甲状腺機能低下症を治療する方法
本発明は、成年において甲状腺機能低下症を治療する方法であって、０．００５〜０．０３μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で、Ｔ３を長期間投与することを含む方法を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
本願は、２００３年２月１１に出願された米国特許出願第１０／３６４，８００号の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
［発明の背景］
甲状腺機能低下症は、甲状腺による甲状腺ホルモンの不十分な分泌を特徴とする状態である。甲状腺機能低下症の考え得る原因の１つは、ヨウ素欠乏に起因する甲状腺ホルモンの不適切な合成である。この形態の甲状腺機能低下症は、被験体にヨウ素化した塩を供給することにより元に戻すことができる。甲状腺機能低下症はまた、甲状腺ホルモン合成における遺伝的異常性、甲状腺の自己免疫的または他の破壊、あるいは不適切なレベルの甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）（二次性甲状腺機能低下症）または甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）（三次性甲状腺機能低下症）に起因して起こり得る。視床下部の下垂体刺激帯から放出されるＴＲＨは、腺下垂体におけるＴＳＨの合成に影響を及ぼし、順次ＴＳＨは、甲状腺ホルモンであるテトラヨードサイロニン（サイロキシン、すなわちＴ４）およびトリヨードサイロニン（Ｔ３）の合成を制御する(Human Physiology, Schmidt R.F. and Thews G. (eds), Springer-Verlag, New York 1983, pp 670-674)。
【０００３】
Ｔ４は、Ｔ３にとってプロホルモンであり、Ｔ４がその生物学的効果を発揮する前に、Ｔ３に変換されなくてはならない。核甲状腺ホルモン受容体へのＴ３の結合が、甲状腺ホルモンの効果の大部分を開始すると考えられている。Ｔ３は、Ｔ４の親和性よりも約１０倍高い親和性で、この受容体に結合する。循環Ｔ３の約８０％が、特に肝臓、腎臓、下垂体および中枢神経系中の酵素によるＴ４からＴ３への甲状腺外変換から生じる。Ｔ３はまた、アミノ酸チロシンのヨウ素化およびカップリングにより、Ｔ４と一緒に甲状腺で合成される(Physician's Desk Reference, 56th ed. （Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, p 1825)。Ｔ３は、身体のたいていの組織による酸素（Ｏ２）消費を増強し、基礎代謝速度を増加し、炭水化物、脂質およびタンパク質の代謝に影響を与えることが知られている(Physician's Desk Reference, 56th ed. Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, p 1825)。
【０００４】
胚期間および若年期間中の甲状腺欠損は、精神遅滞をもたらし、小児期中では、甲状腺欠損は、成長を妨げる。成年における甲状腺欠損は、身体的および精神的活性の減少(Dugbartey A.T. Arch. Intern. Med. 158: 1413-8, 1998)および皮膚の肥厚化（粘液水腫）(Human Physiology, Schmidt R.F. and Thews G. (eds), Springer-Verlag, New York 1983, pp 670-674)を引き起こす。甲状腺機能低下性の心臓表現型としては、収縮性機能の悪化、心拍出量の減少、および筋細胞遺伝子発現の改変が挙げられる(Ojamaa et al. CVR&R 23: 20-6, 2002; Danzi and Klein, Thyroid 12 (6): 467-72, 2002)。甲状腺機能低下症はまた、血管平滑筋抵抗の有意な増加を伴う血管リモデリングおよび高血圧に関する潜在性を引き起こす。甲状腺機能低下症は、甲状腺ホルモンの減少したレベルに応答して起こる甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）の増加した生産に起因する甲状腺の顕著な腫脹（甲状腺腫）に関連し得る(Human Physiology, Schmidt R.F. and Thews G. (eds), Springer-Verlag, New York 1983, pp 670-674)。成年では、すべての原因からの甲状腺機能低下症の平均発生数は、女性に関しては４．１／１０００および男性に関しては０．６／１０００と報告されている(Vanderpump et al., Clin. Endocrinol. 43:55-68, 1995)。別の研究からは、成年での中程度の甲状腺不全の有病率は、女性に関しては２０歳で４％から６５歳で１７％に及び、男性に関しては２０歳で２％から６５歳で７％に及ぶ(Danese et al. J. Clin. Endocrinol. Metab. 85: 2993-3001, 2000)ことが報告された。
【０００５】
Ｔ４は、一般的にほとんどの形態の甲状腺機能低下症を伴う患者を治療するための置換または補助療法で投与される(Wiersinga W.M. Horm. Res. 56(Suppl 1):74-81, 2001; Danese et al. J. Clin. Endocrinol. Metab. 85:2993-3001, 2000; Adlin V. Am. Fam. Physician 57:776-80, 1998)。対比して、Ｔ３は、無数の合併症がその使用に付随していることから、ごく稀に投与される。Ｔ３の長期間または慢性的投与は、酸素消耗性効果、不整脈および狭心症の増悪に関する懸念に起因して、歴史的に禁忌を示されてきた。特に、優勢なパラダイムは、Ｔ３が、付随する血液供給の増加を伴わない心臓によるＯ２消費、すなわち、アンギナ、細動および他の心臓状態の発症に関する古典的なシナリオを増加するため、長期間の治療には適さないとみなしている(Levine, H.D., Am. J. Med., 69:411-18, 1980、Klemperer et al., N. Engl. J. Med., 333:1522-27, 1995およびKlein and Ojamaa, Am. J. Cardiol, 81:490-91, 1998)。例えば、H.D. Levine(Am. J. Med., 69:411-18, 1980)は、甲状腺ホルモンの投与および甲状腺機能正常（正常）状態への回復は、甲状腺機能低下症および冠状動脈疾患を伴う患者における心臓問題を実際に誘導または増悪させることさえ提唱した。甲状腺ホルモン療法は、心臓血管系、特に冠状動脈の完全性が疑わしい多数の状況では、非常に慎重に使用すべきであるとよく知られている(Physician's Desk Reference, 56th ed. （Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, pp 1817,1825)。
【０００６】
甲状腺ホルモン置換療法は、Ｔ４およびＴ３の組合せを用いて実施されており、ここではＴ４の用量はＴ３の用量を上回り、４対１の比のＴ４対Ｔ３が好ましい（米国特許第５，３２４，５２２号明細書に概説）。Ｔ３は、Ｔ４の同時投与とともに使用するための持続性または持効性放出投薬形態で使用されており、ここでは調製物は、Ｔ３１部に対してＴ４１〜５０部を含有し、日用量は、Ｔ４ ２５〜２００μｇおよびＴ３ ５〜２５μｇである（米国特許第５，３２４，５２２号明細書）。Ｔ４およびＴ３の両方を含有する調製物は、甲状腺機能低下症患者によっては、Ｔ４療法単独と比較して、クオリティ・オブ・ライフ（生活の質）を改善し得ることが提唱されている(Wiersinga W.M. Horm. Res. 56(Suppl 1):74-81, 2001)。実際に、甲状腺癌または自己免疫甲状腺炎を伴う甲状腺機能低下症患者において(Bunevicius and Prange, Int. J. Neuropsychopharmacol. 3: 167-174, 2000)、あるいはグレーヴズ病のための甲状腺切除後に(Bunevicius, Endocrine 18(2):129-33, 2002)、Ｔ４単独と比較して、複合Ｔ４およびＴ３置換療法を用いて、精神向上が報告されている。
【０００７】
Ｔ３を単独で使用する場合には、中程度の甲状腺機能低下症の治療に関して現在推奨されている成人の出発用量は、１日１回経口により２５μｇであり、通常の維持用量は、１日当たり２５〜７５μｇである(Physician's Desk Reference, 56th ed. Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, p 1818)。Ｔ３２５〜５０μｇの開始静脈内用量は、成年における粘液水腫昏睡／前昏睡期の緊急治療において推奨されており、療法の最初の数日では、１日当たりＴ３少なくとも６５μｇの静脈内投与が、より低い死亡率に関連している(Physician's Desk Reference, 56th ed. （Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, p 1826)。
【０００８】
Ｔ３はまた、約５μｇ／日〜約５０μｇ／日の用量を用いて、うっ血性心不全の治療用に患者に投与されている（米国特許第６，２８８，１１７ Ｂ１号明細書）。０．０５〜０．１５μｇ／ｋｇ／時間の用量でのＴ３の急性連続注入は、複雑な先天性心臓疾患の治療のための手術後に、乳幼児、小児および１８歳以下の年齢の患者に使用されている(Chowdhury et al., Am. J. Cardiology 84: 1107-9, 1999, J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 122: 1023-5)。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
［発明の概要］
甲状腺ホルモンの高用量投与、およびＴ４およびＴ３の複合投与の優勢を教示する従来技術に反して、本発明は、成年における甲状腺機能低下症を治療するための低用量のＴ３の長期間の連続投与に関する。低用量のＴ３の長期間の連続投与は、甲状腺機能低下被験体におけるＴ３の血清レベルを首尾よく正常化するだけでなく、高用量のＴ３もしくはＴ３／Ｔ４複合療法に伴って生じ得る有害な副作用を回避または低減すると考えられる。
【００１０】
［発明の詳細な説明］
本発明は、Ｔ３の長期間の連続投与による甲状腺機能低下症を有する成年における甲状腺機能低下症の治療方法に関する。「甲状腺機能低下症を治療する」という用語は、本明細書中で使用する場合、甲状腺機能低下症の任意の１つまたはそれ以上の症状を治療することを包含する。本明細書中で使用する場合、「成年」という用語は、思春期を完了した人を意味するのに使用される。
【００１１】
本明細書中で使用する場合、「Ｔ３」は、トリヨードサイロニンを指す。Ｔ３を、Ｔ３生物活性を有するＴ３フラグメントまたはＴ３生物活性を有するＴ３機能的変異体で置換いうることもまた、本発明の範囲内である。Ｔ３の機能的変異体としては、アミノ酸基がＴ３中に一般的に存在するアミノ酸基に代わって置換したＴ３の変異体、およびＴ３ならびにさらなるアミノ酸を含むか、あるいは任意の１つまたはそれ以上の炭水化物、脂質または核酸をさらに含む変異体が挙げられるが、これらに限定されない。Ｔ３フラグメントおよびＴ３の変異体は、Ｔ３の生物活性と同じ生物活性またはＴ３と比較して増強もしくは低減された生物活性を有し得る。本明細書中で使用する場合、Ｔ３ならびにそのフラグメントまたは変異体は、Ｔ４を包含しない。
【００１２】
合成Ｔ３は、市販されており、Jones Pharma Incorporated (St. Louis, MO)から入手可能であり得る。リオサイロニンナトリウムは、Ｔ３の合成調製物であり、経口（Ｃｙｔｏｍｅｌ）および静脈内（Ｔｒｉｏｓｔａｔ）配合物で購入することができる。Ｃｙｔｏｍｅｌ錠剤は、天然甲状腺ホルモンの合成形態であるリオサイロニン（Ｌ−トリヨードサイロニン）であり、ナトリウム塩として利用可能である(Physician's Desk Reference, 56th ed. Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, p 1817)。Ｔ３の天然調製物は、動物甲状腺に由来し得る。天然調製物は、乾燥甲状腺およびサイログロブリンを含む。乾燥甲状腺は、ヒトにおいて食品用に使用される家畜（例えば、ウシまたはブタ甲状腺）に由来し、サイログロブリンは、ブタの甲状腺に由来する。
【００１３】
本発明の方法は、Ｔ３欠損した患者を治療するのに使用される。かかる患者では、長期間にわたって投与される低用量のＴ３が、規則的な（例えば、毎日１回）高用量のＴ３の長期間投与に一般的に付随する最低限の有害な副作用を伴って、または有害な副作用を全く伴わずに、患者において、血清Ｔ３を正常レベル（８０〜１８０ｎｇ／ｄｌ）へ回復させるか、あるいは正常以上の血清Ｔ３レベルにわずかに上昇させることが期待される。
【００１４】
好ましい患者の分類の１つは、Ｔ４をＴ３に変換することが欠乏している被験体である（例えば、De Groot, J. Clin. Endocrinology Metabolism 84:151-64, 1999)。
【００１５】
本発明の方法では、Ｔ３は、０．００５〜０．０３μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される。好ましくは、Ｔ３は、０．００７５〜０．０２μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される。より好ましくは、Ｔ３は、０．０１〜０．０１５μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される。好ましい実施形態では、Ｔ３は、約０．０１μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される。好ましくは、Ｔ３の日用量は、８〜５０μｇである。例えば、７０ｋｇの人に関しては、０．００５μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量は、Ｔ３８．４μｇの日用量をもたらす。より好ましくは、Ｔ３の日用量は、１２〜３５μｇである。最も好ましくは、Ｔ３の日用量は、１７〜２５μｇである。好ましい実施形態では、Ｔ３の日用量は、１７μｇである。Ｔ３の実際の好ましい用量は、患者の容態の重篤性およびＴ３の代謝における個々の変動を含む各場合の特定の要因に依存し、当該技術分野の専門家により容易に決定される。
【００１６】
「長期間の投与」という用語は、本明細書中で使用する場合、少なくとも１週間の期間、および好ましくは少なくとも３週間の期間を指すが、Ｔ３を男性または女性の生涯にわたって被験体に投与することができることは、本発明の範囲内である。Ｔ３の用量は、経口投与、注射、経皮投与および注入（例えば、浸透圧ミニポンプによる）を含むが、これらに限定されない既知の手順によりヒトまたは動物患者に投与され得る。
【００１７】
Ｔ３は、医薬上許容可能なキャリア中に配合することができる。経口投与に関して、Ｔ３の用量の配合物は、カプセル、錠剤、粉末、顆粒として、あるいは懸濁液として提示され得る。好ましくは、Ｔ３の用量は、Ｔ３の単回日用量が投与され得るように、持続放出性または制御放出性配合物で提示される。具体的な持続放出性配合物は、米国特許第５，３２４，５２２号明細書、同第５，８８５，６１６号明細書、同第５，９２２，３５６号明細書、同第５，９６８，５５４号明細書、同第６，０１１，０１１号明細書および同第６，０３９，９８０号明細書（これらは、参照されて本明細書の一部とする）に記載されている。Ｔ３の配合物は、ラクトース、マンニトール、コーンスターチまたはポテトスターチのような従来の添加物を有してもよい。配合物はまた、結晶セルロース、セルロース誘導体、アラビアゴム、コーンスターチまたはゼラチンのような結合剤とともに提示してもよい。さらに、配合物は、コーンスターチ、ポテトスターチまたはカルボキシメチルセルロースナトリウムのような崩壊剤とともに提示してもよい。最終的に、配合物は、タルクまたはステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤とともに提示してもよい。
【００１８】
注射に関して、Ｔ３の用量は、好ましくは患者の血液と等張性である滅菌水溶液と組み合わせてもよい。かかる配合物は、水溶液を生じるように、生理学的に適合性の物質（例えば、塩化ナトリウム、グリシン等）を含有し、かつ生理学的条件と適合可能な緩衝ｐＨを有する水中で、固体有効成分を溶解すること、続いて上記水溶液を滅菌させるにより調製され得る。配合物は、密封アンプルまたはバイアルのような単位または多用量容器中に存在し得る。配合物はまた、筋膜上、皮内、筋内、脈管内、静脈内、実質または皮下を含む任意の注射様式により送達され得るが、これらに限定されない。
【００１９】
経皮投与に関して、Ｔ３の用量は、Ｔ３の用量に対する皮膚の浸透性を増大し、かつ皮膚を通っておよび血流へとＴ３の用量が浸透するのを可能にする皮膚浸透増進剤（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、イソプロパノール、エタノール、オレイン酸、Ｎ−メチルピロリドン等）と組み合わせてもよい。Ｔ３／増進剤組成物はまた、高分子物質（例えば、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、エチレン／酢酸ビニル、ポリビニルピロリドン等）とさらに組み合わせて、ゲル形態で組成物を提供してもよく、この組成物は、塩化メチレンのような溶媒中に溶解させて、所望の粘度に蒸発させ、続いて裏当て材料に塗布して、パッチを提供してもよい。
【００２０】
本発明のＴ３の用量はまた、浸透圧もしくは他のミニポンプから放出または送達されてもよい。基本的な浸透圧ミニポンプからの放出速度は、放出口に配置される微孔性高速応答(fast-response)ゲルにより調節され得る。浸透圧ミニポンプは、Ｔ３の放出を制御するのに、あるいはＴ３の送達を標的化するのに有用である。
【００２１】
本発明の好ましい実施形態では、Ｔ３は、治療的用量のＴ４の投与の非存在下で投与される。
【００２２】
本明細書中に記載するような低用量のＴ３の長期間の連続投与は、Ｔ３もしくはＴ３／Ｔ４複合療法の高用量投与により生じ得る有害な副作用を回避または減衰させることができると考えられる。かかる副作用としては、筋衰弱、骨量の減少、骨粗しょう症、体重の減少、熱不耐性の誘導または悪化、神経質、疲労、被刺激性、うつ病（激越性うつ病を含む）および睡眠障害を含む神経心理学的変化、ならびに心臓肥大、頻拍、狭心症および心不整脈（細動を含む）を含む心臓障害が挙げられるが、これらに限定されない（例えば、The Thyroid, Braverman LE and Utiger RD(eds), Lippincott Williams & Wilkins, 2000）。
【００２３】
本発明はまた、Ｔ３の制御放出用の配合物を提供し、ここでＴ３は、０．００５〜０．０３μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される。好ましくは、Ｔ３は、０．００７５〜０．０２μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される。より好ましくは、Ｔ３は、０．０１〜０．０１５μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される。好ましい実施形態では、Ｔ３は、約０．０１μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される。好ましくは、Ｔ３の日用量は、８〜５０μｇである。より好ましくは、Ｔ３の日用量は、１２〜３５μｇである。最も好ましくは、Ｔ３の日用量は、１７〜２５μｇである。好ましい実施形態では、Ｔ３の日用量は、約１７μｇである。実際の好ましいＴ３の用量は、患者の容体の重篤性およびＴ３の代謝における個々の変動を含む各場合の特定の要因に依存する。
【００２４】
本発明は、以下の実験の詳細の節において記載されるが、実験の詳細は、本発明の理解を助長するために記述するものであり、いかなる場合においても添付の特許請求の範囲で規定するような本発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。
【実施例】
【００２５】
［実験の詳細］
方法および材料−動物研究。研究は、体重１８０〜２２５ｇの成年ＳＤラットを用いて行った。甲状腺切除は、甲状腺の外科的除去により実施した。Ｔ３は、Sigma(St. Louis, MO)から入手し、ボーラス注射またはミニ浸透圧ポンプ(Alza, Palo Alto, CA)による一定注入のいずれかにより皮下投与した。血液は、ラジオイムノアッセイによるＴ３の血清レベルの測定用に、眼窩後隙から定期的に採取した(DiaSorin, Stillwater, MN)。動物を屠殺した後、心臓の左心室を液体窒素中で即座に凍結した後、これまでに記載されるようにＲＮＡ抽出用に処理した(Balkman et al. Endocrinology 130:1002-6, 1992)。α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）ヘテロ核（ｈｎ）ＲＮＡに関する総左心室ＲＮＡの逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）アッセイを、これまでに記載されるように実施した(Danzi and Klein, Thyroid 12(6): 467-72, 2002)。結果は、平均値±ＳＥで表す。
【００２６】
［実施例１］
ラットにおけるＴ３の血清半減期。
甲状腺切除したマウスに、Ｔ３１μｇのボーラス注射を施した。注射後のＴ３の血清レベルの測定により、Ｔ３は、７時間の半減期を有することが示された（図１）。この値は、一般的に報告されている値である約２〜１／２日よりも相当短い(Physician's Desk Reference, 56th ed. (Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002) 1817)。
【００２７】
［実施例２］
一定Ｔ３注入は、甲状腺機能低下性被験体においてＴ３の血清レベルを正常にまで回復させ、かつ不都合な副作用を回避するが、ボーラスＴ３注射は、甲状腺機能低下性被験体においてＴ３の血清レベルを正常にまで回復させず、かつ不都合な副作用を回避しない。正常なラットは、平均約９５ｎｇ／ｄｌの血清Ｔ３レベルを有する（図２のＥｕ）。甲状腺切除したラットにおける７日間のＴ３の注入（０．０４２μｇ／ｈｒ）後、血清Ｔ３レベルは、正常に回復した（７ｄポンプ、図２）。対比して、甲状腺切除したラットにおいて単回ボーラス注射として投与した同じ日用量のＴ３の毎日の注射（Ｔ３１μｇ／日）は、血清Ｔ３レベルを正常に回復させなかった（７ｄ注射、図２）。一定Ｔ３注入は、正常レベルへの血清Ｔ３の回復をもたらしたのに対して、ボーラスＴ３注射は、血清Ｔ３レベルに対する効果が相当小さかったという事実にもかかわらず、Ｔ３の毎日のボーラス注射はまた、望ましくない心臓肥大をもたらしたのに対して、Ｔ３の一定注入は心臓肥大をもたらさなかった。
【００２８】
［実施例３］
一定Ｔ３注入は、甲状腺機能低下性被験体において心臓機能を正常にまで回復させるが、ボーラスＴ３注射は、甲状腺機能低下性被験体において心臓機能を正常にまで回復させない。心臓特異的遺伝子α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）の発現は、正常な心臓機能の高感度の指標である(Ojamaa et al. CVR&R 23:20-6, 2002; Danzi and Klein, Thyroid 12(6):467-72, 2002; Ojamma and Klein, Endorcrinology 132: 1002-6, 1993)。甲状腺切除したラットでは、α−ＭＨＣの発現は、非常に低減している（図４）。図３に示されるように、Ｔ３のボーラス注射は、α−ＭＨＣ発現の一過性の増加から明らかなように、心臓に対して一過性の効果をもたらす。しかしながら、血清Ｔ３レベルに対する効果と同様に、Ｔ３の一定注入は、α−ミオシンＨＣ発現を正常にまで回復させるのに対して、Ｔ３のボーラス注射は、α−ミオシンＨＣ発現を正常にまで回復させない（図４）。
【００２９】
［実施例４］
種々の濃度でのＴ３注入の効果。
甲状腺機能低下性ラットにおける血清Ｔ３レベルおよび他のパラメータに対する種々の濃度でのＴ３注入の効果を表１に示す。１μｇ／日で１週間のＴ３の注入は、甲状腺機能低下性ラットにおいて、血清Ｔ３レベルを正常にまで回復させた。対比して、２．５、５．０および７．０μｇ／日の濃度でのＴ３の注入は、血清Ｔ３レベルを正常以上にまで著しく上昇させた。７．０μｇ／日の濃度でのＴ３の注入はまた、心拍数および体重に対する心臓の重量の比の両方を正常以上にまで著しく上昇させた。１μｇ／日の濃度でのＴ３の注入は、１週間よりも長い期間連続した場合に、心拍数および心臓の大きさを甲状腺機能正常対照の心拍数および心臓の大きさへと正常化すると予測される。
【００３０】
［実施例５］
ラットおよびヒトにおけるＴ３用量の比較。
Ｔ３の代謝クリアランス率（ＭＣＲ）は、ヒトよりもラットでは約１３．５倍速い。ラットに関するＴ３のＭＣＲは、１７６ｍｌ／ｈｒ／ｋｇであると報告されている(Goslings et al., Endocrinology 98:666-75, 1976)。同様に、甲状腺機能低下性ヒトに関するＴ３のＭＣＲは、１１．４Ｌ／日／ｍ２であると報告されている(Bianchi et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 46:203-14, 1997)。７０ｋｇのヒトが１．９１ｍ２であると仮定すると、ヒトに関するＴ３のＭＣＲは、約１３ｍｌ／ｈｒ／ｋｇである。ラットはヒトよりも約１３．５倍高いＴ３のＭＣＲを有するため、等価な結果をもたらすためには、Ｔ３注入は、ラットよりもヒトでは、約１３．５倍低い濃度で施さすべきである。
【００３１】
本明細書中で言及した刊行物はすべて、それらの全体が参照により本出願に援用される。上述の本発明は、明瞭性および理解の目的で、多少詳細に記載してきたが、添付の特許請求の範囲における本発明の真の範囲を逸脱することなく、形態および詳細における様々な変更を行うことができることが、本開示に目を通すことで当業者に理解されよう。
【００３２】
【表１】
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】３匹の甲状腺切除したラットにおけるＴ３１μｇの単回静脈内注射後の、時間の関数としてのＴ３の血清レベル。挿入物は、注射の３０分〜２４時間後のＴ３レベルの常用対数プロットを示す。Ｔ３の半減期は、７時間であると確定された。
【図２】Ｔ３の血清レベルは、連続Ｔ３注入により回復されるが、同量のＴ３のボーラス注射では回復されない。Ｔ３血清レベルは、正常（Ｅｕ）ラット、甲状腺切除した（Ｔｘ）ラット、０．０４２μｇ／ｈｒでのＴ３注入の７日後のＴｘラット（７ｄポンプ）、および７日間のＴ３１μｇ／日のボーラス注射後のＴｘラット（７日注射）に関して示している。各群につきラット３匹。
【図３Ａ】Ｔ３のボーラス注射は、甲状腺切除したラットにおいて心臓特異的遺伝子α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）の発現の一過性の増加をもたらす。α−ＭＨＣヘテロ核（ｈｎ）ＲＮＡのレベルを、Ｔ３１μｇのボーラス注射後の様々な時点で示している。臭化エチジウムで染色して、かつ紫外光で可視化したα−ＭＨＣ ｈｎＲＮＡ ＰＣＲ産物を示す代表的なアガロースゲル。ＰＣＲフラグメントサイズは、３３５塩基対（ｂｐ）である。
【図３Ｂ】Ｔ３のボーラス注射は、甲状腺切除したラットにおいて心臓特異的遺伝子α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）の発現の一過性の増加をもたらす。α−ＭＨＣヘテロ核（ｈｎ）ＲＮＡのレベルを、Ｔ３１μｇのボーラス注射後の様々な時点で示している。３匹のラットに関する甲状腺機能正常（正常）値のパーセントとして示した左心室ＲＮＡ由来のｈｎＲＮＡ α−ＭＨＣ３３５ｂｐフラグメントの定量化。
【図４】心臓特異的遺伝子α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）の発現は、連続Ｔ３注入により正常レベルに回復されるが、ボーラスＴ３注射によっては回復されない。データは、正常な甲状腺機能正常ラット、甲状腺切除した（Ｔｘ）ラット、およびＴ３のボーラス注射（各日Ｔ３１μｇの単回注射を２日間）後またはＴ３の連続注入（０．０４２μｇ／時間を４８時間）後の甲状腺切除したラットに関して示している。Ｔ３連続注入は、α−ＭＨＣ遺伝子発現を正常に回復させたが、Ｔ３のボーラス注射は、正常のほんの６０％の心臓での転写をもたらした。各群当たり２００グラムのラット３匹。
【技術分野】
【０００１】
［関連出願の相互参照］
本願は、２００３年２月１１に出願された米国特許出願第１０／３６４，８００号の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
［発明の背景］
甲状腺機能低下症は、甲状腺による甲状腺ホルモンの不十分な分泌を特徴とする状態である。甲状腺機能低下症の考え得る原因の１つは、ヨウ素欠乏に起因する甲状腺ホルモンの不適切な合成である。この形態の甲状腺機能低下症は、被験体にヨウ素化した塩を供給することにより元に戻すことができる。甲状腺機能低下症はまた、甲状腺ホルモン合成における遺伝的異常性、甲状腺の自己免疫的または他の破壊、あるいは不適切なレベルの甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）（二次性甲状腺機能低下症）または甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）（三次性甲状腺機能低下症）に起因して起こり得る。視床下部の下垂体刺激帯から放出されるＴＲＨは、腺下垂体におけるＴＳＨの合成に影響を及ぼし、順次ＴＳＨは、甲状腺ホルモンであるテトラヨードサイロニン（サイロキシン、すなわちＴ４）およびトリヨードサイロニン（Ｔ３）の合成を制御する(Human Physiology, Schmidt R.F. and Thews G. (eds), Springer-Verlag, New York 1983, pp 670-674)。
【０００３】
Ｔ４は、Ｔ３にとってプロホルモンであり、Ｔ４がその生物学的効果を発揮する前に、Ｔ３に変換されなくてはならない。核甲状腺ホルモン受容体へのＴ３の結合が、甲状腺ホルモンの効果の大部分を開始すると考えられている。Ｔ３は、Ｔ４の親和性よりも約１０倍高い親和性で、この受容体に結合する。循環Ｔ３の約８０％が、特に肝臓、腎臓、下垂体および中枢神経系中の酵素によるＴ４からＴ３への甲状腺外変換から生じる。Ｔ３はまた、アミノ酸チロシンのヨウ素化およびカップリングにより、Ｔ４と一緒に甲状腺で合成される(Physician's Desk Reference, 56th ed. （Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, p 1825)。Ｔ３は、身体のたいていの組織による酸素（Ｏ２）消費を増強し、基礎代謝速度を増加し、炭水化物、脂質およびタンパク質の代謝に影響を与えることが知られている(Physician's Desk Reference, 56th ed. Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, p 1825)。
【０００４】
胚期間および若年期間中の甲状腺欠損は、精神遅滞をもたらし、小児期中では、甲状腺欠損は、成長を妨げる。成年における甲状腺欠損は、身体的および精神的活性の減少(Dugbartey A.T. Arch. Intern. Med. 158: 1413-8, 1998)および皮膚の肥厚化（粘液水腫）(Human Physiology, Schmidt R.F. and Thews G. (eds), Springer-Verlag, New York 1983, pp 670-674)を引き起こす。甲状腺機能低下性の心臓表現型としては、収縮性機能の悪化、心拍出量の減少、および筋細胞遺伝子発現の改変が挙げられる(Ojamaa et al. CVR&R 23: 20-6, 2002; Danzi and Klein, Thyroid 12 (6): 467-72, 2002)。甲状腺機能低下症はまた、血管平滑筋抵抗の有意な増加を伴う血管リモデリングおよび高血圧に関する潜在性を引き起こす。甲状腺機能低下症は、甲状腺ホルモンの減少したレベルに応答して起こる甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）の増加した生産に起因する甲状腺の顕著な腫脹（甲状腺腫）に関連し得る(Human Physiology, Schmidt R.F. and Thews G. (eds), Springer-Verlag, New York 1983, pp 670-674)。成年では、すべての原因からの甲状腺機能低下症の平均発生数は、女性に関しては４．１／１０００および男性に関しては０．６／１０００と報告されている(Vanderpump et al., Clin. Endocrinol. 43:55-68, 1995)。別の研究からは、成年での中程度の甲状腺不全の有病率は、女性に関しては２０歳で４％から６５歳で１７％に及び、男性に関しては２０歳で２％から６５歳で７％に及ぶ(Danese et al. J. Clin. Endocrinol. Metab. 85: 2993-3001, 2000)ことが報告された。
【０００５】
Ｔ４は、一般的にほとんどの形態の甲状腺機能低下症を伴う患者を治療するための置換または補助療法で投与される(Wiersinga W.M. Horm. Res. 56(Suppl 1):74-81, 2001; Danese et al. J. Clin. Endocrinol. Metab. 85:2993-3001, 2000; Adlin V. Am. Fam. Physician 57:776-80, 1998)。対比して、Ｔ３は、無数の合併症がその使用に付随していることから、ごく稀に投与される。Ｔ３の長期間または慢性的投与は、酸素消耗性効果、不整脈および狭心症の増悪に関する懸念に起因して、歴史的に禁忌を示されてきた。特に、優勢なパラダイムは、Ｔ３が、付随する血液供給の増加を伴わない心臓によるＯ２消費、すなわち、アンギナ、細動および他の心臓状態の発症に関する古典的なシナリオを増加するため、長期間の治療には適さないとみなしている(Levine, H.D., Am. J. Med., 69:411-18, 1980、Klemperer et al., N. Engl. J. Med., 333:1522-27, 1995およびKlein and Ojamaa, Am. J. Cardiol, 81:490-91, 1998)。例えば、H.D. Levine(Am. J. Med., 69:411-18, 1980)は、甲状腺ホルモンの投与および甲状腺機能正常（正常）状態への回復は、甲状腺機能低下症および冠状動脈疾患を伴う患者における心臓問題を実際に誘導または増悪させることさえ提唱した。甲状腺ホルモン療法は、心臓血管系、特に冠状動脈の完全性が疑わしい多数の状況では、非常に慎重に使用すべきであるとよく知られている(Physician's Desk Reference, 56th ed. （Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, pp 1817,1825)。
【０００６】
甲状腺ホルモン置換療法は、Ｔ４およびＴ３の組合せを用いて実施されており、ここではＴ４の用量はＴ３の用量を上回り、４対１の比のＴ４対Ｔ３が好ましい（米国特許第５，３２４，５２２号明細書に概説）。Ｔ３は、Ｔ４の同時投与とともに使用するための持続性または持効性放出投薬形態で使用されており、ここでは調製物は、Ｔ３１部に対してＴ４１〜５０部を含有し、日用量は、Ｔ４ ２５〜２００μｇおよびＴ３ ５〜２５μｇである（米国特許第５，３２４，５２２号明細書）。Ｔ４およびＴ３の両方を含有する調製物は、甲状腺機能低下症患者によっては、Ｔ４療法単独と比較して、クオリティ・オブ・ライフ（生活の質）を改善し得ることが提唱されている(Wiersinga W.M. Horm. Res. 56(Suppl 1):74-81, 2001)。実際に、甲状腺癌または自己免疫甲状腺炎を伴う甲状腺機能低下症患者において(Bunevicius and Prange, Int. J. Neuropsychopharmacol. 3: 167-174, 2000)、あるいはグレーヴズ病のための甲状腺切除後に(Bunevicius, Endocrine 18(2):129-33, 2002)、Ｔ４単独と比較して、複合Ｔ４およびＴ３置換療法を用いて、精神向上が報告されている。
【０００７】
Ｔ３を単独で使用する場合には、中程度の甲状腺機能低下症の治療に関して現在推奨されている成人の出発用量は、１日１回経口により２５μｇであり、通常の維持用量は、１日当たり２５〜７５μｇである(Physician's Desk Reference, 56th ed. Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, p 1818)。Ｔ３２５〜５０μｇの開始静脈内用量は、成年における粘液水腫昏睡／前昏睡期の緊急治療において推奨されており、療法の最初の数日では、１日当たりＴ３少なくとも６５μｇの静脈内投与が、より低い死亡率に関連している(Physician's Desk Reference, 56th ed. （Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, p 1826)。
【０００８】
Ｔ３はまた、約５μｇ／日〜約５０μｇ／日の用量を用いて、うっ血性心不全の治療用に患者に投与されている（米国特許第６，２８８，１１７ Ｂ１号明細書）。０．０５〜０．１５μｇ／ｋｇ／時間の用量でのＴ３の急性連続注入は、複雑な先天性心臓疾患の治療のための手術後に、乳幼児、小児および１８歳以下の年齢の患者に使用されている(Chowdhury et al., Am. J. Cardiology 84: 1107-9, 1999, J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 122: 1023-5)。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
［発明の概要］
甲状腺ホルモンの高用量投与、およびＴ４およびＴ３の複合投与の優勢を教示する従来技術に反して、本発明は、成年における甲状腺機能低下症を治療するための低用量のＴ３の長期間の連続投与に関する。低用量のＴ３の長期間の連続投与は、甲状腺機能低下被験体におけるＴ３の血清レベルを首尾よく正常化するだけでなく、高用量のＴ３もしくはＴ３／Ｔ４複合療法に伴って生じ得る有害な副作用を回避または低減すると考えられる。
【００１０】
［発明の詳細な説明］
本発明は、Ｔ３の長期間の連続投与による甲状腺機能低下症を有する成年における甲状腺機能低下症の治療方法に関する。「甲状腺機能低下症を治療する」という用語は、本明細書中で使用する場合、甲状腺機能低下症の任意の１つまたはそれ以上の症状を治療することを包含する。本明細書中で使用する場合、「成年」という用語は、思春期を完了した人を意味するのに使用される。
【００１１】
本明細書中で使用する場合、「Ｔ３」は、トリヨードサイロニンを指す。Ｔ３を、Ｔ３生物活性を有するＴ３フラグメントまたはＴ３生物活性を有するＴ３機能的変異体で置換いうることもまた、本発明の範囲内である。Ｔ３の機能的変異体としては、アミノ酸基がＴ３中に一般的に存在するアミノ酸基に代わって置換したＴ３の変異体、およびＴ３ならびにさらなるアミノ酸を含むか、あるいは任意の１つまたはそれ以上の炭水化物、脂質または核酸をさらに含む変異体が挙げられるが、これらに限定されない。Ｔ３フラグメントおよびＴ３の変異体は、Ｔ３の生物活性と同じ生物活性またはＴ３と比較して増強もしくは低減された生物活性を有し得る。本明細書中で使用する場合、Ｔ３ならびにそのフラグメントまたは変異体は、Ｔ４を包含しない。
【００１２】
合成Ｔ３は、市販されており、Jones Pharma Incorporated (St. Louis, MO)から入手可能であり得る。リオサイロニンナトリウムは、Ｔ３の合成調製物であり、経口（Ｃｙｔｏｍｅｌ）および静脈内（Ｔｒｉｏｓｔａｔ）配合物で購入することができる。Ｃｙｔｏｍｅｌ錠剤は、天然甲状腺ホルモンの合成形態であるリオサイロニン（Ｌ−トリヨードサイロニン）であり、ナトリウム塩として利用可能である(Physician's Desk Reference, 56th ed. Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002, p 1817)。Ｔ３の天然調製物は、動物甲状腺に由来し得る。天然調製物は、乾燥甲状腺およびサイログロブリンを含む。乾燥甲状腺は、ヒトにおいて食品用に使用される家畜（例えば、ウシまたはブタ甲状腺）に由来し、サイログロブリンは、ブタの甲状腺に由来する。
【００１３】
本発明の方法は、Ｔ３欠損した患者を治療するのに使用される。かかる患者では、長期間にわたって投与される低用量のＴ３が、規則的な（例えば、毎日１回）高用量のＴ３の長期間投与に一般的に付随する最低限の有害な副作用を伴って、または有害な副作用を全く伴わずに、患者において、血清Ｔ３を正常レベル（８０〜１８０ｎｇ／ｄｌ）へ回復させるか、あるいは正常以上の血清Ｔ３レベルにわずかに上昇させることが期待される。
【００１４】
好ましい患者の分類の１つは、Ｔ４をＴ３に変換することが欠乏している被験体である（例えば、De Groot, J. Clin. Endocrinology Metabolism 84:151-64, 1999)。
【００１５】
本発明の方法では、Ｔ３は、０．００５〜０．０３μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される。好ましくは、Ｔ３は、０．００７５〜０．０２μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される。より好ましくは、Ｔ３は、０．０１〜０．０１５μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される。好ましい実施形態では、Ｔ３は、約０．０１μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される。好ましくは、Ｔ３の日用量は、８〜５０μｇである。例えば、７０ｋｇの人に関しては、０．００５μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量は、Ｔ３８．４μｇの日用量をもたらす。より好ましくは、Ｔ３の日用量は、１２〜３５μｇである。最も好ましくは、Ｔ３の日用量は、１７〜２５μｇである。好ましい実施形態では、Ｔ３の日用量は、１７μｇである。Ｔ３の実際の好ましい用量は、患者の容態の重篤性およびＴ３の代謝における個々の変動を含む各場合の特定の要因に依存し、当該技術分野の専門家により容易に決定される。
【００１６】
「長期間の投与」という用語は、本明細書中で使用する場合、少なくとも１週間の期間、および好ましくは少なくとも３週間の期間を指すが、Ｔ３を男性または女性の生涯にわたって被験体に投与することができることは、本発明の範囲内である。Ｔ３の用量は、経口投与、注射、経皮投与および注入（例えば、浸透圧ミニポンプによる）を含むが、これらに限定されない既知の手順によりヒトまたは動物患者に投与され得る。
【００１７】
Ｔ３は、医薬上許容可能なキャリア中に配合することができる。経口投与に関して、Ｔ３の用量の配合物は、カプセル、錠剤、粉末、顆粒として、あるいは懸濁液として提示され得る。好ましくは、Ｔ３の用量は、Ｔ３の単回日用量が投与され得るように、持続放出性または制御放出性配合物で提示される。具体的な持続放出性配合物は、米国特許第５，３２４，５２２号明細書、同第５，８８５，６１６号明細書、同第５，９２２，３５６号明細書、同第５，９６８，５５４号明細書、同第６，０１１，０１１号明細書および同第６，０３９，９８０号明細書（これらは、参照されて本明細書の一部とする）に記載されている。Ｔ３の配合物は、ラクトース、マンニトール、コーンスターチまたはポテトスターチのような従来の添加物を有してもよい。配合物はまた、結晶セルロース、セルロース誘導体、アラビアゴム、コーンスターチまたはゼラチンのような結合剤とともに提示してもよい。さらに、配合物は、コーンスターチ、ポテトスターチまたはカルボキシメチルセルロースナトリウムのような崩壊剤とともに提示してもよい。最終的に、配合物は、タルクまたはステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤とともに提示してもよい。
【００１８】
注射に関して、Ｔ３の用量は、好ましくは患者の血液と等張性である滅菌水溶液と組み合わせてもよい。かかる配合物は、水溶液を生じるように、生理学的に適合性の物質（例えば、塩化ナトリウム、グリシン等）を含有し、かつ生理学的条件と適合可能な緩衝ｐＨを有する水中で、固体有効成分を溶解すること、続いて上記水溶液を滅菌させるにより調製され得る。配合物は、密封アンプルまたはバイアルのような単位または多用量容器中に存在し得る。配合物はまた、筋膜上、皮内、筋内、脈管内、静脈内、実質または皮下を含む任意の注射様式により送達され得るが、これらに限定されない。
【００１９】
経皮投与に関して、Ｔ３の用量は、Ｔ３の用量に対する皮膚の浸透性を増大し、かつ皮膚を通っておよび血流へとＴ３の用量が浸透するのを可能にする皮膚浸透増進剤（例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、イソプロパノール、エタノール、オレイン酸、Ｎ−メチルピロリドン等）と組み合わせてもよい。Ｔ３／増進剤組成物はまた、高分子物質（例えば、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、エチレン／酢酸ビニル、ポリビニルピロリドン等）とさらに組み合わせて、ゲル形態で組成物を提供してもよく、この組成物は、塩化メチレンのような溶媒中に溶解させて、所望の粘度に蒸発させ、続いて裏当て材料に塗布して、パッチを提供してもよい。
【００２０】
本発明のＴ３の用量はまた、浸透圧もしくは他のミニポンプから放出または送達されてもよい。基本的な浸透圧ミニポンプからの放出速度は、放出口に配置される微孔性高速応答(fast-response)ゲルにより調節され得る。浸透圧ミニポンプは、Ｔ３の放出を制御するのに、あるいはＴ３の送達を標的化するのに有用である。
【００２１】
本発明の好ましい実施形態では、Ｔ３は、治療的用量のＴ４の投与の非存在下で投与される。
【００２２】
本明細書中に記載するような低用量のＴ３の長期間の連続投与は、Ｔ３もしくはＴ３／Ｔ４複合療法の高用量投与により生じ得る有害な副作用を回避または減衰させることができると考えられる。かかる副作用としては、筋衰弱、骨量の減少、骨粗しょう症、体重の減少、熱不耐性の誘導または悪化、神経質、疲労、被刺激性、うつ病（激越性うつ病を含む）および睡眠障害を含む神経心理学的変化、ならびに心臓肥大、頻拍、狭心症および心不整脈（細動を含む）を含む心臓障害が挙げられるが、これらに限定されない（例えば、The Thyroid, Braverman LE and Utiger RD(eds), Lippincott Williams & Wilkins, 2000）。
【００２３】
本発明はまた、Ｔ３の制御放出用の配合物を提供し、ここでＴ３は、０．００５〜０．０３μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される。好ましくは、Ｔ３は、０．００７５〜０．０２μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される。より好ましくは、Ｔ３は、０．０１〜０．０１５μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される。好ましい実施形態では、Ｔ３は、約０．０１μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される。好ましくは、Ｔ３の日用量は、８〜５０μｇである。より好ましくは、Ｔ３の日用量は、１２〜３５μｇである。最も好ましくは、Ｔ３の日用量は、１７〜２５μｇである。好ましい実施形態では、Ｔ３の日用量は、約１７μｇである。実際の好ましいＴ３の用量は、患者の容体の重篤性およびＴ３の代謝における個々の変動を含む各場合の特定の要因に依存する。
【００２４】
本発明は、以下の実験の詳細の節において記載されるが、実験の詳細は、本発明の理解を助長するために記述するものであり、いかなる場合においても添付の特許請求の範囲で規定するような本発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。
【実施例】
【００２５】
［実験の詳細］
方法および材料−動物研究。研究は、体重１８０〜２２５ｇの成年ＳＤラットを用いて行った。甲状腺切除は、甲状腺の外科的除去により実施した。Ｔ３は、Sigma(St. Louis, MO)から入手し、ボーラス注射またはミニ浸透圧ポンプ(Alza, Palo Alto, CA)による一定注入のいずれかにより皮下投与した。血液は、ラジオイムノアッセイによるＴ３の血清レベルの測定用に、眼窩後隙から定期的に採取した(DiaSorin, Stillwater, MN)。動物を屠殺した後、心臓の左心室を液体窒素中で即座に凍結した後、これまでに記載されるようにＲＮＡ抽出用に処理した(Balkman et al. Endocrinology 130:1002-6, 1992)。α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）ヘテロ核（ｈｎ）ＲＮＡに関する総左心室ＲＮＡの逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）アッセイを、これまでに記載されるように実施した(Danzi and Klein, Thyroid 12(6): 467-72, 2002)。結果は、平均値±ＳＥで表す。
【００２６】
［実施例１］
ラットにおけるＴ３の血清半減期。
甲状腺切除したマウスに、Ｔ３１μｇのボーラス注射を施した。注射後のＴ３の血清レベルの測定により、Ｔ３は、７時間の半減期を有することが示された（図１）。この値は、一般的に報告されている値である約２〜１／２日よりも相当短い(Physician's Desk Reference, 56th ed. (Montvale, NJ: Medical Economics Company, Inc., 2002) 1817)。
【００２７】
［実施例２］
一定Ｔ３注入は、甲状腺機能低下性被験体においてＴ３の血清レベルを正常にまで回復させ、かつ不都合な副作用を回避するが、ボーラスＴ３注射は、甲状腺機能低下性被験体においてＴ３の血清レベルを正常にまで回復させず、かつ不都合な副作用を回避しない。正常なラットは、平均約９５ｎｇ／ｄｌの血清Ｔ３レベルを有する（図２のＥｕ）。甲状腺切除したラットにおける７日間のＴ３の注入（０．０４２μｇ／ｈｒ）後、血清Ｔ３レベルは、正常に回復した（７ｄポンプ、図２）。対比して、甲状腺切除したラットにおいて単回ボーラス注射として投与した同じ日用量のＴ３の毎日の注射（Ｔ３１μｇ／日）は、血清Ｔ３レベルを正常に回復させなかった（７ｄ注射、図２）。一定Ｔ３注入は、正常レベルへの血清Ｔ３の回復をもたらしたのに対して、ボーラスＴ３注射は、血清Ｔ３レベルに対する効果が相当小さかったという事実にもかかわらず、Ｔ３の毎日のボーラス注射はまた、望ましくない心臓肥大をもたらしたのに対して、Ｔ３の一定注入は心臓肥大をもたらさなかった。
【００２８】
［実施例３］
一定Ｔ３注入は、甲状腺機能低下性被験体において心臓機能を正常にまで回復させるが、ボーラスＴ３注射は、甲状腺機能低下性被験体において心臓機能を正常にまで回復させない。心臓特異的遺伝子α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）の発現は、正常な心臓機能の高感度の指標である(Ojamaa et al. CVR&R 23:20-6, 2002; Danzi and Klein, Thyroid 12(6):467-72, 2002; Ojamma and Klein, Endorcrinology 132: 1002-6, 1993)。甲状腺切除したラットでは、α−ＭＨＣの発現は、非常に低減している（図４）。図３に示されるように、Ｔ３のボーラス注射は、α−ＭＨＣ発現の一過性の増加から明らかなように、心臓に対して一過性の効果をもたらす。しかしながら、血清Ｔ３レベルに対する効果と同様に、Ｔ３の一定注入は、α−ミオシンＨＣ発現を正常にまで回復させるのに対して、Ｔ３のボーラス注射は、α−ミオシンＨＣ発現を正常にまで回復させない（図４）。
【００２９】
［実施例４］
種々の濃度でのＴ３注入の効果。
甲状腺機能低下性ラットにおける血清Ｔ３レベルおよび他のパラメータに対する種々の濃度でのＴ３注入の効果を表１に示す。１μｇ／日で１週間のＴ３の注入は、甲状腺機能低下性ラットにおいて、血清Ｔ３レベルを正常にまで回復させた。対比して、２．５、５．０および７．０μｇ／日の濃度でのＴ３の注入は、血清Ｔ３レベルを正常以上にまで著しく上昇させた。７．０μｇ／日の濃度でのＴ３の注入はまた、心拍数および体重に対する心臓の重量の比の両方を正常以上にまで著しく上昇させた。１μｇ／日の濃度でのＴ３の注入は、１週間よりも長い期間連続した場合に、心拍数および心臓の大きさを甲状腺機能正常対照の心拍数および心臓の大きさへと正常化すると予測される。
【００３０】
［実施例５］
ラットおよびヒトにおけるＴ３用量の比較。
Ｔ３の代謝クリアランス率（ＭＣＲ）は、ヒトよりもラットでは約１３．５倍速い。ラットに関するＴ３のＭＣＲは、１７６ｍｌ／ｈｒ／ｋｇであると報告されている(Goslings et al., Endocrinology 98:666-75, 1976)。同様に、甲状腺機能低下性ヒトに関するＴ３のＭＣＲは、１１．４Ｌ／日／ｍ２であると報告されている(Bianchi et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 46:203-14, 1997)。７０ｋｇのヒトが１．９１ｍ２であると仮定すると、ヒトに関するＴ３のＭＣＲは、約１３ｍｌ／ｈｒ／ｋｇである。ラットはヒトよりも約１３．５倍高いＴ３のＭＣＲを有するため、等価な結果をもたらすためには、Ｔ３注入は、ラットよりもヒトでは、約１３．５倍低い濃度で施さすべきである。
【００３１】
本明細書中で言及した刊行物はすべて、それらの全体が参照により本出願に援用される。上述の本発明は、明瞭性および理解の目的で、多少詳細に記載してきたが、添付の特許請求の範囲における本発明の真の範囲を逸脱することなく、形態および詳細における様々な変更を行うことができることが、本開示に目を通すことで当業者に理解されよう。
【００３２】
【表１】
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】３匹の甲状腺切除したラットにおけるＴ３１μｇの単回静脈内注射後の、時間の関数としてのＴ３の血清レベル。挿入物は、注射の３０分〜２４時間後のＴ３レベルの常用対数プロットを示す。Ｔ３の半減期は、７時間であると確定された。
【図２】Ｔ３の血清レベルは、連続Ｔ３注入により回復されるが、同量のＴ３のボーラス注射では回復されない。Ｔ３血清レベルは、正常（Ｅｕ）ラット、甲状腺切除した（Ｔｘ）ラット、０．０４２μｇ／ｈｒでのＴ３注入の７日後のＴｘラット（７ｄポンプ）、および７日間のＴ３１μｇ／日のボーラス注射後のＴｘラット（７日注射）に関して示している。各群につきラット３匹。
【図３Ａ】Ｔ３のボーラス注射は、甲状腺切除したラットにおいて心臓特異的遺伝子α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）の発現の一過性の増加をもたらす。α−ＭＨＣヘテロ核（ｈｎ）ＲＮＡのレベルを、Ｔ３１μｇのボーラス注射後の様々な時点で示している。臭化エチジウムで染色して、かつ紫外光で可視化したα−ＭＨＣ ｈｎＲＮＡ ＰＣＲ産物を示す代表的なアガロースゲル。ＰＣＲフラグメントサイズは、３３５塩基対（ｂｐ）である。
【図３Ｂ】Ｔ３のボーラス注射は、甲状腺切除したラットにおいて心臓特異的遺伝子α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）の発現の一過性の増加をもたらす。α−ＭＨＣヘテロ核（ｈｎ）ＲＮＡのレベルを、Ｔ３１μｇのボーラス注射後の様々な時点で示している。３匹のラットに関する甲状腺機能正常（正常）値のパーセントとして示した左心室ＲＮＡ由来のｈｎＲＮＡ α−ＭＨＣ３３５ｂｐフラグメントの定量化。
【図４】心臓特異的遺伝子α−ミオシン重鎖（α−ＭＨＣ）の発現は、連続Ｔ３注入により正常レベルに回復されるが、ボーラスＴ３注射によっては回復されない。データは、正常な甲状腺機能正常ラット、甲状腺切除した（Ｔｘ）ラット、およびＴ３のボーラス注射（各日Ｔ３１μｇの単回注射を２日間）後またはＴ３の連続注入（０．０４２μｇ／時間を４８時間）後の甲状腺切除したラットに関して示している。Ｔ３連続注入は、α−ＭＨＣ遺伝子発現を正常に回復させたが、Ｔ３のボーラス注射は、正常のほんの６０％の心臓での転写をもたらした。各群当たり２００グラムのラット３匹。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
甲状腺機能低下症を有する成年被験体において、甲状腺機能低下症を治療する方法であって、前記被験体において甲状腺機能低下症を治療するのに有効な０．００５〜０．０３μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で、前記成年被験体へＴ３を長期間投与することを含む方法。
【請求項２】
Ｔ３は、０．００７５〜０．０２μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｔ３は、０．０１〜０．０１５μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
Ｔ３は、約０．０１μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
Ｔ３の日用量は、８〜５０μｇである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
Ｔ３の日用量は、１２〜３５μｇである、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
Ｔ３の日用量は、１７〜２５μｇである、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
Ｔ３の日用量は、約１７μｇである、請求項４に記載の方法。
【請求項９】
Ｔ３は、医薬上許容可能なキャリア中に配合される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
Ｔ３は、持続放出性配合物中で投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
Ｔ３は、毎日投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
Ｔ３は、経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
Ｔ３は、注入により投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
Ｔ３は、毎日投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
Ｔ３は、経口投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
Ｔ３は、一日に一度、持続放出性配合物中で経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記成年は、Ｔ４をＴ３に変換することが欠乏している、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
Ｔ３は、治療的用量のＴ４の投与の欠如下で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
Ｔ３は、０．００５〜０．０３μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される配合物。
【請求項２０】
Ｔ３は、０．００７５〜０．０２μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される、請求項１９に記載の配合物。
【請求項２１】
Ｔ３は、０．０１〜０．０１５μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される、請求項２０に記載の配合物。
【請求項２２】
Ｔ３は、約０．０１μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される、請求項２０に記載の配合物。
【請求項２３】
Ｔ３の日用量は、８〜５０μｇである、請求項１９に記載の配合物。
【請求項２４】
Ｔ３の日用量は、１２〜３５μｇである、請求項２０に記載の配合物。
【請求項２５】
Ｔ３の日用量は、１７〜２５μｇである、請求項２１に記載の配合物。
【請求項２６】
Ｔ３の日用量は、約１７μｇである、請求項２２に記載の配合物。
【請求項１】
甲状腺機能低下症を有する成年被験体において、甲状腺機能低下症を治療する方法であって、前記被験体において甲状腺機能低下症を治療するのに有効な０．００５〜０．０３μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で、前記成年被験体へＴ３を長期間投与することを含む方法。
【請求項２】
Ｔ３は、０．００７５〜０．０２μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｔ３は、０．０１〜０．０１５μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
Ｔ３は、約０．０１μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
Ｔ３の日用量は、８〜５０μｇである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
Ｔ３の日用量は、１２〜３５μｇである、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
Ｔ３の日用量は、１７〜２５μｇである、請求項３に記載の方法。
【請求項８】
Ｔ３の日用量は、約１７μｇである、請求項４に記載の方法。
【請求項９】
Ｔ３は、医薬上許容可能なキャリア中に配合される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
Ｔ３は、持続放出性配合物中で投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
Ｔ３は、毎日投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
Ｔ３は、経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
Ｔ３は、注入により投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
Ｔ３は、毎日投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
Ｔ３は、経口投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
Ｔ３は、一日に一度、持続放出性配合物中で経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記成年は、Ｔ４をＴ３に変換することが欠乏している、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
Ｔ３は、治療的用量のＴ４の投与の欠如下で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
Ｔ３は、０．００５〜０．０３μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される配合物。
【請求項２０】
Ｔ３は、０．００７５〜０．０２μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される、請求項１９に記載の配合物。
【請求項２１】
Ｔ３は、０．０１〜０．０１５μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される、請求項２０に記載の配合物。
【請求項２２】
Ｔ３は、約０．０１μｇ／ｋｇ（体重）／時間／日の用量で放出される、請求項２０に記載の配合物。
【請求項２３】
Ｔ３の日用量は、８〜５０μｇである、請求項１９に記載の配合物。
【請求項２４】
Ｔ３の日用量は、１２〜３５μｇである、請求項２０に記載の配合物。
【請求項２５】
Ｔ３の日用量は、１７〜２５μｇである、請求項２１に記載の配合物。
【請求項２６】
Ｔ３の日用量は、約１７μｇである、請求項２２に記載の配合物。
【図１】
【図２】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図４】
【図２】
【図３Ａ】
【図３Ｂ】
【図４】
【公表番号】特表２００６−５１７５８８（Ｐ２００６−５１７５８８Ａ）
【公表日】平成１８年７月２７日（２００６．７．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５０３４１２（Ｐ２００６−５０３４１２）
【出願日】平成１６年２月６日（２００４．２．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／００３６２０
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０７１４３２
【国際公開日】平成１６年８月２６日（２００４．８．２６）
【出願人】（５０１３２４８３４）ザ・フェインスタイン・インスティチュート・フォー・メディカル・リサーチ (14)
【氏名又は名称原語表記】Ｔｈｅ Ｆｅｉｎｓｔｅｉｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
【住所又は居所原語表記】３５０ Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ Ｄｒｉｖｅ， Ｍａｎｈａｓｓｅｔ， ＮＹ １１０３０， Ｕ．Ｓ．Ａ．
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年７月２７日（２００６．７．２７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年２月６日（２００４．２．６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／００３６２０
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０７１４３２
【国際公開日】平成１６年８月２６日（２００４．８．２６）
【出願人】（５０１３２４８３４）ザ・フェインスタイン・インスティチュート・フォー・メディカル・リサーチ (14)
【氏名又は名称原語表記】Ｔｈｅ Ｆｅｉｎｓｔｅｉｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
【住所又は居所原語表記】３５０ Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ Ｄｒｉｖｅ， Ｍａｎｈａｓｓｅｔ， ＮＹ １１０３０， Ｕ．Ｓ．Ａ．
【Ｆターム（参考）】
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