本発明は、がんの発がんにおいてＣＳＴＦ２遺伝子が果たす役割に関し、ＣＳＴＦ２遺伝子に対する二本鎖分子、またはそのような二本鎖分子を含む組成物、ベクター、もしくは細胞を投与することにより、がんを治療または予防するための方法を特徴とする。本発明はまた、ＣＳＴＦ２遺伝子の過剰発現を用いて、がんを診断するため、または肺癌を有する対象の予後を評価／判定するための方法を特徴とする。そのために、ＣＳＴＦ２はがん、特に肺癌の新規予後バイオマーカーとして役立ち得る。また、ＣＳＴＦ２の発現または生物学的活性に対するその効果を指標として用いて、がんを治療および予防するための候補物質をスクリーニングする方法も開示される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象におけるがんまたはがんを発症する素因を診断するための方法であって、
（ａ）（ｉ）ＣＳＴＦ２遺伝子のｍＲＮＡを検出すること、
（ｉｉ）ＣＳＴＦ２遺伝子によってコードされるタンパク質を検出すること、および
（ｉｉｉ）ＣＳＴＦ２遺伝子によってコードされるタンパク質の生物学的活性を検出すること
からなる群より選択される方法のいずれか１つにより、対象由来の生物学的試料中のＣＳＴＦ２遺伝子の発現レベルを測定する段階；ならびに
（ｂ）ＣＳＴＦ２遺伝子の正常対照レベルと比較した、段階（ａ）で測定された発現レベルの上昇を、該対象におけるがんの存在と関連付ける段階
を含む、方法。
【請求項２】
段階（ａ）で測定された発現レベルが前記正常対照レベルよりも少なくとも１０％高い、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記対象由来の生物学的試料が生検試料、痰、血液、胸水、または尿を含む、請求項１記載の方法。
【請求項４】
がんを有する対象の予後を評価または判定するための方法であって、
（ａ）対象由来の生物学的試料中のＣＳＴＦ２遺伝子の発現レベルを検出する段階；
（ｂ）検出された発現レベルを対照レベルと比較する段階；および
（ｃ）（ｂ）の比較に基づいて、該対象の予後を判定する段階
を含む、方法。
【請求項５】
前記対照レベルが予後良好対照レベルであり、該対照レベルと比較して発現レベルが上昇していることにより予後不良が示される、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記上昇が前記対照レベルよりも少なくとも１０％高い、請求項５記載の方法。
【請求項７】
前記発現レベルが、
（ａ）ＣＳＴＦ２遺伝子のｍＲＮＡを検出すること；
（ｂ）ＣＳＴＦ２遺伝子によってコードされるタンパク質を検出すること；および
（ｃ）ＣＳＴＦ２遺伝子によってコードされるタンパク質の生物学的活性を検出すること
からなる群より選択される方法のいずれか１つによって測定される、請求項４記載の方法。
【請求項８】
前記対象由来の生物学的試料が生検試料、痰、または血液、胸水、または尿を含む、請求項４記載の方法。
【請求項９】
（ａ）ＣＳＴＦ２遺伝子のｍＲＮＡを検出するための試薬；
（ｂ）ＣＳＴＦ２遺伝子によってコードされるタンパク質を検出するための試薬；および
（ｃ）ＣＳＴＦ２遺伝子によってコードされるタンパク質の生物学的活性を検出するための試薬
からなる群より選択される試薬を含む、がんを診断するため、またはがんを有する対象の予後を評価もしくは判定するためのキット。
【請求項１０】
前記試薬が、ＣＳＴＦ２遺伝子の遺伝子転写物に対するプローブもしくはプライマー、またはＣＳＴＦ２遺伝子の翻訳産物に対する抗体を含む、請求項９記載のキット。
【請求項１１】
細胞に導入された場合に、ＣＳＴＦ２遺伝子のインビボ発現および細胞増殖を阻害する、単離された二本鎖分子であって、該分子が、互いにハイブリダイズして二本鎖分子を形成するセンス鎖およびそれに相補的なアンチセンス鎖を含む、単離された二本鎖分子。
【請求項１２】
前記センス鎖が、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９および１０からなる群より選択される標的配列に相当する配列を含む、請求項１１記載の二本鎖分子。
【請求項１３】
前記センス鎖が標的配列においてアンチセンス鎖とハイブリダイズして、１９〜２５ヌクレオチド対の長さを有する二本鎖分子を形成する、請求項１１または１２記載の二本鎖分子。
【請求項１４】
介在一本鎖によって連結されたセンス鎖およびアンチセンス鎖の両方を含む単一ポリヌクレオチドからなる、請求項１１〜１３のいずれか一項記載の二本鎖分子。
【請求項１５】
一般式
５'−［Ａ］−［Ｂ］−［Ａ'］−３'
を有する二本鎖分子であって、［Ａ］は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９および１０からなる群より選択される標的配列に相当する配列を含むセンス鎖であり、［Ｂ］は３〜２３ヌクレオチドからなる介在一本鎖であり、かつ［Ａ'］は、［Ａ］において選択される標的配列に対する相補配列を含むアンチセンス鎖である、請求項１４記載の二本鎖分子。
【請求項１６】
請求項１１〜１５のいずれか一項記載の二本鎖分子をコードするベクター。
【請求項１７】
ＣＳＴＦ２遺伝子に対する二本鎖分子または該二本鎖分子をコードするベクターの薬学的有効量を対象に投与する段階を含む、対象におけるがんを治療または予防する方法であって、該二本鎖分子が、ＣＳＴＦ２遺伝子を発現する細胞に導入された場合にＣＳＴＦ２遺伝子の発現を阻害する、方法。
【請求項１８】
前記二本鎖分子が請求項１１〜１５のいずれか一項記載のものである、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
前記ベクターが請求項１６記載のものである、請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
ＣＳＴＦ２遺伝子に対する少なくとも１つの単離された二本鎖分子、または該二本鎖分子をコードするベクター、および薬学的に許容される担体を含む、ＣＳＴＦ２遺伝子を発現するがんを治療するための組成物であって、該二本鎖分子が、ＣＳＴＦ２遺伝子を発現する細胞に導入された場合にＣＳＴＦ２遺伝子の発現を阻害する、組成物。
【請求項２１】
前記二本鎖分子が請求項１１〜１５のいずれか一項記載のものである、請求項２０記載の組成物。
【請求項２２】
前記ベクターが請求項１６記載のものである、請求項２０記載の組成物。
【請求項２３】
がんを治療もしくは予防するためまたはがん細胞の増殖を阻害するための候補物質をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験物質をＣＳＴＦ２ポリペプチドまたはその断片と接触させる段階；
（ｂ）該ポリペプチドまたは断片と該試験物質との間の結合活性を検出する段階；および
（ｃ）該ポリペプチドまたは断片に結合する試験物質を、がんを治療または予防するための候補物質として選択する段階
を含む、方法。
【請求項２４】
がんを治療もしくは予防するためまたはがん細胞の増殖を阻害するための候補物質をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験物質をＣＳＴＦ２ポリペプチドまたはその断片と接触させる段階；
（ｂ）該ポリペプチドまたは断片の生物学的活性を検出する段階；
（ｃ）該ポリペプチドまたは断片の生物学的活性を、該試験物質の非存在下で検出された生物学的活性と比較する段階；および
（ｄ）該ポリペプチドの生物学的活性を抑制する試験物質を、がんを治療または予防するための候補物質として選択する段階
を含む、方法。
【請求項２５】
前記生物学的活性が細胞増殖活性、ＲＮＡ結合活性、ｍＲＮＡ切断活性、またはｍＲＮＡポリアデニル化活性である、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
がんを治療もしくは予防するためまたはがん細胞の増殖を阻害するための候補物質をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験物質を、ＣＳＴＦ２遺伝子を発現する細胞と接触させる段階；および
（ｂ）試験物質の非存在下で検出された発現レベルと比較して、ＣＳＴＦ２遺伝子の発現レベルを低下させる該試験物質を選択する段階
を含む、方法。
【請求項２７】
がんを治療もしくは予防するためまたはがん細胞の増殖を阻害するための候補物質をスクリーニングする方法であって、
（ａ）試験物質を、ＣＳＴＦ２遺伝子の転写調節領域および該転写調節領域の制御下で発現するレポーター遺伝子を含むベクターを導入した細胞と接触させる段階；
（ｂ）該レポーター遺伝子の発現または活性を測定する段階；ならびに
（ｃ）試験物質の非存在下で検出された発現または活性レベルと比較して、該レポーター遺伝子の発現または活性レベルを低下させる該試験物質を選択する段階
を含む、方法。
【請求項２８】
抗ＣＳＴＦ２抗体またはその免疫学的活性断片を対象に投与する段階を含む、該対象におけるがんを治療または予防するための方法。
【請求項２９】
がんが肺癌である、請求項１〜８、１７〜１９、および２３〜２８のいずれか一項記載の方法、請求項９もしくは１０記載のキット、または請求項２０〜２２のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３０】
ＣＳＴＦ２遺伝子を発現する細胞に導入された場合に細胞増殖を阻害する、センス鎖核酸およびアンチセンス鎖核酸を含むポリヌクレオチドの組み合わせのそれぞれを含むベクターであって、該センス鎖核酸がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９または１０に相当するヌクレオチド配列を含み、該アンチセンス鎖核酸が該センス鎖に相補的な配列からなり、該センス鎖と該アンチセンス鎖の転写物が互いにハイブリダイズして二本鎖分子を形成する、ベクター。

【図１ａｂ】

【図１ｃ】

【図２ａｂ】

【図２ｃｄ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図４Ｃ】

【公表番号】特表２０１３−５０２２０１（Ｐ２０１３−５０２２０１Ａ）
【公表日】平成２５年１月２４日（２０１３．１．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５０８８３７（Ｐ２０１２−５０８８３７）
【出願日】平成２２年８月１８日（２０１０．８．１８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２０１０／００５０９５
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０２１３８６
【国際公開日】平成２３年２月２４日（２０１１．２．２４）
【出願人】（５０２２４０１１３）オンコセラピー・サイエンス株式会社 (142)
【Ｆターム（参考）】