脂質吸収抑制剤
【課題】食習慣があり安全である植物由来成分を有効成分として、副作用が少なく、長期投与可能な脂質吸収抑制剤を提供することを目的とする。
【解決手段】マウスにおける脂質負荷試験において、３−ブテニルグルコシノレート及び２−プロペニルグルコシノレートは８０μｍｏｌ／ｋｇ経口投与にて有意に脂質吸収抑制効果を示し、ならびにアルケニルグルコシノレート類を含有する大和マナ熱水抽出物も経口投与にて脂質吸収抑制傾向を示した。
【解決手段】マウスにおける脂質負荷試験において、３−ブテニルグルコシノレート及び２−プロペニルグルコシノレートは８０μｍｏｌ／ｋｇ経口投与にて有意に脂質吸収抑制効果を示し、ならびにアルケニルグルコシノレート類を含有する大和マナ熱水抽出物も経口投与にて脂質吸収抑制傾向を示した。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）植物由来のグルコシノレート類、特にアルケニルグルコシノレートを有効成分として含有することを特徴とする脂質吸収抑制剤、ならびにそれを配合してなる医薬品および飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、食生活の欧米化に伴い、特に脂肪摂取量の増加によって肥満を始めとする生活習慣病患者が急増していることが指摘されている。肥満は、摂取エネルギーと消費エネルギーのアンバランスを特徴とするエネルギー代謝異常であり、結果として脂肪細胞に中性脂肪が過剰に蓄積した状態と定義されている。食事により摂取された脂肪は、腸管内で分解・吸収され、生体内でエネルギーとして蓄積される。しかしながら、脂肪の過剰摂取や消費カロリー不足等により、エネルギーの吸収量が消費量を上回った場合には、生体内の組織や臓器において脂肪の過剰蓄積が起こり、肥満や脂質異常症等の症状が生じる。これらの症状は、動脈硬化、糖尿病、脂質異常症等の生活習慣病の発症にも関与していることが分かっている。そのため、血中脂質濃度を適正なレベルに維持あるいは改善することは、生活習慣病の予防に非常に重要であると考えられている。
【０００３】
また、近年、予防的な観点から、ヒトの健康状態や食品機能を科学的に研究する機能性食品、特にその有効成分の研究が盛んになされている。アブラナ科植物由来のイソチオシアネート化合物およびその配糖体（グルコシノレート）は、抗菌活性、ガン予防効果等様々な生理活性作用にて注目を集めている（非特許文献１）。アブラナ科植物において、グルコシノレートを実質的に含まないわさび含水溶媒抽出物を有効成分とする前駆脂肪細胞の分化抑制作用剤または脂肪分解作用剤に関する開示がある（特許文献１）。一方、マカまたはベンジルグルコシノレートを有効成分とする抗肥満作用および血中脂質低下作用に関する特許出願はあるが（特許文献２）、アルケニルグルコシノレートを有効成分とすることを特徴とする脂質吸収抑制剤に関する開示はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００６−３２８０５６号公報
【特許文献２】特開２００７−２３０９８７号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｙ．Ｚｈａｎｇら、プロシーディングス・オブ・ザ・ニュートリ ション・ソサイアティ（Ｐｒｏｃ Ｎｕｔｒ Ｓｏｃ．）、第６５巻、６８−７５頁、２００６年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、植物食品由来で副作用が少なく、持続的かつ予防的な摂取あるいは投与可能な脂質吸収抑制剤、ならびにそれを配合してなる医薬品および飲食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは上記目的を達成すべく、植物食品由来で安全性が高く、脂質吸収抑制作用を示す物質について鋭意検討した結果、アブラナ科植物由来のグルコシノレート、特にアルケニルグルコシノレートに脂質吸収抑制効果があることを見出し、本発明を完成させた。
【０００８】
即ち、本発明は以下の発明を包含する。
（１）アルケニルグルコシノレートを有効成分として含有することを特徴とする脂質吸収抑制剤；
（２）前記アルケニルグルコシノレートのアルケニル基が、炭素数３〜７個の直鎖または分枝状のアルケニル基である（１）記載の剤；
（３）前記アルケニルグルコシノレートが、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレート、５−ヘキセニルグルコシノレート、６−へプテニルグルコシノレート、２−メチル−２−プロペニルグルコシノレート、３−メチル−３−ブテニルグルコシノレート、１−ペンテニルグルコシノレートから選択される１種または２種以上であることを特徴とする（１）または（２）記載の剤；
（４）前記アルケニルグルコシノレートが、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレートから選択される１種または２種以上であることを特徴とする（１）〜（３）のいずれかに記載の剤；
（５）前記アルケニルグルコシノレートが、アブラナ科植物（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）を原料とした、（１）〜（４）のいずれかに記載の剤；
（６）前記アブラナ科植物が、大和マナ（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ Ｌ．）である（５）記載の剤；
（７）前記アルケニルグルコシノレートを含有するものとして大和マナ抽出物を用いることを特徴とする（１）記載の剤；
（８）（１）〜（７）のいずれかに記載の剤を配合してなる飲食品；
（９）（１）〜（７）のいずれかに記載の剤を配合してなる医薬品；
などに関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、副作用が少なく、経口的に、持続的かつ予防的な摂取あるいは投与可能なアブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）植物由来のグルコシノレート類、特にアルケニルアルキルグルコシノレートを有効成分として含有することを特徴とする脂質吸収抑制剤、ならびに肥満抑制剤、さらにそれを配合してなる飲食品および医薬品を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】マウスに、３−ブテニルグルコシノレート（ＢＵＧＬＳ、Ｇｌｕｃｏｎａｐｉｎ），２−プロペニルグルコシノレート（Ｓｉｎｉｇｒｉｎ）各８０μｍｏｌ／ｋｇを経口投与直後にコーン油を経口投与し、０〜８時間の血漿トリグリセリド濃度変化を示した図である。
【図２】マウスに、ＢＵＧＬＳ，Ｓｉｎｉｇｒｉｎ各８０μｍｏｌ／ｋｇを経口投与直後にコーン油を経口投与し、０〜８時間の血漿トリグリセリドＡＵＣ値を示した図である。
【図３】マウスに、フェネチルグルコシノレート（ＰＥＧＬＳ）８０μｍｏｌ／ｋｇ、大和マナ熱水抽出物（Ｍａｎａ Ｅｘｔｒａｃｔ）１ｇ／ｋｇを経口投与直後にコーン油を経口投与し、０〜８時間の血漿トリグリセリド濃度変化を示した図である。
【図４】マウスに、ＰＥＧＬＳ８０μｍｏｌ／ｋｇ、Ｍａｎａ Ｅｘｔｒａｃｔ １ｇ／ｋｇを経口投与直後にコーン油を経口投与し、０〜８時間の血漿トリグリセリドＡＵＣ値を示した図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下において、本発明を詳細に説明する。本発明において、グルコシノレートとは、アブラナ科植物を中心に、植物の葉、茎、根、および種子に広く存在しているカラシ油配糖体（イソチオシアネート配糖体）と呼ばれるもので、下記一般式（１）で示される化合物群である。グルコシノレート類は、アブラナ科植物内在性のミロシナーゼにより対応するイソチオシアネート類に変換される。
【００１２】
【化１】
[式中、Ｒは炭素置換基をあらわす]
【００１３】
本発明におけるアルケニルグルコシノレートとは、一般式（１）において、Ｒで示される炭素置換基がアルケニル基である化合物またはその塩であり、アルケニルグルコシノレートとしては、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレート、５−ヘキセニルグルコシノレート、６−ヘプテニルグルコシノレート、２−メチル−２−プロペニルグルコシノレート、３−メチル−３−ブテニルグルコシノレート、１−ペンテニルグルコシノレートなどが挙げられる。好ましいグルコシノレートとしては、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレートが用いられる。
【００１４】
本発明のアルケニルグルコシノレートは、アブラナ科植物由来のものが利用されるが、そのアブラナ科植物としては、ブロッコリー、タカナ、キャベツ、ハクサイ、大和マナ、小松菜、カリフラワー、カブ、チンゲンサイ、ミズナ、ノザワナなどがある。
【００１５】
以上のようにアルケニルグルコシノレートを含有するアブラナ科植物自体またはその抽出物を有効成分として用いることが出来る。例えば、大和マナ自体を有効成分として用いる場合、採取した大和マナを水洗し必要により凍結乾燥、熱風乾燥あるいは低温乾燥したものを粉砕し粉末状物にしたもの、または、大和マナの細断物あるいは粉末状物を水や有機溶媒、あるいはその混合物にて抽出したもの、あるいはその抽出液を濃縮して得られた濃縮物（エキス）、あるいはその濃縮物を真空乾燥、スプレー乾燥、凍結乾燥をして粉末化したものなどが用いられる。抽出有機溶媒としては、水および水溶性溶媒が用いられる。水溶性溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールおよびイソブタノール等の低級アルコール類、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類などが用いられる。これら水溶性溶媒と水は、単独でも２種類以上を混合して用いても良い。
【００１６】
グルコシノレート化合物は、試薬として市販されているものは購入により入手可能であるが、種々の化学合成によっても得られる。例えば、種々の化学的方法によっても得ることができる（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，３６，７７９−７８３（１９８０）等）。
【００１７】
かくして得られたアルケニルグルコシノレートは、１種あるいは２種以上を組み合わせて用いることができる。アルケニルグルコシノレートまたはそれを含有するアブラナ科植物の抽出物は、単独で摂取することは可能であるが、各種飲食品に添加して使用することができる。
【００１８】
かかる飲食品としては、例えば、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料、アルコール飲料等の各種飲料(これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む)、そば、うどん、素麺、はるさめ、中華麺、即席麺等の麺類、パン、クッキー、ケーキ、煎餅等の焼き菓子類、飴、キャンディー、ガム、チョコレート菓子類、プリン、ゼリー、アイスクリーム類等の冷菓類、かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品類、加工乳、発酵乳等の乳製品類、サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品類、みそ、醤油、ソース、たれ等の調味料類、スープ、シチュー、サラダ、漬物類等の各種総菜類その他種々の形態の健康・栄養補助食品、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤、トローチ形態の食品などが挙げられ、これらを製造するに当り通常用いられる補助的な原料や添加物と共に添加することができる。
【００１９】
このような補助的な原料及び添加物としては、例えばブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤などが挙げられる。
【００２０】
本発明のアルケニルグルコシノレートまたはアブラナ科植物抽出物を飲食品添加物として用いる場合の有効成分の摂取量は、その摂取形態、摂取方法、摂取目的および摂取するヒトの性別や年齢、体重、症状によって異なるが、成人１日当たり好ましくはアルケニルグルコシノレートとして０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．０１〜１ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００２１】
一方、アルケニルグルコシノレートは、１種あるいは２種以上を組み合わせて、医薬品の素材として用いることができる。本発明の脂質吸収抑制剤は、錠剤、丸剤、軟・硬カプセル剤、細粒剤、散剤、顆粒剤、液剤等の形態で経口投与することができる。本発明の脂質吸収抑制剤に配合しうる製剤原料としては、例えば、賦形剤（ブドウ糖、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、カカオ脂、硬化植物油、タルク等）、結合剤（蒸留水、生理食塩水、エタノール水、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等）、崩壊剤（アルギン酸ナトリウム、カンテン、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖、アラビアゴム末、ゼラチン、エタノール等）、崩壊抑制剤（白糖、ステアリン、カカオ脂、水素添加油等）、吸収促進剤（第四級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等）、吸着剤（グリセリン、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、硅酸等）、滑沢剤（精製タルク、ステアリン酸塩、ポリエチレングリコール等）などが挙げられる。
【００２２】
アルケニルグルコシノレートを治療目的あるいは予防的目的の医薬として用いる場合の投与量は、その製剤形態、投与方法、使用目的および投与される患者の年齢、体重、症状によって異なるが、成人１日当たり好ましくは０．００１〜２０００ｍｇ／ｋｇ体重であり、より好ましくは０．０１〜２００ｍｇ／ｋｇ体重である。
【実施例】
【００２３】
以下に、本発明を実施例に基づいて説明する。本発明は以下の実施例によってなんら限定されるものではなく、本発明の属する技術分野における通常の変更を加えて実施することが出来ることは言うまでもない。
【００２４】
試験サンプルのうち、２−プロペニルグルコシノレート（シニグリン; Ｓｉｎｉｇｒｉｎ）は、東京化成工業株式会社から購入したものを使用した。
【００２５】
製造例１ （３−ブテニルグルコシノレート（ＢＵＧＬＳ;Ｇｌｕｃｏｎａｐｉｎ）の単離・精製）
大和マナの種１００ｇを８０℃に熱した１０００ｍＬの蒸留水で２０分間処理し、ミロシナーゼを失活させた。その後、常温に戻したマナの種を蒸留水ごと、３０秒間ホモジナイズし、さらに８０℃で１時間加熱した。その後、遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）することで、マナの種の熱水抽出液と残渣を得た。また、残渣には５００ｍｌの蒸留水を加え、もう一度、熱水抽出を行い、得られた熱水抽出液も１回目の熱水抽出液と合わせた。続いて、熱水抽出液に１Ｍ酢酸亜鉛を３０ｍＬ添加し、攪拌することでタンパク質を沈殿させ、遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）を行うことで、除タンパクを行った。得られた上清は、陰イオン交換樹脂（ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ−２５）により精製し、０．１ＭＫ２ＳＯ４溶出画分を得た。この画分を濃縮乾固し、７０℃のメタノールで抽出した。その抽出液を−３０℃のエタノールに滴下し、エタノール溶液を遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）し、得られた沈殿を凍結乾燥することで、３−ブテニルイソチオシアネート配糖体（３−ブテニルグルコシノレート）を単離した。本品は、黄色不定形粉末として得られ、水に可溶であった。高分解能ＥＳＩ−ＭＳにより得られた分子イオンピークの値［ｍ／ｚ ３７２．０４２８５ （Ｍ−Ｈ）−Δ−０．０４ｍｍｕ］より、分子式がＣ１１Ｈ１９ＮＯ９Ｓ２であり、３−ブテニルイソチオシアネート配糖体の分子式と一致した。本品の１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルデータを以下に示す。そして、これらのスペクトルの解析から、本品は３−ブテニルイソチオシアネート配糖体であると決定した。
【００２６】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：５．９４（１Ｈ，ｍ，Ｈ１０），５．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．２５＆１７．２４Ｈｚ，Ｈ−１１ａ），５．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．２５＆１０．５０Ｈｚ，Ｈ−１１ｂ），５．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８３Ｈｚ，Ｈ１），３．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．５９Ｈｚ，Ｈ−６ａ），３．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．６３＆１２．５９，Ｈ−６ｂ），３．５７−３．４７（４Ｈ，ｍ，Ｈ２，Ｈ３，Ｈ４ ａｎｄ Ｈ５），２．８４（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２−９），２．４９（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２−８）．
１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：１６６．６（Ｃ７），１３９．６（Ｃ１０），１１８．８（Ｃ１１），８４．６（Ｃ１），８２．９（Ｃ５），７９．９（Ｃ３），７４．８（Ｃ２），７２．０（Ｃ４），６３．４（Ｃ６），３６．８ ａｎｄ ３５．４（Ｃ８ ａｎｄ Ｃ９）．
【００２７】
製造例２ （フェネチルグルコシノレート（ＰＥＧＬＳ）の単離・精製）
キバナクレスの種１００ｇを８０℃に熱した１０００ｍＬの蒸留水で２０分間処理し、ミロシナーゼを失活させた。その後、常温に戻した種を蒸留水ごと、３０秒間ホモジナイズし、さらに８０℃で１時間加熱した。その後、遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）することで、キナバクレスの種の熱水抽出液と残渣を得た。また、残渣には５００ｍｌの蒸留水を加え、もう一度、熱水抽出を行い、得られた熱水抽出液も１回目の熱水抽出液と合わせた。続いて、熱水抽出液に１Ｍ酢酸亜鉛を３０ｍＬ添加し、攪拌することでタンパク質を沈殿させ、遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）を行うことで、除タンパクを行った。得られた上清は、陰イオン交換樹脂（ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ−２５）により精製し、０．１ＭＫ２ＳＯ４溶出画分を得た。この画分を濃縮乾固し、７０℃のメタノールで抽出した。その抽出液を−３０℃のエタノールに滴下し、エタノール溶液を遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）し、得られた沈殿を凍結乾燥することで、フェネチルグルコシノレート（フェネチルイソチオシアネート配糖体）が黄色不定形粉末として得られた。本品は、高分解能ＥＳＩ−ＭＳにより得られた分子イオンピークの値［ｍ／ｚ ４２２．０５８５０ （Ｍ−Ｈ）−、Δ−０．０ｍｍｕ］より、分子式がＣ１５Ｈ２１ＮＯ９Ｓ２であり、フェネチルグルコシノレートの分子式と一致した。また、１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルデータを以下に示すが、これらのデータは文献値（Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ，７２巻７６０−７６４頁２００１年）と良く一致した。
【００２８】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：７．３８（４Ｈ，ｍ，Ｈ１１ ａｎｄ Ｈ１２），７．３１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．００Ｈｚ，Ｈ１３），４．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．７１Ｈｚ，Ｈ１），３．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．８０Ｈｚ，Ｈ−６ａ），３．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．１０＆１２．８０Ｈｚ，Ｈ−６ｂ），３．４７（４Ｈ，ｍ，Ｈ２，Ｈ３，Ｈ４ ａｎｄ Ｈ５），３．０５（４Ｈ，ｍ，ＣＨ２−８ ａｎｄ ＣＨ２−９）.
１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：１６６．２（Ｃ７），１４３．４（Ｃ１０），１３１．６（Ｃ１１ ａｎｄ Ｃ１２），１２９．５（Ｃ１３），８４．５（Ｃ１），８２．９（Ｃ５），７９．９（Ｃ３），７４．７（Ｃ２），７１．９（Ｃ４），６３．４（Ｃ６），３６．８ ａｎｄ ３５．４（Ｃ８ ａｎｄ Ｃ９）.
【００２９】
製造例３ （大和マナ熱水抽出物の調製）
収穫した大和マナは凍結乾燥し、粉砕、粉末化させた。大和マナ凍結乾燥粉末５ｇは、８０−９０℃に熱した２００ｍＬの蒸留水で６０分間抽出した。その後、常温に戻し、遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）、ろ過することで、大和マナの熱水抽出液を得た。その抽出液を凍結乾燥させることで、大和マナ熱水抽出物を得た。大和マナ熱水抽出物１ｇ中に、３−ブテニルグルコシノレート２．９６ｍｇ、４−ペンテニルグルコシノレート２．７９ｍｇ、フェネチルグルコシノレート０．７３ｍｇが含まれていた。なお、大和マナ熱水抽出液中のグルコシノレート（ＧＬＳ）の定量は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析（Ｃｏｓｍｏｓｉｌ５Ｃ１８−ＭＳＩＩ，０．０５％入りＣＨ３ＯＨ：０．０５％ＴＦＡ＝５／９９５−（２０ｍｉｎ）−８３／９１７−（３０ｍｉｎ）−２７４／７２６−（５ｍｉｎ）−１０００／０−（１０ｍｉｎ）−１０００／０，１．０ｍＬ／ｍｉｎ，２３５ｎｍ）の結果、ＢＵＧＬＳおよびＰＥＧＬＳを定量した。Ｐｅｎｔｅｎｙｌ ＧＬＳはＢＵＧＬＳ換算で定量した。
【００３０】
製造例４ （４−ペンテニルグルコシノレートの確認）
製造例３で調整した大和マナ熱水抽出液中の未同定グルコシノレートのピークをＨＰＬＣ（Ｃｏｓｍｏｓｉｌ５Ｃ１８−ＭＳＩＩ，０．０５％入りＣＨ３ＯＨ：０．０５％ＴＦＡ＝５／９９５−（２０ｍｉｎ）−８３／９１７−（３０ｍｉｎ）−２７４／７２６−（５ｍｉｎ）−１０００／０−（１０ｍｉｎ）−１０００／０，１．０ｍＬ／ｍｉｎ，２３５ｎｍ）により分離精製し、ＬＣ−ＭＳ分析した結果は、ｍ／ｚ ３８６．０５（Ｍ−Ｈ）−であり、この未同定グルコシノレートは、４−ペンテニルグルコシノレートと同定した。
【００３１】
実施例１ （脂質負荷試験法）
ｄｄＹマウス（雄、６週齢）は１週間予備飼育してから、試験に使用した。２４時間の絶食後、マウス（各群８匹ずつ）に蒸留水（コントロール群）または試験サンプル溶液（サンプル投与群）を、ゾンデを用いて経口投与後すぐにコーン油（８ｍｌ／ｋｇ）を経口投与した。血液サンプルは摂取後０、１、２、３、４、５、６、７、８時間まで経時的に尾採血した。血漿は遠心分離により得、トリグリセリド濃度はトリグリセリドＥテストワコーキットにより測定した。ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）値は、血漿トリグリセリド濃度の経時的変化のグラフから、総脂質吸収量の指標として算出した。
【００３２】
試験サンプルとして、３−ブテニルグルコシノレート（ＢＵＧＬＳ）、２−プロペニルグルコシノレート（Ｓｉｎｉｇｒｉｎ）をそれぞれ８０μｍｏｌ／ｋｇを水２０ｍＬに溶解した溶液を使用した場合の０〜８時間の時間毎の血漿トリグリセリド濃度を図１に、８時間の血漿トリグリセリドＡＵＣ値を図２に示した。一方、ＰＥＧＬＳ８０μｍｏｌ／ｋｇ、大和マナ熱水抽出物１ｇ／ｋｇ（ＢＵＧＬＳ，４−ペンテニルグルコシノレートの総和量は３４μｍｏｌ／ｋｇ相当量）を水２０ｍＬに溶解した溶液を使用した場合の０〜８時間の時間毎の血漿トリグリセリド濃度を図３に、８時間の血漿トリグリセリドＡＵＣ値を図４に示した。
【００３３】
以上の結果、３−ブテニルグルコシノレートおよび２−プロペニルグルコシノレートは、８０μｍｏｌ／ｋｇで有意に脂質吸収抑制作用を示した。一方、３−ブテニルグルコシノレートおよび４−ペンテニルグルコシノレートを含有する大和マナ熱水抽出物（アルケニルグルコシノレートの含有量合計は、３４μｍｏｌ／ｋｇに相当する量）は、脂質吸収抑制傾向を示した。しかし、フェネチルグルコシノレートは、８０μｍｏｌ／ｋｇでも殆ど脂質吸収抑制作用を示さなかった。
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明により、アルケニルグルコシノレートを有効成分として含有する、副作用が少なく、持続的かつ予防的な摂取あるいは投与可能な脂質吸収抑制剤、ならびにそれを配合してなる医薬品および飲食品を提供することができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）植物由来のグルコシノレート類、特にアルケニルグルコシノレートを有効成分として含有することを特徴とする脂質吸収抑制剤、ならびにそれを配合してなる医薬品および飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、食生活の欧米化に伴い、特に脂肪摂取量の増加によって肥満を始めとする生活習慣病患者が急増していることが指摘されている。肥満は、摂取エネルギーと消費エネルギーのアンバランスを特徴とするエネルギー代謝異常であり、結果として脂肪細胞に中性脂肪が過剰に蓄積した状態と定義されている。食事により摂取された脂肪は、腸管内で分解・吸収され、生体内でエネルギーとして蓄積される。しかしながら、脂肪の過剰摂取や消費カロリー不足等により、エネルギーの吸収量が消費量を上回った場合には、生体内の組織や臓器において脂肪の過剰蓄積が起こり、肥満や脂質異常症等の症状が生じる。これらの症状は、動脈硬化、糖尿病、脂質異常症等の生活習慣病の発症にも関与していることが分かっている。そのため、血中脂質濃度を適正なレベルに維持あるいは改善することは、生活習慣病の予防に非常に重要であると考えられている。
【０００３】
また、近年、予防的な観点から、ヒトの健康状態や食品機能を科学的に研究する機能性食品、特にその有効成分の研究が盛んになされている。アブラナ科植物由来のイソチオシアネート化合物およびその配糖体（グルコシノレート）は、抗菌活性、ガン予防効果等様々な生理活性作用にて注目を集めている（非特許文献１）。アブラナ科植物において、グルコシノレートを実質的に含まないわさび含水溶媒抽出物を有効成分とする前駆脂肪細胞の分化抑制作用剤または脂肪分解作用剤に関する開示がある（特許文献１）。一方、マカまたはベンジルグルコシノレートを有効成分とする抗肥満作用および血中脂質低下作用に関する特許出願はあるが（特許文献２）、アルケニルグルコシノレートを有効成分とすることを特徴とする脂質吸収抑制剤に関する開示はない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００６−３２８０５６号公報
【特許文献２】特開２００７−２３０９８７号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｙ．Ｚｈａｎｇら、プロシーディングス・オブ・ザ・ニュートリ ション・ソサイアティ（Ｐｒｏｃ Ｎｕｔｒ Ｓｏｃ．）、第６５巻、６８−７５頁、２００６年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、植物食品由来で副作用が少なく、持続的かつ予防的な摂取あるいは投与可能な脂質吸収抑制剤、ならびにそれを配合してなる医薬品および飲食品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは上記目的を達成すべく、植物食品由来で安全性が高く、脂質吸収抑制作用を示す物質について鋭意検討した結果、アブラナ科植物由来のグルコシノレート、特にアルケニルグルコシノレートに脂質吸収抑制効果があることを見出し、本発明を完成させた。
【０００８】
即ち、本発明は以下の発明を包含する。
（１）アルケニルグルコシノレートを有効成分として含有することを特徴とする脂質吸収抑制剤；
（２）前記アルケニルグルコシノレートのアルケニル基が、炭素数３〜７個の直鎖または分枝状のアルケニル基である（１）記載の剤；
（３）前記アルケニルグルコシノレートが、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレート、５−ヘキセニルグルコシノレート、６−へプテニルグルコシノレート、２−メチル−２−プロペニルグルコシノレート、３−メチル−３−ブテニルグルコシノレート、１−ペンテニルグルコシノレートから選択される１種または２種以上であることを特徴とする（１）または（２）記載の剤；
（４）前記アルケニルグルコシノレートが、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレートから選択される１種または２種以上であることを特徴とする（１）〜（３）のいずれかに記載の剤；
（５）前記アルケニルグルコシノレートが、アブラナ科植物（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）を原料とした、（１）〜（４）のいずれかに記載の剤；
（６）前記アブラナ科植物が、大和マナ（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ Ｌ．）である（５）記載の剤；
（７）前記アルケニルグルコシノレートを含有するものとして大和マナ抽出物を用いることを特徴とする（１）記載の剤；
（８）（１）〜（７）のいずれかに記載の剤を配合してなる飲食品；
（９）（１）〜（７）のいずれかに記載の剤を配合してなる医薬品；
などに関する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、副作用が少なく、経口的に、持続的かつ予防的な摂取あるいは投与可能なアブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）植物由来のグルコシノレート類、特にアルケニルアルキルグルコシノレートを有効成分として含有することを特徴とする脂質吸収抑制剤、ならびに肥満抑制剤、さらにそれを配合してなる飲食品および医薬品を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】マウスに、３−ブテニルグルコシノレート（ＢＵＧＬＳ、Ｇｌｕｃｏｎａｐｉｎ），２−プロペニルグルコシノレート（Ｓｉｎｉｇｒｉｎ）各８０μｍｏｌ／ｋｇを経口投与直後にコーン油を経口投与し、０〜８時間の血漿トリグリセリド濃度変化を示した図である。
【図２】マウスに、ＢＵＧＬＳ，Ｓｉｎｉｇｒｉｎ各８０μｍｏｌ／ｋｇを経口投与直後にコーン油を経口投与し、０〜８時間の血漿トリグリセリドＡＵＣ値を示した図である。
【図３】マウスに、フェネチルグルコシノレート（ＰＥＧＬＳ）８０μｍｏｌ／ｋｇ、大和マナ熱水抽出物（Ｍａｎａ Ｅｘｔｒａｃｔ）１ｇ／ｋｇを経口投与直後にコーン油を経口投与し、０〜８時間の血漿トリグリセリド濃度変化を示した図である。
【図４】マウスに、ＰＥＧＬＳ８０μｍｏｌ／ｋｇ、Ｍａｎａ Ｅｘｔｒａｃｔ １ｇ／ｋｇを経口投与直後にコーン油を経口投与し、０〜８時間の血漿トリグリセリドＡＵＣ値を示した図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
以下において、本発明を詳細に説明する。本発明において、グルコシノレートとは、アブラナ科植物を中心に、植物の葉、茎、根、および種子に広く存在しているカラシ油配糖体（イソチオシアネート配糖体）と呼ばれるもので、下記一般式（１）で示される化合物群である。グルコシノレート類は、アブラナ科植物内在性のミロシナーゼにより対応するイソチオシアネート類に変換される。
【００１２】
【化１】
[式中、Ｒは炭素置換基をあらわす]
【００１３】
本発明におけるアルケニルグルコシノレートとは、一般式（１）において、Ｒで示される炭素置換基がアルケニル基である化合物またはその塩であり、アルケニルグルコシノレートとしては、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレート、５−ヘキセニルグルコシノレート、６−ヘプテニルグルコシノレート、２−メチル−２−プロペニルグルコシノレート、３−メチル−３−ブテニルグルコシノレート、１−ペンテニルグルコシノレートなどが挙げられる。好ましいグルコシノレートとしては、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレートが用いられる。
【００１４】
本発明のアルケニルグルコシノレートは、アブラナ科植物由来のものが利用されるが、そのアブラナ科植物としては、ブロッコリー、タカナ、キャベツ、ハクサイ、大和マナ、小松菜、カリフラワー、カブ、チンゲンサイ、ミズナ、ノザワナなどがある。
【００１５】
以上のようにアルケニルグルコシノレートを含有するアブラナ科植物自体またはその抽出物を有効成分として用いることが出来る。例えば、大和マナ自体を有効成分として用いる場合、採取した大和マナを水洗し必要により凍結乾燥、熱風乾燥あるいは低温乾燥したものを粉砕し粉末状物にしたもの、または、大和マナの細断物あるいは粉末状物を水や有機溶媒、あるいはその混合物にて抽出したもの、あるいはその抽出液を濃縮して得られた濃縮物（エキス）、あるいはその濃縮物を真空乾燥、スプレー乾燥、凍結乾燥をして粉末化したものなどが用いられる。抽出有機溶媒としては、水および水溶性溶媒が用いられる。水溶性溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールおよびイソブタノール等の低級アルコール類、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類などが用いられる。これら水溶性溶媒と水は、単独でも２種類以上を混合して用いても良い。
【００１６】
グルコシノレート化合物は、試薬として市販されているものは購入により入手可能であるが、種々の化学合成によっても得られる。例えば、種々の化学的方法によっても得ることができる（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，３６，７７９−７８３（１９８０）等）。
【００１７】
かくして得られたアルケニルグルコシノレートは、１種あるいは２種以上を組み合わせて用いることができる。アルケニルグルコシノレートまたはそれを含有するアブラナ科植物の抽出物は、単独で摂取することは可能であるが、各種飲食品に添加して使用することができる。
【００１８】
かかる飲食品としては、例えば、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料、アルコール飲料等の各種飲料(これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む)、そば、うどん、素麺、はるさめ、中華麺、即席麺等の麺類、パン、クッキー、ケーキ、煎餅等の焼き菓子類、飴、キャンディー、ガム、チョコレート菓子類、プリン、ゼリー、アイスクリーム類等の冷菓類、かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品類、加工乳、発酵乳等の乳製品類、サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品類、みそ、醤油、ソース、たれ等の調味料類、スープ、シチュー、サラダ、漬物類等の各種総菜類その他種々の形態の健康・栄養補助食品、錠剤、カプセル剤、ドリンク剤、トローチ形態の食品などが挙げられ、これらを製造するに当り通常用いられる補助的な原料や添加物と共に添加することができる。
【００１９】
このような補助的な原料及び添加物としては、例えばブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステビオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、Ｌ−アスコルビン酸、ｄｌ−α−トコフェロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、アラビアガム、カラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ペクチン、寒天、ビタミンＢ類、ニコチン酸アミド、パントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料、保存剤などが挙げられる。
【００２０】
本発明のアルケニルグルコシノレートまたはアブラナ科植物抽出物を飲食品添加物として用いる場合の有効成分の摂取量は、その摂取形態、摂取方法、摂取目的および摂取するヒトの性別や年齢、体重、症状によって異なるが、成人１日当たり好ましくはアルケニルグルコシノレートとして０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは０．０１〜１ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００２１】
一方、アルケニルグルコシノレートは、１種あるいは２種以上を組み合わせて、医薬品の素材として用いることができる。本発明の脂質吸収抑制剤は、錠剤、丸剤、軟・硬カプセル剤、細粒剤、散剤、顆粒剤、液剤等の形態で経口投与することができる。本発明の脂質吸収抑制剤に配合しうる製剤原料としては、例えば、賦形剤（ブドウ糖、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、カカオ脂、硬化植物油、タルク等）、結合剤（蒸留水、生理食塩水、エタノール水、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等）、崩壊剤（アルギン酸ナトリウム、カンテン、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖、アラビアゴム末、ゼラチン、エタノール等）、崩壊抑制剤（白糖、ステアリン、カカオ脂、水素添加油等）、吸収促進剤（第四級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウム等）、吸着剤（グリセリン、デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、硅酸等）、滑沢剤（精製タルク、ステアリン酸塩、ポリエチレングリコール等）などが挙げられる。
【００２２】
アルケニルグルコシノレートを治療目的あるいは予防的目的の医薬として用いる場合の投与量は、その製剤形態、投与方法、使用目的および投与される患者の年齢、体重、症状によって異なるが、成人１日当たり好ましくは０．００１〜２０００ｍｇ／ｋｇ体重であり、より好ましくは０．０１〜２００ｍｇ／ｋｇ体重である。
【実施例】
【００２３】
以下に、本発明を実施例に基づいて説明する。本発明は以下の実施例によってなんら限定されるものではなく、本発明の属する技術分野における通常の変更を加えて実施することが出来ることは言うまでもない。
【００２４】
試験サンプルのうち、２−プロペニルグルコシノレート（シニグリン; Ｓｉｎｉｇｒｉｎ）は、東京化成工業株式会社から購入したものを使用した。
【００２５】
製造例１ （３−ブテニルグルコシノレート（ＢＵＧＬＳ;Ｇｌｕｃｏｎａｐｉｎ）の単離・精製）
大和マナの種１００ｇを８０℃に熱した１０００ｍＬの蒸留水で２０分間処理し、ミロシナーゼを失活させた。その後、常温に戻したマナの種を蒸留水ごと、３０秒間ホモジナイズし、さらに８０℃で１時間加熱した。その後、遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）することで、マナの種の熱水抽出液と残渣を得た。また、残渣には５００ｍｌの蒸留水を加え、もう一度、熱水抽出を行い、得られた熱水抽出液も１回目の熱水抽出液と合わせた。続いて、熱水抽出液に１Ｍ酢酸亜鉛を３０ｍＬ添加し、攪拌することでタンパク質を沈殿させ、遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）を行うことで、除タンパクを行った。得られた上清は、陰イオン交換樹脂（ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ−２５）により精製し、０．１ＭＫ２ＳＯ４溶出画分を得た。この画分を濃縮乾固し、７０℃のメタノールで抽出した。その抽出液を−３０℃のエタノールに滴下し、エタノール溶液を遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）し、得られた沈殿を凍結乾燥することで、３−ブテニルイソチオシアネート配糖体（３−ブテニルグルコシノレート）を単離した。本品は、黄色不定形粉末として得られ、水に可溶であった。高分解能ＥＳＩ−ＭＳにより得られた分子イオンピークの値［ｍ／ｚ ３７２．０４２８５ （Ｍ−Ｈ）−Δ−０．０４ｍｍｕ］より、分子式がＣ１１Ｈ１９ＮＯ９Ｓ２であり、３−ブテニルイソチオシアネート配糖体の分子式と一致した。本品の１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルデータを以下に示す。そして、これらのスペクトルの解析から、本品は３−ブテニルイソチオシアネート配糖体であると決定した。
【００２６】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：５．９４（１Ｈ，ｍ，Ｈ１０），５．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．２５＆１７．２４Ｈｚ，Ｈ−１１ａ），５．０９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．２５＆１０．５０Ｈｚ，Ｈ−１１ｂ），５．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．８３Ｈｚ，Ｈ１），３．９０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．５９Ｈｚ，Ｈ−６ａ），３．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．６３＆１２．５９，Ｈ−６ｂ），３．５７−３．４７（４Ｈ，ｍ，Ｈ２，Ｈ３，Ｈ４ ａｎｄ Ｈ５），２．８４（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２−９），２．４９（２Ｈ，ｍ，ＣＨ２−８）．
１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：１６６．６（Ｃ７），１３９．６（Ｃ１０），１１８．８（Ｃ１１），８４．６（Ｃ１），８２．９（Ｃ５），７９．９（Ｃ３），７４．８（Ｃ２），７２．０（Ｃ４），６３．４（Ｃ６），３６．８ ａｎｄ ３５．４（Ｃ８ ａｎｄ Ｃ９）．
【００２７】
製造例２ （フェネチルグルコシノレート（ＰＥＧＬＳ）の単離・精製）
キバナクレスの種１００ｇを８０℃に熱した１０００ｍＬの蒸留水で２０分間処理し、ミロシナーゼを失活させた。その後、常温に戻した種を蒸留水ごと、３０秒間ホモジナイズし、さらに８０℃で１時間加熱した。その後、遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）することで、キナバクレスの種の熱水抽出液と残渣を得た。また、残渣には５００ｍｌの蒸留水を加え、もう一度、熱水抽出を行い、得られた熱水抽出液も１回目の熱水抽出液と合わせた。続いて、熱水抽出液に１Ｍ酢酸亜鉛を３０ｍＬ添加し、攪拌することでタンパク質を沈殿させ、遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）を行うことで、除タンパクを行った。得られた上清は、陰イオン交換樹脂（ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ−２５）により精製し、０．１ＭＫ２ＳＯ４溶出画分を得た。この画分を濃縮乾固し、７０℃のメタノールで抽出した。その抽出液を−３０℃のエタノールに滴下し、エタノール溶液を遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）し、得られた沈殿を凍結乾燥することで、フェネチルグルコシノレート（フェネチルイソチオシアネート配糖体）が黄色不定形粉末として得られた。本品は、高分解能ＥＳＩ−ＭＳにより得られた分子イオンピークの値［ｍ／ｚ ４２２．０５８５０ （Ｍ−Ｈ）−、Δ−０．０ｍｍｕ］より、分子式がＣ１５Ｈ２１ＮＯ９Ｓ２であり、フェネチルグルコシノレートの分子式と一致した。また、１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルデータを以下に示すが、これらのデータは文献値（Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ，７２巻７６０−７６４頁２００１年）と良く一致した。
【００２８】
１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：７．３８（４Ｈ，ｍ，Ｈ１１ ａｎｄ Ｈ１２），７．３１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．００Ｈｚ，Ｈ１３），４．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．７１Ｈｚ，Ｈ１），３．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．８０Ｈｚ，Ｈ−６ａ），３．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．１０＆１２．８０Ｈｚ，Ｈ−６ｂ），３．４７（４Ｈ，ｍ，Ｈ２，Ｈ３，Ｈ４ ａｎｄ Ｈ５），３．０５（４Ｈ，ｍ，ＣＨ２−８ ａｎｄ ＣＨ２−９）.
１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：１６６．２（Ｃ７），１４３．４（Ｃ１０），１３１．６（Ｃ１１ ａｎｄ Ｃ１２），１２９．５（Ｃ１３），８４．５（Ｃ１），８２．９（Ｃ５），７９．９（Ｃ３），７４．７（Ｃ２），７１．９（Ｃ４），６３．４（Ｃ６），３６．８ ａｎｄ ３５．４（Ｃ８ ａｎｄ Ｃ９）.
【００２９】
製造例３ （大和マナ熱水抽出物の調製）
収穫した大和マナは凍結乾燥し、粉砕、粉末化させた。大和マナ凍結乾燥粉末５ｇは、８０−９０℃に熱した２００ｍＬの蒸留水で６０分間抽出した。その後、常温に戻し、遠心分離（３１００ｒｐｍ，５ｍｉｎ）、ろ過することで、大和マナの熱水抽出液を得た。その抽出液を凍結乾燥させることで、大和マナ熱水抽出物を得た。大和マナ熱水抽出物１ｇ中に、３−ブテニルグルコシノレート２．９６ｍｇ、４−ペンテニルグルコシノレート２．７９ｍｇ、フェネチルグルコシノレート０．７３ｍｇが含まれていた。なお、大和マナ熱水抽出液中のグルコシノレート（ＧＬＳ）の定量は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析（Ｃｏｓｍｏｓｉｌ５Ｃ１８−ＭＳＩＩ，０．０５％入りＣＨ３ＯＨ：０．０５％ＴＦＡ＝５／９９５−（２０ｍｉｎ）−８３／９１７−（３０ｍｉｎ）−２７４／７２６−（５ｍｉｎ）−１０００／０−（１０ｍｉｎ）−１０００／０，１．０ｍＬ／ｍｉｎ，２３５ｎｍ）の結果、ＢＵＧＬＳおよびＰＥＧＬＳを定量した。Ｐｅｎｔｅｎｙｌ ＧＬＳはＢＵＧＬＳ換算で定量した。
【００３０】
製造例４ （４−ペンテニルグルコシノレートの確認）
製造例３で調整した大和マナ熱水抽出液中の未同定グルコシノレートのピークをＨＰＬＣ（Ｃｏｓｍｏｓｉｌ５Ｃ１８−ＭＳＩＩ，０．０５％入りＣＨ３ＯＨ：０．０５％ＴＦＡ＝５／９９５−（２０ｍｉｎ）−８３／９１７−（３０ｍｉｎ）−２７４／７２６−（５ｍｉｎ）−１０００／０−（１０ｍｉｎ）−１０００／０，１．０ｍＬ／ｍｉｎ，２３５ｎｍ）により分離精製し、ＬＣ−ＭＳ分析した結果は、ｍ／ｚ ３８６．０５（Ｍ−Ｈ）−であり、この未同定グルコシノレートは、４−ペンテニルグルコシノレートと同定した。
【００３１】
実施例１ （脂質負荷試験法）
ｄｄＹマウス（雄、６週齢）は１週間予備飼育してから、試験に使用した。２４時間の絶食後、マウス（各群８匹ずつ）に蒸留水（コントロール群）または試験サンプル溶液（サンプル投与群）を、ゾンデを用いて経口投与後すぐにコーン油（８ｍｌ／ｋｇ）を経口投与した。血液サンプルは摂取後０、１、２、３、４、５、６、７、８時間まで経時的に尾採血した。血漿は遠心分離により得、トリグリセリド濃度はトリグリセリドＥテストワコーキットにより測定した。ＡＵＣ（Ａｒｅａ Ｕｎｄｅｒ Ｃｕｒｖｅ）値は、血漿トリグリセリド濃度の経時的変化のグラフから、総脂質吸収量の指標として算出した。
【００３２】
試験サンプルとして、３−ブテニルグルコシノレート（ＢＵＧＬＳ）、２−プロペニルグルコシノレート（Ｓｉｎｉｇｒｉｎ）をそれぞれ８０μｍｏｌ／ｋｇを水２０ｍＬに溶解した溶液を使用した場合の０〜８時間の時間毎の血漿トリグリセリド濃度を図１に、８時間の血漿トリグリセリドＡＵＣ値を図２に示した。一方、ＰＥＧＬＳ８０μｍｏｌ／ｋｇ、大和マナ熱水抽出物１ｇ／ｋｇ（ＢＵＧＬＳ，４−ペンテニルグルコシノレートの総和量は３４μｍｏｌ／ｋｇ相当量）を水２０ｍＬに溶解した溶液を使用した場合の０〜８時間の時間毎の血漿トリグリセリド濃度を図３に、８時間の血漿トリグリセリドＡＵＣ値を図４に示した。
【００３３】
以上の結果、３−ブテニルグルコシノレートおよび２−プロペニルグルコシノレートは、８０μｍｏｌ／ｋｇで有意に脂質吸収抑制作用を示した。一方、３−ブテニルグルコシノレートおよび４−ペンテニルグルコシノレートを含有する大和マナ熱水抽出物（アルケニルグルコシノレートの含有量合計は、３４μｍｏｌ／ｋｇに相当する量）は、脂質吸収抑制傾向を示した。しかし、フェネチルグルコシノレートは、８０μｍｏｌ／ｋｇでも殆ど脂質吸収抑制作用を示さなかった。
【産業上の利用可能性】
【００３４】
本発明により、アルケニルグルコシノレートを有効成分として含有する、副作用が少なく、持続的かつ予防的な摂取あるいは投与可能な脂質吸収抑制剤、ならびにそれを配合してなる医薬品および飲食品を提供することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルケニルグルコシノレートを有効成分として含有することを特徴とする脂質吸収抑制剤。
【請求項２】
前記アルケニルグルコシノレートのアルケニル基が、炭素数３〜７個の直鎖または分枝状のアルケニル基である請求項１記載の剤。
【請求項３】
前記アルケニルグルコシノレートが、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレート、５−ヘキセニルグルコシノレート、６−へプテニルグルコシノレート、２−メチル−２−プロペニルグルコシノレート、３−メチル−３−ブテニルグルコシノレート、１−ペンテニルグルコシノレートから選択される１種または２種以上であることを特徴とする請求項１または２記載の剤。
【請求項４】
前記アルケニルグルコシノレートが、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレートから選択される１種または２種以上であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項記載の剤。
【請求項５】
前記アルケニルグルコシノレートが、アブラナ科植物（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）を原料とした、請求項１〜４のいずれか１項記載の剤。
【請求項６】
前記アブラナ科植物が、大和マナ（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ Ｌ．）である請求項５記載の剤。
【請求項７】
前記アルケニルグルコシノレートを含有するものとして大和マナ抽出物を用いることを特徴とする請求項１記載の剤。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項記載の剤を配合してなる飲食品。
【請求項９】
請求項１〜７のいずれか１項記載の剤を配合してなる医薬品。
【請求項１】
アルケニルグルコシノレートを有効成分として含有することを特徴とする脂質吸収抑制剤。
【請求項２】
前記アルケニルグルコシノレートのアルケニル基が、炭素数３〜７個の直鎖または分枝状のアルケニル基である請求項１記載の剤。
【請求項３】
前記アルケニルグルコシノレートが、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレート、５−ヘキセニルグルコシノレート、６−へプテニルグルコシノレート、２−メチル−２−プロペニルグルコシノレート、３−メチル−３−ブテニルグルコシノレート、１−ペンテニルグルコシノレートから選択される１種または２種以上であることを特徴とする請求項１または２記載の剤。
【請求項４】
前記アルケニルグルコシノレートが、２−プロペニルグルコシノレート、３−ブテニルグルコシノレート、４−ペンテニルグルコシノレートから選択される１種または２種以上であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項記載の剤。
【請求項５】
前記アルケニルグルコシノレートが、アブラナ科植物（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）を原料とした、請求項１〜４のいずれか１項記載の剤。
【請求項６】
前記アブラナ科植物が、大和マナ（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ Ｌ．）である請求項５記載の剤。
【請求項７】
前記アルケニルグルコシノレートを含有するものとして大和マナ抽出物を用いることを特徴とする請求項１記載の剤。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項記載の剤を配合してなる飲食品。
【請求項９】
請求項１〜７のいずれか１項記載の剤を配合してなる医薬品。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図２】
【図３】
【図４】
【公開番号】特開２０１１−１２１９１９（Ｐ２０１１−１２１９１９Ａ）
【公開日】平成２３年６月２３日（２０１１．６．２３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２８２３３７（Ｐ２００９−２８２３３７）
【出願日】平成２１年１２月１４日（２００９．１２．１４）
【出願人】（３０６０２３３３６）財団法人奈良県中小企業支援センター (18)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年６月２３日（２０１１．６．２３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年１２月１４日（２００９．１２．１４）
【出願人】（３０６０２３３３６）財団法人奈良県中小企業支援センター (18)
【Ｆターム（参考）】
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