説明

胚体内胚葉を分化させるための因子を同定する方法

【課題】細胞療法用途で有用である細胞を生成するための出発材料としてのhESCの効率的な指示分化を課題とする。
【解決手段】培地、ヒト胚体外内胚葉細胞、およびヒト胚体内胚葉細胞を含むインビトロ細胞培養物であって、該胚体内胚葉細胞が腸管またはそれに由来する器官の細胞に分化し得る多分化能性細胞であり、該胚体外内胚葉細胞が該細胞培養物中の細胞の5%未満である、細胞培養物。


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【特許請求の範囲】
【請求項1】
培地、ヒト胚体外内胚葉細胞、およびヒト胚体内胚葉細胞を含むインビトロ細胞培養物であって、該胚体内胚葉細胞が腸管またはそれに由来する器官の細胞に分化し得る多分化能性細胞であり、該胚体外内胚葉細胞が該細胞培養物中の細胞の5%未満である、細胞培養物。
【請求項2】
前記胚体外内胚葉細胞および前記胚体内胚葉細胞が、合わせて、前記細胞培養物中の細胞の10%を超える、請求項1に記載の細胞培養物。
【請求項3】
前記胚体外内胚葉細胞および前記胚体内胚葉細胞が、合わせて、前記細胞培養物中の細胞の15%を超える、請求項1に記載の細胞培養物。
【請求項4】
ヒト多能性幹細胞をさらに含む請求項1に記載の細胞培養物。
【請求項5】
前記ヒト多能性幹細胞が胚性幹細胞を含む、請求項4に記載の細胞培養物。
【請求項6】
前記胚性幹細胞が、桑実胚および胚の内部細胞塊(ICM)からなる群から選択される組織に由来する、請求項5に記載の細胞培養物。
【請求項7】
前記培地がB27を欠いている、請求項1〜6のいずれか1項に記載の細胞培養物。
【請求項8】
前記培地が血清代替物を欠いている、請求項1〜7のいずれか1項に記載の細胞培養物。
【請求項9】
前記培地がTGFβスーパーファミリーのノーダル/アクチビンサブグループの増殖因子を含む、請求項1〜8のいずれか1項に記載の細胞培養物。
【請求項10】
前記TGFβスーパーファミリーのノーダル/アクチビンサブグループの増殖因子がノーダル、アクチビンA、アクチビンBおよびそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項9に記載の細胞培養物。
【請求項11】
前記胚体外内胚葉細胞が、臓側内胚葉細胞を含む、請求項1〜10のいずれか1項に記載の細胞培養物。
【請求項12】
前記胚体外内胚葉細胞が、5%未満の臓側内胚葉細胞を含む、請求項11に記載の細胞培養物。
【請求項13】
前記胚体外内胚葉細胞が、壁側内胚葉細胞を含む、請求項1〜10のいずれか1項に記載の細胞培養物。
【請求項14】
前記胚体外内胚葉細胞が、5%未満の壁側内胚葉細胞を含む、請求項13に記載の細胞培養物。

【図1】
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【図2】
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【図3】
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【図4】
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【図7】
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【図8】
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【図9】
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【図11】
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【図12】
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【図13】
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【図14】
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【図18】
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【図19】
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【図20】
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【図21】
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【図22】
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【図23】
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【図24】
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【図26】
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【図29】
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【図30】
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【図31】
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【図32】
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【図33】
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【図34−1】
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【図34−2】
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【図34−3】
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【図35】
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【図36】
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【図37】
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【図38】
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【図39】
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【図40】
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【図41】
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【図42】
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【図43】
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【図44】
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【図45】
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【図46】
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【図47】
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【図48】
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【図49】
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【図51】
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【図52−1】
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【図52−2】
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【図5】
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【図6】
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【図10】
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【図15】
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【図16】
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【図17】
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【図25】
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【図27】
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【図28】
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【図50】
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【公開番号】特開2012−152222(P2012−152222A)
【公開日】平成24年8月16日(2012.8.16)
【国際特許分類】
【出願番号】特願2012−92437(P2012−92437)
【出願日】平成24年4月13日(2012.4.13)
【分割の表示】特願2007−520340(P2007−520340)の分割
【原出願日】平成17年6月23日(2005.6.23)
【出願人】(503431792)ヴィアサイト,インコーポレイテッド (9)
【Fターム(参考)】