糖尿病および糖尿病に関連する状態の治療のため、ならびに血中ＧＬＰ−１レベルの増加によって改善される状態の治療のための併用療法
【課題】被験体の血糖値を低下させること、および被験体の血中ＧＬＰ−１レベルを増加させることに対する新規アプローチを提供すること。
【解決手段】本発明は、一定量のＧＰＲ１１９アゴニストと一定量のジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）インヒビターとの組み合わせであって、その結果この組み合わせが、一定量のＧＰＲ１１９アゴニストのみまたは一定量のＤＰＰ−ＩＶインヒビターのみによって得られる効果よりも被験体の血糖値の低下または血中ＧＬＰ−１レベルの増加に効果がある組み合わせ、ならびに糖尿病および糖尿病に関連する状態または血中ＧＬＰ−１レベルの増加によって改善される状態の治療または予防のためのこのような組み合わせの使用に関する。本発明はまた、ＧＬＰ−１分泌促進薬のスクリーニングのためのＧタンパク質共役型受容体の使用に関する。
【解決手段】本発明は、一定量のＧＰＲ１１９アゴニストと一定量のジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）インヒビターとの組み合わせであって、その結果この組み合わせが、一定量のＧＰＲ１１９アゴニストのみまたは一定量のＤＰＰ−ＩＶインヒビターのみによって得られる効果よりも被験体の血糖値の低下または血中ＧＬＰ−１レベルの増加に効果がある組み合わせ、ならびに糖尿病および糖尿病に関連する状態または血中ＧＬＰ−１レベルの増加によって改善される状態の治療または予防のためのこのような組み合わせの使用に関する。本発明はまた、ＧＬＰ−１分泌促進薬のスクリーニングのためのＧタンパク質共役型受容体の使用に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）試験化合物を、Ｇタンパク質共役型受容体を発現する宿主細胞または宿主細胞膜と接触させる工程であって、該Ｇタンパク質共役型受容体が、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３３５、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５、
（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５であって、但し、該受容体が配列番号２のアミノ酸配列を含まない、
（ｉｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、配列番号３および配列番号４の特異的プライマーを使用したヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う工程を含むプロセスによって得ることができる配列である、アミノ酸配列、
（ｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、ストリンジェントな条件下で配列番号１の相補体にハイブリダイズする、アミノ酸配列、および
（ｖｉ）（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、工程と、
（ｂ）該試験化合物が該受容体の機能性を刺激する能力を決定する工程とを含み、
該試験化合物が該受容体の機能性を刺激する能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることを示す、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、さらに、
（ｃ）工程（ｂ）で前記受容体の機能性を刺激する化合物を、インビトロで哺乳動物腸内分泌細胞と接触させる工程と、
（ｄ）該化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激するかどうかを決定する工程とを含み、
該試験化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激する能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法であって、さらに、
（ｃ）ヒトから得た生物学的サンプル中の血中ＧＬＰ−１レベルを決定する工程であって、該ヒトは、工程（ｂ）で前記受容体の機能性を刺激する化合物を投与されている、工程を含み、
該試験化合物が該ヒトにおける血中ＧＬＰ−１レベルを増加させる能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項４】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）Ｇタンパク質共役型受容体の機能性を刺激する化合物を、インビトロで哺乳動物腸内分泌細胞と接触させる工程であって、該Ｇタンパク質共役型受容体は、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３３５、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５、
（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５であって、但し、該受容体が配列番号２のアミノ酸配列を含まない、
（ｉｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、配列番号３および配列番号４の特異的プライマーを使用したヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う工程を含むプロセスによって得ることができる配列である、アミノ酸配列、
（ｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、ストリンジェントな条件下で配列番号１の相補体にハイブリダイズする、アミノ酸配列、および
（ｖｉ）（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該化合物は、請求項１に記載の方法によって決定されている、工程と、
（ｂ）該化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激するかどうかを決定する工程とを含み、
該試験化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激する能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項５】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）ヒトから得た生物学的サンプル中の血中ＧＬＰ−１レベルを決定する工程であって、該ヒトは、Ｇタンパク質共役型受容体の機能性を刺激する化合物を投与されており、該Ｇタンパク質共役型受容体は、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３３５、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５、
（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５であって、但し、該受容体が配列番号２のアミノ酸配列を含まない、
（ｉｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、配列番号３および配列番号４の特異的プライマーを使用したヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う工程を含むプロセスによって得ることができる配列である、アミノ酸配列、
（ｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、ストリンジェントな条件下で配列番号１の相補体にハイブリダイズする、アミノ酸配列、および
（ｖｉ）（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該化合物は、請求項１に記載の方法によって決定されている、工程を含み、
該試験化合物が該ヒトにおける血中ＧＬＰ−１レベルを増加させる能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項６】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）Ｇタンパク質共役型受容体を、試験化合物の存在下または非存在下で、必要に応じて標識された該受容体に対する公知のリガンドと接触させる工程であって、該Ｇタンパク質共役型受容体が、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３３５、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５、
（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５であって、但し、前記受容体が配列番号２のアミノ酸配列を含まない、
（ｉｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、配列番号３および配列番号４の特異的プライマーを使用したヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う工程を含むプロセスによって得ることができる配列である、アミノ酸配列、
（ｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、ストリンジェントな条件下で配列番号１の相補体にハイブリダイズする、アミノ酸配列、および
（ｖｉ）（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１つの生物活性フラグメントからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、工程と、
（ｂ）該公知のリガンドと該受容体との間の複合体を検出する工程と、
（ｃ）該試験化合物の非存在下よりも該試験化合物の存在下で該複合体があまり形成されないかどうかを決定する工程とを含み、
該決定は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることを示す、方法。
【請求項７】
請求項６に記載の方法であって、さらに、
（ｄ）その化合物の存在下で工程（ｃ）において前記複合体があまり形成されない化合物を、インビトロで哺乳動物腸内分泌細胞と接触させる工程と、
（ｅ）該化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激するかどうかを決定する工程とを含み、
該試験化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激する能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項８】
請求項６に記載の方法であって、さらに、
（ｄ）ヒトから得た生物学的サンプル中の血中ＧＬＰ−１レベルを決定する工程であって、該ヒトは、その化合物の存在下で工程（ｃ）において前記複合体があまり形成されない化合物を投与されている、工程を含み、
該試験化合物が該ヒトにおける血中ＧＬＰ−１レベルを増加させる能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項９】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）化合物をインビトロで哺乳動物腸内分泌細胞と接触させる工程であって、該化合物は、請求項６に記載の方法によって同定されている、工程と
（ｂ）該化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激するかどうかを決定する工程とを含み、
該試験化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激する能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項１０】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）ヒトから得た生物学的サンプル中の血中ＧＬＰ−１レベルを決定する工程であって、該ヒトは請求項６に記載の方法によって同定された化合物を投与されている、工程を含み、
該試験化合物が該ヒトにおける血中ＧＬＰ−１レベルを増加させる能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項１１】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）ＧＰＲ１１９アゴニストを、インビトロで哺乳動物腸内分泌細胞と接触させる工程と、
（ｂ）該ＧＰＲ１１９アゴニストが該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激するかどうかを決定する工程とを含み、
該ＧＰＲ１１９アゴニストが該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激する能力は、該アゴニストがＧＬＰ−１分泌促進薬であることを示す、方法。
【請求項１２】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）ヒトから得た生物学的サンプル中の血中ＧＬＰ−１レベルを決定する工程であって、該ヒトは、ＧＰＲ１１９アゴニストを投与されている、工程を含み、
該ＧＰＲ１１９アゴニストが該ヒトにおけるＧＬＰ−１レベルを増加させる能力は、該アゴニストがＧＬＰ−１分泌促進薬であることを示す、方法。
【請求項１３】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、ヒトＧＰＲ１１９のアゴニストである、請求項１１または請求項１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが低分子である、請求項１１〜請求項１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが経口で活性である、請求項１１〜請求項１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが選択的ＧＰＲ１１９アゴニストである、請求項１１〜請求項１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが１０μＭ未満のＥＣ５０を有する、請求項１１〜請求項１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記宿主細胞が発現ベクターを含み、該発現ベクターがＧタンパク質共役型受容体をコードするポリヌクレオチドを含む、請求項１〜請求項５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記決定する工程が、サイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）、サイクリックＧＭＰ（ｃＧＭＰ）、イノシトール１，４，５−三リン酸（ＩＰ３）、ジアシルグリセロール（ＤＡＧ）、ＭＡＰキナーゼ活性、ＭＡＰＫ／ＥＲＫキナーゼキナーゼ−１（ＭＥＫＫ１）活性、およびＣａ２＋からなる群から選択される第２のメッセンジャーレベルの測定による、請求項１〜請求項５または請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ｃＡＭＰレベルが増加する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記決定する工程が、メラニン保有細胞アッセイの使用によるか、レポーターアッセイの使用によるか、前記ＧＰＣＲを含む膜へのＧＴＰγＳ結合の測定による、請求項１〜請求項５または請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記受容体が組換え体である、請求項１〜請求項１０および請求項１８〜請求項２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
ＧＬＰ−１分泌促進薬として試験化合物をスクリーニングするための、Ｇタンパク質共役型受容体の使用であって、該Ｇタンパク質共役型受容体は、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３３５、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５、
（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５であって、但し、該受容体が配列番号２のアミノ酸配列を含まない、
（ｉｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、配列番号３および配列番号４の特異的プライマーを使用したヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う工程を含むプロセスによって得ることができる配列である、アミノ酸配列、
（ｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、ストリンジェントな条件下で配列番号１の相補体にハイブリダイズする、アミノ酸配列、および
（ｖｉ）（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、使用。
【請求項２４】
前記Ｇタンパク質共役型受容体が、組み換え体である、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
前記試験化合物が低分子である、請求項２３または請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
前記試験化合物がＧＰＲ１１９アゴニストである、請求項２３〜請求項２５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２７】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、１０μＭ未満のＥＣ５０を有する、請求項２６に記載の使用。
【請求項１】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）試験化合物を、Ｇタンパク質共役型受容体を発現する宿主細胞または宿主細胞膜と接触させる工程であって、該Ｇタンパク質共役型受容体が、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３３５、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５、
（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５であって、但し、該受容体が配列番号２のアミノ酸配列を含まない、
（ｉｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、配列番号３および配列番号４の特異的プライマーを使用したヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う工程を含むプロセスによって得ることができる配列である、アミノ酸配列、
（ｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、ストリンジェントな条件下で配列番号１の相補体にハイブリダイズする、アミノ酸配列、および
（ｖｉ）（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、工程と、
（ｂ）該試験化合物が該受容体の機能性を刺激する能力を決定する工程とを含み、
該試験化合物が該受容体の機能性を刺激する能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることを示す、方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、さらに、
（ｃ）工程（ｂ）で前記受容体の機能性を刺激する化合物を、インビトロで哺乳動物腸内分泌細胞と接触させる工程と、
（ｄ）該化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激するかどうかを決定する工程とを含み、
該試験化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激する能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法であって、さらに、
（ｃ）ヒトから得た生物学的サンプル中の血中ＧＬＰ−１レベルを決定する工程であって、該ヒトは、工程（ｂ）で前記受容体の機能性を刺激する化合物を投与されている、工程を含み、
該試験化合物が該ヒトにおける血中ＧＬＰ−１レベルを増加させる能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項４】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）Ｇタンパク質共役型受容体の機能性を刺激する化合物を、インビトロで哺乳動物腸内分泌細胞と接触させる工程であって、該Ｇタンパク質共役型受容体は、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３３５、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５、
（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５であって、但し、該受容体が配列番号２のアミノ酸配列を含まない、
（ｉｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、配列番号３および配列番号４の特異的プライマーを使用したヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う工程を含むプロセスによって得ることができる配列である、アミノ酸配列、
（ｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、ストリンジェントな条件下で配列番号１の相補体にハイブリダイズする、アミノ酸配列、および
（ｖｉ）（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該化合物は、請求項１に記載の方法によって決定されている、工程と、
（ｂ）該化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激するかどうかを決定する工程とを含み、
該試験化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激する能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項５】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）ヒトから得た生物学的サンプル中の血中ＧＬＰ−１レベルを決定する工程であって、該ヒトは、Ｇタンパク質共役型受容体の機能性を刺激する化合物を投与されており、該Ｇタンパク質共役型受容体は、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３３５、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５、
（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５であって、但し、該受容体が配列番号２のアミノ酸配列を含まない、
（ｉｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、配列番号３および配列番号４の特異的プライマーを使用したヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う工程を含むプロセスによって得ることができる配列である、アミノ酸配列、
（ｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、ストリンジェントな条件下で配列番号１の相補体にハイブリダイズする、アミノ酸配列、および
（ｖｉ）（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、該化合物は、請求項１に記載の方法によって決定されている、工程を含み、
該試験化合物が該ヒトにおける血中ＧＬＰ−１レベルを増加させる能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項６】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）Ｇタンパク質共役型受容体を、試験化合物の存在下または非存在下で、必要に応じて標識された該受容体に対する公知のリガンドと接触させる工程であって、該Ｇタンパク質共役型受容体が、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３３５、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５、
（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５であって、但し、前記受容体が配列番号２のアミノ酸配列を含まない、
（ｉｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、配列番号３および配列番号４の特異的プライマーを使用したヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う工程を含むプロセスによって得ることができる配列である、アミノ酸配列、
（ｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、ストリンジェントな条件下で配列番号１の相補体にハイブリダイズする、アミノ酸配列、および
（ｖｉ）（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１つの生物活性フラグメントからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、工程と、
（ｂ）該公知のリガンドと該受容体との間の複合体を検出する工程と、
（ｃ）該試験化合物の非存在下よりも該試験化合物の存在下で該複合体があまり形成されないかどうかを決定する工程とを含み、
該決定は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることを示す、方法。
【請求項７】
請求項６に記載の方法であって、さらに、
（ｄ）その化合物の存在下で工程（ｃ）において前記複合体があまり形成されない化合物を、インビトロで哺乳動物腸内分泌細胞と接触させる工程と、
（ｅ）該化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激するかどうかを決定する工程とを含み、
該試験化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激する能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項８】
請求項６に記載の方法であって、さらに、
（ｄ）ヒトから得た生物学的サンプル中の血中ＧＬＰ−１レベルを決定する工程であって、該ヒトは、その化合物の存在下で工程（ｃ）において前記複合体があまり形成されない化合物を投与されている、工程を含み、
該試験化合物が該ヒトにおける血中ＧＬＰ−１レベルを増加させる能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項９】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）化合物をインビトロで哺乳動物腸内分泌細胞と接触させる工程であって、該化合物は、請求項６に記載の方法によって同定されている、工程と
（ｂ）該化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激するかどうかを決定する工程とを含み、
該試験化合物が該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激する能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項１０】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）ヒトから得た生物学的サンプル中の血中ＧＬＰ−１レベルを決定する工程であって、該ヒトは請求項６に記載の方法によって同定された化合物を投与されている、工程を含み、
該試験化合物が該ヒトにおける血中ＧＬＰ−１レベルを増加させる能力は、該試験化合物がＧＬＰ−１分泌促進薬であることをさらに示す、方法。
【請求項１１】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）ＧＰＲ１１９アゴニストを、インビトロで哺乳動物腸内分泌細胞と接触させる工程と、
（ｂ）該ＧＰＲ１１９アゴニストが該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激するかどうかを決定する工程とを含み、
該ＧＰＲ１１９アゴニストが該哺乳動物腸内分泌細胞からのＧＬＰ−１分泌を刺激する能力は、該アゴニストがＧＬＰ−１分泌促進薬であることを示す、方法。
【請求項１２】
ＧＬＰ−１分泌促進薬を同定する方法であって、
（ａ）ヒトから得た生物学的サンプル中の血中ＧＬＰ−１レベルを決定する工程であって、該ヒトは、ＧＰＲ１１９アゴニストを投与されている、工程を含み、
該ＧＰＲ１１９アゴニストが該ヒトにおけるＧＬＰ−１レベルを増加させる能力は、該アゴニストがＧＬＰ−１分泌促進薬であることを示す、方法。
【請求項１３】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、ヒトＧＰＲ１１９のアゴニストである、請求項１１または請求項１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが低分子である、請求項１１〜請求項１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが経口で活性である、請求項１１〜請求項１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが選択的ＧＰＲ１１９アゴニストである、請求項１１〜請求項１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが１０μＭ未満のＥＣ５０を有する、請求項１１〜請求項１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記宿主細胞が発現ベクターを含み、該発現ベクターがＧタンパク質共役型受容体をコードするポリヌクレオチドを含む、請求項１〜請求項５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記決定する工程が、サイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）、サイクリックＧＭＰ（ｃＧＭＰ）、イノシトール１，４，５−三リン酸（ＩＰ３）、ジアシルグリセロール（ＤＡＧ）、ＭＡＰキナーゼ活性、ＭＡＰＫ／ＥＲＫキナーゼキナーゼ−１（ＭＥＫＫ１）活性、およびＣａ２＋からなる群から選択される第２のメッセンジャーレベルの測定による、請求項１〜請求項５または請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ｃＡＭＰレベルが増加する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記決定する工程が、メラニン保有細胞アッセイの使用によるか、レポーターアッセイの使用によるか、前記ＧＰＣＲを含む膜へのＧＴＰγＳ結合の測定による、請求項１〜請求項５または請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記受容体が組換え体である、請求項１〜請求項１０および請求項１８〜請求項２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
ＧＬＰ−１分泌促進薬として試験化合物をスクリーニングするための、Ｇタンパク質共役型受容体の使用であって、該Ｇタンパク質共役型受容体は、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸１〜３３５、
（ｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５、
（ｉｉｉ）配列番号２のアミノ酸２〜３３５であって、但し、該受容体が配列番号２のアミノ酸配列を含まない、
（ｉｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、配列番号３および配列番号４の特異的プライマーを使用したヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を行う工程を含むプロセスによって得ることができる配列である、アミノ酸配列、
（ｖ）ヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチドによってコードされるＧタンパク質共役型受容体のアミノ酸配列であって、該ヌクレオチド配列が、ストリンジェントな条件下で配列番号１の相補体にハイブリダイズする、アミノ酸配列、および
（ｖｉ）（ｉ）〜（ｖ）のいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、使用。
【請求項２４】
前記Ｇタンパク質共役型受容体が、組み換え体である、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
前記試験化合物が低分子である、請求項２３または請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
前記試験化合物がＧＰＲ１１９アゴニストである、請求項２３〜請求項２５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項２７】
前記ＧＰＲ１１９アゴニストが、１０μＭ未満のＥＣ５０を有する、請求項２６に記載の使用。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【図１Ｃ】
【図１Ｄ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７Ａ】
【図７Ｂ】
【図８Ａ】
【図８Ｂ】
【図９Ａ】
【図９Ｂ】
【図１Ｂ】
【図１Ｃ】
【図１Ｄ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７Ａ】
【図７Ｂ】
【図８Ａ】
【図８Ｂ】
【図９Ａ】
【図９Ｂ】
【公開番号】特開２００８−２２０３７５（Ｐ２００８−２２０３７５Ａ）
【公開日】平成２０年９月２５日（２００８．９．２５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−６８５９８（Ｐ２００８−６８５９８）
【出願日】平成２０年３月１７日（２００８．３．１７）
【分割の表示】特願２００７−５５０５１２（Ｐ２００７−５５０５１２）の分割
【原出願日】平成１８年１月９日（２００６．１．９）
【出願人】（５００４７８０９７）アリーナ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド (97)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２０年９月２５日（２００８．９．２５）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年３月１７日（２００８．３．１７）
【分割の表示】特願２００７−５５０５１２（Ｐ２００７−５５０５１２）の分割
【原出願日】平成１８年１月９日（２００６．１．９）
【出願人】（５００４７８０９７）アリーナ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド (97)
【Ｆターム（参考）】
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