緑色植物および微生物におけるアルブチンの高レベル産生
本発明は、遺伝子改変緑色植物および微生物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法ならびに材料に関する。
Notice: Undefined index: DEJ in /mnt/www/gzt_disp.php on line 298
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）適切な条件下で緑色植物細胞を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）コリスミ酸の内因性供給源；
ｉｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
ｉｉｉ）ハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼの内因性供給源；ならびに
ｉｖ）構造：
Ｐ−Ｔ−Ｃ−Ｄ−ＣＰＬ
（式中、
Ｐはコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ遺伝子の発現を駆動するのに適切なプロモーターであり；Ｔはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドをコードする核酸分子であり；Ｃはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチド切断部位をコードする核酸分子であり；Ｄはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドドナーポリペプチドのＮ末端部分の４連続アミノ酸をコードする核酸分子であり；ＣＰＬは配列番号３０に記載のアミノ酸配列を有するコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸分子であり；Ｐ、Ｔ、Ｃ、Ｄ、およびＣＰＬは相互に作動的に結合されている）
を有するコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ発現カセット；
を有すること、および
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２】
ａ）適切な条件下で緑色植物細胞を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）コリスミ酸の内因性供給源；
ｉｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
ｉｉｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；ならびに
ｉｖ）構造：
Ｐ−Ｔ−Ｃ−Ｄ−ＣＰＬ
（式中、
Ｐはコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ遺伝子の発現を駆動するのに適切なプロモーターであり；Ｔはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドをコードする核酸分子であり；Ｃはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチド切断部位をコードする核酸分子であり；Ｄはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドドナーポリペプチドのＮ末端部分の４連続アミノ酸をコードする核酸分子であり；ＣＰＬは配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸分子であり；Ｐ、Ｔ、Ｃ、Ｄ、およびＣＰＬは相互に作動的に結合されている）
を有するコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ発現カセット；
を有すること、および
ｂ）工程ａ）において産生される緑色植物由来のハイドロキノン配糖体を回収すること、を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項３】
ａ）適切な条件下で緑色植物を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）パラ−クマロイル−ＣｏＡの内因性供給源；
ｉｉ）活性な４−ヒドロキシシナモイル−ＣｏＡヒドラターゼ／リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｉｉ） 配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
ｉｖ）活性なグルコシルトランスフェラーゼ酵素の内因性供給源；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）の緑色植物由来のハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項４】
ａ）適切な条件下で緑色植物を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）パラ−クマロイル−ＣｏＡの内因性供給源；
ｉｉ）活性な４−ヒドロキシシナモイル−ＣｏＡヒドラターゼ／リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｉｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｖ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）の緑色植物由来のハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項５】
ａ）適切な条件下で緑色植物を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）パラ−クマロイル−ＣｏＡの内因性供給源；
ｉｉ）コリスミ酸の内因性供給源；
ｉｉｉ）活性な４−ヒドロキシシナモイル−ＣｏＡヒドラターゼ／リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｖ）構造：
Ｐ−Ｔ−Ｃ−Ｄ−ＣＰＬ
（式中、
Ｐはコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ遺伝子の発現を駆動するのに適切なプロモーターであり；Ｔはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドをコードする核酸分子であり；Ｃはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチド切断部位をコードする核酸分子であり；Ｄはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドドナーポリペプチドのＮ末端部分の４連続アミノ酸をコードする核酸分子であり；ＣＰＬは配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸分子であり；Ｐ、Ｔ、Ｃ、Ｄ、およびＣＰＬは相互に作動的に結合されている）
を有するコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ発現カセット；
ｖ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
ｖｉ）活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素の内因性供給源；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）の緑色植物由来のハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項６】
ａ）適切な条件下で緑色植物細胞を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）パラ−クマロイル−ＣｏＡの内因性供給源；
ｉｉ）コリスミ酸の内因性供給源；
ｉｉｉ）活性な４−ヒドロキシシナモイル−ＣｏＡヒドラターゼ／リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｖ）構造：
Ｐ−Ｔ−Ｃ−Ｄ−ＣＰＬ
（式中、
Ｐはコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ遺伝子の発現を駆動するのに適切なプロモーターであり；Ｔはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドをコードする核酸分子であり；Ｃはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチド切断部位をコードする核酸分子であり；Ｄはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドドナーポリペプチドのＮ末端部分の４連続アミノ酸をコードする核酸分子であり；ＣＰＬは配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸分子であり；Ｐ、Ｔ、Ｃ、Ｄ、およびＣＰＬは相互に作動的に結合されている）
を有するコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ発現カセット；
ｖ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｖｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）の緑色植物由来のハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項７】
プロモーターが、３５Ｓプロモーター、ノパリンシンターゼプロモーター、オクトピンシンターゼプロモーター、カリフラワーモザイクウイルスプロモーター、リブロース−１，５−ビスリン酸カルボキシラーゼプロモーター、およびクロロフィルａ／ｂ結合タンパク質のプロモーターよりなる群から選択される、請求項１、２、５、または６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）輸送ペプチドが、タバコ、アラビドプシス（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ）、テンサイ、サトウキビ、ダイズ、アブラナ、ヒマワリ、ワタ、トウモロコシ、アルファルファ、コムギ、オオムギ、カラスムギ、モロコシ、イネ、カノーラ、キビ、豆類、エンドウ、ライムギ、アマ、またはイネ科牧草（ｆｏｒａｇｅ ｇｒａｓｓｅｓ）に由来する、請求項１、２、５、または６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
緑色植物細胞が、タバコ、アラビドプシス（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ）、テンサイ、およびサトウキビよりなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
コリスミ酸リアーゼ発現カセットが、配列番号３４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする、請求項１、２、５、または６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
活性な４−ヒドロキシシナモイル−ＣｏＡヒドラターゼ／リアーゼ酵素をコードする核酸断片が、配列番号３８に記載のアミノ酸配列に少なくとも９０％同一である、請求項３〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
工程（ｂ）において回収されるハイドロキノン配糖体が、植物葉バイオマスの乾燥重量あたり１０％を超える、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
工程（ｂ）において回収されるハイドロキノン配糖体が、植物葉バイオマスの乾燥重量あたり１５％を超える、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
工程（ｂ）において回収されるハイドロキノン配糖体が、植物葉バイオマスの乾燥重量あたり２０％を超える、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ａ）適切な炭素源の存在下、適切な条件下で組換え微生物を増殖させることであって、組換え微生物が、
ｉ）配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｉｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、組換え微生物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項１６】
ａ）パラ−ヒドロキシ安息香酸の存在下、適切な条件下で組換え微生物を増殖させることであって、組換え微生物が、
ｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、組換え微生物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項１７】
ａ）ハイドロキノンおよびＵＤＰ−グルコースの存在下、適切な条件下で組換え微生物を増殖させることであって、組換え微生物が、配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなること；および
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、組換え微生物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項１８】
ａ）配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｂ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
ｃ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；
を含んでなる組換え微生物。
【請求項１９】
宿主微生物が、
ａ）サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、エシェリヒア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、メチロモナス（Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｓ）、メチロバクター（Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、アルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、シネコシスティス（Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ）、アナベナ（Ａｎａｂａｅｎａ）、チオバチルス（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、メタノバクテリウム（Ｍｅｔｈａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、バークホルデリア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）、スピンゴモナス（Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ）、パラコッカス（Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ）、パンドレア（Ｐａｎｄｏｒａｅａ）、デルフチア（Ｄｅｌｆｔｉａ）、およびコマモナス（Ｃｏｍａｍｏｎａｓ）よりなる群から選択される細菌；
ｂ）アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、ピヒア（Ｐｉｃｈｉａ）、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）、およびハンセヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）よりなる群から選択される酵母；または
ｃ）糸状菌類
である、請求項１８に記載の組換え微生物。
【請求項２０】
宿主微生物が、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）である、請求項１９に記載の組換え微生物。
【請求項２１】
ａ）適切な炭素源を含んでなる水性培地において、適切な条件下で混合型微生物培養を増殖させることであって、混合型微生物培養が、
ｉ）１）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
２）配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸断片
を含んでなる組換えハイドロキノン産生微生物；ならびに
ｉｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなる組換えハイドロキノン配糖体産生微生物；
を、ハイドロキノン配糖体産生させるために、約１×１０６〜約２×１０１０細胞／ｍＬの各組換え微生物の細胞密度でかつ１：１超〜約１：２０の細胞比で過剰のハイドロキノン産生微生物対ハイドロキノン配糖体産生微生物を伴って含んでなること；および
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、ハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２２】
ａ） ｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン産生微生物；および
ｉｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン配糖体産生微生物；
を、ハイドロキノン配糖体産生させるために、パラ−ヒドロキシ安息香酸を含有する水性培地において適切な条件下で、約１×１０６〜約２×１０１０細胞／ｍＬの各組換え微生物の細胞密度でかつ１：１超〜約１：２０の細胞比で過剰のハイドロキノン産生微生物対ハイドロキノン配糖体産生微生物を伴ってなる混合型微生物培養を増殖させること、
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、ハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２３】
ａ）１）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片および２）配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン産生微生物と、水性培地とを適切な条件下で接触させ、ハイドロキノン含有培地を生成し；
（ｂ）工程ａ）において生成されるハイドロキノン含有培地に、配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン配糖体産生微生物を接種し、ハイドロキノン配糖体を産生するのに十分な時間、インキュベートし；ならびに
（ｃ）工程ｂ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、ハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２４】
ａ）パラ−ヒドロキシ安息香酸の存在下で、配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒド
ロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン産生微生物を接触させて、ハイドロキノン含有培地を産出すること；
（ｂ）工程ａ）において生成されるハイドロキノン含有培地に、配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン配糖体産生微生物を接種し、ハイドロキノン配糖体を産出するのに十分な時間、インキュベートすること；および
（ｃ）工程ｂ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、ハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２５】
宿主微生物が、
ａ）サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、エシェリヒア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、メチロモナス（Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｓ）、メチロバクター（Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、アルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、シネコシスティス（Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ）、アナベナ（Ａｎａｂａｅｎａ）、チオバチルス（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、メタノバクテリウム（Ｍｅｔｈａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、バークホルデリア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）、スピンゴモナス（Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ）、パラコッカス（Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ）、パンドレア（Ｐａｎｄｏｒａｅａ）、デルフチア（Ｄｅｌｆｔｉａ）およびコマモナス（Ｃｏｍａｍｏｎａｓ）よりなる群から選択される細菌；
ｂ）アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、ピヒア（Ｐｉｃｈｉａ）、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）、およびハンセヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）よりなる群から選択される酵母；または
ｃ）糸状菌類
である、請求項２１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
宿主微生物が、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
ａ）水性反応混合物において、適切な条件下で、配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素と、ハイドロキノンおよびＵＤＰ−グルコースを接触させ；ならびに
ｂ）工程（ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を単離すること、
を含んでなる、ハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２８】
ａ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列をコードする単離された核酸分子；
ｂ）デフォルトパラメータ下のＮｅｅｄｌｅｍａｎ（ニードルマン）およびＷｕｎｓｃｈ（ヴンシュ）アルゴリズムに基づいて、配列番号２３に記載のアミノ酸配列に少なくとも９０％同一性を有するポリペプチドをコードする単離された核酸分子；ならびに
ｃ）ａ）またはｂ）に完全に相補的である単離された核酸分子
よりなる群から選択されるパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片。
【請求項２９】
配列番号２３に記載のアミノ酸配列を有するパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素。
【請求項３０】
配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるトランスジェニック緑色植物。
【請求項３１】
配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片をさらに含んでなる、請求項３０に記載のトランスジェニック緑色植物。
【請求項３２】
宿主緑色植物が、タバコ、アラビドプシス（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ）、テンサイ、およびサトウキビよりなる群から選択される、請求項３０または３１に記載のトランスジェニック緑色植物。
【請求項１】
ａ）適切な条件下で緑色植物細胞を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）コリスミ酸の内因性供給源；
ｉｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
ｉｉｉ）ハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼの内因性供給源；ならびに
ｉｖ）構造：
Ｐ−Ｔ−Ｃ−Ｄ−ＣＰＬ
（式中、
Ｐはコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ遺伝子の発現を駆動するのに適切なプロモーターであり；Ｔはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドをコードする核酸分子であり；Ｃはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチド切断部位をコードする核酸分子であり；Ｄはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドドナーポリペプチドのＮ末端部分の４連続アミノ酸をコードする核酸分子であり；ＣＰＬは配列番号３０に記載のアミノ酸配列を有するコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸分子であり；Ｐ、Ｔ、Ｃ、Ｄ、およびＣＰＬは相互に作動的に結合されている）
を有するコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ発現カセット；
を有すること、および
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２】
ａ）適切な条件下で緑色植物細胞を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）コリスミ酸の内因性供給源；
ｉｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
ｉｉｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；ならびに
ｉｖ）構造：
Ｐ−Ｔ−Ｃ−Ｄ−ＣＰＬ
（式中、
Ｐはコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ遺伝子の発現を駆動するのに適切なプロモーターであり；Ｔはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドをコードする核酸分子であり；Ｃはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチド切断部位をコードする核酸分子であり；Ｄはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドドナーポリペプチドのＮ末端部分の４連続アミノ酸をコードする核酸分子であり；ＣＰＬは配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸分子であり；Ｐ、Ｔ、Ｃ、Ｄ、およびＣＰＬは相互に作動的に結合されている）
を有するコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ発現カセット；
を有すること、および
ｂ）工程ａ）において産生される緑色植物由来のハイドロキノン配糖体を回収すること、を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項３】
ａ）適切な条件下で緑色植物を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）パラ−クマロイル−ＣｏＡの内因性供給源；
ｉｉ）活性な４−ヒドロキシシナモイル−ＣｏＡヒドラターゼ／リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｉｉ） 配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
ｉｖ）活性なグルコシルトランスフェラーゼ酵素の内因性供給源；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）の緑色植物由来のハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項４】
ａ）適切な条件下で緑色植物を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）パラ−クマロイル−ＣｏＡの内因性供給源；
ｉｉ）活性な４−ヒドロキシシナモイル−ＣｏＡヒドラターゼ／リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｉｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｖ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）の緑色植物由来のハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項５】
ａ）適切な条件下で緑色植物を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）パラ−クマロイル−ＣｏＡの内因性供給源；
ｉｉ）コリスミ酸の内因性供給源；
ｉｉｉ）活性な４−ヒドロキシシナモイル−ＣｏＡヒドラターゼ／リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｖ）構造：
Ｐ−Ｔ−Ｃ−Ｄ−ＣＰＬ
（式中、
Ｐはコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ遺伝子の発現を駆動するのに適切なプロモーターであり；Ｔはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドをコードする核酸分子であり；Ｃはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチド切断部位をコードする核酸分子であり；Ｄはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドドナーポリペプチドのＮ末端部分の４連続アミノ酸をコードする核酸分子であり；ＣＰＬは配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸分子であり；Ｐ、Ｔ、Ｃ、Ｄ、およびＣＰＬは相互に作動的に結合されている）
を有するコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ発現カセット；
ｖ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
ｖｉ）活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素の内因性供給源；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）の緑色植物由来のハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項６】
ａ）適切な条件下で緑色植物細胞を増殖させることであって、緑色植物が、
ｉ）パラ−クマロイル−ＣｏＡの内因性供給源；
ｉｉ）コリスミ酸の内因性供給源；
ｉｉｉ）活性な４−ヒドロキシシナモイル−ＣｏＡヒドラターゼ／リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｖ）構造：
Ｐ−Ｔ−Ｃ−Ｄ−ＣＰＬ
（式中、
Ｐはコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ遺伝子の発現を駆動するのに適切なプロモーターであり；Ｔはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドをコードする核酸分子であり；Ｃはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチド切断部位をコードする核酸分子であり；Ｄはルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）葉緑体輸送ペプチドドナーポリペプチドのＮ末端部分の４連続アミノ酸をコードする核酸分子であり；ＣＰＬは配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸分子であり；Ｐ、Ｔ、Ｃ、Ｄ、およびＣＰＬは相互に作動的に結合されている）
を有するコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ発現カセット；
ｖ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｖｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）の緑色植物由来のハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、緑色植物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項７】
プロモーターが、３５Ｓプロモーター、ノパリンシンターゼプロモーター、オクトピンシンターゼプロモーター、カリフラワーモザイクウイルスプロモーター、リブロース−１，５−ビスリン酸カルボキシラーゼプロモーター、およびクロロフィルａ／ｂ結合タンパク質のプロモーターよりなる群から選択される、請求項１、２、５、または６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ルビスコ（Ｒｕｂｉｓｃｏ）輸送ペプチドが、タバコ、アラビドプシス（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ）、テンサイ、サトウキビ、ダイズ、アブラナ、ヒマワリ、ワタ、トウモロコシ、アルファルファ、コムギ、オオムギ、カラスムギ、モロコシ、イネ、カノーラ、キビ、豆類、エンドウ、ライムギ、アマ、またはイネ科牧草（ｆｏｒａｇｅ ｇｒａｓｓｅｓ）に由来する、請求項１、２、５、または６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
緑色植物細胞が、タバコ、アラビドプシス（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ）、テンサイ、およびサトウキビよりなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
コリスミ酸リアーゼ発現カセットが、配列番号３４に記載のアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする、請求項１、２、５、または６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
活性な４−ヒドロキシシナモイル−ＣｏＡヒドラターゼ／リアーゼ酵素をコードする核酸断片が、配列番号３８に記載のアミノ酸配列に少なくとも９０％同一である、請求項３〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
工程（ｂ）において回収されるハイドロキノン配糖体が、植物葉バイオマスの乾燥重量あたり１０％を超える、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
工程（ｂ）において回収されるハイドロキノン配糖体が、植物葉バイオマスの乾燥重量あたり１５％を超える、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
工程（ｂ）において回収されるハイドロキノン配糖体が、植物葉バイオマスの乾燥重量あたり２０％を超える、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ａ）適切な炭素源の存在下、適切な条件下で組換え微生物を増殖させることであって、組換え微生物が、
ｉ）配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｉｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、組換え微生物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項１６】
ａ）パラ−ヒドロキシ安息香酸の存在下、適切な条件下で組換え微生物を増殖させることであって、組換え微生物が、
ｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｉｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；
を含んでなること、および
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、組換え微生物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項１７】
ａ）ハイドロキノンおよびＵＤＰ−グルコースの存在下、適切な条件下で組換え微生物を増殖させることであって、組換え微生物が、配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなること；および
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、組換え微生物におけるハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項１８】
ａ）配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸断片；
ｂ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
ｃ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片；
を含んでなる組換え微生物。
【請求項１９】
宿主微生物が、
ａ）サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、エシェリヒア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、メチロモナス（Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｓ）、メチロバクター（Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、アルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、シネコシスティス（Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ）、アナベナ（Ａｎａｂａｅｎａ）、チオバチルス（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、メタノバクテリウム（Ｍｅｔｈａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、バークホルデリア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）、スピンゴモナス（Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ）、パラコッカス（Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ）、パンドレア（Ｐａｎｄｏｒａｅａ）、デルフチア（Ｄｅｌｆｔｉａ）、およびコマモナス（Ｃｏｍａｍｏｎａｓ）よりなる群から選択される細菌；
ｂ）アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、ピヒア（Ｐｉｃｈｉａ）、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）、およびハンセヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）よりなる群から選択される酵母；または
ｃ）糸状菌類
である、請求項１８に記載の組換え微生物。
【請求項２０】
宿主微生物が、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）である、請求項１９に記載の組換え微生物。
【請求項２１】
ａ）適切な炭素源を含んでなる水性培地において、適切な条件下で混合型微生物培養を増殖させることであって、混合型微生物培養が、
ｉ）１）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片；および
２）配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸断片
を含んでなる組換えハイドロキノン産生微生物；ならびに
ｉｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなる組換えハイドロキノン配糖体産生微生物；
を、ハイドロキノン配糖体産生させるために、約１×１０６〜約２×１０１０細胞／ｍＬの各組換え微生物の細胞密度でかつ１：１超〜約１：２０の細胞比で過剰のハイドロキノン産生微生物対ハイドロキノン配糖体産生微生物を伴って含んでなること；および
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、ハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２２】
ａ） ｉ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン産生微生物；および
ｉｉ）配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン配糖体産生微生物；
を、ハイドロキノン配糖体産生させるために、パラ−ヒドロキシ安息香酸を含有する水性培地において適切な条件下で、約１×１０６〜約２×１０１０細胞／ｍＬの各組換え微生物の細胞密度でかつ１：１超〜約１：２０の細胞比で過剰のハイドロキノン産生微生物対ハイドロキノン配糖体産生微生物を伴ってなる混合型微生物培養を増殖させること、
ｂ）工程ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、ハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２３】
ａ）１）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片および２）配列番号３０に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン産生微生物と、水性培地とを適切な条件下で接触させ、ハイドロキノン含有培地を生成し；
（ｂ）工程ａ）において生成されるハイドロキノン含有培地に、配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン配糖体産生微生物を接種し、ハイドロキノン配糖体を産生するのに十分な時間、インキュベートし；ならびに
（ｃ）工程ｂ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、ハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２４】
ａ）パラ−ヒドロキシ安息香酸の存在下で、配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒド
ロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン産生微生物を接触させて、ハイドロキノン含有培地を産出すること；
（ｂ）工程ａ）において生成されるハイドロキノン含有培地に、配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるハイドロキノン配糖体産生微生物を接種し、ハイドロキノン配糖体を産出するのに十分な時間、インキュベートすること；および
（ｃ）工程ｂ）において産生されるハイドロキノン配糖体を回収すること、
を含んでなる、ハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２５】
宿主微生物が、
ａ）サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、アシネトバクター（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ）、ロドコッカス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ）、ストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、エシェリヒア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、メチロモナス（Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｓ）、メチロバクター（Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒ）、アルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、シネコシスティス（Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ）、アナベナ（Ａｎａｂａｅｎａ）、チオバチルス（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、メタノバクテリウム（Ｍｅｔｈａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、クレブシエラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、バークホルデリア（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ）、スピンゴモナス（Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ）、パラコッカス（Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ）、パンドレア（Ｐａｎｄｏｒａｅａ）、デルフチア（Ｄｅｌｆｔｉａ）およびコマモナス（Ｃｏｍａｍｏｎａｓ）よりなる群から選択される細菌；
ｂ）アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、トリコデルマ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）、ピヒア（Ｐｉｃｈｉａ）、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）、およびハンセヌラ（Ｈａｎｓｅｎｕｌａ）よりなる群から選択される酵母；または
ｃ）糸状菌類
である、請求項２１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
宿主微生物が、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
ａ）水性反応混合物において、適切な条件下で、配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素と、ハイドロキノンおよびＵＤＰ−グルコースを接触させ；ならびに
ｂ）工程（ａ）において産生されるハイドロキノン配糖体を単離すること、
を含んでなる、ハイドロキノン配糖体の産生方法。
【請求項２８】
ａ）配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列をコードする単離された核酸分子；
ｂ）デフォルトパラメータ下のＮｅｅｄｌｅｍａｎ（ニードルマン）およびＷｕｎｓｃｈ（ヴンシュ）アルゴリズムに基づいて、配列番号２３に記載のアミノ酸配列に少なくとも９０％同一性を有するポリペプチドをコードする単離された核酸分子；ならびに
ｃ）ａ）またはｂ）に完全に相補的である単離された核酸分子
よりなる群から選択されるパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片。
【請求項２９】
配列番号２３に記載のアミノ酸配列を有するパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素。
【請求項３０】
配列番号２３に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なパラ−ヒドロキシ安息香酸１−ヒドロキシラーゼ酵素をコードする核酸断片を含んでなるトランスジェニック緑色植物。
【請求項３１】
配列番号４２に記載のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を有する活性なハイドロキノングルコシルトランスフェラーゼ酵素をコードする核酸断片をさらに含んでなる、請求項３０に記載のトランスジェニック緑色植物。
【請求項３２】
宿主緑色植物が、タバコ、アラビドプシス（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ）、テンサイ、およびサトウキビよりなる群から選択される、請求項３０または３１に記載のトランスジェニック緑色植物。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公表番号】特表２００７−５２５９６６（Ｐ２００７−５２５９６６Ａ）
【公表日】平成１９年９月１３日（２００７．９．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５１７４４８（Ｐ２００６−５１７４４８）
【出願日】平成１６年６月１６日（２００４．６．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１９６４３
【国際公開番号】ＷＯ２００４／１１３５０４
【国際公開日】平成１６年１２月２９日（２００４．１２．２９）
【出願人】（３９００２３６７４）イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー (2,692)
【氏名又は名称原語表記】Ｅ．Ｉ．ＤＵ ＰＯＮＴ ＤＥ ＮＥＭＯＵＲＳ ＡＮＤ ＣＯＭＰＡＮＹ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１９年９月１３日（２００７．９．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年６月１６日（２００４．６．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／０１９６４３
【国際公開番号】ＷＯ２００４／１１３５０４
【国際公開日】平成１６年１２月２９日（２００４．１２．２９）
【出願人】（３９００２３６７４）イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー (2,692)
【氏名又は名称原語表記】Ｅ．Ｉ．ＤＵ ＰＯＮＴ ＤＥ ＮＥＭＯＵＲＳ ＡＮＤ ＣＯＭＰＡＮＹ
【Ｆターム（参考）】
[ Back to top ]