本開示は、脂肪酸生合成に関与する植物の遺伝子を標的化する改変ジンクフィンガータンパク質に関する。遺伝子発現の変調、遺伝子の不活性化、および標的化遺伝子の変更におけるそういったジンクフィンガータンパク質の使用方法もまた提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１種類の内因性植物遺伝子の発現を変調する非天然ジンクフィンガータンパク質であって、上記少なくとも１種類の植物遺伝子が脂肪酸生合成に関与し、かつ、それが以下の：β−ケトアシル−ＡＣＰシンテターゼ（ＫＡＳ）遺伝子、脂肪酸チオエステラーゼＢ（ＦａｔＢ）遺伝子、脂肪酸シンターゼ（ＦＡＳ）遺伝子、脂肪酸エロンガーゼ遺伝子、脂肪酸チオエステラーゼ（ＦａｔＡ）遺伝子、色素体Ｇ−３−Ｐデヒドロゲナーゼ（ＧＰＤＨ）遺伝子、グリセロキナーゼ（ＧＫ）遺伝子、ステアロイル−アシル担体タンパク質デサチュラーゼ（Ｓ−ＡＣＰ−ＤＥＳ）遺伝子、およびオレオイル−ＡＣＰヒドロラーゼ遺伝子から成る群から選択される前記非天然ジンクフィンガータンパク質。
【請求項２】
請求項１に記載のジンクフィンガータンパク質と機能ドメインを含む融合タンパク質。
【請求項３】
前記機能ドメインが、転写調節ドメインまたは切断ドメインである、請求項２に記載の融合タンパク質。
【請求項４】
前記植物遺伝子がアブラナ属植物の中に含まれている、請求項１〜３のいずれか１項に記載のジンクフィンガータンパク質または融合タンパク質。
【請求項５】
前記ジンクフィンガータンパク質が、表２または表１０Ａに示す標的部位に結合する、請求項４に記載のジンクフィンガータンパク質。
【請求項６】
前記ジンクフィンガータンパク質が、表１または表１０Ｂの行中に示す認識ヘリックス領域を含む、請求項４に記載のジンクフィンガータンパク質。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の１以上のジンクフィンガータンパク質または融合タンパク質をコードするポリヌクレオチド。
【請求項８】
植物細胞内の脂肪酸生合成に関与する１以上の遺伝子の変更方法であって、以下のステップ：
請求項７に記載の少なくとも１つのポリヌクレオチドを含む１以上の発現ベクターを、前記１以上のジンクフィンガータンパク質が発現され、そして該１以上の遺伝子が変更されるような条件下、該植物細胞内に導入する、
を含む前記方法。
【請求項９】
前記変更が、少なくとも１種類の遺伝子の発現を変調することを含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
少なくとも１種類の遺伝子の発現が活性化される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
少なくとも１種類の遺伝子の発現が抑制される、請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記ポリヌクレオチドがジンクフィンガーヌクレアーゼをコードし、かつ、少なくとも１種類の遺伝子が切断される、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
ドナーベクターが相同組換えにより切断部位に導入されるように、該ドナー核酸を導入するステップをさらに含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
請求項８〜１３のいずれか１項に記載の方法によって変更した少なくとも１種類の遺伝子を含む植物細胞。
【請求項１５】
前記細胞が種子内にあり、かつ、該種子の脂肪酸含有量が変更されている、請求項１４に記載の植物細胞。
【請求項１６】
請求項１４または１５に記載の少なくとも１つの細胞を含む植物。
【請求項１７】
請求項１６に記載の植物の種子または子孫。
【請求項１８】
請求項１〜６のいずれか１項に記載のジンクフィンガータンパク質または請求項７に記載のポリヌクレオチドを含む少なくとも１つの細胞を含む植物。
【請求項１９】
請求項１８に記載の植物の種子または子孫。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図７Ｃ】

【図７Ｄ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図８Ｃ】

【図８Ｄ】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【公表番号】特表２０１３−５０７９６０（Ｐ２０１３−５０７９６０Ａ）
【公表日】平成２５年３月７日（２０１３．３．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５３５１９２（Ｐ２０１２−５３５１９２）
【出願日】平成２２年１０月２２日（２０１０．１０．２２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／００２８１７
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０４９６２７
【国際公開日】平成２３年４月２８日（２０１１．４．２８）
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．テフロン
【出願人】（３９００３９１９２）ダウ・アグロサイエンス・エル・エル・シー (20)
【氏名又は名称原語表記】Ｄｏｗ　ＡｇｒｏＳｃｉｅｎｃｅｓ　ＬＬＣ
【出願人】（５０８２４１２００）サンガモ　バイオサイエンシーズ，　インコーポレイテッド (28)
【Ｆターム（参考）】