機能性の向上された茶抽出処理物の製造方法
【課題】ツバキ科カメリア属に属する茶の抽出物を含有する液から、エピカテキンガレートを高含有する茶抽出処理物を得る。
【解決手段】ツバキ科カメリア属に属する茶の抽出物を含有する液に、ｐＨを７．０以上に調整して酸素を含む気体を通気する処理を施す。これにより、エピカテキンガレートとエピガロカテキンガレートとを含有し、エピカテキンガレートの含有重量Ａと、エピガロカテキンガレートの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂが３．０以上であり、かつ、ｐＨが７．０以上である茶抽出処理物が得られる。
【解決手段】ツバキ科カメリア属に属する茶の抽出物を含有する液に、ｐＨを７．０以上に調整して酸素を含む気体を通気する処理を施す。これにより、エピカテキンガレートとエピガロカテキンガレートとを含有し、エピカテキンガレートの含有重量Ａと、エピガロカテキンガレートの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂが３．０以上であり、かつ、ｐＨが７．０以上である茶抽出処理物が得られる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エピカテキンガレートを高含有する茶抽出処理物の製造方法に関するものである。エピカテキンガレートはツバキ科カメリア属に属する茶（チャ）から得られるＬＯＸ−１（レクチン様酸化低密度リポ蛋白質受容体）アンタゴニストである。
【背景技術】
【０００２】
ツバキ科カメリア属（Ｃａｍｅｌｌｉａ属）に属する植物である茶の葉（以下「茶葉」とする）には、他の植物に比べカテキン類が比較的多量に含有されている。
【０００３】
また、茶葉の加工品に含まれるカテキン類については、その含有量が報告されている。具体的には、緑茶に関しては玉露、煎茶、釜炒り茶、番茶、ほうじ茶についての分析値の報告があり、報告によっては多少のバラつきがあるが、主要なカテキン類は、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）およびエピカテキン（ＥＣ）の４種である。中でも最も多く含有されるのはＥＧＣｇであり、カテキン類全体の５０〜６０重量％を占める。
【０００４】
一方、その他のカテキン類の含有量は微量である。たとえば、ＥＣｇは主要カテキン成分の一つとされているものの、その含有量は茶葉の加工品の種類の間で差はあるものの、ＥＧＣｇ含有量に対して約１／４〜１／５前後である。紅茶は、緑茶と比較するとＥＣｇの含有量が多く、ＥＧＣｇと等量程度含まれる種類もあるものの、最も多く含有される成分はＥＧＣｇである。飲用茶は、茶葉の加工品を湯や水で抽出したものであるから、飲用茶中のカテキン類の構成も茶葉と類似した比率になる。
【０００５】
カテキン類中で最も含有量の多いＥＧＣｇは近年大きく注目され、さまざまな有効性が証明されている。また、その単離方法についても報告がなされている（特許文献１）。これに対し、ＥＧＣｇと同様に主要なカテキン類中でガレート型カテキンとして知られるＥＣｇは、ＥＧＣｇと比較して含有量が少ないため、活性や単離方法についてあまり検討されていない。茶抽出物中にはＥＣｇと分子構造の類似するＥＧＣｇが多量に含まれるため、たとえば、ＥＣｇのカラムなどによる単離は困難となっている。
【０００６】
そこで、必要量のＥＣｇを単離せずに茶で摂取しようとすると、ＥＧＣｇの含有量が相対的に多くなり、苦味が強くなりすぎるため、摂取は困難である。カテキン類はポリフェノールに属し、苦味や渋味が強いことが知られており、ガレート型カテキン類であるＥＧＣｇ、ＥＣｇ、カテキンガレート（Ｃｇ）およびガロカテキンガレート（ＧＣｇ）は、これらの間での苦味や渋味に大差はないものの、ＥＧＣやＥＣなどの非ガレート型カテキン類よりも苦味や渋味が強いことが示されている。中でもＥＧＣｇとＥＣｇの苦味・渋味閾値濃度は３倍程度低いとされている（非特許文献１）。
【０００７】
近年、喫煙、食生活などの生活習慣から動脈硬化の患者は増加傾向にある。したがって、より少量で、より苦味が少なく摂取しやすいＥＣｇ高含有製品が求められている。
【０００８】
一方、カテキン類のアルカリ領域での挙動について報告がなされている。非特許文献２、３では、アルカリ領域におけるＥＧＣｇ、ＥＧＣ、ＥＣｇおよびＥＣの量について研究されており、ＥＧＣｇとＥＧＣがアルカリ領域において比較的減少しやすいことが報告されている。しかし、茶抽出物では通常、ＥＧＣｇが多く含まれているため、ＥＣｇを高含有することは難しい。夾雑物の多い茶抽出物でのアルカリ領域における挙動は検討されているが、ＥＧＣｇに対するＥＣｇの含有比率を高めることを目的としておらず、これに関する記載もない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２００１−９７９６８号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】「食品の変色の化学」、ｐ１２４−ｐ１２５（光琳）
【非特許文献２】Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．，４５，４６２４−４６２８（１９９７）
【非特許文献３】Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，８３，１８９−１９５（２００３）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明者らは、以前に、酸化ＬＤＬによる血管内皮細胞への作用を媒介する受容体であるレクチン様酸化低密度リポ蛋白質受容体（ＬＯＸ−１）に着目し、強力なＬＯＸ−１アンタゴニストを同定するに至り、既に発明をなし、その作用・効果について詳細に報告している（特願２０１１−２３６４４８号）。同時に、ＬＯＸ−１アンタゴニストとして実用性の高い化合物が茶に存在することも明らかにしており、これらがＥＣｇとＣｇの２種のカテキンであることを初めて明らかにした。たとえば、ＥＣｇは、カテキン類の主要成分であるＥＧＣｇに比べて、５倍程度のアンタゴニスト活性を有していることが明らかになっている。そこで、強いアンタゴニスト活性を有するＥＣｇを高含有する製品が求められている。しかし、現在、ＥＣｇを産業用に精製した工業製品は知られていない。
【００１２】
そこで、本発明者らは、より健康機能性が期待される茶抽出処理物の開発を目的として、すでに本発明者らが発見した強力なＬＯＸ−１アンタゴニスト剤であるＥＣｇに着目し、鋭意研究を重ねた。その結果、本発明者らは、従来の茶抽出物においてカテキン類として含有量の少ないＥＣｇの、カテキン類の主成分であるＥＧＣｇに対する含有比率を顕著に高めることで、苦味や渋味の増加を極力抑えながらＥＣｇに由来する生理活性を付与した製品を得ることに成功し、その製造方法を確立するに至った。
【００１３】
したがって、本発明は、ＥＣｇを高含有する茶抽出処理物の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
即ち、本発明の要旨は、
（１）ツバキ科カメリア属に属する茶の抽出物を含有する液に、ｐＨを７．０以上に調整して酸素を含む気体を通気する処理を施し、エピカテキンガレートの含有重量Ａと、エピガロカテキンガレートの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂを３．０以上に高めることを特徴とする茶抽出処理物の製造方法、
（２）茶の抽出物の処理を、１０ｍＭ以上の塩の存在下で行なうことを特徴とする上記（１）に記載の茶抽出処理物の製造方法、および
（３）上記（１）または（２）に記載の製造方法により得られる茶抽出処理物を含有する食品、に関する。
【発明の効果】
【００１５】
本発明により、優れた健康機能性が期待されるエピカテキンガレート（ＥＣｇ）を高含有する茶抽出処理物を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明で使用するカテキン類は全て「非重合型カテキン類」のことを指し、さらに「非重合型カテキン類」とは、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）、エピカテキン（ＥＣ）およびエピガロカテキン（ＥＧＣ）のエピ体カテキン類、ならびに、カテキンガレート（Ｃｇ）、ガロカテキンガレート（ＧＣｇ）、カテキン（Ｃ）およびガロカテキン（ＧＣ）の非エピ体カテキン類をあわせた総称である。
【００１７】
本発明において、茶抽出処理物の原料としては、ツバキ科カメリア属に属する植物である茶（チャ）を抽出することにより得られる茶抽出物を含有する液を用いる。茶は、カメリア・シネンシス（学名）または茶の木（和名）などとも呼ばれ、中国種とアッサム種の２種類がある。茶の中でも、茶葉を用いるのが好ましい。本発明では、茶には、茶の加工品が含まれる。茶の加工品としては種々のものが知られているが、なかでも、日常的に飲用されている、不発酵茶である各種緑茶、半発酵茶である烏龍茶、強発酵茶である紅茶、後発酵茶である黒茶、プーアル茶などが、安全性が高く、安心感もあり、また原材料が入手しやすい観点から好ましい。また、一般に、ＥＣｇ含有率が比較的高い紅茶は、更に好ましい。
【００１８】
茶抽出物を含有する液としては、茶由来のＥＣｇを含有する液状物であれば特に限定されないが、たとえば、茶抽出液が挙げられる。茶抽出液は、茶葉を濾過することなくそのまま用いてもよく、または濾過により茶葉を除去して用いてもよく、さらに濃縮して用いても良い。また、茶抽出液から得られる乾燥物または精製物を含有する液、一般的な各種飲用茶などを茶抽出物として用いてもよい。茶抽出液から得られる乾燥物または精製物は市販されており、たとえば、ポリフェノン（登録商標、三井農林（株）製）、サンフェノン（登録商標、太陽化学（株）製）などが挙げられる。
【００１９】
茶抽出液は、たとえば、茶に含まれる各成分を溶媒に抽出することにより得られる。溶媒としては、水や有機溶媒、水と有機溶媒との混合溶媒などを使用できる。水としては特に限定されず、工業用水、上水、蒸留水、脱イオン水などを使用できる。有機溶媒としては、メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル、クロロホルム等が挙げられる。好ましくは、親水性のメタノール、エタノール、アセトンが挙げられ、より好ましくはエタノールが食品用途としては適している。
【００２０】
抽出方法としては、茶と溶媒とを接触させた状態での、静置抽出、攪拌抽出、加温抽出、加温加圧抽出、還流抽出、超臨界抽出などが挙げられる。あるいは、茶を充填したカラムに溶媒を繰り返し流して抽出を行なってもよい。これらの抽出方法の中でも、短時間で効率的に抽出する観点からは、加温抽出や加温加圧抽出が望ましい。抽出操作は必要に応じて繰返し実施してもよい。また、２種以上の異なる抽出操作を組み合わせて実施してもよい。
【００２１】
本発明において、茶の抽出に用いる溶媒の量は特に限定されないが、茶の全使用量に対して重量基準で好ましくは５〜１００倍量、さらに好ましくは５〜８０倍量である。抽出温度は、茶や溶媒の量、茶や溶媒の種類、抽出装置、抽出スケールなどにより適宜選択すればよいが、好ましくは０℃〜１００℃、より好ましくは２０℃〜１００℃、さらに好ましくは４０〜１００℃である。抽出時間は、抽出方法、抽出装置の種類、抽出装置の大きさや処理量といったスケールの大きさなどに応じて適宜設定すればよいが、抽出時の時間的なコストなどを考えると、好ましくは１〜１００分、さらに好ましくは１〜８０分である。このようにして、茶抽出物を得ることができる。
【００２２】
なお、茶の抽出を４０℃〜１００℃程度の加熱下に実施している場合、得られた茶抽出物をそのまま後述する特定の処理に供してもよいが、室温程度に冷却した後に後述する特定の処理に供することが好ましい。
【００２３】
本発明では、茶抽出物に特定の処理を施すことにより、本発明の茶抽出処理物を得ることができる。特定の処理とは、茶抽出物のｐＨを７．０以上、好ましくは７．０〜９．０に調整する第１工程と、ｐＨ７．０以上に調整された茶抽出物に、酸素を含有する気体を通気する第２工程とを含んでいる。
【００２４】
第１工程において、茶抽出物のｐＨを７．０以上に調整することにより、最終的に得られる茶抽出処理物中のＥＧＣｇ含有量を顕著に減少させることができる。茶抽出物のｐＨが７．０未満では、最終的に得られる茶抽出処理物におけるＥＣｇの含有重量ＡとＥＧＣｇの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂが３．０未満になり、ＥＧＣｇの含有重量ＢがＥＣｇの含有重量Ａよりも相対的に多くなって、同量のＥＣｇを摂取しようとした際に苦みや渋みの強い茶抽出処理物が得られる。また、茶抽出物のｐＨが９．０を大幅に超えると、ＥＣｇの加水分解反応が起こる懸念がある。
【００２５】
第１工程において、ｐＨ調整方法は特に限定されないが、ｐＨ調整剤を用いる方法が好ましい。ｐＨ調整剤とは、食品のｐＨを適切に調整して、食品の変質や変色を防止し、他の食品添加物の効果を向上させるために用いられる食品添加物をいう。現在、食品のｐＨ調整には、主にリン酸やリン酸の金属塩、有機酸や有機酸の金属塩、食品添加物グレードの塩酸や硫酸、水酸化ナトリウム、重曹などが用いられている。本発明におけるｐＨ調整剤には食品添加物として使用可能な製品であれば特に制限はない。
【００２６】
第２工程において、第１工程でｐＨを７．０以上に調整した茶抽出物中に、酸素を含む気体を強制的に吹き込み、前記茶抽出物に酸素を含む気体を積極的に接触させる。酸素を含む気体としては、酸素、空気、酸素と炭酸ガスとの混合気体、酸素と不活性ガス（窒素、アルゴンなど）との混合気体などが挙げられる。これらの中でも、コスト、産業上の安全性などの観点から、酸素や空気が好ましく、空気がより好ましい。通気方法としては特に限定されず、たとえば、圧縮気体を細かい気泡として茶抽出物中に分散させる散気法、攪拌も同時に行うタービン法などが挙げられる。
【００２７】
通気における気体の通気量および通気時間は特に限定されず、気体の種類、気体中の酸素含有量、茶抽出物の量など種々の条件に応じて広い範囲から適宜選択されるが、たとえば、１リットルの茶抽出物を含有する液に対して、通気量は３〜６ＳＬＰＭ（standard L／分）程度である。通気時間は１〜２００分程度である。
【００２８】
本発明においては、塩の存在下で、第１工程と第２工程とを含む前記処理を実施することが好ましい。より具体的には、茶抽出物および塩を含有する液を用いて、第１工程と第２工程とを実施することが好ましい。これにより、最終的に得られる茶抽出処理物中のＥＧＣｇ含有量を顕著に低減化できる。本発明での塩とは、酸と塩基の中和反応によって生じる化合物であり、酸の陰性成分と塩基の陽性成分からなるものをいう。塩としては、食品に使用可能である食塩、リン酸塩、有機酸塩などが好ましく、中でもリン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウムなどのリン酸塩がより好ましい。塩は１種を単独でまたは２種以上を組み合わせて使用できる。
【００２９】
茶抽出物を含有する液に添加される塩の濃度は、好ましくは１０ｍＭ以上、さらに好ましくは１０ｍＭ〜１０００ｍＭである。塩の量が１０ｍＭ以上であることにより、最終的に得られる茶抽出処理物中でのＥＧＣｇ含有量をより一層少なくし、ＥＣｇを高含有し、ＥＧＣｇの含有量が少なくなり、苦みや渋みが相対的に少ない茶抽出処理物が得られるといった利点が得られる。また、塩濃度が１０００ｍＭを大幅に超えても塩を添加する効果は変わらないが、塩の溶解度やコストなどの面から、この程度を上限としてもよい。
【００３０】
こうして、ＥＣｇとＥＧＣｇとを含有し、ＥＣｇの含有重量Ａと、ＥＧＣｇの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂが３．０以上であり、かつ、ｐＨが７．０以上である本発明の茶抽出処理物が得られる。比Ａ／Ｂが３．０以上であることにより、ＥＣｇを高含有し、かつ、ＥＧＣｇに由来する苦みの少ない、摂食し易い茶抽出処理物になる。なお、上記のｐＨ調整、通気および塩濃度から選ばれる少なくとも１種の条件を変更することにより、ＥＣｇを含有しかつＥＧＣｇを含有しない茶抽出処理物（比Ａ／Ｂ＞９９と示す）が得られることがある。このような場合も、比Ａ／Ｂが３．０以上である場合に含まれる。
【００３１】
また、本発明の茶抽出処理物において、ＥＣｇの含有重量Ａは、原料である茶抽出物におけるＥＣｇの含有重量の１／５以上にすることが好ましい。これは、茶抽出物のｐＨ、塩の添加量、通気時間や通気量などを適宜変更することにより、調整可能である。
【００３２】
本発明の茶抽出処理物を食品などに使用する場合、脱塩や重合物の除去を既知の方法で行ったほうが風味の面で好ましい。たとえば、合成吸着剤を充填したカラムでの精製や、限外濾過膜などを利用して、脱塩や重合物の除去を行なう。
【００３３】
本発明に用いる合成吸着剤としては、たとえば、ダイヤイオンＨＰ２０、セパビーズＳＰ７０、ＳＰ８５０、ＳＰ８２５、ＳＰ７００（いずれも商品名、三菱化学（株）製）、アンバーライトＸＡＤ４、ＸＡＤ１６ＨＰ、ＸＡＤ２０００、（いずれも商品名、オルガノ（株）製）などのスチレン系合成吸着剤、セパビーズＳＰ２０５（商品名、三菱化学（株）製）などの修飾スチレン系合成吸着剤、ダイヤイオンＨＰ１ ＭＧ（商品名、三菱化学（株）製）などのメタクリル系合成吸着剤、アンバーライトＸＡＤ７ＨＰ（商品名、オルガノ（株）製）などのアクリル系合成吸着剤、アンバーライトＸＡＤ７６１（商品名、オルガノ（株）製）などのフェノール系合成吸着剤などが挙げられる。なかでも、スチレン系合成吸着剤が非重合型カテキン類の分離に実績が多く、コストの点や製造スケールアップしやすい点から好ましい。特に汎用されているダイヤイオンＨＰ２０が望ましい。
【００３４】
カラムでの精製において、目的成分、より具体的にはＥＣｇが溶出された画分を合一した後、濃縮を行ってもよい。濃縮方法は公知の方法に準じて行えばよい。たとえば、常圧加熱乾燥法、減圧加熱乾燥法、凍結乾燥法、スプレードライ法などが挙げられる。加熱による成分変化を最小限に抑えるためとコスト面とを考え、産業的には凍結乾燥法、スプレードライ法が好ましい。
【００３５】
また、本発明の茶抽出処理物中のＥＣｇの総量は、ＬＯＸ−１アンタゴニスト活性を期待する上から、全非重合型カテキン類中で、５０〜１００重量％であることが好ましい。ＥＣｇの総量の調整は、たとえば、上記カラム精製におけるＥＣｇの溶出画分の合一やさらなる濃縮により行なうことができる。
【００３６】
本発明の茶抽出処理物は、そのまま、または水などの液体に溶解させて摂食してもよく、さらに食品などに添加して摂食してもよい。本発明の茶抽出処理物を含む食品において、本発明の茶抽出処理物の含有量は特に限定されないが、固形分として０．１〜１００重量％であることが好ましい。食品としてはどのような形態でもよく、たとえば、飲料、アルコール飲料、ゼリー、菓子類、麺類、練り製品、食肉加工品、大豆加工品、乳製品、調味料、ドレッシングなどが挙げられる。菓子類の中でも、その容量等から保存や携帯に優れた、ハードキャンディ、ソフトキャンディ、グミキャンディ、タブレットなどが挙げられるが、特に限定はない。また、食品には、機能性食品、健康食品、健康志向食品なども含まれる。さらに、本発明の茶抽出処理物を、医薬品や医薬部外品などに使用してもよい。
【実施例】
【００３７】
次に、本発明を実施例に基づいて詳細に説明するが、本発明はかかる実施例にのみ限定されるものではない。
【００３８】
（製造例１）紅茶抽出液の作製
紅茶茶葉（茶加工品、商品名：ダージリンＢＯＰ、京都グレインシステム（株）製）１５ｇに対し、水４５０ｍＬを添加し、１００℃にて１０分加熱した。抽出液を綿布にて濾過し、室温まで放冷し、ｐＨ５．１の紅茶抽出液を得た。
【００３９】
（比較例１）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬを、ｐＨ調整および通気することなく３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４０】
（比較例２）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬを、ｐＨ調整することなく、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４１】
（比較例３）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬを、ｐＨ調整することなく、酸素を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４２】
（実施例１）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）３７．８ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを８．４に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４３】
（比較例４）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）３７．８ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを８．４に調製し、３時間撹拌して茶抽出処理物を得た。
【００４４】
（比較例５）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）３７．８ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを６．８に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間撹拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４５】
（実施例２）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬのｐＨを、水酸化ナトリウムを用いて、７．０に調製した。その後、酸素を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４６】
（実施例３）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）５．４ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを７．０に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４７】
（実施例４）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬのｐＨを、水酸化ナトリウムを用いて、７．５に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４８】
（実施例５）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）０．５４ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを７．５に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４９】
（実施例６）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）５．４ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを７．５に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００５０】
（実施例７）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、塩化ナトリウム（財団法人塩事業センター製）２．６ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを７．５に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００５１】
（実施例８）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、クエン酸８．６ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを７．５に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００５２】
（製造例２）緑茶抽出液の作製
緑茶茶葉（商品名：かりがね、（株）宇治森徳製）１５ｇに対し、水４５０ｍＬを添加し、１００℃にて１０分加熱した。得られた抽出液を綿布にて濾過し、緑茶抽出液を得た。
【００５３】
（実施例９）
製造例２と同様にして得られた緑茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）１８．９ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで緑茶抽出液のｐＨを８．４に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００５４】
（製造例３）カテキン含有液の作製
カテキン粉末（商品名：サンフェノン９０ｓ、太陽化学（株）製）０．９ｇを水４５０ｍｌに溶解させ、茶抽出液に相当するカテキン含有液を得た。
【００５５】
（実施例１０）
製造例３と同様にして得られたカテキン含有液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）５．４ｇを添加した後、水酸化ナトリウムでカテキン含有液のｐＨを８．０に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間撹拌し、茶抽出処理物を得た。
【００５６】
製造例１で得られた紅茶抽出液、製造例２で得られた緑茶抽出液、製造例３で得られたカテキン含有液ならびに実施例１〜１０および比較例１〜５で得られた各茶抽出処理物から、試料０．５ｍＬをサンプリングした。これらの試料を２Ｍの酢酸緩衝液０．５ｍＬを用いて２倍希釈し、ＨＰＬＣ測定を行った。表１〜３の結果については、ＨＰＬＣにおける測定値を２倍し、希釈前の数値を示した。表１に茶抽出液（製造例１〜３）の結果、表２に最終的に得られた茶抽出処理物の結果、表３に通気および撹拌開始から１時間後にサンプリングした茶抽出処理物の結果をそれぞれ示す。
【００５７】
ＨＰＬＣ分析条件を下記に示す。
カラム：逆相用カラム（商品名：ＣＯＳＭＯＳＩＬ Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒ、ナカライテスク（株）製、４．６ｍｍｉ．ｄ．×２５０ｍｍ）
移動相：Ｃ；Ｈ2Ｏ（０．１％トリフルオロ酢酸），Ｄ；アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸）
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
注入：１０μＬ
検出：２８０ｎｍ
勾配（容量％）：９５％Ｃ／５％Ｄから７０％Ｃ／３０％Ｄまで２５分間、７０％Ｃ／３０％Ｄから１００％Ｄまで２分間、１００％Ｄで８分間（全て直線）
【００５８】
検量線は、各種標準品、ＥＣｇ、ＥＧＣｇ（全て和光純薬工業（株）製）を用いて作成した。また、他のカテキン類であるＥＣ、ＥＧＣ、Ｃ、ＧＣ、Ｃｇ、ＧＣｇ、および没食子酸、カフェインのリテンションタイムとＥＣｇ、ＥＧＣｇのリテンションタイムには重なりがないことを確認した。
【００５９】
【表１】
【００６０】
【表２】
【００６１】
【表３】
【００６２】
表１、２の結果より、ｐＨ調整を行なっていない比較例１〜３および通気を行っていない比較例４では、ＥＣｇの含有重量ＡとＥＧＣｇの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂが３．０よりも低値であるのに対し、通気およびｐＨを７．０以上にするｐＨ調整を行った実施例１では、ＥＧＣｇのピークが消失し、Ａ／Ｂ＞９９となった。また、通気およびｐＨを６．８にするｐＨ調整を行なった比較例５ではＡ／Ｂが低値となったが、ｐＨを７．０に調整し、通気を行った実施例２、３ではＡ／Ｂが３．０以上となった。さらに、実施例４、５から塩を１０ｍＭ以上含有することで、ＥＧＣｇのピークが消失した。表３の実施例６、７、８の結果から、リン酸塩の添加により短時間においてもＡ／Ｂが３．０以上となり、リン酸塩の添加がより好ましいことが分かった。
【００６３】
（実施例１１）
実施例１で得られた茶抽出処理物４５０ｍＬを、スチレン系合成吸着剤（商品名：ダイヤイオンＨＰ−２０、三菱化学（株）製）を充填したカラムに流して脱塩し、限外濾過膜（商品名：Ｃｅｎｔｒｉｐｒｅｐ、ミリポア社製）を用いて重合物を除去後、凍結乾燥し、ＥＣｇ含有組成物を６０ｍｇ得た。
【００６４】
（実施例１２）
流動層造粒機にて造粒した砂糖１００重量部に対して、ショ糖脂肪酸エステル２重量部、メントール香料１重量部および実施例１１で得られた茶抽出処理物を凍結乾燥した粉末５重量部を添加混合した。得られた混合粉末を、直径１０ｍｍの丸型平型に圧縮打錠し、単重０．５ｇのタブレットを製造した。
【産業上の利用可能性】
【００６５】
本発明の茶抽出処理物を継続的に摂取することで、血管内皮細胞やマクロファージなどで発現しているＬＯＸ−１への酸化ＬＤＬの結合を、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）が効率的に阻害して、心血管病の予防効果や治療効果が期待される。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エピカテキンガレートを高含有する茶抽出処理物の製造方法に関するものである。エピカテキンガレートはツバキ科カメリア属に属する茶（チャ）から得られるＬＯＸ−１（レクチン様酸化低密度リポ蛋白質受容体）アンタゴニストである。
【背景技術】
【０００２】
ツバキ科カメリア属（Ｃａｍｅｌｌｉａ属）に属する植物である茶の葉（以下「茶葉」とする）には、他の植物に比べカテキン類が比較的多量に含有されている。
【０００３】
また、茶葉の加工品に含まれるカテキン類については、その含有量が報告されている。具体的には、緑茶に関しては玉露、煎茶、釜炒り茶、番茶、ほうじ茶についての分析値の報告があり、報告によっては多少のバラつきがあるが、主要なカテキン類は、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）およびエピカテキン（ＥＣ）の４種である。中でも最も多く含有されるのはＥＧＣｇであり、カテキン類全体の５０〜６０重量％を占める。
【０００４】
一方、その他のカテキン類の含有量は微量である。たとえば、ＥＣｇは主要カテキン成分の一つとされているものの、その含有量は茶葉の加工品の種類の間で差はあるものの、ＥＧＣｇ含有量に対して約１／４〜１／５前後である。紅茶は、緑茶と比較するとＥＣｇの含有量が多く、ＥＧＣｇと等量程度含まれる種類もあるものの、最も多く含有される成分はＥＧＣｇである。飲用茶は、茶葉の加工品を湯や水で抽出したものであるから、飲用茶中のカテキン類の構成も茶葉と類似した比率になる。
【０００５】
カテキン類中で最も含有量の多いＥＧＣｇは近年大きく注目され、さまざまな有効性が証明されている。また、その単離方法についても報告がなされている（特許文献１）。これに対し、ＥＧＣｇと同様に主要なカテキン類中でガレート型カテキンとして知られるＥＣｇは、ＥＧＣｇと比較して含有量が少ないため、活性や単離方法についてあまり検討されていない。茶抽出物中にはＥＣｇと分子構造の類似するＥＧＣｇが多量に含まれるため、たとえば、ＥＣｇのカラムなどによる単離は困難となっている。
【０００６】
そこで、必要量のＥＣｇを単離せずに茶で摂取しようとすると、ＥＧＣｇの含有量が相対的に多くなり、苦味が強くなりすぎるため、摂取は困難である。カテキン類はポリフェノールに属し、苦味や渋味が強いことが知られており、ガレート型カテキン類であるＥＧＣｇ、ＥＣｇ、カテキンガレート（Ｃｇ）およびガロカテキンガレート（ＧＣｇ）は、これらの間での苦味や渋味に大差はないものの、ＥＧＣやＥＣなどの非ガレート型カテキン類よりも苦味や渋味が強いことが示されている。中でもＥＧＣｇとＥＣｇの苦味・渋味閾値濃度は３倍程度低いとされている（非特許文献１）。
【０００７】
近年、喫煙、食生活などの生活習慣から動脈硬化の患者は増加傾向にある。したがって、より少量で、より苦味が少なく摂取しやすいＥＣｇ高含有製品が求められている。
【０００８】
一方、カテキン類のアルカリ領域での挙動について報告がなされている。非特許文献２、３では、アルカリ領域におけるＥＧＣｇ、ＥＧＣ、ＥＣｇおよびＥＣの量について研究されており、ＥＧＣｇとＥＧＣがアルカリ領域において比較的減少しやすいことが報告されている。しかし、茶抽出物では通常、ＥＧＣｇが多く含まれているため、ＥＣｇを高含有することは難しい。夾雑物の多い茶抽出物でのアルカリ領域における挙動は検討されているが、ＥＧＣｇに対するＥＣｇの含有比率を高めることを目的としておらず、これに関する記載もない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２００１−９７９６８号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】「食品の変色の化学」、ｐ１２４−ｐ１２５（光琳）
【非特許文献２】Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．，４５，４６２４−４６２８（１９９７）
【非特許文献３】Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，８３，１８９−１９５（２００３）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明者らは、以前に、酸化ＬＤＬによる血管内皮細胞への作用を媒介する受容体であるレクチン様酸化低密度リポ蛋白質受容体（ＬＯＸ−１）に着目し、強力なＬＯＸ−１アンタゴニストを同定するに至り、既に発明をなし、その作用・効果について詳細に報告している（特願２０１１−２３６４４８号）。同時に、ＬＯＸ−１アンタゴニストとして実用性の高い化合物が茶に存在することも明らかにしており、これらがＥＣｇとＣｇの２種のカテキンであることを初めて明らかにした。たとえば、ＥＣｇは、カテキン類の主要成分であるＥＧＣｇに比べて、５倍程度のアンタゴニスト活性を有していることが明らかになっている。そこで、強いアンタゴニスト活性を有するＥＣｇを高含有する製品が求められている。しかし、現在、ＥＣｇを産業用に精製した工業製品は知られていない。
【００１２】
そこで、本発明者らは、より健康機能性が期待される茶抽出処理物の開発を目的として、すでに本発明者らが発見した強力なＬＯＸ−１アンタゴニスト剤であるＥＣｇに着目し、鋭意研究を重ねた。その結果、本発明者らは、従来の茶抽出物においてカテキン類として含有量の少ないＥＣｇの、カテキン類の主成分であるＥＧＣｇに対する含有比率を顕著に高めることで、苦味や渋味の増加を極力抑えながらＥＣｇに由来する生理活性を付与した製品を得ることに成功し、その製造方法を確立するに至った。
【００１３】
したがって、本発明は、ＥＣｇを高含有する茶抽出処理物の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
即ち、本発明の要旨は、
（１）ツバキ科カメリア属に属する茶の抽出物を含有する液に、ｐＨを７．０以上に調整して酸素を含む気体を通気する処理を施し、エピカテキンガレートの含有重量Ａと、エピガロカテキンガレートの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂを３．０以上に高めることを特徴とする茶抽出処理物の製造方法、
（２）茶の抽出物の処理を、１０ｍＭ以上の塩の存在下で行なうことを特徴とする上記（１）に記載の茶抽出処理物の製造方法、および
（３）上記（１）または（２）に記載の製造方法により得られる茶抽出処理物を含有する食品、に関する。
【発明の効果】
【００１５】
本発明により、優れた健康機能性が期待されるエピカテキンガレート（ＥＣｇ）を高含有する茶抽出処理物を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明で使用するカテキン類は全て「非重合型カテキン類」のことを指し、さらに「非重合型カテキン類」とは、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）、エピカテキン（ＥＣ）およびエピガロカテキン（ＥＧＣ）のエピ体カテキン類、ならびに、カテキンガレート（Ｃｇ）、ガロカテキンガレート（ＧＣｇ）、カテキン（Ｃ）およびガロカテキン（ＧＣ）の非エピ体カテキン類をあわせた総称である。
【００１７】
本発明において、茶抽出処理物の原料としては、ツバキ科カメリア属に属する植物である茶（チャ）を抽出することにより得られる茶抽出物を含有する液を用いる。茶は、カメリア・シネンシス（学名）または茶の木（和名）などとも呼ばれ、中国種とアッサム種の２種類がある。茶の中でも、茶葉を用いるのが好ましい。本発明では、茶には、茶の加工品が含まれる。茶の加工品としては種々のものが知られているが、なかでも、日常的に飲用されている、不発酵茶である各種緑茶、半発酵茶である烏龍茶、強発酵茶である紅茶、後発酵茶である黒茶、プーアル茶などが、安全性が高く、安心感もあり、また原材料が入手しやすい観点から好ましい。また、一般に、ＥＣｇ含有率が比較的高い紅茶は、更に好ましい。
【００１８】
茶抽出物を含有する液としては、茶由来のＥＣｇを含有する液状物であれば特に限定されないが、たとえば、茶抽出液が挙げられる。茶抽出液は、茶葉を濾過することなくそのまま用いてもよく、または濾過により茶葉を除去して用いてもよく、さらに濃縮して用いても良い。また、茶抽出液から得られる乾燥物または精製物を含有する液、一般的な各種飲用茶などを茶抽出物として用いてもよい。茶抽出液から得られる乾燥物または精製物は市販されており、たとえば、ポリフェノン（登録商標、三井農林（株）製）、サンフェノン（登録商標、太陽化学（株）製）などが挙げられる。
【００１９】
茶抽出液は、たとえば、茶に含まれる各成分を溶媒に抽出することにより得られる。溶媒としては、水や有機溶媒、水と有機溶媒との混合溶媒などを使用できる。水としては特に限定されず、工業用水、上水、蒸留水、脱イオン水などを使用できる。有機溶媒としては、メタノール、エタノール、アセトン、酢酸エチル、クロロホルム等が挙げられる。好ましくは、親水性のメタノール、エタノール、アセトンが挙げられ、より好ましくはエタノールが食品用途としては適している。
【００２０】
抽出方法としては、茶と溶媒とを接触させた状態での、静置抽出、攪拌抽出、加温抽出、加温加圧抽出、還流抽出、超臨界抽出などが挙げられる。あるいは、茶を充填したカラムに溶媒を繰り返し流して抽出を行なってもよい。これらの抽出方法の中でも、短時間で効率的に抽出する観点からは、加温抽出や加温加圧抽出が望ましい。抽出操作は必要に応じて繰返し実施してもよい。また、２種以上の異なる抽出操作を組み合わせて実施してもよい。
【００２１】
本発明において、茶の抽出に用いる溶媒の量は特に限定されないが、茶の全使用量に対して重量基準で好ましくは５〜１００倍量、さらに好ましくは５〜８０倍量である。抽出温度は、茶や溶媒の量、茶や溶媒の種類、抽出装置、抽出スケールなどにより適宜選択すればよいが、好ましくは０℃〜１００℃、より好ましくは２０℃〜１００℃、さらに好ましくは４０〜１００℃である。抽出時間は、抽出方法、抽出装置の種類、抽出装置の大きさや処理量といったスケールの大きさなどに応じて適宜設定すればよいが、抽出時の時間的なコストなどを考えると、好ましくは１〜１００分、さらに好ましくは１〜８０分である。このようにして、茶抽出物を得ることができる。
【００２２】
なお、茶の抽出を４０℃〜１００℃程度の加熱下に実施している場合、得られた茶抽出物をそのまま後述する特定の処理に供してもよいが、室温程度に冷却した後に後述する特定の処理に供することが好ましい。
【００２３】
本発明では、茶抽出物に特定の処理を施すことにより、本発明の茶抽出処理物を得ることができる。特定の処理とは、茶抽出物のｐＨを７．０以上、好ましくは７．０〜９．０に調整する第１工程と、ｐＨ７．０以上に調整された茶抽出物に、酸素を含有する気体を通気する第２工程とを含んでいる。
【００２４】
第１工程において、茶抽出物のｐＨを７．０以上に調整することにより、最終的に得られる茶抽出処理物中のＥＧＣｇ含有量を顕著に減少させることができる。茶抽出物のｐＨが７．０未満では、最終的に得られる茶抽出処理物におけるＥＣｇの含有重量ＡとＥＧＣｇの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂが３．０未満になり、ＥＧＣｇの含有重量ＢがＥＣｇの含有重量Ａよりも相対的に多くなって、同量のＥＣｇを摂取しようとした際に苦みや渋みの強い茶抽出処理物が得られる。また、茶抽出物のｐＨが９．０を大幅に超えると、ＥＣｇの加水分解反応が起こる懸念がある。
【００２５】
第１工程において、ｐＨ調整方法は特に限定されないが、ｐＨ調整剤を用いる方法が好ましい。ｐＨ調整剤とは、食品のｐＨを適切に調整して、食品の変質や変色を防止し、他の食品添加物の効果を向上させるために用いられる食品添加物をいう。現在、食品のｐＨ調整には、主にリン酸やリン酸の金属塩、有機酸や有機酸の金属塩、食品添加物グレードの塩酸や硫酸、水酸化ナトリウム、重曹などが用いられている。本発明におけるｐＨ調整剤には食品添加物として使用可能な製品であれば特に制限はない。
【００２６】
第２工程において、第１工程でｐＨを７．０以上に調整した茶抽出物中に、酸素を含む気体を強制的に吹き込み、前記茶抽出物に酸素を含む気体を積極的に接触させる。酸素を含む気体としては、酸素、空気、酸素と炭酸ガスとの混合気体、酸素と不活性ガス（窒素、アルゴンなど）との混合気体などが挙げられる。これらの中でも、コスト、産業上の安全性などの観点から、酸素や空気が好ましく、空気がより好ましい。通気方法としては特に限定されず、たとえば、圧縮気体を細かい気泡として茶抽出物中に分散させる散気法、攪拌も同時に行うタービン法などが挙げられる。
【００２７】
通気における気体の通気量および通気時間は特に限定されず、気体の種類、気体中の酸素含有量、茶抽出物の量など種々の条件に応じて広い範囲から適宜選択されるが、たとえば、１リットルの茶抽出物を含有する液に対して、通気量は３〜６ＳＬＰＭ（standard L／分）程度である。通気時間は１〜２００分程度である。
【００２８】
本発明においては、塩の存在下で、第１工程と第２工程とを含む前記処理を実施することが好ましい。より具体的には、茶抽出物および塩を含有する液を用いて、第１工程と第２工程とを実施することが好ましい。これにより、最終的に得られる茶抽出処理物中のＥＧＣｇ含有量を顕著に低減化できる。本発明での塩とは、酸と塩基の中和反応によって生じる化合物であり、酸の陰性成分と塩基の陽性成分からなるものをいう。塩としては、食品に使用可能である食塩、リン酸塩、有機酸塩などが好ましく、中でもリン酸二水素ナトリウム、リン酸水素二ナトリウムなどのリン酸塩がより好ましい。塩は１種を単独でまたは２種以上を組み合わせて使用できる。
【００２９】
茶抽出物を含有する液に添加される塩の濃度は、好ましくは１０ｍＭ以上、さらに好ましくは１０ｍＭ〜１０００ｍＭである。塩の量が１０ｍＭ以上であることにより、最終的に得られる茶抽出処理物中でのＥＧＣｇ含有量をより一層少なくし、ＥＣｇを高含有し、ＥＧＣｇの含有量が少なくなり、苦みや渋みが相対的に少ない茶抽出処理物が得られるといった利点が得られる。また、塩濃度が１０００ｍＭを大幅に超えても塩を添加する効果は変わらないが、塩の溶解度やコストなどの面から、この程度を上限としてもよい。
【００３０】
こうして、ＥＣｇとＥＧＣｇとを含有し、ＥＣｇの含有重量Ａと、ＥＧＣｇの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂが３．０以上であり、かつ、ｐＨが７．０以上である本発明の茶抽出処理物が得られる。比Ａ／Ｂが３．０以上であることにより、ＥＣｇを高含有し、かつ、ＥＧＣｇに由来する苦みの少ない、摂食し易い茶抽出処理物になる。なお、上記のｐＨ調整、通気および塩濃度から選ばれる少なくとも１種の条件を変更することにより、ＥＣｇを含有しかつＥＧＣｇを含有しない茶抽出処理物（比Ａ／Ｂ＞９９と示す）が得られることがある。このような場合も、比Ａ／Ｂが３．０以上である場合に含まれる。
【００３１】
また、本発明の茶抽出処理物において、ＥＣｇの含有重量Ａは、原料である茶抽出物におけるＥＣｇの含有重量の１／５以上にすることが好ましい。これは、茶抽出物のｐＨ、塩の添加量、通気時間や通気量などを適宜変更することにより、調整可能である。
【００３２】
本発明の茶抽出処理物を食品などに使用する場合、脱塩や重合物の除去を既知の方法で行ったほうが風味の面で好ましい。たとえば、合成吸着剤を充填したカラムでの精製や、限外濾過膜などを利用して、脱塩や重合物の除去を行なう。
【００３３】
本発明に用いる合成吸着剤としては、たとえば、ダイヤイオンＨＰ２０、セパビーズＳＰ７０、ＳＰ８５０、ＳＰ８２５、ＳＰ７００（いずれも商品名、三菱化学（株）製）、アンバーライトＸＡＤ４、ＸＡＤ１６ＨＰ、ＸＡＤ２０００、（いずれも商品名、オルガノ（株）製）などのスチレン系合成吸着剤、セパビーズＳＰ２０５（商品名、三菱化学（株）製）などの修飾スチレン系合成吸着剤、ダイヤイオンＨＰ１ ＭＧ（商品名、三菱化学（株）製）などのメタクリル系合成吸着剤、アンバーライトＸＡＤ７ＨＰ（商品名、オルガノ（株）製）などのアクリル系合成吸着剤、アンバーライトＸＡＤ７６１（商品名、オルガノ（株）製）などのフェノール系合成吸着剤などが挙げられる。なかでも、スチレン系合成吸着剤が非重合型カテキン類の分離に実績が多く、コストの点や製造スケールアップしやすい点から好ましい。特に汎用されているダイヤイオンＨＰ２０が望ましい。
【００３４】
カラムでの精製において、目的成分、より具体的にはＥＣｇが溶出された画分を合一した後、濃縮を行ってもよい。濃縮方法は公知の方法に準じて行えばよい。たとえば、常圧加熱乾燥法、減圧加熱乾燥法、凍結乾燥法、スプレードライ法などが挙げられる。加熱による成分変化を最小限に抑えるためとコスト面とを考え、産業的には凍結乾燥法、スプレードライ法が好ましい。
【００３５】
また、本発明の茶抽出処理物中のＥＣｇの総量は、ＬＯＸ−１アンタゴニスト活性を期待する上から、全非重合型カテキン類中で、５０〜１００重量％であることが好ましい。ＥＣｇの総量の調整は、たとえば、上記カラム精製におけるＥＣｇの溶出画分の合一やさらなる濃縮により行なうことができる。
【００３６】
本発明の茶抽出処理物は、そのまま、または水などの液体に溶解させて摂食してもよく、さらに食品などに添加して摂食してもよい。本発明の茶抽出処理物を含む食品において、本発明の茶抽出処理物の含有量は特に限定されないが、固形分として０．１〜１００重量％であることが好ましい。食品としてはどのような形態でもよく、たとえば、飲料、アルコール飲料、ゼリー、菓子類、麺類、練り製品、食肉加工品、大豆加工品、乳製品、調味料、ドレッシングなどが挙げられる。菓子類の中でも、その容量等から保存や携帯に優れた、ハードキャンディ、ソフトキャンディ、グミキャンディ、タブレットなどが挙げられるが、特に限定はない。また、食品には、機能性食品、健康食品、健康志向食品なども含まれる。さらに、本発明の茶抽出処理物を、医薬品や医薬部外品などに使用してもよい。
【実施例】
【００３７】
次に、本発明を実施例に基づいて詳細に説明するが、本発明はかかる実施例にのみ限定されるものではない。
【００３８】
（製造例１）紅茶抽出液の作製
紅茶茶葉（茶加工品、商品名：ダージリンＢＯＰ、京都グレインシステム（株）製）１５ｇに対し、水４５０ｍＬを添加し、１００℃にて１０分加熱した。抽出液を綿布にて濾過し、室温まで放冷し、ｐＨ５．１の紅茶抽出液を得た。
【００３９】
（比較例１）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬを、ｐＨ調整および通気することなく３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４０】
（比較例２）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬを、ｐＨ調整することなく、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４１】
（比較例３）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬを、ｐＨ調整することなく、酸素を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４２】
（実施例１）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）３７．８ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを８．４に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４３】
（比較例４）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）３７．８ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを８．４に調製し、３時間撹拌して茶抽出処理物を得た。
【００４４】
（比較例５）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）３７．８ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを６．８に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間撹拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４５】
（実施例２）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬのｐＨを、水酸化ナトリウムを用いて、７．０に調製した。その後、酸素を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４６】
（実施例３）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）５．４ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを７．０に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４７】
（実施例４）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬのｐＨを、水酸化ナトリウムを用いて、７．５に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４８】
（実施例５）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）０．５４ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを７．５に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００４９】
（実施例６）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）５．４ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを７．５に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００５０】
（実施例７）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、塩化ナトリウム（財団法人塩事業センター製）２．６ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを７．５に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００５１】
（実施例８）
製造例１と同様にして得られた紅茶抽出液４５０ｍＬに、クエン酸８．６ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで紅茶抽出液のｐＨを７．５に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００５２】
（製造例２）緑茶抽出液の作製
緑茶茶葉（商品名：かりがね、（株）宇治森徳製）１５ｇに対し、水４５０ｍＬを添加し、１００℃にて１０分加熱した。得られた抽出液を綿布にて濾過し、緑茶抽出液を得た。
【００５３】
（実施例９）
製造例２と同様にして得られた緑茶抽出液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）１８．９ｇを添加した後、水酸化ナトリウムで緑茶抽出液のｐＨを８．４に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間攪拌し、茶抽出処理物を得た。
【００５４】
（製造例３）カテキン含有液の作製
カテキン粉末（商品名：サンフェノン９０ｓ、太陽化学（株）製）０．９ｇを水４５０ｍｌに溶解させ、茶抽出液に相当するカテキン含有液を得た。
【００５５】
（実施例１０）
製造例３と同様にして得られたカテキン含有液４５０ｍＬに、リン酸二水素ナトリウム（太平化学産業（株）製）５．４ｇを添加した後、水酸化ナトリウムでカテキン含有液のｐＨを８．０に調製した。その後、空気を２ＳＬＰＭ通気しながら３時間撹拌し、茶抽出処理物を得た。
【００５６】
製造例１で得られた紅茶抽出液、製造例２で得られた緑茶抽出液、製造例３で得られたカテキン含有液ならびに実施例１〜１０および比較例１〜５で得られた各茶抽出処理物から、試料０．５ｍＬをサンプリングした。これらの試料を２Ｍの酢酸緩衝液０．５ｍＬを用いて２倍希釈し、ＨＰＬＣ測定を行った。表１〜３の結果については、ＨＰＬＣにおける測定値を２倍し、希釈前の数値を示した。表１に茶抽出液（製造例１〜３）の結果、表２に最終的に得られた茶抽出処理物の結果、表３に通気および撹拌開始から１時間後にサンプリングした茶抽出処理物の結果をそれぞれ示す。
【００５７】
ＨＰＬＣ分析条件を下記に示す。
カラム：逆相用カラム（商品名：ＣＯＳＭＯＳＩＬ Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒ、ナカライテスク（株）製、４．６ｍｍｉ．ｄ．×２５０ｍｍ）
移動相：Ｃ；Ｈ2Ｏ（０．１％トリフルオロ酢酸），Ｄ；アセトニトリル（０．１％トリフルオロ酢酸）
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
注入：１０μＬ
検出：２８０ｎｍ
勾配（容量％）：９５％Ｃ／５％Ｄから７０％Ｃ／３０％Ｄまで２５分間、７０％Ｃ／３０％Ｄから１００％Ｄまで２分間、１００％Ｄで８分間（全て直線）
【００５８】
検量線は、各種標準品、ＥＣｇ、ＥＧＣｇ（全て和光純薬工業（株）製）を用いて作成した。また、他のカテキン類であるＥＣ、ＥＧＣ、Ｃ、ＧＣ、Ｃｇ、ＧＣｇ、および没食子酸、カフェインのリテンションタイムとＥＣｇ、ＥＧＣｇのリテンションタイムには重なりがないことを確認した。
【００５９】
【表１】
【００６０】
【表２】
【００６１】
【表３】
【００６２】
表１、２の結果より、ｐＨ調整を行なっていない比較例１〜３および通気を行っていない比較例４では、ＥＣｇの含有重量ＡとＥＧＣｇの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂが３．０よりも低値であるのに対し、通気およびｐＨを７．０以上にするｐＨ調整を行った実施例１では、ＥＧＣｇのピークが消失し、Ａ／Ｂ＞９９となった。また、通気およびｐＨを６．８にするｐＨ調整を行なった比較例５ではＡ／Ｂが低値となったが、ｐＨを７．０に調整し、通気を行った実施例２、３ではＡ／Ｂが３．０以上となった。さらに、実施例４、５から塩を１０ｍＭ以上含有することで、ＥＧＣｇのピークが消失した。表３の実施例６、７、８の結果から、リン酸塩の添加により短時間においてもＡ／Ｂが３．０以上となり、リン酸塩の添加がより好ましいことが分かった。
【００６３】
（実施例１１）
実施例１で得られた茶抽出処理物４５０ｍＬを、スチレン系合成吸着剤（商品名：ダイヤイオンＨＰ−２０、三菱化学（株）製）を充填したカラムに流して脱塩し、限外濾過膜（商品名：Ｃｅｎｔｒｉｐｒｅｐ、ミリポア社製）を用いて重合物を除去後、凍結乾燥し、ＥＣｇ含有組成物を６０ｍｇ得た。
【００６４】
（実施例１２）
流動層造粒機にて造粒した砂糖１００重量部に対して、ショ糖脂肪酸エステル２重量部、メントール香料１重量部および実施例１１で得られた茶抽出処理物を凍結乾燥した粉末５重量部を添加混合した。得られた混合粉末を、直径１０ｍｍの丸型平型に圧縮打錠し、単重０．５ｇのタブレットを製造した。
【産業上の利用可能性】
【００６５】
本発明の茶抽出処理物を継続的に摂取することで、血管内皮細胞やマクロファージなどで発現しているＬＯＸ−１への酸化ＬＤＬの結合を、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）が効率的に阻害して、心血管病の予防効果や治療効果が期待される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ツバキ科カメリア属に属する茶の抽出物を含有する液に、ｐＨを７．０以上に調整して酸素を含む気体を通気する処理を施し、エピカテキンガレートの含有重量Ａと、エピガロカテキンガレートの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂを３．０以上に高めることを特徴とする茶抽出処理物の製造方法。
【請求項２】
前記処理を、１０ｍＭ以上の塩の存在下で行なうことを特徴とする請求項１に記載の茶抽出処理物の製造方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の製造方法により得られる茶抽出処理物を含有する食品。
【請求項１】
ツバキ科カメリア属に属する茶の抽出物を含有する液に、ｐＨを７．０以上に調整して酸素を含む気体を通気する処理を施し、エピカテキンガレートの含有重量Ａと、エピガロカテキンガレートの含有重量Ｂとの比Ａ／Ｂを３．０以上に高めることを特徴とする茶抽出処理物の製造方法。
【請求項２】
前記処理を、１０ｍＭ以上の塩の存在下で行なうことを特徴とする請求項１に記載の茶抽出処理物の製造方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の製造方法により得られる茶抽出処理物を含有する食品。
【公開番号】特開２０１３−１１１０５１（Ｐ２０１３−１１１０５１Ａ）
【公開日】平成２５年６月１０日（２０１３．６．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−２６２２５７（Ｐ２０１１−２６２２５７）
【出願日】平成２３年１１月３０日（２０１１．１１．３０）
【出願人】（３９００２０１８９）ユーハ味覚糖株式会社 (242)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年６月１０日（２０１３．６．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年１１月３０日（２０１１．１１．３０）
【出願人】（３９００２０１８９）ユーハ味覚糖株式会社 (242)
【Ｆターム（参考）】
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