発育中のイヌにおける骨造形及び軟骨細胞機能を向上する方法
【課題】発育中のイヌにおいて骨造形及び軟骨細胞機能を向上するプロセスを提供すること。
【解決手段】該プロセスは、適切な量と比率の食物性ｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を含有するペットフード組成物を、発育中のイヌに投与することを含む。組成物は、タンパク質源、脂肪源、繊維源及び炭水化物源を更に含むことができる。好ましい濃度のｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を使用すると、炎症の下方調節要素群の合成及び組織内蓄積を促進することができ、それらの要素群が骨形成を刺激し、骨造形を最適化する。
【解決手段】該プロセスは、適切な量と比率の食物性ｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を含有するペットフード組成物を、発育中のイヌに投与することを含む。組成物は、タンパク質源、脂肪源、繊維源及び炭水化物源を更に含むことができる。好ましい濃度のｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を使用すると、炎症の下方調節要素群の合成及び組織内蓄積を促進することができ、それらの要素群が骨形成を刺激し、骨造形を最適化する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、発育中のイヌに適切な量及び比率のｎ−６／ｎ−３脂肪酸類を含むペットフード組成物を投与して、それらの動物における骨造形（ｂｏｎｅ ｍｏｄｅｌｉｎｇ）及び軟骨細胞機能を強化する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
カナダ特許第２，１４５，７１６号により、食物性のｎ−６及びｎ−３脂肪酸類（オメガ−６及びオメガ−３脂肪酸類とも呼ばれる）及びそれらがイヌに存在する比率が、その動物の皮膚及び獣毛の健康に影響を及ぼすということが分っている。研究の結果は、ｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を最適な比率で食餌に配合すると、ある種の炎症性皮膚症状を患っているイヌに有益な効果を与えるということを示している。
【０００３】
長骨の成長及び骨造形は、子犬の遺伝的性質、環境の影響及び栄養の間の複合した相互作用によって調節される。これらの相互作用は、機能的に適切な形態とカルシウム及びリンの生体恒常性における骨格の役割とのバランスのとれた骨の構造を生み出す。犬の長骨は、造形と呼ばれるプロセスによって長さ及び直径が増大する。骨造形は、骨芽細胞及び破骨細胞の活動によって支配される骨の普遍化した連続的な成長及び形状修正の適応プロセスを表し、成体骨構造に達するまで続く。骨造形は、成犬の骨格質量を維持する骨の吸収及び形成プロセスである骨の再造形（ｂｏｎｅ ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ）とは明確に異なる。
【０００４】
骨格組織の中には、骨格代謝に影響を与えるプロスタグランジン類、サイトカイン類及び成長因子等の多くの細胞由来の調節因子が存在する。プロスタグランジン類は骨代謝において主役を演じていると信じられているが、関節症に関係しているとも思われてきた。イヌにおける骨格の異常及び症状のあるものは、異常な骨の再造形及び代謝の、或いは関節炎の場合には炎症プロセスの、結果である。
【０００５】
長骨の成長軟骨は軟骨細胞を含有し、これは、カルシウムイオンの結合に高い親和性を示す酸性のリン脂質類を含有する脂質を取り込んだ、ミクロ環境と呼ばれているマトリックス小胞を通じて骨の無機質化を開始する。多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）は、骨の無機質化及び成長に重要な役割を演じていると信じられている。何故なら、リン脂質類並びにプロスタグランジン類は必須ＰＵＦＡから合成されるからである。
【０００６】
最近の研究は、食餌中のｎ−６／ｎ−３脂肪酸類の比率が発育中の雛の骨及び成長軟骨並びにラットの骨における脂肪酸構成に影響を与えるということを示している。これらの研究において、大豆油を含む食餌を与えられた雛は、メンハーデン油を与えられた雛と比較して、肝臓及び骨培養における半ビボ（ｅｘ ｖｉｖｏ）でのＰＧＥ2（プロスタグランジンＥ2）の産生について大きい値を示したが、低い骨形成速度を示した。骨において局部的に産生されるＰＧＥ2のレベルは、骨形成において重要な因子のようであり、中庸のレベルにおいては刺激性であり、高レベルにおいては阻害性である。プロスタグランジン類が骨代謝を調節するメカニズムは不明確であるが、ＩＧＦシステム及び（又は）サイトカイン類を通じて媒介される可能性が示唆されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
従って、発育中のイヌにおいて骨／軟骨の生化学及び健康を促進する食餌の要求は当業界に存続しており、その食餌は、適切な量の食物性ｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を含むものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、発育中のイヌに適切な量及び比率の食物性のｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を含むペットフード組成物を投与して、骨造形及び軟骨細胞機能を向上する方法を提供することにより、その要求に応えるものである。本発明の一つの態様に従えば、骨造形及び軟骨細胞機能を向上するのに有効な量及び比率のｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を含むペットフード組成物を発育中のイヌに給餌するステップを含む、発育中のイヌにおける骨造形及び軟骨細胞機能を向上するプロセスが提供される。ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率は、好ましくは約２０：１から約１：１であり、より好ましくは約１０：１から約５：１であり、最も好ましくは約８：１から約５：１である。ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％がｎ−６脂肪酸類であることが好ましい。又、ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％がｎ−３脂肪酸類であることが好ましい。
【０００９】
好ましくは、ペットフード組成物は、乾物基準で、約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む。このように、ペットフード組成物中のｎ−３脂肪酸類の量が、ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率と同様に重要である。好ましい実施態様において、ペットフード組成物中に配合されるｎ−３脂肪酸類は、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む。
【００１０】
好ましくは、ペットフード組成物は、約２０から約４０重量％の粗タンパク質、約４から約３０重量％の脂肪、約２から約２０重量％の総食物繊維及び炭水化物源を含む。これらの栄養素の間には、特異的な比率又はパーセンテージは要求されない。
ペットフード組成物は、糞便バクテリアにより２４時間の期間発酵した場合、１５から６０重量パーセントの有機物消失を示す発酵性の繊維類である補充総食物繊維を、約１から約１１重量パーセントの量で更に含んでよい。
【００１１】
さらに、上記と重複する点もあるが、本明細書により以下の発明が提供される。
発明１ 発育中のイヌの骨造形及び軟骨細胞機能を向上する方法であって、ｎ−６及びｎ−３脂肪酸源を含むペットフード組成物を、骨造形及び軟骨細胞機能を向上するのに有効な量で前記イヌに給餌するステップを含む方法。
発明２ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約２０：１から約１：１である、上記発明１記載の方法。
発明３ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約１０：１から約５：１である、上記発明１記載の方法。
発明４ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約８：１から約５：１である、上記発明１記載の方法。
発明５ ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％がｎ−６脂肪酸類である、上記発明１記載の方法。
発明６ ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％がｎ−３脂肪酸類である、上記発明１記載の方法。
発明７ ペットフード組成物が、乾物基準で約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む、上記発明１記載の方法。
発明８ ペットフード組成物中のｎ−３脂肪酸類がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む、上記発明１記載の方法。
発明９ 発育中のイヌの骨造形及び軟骨細胞機能を向上する方法であって、約２０から約４０重量％の粗タンパク質、約４から約３０重量％の脂肪、約２から約２０重量％の総食物繊維、炭水化物源、並びにｎ−６及びｎ−３脂肪酸源を含むペットフード組成物を、骨造形及び軟骨細胞機能を向上するのに有効な量で、前記イヌに給餌するステップを含む方法。
発明１０ 糞便バクテリアにより２４時間の期間発酵した場合１５から６０重量パーセントの有機物消失を示す発酵性の繊維類である補充総食物繊維を、約１から約１１重量パーセントの量で更に含む、上記発明９記載の方法。
発明１１ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約２０：１から約１：１である、上記発明９記載の方法。
発明１２ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約１０：１から約５：１である、上記発明９記載の方法。
発明１３ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約８：１から約５：１である、上記発明９記載の方法。
発明１４ ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％がｎ−６脂肪酸類である、上記発明９記載の方法。
発明１５ ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％がｎ−３脂肪酸類である、上記発明９記載の方法。
発明１６ ペットフード組成物が、乾物基準で約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む、上記発明９記載の方法。
発明１７ ペットフード組成物中のｎ−３脂肪酸類がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む、上記発明９記載の方法。
【００１２】
従って、本発明の特徴は、発育中のイヌにおいて骨造形及び軟骨細胞機能を向上するプロセスを提供することである。本発明のこの特徴並びに他の特徴及び利点は、以下の詳細な説明及び付属の特許請求の範囲から明白になるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
（好ましい態様の詳細な説明）
本発明においては、適切な量のｎ−６脂肪酸類及びｎ−３脂肪酸類を適切な比率で与えて軟骨細胞機能及び骨の成長を刺激することにより、発育中のイヌにおける骨の成長促進を助長するペットフード組成物が用いられる。ペットフード組成物は、好ましい濃度のｎ−３及びｎ−６脂肪酸類を含有してさえいれば、如何なる好適な形態で提供されてもよい。
【００１４】
成体のイヌにおいては、異常な骨の再造形及び代謝が骨格上の病理の原因となり得る。本発明のペットフード組成物を発育中のイヌの幼年期に与えることは、これらのうちのある種の病理の発症及び発病率を遅延させ、或いは低減させる可能性がある。従って、発育中のイヌは、本発明のペットフード組成物を給餌されることによって特定の恩恵を得るであろう。
【００１５】
ペットフード組成物中のｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率を調整することによって、ある種の前炎症性エイコサノイドプロスタグランジン類（ＰＧＥ2）のレベルが抑制されることが発見されている。本発明の好ましい実施態様に従えば、ペットフード組成物はｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約２０：１から約１：１である脂肪酸類を含む。より好ましくは、この重量比は約１０：１から約５：１であり、最も好ましくは、この重量比は約８：１から約５：１である。好ましくは、ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％はｎ−６脂肪酸類である。又、ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％は、ｎ−３脂肪酸類であることが好ましい。ペットフード組成物は、又、好ましくは、乾物基準で約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む。
【００１６】
ｎ−３脂肪酸類、即ち、エイコサペンタエン酸及びドコサヘキサエン酸（それぞれ、ＥＰＡ及びＤＨＡ）のような、炎症に対する下方調節要素の合成及び組織内蓄積は、又、本発明のペットフード組成物中のｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率を調整することによって促進され、その比率が骨形成を刺激し骨造形を最適化する。更に、ペットフード組成物に特定のｎ−３脂肪酸源を配合することによって、抗炎症性のＰＧＥ3系列のプロスタグランジン類を組織内に蓄積することが同様に促進される。好ましくは、本発明のペットフード組成物のｎ−３脂肪酸類は、ＥＰＡ及びＤＨＡを含む。
【００１７】
ペットフード組成物は、動物に対して適切な栄養素も提供する如何なる好適なペットフードの処方も可能である。例えば、本発明で使用される典型的なイヌの食餌は、約２０から４０重量％の粗タンパク質、約４から約３０重量％の脂肪、及び約２から約２０重量％の総食物繊維を炭水化物源と共に含有してよい。ペットフード組成物に使用される好適なタンパク質源としては、鶏肉及び鶏肉副産物、鶏肉消化物、醸造乾燥酵母、及びＤＬ−メチオニンが挙げられる。好適な脂肪源としては、鶏脂（混合トコフェロール類と共に保存される）、魚油、及び亜麻仁油が挙げられる。
【００１８】
本発明のペットフード組成物は、又、所望により一定の有機物消失パーセンテージを示す発酵性の繊維源を含有してよい。使用可能な発酵性の繊維類は、糞便バクテリアによりイン・ビトロで２４時間の期間発酵した場合、約１５から６０パーセントの有機物消失（ＯＭＤ）を示すものである。即ち、最初に存在した総有機物の約１５から６０パーセントが、糞便バクテリアにより発酵し転換する。繊維類の有機物消失は、好ましくは２０から５０パーセント、最も好ましくは３０から４０パーセントである。
【００１９】
従って、イン・ビトロでのＯＭＤパーセンテージは以下のように計算することができる：
｛１−［（ＯＭ残分−ＯＭブランク）／ＯＭ初期］｝×１００
ここで、ＯＭ残分は２４時間の発酵後回収された有機物であり、ＯＭブランクは対応するブランク試験管（即ち、培養液及び希釈糞便を含み基材を含まない試験管）で回収された有機物であり、そしてＯＭ初期は発酵前に試験管に入れた有機物である。更に詳細な手順については、Ｓｕｎｖｏｌｄら、Ｊ．Ａｎｉｍ．Ｓｃｉ．１９９５、Ｖｏｌ．７３、１０９９−１１０９に記載されている。
【００２０】
発酵性の繊維類は、動物に存在する腸内バクテリアによって発酵して有意な量の短鎖脂肪酸類（ＳＣＦＡ類）を産生し得る繊維源であれば、如何なるものでもよい。本発明の目的のためのＳＣＦＡ類の「有意な量」とは、２４時間の期間において基材１グラム当たり０．５ミリモルを超える総ＳＣＦＡ類の量をいう。好ましい繊維類としては、ビートパルプ、アラビアゴム（タラゴムを含む）、オオバコ、米ぬか、キャロブガム、シトラスパルプ、ペクチン、フラクトオリゴ糖及びイヌリン、マンナンオリゴ糖及びこれらの繊維の混合物が挙げられる。
【００２１】
発酵性の繊維類は、補充総食物繊維の１から１１重量パーセント、好ましくは２から９重量パーセント、より好ましくは３から７重量パーセント、そして最も好ましくは４から７重量パーセントの量でペットフード組成物に使用される。
【００２２】
「補充総食物繊維」の定義の説明の前に、先ず、「総食物繊維」の説明が必要である。「総食物繊維」は、動物の消化酵素類によって加水分解しにくい植物性食物の残分として定義される。総食物繊維の主成分は、セルロース、ヘミセルロース、ペクチン、リグニン及びゴムである（これに対し「粗繊維」はある形態のセルロース及びリグニンのみを含む）。「補充総食物繊維」は、食物製品の他の成分に天然に存在する如何なる食物繊維をも上回って、食物製品に添加される食物繊維である。又、「繊維源」は、それが主に繊維から構成される場合に繊維源であると考えられる。
【実施例】
【００２３】
本発明をより簡単に理解する目的で、以下に実施例を記載するが、これらは本発明を例示することを意図するものであり、範囲を限定することを意図するものではない。
【００２４】
例１
イヌを用いた研究を行い、クーンハウンド種の骨区分における脂肪酸構成に対する食物性ｎ−３及びｎ−６脂肪酸の効果を評価した。特定の目的で飼育された８週令の子犬、合計３２頭を、脂肪酸源のみが異なる４つの食餌処理に配置した。処理用食餌は、等窒素、等カロリーであり、ｎ−６／ｎ−３比率が５：１から５０：１に亘るように配合した。イヌの成長食餌は、ｎ−６／ｎ−３脂肪酸類の比率が５：１、５：１、５０：１、及び２５：１と異なるように、以下の脂質源を用いて配合した：ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、メンハーデン油（ＭＥＮ）、ベニバナ油（ＳＡＦ）及び家きん脂肪（対照）。処理３及び処理４ではｎ−３脂肪酸源の効果を評価した（処理３＝ＤＨＡ；処理４＝ＤＨＡ）。子犬群に対し、２週間コンディショニングした後１６週間処理の、合計１８週間に亘って処理用食餌を給餌した。研究結果を以下に報告する。
【００２５】
【表１】
【００２６】
応答の判定基準は以下の通りであった。
【００２７】
【表２】
【００２８】
ＭＥＮ及びＤＨＡ配合食餌は、２２：６ｎ−３（ＤＨＡ）においては対照食餌と比較して、けい骨皮質、小柱骨、骨髄及び骨膜の中性及び極性脂質類の有意な上昇をもたらした。ＭＥＮ配合食餌は、全ての組織の両脂質画分において、２０：５ｎ−３（ＥＰＡ）の有意な濃度上昇をもたらした。１８：２ｎ−６（リノレン酸）の濃度は、ＳＡＦ配合食餌を給餌された群の骨髄極性脂質類を除いて、全ての組織の両脂質画分において有意に高かった。ＭＥＮ及びＤＨＡ配合食餌は、小柱骨及び骨髄の極性脂質画分において、１８：２ｎ−６を抑制した。ＭＥＮ及びＤＨＡ強化食餌においては、骨膜の中性脂質画分においてアラキドン酸（ＡＡ；２０：４ｎ−６）濃度は有意に抑制され、２２：６ｎ−３は上昇した。ＭＥＮ及びＤＨＡ配合食餌の両者とも、対照及びＳＡＦ配合食餌を給餌された犬の値と比較して、じん帯における１８：２ｎ−６を低減し、ｎ−３脂肪酸を増加させた。
【００２９】
これらのデータから、ＥＰＡ及びＤＨＡの両者は骨区分に濃縮され、ＤＨＡは骨皮質極性脂質類にＥＰＡより多く蓄積されるということが分った。腸骨稜組織における半ビボでのＰＧＥ2産生に基づき、ＭＥＮ配合食餌はプロスタノイド類の形成を低減させる傾向があった。更に、炎症の下方調節要素(ＰＧＥ3)はＥＰＡの存在によって刺激される。これらの結果は、ｎ−３脂肪酸類に富む食餌が、イヌの骨区分において前炎症性エイコサノイド(ＰＧＥ2)の合成を低減し、炎症の下方調節要素（ＥＰＡ及びＤＨＡ）の組織内蓄積を促進することを示唆する。これらの結果は、又、食餌中のｎ−６／ｎ−３脂肪酸比率が２５：１以上であると前炎症性ＰＧＥ2の産生が高められ、それにより骨形成が抑制され、一方、比率が５：１の場合はＰＧＥ2のレベルが低下し、それにより骨形成が刺激され、発育中のイヌの骨造形を最適化するということを示唆する。食餌中の特定のｎ−３脂肪酸（２０：５ｎ−３又は２２：６ｎ−３）は、又、発育中のイヌの軟骨及び骨代謝への影響を特異的に調整するものと思われる。
【００３０】
例２
ラットを用いた研究を実施した。収集すべきデータの性質及び発育中のイヌからそのようなデータを収集することの非現実性から、本研究が必要とされた。収集データは、（１）器官及び組織の採取、（２）骨造形の目安として骨形成速度（ＢＦＲ）の定量及び成長軟骨の形態測定、及び（３）無傷骨の機械的性質の評価、を包含した。
【００３１】
合計４０匹のＨａｒｌａｎ Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット、離乳子、雄（２１日令）を、４つの食餌処理に配置し４０日間試験した。対照の食餌（処理１）は、ＡＩＮ９３Ｇ［Ｒｅｅｖｅｓら、「ＡＩＮ−９３実験室げっ歯類用精製食餌（ＡＩＮ−９３ Ｐｕｒｉｆｉｅｄ Ｄｉｅｔｓ ｆｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｒｏｄｅｎｔｓ）」、１２３、Ｊ．Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ、１９３９−５１（１９９３）に報告されている食餌］であり、大豆油を含み、ｎ−６／ｎ−３脂肪酸比率８：１のものであった。他の３つの処理用食餌には補充脂肪酸類を配合し、イヌの実験におけるｎ−６／ｎ−３脂肪酸比率に可能な限り近いものとした。対照の食餌は７０ｇ／ｋｇの添加脂肪を含有した。他の３つの処理用食餌には以下の（ｎ−６）／（ｎ−３）脂肪酸類比率を供給するように脂質類を配合した。８：１［大豆油（ＳＢＯ）］、５０：１［ベニバナ油（ＳＡＦ）］、５：１［ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）］、及び５：１［メンハーデン油（ＭＥＮ）］。処理用食餌を要約して以下の表に示す。
【００３２】
【表３】
【００３３】
評価した応答の判定基準は以下の通りであった。
【００３４】
【表４】
【００３５】
ＭＥＮ及びＤＨＡ配合食餌は、ＳＡＦ配合食餌を給餌された群の値に比べて、けい骨皮質及び骨髄における２０：５ｎ−３（ＥＰＡ）及び２２：６ｎ−３（ＤＨＡ）の濃度を有意に高めた。骨区分における２０：４ｎ−６（ＡＡ）の濃度は、食餌処理によって変わらなかった。骨中のＤＨＡ濃度は、ＳＡＦ配合食餌を給餌されたラットにおいて最低であった。
【００３６】
これらのデータは、ＥＰＡ及びＤＨＡの両者が骨区分に濃縮され、ＤＨＡが皮質骨極性脂質類中にＥＰＡより多く蓄積されることを示した。ＤＨＡ配合食餌を給餌されたラットにおいて、けい骨における半ビボでのＰＧＥ2産生は、ＳＡＦ配合食餌を給餌された群に比べて低減した。ＭＥＮ配合食餌を給餌されたラットの血清の骨特異的アルカリ性フォスファターゼは、他の食餌を給餌されたラットの値に比較して高められた。ＤＨＡグループにおける総小柱数及び骨髄面積は、ＳＢＯグループのそれらに比べて高かったが、骨膜ＢＦＲはＳＢＯ及びＳＡＦ配合食餌を給餌された群において高かった。骨内膜の骨形成速度に関しては、食餌処理間で差異は認められなかった。
【００３７】
この結果は、ｎ−３脂肪酸類に富んだ食餌が、前炎症性エイコサノイド（ＰＧＥ2）の合成を低減させ、骨区分での炎症の下方調節要素（ＥＰＡ及びＤＨＡ）の組織内蓄積を促進することを示唆する。
【００３８】
本発明を例示する目的で特定の代表的な実施態様が示されているが、付属の特許請求の範囲に定義される本発明の請求範囲から逸脱することなしに、本明細書に開示された方法及び装置に関して多くの変更がなされてよいということは、当業者には明白であると思われる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、発育中のイヌに適切な量及び比率のｎ−６／ｎ−３脂肪酸類を含むペットフード組成物を投与して、それらの動物における骨造形（ｂｏｎｅ ｍｏｄｅｌｉｎｇ）及び軟骨細胞機能を強化する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
カナダ特許第２，１４５，７１６号により、食物性のｎ−６及びｎ−３脂肪酸類（オメガ−６及びオメガ−３脂肪酸類とも呼ばれる）及びそれらがイヌに存在する比率が、その動物の皮膚及び獣毛の健康に影響を及ぼすということが分っている。研究の結果は、ｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を最適な比率で食餌に配合すると、ある種の炎症性皮膚症状を患っているイヌに有益な効果を与えるということを示している。
【０００３】
長骨の成長及び骨造形は、子犬の遺伝的性質、環境の影響及び栄養の間の複合した相互作用によって調節される。これらの相互作用は、機能的に適切な形態とカルシウム及びリンの生体恒常性における骨格の役割とのバランスのとれた骨の構造を生み出す。犬の長骨は、造形と呼ばれるプロセスによって長さ及び直径が増大する。骨造形は、骨芽細胞及び破骨細胞の活動によって支配される骨の普遍化した連続的な成長及び形状修正の適応プロセスを表し、成体骨構造に達するまで続く。骨造形は、成犬の骨格質量を維持する骨の吸収及び形成プロセスである骨の再造形（ｂｏｎｅ ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ）とは明確に異なる。
【０００４】
骨格組織の中には、骨格代謝に影響を与えるプロスタグランジン類、サイトカイン類及び成長因子等の多くの細胞由来の調節因子が存在する。プロスタグランジン類は骨代謝において主役を演じていると信じられているが、関節症に関係しているとも思われてきた。イヌにおける骨格の異常及び症状のあるものは、異常な骨の再造形及び代謝の、或いは関節炎の場合には炎症プロセスの、結果である。
【０００５】
長骨の成長軟骨は軟骨細胞を含有し、これは、カルシウムイオンの結合に高い親和性を示す酸性のリン脂質類を含有する脂質を取り込んだ、ミクロ環境と呼ばれているマトリックス小胞を通じて骨の無機質化を開始する。多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）は、骨の無機質化及び成長に重要な役割を演じていると信じられている。何故なら、リン脂質類並びにプロスタグランジン類は必須ＰＵＦＡから合成されるからである。
【０００６】
最近の研究は、食餌中のｎ−６／ｎ−３脂肪酸類の比率が発育中の雛の骨及び成長軟骨並びにラットの骨における脂肪酸構成に影響を与えるということを示している。これらの研究において、大豆油を含む食餌を与えられた雛は、メンハーデン油を与えられた雛と比較して、肝臓及び骨培養における半ビボ（ｅｘ ｖｉｖｏ）でのＰＧＥ2（プロスタグランジンＥ2）の産生について大きい値を示したが、低い骨形成速度を示した。骨において局部的に産生されるＰＧＥ2のレベルは、骨形成において重要な因子のようであり、中庸のレベルにおいては刺激性であり、高レベルにおいては阻害性である。プロスタグランジン類が骨代謝を調節するメカニズムは不明確であるが、ＩＧＦシステム及び（又は）サイトカイン類を通じて媒介される可能性が示唆されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
従って、発育中のイヌにおいて骨／軟骨の生化学及び健康を促進する食餌の要求は当業界に存続しており、その食餌は、適切な量の食物性ｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を含むものである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、発育中のイヌに適切な量及び比率の食物性のｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を含むペットフード組成物を投与して、骨造形及び軟骨細胞機能を向上する方法を提供することにより、その要求に応えるものである。本発明の一つの態様に従えば、骨造形及び軟骨細胞機能を向上するのに有効な量及び比率のｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を含むペットフード組成物を発育中のイヌに給餌するステップを含む、発育中のイヌにおける骨造形及び軟骨細胞機能を向上するプロセスが提供される。ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率は、好ましくは約２０：１から約１：１であり、より好ましくは約１０：１から約５：１であり、最も好ましくは約８：１から約５：１である。ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％がｎ−６脂肪酸類であることが好ましい。又、ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％がｎ−３脂肪酸類であることが好ましい。
【０００９】
好ましくは、ペットフード組成物は、乾物基準で、約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む。このように、ペットフード組成物中のｎ−３脂肪酸類の量が、ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率と同様に重要である。好ましい実施態様において、ペットフード組成物中に配合されるｎ−３脂肪酸類は、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む。
【００１０】
好ましくは、ペットフード組成物は、約２０から約４０重量％の粗タンパク質、約４から約３０重量％の脂肪、約２から約２０重量％の総食物繊維及び炭水化物源を含む。これらの栄養素の間には、特異的な比率又はパーセンテージは要求されない。
ペットフード組成物は、糞便バクテリアにより２４時間の期間発酵した場合、１５から６０重量パーセントの有機物消失を示す発酵性の繊維類である補充総食物繊維を、約１から約１１重量パーセントの量で更に含んでよい。
【００１１】
さらに、上記と重複する点もあるが、本明細書により以下の発明が提供される。
発明１ 発育中のイヌの骨造形及び軟骨細胞機能を向上する方法であって、ｎ−６及びｎ−３脂肪酸源を含むペットフード組成物を、骨造形及び軟骨細胞機能を向上するのに有効な量で前記イヌに給餌するステップを含む方法。
発明２ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約２０：１から約１：１である、上記発明１記載の方法。
発明３ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約１０：１から約５：１である、上記発明１記載の方法。
発明４ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約８：１から約５：１である、上記発明１記載の方法。
発明５ ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％がｎ−６脂肪酸類である、上記発明１記載の方法。
発明６ ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％がｎ−３脂肪酸類である、上記発明１記載の方法。
発明７ ペットフード組成物が、乾物基準で約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む、上記発明１記載の方法。
発明８ ペットフード組成物中のｎ−３脂肪酸類がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む、上記発明１記載の方法。
発明９ 発育中のイヌの骨造形及び軟骨細胞機能を向上する方法であって、約２０から約４０重量％の粗タンパク質、約４から約３０重量％の脂肪、約２から約２０重量％の総食物繊維、炭水化物源、並びにｎ−６及びｎ−３脂肪酸源を含むペットフード組成物を、骨造形及び軟骨細胞機能を向上するのに有効な量で、前記イヌに給餌するステップを含む方法。
発明１０ 糞便バクテリアにより２４時間の期間発酵した場合１５から６０重量パーセントの有機物消失を示す発酵性の繊維類である補充総食物繊維を、約１から約１１重量パーセントの量で更に含む、上記発明９記載の方法。
発明１１ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約２０：１から約１：１である、上記発明９記載の方法。
発明１２ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約１０：１から約５：１である、上記発明９記載の方法。
発明１３ ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約８：１から約５：１である、上記発明９記載の方法。
発明１４ ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％がｎ−６脂肪酸類である、上記発明９記載の方法。
発明１５ ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％がｎ−３脂肪酸類である、上記発明９記載の方法。
発明１６ ペットフード組成物が、乾物基準で約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む、上記発明９記載の方法。
発明１７ ペットフード組成物中のｎ−３脂肪酸類がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む、上記発明９記載の方法。
【００１２】
従って、本発明の特徴は、発育中のイヌにおいて骨造形及び軟骨細胞機能を向上するプロセスを提供することである。本発明のこの特徴並びに他の特徴及び利点は、以下の詳細な説明及び付属の特許請求の範囲から明白になるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
（好ましい態様の詳細な説明）
本発明においては、適切な量のｎ−６脂肪酸類及びｎ−３脂肪酸類を適切な比率で与えて軟骨細胞機能及び骨の成長を刺激することにより、発育中のイヌにおける骨の成長促進を助長するペットフード組成物が用いられる。ペットフード組成物は、好ましい濃度のｎ−３及びｎ−６脂肪酸類を含有してさえいれば、如何なる好適な形態で提供されてもよい。
【００１４】
成体のイヌにおいては、異常な骨の再造形及び代謝が骨格上の病理の原因となり得る。本発明のペットフード組成物を発育中のイヌの幼年期に与えることは、これらのうちのある種の病理の発症及び発病率を遅延させ、或いは低減させる可能性がある。従って、発育中のイヌは、本発明のペットフード組成物を給餌されることによって特定の恩恵を得るであろう。
【００１５】
ペットフード組成物中のｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率を調整することによって、ある種の前炎症性エイコサノイドプロスタグランジン類（ＰＧＥ2）のレベルが抑制されることが発見されている。本発明の好ましい実施態様に従えば、ペットフード組成物はｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約２０：１から約１：１である脂肪酸類を含む。より好ましくは、この重量比は約１０：１から約５：１であり、最も好ましくは、この重量比は約８：１から約５：１である。好ましくは、ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％はｎ−６脂肪酸類である。又、ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％は、ｎ−３脂肪酸類であることが好ましい。ペットフード組成物は、又、好ましくは、乾物基準で約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む。
【００１６】
ｎ−３脂肪酸類、即ち、エイコサペンタエン酸及びドコサヘキサエン酸（それぞれ、ＥＰＡ及びＤＨＡ）のような、炎症に対する下方調節要素の合成及び組織内蓄積は、又、本発明のペットフード組成物中のｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率を調整することによって促進され、その比率が骨形成を刺激し骨造形を最適化する。更に、ペットフード組成物に特定のｎ−３脂肪酸源を配合することによって、抗炎症性のＰＧＥ3系列のプロスタグランジン類を組織内に蓄積することが同様に促進される。好ましくは、本発明のペットフード組成物のｎ−３脂肪酸類は、ＥＰＡ及びＤＨＡを含む。
【００１７】
ペットフード組成物は、動物に対して適切な栄養素も提供する如何なる好適なペットフードの処方も可能である。例えば、本発明で使用される典型的なイヌの食餌は、約２０から４０重量％の粗タンパク質、約４から約３０重量％の脂肪、及び約２から約２０重量％の総食物繊維を炭水化物源と共に含有してよい。ペットフード組成物に使用される好適なタンパク質源としては、鶏肉及び鶏肉副産物、鶏肉消化物、醸造乾燥酵母、及びＤＬ−メチオニンが挙げられる。好適な脂肪源としては、鶏脂（混合トコフェロール類と共に保存される）、魚油、及び亜麻仁油が挙げられる。
【００１８】
本発明のペットフード組成物は、又、所望により一定の有機物消失パーセンテージを示す発酵性の繊維源を含有してよい。使用可能な発酵性の繊維類は、糞便バクテリアによりイン・ビトロで２４時間の期間発酵した場合、約１５から６０パーセントの有機物消失（ＯＭＤ）を示すものである。即ち、最初に存在した総有機物の約１５から６０パーセントが、糞便バクテリアにより発酵し転換する。繊維類の有機物消失は、好ましくは２０から５０パーセント、最も好ましくは３０から４０パーセントである。
【００１９】
従って、イン・ビトロでのＯＭＤパーセンテージは以下のように計算することができる：
｛１−［（ＯＭ残分−ＯＭブランク）／ＯＭ初期］｝×１００
ここで、ＯＭ残分は２４時間の発酵後回収された有機物であり、ＯＭブランクは対応するブランク試験管（即ち、培養液及び希釈糞便を含み基材を含まない試験管）で回収された有機物であり、そしてＯＭ初期は発酵前に試験管に入れた有機物である。更に詳細な手順については、Ｓｕｎｖｏｌｄら、Ｊ．Ａｎｉｍ．Ｓｃｉ．１９９５、Ｖｏｌ．７３、１０９９−１１０９に記載されている。
【００２０】
発酵性の繊維類は、動物に存在する腸内バクテリアによって発酵して有意な量の短鎖脂肪酸類（ＳＣＦＡ類）を産生し得る繊維源であれば、如何なるものでもよい。本発明の目的のためのＳＣＦＡ類の「有意な量」とは、２４時間の期間において基材１グラム当たり０．５ミリモルを超える総ＳＣＦＡ類の量をいう。好ましい繊維類としては、ビートパルプ、アラビアゴム（タラゴムを含む）、オオバコ、米ぬか、キャロブガム、シトラスパルプ、ペクチン、フラクトオリゴ糖及びイヌリン、マンナンオリゴ糖及びこれらの繊維の混合物が挙げられる。
【００２１】
発酵性の繊維類は、補充総食物繊維の１から１１重量パーセント、好ましくは２から９重量パーセント、より好ましくは３から７重量パーセント、そして最も好ましくは４から７重量パーセントの量でペットフード組成物に使用される。
【００２２】
「補充総食物繊維」の定義の説明の前に、先ず、「総食物繊維」の説明が必要である。「総食物繊維」は、動物の消化酵素類によって加水分解しにくい植物性食物の残分として定義される。総食物繊維の主成分は、セルロース、ヘミセルロース、ペクチン、リグニン及びゴムである（これに対し「粗繊維」はある形態のセルロース及びリグニンのみを含む）。「補充総食物繊維」は、食物製品の他の成分に天然に存在する如何なる食物繊維をも上回って、食物製品に添加される食物繊維である。又、「繊維源」は、それが主に繊維から構成される場合に繊維源であると考えられる。
【実施例】
【００２３】
本発明をより簡単に理解する目的で、以下に実施例を記載するが、これらは本発明を例示することを意図するものであり、範囲を限定することを意図するものではない。
【００２４】
例１
イヌを用いた研究を行い、クーンハウンド種の骨区分における脂肪酸構成に対する食物性ｎ−３及びｎ−６脂肪酸の効果を評価した。特定の目的で飼育された８週令の子犬、合計３２頭を、脂肪酸源のみが異なる４つの食餌処理に配置した。処理用食餌は、等窒素、等カロリーであり、ｎ−６／ｎ−３比率が５：１から５０：１に亘るように配合した。イヌの成長食餌は、ｎ−６／ｎ−３脂肪酸類の比率が５：１、５：１、５０：１、及び２５：１と異なるように、以下の脂質源を用いて配合した：ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、メンハーデン油（ＭＥＮ）、ベニバナ油（ＳＡＦ）及び家きん脂肪（対照）。処理３及び処理４ではｎ−３脂肪酸源の効果を評価した（処理３＝ＤＨＡ；処理４＝ＤＨＡ）。子犬群に対し、２週間コンディショニングした後１６週間処理の、合計１８週間に亘って処理用食餌を給餌した。研究結果を以下に報告する。
【００２５】
【表１】
【００２６】
応答の判定基準は以下の通りであった。
【００２７】
【表２】
【００２８】
ＭＥＮ及びＤＨＡ配合食餌は、２２：６ｎ−３（ＤＨＡ）においては対照食餌と比較して、けい骨皮質、小柱骨、骨髄及び骨膜の中性及び極性脂質類の有意な上昇をもたらした。ＭＥＮ配合食餌は、全ての組織の両脂質画分において、２０：５ｎ−３（ＥＰＡ）の有意な濃度上昇をもたらした。１８：２ｎ−６（リノレン酸）の濃度は、ＳＡＦ配合食餌を給餌された群の骨髄極性脂質類を除いて、全ての組織の両脂質画分において有意に高かった。ＭＥＮ及びＤＨＡ配合食餌は、小柱骨及び骨髄の極性脂質画分において、１８：２ｎ−６を抑制した。ＭＥＮ及びＤＨＡ強化食餌においては、骨膜の中性脂質画分においてアラキドン酸（ＡＡ；２０：４ｎ−６）濃度は有意に抑制され、２２：６ｎ−３は上昇した。ＭＥＮ及びＤＨＡ配合食餌の両者とも、対照及びＳＡＦ配合食餌を給餌された犬の値と比較して、じん帯における１８：２ｎ−６を低減し、ｎ−３脂肪酸を増加させた。
【００２９】
これらのデータから、ＥＰＡ及びＤＨＡの両者は骨区分に濃縮され、ＤＨＡは骨皮質極性脂質類にＥＰＡより多く蓄積されるということが分った。腸骨稜組織における半ビボでのＰＧＥ2産生に基づき、ＭＥＮ配合食餌はプロスタノイド類の形成を低減させる傾向があった。更に、炎症の下方調節要素(ＰＧＥ3)はＥＰＡの存在によって刺激される。これらの結果は、ｎ−３脂肪酸類に富む食餌が、イヌの骨区分において前炎症性エイコサノイド(ＰＧＥ2)の合成を低減し、炎症の下方調節要素（ＥＰＡ及びＤＨＡ）の組織内蓄積を促進することを示唆する。これらの結果は、又、食餌中のｎ−６／ｎ−３脂肪酸比率が２５：１以上であると前炎症性ＰＧＥ2の産生が高められ、それにより骨形成が抑制され、一方、比率が５：１の場合はＰＧＥ2のレベルが低下し、それにより骨形成が刺激され、発育中のイヌの骨造形を最適化するということを示唆する。食餌中の特定のｎ−３脂肪酸（２０：５ｎ−３又は２２：６ｎ−３）は、又、発育中のイヌの軟骨及び骨代謝への影響を特異的に調整するものと思われる。
【００３０】
例２
ラットを用いた研究を実施した。収集すべきデータの性質及び発育中のイヌからそのようなデータを収集することの非現実性から、本研究が必要とされた。収集データは、（１）器官及び組織の採取、（２）骨造形の目安として骨形成速度（ＢＦＲ）の定量及び成長軟骨の形態測定、及び（３）無傷骨の機械的性質の評価、を包含した。
【００３１】
合計４０匹のＨａｒｌａｎ Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット、離乳子、雄（２１日令）を、４つの食餌処理に配置し４０日間試験した。対照の食餌（処理１）は、ＡＩＮ９３Ｇ［Ｒｅｅｖｅｓら、「ＡＩＮ−９３実験室げっ歯類用精製食餌（ＡＩＮ−９３ Ｐｕｒｉｆｉｅｄ Ｄｉｅｔｓ ｆｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｒｏｄｅｎｔｓ）」、１２３、Ｊ．Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ、１９３９−５１（１９９３）に報告されている食餌］であり、大豆油を含み、ｎ−６／ｎ−３脂肪酸比率８：１のものであった。他の３つの処理用食餌には補充脂肪酸類を配合し、イヌの実験におけるｎ−６／ｎ−３脂肪酸比率に可能な限り近いものとした。対照の食餌は７０ｇ／ｋｇの添加脂肪を含有した。他の３つの処理用食餌には以下の（ｎ−６）／（ｎ−３）脂肪酸類比率を供給するように脂質類を配合した。８：１［大豆油（ＳＢＯ）］、５０：１［ベニバナ油（ＳＡＦ）］、５：１［ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）］、及び５：１［メンハーデン油（ＭＥＮ）］。処理用食餌を要約して以下の表に示す。
【００３２】
【表３】
【００３３】
評価した応答の判定基準は以下の通りであった。
【００３４】
【表４】
【００３５】
ＭＥＮ及びＤＨＡ配合食餌は、ＳＡＦ配合食餌を給餌された群の値に比べて、けい骨皮質及び骨髄における２０：５ｎ−３（ＥＰＡ）及び２２：６ｎ−３（ＤＨＡ）の濃度を有意に高めた。骨区分における２０：４ｎ−６（ＡＡ）の濃度は、食餌処理によって変わらなかった。骨中のＤＨＡ濃度は、ＳＡＦ配合食餌を給餌されたラットにおいて最低であった。
【００３６】
これらのデータは、ＥＰＡ及びＤＨＡの両者が骨区分に濃縮され、ＤＨＡが皮質骨極性脂質類中にＥＰＡより多く蓄積されることを示した。ＤＨＡ配合食餌を給餌されたラットにおいて、けい骨における半ビボでのＰＧＥ2産生は、ＳＡＦ配合食餌を給餌された群に比べて低減した。ＭＥＮ配合食餌を給餌されたラットの血清の骨特異的アルカリ性フォスファターゼは、他の食餌を給餌されたラットの値に比較して高められた。ＤＨＡグループにおける総小柱数及び骨髄面積は、ＳＢＯグループのそれらに比べて高かったが、骨膜ＢＦＲはＳＢＯ及びＳＡＦ配合食餌を給餌された群において高かった。骨内膜の骨形成速度に関しては、食餌処理間で差異は認められなかった。
【００３７】
この結果は、ｎ−３脂肪酸類に富んだ食餌が、前炎症性エイコサノイド（ＰＧＥ2）の合成を低減させ、骨区分での炎症の下方調節要素（ＥＰＡ及びＤＨＡ）の組織内蓄積を促進することを示唆する。
【００３８】
本発明を例示する目的で特定の代表的な実施態様が示されているが、付属の特許請求の範囲に定義される本発明の請求範囲から逸脱することなしに、本明細書に開示された方法及び装置に関して多くの変更がなされてよいということは、当業者には明白であると思われる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
発育中のイヌにおける骨造形及び軟骨細胞機能を向上するために使用するペットフード製品の製造における、ｎ−６及びｎ−３脂肪酸源を含むペットフード組成物の使用。
【請求項２】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約２０：１から約１：１である、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項３】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約１０：１から約５：１である、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項４】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約８：１から約５：１である、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項５】
ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％がｎ−６脂肪酸類である、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項６】
ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％がｎ−３脂肪酸類である、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項７】
ペットフード組成物が、乾物基準で約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項８】
ペットフード組成物中のｎ−３脂肪酸類がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項９】
発育中のイヌにおける骨造形及び軟骨細胞機能を向上するために使用するペットフード製品の製造における、約２０から約４０重量％の粗タンパク質、約４から約３０重量％の脂肪、２から約２０重量％の総食物繊維、炭水化物源、並びにｎ−６及びｎ−３脂肪酸源を含むペットフード組成物の使用。
【請求項１０】
糞便バクテリアにより２４時間の期間発酵した場合１５から６０重量パーセントの有機物消失を示す発酵性の繊維類である補充総食物繊維を、約１から約１１重量パーセントの量で更に含む、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１１】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約２０：１から約１：１である、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１２】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約１０：１から約５：１である、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１３】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約８：１から約５：１である、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１４】
ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％がｎ−６脂肪酸類である、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１５】
ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％がｎ−３脂肪酸類である、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１６】
ペットフード組成物が、乾物基準で約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１７】
ペットフード組成物中のｎ−３脂肪酸類がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１８】
発育中のイヌにおける骨造形及び軟骨細胞機能を向上するために使用する方法であって、発育中のイヌの食餌中にｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を含有することを含む方法。
【請求項１】
発育中のイヌにおける骨造形及び軟骨細胞機能を向上するために使用するペットフード製品の製造における、ｎ−６及びｎ−３脂肪酸源を含むペットフード組成物の使用。
【請求項２】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約２０：１から約１：１である、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項３】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約１０：１から約５：１である、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項４】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約８：１から約５：１である、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項５】
ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％がｎ−６脂肪酸類である、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項６】
ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％がｎ−３脂肪酸類である、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項７】
ペットフード組成物が、乾物基準で約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項８】
ペットフード組成物中のｎ−３脂肪酸類がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む、請求項１記載のペットフード組成物の使用。
【請求項９】
発育中のイヌにおける骨造形及び軟骨細胞機能を向上するために使用するペットフード製品の製造における、約２０から約４０重量％の粗タンパク質、約４から約３０重量％の脂肪、２から約２０重量％の総食物繊維、炭水化物源、並びにｎ−６及びｎ−３脂肪酸源を含むペットフード組成物の使用。
【請求項１０】
糞便バクテリアにより２４時間の期間発酵した場合１５から６０重量パーセントの有機物消失を示す発酵性の繊維類である補充総食物繊維を、約１から約１１重量パーセントの量で更に含む、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１１】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約２０：１から約１：１である、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１２】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約１０：１から約５：１である、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１３】
ｎ−６脂肪酸類対ｎ−３脂肪酸類の比率が約８：１から約５：１である、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１４】
ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約２２重量％がｎ−６脂肪酸類である、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１５】
ペットフード組成物中の総脂肪酸類の少なくとも約３重量％がｎ−３脂肪酸類である、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１６】
ペットフード組成物が、乾物基準で約０．８８から約６．６重量％のｎ−６脂肪酸類及び約０．１６から約１．２重量％のｎ−３脂肪酸類を含む、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１７】
ペットフード組成物中のｎ−３脂肪酸類がエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を含む、請求項９記載のペットフード組成物の使用。
【請求項１８】
発育中のイヌにおける骨造形及び軟骨細胞機能を向上するために使用する方法であって、発育中のイヌの食餌中にｎ−６及びｎ−３脂肪酸類を含有することを含む方法。
【公開番号】特開２０１１−１３０７７４（Ｐ２０１１−１３０７７４Ａ）
【公開日】平成２３年７月７日（２０１１．７．７）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２０１１−８２３６７（Ｐ２０１１−８２３６７）
【出願日】平成２３年４月４日（２０１１．４．４）
【分割の表示】特願２００１−５５９４５４（Ｐ２００１−５５９４５４）の分割
【原出願日】平成１３年２月１６日（２００１．２．１６）
【出願人】（５９５０５６８５９）ザ・アイムス・カンパニー (52)
【氏名又は名称原語表記】Ｔｈｅ Ｉａｍｓ Ｃｏｍｐａｎｙ
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年７月７日（２０１１．７．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−８２３６７（Ｐ２０１１−８２３６７）
【出願日】平成２３年４月４日（２０１１．４．４）
【分割の表示】特願２００１−５５９４５４（Ｐ２００１−５５９４５４）の分割
【原出願日】平成１３年２月１６日（２００１．２．１６）
【出願人】（５９５０５６８５９）ザ・アイムス・カンパニー (52)
【氏名又は名称原語表記】Ｔｈｅ Ｉａｍｓ Ｃｏｍｐａｎｙ
【Ｆターム（参考）】
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