植物性美白剤の製造方法、植物性美白剤および美白用皮膚外用剤
【課題】優れた美白作用を有し、日焼け後の色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の淡色化、美白に優れた効果を有する美白剤の製造方法を提供する。
【解決手段】Thuja属植物、Rubes属植物、Vaccinium属植物、Actinidia属植物およびPerilla属植物の中から選ばれる一種または二種以上の植物の種子を抽出して植物抽出物とし、次いで該植物抽出物にアルカリ処理を施すか、または特定の種子の粉砕物を温度 １０〜３５℃、相対湿度 ２０〜９０％で１週間以上熟成した後に抽出を行う。
【解決手段】Thuja属植物、Rubes属植物、Vaccinium属植物、Actinidia属植物およびPerilla属植物の中から選ばれる一種または二種以上の植物の種子を抽出して植物抽出物とし、次いで該植物抽出物にアルカリ処理を施すか、または特定の種子の粉砕物を温度 １０〜３５℃、相対湿度 ２０〜９０％で１週間以上熟成した後に抽出を行う。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は植物性美白剤、植物性美白剤の製造方法および美白用皮膚外用剤に関し、さらに詳しくは日焼け後の色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の予防および改善に有効で、安全かつ皮膚の美白に優れた効果を有する植物由来の美白剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚のしみなどの発生機序については一部不明な点もあるが、一般には、ホルモンの異常や日光からの紫外線の刺激が原因となってメラニン色素が形成され、これが皮膚内に異常沈着するものと考えられている。皮膚の着色の原因となるこのメラニン色素は、表皮と真皮との間にあるメラニン細胞（メラノサイト）内のメラニン生成顆粒（メラノソーム）において生産され、生成したメラニンは、浸透作用により隣接細胞へ拡散する。
【０００３】
このメラノサイト内における生化学反応は、次のようなものと推定されている。すなわち、必須アミノ酸であるチロシンが酵素チロシナーゼの作用によりドーパキノンとなり、これが酵素的または非酵素的酸化作用により赤色色素および無色色素を経て黒色のメラニンへ変化する過程がメラニン色素の生成過程である。
【０００４】
上記のメラニン色素の生成を抑制する美白剤及び美白用皮膚外用剤については、従来から植物由来の抽出物が、その安全性や皮膚への刺激の穏やかさを期待して種々開発されている（例えば特許文献１〜４参照）。
一方、植物資源の多様性やそれらの入手性にも限りがあることから、植物が有する能力を十分に引き出すことができるような製法面からの工夫も非常に重要といえる。このような観点から、従来用いられてきた方法と異なる方法で植物由来成分を得る技術、例えば超臨界炭酸ガス抽出法を用いた試み（特許文献５参照）もなされつつある。
【０００５】
【特許文献１】特開平８−３１０９３９号公報
【特許文献２】特開平７−８９８４３号公報
【特許文献３】特開平９−３０９５４号公報
【特許文献４】特開２００３−７３２２４号公報
【特許文献５】特開２００５−１７９２２６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このように、植物由来の美白剤については、新しい植物で、あるいは新しい製法で新たな美白効果を奏する植物を見出すことが求められている。
以上のような背景から、本発明者らは製法の工夫により、安全かつ効果の高い新規な植物由来の美白剤ならびにその製造方法、および美白用皮膚外用剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者等は、このような現状に鑑み鋭意研究を重ねた結果、特定の植物の種子を用いて特定の方法で得られた植物種子抽出物が、高い安全性と顕著な美白効果を有していることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
本発明は、Thuja属植物、Rubes属植物、Vaccinium属植物、Actinidia属植物およびPerilla属植物の中から選ばれる一種または二種以上の植物の種子を抽出して植物抽出物とし、次いで該植物抽出物にアルカリ処理を施して得られることを特徴とする植物性美白剤の製造方法である。
【０００９】
ここで、前記アルカリ処理は、前記抽出物の溶媒の一部または全部を留去した後、溶液濃度が１〜１０Ｎとなるようにアルカリ水溶液を添加、混合し、次いで中和することによりなされるものであることが好ましい。
【００１０】
また本発明は、Thuja属植物、Rubes属植物、Vaccinium属植物、Actinidia属植物およびPerilla属植物の中から選ばれる一種または二種以上の植物の種子を粉砕し、温度 １０〜３５℃、相対湿度 ２０〜９０％で１週間以上熟成した後に抽出してなることを特徴とする植物性美白剤の製造方法である。
【００１１】
前記植物としては、 Thuja orientalis、Rubes idaeus、Vaccinium oxycoccos、Vaccinium corymbosum、Vaccinium vitis-idaea、Perilla frutescens および Actinidia chinensis から選ばれたものであることが好ましい。
【００１２】
また本発明によれば、上記のいずれかの方法で製造された植物性美白剤が提供される。
さらに本発明によれば、上記植物性美白剤を配合してなる美白用皮膚外用剤が提供される。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の植物性美白剤の製造方法によれば、安全で優れた美白作用を有し、日焼け後の色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の淡色化、美白に優れた効果を有する植物性美白剤を製造することができる。また、本発明の植物性美白剤の製造方法のなかでも請求項１に係る方法では美白効果が非常に優れたものが得られる。また請求項３に係る方法では、比較的容易な工程により、優れた美白効果を有する美白剤が得られる。
本発明の植物性美白剤は、安全で優れた美白作用を有し、日焼け後の色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の淡色化、美白に優れた効果を有するものである。
また本発明の美白用皮膚外用剤は、本発明の植物性美白剤を配合したことにより、優れた美白効果やくすみ改善効果を有するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下に、本発明の最良の実施の形態について説明する。
本発明において用いられる植物としては、前述のようにバラ科Rubus属（スグリ属）、ツツジ科Vaccinium属（スノキ属）、マタタビ科Actinidia属（マタタビ属）、ヒノキ科Thuja属（クロベ属）、シソ科Perilla属（シソ属）の植物を挙げることができる。
【００１５】
このうち、バラ科Rubes属植物としてはブラックベリー（Rubus fruticosus）、ラズベリー（Rubus idaeus）およびこれらの交配種などが利用でき、食用として輸入されている北米、北欧産のもの等を利用できる。
ツツジ科Vaccinium属植物としては、クランベリー（Vaccinium oxycoccos）、リンゴンベリー（Vaccinium vitis-idaea）、ブルーベリー（Vaccinium corymbosum および Vaccinium ashei）、ハックルベリー（Vaccinium ovatum）などを挙げることができ、食用として輸入されている北米、北欧産のもの等を利用できる。
マタタビ科Actinidia属植物としては、キウイ（Actinidia chinensis または Actinidia deliciosa）を挙げることができ、食用として輸入されている、ニュージーランド産等のものを利用できる。
これらの植物の種子は果汁やジャムなどの食品を生産する際の剰余物として得ることが可能であり、上記のうち一部の植物については、種子抽出物が市販されており、このような既製品を原料として用いることもできる。
ヒノキ科Thuja属植物は常緑針葉樹でニオイヒバ（Thuja occidentalis）、コノテガシワ（Thuja orientalis）などがあり、中でも Thuja orientalis の種子は生薬の「柏子仁」（ハクシニン）として中医学で汎用されており、中国産のものを利用できる。Thuja orientalisの異名には、Biota orientalis 及びPlatycladus orientalisがある。
シソ科Perilla属植物としてはシソ（Perilla frutescens）を挙げることができ、食用として栽培されている日本産のもの等を利用できる。
【００１６】
本発明による植物性美白剤の製造方法としては、植物の種子を抽出して得られた植物抽出物にアルカリ処理を施す方法（以下、第１の方法と称する。）、および植物の種子を粉砕し、温度 １０〜３５℃、相対湿度 ２０〜９０％で１週間以上熟成した後に抽出する方法（以下、第２の方法と称する。）がある。
【００１７】
上記第１の方法および第２の方法に用いられる抽出溶媒は、通常抽出に用いられる揮発性溶媒であれば何でもよく、特にメタノール、エタノール等のアルコール類、含水アルコール類、アセトン、酢酸エチルエステル、ヘキサン、エーテル等の極性・非極性有機溶媒を単独あるいは組み合わせて用いることができるが、アセトン、酢酸エチル、ヘキサンは低価格であり、減圧濃縮が容易な点で特に好ましい。その他、超臨界炭酸ガスによる抽出を用いることもできる。これに対し、水を多量に含む抽出溶媒は、活性成分の抽出が抑制されるので好ましくない。
【００１８】
抽出にあたっては、種子の質量に対し、１〜１００倍、好ましくは１〜３０倍程度の質量の溶媒で一定期間抽出を行う。用いる種子は必要に応じて適度に粉砕することも可能であるが、ろ過時に目詰まりが問題となる場合等では未粉砕のまま用いても良い。また、少量の溶媒で繰り返し抽出することも可能であり、ソックスレーのような還流装置を用いても良い。超臨界炭酸ガスで抽出する場合は４０℃付近で２０〜４０ＭＰａの一般的な条件にて抽出できる。
【００１９】
本発明の第１の方法においては、これらの抽出物から抽出溶媒を除去した後、アルカリ処理する。アルカリ処理は溶媒除去後の抽出物に対し、０．２〜２倍容量の濃アルカリ水溶液を添加した後、充分撹拌混合し、３０分〜数日程度熟成をおこなう。混合の際の温度としては、室温〜７０℃の範囲が好ましく、３０〜６０℃の範囲がさらに好ましい。熟成時には成分親水性成分と親油性成分が分離しないように、適宜撹拌を行うことが望ましい。濃アルカリ水溶液としては、１〜１０Ｎの濃度のＮａＯＨ、ＫＯＨなどからなる水溶液が挙げられる。
【００２０】
上述のようにアルカリ処理した抽出物をさらに酸で中性付近まで中和すると油状物質が分離してくる。この油状物質はきわめて高い美白作用を奏しながらも、肌に対して高い安全性を示す。油状物質回収促進のために、アルコール、アセトン類などをアルカリ処理後に適宜加えても良く、さらにその後必要に応じて脱色、脱臭、脱塩、蒸留などの操作を加えても良い。
【００２１】
本発明の第２の方法によれば、抽出の前段階で種子を適度に粉砕あるいは圧ぺんし、そのまま室温付近で一定期間熟成する。熟成期間については、目的とする効果が得られる範囲であれば特に問わないが、熟成期間が一週間以内と短いと十分な美白効果を得ることが難しく、反対に数年にも及ぶと腐敗や酸化変臭の問題が起こり、好ましくない。また熟成中には必要に応じて、酸化防止剤添加や窒素置換等を行うことにより、変臭を抑制することも可能である。
【００２２】
このように熟成した種子より、前述した抽出溶媒・抽出法を用いて抽出を行う。抽出後は必要に応じて、溶媒除去・脱色・脱臭・蒸留等の操作を行う。このような特定の種子を粉砕して熟成した後に抽出することにより得られた抽出物は、前述のアルカリ処理した抽出物と同様にきわめて高い美白作用を奏しながらも、肌に対して高い安全性を示す。
【００２３】
本発明においては、上に示したような植物の種子より第１の方法または第２の方法で調製した抽出物よりなる安全で美白効果の優れた植物性美白剤を提供することができ、さらには本美白剤を配合した美白用皮膚外用剤を提供できる。
【００２４】
本発明の美白用皮膚外用剤における植物抽出物の配合量は、外用剤全量中、乾燥物として０．００５〜３．０質量％、好ましくは０．０１〜１．０質量％である。０．００５質量％未満であると、本発明でいう効果が十分に発揮されず、３．０質量％を超えると製剤化が難しいので好ましくない。また、１．０質量％以上配合すると、長期保存した際に変臭などの問題が起こりやすい。
【００２５】
また、本発明の美白用皮膚外用剤には、上記必須成分以外に、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば、グリセリン、１，３−ブタンジオール、ジプロピレングリコールなどの保湿剤、ＢＨＴ（ブチルヒドロキシトルエン）、ＢＨＡ（ブチルヒドロキシアニソール）、ビタミンＥ及びその誘導体などの酸化防止剤、直鎖状シリコーン、環状シリコーン、エステル油、エーテル油、炭化水素、脂肪酸などの油性成分、紫外線吸収剤、界面活性剤、増粘剤、アルコール類、粉末成分、色剤、水性成分、水、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００２６】
その他、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等の金属封鎖剤、カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネキサム酸およびその誘導体、甘草抽出物、グラブリジン、火棘の果実の熱水抽出物、各種生薬、酢酸トコフェロール、グリチルリチン酸およびその誘導体またはその塩等の薬剤、ビタミンＣ、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、コウジ酸等の他の美白剤、グルコース、フルクトース、マンノース、ショ糖、トレハロース等の糖類なども適宜配合することができる。
【００２７】
本発明の美白剤は種々の剤型、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用剤等、従来から皮膚外用剤に用いられるものであればいずれに配合して用いても良い。
【実施例】
【００２８】
本発明について以下に実施例を挙げてさらに詳述するが、本発明はこれによりなんら限定されるものではない。配合量は特記しない限り質量％で示す。
最初に、本発明の植物抽出物のメラニン生成抑制効果に関する試験方法とその結果について説明する。
【００２９】
１．試料の調製
（１）種子抽出物のアルカリ処理物の調製
各種植物の種子（未粉砕、必要に応じて外殻を除去）をそれぞれ５倍量（ｖ／ｗ）のアセトンまたは酢酸エチル（酢エチ）またはヘキサンに浸漬し、室温にて１０日間抽出を行った。ナイロンメッシュ（１００メッシュ）であらかじめ残渣を除き、さらにろ紙にてろ過した。ロータリーエバポレータでろ液から溶媒を除去した後、撹拌羽根で撹拌しながら０．５〜１５ＮのＮａＯＨをＮａＯＨとして１００〜３００ ｇ/ｌ 抽出物の範囲内で添加した（温度５０℃）。２００ ｒｐｍで撹拌しながら、５時間処理を行った。その後、５Ｎ Ｈ2ＳＯ4を徐々に添加し、撹拌しながらｐＨを１付近まで下げ、分離してくる油状物質を回収した。回収した油状物質に等容量の水を加えて水洗し、不純物・塩・過剰の酸を除去した。油状物質を減圧乾燥し、アルカリ処理物とした。比較対照としては、アルカリ処理前の抽出物を用いた。Thuja orientalis については、超臨界ＣＯ2（２０ＭＰａ、４０℃）による抽出も実施し、同様なアルカリ処理を施した。
【００３０】
（２）粉砕熟成種子抽出物の調製
各種植物の種子をブレンダーにて軽く粉砕した後、プラスチックボトルに入れて密封し、１〜１０週間室温にて保存した。次に粉砕物の重量に対して１０倍量（ｖ／ｗ）のアセトン、酢酸エチル（酢エチ）またはヘキサンを加えて、一晩抽出した。ろ過により残渣を除去した後、ろ液を濃縮し、粉砕熟成種子抽出物とした。比較対照として、未粉砕のまま同じ条件で保存した種子より抽出した抽出物を用いた。
【００３１】
２．メラニン生成抑制効果試験方法およびその結果
得られた抽出物を試験試料として、次の方法でメラニン生成抑制効果を測定・評価した。
【００３２】
（１）細胞培養法
マウス由来のＢ１６メラノーマ培養細胞を使用した。５％ウシ胎児血清（Thermo Trace製）を含むＭＥＭ培地中でＣＯ２インキュベーター（９５％空気、５％二酸化炭素）内、３７℃の条件下で培養した。試料溶液を２．５(ｗ/ｖ) ％となるようにエタノールに溶解し、試験試料として用いた。培養２４時間後に試験試料を終濃度（抽出乾燥物換算濃度）で２５ｍｇ/ｌとなるように添加し、さらに３日間培養を続け、以下の方法でメラニン生成量の測定を行った。
また、従来からメラニン生成抑制効果があることが知られているアルブチンについても上記と同様の試験を行った。
【００３３】
（２）測定
２０×１０4個 のＢ１６メラノーマ細胞を、６０ｍｍプラスティックシャーレに植え込み、２４時間前培養した。その後、新鮮な培地に置換し試料を培養液中に５０ｕｌ/Well添加した。細胞は３日間培養したのち、トリプシン処理によって回収した。回収した細胞は１Ｎ ＮａＯＨ、１０％ＤＭＳＯ液に溶解し、４２０ｎｍの吸光度を測定し、メラニン量とした。種々の採取法で得たThuja orientalis の種子、すなわち柏子仁を用いた時のメラニン量の測定結果を図１に示す。図中、（1-1）〜（1-10）は、それぞれ次のものを試料として用いた例である。
【００３４】
（1-1）：０．１％（終濃度）エタノールのみ（薬剤無添加区）
（1-2）：アルブチン（終濃度２５ｍｇ/l、以下、濃度は同様）
（1-3）：柏子仁（未粉砕物）のアセトン抽出物で、アルカリ未処理のもの
（1-4）：前記試料の調製の欄における（１）の方法で得られた柏子仁アセトン抽出物
（1-5）：前記試料の調製の欄における（２）の方法で１週間熟成後に得られた柏子仁アセトン抽出物
（1-6）：前記試料の調製の欄における（２）の方法で４週間熟成後に得られた柏子仁アセトン抽出物
（1-7）：前記試料の調製の欄における（２）の方法で１０週間熟成後に得られた柏子仁アセトン抽出物
（1-8）：柏子仁種子を粉砕しない他は前記試料の調製の欄における（２）の方法で１０週間熟成後に得られた柏子仁アセトン抽出物
（1-9）：柏子仁を圧ぺんした後、直ちに超臨界ＣＯ2（３０ＭＰａ、４０℃）による抽出を行った柏子仁抽出物
（1-11）：柏子仁を圧ぺんした後、直ちに超臨界ＣＯ2（３０ＭＰａ、４０℃）による抽出を行った後、アルカリ処理した柏子仁抽出物
なお、上記におけるアルカリ濃度（ＮａＯＨ濃度）はいずれも５Ｎで行った。
【００３５】
図１より本発明の実施例の一つである柏子仁抽出物（アルカリ処理物）（1-4）はアルカリ未処理物（1-3）に比べ、著しくメラニン抑制効果が高まっていることが分かる。また、本発明の別の実施例である柏子仁粉砕・熟成抽出物（（1-5）〜（1-7））は未粉砕で同期間保存したもの（1-8）に比べ、著しくメラニン抑制効果が高まっていた。種子の粉砕・熟成によるメラニン抑制効果の増大は保存期間が一週間と比較的短い場合（1-5）でも有意に上昇しており、陽性対照であるアルブチン（1-2）以上の優れたメラニン抑制作用を有し、美白剤として有用であることが分かる。なお、同時にＭＴＴ法により細胞生存率を評価した結果、本発明の種子抽出物では細胞生存率の低下は認められなかったことから、図１におけるメラニン産生量の抑制は細胞傷害によるものではないといえる。
【００３６】
図２は、柏子仁抽出物をアルカリ処理した時のアルカリ濃度とメラニン抑制効果との関係を示す図である。試験方法は、次の通りである。
柏子仁抽出物１ｋｇに対し、ＮａＯＨを１７０ｇの割合で、種々のアルカリ強度の水溶液として添加した。２００ｒｐｍで激しく振とうしながら、５０℃水浴上で３時間反応させた後、硫酸を加えて酸性にした際に分離してきた油状物質を回収し、試料として用いてメラニン生成抑制効果試験を行った。
図２から、アルカリ処理の際のアルカリ強度は１〜１０Ｎの間にあることが望ましいことがわかる。
【００３７】
図３に本発明の別の実施例であるVaccinium oxycoccos、Vaccinium corymbosum、Vaccinium vitis-idaea（以上、Vaccinium属植物）、Rubes idaeus（Rubes属植物）、Actinidia chinensis（Actinidia属植物）、Perilla frutescens（Perilla属植物）の種子抽出物（アルカリ処理物）および粉砕・熟成処理を施した種子より抽出した抽出物のメラニン抑制効果評価結果を示す。比較例としては未粉砕種子より抽出した抽出物（アルカリ未処理物）を用いた。図中、Ａは未粉砕種子抽出物（アルカリ未処理、比較例）、Ｂは未粉砕種子抽出物（アルカリ処理、実施例）、Ｃは粉砕・熟成種子抽出物（室温、１０週間熟成、実施例）である。また本発明の範囲外である植物を用いた比較例として、油ヤシ（Elaeis guineensis）種子アセトン抽出物の例を図中に示した（アルカリ未処理、アルカリ処理、粉砕・熟成種子抽出物（室温、１０週間熟成））。
【００３８】
図３に示した何れの実施例においても、顕著なメラニン抑制効果が認められた。これに対し粉砕・熟成処理やアルカリ処理を行わなかった抽出物（Ａ：比較例）および油ヤシ（Elaeis guineensis）種子アセトン抽出物ではいずれもメラニン抑制効果はきわめて低かった。
【００３９】
以下に、本発明の美白剤の配合例を挙げる。このように、本発明の美白剤は種々の皮膚外用剤処方に広く配合できる。
【００４０】
処方例１ クリーム
ステアリン酸 ５．０ 質量％
ステアリルアルコール ４．０
イソプロピルミリステート １８．０
グリセリンモノステアリン酸エステル ３．０
プロピレングリコール １０．０
Thuja orientalis アセトン抽出物（アルカリ処理品） ０．２
Rubes idaeus アセトン抽出物（アルカリ処理品） ０．１
Vaccinium vitis-idaea アセトン抽出物（アルカリ処理品） ０．１
天然型ビタミンＥ ０．０５
苛性カリ ０．２
亜硫酸水素ナトリウム ０．０１
防腐剤 適量
香料 適量
イオン交換水 残余
【００４１】
処方例２ クリーム
ステアリン酸 ２．０ 質量％
ステアリルアルコール ７．０
水添ラノリン ２．０
スクワラン ５．０
２−オクチルドデシルアルコール ６．０
ポリオキシエチレン（２５モル）セチルアルコールエーテル ３．０
グリセリンモノステアリン酸エステル ２．０
プロピレングリコール ５．０
Actinidia chinensis アセトン抽出物（アルカリ処理品） ０．５
亜硫酸水素ナトリウム ０．０３
エチルパラベン ０．３
香料 適量
イオン交換水 残余
【００４２】
処方例３ クリーム
固形パラフィン ５．０ 質量％
ミツロウ １０．０
ワセリン １５．０
流動パラフィン ４１．０
グリセリンモノステアリン酸エステル ２．０
ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノラウリン酸エステル ２．０
石けん粉末 ０．１
硼砂 ０．２
Thuja orientalis 粉砕・熟成種子ヘキサン抽出物 ０．２
亜硫酸水素ナトリウム ０．０３
エチルパラベン ０．３
香料 適量
イオン交換水 残余
【００４３】
処方例４ 乳液
ステアリン酸 ２．５ 質量％
セチルアルコール １．５
ワセリン ５．０
流動パラフィン １０．０
ポリオキシエチレン（１０モル）モノオレイン酸エステル ２．０
ポリエチレングリコール１５００ ３．０
トリエタノールアミン １．０
カルボキシビニルポリマー ０．０５
Perilla frutescens ヘキサン抽出物（アルカリ処理品） １．０
亜硫酸水素ナトリウム ０．０１
エチルパラベン ０．３
香料 適量
イオン交換水 残余
【００４４】
処方例５ 乳液
マイクロクリスタリンワックス １．０ 質量％
密ロウ ２．０
ラノリン ２０．０
流動パラフィン １０．０
スクワラン ５．０
ソルビタンセスキオレイン酸エステル ４．０
ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノオレイン酸エステル １．０
プロピレングリコール ７．０
Vaccinium oxycoccos 粉砕熟成種子アセトン抽出物 ０．５
亜硫酸水素ナトリウム ０．０１
エチルパラベン ０．３
香料 適量
イオン交換水 残余
【００４５】
処方例６ パック
ジプロピレングリコール ５．０ 質量％
ポリオキシエチレン（６０モル）硬化ヒマシ油 ５．０
Thuja orientalis 種子抽出物 （アルカリ処理品） ０．５
オリーブ油 ５．０
酢酸トコフェロール ０．２
エチルパラベン ０．２
香料 ０．２
亜硫酸水素ナトリウム ０．０３
ポリビニルアルコール １３．０
（ケン化度９０、重合度２，０００）
エタノール ７．０
精製水 残余
【００４６】
処方例７ 固形ファンデーション
タルク ４３．１ 質量％
カオリン １５．０
セリサイト １０．０
亜鉛華 ７．０
二酸化チタン ３．８
黄色酸化鉄 ２．９
黒色酸化鉄 ０．２
スクワラン ８．０
イソステアリン酸 ４．０
モノオレイン酸ＰＯＥソルビタン ３．０
オクタン酸イソセチル ２．０
Thuja orientalis 粉砕・熟成種子抽出物 ０．２
Vaccinium oxycoccos 種子アセトン抽出物 （アルカリ処理品） ０．２
防腐剤 適量
香料 適量
【００４７】
処方例８ 乳化型ファンデーション（クリームタイプ）
（処方）
（粉体部）
二酸化チタン １０．３ 質量％
セリサイト ５．４
カオリン ３．０
黄色酸化鉄 ０．８
ベンガラ ０．３
黒色酸化鉄 ０．２
（油相）
デカメチルシクロペンタシロキサン １１．５
流動パラフィン ４．５
ポリオキシエチレン変性ジメチルポリシロキサン ４．０
（水相）
精製水 ５０．０
１，３−ブチレングルコール ４．５
Vaccinium corymbosum 種子抽出物 （アルカリ処理品） ０．２
ソルビタンセスキオレイン酸エステル ３．０
防腐剤 適量
香料 適量
【００４８】
処方例９ 乳液
ジメチルポリシロキサン ３ 質量％
デカメチルシクロペンタシロキサン ４
エタノール ５
グリセリン ６
１，３−ブチレングリコール ５
ポリオキシエチレンメチルグルコシド ３
ヒマワリ油 １
スクワラン ２
水酸化カリウム ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０５
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン ０．１
グリチルリチン酸ジカリウム ０．０５
ビワ葉エキス ０．１
Ｌ−グルタミン酸ナトリウム ０．０５
ウイキョウエキス ０．１
酵母エキス ０．１
ラベンダー油 ０．１
ジオウエキス ０．１
Vaccinium corymbosum 粉砕・熟成種子抽出物 ０．２
Vaccinium vitis-idaea 粉砕・熟成種子抽出物 ０．２
ジモルホリノピリダジノン ０．１
キサンタンガム ０．１
カルボキシビニルポリマー ０．１
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体 ０．１
（ペミュレンＴＲ−１）
ベンガラ 適量
黄酸化鉄 適量
パラベン 適量
精製水 残余
【００４９】
処方例１０ 乳液
ジメチルポリシロキサン ２ 質量％
デカメチルシクロペンタシロキサン ２５
ドデカメチルシクロヘキサシロキサン １０
ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体 １．５
トリメチルシロキシケイ酸 １
１，３−ブチレングリコール ５
スクワラン ０．５
タルク ５
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１
Actinidia chinensis 粉砕・熟成種子抽出物 ０．１
酢酸トコフェロール ０．１
エデト酸三ナトリウム ０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン １
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル ５
ジパラメトキシ桂皮酸モノ−２−エチルヘキサン酸グリセリル １
シリコーン被覆微粒子酸化チタン（４０ｎｍ） ４
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト ０．５
球状ポリエチレン末 ３
フェノキシエタノール 適量
精製水 残余
香料 適量
【００５０】
処方例１１ 乳液
流動パラフィン ７ 質量％
ワセリン ３
デカメチルシクロペンタシロキサン ２
ベヘニルアルコール １
グリセリン ５
ジプロピレングリコール ７
ポリエチレングリコール１５００ ２
ホホバ油 １
イソステアリン酸 ０．５
ステアリン酸 ０．５
ベヘニン酸 ０．５
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット ３
２−エチルヘキサン酸セチル ３
モノステアリン酸グリセリン １
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン １
水酸化カリウム ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０５
グリチルレチン酸ステアリル ０．０５
Ｌ−アルギニン ０．１
ローヤルゼリーエキス ０．１
酵母エキス ０．１
Rubus idaeus 粉砕・熟成種子抽出物 ０．１
Perilla frutescens 粉砕・熟成種子抽出物 ０．１
酢酸トコフェロール ０．１
アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム ０．１
エデト酸三ナトリウム ０．０５
4-t-ブチル-4’-メトキシジベンゾイルメタン ０．１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル ０．１
カルボキシビニルポリマー ０．１５
パラベン 適量
精製水 残余
香料 適量
【００５１】
処方例１２ クリーム
α−オレフィンオリゴマー １０ 質量％
ワセリン １
マイクロクリスタリンワックス ３
デカメチルシクロペンタシロキサン ５
グリセリン １０
ジプロピレングリコール ２
１，３−ブチレングリコール ２
エリスリトール ２
スクワラン １
グリセリン脂肪酸エステルエイコサンニ酸縮合物 ０．１
イソステアリン酸 １
２−エチルヘキサン酸セチル ５
塩化ナトリウム ０．５
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０５
グリチルレチン酸ステアリル ０．０５
コウボエキス ０．１
リン酸Ｌ−アスコルビルマグネシウム ２
酢酸トコフェロール ０．５
チオタウリン ０．１
ＤＬ−ピロリドンカルボン酸ナトリウム １
ウコンエキス ０．１
Vaccinium corymbosum 粉砕・熟成種子抽出物 ０．３
エデト酸３ナトリウム ０．１
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト ２
カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１
パラベン 適量
精製水 残余
香料 適量
【００５２】
処方例１３ クリーム
流動パラフィン ８ 質量％
ワセリン ３
ジメチルポリシロキサン ２
ステアリルアルコール ３
ベヘニルアルコール ２
グリセリン ５
ジプロピレングリコール ４
トレハロース １
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット ４
モノイソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル ２
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン １
親油型モノステアリン酸グリセリン ２
クエン酸 ０．０５
クエン酸ナトリウム ０．０５
水酸化カリウム ０．０１５
油溶性甘草エキス ０．１
レチノールパルミテート（１００万単位） ０．２５
酢酸トコフェロール ０．１
Rubus fruticosus 粉砕熟成種子抽出物 ０．５
パラオキシ安息香酸エステル 適量
フェノキシエタノール 適量
ジブチルヒドロキシトルエン 適量
エデト酸三ナトリウム ０．０５
4-t-ブチル-4’-メトキシジベンゾイルメタン ０．０１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル ０．１
β−カロチン ０．０１
ポリビニルアルコール ０．５
ヒドロキシエチルセルロース ０．５
カルボキシビニルポリマー ０．０５
精製水 残余
香料 適量
【００５３】
処方例１４ パック
ジプロピレングリコール ５．０ 質量％
ポリオキシエチレン（６０モル）硬化ヒマシ油 ５．０
Thuja orientalis 種子抽出物 (アルカリ処理品) ０．５
オリーブ油 ５．０
酢酸トコフェノール ０．２
エチルパラベン ０．２
香料 ０．２
亜硫酸水素ナトリウム ０．０３
ポリビニルアルコール １３．０
（ケン化度９０、重合度２０００）
エタノール ７．０
精製水 残余
【００５４】
処方例１５ 乳化型ファンデーション
ベヘニルアルコール ０．５ 質量％
ジプロピレングリコール ６
ステアリン酸 １
モノステアリン酸グリセリン １
水酸化カリウム ０．２
トリエタノールアミン ０．８
酢酸ＤＬ−α−トコフェロール ０．１
パラオキシ安息香酸エステル 適量
黄酸化鉄 １
α−オレフィンオリゴマー ３
ジメチルポリシロキサン（６ｍＰａ．ｓ） ２
ジメチルポリシロキサン（１００ｍＰａ．ｓ） ５
バチルアルコール ０．５
イソステアリン酸 １
ベヘニン酸 ０．５
２−エチルヘキサン酸セチル １０
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン １
酸化チタン ３
雲母チタン・ポリアクリル酸アルキル複合粉末 ０．５
表面処理酸化チタン（ＭＴ−０６２） １０
ポリアクリ酸アルキル被覆雲母チタン ０．５
黒酸化鉄被覆雲母チタン ０．５
無水ケイ酸 ６
パラメトキシケイ皮酸２−エチルへキシル ２
ベンガラ 適量
群青 適量
黒酸化鉄 適量
法定色素 適量
キサンタンガム ０．１
ベントナイト １
カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１
Actinidia chinensis 粉砕・熟成種子抽出物 ０．１
精製水 残余
香料 適量
【図面の簡単な説明】
【００５５】
【図１】種々の採取法で得た柏子仁抽出物を用いた時のメラニン量の測定結果を示す図である。
【図２】種々のアルカリ条件で処理を行った柏子仁抽出物のメラニン抑制効果を示す図である。
【図３】Vaccinium oxycoccos、Vaccinium vitis-idaea、Rubes idaeus、Actinidia chinensis、Perilla frutescensの種子抽出物（アルカリ処理物）および粉砕・熟成処理を施した種子より抽出した抽出物を用いた時のメラニン量を示す図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は植物性美白剤、植物性美白剤の製造方法および美白用皮膚外用剤に関し、さらに詳しくは日焼け後の色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の予防および改善に有効で、安全かつ皮膚の美白に優れた効果を有する植物由来の美白剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚のしみなどの発生機序については一部不明な点もあるが、一般には、ホルモンの異常や日光からの紫外線の刺激が原因となってメラニン色素が形成され、これが皮膚内に異常沈着するものと考えられている。皮膚の着色の原因となるこのメラニン色素は、表皮と真皮との間にあるメラニン細胞（メラノサイト）内のメラニン生成顆粒（メラノソーム）において生産され、生成したメラニンは、浸透作用により隣接細胞へ拡散する。
【０００３】
このメラノサイト内における生化学反応は、次のようなものと推定されている。すなわち、必須アミノ酸であるチロシンが酵素チロシナーゼの作用によりドーパキノンとなり、これが酵素的または非酵素的酸化作用により赤色色素および無色色素を経て黒色のメラニンへ変化する過程がメラニン色素の生成過程である。
【０００４】
上記のメラニン色素の生成を抑制する美白剤及び美白用皮膚外用剤については、従来から植物由来の抽出物が、その安全性や皮膚への刺激の穏やかさを期待して種々開発されている（例えば特許文献１〜４参照）。
一方、植物資源の多様性やそれらの入手性にも限りがあることから、植物が有する能力を十分に引き出すことができるような製法面からの工夫も非常に重要といえる。このような観点から、従来用いられてきた方法と異なる方法で植物由来成分を得る技術、例えば超臨界炭酸ガス抽出法を用いた試み（特許文献５参照）もなされつつある。
【０００５】
【特許文献１】特開平８−３１０９３９号公報
【特許文献２】特開平７−８９８４３号公報
【特許文献３】特開平９−３０９５４号公報
【特許文献４】特開２００３−７３２２４号公報
【特許文献５】特開２００５−１７９２２６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
このように、植物由来の美白剤については、新しい植物で、あるいは新しい製法で新たな美白効果を奏する植物を見出すことが求められている。
以上のような背景から、本発明者らは製法の工夫により、安全かつ効果の高い新規な植物由来の美白剤ならびにその製造方法、および美白用皮膚外用剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者等は、このような現状に鑑み鋭意研究を重ねた結果、特定の植物の種子を用いて特定の方法で得られた植物種子抽出物が、高い安全性と顕著な美白効果を有していることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】
本発明は、Thuja属植物、Rubes属植物、Vaccinium属植物、Actinidia属植物およびPerilla属植物の中から選ばれる一種または二種以上の植物の種子を抽出して植物抽出物とし、次いで該植物抽出物にアルカリ処理を施して得られることを特徴とする植物性美白剤の製造方法である。
【０００９】
ここで、前記アルカリ処理は、前記抽出物の溶媒の一部または全部を留去した後、溶液濃度が１〜１０Ｎとなるようにアルカリ水溶液を添加、混合し、次いで中和することによりなされるものであることが好ましい。
【００１０】
また本発明は、Thuja属植物、Rubes属植物、Vaccinium属植物、Actinidia属植物およびPerilla属植物の中から選ばれる一種または二種以上の植物の種子を粉砕し、温度 １０〜３５℃、相対湿度 ２０〜９０％で１週間以上熟成した後に抽出してなることを特徴とする植物性美白剤の製造方法である。
【００１１】
前記植物としては、 Thuja orientalis、Rubes idaeus、Vaccinium oxycoccos、Vaccinium corymbosum、Vaccinium vitis-idaea、Perilla frutescens および Actinidia chinensis から選ばれたものであることが好ましい。
【００１２】
また本発明によれば、上記のいずれかの方法で製造された植物性美白剤が提供される。
さらに本発明によれば、上記植物性美白剤を配合してなる美白用皮膚外用剤が提供される。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の植物性美白剤の製造方法によれば、安全で優れた美白作用を有し、日焼け後の色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の淡色化、美白に優れた効果を有する植物性美白剤を製造することができる。また、本発明の植物性美白剤の製造方法のなかでも請求項１に係る方法では美白効果が非常に優れたものが得られる。また請求項３に係る方法では、比較的容易な工程により、優れた美白効果を有する美白剤が得られる。
本発明の植物性美白剤は、安全で優れた美白作用を有し、日焼け後の色素沈着・しみ・そばかす・肝斑等の淡色化、美白に優れた効果を有するものである。
また本発明の美白用皮膚外用剤は、本発明の植物性美白剤を配合したことにより、優れた美白効果やくすみ改善効果を有するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下に、本発明の最良の実施の形態について説明する。
本発明において用いられる植物としては、前述のようにバラ科Rubus属（スグリ属）、ツツジ科Vaccinium属（スノキ属）、マタタビ科Actinidia属（マタタビ属）、ヒノキ科Thuja属（クロベ属）、シソ科Perilla属（シソ属）の植物を挙げることができる。
【００１５】
このうち、バラ科Rubes属植物としてはブラックベリー（Rubus fruticosus）、ラズベリー（Rubus idaeus）およびこれらの交配種などが利用でき、食用として輸入されている北米、北欧産のもの等を利用できる。
ツツジ科Vaccinium属植物としては、クランベリー（Vaccinium oxycoccos）、リンゴンベリー（Vaccinium vitis-idaea）、ブルーベリー（Vaccinium corymbosum および Vaccinium ashei）、ハックルベリー（Vaccinium ovatum）などを挙げることができ、食用として輸入されている北米、北欧産のもの等を利用できる。
マタタビ科Actinidia属植物としては、キウイ（Actinidia chinensis または Actinidia deliciosa）を挙げることができ、食用として輸入されている、ニュージーランド産等のものを利用できる。
これらの植物の種子は果汁やジャムなどの食品を生産する際の剰余物として得ることが可能であり、上記のうち一部の植物については、種子抽出物が市販されており、このような既製品を原料として用いることもできる。
ヒノキ科Thuja属植物は常緑針葉樹でニオイヒバ（Thuja occidentalis）、コノテガシワ（Thuja orientalis）などがあり、中でも Thuja orientalis の種子は生薬の「柏子仁」（ハクシニン）として中医学で汎用されており、中国産のものを利用できる。Thuja orientalisの異名には、Biota orientalis 及びPlatycladus orientalisがある。
シソ科Perilla属植物としてはシソ（Perilla frutescens）を挙げることができ、食用として栽培されている日本産のもの等を利用できる。
【００１６】
本発明による植物性美白剤の製造方法としては、植物の種子を抽出して得られた植物抽出物にアルカリ処理を施す方法（以下、第１の方法と称する。）、および植物の種子を粉砕し、温度 １０〜３５℃、相対湿度 ２０〜９０％で１週間以上熟成した後に抽出する方法（以下、第２の方法と称する。）がある。
【００１７】
上記第１の方法および第２の方法に用いられる抽出溶媒は、通常抽出に用いられる揮発性溶媒であれば何でもよく、特にメタノール、エタノール等のアルコール類、含水アルコール類、アセトン、酢酸エチルエステル、ヘキサン、エーテル等の極性・非極性有機溶媒を単独あるいは組み合わせて用いることができるが、アセトン、酢酸エチル、ヘキサンは低価格であり、減圧濃縮が容易な点で特に好ましい。その他、超臨界炭酸ガスによる抽出を用いることもできる。これに対し、水を多量に含む抽出溶媒は、活性成分の抽出が抑制されるので好ましくない。
【００１８】
抽出にあたっては、種子の質量に対し、１〜１００倍、好ましくは１〜３０倍程度の質量の溶媒で一定期間抽出を行う。用いる種子は必要に応じて適度に粉砕することも可能であるが、ろ過時に目詰まりが問題となる場合等では未粉砕のまま用いても良い。また、少量の溶媒で繰り返し抽出することも可能であり、ソックスレーのような還流装置を用いても良い。超臨界炭酸ガスで抽出する場合は４０℃付近で２０〜４０ＭＰａの一般的な条件にて抽出できる。
【００１９】
本発明の第１の方法においては、これらの抽出物から抽出溶媒を除去した後、アルカリ処理する。アルカリ処理は溶媒除去後の抽出物に対し、０．２〜２倍容量の濃アルカリ水溶液を添加した後、充分撹拌混合し、３０分〜数日程度熟成をおこなう。混合の際の温度としては、室温〜７０℃の範囲が好ましく、３０〜６０℃の範囲がさらに好ましい。熟成時には成分親水性成分と親油性成分が分離しないように、適宜撹拌を行うことが望ましい。濃アルカリ水溶液としては、１〜１０Ｎの濃度のＮａＯＨ、ＫＯＨなどからなる水溶液が挙げられる。
【００２０】
上述のようにアルカリ処理した抽出物をさらに酸で中性付近まで中和すると油状物質が分離してくる。この油状物質はきわめて高い美白作用を奏しながらも、肌に対して高い安全性を示す。油状物質回収促進のために、アルコール、アセトン類などをアルカリ処理後に適宜加えても良く、さらにその後必要に応じて脱色、脱臭、脱塩、蒸留などの操作を加えても良い。
【００２１】
本発明の第２の方法によれば、抽出の前段階で種子を適度に粉砕あるいは圧ぺんし、そのまま室温付近で一定期間熟成する。熟成期間については、目的とする効果が得られる範囲であれば特に問わないが、熟成期間が一週間以内と短いと十分な美白効果を得ることが難しく、反対に数年にも及ぶと腐敗や酸化変臭の問題が起こり、好ましくない。また熟成中には必要に応じて、酸化防止剤添加や窒素置換等を行うことにより、変臭を抑制することも可能である。
【００２２】
このように熟成した種子より、前述した抽出溶媒・抽出法を用いて抽出を行う。抽出後は必要に応じて、溶媒除去・脱色・脱臭・蒸留等の操作を行う。このような特定の種子を粉砕して熟成した後に抽出することにより得られた抽出物は、前述のアルカリ処理した抽出物と同様にきわめて高い美白作用を奏しながらも、肌に対して高い安全性を示す。
【００２３】
本発明においては、上に示したような植物の種子より第１の方法または第２の方法で調製した抽出物よりなる安全で美白効果の優れた植物性美白剤を提供することができ、さらには本美白剤を配合した美白用皮膚外用剤を提供できる。
【００２４】
本発明の美白用皮膚外用剤における植物抽出物の配合量は、外用剤全量中、乾燥物として０．００５〜３．０質量％、好ましくは０．０１〜１．０質量％である。０．００５質量％未満であると、本発明でいう効果が十分に発揮されず、３．０質量％を超えると製剤化が難しいので好ましくない。また、１．０質量％以上配合すると、長期保存した際に変臭などの問題が起こりやすい。
【００２５】
また、本発明の美白用皮膚外用剤には、上記必須成分以外に、通常化粧品や医薬品等の皮膚外用剤に用いられる成分、例えば、グリセリン、１，３−ブタンジオール、ジプロピレングリコールなどの保湿剤、ＢＨＴ（ブチルヒドロキシトルエン）、ＢＨＡ（ブチルヒドロキシアニソール）、ビタミンＥ及びその誘導体などの酸化防止剤、直鎖状シリコーン、環状シリコーン、エステル油、エーテル油、炭化水素、脂肪酸などの油性成分、紫外線吸収剤、界面活性剤、増粘剤、アルコール類、粉末成分、色剤、水性成分、水、各種皮膚栄養剤等を必要に応じて適宜配合することができる。
【００２６】
その他、エデト酸二ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、グルコン酸等の金属封鎖剤、カフェイン、タンニン、ベラパミル、トラネキサム酸およびその誘導体、甘草抽出物、グラブリジン、火棘の果実の熱水抽出物、各種生薬、酢酸トコフェロール、グリチルリチン酸およびその誘導体またはその塩等の薬剤、ビタミンＣ、アスコルビン酸リン酸マグネシウム、アスコルビン酸グルコシド、アルブチン、コウジ酸等の他の美白剤、グルコース、フルクトース、マンノース、ショ糖、トレハロース等の糖類なども適宜配合することができる。
【００２７】
本発明の美白剤は種々の剤型、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、浴用剤等、従来から皮膚外用剤に用いられるものであればいずれに配合して用いても良い。
【実施例】
【００２８】
本発明について以下に実施例を挙げてさらに詳述するが、本発明はこれによりなんら限定されるものではない。配合量は特記しない限り質量％で示す。
最初に、本発明の植物抽出物のメラニン生成抑制効果に関する試験方法とその結果について説明する。
【００２９】
１．試料の調製
（１）種子抽出物のアルカリ処理物の調製
各種植物の種子（未粉砕、必要に応じて外殻を除去）をそれぞれ５倍量（ｖ／ｗ）のアセトンまたは酢酸エチル（酢エチ）またはヘキサンに浸漬し、室温にて１０日間抽出を行った。ナイロンメッシュ（１００メッシュ）であらかじめ残渣を除き、さらにろ紙にてろ過した。ロータリーエバポレータでろ液から溶媒を除去した後、撹拌羽根で撹拌しながら０．５〜１５ＮのＮａＯＨをＮａＯＨとして１００〜３００ ｇ/ｌ 抽出物の範囲内で添加した（温度５０℃）。２００ ｒｐｍで撹拌しながら、５時間処理を行った。その後、５Ｎ Ｈ2ＳＯ4を徐々に添加し、撹拌しながらｐＨを１付近まで下げ、分離してくる油状物質を回収した。回収した油状物質に等容量の水を加えて水洗し、不純物・塩・過剰の酸を除去した。油状物質を減圧乾燥し、アルカリ処理物とした。比較対照としては、アルカリ処理前の抽出物を用いた。Thuja orientalis については、超臨界ＣＯ2（２０ＭＰａ、４０℃）による抽出も実施し、同様なアルカリ処理を施した。
【００３０】
（２）粉砕熟成種子抽出物の調製
各種植物の種子をブレンダーにて軽く粉砕した後、プラスチックボトルに入れて密封し、１〜１０週間室温にて保存した。次に粉砕物の重量に対して１０倍量（ｖ／ｗ）のアセトン、酢酸エチル（酢エチ）またはヘキサンを加えて、一晩抽出した。ろ過により残渣を除去した後、ろ液を濃縮し、粉砕熟成種子抽出物とした。比較対照として、未粉砕のまま同じ条件で保存した種子より抽出した抽出物を用いた。
【００３１】
２．メラニン生成抑制効果試験方法およびその結果
得られた抽出物を試験試料として、次の方法でメラニン生成抑制効果を測定・評価した。
【００３２】
（１）細胞培養法
マウス由来のＢ１６メラノーマ培養細胞を使用した。５％ウシ胎児血清（Thermo Trace製）を含むＭＥＭ培地中でＣＯ２インキュベーター（９５％空気、５％二酸化炭素）内、３７℃の条件下で培養した。試料溶液を２．５(ｗ/ｖ) ％となるようにエタノールに溶解し、試験試料として用いた。培養２４時間後に試験試料を終濃度（抽出乾燥物換算濃度）で２５ｍｇ/ｌとなるように添加し、さらに３日間培養を続け、以下の方法でメラニン生成量の測定を行った。
また、従来からメラニン生成抑制効果があることが知られているアルブチンについても上記と同様の試験を行った。
【００３３】
（２）測定
２０×１０4個 のＢ１６メラノーマ細胞を、６０ｍｍプラスティックシャーレに植え込み、２４時間前培養した。その後、新鮮な培地に置換し試料を培養液中に５０ｕｌ/Well添加した。細胞は３日間培養したのち、トリプシン処理によって回収した。回収した細胞は１Ｎ ＮａＯＨ、１０％ＤＭＳＯ液に溶解し、４２０ｎｍの吸光度を測定し、メラニン量とした。種々の採取法で得たThuja orientalis の種子、すなわち柏子仁を用いた時のメラニン量の測定結果を図１に示す。図中、（1-1）〜（1-10）は、それぞれ次のものを試料として用いた例である。
【００３４】
（1-1）：０．１％（終濃度）エタノールのみ（薬剤無添加区）
（1-2）：アルブチン（終濃度２５ｍｇ/l、以下、濃度は同様）
（1-3）：柏子仁（未粉砕物）のアセトン抽出物で、アルカリ未処理のもの
（1-4）：前記試料の調製の欄における（１）の方法で得られた柏子仁アセトン抽出物
（1-5）：前記試料の調製の欄における（２）の方法で１週間熟成後に得られた柏子仁アセトン抽出物
（1-6）：前記試料の調製の欄における（２）の方法で４週間熟成後に得られた柏子仁アセトン抽出物
（1-7）：前記試料の調製の欄における（２）の方法で１０週間熟成後に得られた柏子仁アセトン抽出物
（1-8）：柏子仁種子を粉砕しない他は前記試料の調製の欄における（２）の方法で１０週間熟成後に得られた柏子仁アセトン抽出物
（1-9）：柏子仁を圧ぺんした後、直ちに超臨界ＣＯ2（３０ＭＰａ、４０℃）による抽出を行った柏子仁抽出物
（1-11）：柏子仁を圧ぺんした後、直ちに超臨界ＣＯ2（３０ＭＰａ、４０℃）による抽出を行った後、アルカリ処理した柏子仁抽出物
なお、上記におけるアルカリ濃度（ＮａＯＨ濃度）はいずれも５Ｎで行った。
【００３５】
図１より本発明の実施例の一つである柏子仁抽出物（アルカリ処理物）（1-4）はアルカリ未処理物（1-3）に比べ、著しくメラニン抑制効果が高まっていることが分かる。また、本発明の別の実施例である柏子仁粉砕・熟成抽出物（（1-5）〜（1-7））は未粉砕で同期間保存したもの（1-8）に比べ、著しくメラニン抑制効果が高まっていた。種子の粉砕・熟成によるメラニン抑制効果の増大は保存期間が一週間と比較的短い場合（1-5）でも有意に上昇しており、陽性対照であるアルブチン（1-2）以上の優れたメラニン抑制作用を有し、美白剤として有用であることが分かる。なお、同時にＭＴＴ法により細胞生存率を評価した結果、本発明の種子抽出物では細胞生存率の低下は認められなかったことから、図１におけるメラニン産生量の抑制は細胞傷害によるものではないといえる。
【００３６】
図２は、柏子仁抽出物をアルカリ処理した時のアルカリ濃度とメラニン抑制効果との関係を示す図である。試験方法は、次の通りである。
柏子仁抽出物１ｋｇに対し、ＮａＯＨを１７０ｇの割合で、種々のアルカリ強度の水溶液として添加した。２００ｒｐｍで激しく振とうしながら、５０℃水浴上で３時間反応させた後、硫酸を加えて酸性にした際に分離してきた油状物質を回収し、試料として用いてメラニン生成抑制効果試験を行った。
図２から、アルカリ処理の際のアルカリ強度は１〜１０Ｎの間にあることが望ましいことがわかる。
【００３７】
図３に本発明の別の実施例であるVaccinium oxycoccos、Vaccinium corymbosum、Vaccinium vitis-idaea（以上、Vaccinium属植物）、Rubes idaeus（Rubes属植物）、Actinidia chinensis（Actinidia属植物）、Perilla frutescens（Perilla属植物）の種子抽出物（アルカリ処理物）および粉砕・熟成処理を施した種子より抽出した抽出物のメラニン抑制効果評価結果を示す。比較例としては未粉砕種子より抽出した抽出物（アルカリ未処理物）を用いた。図中、Ａは未粉砕種子抽出物（アルカリ未処理、比較例）、Ｂは未粉砕種子抽出物（アルカリ処理、実施例）、Ｃは粉砕・熟成種子抽出物（室温、１０週間熟成、実施例）である。また本発明の範囲外である植物を用いた比較例として、油ヤシ（Elaeis guineensis）種子アセトン抽出物の例を図中に示した（アルカリ未処理、アルカリ処理、粉砕・熟成種子抽出物（室温、１０週間熟成））。
【００３８】
図３に示した何れの実施例においても、顕著なメラニン抑制効果が認められた。これに対し粉砕・熟成処理やアルカリ処理を行わなかった抽出物（Ａ：比較例）および油ヤシ（Elaeis guineensis）種子アセトン抽出物ではいずれもメラニン抑制効果はきわめて低かった。
【００３９】
以下に、本発明の美白剤の配合例を挙げる。このように、本発明の美白剤は種々の皮膚外用剤処方に広く配合できる。
【００４０】
処方例１ クリーム
ステアリン酸 ５．０ 質量％
ステアリルアルコール ４．０
イソプロピルミリステート １８．０
グリセリンモノステアリン酸エステル ３．０
プロピレングリコール １０．０
Thuja orientalis アセトン抽出物（アルカリ処理品） ０．２
Rubes idaeus アセトン抽出物（アルカリ処理品） ０．１
Vaccinium vitis-idaea アセトン抽出物（アルカリ処理品） ０．１
天然型ビタミンＥ ０．０５
苛性カリ ０．２
亜硫酸水素ナトリウム ０．０１
防腐剤 適量
香料 適量
イオン交換水 残余
【００４１】
処方例２ クリーム
ステアリン酸 ２．０ 質量％
ステアリルアルコール ７．０
水添ラノリン ２．０
スクワラン ５．０
２−オクチルドデシルアルコール ６．０
ポリオキシエチレン（２５モル）セチルアルコールエーテル ３．０
グリセリンモノステアリン酸エステル ２．０
プロピレングリコール ５．０
Actinidia chinensis アセトン抽出物（アルカリ処理品） ０．５
亜硫酸水素ナトリウム ０．０３
エチルパラベン ０．３
香料 適量
イオン交換水 残余
【００４２】
処方例３ クリーム
固形パラフィン ５．０ 質量％
ミツロウ １０．０
ワセリン １５．０
流動パラフィン ４１．０
グリセリンモノステアリン酸エステル ２．０
ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノラウリン酸エステル ２．０
石けん粉末 ０．１
硼砂 ０．２
Thuja orientalis 粉砕・熟成種子ヘキサン抽出物 ０．２
亜硫酸水素ナトリウム ０．０３
エチルパラベン ０．３
香料 適量
イオン交換水 残余
【００４３】
処方例４ 乳液
ステアリン酸 ２．５ 質量％
セチルアルコール １．５
ワセリン ５．０
流動パラフィン １０．０
ポリオキシエチレン（１０モル）モノオレイン酸エステル ２．０
ポリエチレングリコール１５００ ３．０
トリエタノールアミン １．０
カルボキシビニルポリマー ０．０５
Perilla frutescens ヘキサン抽出物（アルカリ処理品） １．０
亜硫酸水素ナトリウム ０．０１
エチルパラベン ０．３
香料 適量
イオン交換水 残余
【００４４】
処方例５ 乳液
マイクロクリスタリンワックス １．０ 質量％
密ロウ ２．０
ラノリン ２０．０
流動パラフィン １０．０
スクワラン ５．０
ソルビタンセスキオレイン酸エステル ４．０
ポリオキシエチレン（２０モル）ソルビタンモノオレイン酸エステル １．０
プロピレングリコール ７．０
Vaccinium oxycoccos 粉砕熟成種子アセトン抽出物 ０．５
亜硫酸水素ナトリウム ０．０１
エチルパラベン ０．３
香料 適量
イオン交換水 残余
【００４５】
処方例６ パック
ジプロピレングリコール ５．０ 質量％
ポリオキシエチレン（６０モル）硬化ヒマシ油 ５．０
Thuja orientalis 種子抽出物 （アルカリ処理品） ０．５
オリーブ油 ５．０
酢酸トコフェロール ０．２
エチルパラベン ０．２
香料 ０．２
亜硫酸水素ナトリウム ０．０３
ポリビニルアルコール １３．０
（ケン化度９０、重合度２，０００）
エタノール ７．０
精製水 残余
【００４６】
処方例７ 固形ファンデーション
タルク ４３．１ 質量％
カオリン １５．０
セリサイト １０．０
亜鉛華 ７．０
二酸化チタン ３．８
黄色酸化鉄 ２．９
黒色酸化鉄 ０．２
スクワラン ８．０
イソステアリン酸 ４．０
モノオレイン酸ＰＯＥソルビタン ３．０
オクタン酸イソセチル ２．０
Thuja orientalis 粉砕・熟成種子抽出物 ０．２
Vaccinium oxycoccos 種子アセトン抽出物 （アルカリ処理品） ０．２
防腐剤 適量
香料 適量
【００４７】
処方例８ 乳化型ファンデーション（クリームタイプ）
（処方）
（粉体部）
二酸化チタン １０．３ 質量％
セリサイト ５．４
カオリン ３．０
黄色酸化鉄 ０．８
ベンガラ ０．３
黒色酸化鉄 ０．２
（油相）
デカメチルシクロペンタシロキサン １１．５
流動パラフィン ４．５
ポリオキシエチレン変性ジメチルポリシロキサン ４．０
（水相）
精製水 ５０．０
１，３−ブチレングルコール ４．５
Vaccinium corymbosum 種子抽出物 （アルカリ処理品） ０．２
ソルビタンセスキオレイン酸エステル ３．０
防腐剤 適量
香料 適量
【００４８】
処方例９ 乳液
ジメチルポリシロキサン ３ 質量％
デカメチルシクロペンタシロキサン ４
エタノール ５
グリセリン ６
１，３−ブチレングリコール ５
ポリオキシエチレンメチルグルコシド ３
ヒマワリ油 １
スクワラン ２
水酸化カリウム ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０５
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン ０．１
グリチルリチン酸ジカリウム ０．０５
ビワ葉エキス ０．１
Ｌ−グルタミン酸ナトリウム ０．０５
ウイキョウエキス ０．１
酵母エキス ０．１
ラベンダー油 ０．１
ジオウエキス ０．１
Vaccinium corymbosum 粉砕・熟成種子抽出物 ０．２
Vaccinium vitis-idaea 粉砕・熟成種子抽出物 ０．２
ジモルホリノピリダジノン ０．１
キサンタンガム ０．１
カルボキシビニルポリマー ０．１
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体 ０．１
（ペミュレンＴＲ−１）
ベンガラ 適量
黄酸化鉄 適量
パラベン 適量
精製水 残余
【００４９】
処方例１０ 乳液
ジメチルポリシロキサン ２ 質量％
デカメチルシクロペンタシロキサン ２５
ドデカメチルシクロヘキサシロキサン １０
ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体 １．５
トリメチルシロキシケイ酸 １
１，３−ブチレングリコール ５
スクワラン ０．５
タルク ５
グリチルリチン酸ジカリウム ０．１
Actinidia chinensis 粉砕・熟成種子抽出物 ０．１
酢酸トコフェロール ０．１
エデト酸三ナトリウム ０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン １
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル ５
ジパラメトキシ桂皮酸モノ−２−エチルヘキサン酸グリセリル １
シリコーン被覆微粒子酸化チタン（４０ｎｍ） ４
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト ０．５
球状ポリエチレン末 ３
フェノキシエタノール 適量
精製水 残余
香料 適量
【００５０】
処方例１１ 乳液
流動パラフィン ７ 質量％
ワセリン ３
デカメチルシクロペンタシロキサン ２
ベヘニルアルコール １
グリセリン ５
ジプロピレングリコール ７
ポリエチレングリコール１５００ ２
ホホバ油 １
イソステアリン酸 ０．５
ステアリン酸 ０．５
ベヘニン酸 ０．５
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット ３
２−エチルヘキサン酸セチル ３
モノステアリン酸グリセリン １
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン １
水酸化カリウム ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０５
グリチルレチン酸ステアリル ０．０５
Ｌ−アルギニン ０．１
ローヤルゼリーエキス ０．１
酵母エキス ０．１
Rubus idaeus 粉砕・熟成種子抽出物 ０．１
Perilla frutescens 粉砕・熟成種子抽出物 ０．１
酢酸トコフェロール ０．１
アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム ０．１
エデト酸三ナトリウム ０．０５
4-t-ブチル-4’-メトキシジベンゾイルメタン ０．１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル ０．１
カルボキシビニルポリマー ０．１５
パラベン 適量
精製水 残余
香料 適量
【００５１】
処方例１２ クリーム
α−オレフィンオリゴマー １０ 質量％
ワセリン １
マイクロクリスタリンワックス ３
デカメチルシクロペンタシロキサン ５
グリセリン １０
ジプロピレングリコール ２
１，３−ブチレングリコール ２
エリスリトール ２
スクワラン １
グリセリン脂肪酸エステルエイコサンニ酸縮合物 ０．１
イソステアリン酸 １
２−エチルヘキサン酸セチル ５
塩化ナトリウム ０．５
ヘキサメタリン酸ナトリウム ０．０５
グリチルレチン酸ステアリル ０．０５
コウボエキス ０．１
リン酸Ｌ−アスコルビルマグネシウム ２
酢酸トコフェロール ０．５
チオタウリン ０．１
ＤＬ−ピロリドンカルボン酸ナトリウム １
ウコンエキス ０．１
Vaccinium corymbosum 粉砕・熟成種子抽出物 ０．３
エデト酸３ナトリウム ０．１
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト ２
カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１
パラベン 適量
精製水 残余
香料 適量
【００５２】
処方例１３ クリーム
流動パラフィン ８ 質量％
ワセリン ３
ジメチルポリシロキサン ２
ステアリルアルコール ３
ベヘニルアルコール ２
グリセリン ５
ジプロピレングリコール ４
トレハロース １
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット ４
モノイソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル ２
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン １
親油型モノステアリン酸グリセリン ２
クエン酸 ０．０５
クエン酸ナトリウム ０．０５
水酸化カリウム ０．０１５
油溶性甘草エキス ０．１
レチノールパルミテート（１００万単位） ０．２５
酢酸トコフェロール ０．１
Rubus fruticosus 粉砕熟成種子抽出物 ０．５
パラオキシ安息香酸エステル 適量
フェノキシエタノール 適量
ジブチルヒドロキシトルエン 適量
エデト酸三ナトリウム ０．０５
4-t-ブチル-4’-メトキシジベンゾイルメタン ０．０１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル ０．１
β−カロチン ０．０１
ポリビニルアルコール ０．５
ヒドロキシエチルセルロース ０．５
カルボキシビニルポリマー ０．０５
精製水 残余
香料 適量
【００５３】
処方例１４ パック
ジプロピレングリコール ５．０ 質量％
ポリオキシエチレン（６０モル）硬化ヒマシ油 ５．０
Thuja orientalis 種子抽出物 (アルカリ処理品) ０．５
オリーブ油 ５．０
酢酸トコフェノール ０．２
エチルパラベン ０．２
香料 ０．２
亜硫酸水素ナトリウム ０．０３
ポリビニルアルコール １３．０
（ケン化度９０、重合度２０００）
エタノール ７．０
精製水 残余
【００５４】
処方例１５ 乳化型ファンデーション
ベヘニルアルコール ０．５ 質量％
ジプロピレングリコール ６
ステアリン酸 １
モノステアリン酸グリセリン １
水酸化カリウム ０．２
トリエタノールアミン ０．８
酢酸ＤＬ−α−トコフェロール ０．１
パラオキシ安息香酸エステル 適量
黄酸化鉄 １
α−オレフィンオリゴマー ３
ジメチルポリシロキサン（６ｍＰａ．ｓ） ２
ジメチルポリシロキサン（１００ｍＰａ．ｓ） ５
バチルアルコール ０．５
イソステアリン酸 １
ベヘニン酸 ０．５
２−エチルヘキサン酸セチル １０
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン １
酸化チタン ３
雲母チタン・ポリアクリル酸アルキル複合粉末 ０．５
表面処理酸化チタン（ＭＴ−０６２） １０
ポリアクリ酸アルキル被覆雲母チタン ０．５
黒酸化鉄被覆雲母チタン ０．５
無水ケイ酸 ６
パラメトキシケイ皮酸２−エチルへキシル ２
ベンガラ 適量
群青 適量
黒酸化鉄 適量
法定色素 適量
キサンタンガム ０．１
ベントナイト １
カルボキシメチルセルロースナトリウム ０．１
Actinidia chinensis 粉砕・熟成種子抽出物 ０．１
精製水 残余
香料 適量
【図面の簡単な説明】
【００５５】
【図１】種々の採取法で得た柏子仁抽出物を用いた時のメラニン量の測定結果を示す図である。
【図２】種々のアルカリ条件で処理を行った柏子仁抽出物のメラニン抑制効果を示す図である。
【図３】Vaccinium oxycoccos、Vaccinium vitis-idaea、Rubes idaeus、Actinidia chinensis、Perilla frutescensの種子抽出物（アルカリ処理物）および粉砕・熟成処理を施した種子より抽出した抽出物を用いた時のメラニン量を示す図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Thuja属植物、Rubes属植物、Vaccinium属植物、Actinidia属植物およびPerilla属植物の中から選ばれる一種または二種以上の植物の種子を抽出して植物抽出物とし、次いで該植物抽出物にアルカリ処理を施して得られることを特徴とする植物性美白剤の製造方法。
【請求項２】
前記アルカリ処理が、前記抽出物の溶媒の一部または全部を留去した後、溶液濃度が１〜１０Ｎとなるようにアルカリ水溶液を添加、混合し、次いで中和することによりなされるものであることを特徴とする請求項１に記載の植物性美白剤の製造方法。
【請求項３】
Thuja属植物、Rubes属植物、Vaccinium属植物、Actinidia属植物およびPerilla属植物の中から選ばれる一種または二種以上の植物の種子を粉砕し、温度 １０〜３５℃、相対湿度 ２０〜９０％で１週間以上熟成した後に抽出してなることを特徴とする植物性美白剤の製造方法。
【請求項４】
前記植物が Thuja orientalis、Rubes idaeus、Vaccinium oxycoccos、Vaccinium corymbosum、Vaccinium vitis-idaea、Perilla frutescens および Actinidia chinensis から選ばれたものであることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の植物性美白剤の製造方法。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の方法によって製造されたことを特徴とする植物性美白剤。
【請求項６】
請求項５に記載の植物性美白剤を配合してなることを特徴とする美白用皮膚外用剤。
【請求項１】
Thuja属植物、Rubes属植物、Vaccinium属植物、Actinidia属植物およびPerilla属植物の中から選ばれる一種または二種以上の植物の種子を抽出して植物抽出物とし、次いで該植物抽出物にアルカリ処理を施して得られることを特徴とする植物性美白剤の製造方法。
【請求項２】
前記アルカリ処理が、前記抽出物の溶媒の一部または全部を留去した後、溶液濃度が１〜１０Ｎとなるようにアルカリ水溶液を添加、混合し、次いで中和することによりなされるものであることを特徴とする請求項１に記載の植物性美白剤の製造方法。
【請求項３】
Thuja属植物、Rubes属植物、Vaccinium属植物、Actinidia属植物およびPerilla属植物の中から選ばれる一種または二種以上の植物の種子を粉砕し、温度 １０〜３５℃、相対湿度 ２０〜９０％で１週間以上熟成した後に抽出してなることを特徴とする植物性美白剤の製造方法。
【請求項４】
前記植物が Thuja orientalis、Rubes idaeus、Vaccinium oxycoccos、Vaccinium corymbosum、Vaccinium vitis-idaea、Perilla frutescens および Actinidia chinensis から選ばれたものであることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の植物性美白剤の製造方法。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれかに記載の方法によって製造されたことを特徴とする植物性美白剤。
【請求項６】
請求項５に記載の植物性美白剤を配合してなることを特徴とする美白用皮膚外用剤。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公開番号】特開２００７−２２３９４４（Ｐ２００７−２２３９４４Ａ）
【公開日】平成１９年９月６日（２００７．９．６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−４６２２９（Ｐ２００６−４６２２９）
【出願日】平成１８年２月２３日（２００６．２．２３）
【出願人】（０００００１９５９）株式会社資生堂 (1,748)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年９月６日（２００７．９．６）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年２月２３日（２００６．２．２３）
【出願人】（０００００１９５９）株式会社資生堂 (1,748)
【Ｆターム（参考）】
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