６Ｈ４ＳＯ３Ｈである。）ではない前提で、式Ｉで定義したリガンドを提供する。
【００４４】
第３の実施形態の１つの好ましい部類のリガンドは、Ｒ１が−ＣＨ２ＳＨ又は−ＣＨ２ＯＨであるものである。そうしたリガンドは、（ｉ）Ｒ１が−ＣＨ２ＳＨであり、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含むか、或いは（ｉｉ）Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含むものであることがより好ましい。最も好ましいリガンドはＲ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含むものである。
【００４５】
第３の実施形態の好ましいＲ４基は、Ｙが−（ＣＨ２）ｍＮＨ２（ｍは１〜６、好ましくは２〜４の値の整数である。）であるか、或いは生体ターゲティング部分、すなわちリガンドの生体ターゲティング部分とのコンジュゲートであるものである。他の好ましいＲ４基は、Ｙがアミノ置換フェニル、ピリジル、ピペリジル又はイミダゾイルであるものである。
【００４６】
本発明のリガンドはＡｒｎｏｌｄ ｅｔ ａｌ［ＪＣＳ Ｄａｌｔｏｎ Ｔｒａｎｓ．，７３６−７４６（２００１）］の方法によって調製することができる。Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含み、Ｒ４がＨである場合、Ｋｏｄｅｒａ ｅｔ ａｌ［Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，４２，１１９３−１２０３（２００３）］に教示されているように、橋頭プロトン（Ｒ４基）をブチルリチウムで脱プロトン化し、続いてアルキルハライドでアルキル化することができる。生体ターゲティング部分とのコンジュゲートを含むその官能化タイプも、二官能性キレートのアプローチで調製することができる。したがって、それに官能基（それぞれ「二官能性リンカー」又は「二官能性キレート」）が結合しているリガンド又はキレート剤を調製することはよく知られている。結合される官能基には、アミン、チオシアネート、マレイミド、及びＮ−ヒドロキシスクシンイミドなどの活性エステル又はペンタフルオロフェノールが含まれる。本発明のリガンド１はアミン官能化二官能性キレートの例である。テクネチウム又はレニウムのトリカルボニルコアへの錯化に適した二官能性キレートは、Ｓｔｉｃｈｅｌｂｅｒｇｅｒ ｅｔ．ａｌ［Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．，３０，４６５−４７０（２００３）］に記載されている。かかる二官能性キレートは、生体ターゲティング部分の適当な対応官能基と反応して所望のコンジュゲートを形成する。結合する化合物の適当な官能基としては、（アミン官能化二官能性キレーターとのアミド結合形成のための）カルボキシル、（カルボキシル又は活性エステル官能化二官能性キレーターとのアミド結合形成のための）アミン、（アミン官能化二官能性キレーターのＮアルキル化のための）ハロゲン、メシレート及びトシレート、並びに（マレイミド官能化二官能性キレーターとの反応のための）チオールが挙げられる。
【００４７】
本発明のリガンドの合成の詳細は、実施例１〜４に記載されている。
【００４８】
第４の態様では、本発明は、上述のいずれかの態様及び実施形態の本発明の金属錯体を生体適合性担体と共に哺乳動物、特にヒトへの投与に適した形態で含む放射性医薬品を提供する。「生体適合性担体」とは、造影剤を懸濁又は溶解できる流体、特に液体であって、組成物が生理学的に認容できるもの、つまり毒性も耐え難い不快感も伴わずに哺乳類の身体に投与することができるものである。生体適合性担体は好適には注射可能な担体液であり、例えば、発熱物質を含まない注射用の滅菌水、食塩液のような水溶液（これは注射用の最終製剤が等張性又は非低張性となるように調整するのに都合がよい）、１種以上の張度調節物質（例えば血漿カチオンと生体適合性対イオンとの塩）、糖類（例えばグルコース又はスクロース）、糖アルコール（例えばソルビトール又はマンニトール）、グリコール（例えばグリセロール）その他の非イオン性ポリオール材料（例えばポリエチレングリコール、プロピレングリコールなど）の水溶液である。
【００４９】
かかる放射性医薬品は、好適には、無菌状態を維持しながら皮下注射針で一回又は複数回穿刺するのに適したシール（例えばクリンプオン式セプタムシール蓋）を備えた容器に入れて供給される。かかる容器には、１回又は複数回分の用量を入れることができる。好ましい多用量容器は、複数回分の用量を収容した単一バルクバイアル（例えば容積１０〜３０ｃｍ３のもの）からなり、臨床症状に応じて製剤の有効期間中様々な時間間隔で１回分の用量を臨床グレードの注射器に引き出すことができる。プレフィルド型注射器は１回分の用量を収容するように設計され、そのため好ましくは使い捨て又はその他臨床用に適した注射器である。プレフィルド型注射器は、適宜、オペレーターを放射能から保護するため、注射器シールドを備えていてもよい。かかる適当な放射性医薬品注射器シールドは当技術分野で公知であり、好ましくは鉛又はタングステンからなる。
【００５０】
本発明の好ましい放射性医薬品はテクネチウム放射性同位体９９ｍＴｃ又は９４ｍＴｃを含み、最も好ましくは９９ｍＴｃを含む。テクネチウム同位体が９９ｍＴｃである場合、画像診断用放射性医薬品に適した放射能含量は、生体内の撮像部位、取込み量及び標的／バックグラウンド比に応じて、１８０〜１５００ＭＢｑの９９ｍＴｃである。
【００５１】
式ＩＩのＸがＣＯである場合、本発明の９９ｍＴｃ放射性医薬品の調製は、まず［９９ｍＴｃ（ＣＯ３）（Ｈ２Ｏ）３］＋を上述の通り調製する。続いて、［９９ｍＴｃ（ＣＯ３）（Ｈ２Ｏ）３］＋を本発明のリガンドと反応させると本発明の９９ｍＴｃ錯体が得られる。いずれの段階も無菌条件下で実施するか、或いは最終的に滅菌する。
【００５２】
第５の態様では、本発明は、上述の放射性医薬組成物を調製するための非放射性キットであって、第１の実施形態で定義した式（Ｉ）のリガンドを含むキットを提供する。放射性金属が９９ｍＴｃである場合、キットは好適には生体適合性還元剤をさらに含む。かかるキットは、例えば血流への直接注射によるヒトへの投与に適した無菌放射性医薬製剤を与えるように設計される。９９ｍＴｃ用には、キットは好ましくは凍結乾燥したもので、９９ｍＴｃ放射性同位体ジェネレータからの無菌９９ｍＴｃ−過テクネチウム酸（ＴｃＯ４−）で再構成すればそれ以上操作しなくてもヒトへの投与に適した溶液が得られるように設計される。適当なキットは、遊離塩基又は酸塩の形態のキレーターコンジュゲートを亜ジチオン酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アスコルビン酸、ホルムアミジンスルフィン酸、第一スズイオン、Ｆｅ（ＩＩ）又はＣｕ（Ｉ）のような生体適合性還元剤と共に収容した容器（例えばセプタムシールバイアル）を備える。生体適合性還元剤は、好ましくは塩化第一スズや酒石酸第一スズのような第一スズ塩である。或いは、キットは、放射性金属を添加するとトランスメタレーション（金属交換）を起こして所望の生成物を与える金属錯体を適宜含んでいてもよい。
【００５３】
非放射性キットはさらに、トランスキレーター、放射線防護剤、抗菌保存剤、ｐＨ調節剤又は充填剤のような追加成分を適宜含んでいてもよい。「トランスキレーター」とは、テクネチウムと迅速に反応して弱い錯体を形成し、次に上記リガンドで置換される化合物である。これはテクネチウム錯化と競合する過テクネチウム酸塩の迅速な還元に起因した還元型加水分解テクネチウム（ＲＨＴ）が形成するおそれを最小限に抑制する。かかる適当なトランスキレーターは、弱有機酸（つまりｐＫａが３〜７の範囲内にある有機酸）と生体適合性カチオンとの塩である。適当な弱有機酸は、酢酸、クエン酸、酒石酸、グルコン酸、グルコヘプトン酸、安息香酸、フェノール又はホスホン酸である。従って、適当な塩は、酢酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩、フェノラート又はホスホン酸塩である。好ましい塩は、酒石酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩又はホスホン酸塩であり、最も好ましくはホスホン酸塩、特にジホスホン酸塩である。好ましいトランスキレーターは、ＭＤＰ（メチレンジホスホン酸）と生体適合性カチオンとの塩である。
【００５４】
「放射線防護剤」という用語は、水の放射線分解で生成する含酸素フリーラジカルのような反応性の高いフリーラジカルを捕捉することによって、酸化還元プロセスのような分解反応を阻害する化合物をいう。本発明の放射線防護剤は、好適には、アスコルビン酸、パラアミノ安息香酸（即ち４−アミノ安息香酸）、ゲンチシン酸（即ち２，５−ジヒドロキシ安息香酸）並びにこれらと上述の生体適合性カチオンとの塩から選択される。
【００５５】
「抗菌保存剤」という用語は、細菌、酵母又はカビなどの有害微生物の増殖を阻害する薬剤を意味する。抗菌保存剤は、濃度に応じてある程度の殺菌作用を示すこともある。本発明の抗菌保存剤の主な役割は、再構成後の放射線医薬組成物（つまり、放射性診断薬自体）における微生物の増殖を阻害することである。ただし、抗菌保存剤は、再構成前の本発明の非放射性キットの１以上の成分における有害微生物の増殖の防止にも適宜使用できる。適当な抗菌保存剤としては、パラベン類、即ちメチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン又はこれらの混合物、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾール、セトリミド及びチオメルサールが挙げられる。好ましい抗菌保存剤はパラベンである。「ｐＨ調節剤」という用語は、再構成したキットのｐＨが、ヒト又は哺乳類の投与に関する許容範囲（約ｐＨ４．０〜１０．５）内に収まるようにするのに有用な化合物又は化合物の混合物を意味する。かかる適当なｐＨ調節剤としては、トリシン、リン酸塩又はＴＲＩＳ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）のような薬学的に許容される緩衝剤、並びに炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム又はこれらの混合物などの薬学的に許容される塩基が挙げられる。コンジュゲートを酸塩の形態で用いる場合、キットのユーザーが多段階法の一部としてｐＨを調節できるようにｐＨ調節剤を適宜別のバイアル又は容器で提供してもよい。
【００５６】
「充填剤」という用語は、製造時及び凍結乾燥時の材料の取扱いを容易にする薬学的に許容される増量剤を意味する。適当な充填剤としては、塩化ナトリウムのような無機塩並びに水溶性糖類又は糖アルコール、例えばスクロース、マルトース、マンニトール又はトレハロースが挙げられる。
【００５７】
第６の態様では、本発明は、ＳＰＥＣＴイメージングのための放射性金属がガンマエミッターである本発明の放射性医薬品の使用に関する。対象への放射性医薬品の投与に続いて、対象内での放射性医薬品の分配がガンマカメラで検出される。それによって分配を示す画像が得られる。
【実施例】
【００５８】
本発明を以下に詳述する非限定的実施例により説明する。実施例１〜４ではリガンド２〜８の合成を提供する。実施例５はリガンド６の９９ｍＴｃ−トリカルボニル錯体の調製方法を提供する。放射線化学的純度（ＲＣＰ）は９８％であった。実施例４はリガンド１、２、４、５及び６の９９ｍＴｃ−トリカルボニル錯体の調製方法を提供する。
【００５９】
実験
リガンド１［すなわち１，１，１−トリス（ピリジン−２−イル）メチルアミン］をＡｒｎｏｌｄ ｅｔ ａｌ［ＪＣＳ Ｄａｌｔｏｎ Ｔｒａｎｓ．，７３６−７４６（２００１）］の方法で調製した。
【００６０】
実施例１： リガンド２の合成
無水安息香酸（２８０ｍｇ、１．２４ミリモル）を、ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍｌ）中のリガンド１（２５０ｍｇ０．９５ミリモル）の撹拌溶液に、室温で一括して加えた。撹拌を２４時間続行し、反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（１８ｍｌ）で希釈した。この溶液を飽和重炭酸ナトリウム液（２０ｍｌ×２）及び水（２０ｍｌ×２）で洗浄し、次いで脱水し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を蒸発させて黄色残留物を得た。この材料を、ＣＨ２Ｃｌ２／ペンタン混合液から再結晶化させて生成物（１８０ｍｇ、５２％）を黄色粉末、ｍｐ２３３〜２３４℃として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δＨ ７．１０〜７．１７（３Ｈ，ｍ，５−Ｈ）、７．４１〜７．５１（３Ｈ，ｍ，４−Ｈ）、７．５９〜７．６４（６Ｈ，ｍ，３−Ｈ［ｘ２］，メタ−Ｈ［ｘ２］，パラ−Ｈ）、８．０（２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７及び２Ｈｚ，オルト−Ｈ［ｘ２］）、８．５３（３Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，６−Ｈ［ｘ３］）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２３Ｈ１９Ｎ４Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３６７ 実測値：３６７
実施例２： リガンド３及び４の合成
塩化チオニル（５．０ｇ、４２ミリモル）とニコチン酸（６２０ｍｇ、５．０ミリモル）を還流下で３時間加熱し、次いで過剰の試薬を減圧下で除去して白色残留物を得た。この残留物を、減圧下でトルエン（２５ｍｌ×２）と共蒸発させて白色粉末を得た。得られた固体を５０ｍｇに分割して、トリエチルアミン（１．１０ｇ、１０．０ミリモル）を含むＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍｌ）中のリガンド１（２５０ｍｇ、０．９５ミリモル）の溶液に撹拌しながら加えた。室温で１６時間撹拌した後、溶液を水（２０ｍｌ×２）で洗浄し、脱水し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を減圧下で除去して暗褐色の残留物を得た。この残留物を、シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにより、ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ混合液（２０：１）で溶出させて精製した。所要の生成物を黄色固体（ｒｆ＝０．２５）として単離し、これをＣＨ２Ｃｌ２／ペンタンから再結晶化して淡黄色粉末（収量２１０ｍｇ、６０．０％）、ｍｐ２０６〜２０７℃を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δＨ ７．１４（３Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝５．０及び２．７Ｈｚ，５−Ｈ［ｘ３］，７．３５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０及び５．０Ｈｚ，５’−Ｈ）、７．５８〜７．６１（３Ｈ，ｍ ４−Ｈ［ｘ３］）、７．６２（３Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝８．２及び１．５Ｈｚ，３−Ｈ［ｘ３］）、８．２３（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝８．０及び２．０Ｈｚ，４’−Ｈ）、８．５１（３Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，６−Ｈ［ｘ３］）、８．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．０及び１．５Ｈｚ，６’−Ｈ）、９．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２’−Ｈ）、１０．４（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２２Ｈ１８Ｎ５Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３６８ 実測値：３６８
リガンド４を出発材料として、同様の方法で、イソニコチン酸から調製して淡黄色粉末（１４０ｍｇ、４０．０％）、ｍｐ１８３〜１８５℃を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δＨ ７．１５（３Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝５．０及び１．５Ｈｚ，５−Ｈ［ｘ３］，７．５７〜７．６６（６Ｈ，ｍ ４−Ｈ［ｘ３］，３−Ｈ［ｘ３］，７．８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５，９Ｈｚ，２’−Ｈ，６’−Ｈ）８．５１（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，６−Ｈ［ｘ３］，８．７４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，３’−Ｈ，５’−Ｈ）、１０．４５（１Ｈ，ｂｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２２Ｈ１８Ｎ５Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３６８ 実測値：３６８。
【００６１】
実施例３： リガンド５の合成
段階（ａ）：エチル２−（ピペリジン−１−イル）−アセテート
ブロモ酢酸エチル（８．５ｇ、５０．９ミリモル）を、クロロホルム（２０ｍｌ）中のピペリジン（４．３ｇ、５０．５ミリモル）とトリエチルアミン（５．５ｇ、５４．４ミリモル）の撹拌溶液に、弱い還流が維持される速度で滴下した。添加が完了したら撹拌を２時間続行し、反応混合物を水（２０ｍｌ×３）で洗浄した。クロロホルム層を脱水し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を蒸発させて黄色のオイル状物を得た。このオイル状物を、シリカの短いカラムにＣＨ２Ｃｌ２／石油エーテル（Ｐｅｔ Ｅｔｈｅｒ）４０：６０混合液（１：１）で溶出させて通過させた。得られた溶液から溶媒を除去して所要の生成物を淡黄色オイル状物（収量５．５ｇ、６４％）として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：−δＨ １．２０（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ３）、１．４０（２Ｈ，ｍ，４’−Ｈ）、１．５５（４Ｈ，ｍ，３’−Ｈ ５’−Ｈ）、２，４２（４Ｈ，ｍ，２’−Ｈ ６’−Ｈ）、３．１０（２Ｈ，ｓ，ＮＣＨ２ＣＯ）４．１０（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７Ｈｚ，ＯＣＨ２）。
【００６２】
段階（ｂ）：ピペリジン−１−イル酢酸ヒドロクロリド
エチル２−（ピペリジン−１−イル）−アセテート（５．５ｇ、３２．２ミリモル）、水（１２ｍｌ）及びｃＨＣｌ（３ｍｌ）を還流下で２０時間加熱した。揮発性成分を減圧下で蒸発させて灰白色の固体を得た。この固体をトルエン（５０ｍｌ×３）と共蒸発させ、真空下で乾燥して灰白色の粉末（収量４．８ｇ、８３％）を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）；−δＨ １．４２〜１．４６（１Ｈ，ｍ，４’−Ｈ）、１．７３〜１．８６（５Ｈ，ｍ，２’−Ｈ ３’−Ｈ ４’−Ｈ）、２．９７〜３．０５（２Ｈ，ｍ，２’−Ｈ ６’−Ｈ）、３．５２〜３．５７（２Ｈ，ｍ，２’−Ｈ ６’−Ｈ）、４．０２（２Ｈ，ｓ，ＮＣＨ２ＣＯ）。
【００６３】
段階（ｃ）：２−（ピペリジン−１−イル）−Ｎ−［１，１，１？トリス（ピリジル−２−イル）メチル］−アセトアミド
水酸化リチウム（８５ｍｇ、３．５ミリモル）とピペリジン−１−イル酢酸ヒドロクロリド（３００ｍｇ、１．６８ミリモル）をメタノール（１０ｍｌ）溶解して無色の溶液を得た。次いで、減圧下でメタノールを除去し、無色固体を、自由流動性の粉末が得られるまでトルエンと一緒に共蒸発させた。このリチウム塩に、無水ＤＭＦ（１０ｍｌ）、リガンド１（２５０ｍｇ、０．９５ミリモル）、Ｐｙｂｏｐ（５１０ｍｇ、０．９８ミリモル）を加え、透明な溶液が得られるまで混合物を加温した。加熱を止め、撹拌を１６時間続行した。減圧下で揮発性成分を除去して橙色残留物を得た。これをＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）中に溶解し、水（２０ｍｌ×３）で洗浄した。有機層を脱水し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を蒸発させて橙色オイル状物を得た。この残留物を、シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにより、ＣＨ３ＣＮ／ＭｅＯＨ混合液（２００：５）で溶出させて精製した。所要の生成物を淡黄色のオイル状物として単離した（ｒｆ＝０．２）。これは放置すると固化した（１００ｍｇ２７％）。ｍｐ１２３〜１２５℃。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：−δ１．４５〜１．５０（２Ｈ，ｍ，４’−Ｈ））、１．６５〜１．６３（４Ｈ，ｍ，３’−Ｈ ５’−Ｈ）、２．５４〜２．５７（４Ｈ，ｍ，２’−Ｈ ６’−Ｈ）、３．０１（２Ｈ，ｓ，ＮＣＨ２ＣＯ）、７．１２（３Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．５，５．０及び１．０Ｈｚ，５−Ｈ，［ｘ３］）７．４６〜７．５０（３Ｈ，ｍ，３−Ｈ［ｘ３］）、７．６０（３Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．５及び５．０Ｈｚ，４−Ｈ［ｘ３］）、８．５０〜８．５３（３Ｈ，ｍ，６−Ｈ［ｘ３］）、１０．６１（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２３Ｈ２６Ｎ５Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３８８ 実測値：３８８
実施例４： リガンド６、７及び８の合成
１Ｈ−イミダゾール−４−カルボン酸（２００ｍｇ、１．８ミリモル）と水酸化リチウム（４５ｍｇ、１．９ミリモル）をメタノール（１０ｍｌ）中に溶解して透明な溶液を得た。減圧下で揮発性成分を除去し、残留物を、自由流動性の粉末が得られるまでトルエンと一緒に共蒸発させた。リチウム塩に、無水ＤＭＦ（１０ｍｌ）、リガンド１（２５０ｍｇ、０．９５ミリモル）及びＰｙｂｏｐ（５１０ｍｇ、０．９８ミリモル）を加えた。透明な有機溶液が得られるまで混合物を加温した。次いで加熱を止め、溶液を１６時間撹拌した。溶媒をロータリーエバポレータで除去して粘性の橙色残留物を得た。これを、シリカゲルを用いたクロマトグラフィーにより、ＣＨ３ＣＮ／ＭｅＯＨ（９５：５）で溶出させて精製した。表記化合物（１００ｍｇ、２９％）を白色粉末ｍｐ＞２５０℃として単離した（ｒｆ＝０．３）。
１Ｈ ＮＭＲ（ｄ６ ＤＭＳＯ）：−δＨ ５．７６（１Ｈ，ｓ，ＮＨイミド）、７．２３〜７．２８（３Ｈ，ｍ，５−Ｈ［ｘ３］，７．４４〜７．４７（３Ｈ，ｍ，３−Ｈ［ｘ３］，７．５３（１Ｈ，ｓ，Ｃ−Ｈ，イミド）、７．７２（３Ｈ，ｂｔ，Ｊ＝７Ｈｚ，４−Ｈ［ｘ３］，７，８２（１Ｈ，ｓ，Ｃ−Ｈイミド）、８．５０（３Ｈ，ｍ，６−Ｈ［ｘ３］，）、１０．４６（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２０Ｈ１７Ｎ６Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３５７ 実測値：３５７。
【００６４】
同様の方法で、リガンド７を４−ピリジル酢酸ヒドロクロリドから調製して無色の粉末（収量４０ｍｇ、１１％）、ｍ ｐｔ１３４〜１３５℃を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δＨ ３．７０（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）、７．１３（３Ｈ，ｍ，５−Ｈ［ｘ３］，７．２６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０ ３−Ｈ，５−Ｈ）、７．４３（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６Ｈｚ ３−Ｈ［ｘ３］，７．５７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ ４−Ｈ［ｘ３］， ８．４７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝５Ｈｚ，６−Ｈ［ｘ３］，８．５３（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２−Ｈ，６−Ｈ）、９．４９（１Ｈ，ｂｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２３Ｈ２０Ｎ５Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３８２ 実測値：３８２
同様の方法で、リガンド８を３−ピリジル酢酸ヒドロクロリドから調製して淡黄褐色の粉末（１８０ｍｇ、５４％）、ｍｐ１６５〜１６６℃を得た。
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δＨ ３．６８（２Ｈ，ｓ，ＣＨ２）７．０８（３Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝７．５，５．０及び１．０Ｈｚ，５−Ｈ［ｘ３］，７．１９（１Ｈ ｄｄ，Ｊ＝７．５及び５．０Ｈｚ ５’−Ｈ）、７．４３（３Ｈ，ｍ，３−Ｈ［ｘ３］）、７．５３（３Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝７．５及び５．０ ４−Ｈ［ｘ３］，７．６４（１Ｈ，ｂｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ ４’−Ｈ）、８．４３（３Ｈ，ｍ，６−Ｈ［ｘ３］，８．４６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝７．５及び１．５Ｈｚ，６’−Ｈ）、８．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，２’−Ｈ）、９．４９（１Ｈ，ｓ，ＮＨ）。
質量スペクトル（ＥＳ）ｍ／ｅ：Ｃ２３Ｈ２０Ｎ５Ｏ（Ｍ＋Ｈ）の計算値：３８２ 実測値：３８２。
【００６５】
実施例５： リガンド６の９９ｍＴｃトリカルボニル錯体の調製
ジェネレータから溶出した１ｍＬのＴｃＯ４−をＴｃ−カルボニルキット（Ｉｓｏｌｉｎｋ（商標），Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｐｅｔｔｅｎ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）に加えた。活性度を９８３ＭＢｑで測定した。バイアルから約４ｍＬのヘッドスペースを取り出し、次いでこれを約１００℃に３０分間加熱した。バイアルを冷却し、抜出用ニードルで均圧化した。５０〜１００ｕｇのリガンド６を加え、続いて４ｍＬヘッドスペースを取り出した。バイアルを約１００℃に３０分間加熱し、次いで冷却し、抜出用ニードルでバイアルを均圧化した。ｐＨは約１１．５と測定された。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で測定した放射線化学的純度（ＲＣＰ）は９８％であった。
【００６６】
以下のように２つのＨＰＬＣ法を用いた。
【００６７】
方法Ａ
溶媒Ａ＝水の中に０．１％ＴＦＡ、溶媒Ｂ＝アセトニトリル中に０．１％ＴＦＡ
方法Ｂ
溶媒Ａ＝０．２％８８０アンモニア溶液、溶媒Ｂ＝アセトニトリル
両方の方法について以下の勾配を用いた。
【００６８】
【表１】
実施例６： リガンド１、２、４、５及び６の９９ｍＴｃトリカルボニル錯体の調製
ジェネレータから溶出した１ｍＬのＴｃＯ４−をＴｃ−カルボニルキット（Ｉｓｏｌｉｎｋ（商標），Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ，Ｐｅｔｔｅｎ，Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）に加えた。活性度の測定値は２．８８Ｇｑであった。バイアルから約４ｍＬヘッドスペースを取り出し、次いでこれを約１００℃に３０分間加熱した。バイアルを冷却し、抜出用ニードルで均圧化した。
【００６９】
５０〜１００ｕｇ（０．１ｍＬのＭｅＯＨ中に）のリガンドを、窒素を充てんしたバイアルに加え、続いて０．７ｍＬ０．４Ｍホスフェート緩衝剤（ｐＨ約７．５）を加えた。次いでキットから調製した０．２ｍＬのＴｃ（ＣＯ）３（Ｈ２Ｏ）３］＋を加え、活性度の測定値は５９３Ｍｑであった。バイアルを約１００℃に３０分間加熱し、続いて冷却し、抜出用ニードルで均圧化した。ｐＨは約８．５であった。各錯体についてのＲＣＰはＨＰＬＣで測定して（実施例５に記載）以下の通りであった。
【００７０】
【表２】
【図面の簡単な説明】
【００７１】
【図１】本発明のいくつかの金属錯体を示す図である。
【図２】各実施例のリガンドの化学構造をまとめた図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の式Ｉのリガンドの金属錯体。
【化１】
式中、
Ｒ１はＥ基又は−ＣＨ２（ＡＲ５）であり（ＡはＳ又はＯであり、Ｒ５はＨ又はＣ１〜６アルキルである。）、
Ｒ２及びＲ３は各々独立にＥ基であり、
Ｅは適宜置換Ｃ３〜１０窒素含有ヘテロアリール環であり、
Ｒ４は−（Ｚ）ｑ−Ｙであり
（式中、各Ｚは独立に、−ＣＱ２−、−ＣＱ＝ＣＱ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＱ２ＣＯ２−、−ＣＯ２ＣＱ２−、−ＮＱ−、−ＮＱＣＯ−、−ＣＯＮＱ−、−ＮＱ（Ｃ＝Ｏ）ＮＱ−、−ＮＱ（Ｃ＝Ｓ）ＮＱ−、−ＳＯ２ＮＱ−、−ＮＱＳＯ２−、−ＣＱ２ＯＣＱ２−、−ＣＱ２ＳＣＱ２−、−ＣＱ２（ＮＱ）ＣＱ２−、Ｃ４〜８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４〜８シクロアルキレン基、Ｃ５〜１２アリーレン基又はＣ３〜１２ヘテロアリーレン基、アミノ酸若しくは単分散ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロックであり、但し、各Ｑは独立に、Ｈ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４アルコキシアルキル又はＣ１〜４ヒドロキシアルキルから選択され、
ｑは０〜１０の値の整数であり、
ＹはＨ、アミノ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ３〜２０アルキルアリール、Ｃ６〜１４アリール、Ｃ３〜１２複素環、Ｃ２〜１０アルコキシアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０アミノアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０アルコキシ、Ｃ１〜１０アシルオキシ、Ｃ６〜１０アリールオキシ又はＣ６〜１０アロイルオキシであるか、或いはＹは生体ターゲティング部分である。）、
上記金属がテクネチウム又はレニウムの放射性同位体であり、
上記リガンドの５つの可能な原子のうちの３つ以下が錯化に関与する。
【請求項２】
Ｒ１が−ＣＨ２（ＳＲ５）であり、Ｒ５がＣ１〜３アルキルである請求項１記載の金属錯体。
【請求項３】
Ｒ１がピリジル、イミダゾイル及びピラゾイルから選択されるＥ基である請求項１記載の金属錯体。
【請求項４】
Ｒ２及びＲ３が各々ピリジル、イミダゾイル及びピラゾイルから選択されるＥ基である請求項１乃至請求項３記載の金属錯体。
【請求項５】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々ピリジルであるＥ基である請求項１、３及び４のいずれか１項記載の金属錯体。
【請求項６】
各Ｅ基が２−ピリジルである請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の金属錯体。
【請求項７】
前記金属がテクネチウムの放射性同位体である請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の金属錯体。
【請求項８】
前記テクネチウムの放射性同位体が９９ｍＴｃである請求項７記載の金属錯体。
【請求項９】
次の式ＩＩの金属錯体。
［ＬＭＸ３］ｎ （ＩＩ）
式中、
Ｌは請求項１乃至請求項６記載の式Ｉのリガンドであり、
Ｍはテクネチウム又はレニウムの放射性同位体であり、
ＸはＣＯ、ハロゲン、ホスフィン又はイソニトリルから選択され、
ｎは金属錯体の電荷であって、−１、０、＋１又は＋２である。
【請求項１０】
次の式ＩＩａのものである、請求項９記載の金属錯体。
［ＬＭ（ＣＯ）３］ｎ （ＩＩａ）
式中、Ｌは請求項１乃至請求項６記載の式Ｉのリガンドであり、
Ｒ１はＥ基である又は−ＣＨ２（ＡＲ５）であり（Ｒ５はＣ１〜６アルキルである。）、
Ｒ４はアミノ又は−（Ｚ）ｑ−Ｙであり（Ｚ、ｑ及びＹは請求項１で定義した通りである。）、
ｎは＋１又は＋２である。
【請求項１１】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジルである請求項１０記載の金属錯体。
【請求項１２】
Ｒ４がアミノ又は−（Ｚ）ｑ−Ｙであり、Ｙがアミノ、フェニル、ピリジル、ピペリジニル又はイミダゾイルである請求項９又は１０のいずれか１項記載の金属錯体。
【請求項１３】
Ｒ４が−ＮＨ（ＣＯ）Ｐｈ、−ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）３−（ＣＯ）ＮＨＣＨ２Ｐｈ、−ＮＨ（ＣＯ）（３−ピリジル）、−ＮＨ（ＣＯ）（４−ピリジル）、−ＮＨ（ＣＯ）ＣＨ２−ピペリジニル、−ＮＨ（ＣＯ）ＮＨ２又は−ＮＨ（ＣＯ）（２，４−イミダゾイル）から選択される請求項９乃至請求項１１のいずれか１項記載の金属錯体。
【請求項１４】
式ＩＩｂのものである、請求項９記載の金属錯体
ＬＭ（ＣＯ）３ （ＩＩｂ）
式中、Ｌは式Ｉのリガンドであり、
Ｒ１は−ＣＨ２ＳＨ又は−ＣＨ２ＯＨであり、
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は請求項１で定義した通りである。
【請求項１５】
Ｒ１が−ＣＨ２ＳＨであり、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジルである請求項１４記載の金属錯体。
【請求項１６】
Ｍがテクネチウムの放射性同位体である請求項９乃至請求項１５記載の金属錯体。
【請求項１７】
前記テクネチウムの放射性同位体が９９ｍＴｃである請求項１６記載の金属錯体。
【請求項１８】
Ｒ１が−ＣＨ２ＳＣＨ３であるか、又は２−ピリジル若しくは２−キノリン環を含み、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル環を含む場合、Ｒ４はＨ、−ＣＨ２ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ２、Ｃ１〜４カルボキシアルキル、−Ｃ６Ｈ４ＳＯ３Ｈ又は−ＮＨ（ＣＯ）ＲＸ（ＲＸはＣ１〜１２アルキルである。）ではないことを条件とする、請求項１記載の式Ｉのリガンド。
【請求項１９】
Ｙが生体ターゲティング部分である請求項１８記載のリガンド。
【請求項２０】
Ｒ１が−ＣＨ２ＳＨ又は−ＣＨ２ＯＨである請求項１８記載のリガンド。
【請求項２１】
Ｒ１が−ＣＨ２ＳＨであり、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含む請求項２０記載のリガンド。
【請求項２２】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含む請求項１８又は請求項１９記載のリガンド。
【請求項２３】
請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載の金属錯体を含む放射性医薬品。
【請求項２４】
前記金属が９９ｍＴｃである請求項２３記載の放射性医薬品。
【請求項２５】
前記金属錯体が請求項９乃至請求項１３で定義した通りである請求項２４記載の放射性医薬品。
【請求項２６】
前記金属錯体が請求項１４又は請求項１５で定義した通りである請求項２４記載の放射性医薬品。
【請求項２７】
請求項１乃至請求項２２のいずれか１項記載の式Ｉのリガンドを含む請求項２３乃至請求項２６記載の放射性医薬品調製用キット。
【請求項２８】
生体適合性還元剤をさらに含む請求項２７記載のキット。
【請求項２９】
ＳＰＥＣＴイメージングのための請求項２３乃至請求項２６のいずれか１項記載の放射性医薬品の使用。
【請求項１】
次の式Ｉのリガンドの金属錯体。
【化１】
式中、
Ｒ１はＥ基又は−ＣＨ２（ＡＲ５）であり（ＡはＳ又はＯであり、Ｒ５はＨ又はＣ１〜６アルキルである。）、
Ｒ２及びＲ３は各々独立にＥ基であり、
Ｅは適宜置換Ｃ３〜１０窒素含有ヘテロアリール環であり、
Ｒ４は−（Ｚ）ｑ−Ｙであり
（式中、各Ｚは独立に、−ＣＱ２−、−ＣＱ＝ＣＱ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＱ２ＣＯ２−、−ＣＯ２ＣＱ２−、−ＮＱ−、−ＮＱＣＯ−、−ＣＯＮＱ−、−ＮＱ（Ｃ＝Ｏ）ＮＱ−、−ＮＱ（Ｃ＝Ｓ）ＮＱ−、−ＳＯ２ＮＱ−、−ＮＱＳＯ２−、−ＣＱ２ＯＣＱ２−、−ＣＱ２ＳＣＱ２−、−ＣＱ２（ＮＱ）ＣＱ２−、Ｃ４〜８シクロヘテロアルキレン基、Ｃ４〜８シクロアルキレン基、Ｃ５〜１２アリーレン基又はＣ３〜１２ヘテロアリーレン基、アミノ酸若しくは単分散ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）構成ブロックであり、但し、各Ｑは独立に、Ｈ、Ｃ１〜４アルキル、Ｃ２〜４アルケニル、Ｃ２〜４アルキニル、Ｃ１〜４アルコキシアルキル又はＣ１〜４ヒドロキシアルキルから選択され、
ｑは０〜１０の値の整数であり、
ＹはＨ、アミノ、Ｃ１〜１０アルキル、Ｃ３〜２０アルキルアリール、Ｃ６〜１４アリール、Ｃ３〜１２複素環、Ｃ２〜１０アルコキシアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０アミノアルキル、Ｃ１〜１０ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜１０アルコキシ、Ｃ１〜１０アシルオキシ、Ｃ６〜１０アリールオキシ又はＣ６〜１０アロイルオキシであるか、或いはＹは生体ターゲティング部分である。）、
上記金属がテクネチウム又はレニウムの放射性同位体であり、
上記リガンドの５つの可能な原子のうちの３つ以下が錯化に関与する。
【請求項２】
Ｒ１が−ＣＨ２（ＳＲ５）であり、Ｒ５がＣ１〜３アルキルである請求項１記載の金属錯体。
【請求項３】
Ｒ１がピリジル、イミダゾイル及びピラゾイルから選択されるＥ基である請求項１記載の金属錯体。
【請求項４】
Ｒ２及びＲ３が各々ピリジル、イミダゾイル及びピラゾイルから選択されるＥ基である請求項１乃至請求項３記載の金属錯体。
【請求項５】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々ピリジルであるＥ基である請求項１、３及び４のいずれか１項記載の金属錯体。
【請求項６】
各Ｅ基が２−ピリジルである請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の金属錯体。
【請求項７】
前記金属がテクネチウムの放射性同位体である請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の金属錯体。
【請求項８】
前記テクネチウムの放射性同位体が９９ｍＴｃである請求項７記載の金属錯体。
【請求項９】
次の式ＩＩの金属錯体。
［ＬＭＸ３］ｎ （ＩＩ）
式中、
Ｌは請求項１乃至請求項６記載の式Ｉのリガンドであり、
Ｍはテクネチウム又はレニウムの放射性同位体であり、
ＸはＣＯ、ハロゲン、ホスフィン又はイソニトリルから選択され、
ｎは金属錯体の電荷であって、−１、０、＋１又は＋２である。
【請求項１０】
次の式ＩＩａのものである、請求項９記載の金属錯体。
［ＬＭ（ＣＯ）３］ｎ （ＩＩａ）
式中、Ｌは請求項１乃至請求項６記載の式Ｉのリガンドであり、
Ｒ１はＥ基である又は−ＣＨ２（ＡＲ５）であり（Ｒ５はＣ１〜６アルキルである。）、
Ｒ４はアミノ又は−（Ｚ）ｑ−Ｙであり（Ｚ、ｑ及びＹは請求項１で定義した通りである。）、
ｎは＋１又は＋２である。
【請求項１１】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジルである請求項１０記載の金属錯体。
【請求項１２】
Ｒ４がアミノ又は−（Ｚ）ｑ−Ｙであり、Ｙがアミノ、フェニル、ピリジル、ピペリジニル又はイミダゾイルである請求項９又は１０のいずれか１項記載の金属錯体。
【請求項１３】
Ｒ４が−ＮＨ（ＣＯ）Ｐｈ、−ＮＨ（ＣＯ）（ＣＨ２）３−（ＣＯ）ＮＨＣＨ２Ｐｈ、−ＮＨ（ＣＯ）（３−ピリジル）、−ＮＨ（ＣＯ）（４−ピリジル）、−ＮＨ（ＣＯ）ＣＨ２−ピペリジニル、−ＮＨ（ＣＯ）ＮＨ２又は−ＮＨ（ＣＯ）（２，４−イミダゾイル）から選択される請求項９乃至請求項１１のいずれか１項記載の金属錯体。
【請求項１４】
式ＩＩｂのものである、請求項９記載の金属錯体
ＬＭ（ＣＯ）３ （ＩＩｂ）
式中、Ｌは式Ｉのリガンドであり、
Ｒ１は−ＣＨ２ＳＨ又は−ＣＨ２ＯＨであり、
Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は請求項１で定義した通りである。
【請求項１５】
Ｒ１が−ＣＨ２ＳＨであり、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジルである請求項１４記載の金属錯体。
【請求項１６】
Ｍがテクネチウムの放射性同位体である請求項９乃至請求項１５記載の金属錯体。
【請求項１７】
前記テクネチウムの放射性同位体が９９ｍＴｃである請求項１６記載の金属錯体。
【請求項１８】
Ｒ１が−ＣＨ２ＳＣＨ３であるか、又は２−ピリジル若しくは２−キノリン環を含み、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル環を含む場合、Ｒ４はＨ、−ＣＨ２ＯＨ、Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ２、Ｃ１〜４カルボキシアルキル、−Ｃ６Ｈ４ＳＯ３Ｈ又は−ＮＨ（ＣＯ）ＲＸ（ＲＸはＣ１〜１２アルキルである。）ではないことを条件とする、請求項１記載の式Ｉのリガンド。
【請求項１９】
Ｙが生体ターゲティング部分である請求項１８記載のリガンド。
【請求項２０】
Ｒ１が−ＣＨ２ＳＨ又は−ＣＨ２ＯＨである請求項１８記載のリガンド。
【請求項２１】
Ｒ１が−ＣＨ２ＳＨであり、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含む請求項２０記載のリガンド。
【請求項２２】
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が各々２−ピリジル基を含む請求項１８又は請求項１９記載のリガンド。
【請求項２３】
請求項１乃至請求項１７のいずれか１項記載の金属錯体を含む放射性医薬品。
【請求項２４】
前記金属が９９ｍＴｃである請求項２３記載の放射性医薬品。
【請求項２５】
前記金属錯体が請求項９乃至請求項１３で定義した通りである請求項２４記載の放射性医薬品。
【請求項２６】
前記金属錯体が請求項１４又は請求項１５で定義した通りである請求項２４記載の放射性医薬品。
【請求項２７】
請求項１乃至請求項２２のいずれか１項記載の式Ｉのリガンドを含む請求項２３乃至請求項２６記載の放射性医薬品調製用キット。
【請求項２８】
生体適合性還元剤をさらに含む請求項２７記載のキット。
【請求項２９】
ＳＰＥＣＴイメージングのための請求項２３乃至請求項２６のいずれか１項記載の放射性医薬品の使用。
【図１】
【図２】
【図２】
【公表番号】特表２００８−５１５７９４（Ｐ２００８−５１５７９４Ａ）
【公表日】平成２０年５月１５日（２００８．５．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５３４０９１（Ｐ２００７−５３４０９１）
【出願日】平成１７年１０月４日（２００５．１０．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００５／００３８０６
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０３７９８８
【国際公開日】平成１８年４月１３日（２００６．４．１３）
【出願人】（３０５０４０７１０）ジーイー・ヘルスケア・リミテッド (99)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年５月１５日（２００８．５．１５）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年１０月４日（２００５．１０．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００５／００３８０６
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０３７９８８
【国際公開日】平成１８年４月１３日（２００６．４．１３）
【出願人】（３０５０４０７１０）ジーイー・ヘルスケア・リミテッド (99)
【Ｆターム（参考）】
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