植物の生長を促進する方法
【課題】植物の生長促進方法を提供すること。
【解決手段】下記式（１）［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物を植物に処理すること；具体的には当該化合物が５-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル、６-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル等である。
【解決手段】下記式（１）［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物を植物に処理すること；具体的には当該化合物が５-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル、６-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル等である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物の生長を促進する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
いくつかの化学物質には、植物に施用することによって植物の生長を促進する効果を示すものが知られている。例えば、アミノレブリン酸はその施用により植物に対して生長促進効果を示す。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】「Biosynthesis, biotechnological production and applications of 5-aminolevulinic acid」 K. Sasaki et al., (2002) Applied Microbial Biotechnology 58: pp. 23-29
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、植物の生長を促進する優れた方法等を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、鋭意検討した結果、特定の化合物を植物に施用することによってその植物の生長が促進されることを見出し、本発明に到達した。
【０００６】
即ち、本発明は次の通りである。
［１］下記式（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物（以下、本化合物と記すことがある。）を、植物に処理することを特徴とする植物の生長促進方法（以下、本発明方法と記すことがある。）。
［２］式（１）で示される化合物が、下記の化合物群Ａから選ばれる化合物である前項［１］に記載の方法。
＜化合物群Ａ＞
（１）５-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（２）６-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（３）４-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（４）７-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
［３］植物が、非生物的ストレスに暴露された又は暴露されるであろう植物である前項［１］又は［２］に記載の植物の生長促進方法。
［４］植物への処理が、散布処理、土壌処理、種子処理又は水耕処理である前項［１］から［３］のいずれか一に記載の方法。
［５］植物への処理が、種子処理である前項［１］から［３］のいずれか一に記載の方法。
［６］植物がイネ、トウモロコシ、又はコムギである前項［１］から［５］のいずれか一に記載の方法。
［７］植物が遺伝子組換え植物である前項［１］から［６］のいずれか一に記載の方法。
［８］非生物的ストレスが高温ストレスである前項［３］から［７］のいずれか一に記載の方法。
［９］非生物的ストレスが低温ストレスである前項［３］から［７］のいずれか一に記載の方法。
［１０］非生物的ストレスが乾燥ストレスである前項［３］から［７］のいずれか一に記載の方法。
［１１］植物の生長を促進するための、前記式（１）で示される化合物の使用。
［１２］前記式（１）で示される化合物及び不活性成分を含有することを特徴とする植物生長促進組成物。
【発明の効果】
【０００７】
本発明方法によって、優れた植物生長促進方法等を提供することが可能となる。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本発明において、植物の生長を促進する（以下、「生長促進」と記すことがある。）とは、苗立ち率向上、健全葉数増加、草丈増、植物体重量増加、葉面積増加、種子又は果実の数又は重量の増加、着花数又は着果数の増加、根部生長の増加をいう。
【０００９】
生長促進は、以下にあげるパラメーターを用いて定量化が可能である。
(１)苗立ち率
植物の種子を、例えば土壌中、ろ紙上、寒天培地上、砂上などに播種し、一定期間栽培する。栽培の全ての期間中あるいは一部の期間中に非生物的ストレスを負荷した後、生き残った幼植物の割合を調査する。
(２)健全葉数又は健全葉率
各植物について健全な葉の枚数を数え、総健全葉数を調査する。あるいは植物の全ての葉数に対する健全葉数の割合を調査する。
(３)草丈
各植物について地上部分の茎の根元から先端の枝葉までの長さを測定する。
(４)植物体重量
各植物の地上部を切り取り、重量を測定して、植物新鮮重量を求める、あるいは切り取ったサンプルを乾燥させた後に重量を測定して、植物乾燥重量を求める。
(５)葉面積
植物をデジタルカメラで撮影し、写真の緑色の部分の面積を画像解析ソフト例えばWin ROOF（三谷商事社製）で定量することにより、あるいは目視による評価によって、植物の葉面積を求める。
(６)葉色
植物の葉をサンプリングし、葉緑素計（例えばＳＰＡＤ−５０２、コニカミノルタ製）を用いて葉緑素量を測定することにより、葉色を求める。また、植物をデジタルカメラで撮影し、写真の緑色の部分の面積を画像解析ソフト例えばWin ROOF（三谷商事社製）で色抽出を行い定量することにより、植物の葉の緑色部分の面積を求める。
(７)種子あるいは果実の数又は重量
植物を種子あるいは果実が結実あるいは登熟するまで栽培した後、植物当りの果実数を計測あるいは植物当りの総果実重量を測定する。また、種子が登熟するまで栽培した後、例えば穂数、登熟歩合、千粒重などの収量構成要素を調査する。
(８)着花率、着果率、結実率、又は種子充填率
植物を着果するまで栽培した後、着花数と着果数を数え着果率％（着果数/着花数×100）を求める。種子登熟後に結実数と種子充填数を数え結実率（結実数/着花数×100）、種子充填率％（種子充填数/結実数×100）を求める。
(９)根部生長の増加
植物を土壌あるいは水耕にて栽培し、その根部の長さを計測する、あるいは根部を切り取りその新鮮重量等を測定する。
【００１０】
本発明方法において本化合物を植物に処理する場合、当該植物の全体であっても一部分（茎葉、芽、花、果実、穂、種子、球根、塊茎、根等）であっても良く、又当該植物の種々の生育ステージ（播種時前、播種時、播種後出芽前後などの発芽期、育苗時、苗移植時、挿し木又は挿し苗時、定植後の生育時などの栄養生長期、開花前、開花中、開花後、出穂直前又は出穂期などの生殖生長期、収穫予定前、成熟予定前、果実の着色開始期などの収穫期）であって良い。ここで球根とは、鱗茎、球茎、根茎、塊根、および担根体を意味する。また、苗としては、実生、挿し木等を含むものとする。
【００１１】
本発明方法において使用される下記式（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物は、公知の方法で製造することができ、又は試薬として購入することができる。
【００１２】
本化合物の具体例としては、式（１）中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が、表1に示される基の組合せである化合物（本化合物１〜本化合物８）が挙げられる。
【００１３】
【表１】
【００１４】
本発明方法において本化合物を使用する場合、本化合物のみで使用してもよいが、後述するとおり種々の不活性成分（固体担体、液体担体、界面活性剤、その他の製剤用補助剤等）を用いて製剤化された植物生長促進組成物として使用することができる。
【００１５】
製剤化の際に用いられる固体担体としては、例えばカオリンクレー、アッタパルジャイトクレー、ベントナイト、モンモリロナイト、酸性白土、パイロフィライト、タルク、珪藻土、方解石等の鉱物、トウモロコシ穂軸粉、クルミ殻粉等の天然有機物、尿素等の合成有機物、炭酸カルシウム、硫酸アンモニウム等の塩類、合成含水酸化珪素等の合成無機物等からなる微粉末又は粒状物等が挙げられ、液体担体としては、例えばキシレン、アルキルベンゼン、メチルナフタレン等の芳香族炭化水素類、２−プロパノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、エチレングリコールモノエチルエーテル等のアルコール類、アセトン、シクロヘキサノン、イソホロン等のケトン類、ダイズ油、綿実油等の植物油、石油系脂肪族炭化水素類、エステル類、ジメチルスルホキシド、アセトニトリル、及び水が挙げられる。
【００１６】
界面活性剤としては、例えばアルキル硫酸エステル塩、アルキルアリールスルホン酸塩、ジアルキルスルホコハク酸塩、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテルリン酸エステル塩、リグニンスルホン酸塩、ナフタレンスルホネートホルモアルデヒド重縮合物等の陰イオン界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル、ポリオキシエチレンアルキルポリオキシプロピレンブロックコポリマー、ソルビタン脂肪酸エステル等の非イオン界面活性剤、及びアルキルトリメチルアンモニウム塩等の陽イオン界面活性剤が挙げられる。
【００１７】
その他の製剤用補助剤としては、例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等の水溶性高分子、アラビアガム、アルギン酸及びその塩、ＣＭＣ（カルボキシメチルセルロース）、ザンサンガム等の多糖類、アルミニウムマグネシウムシリケート、アルミナゾル等の無機物、防腐剤、着色剤、及びＰＡＰ（酸性リン酸イソプロピル）、ＢＨＴ等の安定化剤が挙げられる。
【００１８】
本発明方法において、本化合物を植物に処理する場合、本化合物の有効量を植物又はその栽培地に処理することにより行われる。植物又は植物の栽培地に処理する場合は、本化合物は１回もしくは複数回処理する。
【００１９】
本発明方法における施用方法としては、具体的には、例えば、茎葉散布等の植物の茎葉、花器又は穂への処理、植物を植えつける前又は植えつけた後の土壌（栽培地）への処理、種子消毒や種子浸漬、種子コート等の種子への処理、苗への処理、種芋等の球根への処理等が挙げられる。
【００２０】
本発明方法における植物の茎葉、花器又は穂への処理としては、具体的には、例えば、茎葉散布、樹幹散布等の植物の表面に施用する処理方法が挙げられる。また、開花前、開花中、開花後を含む開花時期における花器あるいは植物全体に散布処理する方法が挙げられる。また、穀物等おいては出穂時期の穂あるいは植物全体に散布する方法が挙げられる。
【００２１】
本発明方法における土壌処理方法としては、例えば、土壌への散布、土壌混和、土壌への薬液潅注（薬液潅水、土壌注入、薬液ドリップ）が挙げられ、処理する場所としては例えば、植穴、作条、植穴付近、作条付近、栽培地の全面、植物地際部、株間、樹幹下、主幹畦、培土、育苗箱、育苗トレイ、苗床等が挙げられ、処理時期としては播種前、播種時、播種直後、育苗期、定植前、定植時、及び定植後の生育期等が挙げられる。また、上記土壌処理において、複数の本化合物を植物に同時に処理してもよく、本化合物を含有するペースト肥料等の固形肥料を土壌へ施用してもよい。また、本化合物を潅水液に混合してもよく、例えば、潅水設備（潅水チューブ、潅水パイプ、スプリンクラー等）への注入、条間湛水液への混入、水耕液へ混入等が挙げられる。また、あらかじめ潅水液と本化合物を混合し、例えば、上記潅水方法やそれ以外の散水、湛水等のしかるべき潅水方法を用いて処理することができる。
【００２２】
本発明方法における種子への処理としては、対象とする植物の種子、球根等に本化合物を処理する方法であって、具体的には、例えば、本化合物の懸濁液を霧状にして種子表面もしくは球根表面に吹きつける吹きつけ処理、本化合物の水和剤、乳剤、又はフロアブル剤等に少量の水を加えるか、又はそのままで種子もしくは球根に塗付する塗沫処理、本化合物の溶液に一定時間種子を浸漬する浸漬処理、フィルムコート処理、ペレットコート処理が挙げられる。
【００２３】
本発明方法における苗への処理としては、例えば、本化合物を水で適当な有効成分濃度に希釈調製した希釈液を苗全体に散布する散布処理、その希釈液に苗を浸漬する浸漬処理、粉剤に調製した本化合物を苗全体に付着させる塗布処理が挙げられる。また、苗を植えつける前又は植えつけた後の土壌への処理としては、例えば、本化合物を水で適当な有効成分濃度に希釈調製した希釈液を、苗を植えつけた後に苗及び周辺土壌に散布する方法、粒剤又は粒剤等の固形剤に調製した本化合物を、苗を植えつけた後周辺土壌に散布する方法が挙げられる。
【００２４】
また、本化合物を水耕栽培における水耕液に混合して用いてもよく、また組織培養における培地成分の１つとして用いてもよい。本発明方法における水耕処理方法としては、水耕栽培に使用する場合に、通常用いられる園試等の水耕栽培用の水耕培地に培地中濃度として０．００１ｐｐｍ〜１，０００ｐｐｍの範囲で溶解又は懸濁して用いることができる。また組織培養や細胞培養時に使用する場合は、通常用いられるムラシゲ・スクーグ培地等の植物組織培養用培地やホグランド水耕培養液等の水耕培地に、培地中濃度として０．００１ｐｐｍ〜１，０００ｐｐｍの範囲で溶解又は懸濁して用いることができる。この場合、定法に従い、炭素源としての糖類、各種植物ホルモン等を適宜加えることができる
【００２５】
本化合物を、植物又は植物の生育場所に処理する場合、その処理量は、処理する植物の種類、製剤形態、処理時期、気象条件等によって変化させ得るが、１０，０００ｍ2あたり有効成分量として、通常０．１〜１０，０００グラム、好ましくは１〜１，０００グラムの範囲である。土壌に全面混和する場合は、その処理量は、１０，０００ｍ2あたり有効成分量として、通常０．１〜１０，０００グラム、好ましくは１〜１，０００グラムである。
【００２６】
乳剤、水和剤、フロアブル剤、マイクロカプセル剤等は、通常水で希釈して散布することにより処理する。この場合、有効成分の濃度は、通常０．１〜１０，０００ｐｐｍ、好ましくは１〜１０００ｐｐｍの範囲である。粉剤、粒剤等は通常希釈することなくそのまま処理する。
【００２７】
種子への処理においては、種子１００キログラムに対する本化合物の重量としては、通常０．０１〜１，０００グラム、好ましくは０．１〜１００グラムの範囲である。
【００２８】
本発明方法が適用可能な植物としては、下記の植物が挙げられる。
【００２９】
農作物：トウモロコシ、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、エンバク、ソルガム、ワタ、ダイズ、ラッカセイ、ソバ、テンサイ、セイヨウアブラナ、ヒマワリ、サトウキビ、タバコ、ホップ等。
【００３０】
野菜：ナス科野菜（ナス、トマト、ジャガイモ、トウガラシ、ピーマン等）、ウリ科野菜（キュウリ、カボチャ、ズッキーニ、スイカ、メロン、マクワウリ等）、アブラナ科野菜（ダイコン、カブ、セイヨウワサビ、コールラビ、ハクサイ、キャベツ、アブラナ、カラシナ、ブロッコリー、カリフラワー等）、キク科野菜（ゴボウ、シュンギク、アーティチョーク、レタス等）、ユリ科野菜（ネギ、タマネギ、ニンニク、アスパラガス等）、セリ科野菜（ニンジン、パセリ、セロリ、アメリカボウフウ等）、アカザ科野菜（ホウレンソウ、フダンソウ等）、シソ科野菜（シソ、ミント、バジル等）、マメ科作物（エンドウ、インゲンマメ、アズキ、ソラマメ、ヒヨコマメ等）、イチゴ、サツマイモ、ヤマノイモ、サトイモ、コンニャク、ショウガ、オクラ等。
【００３１】
果樹：仁果類（リンゴ、ナシ、セイヨウナシ、カリン、マルメロ等）、核果類（モモ、スモモ、ネクタリン、ウメ、オウトウ、アンズ、プルーン等）、カンキツ類（ウンシュウミカン、オレンジ、レモン、ライム、グレープフルーツ等）、堅果類（クリ、クルミ、ハシバミ、アーモンド、ピスタチオ、カシューナッツ、マカダミアナッツ等）、液果類（ブルーベリー、クランベリー、ブラックベリー、ラズベリー等）、ブドウ、カキ、オリーブ、ビワ、バナナ、コーヒー、ナツメヤシ、ココヤシ、アブラヤシ等。
【００３２】
果樹以外の樹木：チャ、クワ、花木類（サツキ、ツバキ、アジサイ、サザンカ、シキミ、サクラ、ユリノキ、サルスベリ、キンモクセイ等）、街路樹（トネリコ、カバノキ、ハナミズキ、ユーカリ、イチョウ、ライラック、カエデ、カシ、ポプラ、ハナズオウ、フウ、プラタナス、ケヤキ、クロベ、モミノキ、ツガ、ネズ、マツ、トウヒ、イチイ、ニレ、トチノキ等）、サンゴジュ、イヌマキ、スギ、ヒノキ、クロトン、マサキ、カナメモチ、等。
【００３３】
芝生：シバ類（ノシバ、コウライシバ等）、バミューダグラス類（ギョウギシバ等）、ベントグラス類（コヌカグサ、ハイコヌカグサ、イトコヌカグサ等）、ブルーグラス類（ナガハグサ、オオスズメノカタビラ等）、フェスク類（オニウシノケグサ、イトウシノケグサ、ハイウシノケグサ等）、ライグラス類（ネズミムギ、 ホソムギ等）、カモガヤ、オオアワガエリ等。
その他：花卉類（バラ、カーネーション、キク、トルコギキョウ、カスミソウ、ガーベラ、マリーゴールド、サルビア、ペチュニア、バーベナ、チューリップ、アスター、リンドウ、ユリ、パンジー、シクラメン、ラン、スズラン、ラベンダー、ストック、ハボタン、プリムラ、ポインセチア、グラジオラス、カトレア、デージー、シンビジューム、ベゴニア等）、バイオ燃料植物（ヤトロファ、ベニバナ、アマナズナ類、スイッチグラス、ミスカンサス、クサヨシ、ダンチク、ケナフ、キャッサバ、ヤナギ等）、観葉植物等。
【００３４】
本発明に適用可能な植物として、好ましくは、チャ、リンゴ、ナシ、ブドウ、オウトウ、モモ、ネクタリン、カキ、ウメ、スモモ、ダイズ、レタス、キャベツ、トマト、ナス、キュウリ、スイカ、メロン、インゲンマメ、エンドウ、アズキ、シバ、セイヨウアブラナ、イチゴ、アーモンド、トウモロコシ、ソルガム、ソラマメ、ハクサイ、ジャガイモ、ラッカセイ、イネ、コムギ、サトイモ、コンニャク、ヤマノイモ、ダイコン、カブ、パセリ、マクワウリ、オクラ、ショウガ、レモン、オレンジ、グレープフルーツ、ライム、ブルーベリー、クリ、ホップ、バジルが挙げられ、より好ましくはイネ科植物又はナス科植物、更に好ましくはイネ科植物、また更に好ましくはイネ、コムギ、トウモロコシなどが挙げられる。
【００３５】
上記「植物」とは、植物は、植物に除草剤耐性を付与する遺伝子や害虫に対する選択的毒素を産生する遺伝子、植物に病害抵抗性を付与する遺伝子、非生物的ストレスを緩和する遺伝子などが遺伝子組換え法あるいは交配育種によって導入された組換え植物であってもよく、これらを複数組み合わせたスタック品種であってもよい。
【００３６】
本化合物を、殺虫剤、殺菌剤、及び特定の除草剤に対するセーフナー等と同時に種子に処理してもよく、またそれらと同時に植物に施用してもよい。
【００３７】
本発明方法は、本化合物の処理される植物が、非生物的ストレスに暴露された又は暴露されるであろう植物であっても良い。当該非生物的ストレスは、下記式で表される「ストレスの強さ」の値として、１０５〜２００、好ましくは１１０〜１８０、より好ましくは１２０〜１６０であればよい。
【００３８】
式（I）：「ストレスの強さ」＝１００×「非生物的ストレス条件に暴露されていない植物におけるいずれか一つの植物表現型」／「非生物的ストレス条件に暴露された植物における当該いずれか一つの植物表現型」
【００３９】
ここで、「非生物的ストレス」とは、高温ストレス又は低温ストレスである温度ストレス、乾燥ストレス又は過湿ストレスである水分ストレス、塩ストレス等の非生物的ストレス条件に暴露された場合に植物細胞の生理機能の低下を来たし、植物の生理状態が悪化して生育が阻害されるようなストレスをいう。高温ストレスとは、植物の生育適温又は発芽適温よりも高い温度に暴露された場合に受けるストレスをいい、具体的には、植物が栽培されている環境における平均栽培温度が２５℃以上、より厳しくは３０℃以上、更に厳しくは３５℃以上である条件を挙げることができる。 低温ストレスとは、植物の生育適温又は発芽適温よりも低い温度に暴露された場合に受けるストレスをいい、具体的には、植物が栽培されている環境における平均栽培温度が１５℃以下、より厳しくは１０℃以下、更により厳しくは５℃以下である条件を挙げることができる。 また、乾燥ストレスとは、植物は降雨量や灌水量の減少により土壌中の水分含量が減少し、吸水が阻害され植物の生育が阻害されるような水分環境に暴露された場合に受けるストレスをいい、具体的には、土壌の種類により値は異なることがあるが、植物が栽培されている土壌含水率が１５重量％以下、より厳しくは１０重量％以下、更に厳しくは、７．５重量％以下が水分ストレスのある条件、又は、植物が栽培されている土壌のpＦ値が、２．３以上、厳しくは２．７以上、更に厳しくは３．０以上の条件を挙げることができる。過湿ストレスとは土壌中の水分含量が過剰になり植物の生育が阻害されるような水分環境に暴露された場合に受けるストレスをいい、具体的には、土壌の種類により値は異なることがあるが、植物が栽培されている土壌含水率が３０重量％以上、厳しくは４０重量％以上、更に厳しくは５０重量％以上の、又は、植物が栽培されている土壌のｐＦ値が１．７以下、厳しくは１．０以下、更に厳しくは０．３以下である。 なお、土壌のｐＦ値は、「土壌・植物栄養・環境事典」（大洋社、１９９４年、松坂ら）の６１〜６２頁の「ｐＦ値測定法」に記述されている原理に従い、測定することができる。 また、塩ストレスとは、植物が栽培されている土壌あるいは水耕液中の塩類の蓄積により浸透圧が上昇し植物の吸水が阻害される結果、生育が阻害されるような環境に暴露された場合に受けるストレスをいい、具体的には、土壌あるいは水耕液中の塩による浸透圧ポテンシャルが０．２ＭＰａ（ＮａＣｌ濃度では２，４００ｐｐｍ）以上、厳しくは０．２５ＭＰａ以上、さらに厳しくは０．３０ＭＰａである条件である。土壌における浸透圧は、土壌を水で希釈して上澄み液の塩濃度を分析することによって、以下のラウールの式に基づいて求めることができる。
【００４０】
ラウールの式 π（ａｔｍ）＝ｃＲＴ
Ｒ＝０．０８２（Ｌ・ａｔｍ／ｍｏｌ・Ｋ）
Ｔ＝絶対温度（Ｋ）
ｃ＝イオンモル濃度（ｍｏｌ／Ｌ）
１ａｔｍ＝０．１ＭＰａ
【実施例】
【００４１】
以下、本発明を製剤例、製造例及び試験例にてさらに詳しく説明するが、本発明は以下の例のみに限定されるものではない。なお、以下の例において、部は特にことわりの無い限り重量部を示す。
【００４２】
製造例１
２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド５．０ｇ、チオグリコール酸メチル３．３ｇ、炭酸カリウム４．０ｇおよびＤＭＦ５０ｍｌの混合物を６０℃で２時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物に水を加え、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をメタノールから再結晶し、５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチル（本化合物１）６．３ｇを得た。
［本化合物１］
1H-NMR(CDCl3) δ: 8.16(s, 1H), 8.13(s, 1H), 7.99(d, J=8.7Hz, 1H), 7.67(d, J=8.7Hz, 1H), 3.98(s, 3H)
【００４３】
製造例２
２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド１．１１ｇ、チオグリコール酸メチル７３９ｍｇ、炭酸カリウム１．３ｇおよびＤＭＦ２０ｍｌの混合物を１４０℃で２時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物に水を加え、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、６−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチル（本化合物２）８４８ｍｇを得た。
［本化合物２］
1H-NMR(CDCl3) δ: 8.17(s, 1H), 8.11(s, 1H), 8.01-7.97(m, 1H), 7.66-7.62(m, 1H), 3.98(s, 3H)
【００４４】
製造例３
２−フルオロ−６−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド１．００ｇ、チオグリコール酸メチル６３３ｍｇ、炭酸カリウム１．２１ｇおよびＤＭＦ１５ｍｌの混合物を１３０℃で２時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物に水を加え、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、４−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチル（本化合物３）４８０ｍｇを得た。
［本化合物３］
1H-NMR(CDCl3) δ: 8.27(s, 1H), 8.08-8.04(m, 1H), 7.76-7.72(m, 1H), 7.57-7.51(m, 1H), 3.98(s, 3H)
【００４５】
製造例４
２−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド１．１０ｇ、チオグリコール酸メチル６６３ｍｇ、炭酸カリウム１．０３ｇおよびＤＭＦ１５ｍｌの混合物を６０℃で２時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物に水を加え、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、７−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチル（本化合物４）１．３４ｇを得た。
［本化合物４］
1H-NMR(CDCl3) δ: 8.13(s, 1H), 8.08-8.04(m, 1H), 7.79-7.75(m, 1H), 7.54-7.50(m, 1H), 3.97(s, 3H)
【００４６】
製造例５
製造例１に記載の方法に準じた方法で、チオグリコール酸メチルに代えてチオグリコール酸エチルを使用し、５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸エチル（本化合物５）を得る。
【００４７】
製造例６
製造例１に記載の方法に準じた方法で、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドに代えて２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドを使用し、チオグリコール酸メチルに代えてチオグリコール酸エチルを使用して、６−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸エチル（本化合物６）を得る。
【００４８】
製造例７
製造例１に記載の方法に準じた方法で、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドに代えて２−フルオロ−６−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドを使用し、チオグリコール酸メチルに代えてチオグリコール酸エチルを使用して、４−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸エチル（本化合物７）を得る。
【００４９】
製造例８
製造例１に記載の方法に準じた方法で、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドに代えて２−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドを使用し、チオグリコール酸メチルに代えてチオグリコール酸エチルを使用して、７−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸エチル（本化合物８）を得る。
【００５０】
製造例９
５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチル１０．０ｇ、水酸化リチウム一水和物１．８０ｇ、水３０ｍｌおよびメタノール９０ｍｌの混合物を７５℃で１時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、減圧下濃縮した。残渣に水を加え、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回洗浄した。水層に濃塩酸を加えた後、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸９．１０ｇを得た。
５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸４００ｍｇおよびエタノール２０ｍｌの混合物に、氷冷下で塩化オキサリル２５４ｍｇを加えた後、還流下で６時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、減圧下濃縮した。残渣にクロロホルムを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸エチル（本化合物５）３３０ｍｇを得た。
［本化合物５］
1H-NMR(CDCl3) δ: 8.15(s, 1H), 8.12(s, 1H), 7.98(d, J=8.5Hz, 1H), 7.67(d, J=8.5Hz, 1H), 4.43(q, J=7.3Hz, 2H), 1.43(t, J=7.3Hz, 3H)
【００５１】
製剤例１
本化合物１〜８のいずれかひとつの１０部を、キシレン３５部とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３５部との混合物に溶解し、ポリオキシエチレンスチリルフェニルエーテル１４部およびドデシルベンゼンスルホン酸カルシウム６部を加え、良く攪拌混合して各々の１０％乳剤を得る。
【００５２】
製剤例２
本化合物１〜８のいずれかひとつの２０部を、ラウリル硫酸ナトリウム４部、リグニンスルホン酸カルシウム２部、合成含水酸化珪素微粉末２０部および珪藻土５４部を混合した中に加え、良く攪拌混合して各々の２０％水和剤を得る。
【００５３】
製剤例３
本化合物１〜８のいずれかひとつの２部に、合成含水酸化珪素微粉末１部、リグニンスルホン酸カルシウム２部、ベントナイト３０部およびカオリンクレー６５部を加え充分攪拌混合する。ついでこれらの混合物に適当量の水を加え、さらに攪拌し、増粒機で製粒し、通風乾燥して各々の２％粒剤を得る。
【００５４】
製剤例４
本化合物１〜８のいずれかひとつの１部を適当量のアセトンに溶解し、これに合成含水酸化珪素微粉末５部、ＰＡＰ０．３部およびフバサミクレー９３．７部を加え、充分攪拌混合し、アセトンを蒸発除去して各々の１％粉剤を得る。
【００５５】
製剤例５
本化合物１〜８のいずれかひとつの１０部；ポリオキシエチレンアルキルエーテルサルフェートアンモニウム塩５０部を含むホワイトカーボン３５部；および水５５部を混合し、湿式粉砕法で微粉砕することにより、各々の１０％フロアブル剤を得る。
【００５６】
製剤例６
本化合物１〜８のいずれかひとつの０．１部をキシレン５部およびトリクロロエタン５部に溶解し、これを脱臭灯油８９．９部に混合して各々の０．１％油剤を得る。
【００５７】
試験例１ イネ水耕栽培による根部生長促進評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（栽培、化合物処理）
1/4倍濃度のホグランド水耕栽培液（Hoagland and Arnon, California Agricultural Experiment Station 1950 Circular 347 pp.34）に、本化合物１〜本化合物４のいずれかひとつを10,000ppmの濃度で含むDMSO溶液を1/10,000容添加し、本化合物１〜本化合物４のいずれかひとつを1ppm含む水耕栽培液をそれぞれ調製した。無処理区としては、1/4倍濃度のホグランド水耕栽培液にDMSOを1/10,000容添加した水耕栽培液を使用した。
イネ種子を、1%次亜塩素酸ナトリウム水溶液に10分間浸漬し、次いで、70%エタノール溶液に浸漬して表面消毒し、その後、蒸留水で洗浄した。消毒後の種子を、前記の供試化合物を1ppm含む水耕栽培液に浸し、暗黒下、温度28℃で3日間インキュベートし催芽処理を行った。
その後、供試化合物を1ppm含む水耕栽培液30mlを、側面をボール紙で覆って遮光したプラスチック製のチューブ（直径：20mm×高さ：113mm）に分注し、スチレンボードとビニール製メッシュを用いて作製したフロートを浮かべ、水耕栽培液水面にそのフロート上に、催芽処理後の当該イネ種子を置いて、チューブ上面の照度4,000ルクス、温度26℃、湿度50％、日長16時間で3日間栽培した。
（評価方法）
栽培後の当該イネ実生を、WinRHIZOシステム（REGENT INSTRUMENTS社製）で種子根長を測定した。各試験区での、4個体又は5個体の種子根長の測定値の平均値を求めた結果、本化合物１、本化合物２、本化合物３又は本化合物４（いずれも濃度1ppm）で処理した試験区は、無処理区と比較して、明らかに種子根が長かった。
【００５８】
試験例２ トウモロコシ種子処理による生長促進評価試験
（供試植物）
トウモロコシ（品種黒もち）
（種子処理）
10% (V/V) color coat red (Becker Underwood, Inc.)、10% (V/V) CF-Clear (Becker Underwood, Inc.)、1.66% Maxim4FS (Syngenta)を含むブランクスラリー溶液を調製した。トウモロコシ種子100キログラム当り50グラムの化合物処理量となるように本化合物１をブランクスラリーに溶解し、スラリー溶液とした。50ml遠沈管(日本BD社製)に、種子14.4グラム当り0.35mlのスラリー溶液を入れ、スラリー溶液が乾くまで攪拌し、当該種子をコーティングした。また、ブランクスラリーを用いてコーティングした種子を無処理区用種子とした。
（栽培）
種子処理後の当該種子をポット（φ55 mm×高さ58mm）中の培土（愛菜）に1粒ずつ播種し、温度27℃、照度5,000ルクス、日長16時間で18日間栽培した。
（評価方法）
栽培後、生育した植物の地上部新鮮重量を秤量した。各処理条件で３反復をとり、それらを平均して1個体あたりの平均重量を求めた。
その結果、化合物１を50グラム/100キログラム種子の処理量で処理した区では、無処理区と比較して明らかに地上部新鮮重量が大きかった。
【００５９】
試験例３ トウモロコシ種子処理による低温ストレス軽減評価試験
（供試植物）
トウモロコシ（品種：黒もち）
（種子処理）
10% (V/V) color coat red (Becker Underwood, Inc.)、10% (V/V) CF-Clear (Becker Underwood, Inc.)、1.66% Maxim4FS(Syngenta)を含むブランクスラリー溶液を調製した。トウモロコシ種子100キログラム当り0.5グラム、5グラム又は50グラムの化合物処理量となるように本化合物１をそれぞれブランクスラリーに溶解しスラリー溶液とした。50mL遠沈管(日本BD社製)に、トウモロコシ種子14.4g当り0.35mlのスラリー溶液を入れ、スラリー溶液が乾くまで攪拌し、当該種子をコーティングした。また、ブランクスラリーを用いてコーティングした種子を無処理区用種子とした。
（栽培）
種子処理後のトウモロコシ種子をポット（φ55 mm×高さ58mm）中の培土（愛菜）に1粒ずつ播種し、温度27℃、照度5,000ルクス、日長16時間の条件下で10日間栽培し、生育した実生を供試した。
（低温ストレス処理方法）
下記の温度条件に設定した人工気象室（VHT-2-15P-NC2-S、日本医化器械製作所製）に、播種後10日目のポットを入れ、以下の条件で、4日間栽培した。
「条件；温度2.5±1℃、日長16時間、照度5,000ルクス」
（評価）
低温ストレス処理後に、温度27℃、照度5,000ルクス、日長16時間で、4日間栽培した後、当該植物の地上部新鮮重量を秤量した。各処理条件で5反復をとり、それらを平均して1個体あたりの平均重量を求めた。
その結果、本化合物１を種子100キログラム当り0.5グラムで処理した区、5グラムで処理した区及び50グラムで処理した区では、いずれも無処理区と比べて明らかに地上部新鮮重量が大きかった。
【００６０】
試験例４ イネ浸漬処理による低温ストレス軽減評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（栽培）
必要量のイネ種子を1,000ppm ベンレ−ト水溶液に浸け、30℃で一晩暗黒下で培養した。ベンレ−ト水溶液を蒸留水に置換して、30℃でさらに一晩暗黒下で培養し、催芽処理を行った。
４０６穴プラグトレーの穴にろ紙を載せ、催芽処理後のイネ種子をろ紙上に播種した。これに１／２倍濃度の木村B水耕栽培液（Plant Science 119:39-47 (1996)参照）を加え、人工気象室内で以下の条件で5日間栽培した。
【００６１】
「条件；温度 昼28℃/夜23℃、湿度70％、照度8,500ルクス、日長12時間」
（化合物処理）
本化合物１の1,000ppm濃度のDMSO溶液を調製し、1／２倍濃度の木村B水耕栽培液にて希釈した。化合物を含む当該水耕栽培液を２４穴プレートの各ウェルに２mlずつ分注し、生育したイネ実生を1ウェルに1個体ずつ移し、以下の条件下、照明培養棚で2日間栽培した。
「条件：温度25℃、照度5,000ルクス、日長12時間」
また、0.1％DMSOを含む水耕栽培液を用いて同様に栽培したイネ実生を無処理区とした。
（低温ストレス処理）
当該イネ実生を、24穴プレートごと保冷庫（MPR-1411、三洋電機製）内に移し、冷陰極管照明を用いて以下の条件で5日間栽培した。
「条件：温度4℃、照度3,500ルクス、日長12時間」
（評価）
低温ストレス処理後に、低温ストレス処理後のイネ実生を照明培養棚に移し、以下の条件で、さらに4日間栽培した。
「条件：温度25℃、照度5,000ルクス、日長12時間」
４日後、各処理区のイネ実生個体の地上部を写真撮影し、得られた画像データの緑色部分の面積を、画像解析ソフトWin ROOF（三谷商事社製）で定量して、植物の地上部の当該各個体の緑色面積を求めた。処理区毎に、2反復の緑色面積の1個体あたりの平均値を求めた。
その結果、本化合物１を1ppmの処理濃度で処理した区において、無処理区と比べて明らかに植物体緑色面積が大きかった。
【００６２】
試験例５ イネ種子処理による低温ストレス軽減評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（種子処理）
5% (V/V) color coat red (Becker Underwood, Inc.)、5% (V/V) CF-Clear (Becker Underwood, Inc.)、1% Maxim XL (Syngenta社製)を含むブランクスラリー溶液を調製した。イネ種子100キログラム当り5グラム又は50グラムとなるように本化合物１をそれぞれブランクスラリー溶液に溶解しスラリー溶液とした。15ml遠沈管(AGCテクノグラス社製)に、イネ種子3グラム当り0.1mlのスラリー溶液を入れ、スラリー溶液が乾くまで攪拌し、種子コーティングさせた。又、ブランクスラリー溶液を用いてコーティングした種子を無処理区用種子とした。
（栽培方法）
４０６穴プラグトレーの底にろ紙を敷き、種子処理後のイネ種子を播種した。これに１／２倍濃度の木村B水耕栽培液（Plant Science 119:39-47 (1996)）を加え、人工気象室内で、以下の条件下10日間栽培した。
「条件：温度 昼28℃/夜23℃、湿度70％、照度8,500ルクス、日長12時間」
（低温ストレス処理）
10日間栽培後の生じたイネ実生を、プラグトレーごと保冷庫（MPR-1411、三洋電機製）内に移し、以下の条件で、冷陰極管照明下、5日間栽培した。
「条件：温度4℃、照度3,500ルクス、日長12時間」
（評価）
低温ストレス処理後の同一処理区のイネ実生４個体を、ホグランド水耕栽培液（Hoagland and Arnon, California Agricultural Experiment Station 1950 Circular 347 pp.34）60mlが入ったカップ（C-AP角カップ88、SHINGI社製）に移し、照明培養棚で以下の条件で12日間栽培した。
「条件：温度25℃、照度5,000ルクス、日長12時間」
12日後、各植物個体の地上部新鮮重量を秤量した。各処理区で４個体それぞれの地上部新鮮重量の平均値を求めた。
その結果、本化合物１を、5グラム/100キログラム種子で処理した区及び50グラム/100キログラム種子で処理した区において、無処理区と比較して明らかに地上部新鮮重量が大きかった。
【００６３】
試験例６ イネ浸漬処理による乾燥ストレス影響軽減評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（栽培）
必要量のイネ種子を1,000ppmのベンレ−ト水溶液に浸け、30℃暗黒下で一晩培養した。ベンレ−ト水溶液を捨てて蒸留水に置換し、30℃暗黒下でさらに一晩培養した。
【００６４】
４０６穴プラグトレーの穴にろ紙を載せ、催芽処理イネ種子をろ紙上に播種した。１／２倍濃度の木村B水耕栽培液（Plant Science 119:39-47 (1996)参照）に、100,000ppmの本化合物１を含むDMSO溶液を1/10,000容添加し、温度 昼28℃／夜23℃、湿度60%、照度8500ルクス、日長１２時間の条件で、１４日間栽培した。
（乾燥ストレス処理）
生育したイネ実生を5株ずつ空の35ml平底テストチューブ（アシスト/Sarstedt製）に入れ、ふたをせずに、温度 昼28℃／夜23℃、湿度：60%、照度8,500ルクス、日長１２時間で、2日間静置した。
（評価）
乾燥ストレス処理後の植物をホグランド水耕栽培液（Hoagland and Arnon, California Agricultural Experiment Station 1950 Circular 347 pp.34参照）100mlが入った遠沈管（AGCテクノグラス）に入れ、温度 昼28℃／夜23℃、湿度60%、照度8,500ルクス、日長１２時間で、１４日間栽培した。
１４日後、各試験区の供試植物５個体をまとめて地上部新鮮重量を測定し、各試験区の３反復の平均値を求めた。その結果、本化合物１を10ppmの濃度で処理したイネは、無処理区と比べて明らかに地上部新鮮重量が大きかった。
【００６５】
試験例７ コムギ散布処理による高温ストレスによる影響軽減評価試験
（供試植物）
コムギ（品種：アポジー）
（散布処理）
コムギ種子をプラスチックポット中の培土（愛菜）に5粒ずつ播種し、温度 昼18℃/夜15℃、照度7,000ルクスの人工気象室にて28日間栽培した。ストレス試験前に１ポット当り3個体に間引きした。
0.5ミリグラムの本化合物１に、ホワイトカーボンとポリオキシエチレンアルキルエーテルサルフェートアンモニウム塩との混合物(重量割合１：１)を120ミリグラム、水を300μl添加し、湿式粉砕法で微粉砕することにより、化合物１のフロアブル製剤を得た。このフロアブル製剤を水50mlで希釈しこれに展着剤として、リノー（日本農薬株式会社製）を5000倍希釈になるように添加して、本化合物１を100ppmの濃度で含有する散布液を得た。自動散布機を用いて散布液の十分量を前記コムギ実生に散布した。また、本化合物１を含まないフロアブル製剤を散布処理し、無処理区とした。
（高温ストレス処理）
播種後28日目の当該供試植物を、人工気象室内で、温度 昼36℃/夜32℃、湿度 昼50％/夜60％、照度 7,000ルクス、日長１２時間の条件にて7日間栽培した。
（評価）
高温ストレス処理後に、人工気象室内で、温度 昼18℃/夜15℃、照度7,000ルクスで栽培した。播種後60日目に、７ポットないしは８ポットの供試植物の穂の新鮮重量を測定し、1ポット（3個体）あたりの穂新鮮重量の平均値を求めた。その結果、本化合物１を100ppmの濃度で処理したコムギは、本化合物１を処理しなかったコムギ（無処理区）に比べて、明らかに穂新鮮重量が大きかった。
【００６６】
試験例８ イネ水耕栽培による根部生長促進評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（栽培、化合物処理）
1/4倍濃度のホグランド水耕栽培液（Hoagland and Arnon, California Agricultural Experiment Station 1950 Circular 347 pp.34）に、本化合物５を10,000ppmの濃度で含むDMSO溶液を1/10,000容添加し、本化合物５を1ppm含む水耕栽培液を調製した。無処理区としては、1/4倍濃度のホグランド水耕栽培液にDMSOを1/10,000容添加した水耕栽培液を使用した。
イネ種子を、1%次亜塩素酸ナトリウム水溶液に10分間浸漬し、次いで、70%エタノール溶液に浸漬して表面消毒し、その後、蒸留水で洗浄した。消毒後の種子を、前記の試験濃度の供試化合物を含む水耕栽培液に浸し、暗黒下、温度28℃で3日間インキュベートし催芽処理を行った。
その後、各試験濃度の供試化合物を含む水耕栽培液30mlを、側面をボール紙で覆って遮光したプラスチック製のチューブ（直径：20 mm×高さ：113 mm）に分注し、スチレンボードとビニール製メッシュを用いて作製したフロートを浮かべ、水耕栽培液水面にそのフロート上に、催芽処理後の当該イネ種子を置いて、チューブ上面の照度4,000ルクス、温度26℃、湿度50％、日長16時間で３日間栽培した。
（評価方法）
栽培後の当該イネ実生を、WinRHIZOシステム（REGENT INSTRUMENTS社製）で種子根長を測定した。各試験区での、4個体又は5個体の種子根長の測定値の平均値を求めた結果、本化合物５（濃度1ppm）で処理した試験区は、無処理区と比較して、明らかに種子根が長かった。
【００６７】
試験例９ ベンサミアナタバコ水耕栽培による低温ストレス影響軽減評価試験
（供試植物）
ベンサミアナタバコ（Nicotiana benthamiana）
（栽培、化合物処理）
本化合物１、本化合物４、又は本化合物５のいずれかひとつを濃度100ppmで含むDMSO溶液を調製し、１／２倍濃度のムラシゲ・スクーグ培地（水１Ｌ当たり、ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類（和光純薬社製）を2.3 g、ミオイノシトール（シグマアルドリッチ社製）を200 mg、ニコチン酸（和光純薬社製）を2 mg、ピリドキシン塩酸塩（和光純薬社製）を2 mg、チアミン塩酸塩（和光純薬社製）を20 mg、ショ糖（和光純薬社製）を 20 g 、MES（同仁化学研究所社製）を1 g含み、pH5.8に調整された培地）に、上記の本化合物DMSO溶液を1/1,000容添加し、本化合物を濃度10ppmで含む当該培地を作製した。無処理区としては、１／２倍濃度のムラシゲ・スクーグ培地にDMSOを1/1,000容添加した培地を使用した。
ベンサミアナタバコの種子を5μLの当該培地に播種し、22℃で一晩培養した。その後、本化合物を濃度0.1ppmで含む当該培地を45μL添加して照度4,000ルクス、温度22℃、日長16時間、で7日間栽培し、ベンサミアナタバコの実生を化合物で処理した。無処理区には１／２倍濃度のムラシゲ・スクーグ培地にDMSOを1/1,000容添加した培地を45μL添加して、同様に化合物処理を行った。
（低温ストレス処理）
化合物処理したベンサミアナタバコの実生を、照度2,000ルクス、温度1.5±1.0℃、日長16時間、で7日間栽培して低温処理を行った。
（評価）
低温ストレス処理したベンサミアナタバコの実生を、照度4,000ルクス、温度22℃、日長16時間、で3日間栽培した後、緑色の葉面積を目視評価した。完全に枯死した植物体を０、低温処理を行っていない植物体を５として、緑色面積を１／５刻みで６段階で評価し、１以上のものを軽減効果ありとした。目視評価の結果、無処理区の緑色葉面積に対して、本化合物１、本化合物４、又は本化合物５で処理した試験区は明らかに緑色葉面積が増加した。
【００６８】
試験例１０ コムギ散布処理による高温ストレスによる影響軽減評価試験
（供試植物）
コムギ（品種：アポジー）
（散布処理）
コムギ種子をプラスチックポット中の培土（愛菜）に5粒ずつ播種し、温度 昼18℃/夜15℃、照度7,000ルクスの人工気象室にて28日間栽培した。ストレス試験前に１ポット当り3個体に間引きした。
0.5ミリグラムの本化合物１に、ホワイトカーボンとポリオキシエチレンアルキルエーテルサルフェートアンモニウム塩との混合物(重量割合１：１)を120ミリグラム、水を300μL添加し、湿式粉砕法で微粉砕することにより、化合物１のフロアブル製剤を得た。このフロアブル製剤を水500mlで希釈しこれに展着剤として、リノー（日本農薬株式会社製）を5,000倍希釈になるように添加して、本化合物１を1ppmの濃度で含有する散布液を得た。自動散布機を用いて散布液の十分量を前記コムギ実生に散布した。また、本化合物１を含まないフロアブル製剤を散布処理し、無処理区とした。
（高温ストレス処理）
播種後28日目の当該供試植物を、人工気象室内で、温度 昼36℃/夜32℃、湿度 昼50％/夜60％、照度 7,000ルクス、日長１２時間の条件にて7日間栽培した。
（評価）
高温ストレス処理後に、人工気象室内で、温度 昼18℃/夜15℃、照度7,000ルクスで栽培した。高温ストレス処理90日目に、７ポットないしは８ポットの供試植物の穂の種子粒数および種子重量を測定し、一穂あたりの種子粒数および種子重量の平均値を求めた。その結果、本化合物１で処理したコムギは、本化合物１を処理しなかったコムギ（無処理区）に比べて、明らかに種子粒数および種子重量が大きかった。
【００６９】
試験例１１ イネ種子処理による乾燥ストレス影響軽減評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（種子処理）
5% (V/V) color coat red (Becker Underwood, Inc.)、5% (V/V) CF-Clear (Becker Underwood, Inc.)、1% Maxim XL (Syngenta社製)を含むブランクスラリー溶液を調製した。イネ種子100キログラム当り100グラムとなるように本化合物１をそれぞれブランクスラリー溶液に溶解しスラリー溶液とした。50ml遠沈管(AGCテクノグラス社製)に、イネ種子10グラム当り0.3mlのスラリー溶液を入れ、スラリー溶液が乾くまで攪拌し、種子をコーティングした。又、ブランクスラリー溶液を用いてコーティングした種子を無処理区用種子とした。
（栽培）
４０６穴プラグトレーの穴にろ紙を載せ、上記のように種子処理したイネ種子をろ紙上に播種して、１／２倍濃度の木村B水耕栽培液（Plant Science 119:39-47 (1996)参照）を添加し、温度 昼28℃／夜23℃、湿度60%、照度8500ルクス、日長１２時間の条件で、１７日間栽培した。
（乾燥ストレス処理）
生育したイネ実生を5株ずつ空の35ml平底テストチューブ（アシスト/Sarstedt製）に入れ、ふたをせずに、温度 昼28℃／夜23℃、湿度：60%、照度8,500ルクス、日長１２時間で、2日間静置した。
（評価）
乾燥ストレス処理後の植物をホグランド水耕栽培液（Hoagland and Arnon, California Agricultural Experiment Station 1950 Circular 347 pp.34参照）100mlが入った遠沈管（AGCテクノグラス）に入れ、温度 昼28℃／夜23℃、湿度60%、照度8,500ルクス、日長１２時間で、14日間栽培した。
14日後、各試験区の供試植物５個体をまとめて地上部新鮮重量を測定し、各試験区の３反復の平均値を求めた。その結果、本化合物１を、100グラム/100キログラム種子で処理した区において、無処理区と比べて明らかに地上部新鮮重量が大きかった。
【産業上の利用可能性】
【００７０】
本発明方法を用いることによって、効果的に植物の生長を促進することが可能となる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物の生長を促進する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
いくつかの化学物質には、植物に施用することによって植物の生長を促進する効果を示すものが知られている。例えば、アミノレブリン酸はその施用により植物に対して生長促進効果を示す。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】「Biosynthesis, biotechnological production and applications of 5-aminolevulinic acid」 K. Sasaki et al., (2002) Applied Microbial Biotechnology 58: pp. 23-29
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、植物の生長を促進する優れた方法等を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、鋭意検討した結果、特定の化合物を植物に施用することによってその植物の生長が促進されることを見出し、本発明に到達した。
【０００６】
即ち、本発明は次の通りである。
［１］下記式（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物（以下、本化合物と記すことがある。）を、植物に処理することを特徴とする植物の生長促進方法（以下、本発明方法と記すことがある。）。
［２］式（１）で示される化合物が、下記の化合物群Ａから選ばれる化合物である前項［１］に記載の方法。
＜化合物群Ａ＞
（１）５-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（２）６-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（３）４-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（４）７-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
［３］植物が、非生物的ストレスに暴露された又は暴露されるであろう植物である前項［１］又は［２］に記載の植物の生長促進方法。
［４］植物への処理が、散布処理、土壌処理、種子処理又は水耕処理である前項［１］から［３］のいずれか一に記載の方法。
［５］植物への処理が、種子処理である前項［１］から［３］のいずれか一に記載の方法。
［６］植物がイネ、トウモロコシ、又はコムギである前項［１］から［５］のいずれか一に記載の方法。
［７］植物が遺伝子組換え植物である前項［１］から［６］のいずれか一に記載の方法。
［８］非生物的ストレスが高温ストレスである前項［３］から［７］のいずれか一に記載の方法。
［９］非生物的ストレスが低温ストレスである前項［３］から［７］のいずれか一に記載の方法。
［１０］非生物的ストレスが乾燥ストレスである前項［３］から［７］のいずれか一に記載の方法。
［１１］植物の生長を促進するための、前記式（１）で示される化合物の使用。
［１２］前記式（１）で示される化合物及び不活性成分を含有することを特徴とする植物生長促進組成物。
【発明の効果】
【０００７】
本発明方法によって、優れた植物生長促進方法等を提供することが可能となる。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本発明において、植物の生長を促進する（以下、「生長促進」と記すことがある。）とは、苗立ち率向上、健全葉数増加、草丈増、植物体重量増加、葉面積増加、種子又は果実の数又は重量の増加、着花数又は着果数の増加、根部生長の増加をいう。
【０００９】
生長促進は、以下にあげるパラメーターを用いて定量化が可能である。
(１)苗立ち率
植物の種子を、例えば土壌中、ろ紙上、寒天培地上、砂上などに播種し、一定期間栽培する。栽培の全ての期間中あるいは一部の期間中に非生物的ストレスを負荷した後、生き残った幼植物の割合を調査する。
(２)健全葉数又は健全葉率
各植物について健全な葉の枚数を数え、総健全葉数を調査する。あるいは植物の全ての葉数に対する健全葉数の割合を調査する。
(３)草丈
各植物について地上部分の茎の根元から先端の枝葉までの長さを測定する。
(４)植物体重量
各植物の地上部を切り取り、重量を測定して、植物新鮮重量を求める、あるいは切り取ったサンプルを乾燥させた後に重量を測定して、植物乾燥重量を求める。
(５)葉面積
植物をデジタルカメラで撮影し、写真の緑色の部分の面積を画像解析ソフト例えばWin ROOF（三谷商事社製）で定量することにより、あるいは目視による評価によって、植物の葉面積を求める。
(６)葉色
植物の葉をサンプリングし、葉緑素計（例えばＳＰＡＤ−５０２、コニカミノルタ製）を用いて葉緑素量を測定することにより、葉色を求める。また、植物をデジタルカメラで撮影し、写真の緑色の部分の面積を画像解析ソフト例えばWin ROOF（三谷商事社製）で色抽出を行い定量することにより、植物の葉の緑色部分の面積を求める。
(７)種子あるいは果実の数又は重量
植物を種子あるいは果実が結実あるいは登熟するまで栽培した後、植物当りの果実数を計測あるいは植物当りの総果実重量を測定する。また、種子が登熟するまで栽培した後、例えば穂数、登熟歩合、千粒重などの収量構成要素を調査する。
(８)着花率、着果率、結実率、又は種子充填率
植物を着果するまで栽培した後、着花数と着果数を数え着果率％（着果数/着花数×100）を求める。種子登熟後に結実数と種子充填数を数え結実率（結実数/着花数×100）、種子充填率％（種子充填数/結実数×100）を求める。
(９)根部生長の増加
植物を土壌あるいは水耕にて栽培し、その根部の長さを計測する、あるいは根部を切り取りその新鮮重量等を測定する。
【００１０】
本発明方法において本化合物を植物に処理する場合、当該植物の全体であっても一部分（茎葉、芽、花、果実、穂、種子、球根、塊茎、根等）であっても良く、又当該植物の種々の生育ステージ（播種時前、播種時、播種後出芽前後などの発芽期、育苗時、苗移植時、挿し木又は挿し苗時、定植後の生育時などの栄養生長期、開花前、開花中、開花後、出穂直前又は出穂期などの生殖生長期、収穫予定前、成熟予定前、果実の着色開始期などの収穫期）であって良い。ここで球根とは、鱗茎、球茎、根茎、塊根、および担根体を意味する。また、苗としては、実生、挿し木等を含むものとする。
【００１１】
本発明方法において使用される下記式（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3、及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物は、公知の方法で製造することができ、又は試薬として購入することができる。
【００１２】
本化合物の具体例としては、式（１）中のＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５が、表1に示される基の組合せである化合物（本化合物１〜本化合物８）が挙げられる。
【００１３】
【表１】
【００１４】
本発明方法において本化合物を使用する場合、本化合物のみで使用してもよいが、後述するとおり種々の不活性成分（固体担体、液体担体、界面活性剤、その他の製剤用補助剤等）を用いて製剤化された植物生長促進組成物として使用することができる。
【００１５】
製剤化の際に用いられる固体担体としては、例えばカオリンクレー、アッタパルジャイトクレー、ベントナイト、モンモリロナイト、酸性白土、パイロフィライト、タルク、珪藻土、方解石等の鉱物、トウモロコシ穂軸粉、クルミ殻粉等の天然有機物、尿素等の合成有機物、炭酸カルシウム、硫酸アンモニウム等の塩類、合成含水酸化珪素等の合成無機物等からなる微粉末又は粒状物等が挙げられ、液体担体としては、例えばキシレン、アルキルベンゼン、メチルナフタレン等の芳香族炭化水素類、２−プロパノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、エチレングリコールモノエチルエーテル等のアルコール類、アセトン、シクロヘキサノン、イソホロン等のケトン類、ダイズ油、綿実油等の植物油、石油系脂肪族炭化水素類、エステル類、ジメチルスルホキシド、アセトニトリル、及び水が挙げられる。
【００１６】
界面活性剤としては、例えばアルキル硫酸エステル塩、アルキルアリールスルホン酸塩、ジアルキルスルホコハク酸塩、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテルリン酸エステル塩、リグニンスルホン酸塩、ナフタレンスルホネートホルモアルデヒド重縮合物等の陰イオン界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル、ポリオキシエチレンアルキルポリオキシプロピレンブロックコポリマー、ソルビタン脂肪酸エステル等の非イオン界面活性剤、及びアルキルトリメチルアンモニウム塩等の陽イオン界面活性剤が挙げられる。
【００１７】
その他の製剤用補助剤としては、例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン等の水溶性高分子、アラビアガム、アルギン酸及びその塩、ＣＭＣ（カルボキシメチルセルロース）、ザンサンガム等の多糖類、アルミニウムマグネシウムシリケート、アルミナゾル等の無機物、防腐剤、着色剤、及びＰＡＰ（酸性リン酸イソプロピル）、ＢＨＴ等の安定化剤が挙げられる。
【００１８】
本発明方法において、本化合物を植物に処理する場合、本化合物の有効量を植物又はその栽培地に処理することにより行われる。植物又は植物の栽培地に処理する場合は、本化合物は１回もしくは複数回処理する。
【００１９】
本発明方法における施用方法としては、具体的には、例えば、茎葉散布等の植物の茎葉、花器又は穂への処理、植物を植えつける前又は植えつけた後の土壌（栽培地）への処理、種子消毒や種子浸漬、種子コート等の種子への処理、苗への処理、種芋等の球根への処理等が挙げられる。
【００２０】
本発明方法における植物の茎葉、花器又は穂への処理としては、具体的には、例えば、茎葉散布、樹幹散布等の植物の表面に施用する処理方法が挙げられる。また、開花前、開花中、開花後を含む開花時期における花器あるいは植物全体に散布処理する方法が挙げられる。また、穀物等おいては出穂時期の穂あるいは植物全体に散布する方法が挙げられる。
【００２１】
本発明方法における土壌処理方法としては、例えば、土壌への散布、土壌混和、土壌への薬液潅注（薬液潅水、土壌注入、薬液ドリップ）が挙げられ、処理する場所としては例えば、植穴、作条、植穴付近、作条付近、栽培地の全面、植物地際部、株間、樹幹下、主幹畦、培土、育苗箱、育苗トレイ、苗床等が挙げられ、処理時期としては播種前、播種時、播種直後、育苗期、定植前、定植時、及び定植後の生育期等が挙げられる。また、上記土壌処理において、複数の本化合物を植物に同時に処理してもよく、本化合物を含有するペースト肥料等の固形肥料を土壌へ施用してもよい。また、本化合物を潅水液に混合してもよく、例えば、潅水設備（潅水チューブ、潅水パイプ、スプリンクラー等）への注入、条間湛水液への混入、水耕液へ混入等が挙げられる。また、あらかじめ潅水液と本化合物を混合し、例えば、上記潅水方法やそれ以外の散水、湛水等のしかるべき潅水方法を用いて処理することができる。
【００２２】
本発明方法における種子への処理としては、対象とする植物の種子、球根等に本化合物を処理する方法であって、具体的には、例えば、本化合物の懸濁液を霧状にして種子表面もしくは球根表面に吹きつける吹きつけ処理、本化合物の水和剤、乳剤、又はフロアブル剤等に少量の水を加えるか、又はそのままで種子もしくは球根に塗付する塗沫処理、本化合物の溶液に一定時間種子を浸漬する浸漬処理、フィルムコート処理、ペレットコート処理が挙げられる。
【００２３】
本発明方法における苗への処理としては、例えば、本化合物を水で適当な有効成分濃度に希釈調製した希釈液を苗全体に散布する散布処理、その希釈液に苗を浸漬する浸漬処理、粉剤に調製した本化合物を苗全体に付着させる塗布処理が挙げられる。また、苗を植えつける前又は植えつけた後の土壌への処理としては、例えば、本化合物を水で適当な有効成分濃度に希釈調製した希釈液を、苗を植えつけた後に苗及び周辺土壌に散布する方法、粒剤又は粒剤等の固形剤に調製した本化合物を、苗を植えつけた後周辺土壌に散布する方法が挙げられる。
【００２４】
また、本化合物を水耕栽培における水耕液に混合して用いてもよく、また組織培養における培地成分の１つとして用いてもよい。本発明方法における水耕処理方法としては、水耕栽培に使用する場合に、通常用いられる園試等の水耕栽培用の水耕培地に培地中濃度として０．００１ｐｐｍ〜１，０００ｐｐｍの範囲で溶解又は懸濁して用いることができる。また組織培養や細胞培養時に使用する場合は、通常用いられるムラシゲ・スクーグ培地等の植物組織培養用培地やホグランド水耕培養液等の水耕培地に、培地中濃度として０．００１ｐｐｍ〜１，０００ｐｐｍの範囲で溶解又は懸濁して用いることができる。この場合、定法に従い、炭素源としての糖類、各種植物ホルモン等を適宜加えることができる
【００２５】
本化合物を、植物又は植物の生育場所に処理する場合、その処理量は、処理する植物の種類、製剤形態、処理時期、気象条件等によって変化させ得るが、１０，０００ｍ2あたり有効成分量として、通常０．１〜１０，０００グラム、好ましくは１〜１，０００グラムの範囲である。土壌に全面混和する場合は、その処理量は、１０，０００ｍ2あたり有効成分量として、通常０．１〜１０，０００グラム、好ましくは１〜１，０００グラムである。
【００２６】
乳剤、水和剤、フロアブル剤、マイクロカプセル剤等は、通常水で希釈して散布することにより処理する。この場合、有効成分の濃度は、通常０．１〜１０，０００ｐｐｍ、好ましくは１〜１０００ｐｐｍの範囲である。粉剤、粒剤等は通常希釈することなくそのまま処理する。
【００２７】
種子への処理においては、種子１００キログラムに対する本化合物の重量としては、通常０．０１〜１，０００グラム、好ましくは０．１〜１００グラムの範囲である。
【００２８】
本発明方法が適用可能な植物としては、下記の植物が挙げられる。
【００２９】
農作物：トウモロコシ、イネ、コムギ、オオムギ、ライムギ、エンバク、ソルガム、ワタ、ダイズ、ラッカセイ、ソバ、テンサイ、セイヨウアブラナ、ヒマワリ、サトウキビ、タバコ、ホップ等。
【００３０】
野菜：ナス科野菜（ナス、トマト、ジャガイモ、トウガラシ、ピーマン等）、ウリ科野菜（キュウリ、カボチャ、ズッキーニ、スイカ、メロン、マクワウリ等）、アブラナ科野菜（ダイコン、カブ、セイヨウワサビ、コールラビ、ハクサイ、キャベツ、アブラナ、カラシナ、ブロッコリー、カリフラワー等）、キク科野菜（ゴボウ、シュンギク、アーティチョーク、レタス等）、ユリ科野菜（ネギ、タマネギ、ニンニク、アスパラガス等）、セリ科野菜（ニンジン、パセリ、セロリ、アメリカボウフウ等）、アカザ科野菜（ホウレンソウ、フダンソウ等）、シソ科野菜（シソ、ミント、バジル等）、マメ科作物（エンドウ、インゲンマメ、アズキ、ソラマメ、ヒヨコマメ等）、イチゴ、サツマイモ、ヤマノイモ、サトイモ、コンニャク、ショウガ、オクラ等。
【００３１】
果樹：仁果類（リンゴ、ナシ、セイヨウナシ、カリン、マルメロ等）、核果類（モモ、スモモ、ネクタリン、ウメ、オウトウ、アンズ、プルーン等）、カンキツ類（ウンシュウミカン、オレンジ、レモン、ライム、グレープフルーツ等）、堅果類（クリ、クルミ、ハシバミ、アーモンド、ピスタチオ、カシューナッツ、マカダミアナッツ等）、液果類（ブルーベリー、クランベリー、ブラックベリー、ラズベリー等）、ブドウ、カキ、オリーブ、ビワ、バナナ、コーヒー、ナツメヤシ、ココヤシ、アブラヤシ等。
【００３２】
果樹以外の樹木：チャ、クワ、花木類（サツキ、ツバキ、アジサイ、サザンカ、シキミ、サクラ、ユリノキ、サルスベリ、キンモクセイ等）、街路樹（トネリコ、カバノキ、ハナミズキ、ユーカリ、イチョウ、ライラック、カエデ、カシ、ポプラ、ハナズオウ、フウ、プラタナス、ケヤキ、クロベ、モミノキ、ツガ、ネズ、マツ、トウヒ、イチイ、ニレ、トチノキ等）、サンゴジュ、イヌマキ、スギ、ヒノキ、クロトン、マサキ、カナメモチ、等。
【００３３】
芝生：シバ類（ノシバ、コウライシバ等）、バミューダグラス類（ギョウギシバ等）、ベントグラス類（コヌカグサ、ハイコヌカグサ、イトコヌカグサ等）、ブルーグラス類（ナガハグサ、オオスズメノカタビラ等）、フェスク類（オニウシノケグサ、イトウシノケグサ、ハイウシノケグサ等）、ライグラス類（ネズミムギ、 ホソムギ等）、カモガヤ、オオアワガエリ等。
その他：花卉類（バラ、カーネーション、キク、トルコギキョウ、カスミソウ、ガーベラ、マリーゴールド、サルビア、ペチュニア、バーベナ、チューリップ、アスター、リンドウ、ユリ、パンジー、シクラメン、ラン、スズラン、ラベンダー、ストック、ハボタン、プリムラ、ポインセチア、グラジオラス、カトレア、デージー、シンビジューム、ベゴニア等）、バイオ燃料植物（ヤトロファ、ベニバナ、アマナズナ類、スイッチグラス、ミスカンサス、クサヨシ、ダンチク、ケナフ、キャッサバ、ヤナギ等）、観葉植物等。
【００３４】
本発明に適用可能な植物として、好ましくは、チャ、リンゴ、ナシ、ブドウ、オウトウ、モモ、ネクタリン、カキ、ウメ、スモモ、ダイズ、レタス、キャベツ、トマト、ナス、キュウリ、スイカ、メロン、インゲンマメ、エンドウ、アズキ、シバ、セイヨウアブラナ、イチゴ、アーモンド、トウモロコシ、ソルガム、ソラマメ、ハクサイ、ジャガイモ、ラッカセイ、イネ、コムギ、サトイモ、コンニャク、ヤマノイモ、ダイコン、カブ、パセリ、マクワウリ、オクラ、ショウガ、レモン、オレンジ、グレープフルーツ、ライム、ブルーベリー、クリ、ホップ、バジルが挙げられ、より好ましくはイネ科植物又はナス科植物、更に好ましくはイネ科植物、また更に好ましくはイネ、コムギ、トウモロコシなどが挙げられる。
【００３５】
上記「植物」とは、植物は、植物に除草剤耐性を付与する遺伝子や害虫に対する選択的毒素を産生する遺伝子、植物に病害抵抗性を付与する遺伝子、非生物的ストレスを緩和する遺伝子などが遺伝子組換え法あるいは交配育種によって導入された組換え植物であってもよく、これらを複数組み合わせたスタック品種であってもよい。
【００３６】
本化合物を、殺虫剤、殺菌剤、及び特定の除草剤に対するセーフナー等と同時に種子に処理してもよく、またそれらと同時に植物に施用してもよい。
【００３７】
本発明方法は、本化合物の処理される植物が、非生物的ストレスに暴露された又は暴露されるであろう植物であっても良い。当該非生物的ストレスは、下記式で表される「ストレスの強さ」の値として、１０５〜２００、好ましくは１１０〜１８０、より好ましくは１２０〜１６０であればよい。
【００３８】
式（I）：「ストレスの強さ」＝１００×「非生物的ストレス条件に暴露されていない植物におけるいずれか一つの植物表現型」／「非生物的ストレス条件に暴露された植物における当該いずれか一つの植物表現型」
【００３９】
ここで、「非生物的ストレス」とは、高温ストレス又は低温ストレスである温度ストレス、乾燥ストレス又は過湿ストレスである水分ストレス、塩ストレス等の非生物的ストレス条件に暴露された場合に植物細胞の生理機能の低下を来たし、植物の生理状態が悪化して生育が阻害されるようなストレスをいう。高温ストレスとは、植物の生育適温又は発芽適温よりも高い温度に暴露された場合に受けるストレスをいい、具体的には、植物が栽培されている環境における平均栽培温度が２５℃以上、より厳しくは３０℃以上、更に厳しくは３５℃以上である条件を挙げることができる。 低温ストレスとは、植物の生育適温又は発芽適温よりも低い温度に暴露された場合に受けるストレスをいい、具体的には、植物が栽培されている環境における平均栽培温度が１５℃以下、より厳しくは１０℃以下、更により厳しくは５℃以下である条件を挙げることができる。 また、乾燥ストレスとは、植物は降雨量や灌水量の減少により土壌中の水分含量が減少し、吸水が阻害され植物の生育が阻害されるような水分環境に暴露された場合に受けるストレスをいい、具体的には、土壌の種類により値は異なることがあるが、植物が栽培されている土壌含水率が１５重量％以下、より厳しくは１０重量％以下、更に厳しくは、７．５重量％以下が水分ストレスのある条件、又は、植物が栽培されている土壌のpＦ値が、２．３以上、厳しくは２．７以上、更に厳しくは３．０以上の条件を挙げることができる。過湿ストレスとは土壌中の水分含量が過剰になり植物の生育が阻害されるような水分環境に暴露された場合に受けるストレスをいい、具体的には、土壌の種類により値は異なることがあるが、植物が栽培されている土壌含水率が３０重量％以上、厳しくは４０重量％以上、更に厳しくは５０重量％以上の、又は、植物が栽培されている土壌のｐＦ値が１．７以下、厳しくは１．０以下、更に厳しくは０．３以下である。 なお、土壌のｐＦ値は、「土壌・植物栄養・環境事典」（大洋社、１９９４年、松坂ら）の６１〜６２頁の「ｐＦ値測定法」に記述されている原理に従い、測定することができる。 また、塩ストレスとは、植物が栽培されている土壌あるいは水耕液中の塩類の蓄積により浸透圧が上昇し植物の吸水が阻害される結果、生育が阻害されるような環境に暴露された場合に受けるストレスをいい、具体的には、土壌あるいは水耕液中の塩による浸透圧ポテンシャルが０．２ＭＰａ（ＮａＣｌ濃度では２，４００ｐｐｍ）以上、厳しくは０．２５ＭＰａ以上、さらに厳しくは０．３０ＭＰａである条件である。土壌における浸透圧は、土壌を水で希釈して上澄み液の塩濃度を分析することによって、以下のラウールの式に基づいて求めることができる。
【００４０】
ラウールの式 π（ａｔｍ）＝ｃＲＴ
Ｒ＝０．０８２（Ｌ・ａｔｍ／ｍｏｌ・Ｋ）
Ｔ＝絶対温度（Ｋ）
ｃ＝イオンモル濃度（ｍｏｌ／Ｌ）
１ａｔｍ＝０．１ＭＰａ
【実施例】
【００４１】
以下、本発明を製剤例、製造例及び試験例にてさらに詳しく説明するが、本発明は以下の例のみに限定されるものではない。なお、以下の例において、部は特にことわりの無い限り重量部を示す。
【００４２】
製造例１
２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド５．０ｇ、チオグリコール酸メチル３．３ｇ、炭酸カリウム４．０ｇおよびＤＭＦ５０ｍｌの混合物を６０℃で２時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物に水を加え、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をメタノールから再結晶し、５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチル（本化合物１）６．３ｇを得た。
［本化合物１］
1H-NMR(CDCl3) δ: 8.16(s, 1H), 8.13(s, 1H), 7.99(d, J=8.7Hz, 1H), 7.67(d, J=8.7Hz, 1H), 3.98(s, 3H)
【００４３】
製造例２
２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド１．１１ｇ、チオグリコール酸メチル７３９ｍｇ、炭酸カリウム１．３ｇおよびＤＭＦ２０ｍｌの混合物を１４０℃で２時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物に水を加え、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、６−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチル（本化合物２）８４８ｍｇを得た。
［本化合物２］
1H-NMR(CDCl3) δ: 8.17(s, 1H), 8.11(s, 1H), 8.01-7.97(m, 1H), 7.66-7.62(m, 1H), 3.98(s, 3H)
【００４４】
製造例３
２−フルオロ−６−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド１．００ｇ、チオグリコール酸メチル６３３ｍｇ、炭酸カリウム１．２１ｇおよびＤＭＦ１５ｍｌの混合物を１３０℃で２時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物に水を加え、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、４−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチル（本化合物３）４８０ｍｇを得た。
［本化合物３］
1H-NMR(CDCl3) δ: 8.27(s, 1H), 8.08-8.04(m, 1H), 7.76-7.72(m, 1H), 7.57-7.51(m, 1H), 3.98(s, 3H)
【００４５】
製造例４
２−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド１．１０ｇ、チオグリコール酸メチル６６３ｍｇ、炭酸カリウム１．０３ｇおよびＤＭＦ１５ｍｌの混合物を６０℃で２時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物に水を加え、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水、飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、７−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチル（本化合物４）１．３４ｇを得た。
［本化合物４］
1H-NMR(CDCl3) δ: 8.13(s, 1H), 8.08-8.04(m, 1H), 7.79-7.75(m, 1H), 7.54-7.50(m, 1H), 3.97(s, 3H)
【００４６】
製造例５
製造例１に記載の方法に準じた方法で、チオグリコール酸メチルに代えてチオグリコール酸エチルを使用し、５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸エチル（本化合物５）を得る。
【００４７】
製造例６
製造例１に記載の方法に準じた方法で、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドに代えて２−フルオロ−４−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドを使用し、チオグリコール酸メチルに代えてチオグリコール酸エチルを使用して、６−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸エチル（本化合物６）を得る。
【００４８】
製造例７
製造例１に記載の方法に準じた方法で、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドに代えて２−フルオロ−６−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドを使用し、チオグリコール酸メチルに代えてチオグリコール酸エチルを使用して、４−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸エチル（本化合物７）を得る。
【００４９】
製造例８
製造例１に記載の方法に準じた方法で、２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドに代えて２−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒドを使用し、チオグリコール酸メチルに代えてチオグリコール酸エチルを使用して、７−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸エチル（本化合物８）を得る。
【００５０】
製造例９
５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸メチル１０．０ｇ、水酸化リチウム一水和物１．８０ｇ、水３０ｍｌおよびメタノール９０ｍｌの混合物を７５℃で１時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、減圧下濃縮した。残渣に水を加え、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回洗浄した。水層に濃塩酸を加えた後、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸９．１０ｇを得た。
５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸４００ｍｇおよびエタノール２０ｍｌの混合物に、氷冷下で塩化オキサリル２５４ｍｇを加えた後、還流下で６時間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却した後、減圧下濃縮した。残渣にクロロホルムを加え、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、５−（トリフルオロメチル）ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボン酸エチル（本化合物５）３３０ｍｇを得た。
［本化合物５］
1H-NMR(CDCl3) δ: 8.15(s, 1H), 8.12(s, 1H), 7.98(d, J=8.5Hz, 1H), 7.67(d, J=8.5Hz, 1H), 4.43(q, J=7.3Hz, 2H), 1.43(t, J=7.3Hz, 3H)
【００５１】
製剤例１
本化合物１〜８のいずれかひとつの１０部を、キシレン３５部とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３５部との混合物に溶解し、ポリオキシエチレンスチリルフェニルエーテル１４部およびドデシルベンゼンスルホン酸カルシウム６部を加え、良く攪拌混合して各々の１０％乳剤を得る。
【００５２】
製剤例２
本化合物１〜８のいずれかひとつの２０部を、ラウリル硫酸ナトリウム４部、リグニンスルホン酸カルシウム２部、合成含水酸化珪素微粉末２０部および珪藻土５４部を混合した中に加え、良く攪拌混合して各々の２０％水和剤を得る。
【００５３】
製剤例３
本化合物１〜８のいずれかひとつの２部に、合成含水酸化珪素微粉末１部、リグニンスルホン酸カルシウム２部、ベントナイト３０部およびカオリンクレー６５部を加え充分攪拌混合する。ついでこれらの混合物に適当量の水を加え、さらに攪拌し、増粒機で製粒し、通風乾燥して各々の２％粒剤を得る。
【００５４】
製剤例４
本化合物１〜８のいずれかひとつの１部を適当量のアセトンに溶解し、これに合成含水酸化珪素微粉末５部、ＰＡＰ０．３部およびフバサミクレー９３．７部を加え、充分攪拌混合し、アセトンを蒸発除去して各々の１％粉剤を得る。
【００５５】
製剤例５
本化合物１〜８のいずれかひとつの１０部；ポリオキシエチレンアルキルエーテルサルフェートアンモニウム塩５０部を含むホワイトカーボン３５部；および水５５部を混合し、湿式粉砕法で微粉砕することにより、各々の１０％フロアブル剤を得る。
【００５６】
製剤例６
本化合物１〜８のいずれかひとつの０．１部をキシレン５部およびトリクロロエタン５部に溶解し、これを脱臭灯油８９．９部に混合して各々の０．１％油剤を得る。
【００５７】
試験例１ イネ水耕栽培による根部生長促進評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（栽培、化合物処理）
1/4倍濃度のホグランド水耕栽培液（Hoagland and Arnon, California Agricultural Experiment Station 1950 Circular 347 pp.34）に、本化合物１〜本化合物４のいずれかひとつを10,000ppmの濃度で含むDMSO溶液を1/10,000容添加し、本化合物１〜本化合物４のいずれかひとつを1ppm含む水耕栽培液をそれぞれ調製した。無処理区としては、1/4倍濃度のホグランド水耕栽培液にDMSOを1/10,000容添加した水耕栽培液を使用した。
イネ種子を、1%次亜塩素酸ナトリウム水溶液に10分間浸漬し、次いで、70%エタノール溶液に浸漬して表面消毒し、その後、蒸留水で洗浄した。消毒後の種子を、前記の供試化合物を1ppm含む水耕栽培液に浸し、暗黒下、温度28℃で3日間インキュベートし催芽処理を行った。
その後、供試化合物を1ppm含む水耕栽培液30mlを、側面をボール紙で覆って遮光したプラスチック製のチューブ（直径：20mm×高さ：113mm）に分注し、スチレンボードとビニール製メッシュを用いて作製したフロートを浮かべ、水耕栽培液水面にそのフロート上に、催芽処理後の当該イネ種子を置いて、チューブ上面の照度4,000ルクス、温度26℃、湿度50％、日長16時間で3日間栽培した。
（評価方法）
栽培後の当該イネ実生を、WinRHIZOシステム（REGENT INSTRUMENTS社製）で種子根長を測定した。各試験区での、4個体又は5個体の種子根長の測定値の平均値を求めた結果、本化合物１、本化合物２、本化合物３又は本化合物４（いずれも濃度1ppm）で処理した試験区は、無処理区と比較して、明らかに種子根が長かった。
【００５８】
試験例２ トウモロコシ種子処理による生長促進評価試験
（供試植物）
トウモロコシ（品種黒もち）
（種子処理）
10% (V/V) color coat red (Becker Underwood, Inc.)、10% (V/V) CF-Clear (Becker Underwood, Inc.)、1.66% Maxim4FS (Syngenta)を含むブランクスラリー溶液を調製した。トウモロコシ種子100キログラム当り50グラムの化合物処理量となるように本化合物１をブランクスラリーに溶解し、スラリー溶液とした。50ml遠沈管(日本BD社製)に、種子14.4グラム当り0.35mlのスラリー溶液を入れ、スラリー溶液が乾くまで攪拌し、当該種子をコーティングした。また、ブランクスラリーを用いてコーティングした種子を無処理区用種子とした。
（栽培）
種子処理後の当該種子をポット（φ55 mm×高さ58mm）中の培土（愛菜）に1粒ずつ播種し、温度27℃、照度5,000ルクス、日長16時間で18日間栽培した。
（評価方法）
栽培後、生育した植物の地上部新鮮重量を秤量した。各処理条件で３反復をとり、それらを平均して1個体あたりの平均重量を求めた。
その結果、化合物１を50グラム/100キログラム種子の処理量で処理した区では、無処理区と比較して明らかに地上部新鮮重量が大きかった。
【００５９】
試験例３ トウモロコシ種子処理による低温ストレス軽減評価試験
（供試植物）
トウモロコシ（品種：黒もち）
（種子処理）
10% (V/V) color coat red (Becker Underwood, Inc.)、10% (V/V) CF-Clear (Becker Underwood, Inc.)、1.66% Maxim4FS(Syngenta)を含むブランクスラリー溶液を調製した。トウモロコシ種子100キログラム当り0.5グラム、5グラム又は50グラムの化合物処理量となるように本化合物１をそれぞれブランクスラリーに溶解しスラリー溶液とした。50mL遠沈管(日本BD社製)に、トウモロコシ種子14.4g当り0.35mlのスラリー溶液を入れ、スラリー溶液が乾くまで攪拌し、当該種子をコーティングした。また、ブランクスラリーを用いてコーティングした種子を無処理区用種子とした。
（栽培）
種子処理後のトウモロコシ種子をポット（φ55 mm×高さ58mm）中の培土（愛菜）に1粒ずつ播種し、温度27℃、照度5,000ルクス、日長16時間の条件下で10日間栽培し、生育した実生を供試した。
（低温ストレス処理方法）
下記の温度条件に設定した人工気象室（VHT-2-15P-NC2-S、日本医化器械製作所製）に、播種後10日目のポットを入れ、以下の条件で、4日間栽培した。
「条件；温度2.5±1℃、日長16時間、照度5,000ルクス」
（評価）
低温ストレス処理後に、温度27℃、照度5,000ルクス、日長16時間で、4日間栽培した後、当該植物の地上部新鮮重量を秤量した。各処理条件で5反復をとり、それらを平均して1個体あたりの平均重量を求めた。
その結果、本化合物１を種子100キログラム当り0.5グラムで処理した区、5グラムで処理した区及び50グラムで処理した区では、いずれも無処理区と比べて明らかに地上部新鮮重量が大きかった。
【００６０】
試験例４ イネ浸漬処理による低温ストレス軽減評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（栽培）
必要量のイネ種子を1,000ppm ベンレ−ト水溶液に浸け、30℃で一晩暗黒下で培養した。ベンレ−ト水溶液を蒸留水に置換して、30℃でさらに一晩暗黒下で培養し、催芽処理を行った。
４０６穴プラグトレーの穴にろ紙を載せ、催芽処理後のイネ種子をろ紙上に播種した。これに１／２倍濃度の木村B水耕栽培液（Plant Science 119:39-47 (1996)参照）を加え、人工気象室内で以下の条件で5日間栽培した。
【００６１】
「条件；温度 昼28℃/夜23℃、湿度70％、照度8,500ルクス、日長12時間」
（化合物処理）
本化合物１の1,000ppm濃度のDMSO溶液を調製し、1／２倍濃度の木村B水耕栽培液にて希釈した。化合物を含む当該水耕栽培液を２４穴プレートの各ウェルに２mlずつ分注し、生育したイネ実生を1ウェルに1個体ずつ移し、以下の条件下、照明培養棚で2日間栽培した。
「条件：温度25℃、照度5,000ルクス、日長12時間」
また、0.1％DMSOを含む水耕栽培液を用いて同様に栽培したイネ実生を無処理区とした。
（低温ストレス処理）
当該イネ実生を、24穴プレートごと保冷庫（MPR-1411、三洋電機製）内に移し、冷陰極管照明を用いて以下の条件で5日間栽培した。
「条件：温度4℃、照度3,500ルクス、日長12時間」
（評価）
低温ストレス処理後に、低温ストレス処理後のイネ実生を照明培養棚に移し、以下の条件で、さらに4日間栽培した。
「条件：温度25℃、照度5,000ルクス、日長12時間」
４日後、各処理区のイネ実生個体の地上部を写真撮影し、得られた画像データの緑色部分の面積を、画像解析ソフトWin ROOF（三谷商事社製）で定量して、植物の地上部の当該各個体の緑色面積を求めた。処理区毎に、2反復の緑色面積の1個体あたりの平均値を求めた。
その結果、本化合物１を1ppmの処理濃度で処理した区において、無処理区と比べて明らかに植物体緑色面積が大きかった。
【００６２】
試験例５ イネ種子処理による低温ストレス軽減評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（種子処理）
5% (V/V) color coat red (Becker Underwood, Inc.)、5% (V/V) CF-Clear (Becker Underwood, Inc.)、1% Maxim XL (Syngenta社製)を含むブランクスラリー溶液を調製した。イネ種子100キログラム当り5グラム又は50グラムとなるように本化合物１をそれぞれブランクスラリー溶液に溶解しスラリー溶液とした。15ml遠沈管(AGCテクノグラス社製)に、イネ種子3グラム当り0.1mlのスラリー溶液を入れ、スラリー溶液が乾くまで攪拌し、種子コーティングさせた。又、ブランクスラリー溶液を用いてコーティングした種子を無処理区用種子とした。
（栽培方法）
４０６穴プラグトレーの底にろ紙を敷き、種子処理後のイネ種子を播種した。これに１／２倍濃度の木村B水耕栽培液（Plant Science 119:39-47 (1996)）を加え、人工気象室内で、以下の条件下10日間栽培した。
「条件：温度 昼28℃/夜23℃、湿度70％、照度8,500ルクス、日長12時間」
（低温ストレス処理）
10日間栽培後の生じたイネ実生を、プラグトレーごと保冷庫（MPR-1411、三洋電機製）内に移し、以下の条件で、冷陰極管照明下、5日間栽培した。
「条件：温度4℃、照度3,500ルクス、日長12時間」
（評価）
低温ストレス処理後の同一処理区のイネ実生４個体を、ホグランド水耕栽培液（Hoagland and Arnon, California Agricultural Experiment Station 1950 Circular 347 pp.34）60mlが入ったカップ（C-AP角カップ88、SHINGI社製）に移し、照明培養棚で以下の条件で12日間栽培した。
「条件：温度25℃、照度5,000ルクス、日長12時間」
12日後、各植物個体の地上部新鮮重量を秤量した。各処理区で４個体それぞれの地上部新鮮重量の平均値を求めた。
その結果、本化合物１を、5グラム/100キログラム種子で処理した区及び50グラム/100キログラム種子で処理した区において、無処理区と比較して明らかに地上部新鮮重量が大きかった。
【００６３】
試験例６ イネ浸漬処理による乾燥ストレス影響軽減評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（栽培）
必要量のイネ種子を1,000ppmのベンレ−ト水溶液に浸け、30℃暗黒下で一晩培養した。ベンレ−ト水溶液を捨てて蒸留水に置換し、30℃暗黒下でさらに一晩培養した。
【００６４】
４０６穴プラグトレーの穴にろ紙を載せ、催芽処理イネ種子をろ紙上に播種した。１／２倍濃度の木村B水耕栽培液（Plant Science 119:39-47 (1996)参照）に、100,000ppmの本化合物１を含むDMSO溶液を1/10,000容添加し、温度 昼28℃／夜23℃、湿度60%、照度8500ルクス、日長１２時間の条件で、１４日間栽培した。
（乾燥ストレス処理）
生育したイネ実生を5株ずつ空の35ml平底テストチューブ（アシスト/Sarstedt製）に入れ、ふたをせずに、温度 昼28℃／夜23℃、湿度：60%、照度8,500ルクス、日長１２時間で、2日間静置した。
（評価）
乾燥ストレス処理後の植物をホグランド水耕栽培液（Hoagland and Arnon, California Agricultural Experiment Station 1950 Circular 347 pp.34参照）100mlが入った遠沈管（AGCテクノグラス）に入れ、温度 昼28℃／夜23℃、湿度60%、照度8,500ルクス、日長１２時間で、１４日間栽培した。
１４日後、各試験区の供試植物５個体をまとめて地上部新鮮重量を測定し、各試験区の３反復の平均値を求めた。その結果、本化合物１を10ppmの濃度で処理したイネは、無処理区と比べて明らかに地上部新鮮重量が大きかった。
【００６５】
試験例７ コムギ散布処理による高温ストレスによる影響軽減評価試験
（供試植物）
コムギ（品種：アポジー）
（散布処理）
コムギ種子をプラスチックポット中の培土（愛菜）に5粒ずつ播種し、温度 昼18℃/夜15℃、照度7,000ルクスの人工気象室にて28日間栽培した。ストレス試験前に１ポット当り3個体に間引きした。
0.5ミリグラムの本化合物１に、ホワイトカーボンとポリオキシエチレンアルキルエーテルサルフェートアンモニウム塩との混合物(重量割合１：１)を120ミリグラム、水を300μl添加し、湿式粉砕法で微粉砕することにより、化合物１のフロアブル製剤を得た。このフロアブル製剤を水50mlで希釈しこれに展着剤として、リノー（日本農薬株式会社製）を5000倍希釈になるように添加して、本化合物１を100ppmの濃度で含有する散布液を得た。自動散布機を用いて散布液の十分量を前記コムギ実生に散布した。また、本化合物１を含まないフロアブル製剤を散布処理し、無処理区とした。
（高温ストレス処理）
播種後28日目の当該供試植物を、人工気象室内で、温度 昼36℃/夜32℃、湿度 昼50％/夜60％、照度 7,000ルクス、日長１２時間の条件にて7日間栽培した。
（評価）
高温ストレス処理後に、人工気象室内で、温度 昼18℃/夜15℃、照度7,000ルクスで栽培した。播種後60日目に、７ポットないしは８ポットの供試植物の穂の新鮮重量を測定し、1ポット（3個体）あたりの穂新鮮重量の平均値を求めた。その結果、本化合物１を100ppmの濃度で処理したコムギは、本化合物１を処理しなかったコムギ（無処理区）に比べて、明らかに穂新鮮重量が大きかった。
【００６６】
試験例８ イネ水耕栽培による根部生長促進評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（栽培、化合物処理）
1/4倍濃度のホグランド水耕栽培液（Hoagland and Arnon, California Agricultural Experiment Station 1950 Circular 347 pp.34）に、本化合物５を10,000ppmの濃度で含むDMSO溶液を1/10,000容添加し、本化合物５を1ppm含む水耕栽培液を調製した。無処理区としては、1/4倍濃度のホグランド水耕栽培液にDMSOを1/10,000容添加した水耕栽培液を使用した。
イネ種子を、1%次亜塩素酸ナトリウム水溶液に10分間浸漬し、次いで、70%エタノール溶液に浸漬して表面消毒し、その後、蒸留水で洗浄した。消毒後の種子を、前記の試験濃度の供試化合物を含む水耕栽培液に浸し、暗黒下、温度28℃で3日間インキュベートし催芽処理を行った。
その後、各試験濃度の供試化合物を含む水耕栽培液30mlを、側面をボール紙で覆って遮光したプラスチック製のチューブ（直径：20 mm×高さ：113 mm）に分注し、スチレンボードとビニール製メッシュを用いて作製したフロートを浮かべ、水耕栽培液水面にそのフロート上に、催芽処理後の当該イネ種子を置いて、チューブ上面の照度4,000ルクス、温度26℃、湿度50％、日長16時間で３日間栽培した。
（評価方法）
栽培後の当該イネ実生を、WinRHIZOシステム（REGENT INSTRUMENTS社製）で種子根長を測定した。各試験区での、4個体又は5個体の種子根長の測定値の平均値を求めた結果、本化合物５（濃度1ppm）で処理した試験区は、無処理区と比較して、明らかに種子根が長かった。
【００６７】
試験例９ ベンサミアナタバコ水耕栽培による低温ストレス影響軽減評価試験
（供試植物）
ベンサミアナタバコ（Nicotiana benthamiana）
（栽培、化合物処理）
本化合物１、本化合物４、又は本化合物５のいずれかひとつを濃度100ppmで含むDMSO溶液を調製し、１／２倍濃度のムラシゲ・スクーグ培地（水１Ｌ当たり、ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類（和光純薬社製）を2.3 g、ミオイノシトール（シグマアルドリッチ社製）を200 mg、ニコチン酸（和光純薬社製）を2 mg、ピリドキシン塩酸塩（和光純薬社製）を2 mg、チアミン塩酸塩（和光純薬社製）を20 mg、ショ糖（和光純薬社製）を 20 g 、MES（同仁化学研究所社製）を1 g含み、pH5.8に調整された培地）に、上記の本化合物DMSO溶液を1/1,000容添加し、本化合物を濃度10ppmで含む当該培地を作製した。無処理区としては、１／２倍濃度のムラシゲ・スクーグ培地にDMSOを1/1,000容添加した培地を使用した。
ベンサミアナタバコの種子を5μLの当該培地に播種し、22℃で一晩培養した。その後、本化合物を濃度0.1ppmで含む当該培地を45μL添加して照度4,000ルクス、温度22℃、日長16時間、で7日間栽培し、ベンサミアナタバコの実生を化合物で処理した。無処理区には１／２倍濃度のムラシゲ・スクーグ培地にDMSOを1/1,000容添加した培地を45μL添加して、同様に化合物処理を行った。
（低温ストレス処理）
化合物処理したベンサミアナタバコの実生を、照度2,000ルクス、温度1.5±1.0℃、日長16時間、で7日間栽培して低温処理を行った。
（評価）
低温ストレス処理したベンサミアナタバコの実生を、照度4,000ルクス、温度22℃、日長16時間、で3日間栽培した後、緑色の葉面積を目視評価した。完全に枯死した植物体を０、低温処理を行っていない植物体を５として、緑色面積を１／５刻みで６段階で評価し、１以上のものを軽減効果ありとした。目視評価の結果、無処理区の緑色葉面積に対して、本化合物１、本化合物４、又は本化合物５で処理した試験区は明らかに緑色葉面積が増加した。
【００６８】
試験例１０ コムギ散布処理による高温ストレスによる影響軽減評価試験
（供試植物）
コムギ（品種：アポジー）
（散布処理）
コムギ種子をプラスチックポット中の培土（愛菜）に5粒ずつ播種し、温度 昼18℃/夜15℃、照度7,000ルクスの人工気象室にて28日間栽培した。ストレス試験前に１ポット当り3個体に間引きした。
0.5ミリグラムの本化合物１に、ホワイトカーボンとポリオキシエチレンアルキルエーテルサルフェートアンモニウム塩との混合物(重量割合１：１)を120ミリグラム、水を300μL添加し、湿式粉砕法で微粉砕することにより、化合物１のフロアブル製剤を得た。このフロアブル製剤を水500mlで希釈しこれに展着剤として、リノー（日本農薬株式会社製）を5,000倍希釈になるように添加して、本化合物１を1ppmの濃度で含有する散布液を得た。自動散布機を用いて散布液の十分量を前記コムギ実生に散布した。また、本化合物１を含まないフロアブル製剤を散布処理し、無処理区とした。
（高温ストレス処理）
播種後28日目の当該供試植物を、人工気象室内で、温度 昼36℃/夜32℃、湿度 昼50％/夜60％、照度 7,000ルクス、日長１２時間の条件にて7日間栽培した。
（評価）
高温ストレス処理後に、人工気象室内で、温度 昼18℃/夜15℃、照度7,000ルクスで栽培した。高温ストレス処理90日目に、７ポットないしは８ポットの供試植物の穂の種子粒数および種子重量を測定し、一穂あたりの種子粒数および種子重量の平均値を求めた。その結果、本化合物１で処理したコムギは、本化合物１を処理しなかったコムギ（無処理区）に比べて、明らかに種子粒数および種子重量が大きかった。
【００６９】
試験例１１ イネ種子処理による乾燥ストレス影響軽減評価試験
（供試植物）
イネ（品種：日本晴）
（種子処理）
5% (V/V) color coat red (Becker Underwood, Inc.)、5% (V/V) CF-Clear (Becker Underwood, Inc.)、1% Maxim XL (Syngenta社製)を含むブランクスラリー溶液を調製した。イネ種子100キログラム当り100グラムとなるように本化合物１をそれぞれブランクスラリー溶液に溶解しスラリー溶液とした。50ml遠沈管(AGCテクノグラス社製)に、イネ種子10グラム当り0.3mlのスラリー溶液を入れ、スラリー溶液が乾くまで攪拌し、種子をコーティングした。又、ブランクスラリー溶液を用いてコーティングした種子を無処理区用種子とした。
（栽培）
４０６穴プラグトレーの穴にろ紙を載せ、上記のように種子処理したイネ種子をろ紙上に播種して、１／２倍濃度の木村B水耕栽培液（Plant Science 119:39-47 (1996)参照）を添加し、温度 昼28℃／夜23℃、湿度60%、照度8500ルクス、日長１２時間の条件で、１７日間栽培した。
（乾燥ストレス処理）
生育したイネ実生を5株ずつ空の35ml平底テストチューブ（アシスト/Sarstedt製）に入れ、ふたをせずに、温度 昼28℃／夜23℃、湿度：60%、照度8,500ルクス、日長１２時間で、2日間静置した。
（評価）
乾燥ストレス処理後の植物をホグランド水耕栽培液（Hoagland and Arnon, California Agricultural Experiment Station 1950 Circular 347 pp.34参照）100mlが入った遠沈管（AGCテクノグラス）に入れ、温度 昼28℃／夜23℃、湿度60%、照度8,500ルクス、日長１２時間で、14日間栽培した。
14日後、各試験区の供試植物５個体をまとめて地上部新鮮重量を測定し、各試験区の３反復の平均値を求めた。その結果、本化合物１を、100グラム/100キログラム種子で処理した区において、無処理区と比べて明らかに地上部新鮮重量が大きかった。
【産業上の利用可能性】
【００７０】
本発明方法を用いることによって、効果的に植物の生長を促進することが可能となる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物を植物に処理することを特徴とする植物の生長促進方法。
【請求項２】
式（１）で示される化合物が、下記の化合物群Ａから選ばれる化合物である請求項１に記載の方法。
＜化合物群Ａ＞
（１）５-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（２）６-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（３）４-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（４）７-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
【請求項３】
植物が、非生物的ストレスに暴露された又は暴露されるであろう植物である請求項１又は請求項２に記載の植物の生長促進方法。
【請求項４】
植物への処理が、散布処理、土壌処理、種子処理又は水耕処理である請求項１から請求項３のいずれか一に記載の方法。
【請求項５】
植物への処理が、種子処理である請求項１から請求項３のいずれか一に記載の方法。
【請求項６】
植物がイネ、トウモロコシ、又はコムギである請求項１から請求項５のいずれか一に記載の方法。
【請求項７】
植物が遺伝子組換え植物である請求項１から請求項６のいずれか一に記載の方法。
【請求項８】
非生物的ストレスが高温ストレスである請求項３から請求項７のいずれか一に記載の方法。
【請求項９】
非生物的ストレスが低温ストレスである請求項３から請求項７のいずれか一に記載の方法。
【請求項１０】
非生物的ストレスが乾燥ストレスである請求項３から請求項７のいずれか一に記載の方法。
【請求項１１】
植物の生長を促進するための、下記式（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物の使用。
【請求項１２】
下記式（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物及び不活性成分を含有することを特徴とする植物生長促進組成物。
【請求項１】
下記式（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物を植物に処理することを特徴とする植物の生長促進方法。
【請求項２】
式（１）で示される化合物が、下記の化合物群Ａから選ばれる化合物である請求項１に記載の方法。
＜化合物群Ａ＞
（１）５-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（２）６-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（３）４-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
（４）７-（トリフルオロメチル）ベンゾ[ｂ]チオフェン−２−カルボン酸メチル
【請求項３】
植物が、非生物的ストレスに暴露された又は暴露されるであろう植物である請求項１又は請求項２に記載の植物の生長促進方法。
【請求項４】
植物への処理が、散布処理、土壌処理、種子処理又は水耕処理である請求項１から請求項３のいずれか一に記載の方法。
【請求項５】
植物への処理が、種子処理である請求項１から請求項３のいずれか一に記載の方法。
【請求項６】
植物がイネ、トウモロコシ、又はコムギである請求項１から請求項５のいずれか一に記載の方法。
【請求項７】
植物が遺伝子組換え植物である請求項１から請求項６のいずれか一に記載の方法。
【請求項８】
非生物的ストレスが高温ストレスである請求項３から請求項７のいずれか一に記載の方法。
【請求項９】
非生物的ストレスが低温ストレスである請求項３から請求項７のいずれか一に記載の方法。
【請求項１０】
非生物的ストレスが乾燥ストレスである請求項３から請求項７のいずれか一に記載の方法。
【請求項１１】
植物の生長を促進するための、下記式（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物の使用。
【請求項１２】
下記式（１）
［式中、Ｒ１、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4のいずれか一がトリフルオロメチル基を、その他は水素原子を表し、Ｒ5は、メチル基又はエチル基を表す。］
で示される化合物及び不活性成分を含有することを特徴とする植物生長促進組成物。
【公開番号】特開２０１２−２５０９７８（Ｐ２０１２−２５０９７８Ａ）
【公開日】平成２４年１２月２０日（２０１２．１２．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−１０６４７４（Ｐ２０１２−１０６４７４）
【出願日】平成２４年５月８日（２０１２．５．８）
【出願人】（０００００２０９３）住友化学株式会社 (8,981)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年１２月２０日（２０１２．１２．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２４年５月８日（２０１２．５．８）
【出願人】（０００００２０９３）住友化学株式会社 (8,981)
【Ｆターム（参考）】
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