細胞培養の改善
本発明は、ほ乳動物細胞培養における組換えタンパク質、例えば抗体を製造する改善された方法及び組成物を記述する。また、本発明は、ほ乳動物細胞培養におけるタンパク質生産性の改善に使用することができる、改善された産生培地を含めた改善された細胞培地、供給溶液、及び組合せ供給液を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ａ部、Ｂ部及びＣ部を含み、
ａ）Ａ部は、以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地から本質的になり、
ｂ）Ｂ部は無機鉄源から本質的になり、
ｃ）Ｃ部は、組換え増殖因子、緩衝剤、重量オスモル濃度調節剤、エネルギー源、及び少なくとも２種類の非動物加水分解物を含む、
無血清細胞培地。
【請求項２】
Ａ部が、非鉄（ＩＩ）金属イオン、ビタミン、又は両方の組合せを更に含む、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項３】
Ｂ部の無機鉄源がクエン酸鉄（ＩＩＩ）である、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項４】
最終溶液濃度約１２２．５ｍｇ／Ｌ又は０．５ｍＭのクエン酸鉄（ＩＩＩ）を含む、請求項３に記載の細胞培地。
【請求項５】
Ｃ部の組換え増殖因子が、インスリン又は組換え類似体ＩＧＦ−１、及びインスリンとＩＧＦ−１の組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項６】
約４ｍｇ／Ｌから１３ｍｇ／Ｌのインスリン又はその組換え類似体を含む、請求項５に記載の細胞培地。
【請求項７】
改変基本培地から除外される緩衝剤がＨＥＰＥＳ緩衝剤である、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項８】
Ｃ部の緩衝剤が、リン酸緩衝剤、ＨＥＰＥＳ及び炭酸水素ナトリウムを含む、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項９】
約１．６ｇ／Ｌ炭酸水素ナトリウムを含む、請求項８に記載の細胞培地。
【請求項１０】
約１．８ｇ／Ｌ ＨＥＰＥＳを含む、請求項８に記載の細胞培地。
【請求項１１】
リン酸緩衝剤が、約０．０１から０．５ｇ／Ｌのリン酸ナトリウム及びリン酸水素ナトリウムを含む、請求項８に記載の細胞培地。
【請求項１２】
Ｃ部が、アスパラギン、グルタミン、又はグルタミンとアスパラギンを更に含む、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項１３】
Ｃ部の重量オスモル濃度調節剤がＮａＣｌである、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項１４】
約１．０から６．５ｇ／ＬのＮａＣｌを含む、請求項１３に記載の細胞培地。
【請求項１５】
Ｃ部のエネルギー源が単糖である、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項１６】
単糖が、グルコース、マルトース、マンノース、ガラクトース及びフルクトースからなる群から選択される、請求項１５に記載の細胞培地。
【請求項１７】
グルコースがＤ−グルコースである、請求項１６に記載の細胞培地。
【請求項１８】
約７．０ｇ／Ｌ以下のグルコースを含む、請求項１７に記載の細胞培地。
【請求項１９】
Ｃ部の少なくとも２種類の非動物系加水分解物が、植物系加水分解物、及び動物系でも植物系でもない加水分解物である、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項２０】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１９に記載の細胞培地。
【請求項２１】
動物系でも植物系でもない加水分解物が酵母系加水分解物である、請求項１９に記載の細胞培地。
【請求項２２】
メトトレキサートを更に含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項２３】
約１００ｎＭから５０００ｎＭのメトトレキサートを含む、請求項２２に記載の細胞培地。
【請求項２４】
細胞保護剤又は界面活性剤を更に含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項２５】
界面活性剤がメチルセルロース又はＰｌｕｒｏｎｉｃポリオールである、請求項２４に記載の細胞培地。
【請求項２６】
ＰｌｕｒｏｎｉｃポリオールがＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８である、請求項２５に記載の細胞培地。
【請求項２７】
約１．０ｇ／Ｌ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８を含む、請求項２６に記載の細胞培地。
【請求項２８】
Ｌ−グルタミンを更に含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項２９】
ｐＨが７．１から７．３の範囲である、請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項３０】
重量オスモル濃度が３２０から４５０ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲である、請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項３１】
請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地中でほ乳動物細胞を培養することを含む、タンパク質を製造する方法。
【請求項３２】
ほ乳動物細胞がチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
タンパク質が抗体である、請求項３１又は３２に記載の方法。
【請求項３４】
抗体が、抗ＴＮＦα抗体、抗ＩＬ−１２抗体、抗ＩＬ−１８抗体及び抗ＥＰＯ受容体（ＥＰＯ−Ｒ）抗体からなる群から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
ａ）基本培地、
ｂ）約８−１２ｍｌ／ｋｇ又は１１６−１２６ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約２−６ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約２−５ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１−０．５ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１−３ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約０．０１−０．０５ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｈ）約０．４から０．５ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、及び
ｉ）約１．０−３．０ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、無血清細胞培地。
【請求項３６】
ａ）基本培地、
ｂ）約１０．０ｍｌ／ｋｇ又は１２２ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約４．０ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約３．５ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．２９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約０．０３ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｈ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、及び
ｉ）約２．０ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、請求項３５に記載の細胞培地。
【請求項３７】
約２．５０ｍＬ／ｋｇメトトレキサートを更に含む、請求項３５又は３６に記載の細胞培地。
【請求項３８】
ａ）請求項３５又は３６に記載の培地中で、タンパク質をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）タンパク質が製造されるように、（ａ）の培養物を細胞培養産生培地に移送すること
を含む、タンパク質を製造する方法。
【請求項３９】
タンパク質を細胞培養産生培地から単離することを更に含む、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
タンパク質が抗体である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
抗体がＤ２Ｅ７（アダリムマブ）である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約４から８ｍＬ／ｋｇ又は１０から１４ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．５から０．７ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．５から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．４から０．５ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約８から１２ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約６０から７０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、無血清細胞培養産生培地。
【請求項４３】
細胞培地が、
ａ）約１０．０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約６．０ｍＬ／ｋｇ又は１２ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．５８から０．５９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．４から２．５ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約１０．７ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｌ）約６．９から７．０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項４２に記載の細胞培養産生培地。
【請求項４４】
約７．１０から７．２０のｐＨを有する、請求項４２又は４３に記載の細胞培養産生培地。
【請求項４５】
約３７３から４０３ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を有する、請求項４２又は４３に記載の細胞培養産生培地。
【請求項４６】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約３から５ｍＬ／ｋｇ又は６から８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．４から０．５ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約０．４から０．５ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｍ）約２から６ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｎ）約２から４ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、無血清細胞培地。
【請求項４７】
細胞培地が、
ａ）約１０．０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／ｋｇクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約３．８から３．９ｍＬ／ｋｇ又は７．８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．８から０．９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．６から２．７ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．４５ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｌ）約４．０ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約２．６ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項４６に記載の細胞培地。
【請求項４８】
約２．５０ｍＬ／ｋｇメトトレキサートを更に含む、請求項４２から２７のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項４９】
請求項４２から４７のいずれか一項に記載の細胞培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養することを含む、タンパク質を製造する方法。
【請求項５０】
ほ乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
タンパク質が抗体である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５２】
抗体が抗ＴＮＦα抗体又は抗ＥＰＯ−Ｒ抗体である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
抗ＴＮＦα抗体が完全ヒト抗ＴＮＦα抗体である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
完全ヒト抗ＴＮＦα抗体がＤ２Ｅ７（アダリムマブ）である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１０ｍｌ／ｋｇ又は１２０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約３から５ｍＬ／ｋｇ又は７．８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．８から０．９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約０．３から０．５ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｈ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｉ）約２から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｊ）約０．５から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｋ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｌ）約０．１から１．０ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｍ）約２から６ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｎ）約２から４ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、無血清細胞培地。
【請求項５６】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約３．８から３．９ｍＬ／ｋｇ又は７．８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．８７から０．８８ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約０．４５ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｆ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２．６７から２．６８ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約４．０ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約２．６ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項５５に記載の細胞培地。
【請求項５７】
メトトレキサートを更に含む、請求項５５又は５６に記載の細胞培地。
【請求項５８】
ａ）基本細胞増殖培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約２から６ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約１５０から２５０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から０．５ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、及び
ｇ）約５から１５ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、無血清細胞培地。
【請求項５９】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約４ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約２００ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．２９から０．３０ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、及び
ｆ）約１１ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、請求項５８に記載の細胞培地。
【請求項６０】
メトトレキサートを更に含む、請求項５８又は５９に記載の細胞培地。
【請求項６１】
請求項５５から６０のいずれか一項に記載の細胞培地中で、タンパク質をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養することを含む、タンパク質を製造する方法。
【請求項６２】
タンパク質が抗体である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
ほ乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
核酸が完全ヒト抗ＩＬ−１２抗体をコードする、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
完全ヒト抗ＩＬ−１２抗体がＡＢＴ−８７４である、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
ａ）基本細胞増殖培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約２から６ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約１から３ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、及び
ｇ）約１から４ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、無血清細胞培地。
【請求項６７】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約４ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約１．５ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．２９から０．３０ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、及び
ｆ）約２ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、請求項６６に記載の細胞培地。
【請求項６８】
メトトレキサートを更に含む、請求項６６又は６７に記載の細胞培地。
【請求項６９】
約７．１０から７．３０のｐＨを有する、請求項６６又は６７に記載の細胞培地。
【請求項７０】
約３００から３４０ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を有する、請求項６６又は６７に記載の細胞培地。
【請求項７１】
少なくとも８ｇ／ｋｇの酵母系加水分解物を含む、請求項６６又は６７に記載の細胞培地。
【請求項７２】
請求項６２から６５のいずれか一項に記載の細胞培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養することを含む、タンパク質を製造する方法。
【請求項７３】
タンパク質が抗体である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
ほ乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７５】
核酸が抗ＩＬ−１２抗体又は抗ＥＰＯ−Ｒ抗体をコードする、請求項７２に記載の方法。
【請求項７６】
完全ヒト抗ＩＬ−１２抗体がＡＢＴ−８７４である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約２．５から４．５ｍＬ／ｋｇ又は７．８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．５から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｈ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｉ）約１から４ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｊ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｋ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｌ）約０．１から１．０ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｍ）約２から６ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｎ）約２から６ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、細胞培地。
【請求項７８】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約３．８から３．９ｍＬ／ｋｇ又は７．８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．８７から０．８８ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約０．４５ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｆ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２．６７ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約４．０ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約２．６ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項７７に記載の細胞培地。
【請求項７９】
約７．１０から７．２０のｐＨを有する、請求項７７又は７８に記載の細胞培地。
【請求項８０】
約３７３から４０３ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を有する、請求項７７又は７８に記載の細胞培地。
【請求項８１】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、ＨＥＰＥＳ緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを除去するように改変された、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約４から８ｍＬ／ｋｇ又は１０から１４ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約１から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．５から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約８から１２ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約６から８ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、細胞培養産生培地。
【請求項８２】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約６．０ｍＬ／ｋｇ又は１２ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．５８から０．５９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．４５ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約１０．７ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｌ）約６．９から７．０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項８１に記載の細胞培養産生培地。
【請求項８３】
約７．１０から７．２０のｐＨを有する、請求項８０又は８１に記載の細胞培養産生培地。
【請求項８４】
約３７３から４０３ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を有する、請求項８０又は８１に記載の細胞培養産生培地。
【請求項８５】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１１０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約４から８ｍＬ／ｋｇ又は１１から１５ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約１から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約１２から１６ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約８から１０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、細胞培養産生培地。
【請求項８６】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約６．５ｍＬ／ｋｇ又は１３ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．５８から０．５９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．４５ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約１４．２から１４．３ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｌ）約９．２から９．３ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項８５に記載の細胞培養産生培地。
【請求項８７】
メトトレキサートを更に含む、請求項８１から８６のいずれか一項に記載の細胞培養産生培地。
【請求項８８】
請求項８１から８６のいずれか一項に記載の細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養することを含む、抗体を製造する方法。
【請求項８９】
ほ乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
核酸が抗ＩＬ−１８抗体をコードする、請求項８８に記載の方法。
【請求項９１】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項３５、３６、４２、４３、４６、４７、５５、５６、７７、７８、８１、８２、８５又は８６のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項９２】
請求項１から３０、３５から３７、４２から４８、５５から６０、６６から７１、及び８１から８７のいずれか一項に記載の細胞培地中のチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞。
【請求項９３】
タンパク質が製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地を含む細胞培養物中で、タンパク質をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）ある期間中、加水分解物濃縮溶液及び基本濃縮溶液を細胞培養物に添加することによって、ほ乳動物細胞を培養すること
を含み、
加水分解物濃縮溶液が少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む、
タンパク質を製造する流加培養法。
【請求項９４】
基本濃縮溶液が高濃度基本培地を含む、請求項９３に記載の方法。
【請求項９５】
基本濃縮溶液が、基本培地、アスパラギン及びグルコースを含む、請求項９３に記載の方法。
【請求項９６】
基本培地がＰＦ ＣＨＯである、請求項９４又は９５に記載の方法。
【請求項９７】
ほ乳動物細胞がチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、請求項９３から９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
タンパク質が抗体である、請求項９３から９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９９】
抗体が、抗ＴＮＦα抗体、抗ＩＬ−１２抗体、抗ＩＬ−１８抗体及び抗ＥＰＯ受容体（ＥＰＯ−Ｒ）抗体からなる群から選択される、請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
加水分解物濃縮溶液が、植物由来でも動物由来でもない第１の加水分解物と、第２の植物系加水分解物とを含む、請求項９３から９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０１】
植物由来でも動物由来でもない加水分解物、及び植物系加水分解物が、酵母系加水分解物である、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
抗ＴＮＦα抗体が製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地を含む細胞培養物中で、抗ＴＮＦα抗体をコードする核酸を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を培養すること、及び
ｂ）ある期間中、加水分解物濃縮溶液及び基本濃縮溶液を細胞培養物に添加することによって、ＣＨＯ細胞を培養すること
を含み、
基本濃縮溶液が基本培地、アスパラギン及びグルコースを含み、
加水分解物濃縮溶液が少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む、
抗ＴＮＦα抗体を製造する流加培養法。
【請求項１０４】
抗ＴＮＦα抗体が製造されるように、
ａ）少なくとも２．０ｇ／Ｌのグルコースを含む細胞培養産生培地を含む細胞培養物中で、抗ＴＮＦα抗体をコードする核酸を含むＣＨＯ細胞を培養すること（グルコース濃度は、少なくとも２．０ｇ／Ｌのグルコース濃度を維持するのに必要なグルコースを細胞培養産生培地に添加することによって調節される。）、及び
ｂ）ある期間中、加水分解物濃縮溶液及び基本濃縮溶液を細胞培養物に添加することによって、ＣＨＯ細胞を培養すること
を含み、
基本濃縮溶液が基本培地、アスパラギン及びグルコースを含み、
加水分解物濃縮溶液が少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む、
抗ＴＮＦα抗体を製造する流加培養法。
【請求項１０５】
抗ＴＮＦα抗体を回収することを更に含む、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
細胞培養物が約３２から３８℃の温度で培養される、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１０７】
培養温度が約３５℃である、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
細胞培養産生培地が溶存酸素２０から６５％で維持される、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１０９】
細胞培養産生培地が溶存酸素約３０％で維持される、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
細胞培養産生培地の重量オスモル濃度が、培養を通して５００ｍＯｓｍ以下に維持される、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１１１】
加水分解物濃縮溶液が、植物由来でも動物由来でもない第１の加水分解物と、第２の植物系加水分解物とを含む、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１１２】
植物由来でも動物由来でもない加水分解物、及び植物系加水分解物が、酵母系加水分解物である、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
加水分解物濃縮溶液が、約５０−２８０ｇ／ｋｇのダイズ系加水分解物と、約７５−３００ｇ／ｋｇの酵母系加水分解物とから本質的になる、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１１５】
基本培地がＰＦ ＣＨＯである、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１１６】
基本濃縮溶液が約９．０から１０．５のｐＨを有する、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１１７】
期間が約９から１５日間である、請求項１０３から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１８】
期間が約１２日間である、請求項１１７に記載の方法。
【請求項１１９】
基本濃縮溶液が、期間の以下の日、すなわち４日目、６日目、９日目及び１１日目の少なくとも１日に細胞培養産生培地に添加される、請求項１０３から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２０】
加水分解物濃縮溶液が、期間の４日目、７日目、又は４日目と７日目に細胞培養産生培地に添加される、請求項１０３から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２１】
細胞培養産生培地のｐＨをｐＨ線形勾配に従って調節することを更に含み、ｐＨ線形勾配が約７．１から７．２のｐＨから出発し、約６．９の最終ｐＨである、請求項１０３から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２２】
ｐＨ線形勾配が少なくとも約２４時間調節される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
ｐＨ線形勾配が少なくとも約４８時間調節される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２４】
ｐＨ線形勾配が約７２時間調節される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２５】
細胞培養産生培地が、
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１０ｍｌ／ｋｇ又は１１０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約４から８ｍＬ／ｋｇ又は１０から１４ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から３ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から３ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４−Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．１から０．１ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４−７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約８から１２ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約６から８ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１２６】
細胞培養産生培地が、
ａ）約１０．０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約６．０ｍＬ／ｋｇ又は１２ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．５８から０．５９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．４５ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４−Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４−７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約１０．７ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｌ）約６．９から７．０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２７】
ほ乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項１０３から１２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２８】
細胞培養物が大規模細胞培養物である、請求項１０３から１２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２９】
大規模細胞培養物が約１０Ｌを超える、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３０】
大規模細胞培養物が１３Ｌである、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３１】
抗ＴＮＦα抗体が完全ヒト抗ＴＮＦα抗体である、請求項１０３から１２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３２】
抗ＴＮＦα抗体がアダリムマブである、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３３】
抗ＩＬ１２抗体が製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地を含む細胞培養物中で、抗体をコードする核酸を含むＣＨＯ細胞を培養すること、
ｂ）ある期間中、加水分解物濃縮溶液及び基本濃縮溶液を細胞培養物に添加することによって、ＣＨＯ細胞を培養すること
を含み、
基本濃縮溶液が基本培地、アスパラギン及びグルコースを含み、
加水分解物濃縮溶液が少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む、
抗ＩＬ１２抗体を製造する流加培養法。
【請求項１３４】
加水分解物濃縮溶液がグルコースを更に含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
抗ＩＬ１２抗体を回収することを更に含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３６】
細胞培養物が約３２から３８℃の温度で培養される、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３７】
培養温度が約３３℃である、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３８】
細胞培養産生培地が溶存酸素約２０−６５％で維持される、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３９】
細胞培養産生培地が溶存酸素約４０％で維持される、請求項１３８に記載の方法。
【請求項１４０】
細胞培養産生培地が約６．７から７．２のｐＨを有する、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１４１】
加水分解物濃縮溶液が、植物由来でも動物由来でもない加水分解物と植物系加水分解物とを含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１４２】
植物由来でも動物由来でもない加水分解物が酵母系加水分解物である、請求項１４１に記載の方法。
【請求項１４３】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１４２に記載の方法。
【請求項１４４】
加水分解物濃縮溶液が、約５０−２２５ｇ／ｋｇのダイズ系加水分解物、約７５−３００ｇ／ｋｇの酵母系加水分解物、及び約２から３ｇ／Ｌグルコースから本質的になる、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１４５】
基本濃縮溶液が、基本培地、アスパラギン及びグルコースを含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１４６】
基本濃縮溶液が、約９．７のｐＨを有し、約１４００から１５００ｍＯｓｍの重量オスモル濃度を有する、請求項１４５に記載の方法。
【請求項１４７】
基本濃縮溶液中の基本培地がＰＦ ＣＨＯである、請求項１４５に記載の方法。
【請求項１４８】
期間が１４−１５日間である、請求項１３３から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４９】
基本濃縮溶液が、期間の５日目から１日おきに細胞培養産生培地に添加される、請求項１３３から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５０】
加水分解物濃縮溶液が、期間の６日目から毎日、細胞培養産生培地に添加される、請求項１３３から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５１】
基本濃縮溶液及び加水分解物濃縮溶液が、期間の５日目から毎日、細胞培養産生培地に添加される、請求項１３３から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５２】
細胞培養産生培地が、
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１１０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約５から８ｍＬ／ｋｇ又は１１から１５ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４−Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４−７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約６から１２ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約６から８ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項１３３から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５３】
細胞培養産生培地が、
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約６．５ｍＬ／ｋｇ又は１３ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．５８から０．５９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．４５ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４−Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４−７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約１０．７ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｌ）約６．９から７．０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項１５２に記載の方法。
【請求項１５４】
細胞培養物が大規模細胞培養物である、請求項１３３から１５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５５】
大規模細胞培養物が１０Ｌを超える、請求項１５４に記載の方法。
【請求項１５６】
大規模細胞培養物が約１３Ｌである、請求項１５４に記載の方法。
【請求項１５７】
抗ＩＬ１２抗体が完全ヒト抗ＩＬ１２抗体である、請求項１３３から１５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５８】
完全ヒト抗ＩＬ−１２抗体がＡＢＴ−８７４である、請求項１５７に記載の方法。
【請求項１５９】
ａ）グルコース、
ｂ）基本培地、
ｃ）グルタミン以外のアミノ酸、及び
ｄ）少なくとも２種類の非動物系加水分解物
を含み、
供給溶液が約６．０から８．０のｐＨを有する、
組合せ供給溶液。
【請求項１６０】
約１００から２５０ｇ／ｋｇグルコースを含む、請求項１５９に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６１】
アミノ酸がアスパラギンである、請求項１５９に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６２】
アスパラギン約１．０から１５．０ｇを含む、請求項１６０に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６３】
約３．０から５．０ｇ／ｋｇアスパラギンを含む、請求項１６１に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６４】
少なくとも２種類の非動物系加水分解物が、植物系加水分解物、及び動物系でも植物系でもない加水分解物である、請求項１５９に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６５】
動物系でも植物系でもない加水分解物が酵母系加水分解物である、請求項１６４に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６６】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１６４に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６７】
基本培地がＰＦ−ＣＨＯ又はＤＭＥＭ／Ｆ１２培地である、請求項１５９に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６８】
基本細胞培地が、改変基本培地であり、以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤、グルタミン及びグルコースを含まない、請求項１５９に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６９】
約１５ＮＴＵ未満の濁度を更に有する、請求項１５９から１６８のいずれか一項に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１７０】
請求項１５９から１６８のいずれか一項に記載の組合せ供給溶液を添加することを含む、細胞培養産生培地の定常グルコースレベルを維持する方法。
【請求項１７１】
ａ）グルコースと基本細胞培地を組み合わせて溶液にすること、
ｂ）ａ）の溶液のｐＨを約９．５から１０．５に調節すること、
ｃ）少なくとも２種類の非動物系加水分解物をｂ）の溶液に添加すること、及び
ｄ）組合せ供給溶液が約６．５から７．５のｐＨを有するように、ｃ）の溶液のｐＨを調節すること
を含む、基本培地、グルコース及び少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む組合せ供給溶液を製造する方法。
【請求項１７２】
段階ｃ）が、動物系でも植物系でもない第１の加水分解物と、第２の植物系加水分解物とを添加することを含む、請求項１７１に記載の方法。
【請求項１７３】
動物系でも植物系でもない加水分解物が酵母系加水分解物である、請求項１７２に記載の方法。
【請求項１７４】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１７２に記載の方法。
【請求項１７５】
少なくとも約１．５ｇ／Ｌの抗体が製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）約６．７から７．２のｐＨを有する組合せ供給溶液を細胞培養産生培地に添加すること（組合せ供給溶液は、グルコース、基本細胞培地、グルタミン以外のアミノ酸、及び少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む。）
を含む、ほ乳動物細胞培養物から少なくとも約１．５ｇ／Ｌの抗体を製造する方法。
【請求項１７６】
組合せ供給溶液が約１００から２５０ｇ／ｋｇグルコースを含む、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７７】
少なくとも２ｇ／Ｌの抗体が製造される、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７８】
少なくとも４ｇ／Ｌの抗体が製造される、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７９】
少なくとも５ｇ／Ｌの抗体が製造される、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１８０】
約６ｇ／Ｌの抗体が製造される、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１８１】
製造される抗体の力価が、段階ｂ）を含まずに段階ａ）によって培養された対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも５０％高くなるように、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）約６．７から７．２のｐＨを有する組合せ供給溶液を細胞培養産生培地に添加すること（組合せ供給溶液は、グルコース、基本細胞培地、グルタミン以外のアミノ酸、及び少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む。）
を含む、ほ乳動物細胞培養物から産生される抗体の力価を増加させる方法。
【請求項１８２】
製造される抗体の力価が対照よりも少なくとも１００％高い、請求項１８１に記載の方法。
【請求項１８３】
製造される抗体の力価が対照よりも少なくとも１５０％高い、請求項１８１に記載の方法。
【請求項１８４】
細胞密度が少なくとも２．０×１０６細胞／ｍＬに到達したときに、組合せ供給溶液が添加される、請求項１７５から１８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８５】
細胞密度が約３．５×１０６細胞／ｍＬに到達したときに、組合せ供給溶液が添加される、請求項１７５から１８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８６】
抗体が製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地中で、タンパク質をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）細胞培養産生培地中の代謝指標レベルを監視するフィードバック制御系を用いて、組合せ供給溶液を細胞培養産生培地に添加すること（組合せ供給溶液は、フィードバック制御系によって決定される時点で細胞培養産生培地に添加される。）
を含む、ほ乳動物細胞培養物中でタンパク質を製造する方法。
【請求項１８７】
ほ乳動物細胞がチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、請求項１８６に記載の方法。
【請求項１８８】
代謝指標がグルコース又はグルタミンである、請求項１８６又は１８７に記載の方法。
【請求項１８９】
供給溶液が、グルコース、基本細胞培地、グルタミン以外のアミノ酸及び少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む組合せ供給溶液である、請求項１８６又は１８７に記載の方法。
【請求項１９０】
タンパク質が抗体である、請求項１８６又は１８７に記載の方法。
【請求項１９１】
抗体が、抗ＴＮＦα抗体、抗ＩＬ−１２抗体、抗ＩＬ−１８抗体及び抗ＥＰＯ受容体（ＥＰＯ−Ｒ）抗体からなる群から選択される、請求項１９０に記載の方法。
【請求項１９２】
抗体が少なくとも１．５ｇ／Ｌの力価で製造される、請求項１９０又は１９１に記載の方法。
【請求項１９３】
抗体が少なくとも２ｇ／Ｌの力価で製造される、請求項１９０又は１９１に記載の方法。
【請求項１９４】
組合せ供給溶液が約３．０から１２．５ｇ／ｋｇアスパラギンを含む、請求項１７５から１８５及び１８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９５】
少なくとも２種類の非動物系加水分解物が、植物系加水分解物、及び動物系でも植物系でもない加水分解物を含む、請求項１７５から１８５及び１８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９６】
動物系でも植物系でもない加水分解物が酵母系加水分解物である、請求項１９５に記載の方法。
【請求項１９７】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１９５に記載の方法。
【請求項１９８】
組合せ供給溶液が約１００から２００ｇ／ｋｇグルコースを含む、請求項１７５から１８５及び１８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９９】
グルコースレベルが約０．２５から２０．０ｇ／Ｌに維持されるように、細胞培地中のグルコースレベルを監視することを更に含む、請求項１７５から１８５及び１８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２００】
グルコースレベルが自動試料採取装置を用いて監視される、請求項１９９に記載の方法。
【請求項２０１】
製造される抗体が、抗ＴＮＦα抗体、抗ＩＬ−１８抗体及び抗Ｉｌ−１２抗体からなる群から選択される、請求項１７５から１８５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０２】
抗ＴＮＦα抗体がＤ２Ｅ７（アダリムマブ）である、請求項１９１又は２０１に記載の方法。
【請求項２０３】
抗ＩＬ−１８抗体がＡＢＴ−３２５である、請求項１９１又は２０１に記載の方法。
【請求項２０４】
抗ＩＬ−１２抗体がＡＢＴ−８７４である、請求項１９１又は２０１に記載の方法。
【請求項２０５】
供給プロファイルが決定されるように、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）細胞培養産生培地中の代謝指標を監視するフィードバック制御系を用いて、組合せ供給溶液を細胞培養産生培地に添加すること（組合せ供給溶液は、目標代謝指標設定値に適合するように細胞培養産生培地に添加される。）、及び
ｃ）１日当たりに細胞培養産生培地に添加される組合せ供給溶液の量を決定すること
を含む、ほ乳動物細胞培養物中でタンパク質を産生するための供給プロファイルを決定する方法。
【請求項２０６】
代謝指標がグルコース又はグルタミンである、請求項２０５に記載の方法。
【請求項２０７】
請求項２０５に記載の供給プロファイルに従って、組合せ供給溶液をほ乳動物細胞培養物に添加することを含む、ほ乳動物細胞培養物中でタンパク質を製造する流加培養法。
【請求項２０８】
抗体が少なくとも１００ｍｇ／Ｌの力価で製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、
ｂ）酪酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン又はこれらの組合せを細胞培地に添加すること（酪酸ナトリウムを約０．１ｍＭから１０ｍＭの最終濃度まで添加し、Ｎ−アセチルシステインを約１ｍＭから８０ｍＭの最終濃度まで添加する。）
を含む、抗体の力価が少なくとも１００ｍｇ／Ｌであるように、ほ乳動物細胞培養物中で抗体を製造する方法。
【請求項２０９】
抗体価が少なくとも１５０ｍｇ／Ｌである、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１０】
抗体価が少なくとも２００ｍｇ／Ｌである、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１１】
抗体価が少なくとも２５０ｍｇ／Ｌである、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１２】
抗体価が少なくとも３００ｍｇ／Ｌである、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１３】
抗体価が少なくとも４００ｍｇ／Ｌである、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１４】
抗体の力価が対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも１０％高くなるように（対照ほ乳動物細胞培養は、段階ａ）を含むが、段階ｂ）を含まない。）、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）酪酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン又はこれらの組合せを細胞培地に添加すること（酪酸ナトリウムを約０．１ｍＭから１０ｍＭの最終濃度まで添加し、Ｎ−アセチルシステインを約１ｍＭから８０ｍＭの最終濃度まで添加する。）
を含む、抗体の力価が対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも１０％高くなるように、ほ乳動物細胞培養物中で抗体を製造する方法。
【請求項２１５】
ほ乳動物細胞培養物の抗体価が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも２９％改善される、請求項２１４に記載の方法。
【請求項２１６】
ほ乳動物細胞培養物の抗体価が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも４０％改善される、請求項２１４に記載の方法。
【請求項２１７】
ほ乳動物細胞培養物の抗体価が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも７０％改善される、請求項２１４に記載の方法。
【請求項２１８】
ほ乳動物細胞培養物の抗体価が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも９０％高い、請求項２１４に記載の方法。
【請求項２１９】
酪酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン又はこれらの組合せが、ほ乳動物細胞培養物の増殖期中に、ほ乳動物細胞培養物に添加される、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２０】
酪酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン又はこれらの組合せが、培養時間の４日目から７日目にほ乳動物細胞培養物に添加される、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２１】
酪酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン又はこれらの組合せが、培養時間の０日目にほ乳動物細胞培養物に添加される、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２２】
酪酸ナトリウムの最終濃度が約０．１ｍＭから１０ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２３】
酪酸ナトリウムの最終濃度が約０．１ｍＭから８．０ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２４】
酪酸ナトリウムの最終濃度が、酪酸ナトリウムの約０．１ｍＭから３．０ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２５】
Ｎ−アセチルシステインの最終濃度が約２０ｍＭから６０ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２６】
Ｎ−アセチルシステインの最終濃度が約１０ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２７】
Ｎ−アセチルシステインの最終濃度が約８ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２８】
ほ乳動物細胞培養物の寿命が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも３５％延長されるように（対照ほ乳動物細胞培養は、段階ａ）を含むが、段階ｂ）を含まない。）、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）約１ｍＭから８０ｍＭ Ｎ−アセチルシステインを細胞培地に添加すること
を含む、ほ乳動物細胞培養物の寿命を対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも３５％延長する方法。
【請求項２２９】
ほ乳動物細胞培養物の寿命が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも約４５％延長される、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３０】
ほ乳動物細胞培養物の寿命が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも約５５％延長される、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３１】
最終濃度約８ｍＭのＮ−アセチルシステインを細胞培養産生培地に添加することを含む、請求項２２８から２３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３２】
抗体が、抗ＴＮＦα抗体、抗ＩＬ−１８抗体及び抗Ｉｌ−１２抗体からなる群から選択される、請求項２０８から２３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３３】
抗ＩＬ−１８抗体がＡＢＴ−３２５である、請求項２３２に記載の方法。
【請求項１】
Ａ部、Ｂ部及びＣ部を含み、
ａ）Ａ部は、以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地から本質的になり、
ｂ）Ｂ部は無機鉄源から本質的になり、
ｃ）Ｃ部は、組換え増殖因子、緩衝剤、重量オスモル濃度調節剤、エネルギー源、及び少なくとも２種類の非動物加水分解物を含む、
無血清細胞培地。
【請求項２】
Ａ部が、非鉄（ＩＩ）金属イオン、ビタミン、又は両方の組合せを更に含む、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項３】
Ｂ部の無機鉄源がクエン酸鉄（ＩＩＩ）である、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項４】
最終溶液濃度約１２２．５ｍｇ／Ｌ又は０．５ｍＭのクエン酸鉄（ＩＩＩ）を含む、請求項３に記載の細胞培地。
【請求項５】
Ｃ部の組換え増殖因子が、インスリン又は組換え類似体ＩＧＦ−１、及びインスリンとＩＧＦ−１の組合せからなる群から選択される、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項６】
約４ｍｇ／Ｌから１３ｍｇ／Ｌのインスリン又はその組換え類似体を含む、請求項５に記載の細胞培地。
【請求項７】
改変基本培地から除外される緩衝剤がＨＥＰＥＳ緩衝剤である、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項８】
Ｃ部の緩衝剤が、リン酸緩衝剤、ＨＥＰＥＳ及び炭酸水素ナトリウムを含む、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項９】
約１．６ｇ／Ｌ炭酸水素ナトリウムを含む、請求項８に記載の細胞培地。
【請求項１０】
約１．８ｇ／Ｌ ＨＥＰＥＳを含む、請求項８に記載の細胞培地。
【請求項１１】
リン酸緩衝剤が、約０．０１から０．５ｇ／Ｌのリン酸ナトリウム及びリン酸水素ナトリウムを含む、請求項８に記載の細胞培地。
【請求項１２】
Ｃ部が、アスパラギン、グルタミン、又はグルタミンとアスパラギンを更に含む、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項１３】
Ｃ部の重量オスモル濃度調節剤がＮａＣｌである、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項１４】
約１．０から６．５ｇ／ＬのＮａＣｌを含む、請求項１３に記載の細胞培地。
【請求項１５】
Ｃ部のエネルギー源が単糖である、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項１６】
単糖が、グルコース、マルトース、マンノース、ガラクトース及びフルクトースからなる群から選択される、請求項１５に記載の細胞培地。
【請求項１７】
グルコースがＤ−グルコースである、請求項１６に記載の細胞培地。
【請求項１８】
約７．０ｇ／Ｌ以下のグルコースを含む、請求項１７に記載の細胞培地。
【請求項１９】
Ｃ部の少なくとも２種類の非動物系加水分解物が、植物系加水分解物、及び動物系でも植物系でもない加水分解物である、請求項１に記載の細胞培地。
【請求項２０】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１９に記載の細胞培地。
【請求項２１】
動物系でも植物系でもない加水分解物が酵母系加水分解物である、請求項１９に記載の細胞培地。
【請求項２２】
メトトレキサートを更に含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項２３】
約１００ｎＭから５０００ｎＭのメトトレキサートを含む、請求項２２に記載の細胞培地。
【請求項２４】
細胞保護剤又は界面活性剤を更に含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項２５】
界面活性剤がメチルセルロース又はＰｌｕｒｏｎｉｃポリオールである、請求項２４に記載の細胞培地。
【請求項２６】
ＰｌｕｒｏｎｉｃポリオールがＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８である、請求項２５に記載の細胞培地。
【請求項２７】
約１．０ｇ／Ｌ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８を含む、請求項２６に記載の細胞培地。
【請求項２８】
Ｌ−グルタミンを更に含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項２９】
ｐＨが７．１から７．３の範囲である、請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項３０】
重量オスモル濃度が３２０から４５０ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲である、請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項３１】
請求項１から２１のいずれか一項に記載の細胞培地中でほ乳動物細胞を培養することを含む、タンパク質を製造する方法。
【請求項３２】
ほ乳動物細胞がチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
タンパク質が抗体である、請求項３１又は３２に記載の方法。
【請求項３４】
抗体が、抗ＴＮＦα抗体、抗ＩＬ−１２抗体、抗ＩＬ−１８抗体及び抗ＥＰＯ受容体（ＥＰＯ−Ｒ）抗体からなる群から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
ａ）基本培地、
ｂ）約８−１２ｍｌ／ｋｇ又は１１６−１２６ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約２−６ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約２−５ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１−０．５ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１−３ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約０．０１−０．０５ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｈ）約０．４から０．５ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、及び
ｉ）約１．０−３．０ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、無血清細胞培地。
【請求項３６】
ａ）基本培地、
ｂ）約１０．０ｍｌ／ｋｇ又は１２２ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約４．０ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約３．５ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．２９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約０．０３ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｈ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、及び
ｉ）約２．０ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、請求項３５に記載の細胞培地。
【請求項３７】
約２．５０ｍＬ／ｋｇメトトレキサートを更に含む、請求項３５又は３６に記載の細胞培地。
【請求項３８】
ａ）請求項３５又は３６に記載の培地中で、タンパク質をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）タンパク質が製造されるように、（ａ）の培養物を細胞培養産生培地に移送すること
を含む、タンパク質を製造する方法。
【請求項３９】
タンパク質を細胞培養産生培地から単離することを更に含む、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
タンパク質が抗体である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
抗体がＤ２Ｅ７（アダリムマブ）である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約４から８ｍＬ／ｋｇ又は１０から１４ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．５から０．７ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．５から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．４から０．５ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約８から１２ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約６０から７０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、無血清細胞培養産生培地。
【請求項４３】
細胞培地が、
ａ）約１０．０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約６．０ｍＬ／ｋｇ又は１２ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．５８から０．５９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．４から２．５ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約１０．７ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｌ）約６．９から７．０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項４２に記載の細胞培養産生培地。
【請求項４４】
約７．１０から７．２０のｐＨを有する、請求項４２又は４３に記載の細胞培養産生培地。
【請求項４５】
約３７３から４０３ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を有する、請求項４２又は４３に記載の細胞培養産生培地。
【請求項４６】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約３から５ｍＬ／ｋｇ又は６から８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．４から０．５ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約０．４から０．５ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｍ）約２から６ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｎ）約２から４ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、無血清細胞培地。
【請求項４７】
細胞培地が、
ａ）約１０．０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／ｋｇクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約３．８から３．９ｍＬ／ｋｇ又は７．８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．８から０．９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．６から２．７ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．４５ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｌ）約４．０ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約２．６ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項４６に記載の細胞培地。
【請求項４８】
約２．５０ｍＬ／ｋｇメトトレキサートを更に含む、請求項４２から２７のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項４９】
請求項４２から４７のいずれか一項に記載の細胞培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養することを含む、タンパク質を製造する方法。
【請求項５０】
ほ乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
タンパク質が抗体である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５２】
抗体が抗ＴＮＦα抗体又は抗ＥＰＯ−Ｒ抗体である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
抗ＴＮＦα抗体が完全ヒト抗ＴＮＦα抗体である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
完全ヒト抗ＴＮＦα抗体がＤ２Ｅ７（アダリムマブ）である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１０ｍｌ／ｋｇ又は１２０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約３から５ｍＬ／ｋｇ又は７．８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．８から０．９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約０．３から０．５ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｈ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｉ）約２から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｊ）約０．５から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｋ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｌ）約０．１から１．０ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｍ）約２から６ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｎ）約２から４ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、無血清細胞培地。
【請求項５６】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約３．８から３．９ｍＬ／ｋｇ又は７．８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．８７から０．８８ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約０．４５ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｆ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２．６７から２．６８ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約４．０ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約２．６ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項５５に記載の細胞培地。
【請求項５７】
メトトレキサートを更に含む、請求項５５又は５６に記載の細胞培地。
【請求項５８】
ａ）基本細胞増殖培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約２から６ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約１５０から２５０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から０．５ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、及び
ｇ）約５から１５ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、無血清細胞培地。
【請求項５９】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約４ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約２００ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．２９から０．３０ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、及び
ｆ）約１１ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、請求項５８に記載の細胞培地。
【請求項６０】
メトトレキサートを更に含む、請求項５８又は５９に記載の細胞培地。
【請求項６１】
請求項５５から６０のいずれか一項に記載の細胞培地中で、タンパク質をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養することを含む、タンパク質を製造する方法。
【請求項６２】
タンパク質が抗体である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
ほ乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
核酸が完全ヒト抗ＩＬ−１２抗体をコードする、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
完全ヒト抗ＩＬ−１２抗体がＡＢＴ−８７４である、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
ａ）基本細胞増殖培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約２から６ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約１から３ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、及び
ｇ）約１から４ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、無血清細胞培地。
【請求項６７】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約４ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約１．５ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．２９から０．３０ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、及び
ｆ）約２ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物
を含む、請求項６６に記載の細胞培地。
【請求項６８】
メトトレキサートを更に含む、請求項６６又は６７に記載の細胞培地。
【請求項６９】
約７．１０から７．３０のｐＨを有する、請求項６６又は６７に記載の細胞培地。
【請求項７０】
約３００から３４０ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を有する、請求項６６又は６７に記載の細胞培地。
【請求項７１】
少なくとも８ｇ／ｋｇの酵母系加水分解物を含む、請求項６６又は６７に記載の細胞培地。
【請求項７２】
請求項６２から６５のいずれか一項に記載の細胞培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養することを含む、タンパク質を製造する方法。
【請求項７３】
タンパク質が抗体である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
ほ乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項７２に記載の方法。
【請求項７５】
核酸が抗ＩＬ−１２抗体又は抗ＥＰＯ−Ｒ抗体をコードする、請求項７２に記載の方法。
【請求項７６】
完全ヒト抗ＩＬ−１２抗体がＡＢＴ−８７４である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約２．５から４．５ｍＬ／ｋｇ又は７．８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．５から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｈ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｉ）約１から４ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｊ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｋ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｌ）約０．１から１．０ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｍ）約２から６ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｎ）約２から６ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、細胞培地。
【請求項７８】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約３．８から３．９ｍＬ／ｋｇ又は７．８ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．８７から０．８８ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約０．４５ｇ／ｋｇ Ｌ−アスパラギン一水和物、
ｆ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２．６７ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約４．０ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約２．６ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項７７に記載の細胞培地。
【請求項７９】
約７．１０から７．２０のｐＨを有する、請求項７７又は７８に記載の細胞培地。
【請求項８０】
約３７３から４０３ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を有する、請求項７７又は７８に記載の細胞培地。
【請求項８１】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、ＨＥＰＥＳ緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを除去するように改変された、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１２０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約４から８ｍＬ／ｋｇ又は１０から１４ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約１から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．５から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約８から１２ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約６から８ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、細胞培養産生培地。
【請求項８２】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約６．０ｍＬ／ｋｇ又は１２ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．５８から０．５９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．４５ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約１０．７ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｌ）約６．９から７．０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項８１に記載の細胞培養産生培地。
【請求項８３】
約７．１０から７．２０のｐＨを有する、請求項８０又は８１に記載の細胞培養産生培地。
【請求項８４】
約３７３から４０３ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を有する、請求項８０又は８１に記載の細胞培養産生培地。
【請求項８５】
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１１０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約４から８ｍＬ／ｋｇ又は１１から１５ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約１から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約１２から１６ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約８から１０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、細胞培養産生培地。
【請求項８６】
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約６．５ｍＬ／ｋｇ又は１３ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．５８から０．５９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．４５ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４・Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４・７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約１４．２から１４．３ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｌ）約９．２から９．３ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項８５に記載の細胞培養産生培地。
【請求項８７】
メトトレキサートを更に含む、請求項８１から８６のいずれか一項に記載の細胞培養産生培地。
【請求項８８】
請求項８１から８６のいずれか一項に記載の細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養することを含む、抗体を製造する方法。
【請求項８９】
ほ乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
核酸が抗ＩＬ−１８抗体をコードする、請求項８８に記載の方法。
【請求項９１】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項３５、３６、４２、４３、４６、４７、５５、５６、７７、７８、８１、８２、８５又は８６のいずれか一項に記載の細胞培地。
【請求項９２】
請求項１から３０、３５から３７、４２から４８、５５から６０、６６から７１、及び８１から８７のいずれか一項に記載の細胞培地中のチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞。
【請求項９３】
タンパク質が製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地を含む細胞培養物中で、タンパク質をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）ある期間中、加水分解物濃縮溶液及び基本濃縮溶液を細胞培養物に添加することによって、ほ乳動物細胞を培養すること
を含み、
加水分解物濃縮溶液が少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む、
タンパク質を製造する流加培養法。
【請求項９４】
基本濃縮溶液が高濃度基本培地を含む、請求項９３に記載の方法。
【請求項９５】
基本濃縮溶液が、基本培地、アスパラギン及びグルコースを含む、請求項９３に記載の方法。
【請求項９６】
基本培地がＰＦ ＣＨＯである、請求項９４又は９５に記載の方法。
【請求項９７】
ほ乳動物細胞がチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、請求項９３から９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
タンパク質が抗体である、請求項９３から９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９９】
抗体が、抗ＴＮＦα抗体、抗ＩＬ−１２抗体、抗ＩＬ−１８抗体及び抗ＥＰＯ受容体（ＥＰＯ−Ｒ）抗体からなる群から選択される、請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
加水分解物濃縮溶液が、植物由来でも動物由来でもない第１の加水分解物と、第２の植物系加水分解物とを含む、請求項９３から９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０１】
植物由来でも動物由来でもない加水分解物、及び植物系加水分解物が、酵母系加水分解物である、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
抗ＴＮＦα抗体が製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地を含む細胞培養物中で、抗ＴＮＦα抗体をコードする核酸を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞を培養すること、及び
ｂ）ある期間中、加水分解物濃縮溶液及び基本濃縮溶液を細胞培養物に添加することによって、ＣＨＯ細胞を培養すること
を含み、
基本濃縮溶液が基本培地、アスパラギン及びグルコースを含み、
加水分解物濃縮溶液が少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む、
抗ＴＮＦα抗体を製造する流加培養法。
【請求項１０４】
抗ＴＮＦα抗体が製造されるように、
ａ）少なくとも２．０ｇ／Ｌのグルコースを含む細胞培養産生培地を含む細胞培養物中で、抗ＴＮＦα抗体をコードする核酸を含むＣＨＯ細胞を培養すること（グルコース濃度は、少なくとも２．０ｇ／Ｌのグルコース濃度を維持するのに必要なグルコースを細胞培養産生培地に添加することによって調節される。）、及び
ｂ）ある期間中、加水分解物濃縮溶液及び基本濃縮溶液を細胞培養物に添加することによって、ＣＨＯ細胞を培養すること
を含み、
基本濃縮溶液が基本培地、アスパラギン及びグルコースを含み、
加水分解物濃縮溶液が少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む、
抗ＴＮＦα抗体を製造する流加培養法。
【請求項１０５】
抗ＴＮＦα抗体を回収することを更に含む、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
細胞培養物が約３２から３８℃の温度で培養される、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１０７】
培養温度が約３５℃である、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
細胞培養産生培地が溶存酸素２０から６５％で維持される、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１０９】
細胞培養産生培地が溶存酸素約３０％で維持される、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
細胞培養産生培地の重量オスモル濃度が、培養を通して５００ｍＯｓｍ以下に維持される、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１１１】
加水分解物濃縮溶液が、植物由来でも動物由来でもない第１の加水分解物と、第２の植物系加水分解物とを含む、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１１２】
植物由来でも動物由来でもない加水分解物、及び植物系加水分解物が、酵母系加水分解物である、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
加水分解物濃縮溶液が、約５０−２８０ｇ／ｋｇのダイズ系加水分解物と、約７５−３００ｇ／ｋｇの酵母系加水分解物とから本質的になる、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１１５】
基本培地がＰＦ ＣＨＯである、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１１６】
基本濃縮溶液が約９．０から１０．５のｐＨを有する、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１１７】
期間が約９から１５日間である、請求項１０３から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１８】
期間が約１２日間である、請求項１１７に記載の方法。
【請求項１１９】
基本濃縮溶液が、期間の以下の日、すなわち４日目、６日目、９日目及び１１日目の少なくとも１日に細胞培養産生培地に添加される、請求項１０３から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２０】
加水分解物濃縮溶液が、期間の４日目、７日目、又は４日目と７日目に細胞培養産生培地に添加される、請求項１０３から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２１】
細胞培養産生培地のｐＨをｐＨ線形勾配に従って調節することを更に含み、ｐＨ線形勾配が約７．１から７．２のｐＨから出発し、約６．９の最終ｐＨである、請求項１０３から１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２２】
ｐＨ線形勾配が少なくとも約２４時間調節される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２３】
ｐＨ線形勾配が少なくとも約４８時間調節される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２４】
ｐＨ線形勾配が約７２時間調節される、請求項１２１に記載の方法。
【請求項１２５】
細胞培養産生培地が、
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１０ｍｌ／ｋｇ又は１１０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約４から８ｍＬ／ｋｇ又は１０から１４ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から３ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から３ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４−Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．１から０．１ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４−７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約８から１２ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約６から８ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項１０３又は１０４に記載の方法。
【請求項１２６】
細胞培養産生培地が、
ａ）約１０．０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約６．０ｍＬ／ｋｇ又は１２ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．５８から０．５９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．４５ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４−Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４−７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約１０．７ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｌ）約６．９から７．０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２７】
ほ乳動物細胞がＣＨＯ細胞である、請求項１０３から１２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２８】
細胞培養物が大規模細胞培養物である、請求項１０３から１２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２９】
大規模細胞培養物が約１０Ｌを超える、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３０】
大規模細胞培養物が１３Ｌである、請求項１２８に記載の方法。
【請求項１３１】
抗ＴＮＦα抗体が完全ヒト抗ＴＮＦα抗体である、請求項１０３から１２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３２】
抗ＴＮＦα抗体がアダリムマブである、請求項１３１に記載の方法。
【請求項１３３】
抗ＩＬ１２抗体が製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地を含む細胞培養物中で、抗体をコードする核酸を含むＣＨＯ細胞を培養すること、
ｂ）ある期間中、加水分解物濃縮溶液及び基本濃縮溶液を細胞培養物に添加することによって、ＣＨＯ細胞を培養すること
を含み、
基本濃縮溶液が基本培地、アスパラギン及びグルコースを含み、
加水分解物濃縮溶液が少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む、
抗ＩＬ１２抗体を製造する流加培養法。
【請求項１３４】
加水分解物濃縮溶液がグルコースを更に含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３５】
抗ＩＬ１２抗体を回収することを更に含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３６】
細胞培養物が約３２から３８℃の温度で培養される、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３７】
培養温度が約３３℃である、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３８】
細胞培養産生培地が溶存酸素約２０−６５％で維持される、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１３９】
細胞培養産生培地が溶存酸素約４０％で維持される、請求項１３８に記載の方法。
【請求項１４０】
細胞培養産生培地が約６．７から７．２のｐＨを有する、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１４１】
加水分解物濃縮溶液が、植物由来でも動物由来でもない加水分解物と植物系加水分解物とを含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１４２】
植物由来でも動物由来でもない加水分解物が酵母系加水分解物である、請求項１４１に記載の方法。
【請求項１４３】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１４２に記載の方法。
【請求項１４４】
加水分解物濃縮溶液が、約５０−２２５ｇ／ｋｇのダイズ系加水分解物、約７５−３００ｇ／ｋｇの酵母系加水分解物、及び約２から３ｇ／Ｌグルコースから本質的になる、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１４５】
基本濃縮溶液が、基本培地、アスパラギン及びグルコースを含む、請求項１３３に記載の方法。
【請求項１４６】
基本濃縮溶液が、約９．７のｐＨを有し、約１４００から１５００ｍＯｓｍの重量オスモル濃度を有する、請求項１４５に記載の方法。
【請求項１４７】
基本濃縮溶液中の基本培地がＰＦ ＣＨＯである、請求項１４５に記載の方法。
【請求項１４８】
期間が１４−１５日間である、請求項１３３から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４９】
基本濃縮溶液が、期間の５日目から１日おきに細胞培養産生培地に添加される、請求項１３３から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５０】
加水分解物濃縮溶液が、期間の６日目から毎日、細胞培養産生培地に添加される、請求項１３３から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５１】
基本濃縮溶液及び加水分解物濃縮溶液が、期間の５日目から毎日、細胞培養産生培地に添加される、請求項１３３から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５２】
細胞培養産生培地が、
ａ）以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤及び単糖グルコースを含まない、改変基本培地、
ｂ）約８から１２ｍｌ／ｋｇ又は１１０から１３０ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｃ）約５から８ｍＬ／ｋｇ又は１１から１５ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｄ）約５から９ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｅ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｆ）約１から２ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｇ）約１から２ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｈ）約２から３ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｉ）約０．１から２ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｊ）約０．０１から０．１ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４−Ｈ２Ｏ、
ｋ）約０．１から１ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４−７Ｈ２Ｏ、
ｌ）約６から１２ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｍ）約６から８ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項１３３から１４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５３】
細胞培養産生培地が、
ａ）約１０ｍｌ／ｋｇ又は１２２．４５ｍｇ／Ｌクエン酸鉄（ＩＩＩ）、
ｂ）約６．５ｍＬ／ｋｇ又は１３ｍｇ／ｋｇ組換えヒトインスリン、
ｃ）約７．０ｇ／ｋｇ無水グルコース、
ｄ）約０．５８から０．５９ｇ／ｋｇ Ｌ−グルタミン、
ｅ）約１．６ｇ／ｋｇ炭酸水素ナトリウム、
ｆ）約１．８ｇ／ｋｇ ＨＥＰＥＳ、
ｇ）約２．４５ｇ／ｋｇ ＮａＣｌ、
ｈ）約１．０ｇ／ｋｇ Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ−６８、
ｉ）約０．０３から０．０４ｇ／ｋｇ ＮａＨ２ＰＯ４−Ｈ２Ｏ、
ｊ）約０．４３から０．４４ｇ／ｋｇ Ｎａ２ＨＰＯ４−７Ｈ２Ｏ、
ｋ）約１０．７ｇ／ｋｇ酵母系加水分解物、及び
ｌ）約６．９から７．０ｇ／ｋｇ植物系加水分解物
を含む、請求項１５２に記載の方法。
【請求項１５４】
細胞培養物が大規模細胞培養物である、請求項１３３から１５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５５】
大規模細胞培養物が１０Ｌを超える、請求項１５４に記載の方法。
【請求項１５６】
大規模細胞培養物が約１３Ｌである、請求項１５４に記載の方法。
【請求項１５７】
抗ＩＬ１２抗体が完全ヒト抗ＩＬ１２抗体である、請求項１３３から１５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５８】
完全ヒト抗ＩＬ−１２抗体がＡＢＴ−８７４である、請求項１５７に記載の方法。
【請求項１５９】
ａ）グルコース、
ｂ）基本培地、
ｃ）グルタミン以外のアミノ酸、及び
ｄ）少なくとも２種類の非動物系加水分解物
を含み、
供給溶液が約６．０から８．０のｐＨを有する、
組合せ供給溶液。
【請求項１６０】
約１００から２５０ｇ／ｋｇグルコースを含む、請求項１５９に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６１】
アミノ酸がアスパラギンである、請求項１５９に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６２】
アスパラギン約１．０から１５．０ｇを含む、請求項１６０に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６３】
約３．０から５．０ｇ／ｋｇアスパラギンを含む、請求項１６１に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６４】
少なくとも２種類の非動物系加水分解物が、植物系加水分解物、及び動物系でも植物系でもない加水分解物である、請求項１５９に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６５】
動物系でも植物系でもない加水分解物が酵母系加水分解物である、請求項１６４に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６６】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１６４に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６７】
基本培地がＰＦ−ＣＨＯ又はＤＭＥＭ／Ｆ１２培地である、請求項１５９に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６８】
基本細胞培地が、改変基本培地であり、以下の成分、すなわち炭酸水素ナトリウム、緩衝剤、リン酸ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、重量オスモル濃度調節剤、界面活性剤、グルタミン及びグルコースを含まない、請求項１５９に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１６９】
約１５ＮＴＵ未満の濁度を更に有する、請求項１５９から１６８のいずれか一項に記載の組合せ供給溶液。
【請求項１７０】
請求項１５９から１６８のいずれか一項に記載の組合せ供給溶液を添加することを含む、細胞培養産生培地の定常グルコースレベルを維持する方法。
【請求項１７１】
ａ）グルコースと基本細胞培地を組み合わせて溶液にすること、
ｂ）ａ）の溶液のｐＨを約９．５から１０．５に調節すること、
ｃ）少なくとも２種類の非動物系加水分解物をｂ）の溶液に添加すること、及び
ｄ）組合せ供給溶液が約６．５から７．５のｐＨを有するように、ｃ）の溶液のｐＨを調節すること
を含む、基本培地、グルコース及び少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む組合せ供給溶液を製造する方法。
【請求項１７２】
段階ｃ）が、動物系でも植物系でもない第１の加水分解物と、第２の植物系加水分解物とを添加することを含む、請求項１７１に記載の方法。
【請求項１７３】
動物系でも植物系でもない加水分解物が酵母系加水分解物である、請求項１７２に記載の方法。
【請求項１７４】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１７２に記載の方法。
【請求項１７５】
少なくとも約１．５ｇ／Ｌの抗体が製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）約６．７から７．２のｐＨを有する組合せ供給溶液を細胞培養産生培地に添加すること（組合せ供給溶液は、グルコース、基本細胞培地、グルタミン以外のアミノ酸、及び少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む。）
を含む、ほ乳動物細胞培養物から少なくとも約１．５ｇ／Ｌの抗体を製造する方法。
【請求項１７６】
組合せ供給溶液が約１００から２５０ｇ／ｋｇグルコースを含む、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７７】
少なくとも２ｇ／Ｌの抗体が製造される、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７８】
少なくとも４ｇ／Ｌの抗体が製造される、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１７９】
少なくとも５ｇ／Ｌの抗体が製造される、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１８０】
約６ｇ／Ｌの抗体が製造される、請求項１７５に記載の方法。
【請求項１８１】
製造される抗体の力価が、段階ｂ）を含まずに段階ａ）によって培養された対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも５０％高くなるように、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）約６．７から７．２のｐＨを有する組合せ供給溶液を細胞培養産生培地に添加すること（組合せ供給溶液は、グルコース、基本細胞培地、グルタミン以外のアミノ酸、及び少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む。）
を含む、ほ乳動物細胞培養物から産生される抗体の力価を増加させる方法。
【請求項１８２】
製造される抗体の力価が対照よりも少なくとも１００％高い、請求項１８１に記載の方法。
【請求項１８３】
製造される抗体の力価が対照よりも少なくとも１５０％高い、請求項１８１に記載の方法。
【請求項１８４】
細胞密度が少なくとも２．０×１０６細胞／ｍＬに到達したときに、組合せ供給溶液が添加される、請求項１７５から１８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８５】
細胞密度が約３．５×１０６細胞／ｍＬに到達したときに、組合せ供給溶液が添加される、請求項１７５から１８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８６】
抗体が製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地中で、タンパク質をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）細胞培養産生培地中の代謝指標レベルを監視するフィードバック制御系を用いて、組合せ供給溶液を細胞培養産生培地に添加すること（組合せ供給溶液は、フィードバック制御系によって決定される時点で細胞培養産生培地に添加される。）
を含む、ほ乳動物細胞培養物中でタンパク質を製造する方法。
【請求項１８７】
ほ乳動物細胞がチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、請求項１８６に記載の方法。
【請求項１８８】
代謝指標がグルコース又はグルタミンである、請求項１８６又は１８７に記載の方法。
【請求項１８９】
供給溶液が、グルコース、基本細胞培地、グルタミン以外のアミノ酸及び少なくとも２種類の非動物系加水分解物を含む組合せ供給溶液である、請求項１８６又は１８７に記載の方法。
【請求項１９０】
タンパク質が抗体である、請求項１８６又は１８７に記載の方法。
【請求項１９１】
抗体が、抗ＴＮＦα抗体、抗ＩＬ−１２抗体、抗ＩＬ−１８抗体及び抗ＥＰＯ受容体（ＥＰＯ−Ｒ）抗体からなる群から選択される、請求項１９０に記載の方法。
【請求項１９２】
抗体が少なくとも１．５ｇ／Ｌの力価で製造される、請求項１９０又は１９１に記載の方法。
【請求項１９３】
抗体が少なくとも２ｇ／Ｌの力価で製造される、請求項１９０又は１９１に記載の方法。
【請求項１９４】
組合せ供給溶液が約３．０から１２．５ｇ／ｋｇアスパラギンを含む、請求項１７５から１８５及び１８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９５】
少なくとも２種類の非動物系加水分解物が、植物系加水分解物、及び動物系でも植物系でもない加水分解物を含む、請求項１７５から１８５及び１８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９６】
動物系でも植物系でもない加水分解物が酵母系加水分解物である、請求項１９５に記載の方法。
【請求項１９７】
植物系加水分解物がダイズ系加水分解物である、請求項１９５に記載の方法。
【請求項１９８】
組合せ供給溶液が約１００から２００ｇ／ｋｇグルコースを含む、請求項１７５から１８５及び１８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９９】
グルコースレベルが約０．２５から２０．０ｇ／Ｌに維持されるように、細胞培地中のグルコースレベルを監視することを更に含む、請求項１７５から１８５及び１８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２００】
グルコースレベルが自動試料採取装置を用いて監視される、請求項１９９に記載の方法。
【請求項２０１】
製造される抗体が、抗ＴＮＦα抗体、抗ＩＬ−１８抗体及び抗Ｉｌ−１２抗体からなる群から選択される、請求項１７５から１８５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０２】
抗ＴＮＦα抗体がＤ２Ｅ７（アダリムマブ）である、請求項１９１又は２０１に記載の方法。
【請求項２０３】
抗ＩＬ−１８抗体がＡＢＴ−３２５である、請求項１９１又は２０１に記載の方法。
【請求項２０４】
抗ＩＬ−１２抗体がＡＢＴ−８７４である、請求項１９１又は２０１に記載の方法。
【請求項２０５】
供給プロファイルが決定されるように、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）細胞培養産生培地中の代謝指標を監視するフィードバック制御系を用いて、組合せ供給溶液を細胞培養産生培地に添加すること（組合せ供給溶液は、目標代謝指標設定値に適合するように細胞培養産生培地に添加される。）、及び
ｃ）１日当たりに細胞培養産生培地に添加される組合せ供給溶液の量を決定すること
を含む、ほ乳動物細胞培養物中でタンパク質を産生するための供給プロファイルを決定する方法。
【請求項２０６】
代謝指標がグルコース又はグルタミンである、請求項２０５に記載の方法。
【請求項２０７】
請求項２０５に記載の供給プロファイルに従って、組合せ供給溶液をほ乳動物細胞培養物に添加することを含む、ほ乳動物細胞培養物中でタンパク質を製造する流加培養法。
【請求項２０８】
抗体が少なくとも１００ｍｇ／Ｌの力価で製造されるように、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、
ｂ）酪酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン又はこれらの組合せを細胞培地に添加すること（酪酸ナトリウムを約０．１ｍＭから１０ｍＭの最終濃度まで添加し、Ｎ−アセチルシステインを約１ｍＭから８０ｍＭの最終濃度まで添加する。）
を含む、抗体の力価が少なくとも１００ｍｇ／Ｌであるように、ほ乳動物細胞培養物中で抗体を製造する方法。
【請求項２０９】
抗体価が少なくとも１５０ｍｇ／Ｌである、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１０】
抗体価が少なくとも２００ｍｇ／Ｌである、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１１】
抗体価が少なくとも２５０ｍｇ／Ｌである、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１２】
抗体価が少なくとも３００ｍｇ／Ｌである、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１３】
抗体価が少なくとも４００ｍｇ／Ｌである、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１４】
抗体の力価が対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも１０％高くなるように（対照ほ乳動物細胞培養は、段階ａ）を含むが、段階ｂ）を含まない。）、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）酪酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン又はこれらの組合せを細胞培地に添加すること（酪酸ナトリウムを約０．１ｍＭから１０ｍＭの最終濃度まで添加し、Ｎ−アセチルシステインを約１ｍＭから８０ｍＭの最終濃度まで添加する。）
を含む、抗体の力価が対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも１０％高くなるように、ほ乳動物細胞培養物中で抗体を製造する方法。
【請求項２１５】
ほ乳動物細胞培養物の抗体価が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも２９％改善される、請求項２１４に記載の方法。
【請求項２１６】
ほ乳動物細胞培養物の抗体価が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも４０％改善される、請求項２１４に記載の方法。
【請求項２１７】
ほ乳動物細胞培養物の抗体価が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも７０％改善される、請求項２１４に記載の方法。
【請求項２１８】
ほ乳動物細胞培養物の抗体価が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも９０％高い、請求項２１４に記載の方法。
【請求項２１９】
酪酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン又はこれらの組合せが、ほ乳動物細胞培養物の増殖期中に、ほ乳動物細胞培養物に添加される、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２０】
酪酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン又はこれらの組合せが、培養時間の４日目から７日目にほ乳動物細胞培養物に添加される、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２１】
酪酸ナトリウム、Ｎ−アセチルシステイン又はこれらの組合せが、培養時間の０日目にほ乳動物細胞培養物に添加される、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２２】
酪酸ナトリウムの最終濃度が約０．１ｍＭから１０ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２３】
酪酸ナトリウムの最終濃度が約０．１ｍＭから８．０ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２４】
酪酸ナトリウムの最終濃度が、酪酸ナトリウムの約０．１ｍＭから３．０ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２５】
Ｎ−アセチルシステインの最終濃度が約２０ｍＭから６０ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２６】
Ｎ−アセチルシステインの最終濃度が約１０ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２７】
Ｎ−アセチルシステインの最終濃度が約８ｍＭである、請求項２０８から２１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２８】
ほ乳動物細胞培養物の寿命が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも３５％延長されるように（対照ほ乳動物細胞培養は、段階ａ）を含むが、段階ｂ）を含まない。）、
ａ）細胞培養産生培地中で、抗体をコードする核酸を含むほ乳動物細胞を培養すること、及び
ｂ）約１ｍＭから８０ｍＭ Ｎ−アセチルシステインを細胞培地に添加すること
を含む、ほ乳動物細胞培養物の寿命を対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも３５％延長する方法。
【請求項２２９】
ほ乳動物細胞培養物の寿命が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも約４５％延長される、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３０】
ほ乳動物細胞培養物の寿命が、対照ほ乳動物細胞培養物よりも少なくとも約５５％延長される、請求項２２８に記載の方法。
【請求項２３１】
最終濃度約８ｍＭのＮ−アセチルシステインを細胞培養産生培地に添加することを含む、請求項２２８から２３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３２】
抗体が、抗ＴＮＦα抗体、抗ＩＬ−１８抗体及び抗Ｉｌ−１２抗体からなる群から選択される、請求項２０８から２３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３３】
抗ＩＬ−１８抗体がＡＢＴ−３２５である、請求項２３２に記載の方法。
【図１】
【公表番号】特表２０１０−５０３３９７（Ｐ２０１０−５０３３９７Ａ）
【公表日】平成２２年２月４日（２０１０．２．４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５２８３０９（Ｐ２００９−５２８３０９）
【出願日】平成１９年９月１３日（２００７．９．１３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０２００２７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０３３５１７
【国際公開日】平成２０年３月２０日（２００８．３．２０）
【出願人】（３９１００８７８８）アボット・ラボラトリーズ (650)
【氏名又は名称原語表記】ＡＢＢＯＴＴ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＥＳ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２２年２月４日（２０１０．２．４）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年９月１３日（２００７．９．１３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０２００２７
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０３３５１７
【国際公開日】平成２０年３月２０日（２００８．３．２０）
【出願人】（３９１００８７８８）アボット・ラボラトリーズ (650)
【氏名又は名称原語表記】ＡＢＢＯＴＴ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＥＳ
【Ｆターム（参考）】
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