癌増殖抑制剤
【課題】配糖体化により経口吸収性が向上することは多くのフラボノイドで確かめられているも、いまだその効果は十分とはいえない。そこで、フラボノイドの一種であるシーバックソーンのサジーの果実より抽出フラボノイドや種子抽出フラボノイドから成る癌増殖抑制剤を提供する。
【解決手段】クエルセチン、ケンフェロール、ミルセチン、イソラムネチンおよびルチンを含む癌増殖抑制剤であって、生理学的な活性量でフラボノイドを含む果実抽出物または種子抽出物を更に含む、シーバックソーンのサジー果実より抽出の種子より抽出のクエンセチル、ケンフェロール、ミセルチンの単体または混合物に癌増殖抑制を見いだした。
【解決手段】クエルセチン、ケンフェロール、ミルセチン、イソラムネチンおよびルチンを含む癌増殖抑制剤であって、生理学的な活性量でフラボノイドを含む果実抽出物または種子抽出物を更に含む、シーバックソーンのサジー果実より抽出の種子より抽出のクエンセチル、ケンフェロール、ミセルチンの単体または混合物に癌増殖抑制を見いだした。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シーバックソーンのサジーの果実および種子フラボノイドを含む癌増殖抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、活性酸素種やフリーラジカルによる酸化ストレスが、生活習慣病を始めとするさまざまな疾病の原因に成ることが知られている。酸素は生きていくためのエネルギーを生産するために必須の分子である一方、過剰の酸素が非常に反応性の高い活性酸素に変化し、生体に傷害を与えていることも事実である。活性酸素としては、スーパーオキシドアニオンラジカル、過酸化水素、ＯＨラジカル及び励起分子種である一重項酸素等がある。生物はもともとこれらの活性酸素による酸化傷害を防ぐ能力を備えており、ビタミンＥや抗酸化酵素がこれを担っている。しかしながら、加齢等の要因により酸化傷害を防ぐ能力が低下したり、また過激な運動やストレス負荷等の要因により防御能力以上の活性酸素が発生した場合には、消去しきれない活性酸素が標的分子を酸化し、その結果、生体成分は傷害を受け、老化が引き起こされることになる。
【０００３】
したがって、活性酸素やフリーラジカルを消去する抗酸化物質を効率的に接種し、酸化ストレスから防御することがさまざまな疾病の予防や治療の観点から非常に重要であると考えられている。特に、食物から酸化傷害に対する防御機能成分を積極的に摂取することで、より効率的にこの傷害を制御・消去できると考えられることから、抗酸化作用を有するさまざまな食品成分に注目が集まっている。
【０００４】
フラボノイドは、日常摂取する食品の中に多種多様な形態で含まれており、強い抗酸化活性を持つことが知られている。しかしながら、その抗酸化活性は、生体外においては有効である物の、経口吸収性が低いために生体内における活性酸素やフリーラジカルを消去するには十分でない。そこで、フラボノイドに糖を結合させることにより吸収性を高める方法が提案されている（特許文献１参照）。また、蕎麦などに含まれるルチンに糖転移して得られたα−グルコシルルチン、ルチンと比較してその吸収が向上することが報告されている（特許文献２，非特許文献１参照）
【０００５】
ルチンのアグリコンであるクエルセチンは、強力な抗酸化活性（非特許文献２参照）の他、血小板の凝集抑制および接着抑制作用、血管拡張作用、抗癌作用等、多彩な生理機能を持つことが知られている。このクエルセチンについても、タマネギに多く含まれるクエルセチン配糖体の方が吸収性に優れていることが報告されている（非特許文献３参照）また、同様にクエルセチンの３位にグルコースがβ結合したイソクエルシトリンは、クエルセチンやルチンよりも吸収性が高いことが報告されている（非特許文献４参照）
【０００６】
サジーは、グミ科ヒッポファエ属の落葉低木の総称で、生命力が強く、乾燥した砂地や寒冷地、高山などの過酷な環境に生息している。また、シーバックソーンの種子オイルはやけど切り傷などに用いられ、ジュースに含まれている不飽和脂肪酸やフラボノイドなどは、高脂血症、虚血性心疾患などの治療薬として用いられている。また、各種ビタミン、アミノ酸を多く含んでいるため、栄養食として、ロシア、中国では、宇宙食に用いられている。また、サジー果実ジュースの抗酸化力は、７３６２μｍｏｌＴＥ／１００ｍｇ（ＯＰＡＣ法にて測定）であり、これはブルーベリー６５２０μｍｏｌＴＥ／１００ｍｇに次ぎ果物のなかで最高であった。
【特許文献１】特開２０００−７８９５６号公報
【特許文献２】特開２００４−５９５２２号公報
【特許文献３】特開平１−２１３２９３号公報
【非特許文献１】Ｓｈｉｍｏｉ Ｋ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｇｒｉｃ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．，５１，２７８５−２７８９，２００３
【非特許文献２】Ｗｉｄｄｌｔｏｎ ＥＪ．Ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ．，５２，６７３−７５１，２０００
【非特許文献３】Ｈｏｌｌｍａｎ ＰＣ ｅｔ ａｌ．，Ａｒｃｈ Ｔｏｘｉｃｏｌ Ｓｕｐｐｌ．，２０，２３７−２４８，１９９８
【非特許文献４】Ｍｏｒａｎｄ Ｃ ｅｔ．，Ｆｒｅｅ Ｒａｄ Ｒｅｓ．，３３，６６７−６７６，２０００
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
上記の通り、配糖体化により経口吸収性が向上することは多くのフラボノイドで確かめられているものの、いまだその効果は十分とはいえない。
【０００８】
そこで本発明は、フラボノイドの一種であるシーバックソーンのサジーの果実より抽出フラボノイドや種子抽出フラボノイドから成る癌増殖抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討したところ、下記のように
【００１０】
クエルセチン、ケンフェロール、ミルセチン、イソラムネチンおよびルチンを含む癌増殖抑制剤であって、生理学的な活性量でフラボノイドを含む果実抽出物または種子抽出物を更に含む、シーバックソーンのサジー果実より抽出の種子より抽出のクエルセチル、ケンフェロール、ミルセチンの単体または混合物に癌増殖抑制を見いだし得ることで完成したものである。
【実施例と発明の効果】
【００１１】
本発明のシーバックソーンのサジーの果実抽出物や種子抽出物のクエルセチン、ケンフェロール、ミルセチンの単体または混合物を人白血病細胞（Ｕ９３７：３×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調整したもの）を用い、数種の抗癌剤との培養時間に伴う抗癌効果の比較を行った。培養時間は７２時間まで行った。その結果、抗癌剤に匹敵する或いはそれ以上の抗癌効果があることが実証された。添加した濃度により効果に要する培養時間は異なるか、サジー果実抽出フラボノイドについては、全ての濃度において生存細胞が完全に死滅することが確認された。培養中、決して増殖は見られなかった。サジー種子抽出フラボノイドについては、濃度１６．７、１３．３、１０．０μｌ／ｍｌ（Ｕ９３７培養液）をＵ９３７培養液に添加した場合は、濃度による効果の変化は全くなく、サジー果実抽質フラボノイド以上の癌増殖抑制効果が見られた。しかし、６．７μｌ／ｍｌ（Ｕ９３７培養液）を添加した場合は、２４時間まで生存細胞は減少するが、さらに培養すると再び増殖する傾向が見られた。
【００１２】
サジー果実抽出や種子抽出フラボノイドの抽出液中（０．０５ｇを２ｍｌエタノール中に抽出した溶液）に含まれる５種類の抗酸化物質、ルチン、ミルセチン、クエルセチン、ケンフェロール、イソラムネチンの定性を行った。
【００１３】
サジー果実フラボノイド中の含有量は、ケンフェロール：２．０１４ｍｇ、クエルセチン：１．１８４ｍｇ、イソラムネチン：０．３９４ｍｇ、ミセルチン：０．１３４ｍｇ、ルチン：０．０３０ｍｇであった。
【００１４】
サジー種子フラボノイド中の含有量は、ケンフェロール：０．０８９ｍｇ、クエルセチン：０．０８０ｍｇ、イソラムネチン：０．０３３ｍｇ、ミルセチン：０．０５５ｍｇ、ルチン：０．１６１ｍｇであった。
【００１５】
次に、サジー果実抽出および種子抽出フラボノイドと同じ方法で５種類の抗酸化物質をＵ９３７細胞溶液に添加し癌増殖抑制効果の検討を行った。特に効果が大きく現れたのは、クエルセチンとケンフェロールで、２４時間培養で細胞生存率は、１１．７％、１３．０％に減少し、４８時間培養で細胞生存率は、５．２％、５．３％になり、７２時間培養で細胞生存率は０．０％となった。ミセルチンにおいては、細胞培養時間７２時間で６３．４％と若干の減少が見られた。ルチン、イソラムネチンは、全く減少が見られなかった。また、細胞生存率の減少が見られたクエルセチン、ケンフェロール、ミセルチンの混合液を添加したＵ９３７細胞溶液においては、３時間培養で０．０％となり、培養時間７２時間まで０．０％あった。以上の実験結果から、特に含有量が多く、なおかつＵ９３７細胞において、癌増殖抑制効果が認められた、抗酸化物質を含んでいるシーバックソーンのサジー果実および種子フラボノイドの癌増殖抑制効果が実証された。また、抗酸化剤と言われている、クエルセチン、ケンフェロールにおいてもＵ９３７細胞における癌増殖抑制効果が認められ、これらの混合液のＵ９３７細胞における癌増殖抑制効果は非常に大きい。
【測定条件と試料調製】
【００１６】
試料作成条件：前処理および測定試料調製（エタノール抽出）：果実フラボノイド粉末５０．０９ｍｇ、種子フラボノイド粉末５０．０５ｍｇに各々エタノール２ｍｌを加え、時々激しく振りながら１５分間超音波抽出を行った後、３５００ｒｐｍで１５分間遠心分離を行い、上澄みを濾過しエタノール／超純水（７０／３０）で１０倍希釈しＨＰＬＣ注入用試料とした。
【００１７】
装置：▲１▼ＨＰＬＣ ＰＵＭＰ：ＰＵ−２０８０ Ｐｌｕｓ
▲２▼ＩＮ−ＬＩＮＥ ＤＥＧＡＳＳＥＲ：ＤＧ−２０８０−５３
▲３▼ＬＯＷ ＰＲＥＳＳＵＲＥ ＧＲＡＤＩＥＮＴ ＵＮＩＴ：ＬＧ−２０８０−０４
▲４▼ＡＵＴＯＳＡＭＰＬＥＲ：ＡＳ−２０５７ Ｐｌｕｓ（４℃）
▲５▼ＣＯＬＵＭＮ ＯＶＥＮ：ＣＯ−２０６０ Ｐｌｕｓ
▲６▼ＰＨＯＴＯ ＤＩＯＤＥ ＡＲＲＡＹ ＤＥＴＥＣＴＯＲ：ＭＤ−２０１０ Ｐｌｕｓ
▲７▼ＣＨＲＯＭＡＴＯＧＲＡＰＨＹ ＤＡＴＡ ＳＹＳＴＥＭ：ＣｈｒｏｍＮＡＶ
【００１８】
測定条件：▲１▼カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ ＯＤＳ−ＨＧ−５（４．６ｍｍＩ．Ｄ．×２５０ｍｍ）
▲２▼移動相Ａ：０．１％リン酸＋超純水
▲３▼移動相Ｂ：０．１％リン酸＋メタノール／ＴＨＦ（８０／２０）
▲４▼移動相：１．０ｍｌ／ｍｉｎ
▲５▼カラム温度：４０℃
▲６▼ＰＤＡ検出条件：取り込み波長２００〜６５０ｎｍ
仮想チャンネル（ＣＨ９）：２７５ｎｍ
仮想チャンネル（ＣＨ１０）：３５５ｎｍ
仮想チャンネル（ＣＨ１１）：３７５ｎｍ
波長間隔：４ｎｍ
波長積算：４ｎｍ
時間間隔：０．８ｓｅｃ
時間積算：０．８ｓｅｃ
▲７▼注入量：１０μＬ
▲８▼グラジェント条件：Ｔｉｍｅ（ｍｉｎ） Ａ（％）
０．０ １００
１５．０ ７０
６０．０ ４５
６０．１ ０
７０．０ ０
７０．１ １００
注入間隔：８５．０分
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は、Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｕ９３７ ｗｉｔｈ Ｓｅａｂｕｃｋｔｈｏｒｎ（Ｓａｊｉ）ｆｒｕｉｔ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓを示す。
【００２０】
【図２】図２は、Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｕ９３７ ｗｉｔｈ Ｓｅａｂｕｃｋｔｈｏｒｎ（Ｓａｊｉ）ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓを示す。
【００２１】
【図３】図３は、Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｕ９３７ ｗｉｔｈ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｄｒｕｇ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｄｒｕｇ ４５０μｌ／６ｍｌ（７５μｌ／ｍｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ）を示す。
【００２２】
【図４】図４は、Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｕ９３７ ｗｉｔｈ Ｓｅａｂｕｃｋｔｈｏｒｎ ｃｏｎｔｒｏｌを示す。
【００２３】
【図５】図５は、シーバックソーンのサジー果実の分析測定結果（エタノール抽出１回目：３７５ｎｍ）を示す。
【００２４】
【図６】図６は、シーバックソーンのサジー種子の分析結果（エタノール抽出１回目：３７５ｎｍ）を示す。
【００２５】
【図７】図７は、Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｕ９３７ ｗｉｔｈ Ｍｙｒｉｃｅｔｉｎ，Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｄｅｈｙｄｒａｔｅ，Ｋａｅｍｆｅｒｏｌ，Ｍｉｘ ７５μｌ（０．３ｍｇ）／９ｍｌ，８．３μｌ（３０μｇ）／ｍｌを示す。
【００２６】
【図８】図８は、Ｓａｊｉ ｆｒｕｉｔ ａｎｄ ｓｅｅｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ：５０ｍｇ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｉｎ ２ｍｌ ｅｔｈｏｎｏｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｗｅ ｕｓｅｄ ｔｏｐ ｃｌｅａｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎを示す。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シーバックソーンのサジーの果実および種子フラボノイドを含む癌増殖抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、活性酸素種やフリーラジカルによる酸化ストレスが、生活習慣病を始めとするさまざまな疾病の原因に成ることが知られている。酸素は生きていくためのエネルギーを生産するために必須の分子である一方、過剰の酸素が非常に反応性の高い活性酸素に変化し、生体に傷害を与えていることも事実である。活性酸素としては、スーパーオキシドアニオンラジカル、過酸化水素、ＯＨラジカル及び励起分子種である一重項酸素等がある。生物はもともとこれらの活性酸素による酸化傷害を防ぐ能力を備えており、ビタミンＥや抗酸化酵素がこれを担っている。しかしながら、加齢等の要因により酸化傷害を防ぐ能力が低下したり、また過激な運動やストレス負荷等の要因により防御能力以上の活性酸素が発生した場合には、消去しきれない活性酸素が標的分子を酸化し、その結果、生体成分は傷害を受け、老化が引き起こされることになる。
【０００３】
したがって、活性酸素やフリーラジカルを消去する抗酸化物質を効率的に接種し、酸化ストレスから防御することがさまざまな疾病の予防や治療の観点から非常に重要であると考えられている。特に、食物から酸化傷害に対する防御機能成分を積極的に摂取することで、より効率的にこの傷害を制御・消去できると考えられることから、抗酸化作用を有するさまざまな食品成分に注目が集まっている。
【０００４】
フラボノイドは、日常摂取する食品の中に多種多様な形態で含まれており、強い抗酸化活性を持つことが知られている。しかしながら、その抗酸化活性は、生体外においては有効である物の、経口吸収性が低いために生体内における活性酸素やフリーラジカルを消去するには十分でない。そこで、フラボノイドに糖を結合させることにより吸収性を高める方法が提案されている（特許文献１参照）。また、蕎麦などに含まれるルチンに糖転移して得られたα−グルコシルルチン、ルチンと比較してその吸収が向上することが報告されている（特許文献２，非特許文献１参照）
【０００５】
ルチンのアグリコンであるクエルセチンは、強力な抗酸化活性（非特許文献２参照）の他、血小板の凝集抑制および接着抑制作用、血管拡張作用、抗癌作用等、多彩な生理機能を持つことが知られている。このクエルセチンについても、タマネギに多く含まれるクエルセチン配糖体の方が吸収性に優れていることが報告されている（非特許文献３参照）また、同様にクエルセチンの３位にグルコースがβ結合したイソクエルシトリンは、クエルセチンやルチンよりも吸収性が高いことが報告されている（非特許文献４参照）
【０００６】
サジーは、グミ科ヒッポファエ属の落葉低木の総称で、生命力が強く、乾燥した砂地や寒冷地、高山などの過酷な環境に生息している。また、シーバックソーンの種子オイルはやけど切り傷などに用いられ、ジュースに含まれている不飽和脂肪酸やフラボノイドなどは、高脂血症、虚血性心疾患などの治療薬として用いられている。また、各種ビタミン、アミノ酸を多く含んでいるため、栄養食として、ロシア、中国では、宇宙食に用いられている。また、サジー果実ジュースの抗酸化力は、７３６２μｍｏｌＴＥ／１００ｍｇ（ＯＰＡＣ法にて測定）であり、これはブルーベリー６５２０μｍｏｌＴＥ／１００ｍｇに次ぎ果物のなかで最高であった。
【特許文献１】特開２０００−７８９５６号公報
【特許文献２】特開２００４−５９５２２号公報
【特許文献３】特開平１−２１３２９３号公報
【非特許文献１】Ｓｈｉｍｏｉ Ｋ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｇｒｉｃ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．，５１，２７８５−２７８９，２００３
【非特許文献２】Ｗｉｄｄｌｔｏｎ ＥＪ．Ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ．，５２，６７３−７５１，２０００
【非特許文献３】Ｈｏｌｌｍａｎ ＰＣ ｅｔ ａｌ．，Ａｒｃｈ Ｔｏｘｉｃｏｌ Ｓｕｐｐｌ．，２０，２３７−２４８，１９９８
【非特許文献４】Ｍｏｒａｎｄ Ｃ ｅｔ．，Ｆｒｅｅ Ｒａｄ Ｒｅｓ．，３３，６６７−６７６，２０００
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
上記の通り、配糖体化により経口吸収性が向上することは多くのフラボノイドで確かめられているものの、いまだその効果は十分とはいえない。
【０００８】
そこで本発明は、フラボノイドの一種であるシーバックソーンのサジーの果実より抽出フラボノイドや種子抽出フラボノイドから成る癌増殖抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討したところ、下記のように
【００１０】
クエルセチン、ケンフェロール、ミルセチン、イソラムネチンおよびルチンを含む癌増殖抑制剤であって、生理学的な活性量でフラボノイドを含む果実抽出物または種子抽出物を更に含む、シーバックソーンのサジー果実より抽出の種子より抽出のクエルセチル、ケンフェロール、ミルセチンの単体または混合物に癌増殖抑制を見いだし得ることで完成したものである。
【実施例と発明の効果】
【００１１】
本発明のシーバックソーンのサジーの果実抽出物や種子抽出物のクエルセチン、ケンフェロール、ミルセチンの単体または混合物を人白血病細胞（Ｕ９３７：３×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調整したもの）を用い、数種の抗癌剤との培養時間に伴う抗癌効果の比較を行った。培養時間は７２時間まで行った。その結果、抗癌剤に匹敵する或いはそれ以上の抗癌効果があることが実証された。添加した濃度により効果に要する培養時間は異なるか、サジー果実抽出フラボノイドについては、全ての濃度において生存細胞が完全に死滅することが確認された。培養中、決して増殖は見られなかった。サジー種子抽出フラボノイドについては、濃度１６．７、１３．３、１０．０μｌ／ｍｌ（Ｕ９３７培養液）をＵ９３７培養液に添加した場合は、濃度による効果の変化は全くなく、サジー果実抽質フラボノイド以上の癌増殖抑制効果が見られた。しかし、６．７μｌ／ｍｌ（Ｕ９３７培養液）を添加した場合は、２４時間まで生存細胞は減少するが、さらに培養すると再び増殖する傾向が見られた。
【００１２】
サジー果実抽出や種子抽出フラボノイドの抽出液中（０．０５ｇを２ｍｌエタノール中に抽出した溶液）に含まれる５種類の抗酸化物質、ルチン、ミルセチン、クエルセチン、ケンフェロール、イソラムネチンの定性を行った。
【００１３】
サジー果実フラボノイド中の含有量は、ケンフェロール：２．０１４ｍｇ、クエルセチン：１．１８４ｍｇ、イソラムネチン：０．３９４ｍｇ、ミセルチン：０．１３４ｍｇ、ルチン：０．０３０ｍｇであった。
【００１４】
サジー種子フラボノイド中の含有量は、ケンフェロール：０．０８９ｍｇ、クエルセチン：０．０８０ｍｇ、イソラムネチン：０．０３３ｍｇ、ミルセチン：０．０５５ｍｇ、ルチン：０．１６１ｍｇであった。
【００１５】
次に、サジー果実抽出および種子抽出フラボノイドと同じ方法で５種類の抗酸化物質をＵ９３７細胞溶液に添加し癌増殖抑制効果の検討を行った。特に効果が大きく現れたのは、クエルセチンとケンフェロールで、２４時間培養で細胞生存率は、１１．７％、１３．０％に減少し、４８時間培養で細胞生存率は、５．２％、５．３％になり、７２時間培養で細胞生存率は０．０％となった。ミセルチンにおいては、細胞培養時間７２時間で６３．４％と若干の減少が見られた。ルチン、イソラムネチンは、全く減少が見られなかった。また、細胞生存率の減少が見られたクエルセチン、ケンフェロール、ミセルチンの混合液を添加したＵ９３７細胞溶液においては、３時間培養で０．０％となり、培養時間７２時間まで０．０％あった。以上の実験結果から、特に含有量が多く、なおかつＵ９３７細胞において、癌増殖抑制効果が認められた、抗酸化物質を含んでいるシーバックソーンのサジー果実および種子フラボノイドの癌増殖抑制効果が実証された。また、抗酸化剤と言われている、クエルセチン、ケンフェロールにおいてもＵ９３７細胞における癌増殖抑制効果が認められ、これらの混合液のＵ９３７細胞における癌増殖抑制効果は非常に大きい。
【測定条件と試料調製】
【００１６】
試料作成条件：前処理および測定試料調製（エタノール抽出）：果実フラボノイド粉末５０．０９ｍｇ、種子フラボノイド粉末５０．０５ｍｇに各々エタノール２ｍｌを加え、時々激しく振りながら１５分間超音波抽出を行った後、３５００ｒｐｍで１５分間遠心分離を行い、上澄みを濾過しエタノール／超純水（７０／３０）で１０倍希釈しＨＰＬＣ注入用試料とした。
【００１７】
装置：▲１▼ＨＰＬＣ ＰＵＭＰ：ＰＵ−２０８０ Ｐｌｕｓ
▲２▼ＩＮ−ＬＩＮＥ ＤＥＧＡＳＳＥＲ：ＤＧ−２０８０−５３
▲３▼ＬＯＷ ＰＲＥＳＳＵＲＥ ＧＲＡＤＩＥＮＴ ＵＮＩＴ：ＬＧ−２０８０−０４
▲４▼ＡＵＴＯＳＡＭＰＬＥＲ：ＡＳ−２０５７ Ｐｌｕｓ（４℃）
▲５▼ＣＯＬＵＭＮ ＯＶＥＮ：ＣＯ−２０６０ Ｐｌｕｓ
▲６▼ＰＨＯＴＯ ＤＩＯＤＥ ＡＲＲＡＹ ＤＥＴＥＣＴＯＲ：ＭＤ−２０１０ Ｐｌｕｓ
▲７▼ＣＨＲＯＭＡＴＯＧＲＡＰＨＹ ＤＡＴＡ ＳＹＳＴＥＭ：ＣｈｒｏｍＮＡＶ
【００１８】
測定条件：▲１▼カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ ＯＤＳ−ＨＧ−５（４．６ｍｍＩ．Ｄ．×２５０ｍｍ）
▲２▼移動相Ａ：０．１％リン酸＋超純水
▲３▼移動相Ｂ：０．１％リン酸＋メタノール／ＴＨＦ（８０／２０）
▲４▼移動相：１．０ｍｌ／ｍｉｎ
▲５▼カラム温度：４０℃
▲６▼ＰＤＡ検出条件：取り込み波長２００〜６５０ｎｍ
仮想チャンネル（ＣＨ９）：２７５ｎｍ
仮想チャンネル（ＣＨ１０）：３５５ｎｍ
仮想チャンネル（ＣＨ１１）：３７５ｎｍ
波長間隔：４ｎｍ
波長積算：４ｎｍ
時間間隔：０．８ｓｅｃ
時間積算：０．８ｓｅｃ
▲７▼注入量：１０μＬ
▲８▼グラジェント条件：Ｔｉｍｅ（ｍｉｎ） Ａ（％）
０．０ １００
１５．０ ７０
６０．０ ４５
６０．１ ０
７０．０ ０
７０．１ １００
注入間隔：８５．０分
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は、Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｕ９３７ ｗｉｔｈ Ｓｅａｂｕｃｋｔｈｏｒｎ（Ｓａｊｉ）ｆｒｕｉｔ ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓを示す。
【００２０】
【図２】図２は、Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｕ９３７ ｗｉｔｈ Ｓｅａｂｕｃｋｔｈｏｒｎ（Ｓａｊｉ）ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓを示す。
【００２１】
【図３】図３は、Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｕ９３７ ｗｉｔｈ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｄｒｕｇ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｄｒｕｇ ４５０μｌ／６ｍｌ（７５μｌ／ｍｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ）を示す。
【００２２】
【図４】図４は、Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｕ９３７ ｗｉｔｈ Ｓｅａｂｕｃｋｔｈｏｒｎ ｃｏｎｔｒｏｌを示す。
【００２３】
【図５】図５は、シーバックソーンのサジー果実の分析測定結果（エタノール抽出１回目：３７５ｎｍ）を示す。
【００２４】
【図６】図６は、シーバックソーンのサジー種子の分析結果（エタノール抽出１回目：３７５ｎｍ）を示す。
【００２５】
【図７】図７は、Ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ Ｕ９３７ ｗｉｔｈ Ｍｙｒｉｃｅｔｉｎ，Ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ ｄｅｈｙｄｒａｔｅ，Ｋａｅｍｆｅｒｏｌ，Ｍｉｘ ７５μｌ（０．３ｍｇ）／９ｍｌ，８．３μｌ（３０μｇ）／ｍｌを示す。
【００２６】
【図８】図８は、Ｓａｊｉ ｆｒｕｉｔ ａｎｄ ｓｅｅｄ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ：５０ｍｇ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｉｎ ２ｍｌ ｅｔｈｏｎｏｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｗｅ ｕｓｅｄ ｔｏｐ ｃｌｅａｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎを示す。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クエルセチン、ケンフェロール、ミルセチン、イソラムネチンおよびルチンを含む癌増殖抑制剤であって、生理学的な活性量でフラボノイドを含む果実抽質物または種子抽質物を更に含むことを特徴とする。
【請求項２】
前記果実抽質物がシーバックソーンからの抽出物、好ましくはサジー果実抽出物を含むことを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項３】
前記種子抽出物がシーバックソーンからの抽出物、好ましくはサジー種子抽出物を含むことを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項４】
前記癌増殖抑制剤が、サジー果実より抽出クエルセチンであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項５】
前記癌増殖抑制剤が、サジー果実より抽出ケンフェロールであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項６】
前記癌増殖抑制剤が、サジー果実より抽出ミルセチンであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項７】
前記癌増殖抑制剤が、サジー種子より抽出クエルセチンであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項８】
前記癌増殖抑制剤が、サジー種子より抽出ケンフェロールであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項９】
前記癌増殖抑制剤が、サジー種子より抽出ミセルチンであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項１０】
前記癌増殖抑制剤が、サジー果実より抽出のクエルセチン、ケンフェロールおよびミセルチンからなる混合物であることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項１１】
前記癌増殖抑制剤が、サジー種子より抽出のクエルセチン、ケンフェロールおよびミセルチンからなる混合物であることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項１】
クエルセチン、ケンフェロール、ミルセチン、イソラムネチンおよびルチンを含む癌増殖抑制剤であって、生理学的な活性量でフラボノイドを含む果実抽質物または種子抽質物を更に含むことを特徴とする。
【請求項２】
前記果実抽質物がシーバックソーンからの抽出物、好ましくはサジー果実抽出物を含むことを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項３】
前記種子抽出物がシーバックソーンからの抽出物、好ましくはサジー種子抽出物を含むことを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項４】
前記癌増殖抑制剤が、サジー果実より抽出クエルセチンであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項５】
前記癌増殖抑制剤が、サジー果実より抽出ケンフェロールであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項６】
前記癌増殖抑制剤が、サジー果実より抽出ミルセチンであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項７】
前記癌増殖抑制剤が、サジー種子より抽出クエルセチンであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項８】
前記癌増殖抑制剤が、サジー種子より抽出ケンフェロールであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項９】
前記癌増殖抑制剤が、サジー種子より抽出ミセルチンであることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項１０】
前記癌増殖抑制剤が、サジー果実より抽出のクエルセチン、ケンフェロールおよびミセルチンからなる混合物であることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【請求項１１】
前記癌増殖抑制剤が、サジー種子より抽出のクエルセチン、ケンフェロールおよびミセルチンからなる混合物であることを特徴とする、請求項１記載の癌増殖抑制剤。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【公開番号】特開２０１２−２５７２４（Ｐ２０１２−２５７２４Ａ）
【公開日】平成２４年２月９日（２０１２．２．９）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−１７９７８４（Ｐ２０１０−１７９７８４）
【出願日】平成２２年７月２６日（２０１０．７．２６）
【出願人】（５０８０５９４８７）アクテイブ株式会社 (5)
【出願人】（５１０２１９１９８）
【出願人】（５１０２１８１９１）
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年２月９日（２０１２．２．９）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年７月２６日（２０１０．７．２６）
【出願人】（５０８０５９４８７）アクテイブ株式会社 (5)
【出願人】（５１０２１９１９８）
【出願人】（５１０２１８１９１）
【Ｆターム（参考）】
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