浮遊ウイルス不活化評価方法およびその装置
【課題】空間中にウイルスを安定的に浮遊させることができ、ウイルス不活化評価を高精度に行うことが可能な浮遊ウイルス不活化評価方法およびその装置の提供。
【解決手段】隔離壁により外部空間と隔離された評価室１内に、安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス含有浮遊粒子を供給し、評価室１内の浮遊ウイルスの数を計測して評価する。
【解決手段】隔離壁により外部空間と隔離された評価室１内に、安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス含有浮遊粒子を供給し、評価室１内の浮遊ウイルスの数を計測して評価する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、浮遊ウイルス不活化評価方法およびその装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
新型インフルエンザ（Ｈ１Ｎ１）の流行により、空気清浄機などのウイルスを不活化または除去する家電製品のニーズが高まっている。ウイルスを不活化・除去する方法としては、従来から提案されているＨＥＰＡ等を用いたフィルターによる空気中のウイルス浮遊粒子の除去方法がある。この方法は、空気中の微小物質を物理的に捕集することにより、空気中から除去するものである。また、近年はラジカルやイオンに代表される様々な空気浄化技術が注目されている。この技術は、不活化デバイスにより生成したラジカルやイオン等の変性や分解等の作用により、空気中に浮遊するウイルスの有害性をなくす方法である。
【０００３】
このような技術を用いた家電製品の開発においては、該製品の性能評価を正確に行うことにより、要求される空気浄化機能と低エネルギー化等を両立させた設計が可能になる。このため、空気環境の測定技術は商品開発において非常に重要なものとなっており、浮遊ウイルスの不活化評価方法の確立が不可欠となっている。
【０００４】
特許文献１においては、微生物の除去評価方法および装置を利用して、閉じられた空間内の浮遊物質に何らかの作用を施すことによる除去効果試験の定量的評価を効果的に行えることを提案している。
【０００５】
また、特許文献２には、隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に微生物を浮遊させ、微生物を除去するための除去粒子を放出した後、評価室内の微生物を採取して測定し、除去粒子による除去効果を評価する装置が提案されている。この装置では、隔離壁のほぼ全面に多数の空気供給孔を設け、この空気供給孔から評価室内へ空気を流入させ、この空気流により、隔離壁付近の微生物を評価室内側へはじき飛ばすようにしている。これにより、隔離壁に微小物質が付着するのを防止して評価室内に安定的に微生物を浮遊させるようにしている。
【０００６】
また、評価室内に浮遊しているウイルスの数を計測するにあたっては、浮遊しているウイルスを回収液中に採取し、そのウイルス懸濁液中のウイルス数を、５０％ tissue culture infective dose（TCID50）法やプラーク法を用いて計測する方法が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００４−１５９５０８号公報（第７頁、第８頁、図１）
【特許文献２】ＷＯ２００８／０１０３９４Ａ１号公報（図２）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
空気中のウイルス粒子に対する不活化効果を調べるには、比較的長時間での浮遊ウイルス不活化効果を調べる必要がある。よって、評価室内に、ウイルスを長時間安定して浮遊させる必要がある。しかしながら、特許文献１の技術では、評価対象の浮遊物質を評価室内に安定的に浮遊させる点について考慮されていない。
【０００９】
特許文献２の技術では、評価対象の浮遊物質を評価室内に安定的に浮遊させる点について考慮されている。しかし、特許文献２では、その方法として、壁面等から空気を送る方法を採用している。この方法は、特許文献２のように浮遊物質として芽胞形成菌を用いる場合には有効であるが、乾燥に弱いウイルスに対しては有効ではない。すなわち、この方法でウイルスを浮遊させたとしても、著しく自然減衰してしまい、安定的に浮遊させることはできない。よって、そのようなウイルス浮遊環境下で評価試験を行っても、ウイルス不活化デバイスの効果を正当に評価することはできず、十分な精度で評価試験を行うことができないという問題があった。
【００１０】
また、上記の５０％ tissue culture infective dose（TCID50）法やプラーク法によるウイルス数の計測は、感染細胞の細胞変性効果（Cytopathic effect, CPE）や培養細胞に生ずるプラークを指標としている。このため、測定方法、操作法が煩雑で、且つ判定方法にかなりの習熟度を必要とし、さらには、判定までに１日から約一週間の日数を必要とするという問題があった。
【００１１】
本発明は、上述のような問題点を解決するためになされたものであり、評価室中にウイルスを安定的に浮遊させることができ、ウイルス不活化評価を高精度に行うことが可能な浮遊ウイルス不活化評価方法およびその装置を提供することを第１の目的とする。
【００１２】
また、本発明は、空間中のウイルスを迅速に測定可能な浮遊ウイルス不活化評価方法およびその装置を提供することを第２の目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明に係る浮遊ウイルス不活化評価方法は、隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に、安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス含有浮遊粒子（以下、ウイルス粒子）を供給し、評価室内の浮遊ウイルスの数を計測して評価するものである。
【００１４】
また、本発明に係る浮遊ウイルス不活化評価方法は、隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に所定のウイルス液を噴霧することにより、評価室内に、所定の粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、所定の粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより評価室内のウイルス数を計測して評価するものである。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、評価室内に、安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス含有浮遊粒子を供給するため、評価室内にウイルス粒子を安定して浮遊させることができる。よって、ウイルスの不活化評価を高精度に行うことができる。
また、本発明によれば、所定のウイルス液を噴霧して、評価室内に、所定の粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、所定の粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより評価室内のウイルス数を計測するため、評価室内のウイルス数を迅速に測定することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明の実施の形態１に係る浮遊ウイルス不活化評価装置を示す概略断面図である。
【図２】ウイルス液中の残栄養塩濃度と、その濃度のウイルス液を噴霧した際の粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数との関係を示した図である。
【図３】ウイルス液中の残栄養塩濃度と、その濃度のウイルス液を噴霧した際の、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子の全粒子数に占める割合との関係を示した図である。
【図４】残栄養塩濃度と表面張力との関係を示した図である。
【図５】残栄養塩濃度と電気伝導度との関係を示した図である。
【図６】噴霧高さを変えた場合の浮遊ウイルス粒子数を示した図である。
【図７】壁からの噴霧位置を変えた場合の浮遊ウイルス粒子数を示した図である。
【図８】ＪＩＳ３８００Ｋで規定されているミゼットインピンジャーを示した図である。
【図９】流速と浮遊ウイルス回収量の関係の一例を示した図である。
【図１０】評価室床面・壁面の帯電量と浮遊ウイルス付着数の関係を示した図である。
【図１１】風向き可変攪拌方法を用いた場合の評価室内での空気の流れを示す図である。
【図１２】空間体積１０ｍ3の室内空気を、風向き可変攪拌ファンを７．８ｍ3／分の風量で攪拌した場合の、ウイルス噴霧時の評価室内での浮遊粒子測定ポイント（７箇所）での粒子径０．３〜０．５μｍの浮遊粒子数の経時変化を示す流量と浮遊ウイルス回収量の関係の一例を示した図である。
【図１３】評価室内の浮遊粒子数測定ポイントを示した図である。
【図１４】空間体積１０ｍ3の室内空気を、攪拌しなかった場合のウイルス噴霧時の評価室内での浮遊粒子測定ポイント（６箇所）での粒子径０．３〜０．５μｍの浮遊粒子数の経時変化を示した図である。
【図１５】図１の採取部４ｂの概略構成を示す図である。
【図１６】実施の形態１による空気調和装置を運転しない状態でのウイルス数変化を計測した結果である。
【図１７】実施の形態１による空気調和装置を運転した状態でのウイルス数変化を計測した結果である。
【図１８】実施の形態１による空気調和装置を運転しない状態での評価室内でのウイルス噴霧後の直径０．３μｍ〜０．５μｍの粒子数の変化結果である。
【図１９】実施の形態１による温度とウイルスの浮遊量の相関を調べた結果である。
【図２０】実施の形態１による湿度とウイルスの浮遊量の相関を調べた結果である。
【図２１】本発明の実施の形態２に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。
【図２２】図２１の噴霧装置２の概略構成図である。
【図２３】本発明の実施の形態３に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。
【図２４】図２３の噴霧装置２０Ａの概略構成図である。
【図２５】本発明の実施の形態４に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。
【図２６】図２５のウイルス採取装置４ｆの概略構成図である。
【図２７】本発明の実施の形態５に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明の好適な実施の形態について説明する。なお、本発明は、以下の図に示す構成に限定されるものではない。
【００１８】
実施の形態１．
まず、浮遊ウイルス不活化評価装置の具体的な構成を説明するに先立ち、浮遊ウイルス不活化評価装置における試験方法の概要について説明する。
浮遊ウイルス不活化評価装置は、外壁により外部空間と隔離された評価室内にウイルスを供給し、続いてウイルス不活化デバイスを備えた装置（例えば、空調機や、空気清浄機といった空気調和装置等）を駆動して評価室内にウイルスを不活化させる不活化粒子を供給し、ウイルスを不活化する。そして、ウイルス不活化デバイスによるウイルス不活化後の評価室内のウイルス数を計測し、ウイルス不活化デバイスによるウイルスに対する不活化能力を評価する。
【００１９】
以下、本実施の形態１の浮遊ウイルス不活化評価装置で使用するウイルスや、評価室内に長期間、安定してウイルスを浮遊させるための構成等について説明する。なお、本実施の形態１では、下記の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４（ＡＴＣＣ１３７０６−Ｂ１）液を原液として、滅菌超純水にて１００倍希釈したものをウイルス噴霧液とする。そして、その液を、評価室１０ｍ3中に、噴霧流量０．４５mＬ／ｍｉｎ、１０分間で噴霧した場合に関して説明する。しかし、大腸菌ファージの作成方法および本噴霧方法はこれに限ったものではない。なお、大腸菌ファージとは、大腸菌にのみ感染するウイルスのことである。
【００２０】
（大腸菌ファージの作成方法）
以下、大腸菌ファージの作成方法について説明する。普通寒天培地で前培養した１コロニーを釣菌し、大腸菌用液体培地に植菌して、３７℃１８時間培養した。培養後、大腸菌液体培地の吸光度が０．１以上であることを確認し、試験に供した。５０ｍｌ遠沈管に、上記で作成した大腸菌液体培地５ｍＬ（約１０8ＣＦＵ／ｍｌ）（ＣＦＵ：Colony forming unit）とファージ５ｍＬ（約１０6ＰＦＵ／ｍｌ）（ＰＦＵ： Plaque forming unit）を加えて混合し、３７℃１０分間静置した。この液に、４５℃の軟ＮＢ寒天培地１０ｍｌを添加混合し、当日作製した角型シャーレ下層へ重層し、固定化させて倒置せずに３７℃で２４時間培養した。培養後、角型シャーレ上層をコンラージ棒およびピペットを用いて、フィルター付きストマッカー用袋に回収し、２分間ストマッキングした。この液を別の５０ｍｌ遠沈管に移し、３５００ｒｐｍで１０分間遠心し、上澄みをさらに別の５０ｍｌ遠沈管に移した。
【００２１】
この遠心操作を２回繰り返しした後、上澄みを３０分間氷冷し寒天を析出させ、さらに１回遠心して寒天を除いた。遠心後の上澄みを孔径０．２２μｍのメンブレンフィルターでろ過したものを大腸菌ファージ原液として試験に供した。なお、作成したファージ原液は、試験に供すまで−８５℃で凍結保存している。
【００２２】
上記に記載した大腸菌ファージ原液を用い、ウイルスを噴霧する場合、ウイルス噴霧液としては、液の表面張力が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）、望ましくは６５〜６９（×１０-3Ｎ／ｍ）に調節した液を用いるのが望ましい。このようにして噴霧した場合、ウイルス含有浮遊粒子（以下、ウイルス粒子と記載する）の粒子径は０．３〜０．５μｍとなる。ウイルスは、ウイルス粒子のみを分離噴霧することができないため、基本的に水溶液中に懸濁された状態で噴霧される。ウイルスは、他の微生物に比べ、粒子径が数十ｎｍと非常に小さいため、ウイルス粒子の粒子径は、噴霧する際に、ウイルスとともに飛散する水分性状に支配される。
【００２３】
（安定浮遊に好ましいウイルス粒子直径）
ウイルスをウイルス粒子として浮遊させた場合、粒子径が大きいと、自重により自然落下してしまう。逆に、粒子径が小さいと、ウイルスを包む水分が少なくなり、乾燥によりウイルスが不活化しやすい状態となってしまう。以上のようなことから、ウイルスを不活化することなく、安定に浮遊させるためには、ウイルス粒子の噴霧粒子径は、直径０．３〜０．５μｍが望ましい。
【００２４】
（噴霧方式）
以下、噴霧方式について説明する。ウイルスは、残栄養塩濃度を、表面張力、または電気伝導度、または粘度により規定したウイルス噴霧液をジェット式ネブライザで噴霧するのがよい。大腸菌ファージ原液を噴霧する場合、原液は上記のように、寒天培地内で、感染させ、増殖させた大腸菌ファージを精製し、作成する。そのため、大腸菌ファージ原液中には、どうしても培地成分である栄養塩が残存してしまう。本報では、その残存する培地成分を、残栄養塩と定義する。具体的には、肉エキス、ペプトン、寒天、塩化ナトリウム、グルコース、酵母エキス、ブドウ糖等であるが、これらだけでなく、大腸菌ファージ、またそのホスト等、本評価において、浮遊させる微生物を培養する際に用いられる成分すべてを残栄養塩とする。
【００２５】
また、ネブライザとは、液体を噴霧する装置のことである。液体の噴霧方法としては、ジェット式と超音波式とがあり、前者は高速の空気流を利用して霧吹きの原理で細かな液滴を作り出すもの、後者は超音波振動子によって液体を液滴にし、それをファンによる風にのせて噴霧するものである。大腸菌ファージ原液の１００倍希釈液をウイルス噴霧液として、ジェット式、超音波式の両者で、評価室内に噴霧した場合の、評価室中央でのウイルス粒子の粒子径分布を比較した場合、超音波方式に比べ、ジェット式のほうが粒子径は細かく、直径０．３〜０．５μｍ粒子を噴霧でき、かつ粒子数も多い。そのため、ウイルス噴霧液は、ジェット式ネブライザで噴霧するのがよい。ウイルス噴霧液は、先に示した大腸菌ファージ原液作成方法のように、ウイルスを栄養塩含有液体状で培養した後、それを精製することにより作成される。
【００２６】
（残栄養塩濃度）
大腸菌ファージ原液を用いる場合において、ウイルス噴霧液中の残栄養塩濃度と、その液を、評価室内にジェット式ネブライザにより噴霧した際に生じる浮遊物質の粒子径分布との関係では、残栄養塩濃度とともに、噴霧粒子数が変化し、濃度が高くなるほど、全測定粒子径の噴霧粒子数量が多くなった。また、残栄養塩濃度とともに、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数比が異なった。
【００２７】
図２は、ウイルス液中の残栄養塩濃度と、その濃度のウイルス液を噴霧した際の粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数との関係を示した図である。図３は、ウイルス液中の残栄養塩濃度と、その濃度のウイルス液を噴霧した際の、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子の全粒子数に占める割合との関係を示した図である。残栄養塩比が０．００１の場合、８×１０7個／１０ｍ3程度存在させることができる。また、０．１倍以上にすると、更に１０9個／１０ｍ3以上噴霧させることができる。なお、粒子数の検出限界は１０4個／１０ｍ3であるため、ウイルス除去デバイス性能を的確に評価するためには、１０6〜１０7個／１０ｍ3以上対象粒子が存在することが望まれている。
【００２８】
また、残栄養塩濃度と粒子径０．３〜０．５μｍの粒子の全粒子数に占める割合では、ウイルス噴霧液を噴霧した際に、残栄養塩比として０．１以下と調節すると、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子の全粒子数に占める割合が５０％以上、０．０１〜０．００１に調節すると、９０％程度にすることができる。
【００２９】
以上のことより、残栄養塩比として、０．１〜０．００１、望ましくは、０．０１程度に調節したウイルス噴霧液を噴霧した際に、ウイルス粒子を沈降しにくい直径０．３〜０．５μｍの粒子径として、浮遊させることができる。
なお、この各粒子径での噴霧粒子数は、大腸菌ファージの種類によらず、かつ、大腸菌ファージの全く入っていない大腸菌ファージ作成液を原液として用いた場合にも同様の結果が得られる。
【００３０】
（残栄養塩濃度：表面張力による設定）
図４は、大腸菌ファージ原液を用いた場合のウイルス噴霧液の残栄養塩濃度と表面張力との関係を示す図である。図４に示すように、ウイルス噴霧液中の残栄養塩濃度が高いほど、表面張力が低下している。これは、残栄養塩が界面活性剤の性質を有していることを示しており、ウイルス噴霧液中の残栄養塩が界面活性作用を有しているため、希釈率が低いほうが、ネブライザで噴霧した際の粒子中の水の蒸散が抑制され、その結果、噴霧粒子数が増加、かつ、噴霧粒子径が大きいほうにシフトする結果となったと考えられる。
【００３１】
先の方法にて作成した大腸菌ファージ原液を用いる場合、ウイルス噴霧液の表面張力を６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）、望ましくは、６５〜６９（×１０-3Ｎ／ｍ）と規定することで、残栄養塩濃度を制御し、ウイルス噴霧液を噴霧した際に生じるウイルス粒子を、沈降しにくい直径０．３〜０．５μｍの粒子径として、浮遊させることができる。
【００３２】
（残栄養塩濃度：電気伝導度又は粘度による設定）
図５に、大腸菌ファージ原液を用いた場合のウイルス噴霧液の残栄養塩濃度（噴霧粒子径）と電気伝導度との関係を示す。残栄養塩濃度と、電気伝導度においても相関があることがわかる。表面張力のかわりに、電気伝導度を、１０〜１０００μｓ／ｃｍ、望ましくは１００μs／ｃｍと規定したウイルス噴霧液を噴霧することにより、ウイルス粒子の粒子径分布を制御したウイルス噴霧が可能となる。また、ウイルス噴霧液の粘度を規定することによっても、ウイルス噴霧液を噴霧することにより、ウイルス粒子の粒子径分布を制御したウイルス噴霧が可能となる。
【００３３】
なお、大腸菌ファージ、またウイルスの原液の作成方法として、先の方法とは別の方法を用いた場合は、ウイルス噴霧液の性状と噴霧した際のウイルス粒子の粒子径分布の関係を明確化し、上記の方法にて、ウイルス噴霧液中の残栄養塩濃度を規定することで、ウイルス粒子の粒子径分布を制御したウイルス噴霧が可能となる。
【００３４】
（ウイルス数の計測）
評価室内に浮遊するウイルス数を計測する場合、浮遊しているウイルスを回収液中に採取し、そのウイルス懸濁液中のウイルス数を、５０％ tissue culture infective dose（TCID50）法やプラーク法を用いて計測する必要がある。これらの方法は、感染細胞の細胞変性効果（Cytopathic effect, CPE）や培養細胞に生ずるプラークを指標としているため、測定方法、操作法が煩雑であり、かつ判定方法にかなりの習熟度を必要とし、さらには、判定までに１日から約一週間の日数を必要とする。
【００３５】
大腸菌ファージφＸ１７４の原液（１０10ＰＦＵ／ｍｌ）を表面張力が６５、または６９（×１０-3Ｎ／ｍ）となるよう、滅菌水にて、１０倍希釈および１００倍希釈し、ジェット式ネブライザ（ＮＥ−C２９、オムロン製）を用いて、評価室１０ｍ3中に、それぞれ噴霧流量０．４５mＬ／ｍｉｎ、１０分間、噴霧した。１００倍希釈液を噴霧した場合、噴霧粒子径が０．３〜０．５μｍの粒子数は５．０×１０8個／１０ｍ3で、最も粒子数が高く確認され、この際、噴霧されたウイルス噴霧数は、４．５×１０8１０ＰＦＵ／１０m3と算出され、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数とほとんど同数検出された。また、１０倍希釈液を噴霧した場合においても、噴霧粒子径が０．３〜０．５μｍの粒子数は９．０×１０9個／１０ｍ3で、最も粒子数が高く確認され、この際、噴霧されたウイルス噴霧数は、５．０×１０9１０ＰＦＵ／１０ｍ3と算出され、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数とほとんど同数検出された。
【００３６】
つまり、この噴霧方法で、ウイルス噴霧液を噴霧すると、粒子径０．３〜０．５μｍのウイルス粒子一つに対し、ウイルス、具体的には大腸菌ファージφＸ１７４が１存在する系を確立することができる。その結果、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子をパーティクルカウンターで計測することで、ウイルス数、具体的には大腸菌ファージφＸ１７４数を推定することが可能となる。つまり、本来上記のように計測するのに時間を有したウイルス数を、パーティクルカウンター等で粒子数を測定することにより、リアルタイムに推定することができる。ただし、ウイルス不活化メカニズムは、多種多様であるため、パーティクルカウンターでの粒子数の測定と、ウイルス数との間にずれが生じる場合がある。その場合は、粒子数の減少数が物理的除去の効果となるとともに、粒子数とウイルス数の差数がウイルス不活化による効果となるため、ウイルス不活化メカニズムを検証する方法として使用することが可能となる。
【００３７】
（ウイルス噴霧場所）
以下、ウイルス噴霧場所について説明する。評価室内の噴霧ウイルス場所は特に規定しない。図６、図７は、評価室１０ｍ3の中で、大腸菌ファージ原液を用いたウイルス噴霧液をジェット式ネブライザを用いて噴霧させる場合に、噴霧場所を変えた際の、パーティクルカウンターによる評価室中央での粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数を測定した結果を示す図である。噴霧場所に関係なく、噴霧ウイルス数が一定であり、噴霧場所が浮遊ウイルス数に影響を与えないことがわかる。ただし、ウイルス不活化評価デバイスの設置に影響を与えない場所で噴霧するのがよい。
【００３８】
（ウイルス採取手段）
以下、評価室内のウイルスを採取するウイルス採取手段について説明する。浮遊ウイルスの採取には、図８に示すＪＩＳ３８００Ｋで規定されているミゼットインピンジャー（以下、インピンジャーと記載する）を用いると、ウイルス採取率が高く、有効である。具体的な採取方法としては、インピンジャーノズル先端部での流速が１０５ｍ／ｓ以下、望ましくは１０５ｍ／ｓで、インピンジャーを直列に多段式に連結させるのがよい。特に、四連連結が望ましい。また、各インピンジャーの前に差圧計および圧力可変なオリフィスを接続させるのが望ましい。以下、その理由について順次説明する。
【００３９】
（ウイルス採取手段：インピンジャーノズル先端部での流速）
まず、インピンジャーノズル先端部での流速が１０５ｍ／ｓ以下である必要性に関して説明する。一般的に、芽胞菌等をインピンジャーで採取する際には、インピンジャー入口流量を１２．５Ｌ／ｍｉｎまで増加させる。これは、インピンジャーのノズル径が入口径φ８ｍｍから先端径φ１ｍｍと急激に細くなることを利用して、ノズル先端での速度を２６５ｍ／ｓと音速程度まで増大させ、採取空気が回収水に衝突する慣性力を利用して採取効率を高めるためである。音速まで速度を増大させると、ノズル径が小さくなったインピンジャー内部の空気は、圧縮系となり、その結果、熱が上昇する。芽胞形成菌等は、硬い細胞壁で覆われているため、圧力・熱に強く、上記の状態に曝されても性状が変わることはない。
【００４０】
しかし、ウイルスは、たんぱく質とＤＮＡやＲＮＡのみから単純な構造を有しており、圧縮、熱がかかった系では容易に感染力が低下し、不活化してしまう。そのため、圧縮、熱のかからない状態、すなわちウイルスに負荷が掛からない状態での採取方法がよい。したがって、インピンジャーノズル先端部での流速を、芽胞菌等を採取する場合よりも下げる必要がある。
【００４１】
表１に、インピンジャー入口径φ８ｍｍ、先端部φ１ｍｍでの入口流量（回収速度Ｌ／ｍｉｎ）毎の、ノズル先端での速度とマッハ数と空気状態との関係を示す。
【００４２】
【表１】
【００４３】
マッハ数とは、式１に示される流体の流れの速さと音速との比で求まる無次元数で、流れ場のもつ運動エネルギーと内部エネルギーの比率、つまり流れ場における圧縮性の影響力を表している。つまり、マッハ数とは、圧縮性を考慮するか否かの指標であり、マッハ数が小さい＝圧縮性の影響が小さい（概ね０．３より小さいとき）流れでは圧縮性を無視できるといわれている。そのため、ノズル先端部での流速は、マッハ数０．３となる流速１０５ｍ／ｓ以下とするのが望ましい。
【００４４】
図９は、φ１ｍｍにおけるインピンジャーノズル先端部での流速とウイルス回収量との関係を示す図である。図９に示すように、回収流速が大きいほどウイルス回収量が高い。そのため、回収流速は１０５ｍ／ｓとするのが最も良い。
【００４５】
M＝ω／ａ ・・・式１
M：マッハ数
ω：流速（ｍ／s）
ａ：音速（３４０ｍ／s）
【００４６】
なお、インピンジャー入口径φ８ｍｍ、先端部φ１ｍｍの場合、表１に示すとおり、マッハ数０．３となる採取流量は、インピンジャー入口流量５Ｌ／ｍｉｎの時であるため、採取流量としては、５Ｌ／ｍｉｎがよいことになる。
【００４７】
（ウイルス採取手段：インピンジャーの直列多段連結）
インピンジャーを多段式に直列に連結させる理由を説明する。インピンジャー１本で捕集できる粒子数は、１０〜２０％弱であり、ウイルス採取時においても当てはまる。インピンジャーでの先の大腸菌ファージ原液を用い、ウイルス噴霧液を噴霧した場合のウイルス採取量は、採取空気中のウイルス数に対して１７％程度であるため、２本直列で繋いだ場合の１本目、２本目でのウイルス採取量は、１７％、１４％となり、２本目のインピンジャーにおいても、総採取量の４５％を占める。
【００４８】
表２に、連結本数と総ウイルス採取量の関係を示す。
【００４９】
【表２】
【００５０】
連結本数が増加するほど、回収量が増大する。一般的に、ウイルス回収効率が高いと報告されているゼラチンフィルターにおいての回収効率は４０％〜５０％である。このゼラチンフィルター以上の回収効率を有するには、表２よりインピンジャーを四連連結させる必要があることがわかる。以上のことから、インピンジャーを多段式に、特に直列に４連以上連結させることにより、他の回収効率よりも高い効率を得ることができる。ただし、多段式にした場合、インピンジャーの連結本数が多くなるほど、必要吸気ポンプ容量が大きくなり、エネルギーが多量にかかる。そのため、回収量が５０％を超える四連連結程度が望ましい。
【００５１】
（ウイルス採取手段：差圧計および圧力可変なオリフィス）
直列に繋ぐ各インピンジャーの前に差圧計および圧力可変なオリフィスを接続することについて説明する。なお、オリフィスとは、圧力差を作るための絞りのことである。インピンジャー先端ノズル径は、インピンジャー作成のガラス管径によって決定する。一般に市販のガラス管φ１ｍｍの公差は±１０％であるため、ノズルの公差も必然的に±１０％となり、その結果、ノズル先端部での速度公差は約±２０％となる。
【００５２】
表３は、インピンジャー先端部ノズル径毎に、ノズル先端部での速度と、ノズル径φ１ｍｍに対する速度比（速度の交差）と、回収率との関係を示した表である。
【００５３】
【表３】
【００５４】
インピンジャーノズル先端部での流速とウイルス回収量とには、図９に示したように指数的な相関があることがわかり、ノズルの先端部での速度公差が±２０％である場合、ウイルス回収量の公差には±２４％程度の差が生じてしまう。なお、図９は、単連での試験結果である。
【００５５】
しかし、インピンジャー前に、差圧計およびオリフィスを設置し、ノズル先端部での圧力を調節し、ノズル先端部での流速を１０５ｍ／ｓに調節することにより、このばらつきは解消される。以下に具体的に説明する。
【００５６】
流速と圧力の関係は、式２に示すベルヌーイの式から算出できる。ベルヌーイの定義とは、流れに沿って成り立つエネルギー保存の法則のことで、流体の挙動を平易に表した式である。インピンジャー入口での流量を５Ｌ／ｍｉｎとした場合、使用したインピンジャーノズルでの流速、その時の圧力（大気圧）を基準にして、流速を１０５ｍ／ｓに変化させるのに必要な圧力が、式２から、算出できる。
【００５７】
V2／２＋Ｐ／ρ＋ｇＺ＝ｋ・・・式２
Ｖ：流速（ｍ／ｓ）、Ｐ：圧力（Ｎ／ｍ2）、ρ：密度（ｋｇ／ｍ3、０℃１ａｔｍの場合、１．２９３）
ｔ℃における空気の密度ρは下記の式３で表される。
ρ＝１．２９３×Ｐ／（１＋０．００３６７ｔ） ・・・式３
【００５８】
表４に、ノズル先端径をφ０．９ｍｍ、１．０ｍｍ、１．１ｍｍとした場合のノズル先端での速度と、ノズル先端部での流速を１０５ｍ／ｓにするために必要な圧力を上記式１から算出した結果を示す。
【００５９】
【表４】
【００６０】
ノズル径が最も小さくなるφ０．９ｍｍのインピンジャーを用いる場合には、３．７ｋＰａの圧力をさげるオリフィスをインピンジャー前に設置する必要がある。また、ノズル径が最も大きくなるφ１．１ｍｍのインピンジャーを用いる場合には、２ｋＰａの圧力を加えるオリフィスを設置する必要がある。なお、ノズル径がφ１．０ｍｍの場合は、圧力をかける必要がない。
【００６１】
なお、ウイルスは、先に述べたとおり、圧縮系、つまり圧力をかけた条件で回収すると、ウイルスの感染価の低下等を招く恐れがある。しかし、インピンジャーノズル部の流速を変えるのに必要な圧力（−３．７〜２．０ｋＰａ）による圧縮は、ウイルス感染価に全く影響を与えないことは確認済みである。
【００６２】
以上のことから、各インピンジャーの前段に、差圧計および圧力可変なオリフィスを設置することにより、必然的に生じるノズル先端部の直径の公差によらず、ノズル先端での流速を１０５ｍ／ｓに調節することが可能となる。その結果、回収量のばらつきが劇的に減少し、±５％以下に抑えられる。なお、ここでは、各インピンジャーの前段に差圧計およびオリフィスを設けるとしたが、連結させる複数のインピンジャーのうち、ノズル径が等しいインピンジャーが存在し、且つそのノズル径が等しいインピンジャーを順番に直列に連結させる場合には、ノズル径が等しいインピンジャー間の差圧計およびオリフィスは省略できる。
【００６３】
また、連結させるインピンジャーのノズル径がすべて等しい場合に限っては、インピンジャーノズル先端部における流速が１０５ｍ／ｓとなる入口流量を、式４により算出し、入口流量を変化させ、ウイルスを回収する方法を用いても良い。
Ｕ×Ａ＝Ｋ・・・式４
Ｕ：流速（ｍ／ｓ）
Ａ：断面積（ｍ2）
Ｋ：定数（＝流量 ｍ3／s）
【００６４】
（評価室）
評価室には、外部空間から評価室内への空気を取り入れるための空気取入口を設ける。空気取入口には、取り入れられる空気中の埃や微生物等を採取する吸気中微小物質採取手段を設けることが望ましい。具体的な方法としては、空気取入口にＨＥＰＡ等のフィルターを設ける。これにより、評価室内の微小物質による汚染を防ぐことができる。
【００６５】
また、評価室には、評価室内の空気を外部空間へ排出する空気排出口を設ける。空気排出口には、排出される空気中のウイルスを採取する排気中ウイルス採取手段を設ける。これにより、評価室内のウイルスが外気中に漏れるのを防ぐことができる。
【００６６】
評価室は、常圧が望ましいが、陰圧状態であることが望まれる。評価室内が加圧状態とならないようにするための手段として、空気排出口から、評価室内の空気を吸引し、評価室内を陰圧状態に保持する吸引手段を設ける方法がある。評価室内の空気を強制的に外部空間へ排出することにより、評価室内の気圧を下げることができる。
【００６７】
また、その他の評価室内が加圧状態とならないようにするための手段として、評価室内を仕切り、評価室内で移動可能な可変壁を設け、該可変壁の移動により評価室の容積を変更可能とする方法が挙げられる。容積を大きくすることにより、評価室が加圧状態となるのを防ぐことができる。
【００６８】
評価室内の温度、湿度は調節されていることが望ましい。温度や湿度の変化に弱いウイルスを安定的に空間中に浮遊させることができる。具体的には、空気取入口よりも上流側に温度、または湿度を調節する空気調和部を設けることができる。また、評価室内に空気調和部を設ける構成としてもよい。
【００６９】
試験環境における湿度の調節は、水の加熱により蒸発させた高温水蒸気を一度冷ました後飛散させる低温加湿器がよい。水を加熱し、蒸発させる場合、水蒸気の殺菌につながり、無菌化される。また、その高温水蒸気を一度冷ますことにより、高温によるウイルスの不活化効果を無効化することができる。加湿器には、一般的超音波で水にエネルギーを与え、空気中に飛散させる方法があるが、この方法では、噴霧させる水中の殺菌工程がないため、浮遊ウイルス除去試験装置内の加湿方法としては望ましくない。なお、最適浮遊ウイルス温度、湿度は、噴霧するウイルスにより異なるため、それぞれのウイルスの最適環境に合わせた設定を行うことが望ましい。
【００７０】
評価室の床面、壁面の材質は、帯電量１０8Ω以下が望ましい。塗装鋼板やステンレス鋼である。床面、壁面が１０9Ω以上と帯電すると、物質が吸着しやすくなり、浮遊させたウイルス粒子が床面や壁面に付着してしまう。
【００７１】
図１０に、帯電量と浮遊ウイルス付着数の関係を示す。帯電量が１０8Ω以上になると急激に浮遊ウイルスが付着する。そのため、帯電量を１０8Ω以下にすると、浮遊ウイルス粒子が床面、壁面に付着するのを防ぐことができる。また、評価室の内部空間で、ウイルスを浮遊させるために、浮遊ウイルスの下方から評価室の内部空間を攪拌して行うことができる。攪拌方法としては、風向き可変攪拌方法を用いるのが良い。風向き可変攪拌とは、攪拌方向が一方向ではなく、常時円を描きながら、他方に風向きを変え、攪拌を行う方法である。
【００７２】
図１１は、この手法により、評価室内の空気の攪拌を行った場合の室内の空気の流れを示す図である。評価室内の空気は、床から円を描くように上昇する攪拌となる。その結果、評価室内に噴霧されたウイルス粒子の自重による自然沈降を防ぐことができる。なお、図１１には、風向きを時計回りに記載しているが、風の向きは攪拌ファンの風向き可変方向等により異なる。具体的には、評価室の空間体積１０ｍ3においては、７．８ｍ3／分以上の風速で、風向き可変攪拌を行うのがよい。
【００７３】
図１２は、空間体積１０ｍ3の室内空気を、風向き可変攪拌ファンにより７．８ｍ3／分の風量で攪拌した場合の、ウイルス噴霧時の評価室内での浮遊粒子測定ポイント（７箇所）における、粒子径０．３〜０．５μｍの浮遊粒子数の経時変化を示す図である。なお、図１３は、評価室内の浮遊粒子数測定ポイントを示している。また、図１４は、比較として空間体積１０ｍ3の室内空気を攪拌しなかった場合のウイルス噴霧時の評価室内での浮遊粒子測定ポイント（６箇所）における、浮遊粒子測定ポイントでの粒子径０．３〜０．５μｍの浮遊粒子数の経時変化を示している。
【００７４】
（攪拌ファン）
風向き可変攪拌ファンを用い、評価室内空気を攪拌した場合、浮遊粒子測定ポイントすべてにおいて同程度の粒子が測定されるとともに、時間的経過とともに、すべてのポイントにおいて同様に推移できた。その一方で、攪拌ファンを用いない場合は、浮遊粒子測定ポイントすべてにおいて時間的にばらつきが大きく、評価室内で浮遊粒子数にばらつきがあった。
【００７５】
空間体積が１０ｍ3よりも大きくなる場合は、評価室内全体を１台の風向き可変攪拌ファンで均一に攪拌することは難しい。なぜなら、どうしても、評価室内の中で、風が到達しない部分がでてくるからである。そのため、主に、評価室内全体を攪拌しようとする主的風向き可変攪拌ファンを１台用いるに加え、その攪拌により十分攪拌できない部分を補う補助的風向き攪拌ファンを１台以上用いるのが望ましい。補助的風向き攪拌ファンの設置場所は、評価室の構造によるため、特に限定されるものではないが、主的風向き可変攪拌ファンが設置された場所に対し、評価室内で最も遠くなり、ファンの影響を受けにくい、対角から攪拌することが望ましい。
【００７６】
（浮遊ウイルス）
浮遊させるウイルスとしては、特に限定されるものではないが、人体に影響を与えず、かつ、乾燥に強く、浮遊時に自然減衰しにくい大腸菌ファージが望ましい。ウイルスを不活化させる不活化因子としては、オゾンガス、ラジカル粒子、イオン粒子、放射光、Ｘ線等を、また、ウイルス不活化デバイスとしては、それらの発生機能を有する空調機、空気清浄機等を用いることができる。
【００７７】
（不活化処理）
ここで、上記不活化因子がウイルスを不活化処理できる理由を、以下に述べる。
オゾンは、酸素、または空気を原料としての放電法、紫外線照射法、放射線照射法等により生成する。特に放電法の中でもコロナ放電においては、空気清浄機、空調機等内でのオゾンガスを生成するときに使用されている。以下に、コロナ放電に関して説明する。針状の電極が空中に配置されて高電圧がかけられた場合、その針の先端の周辺に気中放電が生じ、暗くするとその電極周辺にＣｏｒｏｎａ（王冠）状の光が確認される。
【００７８】
このように、局所的に放射状の強い電界が存在する場合に現れる気中放電をコロナ放電といい、本放電を行った結果、オゾンが生成する。オゾンは、ウイルスのたんぱく質と結合し、変性させ、また、直接ＤＮＡやＲＮＡにアタックし、感染力をなくすことにより、ウイルス不活化作用を生じさせるという効果が生じ得る。また、オゾンは、不活化処理能力を発揮した後、無害な酸素になり、残存することがない。そして、かかるオゾンによりウイルスを不活化処理する能力を評価することが可能になる。
【００７９】
オゾンガスと、過酸化水素やＵＶによる反応によりラジカルＯＨ・が生成される。ラジカル・ＯＨ・はきわめて強力な活性を示し、たんぱく質の変性や、ＤＮＡ、ＲＮＡの損傷に作用し、ウイルス不活化作用を生じさせる。また、ラジカルは、即座に、ウイルスや空気中の諸分子と結合し、不活性な物質に変化するため、残存することはない。そして、かかるラジカルによりウイルスを不活化処理する能力を評価することが可能になる。
【００８０】
また、ウイルスを不活化処理するにあたり、薬剤を用い、薬剤の粒子を照射して不活化処理することもできる。薬剤を用いて不活化処理すると、前記イオンやオゾンよる場合に比べ、その粒子の供給を簡易な装置で行うことができる。そして、かかる薬剤によるウイルスの不活化効果を評価することが可能になる。
【００８１】
なお、特に、ウイルス不活化因子として、オゾンガス、ラジカル等の不活化能力を有するガスまたは粒子を用いた試験方法に本試験方法を好適に用いることができる。空気中にオゾンガス、ラジカル等の不活化能力を有する粒子を放出し、その効果を検証する試験においては、一般家庭用途を想定し、ウイルス粒子が存在する空間内に、人体に害のない範囲で不活化能力を有する粒子を放出する試験が一般的である。したがって、空気中のウイルス粒子に対する不活化効果を調べるには、比較的長時間での浮遊ウイルス不活化効果を調べる必要がある。よって、長時間安定してウイルスを浮遊させる必要がある。その方法として、上述したように、ウイルス粒子径が安定浮遊に好ましい０．３〜０．５μｍとなるように残栄養塩濃度を調整するべく、表面張力、電気伝導度及び粘度等を設定する方法が特に顕著に有効である。
【００８２】
また、人等が存在する室内空間で、ウイルスを不活化させる試験方法にも本試験方法を好適用いることができる。このような試験の場合においては、人体に害のない範囲での不活化能力試験が一般的である。したがって、空気中のウイルス粒子に対する不活化効果を調べるには、比較的長時間での浮遊ウイルス不活化効果を調べる必要がある。よって、長時間安定してウイルスを浮遊させる必要がある。その方法として、上述したように、ウイルス粒子径が安定浮遊に好ましい０．３〜０．５μｍとなるように残栄養塩濃度を調整するべく、表面張力、電気伝導度及び粘度等を設定する方法が特に顕著に有効である。
【００８３】
また、採取されたウイルスを計測するにあたり、さらにその粒子の曝露時間による経時変化を測定することもできる。これにより、ウイルスを不活化処理する能力の時間の経過に対する定量的な評価を行うことができる。
【００８４】
また、採取されたウイルスを測定するにあたり、ウイルス不活化因子の濃度依存性を測定することもできる。これにより、ウイルスを不活化処理する能力の粒子濃度依存性に対する定量的評価を行うことができる。
【００８５】
（浮遊ウイルス不活化評価装置の具体的な構成）
以下、上記の構成を具体化してなる浮遊ウイルス不活化評価装置について説明する。
【００８６】
図１は、本発明の実施の形態１に係る浮遊ウイルス不活化評価装置を示す概略断面図である。
本浮遊ウイルス不活化評価装置は、外壁により外部空間と隔離された評価室１内にウイルスを供給するウイルス供給装置としての噴霧装置２と、評価室１内のウイルスを不活化する空気調和装置３と、ウイルス採取装置４と、パーティクルカウンター５ａと、室内粒子数測定装置５とを有している。
【００８７】
評価室１は、その４方が隔離壁により外部空間と隔離され、気密性の高いクリーンルームとなっている。評価室１の空間サイズは、約１０ｍ3（２．２×２．２×２．２ｍ）とされるが、サイズは限定されるものではない。また、評価室１入り口壁側に、前室１００が設けられている。また、評価室１の床面、壁面の材質は、帯電量１０8Ω以下のものを採用することが望ましい。
【００８８】
また、評価室１の下方に攪拌ファン６が設けられている。攪拌ファン６は、風向き可変式のファンで、その周囲に気流を形成して空間を攪拌することができ、ウイルス粒子の自重による下方への自然沈降を防ぐことができる。評価室１の空間サイズが１０ｍ3の本装置の場合、７．８ｍ3／分以上、望ましくは７．８ｍ3／分の風量がよい。なお、本風量は、人が風を感じない程度の微量な風量である。
【００８９】
また、評価室１内には殺菌灯７を装備しており、室内の除菌が可能である。この殺菌灯７は、主に、評価試験前における評価室１内の殺菌に用いられる。また、評価室１内の気圧を計測する気圧計（図示せず）が設けられている。この気圧計は、前室１００内の気圧を計測する気圧計（図示せず）と共に、評価室１外から確認可能な位置に配置されている。評価室１の外壁には、評価試験前後に換気を行うための換気口として、空気取入口１ａと、空気排出口１ｂとが設けられる。更に、前室１００側に空気出入口１ｃが設けられている。この空気取入口１ａ、空気排出口１ｂおよび空気出入口１ｃは閉塞可能であり、評価試験中には閉じられている。また、評価室１には、評価室１内部に出入りするための扉９が設けられている。
【００９０】
空気取入口１ａには、ＨＥＰＡ／活性炭フィルターが設けられ、清浄化された空気を導入することができる。また、空気排出口１ｂには、ＨＥＰＡ／活性炭フィルターが設けられ、空気を清浄化した後に外部空間に排気することができる。なお、空気取入口１ａおよび空気排出口１ｂに設けられるフィルターはＨＥＰＡ／活性炭フィルターに限定されるものではなく、他の種類のフィルターを用いても良い。また、空気出入口１ｃにも同様にＨＥＰＡ／活性炭フィルターが設けられている。
【００９１】
噴霧装置２は、ネブライザ２ａと、コンプレッサー２ｂと、コンプレッサー２ｂの駆動をＯＮ／ＯＦＦする電源２ｃとを有している。ネブライザ２ａとコンプレッサー２ｂは評価室１内に配置され、コンプレッサー２ｂの駆動により、ネブライザ２ａ内にセットされた噴霧液が評価室１内へ噴霧される。ネブライザ２ａは、床面から１００ｃｍ、壁面から５０ｃｍの部分に、噴霧側が真上になるようにコンプレッサー２ｂ上に設置されている。
【００９２】
噴霧装置２により噴霧する噴霧液は、上述の方法によって作成された大腸菌ファージφＸ１７４（ＡＴＣＣ１３７０６−Ｂ１）液を原液として、滅菌超純水にて１００倍希釈したものとする。φＸ１７４は、大腸菌に感染するウイルスで、１−ＤＮＡを有する直径約２６ｎｍで、正２０面体のウイルスである。φＸ１７４を初めとする大腸菌ファージは、一般的に、人に対しては病原性を有しない。また、乾燥による不活化や、自重による自然落下を防止可能な粒子径０．３〜０．５μｍとなるように、表面張力、電気伝導度または粘度の何れかが上述したように調整されたものである。また、ここで使用するネブライザ２ａは、上述したように、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子を噴霧できるジェット式ネブライザを用いることが好ましい。
【００９３】
また、ウイルス不活化デバイスとしての空気調和装置３は、具体的には例えばエアコンや空気清浄機で構成され、ＨＥＰＡフィルターによるウイルス捕集機能や、空気中にオゾンガス、ラジカル等の不活化能力を有する粒子を放出し、ウイルスを不活化させる機能を有する。ここでは、空気調和装置３は、空気中のウイルスを電気集塵により、装置内に捕集し、その後、空気中の水分に高電圧をかけ作成した１０〜４０ｎｍの水分粒子（イオンが多数存在）によりウイルスを装置内で不活化するシステムとしている。空気調和装置３は支持台３ａによって支持されている。
【００９４】
ウイルス採取装置４は、評価室１内に配置され、評価室１内のウイルスを採取するための採取管４ａと採取部４ｂとを備えており、第１計測方法によりウイルス計測して評価する第１ウイルス計測装置に相当する。採取管４ａは、評価室１及び前室１００を貫通して前室１００内に延び、採取部４ｂに接続されている。また、採取管４ａの評価室１内の先端は、支持台４ｃによって支持されている。ウイルス採取装置４には更に、ウイルスを採取して除去された空気を評価室１内に戻すための戻し管４ｄが接続され、戻し管４ｄの先端は評価室１の壁面に開口している。このようにウイルスを採取して除去された空気を評価室１内に戻すことにより、評価室１内の圧力を一定に保つようにしている。
【００９５】
図１５は、図１の採取部４ｂの概略構成を示す図である。
図１５に示すように、採取部４ｂは、図８のインピンジャー４０を四連連結させた後、流量計４１およびポンプ４２を接続する。流量は５Ｌ／ｍｉｎで吸引する。また、各インピンジャー４０の前に差圧計４３および圧力可変なオリフィス４４を接続させ、各インピンジャーノズル先端部（以下、ノズル先端部と略す）４０ａでの流速が１０５ｍ／ｓとなるようオリフィス４４を調節している。
【００９６】
パーティクルカウンター５ａは、評価室１内の粒子径０．３〜０．５μｍのウイルス粒子数を計測し、計測結果を評価室１外に配置された室内粒子数測定装置５に出力する。室内粒子数測定装置５は、評価室１内の粒子数をウイルス数としてリアルタイムに測定する。パーティクルカウンター５ａおよび室内粒子数測定装置５が第２計測方法によりウイルス計測して評価する第２ウイルス計測装置に相当する。
【００９７】
以上のような構成の浮遊ウイルス不活化評価装置を用いた試験手順を以下に説明する。
【００９８】
（１）試験準備
試験開始前に、空気取入口１ａおよび空気排出口１ｂを開けて評価室１内に塵の少ない清浄な空気が満たされるようにしておく。また、紫外線を発生する殺菌灯７により、評価室１内部の壁面等をあらかじめ一定時間照射して消毒しておき、さらに加湿器（図示せず）により、評価室１内の空気の湿度を調節しておくことが望ましい。また、例えば空気調和装置３の空調機能により、評価室１内の温度も調整しておくことが望ましい。評価室１内の消毒が終了した後、空気取入口１ａおよび空気排出口１ｂを閉じると共に、殺菌灯７の運転を停止する。そして、パーティクルカウンター５ａおよび室内粒子数測定装置５を作動させ、評価室１内の粒子数を計測する。攪拌ファン６を風向き可変をＯＮ、風速を７．８ｍ3／分とし、後に噴霧されるウイルス粒子が空間中に拡散するように、送風を行う。
【００９９】
（２）菌の噴霧
予め作成しておいたウイルス懸濁液７ｍｌをネブライザ２ａにセットし、コンプレッサー２ｂをＯＮし、ウイルス溶液を評価室１内に１０分間噴霧する。噴霧液は、上述したように、乾燥による不活化や、自重による自然落下を防止可能な粒子径０．３〜０．５μｍとなるように、表面張力、電気伝導度または粘度の何れかが上述したように調整されたものである。よって、ウイルス粒子を評価室１内に安定して長時間浮遊させることが可能となっている。また、評価室１内には攪拌ファン６により気流が形成されているため、この点からも、噴霧されたウイルス粒子は、自然落下することなく評価室１内で安定して浮遊する。
【０１００】
（３）空気調和装置３の駆動
空気調和装置３を駆動させる。空気調和装置３は、吸引した空気中のウイルスを電気集塵により、空気調和装置３内に捕集し、評価室１内の浮遊ウイルスを減少させることが可能である。
【０１０１】
（４）ウイルスの計測（第１計測方法）：ウイルス採取装置
ウイルス採取装置４のポンプ４２を作動させ、その後、評価室空気入り口コック１ｄを開き、評価室１内の空気を採取管４ａにより採取し、ウイルス粒子を採取部４ｂのインピンジャー４０で捕集する。採取部４ｂにおける採取流量は、ここでは上述したように、５Ｌ／ｍｉｎ、採取流速は１０５ｍ／ｓに調整されており、ウイルス粒子に対して圧縮、熱のかからない状態、すなわちウイルスに負荷が掛からない状態で採取できるようになっている。そして、採取された空気は、インピンジャー４０、ポンプ４２および空気戻り口１ｅを通って、再度、評価室１内に返送される。
【０１０２】
（５）ウイルスの計測（第２計測方法）：パーティクルカウンターおよび室内粒子数測定装置
パーティクルカウンター５ａは、評価室１内の粒子径０．３〜０．５μｍのウイルス粒子数を計測し、計測結果を評価室１外に配置された室内粒子数測定装置５に出力する。室内粒子数測定装置５は、評価室１内の粒子数をウイルス数と推定し、推定結果を表示手段（図示せず）に表示する。このように、評価室１内に、ウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、０．３〜０．５μｍのウイルス粒子数を計測することにより評価室内のウイルス数を計測するため、評価室１内のウイルス数を迅速に測定でき、リアルタイムにモニタリングすることができる。また、ウイルス数の測定結果は時系列に室内粒子数測定装置５内に記憶でき、ウイルス数の経時変化を確認できるものとする。
【０１０３】
インピンジャー４０によるウイルス粒子の採取後、ポンプ４２を停止させ、評価室空気入り口コック１ｄを閉めた後、インピンジャー４０を回収し、インピンジャー４０の中の回収水中のウイルス数をプラーク法にて計測した。
【０１０４】
ウイルスの採取は、１時間おきに、６回行い、６時間で合計７回行う。これにより、浮遊ウイルス濃度の経時変化を測定するようにする。
【０１０５】
（６）終了
浮遊ウイルスの評価が終わったら、空気調和装置３を停止し、空気取入口１ａから評価室１内に清浄空気を入れ、評価室１内の浮遊ウイルスを含む空気を空気排出口１ｂを通過させることで清浄化した上で、外部に排出するようにする。
【０１０６】
以上のような構成によると、ウイルスを評価室１内に自然落下することなく、安定的に浮遊させることができる。その結果、複数回試験によっても回収結果の統計的ばらつきが小さい安定した試験を行うことが可能となる。よって、ウイルス不活化デバイスの効果を正当に評価することができ、ウイルスの不活化評価精度を高精度なものとすることができる。
【０１０７】
なお、本実施の形態１では、ウイルス計測評価装置として、ウイルス採取装置４と、リアルタイムなモニタリング可能なパーティクルカウンター５ａおよび室内粒子数測定装置５との両方を用い、併用して計測評価している。しかし、本実施の形態１は、両方併用することに限定されない。
【０１０８】
また、ここでは、ウイルス不活化デバイスとしての空気調和装置３の条件については特に言及しなかったが、各種条件を自由に設定可能にすることで、ウイルス不活化条件等を定量的に評価することが可能である。
【０１０９】
次に、本試験設備により得られた試験結果を以下に示す。なお、以下の試験は、ウイルス不活化デバイス評価装置において本来目的とするウイルス不活化デバイス評価試験ではなく、いわば、本装置自体の性能試験や、試験環境の試験等に相当するものである。
【０１１０】
〔ウイルス粒子の安定性試験〕
空気調和装置３を運転しない状態における評価室１内のウイルス粒子の安定性試験について説明する。ここでは、ウイルス原液を滅菌した超純水で１００倍希釈し、表面張力を６９ｇｙｎ／ｃｍに調節したウイルス懸濁液をジェット式ネブライザで評価室１内に噴霧した。図１６は、温度２０℃、相対湿度６０％ＲＨに設定し、空気調和装置３を運転しない状態でのウイルス数変化を計測した結果である。図１６において、横軸は時間、縦軸はウイルスを浮遊させた１０ｍ3評価室１内の浮遊ウイルス濃度をとって示したものである。図１６に示すように、６ｈｒ後におけるウイルス数の減衰は、約１／１０で、大きな減少はみられていない。ウイルスは、乾燥に弱いために、相対湿度６０％ＲＨほどの高い湿度環境にすると、ウイルスが死滅することなく、不活化しない状態で、長時間浮遊させることができるものと推定される。
【０１１１】
このように、本実施の形態１の浮遊ウイルス不活化評価装置では、ウイルスを噴霧させても、長時間ウイルスを不活化させず、浮遊させることができる。
【０１１２】
〔ウイルス不活化試験〕
図１７は、空気調和装置３を運転した状態での評価室１内のウイルス数変化を計測した結果である。本試験結果は、空気調和装置３を運転しない場合（図１６）に比較して、空気調和装置３を運転した場合には、４ｈｒ後には、約９９％の浮遊ウイルスが不活化されている。本発明者らによる実験により、同条件で複数回の試験によっても、プロットの近似曲線の傾きにおいて、１０％以下のばらつきレベルに制御された安定した試験を行えることが確認されている。
【０１１３】
〔ウイルス数評価方法〕
図１８は、空気調和装置３を運転しない状態での評価室１内でのウイルス噴霧後の直径０．３μｍ〜０．５μｍの粒子数の変化を示す図である。図１８を図１６と比較すると分かるように、計測された浮遊ウイルス数と粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数とがほぼ同数で測定されている。そのため、本来ウイルス数を計測しなくてはならない浮遊ウイルス不活化評価において、パーティクルカウンター５ａ等で粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数を測定することにより、浮遊ウイルス数をリアルタイムに推定することができる。
以上説明したように、ウイルスを浮遊させた１０ｍ3評価室１の浮遊ウイルス濃度および直径０．３〜０．５μｍ粒子径の粒子数をモニタリングできる。本手法では、１０ｍ3評価室１の浮遊ウイルス濃度と直径０．３〜０．５μｍ粒子径の粒子数はほぼ同数であるため、ウイルス数を測定することなく、直径０．３〜０．５μｍ粒子径の粒子を計測することにより、ウイルス数をモニタリングすることができる。
【０１１４】
〔温度、湿度試験〕
上記においては、ウイルスの自然減衰を防ぐために、温度２０℃、相対湿度６０％ＲＨに設定した評価室１内にウイルスを噴霧している。温度の影響を評価するため、湿度は６０％ＲＨと一定条件とし、温度を１０℃、１５℃、２０℃、２５℃と異なる評価室１内にウイルスを噴霧させ、空気調和装置３を運転しない状態でのウイルス数変化を計測した結果を図１９に示す。
【０１１５】
図１９は、温度とウイルスの浮遊量の相関を調べた結果であって、評価室１内の温度を変化させ、０、１、２、４、６ｈｒ後の浮遊ウイルス数を調べた結果である。図１９から１０℃〜２５℃内でのすべての温度条件において、６時間放置しても、ウイルスは、１０％以上存在できる。そのため、温度は、１０〜２５℃の範囲内で評価するのが望ましい。ただし、温度が変化すると若干ながら生存率が変化していることから、ウイルス不活化デバイスを運転する状態、および運転しない状態をついで試験する際は、温度を一定に保ち試験するのが望ましい。
【０１１６】
湿度の影響を評価するため、温度は２０℃と一定条件とし、温度を４０、５０、６０、７０％ＲＨと異なる評価室１内にウイルスを噴霧させ、空調機を運転しない状態でのウイルス数変化を計測した結果を図２０に示す。
【０１１７】
図２０は、湿度とウイルスの浮遊量の相関を調べた結果であって、評価室１内の湿度を変化させ、０、１、２、４、６ｈｒ後の浮遊ウイルス数を調べた結果である。図２０より、湿度を５０％ＲＨ以上にすると、６時間放置しても、ウイルスは、５％以上存在できることがわかる。また、湿度が６０％ＲＨ以上であれば、６時間放置しても、ウイルスは１桁以上生存できることがわかる。そのため、湿度は５０％以上、可能であれば６０％ＲＨで制御するのが望ましい。
【０１１８】
このように、本実施の形態１による浮遊ウイルス不活化評価においては、温度、湿度制御下でウイルスを噴霧して試験するため、ウイルスを長時間、不活化しない状態で浮遊させることができる。
【０１１９】
なお、上記温湿度は、大腸菌ファージφＸ１７４を評価室１内に噴霧した場合の最適温湿度であり、最適浮遊ウイルス温度、湿度は、噴霧するウイルスにより異なる。よって、それぞれのウイルスの最適環境に合わせた設定を行うことが望ましい。なお、本発明は、上記実施の形態に限られるものではなく、本発明の範囲内で上記実施の形態に多くの修正および変更を加え得ることはもちろんである。
【０１２０】
以上説明したように、本実施の形態１による浮遊ウイルス不活化評価装置では、ウイルスを噴霧させても、ウイルスを長時間不活化させず、安定して浮遊させることができる。
【０１２１】
実施の形態２．噴霧装置の自動化
実施の形態２は、実施の形態１の噴霧装置２の他の構成例（その１）について説明するものであり、噴霧装置２以外の構成は、図１に示した上記実施の形態１と同様である。以下、実施の形態２の噴霧装置２０について詳細に説明する。
【０１２２】
図２１は、本発明の実施の形態２に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。図２２は、図２１の噴霧装置２０の概略構成図である。なお、図２２においてコンプレッサー２ｂの図示は省略している。また、図２１および図２２において、図１に示した実施の形態１と同一部分には同一符号を付す。
図２１に示すように、本実施の形態２の噴霧装置２０は、ネブライザ２ａと、コンプレッサー２ｂと、噴霧液調合装置２１とを備えている。噴霧液調合装置２１は、図２２に示すように、上記の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を貯留するウイルス原液タンク２２ａと残栄養塩含有液タンク２２ｂと純水タンク２２ｃとがそれぞれポンプ２３ａ〜２３ｃを介してチューブにより液混合装置２４に接続され、液混合装置２４にて混合された液がネブライザ２ａに送り込まれるように構成されている。
【０１２３】
また、液混合装置２４には表面張力測定装置２５が接続され、更に、図示していないが、各タンク２２ａ〜２２ｃから液混合装置２４に至る流路には流量計が設けられている。また、各タンク２２ａ〜２２ｃおよび液混合装置２４は冷蔵室内に配置されており、各タンク２２ａ〜２２ｃからの各液の配合が調整されたウイルス噴霧液は、噴霧直前まで４℃以下で保存されるようになっている。また、噴霧液調合装置２１には、実施の形態１と同様の電源２ｃが配置されており、電源２ｃによりコンプレッサー２ｂの駆動をＯＮ／ＯＦＦできるようになっている。また、各ポンプ２３ａ〜２３ｃの駆動は図示しない制御装置により制御されるものとする。
【０１２４】
制御装置により各ポンプ２３ａ〜２３ｃをそれぞれ独立して制御して、ウイルス原液、残栄養塩含有液および純水の混合液の表面張力が６５〜６９（×１０-3Ｎ／ｍ）となるように配合を調節した混合液を自動的に作成する。その後、制御装置は、その混合液をネブライザ２ａに注入させ、コンプレッサー２ｂをＯＮし、ネブライザ２ａにより評価室１内にウイルス噴霧液を噴霧させる。
【０１２５】
以上のような構成によると、実施の形態１と同様の効果が得られるとともに、ウイルス噴霧液を自動的に作成することができ、人に感染するウイルスを取り扱う場合においても安全に作業できる。また、制御装置によるコンプレッサー２ｂのＯＮ／ＯＦＦ制御により、連続噴霧、間欠噴霧も可能となり、効率的に浮遊ウイルス不活化評価を行うことができる。また、ウイルス原液を純水や不純物液と混合せずに単独でタンクに貯留するようにしたため、保存濃度が薄いと内部のウイルスが減衰してしまうウイルス液を試験直前まで高濃度に維持できる。また、ウイルス液を冷蔵や冷凍で保存できるので、状態の安定したウイルスを噴霧することができる。
【０１２６】
実施の形態３．噴霧装置の自動化
実施の形態３は、実施の形態１の噴霧装置２の他の構成例（その２）について説明するものであり、噴霧装置２以外の構成は、図１に示した上記実施の形態１と同様である。以下、実施の形態３の噴霧装置２０Ａについて詳細に説明する。
【０１２７】
図２３は、本発明の実施の形態３における浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。図２４は、図２３の噴霧装置２０Ａの概略構成図である。なお、図２４においてコンプレッサー２ｂの図示は省略している。また、図２３および図２４において、図１に示した実施の形態１と同一部分には同一符号を付す。
図２３に示すように、本実施の形態３の噴霧装置２０Ａは、ネブライザ２ａと、コンプレッサー２ｂと、噴霧液調合装置２１Ａとを備えている。噴霧液調合装置２１Ａは、図２４に示すように、上記の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を貯留するウイルス原液タンク２２ａと残栄養塩含有液タンク２２ｂと純水タンク２２ｃとがそれぞれポンプ２３ａ〜２３ｃを介してチューブにより液混合装置２４に接続され、液混合装置２４にて混合された液がネブライザ２ａに送り込まれるように構成されている。
【０１２８】
また、液混合装置２４には電気伝導度測定装置２５Ａが接続され、更に、図示していないが、各タンク２２ａ〜２２ｃから液混合装置２４に至る流路には流量計が設けられている。また、各タンク２２ａ〜２２ｃおよび液混合装置２４は冷蔵室内に配置されており、各タンク２２ａ〜２２ｃからの各液の配合が調整されたウイルス噴霧液は、噴霧直前まで４℃以下で保存されるようになっている。また、噴霧液調合装置２１Ａには、実施の形態１と同様の電源２ｃが配置されており、電源２ｃによりコンプレッサー２ｂの駆動をＯＮ／ＯＦＦできるようになっている。また、各ポンプ２３ａ〜２３ｃの駆動は図示しない制御装置により制御されるものとする。
【０１２９】
制御装置により各ポンプ２３ａ〜２３ｃをそれぞれ独立して制御して、ウイルス原液、残栄養塩含有液および純水の混合液の電気伝導度が２００μｓ／ｃｍ となるように配合を調節した混合液を自動的に作成する。その後、制御装置は、その混合液をネブライザ２ａに注入させ、コンプレッサー２ｂをＯＮし、ネブライザ２ａにより評価室１内にウイルス噴霧液を噴霧させる。
【０１３０】
以上のような構成によると、実施の形態１と同様の効果が得られるとともに、ウイルス噴霧液を自動的に作成することができ、人に感染するウイルスを取り扱う場合においても安全に作業できる。また、制御装置によるコンプレッサー２ｂのＯＮ／ＯＦＦ制御により、連続噴霧、間欠噴霧も可能となり、効率的に浮遊ウイルス不活化評価を行うことができる。また、ウイルス原液を純水や不純物液と混合せずに単独でタンクに貯留するようにしたため、保存濃度が薄いと内部のウイルスが減衰してしまうウイルス液を試験直前まで高濃度に維持できる。また、ウイルス液を冷蔵や冷凍で保存できるので、状態の安定したウイルスを噴霧することができる。なお、電気伝導度測定装置の代わりに粘度計を接続し、同様の機能を有することもできる。
【０１３１】
実施の形態４．
実施の形態４の浮遊ウイルス不活化評価装置は、実施の形態１の浮遊ウイルス不活化評価装置のウイルス採取装置４に代えてウイルス採取装置４ｆを備えたもので、その他の構成は実施の形態１と同様である。
【０１３２】
図２５は、本発明の実施の形態４における浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。図２６は、図２５のウイルス採取装置４ｆの概略構成図である。図２５および図２６において、図１に示した実施の形態１と同一部分には同一符号を付す。
図２６に示すように本実施の形態４のウイルス採取装置４ｆは、実施の形態１のウイルス採取装置４と採取部４ｂの構成が異なり、実施の形態４の採取部４ｅは、幅φ１ｍｍ（±０．１ｍｍ）、長さ１００ｍｍの管４５の後に、インピンジャー４０を直列に四連連結し、更に流量計４１とポンプ４２とを接続した構造を有する。すなわち、上記実施の形態１のウイルス採取装置４の採取部４ｂにおいて各インピンジャー４０の前にそれぞれ差圧計４３およびオリフィス４４を設けていた構成に代えて、直列に四連連結したインピンジャー４０群の前に、管４５を接続した構成とした点に特徴を有している。なお、空気を採取する場合には、φ１ｍｍ（±０．１ｍｍ）を通過する際の流速が１０５ｍ／ｓとなるようポンプで吸引する。
【０１３３】
インピンジャー４０の先端部直径φ１ｍｍの部分の長さは図８より２７ｍｍであるため、直列に繋がっているインピンジャー４０の前にφ１ｍｍ、１００ｍｍの管４５を繋ぐと、インピンジャー４０に捕集される空気が、φ１ｍｍ程度の流路を流れる際の、管部の割合は８０％を占めることになる。そのため、その後のノズル先端部４０ａの直径がφ０．９〜１．１ｍｍと変化しようと、ノズル先端部４０ａでの流速は、その前段部のφ１ｍｍの１００ｍｍ管部による差圧が支配的となるため、ノズル先端部４０ａでの流速公差は±５％以下に抑えられる。
【０１３４】
以上のような構成によると、インピンジャー４０のノズル先端部４０ａでの流速は、そのノズル先端部４０ａの直径に関わらず、その前段に設置させた管４５を通過する際の管内流速に支配される。このため、ノズル先端部４０ａでの流速を公差±５％以下に抑えることができる。なお、更なる精度向上のために、１００ｍｍ以上のφ１ｍｍの管を用いてももちろん良い。
【０１３５】
実施の形態５．サンプリング位置の移動
図２７は、本発明の実施の形態５に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。図２７において、図１に示した実施の形態１と同一の部分には同一符号を付す。
本実施の形態５は、インピンジャー４０の採取管４ａの先端またはパーティクルカウンター５ａに空気を誘導するチューブ（図示せず）の先端の位置、すなわち測定ポイントを遠隔操作により変更できるようにした点に特徴を有する。その他の基本的な構成は、実施の形態１と同様である。以下、実施の形態５が実施の形態１と異なる部分を中心に説明する。
【０１３６】
評価室１の天井面には、誘導路としてのレール１０が設けられている。レール１０は、評価室１の両側壁面に平行に設けられた第１のレール１０ａと、第１のレール１０ａに掛け渡された第２のレール１０ｂとから構成される。第２のレール１０ｂは車輪１０ｃを有し、第１のレール１０ａ上を移動可能とされる。第１のレール１０ａの移動は、遠隔制御される。また、第２のレール１０ｂ上には、第２のレール１０ｂに沿って移動可能な車輪１２を有する台車１１が乗せられており、台車１１は第２のレール１０ｂに沿って移動可能となっている。
【０１３７】
また、台車１１は、車輪１２を駆動する駆動部（図示せず）と、遠隔操作可能な受信部（図示せず）とを有している。台車１１には、下方に伸びる棒１３が連結され、その下端には載置台１４が固定されている。これら台車１１、車輪１２、棒１３および載置台１４により移動体１５が構成されている。この移動体１５の載置台１４に、インピンジャー４０の採取管４ａの先端またはパーティクルカウンター５ａへの空気誘導チューブ（図示せず）の先端が載置される。台車１１の車輪１２の駆動は、遠隔制御される。遠隔操作により、台車１１を第２のレール１０ｂに沿って自由に移動させることができる。また、棒１３も遠隔操作により自由に上下することができるものとする。
【０１３８】
上記の構成にすることにより、移動体１５は、第２のレール１０ｂに沿って、左右に移動可能となり、また、第２のレール１０ｂ自体が第１のレール１０ａに沿って前後に移動可能となる。さらには、棒１３自体の上下運動により、評価室１内において載置台１４を上下に移動可能である。よって、全体として、載置台１４を評価室１内において前後左右、さらに上下に移動させることができるため、測定ポイントを評価室１内の自由な位置に移動させることができる。
【０１３９】
以上のような構成によると、評価室１内の粒子数測定ポイントおよびインピンジャー４０での回収ポイントを評価室１内で自由に変えることが可能となり、空気調和装置３などの不活化デバイスからの距離、位置等を変化させたサンプリングが可能となる。また、１つの試験中においても、サンプリング位置を変化させることができるため、評価室１内での不活化デバイスによるウイルス不活化分布を取得することが可能となる。
【０１４０】
なお、上記各実施の形態１〜５では、それぞれ別の実施の形態として説明したが、各実施の形態の特徴的な構成を適宜組み合わせて浮遊ウイルス不活化評価装置を構成してもよい。
【符号の説明】
【０１４１】
１ 評価室、１ａ 空気取入口、１ｂ 空気排出口、１ｃ 空気出入口、１ｄ 評価室空気入り口コック、１ｅ 空気戻り口、２ 噴霧装置、２ａ ネブライザ、２ｂ コンプレッサー、２ｃ 電源、３ 空気調和装置、３ａ 支持台、４ ウイルス採取装置、４ａ 採取管、４ｂ 採取部、４ｃ 支持台、４ｄ 戻し管、４ｅ 採取部、４ｆ ウイルス採取装置、５ 室内粒子数測定装置、５ａ パーティクルカウンター、６ 攪拌ファン、７ 殺菌灯、９ 扉、１０ レール、１０ａ 第１のレール、１０ｂ 第２のレール、１０ｃ 車輪、１１ 台車、１２ 車輪、１３ 棒、１４ 載置台、１５ 移動体、２０ 噴霧装置、２０Ａ 噴霧装置、２１ 噴霧液調合装置、２１Ａ 噴霧液調合装置、２２ａ ウイルス原液タンク、２２ｂ 残栄養塩含有液タンク、２２ｃ 純水タンク、２３ａ〜２３ｃ ポンプ（ポンプ装置）、２４ 液混合装置、２５ 表面張力測定装置、２５Ａ 電気伝導度測定装置、４０ インピンジャー、４０ａ ノズル先端部、４１ 流量計、４２ ポンプ、４３ 差圧計、４４ オリフィス、４５ 管、１００ 前室。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、浮遊ウイルス不活化評価方法およびその装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
新型インフルエンザ（Ｈ１Ｎ１）の流行により、空気清浄機などのウイルスを不活化または除去する家電製品のニーズが高まっている。ウイルスを不活化・除去する方法としては、従来から提案されているＨＥＰＡ等を用いたフィルターによる空気中のウイルス浮遊粒子の除去方法がある。この方法は、空気中の微小物質を物理的に捕集することにより、空気中から除去するものである。また、近年はラジカルやイオンに代表される様々な空気浄化技術が注目されている。この技術は、不活化デバイスにより生成したラジカルやイオン等の変性や分解等の作用により、空気中に浮遊するウイルスの有害性をなくす方法である。
【０００３】
このような技術を用いた家電製品の開発においては、該製品の性能評価を正確に行うことにより、要求される空気浄化機能と低エネルギー化等を両立させた設計が可能になる。このため、空気環境の測定技術は商品開発において非常に重要なものとなっており、浮遊ウイルスの不活化評価方法の確立が不可欠となっている。
【０００４】
特許文献１においては、微生物の除去評価方法および装置を利用して、閉じられた空間内の浮遊物質に何らかの作用を施すことによる除去効果試験の定量的評価を効果的に行えることを提案している。
【０００５】
また、特許文献２には、隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に微生物を浮遊させ、微生物を除去するための除去粒子を放出した後、評価室内の微生物を採取して測定し、除去粒子による除去効果を評価する装置が提案されている。この装置では、隔離壁のほぼ全面に多数の空気供給孔を設け、この空気供給孔から評価室内へ空気を流入させ、この空気流により、隔離壁付近の微生物を評価室内側へはじき飛ばすようにしている。これにより、隔離壁に微小物質が付着するのを防止して評価室内に安定的に微生物を浮遊させるようにしている。
【０００６】
また、評価室内に浮遊しているウイルスの数を計測するにあたっては、浮遊しているウイルスを回収液中に採取し、そのウイルス懸濁液中のウイルス数を、５０％ tissue culture infective dose（TCID50）法やプラーク法を用いて計測する方法が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００４−１５９５０８号公報（第７頁、第８頁、図１）
【特許文献２】ＷＯ２００８／０１０３９４Ａ１号公報（図２）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
空気中のウイルス粒子に対する不活化効果を調べるには、比較的長時間での浮遊ウイルス不活化効果を調べる必要がある。よって、評価室内に、ウイルスを長時間安定して浮遊させる必要がある。しかしながら、特許文献１の技術では、評価対象の浮遊物質を評価室内に安定的に浮遊させる点について考慮されていない。
【０００９】
特許文献２の技術では、評価対象の浮遊物質を評価室内に安定的に浮遊させる点について考慮されている。しかし、特許文献２では、その方法として、壁面等から空気を送る方法を採用している。この方法は、特許文献２のように浮遊物質として芽胞形成菌を用いる場合には有効であるが、乾燥に弱いウイルスに対しては有効ではない。すなわち、この方法でウイルスを浮遊させたとしても、著しく自然減衰してしまい、安定的に浮遊させることはできない。よって、そのようなウイルス浮遊環境下で評価試験を行っても、ウイルス不活化デバイスの効果を正当に評価することはできず、十分な精度で評価試験を行うことができないという問題があった。
【００１０】
また、上記の５０％ tissue culture infective dose（TCID50）法やプラーク法によるウイルス数の計測は、感染細胞の細胞変性効果（Cytopathic effect, CPE）や培養細胞に生ずるプラークを指標としている。このため、測定方法、操作法が煩雑で、且つ判定方法にかなりの習熟度を必要とし、さらには、判定までに１日から約一週間の日数を必要とするという問題があった。
【００１１】
本発明は、上述のような問題点を解決するためになされたものであり、評価室中にウイルスを安定的に浮遊させることができ、ウイルス不活化評価を高精度に行うことが可能な浮遊ウイルス不活化評価方法およびその装置を提供することを第１の目的とする。
【００１２】
また、本発明は、空間中のウイルスを迅速に測定可能な浮遊ウイルス不活化評価方法およびその装置を提供することを第２の目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明に係る浮遊ウイルス不活化評価方法は、隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に、安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス含有浮遊粒子（以下、ウイルス粒子）を供給し、評価室内の浮遊ウイルスの数を計測して評価するものである。
【００１４】
また、本発明に係る浮遊ウイルス不活化評価方法は、隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に所定のウイルス液を噴霧することにより、評価室内に、所定の粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、所定の粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより評価室内のウイルス数を計測して評価するものである。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、評価室内に、安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス含有浮遊粒子を供給するため、評価室内にウイルス粒子を安定して浮遊させることができる。よって、ウイルスの不活化評価を高精度に行うことができる。
また、本発明によれば、所定のウイルス液を噴霧して、評価室内に、所定の粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、所定の粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより評価室内のウイルス数を計測するため、評価室内のウイルス数を迅速に測定することが可能である。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明の実施の形態１に係る浮遊ウイルス不活化評価装置を示す概略断面図である。
【図２】ウイルス液中の残栄養塩濃度と、その濃度のウイルス液を噴霧した際の粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数との関係を示した図である。
【図３】ウイルス液中の残栄養塩濃度と、その濃度のウイルス液を噴霧した際の、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子の全粒子数に占める割合との関係を示した図である。
【図４】残栄養塩濃度と表面張力との関係を示した図である。
【図５】残栄養塩濃度と電気伝導度との関係を示した図である。
【図６】噴霧高さを変えた場合の浮遊ウイルス粒子数を示した図である。
【図７】壁からの噴霧位置を変えた場合の浮遊ウイルス粒子数を示した図である。
【図８】ＪＩＳ３８００Ｋで規定されているミゼットインピンジャーを示した図である。
【図９】流速と浮遊ウイルス回収量の関係の一例を示した図である。
【図１０】評価室床面・壁面の帯電量と浮遊ウイルス付着数の関係を示した図である。
【図１１】風向き可変攪拌方法を用いた場合の評価室内での空気の流れを示す図である。
【図１２】空間体積１０ｍ3の室内空気を、風向き可変攪拌ファンを７．８ｍ3／分の風量で攪拌した場合の、ウイルス噴霧時の評価室内での浮遊粒子測定ポイント（７箇所）での粒子径０．３〜０．５μｍの浮遊粒子数の経時変化を示す流量と浮遊ウイルス回収量の関係の一例を示した図である。
【図１３】評価室内の浮遊粒子数測定ポイントを示した図である。
【図１４】空間体積１０ｍ3の室内空気を、攪拌しなかった場合のウイルス噴霧時の評価室内での浮遊粒子測定ポイント（６箇所）での粒子径０．３〜０．５μｍの浮遊粒子数の経時変化を示した図である。
【図１５】図１の採取部４ｂの概略構成を示す図である。
【図１６】実施の形態１による空気調和装置を運転しない状態でのウイルス数変化を計測した結果である。
【図１７】実施の形態１による空気調和装置を運転した状態でのウイルス数変化を計測した結果である。
【図１８】実施の形態１による空気調和装置を運転しない状態での評価室内でのウイルス噴霧後の直径０．３μｍ〜０．５μｍの粒子数の変化結果である。
【図１９】実施の形態１による温度とウイルスの浮遊量の相関を調べた結果である。
【図２０】実施の形態１による湿度とウイルスの浮遊量の相関を調べた結果である。
【図２１】本発明の実施の形態２に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。
【図２２】図２１の噴霧装置２の概略構成図である。
【図２３】本発明の実施の形態３に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。
【図２４】図２３の噴霧装置２０Ａの概略構成図である。
【図２５】本発明の実施の形態４に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。
【図２６】図２５のウイルス採取装置４ｆの概略構成図である。
【図２７】本発明の実施の形態５に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明の好適な実施の形態について説明する。なお、本発明は、以下の図に示す構成に限定されるものではない。
【００１８】
実施の形態１．
まず、浮遊ウイルス不活化評価装置の具体的な構成を説明するに先立ち、浮遊ウイルス不活化評価装置における試験方法の概要について説明する。
浮遊ウイルス不活化評価装置は、外壁により外部空間と隔離された評価室内にウイルスを供給し、続いてウイルス不活化デバイスを備えた装置（例えば、空調機や、空気清浄機といった空気調和装置等）を駆動して評価室内にウイルスを不活化させる不活化粒子を供給し、ウイルスを不活化する。そして、ウイルス不活化デバイスによるウイルス不活化後の評価室内のウイルス数を計測し、ウイルス不活化デバイスによるウイルスに対する不活化能力を評価する。
【００１９】
以下、本実施の形態１の浮遊ウイルス不活化評価装置で使用するウイルスや、評価室内に長期間、安定してウイルスを浮遊させるための構成等について説明する。なお、本実施の形態１では、下記の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４（ＡＴＣＣ１３７０６−Ｂ１）液を原液として、滅菌超純水にて１００倍希釈したものをウイルス噴霧液とする。そして、その液を、評価室１０ｍ3中に、噴霧流量０．４５mＬ／ｍｉｎ、１０分間で噴霧した場合に関して説明する。しかし、大腸菌ファージの作成方法および本噴霧方法はこれに限ったものではない。なお、大腸菌ファージとは、大腸菌にのみ感染するウイルスのことである。
【００２０】
（大腸菌ファージの作成方法）
以下、大腸菌ファージの作成方法について説明する。普通寒天培地で前培養した１コロニーを釣菌し、大腸菌用液体培地に植菌して、３７℃１８時間培養した。培養後、大腸菌液体培地の吸光度が０．１以上であることを確認し、試験に供した。５０ｍｌ遠沈管に、上記で作成した大腸菌液体培地５ｍＬ（約１０8ＣＦＵ／ｍｌ）（ＣＦＵ：Colony forming unit）とファージ５ｍＬ（約１０6ＰＦＵ／ｍｌ）（ＰＦＵ： Plaque forming unit）を加えて混合し、３７℃１０分間静置した。この液に、４５℃の軟ＮＢ寒天培地１０ｍｌを添加混合し、当日作製した角型シャーレ下層へ重層し、固定化させて倒置せずに３７℃で２４時間培養した。培養後、角型シャーレ上層をコンラージ棒およびピペットを用いて、フィルター付きストマッカー用袋に回収し、２分間ストマッキングした。この液を別の５０ｍｌ遠沈管に移し、３５００ｒｐｍで１０分間遠心し、上澄みをさらに別の５０ｍｌ遠沈管に移した。
【００２１】
この遠心操作を２回繰り返しした後、上澄みを３０分間氷冷し寒天を析出させ、さらに１回遠心して寒天を除いた。遠心後の上澄みを孔径０．２２μｍのメンブレンフィルターでろ過したものを大腸菌ファージ原液として試験に供した。なお、作成したファージ原液は、試験に供すまで−８５℃で凍結保存している。
【００２２】
上記に記載した大腸菌ファージ原液を用い、ウイルスを噴霧する場合、ウイルス噴霧液としては、液の表面張力が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）、望ましくは６５〜６９（×１０-3Ｎ／ｍ）に調節した液を用いるのが望ましい。このようにして噴霧した場合、ウイルス含有浮遊粒子（以下、ウイルス粒子と記載する）の粒子径は０．３〜０．５μｍとなる。ウイルスは、ウイルス粒子のみを分離噴霧することができないため、基本的に水溶液中に懸濁された状態で噴霧される。ウイルスは、他の微生物に比べ、粒子径が数十ｎｍと非常に小さいため、ウイルス粒子の粒子径は、噴霧する際に、ウイルスとともに飛散する水分性状に支配される。
【００２３】
（安定浮遊に好ましいウイルス粒子直径）
ウイルスをウイルス粒子として浮遊させた場合、粒子径が大きいと、自重により自然落下してしまう。逆に、粒子径が小さいと、ウイルスを包む水分が少なくなり、乾燥によりウイルスが不活化しやすい状態となってしまう。以上のようなことから、ウイルスを不活化することなく、安定に浮遊させるためには、ウイルス粒子の噴霧粒子径は、直径０．３〜０．５μｍが望ましい。
【００２４】
（噴霧方式）
以下、噴霧方式について説明する。ウイルスは、残栄養塩濃度を、表面張力、または電気伝導度、または粘度により規定したウイルス噴霧液をジェット式ネブライザで噴霧するのがよい。大腸菌ファージ原液を噴霧する場合、原液は上記のように、寒天培地内で、感染させ、増殖させた大腸菌ファージを精製し、作成する。そのため、大腸菌ファージ原液中には、どうしても培地成分である栄養塩が残存してしまう。本報では、その残存する培地成分を、残栄養塩と定義する。具体的には、肉エキス、ペプトン、寒天、塩化ナトリウム、グルコース、酵母エキス、ブドウ糖等であるが、これらだけでなく、大腸菌ファージ、またそのホスト等、本評価において、浮遊させる微生物を培養する際に用いられる成分すべてを残栄養塩とする。
【００２５】
また、ネブライザとは、液体を噴霧する装置のことである。液体の噴霧方法としては、ジェット式と超音波式とがあり、前者は高速の空気流を利用して霧吹きの原理で細かな液滴を作り出すもの、後者は超音波振動子によって液体を液滴にし、それをファンによる風にのせて噴霧するものである。大腸菌ファージ原液の１００倍希釈液をウイルス噴霧液として、ジェット式、超音波式の両者で、評価室内に噴霧した場合の、評価室中央でのウイルス粒子の粒子径分布を比較した場合、超音波方式に比べ、ジェット式のほうが粒子径は細かく、直径０．３〜０．５μｍ粒子を噴霧でき、かつ粒子数も多い。そのため、ウイルス噴霧液は、ジェット式ネブライザで噴霧するのがよい。ウイルス噴霧液は、先に示した大腸菌ファージ原液作成方法のように、ウイルスを栄養塩含有液体状で培養した後、それを精製することにより作成される。
【００２６】
（残栄養塩濃度）
大腸菌ファージ原液を用いる場合において、ウイルス噴霧液中の残栄養塩濃度と、その液を、評価室内にジェット式ネブライザにより噴霧した際に生じる浮遊物質の粒子径分布との関係では、残栄養塩濃度とともに、噴霧粒子数が変化し、濃度が高くなるほど、全測定粒子径の噴霧粒子数量が多くなった。また、残栄養塩濃度とともに、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数比が異なった。
【００２７】
図２は、ウイルス液中の残栄養塩濃度と、その濃度のウイルス液を噴霧した際の粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数との関係を示した図である。図３は、ウイルス液中の残栄養塩濃度と、その濃度のウイルス液を噴霧した際の、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子の全粒子数に占める割合との関係を示した図である。残栄養塩比が０．００１の場合、８×１０7個／１０ｍ3程度存在させることができる。また、０．１倍以上にすると、更に１０9個／１０ｍ3以上噴霧させることができる。なお、粒子数の検出限界は１０4個／１０ｍ3であるため、ウイルス除去デバイス性能を的確に評価するためには、１０6〜１０7個／１０ｍ3以上対象粒子が存在することが望まれている。
【００２８】
また、残栄養塩濃度と粒子径０．３〜０．５μｍの粒子の全粒子数に占める割合では、ウイルス噴霧液を噴霧した際に、残栄養塩比として０．１以下と調節すると、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子の全粒子数に占める割合が５０％以上、０．０１〜０．００１に調節すると、９０％程度にすることができる。
【００２９】
以上のことより、残栄養塩比として、０．１〜０．００１、望ましくは、０．０１程度に調節したウイルス噴霧液を噴霧した際に、ウイルス粒子を沈降しにくい直径０．３〜０．５μｍの粒子径として、浮遊させることができる。
なお、この各粒子径での噴霧粒子数は、大腸菌ファージの種類によらず、かつ、大腸菌ファージの全く入っていない大腸菌ファージ作成液を原液として用いた場合にも同様の結果が得られる。
【００３０】
（残栄養塩濃度：表面張力による設定）
図４は、大腸菌ファージ原液を用いた場合のウイルス噴霧液の残栄養塩濃度と表面張力との関係を示す図である。図４に示すように、ウイルス噴霧液中の残栄養塩濃度が高いほど、表面張力が低下している。これは、残栄養塩が界面活性剤の性質を有していることを示しており、ウイルス噴霧液中の残栄養塩が界面活性作用を有しているため、希釈率が低いほうが、ネブライザで噴霧した際の粒子中の水の蒸散が抑制され、その結果、噴霧粒子数が増加、かつ、噴霧粒子径が大きいほうにシフトする結果となったと考えられる。
【００３１】
先の方法にて作成した大腸菌ファージ原液を用いる場合、ウイルス噴霧液の表面張力を６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）、望ましくは、６５〜６９（×１０-3Ｎ／ｍ）と規定することで、残栄養塩濃度を制御し、ウイルス噴霧液を噴霧した際に生じるウイルス粒子を、沈降しにくい直径０．３〜０．５μｍの粒子径として、浮遊させることができる。
【００３２】
（残栄養塩濃度：電気伝導度又は粘度による設定）
図５に、大腸菌ファージ原液を用いた場合のウイルス噴霧液の残栄養塩濃度（噴霧粒子径）と電気伝導度との関係を示す。残栄養塩濃度と、電気伝導度においても相関があることがわかる。表面張力のかわりに、電気伝導度を、１０〜１０００μｓ／ｃｍ、望ましくは１００μs／ｃｍと規定したウイルス噴霧液を噴霧することにより、ウイルス粒子の粒子径分布を制御したウイルス噴霧が可能となる。また、ウイルス噴霧液の粘度を規定することによっても、ウイルス噴霧液を噴霧することにより、ウイルス粒子の粒子径分布を制御したウイルス噴霧が可能となる。
【００３３】
なお、大腸菌ファージ、またウイルスの原液の作成方法として、先の方法とは別の方法を用いた場合は、ウイルス噴霧液の性状と噴霧した際のウイルス粒子の粒子径分布の関係を明確化し、上記の方法にて、ウイルス噴霧液中の残栄養塩濃度を規定することで、ウイルス粒子の粒子径分布を制御したウイルス噴霧が可能となる。
【００３４】
（ウイルス数の計測）
評価室内に浮遊するウイルス数を計測する場合、浮遊しているウイルスを回収液中に採取し、そのウイルス懸濁液中のウイルス数を、５０％ tissue culture infective dose（TCID50）法やプラーク法を用いて計測する必要がある。これらの方法は、感染細胞の細胞変性効果（Cytopathic effect, CPE）や培養細胞に生ずるプラークを指標としているため、測定方法、操作法が煩雑であり、かつ判定方法にかなりの習熟度を必要とし、さらには、判定までに１日から約一週間の日数を必要とする。
【００３５】
大腸菌ファージφＸ１７４の原液（１０10ＰＦＵ／ｍｌ）を表面張力が６５、または６９（×１０-3Ｎ／ｍ）となるよう、滅菌水にて、１０倍希釈および１００倍希釈し、ジェット式ネブライザ（ＮＥ−C２９、オムロン製）を用いて、評価室１０ｍ3中に、それぞれ噴霧流量０．４５mＬ／ｍｉｎ、１０分間、噴霧した。１００倍希釈液を噴霧した場合、噴霧粒子径が０．３〜０．５μｍの粒子数は５．０×１０8個／１０ｍ3で、最も粒子数が高く確認され、この際、噴霧されたウイルス噴霧数は、４．５×１０8１０ＰＦＵ／１０m3と算出され、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数とほとんど同数検出された。また、１０倍希釈液を噴霧した場合においても、噴霧粒子径が０．３〜０．５μｍの粒子数は９．０×１０9個／１０ｍ3で、最も粒子数が高く確認され、この際、噴霧されたウイルス噴霧数は、５．０×１０9１０ＰＦＵ／１０ｍ3と算出され、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数とほとんど同数検出された。
【００３６】
つまり、この噴霧方法で、ウイルス噴霧液を噴霧すると、粒子径０．３〜０．５μｍのウイルス粒子一つに対し、ウイルス、具体的には大腸菌ファージφＸ１７４が１存在する系を確立することができる。その結果、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子をパーティクルカウンターで計測することで、ウイルス数、具体的には大腸菌ファージφＸ１７４数を推定することが可能となる。つまり、本来上記のように計測するのに時間を有したウイルス数を、パーティクルカウンター等で粒子数を測定することにより、リアルタイムに推定することができる。ただし、ウイルス不活化メカニズムは、多種多様であるため、パーティクルカウンターでの粒子数の測定と、ウイルス数との間にずれが生じる場合がある。その場合は、粒子数の減少数が物理的除去の効果となるとともに、粒子数とウイルス数の差数がウイルス不活化による効果となるため、ウイルス不活化メカニズムを検証する方法として使用することが可能となる。
【００３７】
（ウイルス噴霧場所）
以下、ウイルス噴霧場所について説明する。評価室内の噴霧ウイルス場所は特に規定しない。図６、図７は、評価室１０ｍ3の中で、大腸菌ファージ原液を用いたウイルス噴霧液をジェット式ネブライザを用いて噴霧させる場合に、噴霧場所を変えた際の、パーティクルカウンターによる評価室中央での粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数を測定した結果を示す図である。噴霧場所に関係なく、噴霧ウイルス数が一定であり、噴霧場所が浮遊ウイルス数に影響を与えないことがわかる。ただし、ウイルス不活化評価デバイスの設置に影響を与えない場所で噴霧するのがよい。
【００３８】
（ウイルス採取手段）
以下、評価室内のウイルスを採取するウイルス採取手段について説明する。浮遊ウイルスの採取には、図８に示すＪＩＳ３８００Ｋで規定されているミゼットインピンジャー（以下、インピンジャーと記載する）を用いると、ウイルス採取率が高く、有効である。具体的な採取方法としては、インピンジャーノズル先端部での流速が１０５ｍ／ｓ以下、望ましくは１０５ｍ／ｓで、インピンジャーを直列に多段式に連結させるのがよい。特に、四連連結が望ましい。また、各インピンジャーの前に差圧計および圧力可変なオリフィスを接続させるのが望ましい。以下、その理由について順次説明する。
【００３９】
（ウイルス採取手段：インピンジャーノズル先端部での流速）
まず、インピンジャーノズル先端部での流速が１０５ｍ／ｓ以下である必要性に関して説明する。一般的に、芽胞菌等をインピンジャーで採取する際には、インピンジャー入口流量を１２．５Ｌ／ｍｉｎまで増加させる。これは、インピンジャーのノズル径が入口径φ８ｍｍから先端径φ１ｍｍと急激に細くなることを利用して、ノズル先端での速度を２６５ｍ／ｓと音速程度まで増大させ、採取空気が回収水に衝突する慣性力を利用して採取効率を高めるためである。音速まで速度を増大させると、ノズル径が小さくなったインピンジャー内部の空気は、圧縮系となり、その結果、熱が上昇する。芽胞形成菌等は、硬い細胞壁で覆われているため、圧力・熱に強く、上記の状態に曝されても性状が変わることはない。
【００４０】
しかし、ウイルスは、たんぱく質とＤＮＡやＲＮＡのみから単純な構造を有しており、圧縮、熱がかかった系では容易に感染力が低下し、不活化してしまう。そのため、圧縮、熱のかからない状態、すなわちウイルスに負荷が掛からない状態での採取方法がよい。したがって、インピンジャーノズル先端部での流速を、芽胞菌等を採取する場合よりも下げる必要がある。
【００４１】
表１に、インピンジャー入口径φ８ｍｍ、先端部φ１ｍｍでの入口流量（回収速度Ｌ／ｍｉｎ）毎の、ノズル先端での速度とマッハ数と空気状態との関係を示す。
【００４２】
【表１】
【００４３】
マッハ数とは、式１に示される流体の流れの速さと音速との比で求まる無次元数で、流れ場のもつ運動エネルギーと内部エネルギーの比率、つまり流れ場における圧縮性の影響力を表している。つまり、マッハ数とは、圧縮性を考慮するか否かの指標であり、マッハ数が小さい＝圧縮性の影響が小さい（概ね０．３より小さいとき）流れでは圧縮性を無視できるといわれている。そのため、ノズル先端部での流速は、マッハ数０．３となる流速１０５ｍ／ｓ以下とするのが望ましい。
【００４４】
図９は、φ１ｍｍにおけるインピンジャーノズル先端部での流速とウイルス回収量との関係を示す図である。図９に示すように、回収流速が大きいほどウイルス回収量が高い。そのため、回収流速は１０５ｍ／ｓとするのが最も良い。
【００４５】
M＝ω／ａ ・・・式１
M：マッハ数
ω：流速（ｍ／s）
ａ：音速（３４０ｍ／s）
【００４６】
なお、インピンジャー入口径φ８ｍｍ、先端部φ１ｍｍの場合、表１に示すとおり、マッハ数０．３となる採取流量は、インピンジャー入口流量５Ｌ／ｍｉｎの時であるため、採取流量としては、５Ｌ／ｍｉｎがよいことになる。
【００４７】
（ウイルス採取手段：インピンジャーの直列多段連結）
インピンジャーを多段式に直列に連結させる理由を説明する。インピンジャー１本で捕集できる粒子数は、１０〜２０％弱であり、ウイルス採取時においても当てはまる。インピンジャーでの先の大腸菌ファージ原液を用い、ウイルス噴霧液を噴霧した場合のウイルス採取量は、採取空気中のウイルス数に対して１７％程度であるため、２本直列で繋いだ場合の１本目、２本目でのウイルス採取量は、１７％、１４％となり、２本目のインピンジャーにおいても、総採取量の４５％を占める。
【００４８】
表２に、連結本数と総ウイルス採取量の関係を示す。
【００４９】
【表２】
【００５０】
連結本数が増加するほど、回収量が増大する。一般的に、ウイルス回収効率が高いと報告されているゼラチンフィルターにおいての回収効率は４０％〜５０％である。このゼラチンフィルター以上の回収効率を有するには、表２よりインピンジャーを四連連結させる必要があることがわかる。以上のことから、インピンジャーを多段式に、特に直列に４連以上連結させることにより、他の回収効率よりも高い効率を得ることができる。ただし、多段式にした場合、インピンジャーの連結本数が多くなるほど、必要吸気ポンプ容量が大きくなり、エネルギーが多量にかかる。そのため、回収量が５０％を超える四連連結程度が望ましい。
【００５１】
（ウイルス採取手段：差圧計および圧力可変なオリフィス）
直列に繋ぐ各インピンジャーの前に差圧計および圧力可変なオリフィスを接続することについて説明する。なお、オリフィスとは、圧力差を作るための絞りのことである。インピンジャー先端ノズル径は、インピンジャー作成のガラス管径によって決定する。一般に市販のガラス管φ１ｍｍの公差は±１０％であるため、ノズルの公差も必然的に±１０％となり、その結果、ノズル先端部での速度公差は約±２０％となる。
【００５２】
表３は、インピンジャー先端部ノズル径毎に、ノズル先端部での速度と、ノズル径φ１ｍｍに対する速度比（速度の交差）と、回収率との関係を示した表である。
【００５３】
【表３】
【００５４】
インピンジャーノズル先端部での流速とウイルス回収量とには、図９に示したように指数的な相関があることがわかり、ノズルの先端部での速度公差が±２０％である場合、ウイルス回収量の公差には±２４％程度の差が生じてしまう。なお、図９は、単連での試験結果である。
【００５５】
しかし、インピンジャー前に、差圧計およびオリフィスを設置し、ノズル先端部での圧力を調節し、ノズル先端部での流速を１０５ｍ／ｓに調節することにより、このばらつきは解消される。以下に具体的に説明する。
【００５６】
流速と圧力の関係は、式２に示すベルヌーイの式から算出できる。ベルヌーイの定義とは、流れに沿って成り立つエネルギー保存の法則のことで、流体の挙動を平易に表した式である。インピンジャー入口での流量を５Ｌ／ｍｉｎとした場合、使用したインピンジャーノズルでの流速、その時の圧力（大気圧）を基準にして、流速を１０５ｍ／ｓに変化させるのに必要な圧力が、式２から、算出できる。
【００５７】
V2／２＋Ｐ／ρ＋ｇＺ＝ｋ・・・式２
Ｖ：流速（ｍ／ｓ）、Ｐ：圧力（Ｎ／ｍ2）、ρ：密度（ｋｇ／ｍ3、０℃１ａｔｍの場合、１．２９３）
ｔ℃における空気の密度ρは下記の式３で表される。
ρ＝１．２９３×Ｐ／（１＋０．００３６７ｔ） ・・・式３
【００５８】
表４に、ノズル先端径をφ０．９ｍｍ、１．０ｍｍ、１．１ｍｍとした場合のノズル先端での速度と、ノズル先端部での流速を１０５ｍ／ｓにするために必要な圧力を上記式１から算出した結果を示す。
【００５９】
【表４】
【００６０】
ノズル径が最も小さくなるφ０．９ｍｍのインピンジャーを用いる場合には、３．７ｋＰａの圧力をさげるオリフィスをインピンジャー前に設置する必要がある。また、ノズル径が最も大きくなるφ１．１ｍｍのインピンジャーを用いる場合には、２ｋＰａの圧力を加えるオリフィスを設置する必要がある。なお、ノズル径がφ１．０ｍｍの場合は、圧力をかける必要がない。
【００６１】
なお、ウイルスは、先に述べたとおり、圧縮系、つまり圧力をかけた条件で回収すると、ウイルスの感染価の低下等を招く恐れがある。しかし、インピンジャーノズル部の流速を変えるのに必要な圧力（−３．７〜２．０ｋＰａ）による圧縮は、ウイルス感染価に全く影響を与えないことは確認済みである。
【００６２】
以上のことから、各インピンジャーの前段に、差圧計および圧力可変なオリフィスを設置することにより、必然的に生じるノズル先端部の直径の公差によらず、ノズル先端での流速を１０５ｍ／ｓに調節することが可能となる。その結果、回収量のばらつきが劇的に減少し、±５％以下に抑えられる。なお、ここでは、各インピンジャーの前段に差圧計およびオリフィスを設けるとしたが、連結させる複数のインピンジャーのうち、ノズル径が等しいインピンジャーが存在し、且つそのノズル径が等しいインピンジャーを順番に直列に連結させる場合には、ノズル径が等しいインピンジャー間の差圧計およびオリフィスは省略できる。
【００６３】
また、連結させるインピンジャーのノズル径がすべて等しい場合に限っては、インピンジャーノズル先端部における流速が１０５ｍ／ｓとなる入口流量を、式４により算出し、入口流量を変化させ、ウイルスを回収する方法を用いても良い。
Ｕ×Ａ＝Ｋ・・・式４
Ｕ：流速（ｍ／ｓ）
Ａ：断面積（ｍ2）
Ｋ：定数（＝流量 ｍ3／s）
【００６４】
（評価室）
評価室には、外部空間から評価室内への空気を取り入れるための空気取入口を設ける。空気取入口には、取り入れられる空気中の埃や微生物等を採取する吸気中微小物質採取手段を設けることが望ましい。具体的な方法としては、空気取入口にＨＥＰＡ等のフィルターを設ける。これにより、評価室内の微小物質による汚染を防ぐことができる。
【００６５】
また、評価室には、評価室内の空気を外部空間へ排出する空気排出口を設ける。空気排出口には、排出される空気中のウイルスを採取する排気中ウイルス採取手段を設ける。これにより、評価室内のウイルスが外気中に漏れるのを防ぐことができる。
【００６６】
評価室は、常圧が望ましいが、陰圧状態であることが望まれる。評価室内が加圧状態とならないようにするための手段として、空気排出口から、評価室内の空気を吸引し、評価室内を陰圧状態に保持する吸引手段を設ける方法がある。評価室内の空気を強制的に外部空間へ排出することにより、評価室内の気圧を下げることができる。
【００６７】
また、その他の評価室内が加圧状態とならないようにするための手段として、評価室内を仕切り、評価室内で移動可能な可変壁を設け、該可変壁の移動により評価室の容積を変更可能とする方法が挙げられる。容積を大きくすることにより、評価室が加圧状態となるのを防ぐことができる。
【００６８】
評価室内の温度、湿度は調節されていることが望ましい。温度や湿度の変化に弱いウイルスを安定的に空間中に浮遊させることができる。具体的には、空気取入口よりも上流側に温度、または湿度を調節する空気調和部を設けることができる。また、評価室内に空気調和部を設ける構成としてもよい。
【００６９】
試験環境における湿度の調節は、水の加熱により蒸発させた高温水蒸気を一度冷ました後飛散させる低温加湿器がよい。水を加熱し、蒸発させる場合、水蒸気の殺菌につながり、無菌化される。また、その高温水蒸気を一度冷ますことにより、高温によるウイルスの不活化効果を無効化することができる。加湿器には、一般的超音波で水にエネルギーを与え、空気中に飛散させる方法があるが、この方法では、噴霧させる水中の殺菌工程がないため、浮遊ウイルス除去試験装置内の加湿方法としては望ましくない。なお、最適浮遊ウイルス温度、湿度は、噴霧するウイルスにより異なるため、それぞれのウイルスの最適環境に合わせた設定を行うことが望ましい。
【００７０】
評価室の床面、壁面の材質は、帯電量１０8Ω以下が望ましい。塗装鋼板やステンレス鋼である。床面、壁面が１０9Ω以上と帯電すると、物質が吸着しやすくなり、浮遊させたウイルス粒子が床面や壁面に付着してしまう。
【００７１】
図１０に、帯電量と浮遊ウイルス付着数の関係を示す。帯電量が１０8Ω以上になると急激に浮遊ウイルスが付着する。そのため、帯電量を１０8Ω以下にすると、浮遊ウイルス粒子が床面、壁面に付着するのを防ぐことができる。また、評価室の内部空間で、ウイルスを浮遊させるために、浮遊ウイルスの下方から評価室の内部空間を攪拌して行うことができる。攪拌方法としては、風向き可変攪拌方法を用いるのが良い。風向き可変攪拌とは、攪拌方向が一方向ではなく、常時円を描きながら、他方に風向きを変え、攪拌を行う方法である。
【００７２】
図１１は、この手法により、評価室内の空気の攪拌を行った場合の室内の空気の流れを示す図である。評価室内の空気は、床から円を描くように上昇する攪拌となる。その結果、評価室内に噴霧されたウイルス粒子の自重による自然沈降を防ぐことができる。なお、図１１には、風向きを時計回りに記載しているが、風の向きは攪拌ファンの風向き可変方向等により異なる。具体的には、評価室の空間体積１０ｍ3においては、７．８ｍ3／分以上の風速で、風向き可変攪拌を行うのがよい。
【００７３】
図１２は、空間体積１０ｍ3の室内空気を、風向き可変攪拌ファンにより７．８ｍ3／分の風量で攪拌した場合の、ウイルス噴霧時の評価室内での浮遊粒子測定ポイント（７箇所）における、粒子径０．３〜０．５μｍの浮遊粒子数の経時変化を示す図である。なお、図１３は、評価室内の浮遊粒子数測定ポイントを示している。また、図１４は、比較として空間体積１０ｍ3の室内空気を攪拌しなかった場合のウイルス噴霧時の評価室内での浮遊粒子測定ポイント（６箇所）における、浮遊粒子測定ポイントでの粒子径０．３〜０．５μｍの浮遊粒子数の経時変化を示している。
【００７４】
（攪拌ファン）
風向き可変攪拌ファンを用い、評価室内空気を攪拌した場合、浮遊粒子測定ポイントすべてにおいて同程度の粒子が測定されるとともに、時間的経過とともに、すべてのポイントにおいて同様に推移できた。その一方で、攪拌ファンを用いない場合は、浮遊粒子測定ポイントすべてにおいて時間的にばらつきが大きく、評価室内で浮遊粒子数にばらつきがあった。
【００７５】
空間体積が１０ｍ3よりも大きくなる場合は、評価室内全体を１台の風向き可変攪拌ファンで均一に攪拌することは難しい。なぜなら、どうしても、評価室内の中で、風が到達しない部分がでてくるからである。そのため、主に、評価室内全体を攪拌しようとする主的風向き可変攪拌ファンを１台用いるに加え、その攪拌により十分攪拌できない部分を補う補助的風向き攪拌ファンを１台以上用いるのが望ましい。補助的風向き攪拌ファンの設置場所は、評価室の構造によるため、特に限定されるものではないが、主的風向き可変攪拌ファンが設置された場所に対し、評価室内で最も遠くなり、ファンの影響を受けにくい、対角から攪拌することが望ましい。
【００７６】
（浮遊ウイルス）
浮遊させるウイルスとしては、特に限定されるものではないが、人体に影響を与えず、かつ、乾燥に強く、浮遊時に自然減衰しにくい大腸菌ファージが望ましい。ウイルスを不活化させる不活化因子としては、オゾンガス、ラジカル粒子、イオン粒子、放射光、Ｘ線等を、また、ウイルス不活化デバイスとしては、それらの発生機能を有する空調機、空気清浄機等を用いることができる。
【００７７】
（不活化処理）
ここで、上記不活化因子がウイルスを不活化処理できる理由を、以下に述べる。
オゾンは、酸素、または空気を原料としての放電法、紫外線照射法、放射線照射法等により生成する。特に放電法の中でもコロナ放電においては、空気清浄機、空調機等内でのオゾンガスを生成するときに使用されている。以下に、コロナ放電に関して説明する。針状の電極が空中に配置されて高電圧がかけられた場合、その針の先端の周辺に気中放電が生じ、暗くするとその電極周辺にＣｏｒｏｎａ（王冠）状の光が確認される。
【００７８】
このように、局所的に放射状の強い電界が存在する場合に現れる気中放電をコロナ放電といい、本放電を行った結果、オゾンが生成する。オゾンは、ウイルスのたんぱく質と結合し、変性させ、また、直接ＤＮＡやＲＮＡにアタックし、感染力をなくすことにより、ウイルス不活化作用を生じさせるという効果が生じ得る。また、オゾンは、不活化処理能力を発揮した後、無害な酸素になり、残存することがない。そして、かかるオゾンによりウイルスを不活化処理する能力を評価することが可能になる。
【００７９】
オゾンガスと、過酸化水素やＵＶによる反応によりラジカルＯＨ・が生成される。ラジカル・ＯＨ・はきわめて強力な活性を示し、たんぱく質の変性や、ＤＮＡ、ＲＮＡの損傷に作用し、ウイルス不活化作用を生じさせる。また、ラジカルは、即座に、ウイルスや空気中の諸分子と結合し、不活性な物質に変化するため、残存することはない。そして、かかるラジカルによりウイルスを不活化処理する能力を評価することが可能になる。
【００８０】
また、ウイルスを不活化処理するにあたり、薬剤を用い、薬剤の粒子を照射して不活化処理することもできる。薬剤を用いて不活化処理すると、前記イオンやオゾンよる場合に比べ、その粒子の供給を簡易な装置で行うことができる。そして、かかる薬剤によるウイルスの不活化効果を評価することが可能になる。
【００８１】
なお、特に、ウイルス不活化因子として、オゾンガス、ラジカル等の不活化能力を有するガスまたは粒子を用いた試験方法に本試験方法を好適に用いることができる。空気中にオゾンガス、ラジカル等の不活化能力を有する粒子を放出し、その効果を検証する試験においては、一般家庭用途を想定し、ウイルス粒子が存在する空間内に、人体に害のない範囲で不活化能力を有する粒子を放出する試験が一般的である。したがって、空気中のウイルス粒子に対する不活化効果を調べるには、比較的長時間での浮遊ウイルス不活化効果を調べる必要がある。よって、長時間安定してウイルスを浮遊させる必要がある。その方法として、上述したように、ウイルス粒子径が安定浮遊に好ましい０．３〜０．５μｍとなるように残栄養塩濃度を調整するべく、表面張力、電気伝導度及び粘度等を設定する方法が特に顕著に有効である。
【００８２】
また、人等が存在する室内空間で、ウイルスを不活化させる試験方法にも本試験方法を好適用いることができる。このような試験の場合においては、人体に害のない範囲での不活化能力試験が一般的である。したがって、空気中のウイルス粒子に対する不活化効果を調べるには、比較的長時間での浮遊ウイルス不活化効果を調べる必要がある。よって、長時間安定してウイルスを浮遊させる必要がある。その方法として、上述したように、ウイルス粒子径が安定浮遊に好ましい０．３〜０．５μｍとなるように残栄養塩濃度を調整するべく、表面張力、電気伝導度及び粘度等を設定する方法が特に顕著に有効である。
【００８３】
また、採取されたウイルスを計測するにあたり、さらにその粒子の曝露時間による経時変化を測定することもできる。これにより、ウイルスを不活化処理する能力の時間の経過に対する定量的な評価を行うことができる。
【００８４】
また、採取されたウイルスを測定するにあたり、ウイルス不活化因子の濃度依存性を測定することもできる。これにより、ウイルスを不活化処理する能力の粒子濃度依存性に対する定量的評価を行うことができる。
【００８５】
（浮遊ウイルス不活化評価装置の具体的な構成）
以下、上記の構成を具体化してなる浮遊ウイルス不活化評価装置について説明する。
【００８６】
図１は、本発明の実施の形態１に係る浮遊ウイルス不活化評価装置を示す概略断面図である。
本浮遊ウイルス不活化評価装置は、外壁により外部空間と隔離された評価室１内にウイルスを供給するウイルス供給装置としての噴霧装置２と、評価室１内のウイルスを不活化する空気調和装置３と、ウイルス採取装置４と、パーティクルカウンター５ａと、室内粒子数測定装置５とを有している。
【００８７】
評価室１は、その４方が隔離壁により外部空間と隔離され、気密性の高いクリーンルームとなっている。評価室１の空間サイズは、約１０ｍ3（２．２×２．２×２．２ｍ）とされるが、サイズは限定されるものではない。また、評価室１入り口壁側に、前室１００が設けられている。また、評価室１の床面、壁面の材質は、帯電量１０8Ω以下のものを採用することが望ましい。
【００８８】
また、評価室１の下方に攪拌ファン６が設けられている。攪拌ファン６は、風向き可変式のファンで、その周囲に気流を形成して空間を攪拌することができ、ウイルス粒子の自重による下方への自然沈降を防ぐことができる。評価室１の空間サイズが１０ｍ3の本装置の場合、７．８ｍ3／分以上、望ましくは７．８ｍ3／分の風量がよい。なお、本風量は、人が風を感じない程度の微量な風量である。
【００８９】
また、評価室１内には殺菌灯７を装備しており、室内の除菌が可能である。この殺菌灯７は、主に、評価試験前における評価室１内の殺菌に用いられる。また、評価室１内の気圧を計測する気圧計（図示せず）が設けられている。この気圧計は、前室１００内の気圧を計測する気圧計（図示せず）と共に、評価室１外から確認可能な位置に配置されている。評価室１の外壁には、評価試験前後に換気を行うための換気口として、空気取入口１ａと、空気排出口１ｂとが設けられる。更に、前室１００側に空気出入口１ｃが設けられている。この空気取入口１ａ、空気排出口１ｂおよび空気出入口１ｃは閉塞可能であり、評価試験中には閉じられている。また、評価室１には、評価室１内部に出入りするための扉９が設けられている。
【００９０】
空気取入口１ａには、ＨＥＰＡ／活性炭フィルターが設けられ、清浄化された空気を導入することができる。また、空気排出口１ｂには、ＨＥＰＡ／活性炭フィルターが設けられ、空気を清浄化した後に外部空間に排気することができる。なお、空気取入口１ａおよび空気排出口１ｂに設けられるフィルターはＨＥＰＡ／活性炭フィルターに限定されるものではなく、他の種類のフィルターを用いても良い。また、空気出入口１ｃにも同様にＨＥＰＡ／活性炭フィルターが設けられている。
【００９１】
噴霧装置２は、ネブライザ２ａと、コンプレッサー２ｂと、コンプレッサー２ｂの駆動をＯＮ／ＯＦＦする電源２ｃとを有している。ネブライザ２ａとコンプレッサー２ｂは評価室１内に配置され、コンプレッサー２ｂの駆動により、ネブライザ２ａ内にセットされた噴霧液が評価室１内へ噴霧される。ネブライザ２ａは、床面から１００ｃｍ、壁面から５０ｃｍの部分に、噴霧側が真上になるようにコンプレッサー２ｂ上に設置されている。
【００９２】
噴霧装置２により噴霧する噴霧液は、上述の方法によって作成された大腸菌ファージφＸ１７４（ＡＴＣＣ１３７０６−Ｂ１）液を原液として、滅菌超純水にて１００倍希釈したものとする。φＸ１７４は、大腸菌に感染するウイルスで、１−ＤＮＡを有する直径約２６ｎｍで、正２０面体のウイルスである。φＸ１７４を初めとする大腸菌ファージは、一般的に、人に対しては病原性を有しない。また、乾燥による不活化や、自重による自然落下を防止可能な粒子径０．３〜０．５μｍとなるように、表面張力、電気伝導度または粘度の何れかが上述したように調整されたものである。また、ここで使用するネブライザ２ａは、上述したように、粒子径０．３〜０．５μｍの粒子を噴霧できるジェット式ネブライザを用いることが好ましい。
【００９３】
また、ウイルス不活化デバイスとしての空気調和装置３は、具体的には例えばエアコンや空気清浄機で構成され、ＨＥＰＡフィルターによるウイルス捕集機能や、空気中にオゾンガス、ラジカル等の不活化能力を有する粒子を放出し、ウイルスを不活化させる機能を有する。ここでは、空気調和装置３は、空気中のウイルスを電気集塵により、装置内に捕集し、その後、空気中の水分に高電圧をかけ作成した１０〜４０ｎｍの水分粒子（イオンが多数存在）によりウイルスを装置内で不活化するシステムとしている。空気調和装置３は支持台３ａによって支持されている。
【００９４】
ウイルス採取装置４は、評価室１内に配置され、評価室１内のウイルスを採取するための採取管４ａと採取部４ｂとを備えており、第１計測方法によりウイルス計測して評価する第１ウイルス計測装置に相当する。採取管４ａは、評価室１及び前室１００を貫通して前室１００内に延び、採取部４ｂに接続されている。また、採取管４ａの評価室１内の先端は、支持台４ｃによって支持されている。ウイルス採取装置４には更に、ウイルスを採取して除去された空気を評価室１内に戻すための戻し管４ｄが接続され、戻し管４ｄの先端は評価室１の壁面に開口している。このようにウイルスを採取して除去された空気を評価室１内に戻すことにより、評価室１内の圧力を一定に保つようにしている。
【００９５】
図１５は、図１の採取部４ｂの概略構成を示す図である。
図１５に示すように、採取部４ｂは、図８のインピンジャー４０を四連連結させた後、流量計４１およびポンプ４２を接続する。流量は５Ｌ／ｍｉｎで吸引する。また、各インピンジャー４０の前に差圧計４３および圧力可変なオリフィス４４を接続させ、各インピンジャーノズル先端部（以下、ノズル先端部と略す）４０ａでの流速が１０５ｍ／ｓとなるようオリフィス４４を調節している。
【００９６】
パーティクルカウンター５ａは、評価室１内の粒子径０．３〜０．５μｍのウイルス粒子数を計測し、計測結果を評価室１外に配置された室内粒子数測定装置５に出力する。室内粒子数測定装置５は、評価室１内の粒子数をウイルス数としてリアルタイムに測定する。パーティクルカウンター５ａおよび室内粒子数測定装置５が第２計測方法によりウイルス計測して評価する第２ウイルス計測装置に相当する。
【００９７】
以上のような構成の浮遊ウイルス不活化評価装置を用いた試験手順を以下に説明する。
【００９８】
（１）試験準備
試験開始前に、空気取入口１ａおよび空気排出口１ｂを開けて評価室１内に塵の少ない清浄な空気が満たされるようにしておく。また、紫外線を発生する殺菌灯７により、評価室１内部の壁面等をあらかじめ一定時間照射して消毒しておき、さらに加湿器（図示せず）により、評価室１内の空気の湿度を調節しておくことが望ましい。また、例えば空気調和装置３の空調機能により、評価室１内の温度も調整しておくことが望ましい。評価室１内の消毒が終了した後、空気取入口１ａおよび空気排出口１ｂを閉じると共に、殺菌灯７の運転を停止する。そして、パーティクルカウンター５ａおよび室内粒子数測定装置５を作動させ、評価室１内の粒子数を計測する。攪拌ファン６を風向き可変をＯＮ、風速を７．８ｍ3／分とし、後に噴霧されるウイルス粒子が空間中に拡散するように、送風を行う。
【００９９】
（２）菌の噴霧
予め作成しておいたウイルス懸濁液７ｍｌをネブライザ２ａにセットし、コンプレッサー２ｂをＯＮし、ウイルス溶液を評価室１内に１０分間噴霧する。噴霧液は、上述したように、乾燥による不活化や、自重による自然落下を防止可能な粒子径０．３〜０．５μｍとなるように、表面張力、電気伝導度または粘度の何れかが上述したように調整されたものである。よって、ウイルス粒子を評価室１内に安定して長時間浮遊させることが可能となっている。また、評価室１内には攪拌ファン６により気流が形成されているため、この点からも、噴霧されたウイルス粒子は、自然落下することなく評価室１内で安定して浮遊する。
【０１００】
（３）空気調和装置３の駆動
空気調和装置３を駆動させる。空気調和装置３は、吸引した空気中のウイルスを電気集塵により、空気調和装置３内に捕集し、評価室１内の浮遊ウイルスを減少させることが可能である。
【０１０１】
（４）ウイルスの計測（第１計測方法）：ウイルス採取装置
ウイルス採取装置４のポンプ４２を作動させ、その後、評価室空気入り口コック１ｄを開き、評価室１内の空気を採取管４ａにより採取し、ウイルス粒子を採取部４ｂのインピンジャー４０で捕集する。採取部４ｂにおける採取流量は、ここでは上述したように、５Ｌ／ｍｉｎ、採取流速は１０５ｍ／ｓに調整されており、ウイルス粒子に対して圧縮、熱のかからない状態、すなわちウイルスに負荷が掛からない状態で採取できるようになっている。そして、採取された空気は、インピンジャー４０、ポンプ４２および空気戻り口１ｅを通って、再度、評価室１内に返送される。
【０１０２】
（５）ウイルスの計測（第２計測方法）：パーティクルカウンターおよび室内粒子数測定装置
パーティクルカウンター５ａは、評価室１内の粒子径０．３〜０．５μｍのウイルス粒子数を計測し、計測結果を評価室１外に配置された室内粒子数測定装置５に出力する。室内粒子数測定装置５は、評価室１内の粒子数をウイルス数と推定し、推定結果を表示手段（図示せず）に表示する。このように、評価室１内に、ウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、０．３〜０．５μｍのウイルス粒子数を計測することにより評価室内のウイルス数を計測するため、評価室１内のウイルス数を迅速に測定でき、リアルタイムにモニタリングすることができる。また、ウイルス数の測定結果は時系列に室内粒子数測定装置５内に記憶でき、ウイルス数の経時変化を確認できるものとする。
【０１０３】
インピンジャー４０によるウイルス粒子の採取後、ポンプ４２を停止させ、評価室空気入り口コック１ｄを閉めた後、インピンジャー４０を回収し、インピンジャー４０の中の回収水中のウイルス数をプラーク法にて計測した。
【０１０４】
ウイルスの採取は、１時間おきに、６回行い、６時間で合計７回行う。これにより、浮遊ウイルス濃度の経時変化を測定するようにする。
【０１０５】
（６）終了
浮遊ウイルスの評価が終わったら、空気調和装置３を停止し、空気取入口１ａから評価室１内に清浄空気を入れ、評価室１内の浮遊ウイルスを含む空気を空気排出口１ｂを通過させることで清浄化した上で、外部に排出するようにする。
【０１０６】
以上のような構成によると、ウイルスを評価室１内に自然落下することなく、安定的に浮遊させることができる。その結果、複数回試験によっても回収結果の統計的ばらつきが小さい安定した試験を行うことが可能となる。よって、ウイルス不活化デバイスの効果を正当に評価することができ、ウイルスの不活化評価精度を高精度なものとすることができる。
【０１０７】
なお、本実施の形態１では、ウイルス計測評価装置として、ウイルス採取装置４と、リアルタイムなモニタリング可能なパーティクルカウンター５ａおよび室内粒子数測定装置５との両方を用い、併用して計測評価している。しかし、本実施の形態１は、両方併用することに限定されない。
【０１０８】
また、ここでは、ウイルス不活化デバイスとしての空気調和装置３の条件については特に言及しなかったが、各種条件を自由に設定可能にすることで、ウイルス不活化条件等を定量的に評価することが可能である。
【０１０９】
次に、本試験設備により得られた試験結果を以下に示す。なお、以下の試験は、ウイルス不活化デバイス評価装置において本来目的とするウイルス不活化デバイス評価試験ではなく、いわば、本装置自体の性能試験や、試験環境の試験等に相当するものである。
【０１１０】
〔ウイルス粒子の安定性試験〕
空気調和装置３を運転しない状態における評価室１内のウイルス粒子の安定性試験について説明する。ここでは、ウイルス原液を滅菌した超純水で１００倍希釈し、表面張力を６９ｇｙｎ／ｃｍに調節したウイルス懸濁液をジェット式ネブライザで評価室１内に噴霧した。図１６は、温度２０℃、相対湿度６０％ＲＨに設定し、空気調和装置３を運転しない状態でのウイルス数変化を計測した結果である。図１６において、横軸は時間、縦軸はウイルスを浮遊させた１０ｍ3評価室１内の浮遊ウイルス濃度をとって示したものである。図１６に示すように、６ｈｒ後におけるウイルス数の減衰は、約１／１０で、大きな減少はみられていない。ウイルスは、乾燥に弱いために、相対湿度６０％ＲＨほどの高い湿度環境にすると、ウイルスが死滅することなく、不活化しない状態で、長時間浮遊させることができるものと推定される。
【０１１１】
このように、本実施の形態１の浮遊ウイルス不活化評価装置では、ウイルスを噴霧させても、長時間ウイルスを不活化させず、浮遊させることができる。
【０１１２】
〔ウイルス不活化試験〕
図１７は、空気調和装置３を運転した状態での評価室１内のウイルス数変化を計測した結果である。本試験結果は、空気調和装置３を運転しない場合（図１６）に比較して、空気調和装置３を運転した場合には、４ｈｒ後には、約９９％の浮遊ウイルスが不活化されている。本発明者らによる実験により、同条件で複数回の試験によっても、プロットの近似曲線の傾きにおいて、１０％以下のばらつきレベルに制御された安定した試験を行えることが確認されている。
【０１１３】
〔ウイルス数評価方法〕
図１８は、空気調和装置３を運転しない状態での評価室１内でのウイルス噴霧後の直径０．３μｍ〜０．５μｍの粒子数の変化を示す図である。図１８を図１６と比較すると分かるように、計測された浮遊ウイルス数と粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数とがほぼ同数で測定されている。そのため、本来ウイルス数を計測しなくてはならない浮遊ウイルス不活化評価において、パーティクルカウンター５ａ等で粒子径０．３〜０．５μｍの粒子数を測定することにより、浮遊ウイルス数をリアルタイムに推定することができる。
以上説明したように、ウイルスを浮遊させた１０ｍ3評価室１の浮遊ウイルス濃度および直径０．３〜０．５μｍ粒子径の粒子数をモニタリングできる。本手法では、１０ｍ3評価室１の浮遊ウイルス濃度と直径０．３〜０．５μｍ粒子径の粒子数はほぼ同数であるため、ウイルス数を測定することなく、直径０．３〜０．５μｍ粒子径の粒子を計測することにより、ウイルス数をモニタリングすることができる。
【０１１４】
〔温度、湿度試験〕
上記においては、ウイルスの自然減衰を防ぐために、温度２０℃、相対湿度６０％ＲＨに設定した評価室１内にウイルスを噴霧している。温度の影響を評価するため、湿度は６０％ＲＨと一定条件とし、温度を１０℃、１５℃、２０℃、２５℃と異なる評価室１内にウイルスを噴霧させ、空気調和装置３を運転しない状態でのウイルス数変化を計測した結果を図１９に示す。
【０１１５】
図１９は、温度とウイルスの浮遊量の相関を調べた結果であって、評価室１内の温度を変化させ、０、１、２、４、６ｈｒ後の浮遊ウイルス数を調べた結果である。図１９から１０℃〜２５℃内でのすべての温度条件において、６時間放置しても、ウイルスは、１０％以上存在できる。そのため、温度は、１０〜２５℃の範囲内で評価するのが望ましい。ただし、温度が変化すると若干ながら生存率が変化していることから、ウイルス不活化デバイスを運転する状態、および運転しない状態をついで試験する際は、温度を一定に保ち試験するのが望ましい。
【０１１６】
湿度の影響を評価するため、温度は２０℃と一定条件とし、温度を４０、５０、６０、７０％ＲＨと異なる評価室１内にウイルスを噴霧させ、空調機を運転しない状態でのウイルス数変化を計測した結果を図２０に示す。
【０１１７】
図２０は、湿度とウイルスの浮遊量の相関を調べた結果であって、評価室１内の湿度を変化させ、０、１、２、４、６ｈｒ後の浮遊ウイルス数を調べた結果である。図２０より、湿度を５０％ＲＨ以上にすると、６時間放置しても、ウイルスは、５％以上存在できることがわかる。また、湿度が６０％ＲＨ以上であれば、６時間放置しても、ウイルスは１桁以上生存できることがわかる。そのため、湿度は５０％以上、可能であれば６０％ＲＨで制御するのが望ましい。
【０１１８】
このように、本実施の形態１による浮遊ウイルス不活化評価においては、温度、湿度制御下でウイルスを噴霧して試験するため、ウイルスを長時間、不活化しない状態で浮遊させることができる。
【０１１９】
なお、上記温湿度は、大腸菌ファージφＸ１７４を評価室１内に噴霧した場合の最適温湿度であり、最適浮遊ウイルス温度、湿度は、噴霧するウイルスにより異なる。よって、それぞれのウイルスの最適環境に合わせた設定を行うことが望ましい。なお、本発明は、上記実施の形態に限られるものではなく、本発明の範囲内で上記実施の形態に多くの修正および変更を加え得ることはもちろんである。
【０１２０】
以上説明したように、本実施の形態１による浮遊ウイルス不活化評価装置では、ウイルスを噴霧させても、ウイルスを長時間不活化させず、安定して浮遊させることができる。
【０１２１】
実施の形態２．噴霧装置の自動化
実施の形態２は、実施の形態１の噴霧装置２の他の構成例（その１）について説明するものであり、噴霧装置２以外の構成は、図１に示した上記実施の形態１と同様である。以下、実施の形態２の噴霧装置２０について詳細に説明する。
【０１２２】
図２１は、本発明の実施の形態２に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。図２２は、図２１の噴霧装置２０の概略構成図である。なお、図２２においてコンプレッサー２ｂの図示は省略している。また、図２１および図２２において、図１に示した実施の形態１と同一部分には同一符号を付す。
図２１に示すように、本実施の形態２の噴霧装置２０は、ネブライザ２ａと、コンプレッサー２ｂと、噴霧液調合装置２１とを備えている。噴霧液調合装置２１は、図２２に示すように、上記の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を貯留するウイルス原液タンク２２ａと残栄養塩含有液タンク２２ｂと純水タンク２２ｃとがそれぞれポンプ２３ａ〜２３ｃを介してチューブにより液混合装置２４に接続され、液混合装置２４にて混合された液がネブライザ２ａに送り込まれるように構成されている。
【０１２３】
また、液混合装置２４には表面張力測定装置２５が接続され、更に、図示していないが、各タンク２２ａ〜２２ｃから液混合装置２４に至る流路には流量計が設けられている。また、各タンク２２ａ〜２２ｃおよび液混合装置２４は冷蔵室内に配置されており、各タンク２２ａ〜２２ｃからの各液の配合が調整されたウイルス噴霧液は、噴霧直前まで４℃以下で保存されるようになっている。また、噴霧液調合装置２１には、実施の形態１と同様の電源２ｃが配置されており、電源２ｃによりコンプレッサー２ｂの駆動をＯＮ／ＯＦＦできるようになっている。また、各ポンプ２３ａ〜２３ｃの駆動は図示しない制御装置により制御されるものとする。
【０１２４】
制御装置により各ポンプ２３ａ〜２３ｃをそれぞれ独立して制御して、ウイルス原液、残栄養塩含有液および純水の混合液の表面張力が６５〜６９（×１０-3Ｎ／ｍ）となるように配合を調節した混合液を自動的に作成する。その後、制御装置は、その混合液をネブライザ２ａに注入させ、コンプレッサー２ｂをＯＮし、ネブライザ２ａにより評価室１内にウイルス噴霧液を噴霧させる。
【０１２５】
以上のような構成によると、実施の形態１と同様の効果が得られるとともに、ウイルス噴霧液を自動的に作成することができ、人に感染するウイルスを取り扱う場合においても安全に作業できる。また、制御装置によるコンプレッサー２ｂのＯＮ／ＯＦＦ制御により、連続噴霧、間欠噴霧も可能となり、効率的に浮遊ウイルス不活化評価を行うことができる。また、ウイルス原液を純水や不純物液と混合せずに単独でタンクに貯留するようにしたため、保存濃度が薄いと内部のウイルスが減衰してしまうウイルス液を試験直前まで高濃度に維持できる。また、ウイルス液を冷蔵や冷凍で保存できるので、状態の安定したウイルスを噴霧することができる。
【０１２６】
実施の形態３．噴霧装置の自動化
実施の形態３は、実施の形態１の噴霧装置２の他の構成例（その２）について説明するものであり、噴霧装置２以外の構成は、図１に示した上記実施の形態１と同様である。以下、実施の形態３の噴霧装置２０Ａについて詳細に説明する。
【０１２７】
図２３は、本発明の実施の形態３における浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。図２４は、図２３の噴霧装置２０Ａの概略構成図である。なお、図２４においてコンプレッサー２ｂの図示は省略している。また、図２３および図２４において、図１に示した実施の形態１と同一部分には同一符号を付す。
図２３に示すように、本実施の形態３の噴霧装置２０Ａは、ネブライザ２ａと、コンプレッサー２ｂと、噴霧液調合装置２１Ａとを備えている。噴霧液調合装置２１Ａは、図２４に示すように、上記の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を貯留するウイルス原液タンク２２ａと残栄養塩含有液タンク２２ｂと純水タンク２２ｃとがそれぞれポンプ２３ａ〜２３ｃを介してチューブにより液混合装置２４に接続され、液混合装置２４にて混合された液がネブライザ２ａに送り込まれるように構成されている。
【０１２８】
また、液混合装置２４には電気伝導度測定装置２５Ａが接続され、更に、図示していないが、各タンク２２ａ〜２２ｃから液混合装置２４に至る流路には流量計が設けられている。また、各タンク２２ａ〜２２ｃおよび液混合装置２４は冷蔵室内に配置されており、各タンク２２ａ〜２２ｃからの各液の配合が調整されたウイルス噴霧液は、噴霧直前まで４℃以下で保存されるようになっている。また、噴霧液調合装置２１Ａには、実施の形態１と同様の電源２ｃが配置されており、電源２ｃによりコンプレッサー２ｂの駆動をＯＮ／ＯＦＦできるようになっている。また、各ポンプ２３ａ〜２３ｃの駆動は図示しない制御装置により制御されるものとする。
【０１２９】
制御装置により各ポンプ２３ａ〜２３ｃをそれぞれ独立して制御して、ウイルス原液、残栄養塩含有液および純水の混合液の電気伝導度が２００μｓ／ｃｍ となるように配合を調節した混合液を自動的に作成する。その後、制御装置は、その混合液をネブライザ２ａに注入させ、コンプレッサー２ｂをＯＮし、ネブライザ２ａにより評価室１内にウイルス噴霧液を噴霧させる。
【０１３０】
以上のような構成によると、実施の形態１と同様の効果が得られるとともに、ウイルス噴霧液を自動的に作成することができ、人に感染するウイルスを取り扱う場合においても安全に作業できる。また、制御装置によるコンプレッサー２ｂのＯＮ／ＯＦＦ制御により、連続噴霧、間欠噴霧も可能となり、効率的に浮遊ウイルス不活化評価を行うことができる。また、ウイルス原液を純水や不純物液と混合せずに単独でタンクに貯留するようにしたため、保存濃度が薄いと内部のウイルスが減衰してしまうウイルス液を試験直前まで高濃度に維持できる。また、ウイルス液を冷蔵や冷凍で保存できるので、状態の安定したウイルスを噴霧することができる。なお、電気伝導度測定装置の代わりに粘度計を接続し、同様の機能を有することもできる。
【０１３１】
実施の形態４．
実施の形態４の浮遊ウイルス不活化評価装置は、実施の形態１の浮遊ウイルス不活化評価装置のウイルス採取装置４に代えてウイルス採取装置４ｆを備えたもので、その他の構成は実施の形態１と同様である。
【０１３２】
図２５は、本発明の実施の形態４における浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。図２６は、図２５のウイルス採取装置４ｆの概略構成図である。図２５および図２６において、図１に示した実施の形態１と同一部分には同一符号を付す。
図２６に示すように本実施の形態４のウイルス採取装置４ｆは、実施の形態１のウイルス採取装置４と採取部４ｂの構成が異なり、実施の形態４の採取部４ｅは、幅φ１ｍｍ（±０．１ｍｍ）、長さ１００ｍｍの管４５の後に、インピンジャー４０を直列に四連連結し、更に流量計４１とポンプ４２とを接続した構造を有する。すなわち、上記実施の形態１のウイルス採取装置４の採取部４ｂにおいて各インピンジャー４０の前にそれぞれ差圧計４３およびオリフィス４４を設けていた構成に代えて、直列に四連連結したインピンジャー４０群の前に、管４５を接続した構成とした点に特徴を有している。なお、空気を採取する場合には、φ１ｍｍ（±０．１ｍｍ）を通過する際の流速が１０５ｍ／ｓとなるようポンプで吸引する。
【０１３３】
インピンジャー４０の先端部直径φ１ｍｍの部分の長さは図８より２７ｍｍであるため、直列に繋がっているインピンジャー４０の前にφ１ｍｍ、１００ｍｍの管４５を繋ぐと、インピンジャー４０に捕集される空気が、φ１ｍｍ程度の流路を流れる際の、管部の割合は８０％を占めることになる。そのため、その後のノズル先端部４０ａの直径がφ０．９〜１．１ｍｍと変化しようと、ノズル先端部４０ａでの流速は、その前段部のφ１ｍｍの１００ｍｍ管部による差圧が支配的となるため、ノズル先端部４０ａでの流速公差は±５％以下に抑えられる。
【０１３４】
以上のような構成によると、インピンジャー４０のノズル先端部４０ａでの流速は、そのノズル先端部４０ａの直径に関わらず、その前段に設置させた管４５を通過する際の管内流速に支配される。このため、ノズル先端部４０ａでの流速を公差±５％以下に抑えることができる。なお、更なる精度向上のために、１００ｍｍ以上のφ１ｍｍの管を用いてももちろん良い。
【０１３５】
実施の形態５．サンプリング位置の移動
図２７は、本発明の実施の形態５に係る浮遊ウイルス不活化評価装置の概略構成図である。図２７において、図１に示した実施の形態１と同一の部分には同一符号を付す。
本実施の形態５は、インピンジャー４０の採取管４ａの先端またはパーティクルカウンター５ａに空気を誘導するチューブ（図示せず）の先端の位置、すなわち測定ポイントを遠隔操作により変更できるようにした点に特徴を有する。その他の基本的な構成は、実施の形態１と同様である。以下、実施の形態５が実施の形態１と異なる部分を中心に説明する。
【０１３６】
評価室１の天井面には、誘導路としてのレール１０が設けられている。レール１０は、評価室１の両側壁面に平行に設けられた第１のレール１０ａと、第１のレール１０ａに掛け渡された第２のレール１０ｂとから構成される。第２のレール１０ｂは車輪１０ｃを有し、第１のレール１０ａ上を移動可能とされる。第１のレール１０ａの移動は、遠隔制御される。また、第２のレール１０ｂ上には、第２のレール１０ｂに沿って移動可能な車輪１２を有する台車１１が乗せられており、台車１１は第２のレール１０ｂに沿って移動可能となっている。
【０１３７】
また、台車１１は、車輪１２を駆動する駆動部（図示せず）と、遠隔操作可能な受信部（図示せず）とを有している。台車１１には、下方に伸びる棒１３が連結され、その下端には載置台１４が固定されている。これら台車１１、車輪１２、棒１３および載置台１４により移動体１５が構成されている。この移動体１５の載置台１４に、インピンジャー４０の採取管４ａの先端またはパーティクルカウンター５ａへの空気誘導チューブ（図示せず）の先端が載置される。台車１１の車輪１２の駆動は、遠隔制御される。遠隔操作により、台車１１を第２のレール１０ｂに沿って自由に移動させることができる。また、棒１３も遠隔操作により自由に上下することができるものとする。
【０１３８】
上記の構成にすることにより、移動体１５は、第２のレール１０ｂに沿って、左右に移動可能となり、また、第２のレール１０ｂ自体が第１のレール１０ａに沿って前後に移動可能となる。さらには、棒１３自体の上下運動により、評価室１内において載置台１４を上下に移動可能である。よって、全体として、載置台１４を評価室１内において前後左右、さらに上下に移動させることができるため、測定ポイントを評価室１内の自由な位置に移動させることができる。
【０１３９】
以上のような構成によると、評価室１内の粒子数測定ポイントおよびインピンジャー４０での回収ポイントを評価室１内で自由に変えることが可能となり、空気調和装置３などの不活化デバイスからの距離、位置等を変化させたサンプリングが可能となる。また、１つの試験中においても、サンプリング位置を変化させることができるため、評価室１内での不活化デバイスによるウイルス不活化分布を取得することが可能となる。
【０１４０】
なお、上記各実施の形態１〜５では、それぞれ別の実施の形態として説明したが、各実施の形態の特徴的な構成を適宜組み合わせて浮遊ウイルス不活化評価装置を構成してもよい。
【符号の説明】
【０１４１】
１ 評価室、１ａ 空気取入口、１ｂ 空気排出口、１ｃ 空気出入口、１ｄ 評価室空気入り口コック、１ｅ 空気戻り口、２ 噴霧装置、２ａ ネブライザ、２ｂ コンプレッサー、２ｃ 電源、３ 空気調和装置、３ａ 支持台、４ ウイルス採取装置、４ａ 採取管、４ｂ 採取部、４ｃ 支持台、４ｄ 戻し管、４ｅ 採取部、４ｆ ウイルス採取装置、５ 室内粒子数測定装置、５ａ パーティクルカウンター、６ 攪拌ファン、７ 殺菌灯、９ 扉、１０ レール、１０ａ 第１のレール、１０ｂ 第２のレール、１０ｃ 車輪、１１ 台車、１２ 車輪、１３ 棒、１４ 載置台、１５ 移動体、２０ 噴霧装置、２０Ａ 噴霧装置、２１ 噴霧液調合装置、２１Ａ 噴霧液調合装置、２２ａ ウイルス原液タンク、２２ｂ 残栄養塩含有液タンク、２２ｃ 純水タンク、２３ａ〜２３ｃ ポンプ（ポンプ装置）、２４ 液混合装置、２５ 表面張力測定装置、２５Ａ 電気伝導度測定装置、４０ インピンジャー、４０ａ ノズル先端部、４１ 流量計、４２ ポンプ、４３ 差圧計、４４ オリフィス、４５ 管、１００ 前室。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に、安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス含有浮遊粒子（以下、ウイルス粒子）を供給し、前記評価室内の浮遊ウイルスの数を計測して評価することを特徴とする浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項２】
前記評価室内にウイルス粒子を供給するにあたり、所定のウイルス液を噴霧して行い、前記所定のウイルス液は、前記所定のウイルス液を噴霧した際のウイルス粒子の粒子径が前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子が主となるように残栄養塩濃度が調整されたウイルス液であることを特徴とする請求項１記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項３】
前記所定のウイルス液の残栄養塩濃度を、前記所定のウイルス液の表面張力により調整することを特徴とする請求項２記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項４】
前記所定のウイルス液の残栄養塩濃度を、前記所定のウイルス液の電気伝導度により調整することを特徴とする請求項２記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項５】
前記所定のウイルス液の残栄養塩濃度を、前記所定のウイルス液の粘度により調整することを特徴とする請求項２記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項６】
第１計測方法として、直列に連結した複数のインピンジャーにより浮遊ウイルスを採取し、その採取されたウイルスの数を計測することを特徴とする請求項１乃至請求項５の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項７】
各インピンジャーの前に差圧計および圧力可変なオリフィスをそれぞれ接続し、各インピンジャーのノズル先端部の空気流入流速を所定の流速に調節することを特徴とする請求項６記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項８】
前記ウイルスは、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４であり、前記空気流入流速を１０５ｍ／ｓ以下としたことを特徴とする請求項７記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項９】
前記インピンジャーの数を４つとしたことを特徴とする請求項８記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１０】
前記ウイルスは、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４であり、φ１ｍｍ、長さ１００ｍｍ以上の管の後に４つのインピンジャーを直列に連結し、各インピンジャーのノズル先端部の空気流入流速が１０５ｍ／ｓ以下となるように調整して浮遊ウイルスを採取することを特徴とする請求項６記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１１】
前記所定のウイルス液は、噴霧された際に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立するように調整された液であり、このウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、
第２計測方法として、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測することを特徴とする請求項１乃至請求項５の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１２】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して表面張力が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）となる範囲に調節された液であり、このウイルス液を噴霧することにより、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立し、
第２計測方法として、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測することを特徴とする請求項３記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１３】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して電気伝導度が１０〜１０００μｓ／ｃｍとなる範囲に調節された液であり、このウイルス液を噴霧することにより、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立し、
第２計測方法として、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測することを特徴とする請求項４記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１４】
前記安定浮遊可能な粒子径範囲が０．３〜０．５μｍであることを特徴とする請求項１２または請求項１３記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１５】
前記ウイルス粒子数をパーティクルカウンターにより計測することを特徴とする請求項１１乃至請求項１４の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１６】
前記所定のウイルス液は、噴霧された際に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立するように調整された液であり、このウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、
直列に連結した複数のインピンジャーにより浮遊ウイルスを採取し、その採取されたウイルスを計測する第１計測方法と、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測する第２計測方法とを併用してウイルス数を計測することを特徴とする請求項２記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１７】
隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に所定のウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、所定の粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、
前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記所定の粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測して評価することを特徴とする浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１８】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して表面張力が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）となる範囲に調節したものであることを特徴とする請求項１７記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１９】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して電気伝導度が１０〜１０００μｓ／ｃｍとなる範囲に調節したものであることを特徴とする請求項１７記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項２０】
前記所定の粒子径範囲は０．３〜０．５μｍであることを特徴とする請求項１８または請求項１９記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項２１】
前記ウイルス粒子数をパーティクルカウンターにより計測することを特徴とする請求項１７乃至請求項２０の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項２２】
前記所定のウイルス液をジェット式ネブライザで噴霧することを特徴とする請求項１乃至請求項２１の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項２３】
隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に、安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子を供給するウイルス供給装置と、
前記評価室内の浮遊ウイルスの数を計測して評価するウイルス計測評価装置と
を有することを特徴とする浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２４】
前記ウイルス供給装置は、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子が主となるように残栄養塩濃度を調整した所定のウイルス液を噴霧して前記評価室内にウイルス粒子を供給することを特徴とする請求項２３記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２５】
前記ウイルス供給装置は、ウイルス原液タンクと、残栄養塩含有液タンクと、純水タンクと、液混合装置と、前記各タンクの液をそれぞれ独立して前記液混合装置に供給するポンプ装置と、前記液混合装置で混合された混合液の表面張力を測定する表面張力測定装置と、前記表面張力測定装置の測定結果が所定の表面張力範囲内となるように前記ポンプ装置を制御する制御装置とを備え、前記ウイルス供給装置は、前記所定の表面張力範囲内となるように調整された混合液を、残栄養塩濃度を調整した前記所定のウイルス液として前記評価室内に噴霧することを特徴とする請求項２４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２６】
前記ウイルス供給装置は、ウイルス原液タンクと、残栄養塩含有液タンクと、純水タンクと、液混合装置と、前記各タンクの液をそれぞれ独立して前記液混合装置に供給するポンプ装置と、前記液混合装置で混合された混合液の電気伝導度を測定する電気伝導度測定装置と、前記電気伝導度測定装置の測定結果が所定の電気伝導度範囲内となるように前記ポンプ装置を制御する制御装置とを備え、所定の電気伝導度範囲内となるように調整された混合液を、残栄養塩濃度を調整した前記所定のウイルス液として前記評価室内に噴霧することを特徴とする請求項２４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２７】
前記ウイルス供給装置は、ウイルス原液タンクと、残栄養塩含有液タンクと、純水タンクと、液混合装置と、前記各タンクの液をそれぞれ独立して前記液混合装置に供給するポンプ装置と、前記液混合装置で混合された混合液の粘度を測定する粘度測定装置と、前記粘度測定装置の測定結果が所定の粘度範囲内となるように前記ポンプ装置を制御する制御装置とを備え、所定の粘度範囲内となるように調整された混合液を、残栄養塩濃度を調整した前記所定のウイルス液として前記評価室内に噴霧することを特徴とする請求項２４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２８】
前記各タンク、前記液混合装置および前記ポンプ装置を、温度調整可能な冷蔵庫内に配置したことを特徴とする請求項２５乃至請求項２７の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２９】
前記ウイルス計測評価装置は、直列に連結した複数のインピンジャーにより浮遊ウイルスを採取し、その採取されたウイルスの数を計測する第１ウイルス計測装置を有することを特徴とする請求項２３乃至請求項２８の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３０】
前記第１ウイルス計測装置は、各インピンジャーの前に差圧計および圧力可変なオリフィスをそれぞれ接続した構成を有し、前記差圧計および前記オリフィスにより各ノズル先端部の空気流入流速が所定の流速に調節されてなることを特徴とする請求項２９記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３１】
前記ウイルスは、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４であり、前記空気流入流速を１０５ｍ／ｓ以下としたことを特徴とする請求項３０記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３２】
前記インピンジャーの数を４つとしたことを特徴とする請求項３１記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３３】
前記ウイルスは、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４であり、前記第１ウイルス計測装置は、φ１ｍｍ、長さ１００ｍｍ以上の管の後に、４つのインピンジャーを直列に連結し、各インピンジャーのノズル先端部の空気流入流速が１０５ｍ／ｓ以下となるように調整して浮遊ウイルスを採取することを特徴とする請求項２９記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３４】
前記所定のウイルス液は、噴霧された際に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立するように調整された液であり、このウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、
前記ウイルス計測評価装置は、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測する第２ウイルス計測装置を有することを特徴とする請求項２４乃至請求項２８の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３５】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して表面張力が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）となる範囲に調節したものであることを特徴とする請求項３４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３６】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して電気伝導度が１０〜１０００μｓ／ｃｍとなる範囲に調節したものであることを特徴とする請求項３４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３７】
前記所定の粒子径範囲が０．３〜０．５μｍであることを特徴とする請求項３５または請求項３６記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３８】
前記第２ウイルス計測装置は、前記ウイルス粒子数をパーティクルカウンターにより計測することを特徴とする請求項３４乃至請求項３７の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３９】
前記所定のウイルス液は、噴霧された際に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立するように調整された液であり、前記ウイルス供給装置は、この所定のウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、
前記ウイルス計測評価装置は、直列に連結した複数のインピンジャーにより浮遊ウイルスを採取し、その採取されたウイルスの数を計測する第１ウイルス計測装置と、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測する第２ウイルス計測装置とを併用してウイルス数を計測することを特徴とする請求項２４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４０】
隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に所定のウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、所定の粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立するウイルス供給装置と、
前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記所定の粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測して評価するウイルス計測評価装置とを備えたことを特徴とする浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４１】
前記ウイルス供給装置は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を貯留するウイルス原液タンクと、残栄養塩含有液タンクと、純水タンクと、液混合装置と、前記各タンクの液をそれぞれ独立して前記液混合装置に供給するポンプ装置と、前記液混合装置で混合された混合液の表面張力を測定する表面張力測定装置と、前記表面張力測定装置の測定結果が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）となるように前記ポンプ装置を制御する制御装置とを備え、前記ウイルス供給装置は、表面張力が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）となるように調整された混合液を、残栄養塩濃度を調整した前記所定のウイルス液として前記評価室内に噴霧することを特徴とする請求項４０記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４２】
前記ウイルス供給装置は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を貯留するウイルス原液タンクと、残栄養塩含有液タンクと、純水タンクと、液混合装置と、前記各タンクの液をそれぞれ独立して前記液混合装置に供給するポンプ装置と、前記液混合装置で混合された混合液の電気伝導度を測定する電気伝導度測定装置と、前記電気伝導度測定装置の測定結果が１０〜１０００μｓ／ｃｍの電気伝導度となるように前記ポンプ装置を制御する制御装置とを備え、前記ウイルス供給装置は、電気伝導度が１０〜１０００μｓ／ｃｍとなるように調整された混合液を、残栄養塩濃度を調整した前記所定のウイルス液として前記評価室内に噴霧することを特徴とする請求項４０記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４３】
前記所定の粒子径範囲が０．３〜０．５μｍであることを特徴とする請求項４１または請求項４２記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４４】
前記ウイルス計測評価装置は、前記ウイルス粒子数をパーティクルカウンターにより計測することを特徴とする請求項４０乃至請求項４３の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４５】
前記ウイルス供給装置は、前記所定のウイルス液をジェット式ネブライザで噴霧することを特徴とする請求項４０乃至請求項４４の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４６】
前記各タンク、前記液混合装置および前記ポンプ装置を、温度調整可能な冷蔵庫内に配置したことを特徴とする請求項４１乃至請求項４５の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４７】
前記評価室内に、外部から位置制御可能で前記ウイルス計測評価装置による計測ポイントを移動可能な移動装置を設けたことを特徴とする請求項２４乃至請求項４６の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項１】
隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に、安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス含有浮遊粒子（以下、ウイルス粒子）を供給し、前記評価室内の浮遊ウイルスの数を計測して評価することを特徴とする浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項２】
前記評価室内にウイルス粒子を供給するにあたり、所定のウイルス液を噴霧して行い、前記所定のウイルス液は、前記所定のウイルス液を噴霧した際のウイルス粒子の粒子径が前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子が主となるように残栄養塩濃度が調整されたウイルス液であることを特徴とする請求項１記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項３】
前記所定のウイルス液の残栄養塩濃度を、前記所定のウイルス液の表面張力により調整することを特徴とする請求項２記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項４】
前記所定のウイルス液の残栄養塩濃度を、前記所定のウイルス液の電気伝導度により調整することを特徴とする請求項２記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項５】
前記所定のウイルス液の残栄養塩濃度を、前記所定のウイルス液の粘度により調整することを特徴とする請求項２記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項６】
第１計測方法として、直列に連結した複数のインピンジャーにより浮遊ウイルスを採取し、その採取されたウイルスの数を計測することを特徴とする請求項１乃至請求項５の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項７】
各インピンジャーの前に差圧計および圧力可変なオリフィスをそれぞれ接続し、各インピンジャーのノズル先端部の空気流入流速を所定の流速に調節することを特徴とする請求項６記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項８】
前記ウイルスは、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４であり、前記空気流入流速を１０５ｍ／ｓ以下としたことを特徴とする請求項７記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項９】
前記インピンジャーの数を４つとしたことを特徴とする請求項８記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１０】
前記ウイルスは、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４であり、φ１ｍｍ、長さ１００ｍｍ以上の管の後に４つのインピンジャーを直列に連結し、各インピンジャーのノズル先端部の空気流入流速が１０５ｍ／ｓ以下となるように調整して浮遊ウイルスを採取することを特徴とする請求項６記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１１】
前記所定のウイルス液は、噴霧された際に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立するように調整された液であり、このウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、
第２計測方法として、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測することを特徴とする請求項１乃至請求項５の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１２】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して表面張力が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）となる範囲に調節された液であり、このウイルス液を噴霧することにより、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立し、
第２計測方法として、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測することを特徴とする請求項３記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１３】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して電気伝導度が１０〜１０００μｓ／ｃｍとなる範囲に調節された液であり、このウイルス液を噴霧することにより、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立し、
第２計測方法として、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測することを特徴とする請求項４記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１４】
前記安定浮遊可能な粒子径範囲が０．３〜０．５μｍであることを特徴とする請求項１２または請求項１３記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１５】
前記ウイルス粒子数をパーティクルカウンターにより計測することを特徴とする請求項１１乃至請求項１４の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１６】
前記所定のウイルス液は、噴霧された際に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立するように調整された液であり、このウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、
直列に連結した複数のインピンジャーにより浮遊ウイルスを採取し、その採取されたウイルスを計測する第１計測方法と、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測する第２計測方法とを併用してウイルス数を計測することを特徴とする請求項２記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１７】
隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に所定のウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、所定の粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、
前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記所定の粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測して評価することを特徴とする浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１８】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して表面張力が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）となる範囲に調節したものであることを特徴とする請求項１７記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項１９】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して電気伝導度が１０〜１０００μｓ／ｃｍとなる範囲に調節したものであることを特徴とする請求項１７記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項２０】
前記所定の粒子径範囲は０．３〜０．５μｍであることを特徴とする請求項１８または請求項１９記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項２１】
前記ウイルス粒子数をパーティクルカウンターにより計測することを特徴とする請求項１７乃至請求項２０の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項２２】
前記所定のウイルス液をジェット式ネブライザで噴霧することを特徴とする請求項１乃至請求項２１の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価方法。
【請求項２３】
隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に、安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子を供給するウイルス供給装置と、
前記評価室内の浮遊ウイルスの数を計測して評価するウイルス計測評価装置と
を有することを特徴とする浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２４】
前記ウイルス供給装置は、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子が主となるように残栄養塩濃度を調整した所定のウイルス液を噴霧して前記評価室内にウイルス粒子を供給することを特徴とする請求項２３記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２５】
前記ウイルス供給装置は、ウイルス原液タンクと、残栄養塩含有液タンクと、純水タンクと、液混合装置と、前記各タンクの液をそれぞれ独立して前記液混合装置に供給するポンプ装置と、前記液混合装置で混合された混合液の表面張力を測定する表面張力測定装置と、前記表面張力測定装置の測定結果が所定の表面張力範囲内となるように前記ポンプ装置を制御する制御装置とを備え、前記ウイルス供給装置は、前記所定の表面張力範囲内となるように調整された混合液を、残栄養塩濃度を調整した前記所定のウイルス液として前記評価室内に噴霧することを特徴とする請求項２４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２６】
前記ウイルス供給装置は、ウイルス原液タンクと、残栄養塩含有液タンクと、純水タンクと、液混合装置と、前記各タンクの液をそれぞれ独立して前記液混合装置に供給するポンプ装置と、前記液混合装置で混合された混合液の電気伝導度を測定する電気伝導度測定装置と、前記電気伝導度測定装置の測定結果が所定の電気伝導度範囲内となるように前記ポンプ装置を制御する制御装置とを備え、所定の電気伝導度範囲内となるように調整された混合液を、残栄養塩濃度を調整した前記所定のウイルス液として前記評価室内に噴霧することを特徴とする請求項２４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２７】
前記ウイルス供給装置は、ウイルス原液タンクと、残栄養塩含有液タンクと、純水タンクと、液混合装置と、前記各タンクの液をそれぞれ独立して前記液混合装置に供給するポンプ装置と、前記液混合装置で混合された混合液の粘度を測定する粘度測定装置と、前記粘度測定装置の測定結果が所定の粘度範囲内となるように前記ポンプ装置を制御する制御装置とを備え、所定の粘度範囲内となるように調整された混合液を、残栄養塩濃度を調整した前記所定のウイルス液として前記評価室内に噴霧することを特徴とする請求項２４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２８】
前記各タンク、前記液混合装置および前記ポンプ装置を、温度調整可能な冷蔵庫内に配置したことを特徴とする請求項２５乃至請求項２７の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項２９】
前記ウイルス計測評価装置は、直列に連結した複数のインピンジャーにより浮遊ウイルスを採取し、その採取されたウイルスの数を計測する第１ウイルス計測装置を有することを特徴とする請求項２３乃至請求項２８の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３０】
前記第１ウイルス計測装置は、各インピンジャーの前に差圧計および圧力可変なオリフィスをそれぞれ接続した構成を有し、前記差圧計および前記オリフィスにより各ノズル先端部の空気流入流速が所定の流速に調節されてなることを特徴とする請求項２９記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３１】
前記ウイルスは、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４であり、前記空気流入流速を１０５ｍ／ｓ以下としたことを特徴とする請求項３０記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３２】
前記インピンジャーの数を４つとしたことを特徴とする請求項３１記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３３】
前記ウイルスは、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４であり、前記第１ウイルス計測装置は、φ１ｍｍ、長さ１００ｍｍ以上の管の後に、４つのインピンジャーを直列に連結し、各インピンジャーのノズル先端部の空気流入流速が１０５ｍ／ｓ以下となるように調整して浮遊ウイルスを採取することを特徴とする請求項２９記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３４】
前記所定のウイルス液は、噴霧された際に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立するように調整された液であり、このウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、
前記ウイルス計測評価装置は、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測する第２ウイルス計測装置を有することを特徴とする請求項２４乃至請求項２８の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３５】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して表面張力が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）となる範囲に調節したものであることを特徴とする請求項３４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３６】
前記所定のウイルス液は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を希釈して電気伝導度が１０〜１０００μｓ／ｃｍとなる範囲に調節したものであることを特徴とする請求項３４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３７】
前記所定の粒子径範囲が０．３〜０．５μｍであることを特徴とする請求項３５または請求項３６記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３８】
前記第２ウイルス計測装置は、前記ウイルス粒子数をパーティクルカウンターにより計測することを特徴とする請求項３４乃至請求項３７の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項３９】
前記所定のウイルス液は、噴霧された際に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を前記評価室内に確立するように調整された液であり、前記ウイルス供給装置は、この所定のウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立し、
前記ウイルス計測評価装置は、直列に連結した複数のインピンジャーにより浮遊ウイルスを採取し、その採取されたウイルスの数を計測する第１ウイルス計測装置と、前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記安定浮遊可能な粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測する第２ウイルス計測装置とを併用してウイルス数を計測することを特徴とする請求項２４記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４０】
隔離壁により外部空間と隔離された評価室内に所定のウイルス液を噴霧することにより、前記評価室内に、所定の粒子径範囲のウイルス粒子一つに対してウイルスが一つ存在する系を確立するウイルス供給装置と、
前記評価室内を浮遊するウイルス粒子のうち、前記所定の粒子径範囲のウイルス粒子数を計測することにより前記評価室内のウイルス数を計測して評価するウイルス計測評価装置とを備えたことを特徴とする浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４１】
前記ウイルス供給装置は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を貯留するウイルス原液タンクと、残栄養塩含有液タンクと、純水タンクと、液混合装置と、前記各タンクの液をそれぞれ独立して前記液混合装置に供給するポンプ装置と、前記液混合装置で混合された混合液の表面張力を測定する表面張力測定装置と、前記表面張力測定装置の測定結果が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）となるように前記ポンプ装置を制御する制御装置とを備え、前記ウイルス供給装置は、表面張力が６０〜７０（×１０-3Ｎ／ｍ）となるように調整された混合液を、残栄養塩濃度を調整した前記所定のウイルス液として前記評価室内に噴霧することを特徴とする請求項４０記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４２】
前記ウイルス供給装置は、特定の方法で作成した大腸菌ファージφＸ１７４の原液を貯留するウイルス原液タンクと、残栄養塩含有液タンクと、純水タンクと、液混合装置と、前記各タンクの液をそれぞれ独立して前記液混合装置に供給するポンプ装置と、前記液混合装置で混合された混合液の電気伝導度を測定する電気伝導度測定装置と、前記電気伝導度測定装置の測定結果が１０〜１０００μｓ／ｃｍの電気伝導度となるように前記ポンプ装置を制御する制御装置とを備え、前記ウイルス供給装置は、電気伝導度が１０〜１０００μｓ／ｃｍとなるように調整された混合液を、残栄養塩濃度を調整した前記所定のウイルス液として前記評価室内に噴霧することを特徴とする請求項４０記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４３】
前記所定の粒子径範囲が０．３〜０．５μｍであることを特徴とする請求項４１または請求項４２記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４４】
前記ウイルス計測評価装置は、前記ウイルス粒子数をパーティクルカウンターにより計測することを特徴とする請求項４０乃至請求項４３の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４５】
前記ウイルス供給装置は、前記所定のウイルス液をジェット式ネブライザで噴霧することを特徴とする請求項４０乃至請求項４４の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４６】
前記各タンク、前記液混合装置および前記ポンプ装置を、温度調整可能な冷蔵庫内に配置したことを特徴とする請求項４１乃至請求項４５の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【請求項４７】
前記評価室内に、外部から位置制御可能で前記ウイルス計測評価装置による計測ポイントを移動可能な移動装置を設けたことを特徴とする請求項２４乃至請求項４６の何れか１項に記載の浮遊ウイルス不活化評価装置。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２０】
【図２１】
【図２２】
【図２３】
【図２４】
【図２５】
【図２６】
【図２７】
【公開番号】特開２０１２−４４９５７（Ｐ２０１２−４４９５７Ａ）
【公開日】平成２４年３月８日（２０１２．３．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−１９２１９１（Ｐ２０１０−１９２１９１）
【出願日】平成２２年８月３０日（２０１０．８．３０）
【出願人】（０００００６０１３）三菱電機株式会社 (33,312)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年３月８日（２０１２．３．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年８月３０日（２０１０．８．３０）
【出願人】（０００００６０１３）三菱電機株式会社 (33,312)
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]