核酸誘導体及びその中間体化合物の製造方法
【課題】 Ｌ−チミジン等の核酸誘導体及びその中間体化合物の工業的により有利な製造方法を提供する。さらに、核酸誘導体の合成に有用な新規中間体化合物を提供する。
【解決手段】 アラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を行い、２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体を得る。また該エキソメチレン体を異性化し、２′−ハロゲン−チミジン化合物を得る。該２′−ハロゲン−チミジン化合物は、脱ハロゲン化及び脱保護化を経て、チミジンへと誘導することができる。また２′−ハロゲン−チミジン化合物を塩基で処理することにより、２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンへ誘導することができる。
【解決手段】 アラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を行い、２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体を得る。また該エキソメチレン体を異性化し、２′−ハロゲン−チミジン化合物を得る。該２′−ハロゲン−チミジン化合物は、脱ハロゲン化及び脱保護化を経て、チミジンへと誘導することができる。また２′−ハロゲン−チミジン化合物を塩基で処理することにより、２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンへ誘導することができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品として有用な核酸誘導体及びその中間体化合物の製造方法に関する。本発明はまた、該核酸誘導体の合成に有用な中間体化合物にも関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、核酸誘導体、特にＬ−チミジンなどの非天然型であるＬ−核酸誘導体の医薬品としての有用性が注目されている。Ｌ−核酸誘導体の合成法としては、天然に存在するＬ型糖であるＬ−アラビノースを原料とする方法が一般に知られている。
【０００３】
特許文献１には、アラビノースよりアラビノアミノオキサゾリンを合成し、該アラビノアミノオキサゾリンとα−ブロモメチルアクリル酸エステルとから得られるアラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エステル付加体を閉環して、２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンを得る方法が開示されている。実施例では、原料としてＤ−アラビノースを用い、Ｄ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンを得ているが、Ｌ−アラビノースを用いれば同様にＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンを得ることができる。該Ｌ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンは、非特許文献１等に開示されている公知の方法により、Ｌ−チミジン等のＬ−核酸誘導体に導くことできる。
【０００４】
特許文献２には、上記方法の改良法が開示されている。すなわち、該文献には、Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エステル付加体を閉環してＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンとする過程において、中間物質として生じるＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンのエキソ体を、水素雰囲気下、パラジウム触媒で異性化させることで、より効率的にＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンに誘導する方法が開示されている。本方法は、特許文献１の方法において、閉環反応に続いて起こる異性化反応に、パラジウム触媒を使用することで、Ｌ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンの加水分解化合物が副生物として生じる問題を改善する方法であるが、淘汰が比較的困難なＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンの水素化化合物（５、６−ジヒドロ体）が副生物として新たに生じるという問題がある。
【０００５】
特許文献３には、特許文献２の方法の上記問題点が指摘されており、触媒量や反応温度等を最適化することにより、５、６−ジヒドロ体の副生を抑制することが提案されている。しかしながら、Ｌ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンのエキソ体は比較的不安定な化合物であり、高温では水素化化合物の副生が低下するものの、加水分解化合物の副生が増大する傾向にあるなど、反応の制御が煩雑かつ困難である。また特許文献３の方法でも数％の５、６−ジヒドロ体の生成は避けられない。
【０００６】
【特許文献１】特開平６-９２９８８号公報
【特許文献２】特開２００２-２４１３９０公報
【特許文献３】国際公開２００７-１０４７９３号パンフレット
【非特許文献１】ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサイティー・ケミカル・コミュニケーション（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．），１０，１２５５−１２５６（１９９４）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、前記記載の従来技術で課題とされている副反応の問題を解決する、核酸誘導体及びその中間体化合物の製造方法を提供することにある。また本発明は、該核酸誘導体の合成に有用な新規中間体化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者等は前記課題を解決すべく鋭意検討した結果、式（１）で表されるアラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を行なって得られる、式（２）で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体が、核酸誘導体の製造に有用な新規の中間体となることを見出した。該エキソメチレン体は、２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンのエキソ体と比較し、加水分解反応に対して安定であり、また該エキソメチレン体は非水素雰囲気下で異性化することができるため、５，６−ジヒドロ体の副生といった問題を生じることなく、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を得ることが可能である。該２′−ハロゲン−チミジン化合物は、脱ハロゲン化及び脱保護化を経て、チミジンへと誘導することができる。また、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を塩基で処理することにより、２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンへも誘導することができる。本発明者らはこれらの知見に基づき本発明を完成させた。
【０００９】
すなわち、本発明は以下の内容を含むものである。
［１］ 式（１）：
（式中、Ｒ１はアルキル基を示し、Ｘ１は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ｐ−トルエンスルフォニルオキシ基又はメタンスルフォニルオキシ基を示す。）で表されるアラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を逐次又は同時に行なうことを特徴とする、式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物の製造方法。
［２］ 前記［１］記載の方法に従って、式（２）で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を得た後、該化合物を異性化することを特徴とする、式（３）：
で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物の製造方法。
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
［３］ 前記［２］記載の方法に従って、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱ハロゲン化することを特徴とする、式（４）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるチミジン化合物の製造方法。
［４］ 前記［３］記載の方法に従って、式（４）で表されるチミジン化合物を得た後、該化合物を脱保護化することを特徴とする、式（５）：
で表されるチミジンの製造方法。
［５］ 前記［２］記載の方法に従って、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を塩基で処理することを特徴とする、式（６）：
で表される２、２′−アンヒドロ−１−（β−アラビノフラノシル）チミンの製造方法。
［６］ 式（１）で表されるアラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、式（７）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される化合物を作用させ、保護化及びハロゲン化を同時に行ない、式（２）で表される化合物を得ること特徴とする、前記［１］〜［５］のいずれかに記載の方法。
［７］ 式（１′）：
（式中、Ｒ１はアルキル基を示し、Ｘ１は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ｐ−トルエンスルフォニルオキシ基又はメタンスルフォニルオキシ基を示す。）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を逐次又は同時に行なうことを特徴とする、式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物の製造方法。
［８］ 前記［７］記載の方法に従って、式（２）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を得た後、該化合物を異性化することを特徴とする、式（３′）：
で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物の製造方法。
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
［９］ 前記［８］記載の方法に従って、式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱ハロゲン化することを特徴とする、式（４′）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるＬ−チミジン化合物の製造方法。
［１０］ 前記［９］記載の方法に従って、式（４′）で表されるＬ−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱保護化することを特徴とする、式（５′）：
で表されるＬ−チミジンの製造方法。
［１１］ 前記［８］記載の方法に従って、式（３′）で表されるＬ−チミジン化合物を得た後、該化合物を塩基で処理することを特徴とする、式（６′）：
で表される２、２′−アンヒドロ−１−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンの製造方法。
［１２］ 式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、式（７）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される化合物を作用させ、保護化及びハロゲン化を同時に行ない、式（２′）で表される化合物を得ること特徴とする、前記［７］〜［１１］のいずれかに記載の方法。
［１３］ 異性化が、非水素雰囲気下に行われる、前記［２］〜［６］、［８］〜［１２］のいずれかに記載の方法。
［１４］ 異性化が、遷移金属触媒によって行われる、前記［２］〜［６］、［８］〜［１２］のいずれかに記載の方法。
［１５］ 異性化が、ロジウム触媒又はパラジウム触媒によって行われる、前記［２］〜［６］、［８］〜［１２］のいずれかに記載の方法。
［１６］ Ｘ１が塩素原子又は臭素原子である、前記［１］〜［１５］のいずれかに記載の方法。
［１７］ Ｘ２が塩素原子又は臭素原子である、前記［１］〜［１６］のいずれかに記載の方法。
［１８］ 一般式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物。
［１９］ 一般式（２′）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物。
【００１０】
本発明の方法を適用し、Ｌ−アラビノースからＬ−チミジン又はＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンへ誘導するスキームを以下に示す。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、核酸誘導体の中間体として有用な一般式（２）で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物が提供される。該化合物は、加水分解反応に対して安定であり、５，６−ジヒドロ体を副生することなく異性化が可能であり、チミジン等の核酸誘導体に、より工業的に有利な方法で導くことができる。特に本発明は、Ｌ−チミジン等のＬ−核酸誘導体の製造に好適に用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下、Ｌ−核酸誘導体の製法を例にして、本発明を詳細に説明する。なお本発明はＤ−核酸誘導体、核酸誘導体のラセミ体にも同様に適用可能である。
【００１３】
式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン化合物は、Ｌ−アラビノースを出発原料として、以下の公知のスキームにより製造することができる。
【００１４】
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリンは、公知反応に従って、Ｌ−アラビノースとシアンアミドを反応させることにより得ることができる（ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ. ），４７，５３１−５４３（１９７０）；ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．），３８，５９３（１９７３）参照）。また、Ｌ−アラビノアミノオキサゾリンを式（８）：
で表される、α−ハロメチルアクリル酸エステルと反応させることにより、式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を得ることができる（特許文献１、２及び３参照）。
【００１５】
式（１′）及び（８）中、Ｒ１はアルキル基を示し、Ｘ１は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ｐ−トルエンスルフォニルオキシ基又はメタンスルフォニルオキシ基を示す。Ｒ１で示されるアルキル基としては炭素数１〜６のアルキル基が好ましく、特にメチル基、エチル基が好ましい。Ｘ１としては、特に塩素原子、臭素原子が好ましい。
【００１６】
式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を逐次又は同時に行ない、式（２′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物に誘導する。
式（２′）中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。
【００１７】
Ｒ２で示されるヒドロキシの保護基としては、アシル基、アルコキシカルボニル基、アルキル基、アラルキル基、シリル基等が挙げられる。アシル基としては、例えば、ホルミル基、アセチル基、イソブチロイル基、ピバロイル基、ベンゾイル基、４−トルオイル基、４−クロロベンゾイル基等の炭素数１〜８のアシル基が挙げられる。アルコキシカルボニル基としては、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル基、２−トリメチルシリルエトキシカルボニル基などが挙げられる。アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等の炭素数１〜４のアルキル基が挙げられる。アラルキル基としては、例えば、ベンジル基、４−モノメトキシベンジル基、トリチル基、４−モノメトキシトリチル基、４，４’−ジメトキシトリチル基等の炭素数７〜２１のアラルキル基が挙げられる。シリル基としては、例えば、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基等の３置換シリル基が挙げられる。その他、メトキシメチル基、メチルチオメチル基、ベンジルオキシメチル基、メトキシエトキシメチル基、テトラヒドロピラニル基、メトキシカルボニル基、９−フルオレニルメトキシカルボニル基、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基等のヒドロキシ基の保護基を使用することができる。ヒドロキシ基の保護基としては、塩基による加水分解により容易に脱保護が可能なアシル基が特に好ましく、アシル基の中ではアセチル基が特に好ましい。
【００１８】
Ｘ２で示されるハロゲン原子としては、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、フッ素原子が挙げられる。これらの中では、塩素原子、臭素原子が好ましく、特に臭素原子が好ましい。
【００１９】
塩基処理において使用する塩基は、無機塩基及び有機塩基のいずれも使用することができる。具体例としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化バリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、酢酸ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、ＤＭＡＰ（ジメチルアミノピリジン）、アンモニア等が挙げられ、特に炭酸カリウム及びカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドが好ましい。
【００２０】
塩基処理による反応は溶媒中で行うのが好ましい。溶媒としては、例えば、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のプロトン性溶媒、ベンゼン、トルエン、キシレン、１，２−ジクロロエタン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、ジメチルイミダゾリジノン、Ｎ−メチルピロリドン、酢酸エチル、ジオキサン、テトラヒドロフランなどの非プロトン性溶媒を単独で、あるいは２種類以上を混合して使用することができる。これらの中では、特に水が好ましい。反応温度は通常−５０℃〜１５０℃の範囲であり、０℃〜５０℃の範囲で行うのが好ましい。反応時間は通常１０分〜１６８時間の範囲であり、１時間〜１０８時間の範囲で行うのが好ましい。
【００２１】
塩基による処理が終了した後、３′位及び５′位のヒドロキシ基の保護化及び２′位のハロゲン化を逐次又は同時に行ない、式（２′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を得る。保護化及びハロゲン化は逐次に、すなわち、保護化に続いてハロゲン化を行うか、ハロゲン化に続いて保護化を行うかのいずれかで行うことができる。
【００２２】
ヒドロキシ基の保護は、公知の方法に従って行うことができる。例えば、適当な溶媒中で、アシル化剤、アルコキシカルボニル化剤、アルキル化剤、アラルキル化剤、シリル化剤等のヒドロキシ基の保護化試薬を添加する。ヒドロキシ基の保護化試薬の例としては、無水酢酸、塩化アセチル、塩化ベンゾイル、無水トリフルオロ酢酸等のアシル化剤、塩化メトキシカルボニル、塩化ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、塩化ベンジルオキシカルボニル、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート等のアルコキシカルボニル化剤、臭化ベンジル等のアラルキル化剤、塩化トリメチルシリル、塩化トリエチルシリル、塩化ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、トリフルオロメタンスルホン酸ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルエステル等のシリル化剤等を挙げることができる。
【００２３】
ヒドロキシ基の保護化は当業者によく知られた方法であり、例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（第３版、ジョン・ウィリー・アンド・ソンズ社、１９９９年（Protective Groups in Organic Synthesis 3rd edition (John Wiley＆Sons, Inc. 1999)）に記載の方法に準じて行うことができる。
【００２４】
ハロゲン化剤としては、臭化水素酸、塩酸、ピリジン臭化水素酸塩、ピリジン塩酸塩、アルキルアンモニウムハライド、臭素化ナトリウム等のハロゲン化物が挙げられる。また、式（７）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表されるハロゲン化試薬を作用させれば、保護化及びハロゲン化を同時に行なうことができる。この方法は、工程数を省略化できるので、より好ましい方法となる。
【００２５】
式（７）中、Ｒ２で示されるヒドロキシ基の保護基としては、前記と同じものが挙げられる。式（７）で表されるハロゲン化試薬を使用した場合、特にアシル基が好ましい。アシル基としては前述したものが例示され、特にアセチル基が好ましい。Ｘ２で示されるハロゲン原子としては、塩素原子、臭素原子が好ましく、特に臭素原子が好ましい。すなわち、式（７）で表されるハロゲン化試薬の好ましい例としては、アシルクロリド、アシルブロミドが挙げられ、中でもベンゾイルクロリド、ベンゾイルブロミド、アセチルクロリド、アセチルブロミドが好ましく、特にアセチルブロミドが好ましい。
【００２６】
ハロゲン化試薬の使用量は、式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体に対して、通常１．１〜１５モル当量、好ましくは３〜７モル当量である。反応は溶媒中で行うのが好ましい。溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、ジメチルスルホキシド、ジメチルイミダゾリジノン、Ｎ−メチルピロリドン、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、酢酸エチルなどの非プロトン性溶媒、あるいはこれら非プロトン性溶媒の２種以上を混合した混合溶媒が好ましく、特にジメチルホルムアミド、及びジメチルホルムアミドと酢酸エチルの混合溶媒が好ましい。反応温度は通常０〜１５０℃の範囲であり、４０〜１００℃の範囲で行うのが好ましい。 反応時間は通常５分〜２４時間の範囲であり、１５分〜６時間の範囲で行うのが好ましい。反応溶液を、抽出、晶析、クロマトグラフィー等の当業者に公知の精製手段で処理することにより、式（２′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を精製及び単離することができる。引き続き式（３′）で表される化合物に誘導する場合は、任意に精製操作や単離操作を省略してもよい。
【００２７】
なお、式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した場合、特許文献１〜３に記載の方法と同様に、まず閉環反応が進行し、下式（９′）：
で表されるＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンのエキソ体が生成する。該エキソ体を単離して固体として取得することも可能であるが、通常その必要はなく、また単離した場合、特許文献２の実施例にも記載されているように、収率の著しい低下を招くため、精製や単離を行うことなく、次の保護化及びハロゲン化工程を行うのが好ましい。
【００２８】
式（２′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物は、異性化することにより、式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物に誘導することができる。
式（３′）中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。ヒドロキシ基の保護基及びハロゲン原子については前述と同様である。
【００２９】
本発明においては、異性化反応を安定な式（２′）で表される化合物に対して行うため、特許文献１〜３に見られるように、式（９′）で表される化合物が異性化反応中に加水分解するといった問題を生じない。また、水素を使用せずに異性化を行うことができるため、特許文献２及び３のように５，６−ジヒドロ体の副生といった問題を生じることなく、式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物に誘導することが可能である。
【００３０】
式（２′）で表される化合物は、金属触媒、酸、光照射によって異性化させることができる。金属触媒としては、異性化を促進させるものであれば特に限定されないが、遷移金属触媒が好ましい。遷移金属触媒としては、パラジウム触媒、ロジウム触媒、ルテニウム触媒、白金触媒等が挙げられる。遷移金属触媒は、遷移金属の酸化物または塩化物の形態や、遷移金属触媒に配位子が配位した形態のものを使用することができる。また遷移金属触媒は、活性炭、アルミナ、シリカ等の担体に担持させた形態のものを使用することができる。酸としては、塩酸、硫酸、リン酸等の無機酸、ギ酸、酢酸、メタンスルホン酸、Ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸及びアンバーライト１５等の酸性樹脂が挙げられる。異性化は、遷移金属触媒により行うのが好ましい。遷移金属触媒としては、パラジウム触媒及びロジウム触媒がより好ましく、特にロジウム触媒が好ましい。具体例としては、パラジウム炭素担持触媒、パラジウムアルミナ担持触媒、臭化パラジウム、塩化パラジウム、ヨウ化パラジウム、硝酸パラジウム、シアン化パラジウム、パラジウムアセテート、パラジウムアセチルアセトナート、パラジウムトリフルオロアセテートダイマー、酸化パラジウム、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム等のパラジウム触媒、ロジウム炭素担持触媒、ロジウムアルミナ担持触媒、ロジウムカルボニル、臭化ロジウム、塩化ロジウム、ヨウ化ロジウム、ロジウムアセテートダイマー、ロジウムアセチルアセトナート、ロジウムトリフルオロアセテートダイマー、酸化ロジウム、クロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム等のロジウム触媒が挙げられる。
【００３１】
異性化反応は系内に実質的に水素を含まない、不活性ガス雰囲気下、窒素雰囲気下、真空下、減圧下等の非水素雰囲気下で行うのが好ましい。特に不活性ガス雰囲気下で行うのが好ましく、不活性ガスとしては窒素及びアルゴンが特に好ましい。水素雰囲気下で行う異性化反応は５，６−ジヒドロ体の副生を招くので好ましくない。なお後掲参考例２に示すように、不活性ガス雰囲気下における遷移金属触媒による異性化反応を式（９′）で表されるＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンのエキソ体に適用しても、異性化反応は進行しなかった。本発明の新規中間体化合物である式（２′）の化合物に誘導することで、非水素雰囲気下において異性化が達成された。これにより、特許文献２及び３で問題となっていた５，６−ジヒドロ体の副生を回避することが可能となった。
【００３２】
触媒量は式（２′）の化合物に対して通常０．０１〜９０ｍｏｌ％、好ましくは１〜２０ｍｏｌ％である。反応は溶媒中で行うのが好ましい。溶媒としては、水、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、ジメチルスルホキシド、ジメチルイミダゾリジノン、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル、アセトン、エチルメチルケトン、イソブチルメチルケトン、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ベンゼン、トルエン、ヘキサン、ヘプタン等の単独もしくは混合物が好ましく、特にトルエンが好ましい。反応温度は−５０〜３００℃の範囲で行うのが好ましく、特に５０〜１５０℃の範囲で行うのがより好ましい。反応時間は通常１５分〜７２時間の範囲であり、１時間〜２４時間の範囲で行うのが好ましい。反応終了後、反応溶液を抽出、晶析、クロマトグラフィー等の当業者に公知の単離精製手段で処理することにより、式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物を単離精製することができる。引き続き、式（４′）で表される化合物に誘導する場合は、任意に単離精製操作を省略してもよい。
【００３３】
式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物は、２′位を脱ハロゲン化することにより、式（４′）で表されるＬ−チミジン化合物に誘導することができる。
式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示す。ヒドロキシ基の保護基については前述と同様である。
【００３４】
脱ハロゲン化は、水素化トリブチルスズ、水素化トリエチルシラン、亜リン酸エステル、次亜リン酸及び次亜リン酸塩を用いるラジカル還元、水素雰囲気下における遷移金属触媒による接触還元、ニッケル触媒による還元等、公知の方法により行うことができる。次亜リン酸塩としては、例えば、次亜リン酸Ｎ−エチルピペリジニウム、次亜リン酸トリエチルアンモニウム、次亜リン酸ヘキサデシルトリメチルアンモニウム等が挙げられる。脱ハロゲン化剤として水素化トリブチルスズや水素化トリエチルシランを用いる場合、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、１，１’−アゾビス（シクロヘキサンカルボニトリル）、トリエチルボラン等のラジカル反応開始剤を共存させる。
【００３５】
脱ハロゲン化は、水素雰囲気下で遷移金属触媒により接触還元する方法が好ましい。遷移金属触媒としては、前述したのと同様のものを用いることができる。特に、パラジウム触媒、ロジウム触媒が好ましい。具体例も前述と同様である。水素圧は、常圧〜５０気圧、好ましくは１気圧〜１０気圧の範囲で行われる。なお、式（２′）の化合物の異性化において、反応終了後、反応溶液から金属触媒を除去することなく、脱ハロゲン化工程における接触還元反応の触媒として、そのまま使用することができる。
【００３６】
反応は溶媒中で行うのが好ましい。溶媒としては、水、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、ジメチルスルホキシド、ジメチルイミダゾリジノン、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル、アセトン、エチルメチルケトン、イソブチルメチルケトン、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ベンゼン、トルエン、ヘキサン、ヘプタン等が、単独もしくは混合物として挙げられ、特にメタノールと水の混合溶媒が好ましい。系中に必要により、トリエチルアミン、酢酸ナトリウム等の塩基や酢酸等の酸を添加してもよい。反応温度は−５０℃〜２００℃の範囲で行うのが好ましく、特に０℃〜５０℃の範囲で行うのがより好ましい。 反応時間は通常１０分〜７２時間の範囲であり、３０分〜２４時間の範囲で行うのが好ましい。反応終了後、遷移金属触媒をろ過により除去する。反応溶液は、抽出、晶析、クロマトグラフィー等の当業者に公知の単離精製手段で処理することにより、式（４′）で表されるＬ−チミジン化合物を単離精製することができる。引き続き式（５′）で表される化合物に誘導する場合は、任意に単離精製操作を省略してもよい。
【００３７】
式（４′）で表されるＬ−チミジン化合物は、脱保護化することにより、式（５′）で表されるＬ−チミジンに誘導することができる。
【００３８】
ヒドロキシ基の脱保護化は、当業者に公知の方法により行うことができる。例えば、ヒドロキシ基の保護基がアシル基の場合には、アンモニア、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムメトキサイド、カリウムメトキサイド等のアルカリで処理することにより脱保護することができる。またヒドロキシ基の保護基がアラルキル基の場合には、塩酸もしくは酢酸等の酸で処理することにより、またはパラジウム炭素等を触媒とする接触水素分解等により、脱保護することができる。
【００３９】
式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物は、塩基で処理することにより、式（６′）で表される２、２′−アンヒドロ−１−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンに誘導することができる。
【００４０】
塩基処理において使用する塩基は、前述の式（１′）で表される化合物の塩基処理と同様のものを用いることができ、ここでは特にアンモニアが好ましい。塩基処理による反応は溶媒中で行うのが好ましい。溶媒は、前述の式（１′）で表される化合物の塩基処理の反応溶媒と同様のものを用いることができ、ここでは特にメタノールが好ましい。反応温度、反応時間も前述の塩基処理と同様である。単離精製も抽出、晶析、クロマトグラフィー等の当業者に公知の手段で行うことができる。
【００４１】
以下、実施例により本発明の実施の形態を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。なお以下の式中、Ｅｔはエチル基、Ａｃはアセチル基を意味する。
【実施例１】
【００４２】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体の合成（１）
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体（１ｇ、純度８３％、２．２６ｍｍｏｌ）の水（３ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（０．３８ｇ、２．７７ｍｍｏｌ）の水（２ｍＬ）溶液を加え、３０℃で２時間攪拌した。ＨＰＬＣで、反応溶液中にＬ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体が生成しているのを確認した。反応溶液を希塩酸で中和し、溶媒をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに置換した。次に、アルゴンガス雰囲気下、得られた溶液に酢酸エチル（１８ｍＬ）及びアセチルブロミド（０．８０ｍＬ、１０．８８ｍｍｏｌ）を加え、８０℃にて３０分間反応させた。反応終了後、酢酸エチル（１０ｍＬ）及び飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えて分相し、水相を酢酸エチル（１０ｍＬ）で再抽出した。有機相を合わせて、水（１０ｍＬ）及び飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム用いて乾燥した後、溶媒を減圧除去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（０．４８ｇ、収率５３％）を得た。
得られた標題化合物の分析結果
ｍｐ：１４８−１４９℃
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ２．１３（ｓ，３Ｈ），δ２．１９（ｓ，３Ｈ），δ４．０３−４．０８（ｍ，１Ｈ），δ４．１７−４．３７（ｍ，４Ｈ），δ４．３９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９，５．９Ｈｚ），δ５．２０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９，３．１Ｈｚ），δ５．７３−５．７４（ｍ，１Ｈ），δ６．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），δ６．４５−６．４７（ｍ，１Ｈ），δ８．２６（ｂｓ，１Ｈ）
【実施例２】
【００４３】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体の合成（２）
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体（１ｇ、純度９１％、２．４８ｍｍｏｌ）の水（３ｍＬ）溶液に１Ｍのカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドのテトラヒドロフラン（２．７２ｍＬ）溶液を加え、室温で２時間及び３０℃で１９時間攪拌した。ＨＰＬＣで、反応溶液中にＬ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体が生成しているのを確認した。反応溶液を希塩酸で中和し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに置換した。次いで、アルゴンガス雰囲気下、得られた溶液にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１８ｍＬ）及びアセチルブロミド（０．８０ｍＬ、１０．８８ｍｍｏｌ）を加え、８０℃にて３０分間反応させた。反応終了後、酢酸エチル（１０ｍＬ）及び飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えて分相し、水相を酢酸エチル（１０ｍＬ）で再抽出した。有機相を合わせてＨＰＬＣで分析し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（０．４３ｇ、収率４３％）が生成していることを確認した。反応終了後、酢酸エチル（１０ｍＬ）及び飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えて分相し、水相を酢酸エチル（１０ｍＬ）で再抽出した。有機相を合わせて水（１０ｍＬ）及び飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム用いて乾燥した後、溶媒を減圧除去した。得られた残渣にメタノール（２ｍＬ）を加え、０℃で１．５時間攪拌した。生成した結晶をろ別し、メタノール（１ｍＬ）で洗浄後、減圧乾燥することにより、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（０．４０ｇ、収率４０％）を得た。
【実施例３】
【００４４】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジンの合成（１）
アルゴンガス雰囲気下、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（０．２ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）及びクロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（０．０２３ｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）をトルエン（９．８ｍＬ）に溶解し、１００℃で２時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧除去し、得られた残渣を１Ｈ ＮＭＲ及びＨＰＬＣで分析したところ、原料は完全に消失しており、また５，６−ジヒドロ体であるＬ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジンは全く生成していないことを確認した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（０．１８ｇ、収率８９％）を得た。
得られた標題化合物の分析結果
ｍｐ：１３１−１３２℃
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ｍＨｚ）：δ１．９５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），δ２．１１（ｓ，３Ｈ），δ２．１３（ｓ，３Ｈ），δ４．３０−４．４５（ｍ，３Ｈ），δ４．５２−４．５７（ｍ，１Ｈ），δ５．１５−５．２０（ｍ，１Ｈ），δ６．２３ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），δ７．１９（ｓ，１Ｈ），δ８．０２（ｂｓ，１Ｈ）
【実施例４】
【００４５】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジンの合成（２）
アルゴンガス雰囲気下、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（２９．７ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）とトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（３．７３ｍｇ、０．００３５ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（３．７５ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）をトルエン（３ｍＬ）に溶解し、１００℃で１６時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧除去し、得られた残渣を１Ｈ ＮＭＲ及びＨＰＬＣで分析し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（１１．２ｍｇ、３８％）が生成していることを確認した。また５，６−ジヒドロ体であるＬ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジンは全く生成していなかった。
【実施例５】
【００４６】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジンの合成（１）
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（１９５．６ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）の水−メタノール混合溶液（１ｍＬ、水／メタノール＝１／４ (ｖ／ｖ)）に酢酸アンモニウム（４４ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）、酢酸（０．０５５ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）及び１０％パラジウム／炭素（５４．９ｍｇ）を加え、水素雰囲気下、室温で２時間攪拌した。反応終了後、触媒をろ過し、ろ液を減圧除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジン（９０．８ｍｇ、６０％）を得た。
得られた標題化合物の分析結果
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ｍＨｚ）：δ１．９４（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），δ２．１１（ｓ，３Ｈ），δ２．１３（ｓ，３Ｈ），δ２．０２−２．２０（ｍ，１Ｈ），δ２．４４−２．５０（ｍ，１Ｈ），δ４．２４−４．２８（ｍ，１Ｈ），δ４．３０−４．４０（ｍ，２Ｈ），δ５．２０−５．２４（ｍ，１Ｈ），δ６．３０−６．３６（ｍ，１Ｈ），δ７．２７（ｓ，１Ｈ），δ８．２０（ｂｓ，１Ｈ）
【実施例６】
【００４７】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジンの合成（２）
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（５０．９ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の水−メタノール混合溶液（１ｍＬ、水／メタノール＝１／４(ｖ／ｖ)）に酢酸アンモニウム（１１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、酢酸（０．０１４ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）及び１０％パラジウム／炭素（１４．４ｍｇ）を加え、水素雰囲気下室温で２時間攪拌した。反応終了後、触媒をろ過した。ろ液をＨＰＬＣで分析し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジン（３６．７ｍｇ、収率９４％）が生成していることを確認した。
【実施例７】
【００４８】
Ｌ−チミジンの合成
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジン（４６．３ｍｇ、０．１４２ｍｍｏｌ）のメタノール（０．５６ｍＬ）溶液に１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．８５ｍＬ）を加え、室温で２時間攪拌した。反応終了後、反応溶液を希塩酸で中和し、溶媒を減圧除去した。次いで、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ジクロロメタン／メタノール）で精製し、Ｌ−チミジン(３４ｍｇ、収率９８％）を得た。
得られた標題化合物の分析結果
１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＨ−ｄ４，４００ｍＨｚ）：δ１．８７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）， δ２．２０−２．３０（ｍ，２Ｈ），δ３．７０−３．７６（ｍ，１Ｈ），δ３．７６−３．８２（ｍ，１Ｈ，δ３．８６−３．９２（ｍ，１Ｈ），δ４．３６−４．４２（ｍ，１Ｈ），δ６．２５−６．３０（ｍ，１Ｈ），δ７．８１（ｓ，１Ｈ）
【実施例８】
【００４９】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジンの合成（３）
アルゴンガス雰囲気下、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（６０．２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びクロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（１３．８ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）をトルエン（３ｍＬ）に溶解し、１００℃で２時間攪拌した。反応液を室温にまで戻し、トリエチルアミン（３１μＬ、０．２２５ｍｍｏｌ）を加えてから水素ガスに置換して、水素ガス雰囲気下、室温で２０時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧除去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ヘキサン／酢酸エチル）で精製して、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジン（１８．５ｍｇ、収率３８％）を得た。
【実施例９】
【００５０】
２，２′−アンヒドロ−１−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンの合成
アルゴンガス雰囲気下、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（３０ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍＬ）溶液に７Ｍのアンモニアのメタノール溶液（０．７７ｍＬ）を加え、室温で９０時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧除去し、得られた残渣をＨＰＬＣで分析し、２，２′−アンヒドロ−１−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミン（１６．３ｍｇ、８８％）が生成していることを確認した。
【００５１】
＜比較例１＞
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体から２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンの合成
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体（１．５ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の水（１５ｍＬ）溶液を０℃に冷却し、ヒドロキノン（４３．９ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）及び無水炭酸ナトリウム（４３２ｍｇ、４．１ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１５時間攪拌した。反応終了後、酢酸にて中和し、Ｌ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体を含む水溶液（７４０ｍｇ、収率８３％）を得た。次いで、５％パラジウムアルミナ（１５０ｍｇ）を水（７．５ｍＬ）に懸濁し、水素ガス雰囲気下、上記水溶液を４０℃にて滴下し、２時間反応させた。ＨＰＬＣで、反応溶液中にＬ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体が消失していることを確認した後、触媒をろ過し、溶媒を減圧除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ジクロロメタン／メタノール）で精製し、２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミン（６２８ｍｇ、８５％：Ｌ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体基準）と２，２′−アンヒドロ−１−β−Ｌ−アラビノフラノシル−５，６−ジヒドロチミン（９１ｍｇ、１２％：Ｌ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体基準）を７：１の混合物として得た。これら化合物はＲｆ値が非常に近いために分離が困難であった。
２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンのＲｆ値＝０．３２（ジクロロメタン／メタノール＝４／１）
２，２′−アンヒドロ−１−β−Ｌ−アラビノフラノシル−５，６−ジヒドロチミンのＲｆ値＝０．３７（ジクロロメタン／メタノール＝４／１）
【００５２】
＜比較例２＞
２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンからＬ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジンの合成
比較例１で得られた２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミン（１１７．８ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）と２，２′−アンヒドロ−１−β−Ｌ−アラビノフラノシル−５，６−ジヒドロチミン（１６．９ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）の混合物（７：１）を酢酸エチル（６．４ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（０．８９ｍＬ）に懸濁し、室温下アセチルブロミド（０．２２５ ｍＬ、３．０４ｍｍｏｌ）を加え、８０℃にて１時間反応させた。ＴＬＣで原料の消失を確認した後、酢酸エチル（４．２ｍＬ）及び飽和重曹水（２．２ｍＬ）を加え分液し、得られた有機相を飽和食塩水（２．２ｍＬ）で２回洗浄した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ヘキサン／酢酸エチル）で精製したところ、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（１６４．１ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）とＬ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジン（１８．８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を８：１の混合物として得た。これら化合物はＲｆ値が非常に近いために分離が困難であった。
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジンのＲｆ値＝０．３９(ジクロロメタン／メタノール＝２０／１)、 ０．５２（ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）、０．２７（トルエン／ジエチルエーテル＝１／５）
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジンのＲｆ値＝＝０．３９(ジクロロメタン／メタノール＝２０／１)、 ０．５２（ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）、０．２７（トルエン／ジエチルエーテル＝１／５）
【００５３】
＜参考例１＞
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体のロジウム触媒による接触還元
水素ガス雰囲気下、５％ロジウムアルミナ（６ｍｇ）のメタノール（１．５ｍＬ）懸濁液を６０℃に加熱し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（６０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）のメタノール（１．５ｍＬ）懸濁液を滴下して、６０℃で３時間攪拌した。反応終了後、触媒をろ過し、溶媒を減圧除去した。得られた残渣を１Ｈ ＮＭＲで分析したところ、原料は完全に消失し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジンとＬ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジンの混合物が６８：３２で生成していた。
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジン(４６：５４のジアステレオマー混合物)の分析結果
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ｍＨｚ）：δ１．２０−１．３０（ｍ，３Ｈ），δ２．１１（ｓ，３Ｈ），δ２．１９（ｓ，３Ｈ），δ２．７０−２．８０（ｍ，１Ｈ），δ３．１１（ｄｄ，０．４６Ｈ，Ｊ＝１１．９，１１．９Ｈｚ），δ３．２３（ｄｄ，０．５４Ｈ，Ｊ＝１１．９，１１．９Ｈｚ），δ３．３７（ｄｄ，０．５４Ｈ，Ｊ＝１１．９，５．５Ｈｚ），δ３．５４（ｄｄ，０．４６Ｈ，Ｊ＝１１．９，５．９Ｈｚ），δ４．２０−４．４０（ｍ，４Ｈ），δ５．１３−５．３０（ｍ，１Ｈ），δ６．１６（ｄ，０．５４Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），δ６．１７（ｄ，０．４６Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），δ７．５５（ｂｓ，１Ｈ）
【００５４】
＜参考例２＞
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体から不活性ガス雰囲気下での異性化検討
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体（３００ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）の水（３ｍＬ）溶液を０℃に冷却し、ヒドロキノン（９０ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）及び無水炭酸ナトリウム（８７．１ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を加え１５時間攪拌した。反応終了後、酢酸にて中和し、Ｌ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体を含む水溶液（１６７．４ｍｇ、８５％）を得た。次いで、クロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（３７．８ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を水（１．２ｍＬ）に懸濁し、アルゴンガス雰囲気下、上記水溶液を１００℃にて滴下し、２時間反応させた。反応溶液をＨＰＬＣで分析したところ、２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンの生成は確認されず、Ｌ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体の加水分解物である１−β−Ｌ−アラビノフラノシル−５，６−ジヒドロウラシル−５−エキソメチレン体（４４．７ｍｇ、収率２１％）が確認された。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品として有用な核酸誘導体及びその中間体化合物の製造方法に関する。本発明はまた、該核酸誘導体の合成に有用な中間体化合物にも関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、核酸誘導体、特にＬ−チミジンなどの非天然型であるＬ−核酸誘導体の医薬品としての有用性が注目されている。Ｌ−核酸誘導体の合成法としては、天然に存在するＬ型糖であるＬ−アラビノースを原料とする方法が一般に知られている。
【０００３】
特許文献１には、アラビノースよりアラビノアミノオキサゾリンを合成し、該アラビノアミノオキサゾリンとα−ブロモメチルアクリル酸エステルとから得られるアラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エステル付加体を閉環して、２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンを得る方法が開示されている。実施例では、原料としてＤ−アラビノースを用い、Ｄ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンを得ているが、Ｌ−アラビノースを用いれば同様にＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンを得ることができる。該Ｌ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンは、非特許文献１等に開示されている公知の方法により、Ｌ−チミジン等のＬ−核酸誘導体に導くことできる。
【０００４】
特許文献２には、上記方法の改良法が開示されている。すなわち、該文献には、Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エステル付加体を閉環してＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンとする過程において、中間物質として生じるＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンのエキソ体を、水素雰囲気下、パラジウム触媒で異性化させることで、より効率的にＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンに誘導する方法が開示されている。本方法は、特許文献１の方法において、閉環反応に続いて起こる異性化反応に、パラジウム触媒を使用することで、Ｌ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンの加水分解化合物が副生物として生じる問題を改善する方法であるが、淘汰が比較的困難なＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンの水素化化合物（５、６−ジヒドロ体）が副生物として新たに生じるという問題がある。
【０００５】
特許文献３には、特許文献２の方法の上記問題点が指摘されており、触媒量や反応温度等を最適化することにより、５、６−ジヒドロ体の副生を抑制することが提案されている。しかしながら、Ｌ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンのエキソ体は比較的不安定な化合物であり、高温では水素化化合物の副生が低下するものの、加水分解化合物の副生が増大する傾向にあるなど、反応の制御が煩雑かつ困難である。また特許文献３の方法でも数％の５、６−ジヒドロ体の生成は避けられない。
【０００６】
【特許文献１】特開平６-９２９８８号公報
【特許文献２】特開２００２-２４１３９０公報
【特許文献３】国際公開２００７-１０４７９３号パンフレット
【非特許文献１】ジャーナル・オブ・ケミカル・ソサイティー・ケミカル・コミュニケーション（Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．），１０，１２５５−１２５６（１９９４）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、前記記載の従来技術で課題とされている副反応の問題を解決する、核酸誘導体及びその中間体化合物の製造方法を提供することにある。また本発明は、該核酸誘導体の合成に有用な新規中間体化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者等は前記課題を解決すべく鋭意検討した結果、式（１）で表されるアラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を行なって得られる、式（２）で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体が、核酸誘導体の製造に有用な新規の中間体となることを見出した。該エキソメチレン体は、２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンのエキソ体と比較し、加水分解反応に対して安定であり、また該エキソメチレン体は非水素雰囲気下で異性化することができるため、５，６−ジヒドロ体の副生といった問題を生じることなく、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を得ることが可能である。該２′−ハロゲン−チミジン化合物は、脱ハロゲン化及び脱保護化を経て、チミジンへと誘導することができる。また、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を塩基で処理することにより、２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンへも誘導することができる。本発明者らはこれらの知見に基づき本発明を完成させた。
【０００９】
すなわち、本発明は以下の内容を含むものである。
［１］ 式（１）：
（式中、Ｒ１はアルキル基を示し、Ｘ１は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ｐ−トルエンスルフォニルオキシ基又はメタンスルフォニルオキシ基を示す。）で表されるアラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を逐次又は同時に行なうことを特徴とする、式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物の製造方法。
［２］ 前記［１］記載の方法に従って、式（２）で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を得た後、該化合物を異性化することを特徴とする、式（３）：
で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物の製造方法。
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
［３］ 前記［２］記載の方法に従って、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱ハロゲン化することを特徴とする、式（４）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるチミジン化合物の製造方法。
［４］ 前記［３］記載の方法に従って、式（４）で表されるチミジン化合物を得た後、該化合物を脱保護化することを特徴とする、式（５）：
で表されるチミジンの製造方法。
［５］ 前記［２］記載の方法に従って、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を塩基で処理することを特徴とする、式（６）：
で表される２、２′−アンヒドロ−１−（β−アラビノフラノシル）チミンの製造方法。
［６］ 式（１）で表されるアラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、式（７）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される化合物を作用させ、保護化及びハロゲン化を同時に行ない、式（２）で表される化合物を得ること特徴とする、前記［１］〜［５］のいずれかに記載の方法。
［７］ 式（１′）：
（式中、Ｒ１はアルキル基を示し、Ｘ１は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ｐ−トルエンスルフォニルオキシ基又はメタンスルフォニルオキシ基を示す。）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を逐次又は同時に行なうことを特徴とする、式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物の製造方法。
［８］ 前記［７］記載の方法に従って、式（２）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を得た後、該化合物を異性化することを特徴とする、式（３′）：
で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物の製造方法。
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
［９］ 前記［８］記載の方法に従って、式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱ハロゲン化することを特徴とする、式（４′）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるＬ−チミジン化合物の製造方法。
［１０］ 前記［９］記載の方法に従って、式（４′）で表されるＬ−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱保護化することを特徴とする、式（５′）：
で表されるＬ−チミジンの製造方法。
［１１］ 前記［８］記載の方法に従って、式（３′）で表されるＬ−チミジン化合物を得た後、該化合物を塩基で処理することを特徴とする、式（６′）：
で表される２、２′−アンヒドロ−１−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンの製造方法。
［１２］ 式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、式（７）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される化合物を作用させ、保護化及びハロゲン化を同時に行ない、式（２′）で表される化合物を得ること特徴とする、前記［７］〜［１１］のいずれかに記載の方法。
［１３］ 異性化が、非水素雰囲気下に行われる、前記［２］〜［６］、［８］〜［１２］のいずれかに記載の方法。
［１４］ 異性化が、遷移金属触媒によって行われる、前記［２］〜［６］、［８］〜［１２］のいずれかに記載の方法。
［１５］ 異性化が、ロジウム触媒又はパラジウム触媒によって行われる、前記［２］〜［６］、［８］〜［１２］のいずれかに記載の方法。
［１６］ Ｘ１が塩素原子又は臭素原子である、前記［１］〜［１５］のいずれかに記載の方法。
［１７］ Ｘ２が塩素原子又は臭素原子である、前記［１］〜［１６］のいずれかに記載の方法。
［１８］ 一般式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物。
［１９］ 一般式（２′）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物。
【００１０】
本発明の方法を適用し、Ｌ−アラビノースからＬ−チミジン又はＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンへ誘導するスキームを以下に示す。
【発明の効果】
【００１１】
本発明によれば、核酸誘導体の中間体として有用な一般式（２）で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物が提供される。該化合物は、加水分解反応に対して安定であり、５，６−ジヒドロ体を副生することなく異性化が可能であり、チミジン等の核酸誘導体に、より工業的に有利な方法で導くことができる。特に本発明は、Ｌ−チミジン等のＬ−核酸誘導体の製造に好適に用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下、Ｌ−核酸誘導体の製法を例にして、本発明を詳細に説明する。なお本発明はＤ−核酸誘導体、核酸誘導体のラセミ体にも同様に適用可能である。
【００１３】
式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン化合物は、Ｌ−アラビノースを出発原料として、以下の公知のスキームにより製造することができる。
【００１４】
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリンは、公知反応に従って、Ｌ−アラビノースとシアンアミドを反応させることにより得ることができる（ジャーナル・オブ・モレキュラー・バイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ. ），４７，５３１−５４３（１９７０）；ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．），３８，５９３（１９７３）参照）。また、Ｌ−アラビノアミノオキサゾリンを式（８）：
で表される、α−ハロメチルアクリル酸エステルと反応させることにより、式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を得ることができる（特許文献１、２及び３参照）。
【００１５】
式（１′）及び（８）中、Ｒ１はアルキル基を示し、Ｘ１は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ｐ−トルエンスルフォニルオキシ基又はメタンスルフォニルオキシ基を示す。Ｒ１で示されるアルキル基としては炭素数１〜６のアルキル基が好ましく、特にメチル基、エチル基が好ましい。Ｘ１としては、特に塩素原子、臭素原子が好ましい。
【００１６】
式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を逐次又は同時に行ない、式（２′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物に誘導する。
式（２′）中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。
【００１７】
Ｒ２で示されるヒドロキシの保護基としては、アシル基、アルコキシカルボニル基、アルキル基、アラルキル基、シリル基等が挙げられる。アシル基としては、例えば、ホルミル基、アセチル基、イソブチロイル基、ピバロイル基、ベンゾイル基、４−トルオイル基、４−クロロベンゾイル基等の炭素数１〜８のアシル基が挙げられる。アルコキシカルボニル基としては、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル基、２−トリメチルシリルエトキシカルボニル基などが挙げられる。アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等の炭素数１〜４のアルキル基が挙げられる。アラルキル基としては、例えば、ベンジル基、４−モノメトキシベンジル基、トリチル基、４−モノメトキシトリチル基、４，４’−ジメトキシトリチル基等の炭素数７〜２１のアラルキル基が挙げられる。シリル基としては、例えば、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基等の３置換シリル基が挙げられる。その他、メトキシメチル基、メチルチオメチル基、ベンジルオキシメチル基、メトキシエトキシメチル基、テトラヒドロピラニル基、メトキシカルボニル基、９−フルオレニルメトキシカルボニル基、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基等のヒドロキシ基の保護基を使用することができる。ヒドロキシ基の保護基としては、塩基による加水分解により容易に脱保護が可能なアシル基が特に好ましく、アシル基の中ではアセチル基が特に好ましい。
【００１８】
Ｘ２で示されるハロゲン原子としては、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、フッ素原子が挙げられる。これらの中では、塩素原子、臭素原子が好ましく、特に臭素原子が好ましい。
【００１９】
塩基処理において使用する塩基は、無機塩基及び有機塩基のいずれも使用することができる。具体例としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化バリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、酢酸ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、ＤＭＡＰ（ジメチルアミノピリジン）、アンモニア等が挙げられ、特に炭酸カリウム及びカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドが好ましい。
【００２０】
塩基処理による反応は溶媒中で行うのが好ましい。溶媒としては、例えば、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のプロトン性溶媒、ベンゼン、トルエン、キシレン、１，２−ジクロロエタン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、ジメチルイミダゾリジノン、Ｎ−メチルピロリドン、酢酸エチル、ジオキサン、テトラヒドロフランなどの非プロトン性溶媒を単独で、あるいは２種類以上を混合して使用することができる。これらの中では、特に水が好ましい。反応温度は通常−５０℃〜１５０℃の範囲であり、０℃〜５０℃の範囲で行うのが好ましい。反応時間は通常１０分〜１６８時間の範囲であり、１時間〜１０８時間の範囲で行うのが好ましい。
【００２１】
塩基による処理が終了した後、３′位及び５′位のヒドロキシ基の保護化及び２′位のハロゲン化を逐次又は同時に行ない、式（２′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を得る。保護化及びハロゲン化は逐次に、すなわち、保護化に続いてハロゲン化を行うか、ハロゲン化に続いて保護化を行うかのいずれかで行うことができる。
【００２２】
ヒドロキシ基の保護は、公知の方法に従って行うことができる。例えば、適当な溶媒中で、アシル化剤、アルコキシカルボニル化剤、アルキル化剤、アラルキル化剤、シリル化剤等のヒドロキシ基の保護化試薬を添加する。ヒドロキシ基の保護化試薬の例としては、無水酢酸、塩化アセチル、塩化ベンゾイル、無水トリフルオロ酢酸等のアシル化剤、塩化メトキシカルボニル、塩化ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、塩化ベンジルオキシカルボニル、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボネート等のアルコキシカルボニル化剤、臭化ベンジル等のアラルキル化剤、塩化トリメチルシリル、塩化トリエチルシリル、塩化ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル、トリフルオロメタンスルホン酸ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルエステル等のシリル化剤等を挙げることができる。
【００２３】
ヒドロキシ基の保護化は当業者によく知られた方法であり、例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（第３版、ジョン・ウィリー・アンド・ソンズ社、１９９９年（Protective Groups in Organic Synthesis 3rd edition (John Wiley＆Sons, Inc. 1999)）に記載の方法に準じて行うことができる。
【００２４】
ハロゲン化剤としては、臭化水素酸、塩酸、ピリジン臭化水素酸塩、ピリジン塩酸塩、アルキルアンモニウムハライド、臭素化ナトリウム等のハロゲン化物が挙げられる。また、式（７）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表されるハロゲン化試薬を作用させれば、保護化及びハロゲン化を同時に行なうことができる。この方法は、工程数を省略化できるので、より好ましい方法となる。
【００２５】
式（７）中、Ｒ２で示されるヒドロキシ基の保護基としては、前記と同じものが挙げられる。式（７）で表されるハロゲン化試薬を使用した場合、特にアシル基が好ましい。アシル基としては前述したものが例示され、特にアセチル基が好ましい。Ｘ２で示されるハロゲン原子としては、塩素原子、臭素原子が好ましく、特に臭素原子が好ましい。すなわち、式（７）で表されるハロゲン化試薬の好ましい例としては、アシルクロリド、アシルブロミドが挙げられ、中でもベンゾイルクロリド、ベンゾイルブロミド、アセチルクロリド、アセチルブロミドが好ましく、特にアセチルブロミドが好ましい。
【００２６】
ハロゲン化試薬の使用量は、式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体に対して、通常１．１〜１５モル当量、好ましくは３〜７モル当量である。反応は溶媒中で行うのが好ましい。溶媒としては、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、ジメチルスルホキシド、ジメチルイミダゾリジノン、Ｎ−メチルピロリドン、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、酢酸エチルなどの非プロトン性溶媒、あるいはこれら非プロトン性溶媒の２種以上を混合した混合溶媒が好ましく、特にジメチルホルムアミド、及びジメチルホルムアミドと酢酸エチルの混合溶媒が好ましい。反応温度は通常０〜１５０℃の範囲であり、４０〜１００℃の範囲で行うのが好ましい。 反応時間は通常５分〜２４時間の範囲であり、１５分〜６時間の範囲で行うのが好ましい。反応溶液を、抽出、晶析、クロマトグラフィー等の当業者に公知の精製手段で処理することにより、式（２′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を精製及び単離することができる。引き続き式（３′）で表される化合物に誘導する場合は、任意に精製操作や単離操作を省略してもよい。
【００２７】
なお、式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した場合、特許文献１〜３に記載の方法と同様に、まず閉環反応が進行し、下式（９′）：
で表されるＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンのエキソ体が生成する。該エキソ体を単離して固体として取得することも可能であるが、通常その必要はなく、また単離した場合、特許文献２の実施例にも記載されているように、収率の著しい低下を招くため、精製や単離を行うことなく、次の保護化及びハロゲン化工程を行うのが好ましい。
【００２８】
式（２′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物は、異性化することにより、式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物に誘導することができる。
式（３′）中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。ヒドロキシ基の保護基及びハロゲン原子については前述と同様である。
【００２９】
本発明においては、異性化反応を安定な式（２′）で表される化合物に対して行うため、特許文献１〜３に見られるように、式（９′）で表される化合物が異性化反応中に加水分解するといった問題を生じない。また、水素を使用せずに異性化を行うことができるため、特許文献２及び３のように５，６−ジヒドロ体の副生といった問題を生じることなく、式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物に誘導することが可能である。
【００３０】
式（２′）で表される化合物は、金属触媒、酸、光照射によって異性化させることができる。金属触媒としては、異性化を促進させるものであれば特に限定されないが、遷移金属触媒が好ましい。遷移金属触媒としては、パラジウム触媒、ロジウム触媒、ルテニウム触媒、白金触媒等が挙げられる。遷移金属触媒は、遷移金属の酸化物または塩化物の形態や、遷移金属触媒に配位子が配位した形態のものを使用することができる。また遷移金属触媒は、活性炭、アルミナ、シリカ等の担体に担持させた形態のものを使用することができる。酸としては、塩酸、硫酸、リン酸等の無機酸、ギ酸、酢酸、メタンスルホン酸、Ｐ−トルエンスルホン酸等の有機酸及びアンバーライト１５等の酸性樹脂が挙げられる。異性化は、遷移金属触媒により行うのが好ましい。遷移金属触媒としては、パラジウム触媒及びロジウム触媒がより好ましく、特にロジウム触媒が好ましい。具体例としては、パラジウム炭素担持触媒、パラジウムアルミナ担持触媒、臭化パラジウム、塩化パラジウム、ヨウ化パラジウム、硝酸パラジウム、シアン化パラジウム、パラジウムアセテート、パラジウムアセチルアセトナート、パラジウムトリフルオロアセテートダイマー、酸化パラジウム、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム等のパラジウム触媒、ロジウム炭素担持触媒、ロジウムアルミナ担持触媒、ロジウムカルボニル、臭化ロジウム、塩化ロジウム、ヨウ化ロジウム、ロジウムアセテートダイマー、ロジウムアセチルアセトナート、ロジウムトリフルオロアセテートダイマー、酸化ロジウム、クロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム等のロジウム触媒が挙げられる。
【００３１】
異性化反応は系内に実質的に水素を含まない、不活性ガス雰囲気下、窒素雰囲気下、真空下、減圧下等の非水素雰囲気下で行うのが好ましい。特に不活性ガス雰囲気下で行うのが好ましく、不活性ガスとしては窒素及びアルゴンが特に好ましい。水素雰囲気下で行う異性化反応は５，６−ジヒドロ体の副生を招くので好ましくない。なお後掲参考例２に示すように、不活性ガス雰囲気下における遷移金属触媒による異性化反応を式（９′）で表されるＬ−２，２′−アンヒドロアラビノシルチミンのエキソ体に適用しても、異性化反応は進行しなかった。本発明の新規中間体化合物である式（２′）の化合物に誘導することで、非水素雰囲気下において異性化が達成された。これにより、特許文献２及び３で問題となっていた５，６−ジヒドロ体の副生を回避することが可能となった。
【００３２】
触媒量は式（２′）の化合物に対して通常０．０１〜９０ｍｏｌ％、好ましくは１〜２０ｍｏｌ％である。反応は溶媒中で行うのが好ましい。溶媒としては、水、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、ジメチルスルホキシド、ジメチルイミダゾリジノン、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル、アセトン、エチルメチルケトン、イソブチルメチルケトン、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ベンゼン、トルエン、ヘキサン、ヘプタン等の単独もしくは混合物が好ましく、特にトルエンが好ましい。反応温度は−５０〜３００℃の範囲で行うのが好ましく、特に５０〜１５０℃の範囲で行うのがより好ましい。反応時間は通常１５分〜７２時間の範囲であり、１時間〜２４時間の範囲で行うのが好ましい。反応終了後、反応溶液を抽出、晶析、クロマトグラフィー等の当業者に公知の単離精製手段で処理することにより、式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物を単離精製することができる。引き続き、式（４′）で表される化合物に誘導する場合は、任意に単離精製操作を省略してもよい。
【００３３】
式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物は、２′位を脱ハロゲン化することにより、式（４′）で表されるＬ−チミジン化合物に誘導することができる。
式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示す。ヒドロキシ基の保護基については前述と同様である。
【００３４】
脱ハロゲン化は、水素化トリブチルスズ、水素化トリエチルシラン、亜リン酸エステル、次亜リン酸及び次亜リン酸塩を用いるラジカル還元、水素雰囲気下における遷移金属触媒による接触還元、ニッケル触媒による還元等、公知の方法により行うことができる。次亜リン酸塩としては、例えば、次亜リン酸Ｎ−エチルピペリジニウム、次亜リン酸トリエチルアンモニウム、次亜リン酸ヘキサデシルトリメチルアンモニウム等が挙げられる。脱ハロゲン化剤として水素化トリブチルスズや水素化トリエチルシランを用いる場合、２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、１，１’−アゾビス（シクロヘキサンカルボニトリル）、トリエチルボラン等のラジカル反応開始剤を共存させる。
【００３５】
脱ハロゲン化は、水素雰囲気下で遷移金属触媒により接触還元する方法が好ましい。遷移金属触媒としては、前述したのと同様のものを用いることができる。特に、パラジウム触媒、ロジウム触媒が好ましい。具体例も前述と同様である。水素圧は、常圧〜５０気圧、好ましくは１気圧〜１０気圧の範囲で行われる。なお、式（２′）の化合物の異性化において、反応終了後、反応溶液から金属触媒を除去することなく、脱ハロゲン化工程における接触還元反応の触媒として、そのまま使用することができる。
【００３６】
反応は溶媒中で行うのが好ましい。溶媒としては、水、メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、ジメチルスルホキシド、ジメチルイミダゾリジノン、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルアセトアミド、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、アセトニトリル、アセトン、エチルメチルケトン、イソブチルメチルケトン、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ベンゼン、トルエン、ヘキサン、ヘプタン等が、単独もしくは混合物として挙げられ、特にメタノールと水の混合溶媒が好ましい。系中に必要により、トリエチルアミン、酢酸ナトリウム等の塩基や酢酸等の酸を添加してもよい。反応温度は−５０℃〜２００℃の範囲で行うのが好ましく、特に０℃〜５０℃の範囲で行うのがより好ましい。 反応時間は通常１０分〜７２時間の範囲であり、３０分〜２４時間の範囲で行うのが好ましい。反応終了後、遷移金属触媒をろ過により除去する。反応溶液は、抽出、晶析、クロマトグラフィー等の当業者に公知の単離精製手段で処理することにより、式（４′）で表されるＬ−チミジン化合物を単離精製することができる。引き続き式（５′）で表される化合物に誘導する場合は、任意に単離精製操作を省略してもよい。
【００３７】
式（４′）で表されるＬ−チミジン化合物は、脱保護化することにより、式（５′）で表されるＬ−チミジンに誘導することができる。
【００３８】
ヒドロキシ基の脱保護化は、当業者に公知の方法により行うことができる。例えば、ヒドロキシ基の保護基がアシル基の場合には、アンモニア、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムメトキサイド、カリウムメトキサイド等のアルカリで処理することにより脱保護することができる。またヒドロキシ基の保護基がアラルキル基の場合には、塩酸もしくは酢酸等の酸で処理することにより、またはパラジウム炭素等を触媒とする接触水素分解等により、脱保護することができる。
【００３９】
式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物は、塩基で処理することにより、式（６′）で表される２、２′−アンヒドロ−１−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンに誘導することができる。
【００４０】
塩基処理において使用する塩基は、前述の式（１′）で表される化合物の塩基処理と同様のものを用いることができ、ここでは特にアンモニアが好ましい。塩基処理による反応は溶媒中で行うのが好ましい。溶媒は、前述の式（１′）で表される化合物の塩基処理の反応溶媒と同様のものを用いることができ、ここでは特にメタノールが好ましい。反応温度、反応時間も前述の塩基処理と同様である。単離精製も抽出、晶析、クロマトグラフィー等の当業者に公知の手段で行うことができる。
【００４１】
以下、実施例により本発明の実施の形態を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。なお以下の式中、Ｅｔはエチル基、Ａｃはアセチル基を意味する。
【実施例１】
【００４２】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体の合成（１）
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体（１ｇ、純度８３％、２．２６ｍｍｏｌ）の水（３ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（０．３８ｇ、２．７７ｍｍｏｌ）の水（２ｍＬ）溶液を加え、３０℃で２時間攪拌した。ＨＰＬＣで、反応溶液中にＬ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体が生成しているのを確認した。反応溶液を希塩酸で中和し、溶媒をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに置換した。次に、アルゴンガス雰囲気下、得られた溶液に酢酸エチル（１８ｍＬ）及びアセチルブロミド（０．８０ｍＬ、１０．８８ｍｍｏｌ）を加え、８０℃にて３０分間反応させた。反応終了後、酢酸エチル（１０ｍＬ）及び飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えて分相し、水相を酢酸エチル（１０ｍＬ）で再抽出した。有機相を合わせて、水（１０ｍＬ）及び飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム用いて乾燥した後、溶媒を減圧除去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（０．４８ｇ、収率５３％）を得た。
得られた標題化合物の分析結果
ｍｐ：１４８−１４９℃
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）：δ２．１３（ｓ，３Ｈ），δ２．１９（ｓ，３Ｈ），δ４．０３−４．０８（ｍ，１Ｈ），δ４．１７−４．３７（ｍ，４Ｈ），δ４．３９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９，５．９Ｈｚ），δ５．２０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝５．９，３．１Ｈｚ），δ５．７３−５．７４（ｍ，１Ｈ），δ６．２０（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７．９Ｈｚ），δ６．４５−６．４７（ｍ，１Ｈ），δ８．２６（ｂｓ，１Ｈ）
【実施例２】
【００４３】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体の合成（２）
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体（１ｇ、純度９１％、２．４８ｍｍｏｌ）の水（３ｍＬ）溶液に１Ｍのカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドのテトラヒドロフラン（２．７２ｍＬ）溶液を加え、室温で２時間及び３０℃で１９時間攪拌した。ＨＰＬＣで、反応溶液中にＬ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体が生成しているのを確認した。反応溶液を希塩酸で中和し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに置換した。次いで、アルゴンガス雰囲気下、得られた溶液にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１８ｍＬ）及びアセチルブロミド（０．８０ｍＬ、１０．８８ｍｍｏｌ）を加え、８０℃にて３０分間反応させた。反応終了後、酢酸エチル（１０ｍＬ）及び飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えて分相し、水相を酢酸エチル（１０ｍＬ）で再抽出した。有機相を合わせてＨＰＬＣで分析し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（０．４３ｇ、収率４３％）が生成していることを確認した。反応終了後、酢酸エチル（１０ｍＬ）及び飽和重曹水（１０ｍＬ）を加えて分相し、水相を酢酸エチル（１０ｍＬ）で再抽出した。有機相を合わせて水（１０ｍＬ）及び飽和食塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム用いて乾燥した後、溶媒を減圧除去した。得られた残渣にメタノール（２ｍＬ）を加え、０℃で１．５時間攪拌した。生成した結晶をろ別し、メタノール（１ｍＬ）で洗浄後、減圧乾燥することにより、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（０．４０ｇ、収率４０％）を得た。
【実施例３】
【００４４】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジンの合成（１）
アルゴンガス雰囲気下、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（０．２ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）及びクロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（０．０２３ｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）をトルエン（９．８ｍＬ）に溶解し、１００℃で２時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧除去し、得られた残渣を１Ｈ ＮＭＲ及びＨＰＬＣで分析したところ、原料は完全に消失しており、また５，６−ジヒドロ体であるＬ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジンは全く生成していないことを確認した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（０．１８ｇ、収率８９％）を得た。
得られた標題化合物の分析結果
ｍｐ：１３１−１３２℃
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ｍＨｚ）：δ１．９５（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），δ２．１１（ｓ，３Ｈ），δ２．１３（ｓ，３Ｈ），δ４．３０−４．４５（ｍ，３Ｈ），δ４．５２−４．５７（ｍ，１Ｈ），δ５．１５−５．２０（ｍ，１Ｈ），δ６．２３ （ｄ，１Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），δ７．１９（ｓ，１Ｈ），δ８．０２（ｂｓ，１Ｈ）
【実施例４】
【００４５】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジンの合成（２）
アルゴンガス雰囲気下、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（２９．７ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）とトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（３．７３ｍｇ、０．００３５ｍｍｏｌ）及びトリフェニルホスフィン（３．７５ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）をトルエン（３ｍＬ）に溶解し、１００℃で１６時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧除去し、得られた残渣を１Ｈ ＮＭＲ及びＨＰＬＣで分析し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（１１．２ｍｇ、３８％）が生成していることを確認した。また５，６−ジヒドロ体であるＬ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジンは全く生成していなかった。
【実施例５】
【００４６】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジンの合成（１）
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（１９５．６ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）の水−メタノール混合溶液（１ｍＬ、水／メタノール＝１／４ (ｖ／ｖ)）に酢酸アンモニウム（４４ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）、酢酸（０．０５５ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）及び１０％パラジウム／炭素（５４．９ｍｇ）を加え、水素雰囲気下、室温で２時間攪拌した。反応終了後、触媒をろ過し、ろ液を減圧除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ヘキサン／酢酸エチル）で精製し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジン（９０．８ｍｇ、６０％）を得た。
得られた標題化合物の分析結果
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ｍＨｚ）：δ１．９４（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ），δ２．１１（ｓ，３Ｈ），δ２．１３（ｓ，３Ｈ），δ２．０２−２．２０（ｍ，１Ｈ），δ２．４４−２．５０（ｍ，１Ｈ），δ４．２４−４．２８（ｍ，１Ｈ），δ４．３０−４．４０（ｍ，２Ｈ），δ５．２０−５．２４（ｍ，１Ｈ），δ６．３０−６．３６（ｍ，１Ｈ），δ７．２７（ｓ，１Ｈ），δ８．２０（ｂｓ，１Ｈ）
【実施例６】
【００４７】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジンの合成（２）
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（５０．９ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の水−メタノール混合溶液（１ｍＬ、水／メタノール＝１／４(ｖ／ｖ)）に酢酸アンモニウム（１１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、酢酸（０．０１４ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）及び１０％パラジウム／炭素（１４．４ｍｇ）を加え、水素雰囲気下室温で２時間攪拌した。反応終了後、触媒をろ過した。ろ液をＨＰＬＣで分析し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジン（３６．７ｍｇ、収率９４％）が生成していることを確認した。
【実施例７】
【００４８】
Ｌ−チミジンの合成
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジン（４６．３ｍｇ、０．１４２ｍｍｏｌ）のメタノール（０．５６ｍＬ）溶液に１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．８５ｍＬ）を加え、室温で２時間攪拌した。反応終了後、反応溶液を希塩酸で中和し、溶媒を減圧除去した。次いで、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ジクロロメタン／メタノール）で精製し、Ｌ−チミジン(３４ｍｇ、収率９８％）を得た。
得られた標題化合物の分析結果
１Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＨ−ｄ４，４００ｍＨｚ）：δ１．８７（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝１．２Ｈｚ）， δ２．２０−２．３０（ｍ，２Ｈ），δ３．７０−３．７６（ｍ，１Ｈ），δ３．７６−３．８２（ｍ，１Ｈ，δ３．８６−３．９２（ｍ，１Ｈ），δ４．３６−４．４２（ｍ，１Ｈ），δ６．２５−６．３０（ｍ，１Ｈ），δ７．８１（ｓ，１Ｈ）
【実施例８】
【００４９】
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジンの合成（３）
アルゴンガス雰囲気下、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（６０．２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びクロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（１３．８ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）をトルエン（３ｍＬ）に溶解し、１００℃で２時間攪拌した。反応液を室温にまで戻し、トリエチルアミン（３１μＬ、０．２２５ｍｍｏｌ）を加えてから水素ガスに置換して、水素ガス雰囲気下、室温で２０時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧除去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ヘキサン／酢酸エチル）で精製して、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−チミジン（１８．５ｍｇ、収率３８％）を得た。
【実施例９】
【００５０】
２，２′−アンヒドロ−１−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンの合成
アルゴンガス雰囲気下、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（３０ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍＬ）溶液に７Ｍのアンモニアのメタノール溶液（０．７７ｍＬ）を加え、室温で９０時間攪拌した。反応終了後、溶媒を減圧除去し、得られた残渣をＨＰＬＣで分析し、２，２′−アンヒドロ−１−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミン（１６．３ｍｇ、８８％）が生成していることを確認した。
【００５１】
＜比較例１＞
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体から２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンの合成
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体（１．５ｇ、４．１ｍｍｏｌ）の水（１５ｍＬ）溶液を０℃に冷却し、ヒドロキノン（４３．９ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）及び無水炭酸ナトリウム（４３２ｍｇ、４．１ｍｍｏｌ）を加え、０℃で１５時間攪拌した。反応終了後、酢酸にて中和し、Ｌ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体を含む水溶液（７４０ｍｇ、収率８３％）を得た。次いで、５％パラジウムアルミナ（１５０ｍｇ）を水（７．５ｍＬ）に懸濁し、水素ガス雰囲気下、上記水溶液を４０℃にて滴下し、２時間反応させた。ＨＰＬＣで、反応溶液中にＬ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体が消失していることを確認した後、触媒をろ過し、溶媒を減圧除去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ジクロロメタン／メタノール）で精製し、２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミン（６２８ｍｇ、８５％：Ｌ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体基準）と２，２′−アンヒドロ−１−β−Ｌ−アラビノフラノシル−５，６−ジヒドロチミン（９１ｍｇ、１２％：Ｌ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体基準）を７：１の混合物として得た。これら化合物はＲｆ値が非常に近いために分離が困難であった。
２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンのＲｆ値＝０．３２（ジクロロメタン／メタノール＝４／１）
２，２′−アンヒドロ−１−β−Ｌ−アラビノフラノシル−５，６−ジヒドロチミンのＲｆ値＝０．３７（ジクロロメタン／メタノール＝４／１）
【００５２】
＜比較例２＞
２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンからＬ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジンの合成
比較例１で得られた２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミン（１１７．８ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）と２，２′−アンヒドロ−１−β−Ｌ−アラビノフラノシル−５，６−ジヒドロチミン（１６．９ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）の混合物（７：１）を酢酸エチル（６．４ｍＬ）及びジメチルホルムアミド（０．８９ｍＬ）に懸濁し、室温下アセチルブロミド（０．２２５ ｍＬ、３．０４ｍｍｏｌ）を加え、８０℃にて１時間反応させた。ＴＬＣで原料の消失を確認した後、酢酸エチル（４．２ｍＬ）及び飽和重曹水（２．２ｍＬ）を加え分液し、得られた有機相を飽和食塩水（２．２ｍＬ）で２回洗浄した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開液：ヘキサン／酢酸エチル）で精製したところ、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジン（１６４．１ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）とＬ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジン（１８．８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を８：１の混合物として得た。これら化合物はＲｆ値が非常に近いために分離が困難であった。
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジンのＲｆ値＝０．３９(ジクロロメタン／メタノール＝２０／１)、 ０．５２（ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）、０．２７（トルエン／ジエチルエーテル＝１／５）
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジンのＲｆ値＝＝０．３９(ジクロロメタン／メタノール＝２０／１)、 ０．５２（ヘキサン／酢酸エチル＝１／２）、０．２７（トルエン／ジエチルエーテル＝１／５）
【００５３】
＜参考例１＞
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体のロジウム触媒による接触還元
水素ガス雰囲気下、５％ロジウムアルミナ（６ｍｇ）のメタノール（１．５ｍＬ）懸濁液を６０℃に加熱し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−２′−デオキシ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体（６０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）のメタノール（１．５ｍＬ）懸濁液を滴下して、６０℃で３時間攪拌した。反応終了後、触媒をろ過し、溶媒を減圧除去した。得られた残渣を１Ｈ ＮＭＲで分析したところ、原料は完全に消失し、Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−チミジンとＬ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジンの混合物が６８：３２で生成していた。
Ｌ−３′,５′−ジ−アセチル−２′−ブロモ−５，６−ジヒドロチミジン(４６：５４のジアステレオマー混合物)の分析結果
１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ｍＨｚ）：δ１．２０−１．３０（ｍ，３Ｈ），δ２．１１（ｓ，３Ｈ），δ２．１９（ｓ，３Ｈ），δ２．７０−２．８０（ｍ，１Ｈ），δ３．１１（ｄｄ，０．４６Ｈ，Ｊ＝１１．９，１１．９Ｈｚ），δ３．２３（ｄｄ，０．５４Ｈ，Ｊ＝１１．９，１１．９Ｈｚ），δ３．３７（ｄｄ，０．５４Ｈ，Ｊ＝１１．９，５．５Ｈｚ），δ３．５４（ｄｄ，０．４６Ｈ，Ｊ＝１１．９，５．９Ｈｚ），δ４．２０−４．４０（ｍ，４Ｈ），δ５．１３−５．３０（ｍ，１Ｈ），δ６．１６（ｄ，０．５４Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），δ６．１７（ｄ，０．４６Ｈ，Ｊ＝６．２Ｈｚ），δ７．５５（ｂｓ，１Ｈ）
【００５４】
＜参考例２＞
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体から不活性ガス雰囲気下での異性化検討
Ｌ−アラビノアミノオキサゾリン−α−ブロモメチルアクリル酸エチル付加体（３００ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）の水（３ｍＬ）溶液を０℃に冷却し、ヒドロキノン（９０ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）及び無水炭酸ナトリウム（８７．１ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）を加え１５時間攪拌した。反応終了後、酢酸にて中和し、Ｌ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体を含む水溶液（１６７．４ｍｇ、８５％）を得た。次いで、クロロトリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（３７．８ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を水（１．２ｍＬ）に懸濁し、アルゴンガス雰囲気下、上記水溶液を１００℃にて滴下し、２時間反応させた。反応溶液をＨＰＬＣで分析したところ、２，２′−アンヒドロ−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンの生成は確認されず、Ｌ−２，２′−アンヒドロ−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体の加水分解物である１−β−Ｌ−アラビノフラノシル−５，６−ジヒドロウラシル−５−エキソメチレン体（４４．７ｍｇ、収率２１％）が確認された。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）：
（式中、Ｒ１はアルキル基を示し、Ｘ１は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ｐ−トルエンスルフォニルオキシ基又はメタンスルフォニルオキシ基を示す。）で表されるアラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を逐次又は同時に行なうことを特徴とする、式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物の製造方法。
【請求項２】
請求項１記載の方法に従って、式（２）で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を得た後、該化合物を異性化することを特徴とする、式（３）：
で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物の製造方法。
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
【請求項３】
請求項２記載の方法に従って、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱ハロゲン化することを特徴とする、式（４）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるチミジン化合物の製造方法。
【請求項４】
請求項３記載の方法に従って、式（４）で表されるチミジン化合物を得た後、該化合物を脱保護化することを特徴とする、式（５）：
で表されるチミジンの製造方法。
【請求項５】
請求項２記載の方法に従って、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を塩基で処理することを特徴とする、式（６）：
で表される２、２′−アンヒドロ−１−（β−アラビノフラノシル）チミンの製造方法。
【請求項６】
式（１）で表されるアラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、式（７）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される化合物を作用させ、保護化及びハロゲン化を同時に行ない、式（２）で表される化合物を得ること特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
式（１′）：
（式中、Ｒ１はアルキル基を示し、Ｘ１は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ｐ−トルエンスルフォニルオキシ基又はメタンスルフォニルオキシ基を示す。）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を逐次又は同時に行なうことを特徴とする、式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物の製造方法。
【請求項８】
請求項７記載の方法に従って、式（２）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を得た後、該化合物を異性化することを特徴とする、式（３′）：
で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物の製造方法。
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
【請求項９】
請求項８記載の方法に従って、式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱ハロゲン化することを特徴とする、式（４′）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるＬ−チミジン化合物の製造方法。
【請求項１０】
請求項９記載の方法に従って、式（４′）で表されるＬ−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱保護化することを特徴とする、式（５′）：
で表されるＬ−チミジンの製造方法。
【請求項１１】
請求項８記載の方法に従って、式（３′）で表されるＬ−チミジン化合物を得た後、該化合物を塩基で処理することを特徴とする、式（６′）：
で表される２、２′−アンヒドロ−１−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンの製造方法。
【請求項１２】
式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、式（７）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される化合物を作用させ、保護化及びハロゲン化を同時に行ない、式（２′）で表される化合物を得ること特徴とする、請求項７〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
異性化が、非水素雰囲気下に行われる、請求項２〜６、８〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
異性化が、遷移金属触媒によって行われる、請求項２〜６、８〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
異性化が、ロジウム触媒又はパラジウム触媒によって行われる、請求項２〜６、８〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
Ｘ１が塩素原子又は臭素原子である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
Ｘ２が塩素原子又は臭素原子である、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
一般式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物。
【請求項１９】
一般式（２′）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物。
【請求項１】
式（１）：
（式中、Ｒ１はアルキル基を示し、Ｘ１は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ｐ−トルエンスルフォニルオキシ基又はメタンスルフォニルオキシ基を示す。）で表されるアラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を逐次又は同時に行なうことを特徴とする、式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物の製造方法。
【請求項２】
請求項１記載の方法に従って、式（２）で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を得た後、該化合物を異性化することを特徴とする、式（３）：
で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物の製造方法。
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
【請求項３】
請求項２記載の方法に従って、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱ハロゲン化することを特徴とする、式（４）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるチミジン化合物の製造方法。
【請求項４】
請求項３記載の方法に従って、式（４）で表されるチミジン化合物を得た後、該化合物を脱保護化することを特徴とする、式（５）：
で表されるチミジンの製造方法。
【請求項５】
請求項２記載の方法に従って、式（３）で表される２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を塩基で処理することを特徴とする、式（６）：
で表される２、２′−アンヒドロ−１−（β−アラビノフラノシル）チミンの製造方法。
【請求項６】
式（１）で表されるアラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、式（７）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される化合物を作用させ、保護化及びハロゲン化を同時に行ない、式（２）で表される化合物を得ること特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
式（１′）：
（式中、Ｒ１はアルキル基を示し、Ｘ１は塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子、ｐ−トルエンスルフォニルオキシ基又はメタンスルフォニルオキシ基を示す。）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン−α−メチルアクリル酸エステル付加体を塩基で処理した後、保護化及びハロゲン化を逐次又は同時に行なうことを特徴とする、式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物の製造方法。
【請求項８】
請求項７記載の方法に従って、式（２）で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物を得た後、該化合物を異性化することを特徴とする、式（３′）：
で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物の製造方法。
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
【請求項９】
請求項８記載の方法に従って、式（３′）で表されるＬ−２′−ハロゲン−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱ハロゲン化することを特徴とする、式（４′）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示す。）
で表されるＬ−チミジン化合物の製造方法。
【請求項１０】
請求項９記載の方法に従って、式（４′）で表されるＬ−チミジン化合物を得た後、該化合物を脱保護化することを特徴とする、式（５′）：
で表されるＬ−チミジンの製造方法。
【請求項１１】
請求項８記載の方法に従って、式（３′）で表されるＬ−チミジン化合物を得た後、該化合物を塩基で処理することを特徴とする、式（６′）：
で表される２、２′−アンヒドロ−１−（β−Ｌ−アラビノフラノシル）チミンの製造方法。
【請求項１２】
式（１′）で表されるＬ−アラビノアミノオキサゾリン化合物を塩基で処理した後、式（７）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される化合物を作用させ、保護化及びハロゲン化を同時に行ない、式（２′）で表される化合物を得ること特徴とする、請求項７〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
異性化が、非水素雰囲気下に行われる、請求項２〜６、８〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
異性化が、遷移金属触媒によって行われる、請求項２〜６、８〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
異性化が、ロジウム触媒又はパラジウム触媒によって行われる、請求項２〜６、８〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
Ｘ１が塩素原子又は臭素原子である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
Ｘ２が塩素原子又は臭素原子である、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
一般式（２）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表される２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物。
【請求項１９】
一般式（２′）：
（式中、Ｒ２はヒドロキシ基の保護基を示し、Ｘ２はハロゲン原子を示す。）
で表されるＬ−２′−ハロゲン−５，６−ジヒドロウリジン−５−エキソメチレン体化合物。
【公開番号】特開２０１１−８４４７１（Ｐ２０１１−８４４７１Ａ）
【公開日】平成２３年４月２８日（２０１１．４．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−１６５６１（Ｐ２００８−１６５６１）
【出願日】平成２０年１月２８日（２００８．１．２８）
【出願人】（０００００００６６）味の素株式会社 (887)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年４月２８日（２０１１．４．２８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年１月２８日（２００８．１．２８）
【出願人】（０００００００６６）味の素株式会社 (887)
【Ｆターム（参考）】
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