細胞回収方法並びにフィルタ及び細胞回収装置
【課題】細胞を効率的に回収することができる細胞回収方法並びにフィルタ及び細胞回収装置を提供する。
【解決手段】目開きが細胞Ｂよりも小さくなるように少なくとも一部を可溶性ゲルで形成したフィルタ１に細胞懸濁液Ａを通過させ、細胞懸濁液Ａ中の細胞Ｂを捕捉させる細胞Ｂ捕捉工程と、細胞捕捉工程により細胞Ｂが捕捉されたフィルタ１にゲル溶解液Ｃを供給して可溶性ゲルを溶解するゲル溶解工程と、ゲル溶解工程により生成されたゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄを回収する細胞回収工程とを含む細胞回収方法を提供する。
【解決手段】目開きが細胞Ｂよりも小さくなるように少なくとも一部を可溶性ゲルで形成したフィルタ１に細胞懸濁液Ａを通過させ、細胞懸濁液Ａ中の細胞Ｂを捕捉させる細胞Ｂ捕捉工程と、細胞捕捉工程により細胞Ｂが捕捉されたフィルタ１にゲル溶解液Ｃを供給して可溶性ゲルを溶解するゲル溶解工程と、ゲル溶解工程により生成されたゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄを回収する細胞回収工程とを含む細胞回収方法を提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞回収方法並びにフィルタ及び細胞回収装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、細胞捕捉材料から構成されたフィルタに細胞懸濁液を通過させることで、必要な細胞をフィルタにより捕捉する方法が知られている（例えば、特許文献１から４参照）。この際、フィルタによる細胞の捕捉は、フィルタ内の空隙で細胞がブラウン運動（自己振動）することで行われる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特許第４０３６３０４号公報
【特許文献２】特開２００５−３３６０８０号公報
【特許文献３】特開２００４−２３６５２７号公報
【特許文献４】特開２００６−２４６８８３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、上記のフィルタに大量の細胞懸濁液を通過させると、回収したい細胞がフィルタの奥に入り込んでしまう。この場合には、細胞の回収が困難になってしまうため、フィルタに逆方向から洗浄液を流し、細胞がフィルタ内部に入り込まないようにする工夫が必要であった。しかし、逆洗しすぎると、必要な細胞まで洗い流されてしまうため、洗浄液量の綿密な計算が必要であるとともに、細胞の収率が低下してしまうという不都合があった。
【０００５】
本発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、細胞を効率的に回収することができる細胞回収方法並びにフィルタ及び細胞回収装置を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明の第１の態様は、目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部を可溶性ゲルで形成したフィルタに細胞懸濁液を通過させ、前記細胞懸濁液中の前記細胞を捕捉させる細胞捕捉工程と、該細胞捕捉工程により細胞が捕捉された前記フィルタにゲル溶解液を供給して前記可溶性ゲルを溶解するゲル溶解工程と、該ゲル溶解工程により生成された前記ゲル溶解液、前記可溶性ゲル、および前記細胞の混合液を回収する細胞回収工程とを含む細胞回収方法である。
【０００７】
このような細胞回収方法によれば、細胞捕捉工程において、少なくとも一部を可溶性ゲルで形成したフィルタに細胞懸濁液が通過させられることで、細胞懸濁液中の細胞がフィルタに捕捉される。次に、ゲル溶解工程において、細胞が捕捉されたフィルタにゲル溶解液が供給され、可溶性ゲルが溶解される。次に、細胞回収工程において、ゲル溶解液、可溶性ゲル、および細胞の混合液が回収される。そして、この混合液から必要な細胞を容易に回収することができる。
【０００８】
このような細胞回収方法によれば、フィルタに逆方向から洗浄液を流す（逆洗）ことなく、必要な細胞を回収することができる。これにより、逆洗により細胞が流されてしまうことを防止することができ、細胞の収率を向上することができる。
【０００９】
上記の第１の態様において、前記ゲル溶解工程において、前記細胞捕捉工程における前記細胞懸濁液の流通方向とは逆方向に前記ゲル溶解液を通過させることとしてもよい。
細胞捕捉工程において、細胞懸濁液中の細胞は、フィルタの細胞懸濁液を流通させる側に多く捕捉される。したがって、細胞捕捉工程における細胞懸濁液の流通方向とは逆方向にゲル溶解液を通過させることで、フィルタに捕捉された細胞を容易に解放することができ、細胞の回収率を向上することができる。
【００１０】
上記の第１の態様において、前記ゲル溶解工程において、前記フィルタの少なくとも一部を前記ゲル溶解液中に浸漬することとしてもよい。
このようにすることで、効率的に可溶性ゲルを溶解してフィルタに捕捉された細胞を回収することができる。特に、フィルタの細胞懸濁液を流通させる側をゲル溶解液中に浸漬することで、当該位置に捕捉された多くの細胞を効率的に回収することができる。
【００１１】
本発明の第２の態様は、目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部が可溶性ゲルで形成されたフィルタである。
このようなフィルタによれば、細胞懸濁液が通過させることで、細胞懸濁液中の細胞を捕捉することができる。そして、このフィルタに、可溶性ゲルを溶解させるゲル溶解液を供給することで、ゲル溶解液、可溶性ゲル、および細胞の混合液を回収することができ、この混合液から必要な細胞を容易に回収することができる。
【００１２】
上記の第２の態様において、前記フィルタが、目開きが細胞以上の大きさを有する下地フィルタに可溶性ゲルがコーティングされて形成されていることとしてもよい。
このような下地フィルタに可溶性ゲルをコーティングすることで、細胞を捕捉するためのフィルタ（目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部が可溶性ゲルで形成されたフィルタ）を容易に作成することができる。
【００１３】
上記の第２の態様において、前記フィルタが、細粒状の可溶性ゲルにより形成されていることとしてもよい。
細粒状の可溶性ゲルによりフィルタを形成することで、細胞を捕捉するためのフィルタ（目開きが細胞よりも小さくなるように可溶性ゲルで形成されたフィルタ）を容易に作成することができる。
【００１４】
上記の第２の態様において、前記可溶性ゲルが、アルギン酸塩ゲルであることとしてもよい。
可溶性ゲルをアルギン酸塩ゲルとすることで、細胞に悪影響を与えることなく、細胞を捕捉するためのフィルタを形成することができる。
【００１５】
上記の第２の態様において、前記ゲル溶解液が、キレート剤を含む細胞等張液であることとしてもよい。
ゲル溶解液をキレート剤を含む細胞等張液とすることで、細胞に悪影響を与えることなく、可溶性ゲルを溶解させて細胞を回収することができる。
【００１６】
本発明の第３の態様は、上記のフィルタと、該フィルタに細胞懸濁液を供給する細胞懸濁液供給手段と、該細胞懸濁液供給手段により細胞懸濁液が供給されることで細胞懸濁液中の細胞が捕捉された前記フィルタに、前記可溶性ゲルを溶解させるゲル溶解液を供給するゲル溶解液供給手段と、該ゲル溶解液供給手段によりゲル溶解液が供給されることで生成された前記ゲル溶解液、前記可溶性ゲル、および前記細胞の混合液を回収する細胞回収手段とを備える細胞回収装置である。
【００１７】
このような細胞回収装置によれば、細胞懸濁液供給手段により、目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部が可溶性ゲルで形成されたフィルタに細胞懸濁液が供給されることで、細胞懸濁液中の細胞がフィルタに捕捉される。そして、ゲル溶解液供給手段により、細胞が捕捉されたフィルタにゲル溶解液が供給され、可溶性ゲルが溶解される。そして、細胞回収手段により、ゲル溶解液、可溶性ゲル、および細胞の混合液が回収される。そして、この混合液から必要な細胞を容易に回収することができる。
【００１８】
このような細胞回収装置によれば、フィルタに逆方向から洗浄液を流す（逆洗）ことなく、必要な細胞を回収することができる。これにより、逆洗により細胞が流されてしまうことを防止することができ、細胞の収率を向上することができる。
【発明の効果】
【００１９】
本発明によれば、細胞を効率的に回収することができるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】本発明の第１の実施形態に係るフィルタの模式図である。
【図２】図１のフィルタのベースとなる下地フィルタの模式図である。
【図３】図１のフィルタを有する細胞回収装置の模式図であり、（ａ）は細胞懸濁液を流通させる前の状態を示す図であり、（ｂ）は細胞捕捉工程の状態を示す図であり、（ｃ）はゲル溶解工程の状態を示す図であり、（ｄ）は細胞回収工程の状態を示す図である。
【図４】図１のフィルタを有する細胞回収装置の模式図であり、（ａ）は細胞懸濁液を流通させる前の状態を示す図であり、（ｂ）は細胞捕捉工程の状態を示す図であり、（ｃ）はゲル溶解工程の状態を示す図であり、（ｄ）は細胞回収工程の状態を示す図である。
【図５】図１のフィルタを有する細胞回収装置の模式図であり、（ａ）は細胞懸濁液を流通させる前の状態を示す図であり、（ｂ）は細胞捕捉工程の状態を示す図であり、（ｃ）および（ｄ）はゲル溶解工程の状態を示す図であり、（ｅ）は細胞回収工程の状態を示す図である。
【図６】本発明の第２の実施形態に係るフィルタを有する細胞回収装置の模式図であり、（ａ）は細胞懸濁液を流通させる前の状態を示す図であり、（ｂ）は細胞捕捉工程の状態を示す図であり、（ｃ）はゲル溶解工程の状態を示す図であり、（ｄ）は細胞回収工程の状態を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
［第１の実施形態］
本発明の第１の実施形態に係るフィルタ１、およびフィルタ１を備える細胞回収装置５、並びにその細胞回収方法について、図面を参照して以下に説明する。
本実施形態に係るフィルタ１は、図１に示されるように、目開きが細胞よりも小さくされたフィルタである。すなわち、フィルタ１は、細胞懸濁液中の細胞を捕捉できるサイズの空隙（目開き）を有するフィルタである。
【００２２】
このフィルタ１は、図２に示されるような下地フィルタ１０に、可溶性ゲルがコーティングされて形成されている。下地フィルタ１０は、図２に示されるように、目開きが細胞よりも大きい、すなわち、細胞懸濁液中の細胞を捕捉できないサイズの空隙（目開き）を有するフィルタである。下地フィルタ１０として、例えば不織布を採用することで、安価に大量生産ができるとともに、厚みや空隙を容易に変更することができる。
【００２３】
このような下地フィルタ１０に可溶性ゲルをコーティングすることで、細胞を捕捉するためのフィルタ、すなわち、目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部が可溶性ゲルで形成されたフィルタ１を容易に作成することができる。
【００２４】
ここで、可溶性ゲルは、例えばアルギン酸ナトリウム等のアルギン酸塩ゲルである。
可溶性ゲルをアルギン酸塩ゲルとすることで、細胞に悪影響を与えることなく、細胞懸濁液中の細胞を捕捉するためのフィルタ１を形成することができる。
【００２５】
具体的には、アルギン酸塩ゲルは、例えば、通常ビーズ作成などに使用される濃度０．５〜１％のものを使用する。フィルタ１の形成手順としては、まず、アルギン酸塩水溶液を下地フィルタ１０に通過させる。そして、完全にアルギン酸塩水溶液が切れた後に、濃度１０％程度の塩化カルシウム溶液を通過させることで、下地フィルタ１０をコーティングして、図１に示すフィルタ１を形成することができる。
【００２６】
このようなフィルタ１によれば、フィルタ１に細胞懸濁液を通過させることで、細胞懸濁液中の細胞を捕捉することができる。そして、このフィルタ１に、可溶性ゲルを溶解させるゲル溶解液を供給することで、下地フィルタ１０にコーティングされた可溶性ゲルを溶解させ、捕捉された細胞を解放することができる。そして、ゲル溶解液、可溶性ゲル、および細胞の混合液を回収することで、この混合液から必要な細胞を容易に回収することができる。
【００２７】
ここで、ゲル溶解液は、例えばモル濃度０．０１〜０．１Ｍ程度のエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）等のキレート剤を含む細胞等張液である。
ゲル溶解液をキレート剤を含む細胞等張液とすることで、細胞に悪影響を与えることなく、可溶性ゲルを溶解させて細胞懸濁液中の細胞を回収することができる。
【００２８】
上記のフィルタ１を用いた細胞回収方法について以下に説明する。
図３において、（ａ）は細胞懸濁液を流通させる前の状態を示す図であり、（ｂ）は細胞捕捉工程の状態を示す図であり、（ｃ）はゲル溶解工程の状態を示す図であり、（ｄ）は細胞回収工程の状態を示す図である。
【００２９】
ここで使用される細胞回収装置５は、図３（ａ）に示すように、前述のフィルタ１と、細胞懸濁液Ａを供給する細胞懸濁液供給手段（図示略）と、ゲル溶解液Ｃを供給するゲル溶解液供給手段（図示略）と、ゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄを回収する細胞回収手段（図示略）とを備えている。
【００３０】
フィルタ１は、例えば円筒形のケーシング６内に収容されている。ケーシング６には、細胞懸濁液Ａやゲル溶解液Ｃが供給される供給口７と、フィルタ１を通過した液体を排出する排出する排出口８が形成されている。細胞回収装置５は、供給口７を上方に、排出口８を下方に向けて配置される。また、供給口７および排出口８には、図示しないバルブが設けられており、このバルブを動作させることで、供給口７および排出口８を開閉するようになっている。
【００３１】
細胞懸濁液供給手段は、例えばチューブおよびポンプから構成され、図示しない細胞懸濁液収容容器から、供給口７を介してフィルタ１に細胞懸濁液Ａを供給するようになっている。
【００３２】
ゲル溶解液供給手段は、例えばチューブおよびポンプから構成され、図示しないゲル溶解液収容容器から、供給口７を介してフィルタ１にゲル溶解液Ｃを供給するようになっている。なお、ゲル溶解液供給手段として、ゲル溶解液収容容器から人手で供給口７に直接ゲル溶解液を供給してもよい。
【００３３】
細胞回収手段は、例えば排出口８に接続されたチューブおよび回収容器９から構成され、ゲル溶解液供給手段によりゲル溶解液Ｃが供給されることで生成されたゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄを回収するようになっている。
【００３４】
以下に、上記の細胞回収装置５を用いた細胞回収方法について説明する。
まず、細胞捕捉工程においては、図３（ｂ）に示すように、細胞懸濁液供給手段により、供給口７を介してケーシング６内のフィルタ１に細胞懸濁液Ａが供給される。これにより、フィルタ１に細胞懸濁液Ａ中の細胞Ｂが捕捉され、水等の細胞Ｂ以外の物質は、フィルタ１を通過して、排出口８からケーシング６の外部に排出される。
【００３５】
次に、ゲル溶解工程においては、図３（ｃ）に示すように、ゲル溶解液供給手段により、供給口７を介して、細胞Ｂが捕捉されたフィルタ１にゲル溶解液Ｃが供給される。これにより、フィルタ１の可溶性ゲルが溶解され、フィルタ１の空隙が広がり、フィルタ１に捕捉された細胞Ｂが解放される。
【００３６】
次に、細胞回収工程においては、図３（ｄ）に示すように、排出口８に設けられたバルブが開かれて、排出口８に接続されたチューブを介して、ゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄが、回収容器９に排出される。
【００３７】
以上のように、本実施形態に係る細胞回収装置５および細胞回収方法によれば、細胞捕捉工程において、一部を可溶性ゲルで形成したフィルタ１に細胞懸濁液Ａが通過させられることで、細胞懸濁液Ａ中の細胞Ｂがフィルタ１に捕捉される。次に、ゲル溶解工程において、細胞Ｂが捕捉されたフィルタ１にゲル溶解液Ｃが供給され、可溶性ゲルが溶解される。次に、細胞回収工程において、ゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄが回収される。そして、この混合液Ｄから必要な細胞Ｂを容易に回収することができる。
【００３８】
このような細胞回収装置５および細胞回収方法によれば、フィルタ１に逆方向から洗浄液を流す（逆洗）ことなく、必要な細胞Ｂを回収することができる。これにより、逆洗により細胞Ｂが流されてしまうことを防止することができ、細胞Ｂの収率を向上することができる。
【００３９】
なお、本実施形態に係る細胞回収装置５および細胞回収方法において、図４（ｃ）に示すように、ゲル溶解工程において、細胞捕捉工程における細胞懸濁液Ａの流通方向とは逆方向にゲル溶解液Ｃを通過させることとしてもよい。この場合には、ゲル溶解工程において、細胞回収装置５の上下をひっくり返す、すなわち、細胞回収装置５を、供給口７を下方に、排出口８を上方に向けて配置する。
【００４０】
ここで、細胞捕捉工程において、細胞懸濁液Ａ中の細胞Ｂは、フィルタ１の細胞懸濁液Ａを流通させる側に多く捕捉される。したがって、細胞捕捉工程における細胞懸濁液Ａの流通方向とは逆方向にゲル溶解液Ｃを通過させることで、フィルタ１に捕捉された細胞Ｂを容易に解放することができ、細胞Ｂの回収率を向上することができる。
【００４１】
また、上記の細胞回収装置５および細胞回収方法において、図５（ｄ）に示すように、ゲル溶解工程において、フィルタ１の一部（細胞懸濁液Ａを流通させる側）をゲル溶解液Ｃ中に浸漬して、フィルタ１の可溶性ゲルが溶解されるまで静置しておくこととしてもよい。
【００４２】
このようにすることで、効率的に可溶性ゲルを溶解して、フィルタ１に捕捉された細胞Ｂを回収することができる。特に、フィルタ１の細胞懸濁液Ａを流通させる側をゲル溶解液Ｃ中に浸漬することで、当位置に捕捉された多くの細胞Ｂを効率的に回収することができる。また、このような細胞回収方法によれば、全ての可溶性ゲルを溶解させることなくフィルタ１に捕捉された細胞Ｂを回収することができるため、混合液Ｄ中の不純物（可溶性ゲルおよびゲル溶解液Ｃ）の混入を少なくすることができる。
【００４３】
［第２の実施形態］
次に、本発明の第２の実施形態に係るフィルタ２について、図６を参照して以下に説明する。
本実施形に係るフィルタ２が第１の実施形態に係るフィルタ１と異なる点は、その構成および形成方法である。具体的には、本実施形態に係るフィルタ２は、下地フィルタに可溶性ゲルをコーティングして形成するのではなく、細粒状の可溶性ゲルにより形成されている。以降では、本実施形態に係るフィルタ２について、第１の実施形態に係るフィルタ１と共通する点については説明を省略し、異なる点について主に説明する。
【００４４】
本実施形態に係るフィルタ２の形成方法について以下に説明する。
ここでは、アルギン酸ゲル自体により細粒（ビーズ）を作成する方法と、細粒（ビーズ）の表面にアルギン酸ゲルをコーティングする方法の２つの方法を例に挙げて説明する。
【００４５】
アルギン酸ゲル自体によりビーズを作成する場合には、シリンジに０．５〜１％アルギン酸塩水溶液を充填し、シリンジの注射針から、１０％塩化カルシウム溶液中に滴下することでビーズを作成する。その後、ビーズを塩化カルシウム溶液から回収し、細胞等張液で洗浄する。ここで、ビーズの直径は、細胞を分離できる５０〜５０００μｍの範囲であればよい。
【００４６】
一方、ビーズの表面にアルギン酸ゲルをコーティングする場合には、５０〜５０００μｍの直径のビーズを容器に充填する。ここで、ビーズの材料は、無機材料（例えば、ガラスビーズ、セラミックスビーズなど）、有機材料（例えば、ポリエチレン、ポリスチレン、ゴムビーズなど）のいずれでもよく、特に限定されるものではない。ビーズの充填された容器に、濃度０．５〜１％のアルギン酸塩水溶液を通過させ、完全にアルギン酸塩水溶液が切れた後に、濃度１０％の塩化カルシウム溶液を通過させる。
【００４７】
図６（ａ）に示すように、上記のいずれの方法で作成したビーズ３をケーシング６内に敷き詰めることで、本実施形態に係るフィルタ２を有する細胞回収装置４が形成される。
このフィルタ２は、ビーズ３の隙間が細胞よりも小さく構成されている。すなわち、本実施形態に係るフィルタ２によれば、細胞懸濁液中の細胞を捕捉することができる。
【００４８】
上記のフィルタ２を有する細胞回収装置４の作用について以下に説明する。
まず、図６（ｂ）に示すように、細胞捕捉工程において、フィルタ２に細胞懸濁液Ａを通過させることで、ビーズ３の隙間から細胞懸濁液Ａ中の赤血球などの不要物を含む液体部分が流れ落ち、細胞Ｂがビーズ３の間にトラップされる。すなわち、細胞懸濁液Ａ中の細胞Ｂを捕捉することができる。
【００４９】
次に、図６（ｃ）に示すように、ゲル溶解工程において、このフィルタ２に、可溶性ゲルを溶解させるゲル溶解液Ｃを供給することで、ビーズ３（またはビーズ３の表面にコーティングされた可溶性ゲル）を溶解させ、ビーズ３間の空隙率を上げ、またはビーズ３自体を無くして、ビーズ３の間に捕捉された細胞を解放することができる。
【００５０】
次に、図６（ｄ）に示すように、細胞回収工程において、ゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄが回収される。そして、この混合液Ｄから必要な細胞Ｂを容易に回収することができる。
【００５１】
以上のように、本実施形態に係るフィルタ２および細胞回収装置４並びに細胞回収方法によれば、第１の実施形態と同様に、フィルタ２に逆方向から洗浄液を流す（逆洗）ことなく、必要な細胞Ｂを回収することができる。これにより、逆洗により細胞Ｂが流されてしまうことを防止することができ、細胞Ｂの収率を向上することができる。
【００５２】
以上、本発明の各実施形態について図面を参照して詳述してきたが、具体的な構成はこの実施形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲の設計変更等も含まれる。例えば、本発明を各実施形態を適宜組み合わせた実施形態に適用してもよく、特に限定されるものではない。
【００５３】
例えば、第２の実施形態に係るフィルタ２および細胞回収装置４において、第１の実施形態において説明した図４および図５に示す細胞回収方法を採用してもよい。
また、可溶性ゲルとして、アルギン酸ナトリウム等のアルギン酸塩ゲルを例に挙げて説明したが、生体適合性を有する可溶性ゲルであれば、この例に限定されるものではない。
【符号の説明】
【００５４】
１，２ フィルタ
３ ビーズ
４，５ 細胞回収装置
６ ケーシング
７ 供給口
８ 排出口
９ 回収容器
１０ 下地フィルタ
Ａ 細胞懸濁液
Ｂ 細胞
Ｃ ゲル溶解液
Ｄ 混合液
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞回収方法並びにフィルタ及び細胞回収装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、細胞捕捉材料から構成されたフィルタに細胞懸濁液を通過させることで、必要な細胞をフィルタにより捕捉する方法が知られている（例えば、特許文献１から４参照）。この際、フィルタによる細胞の捕捉は、フィルタ内の空隙で細胞がブラウン運動（自己振動）することで行われる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特許第４０３６３０４号公報
【特許文献２】特開２００５−３３６０８０号公報
【特許文献３】特開２００４−２３６５２７号公報
【特許文献４】特開２００６−２４６８８３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、上記のフィルタに大量の細胞懸濁液を通過させると、回収したい細胞がフィルタの奥に入り込んでしまう。この場合には、細胞の回収が困難になってしまうため、フィルタに逆方向から洗浄液を流し、細胞がフィルタ内部に入り込まないようにする工夫が必要であった。しかし、逆洗しすぎると、必要な細胞まで洗い流されてしまうため、洗浄液量の綿密な計算が必要であるとともに、細胞の収率が低下してしまうという不都合があった。
【０００５】
本発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、細胞を効率的に回収することができる細胞回収方法並びにフィルタ及び細胞回収装置を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
上記目的を達成するために、本発明は以下の手段を提供する。
本発明の第１の態様は、目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部を可溶性ゲルで形成したフィルタに細胞懸濁液を通過させ、前記細胞懸濁液中の前記細胞を捕捉させる細胞捕捉工程と、該細胞捕捉工程により細胞が捕捉された前記フィルタにゲル溶解液を供給して前記可溶性ゲルを溶解するゲル溶解工程と、該ゲル溶解工程により生成された前記ゲル溶解液、前記可溶性ゲル、および前記細胞の混合液を回収する細胞回収工程とを含む細胞回収方法である。
【０００７】
このような細胞回収方法によれば、細胞捕捉工程において、少なくとも一部を可溶性ゲルで形成したフィルタに細胞懸濁液が通過させられることで、細胞懸濁液中の細胞がフィルタに捕捉される。次に、ゲル溶解工程において、細胞が捕捉されたフィルタにゲル溶解液が供給され、可溶性ゲルが溶解される。次に、細胞回収工程において、ゲル溶解液、可溶性ゲル、および細胞の混合液が回収される。そして、この混合液から必要な細胞を容易に回収することができる。
【０００８】
このような細胞回収方法によれば、フィルタに逆方向から洗浄液を流す（逆洗）ことなく、必要な細胞を回収することができる。これにより、逆洗により細胞が流されてしまうことを防止することができ、細胞の収率を向上することができる。
【０００９】
上記の第１の態様において、前記ゲル溶解工程において、前記細胞捕捉工程における前記細胞懸濁液の流通方向とは逆方向に前記ゲル溶解液を通過させることとしてもよい。
細胞捕捉工程において、細胞懸濁液中の細胞は、フィルタの細胞懸濁液を流通させる側に多く捕捉される。したがって、細胞捕捉工程における細胞懸濁液の流通方向とは逆方向にゲル溶解液を通過させることで、フィルタに捕捉された細胞を容易に解放することができ、細胞の回収率を向上することができる。
【００１０】
上記の第１の態様において、前記ゲル溶解工程において、前記フィルタの少なくとも一部を前記ゲル溶解液中に浸漬することとしてもよい。
このようにすることで、効率的に可溶性ゲルを溶解してフィルタに捕捉された細胞を回収することができる。特に、フィルタの細胞懸濁液を流通させる側をゲル溶解液中に浸漬することで、当該位置に捕捉された多くの細胞を効率的に回収することができる。
【００１１】
本発明の第２の態様は、目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部が可溶性ゲルで形成されたフィルタである。
このようなフィルタによれば、細胞懸濁液が通過させることで、細胞懸濁液中の細胞を捕捉することができる。そして、このフィルタに、可溶性ゲルを溶解させるゲル溶解液を供給することで、ゲル溶解液、可溶性ゲル、および細胞の混合液を回収することができ、この混合液から必要な細胞を容易に回収することができる。
【００１２】
上記の第２の態様において、前記フィルタが、目開きが細胞以上の大きさを有する下地フィルタに可溶性ゲルがコーティングされて形成されていることとしてもよい。
このような下地フィルタに可溶性ゲルをコーティングすることで、細胞を捕捉するためのフィルタ（目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部が可溶性ゲルで形成されたフィルタ）を容易に作成することができる。
【００１３】
上記の第２の態様において、前記フィルタが、細粒状の可溶性ゲルにより形成されていることとしてもよい。
細粒状の可溶性ゲルによりフィルタを形成することで、細胞を捕捉するためのフィルタ（目開きが細胞よりも小さくなるように可溶性ゲルで形成されたフィルタ）を容易に作成することができる。
【００１４】
上記の第２の態様において、前記可溶性ゲルが、アルギン酸塩ゲルであることとしてもよい。
可溶性ゲルをアルギン酸塩ゲルとすることで、細胞に悪影響を与えることなく、細胞を捕捉するためのフィルタを形成することができる。
【００１５】
上記の第２の態様において、前記ゲル溶解液が、キレート剤を含む細胞等張液であることとしてもよい。
ゲル溶解液をキレート剤を含む細胞等張液とすることで、細胞に悪影響を与えることなく、可溶性ゲルを溶解させて細胞を回収することができる。
【００１６】
本発明の第３の態様は、上記のフィルタと、該フィルタに細胞懸濁液を供給する細胞懸濁液供給手段と、該細胞懸濁液供給手段により細胞懸濁液が供給されることで細胞懸濁液中の細胞が捕捉された前記フィルタに、前記可溶性ゲルを溶解させるゲル溶解液を供給するゲル溶解液供給手段と、該ゲル溶解液供給手段によりゲル溶解液が供給されることで生成された前記ゲル溶解液、前記可溶性ゲル、および前記細胞の混合液を回収する細胞回収手段とを備える細胞回収装置である。
【００１７】
このような細胞回収装置によれば、細胞懸濁液供給手段により、目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部が可溶性ゲルで形成されたフィルタに細胞懸濁液が供給されることで、細胞懸濁液中の細胞がフィルタに捕捉される。そして、ゲル溶解液供給手段により、細胞が捕捉されたフィルタにゲル溶解液が供給され、可溶性ゲルが溶解される。そして、細胞回収手段により、ゲル溶解液、可溶性ゲル、および細胞の混合液が回収される。そして、この混合液から必要な細胞を容易に回収することができる。
【００１８】
このような細胞回収装置によれば、フィルタに逆方向から洗浄液を流す（逆洗）ことなく、必要な細胞を回収することができる。これにより、逆洗により細胞が流されてしまうことを防止することができ、細胞の収率を向上することができる。
【発明の効果】
【００１９】
本発明によれば、細胞を効率的に回収することができるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】本発明の第１の実施形態に係るフィルタの模式図である。
【図２】図１のフィルタのベースとなる下地フィルタの模式図である。
【図３】図１のフィルタを有する細胞回収装置の模式図であり、（ａ）は細胞懸濁液を流通させる前の状態を示す図であり、（ｂ）は細胞捕捉工程の状態を示す図であり、（ｃ）はゲル溶解工程の状態を示す図であり、（ｄ）は細胞回収工程の状態を示す図である。
【図４】図１のフィルタを有する細胞回収装置の模式図であり、（ａ）は細胞懸濁液を流通させる前の状態を示す図であり、（ｂ）は細胞捕捉工程の状態を示す図であり、（ｃ）はゲル溶解工程の状態を示す図であり、（ｄ）は細胞回収工程の状態を示す図である。
【図５】図１のフィルタを有する細胞回収装置の模式図であり、（ａ）は細胞懸濁液を流通させる前の状態を示す図であり、（ｂ）は細胞捕捉工程の状態を示す図であり、（ｃ）および（ｄ）はゲル溶解工程の状態を示す図であり、（ｅ）は細胞回収工程の状態を示す図である。
【図６】本発明の第２の実施形態に係るフィルタを有する細胞回収装置の模式図であり、（ａ）は細胞懸濁液を流通させる前の状態を示す図であり、（ｂ）は細胞捕捉工程の状態を示す図であり、（ｃ）はゲル溶解工程の状態を示す図であり、（ｄ）は細胞回収工程の状態を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
［第１の実施形態］
本発明の第１の実施形態に係るフィルタ１、およびフィルタ１を備える細胞回収装置５、並びにその細胞回収方法について、図面を参照して以下に説明する。
本実施形態に係るフィルタ１は、図１に示されるように、目開きが細胞よりも小さくされたフィルタである。すなわち、フィルタ１は、細胞懸濁液中の細胞を捕捉できるサイズの空隙（目開き）を有するフィルタである。
【００２２】
このフィルタ１は、図２に示されるような下地フィルタ１０に、可溶性ゲルがコーティングされて形成されている。下地フィルタ１０は、図２に示されるように、目開きが細胞よりも大きい、すなわち、細胞懸濁液中の細胞を捕捉できないサイズの空隙（目開き）を有するフィルタである。下地フィルタ１０として、例えば不織布を採用することで、安価に大量生産ができるとともに、厚みや空隙を容易に変更することができる。
【００２３】
このような下地フィルタ１０に可溶性ゲルをコーティングすることで、細胞を捕捉するためのフィルタ、すなわち、目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部が可溶性ゲルで形成されたフィルタ１を容易に作成することができる。
【００２４】
ここで、可溶性ゲルは、例えばアルギン酸ナトリウム等のアルギン酸塩ゲルである。
可溶性ゲルをアルギン酸塩ゲルとすることで、細胞に悪影響を与えることなく、細胞懸濁液中の細胞を捕捉するためのフィルタ１を形成することができる。
【００２５】
具体的には、アルギン酸塩ゲルは、例えば、通常ビーズ作成などに使用される濃度０．５〜１％のものを使用する。フィルタ１の形成手順としては、まず、アルギン酸塩水溶液を下地フィルタ１０に通過させる。そして、完全にアルギン酸塩水溶液が切れた後に、濃度１０％程度の塩化カルシウム溶液を通過させることで、下地フィルタ１０をコーティングして、図１に示すフィルタ１を形成することができる。
【００２６】
このようなフィルタ１によれば、フィルタ１に細胞懸濁液を通過させることで、細胞懸濁液中の細胞を捕捉することができる。そして、このフィルタ１に、可溶性ゲルを溶解させるゲル溶解液を供給することで、下地フィルタ１０にコーティングされた可溶性ゲルを溶解させ、捕捉された細胞を解放することができる。そして、ゲル溶解液、可溶性ゲル、および細胞の混合液を回収することで、この混合液から必要な細胞を容易に回収することができる。
【００２７】
ここで、ゲル溶解液は、例えばモル濃度０．０１〜０．１Ｍ程度のエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）等のキレート剤を含む細胞等張液である。
ゲル溶解液をキレート剤を含む細胞等張液とすることで、細胞に悪影響を与えることなく、可溶性ゲルを溶解させて細胞懸濁液中の細胞を回収することができる。
【００２８】
上記のフィルタ１を用いた細胞回収方法について以下に説明する。
図３において、（ａ）は細胞懸濁液を流通させる前の状態を示す図であり、（ｂ）は細胞捕捉工程の状態を示す図であり、（ｃ）はゲル溶解工程の状態を示す図であり、（ｄ）は細胞回収工程の状態を示す図である。
【００２９】
ここで使用される細胞回収装置５は、図３（ａ）に示すように、前述のフィルタ１と、細胞懸濁液Ａを供給する細胞懸濁液供給手段（図示略）と、ゲル溶解液Ｃを供給するゲル溶解液供給手段（図示略）と、ゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄを回収する細胞回収手段（図示略）とを備えている。
【００３０】
フィルタ１は、例えば円筒形のケーシング６内に収容されている。ケーシング６には、細胞懸濁液Ａやゲル溶解液Ｃが供給される供給口７と、フィルタ１を通過した液体を排出する排出する排出口８が形成されている。細胞回収装置５は、供給口７を上方に、排出口８を下方に向けて配置される。また、供給口７および排出口８には、図示しないバルブが設けられており、このバルブを動作させることで、供給口７および排出口８を開閉するようになっている。
【００３１】
細胞懸濁液供給手段は、例えばチューブおよびポンプから構成され、図示しない細胞懸濁液収容容器から、供給口７を介してフィルタ１に細胞懸濁液Ａを供給するようになっている。
【００３２】
ゲル溶解液供給手段は、例えばチューブおよびポンプから構成され、図示しないゲル溶解液収容容器から、供給口７を介してフィルタ１にゲル溶解液Ｃを供給するようになっている。なお、ゲル溶解液供給手段として、ゲル溶解液収容容器から人手で供給口７に直接ゲル溶解液を供給してもよい。
【００３３】
細胞回収手段は、例えば排出口８に接続されたチューブおよび回収容器９から構成され、ゲル溶解液供給手段によりゲル溶解液Ｃが供給されることで生成されたゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄを回収するようになっている。
【００３４】
以下に、上記の細胞回収装置５を用いた細胞回収方法について説明する。
まず、細胞捕捉工程においては、図３（ｂ）に示すように、細胞懸濁液供給手段により、供給口７を介してケーシング６内のフィルタ１に細胞懸濁液Ａが供給される。これにより、フィルタ１に細胞懸濁液Ａ中の細胞Ｂが捕捉され、水等の細胞Ｂ以外の物質は、フィルタ１を通過して、排出口８からケーシング６の外部に排出される。
【００３５】
次に、ゲル溶解工程においては、図３（ｃ）に示すように、ゲル溶解液供給手段により、供給口７を介して、細胞Ｂが捕捉されたフィルタ１にゲル溶解液Ｃが供給される。これにより、フィルタ１の可溶性ゲルが溶解され、フィルタ１の空隙が広がり、フィルタ１に捕捉された細胞Ｂが解放される。
【００３６】
次に、細胞回収工程においては、図３（ｄ）に示すように、排出口８に設けられたバルブが開かれて、排出口８に接続されたチューブを介して、ゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄが、回収容器９に排出される。
【００３７】
以上のように、本実施形態に係る細胞回収装置５および細胞回収方法によれば、細胞捕捉工程において、一部を可溶性ゲルで形成したフィルタ１に細胞懸濁液Ａが通過させられることで、細胞懸濁液Ａ中の細胞Ｂがフィルタ１に捕捉される。次に、ゲル溶解工程において、細胞Ｂが捕捉されたフィルタ１にゲル溶解液Ｃが供給され、可溶性ゲルが溶解される。次に、細胞回収工程において、ゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄが回収される。そして、この混合液Ｄから必要な細胞Ｂを容易に回収することができる。
【００３８】
このような細胞回収装置５および細胞回収方法によれば、フィルタ１に逆方向から洗浄液を流す（逆洗）ことなく、必要な細胞Ｂを回収することができる。これにより、逆洗により細胞Ｂが流されてしまうことを防止することができ、細胞Ｂの収率を向上することができる。
【００３９】
なお、本実施形態に係る細胞回収装置５および細胞回収方法において、図４（ｃ）に示すように、ゲル溶解工程において、細胞捕捉工程における細胞懸濁液Ａの流通方向とは逆方向にゲル溶解液Ｃを通過させることとしてもよい。この場合には、ゲル溶解工程において、細胞回収装置５の上下をひっくり返す、すなわち、細胞回収装置５を、供給口７を下方に、排出口８を上方に向けて配置する。
【００４０】
ここで、細胞捕捉工程において、細胞懸濁液Ａ中の細胞Ｂは、フィルタ１の細胞懸濁液Ａを流通させる側に多く捕捉される。したがって、細胞捕捉工程における細胞懸濁液Ａの流通方向とは逆方向にゲル溶解液Ｃを通過させることで、フィルタ１に捕捉された細胞Ｂを容易に解放することができ、細胞Ｂの回収率を向上することができる。
【００４１】
また、上記の細胞回収装置５および細胞回収方法において、図５（ｄ）に示すように、ゲル溶解工程において、フィルタ１の一部（細胞懸濁液Ａを流通させる側）をゲル溶解液Ｃ中に浸漬して、フィルタ１の可溶性ゲルが溶解されるまで静置しておくこととしてもよい。
【００４２】
このようにすることで、効率的に可溶性ゲルを溶解して、フィルタ１に捕捉された細胞Ｂを回収することができる。特に、フィルタ１の細胞懸濁液Ａを流通させる側をゲル溶解液Ｃ中に浸漬することで、当位置に捕捉された多くの細胞Ｂを効率的に回収することができる。また、このような細胞回収方法によれば、全ての可溶性ゲルを溶解させることなくフィルタ１に捕捉された細胞Ｂを回収することができるため、混合液Ｄ中の不純物（可溶性ゲルおよびゲル溶解液Ｃ）の混入を少なくすることができる。
【００４３】
［第２の実施形態］
次に、本発明の第２の実施形態に係るフィルタ２について、図６を参照して以下に説明する。
本実施形に係るフィルタ２が第１の実施形態に係るフィルタ１と異なる点は、その構成および形成方法である。具体的には、本実施形態に係るフィルタ２は、下地フィルタに可溶性ゲルをコーティングして形成するのではなく、細粒状の可溶性ゲルにより形成されている。以降では、本実施形態に係るフィルタ２について、第１の実施形態に係るフィルタ１と共通する点については説明を省略し、異なる点について主に説明する。
【００４４】
本実施形態に係るフィルタ２の形成方法について以下に説明する。
ここでは、アルギン酸ゲル自体により細粒（ビーズ）を作成する方法と、細粒（ビーズ）の表面にアルギン酸ゲルをコーティングする方法の２つの方法を例に挙げて説明する。
【００４５】
アルギン酸ゲル自体によりビーズを作成する場合には、シリンジに０．５〜１％アルギン酸塩水溶液を充填し、シリンジの注射針から、１０％塩化カルシウム溶液中に滴下することでビーズを作成する。その後、ビーズを塩化カルシウム溶液から回収し、細胞等張液で洗浄する。ここで、ビーズの直径は、細胞を分離できる５０〜５０００μｍの範囲であればよい。
【００４６】
一方、ビーズの表面にアルギン酸ゲルをコーティングする場合には、５０〜５０００μｍの直径のビーズを容器に充填する。ここで、ビーズの材料は、無機材料（例えば、ガラスビーズ、セラミックスビーズなど）、有機材料（例えば、ポリエチレン、ポリスチレン、ゴムビーズなど）のいずれでもよく、特に限定されるものではない。ビーズの充填された容器に、濃度０．５〜１％のアルギン酸塩水溶液を通過させ、完全にアルギン酸塩水溶液が切れた後に、濃度１０％の塩化カルシウム溶液を通過させる。
【００４７】
図６（ａ）に示すように、上記のいずれの方法で作成したビーズ３をケーシング６内に敷き詰めることで、本実施形態に係るフィルタ２を有する細胞回収装置４が形成される。
このフィルタ２は、ビーズ３の隙間が細胞よりも小さく構成されている。すなわち、本実施形態に係るフィルタ２によれば、細胞懸濁液中の細胞を捕捉することができる。
【００４８】
上記のフィルタ２を有する細胞回収装置４の作用について以下に説明する。
まず、図６（ｂ）に示すように、細胞捕捉工程において、フィルタ２に細胞懸濁液Ａを通過させることで、ビーズ３の隙間から細胞懸濁液Ａ中の赤血球などの不要物を含む液体部分が流れ落ち、細胞Ｂがビーズ３の間にトラップされる。すなわち、細胞懸濁液Ａ中の細胞Ｂを捕捉することができる。
【００４９】
次に、図６（ｃ）に示すように、ゲル溶解工程において、このフィルタ２に、可溶性ゲルを溶解させるゲル溶解液Ｃを供給することで、ビーズ３（またはビーズ３の表面にコーティングされた可溶性ゲル）を溶解させ、ビーズ３間の空隙率を上げ、またはビーズ３自体を無くして、ビーズ３の間に捕捉された細胞を解放することができる。
【００５０】
次に、図６（ｄ）に示すように、細胞回収工程において、ゲル溶解液Ｃ、可溶性ゲル、および細胞Ｂの混合液Ｄが回収される。そして、この混合液Ｄから必要な細胞Ｂを容易に回収することができる。
【００５１】
以上のように、本実施形態に係るフィルタ２および細胞回収装置４並びに細胞回収方法によれば、第１の実施形態と同様に、フィルタ２に逆方向から洗浄液を流す（逆洗）ことなく、必要な細胞Ｂを回収することができる。これにより、逆洗により細胞Ｂが流されてしまうことを防止することができ、細胞Ｂの収率を向上することができる。
【００５２】
以上、本発明の各実施形態について図面を参照して詳述してきたが、具体的な構成はこの実施形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲の設計変更等も含まれる。例えば、本発明を各実施形態を適宜組み合わせた実施形態に適用してもよく、特に限定されるものではない。
【００５３】
例えば、第２の実施形態に係るフィルタ２および細胞回収装置４において、第１の実施形態において説明した図４および図５に示す細胞回収方法を採用してもよい。
また、可溶性ゲルとして、アルギン酸ナトリウム等のアルギン酸塩ゲルを例に挙げて説明したが、生体適合性を有する可溶性ゲルであれば、この例に限定されるものではない。
【符号の説明】
【００５４】
１，２ フィルタ
３ ビーズ
４，５ 細胞回収装置
６ ケーシング
７ 供給口
８ 排出口
９ 回収容器
１０ 下地フィルタ
Ａ 細胞懸濁液
Ｂ 細胞
Ｃ ゲル溶解液
Ｄ 混合液
【特許請求の範囲】
【請求項１】
目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部を可溶性ゲルで形成したフィルタに細胞懸濁液を通過させ、前記細胞懸濁液中の前記細胞を捕捉させる細胞捕捉工程と、
該細胞捕捉工程により細胞が捕捉された前記フィルタにゲル溶解液を供給して前記可溶性ゲルを溶解するゲル溶解工程と、
該ゲル溶解工程により生成された前記ゲル溶解液、前記可溶性ゲル、および前記細胞の混合液を回収する細胞回収工程とを含む細胞回収方法。
【請求項２】
前記ゲル溶解工程において、前記細胞捕捉工程における前記細胞懸濁液の流通方向とは逆方向に前記ゲル溶解液を通過させる請求項１に記載の細胞回収方法。
【請求項３】
前記ゲル溶解工程において、前記フィルタの少なくとも一部を前記ゲル溶解液中に浸漬する請求項１に記載の細胞回収方法。
【請求項４】
目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部が可溶性ゲルで形成されたフィルタ。
【請求項５】
前記フィルタが、目開きが細胞以上の大きさを有する下地フィルタに可溶性ゲルがコーティングされて形成されている請求項４に記載のフィルタ。
【請求項６】
前記フィルタが、細粒状の可溶性ゲルにより形成されている請求項４に記載のフィルタ。
【請求項７】
前記可溶性ゲルが、アルギン酸塩ゲルである請求項４に記載のフィルタ。
【請求項８】
前記ゲル溶解液が、キレート剤を含む細胞等張液である請求項４に記載のフィルタ。
【請求項９】
請求項４に記載のフィルタと、
該フィルタに細胞懸濁液を供給する細胞懸濁液供給手段と、
該細胞懸濁液供給手段により細胞懸濁液が供給されることで細胞懸濁液中の細胞が捕捉された前記フィルタに、前記可溶性ゲルを溶解させるゲル溶解液を供給するゲル溶解液供給手段と、
該ゲル溶解液供給手段によりゲル溶解液が供給されることで生成された前記ゲル溶解液、前記可溶性ゲル、および前記細胞の混合液を回収する細胞回収手段とを備える細胞回収装置。
【請求項１】
目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部を可溶性ゲルで形成したフィルタに細胞懸濁液を通過させ、前記細胞懸濁液中の前記細胞を捕捉させる細胞捕捉工程と、
該細胞捕捉工程により細胞が捕捉された前記フィルタにゲル溶解液を供給して前記可溶性ゲルを溶解するゲル溶解工程と、
該ゲル溶解工程により生成された前記ゲル溶解液、前記可溶性ゲル、および前記細胞の混合液を回収する細胞回収工程とを含む細胞回収方法。
【請求項２】
前記ゲル溶解工程において、前記細胞捕捉工程における前記細胞懸濁液の流通方向とは逆方向に前記ゲル溶解液を通過させる請求項１に記載の細胞回収方法。
【請求項３】
前記ゲル溶解工程において、前記フィルタの少なくとも一部を前記ゲル溶解液中に浸漬する請求項１に記載の細胞回収方法。
【請求項４】
目開きが細胞よりも小さくなるように少なくとも一部が可溶性ゲルで形成されたフィルタ。
【請求項５】
前記フィルタが、目開きが細胞以上の大きさを有する下地フィルタに可溶性ゲルがコーティングされて形成されている請求項４に記載のフィルタ。
【請求項６】
前記フィルタが、細粒状の可溶性ゲルにより形成されている請求項４に記載のフィルタ。
【請求項７】
前記可溶性ゲルが、アルギン酸塩ゲルである請求項４に記載のフィルタ。
【請求項８】
前記ゲル溶解液が、キレート剤を含む細胞等張液である請求項４に記載のフィルタ。
【請求項９】
請求項４に記載のフィルタと、
該フィルタに細胞懸濁液を供給する細胞懸濁液供給手段と、
該細胞懸濁液供給手段により細胞懸濁液が供給されることで細胞懸濁液中の細胞が捕捉された前記フィルタに、前記可溶性ゲルを溶解させるゲル溶解液を供給するゲル溶解液供給手段と、
該ゲル溶解液供給手段によりゲル溶解液が供給されることで生成された前記ゲル溶解液、前記可溶性ゲル、および前記細胞の混合液を回収する細胞回収手段とを備える細胞回収装置。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【公開番号】特開２０１２−３４６３７（Ｐ２０１２−３４６３７Ａ）
【公開日】平成２４年２月２３日（２０１２．２．２３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−１７８４０２（Ｐ２０１０−１７８４０２）
【出願日】平成２２年８月９日（２０１０．８．９）
【出願人】（００００００３７６）オリンパス株式会社 (11,466)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年２月２３日（２０１２．２．２３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年８月９日（２０１０．８．９）
【出願人】（００００００３７６）オリンパス株式会社 (11,466)
【Ｆターム（参考）】
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