【課題】腫瘍及び繊維形成性疾患において、繊維形成と、繊維芽細胞の活性化とを減少させる方法及び組成物を提供する。
【解決手段】本発明に係る方法は、細胞外酵素リシルオキシダーゼＬｉｋｅ２の活性を阻害することによって、腫瘍環境を調節する。本発明に係る方法は、腫瘍の成長を減少させること、腫瘍の細胞の増殖を減少させること、繊維芽細胞の活性化を減少させること、線維形成を減少させること、コラーゲン沈着を阻害すること、腫瘍の壊死及び核凝縮を増加させることに有効である。ＬＯＸＬ２活性の阻害剤の例は、抗体及びｓｉＲＮＡである。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍環境における繊維芽細胞の活性化を阻害する方法であって、
リシルオキシダーゼｌｉｋｅ２（ＬＯＸＬ２）の活性を阻害することを含む方法。
【請求項２】
前記繊維芽細胞の活性化が、トランスフォーミング成長因子−β（ＴＧＦ−β）のシグナリングによって媒介されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＬＯＸＬ２の活性の阻害が、細胞外マトリックスの組織非形成をもたらすことを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４】
細胞外マトリックスの組織非形成が、腫瘍ストロマ内の細胞の細胞骨格の崩壊をもたらすことを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記繊維芽細胞が腫瘍関連性繊維芽細胞（ＴＡＦｓ）であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項６】
繊維芽細胞が筋繊維芽細胞であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項７】
腫瘍環境における繊維形成を阻害する方法であって、リシルオキシダーゼｌｉｋｅ２（ＬＯＸＬ２）の活性を阻害することを含む方法。
【請求項８】
腫瘍が転移性腫瘍であることを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
腫瘍環境における血管形成を阻害する方法であって、リシルオキシダーゼｌｉｋｅ２（ＬＯＸＬ２）の活性を阻害することを含む方法。
【請求項１０】
前記血管形成が、腫瘍環境への血管細胞又は血管前駆細胞の増殖（リクルートメント）を含むことを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記血管形成が、血管の枝状化を含むことを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記血管形成が、血管の長さの増加を含むことを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記血管形成が、血管の本数の増加を含むことを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
腫瘍ストロマ内の腫瘍関連性繊維芽細胞（ＴＡＦｓ）の細胞数を減少させるための方法であって、リシルオキシダーゼｌｉｋｅ２（ＬＯＸＬ２）の活性を阻害することを含む方法。
【請求項１５】
腫瘍環境におけるコラーゲン沈着を阻害する方法であって、
リシルオキシダーゼｌｉｋｅ２（ＬＯＸＬ２）の活性を阻害することを含む方法。
【請求項１６】
腫瘍環境を調節する方法であって、
リシルオキシダーゼｌｉｋｅ２（ＬＯＸＬ２）の活性を阻害することを含む方法。
【請求項１７】
前記調節が、繊維形成の減少を含むことを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記調節が、腫瘍関連性繊維芽細胞（ＴＡＦｓ）の細胞数の減少を含むことを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記調節が、筋繊維芽細胞の細胞数の減少を含むことを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
前記調節が、細胞の細胞骨格のリモデリング（再構築）を含むことを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
前記細胞が、腫瘍細胞であることを特徴とする請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記細胞が、繊維芽細胞であることを特徴とする請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記細胞が、内皮細胞であることを特徴とする請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
前記調節が、腫瘍血管系の減少を含むことを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２５】
前記調節が、コラーゲン生成の減少を含むことを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２６】
前記調節が、繊維芽細胞の活性化の減少を含むことを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２７】
前記調節が、腫瘍環境への繊維芽細胞の増殖（リクルートメント）の阻害を含むことを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２８】
ストロマ成分をコードする遺伝子の発現の減少を含むことを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項２９】
前記ストロマ成分が、α−平滑筋アクチン、タイプＩコラーゲン、ビメンチン、マトリックスメタロプロテアーゼ９及びフィブロネクチンから成る群から選択されることを特徴とする請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
腫瘍環境における成長因子の生成を調節する方法であって、リシルオキシダーゼｌｉｋｅ２（ＬＯＸＬ２）の活性を阻害することを含む方法。
【請求項３１】
成長因子が、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）及びストロマ細胞由来因子１（ＳＤＦ−１）から成る群から選択されることを特徴とする請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
腫瘍の壊死を増加させる方法であって、
リシルオキシダーゼｌｉｋｅ２（ＬＯＸＬ２）の活性を阻害することを含む方法。
【請求項３３】
腫瘍における核凝縮を増加させる方法であって、
リシルオキシダーゼｌｉｋｅ２（ＬＯＸＬ２）の活性を阻害することを含む方法。
【請求項３４】
ＬＯＸＬ２の活性が、抗ＬＯＸＬ２抗体を使用して阻害されることを特徴とする請求項１、７、９、１４、１５、１６、３０、３２又は３３の何れか１項に記載の方法。
【請求項３５】
抗体が、配列番号１に記載された重鎖配列及び配列番号２に記載された軽鎖配列を含むことを特徴とする請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
抗体が、ヒトに適合化させた抗体（ヒト化抗体）であることを特徴とする請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
抗体が、配列番号３に記載された重鎖配列及び配列番号４に記載された軽鎖配列を含むことを特徴とする請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
ＬＯＸＬ２の活性が、核酸を使用して阻害されることを特徴とする 請求項１、７、９、１４、１５、１６、３０、３２又は３３の何れか１項に記載の方法。
【請求項３９】
核酸が、ｓｉＲＮＡであることを特徴とする請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
ＬＯＸＬ２の阻害剤を同定する方法であって、
腫瘍環境を調節する能力について、テスト分子を分析することを含む方法。
【請求項４１】
前記調節が、繊維形成の減少を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記調節が、腫瘍関連性繊維芽細胞（ＴＡＦｓ）の細胞数の減少を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
前記調節が、筋繊維芽細胞の細胞数の減少を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
前記調節が、細胞の細胞骨格のリモデリングを含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項４５】
前記細胞が、腫瘍細胞であることを特徴とする請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記細胞が、繊維芽細胞であることを特徴とする請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
前記細胞が、内皮細胞であることを特徴とする請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】
前記調節が、腫瘍血管系の減少を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項４９】
腫瘍血管系の減少が、ＣＤ３１、及び／又は、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）のレベルの減少によって証明されることを特徴とする請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記調節が、コラーゲン生成の減少、及び／又は、コラーゲンクロスリンキングの度合いの減少を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項５１】
前記調節が、繊維芽細胞の活性化の減少を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項５２】
前記調節が、腫瘍環境への繊維芽細胞の増殖（リクルートメント）の阻害を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項５３】
ストロマ成分をコードする遺伝子の発現の減少を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項５４】
ストロマ成分が、α−平滑筋アクチン、タイプＩコラーゲン、ビメンチン、マトリックスメタロプロテアーゼ９及びフィブロネクチンから成る群から選択されることを特徴とする請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記調節が、腫瘍環境における ストロマ細胞由来因子１（ＳＤＦ−１）のレベルの減少を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項５６】
前記調節が、腫瘍の細胞における、壊死及び／又は核凝縮の発生率の増加を含むことを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項５７】
テスト分子が、分子量１ｋＤ未満の小（Small）有機分子であることを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項５８】
テスト分子が、ポリペプチドであることを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項５９】
ポリペプチドが、抗体であることを特徴とする請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
テスト分子が、核酸であることを特徴とする請求項４０に記載の方法。
【請求項６１】
核酸が、ｓｉＲＮＡであることを特徴とする請求項６０に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５−１】

【図５−２】

【図６】

【図７−１】

【図７−２】

【図８−１】

【図８−２】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【公表番号】特表２０１３−５０２４３７（Ｐ２０１３−５０２４３７Ａ）
【公表日】平成２５年１月２４日（２０１３．１．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５２５７４９（Ｐ２０１２−５２５７４９）
【出願日】平成２２年８月２０日（２０１０．８．２０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０４６２４８
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０２２７１０
【国際公開日】平成２３年２月２４日（２０１１．２．２４）
【出願人】（５１２０４３５８８）ギリアド　バイオロジクス，インク． (7)
【氏名又は名称原語表記】ＧＩＬＥＡＤ　ＢＩＯＬＯＧＩＣＳ，ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】