発酵食品
【課題】乳成分を介在させずに、乳酸発酵された好ましい味や臭いの発酵食品を提供することである。
【解決手段】すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びペディオコッカス属に属する乳酸菌の少なくとも１以上の乳酸菌によって、リモネン、シトラール、ヌートカトン、ペリラアルデヒド、フラネオール、マルトール、エチル２−メチルブチレートなどの香気成分を含有する植物を発酵させたことを特徴とする発酵食品である。
【解決手段】すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びペディオコッカス属に属する乳酸菌の少なくとも１以上の乳酸菌によって、リモネン、シトラール、ヌートカトン、ペリラアルデヒド、フラネオール、マルトール、エチル２−メチルブチレートなどの香気成分を含有する植物を発酵させたことを特徴とする発酵食品である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びペディオコッカス属に属する乳酸菌の少なくとも１以上の乳酸菌によって植物を発酵させたことを特徴とする発酵食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来から、我が国においては、野菜を日持ちさせるため、野菜を乳酸発酵させた漬け物が食されている。例えば、長野県の木曽地方の伝統的な漬物がある「すんき漬け」、京都の伝統的な漬け物である「すぐき漬け」などがある。韓国のキムチなども乳酸発酵させた漬物である。また、野菜などを乳酸発酵させた発酵食品としては、様々なものが研究されている（特許文献１乃至３）。
【特許文献１】特開昭６０−２４８１３１号公報
【特許文献２】特開平１−１８１７４５号公報
【特許文献３】特開平３−３９０６６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかしながら、これら特許文献１乃至３などに記載されたものは、いずれも乳成分を介在させて乳酸発酵させたものであり、酸味と発酵臭が強いという問題があり、このような酸味は、発酵の際に添加される様々な調味料によって抑えられている。例えば、白菜キムチにおいては、発酵の際に添加されるトウガラシや塩などによって酸味が抑えられている。このため、乳成分を介在させて乳酸発酵させているものは、酸味が強いか、又は調味料の味によって、味が制限されるので、様々な野菜などに利用できない。
【０００４】
そこで、本発明は、乳成分や調味料を介在させずに、乳酸発酵された好ましい味や臭いの発酵食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
以上の目的を達成するため、本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びペディオコッカス属に属する乳酸菌の少なくとも１以上の乳酸菌を用いて、所定の香気成分が含有された植物を乳成分や調味料を介在させずに発酵させることができ、その食物の本来の香気成分によって、乳酸発酵による酸味が緩和され、好ましい味や臭いを得ることができることを見出した。すなわち、本発明は、すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びベディオコッカス属に属する乳酸菌の少なくとも１以上の乳酸菌によって、リモネン、シトラール、ヌートカトン、ペリラアルデヒド、フラネオール、マルトール、エチル２−メチルブチレート、ヘキセナール、メチルアンスラニレート、エチルアンスラニレート、ピーチアルデヒド、ベンズアルデヒド、イソアミルアルコール、ヘキセノール、セダノライド、セダノール酸、シンナムアルデヒド、アリシン、ショウガオール、ジンゲロン、αーピネン酸、メトキシピラジン類、リナロール、アリルイソチオシアネート、ミルセン、酢酸エチル、酪酸メチル、カプロン酸エチル、酢酸イソアミル、カプサイシン及びカコチン臭の少なくとも1以上の香気成分を含有する植物を発酵させたことを特徴とする発酵食品である。
【発明の効果】
【０００６】
以上のように、本発明によれば、乳成分や調味料を介在させずに、乳酸発酵された好ましい味や臭いの発酵食品を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明に係る発酵食品において、すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びペディオコッカス属に属する乳酸菌は、すんき漬から抽出することができる。具体的には、すんき漬の一部を乳酸菌用集積培地で集積培養後、滅菌生理食塩水で任意に希釈し、薬剤を添加した乳酸菌分離用寒天培地（ＧＹＰ白亜寒天培地）で培養して乳酸菌の分離を行うことにより作製した。乳酸菌の確認および発酵性の確認は乳酸菌分離用寒天培地上に検出されたコロニーを個々に純培養し、常法によりグラム染色や顕微鏡による形態観察を行った後、細菌同定検査キット（アピ５０ＣＨＬ（日本ビオメリュー（株））により確認を行った。さらに、１６Ｓ ｒＲＮＡをコードするＳＳＵ ｒＤＮＡのＰＣＲ産物のシークエンスを行い、その塩基配列より乳酸菌の同定を行った。分離した乳酸菌は、単独或いは数種類を乳酸菌増殖培地で増殖させ、必要に応じてスケールアップし、発酵用スタータを作製した。
【０００８】
これら乳酸菌としては、例えば、ラクトバチルス・デルブルッキーに属する乳酸菌、ラクトバチルス・ブレビスに属する乳酸菌、ラクトバチルス・サケイに属する乳酸菌、ラクトバチルス・クリアタスに属する乳酸菌、ラクトバチルス・プランタムに属する乳酸菌、ラクトバチルス・ファーメンタムに属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌、及びペディオコッカス・ペントサセウスに属する乳酸菌などがある。
【０００９】
また、本発明に係る発酵食品において、香気成分リモネンやシトラールは、オレンジ、レモン、柚子、スダチ及びカボスなどに含まれており、香気成分ヌートカトンは、グレープフルーツなどに含まれており、香気成分ペリラアルデヒドは、紫蘇などに含まれており、香気成分フラネオールやマルトール、酪酸メチルは、イチゴなどに含まれており、香気成分エチル２−メチルブチレートやヘキセナールは、林檎などに含まれており、香気成分メチルアンスラニレートやエチルアンスラニレートは、葡萄などに含まれており、香気成分ピーチアルデヒドやベンズアルデヒドは、桃などに含まれており、香気成分イソアミルアルコールやヘキセノール、カプロン酸エチル、酢酸イソアミルは、バナナなどに含まれており、香気成分セダノライドやセダノール酸は、セロリなどに含まれており、香気成分シンナムアルデヒドは、ニッケイなどに含まれており、香気成分アリシンは、ニンニクなどに含まれており、香気成分ショーガオールやジンゲロンは、生姜などに含まれており、香気成分αーピネン酸やメトキシピラジン類は、みょうがなどに含まれており、香気成分アリルイソチオシアネートは、わさび菜などに含まれており、ミルセンや酢酸エチルは、きんかんなどに含まれており、カプサイシンやカコチン臭は、ロコトトウガラシなどに含まれている。
【実施例】
【００１０】
次に、本発明に係る発酵食品の実施例について説明する。先ず、本実施例に係る発酵食品の発酵に用いられる乳酸菌の抽出方法について説明する。木曽王滝村より調達した赤カブ菜のすんき漬けの１株を乳酸菌用集積培地で３０℃、４８時間集積培養後、滅菌生理食塩水で任意に希釈した。希釈液はアジ化ナトリウムとシクロヘキシミドの抗菌剤を添加した乳酸菌分離用寒天培地（ＧＹＰ白亜寒天培地）で３０℃、７２時間培養して乳酸菌の分離を行った。乳酸菌の確認および発酵性の確認は乳酸菌分離用寒天培地上に検出されたコロニーを個々にＭＲＳ培地（ＯＸＯＩＤ社製）で３０℃、７２時間で純培養し、常法によりグラム染色や顕微鏡による形態観察を行った後、細菌同定検査キット（アピ５０ＣＨＬ（日本ビオメリュー（株））により確認を行った。さらに、１６ＳｒＲＮＡをコードするＳＳＵ ｒＤＮＡのＰＣＲ産物のシークエンスを行ったところ、その塩基配列より乳酸菌であることが確認できた。分離した乳酸菌は、単独或いは数種類を乳酸菌増殖培地で増殖させ、必要に応じてスケールアップし、１．０×１０９個／ｇの発酵用スタータとしての乳酸菌溶液を作製できた。
【００１１】
実施例１（ミョウガ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ロイコノストック・ガーリカムを用いて、ミョウガを発酵させた。すなわち、先ず、縦半分にカットしたミョウガ１ｋｇに対し、乳酸菌ロイコノストック・ガーリカム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ５．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．５であった。実施例１に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行なったところ、乳酸による酸味とミョウガ本来の香味（αーピネン酸やメトキシピラジン類など）が合わさって、単なる酢漬けと違い好ましいとの評価を得た。
【００１２】
実施例２（生姜）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・ファーメンタムを用いて、生姜を発酵させた。すなわち、先ず、スライスした生姜１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・ファーメンタム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例２に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ２．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．５であった。実施例２に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味と生姜本来の香味（シトラールやリナロールなど）・辛味（ジンゲロンやショーガオールなど）が合わさって、単なる酢漬けと違い好ましいとの評価を得た。
【００１３】
実施例３（わさび菜）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ロイコノストック・ガーリカムを用いて、わさび菜を発酵させた。すなわち、先ず、２〜３ｃｍ幅にカットしたわさび菜１ｋｇに対し、乳酸菌ロイコノストック・ガーリカム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例３に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ８．０×１０７個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ５．０であった。実施例３に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味とわさび菜本来の香味（アリルイソチオシアネート）があり、辛味が残っていて好ましいとの評価を得た。
【００１４】
実施例４（セロリ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ロイコノストック・ガーリカムを用いて、セロリを発酵させた。すなわち、先ず、斜め切りにしたセロリ１ｋｇに対し、乳酸菌ロイコノストック・ガーリカム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例４に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ３．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．１であった。実施例４に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味とセロリ本来の香味（セダノライドやセダノール酸など）が合わさって、かつ食塩を使わないのでシャキシャキ感が残り好ましいとの評価を得た。
【００１５】
実施例５（きんかん）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ロイコノストック・ガーリカムを用いて、きんかんを発酵させた。すなわち、先ず、スライスしたきんかん１ｋｇに対し、乳酸菌ロイコノストック・ガーリカム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例５に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ２．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．０であった。実施例５に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味ときんかん本来の香味（リモネン、ミルセン及び酢酸エチルなど）が合わさって、非常に好ましいとの評価を得た。
【００１６】
実施例６（リンゴ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・プランタムを用いて、りんごを発酵させた。すなわち、芯を抜いて１個を１６等分したりんご１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・プランタム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例６に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ５．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．０であった。実施例６に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味とリンゴの酸味や香味（エチル２−メチルブチレートなど）が合わさって、シャッキリ感も残り好ましいとの評価を得た。
【００１７】
実施例７（トウガラシ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ロイコノストック・ガーリカムを用いて、トウガラシを発酵させた。すなわち、芯を抜いて荒くみじん切りしたロコトトウガラシ１ｋｇに対し、乳酸菌ロイコノストック・ガーリカム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施７に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ８．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．２であった。実施例７に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味とトウガラジの辛味（カプサイシンなど）・香味（カコチン臭など）が合わさって好ましいとの評価を得た。
【００１８】
実施例８（グレープフルーツ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・デルブルッキーを用いて、グレープフルーツを発酵させた。すなわち、まず、皮付きのまま２ｃｍの厚さにスライスしたグレープフルーツ１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・デルブルッキーの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例８に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ３．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ３．４であった。実施例８に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味とグレープフルーツ本来の香味（ヌートカトンやシトラール、リナロール）が合わさって、好ましいとの評価を得た。
【００１９】
実施例９（紫蘇）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・ブレビスを用いて、紫蘇を発酵させた。すなわち、まず、１〜２ｃｍの幅にカットした紫蘇１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・ブレビスの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例９に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ７．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．５であった。実施例９に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味と紫蘇本来の香味（ペリラアルデヒド）が合わさって、シャキシャキ感も残り好ましいとの評価を得た。
【００２０】
実施例１０（イチゴ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・サケイを用いて、イチゴを発酵させた。すなわち、まず、１／４カットしたイチゴ１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・サケイの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１０に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ４．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．６であった。実施例１０に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味とイチゴ本来の香味（フラネオールやマルトール、酪酸メチル）が合わさって、好ましいとの評価を得た。
【００２１】
実施例１１（葡萄）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・クリアタスを用いて、葡萄を発酵させた。すなわち、まず、皮付きのまま半分にカットしたマスカット１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・クリアタスの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１１に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ１．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．３であった。実施例１１に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味と葡萄本来の香味（酢酸エチルやメチルアンスラニレート、エチルアンスラニレート）が合わさって、好ましいとの評価を得た。
【００２２】
実施例１２（桃）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ペディオコッカス・ペントサセウスを用いて、桃を発酵させた。すなわち、まず、皮付きのまま１／８カットした桃１ｋｇに対し、乳酸菌ペディオコッカス・ペントサセウスの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１２に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ６．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．６であった。実施例１２に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味と桃本来の香味（ピーチアルデヒドやベンズアルデヒド）が合わさって、好ましいとの評価を得た。
【００２３】
実施例１３（バナナ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・サケイを用いて、バナナを発酵させた。すなわち、まず、皮を剥いて２ｃｍの厚さにスライスしたバナナ１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・サケイの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１３に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ７．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．４であった。実施例１３に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味とバナナ本来の香味（イソアミルアルコールや酢酸イソアミル、ヘキセノール、カプロン酸エチル）が合わさって、好ましいとの評価を得た。
【００２４】
実施例１４（ニッケイとニンニク）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ペディオコッカス・ペントサセウスを用いて、ニッケイとニンニクを発酵させた。すなわち、まず、皮を剥いたニンニク０．９ｋｇと棒状のニッケイ０．１ｋｇに対し、乳酸菌ペディオコッカス・ペントサセウスの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１４に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ２．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．６であった。実施例１４に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味とニッケイとニンニクの本来の香味（シンナムアルデヒドやアリシン）が合わさって、単なる酢漬けと違い好ましいとの評価を得た。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びペディオコッカス属に属する乳酸菌の少なくとも１以上の乳酸菌によって植物を発酵させたことを特徴とする発酵食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来から、我が国においては、野菜を日持ちさせるため、野菜を乳酸発酵させた漬け物が食されている。例えば、長野県の木曽地方の伝統的な漬物がある「すんき漬け」、京都の伝統的な漬け物である「すぐき漬け」などがある。韓国のキムチなども乳酸発酵させた漬物である。また、野菜などを乳酸発酵させた発酵食品としては、様々なものが研究されている（特許文献１乃至３）。
【特許文献１】特開昭６０−２４８１３１号公報
【特許文献２】特開平１−１８１７４５号公報
【特許文献３】特開平３−３９０６６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかしながら、これら特許文献１乃至３などに記載されたものは、いずれも乳成分を介在させて乳酸発酵させたものであり、酸味と発酵臭が強いという問題があり、このような酸味は、発酵の際に添加される様々な調味料によって抑えられている。例えば、白菜キムチにおいては、発酵の際に添加されるトウガラシや塩などによって酸味が抑えられている。このため、乳成分を介在させて乳酸発酵させているものは、酸味が強いか、又は調味料の味によって、味が制限されるので、様々な野菜などに利用できない。
【０００４】
そこで、本発明は、乳成分や調味料を介在させずに、乳酸発酵された好ましい味や臭いの発酵食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
以上の目的を達成するため、本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びペディオコッカス属に属する乳酸菌の少なくとも１以上の乳酸菌を用いて、所定の香気成分が含有された植物を乳成分や調味料を介在させずに発酵させることができ、その食物の本来の香気成分によって、乳酸発酵による酸味が緩和され、好ましい味や臭いを得ることができることを見出した。すなわち、本発明は、すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びベディオコッカス属に属する乳酸菌の少なくとも１以上の乳酸菌によって、リモネン、シトラール、ヌートカトン、ペリラアルデヒド、フラネオール、マルトール、エチル２−メチルブチレート、ヘキセナール、メチルアンスラニレート、エチルアンスラニレート、ピーチアルデヒド、ベンズアルデヒド、イソアミルアルコール、ヘキセノール、セダノライド、セダノール酸、シンナムアルデヒド、アリシン、ショウガオール、ジンゲロン、αーピネン酸、メトキシピラジン類、リナロール、アリルイソチオシアネート、ミルセン、酢酸エチル、酪酸メチル、カプロン酸エチル、酢酸イソアミル、カプサイシン及びカコチン臭の少なくとも1以上の香気成分を含有する植物を発酵させたことを特徴とする発酵食品である。
【発明の効果】
【０００６】
以上のように、本発明によれば、乳成分や調味料を介在させずに、乳酸発酵された好ましい味や臭いの発酵食品を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明に係る発酵食品において、すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びペディオコッカス属に属する乳酸菌は、すんき漬から抽出することができる。具体的には、すんき漬の一部を乳酸菌用集積培地で集積培養後、滅菌生理食塩水で任意に希釈し、薬剤を添加した乳酸菌分離用寒天培地（ＧＹＰ白亜寒天培地）で培養して乳酸菌の分離を行うことにより作製した。乳酸菌の確認および発酵性の確認は乳酸菌分離用寒天培地上に検出されたコロニーを個々に純培養し、常法によりグラム染色や顕微鏡による形態観察を行った後、細菌同定検査キット（アピ５０ＣＨＬ（日本ビオメリュー（株））により確認を行った。さらに、１６Ｓ ｒＲＮＡをコードするＳＳＵ ｒＤＮＡのＰＣＲ産物のシークエンスを行い、その塩基配列より乳酸菌の同定を行った。分離した乳酸菌は、単独或いは数種類を乳酸菌増殖培地で増殖させ、必要に応じてスケールアップし、発酵用スタータを作製した。
【０００８】
これら乳酸菌としては、例えば、ラクトバチルス・デルブルッキーに属する乳酸菌、ラクトバチルス・ブレビスに属する乳酸菌、ラクトバチルス・サケイに属する乳酸菌、ラクトバチルス・クリアタスに属する乳酸菌、ラクトバチルス・プランタムに属する乳酸菌、ラクトバチルス・ファーメンタムに属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌、及びペディオコッカス・ペントサセウスに属する乳酸菌などがある。
【０００９】
また、本発明に係る発酵食品において、香気成分リモネンやシトラールは、オレンジ、レモン、柚子、スダチ及びカボスなどに含まれており、香気成分ヌートカトンは、グレープフルーツなどに含まれており、香気成分ペリラアルデヒドは、紫蘇などに含まれており、香気成分フラネオールやマルトール、酪酸メチルは、イチゴなどに含まれており、香気成分エチル２−メチルブチレートやヘキセナールは、林檎などに含まれており、香気成分メチルアンスラニレートやエチルアンスラニレートは、葡萄などに含まれており、香気成分ピーチアルデヒドやベンズアルデヒドは、桃などに含まれており、香気成分イソアミルアルコールやヘキセノール、カプロン酸エチル、酢酸イソアミルは、バナナなどに含まれており、香気成分セダノライドやセダノール酸は、セロリなどに含まれており、香気成分シンナムアルデヒドは、ニッケイなどに含まれており、香気成分アリシンは、ニンニクなどに含まれており、香気成分ショーガオールやジンゲロンは、生姜などに含まれており、香気成分αーピネン酸やメトキシピラジン類は、みょうがなどに含まれており、香気成分アリルイソチオシアネートは、わさび菜などに含まれており、ミルセンや酢酸エチルは、きんかんなどに含まれており、カプサイシンやカコチン臭は、ロコトトウガラシなどに含まれている。
【実施例】
【００１０】
次に、本発明に係る発酵食品の実施例について説明する。先ず、本実施例に係る発酵食品の発酵に用いられる乳酸菌の抽出方法について説明する。木曽王滝村より調達した赤カブ菜のすんき漬けの１株を乳酸菌用集積培地で３０℃、４８時間集積培養後、滅菌生理食塩水で任意に希釈した。希釈液はアジ化ナトリウムとシクロヘキシミドの抗菌剤を添加した乳酸菌分離用寒天培地（ＧＹＰ白亜寒天培地）で３０℃、７２時間培養して乳酸菌の分離を行った。乳酸菌の確認および発酵性の確認は乳酸菌分離用寒天培地上に検出されたコロニーを個々にＭＲＳ培地（ＯＸＯＩＤ社製）で３０℃、７２時間で純培養し、常法によりグラム染色や顕微鏡による形態観察を行った後、細菌同定検査キット（アピ５０ＣＨＬ（日本ビオメリュー（株））により確認を行った。さらに、１６ＳｒＲＮＡをコードするＳＳＵ ｒＤＮＡのＰＣＲ産物のシークエンスを行ったところ、その塩基配列より乳酸菌であることが確認できた。分離した乳酸菌は、単独或いは数種類を乳酸菌増殖培地で増殖させ、必要に応じてスケールアップし、１．０×１０９個／ｇの発酵用スタータとしての乳酸菌溶液を作製できた。
【００１１】
実施例１（ミョウガ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ロイコノストック・ガーリカムを用いて、ミョウガを発酵させた。すなわち、先ず、縦半分にカットしたミョウガ１ｋｇに対し、乳酸菌ロイコノストック・ガーリカム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ５．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．５であった。実施例１に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行なったところ、乳酸による酸味とミョウガ本来の香味（αーピネン酸やメトキシピラジン類など）が合わさって、単なる酢漬けと違い好ましいとの評価を得た。
【００１２】
実施例２（生姜）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・ファーメンタムを用いて、生姜を発酵させた。すなわち、先ず、スライスした生姜１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・ファーメンタム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例２に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ２．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．５であった。実施例２に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味と生姜本来の香味（シトラールやリナロールなど）・辛味（ジンゲロンやショーガオールなど）が合わさって、単なる酢漬けと違い好ましいとの評価を得た。
【００１３】
実施例３（わさび菜）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ロイコノストック・ガーリカムを用いて、わさび菜を発酵させた。すなわち、先ず、２〜３ｃｍ幅にカットしたわさび菜１ｋｇに対し、乳酸菌ロイコノストック・ガーリカム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例３に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ８．０×１０７個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ５．０であった。実施例３に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味とわさび菜本来の香味（アリルイソチオシアネート）があり、辛味が残っていて好ましいとの評価を得た。
【００１４】
実施例４（セロリ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ロイコノストック・ガーリカムを用いて、セロリを発酵させた。すなわち、先ず、斜め切りにしたセロリ１ｋｇに対し、乳酸菌ロイコノストック・ガーリカム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例４に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ３．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．１であった。実施例４に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味とセロリ本来の香味（セダノライドやセダノール酸など）が合わさって、かつ食塩を使わないのでシャキシャキ感が残り好ましいとの評価を得た。
【００１５】
実施例５（きんかん）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ロイコノストック・ガーリカムを用いて、きんかんを発酵させた。すなわち、先ず、スライスしたきんかん１ｋｇに対し、乳酸菌ロイコノストック・ガーリカム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例５に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ２．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．０であった。実施例５に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味ときんかん本来の香味（リモネン、ミルセン及び酢酸エチルなど）が合わさって、非常に好ましいとの評価を得た。
【００１６】
実施例６（リンゴ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・プランタムを用いて、りんごを発酵させた。すなわち、芯を抜いて１個を１６等分したりんご１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・プランタム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例６に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ５．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．０であった。実施例６に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味とリンゴの酸味や香味（エチル２−メチルブチレートなど）が合わさって、シャッキリ感も残り好ましいとの評価を得た。
【００１７】
実施例７（トウガラシ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ロイコノストック・ガーリカムを用いて、トウガラシを発酵させた。すなわち、芯を抜いて荒くみじん切りしたロコトトウガラシ１ｋｇに対し、乳酸菌ロイコノストック・ガーリカム５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を接種し、３７℃嫌気的条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施７に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ８．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．２であった。実施例７に係る発酵食品について１５名のパネラーによって官能試験を行なったところ、乳酸による酸味とトウガラジの辛味（カプサイシンなど）・香味（カコチン臭など）が合わさって好ましいとの評価を得た。
【００１８】
実施例８（グレープフルーツ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・デルブルッキーを用いて、グレープフルーツを発酵させた。すなわち、まず、皮付きのまま２ｃｍの厚さにスライスしたグレープフルーツ１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・デルブルッキーの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例８に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ３．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ３．４であった。実施例８に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味とグレープフルーツ本来の香味（ヌートカトンやシトラール、リナロール）が合わさって、好ましいとの評価を得た。
【００１９】
実施例９（紫蘇）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・ブレビスを用いて、紫蘇を発酵させた。すなわち、まず、１〜２ｃｍの幅にカットした紫蘇１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・ブレビスの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例９に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ７．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．５であった。実施例９に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味と紫蘇本来の香味（ペリラアルデヒド）が合わさって、シャキシャキ感も残り好ましいとの評価を得た。
【００２０】
実施例１０（イチゴ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・サケイを用いて、イチゴを発酵させた。すなわち、まず、１／４カットしたイチゴ１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・サケイの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１０に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ４．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．６であった。実施例１０に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味とイチゴ本来の香味（フラネオールやマルトール、酪酸メチル）が合わさって、好ましいとの評価を得た。
【００２１】
実施例１１（葡萄）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・クリアタスを用いて、葡萄を発酵させた。すなわち、まず、皮付きのまま半分にカットしたマスカット１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・クリアタスの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１１に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ１．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．３であった。実施例１１に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味と葡萄本来の香味（酢酸エチルやメチルアンスラニレート、エチルアンスラニレート）が合わさって、好ましいとの評価を得た。
【００２２】
実施例１２（桃）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ペディオコッカス・ペントサセウスを用いて、桃を発酵させた。すなわち、まず、皮付きのまま１／８カットした桃１ｋｇに対し、乳酸菌ペディオコッカス・ペントサセウスの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１２に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ６．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．６であった。実施例１２に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味と桃本来の香味（ピーチアルデヒドやベンズアルデヒド）が合わさって、好ましいとの評価を得た。
【００２３】
実施例１３（バナナ）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ラクトバチルス・サケイを用いて、バナナを発酵させた。すなわち、まず、皮を剥いて２ｃｍの厚さにスライスしたバナナ１ｋｇに対し、乳酸菌ラクトバチルス・サケイの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１３に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ７．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．４であった。実施例１３に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味とバナナ本来の香味（イソアミルアルコールや酢酸イソアミル、ヘキセノール、カプロン酸エチル）が合わさって、好ましいとの評価を得た。
【００２４】
実施例１４（ニッケイとニンニク）
次に、上述の方法ですんき漬けから抽出された乳酸菌ペディオコッカス・ペントサセウスを用いて、ニッケイとニンニクを発酵させた。すなわち、まず、皮を剥いたニンニク０．９ｋｇと棒状のニッケイ０．１ｋｇに対し、乳酸菌ペディオコッカス・ペントサセウスの培養液５０ｍｌ（１．０×１０６／ｍｌ）を摂取し、３７℃嫌気条件下で約１５時間前培養した後、５℃で約２週間乳酸発酵させることによって実施例１４に係る発酵食品を得た。発酵後、乳酸菌生菌数を測定したところ２．０×１０８個で、その他の菌については増殖がなく腐敗臭も認められなかった。ｐＨを測定したところ４．６であった。実施例１４に係る発酵食品について１５名のパネラーにより官能試験を行ったところ、乳酸による酸味とニッケイとニンニクの本来の香味（シンナムアルデヒドやアリシン）が合わさって、単なる酢漬けと違い好ましいとの評価を得た。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びぺディオコッカス属に属する乳酸菌の少なくとも１以上の乳酸菌によって、リモネン、シトラール、ヌートカトン、ペリラアルデヒド、フラネオール、マルトール、エチル２−メチルブチレート、ヘキセナール、メチルアンスラニレート、エチルアンスラニレート、ピーチアルデヒド、ベンズアルデヒド、イソアミルアルコール、ヘキセノール、セダノライド、セダノール酸、シンナムアルデヒド、アリシン、ショウガオール、ジンゲロン、αーピネン酸、メトキシピラジン類、リナロール、アリルイソチオシアネート、ミルセン、酢酸エチル、酪酸メチル、カプロン酸エチル、酢酸イソアミル、カプサイシン及びカコチン臭の少なくとも１以上の香気成分を含有する植物を発酵させたことを特徴とする発酵食品。
【請求項２】
前記乳酸菌は、ラクトバチルス・デルブルッキーに属する乳酸菌、ラクトバチルス・ブレビスに属する乳酸菌、ラクトバチルス・サケイに属する乳酸菌、ラクトバチルス・クリアタスに属する乳酸菌、ラクトバチルス・プランタムに属する乳酸菌、ラクトバチルス・ファーメンタムに属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌、及びペディオコッカス・ペントサセウスに属する乳酸菌の少なくとも１以上であることを特徴とする発酵食品。
【請求項１】
すんき漬由来のラクトバチルス属に属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌及びぺディオコッカス属に属する乳酸菌の少なくとも１以上の乳酸菌によって、リモネン、シトラール、ヌートカトン、ペリラアルデヒド、フラネオール、マルトール、エチル２−メチルブチレート、ヘキセナール、メチルアンスラニレート、エチルアンスラニレート、ピーチアルデヒド、ベンズアルデヒド、イソアミルアルコール、ヘキセノール、セダノライド、セダノール酸、シンナムアルデヒド、アリシン、ショウガオール、ジンゲロン、αーピネン酸、メトキシピラジン類、リナロール、アリルイソチオシアネート、ミルセン、酢酸エチル、酪酸メチル、カプロン酸エチル、酢酸イソアミル、カプサイシン及びカコチン臭の少なくとも１以上の香気成分を含有する植物を発酵させたことを特徴とする発酵食品。
【請求項２】
前記乳酸菌は、ラクトバチルス・デルブルッキーに属する乳酸菌、ラクトバチルス・ブレビスに属する乳酸菌、ラクトバチルス・サケイに属する乳酸菌、ラクトバチルス・クリアタスに属する乳酸菌、ラクトバチルス・プランタムに属する乳酸菌、ラクトバチルス・ファーメンタムに属する乳酸菌、ロイコノストック属に属する乳酸菌、及びペディオコッカス・ペントサセウスに属する乳酸菌の少なくとも１以上であることを特徴とする発酵食品。
【公開番号】特開２００８−７９５３４（Ｐ２００８−７９５３４Ａ）
【公開日】平成２０年４月１０日（２００８．４．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−２６２５７２（Ｐ２００６−２６２５７２）
【出願日】平成１８年９月２７日（２００６．９．２７）
【出願人】（０００１１８６１５）伊那食品工業株式会社 (95)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年４月１０日（２００８．４．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年９月２７日（２００６．９．２７）
【出願人】（０００１１８６１５）伊那食品工業株式会社 (95)
【Ｆターム（参考）】
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