薬剤耐性増殖性疾患の治療剤
式Ｉに従うα，β−不飽和スルホン、スルホキシド及びスルホンアミド(式中、Ａｒ1、Ａｒ2、ｎ、*及びＲは、明細書中に規定した通りである)は、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性の増殖性疾患の治療に有用である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターである治療剤に耐性の増殖性疾患の治療に関係する。
【背景技術】
【０００２】
Ｉ．増殖性疾患の、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターに対する耐性
プロテインキナーゼは、細胞増殖を制御することが示されてきた。プロテインキナーゼの阻害が、増殖性疾患特に癌の新しい治療剤の開発の可能性を有する研究領域として浮かび上がってきている。
【０００３】
プロテインキナーゼの阻害は、治療的には、ＡＴＰ競合性の小型分子の投与によって達成されてきた。かかるインヒビターは、キナーゼの酵素活性をブロックし、それにより、細胞性基質のリン酸化を邪魔する。キナーゼの、ＡＴＰ競合性の小型分子のインヒビター例を、表１に示す。
【０００４】
ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターは、異常を治療するために該インヒビターを投与する当該異常と関係する標的の増殖性細胞において選択圧を与えることが示されている。これらの選択圧は、しばしば、標的細胞における耐性の発生を生じる。耐性は、標的のキナーゼの突然変異から生じうる。
【表１】
【０００５】
Ａ．ＢＣＲ−ＡＢＬと関連する増殖性疾患
１．この疾患の分子的基礎
慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)は、特異的な染色体異常(即ち、フィラデルフィア又はＰｈ1染色体)と関連付けらた最初の疾患である。分子レベルにおいて、最も顕著な特徴は、プロトオンコジーンｃ−ａｂｌの、第９染色体長腕から第２２染色体上のブレークポイントクラスター領域(ｂｃｒ)への転座であり、これは、ｂｃｒ−ａｂｌハイブリッド遺伝子の形成を生じる。ｃ−ａｂｌプロトオンコジーンは、通常、チロシンキナーゼ活性を有するタンパク質(ＡＢＬ)をコードする。ｂｃｒ−ａｂｌハイブリッド遺伝子を有する細胞において、オンコジーンＢＣＲ−ＡＢＬが発現される。ＢＣＲ−ＡＢＬのチロシンキナーゼ活性は、ＡＢＬのチロシンキナーゼ活性と比較して相当増大されている。
【０００６】
フィラデルフィア染色体ＣＭＬ患者において一般的に見出されるこのＢＣＲ−ＡＢＬ融合タンパク質は、約２１０ｋＤａのタンパク質である(ｐ２１０ｗｔ又はｐ２１０ＢＣＲ−ＡＢＬ)。この融合転写物は、典型的には、ＡＢＬエキソン２に結合したＢＣＲエキソン１３又は１４から生じる。(Chissoe等(1995) Genomics 27:67-82)。それ故、ｐ２１０ｗｔのＡＢＬ部分は、ｃ−ＡＢＬ遺伝子のエキソン２〜１１よりなる。特定のＢＣＬ−ＡＢＬアレル中のＡＢＬチロシンキナーゼ部分における位置を同定するための文献中の一般的な慣用法は、エキソン１ａを用いて選択的スプライシングから生じるｃ−ＡＢＬについてのアミノ酸番号付けを利用することである(タンパク質ＩＤ ＡＡＢ６０３９４．１及びＧｅｎＢａｎｋ ＡｃｃｅｓｓｉｏｎナンバーＵ０７５６３)。それ故、この明細書中で引用した突然変異が、この配列がSEQ ID NO:１として与えられたスプライシング変異体のアミノ酸番号付けに対してキーとなることはありそうなことである。SEQ ID NO:１の最初の２６アミノ酸は、ＡＢＬエキソン１ａによりコードされており、ＢＣＲ−ＡＢＬ融合タンパク質２１０ｗｔ中には見出されない。このエキソン２によりコードされるアミノ酸配列は、エキソン１ａを利用する選択的スプライシングから生じる転写物から生じるプロトオンコジーンＡＢＬのＥ２７から開始する。このプロテインキナーゼドメインは、ほぼＩｌｅ２４２〜アミノ酸４９３からのものである。この番号付けシステムにおいて、ホスフェート結合ループ(ｐ−ループ)は、アミノ酸２４９〜２５６であり、触媒領域は、アミノ酸３６１〜３６７であり、そして活性化ループは、アミノ酸３８０〜４０２である。
【０００７】
ＡＴＰ競合性チロシンキナーゼインヒビターイマチニブは、チロシンキナーゼＡＢＬ、ＫＩＴ及び血小板由来成長因子受容体(ＰＤＧＦＲ)の阻害において大いに有効である。イマチニブの治療用投与は、ＣＭＬ及び急性リンパ芽球性リンパ腫(ＡＬＬ)の治療における臨床的有効性を示す。ＢＣＲ−ＡＢＬは又、特発性肺線維症にも関連付けられており、該線維症においては、ＡＢＬのイマチニブによる阻害は、細胞増殖を妨げることが示されている。Daniels等、J.Clin.Invest., 114, 1308-16 (2004)。しかしながら、イマチニブ処理した患者の一部は、イマチニブ耐性細胞が現れた場合に再発する。
【０００８】
(２)ＢＣＲ−ＡＢＬの変異は、イマチニブ耐性を与える
イマチニブ耐性は、キナーゼのイマチニブ結合部位における突然変異から生じうる。突然変異は、いわゆる「ゲートキーパー」残基、Ｔｈｒ３１５及び他のイマチニブと結合中に接触する残基(例えば、Ｐｈｅ３１７及びＰｈｅ３５９)を含むキナーゼの触媒ドメインで起こりうる。他の変異は、ＡＴＰ結合ドメイン(ｐ−ループ)及び活性化ループ(イマチニブ結合に際して起きるコンホメーション変化に関与するキナーゼ構造の領域)において起こる。
【０００９】
ＢＣＲ−ＡＢＬへのイマチニブの結合は、Ｔｈｒ３１５の水酸基への水素結合の形成を含む。３１５位におけるスレオニンのイソロイシンへの置換は、イマチニブ耐性ＣＭＬにおける最も頻繁なＢＣＲ−ＡＢＬ変異の一つである。Ｔｈｒ３１５の一層大きい非水素結合性イソロイシンへの変化は、直接、イマチニブの結合を邪魔する。Ｔｈｒ３１５は、イマチニブの結合に必要であるが、ＡＴＰのＢＣＲ−ＡＢＬへの結合には必要とされない。従って、その触媒活性(従って、ＢＣＲ−ＡＢＬ癌タンパク質の腫瘍促進機能)は、Ｔ３１５Ｉ変異体において保存されている。
【００１０】
イマチニブ結合は又、キナーゼのｐ−ループの変異によっても影響される。再発したＣＭＬ及びＰｈ＋ＡＬＬの患者におけるＢＣＲ−ＡＢＬ配列分析は、Ｔｙｒ２５３及びＧｌｕ２５５におけるｐ−ループ変異を検出した。これらの位置におけるアミノ酸置換は、イマチニブ結合のためのゆがんだｐ−ループコンホメーションを邪魔しうる。これは、観察されたイン・ビボでの耐性及びＢＣＲ−ＡＢＬｐ−ループ変異例えばＹ２５３及びＥ２５５Ｋにより影響された患者の特に悪い予後と一致する(Branford等、Blood, 102, 276-283 (2003))。
【００１１】
イマチニブ結合は、ＢＣＲ−ＡＢＬ活性化ループの不活性な、非リン酸化状態と関係している。この領域における変異例えばＨ３９６Ｒは、活性化ループの閉じたコンホメーションを不安定にし、それによりイマチニブ阻害を妨げる。
【００１２】
イマチニブ結合部位から離れた別の点突然変異のグループは、このキナーゼドメインのカルボキシ末端ローブにある。このグループに入る最も頻繁に検出されるＢＣＲ−ＡＢＬ変異は、Ｍ３５１Ｔである。Ｍ３５１Ｔ変異は、臨床的イマチニブ耐性の全症例の１５〜２０％を説明する(Hochhaus等、Leukemia, 18, 1321-31 (2004))。Ｍ３５１Ｔ変異は、イマチニブとの直接接触における残基の正確な配置に影響を与えるようである(Cowan-Jacob等、Mini Rev. Med. Chem., 4, 285-299 (2004)、及びShah等、Cancer Cell, 2, 117-125 (2002))。
【００１３】
上記のＢＣＲ−ＡＢＬ変異は、イマチニブ耐性と関係した殆どのＢＣＲ−ＡＢＬ変異を説明する。しかしながら、イマチニブの存在下でＢＣＲ−ＡＢＬ駆動される細胞増殖について選択する細胞スクリーニング手順と結合させた完全長ＢＣＲ−ＡＢＬの飽和変異分析は、このキナーゼドメインの外側の突然変異がキナーゼのイマチニブとの相互作用を弱め、それにより標的の耐性に寄与することを明らかにした(Azam等、Cell, 112, 831-843 (2003))。
【００１４】
ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビター例えばイマチニブに対する耐性の発生に、臨床的に関連するＢＣＲ−ＡＢＬ突然変異は、次を含む：Ｇ２５０Ｅ、Ｆ３１７Ｌ、Ｙ２５３Ｆ、Ｈ３９６Ｒ、Ｆ３１１Ｌ、Ｍ３５１Ｔ、Ｔ３１５Ｉ、Ｈ３９６Ｐ、Ｅ２５５Ｖ、Ｙ２５３Ｈ、Ｑ２５２Ｈ、Ｍ２４４Ｖ、Ｌ３８７Ｍ、Ｅ３５５Ｇ、Ｅ２５５Ｋ及びＦ３５９Ｖ。von Bubnoff等、Leukemia 17, 829-838 (2003)；Cowan-Jacob等、Mini Rev. Med. Chem. 4, 285-299 (2004)；Hochhaus等、Leukemia 18, 1321-1331 (2004)；Nardi等、Curr. Opin. Hematol. 11, 35-43 (2004)；Ross等、Br. J. Cancer 90, 12-19；及びDaub等、Nature Reviews Drug Discovery, 3, 1001-10 (2004)。
【００１５】
治療剤ＰＤ１８０９７０、ＢＭＳ−３５４８２５及びＡＰ２３４６４は、幾らかのイマチニブ耐性の増殖性疾患に対する有効性を示した(Daub等、前出)。しかしながら、如何なる薬剤も、ＢＣＲ−ＡＢＬ変異に対する有効性を示さなかった。その上、何れの薬剤も、Ｔ３１５Ｉ変異により与えられる耐性に対しては効果的でない。
【００１６】
Ｂ．血小板由来成長因子(ＰＤＧＦ)と関連する増殖性疾患
血小板由来成長因子レセプター(ＰＤＧＦＲ)は、別のチロシンキナーゼである。ＢＣＲ−ＡＢＬ癌タンパク質を生成する染色体転座と類似の分子機構が、イマチニブ感受性のＰＤＧＦＲ融合タンパク質ＰＤＧＦＲα(SEQ ID NO:２)及びＰＤＧＦＲβ(SEQ ID NO:３)を生じることが示されている。ＰＤＧＦＲα及びＰＤＧＦＲβは、特発性好酸球増加症候群及び慢性骨髄性単球性白血病にそれぞれ関係している(Apperley等、N. Engl. J. Med., 347, 481-487 (2002), 及び Cools等、N. Engl. J. Med, 348, 1201-14 (2003))。好酸球増加症候群において、好酸球の過剰増殖は、しばしば、ＦＩＰ１Ｌ１とＰＤＧＦＲαとの融合から生じるキメラのＦｉｐ１様(ＦＩＰ１Ｌ１)−ＰＤＧＦＲタンパク質の構成的チロシンキナーゼ活性から生じる。
【００１７】
ＰＤＧＦＲ及びプロトオンコジーンｃ−ｋｉｔは、悪性線維性組織球腫(ＭＦＨ)に関連している。イマチニブは、標的キナーゼの一方又は両方を発現する３つのＭＦＨ細胞株(ＴＮＭＹ１、ＧＢＳ−１及びＮａｒａ−Ｆ)における細胞増殖の阻害を示した(Kawamoto等、Anticancer Res., 24, 2675-9 (2004))。
【００１８】
ＰＤＧＦＲβも又、前立腺癌(Hofer等、Neoplasia, 6, 503-12 (2004))、アンドロゲン依存性前立腺癌(Mathew等、J. Clin. Oncol., 22, 3323-9 (2004))及び皮膚線維肉腫(Klener等、Cas. Lek. Cesk., 143, 582-3 (2004))に関連してきた。
【００１９】
ＰＤＧＦＲ及びＢＣＲ−ＡＢＬは又、子宮内膜癌(ＥＥＣ)及び子宮乳頭漿液性癌(ＵＰＳＣ)にも関連している(Slomovitz等、Gyneco. Oncol., 95, 32-36 (2004))。
【００２０】
ＰＤＧＦＲβは又、脊索腫にも関連し、脊索腫の患者のグループにおいて、イマチニブの臨床的投与が、抗癌活性を有することが示されている(Casali等、Cancer, 1, 2086-97 (2004))。
【００２１】
ＰＤＧＦＲα及びＰＤＧＦＲβは、事実上すべてのグリオーマ細胞株において及びヒトの悪性星状細胞腫の新鮮な外科的分離物において発現される。イマチニブは、ヒトのグリア芽細胞腫細胞の成長を、ヌードマウスにおいてイン・ビボで阻害することが示されている(Kilic等、Cancer Res., 60, 5143-50 (2000))。
【００２２】
一の研究において、検出可能なＦＩＰ１Ｌ１−ＰＤＧＦＲ遺伝子融合物を用いてイマチニブ治療された５人の患者の内の５人は、完全な血液学的軽減を経験した(Cools等、同書)。これらの５人の患者の１人は、結局、再発して、イマチニブに耐性であることが見出された。このイマチニブ耐性は、αＰＤＧＦＲαＡＴＰ結合部位における点突然変異に帰せられた。スレオニンのイソロイシンへの置換(Ｔ６７４Ｉ)は、ＢＣＲ−ＡＢＬのゲートキーパー残基のＴ３１５Ｉ変異と同等の位置に起きる。
【００２３】
ＢＣＲ−ＡＢＬのゲートキーパー残基は、ＰＤＧＦＲ、ＫＩＴ、ＥＧＦＲ、ＳＲＣ及びＰ３８を含む幾つかのキナーゼにおけるゲートキーパー残基に対応する。キナーゼ関連疾患の治療における臨床的前進にもかかわらず、臨床的に意味のある変異は、ＰＤＧＦＲ、ＫＩＴ及びＥＧＦＲのキナーゼドメイン中で同定されてきた。これらの突然変異の幾つかは、ＢＣＲ−ＡＢＬに起きる変異に対応しており、ゲートキーパー残基を含んでいる。一層大きい残基例えばイソロイシン又はメチオニンへのゲートキーパー残基の変異は、キナーゼｐ３８、ＳＲＣ及びＥＧＦＲにおいて、それぞれＡＴＰ競合性インヒビターＳＢ２０３５８０、ＰＰ１及びＰＤ１５３０３５に対する耐性を与えることが示されている(Eyers等、Chem. Biol., 5, 321-328 (1998)；Liu等、Chem. Biol., 8, 257-266 (1999)；及びBlencke等、J. Biol. Chem., 278, 15435-40 (2003))。
【００２４】
Ｃ．ＫＩＴと関連する増殖性疾患
胃及び小腸の間充織腫瘍である胃腸間質腫瘍(ＧＩＳＴ)は、ＫＩＴチロシンキナーゼレセプター(SEQ ID NO:４)を発現する。ＧＩＳＴ細胞は、しばしば、ＫＩＴキナーゼドメイン中に、構成的キナーゼへと導く活性化点突然変異を含む。マウスにおける活性化ＫＩＴ変異の発現は、ヒトのＧＩＳＴに類似の腫瘍を引き起こすことが示された(Somsmer等、Proc.Natl.Acad.Sci., 100, 6706-11 (2003))。ｃ−ｋｉｔ発現は又、小脳の高度に侵襲性の未分化神経外胚葉性腫瘍であり、最も一般的な子供の悪性の中枢神経系の腫瘍である髄芽細胞腫にも関連している。１０の髄芽細胞腫の腫瘍試料の研究において、すべては、ｃ−ｋｉｔを発現した(Chilton-Macneill等、Pediatr. Dev. Pathol., 7, 493-8 (2004))。ｃ−ｋｉｔは又、多くの子宮平滑筋肉腫において発現されることも示されている(Raspollini等、Clin. Cancer Res., 10, 3500-3 (2004))。
【００２５】
イマチニブに対する二次的な耐性の形成が、少なくとも一人のＧＩＳＴ患者において報告されている。この耐性は、ＫＩＴキナーゼドメイン中のＴ６７０Ｉ変異により引き起こされ；この変異部位は、ＢＣＲ−ＡＢＬのＴ３１５Ｉゲートキーパー残基に対応する(Demitri等、N. Engl. J. Med, 347, 472-480 (2002))。この変異は、継続されるイマチニブ治療中に進行した固形腫瘍の転移病巣に限られ、他の病巣は依然としてイマチニブ治療に応答した(Tamborini等、Gastroenterology, 127, 294-299 (2004))。
【００２６】
別の二次的ＫＩＴ変異であるＹ８２３Ｄは、イマチニブ治療中に現れて有意のイマチニブ耐性を与えることが示されている。この点突然変異は、ＡＢＬ活性化ループ中の主要リン酸化部位のＴｙｒ３９３に対応する位置にある(Wakai等、Br. J. Cancer, 90, 2059-61 (2004))。野生型ＡＢＬのこの部位のリン酸化は、活性化ループの不活性コンホメーションを不安定にするのに役立つ(Schindler等、Science, 289, 1938-42 (2000))。Ｙ８２３Ｄ ＫＩＴ変異は、ＡＢＬのリン酸化されたＴｙｒ３９３を真似ることができ、それにより類似のイマチニブ耐性を与えることができるということが示唆されている(Daub等、Nature Reviews Drug Discovery, 3, 1001-10 (2004))。
【００２７】
他の変異は、ＫＩＴ活性化ループにおいて特徴付けられてきた。ＫＩＴタンパク質中のキナーゼ活性化Ｄ８１６Ｖ変異は、主なイマチニブ耐性を与え、ヒトの肥満細胞症における病気の原因として同定されてきた(Ma等、Blood, 99, 2059-61 (2002))。
【００２８】
Ｄ．ＥＧＦＲと関連する増殖性疾患
上皮成長因子レセプター(ＥＧＦＲ、SEQ ID NO:５)は、他のチロシンキナーゼである。ゲフィチニブ(ＥＧＦＲインヒビター)は、確立された化学療法養生法に応答しない進行した非小細胞肺癌(ＮＳＣＬＣ)の治療につき承認されている(Muhsin等、Nature Rev. Drug Discov., 2, 515-516 (2003)及びCohen等、Clin. Cancer Res., 10, 1212-18 (2004))。イマチニブ不従順Ｔ３１５Ｉ ＢＣＲ−ＡＢＬ変異体へと導くＣからＴへの単一ヌクレオチドの変異は又、対応するゲートキーパー残基Ｔｈｒ７６６をメチオニン残基で置き換えること(Ｔ７６６Ｍ)によりゲフィニチブに対してＥＧＦＲを劇的に不安定化させる(Blenke等、Chem. Biol., 11, 691-791 (2004)及びBlenke等、J. Biol. Chem, 278, 15435-40 (2003))。
【００２９】
ＩＩ．イマチニブ耐性を克服するための従来の試み
ピリド[２，３−ｄ]ピリミジン例えばＰＤ１８０９７０(表１)は、ＢＣＲ−ＡＢＬ活性化ループ変異体例えばＨ３９６Ｐの癌促進活性を抑制することが示されている(La Posee等、Cancer Res., 62, 7149-53 (2002)及びvon Bubnoff等、Cancer Res., 9, 1267-73 (2003))。これらの化合物は又、臨床的に一般的なＴｙｒ２５３又はＧｌｕ２５５と関係するｐ−ループ変異を含むＢＣＲ−ＡＢＬをも阻害する。ＰＤ１８０９７０は又、Ｍ３５１Ｔ変異体(この変異は、イマチニブ耐性ＣＭＬの症例の約１５〜２０%を説明する)を含むＢＣＲ−ＡＢＬを阻害することも示されている(Kantarjian等、Blood, 101, 473-475 (2003))。
【００３０】
ＳＲＣ(記載された最初のプロトオンコジーンタンパク質)は、非レセプターチロシンキナーゼである。ＳＲＣ及びＡＢＬインヒビターのＢＭＳ−３５４８２５及びＡＰ２３４６４(表１)は、イマチニブ耐性と関係するある種の臨床的に一般的な変異を含むＢＣＲ−ＡＢＬの阻害において、ピリド[２，３−ｄ]ピリミジンに類似した活性を示している(Shah等、Science, 305, 399-401 (2004)及びO'Hare等、Blood, 104, 2532-39 (2004))。
【００３１】
ＩＩＩ．α，β−不飽和スルホン、スルホキシド及びスルホンアミド
ある種のα，β−不飽和スルホン、スルホキシド及びスルホンアミド、特に、スチリルベンジルスルホン、スチリルベンジルスルホキシド及びスチリルスルホンアミドは、抗増殖性、放射線防護的及び化学防護的活性を有することが示されている。米国特許第６，５９９，９３２号、６，５７６，６７３号、６，５４８，５５３号、６，５４１，４７５号、６，４８６，２１０号、６，４１４，０３４号、６，３５９，０１３号、６，２０１，１５４号、６，６５６，９７３号及び６，７６２，２０７号を参照されたい。しかしながら、これらのα，β−不飽和スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドの何れも、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターを用いる治療に耐性のキナーゼ依存性の増殖性疾患の治療において活性を有することは報告されていない。
【００３２】
キナーゼ変異により引き起こされる薬物耐性の克服において幾らかの進歩がなされた。しかしながら、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性の増殖性疾患特に癌を治療することができ、かかる耐性の発生を防止することのできる新しい治療法が必要とされている。加えて、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性の増殖性疾患特に癌の発生を防止又は遅延させることのできる新しい治療法が必要とされている。
【００３３】
発明の概要
この発明の一具体例により、個人における、ＡＴＰ競合性のキナーゼインヒビターを用いる治療に耐性の、キナーゼ依存性の増殖性疾患特に癌を治療する方法を提供する。この方法は、かかる治療の必要な個人に、有効量の少なくとも一種の下記式Ｉの化合物を投与することを含む：
【化１】
(式中、Ａｒ1及びＡｒ2は、独立に、置換された及びされてないアリール及び置換された及びされてないヘテロアリールから選択し；
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
ｎは、１又は２であり；
Ｒは、−Ｈ又は−(Ｃ1〜Ｃ8)ヒドロカルビルであり；そして
*は、ＸがＣＨで且つＲが−Ｈ以外の場合には、Ｘの炭素原子上の置換基のコンホメーションが、Ｒ−、Ｓ−又はＲ−とＳ−の任意の混合物であり；又はその塩であることを示し;
但し、ＸがＮである場合には、ｎは２である)。
【００３４】
この発明の他の具体例により、キナーゼ依存性の増殖性疾患を病んでいる個人において、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの投与を含む治療に対する耐性の発生を防ぎ又は遅延させる方法を提供する。この方法は、かかる治療を必要とする個人に、有効量の上記の式Ｉに従う少なくとも一種の化合物を投与することを含む。一具体例によれば、この方法は、更に、有効量の少なくとも一種のＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの投与を含む。
【００３５】
キナーゼ依存性の増殖性疾患の、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターを用いる治療に対する耐性は、キナーゼ依存性の増殖性疾患と関連するキナーゼのタンパク質配列中の突然変異から生じる。
【００３６】
この発明の一具体例によれば、この治療されるキナーゼ依存性の増殖性疾患は、少なくとも一種のＡＴＰ競合性ＢＣＲ−ＡＢＬインヒビターに耐性である。
【００３７】
この発明の一具体例によれば、ＢＣＲ−ＡＢＬのＡＴＰ競合性インヒビターに対する耐性は、ＢＣＲ−ＡＢＬタンパク質のキナーゼドメイン内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変異から生じる。幾つかの具体例によれば、この耐性は、ＢＣＲ−ＡＢＬのｐ−ループ内の少なくとも一つの残基の突然変異から生じる。特定の具体例によれば、この変異は、ＢＣＲ−ＡＢＬのＴｙｒ２５３又はＧｌｕ２５５の変化を含む。他の具体例によれば、この耐性は、ＢＣＲ−ＡＢＬの活性化ループ内の少なくとも一つの残基の変異から生じる。特定の具体例によれば、この変異は、Ｈｉｓ３９６の変化である。
【００３８】
好適具体例によれば、ＡＴＰ競合性ＢＣＲ−ＡＢＬインヒビターは、イマチニブである。
【００３９】
他の具体例によれば、ＢＣＲ−ＡＢＬのＡＴＰ競合性インヒビターに対する耐性は、Ｆ３１７Ｌ、Ｈ３９６Ｒ、Ｍ３５１Ｔ、Ｈ３９６Ｐ、Ｙ２５３Ｈ、Ｍ２４４Ｖ、Ｅ３５５Ｇ、Ｆ３５９Ｖ、Ｇ２５０Ｅ、Ｙ２５３Ｆ、Ｆ３１１Ｌ、Ｔ３１５Ｉ、Ｅ２５５Ｖ、Ｑ２５２Ｈ、Ｌ３８７Ｍ、Ｅ２５５Ｋよりなる群から選択する少なくとも一つの変異を含むＢＣＲ−ＡＢＬタンパク質内の突然変異から生じる。
【００４０】
この発明の幾つかの具体例により、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性のキナーゼ依存性の増殖性疾患は、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性リンパ腫、特発性肺線維症、特発性好酸球増加症候群、慢性骨髄性単球性白血病、悪性線維性組織球腫、前立腺癌、アンドロゲン依存性前立腺癌、皮膚線維肉腫、子宮内膜癌、子宮乳頭漿液性癌、脊索腫、グリオーマ、悪性星状細胞腫、グリア芽細胞腫細胞、胃腸間質腫瘍、髄芽細胞腫、子宮平滑筋肉腫、及び非小細胞肺癌よりなる群から選択する。
【００４１】
この発明の一具体例により、キナーゼ依存性の増殖性疾患は、ＫＩＴの少なくとも一のＡＴＰ競合性インヒビターに対して耐性であり、この耐性は、ＫＩＴタンパク質内の少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる。一具体例により、この変異は、ＫＩＴキナーゼドメイン内にある。
【００４２】
ある具体例により、このＫＩＴタンパク質内の変異は、Ｔｈｒ６７０、Ｔｙｒ８２３又はＡｓｐ８１６の少なくとも一つの変化を含む。他の具体例によれば、このＫＩＴタンパク質内の変異は、Ｔ６７０Ｉ、Ｙ８２３Ｄ及びＤ８１６Ｖよりなる群から選択する少なくとも一つの変異を含む。
【００４３】
この発明の一具体例により、キナーゼ依存性の増殖性疾患は、ＥＧＦＲの少なくとも一つのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性であり、この耐性は、ＥＧＦＲタンパク質内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変異から生じる。一具体例によれば、この変異は、ＥＧＦＲキナーゼドメイン内にある。
【００４４】
ある具体例により、ＥＧＦＲ変異は、Ｔｈｒ７６６の変化を含む。一つのかかる変異は、変異Ｔ７６６Ｍである。
【００４５】
この発明の他の具体例によれば、このキナーゼ依存性の増殖性疾患は、ＰＤＧＦＲαの少なくとも一つのインヒビターに耐性であり、この耐性は、ＰＤＧＦＲαタンパク質内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変異から生じる。一具体例によれば、この変異は、ＰＤＧＦＲαキナーゼドメイン内にある。
【００４６】
ある具体例によれば、このＰＤＧＦＲα変異は、Ｔｈｒ６７４の変化を含む。一つのかかる変異は、Ｔ６７４Ｉの変異である。
【００４７】
この発明の他の具体例によれば、このキナーゼ依存性の増殖性疾患は、ＰＤＧＦＲβの少なくとも一つに耐性であり、その耐性は、ＰＤＧＦＲβタンパク質内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変異から生じる。一具体例により、この変異は、ＰＤＧＦＲαキナーゼドメイン内にある。
【００４８】
ある具体例によれば、このＰＤＧＦＲβ変異は、Ｔｈｒ６８１の変化を含む。一つのかかる変異は、Ｔ６８１Ｉの変異である。
【００４９】
この発明の一具体例により、式Ｉ中の置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ1上の置換基は、独立に、ハロゲン、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ2、−ＮＲ22、−ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｒ3、−ＮＨＳＯ2Ｒ3、−ＮＨ(Ｃ2−Ｃ6)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−ＮＨＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ22、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＯＲ2、−ＯＣ(＝Ｏ)Ｒ3、−ＯＳＯ2Ｒ3、−Ｏ(Ｃ2−Ｃ6)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−ＯＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−Ｐ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2、−ＯＰ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2、−Ｏ(Ｃ2−Ｃ6アルキレン)Ｎ(Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−ＮＨＣ(＝ＮＨ)ＮＨＲ2、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル、−Ｏ(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル；−ＳＯ2ＮＨ2；及び−Ｎ＝ＣＨ−Ｒ7よりなる群から選択することができ；式Ｉ中の置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ2上の置換基は、独立に、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ2、ハロゲン、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、−ＮＲ22、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル；−ＳＯ2ＮＨ2；及び−Ｏ(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキルよりなる群から選択することができる；
(式中、
各Ｒ2は、独立に、−Ｈ及び−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビルよりなる群から選択され；
各Ｒ3は、独立に、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｏ(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、置換された及びされてないアリール、置換された及びされてないヘテロシクリル(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、置換された及びされてないヘテロアリール(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、−(Ｃ2−Ｃ10)へテロアルキル、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル、−ＣＲ2Ｒ4ＮＨＲ5、−ＮＲ22、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレンＮＨ2、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレンＮ((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−(Ｃ1−Ｃ3)ペルフルオロアルキレン−Ｎ((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｎ+((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)3、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｎ+(ＣＨ2ＣＨ2ＯＨ)3、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−ＯＲ2、−(Ｃ1−Ｃ4)アルキレン−ＣＯ2Ｒ2、−(Ｃ1−Ｃ4)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)ハロゲン、ハロ(Ｃ1−Ｃ3)アルキル−、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、及び−(Ｃ1−Ｃ4)ペルフルオロアルキレン−ＣＯ2Ｒ2よりなる群から選択され；
各Ｒ4は、独立に、−Ｈ、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−(ＣＨ2)3−ＮＨ−Ｃ(ＮＨ2)(＝ＮＨ)、−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ2、−ＣＨ2ＣＯ2Ｒ2、−ＣＨ2ＳＨ、−(ＣＨ2)Ｃ(＝Ｏ)−ＮＨ2、−(ＣＨ2)ＣＯ2Ｒ2、−ＣＨ2−(２−イミダゾリル)、−(ＣＨ2)4−ＮＨ2、−(ＣＨ2)2−Ｓ−ＣＨ3、フェニル、−ＣＨ2−フェニル、−ＣＨ2−ＯＨ、−ＣＨ(ＯＨ)−ＣＨ3、−ＣＨ2−(３−インドリル)、及び−ＣＨ2−(４−ヒドロキシフェニル)よりなる群から選択され；
各Ｒ5は、独立に、−Ｈ，−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ7)ヒドロカルビル及び１〜３アミノ酸を含むカルボキシ末端結合したペプチジル残基よりなる群から選択され、該ペプチジル残基の末端アミノ基は、−ＮＨ2、−ＮＨＣ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−ＮＨ(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−Ｎ(Ｃ1−Ｃ6アルキル)2及び−ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｏ(Ｃ1−Ｃ7)ヒドロカルビルよりなる群から選択する官能基として存在し；
各Ｒ6は、独立に、−ＯＲ2、−ＮＲ22、及び１〜３アミノ酸を含むアミノ末端結合したペプチジル残基よりなる群から選択され、該ペプチジル残基の末端カルボキシル基は、−ＣＯ2Ｒ2及び−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ22よりなる群から選択する官能基として存在し；そして
各Ｒ7は、独立に、置換された及びされてないアリール及び置換された及びされてないヘテロアリールよりなる群から選択され；
但し、Ａｒ1及びＡｒ2上の置換基の最大数は、それらの置換基が結合している環内の置換可能な水素原子の数に等しい。
【００５０】
Ｒ3又はＲ7を含む置換されたアリール又はヘテロアリール基上の置換基は、好ましくは、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−(Ｃ1−Ｃ6)アルコキシ、ハロゲン、−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−ＮＨ2、−ＮＨ(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−Ｎ(Ｃ1−Ｃ6)アルキル)2、−ＮＨＣ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−ＮＯ2、−ＣＮ、(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキレン−ＮＨ2、−ＣＯ2Ｈ、ＣＯＮＨ2、Ｃ(＝Ｎ)ＮＨ2、及びヘテロシクリル(Ｃ1−Ｃ6)アルキルよりなる群から選択され；ここに、ヘテロシクリル(Ｃ1−Ｃ6)アルキルを含むヘテロシクリル環は、適宜、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル又はＣ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキルにより置換されている。
【００５１】
Ｒ3を含む置換されたヘテロシクリル基上の置換基は、好ましくは、独立に、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−(Ｃ1−Ｃ6)アルコキシ、ハロゲン、−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−ＣＯ2Ｈ、及びＣＯＮＨ2よりなる群から選択する。
【００５２】
この発明の幾つかの好適具体例によれば、Ａｒ1は、フェニルである。この発明の他の好適具体例によれば、Ａｒ2は、フェニルである。この発明の更に別の好適具体例によれば、Ａｒ1及びＡｒ2の両者は、フェニルである。
【００５３】
好ましくは、Ａｒ1及びＡｒ2の両者がフェニルである場合には、Ａｒ1及びＡｒ2の両者は、少なくとも一置換されている。
【００５４】
この発明の幾つかの具体例によれば、式Ｉの化合物中のＡｒ1及びＡｒ2を含むアリール及びヘテロアリール基は、一、二又は三置換されている。他の具体例によれば、Ａｒ1及びＡｒ2を含むアリール及びヘテロアリール基は、すべての置換可能な位置で置換されている。
【００５５】
Ｒは、好ましくは、−Ｈ又は−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、最も好ましくは−Ｈ又は−(Ｃ1−Ｃ6)アルキルである。
【００５６】
好適具体例によれば、置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ1上の置換基は、独立に、ハロゲン、−ＮＲ22、−ＮＨＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−ＯＲ2、−ＯＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、及び−ＯＰ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2よりなる群から選択され；そして置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ2上の置換基は、独立に、(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、ハロゲン、−ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、及び−ＮＲ22よりなる群から選択される。
【００５７】
一層好適な具体例によれば、置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ1上の置換基は、独立に、ハロゲン、−ＮＨ2、−ＮＨＣＨＲ4Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、−ＯＨ、−ＯＣＨＲ4Ｃ(＝Ｏ) ＯＲ2、及び−ＯＰ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2よりなる群から選択され；そして置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ2上の置換基は、独立に、(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、ハロゲン、−ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、及び−ＮＲ22よりなる群から選択される。
【００５８】
最も好適な具体例によれば、置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ1上の置換基は、独立に、ハロゲン、−ＮＨ2、−ＮＨＣＨ(ＣＨ3)Ｃ(＝Ｏ)ＯＨ、−ＮＨＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)ＯＨ、−ＯＨ、−ＯＣＨ(ＣＨ3)Ｃ(＝Ｏ)ＯＨ、及び−ＯＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)ＯＨよりなる群から選択され；そして置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ2上の置換基は、独立に、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、ハロゲン、−Ｏ(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、及び−ＮＲ22よりなる群から選択される。
【００５９】
式Ｉに従う好適化合物には、例えば、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)酢酸；(ラセミ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｒ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｓ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルフィニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)酢酸；(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルフィニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｅ)−２，４，６−トリメトキシスチリル−Ｎ−(３−カルボキシメチルアミノ−４−メトキシ−フェニル)スルホンアミド；(Ｓ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；(Ｒ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；(ラセミ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−メチルプロパン酸；(Ｅ)−１−(２−(４−ブロモベンジルスルホニル)ビニル)−２，４−ジフルオロベンゼン；及び製薬上許容しうるこれらの塩が含まれる。
【００６０】
この発明のある具体例によれば、式Ｉに従う化合物は、反対のエナンチオマーを実質的に含まない単離された光学異性体を含む。一つの好適な下位具体例により、この単離された光学異性体は、*により示された原子における(Ｒ)−絶対配置を有し、実質的に(Ｓ)−エナンチオマーを含まない。他の好適な下位具体例によれば、この単離された光学異性体は、*により示された原子における(Ｓ)−絶対配置を有し、実質的に(Ｒ)−エナンチオマーを含まない。
【００６１】
この発明は又、式Ｉに従う化合物又は製薬上許容しうるその塩の、(１)個人におけるキナーゼ依存性の増殖性疾患(該疾患は、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性である)を治療し又は(２)キナーゼ依存性の増殖性疾患を病んでいる個人においてＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの投与を含む治療に対する耐性の発生を予防若しくは遅延させる医薬の製造のための利用にも向けられている。
【００６２】
定義
用語「個人」は、ヒト及び非ヒト動物を包含する。
【００６３】
表現「有効量」は、増殖性疾患特に癌を病んでいる患者の治療との関連において、異常に高速度で増殖している細胞の成長を阻止し或はかかる細胞好ましくは癌細胞のアポトーシスを誘導し、増殖性疾患特に癌を病んでいる患者に投与した場合に増殖性細胞に対する治療上有用な選択的細胞傷害性効果を生じる式Ｉの化合物の量を指す。用語「有効量」は、異常に増殖性の細胞の成長を阻止し又はかかる細胞のアポトーシスを誘導する量で、活性な代謝産物に代謝されうる式Ｉの化合物の量を含む。
【００６４】
表現「増殖性疾患」は、身体によって、異型に促進された速度で細胞が作られる疾患を意味する。表現「キナーゼ依存性の増殖性疾患」は、異常に速い細胞増殖が、プロテインキナーゼの発現によって駆動される増殖性疾患を指す。
【００６５】
用語「腫瘍」は、異常な細胞増殖から生じて、生理的機能に役立たない組織の異常な成長を意味する。腫瘍は、良性腫瘍即ち周囲組織を侵襲せず個体の生命を危険に曝さない腫瘍であってよい。腫瘍は、癌性であってよい。癌性腫瘍は、悪性即ち周囲組織を侵襲し且つ／又は転移即ち元の腫瘍の部位から離れた身体の組織に広がる傾向があるものである。
【００６６】
表現「キナーゼインヒビター」は、キナーゼのキナーゼ活性を阻害する作用をする薬剤を指す。
【００６７】
表現「ＡＴＰ競合性のキナーゼインヒビター」は、キナーゼを、そのキナーゼ上のＡＴＰ結合部位とＡＴＰを競合することによって阻害するキナーゼインヒビターを意味する。
【００６８】
用語「アルキル」は、それ自体又は他の置換基の部分として、別途示された場合を除いて、(Ｃx−Ｃy)アルキルなどの表現において示された炭素数を有する直鎖、分枝鎖又は環状鎖の飽和炭化水素基(２以上の基を含む)を意味する。表現(Ｃx−Ｃy)アルキル(式中、ｘ＜ｙ)は、最少でｘ炭素原子、最大でｙ炭素原子を含むアルキル鎖を表している。例には、下記が含まれる：メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロヘキシル及びシクロプロピルメチル。好ましいのは、(Ｃ1−Ｃ3)アルキルであり、特に、エチル、メチル及びイソプロピルである。
【００６９】
用語「シクロアルキル」は、少なくとも一つの環状構造を含むアルキル基を指す。例には、シクロヘキシル、シクロペンチル、ノルボルニル、アダマンチル及びシクロプロピルメチルが含まれる。好ましいのは、(Ｃ3−Ｃ12)シクロアルキルであり、特に、シクロペンチル、ノルボルニル及びアダマンチルである。
【００７０】
用語「アルキレン」は、示された炭素数を有する２価のアルキル基を指す(即ち、(Ｃ1−Ｃ6)は、−ＣＨ2−；−ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−；−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−；及び−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−を意味し、分枝した２価の構造例えば−ＣＨ2ＣＨ(ＣＨ3)ＣＨ2ＣＨ2−及び−ＣＨ(ＣＨ3)ＣＨ(ＣＨ3)−、及び２価の環状構造例えば１，３−シクロペンチルも含む)。
【００７１】
用語「アリーレン」は、それ自体又は他の置換基の部分として、別途示されていない限り、２価のアリール基を意味する。好ましいのは、２価のフェニル基即ち「フェニレン」基、特に、１，４−二価フェニル基である。
【００７２】
用語「ヘテロアリーレン」は、それ自体又は他の置換基の部分として、別途示されていない限り、２価のヘテロアリール基を意味する。好ましいのは、５員又は６員の単環式ヘテロアリーレンである。一層好ましいのは、ピリジン、ピペラジン、ピリミジン、ピラジン、フラン、チオフェン、ピロール、チアゾール、イミダゾール及びオキサゾールよりなる群から選択する二価のヘテロアリール環を含むヘテロアリーレン部分例えば２，５−二価ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、オキサゾール、及びイミダゾールである。
【００７３】
用語「アルコキシ」は、単独で又は他の用語と組み合わせて用いるが、別途示されていない限り、上記のように、酸素原子を介して分子の残りと結合された示された数の炭素原子を有するアルキル基例えばメトキシ、エトキシ、１−プロポキシ、２−プロポキシ(イソプロポキシ)及び一層高分子の同族体及び異性体を意味する。好ましいのは、(Ｃ1−Ｃ6)アルコキシ、特に、エトキシ及びメトキシである。
【００７４】
この発明の化合物中に出現しうるアルキル基及びアルコキシ基における炭素鎖は、環状、直鎖又は分枝していてよいが、直鎖が好ましい。表現「(Ｃ1−Ｃ6)アルキル」は、従って、１、２、３、４、５又は６炭素を含むアルキル基に及ぶ。表現「(Ｃ1−Ｃ6)アルコキシ」は、従って、１、２、３、４、５又は６炭素を含むアルコキシ基に及ぶ。
【００７５】
用語「ヒドロカルビル」は、水素及び炭素原子のみを含む任意の部分を指す。この用語は、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール及びベンジル基を包含する。好ましいのは、(Ｃ1−Ｃ7)ヒドロカルビルである。一層好ましいのは、(Ｃ1−Ｃ6)アルキル及び(Ｃ3−Ｃ12)シクロアルキルである。
【００７６】
用語「ヘテロアルキル」は、それ自体又は他の用語との組合せにおいて、別途示されない限り、示された数の炭素原子及び、Ｏ、Ｎ及びＳよりなる群から選択した１つ又は２つのヘテロ原子よりなる安定な直鎖又は分枝鎖の基を意味し、ここに、窒素及び硫黄原子は、適宜、酸化されていてよく、窒素ヘテロ原子は、適宜、四級化されていてよい。この(これらの)ヘテロ原子は、ヘテロアルキル基の任意の位置(ヘテロアルキル基の残りとそれが結合している断片との間を含む)に位置してよく、ヘテロアルキル基中の最も遠位の炭素原子に結合していてよい。例には、次が含まれる：−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＨ2ＣＨ2−ＯＨ、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＮＨ−ＣＨ3、−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ2−ＣＨ3、及び−ＣＨ2ＣＨ2−Ｓ(＝Ｏ)−ＣＨ3。最大２ヘテロ原子まで連続させることができる、例えば、−ＣＨ2−ＮＨ−ＯＣＨ3、又は−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｓ−Ｓ−ＣＨ3。
【００７７】
用語「ハロ」又は「ハロゲン」は、それら自体又は他の置換基の部分として、別途示されない限り、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を意味する。
【００７８】
用語「芳香族の」は、少なくとも一つの芳香族性(４ｎ＋２)の非局在化π(パイ)電子を有する不飽和多環を有する炭素環又はヘテロ環を指す。用語「芳香族の」は、炭素環原子のみを含む環系を包含するだけでなく、少なくとも一つの非炭素原子を環原子として含む系をも包含することを意図している。少なくとも一つの非炭素原子を含む系は、「ヘテロアリール」又は「ヘテロ芳香族」系として知られているものであってよい。用語「芳香族の」は、従って、「アリール」及び「ヘテロアリール」環系を包含するものと認められる。
【００７９】
用語「アリール」は、単独で又は他の用語と組み合わせて用いられるが、別途示されていない限り、少なくとも一つの環(典型的には、１、２又は３環)を含む炭素環式芳香族系を意味し、かかる環は、ビフェニルのように懸垂様式で一緒に結合することができ、又はナフタレンのように融合してよい。例には、フェニル、アントラシル、及びナフチル(置換されていてもされてなくてもよい)が含まれる。前述のアリール部分の一覧は、代表することを意図したものであり、制限するものではない。
【００８０】
用語「ヘテロ環」又は「ヘテロシクリル」又は「ヘテロ環式」は、それ自体又は他の置換基の部分として、別途示されない限り、置換されてない又はされた、安定な、炭素原子及びＮ、Ｏ及びＳよりなる群から選択する少なくとも一つのヘテロ原子よりなる単環式又は多環式のヘテロ環系を意味し、ここに、窒素及び硫黄ヘテロ原子は、適宜、酸化されていてよく、窒素原子は、適宜、四級化されていてよい。このヘテロ環系は、別途示されない限り、安定な構造を与える任意のヘテロ原子又は炭素原子で結合することができる。
【００８１】
ヘテロシクリル基には、単環式及び多環式ヘテロアリール基、及び芳香族でない単環式及び多環式基例えば飽和及び部分飽和のもの並びに単環式及び多環式の部分的に飽和の単環式及び多環式基が含まれる。
【００８２】
用語「ヘテロアリール」又は「ヘテロ芳香族」は、芳香族性を有するヘテロ環を指し、単環式ヘテロアリール基と多環式ヘテロアリール基の両方を包含する。多環式ヘテロアリール基は、少なくとも一つの部分的に飽和した環を含むことができる。
【００８３】
単環式ヘテロアリール基の例には、次のものが含まれる：ピリジル；ピラジニル；ピリミジニル、特に２−及び５−ピリミジル；ピリダジニル；チエニル；フリル；ピロリル、特に２−ピロリル及び１−アルキル−２−ピロリル；イミダゾリル、特に２−イミダゾリル；チアゾリル、特に２−チアゾリル；オキサゾリル、と国２−オキサゾリル；ピラゾリル、特に３−及び５−ピラゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，３，４−トリアゾリル、テトラゾリル、１，２，３−チアジアゾリル１，２，３−オキサジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル；及び１，３，４−オキサジアゾリル。
【００８４】
芳香族でない単環式ヘテロ環の例には、飽和単環式の群例えばアジリジン、オキシラン、チイラン、アゼチジン、オキセタン、チエタン、ピロリジン、ピロリン、イミダゾリン、ピラゾリジン、ジオキソラン、１，４−ジオキサン、１，３−ジオキサン、スルフォラン、テトラヒドロフラン、チオファン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、テトラヒドロピラン、ホモピペラジン、ホモピペリジン、１，３−ジオキセパン、ヘキサメチレンオキシド及びピペリジン；及び部分的に飽和した単環式の群例えば１，２，３，６−テトラヒドロピリジン、１，４−ジヒドロピリジン、２，３−ジヒドロフラン、２，５−ジヒドロフラン、２，３−ジヒドロピラン、１，２−ジヒドロチアゾール、１，２−ジヒドロオキサゾール、１，２−ジヒドロイミダゾール及び４，７−ジヒドロ−１，３−ジオキセピンが含まれる。
【００８５】
多環式ヘテロアリール基の例には、次のものが含まれる：インドリル、特に３−、４−、５−、６−及び７−インドリル、キノリル、イソキノリル、特に１−及び５−イソキノリル、シノリニル、キノクサリニル、特に２−及び５−キノクサリニル、キナゾリニル、フタラジニル、１，８−ナフチリジニル、１，４−ベンゾジオキサニル、クマリン、ベンゾフリル、特に３−、４−、１，５−ナフチリジニル、５−、６−及び７−ベンゾフリル、１，２−ベンズイソキサゾリル、ベンゾチエニル、特に３−、４−、５−、６−及び７−ベンゾチエニル、ベンゾキサゾリル、ベンズチアゾリル、特に２−ベンゾチアゾリル及び５−ベンゾチアゾリル、プリニル、ベンズイミダゾリル、特に２−ベンズイミダゾリル、ベンズトリアゾリル、チオキサンチニル、カルバゾリル、カルボリニル、アクリジニル、ピロリジニル、テトラヒドロキノリル、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリル、ジヒドロクマリニル、２，３−ジヒドロベンゾフリル；２，３−ジヒドロベンゾチエニル、Ｎ−メチル−２−インドリニル；及びインドリニル。
【００８６】
非芳香族多環式ヘテロ環の例には、ピロリジジニル及びキノリジジニルが含まれる。
【００８７】
非芳香族ヘテロ環式部分及びヘテロアリール部分の前述の一覧は、代表であって、制限することを意図したものではない。
【００８８】
好適なヘテロアリール基は、２−、３−及び４−ピリジル；２−及び５−ピリミジニル；３−ピリダジニル；２−及び３−チエニル；２−及び３−フリル；ピロリル；特にＮ−メチルピロール−２−イル；２−イミダゾリル；２−チアゾリル；２−オキサゾリル；ピラゾリル；特に３−及び５−ピラゾリル；イソチアゾリル；１，２，３−トリアゾリル；１，２，４−トリアゾリル；１，３，４−トリアゾリル；テトラゾリル、１，２，３−チアジアゾリル；１，２，３−オキサジアゾリル；１，３，４−チアジアゾリル及び１，３，４−オキサジアゾリル；インドリル、特に２−、３−、４−、５−、６−及び７−インドリル；シノリニル；キノクサリニル、特に２−及び５−キノクサリニル；キナゾリニル、特に２−、５−、６−、７−及び８−キナゾリニル；フタラジニル；１，８−ナフチリジニル；１，５−ナフチリジニル、特に１，５−ナフチリジン−３−イル及び１，５−ナフチリジン−４−イル；１，４−ベンゾジオキサニル；クマリニル；ベンゾフリル、特に２−、３−、５−、６−及び７−ベンゾフリル；１，２−ベンズイソキサゾリル、ベンゾチエニル、特に２−、３−、４−、５−、６−及び７−ベンゾチエニル；ベンゾキサゾリル；ベンズチアゾリル、特に２−ベンゾチアゾリル及び５−ベンゾチアゾリル；プリニル；ベンズイミダゾリル、特に２−ベンズイミダゾリル；ベンズトリアゾリル；チオキサンチニル；カルバゾリル；カルボリニル；及びアクリジニル、特に６−アクリジニルである。
【００８９】
一層好ましいヘテロアリール基は、２，３−及び４−ピリジル；２−及び３−チエニル；２−及び３−フリル；２−ピロリル；２−イミダゾリル；２−チアゾリル；２−オキサゾリル；２−及び３−インドリル；２−及び３−ベンゾフリル；３−(１，２−ベンズイソキサゾリル)；２−及び３−ベンゾチエニル；２−ベンゾキサゾリル；１−及び２−ベンズイミダゾリル、２−、３−及び４−キノリル；及び２−及び５−ベンズチアゾリルである。最も好ましいヘテロアリール基は、２−及び３−インドリル；２−及び３−ピロリル、２−及び３−ベンゾフリル；及び２−及び３−ベンゾチエニルである。
【００９０】
用語「置換された」は、原子又は原子団が、他の基に結合した置換基として水素に置き換わったことを意味する。アリール及びへテロアリール基に関して、用語「置換された」は、任意のレベルの置換即ちモノ−、ジ−、トリ−、又はペンタ−置換(かかる置換が可能な場合)を指す。これらの置換基は、独立に選択されて、置換は、化学的に許容しうる任意の位置であってよい。
【００９１】
α，β−不飽和の(アリール又はヘテロアリール)スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドは、二重結合の存在から生じる異性により特徴付けられる。この異性は、一般に、シス−トランス異性と呼ばれるが、Ｅ及びＺ命名法を用いるさらなる包括的な命名規則がある。これらの化合物は、Cahn-Ingold-Prelogシステム、ＩＵＰＡＣ１９７４推奨、区分Ｅ：立体化学、有機化学命名法、John Wiley & Sons、Inc.、New York、NY、第4版.、1992、p.127-138によって命名される。このシステムの命名法を使用し、二重結合について４個の基が一連の規則に従って優先順位が決められる。続いて、二重結合の同じ側に２個の高順位の基を有する異性体は、Ｚ（ドイツ語の単語“ｚｕｓａｍｍｅｎ”、一緒にという意味）と呼ばれる。２個のより高順位の基が二重結合の反対側にある異性体は、Ｅ（ドイツ語の単語“ｅｎｔｇｅｇｅｎ”、“反対”を意味する）と呼ばれる。従って、Ａが一番低い順位でありＤが一番高い順位として、Ａ＞Ｂ＞Ｃ＞Ｄとして炭素−炭素二重結合上の４個の基を順位付けする場合、異性体はスキーム１中のように命名される。
【化２】
【００９２】
本発明は、Ｅ配置のα，β−不飽和(アリール又はヘテロアリール)スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドを企図する。
【００９３】
式Ｉに従うα，β−不飽和(アリール又はヘテロアリール)スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドの幾つかは、ＸがＣＨで且つＲが−Ｈ以外の場合、Ｘにおけるキラル中心の存在から生じる異性により特徴付けられうる。キラル中心の存在に起因する異性体は、異性体と重ね合わせることができないペアを含み、それらは“光学異性体”と呼ばれる。純粋な化合物の単一の光学異性体は光学的に活性であり、即ち、それらは直線偏光の平面を回転することができる。単一の光学異性体はCahn-Ingold-Prelogシステムに従って指名される。マーチ、応用有機化学、第４版、（１９９２）、ｐ．１０９。一旦４個の基の優先順位が決定されると、分子は最低順位の基が観察者から見て向こう側に配置される。そして、他の基の降順が時計回りに進む場合、分子は（Ｒ）と規定され、他の基の降順が反時計回りに進む場合、分子は（Ｓ）と規定される。スキーム２の例中、Cahn-Ingold-Prelog順位はＡ＞Ｂ＞Ｃ＞Ｄである。最低順位の原子、Ｄは観察者から見て向こう側に配置される。
【化３】
【００９４】
別途示されない限り、絶対配置及びそれらの混合は、式Ｉのα，β−不飽和(アリール又はヘテロアリール)スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドの範囲に含まれる。
【００９５】
表現(Ｒ)又は(Ｓ)−エナンチオマーを「実質的に含まない」は、式Ｉに従う光学的に活性な化合物を参照して用いる場合には、この化合物の(Ｒ)及び(Ｓ)−エナンチオマーが、その組成が８０重量％以上単一のエナンチオマーであるように分離されていることを意味する。好ましくは、その組成は、９０重量％以上単一のエナンチオマーである。一層好ましくは、この組成は、９５重量％以上単一のエナンチオマーである。最も好ましくは、この組成は、９９重量％以上単一のエナンチオマーである。
【００９６】
従って、実質的に(Ｓ)−エナンチオマーを含まない式Ｉに従う化合物の(Ｒ)−エナンチオマーとは、その化合物が、８０重量％以上の(Ｒ)−エナンチオマーを含み、２０重量％以下の(Ｓ)−エナンチオマーを夾雑物として含むことを意味する。
【００９７】
単離された光学異性体は、周知のキラル分離技術によってラセミ性混合物から精製することができる。このような方法の一例によると、式Ｉの構造を有する化合物のラセミ混合物又はそのキラル中間体は、適当なキラルカラム例えばダイセル・キラルパックファミリー（商標）シリーズのメンバーのカラム(ダイセル化学工業株式会社、東京、日本)を使用したＨＰＬＣにより、９９重量％純粋な光学異性体に分離される。このカラムは製造業者の指示書によって操作される。
【００９８】
式Ｉに従う化合物に関して、一つより多いキラル中心が、分子中に存在しうる。２対のエナンチオマーが、２つのキラル中心の存在から生じる。鏡像異性体間の関係のみが、エナンチオマーと呼ばれる。単一のエナンチオマーと他の更なるキラル中心の結果として存在する異性体との間の関係は、「ジアステレオマー」と呼ばれる。ジアステレオマー対は、正常及び逆相クロマトグラフィー、及び結晶化を含む公知の分離技術によって分離することができる。２つのキラル中心を含む式Ｉに従う本発明の化合物は、単離されたジアステレオマー例えば(Ｒ，Ｒ)、(Ｒ，Ｓ)、(Ｓ，Ｒ)及び(Ｓ，Ｓ)；単離されたジアステレオマー対例えば(Ｒ，Ｒ)と(Ｒ，Ｓ)、又は(Ｓ，Ｒ)と(Ｓ，Ｓ)；及び任意の割合でのジアステレオマーの全混合物を包含すると理解される。
【００９９】
ここに開示した化合物の系統名を与えるためにここで採用した命名法は、コンピュータープログラムパッケージ、CHEMDRAW(登録商標)(CambridgeSoft Corporation, マサチューセッツ、02140 Cambridge在)を用いて得ることができる。
【０１００】
図面の説明
図１は、化合物１、イマチニブ又は塩溶液の、３２Ｄ／ＢＣＲ−ＡＢＬT315I細胞の、該細胞１×１０6を静脈注射した後の、ヌードマウスにおけるイン・ビボでの成長に対する効果のグラフである。データは、１０フィールド当たりの３２Ｄ／ＢＣＲ−ＡＢＬT315I細胞の平均数±ＳＥＭ(ｎ＝１０)としてプロットしてある。
図２は、化合物１(１００ｍｇ／ｋｇ)、イマチニブ(１００ｍｇ／ｋｇ)又は塩溶液を投与された個々のマウスの体重のプロットである。これらの３投与グループの各マウスの体重は、毎日測定された。平均体重を、出発体重のパーセントとしてプロットした。
図３は、塩溶液又は塩溶液に溶解させた化合物１(１００ｍｇ／ｋｇ)を静脈注射(尾静脈注射)したＣＤ−１マウスにおける造血コロニー形成のグラフである。
図４(ａ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＣＭＬ Ｋ５６２細胞のパーセントのプロットである。
図４(ｂ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後の生存可能なマウス３２Ｄｃｌ３．ＢＣＲ−ＡＢＬ細胞のパーセントのプロットである。
図５(ａ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｔ３１５Ｌ発現細胞のパーセントのプロットである。
図５(ｂ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｅ２５５Ｋ発現細胞のパーセントのプロットである。
図５(ｃ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｙ２５３Ｈ発現細胞のパーセントのプロットである。
図５(ｄ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｇ２５０Ｅ発現細胞のパーセントのプロットである。
図６は、ＢＣＲ−ＡＢＬの野生型又はイマチニブ耐性型を発現するようにトランスフェクトされて化合物２で処理された３２Ｄｃｌ３細胞の成長のグラフである。
図７は、野生型ＢＣＲ−ＡＢＬ、又はＢＣＲ−ＡＢＬ変異Ｇ２５０Ｅ、Ｔ３１５Ｉ又はＭ３５１Ｔを発現する生存可能な細胞の、変化する濃度の化合物４との７２時間のインキュベーション後のパーセントのプロットである。
【０１０１】
発明の詳細な説明
本発明によれば、ある種のα，β−不飽和スルホン スルホキシド及びスルホンアミド、又は製薬上許容しうるそれらの塩は、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性のキナーゼ依存性の増殖性疾患における標的細胞の増殖の阻止において有効である。
【０１０２】
これらの化合物は、標的キナーゼにおける突然変異によりＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性となった個人における増殖性疾患の治療に用いることができる。例えば、この発明の化合物は、標的キナーゼにおける点突然変異ＢＣＲ−ＡＢＬから生じたイマチニブ耐性のＣＭＬ及びＡＬＬを治療するために投与することができる。この発明の化合物は、キナーゼ変異のために治療に対して無反応性となった他のキナーゼ依存性の増殖性疾患例えばＫＩＴ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＥＧＦＲ、ＳＲＣ及びＰ３８の発現により特徴付けられる増殖性疾患に対して用いることができる。これらのキナーゼにおける突然変異は、イマチニブ及び他のＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの結合を阻止することが示されている。
【０１０３】
キナーゼ発現により駆動されうる増殖性疾患には、例えば、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性リンパ腫、特発性肺線維症、特発性好酸球増加症候群、慢性骨髄性単球性白血病、悪性線維性組織球腫、前立腺癌、アンドロゲン依存性前立腺癌、皮膚線維肉腫、子宮内膜癌、子宮乳頭漿液性癌、脊索腫、グリオーマ、悪性星状細胞腫、グリア芽細胞腫細胞、胃腸間質腫瘍、髄芽細胞腫、子宮平滑筋肉腫、及び非小細胞肺癌が含まれる。
【０１０４】
Ｉ．ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターに耐性の増殖性疾患の同定
イマチニブで治療した慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)におけるＢＣＲ−ＡＢＬキナーゼドメイン内の突然変異は、ＣＭＬにおけるイマチニブ耐性の獲得の主要な機構である。同様に、他のキナーゼをコードする遺伝子のキナーゼドメイン内の突然変異例えばＰＤＧＦＲ、ＫＩＴ、ＥＧＦＲ、ＳＲＣ及びＰ３８は、非変異キナーゼに対して抗増殖活性を有するプロテインキナーゼインヒビターに対する獲得された耐性の主たる機構として関係してきた。
【０１０５】
本発明の方法を用いることによる薬物耐性の症例における介入は、患者の細胞におけるキナーゼ変異の検出後に、特に患者の新生物細胞の検出後に実施することができる。変異は、例えば、標的細胞例えば新生物細胞における患者の関係するキナーゼ遺伝子を配列決定して、その配列を耐性を与える突然変異のデータバンクと比較することにより検出することができる。直接のＤＮＡ配列決定に加えて、当業者に公知の次の方法を利用してキナーゼ変異を検出することもできる：一本鎖コンホメーションの多型(ＳＳＣＰ)；変性勾配ゲル電気泳動(ＤＧＧＥ)；変性高性能液体クロマトグラフィー(ＤＨＰＬＣ)；化学的ミスマッチ開裂(ＣＭＣ)；酵素ミスマッチ開裂(ＥＭＣ)；ヘテロ二本鎖分析；及びＤＮＡマイクロアレイの利用。
【０１０６】
この発明の一具体例によれば、イマチニブで治療した患者において、ＢＣＲ−ＡＢＬｍＲＮＡの定量的ポリメラーゼ連鎖反応(ＲＱ−ＰＣＲ)を利用して、耐性の危険にある患者を検出することができる。ｂｃｒ−ａｂｌ発現の２倍以上の増加を示すイマチニブで治療した患者の相当の部分は、検出可能なＢＣＲ−ＡＢＬ変異を有し、これは、かかるＢＣＲ−ＡＢＬの上昇が、イマチニブを不活性化するＢＣＲ−ＡＢＬキナーゼドメインの突然変異について患者を調べるための主たる指示として役立ちうることを示している(Branford等、Blood, 104, 2926-32 (2004))。ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターでの治療を受けた患者の細胞における、上昇したＢＣＲ−ＡＢＬ発現は、可能な耐性付与ＢＣＲ−ＡＢＬ変異、特にＢＣＲ−ＡＢＬキナーゼドメインにおける変異を同定するための突然変異の分析の必要性を示唆している。
【０１０７】
ＩＩ．化合物の投与
これらの化合物は、経口投与及び非経口投与を含む任意の経路によって投与することができる。非経口投与には、例えば、静脈投与、筋肉内投与、動脈投与、腹腔内投与、鼻内投与、直腸投与、膣内投与、嚢(例えば、膀胱)内投与、皮内投与、局所投与又は皮下投与が含まれる。やはりこの発明の範囲内で企図されるのは、遅れて起きる薬物の全身又は局所的放出を用いる、制御された配合での患者の身体における薬物の点滴である。例えば、循環への又は腫瘍成長の局所部位への制御された放出のために薬物をデポー剤中に局在化させることができる。
【０１０８】
式Ｉの一種以上の化合物は、同時に同じ若しくは異なる経路によって投与することができ、又は治療の異なる時点で投与することができる。
【０１０９】
式Ｉの化合物及びＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの両者を患者に投与する場合には、好適なスケジュール及び投与量は、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターに好適な様式で指示される。その治療のコースは、個人間で異なり、当業者は、このＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの、所定の臨床的状況における、適当な投与量及び投与スケジュールを容易に決定することができる。
【０１１０】
式Ｉの化合物の、増殖性疾患の治療に関する治療的利益を得るための、特定の投与量は、当然、個々の患者の、大きさ、体重、年齢及び性別、増殖性疾患の性質及び段階、増殖性疾患の侵襲性、及び化合物の投与経路を含む特定の事情によって決定される。
【０１１１】
例えば、毎日の、約０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量を利用することができ、一層好ましくは、０．０５〜２５ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量を利用することができる。特に好ましいのは、約０．５〜１０．０ｍｇ／ｋｇ／日の、例えば約５．０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量である。この投与量は、多数回の投与例えば２回の２．５ｍｇ／ｋｇの投与で与えることができる。一層多い又は少ない投与量も企図される。
【０１１２】
式Ｉの化合物及びＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの両方を患者に投与する場合には、投与の経路は、これらの２種の薬物について同じであっても異なってもよい。これらの薬物は、同じ日に投与することもできるし異なる日に投与することもできる。一具体例によれば、これらの薬物は、連続する日に投与される。同じ日に薬物を投与することは、同時又は事実上同時の投与(互いに約２４時間の時間枠内での投与)を包含する。
【０１１３】
白血病性の増殖性疾患、特に慢性骨髄性白血病に対して養生法を施与することは、下記を含みうる。
【０１１４】
ｂｃｒ−ａｂｌ遺伝子のキナーゼドメインの突然変異のためにイマチニブ耐性になっている慢性期のＣＭＬ患者に対して、治療は、式Ｉの化合物の、約１．５〜４ｍｇ／ｋｇ／日に及ぶ毎日の経口投与を含む。もし所望の治療結果が、３ヶ月の治療の後に達成されないならば、投与量を、３ヶ月ごとにモニタリングを行なって、約０．５〜１．５ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で増加させる。病気の進行が現れた場合には、投与量を、約１．０〜３．０ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で、所望の治療結果が達成されるまで増加させる。
【０１１５】
加速期又はブラスト期のＣＭＬ患者については、治療は、式Ｉの化合物の、約２．５〜４．５ｍｇ／ｋｇ／日に及ぶ毎日の経口投与を含む。もし所望の治療結果が、３ヶ月の治療の後に達成されないならば、投与量を、３ヶ月ごとにモニタリングを行なって、約０．５〜１．５ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で増加させる。病気の進行が現れた場合には、投与量を、約１．０〜３．０ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で、所望の治療結果が達成されるまで増加させる。
【０１１６】
毎日４００ｍｇのイマチニブでの治療のコース中にイマチニブ耐性となったＣＭＬ患者の治療のためには、イマチニブ投与量を、毎日６００又は８００ｍｇに増大させ、約２．０〜５．０ｍｇ／ｋｇ／日の式Ｉの化合物の経口投与量を加える。もし所望の治療結果が、３ヶ月の治療の後に達成されないならば、式Ｉの化合物の投与量を、３ヶ月ごとにモニタリングを行なって、約０．５〜１．５ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で増加させる。病気の進行が現れた場合には、式Ｉの化合物の投与量を、約１．０〜３．０ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で、所望の治療結果が達成されるまで増加させる。
【０１１７】
ＣＭＬ患者に対する第一ライン治療としては、治療は、イマチニブ及び式Ｉの化合物の組合せを含む。毎日の、４００ミリグラムのイマチニブ及び約１．０〜４．０ｍｇ／ｋｇ／日の式Ｉの化合物の経口投与量を投与する。もし所望の治療結果が、３ヶ月の治療の後に達成されないならば、式Ｉの化合物の投与量を、３ヶ月ごとにモニタリングを行なって、約０．５〜１．５ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で増加させる。病気の進行が現れた場合には、イマチニブの投与量を６００又は８００ミリグラムに増やし、式Ｉの化合物の投与量を、約１．０〜３．０ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で、所望の治療結果が達成されるまで増加させる。
【０１１８】
上記の養生法の各々において、治療を、許容しうる毒性を前提に、患者が死亡するか又は他の因子(末期の病気など)が治療の停止を命ずるまで継続する。病状のモニタリング頻度は、当業者によって、必要に応じて調節することができる。
【０１１９】
病状のモニタリングは、当分野では、周知である。白血病性の増殖性疾患特に慢性骨髄性白血病のモニタリングのためには、病気のマーカーには、血球計数、骨髄細胞の細胞遺伝学的監視(例えば、フィラデルフィア陽性の中期のパーセント)及び分子マーカー(例えば、ＲＱ−ＰＣＲにより測定したｂｃｒ−ａｂｌ ｍＲＮＡ転写物の量又は蛍光イン・シトゥーハイブリダイゼーション(ＦＩＳＨ)による分子的再配置)が含まれるが、これらに限られない。
【０１２０】
ＩＩＩ．医薬組成物
式Ｉの化合物は、製薬上許容しうるキャリアーと組合わせた医薬組成物の形態で投与することができる。かかる配合物中の活性成分は、０．１〜９９．９９重量パーセントを含むことができる。「製薬上許容しうるキャリアー」とは、配合物の他の成分と適合性で且つレシピエントに有害でないの任意のキャリアー、希釈剤又は賦形剤を意味する。
【０１２１】
この活性剤は、好ましくは、投与経路及び標準的製薬プラクティスに基いて選択される製薬上許容しうるキャリアーと共に投与される。この活性剤は、製薬の分野における標準的プラクティスに従って投薬用の形態に配合することができる。Alphonso Gennaro 編、Remington's Pharmaceutical Sciences, 第１８版、(1990) Mack Publishing Co., ペンシルベニア、Easton。適当な投薬用形態には、例えば、錠剤、カプセル、溶液、非経口液、トローチ、座薬、又は懸濁液が含まれうる。
【０１２２】
非経口投与のためには、この活性剤を、適当なキャリアー又は希釈剤例えば水、油(特に、植物油)、エタノール、塩溶液、水性デキストロース(グルコース)及び関連糖溶液、グリセロール、又はグリコール例えばプロピレングリコール又はポリエチレングリコールと混合することができる。非経口投与のための溶液は、好ましくは、活性剤の水溶性の塩を含む。安定剤、抗酸化剤、及び防腐剤も又、加えることができる。適当な抗酸化剤には、亜硫酸塩、アスコルビン酸、クエン酸及びその塩、及びナトリウムＥＤＴＡが含まれる。適当な防腐剤には、塩化ベンザルコニウム、メチル又はプロピルパラベン、及びクロロブタノールが含まれる。この非経口投与のための組成物は、水性又は非水性の溶液、分散液、懸濁液又は乳濁液の形態をとることができる。
【０１２３】
経口投与のためには、この活性剤を、錠剤、カプセル、丸薬、粉末、顆粒又は他の適当な経口投薬形態の製造のために、一種以上の固体の不活性成分と合わせることができる。例えば、この活性剤を、少なくとも一種の賦形剤例えば充填剤、湿潤剤、崩壊剤、溶解遅延剤、吸収促進剤、湿潤剤、吸収剤又は潤滑剤と合わせることができる。一つの錠剤の具体例によれば、この活性剤を、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール及び澱粉と合わせてから、慣用の錠剤化方法によって錠剤に成形することができる。
【０１２４】
ＩＶ．式Ｉに従う化合物の塩
式Ｉの化合物は、塩の形態をとりうる。用語「塩」は、この発明の化合物である遊離酸又は遊離塩基の付加塩を包含する。用語「製薬上許容しうる塩」は、医薬適用において有用性を与える範囲内の毒性を有する塩を指す。
【０１２５】
適当な製薬上許容しうる酸付加塩は、無機酸又は有機酸から製造することができる。無機酸の例には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、硫酸及びリン酸が含まれる。適当な有機酸は、脂肪族、脂環式、芳香族、アリール脂肪族、ヘテロ環式、カルボン酸及びスルホン酸クラスの有機酸から選択することができ、その例には、蟻酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、グルクロン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、サリチル酸、４−ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、マンデル酸、パモ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パントテン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、スルファニル酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸、ステアリン酸、アルギン酸、γ−ヒドロキシ酪酸、ガラクタル酸及びガラクツロン酸が含まれる。
【０１２６】
式Ｉの化合物の適当な製薬上許容しうる塩基付加塩には、例えば、アルカリ金属、アルカリ土類金属及び遷移金属塩例えばカルシウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム及び亜鉛の塩を含む金属塩が含まれる。製薬上許容しうる塩基付加塩は又、塩基性アミン例えばＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン(Ｎ−メチルグルカミン)及びプロカインから作られた有機塩も包含する。
【０１２７】
これらの塩のすべては、慣用の手段によって、式Ｉに従う対応する化合物から、例えば、適当な酸又は塩基を式Ｉに従う化合物と反応させることにより製造することができる。
【０１２８】
Ｖ．この発明の実施において有用なα，β−不飽和スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドの製造
α，β−不飽和スルホンＤ１(式中、Ａｒ1、Ａｒ2、Ｒ及び*は、式Ｉの化合物について定義した通りである)を、芳香族アルデヒドのベンジルスルホニル酢酸Ｃ１とのクネーベナーゲル縮合によって製造することができる。その手順は、Reddy等、Acta. Chim. Hung. 115:269-71 (1984)；Reddy等、Sulfur Letters 13:83-90 (1991)；Reddy等、Synthesis No. 4, 322-323 (1984)；及びReddy等、Sulfur Letters 7:43-48 (1987)により記載されており、これらの全開示を、参考として本明細書中に援用する。クネーベナーゲル縮合に従う一般的合成を、下記のスキーム３に描いた。
【化４】
【０１２９】
スキーム３で用いた出発ベンジルスルホニル酢酸Ｃ１は、対応するベンジルメルカプト酢酸Ｂの酸化によって製造することができる。この酸化は、硫黄をスルホンに酸化するのに適した任意の酸化条件を用いて達成することができる。適当な試薬には、過酸化水素などの過酸化物、メタ−クロロペルオキシ安息香酸(ＭＣＰＢＡ)などの過酸及びＯＸＯＮＥ(登録商標)(ペルオキソ一硫酸カリウム)などの過硫酸塩が含まれる。この酸化反応は、好ましくは、適当な溶媒の存在下で実施する。適当な溶媒には、例えば、水、酢酸又は非極性溶媒例えばジクロロメタン(ＤＣＭ)が含まれる。
【０１３０】
ベンジルメルカプト酢酸Ｂは、メルカプト酢酸をベンジル化合物Ａ２と反応させるか、又はハロ酢酸をベンジルメルカプタンＡ１と反応させることにより製造することができる。
【０１３１】
スキーム３に描いたように、α，β−不飽和スルホキシドは、芳香族アルデヒドのベンジルスルフィニル酢酸Ｃ２とのクネーベナーゲル縮合によって製造することができる。
【０１３２】
スルホキシドＤ２の製造において、スキーム３において用いられている出発ベンジルスルフィニル酢酸Ｃ２は、対応するベンジルメルカプト酢酸Ｂの酸化によって製造することができる。この酸化は、スルフィドをスルホキシドに酸化するのに適した任意の酸化条件を用いて達成することができる。適当な試薬には、過酸化水素などの過酸化物、メタ−クロロペルオキシ安息香酸(ＭＣＰＢＡ)などの過酸及びＯＸＯＮＥ(登録商標)(ペルオキソ一硫酸カリウム)などの過硫酸塩が含まれる。この反応は、好ましくは、適当な溶媒の存在下で実施する。適当な溶媒には、例えば、水、酢酸又はジクロロメタン(ＤＣＭ)などの非極性溶媒が含まれる。スルホキシドへの酸化は、一般に、対臨界温度例えば約１０〜２５℃で行なわれ、その酸化反応は、スルホンへの過酸化の前に反応を終了するようにモニターされる。
【０１３３】
α，β−不飽和スルホンアミドＧ(式中、Ａｒ1、Ａｒ2及びＲは、式Ｉについて定義した通りである)は、スキーム４に示したように、芳香族アルデヒドのアリールアミノスルホニル酢酸Ｆとのクネーベナーゲル縮合により製造することができる。
【化５】
【０１３４】
α，β−不飽和スルホンアミドＧは、スキーム５に描いたように、別法により、芳香族アミンＥを芳香族スルホニルハリドＨと反応させることによって製造することができる。この芳香族スルホニルハリドＨは、好ましくは、芳香族オレフィンＪを塩化スルフリルと反応させることにより製造する。
【化６】
【０１３５】
式Ｉの化合物の製造は又、次の米国特許(これらの全開示を参考として本明細書中に援用する)の少なくとも一つにも記載されている：第６，５９９，９３２号、６，５７６，６７５号、６，５４８，５５３号、６，５４１，４７５号、６，４８６，２１０号、６，４１４，０３４号、６，３５９，０１３号、６，２０１，１５４号、６，６５６，９７３号及び６，７６２，２０７号。
【０１３６】
この発明の実施を、下記の非制限的実施例により説明する：
【０１３７】
「化合物１」は、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸：
【化７】
である。
【０１３８】
「化合物２」は、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)酢酸：
【化８】
である。
【０１３９】
「化合物３」は、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−メチルプロパン酸：
【化９】
のナトリウム塩である。
【０１４０】
「化合物４」は、(Ｅ)−１−(２−(４−ブロモベンジルスルホニル)ビニル)−２，４−ジフルオロベンゼン：
【化１０】
である。
【実施例】
【０１４１】
実施例１：(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸(化合物１)の、イマチニブ耐性ＢＣＲ−ＡＢＬT315Iを発現する細胞のイン・ビボでの成長に対する効果
Ａ．３２Ｄｃｌ３細胞株
３２Ｄｃｌ３細胞(Rovera等、Oncogene, 1, 29-35 (1987))を、１０％ ＦＢＳ、１Ｕ／ｍＬ ペニシリン−ストレプトマイシン及び１０％ ＷＥＨＩ−３Ｂ調整培地(ＩＬ−３源として)(Ymer等、Nature, 317, 255-258 (1985))を補ったIscove改変ダルベッコ培地中に維持した。
【０１４２】
Ｂ．野生型及びイマチニブ耐性変異型のＢＣＲ−ＡＢＬの生成
イマチニブ耐性と関係する公開されたｂｃｒ−ａｂｌ突然変異(Shah等、Oncogene 22, 7389-85 (2003))に対応するオリゴヌクレオチドを利用して、これらの変異を、完全長のｂｃｒ−ａｂｌ ｃＤＮＡ中に、ＰＣＲベースの位置指定突然変異導入法(Myers等、PCR Technology, Erlich, H.A.編、Stockton Press, London (1989))を用いて導入した。すべての構築物を、配列分析により確認した。野生型及びイマチニブ耐性型のＢＣＲ−ＡＢＬをコードするｐＣＤＮＡ３ベースの発現プラスミドを、活発に増殖している３２Ｄｃｌ３細胞に、エレクトロポレーションによって以前に記載された(Kumar等、Mol. Cell. Biol., 23, 6631-45 (2003))ようにして導入して、細胞をＩＬ−３の非存在下で選択した。ＢＣＲ−ＡＢＬタンパク質の発現を、下記のように、ウエスタンブロット及びキナーゼアッセイにより測定した。
【０１４３】
Ｃ．Ｔ３１５Ｉ細胞のイン・ビボでの成長の分析
雌の無胸腺ヌードマウス(ｎｅｒ／ｎｅｒ)に、１×１０6の変異型ＢＣＲ−ＡＢＬT315Iを発現する３２Ｄｃｌ３細胞を尾静脈から静脈注射した。治療(投薬群ごとに１０匹のマウスよりなる３群)を、細胞注射の２４時間後に、塩溶液(ビヒクル)、化合物１(１００ｍｇ／ｋｇ)又はイマチニブ(１００ｍｇ／ｋｇ)の日々の腹腔内注射によって開始した。イマチニブ注射を、毒性のために、１０日後に停止した。
【０１４４】
(ｉ)イマチニブ及び化合物１の毒性
試験動物の体重を、２日ごとに測定した。この体重データを、図２に示してある。化合物１で治療したマウスは、毒性の徴候例えば体重減少、もつれた毛、嗜眠又は異常な糞を示さなかった。定常的に、１０日にわたるイマチニブの投与は、２０％を超える体重の減少から判断して重い毒性を生じ、これは、薬物投与の停止を生じた。
【０１４５】
(ii) Ｔ３２５Ｉ細胞のイン・ビボでの成長の分析
治療したマウスにおける血液塗抹標本作成を、治療開始後７日及び１４日に、行なった。各マウスからの一滴の血液を、スライド硝子上に塗って、風乾し且つ改変Wrightステイン(Sigma)でしみを付けた。血液中のＴ３１５Ｉ細胞は、それらのブルー染色及びサイズの差異のために容易に見ることができた。１０フィールド当たりのＴ３１５１の数を、オリンパス製の直立顕微鏡で同密度の赤血球を含む１０視野を４０倍対物レンズを用いて計数することにより測定した。この研究におけるＴ３１５Ｉ細胞のイン・ビボでの成長を図１に示した。化合物１で治療したマウスの血液中のＴ３１５Ｉ細胞の数は、７日目及び１４日目において、ビヒクル及びイマチニブ処理した群において見出された細胞数と比較して有意に減少した。
【０１４６】
実施例２：造血コロニー形成アッセイ
イン・ビボで正常な造血細胞集団に対する化合物１の効果を調べるために、この化合物の正常塩溶液(又は対照としての塩溶液のみ)中の１００ｍｇ／ｋｇの投与量を、ＣＤ−１マウス(１群当たり１０匹)に静脈注射(尾静脈注射)した。これらのマウスに由来する正常骨髄細胞のイン・ビトロでの造血コロニー形成に対する効果を、投与の２４時間後に測定した。２４時間後に骨髄細胞をマウスから抽出して、２×１０5細胞を、系統特異的なコロニー形成に適当なサイトカインを含むメチルセルロース上にプレートした。５〜１４日のインキュベーションの後にコロニーを計数した。骨髄コロニー形成アッセイについてのデータは、図３に示してある。赤血球、骨髄又はリンパ系統のコロニー形成には、化合物１の投与による減少はない。
【０１４７】
実施例３：化合物１の、ＢＣＲ−ＡＢＬを発現する細胞株に対する活性
Ａ．細胞株
Ｋ５６２細胞を、１０％ ＦＢＳ及び１Ｕ／ｍｌ ペニシリン−ストレプトマイシンを補ったＲＰＭＩ(Roswell Park Memorial Institute)培地中に維持した。
【０１４８】
３２Ｄｃｌ３細胞(Rovera等、Oncogene, 1, 29-35 (1987))を、１０％ ＦＢＳ、１Ｕ／ｍＬ ペニシリン−ストレプトマイシン及びＷＥＨＩ−３Ｂ調整培地(ＩＬ−３源として)(Ymer等、Nature, 317, 255-258 (1985))を補ったIscove改変ダルベッコ培地中に維持した。
【０１４９】
Ｂ．イマチニブ又は化合物１による治療における細胞生存力
Ｋ５６２細胞及びマウス３２Ｄｃｌ３．ＢＣＲ−ＡＢＬ細胞(野生型ｐ２１０BCR-ABL癌タンパク質を異所的に発現)を、変化する濃度の化合物１と共に７２時間にわたってインキュベートした。次いで、細胞生存力を、トリパンブルー排除により測定した。生存可能な細胞の、ビヒクルで処理した対照と比較したパーセントを測定した。両細胞株において、化合物１とのインキュベーションは、図４ａ及び４ｂに示したように、１０〜１５ｎＭのＬＤ50での、生存力の急速な喪失を生じた。この細胞生存力アッセイを、イマチニブを用いても実施した。イマチニブのＩＣ50は、１００ｎＭより大きいことが見出された(図４ａ及び４ｂ)。このイマチニブについてのデータは、公表されたデータ(O'Dwyer、同書)と一致する。
【０１５０】
化合物１及びイマチニブの両者は、ＢＣＲ−ＡＢＬ+細胞の増殖を阻止する。化合物１は、ＢＣＲ−ＡＢＬ+細胞株の増殖を、イマチニブについて示されたものより１０倍低い濃度で阻止した。
【０１５１】
実施例５：化合物１の、イマチニブ耐性腫瘍細胞株に対する活性
文献(Shah等、Oncogene, 22, 7389-7395 (2003))に公開されたものに対応する突然変異を、ｂｃｒ−ａｂｌ ｃＤＮＡ中に導入してから、活発に増殖している３２Ｄｃｌ３細胞(Rovera等、Oncogene 1, 29-35 (1987))中に下記の手順に従って導入した。
【０１５２】
イマチニブ耐性と関係する公開されたｂｃｒ−ａｂｌ突然変異(Shah等、Oncogene, 22, 7389-85 (2003))に対応するオリゴヌクレオチドを用いて、これらの変異を完全長のｂｃｒ−ａｂｌ ｃＤＮＡ中に、ＰＣＲベースの位置指定突然変異導入法(Myers等、PCR Technology, Erlich, H.A.編、Stockton Press, London (1989))を用いて導入した。すべての構築物を、配列分析により確認した。野生型及びイマチニブ耐性型のＢＣＲ−ＡＢＬをコードするｐＣＤＮＡ３ベースの発現プラスミドを、活発に増殖している３２Ｄｃｌ３細胞に、以前に記載されたようにしてエレクトロポレーション(Kumar等、Mol. Cell. Biol., 23, 6631-45 (2003))により導入して、細胞をＩＬ−３の非存在下で選択した。これらのＢＣＲ−ＡＢＬタンパク質の発現を、ウエスタンブロット及びキナーゼアッセイにより測定した。
【０１５３】
トランスフェクタントを、ＩＬ−３の非存在下で選択した。各変異型ＢＣＲ−ＡＢＬタンパク質の発現及び活性を、ウエスタンブロット分析及びキナーゼアッセイにより確認した(データは、示してない)。すべての変異体は、イマチニブ耐性を、野生型ｐ２１０BCR-ABL発現細胞と比較した場合、以前に公開された研究(Azam等、Cell, 112, 831-843 (2003))に匹敵するレベルで与えた(データは、示してない)。
【０１５４】
これらのトランスフェクトされた細胞を、次いで、様々な濃度の化合物１又はイマチニブの存在下で培養した。生存可能な細胞の総数を、処理後７２時間で、トリパンブルー排除により測定した。ビヒクルで処理した対照と比較した生存可能細胞のパーセントを測定した。トランスフェクトされた細胞株のすべて(Ｔ３１５Ｉ変異体を発現する細胞を含む)は、化合物１の成長阻害活性に極めて敏感であることが見出された。これらの細胞株の感度(ＧＩ50(５０％の成長阻害を達成する濃度)で表す)を、１６の臨床的に関係するＢＣＲ−ＡＢＬ変異につき、表２に列記した。
【表２】
【０１５５】
ＢＣＲ−ＡＢＬ変異体を発現する４つの選択した細胞株Ｔ３１５Ｉ、Ｅ２５５Ｋ、Ｙ２５３Ｈ及びＧ２５０Ｅの結果を、それぞれ、図５ａ、５ｂ、５ｃ及び５ｄに示した。
【０１５６】
実施例６：化合物２((Ｅ)-２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)-２−メトキシフェニルアミノ)酢酸)の、イマチニブ耐性腫瘍細胞株に対する活性
表２に列記した細胞株を、２５０ｎＭ 化合物２又はイマチニブの存在下で培養した。その結果を、図６に示した。これらの細胞株のすべては、化合物２の成長阻害活性に敏感であった。
【０１５７】
実施例７：慢性期のイマチニブ耐性ＣＭＬの治療
慢性骨髄性白血病と診断されたある成人の患者は、イマチニブ耐性であることが見出されている。白血病細胞により発現されるｂｃｒ−ａｂｌ遺伝子の配列決定は、そのｂｃｒ−ａｂｌキナーゼドメインにおける突然変異の存在を確認する。この患者の病気は、慢性期にある(血液又は骨髄試料において、１０％未満の芽細胞、又は合わせて２０％の芽細胞及び前骨髄細胞)。この患者を、次の投与養生法を用いて、化合物１で治療する：２００ミリグラムの化合物１を毎日一回経口投与する。治療を、病気の進行の証拠又は許容しえない毒性のない限り継続する。病気の促進期への進行の出現(骨髄又は血液試料が、１０％より多くの芽細胞を有する(又は合わせて２０％の芽細胞及び前骨髄細胞)が、３０％未満の芽細胞及び前骨髄細胞)の場合には、化合物１の毎日の投与量を、３００ミリグラムに増加させる。もし必要であれば、更なる投与量の増加を(許容しえない毒性が現れなければ)行なって、所望の治療結果を達成する。
【０１５８】
実施例８：芽細胞期のイマチニブ耐性ＣＭＬの治療
慢性骨髄性白血病と診断されたある成人の患者は、イマチニブ耐性であることが見出されている。白血病細胞により発現されるｂｃｒ−ａｂｌ遺伝子の配列決定は、そのｂｃｒ−ａｂｌキナーゼドメインにおける突然変異の存在を確認する。この患者の病気は、芽細胞期にある。芽細胞期(急性期又は芽細胞危期としても知られる)は、３０％より多くの芽細胞及び前骨髄細胞を有する骨髄及び／又は血液試料により特徴付けられる。この患者を、次の投与養生法を用いて、化合物１で治療する：３００ミリグラムの化合物１を毎日一回経口投与する。治療を、病気の進行の証拠又は許容しえない毒性のない限り継続する。病気の促進期への進行の出現の場合には、この投与量を、４００ミリグラムに増加させる(単一投与又は、適宜、２００ミリグラムの投与量を毎日２回)。もし必要であれば、更なる投与量の増加を(許容しえない毒性が現れなければ)行なって、所望の治療結果を達成する。
【０１５９】
実施例９：イマチニブによる初期治療後の、ＣＭＬの治療
慢性骨髄性白血病と診断されたある成人の患者は、先ず、イマチニブで治療される。時間が経つと、この患者の病気は、イマチニブ耐性となる。白血病細胞により発現されるｂｃｒ−ａｂｌ遺伝子の配列決定は、そのｂｃｒ−ａｂｌキナーゼドメイン内の突然変異の存在を確認する。この患者の治療養生法は、次の組合せ養生法に変えられる：イマチニブを、患者が許容する最大投与量まで増加させて、毎日２回、４００ミリグラムの投与量で投与する。３００ミリグラムの投与量の化合物１も、毎日一回、経口投与する。治療を、病気の進行の証拠又は許容しえない毒性のない限り継続する。病気の進行が現れた場合には、化合物１の量を、所望の治療結果を達成するのに必要なだけ増大させる。
【０１６０】
実施例１０：２種類の薬物によるＣＭＬの第一線の治療
ある成人の患者が、新たに、慢性骨髄性白血病と診断される。イマチニブへの感受性は、未知である。第一線の治療として、この患者には、イマチニブと化合物１の組合せを、次の投与養生法を用いて投与する：４００ミリグラムのイマチニブと１００ミリグラムの化合物１を含む一日一回の経口投与を施与する。治療を、病気の進行の証拠又は許容しえない毒性のない限り継続する。病気の進行が現れた場合には、イマチニブの投与量を、６００ミリグラムに増加させて、化合物１の投与量を、２００ミリグラムまで増加させる。もし必要であれば、イマチニブ(最大８００ミリグラム)及び化合物１の一方又は両方において、更なる投与量の増加を(許容しえない毒性が現れなければ)行なう。
【０１６１】
実施例１１：化合物３((Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−メチルプロパン酸ナトリウム塩)の、イマチニブ耐性腫瘍細胞株に対する活性
表３に列記した細胞株を、様々な濃度の化合物３((Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−メチルプロパン酸ナトリウム塩)の存在下で培養した。この野生型は、野生型ｐ２１０BCR-ABL癌タンパク質を異所的に発現した３２Ｄｃｌ３．ＢＣＲ−ＡＢＬ細胞を含む。生存可能な細胞の総数を、処理後７２時間で、トリパンブルー排除により測定した。ビヒクルで処理した対照と比較した生存可能な細胞のパーセントを測定した。これらの細胞株の、ＧＩ50で表した感受性を表３に列記した。これらの細胞株のすべては、化合物３の成長阻害活性に対して感受性であった。
【表３】
【０１６２】
実施例１２：化合物４((Ｅ)−１−(２−(４−ブロモベンジルスルホニル)ビニル)−２，４−ジフルオロベンゼン)の、イマチニブ耐性腫瘍細胞株に対する活性
野生型ｐ２１０BCR-ABL癌タンパク質(３２Ｄｃｌ３．ＢＣＲ−ＡＢＬ)又はＢＣＲ−ＡＢＬ変異Ｇ２５０Ｅ、Ｔ３１５Ｉ又はＭ３１５Ｔを発現する細胞を、変化する濃度の化合物４((Ｅ)−１−(２−(４−ブロモベンジルスルホニル)ビニル)−２，４−ジフルオロベンゼン)と共にインキュベートした。生存可能な細胞の総数を、処理後７２時間で、トリパンブルー排除により測定した。ビヒクルで処理した対照と比較した生存可能細胞のパーセントを、測定した。その結果を、図７に示した。これらの細胞株のすべては、化合物４の成長阻害活性に感受性であった。
【０１６３】
ここで論じたすべての参考文献を、参考として本明細書中に援用する。当業者は、容易に、本発明が、言及した及び内在する目的を達成し及び利益を得るためによく適合されることを認めるであろう。本発明は、そお精神又は本質的属性から離れることなく、他の特定の形態で具体化することができ、従って、この発明の範囲を示すものとしては、前述の明細書よりも、添付の請求の範囲を参照すべきである。
【図面の簡単な説明】
【０１６４】
【図１】化合物１、イマチニブ又は塩溶液の、３２Ｄ／ＢＣＲ−ＡＢＬT315I細胞の、該細胞１×１０6を静脈注射した後の、ヌードマウスにおけるイン・ビボでの成長に対する効果のグラフである。
【図２】化合物１(１００ｍｇ／ｋｇ)、イマチニブ(１００ｍｇ／ｋｇ)又は塩溶液を投与された個々のマウスの体重のプロットの図である。
【図３】塩溶液又は塩溶液に溶解させた化合物１(１００ｍｇ／ｋｇ)を静脈注射(尾静脈注射)したＣＤ−１マウスにおける造血コロニー形成のグラフである。
【図４ａ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＣＭＬ Ｋ５６２細胞のパーセントのプロットの図である。
【図４ｂ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後の生存可能なマウス３２Ｄｃｌ３．ＢＣＲ−ＡＢＬ細胞のパーセントのプロットの図である。
【図５ａ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｔ３１５Ｌ発現細胞のパーセントのプロットの図である。
【図５ｂ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｅ２５５Ｋ発現細胞のパーセントのプロットの図である。
【図５ｃ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｙ２５３Ｈ発現細胞のパーセントのプロットの図である。
【図５ｄ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｇ２５０Ｅ発現細胞のパーセントのプロットの図である。
【図６】ＢＣＲ−ＡＢＬの野生型又はイマチニブ耐性型を発現するようにトランスフェクトされて化合物２で処理された３２Ｄｃｌ３細胞の成長のグラフである。
【図７】野生型ＢＣＲ−ＡＢＬ、又はＢＣＲ−ＡＢＬ変異Ｇ２５０Ｅ、Ｔ３１５Ｉ又はＭ３５１Ｔを発現する生存可能な細胞の、変化する濃度の化合物４との７２時間のインキュベーション後のパーセントのプロットの図である。
【技術分野】
【０００１】
この発明は、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターである治療剤に耐性の増殖性疾患の治療に関係する。
【背景技術】
【０００２】
Ｉ．増殖性疾患の、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターに対する耐性
プロテインキナーゼは、細胞増殖を制御することが示されてきた。プロテインキナーゼの阻害が、増殖性疾患特に癌の新しい治療剤の開発の可能性を有する研究領域として浮かび上がってきている。
【０００３】
プロテインキナーゼの阻害は、治療的には、ＡＴＰ競合性の小型分子の投与によって達成されてきた。かかるインヒビターは、キナーゼの酵素活性をブロックし、それにより、細胞性基質のリン酸化を邪魔する。キナーゼの、ＡＴＰ競合性の小型分子のインヒビター例を、表１に示す。
【０００４】
ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターは、異常を治療するために該インヒビターを投与する当該異常と関係する標的の増殖性細胞において選択圧を与えることが示されている。これらの選択圧は、しばしば、標的細胞における耐性の発生を生じる。耐性は、標的のキナーゼの突然変異から生じうる。
【表１】
【０００５】
Ａ．ＢＣＲ−ＡＢＬと関連する増殖性疾患
１．この疾患の分子的基礎
慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)は、特異的な染色体異常(即ち、フィラデルフィア又はＰｈ1染色体)と関連付けらた最初の疾患である。分子レベルにおいて、最も顕著な特徴は、プロトオンコジーンｃ−ａｂｌの、第９染色体長腕から第２２染色体上のブレークポイントクラスター領域(ｂｃｒ)への転座であり、これは、ｂｃｒ−ａｂｌハイブリッド遺伝子の形成を生じる。ｃ−ａｂｌプロトオンコジーンは、通常、チロシンキナーゼ活性を有するタンパク質(ＡＢＬ)をコードする。ｂｃｒ−ａｂｌハイブリッド遺伝子を有する細胞において、オンコジーンＢＣＲ−ＡＢＬが発現される。ＢＣＲ−ＡＢＬのチロシンキナーゼ活性は、ＡＢＬのチロシンキナーゼ活性と比較して相当増大されている。
【０００６】
フィラデルフィア染色体ＣＭＬ患者において一般的に見出されるこのＢＣＲ−ＡＢＬ融合タンパク質は、約２１０ｋＤａのタンパク質である(ｐ２１０ｗｔ又はｐ２１０ＢＣＲ−ＡＢＬ)。この融合転写物は、典型的には、ＡＢＬエキソン２に結合したＢＣＲエキソン１３又は１４から生じる。(Chissoe等(1995) Genomics 27:67-82)。それ故、ｐ２１０ｗｔのＡＢＬ部分は、ｃ−ＡＢＬ遺伝子のエキソン２〜１１よりなる。特定のＢＣＬ−ＡＢＬアレル中のＡＢＬチロシンキナーゼ部分における位置を同定するための文献中の一般的な慣用法は、エキソン１ａを用いて選択的スプライシングから生じるｃ−ＡＢＬについてのアミノ酸番号付けを利用することである(タンパク質ＩＤ ＡＡＢ６０３９４．１及びＧｅｎＢａｎｋ ＡｃｃｅｓｓｉｏｎナンバーＵ０７５６３)。それ故、この明細書中で引用した突然変異が、この配列がSEQ ID NO:１として与えられたスプライシング変異体のアミノ酸番号付けに対してキーとなることはありそうなことである。SEQ ID NO:１の最初の２６アミノ酸は、ＡＢＬエキソン１ａによりコードされており、ＢＣＲ−ＡＢＬ融合タンパク質２１０ｗｔ中には見出されない。このエキソン２によりコードされるアミノ酸配列は、エキソン１ａを利用する選択的スプライシングから生じる転写物から生じるプロトオンコジーンＡＢＬのＥ２７から開始する。このプロテインキナーゼドメインは、ほぼＩｌｅ２４２〜アミノ酸４９３からのものである。この番号付けシステムにおいて、ホスフェート結合ループ(ｐ−ループ)は、アミノ酸２４９〜２５６であり、触媒領域は、アミノ酸３６１〜３６７であり、そして活性化ループは、アミノ酸３８０〜４０２である。
【０００７】
ＡＴＰ競合性チロシンキナーゼインヒビターイマチニブは、チロシンキナーゼＡＢＬ、ＫＩＴ及び血小板由来成長因子受容体(ＰＤＧＦＲ)の阻害において大いに有効である。イマチニブの治療用投与は、ＣＭＬ及び急性リンパ芽球性リンパ腫(ＡＬＬ)の治療における臨床的有効性を示す。ＢＣＲ−ＡＢＬは又、特発性肺線維症にも関連付けられており、該線維症においては、ＡＢＬのイマチニブによる阻害は、細胞増殖を妨げることが示されている。Daniels等、J.Clin.Invest., 114, 1308-16 (2004)。しかしながら、イマチニブ処理した患者の一部は、イマチニブ耐性細胞が現れた場合に再発する。
【０００８】
(２)ＢＣＲ−ＡＢＬの変異は、イマチニブ耐性を与える
イマチニブ耐性は、キナーゼのイマチニブ結合部位における突然変異から生じうる。突然変異は、いわゆる「ゲートキーパー」残基、Ｔｈｒ３１５及び他のイマチニブと結合中に接触する残基(例えば、Ｐｈｅ３１７及びＰｈｅ３５９)を含むキナーゼの触媒ドメインで起こりうる。他の変異は、ＡＴＰ結合ドメイン(ｐ−ループ)及び活性化ループ(イマチニブ結合に際して起きるコンホメーション変化に関与するキナーゼ構造の領域)において起こる。
【０００９】
ＢＣＲ−ＡＢＬへのイマチニブの結合は、Ｔｈｒ３１５の水酸基への水素結合の形成を含む。３１５位におけるスレオニンのイソロイシンへの置換は、イマチニブ耐性ＣＭＬにおける最も頻繁なＢＣＲ−ＡＢＬ変異の一つである。Ｔｈｒ３１５の一層大きい非水素結合性イソロイシンへの変化は、直接、イマチニブの結合を邪魔する。Ｔｈｒ３１５は、イマチニブの結合に必要であるが、ＡＴＰのＢＣＲ−ＡＢＬへの結合には必要とされない。従って、その触媒活性(従って、ＢＣＲ−ＡＢＬ癌タンパク質の腫瘍促進機能)は、Ｔ３１５Ｉ変異体において保存されている。
【００１０】
イマチニブ結合は又、キナーゼのｐ−ループの変異によっても影響される。再発したＣＭＬ及びＰｈ＋ＡＬＬの患者におけるＢＣＲ−ＡＢＬ配列分析は、Ｔｙｒ２５３及びＧｌｕ２５５におけるｐ−ループ変異を検出した。これらの位置におけるアミノ酸置換は、イマチニブ結合のためのゆがんだｐ−ループコンホメーションを邪魔しうる。これは、観察されたイン・ビボでの耐性及びＢＣＲ−ＡＢＬｐ−ループ変異例えばＹ２５３及びＥ２５５Ｋにより影響された患者の特に悪い予後と一致する(Branford等、Blood, 102, 276-283 (2003))。
【００１１】
イマチニブ結合は、ＢＣＲ−ＡＢＬ活性化ループの不活性な、非リン酸化状態と関係している。この領域における変異例えばＨ３９６Ｒは、活性化ループの閉じたコンホメーションを不安定にし、それによりイマチニブ阻害を妨げる。
【００１２】
イマチニブ結合部位から離れた別の点突然変異のグループは、このキナーゼドメインのカルボキシ末端ローブにある。このグループに入る最も頻繁に検出されるＢＣＲ−ＡＢＬ変異は、Ｍ３５１Ｔである。Ｍ３５１Ｔ変異は、臨床的イマチニブ耐性の全症例の１５〜２０％を説明する(Hochhaus等、Leukemia, 18, 1321-31 (2004))。Ｍ３５１Ｔ変異は、イマチニブとの直接接触における残基の正確な配置に影響を与えるようである(Cowan-Jacob等、Mini Rev. Med. Chem., 4, 285-299 (2004)、及びShah等、Cancer Cell, 2, 117-125 (2002))。
【００１３】
上記のＢＣＲ−ＡＢＬ変異は、イマチニブ耐性と関係した殆どのＢＣＲ−ＡＢＬ変異を説明する。しかしながら、イマチニブの存在下でＢＣＲ−ＡＢＬ駆動される細胞増殖について選択する細胞スクリーニング手順と結合させた完全長ＢＣＲ−ＡＢＬの飽和変異分析は、このキナーゼドメインの外側の突然変異がキナーゼのイマチニブとの相互作用を弱め、それにより標的の耐性に寄与することを明らかにした(Azam等、Cell, 112, 831-843 (2003))。
【００１４】
ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビター例えばイマチニブに対する耐性の発生に、臨床的に関連するＢＣＲ−ＡＢＬ突然変異は、次を含む：Ｇ２５０Ｅ、Ｆ３１７Ｌ、Ｙ２５３Ｆ、Ｈ３９６Ｒ、Ｆ３１１Ｌ、Ｍ３５１Ｔ、Ｔ３１５Ｉ、Ｈ３９６Ｐ、Ｅ２５５Ｖ、Ｙ２５３Ｈ、Ｑ２５２Ｈ、Ｍ２４４Ｖ、Ｌ３８７Ｍ、Ｅ３５５Ｇ、Ｅ２５５Ｋ及びＦ３５９Ｖ。von Bubnoff等、Leukemia 17, 829-838 (2003)；Cowan-Jacob等、Mini Rev. Med. Chem. 4, 285-299 (2004)；Hochhaus等、Leukemia 18, 1321-1331 (2004)；Nardi等、Curr. Opin. Hematol. 11, 35-43 (2004)；Ross等、Br. J. Cancer 90, 12-19；及びDaub等、Nature Reviews Drug Discovery, 3, 1001-10 (2004)。
【００１５】
治療剤ＰＤ１８０９７０、ＢＭＳ−３５４８２５及びＡＰ２３４６４は、幾らかのイマチニブ耐性の増殖性疾患に対する有効性を示した(Daub等、前出)。しかしながら、如何なる薬剤も、ＢＣＲ−ＡＢＬ変異に対する有効性を示さなかった。その上、何れの薬剤も、Ｔ３１５Ｉ変異により与えられる耐性に対しては効果的でない。
【００１６】
Ｂ．血小板由来成長因子(ＰＤＧＦ)と関連する増殖性疾患
血小板由来成長因子レセプター(ＰＤＧＦＲ)は、別のチロシンキナーゼである。ＢＣＲ−ＡＢＬ癌タンパク質を生成する染色体転座と類似の分子機構が、イマチニブ感受性のＰＤＧＦＲ融合タンパク質ＰＤＧＦＲα(SEQ ID NO:２)及びＰＤＧＦＲβ(SEQ ID NO:３)を生じることが示されている。ＰＤＧＦＲα及びＰＤＧＦＲβは、特発性好酸球増加症候群及び慢性骨髄性単球性白血病にそれぞれ関係している(Apperley等、N. Engl. J. Med., 347, 481-487 (2002), 及び Cools等、N. Engl. J. Med, 348, 1201-14 (2003))。好酸球増加症候群において、好酸球の過剰増殖は、しばしば、ＦＩＰ１Ｌ１とＰＤＧＦＲαとの融合から生じるキメラのＦｉｐ１様(ＦＩＰ１Ｌ１)−ＰＤＧＦＲタンパク質の構成的チロシンキナーゼ活性から生じる。
【００１７】
ＰＤＧＦＲ及びプロトオンコジーンｃ−ｋｉｔは、悪性線維性組織球腫(ＭＦＨ)に関連している。イマチニブは、標的キナーゼの一方又は両方を発現する３つのＭＦＨ細胞株(ＴＮＭＹ１、ＧＢＳ−１及びＮａｒａ−Ｆ)における細胞増殖の阻害を示した(Kawamoto等、Anticancer Res., 24, 2675-9 (2004))。
【００１８】
ＰＤＧＦＲβも又、前立腺癌(Hofer等、Neoplasia, 6, 503-12 (2004))、アンドロゲン依存性前立腺癌(Mathew等、J. Clin. Oncol., 22, 3323-9 (2004))及び皮膚線維肉腫(Klener等、Cas. Lek. Cesk., 143, 582-3 (2004))に関連してきた。
【００１９】
ＰＤＧＦＲ及びＢＣＲ−ＡＢＬは又、子宮内膜癌(ＥＥＣ)及び子宮乳頭漿液性癌(ＵＰＳＣ)にも関連している(Slomovitz等、Gyneco. Oncol., 95, 32-36 (2004))。
【００２０】
ＰＤＧＦＲβは又、脊索腫にも関連し、脊索腫の患者のグループにおいて、イマチニブの臨床的投与が、抗癌活性を有することが示されている(Casali等、Cancer, 1, 2086-97 (2004))。
【００２１】
ＰＤＧＦＲα及びＰＤＧＦＲβは、事実上すべてのグリオーマ細胞株において及びヒトの悪性星状細胞腫の新鮮な外科的分離物において発現される。イマチニブは、ヒトのグリア芽細胞腫細胞の成長を、ヌードマウスにおいてイン・ビボで阻害することが示されている(Kilic等、Cancer Res., 60, 5143-50 (2000))。
【００２２】
一の研究において、検出可能なＦＩＰ１Ｌ１−ＰＤＧＦＲ遺伝子融合物を用いてイマチニブ治療された５人の患者の内の５人は、完全な血液学的軽減を経験した(Cools等、同書)。これらの５人の患者の１人は、結局、再発して、イマチニブに耐性であることが見出された。このイマチニブ耐性は、αＰＤＧＦＲαＡＴＰ結合部位における点突然変異に帰せられた。スレオニンのイソロイシンへの置換(Ｔ６７４Ｉ)は、ＢＣＲ−ＡＢＬのゲートキーパー残基のＴ３１５Ｉ変異と同等の位置に起きる。
【００２３】
ＢＣＲ−ＡＢＬのゲートキーパー残基は、ＰＤＧＦＲ、ＫＩＴ、ＥＧＦＲ、ＳＲＣ及びＰ３８を含む幾つかのキナーゼにおけるゲートキーパー残基に対応する。キナーゼ関連疾患の治療における臨床的前進にもかかわらず、臨床的に意味のある変異は、ＰＤＧＦＲ、ＫＩＴ及びＥＧＦＲのキナーゼドメイン中で同定されてきた。これらの突然変異の幾つかは、ＢＣＲ−ＡＢＬに起きる変異に対応しており、ゲートキーパー残基を含んでいる。一層大きい残基例えばイソロイシン又はメチオニンへのゲートキーパー残基の変異は、キナーゼｐ３８、ＳＲＣ及びＥＧＦＲにおいて、それぞれＡＴＰ競合性インヒビターＳＢ２０３５８０、ＰＰ１及びＰＤ１５３０３５に対する耐性を与えることが示されている(Eyers等、Chem. Biol., 5, 321-328 (1998)；Liu等、Chem. Biol., 8, 257-266 (1999)；及びBlencke等、J. Biol. Chem., 278, 15435-40 (2003))。
【００２４】
Ｃ．ＫＩＴと関連する増殖性疾患
胃及び小腸の間充織腫瘍である胃腸間質腫瘍(ＧＩＳＴ)は、ＫＩＴチロシンキナーゼレセプター(SEQ ID NO:４)を発現する。ＧＩＳＴ細胞は、しばしば、ＫＩＴキナーゼドメイン中に、構成的キナーゼへと導く活性化点突然変異を含む。マウスにおける活性化ＫＩＴ変異の発現は、ヒトのＧＩＳＴに類似の腫瘍を引き起こすことが示された(Somsmer等、Proc.Natl.Acad.Sci., 100, 6706-11 (2003))。ｃ−ｋｉｔ発現は又、小脳の高度に侵襲性の未分化神経外胚葉性腫瘍であり、最も一般的な子供の悪性の中枢神経系の腫瘍である髄芽細胞腫にも関連している。１０の髄芽細胞腫の腫瘍試料の研究において、すべては、ｃ−ｋｉｔを発現した(Chilton-Macneill等、Pediatr. Dev. Pathol., 7, 493-8 (2004))。ｃ−ｋｉｔは又、多くの子宮平滑筋肉腫において発現されることも示されている(Raspollini等、Clin. Cancer Res., 10, 3500-3 (2004))。
【００２５】
イマチニブに対する二次的な耐性の形成が、少なくとも一人のＧＩＳＴ患者において報告されている。この耐性は、ＫＩＴキナーゼドメイン中のＴ６７０Ｉ変異により引き起こされ；この変異部位は、ＢＣＲ−ＡＢＬのＴ３１５Ｉゲートキーパー残基に対応する(Demitri等、N. Engl. J. Med, 347, 472-480 (2002))。この変異は、継続されるイマチニブ治療中に進行した固形腫瘍の転移病巣に限られ、他の病巣は依然としてイマチニブ治療に応答した(Tamborini等、Gastroenterology, 127, 294-299 (2004))。
【００２６】
別の二次的ＫＩＴ変異であるＹ８２３Ｄは、イマチニブ治療中に現れて有意のイマチニブ耐性を与えることが示されている。この点突然変異は、ＡＢＬ活性化ループ中の主要リン酸化部位のＴｙｒ３９３に対応する位置にある(Wakai等、Br. J. Cancer, 90, 2059-61 (2004))。野生型ＡＢＬのこの部位のリン酸化は、活性化ループの不活性コンホメーションを不安定にするのに役立つ(Schindler等、Science, 289, 1938-42 (2000))。Ｙ８２３Ｄ ＫＩＴ変異は、ＡＢＬのリン酸化されたＴｙｒ３９３を真似ることができ、それにより類似のイマチニブ耐性を与えることができるということが示唆されている(Daub等、Nature Reviews Drug Discovery, 3, 1001-10 (2004))。
【００２７】
他の変異は、ＫＩＴ活性化ループにおいて特徴付けられてきた。ＫＩＴタンパク質中のキナーゼ活性化Ｄ８１６Ｖ変異は、主なイマチニブ耐性を与え、ヒトの肥満細胞症における病気の原因として同定されてきた(Ma等、Blood, 99, 2059-61 (2002))。
【００２８】
Ｄ．ＥＧＦＲと関連する増殖性疾患
上皮成長因子レセプター(ＥＧＦＲ、SEQ ID NO:５)は、他のチロシンキナーゼである。ゲフィチニブ(ＥＧＦＲインヒビター)は、確立された化学療法養生法に応答しない進行した非小細胞肺癌(ＮＳＣＬＣ)の治療につき承認されている(Muhsin等、Nature Rev. Drug Discov., 2, 515-516 (2003)及びCohen等、Clin. Cancer Res., 10, 1212-18 (2004))。イマチニブ不従順Ｔ３１５Ｉ ＢＣＲ−ＡＢＬ変異体へと導くＣからＴへの単一ヌクレオチドの変異は又、対応するゲートキーパー残基Ｔｈｒ７６６をメチオニン残基で置き換えること(Ｔ７６６Ｍ)によりゲフィニチブに対してＥＧＦＲを劇的に不安定化させる(Blenke等、Chem. Biol., 11, 691-791 (2004)及びBlenke等、J. Biol. Chem, 278, 15435-40 (2003))。
【００２９】
ＩＩ．イマチニブ耐性を克服するための従来の試み
ピリド[２，３−ｄ]ピリミジン例えばＰＤ１８０９７０(表１)は、ＢＣＲ−ＡＢＬ活性化ループ変異体例えばＨ３９６Ｐの癌促進活性を抑制することが示されている(La Posee等、Cancer Res., 62, 7149-53 (2002)及びvon Bubnoff等、Cancer Res., 9, 1267-73 (2003))。これらの化合物は又、臨床的に一般的なＴｙｒ２５３又はＧｌｕ２５５と関係するｐ−ループ変異を含むＢＣＲ−ＡＢＬをも阻害する。ＰＤ１８０９７０は又、Ｍ３５１Ｔ変異体(この変異は、イマチニブ耐性ＣＭＬの症例の約１５〜２０%を説明する)を含むＢＣＲ−ＡＢＬを阻害することも示されている(Kantarjian等、Blood, 101, 473-475 (2003))。
【００３０】
ＳＲＣ(記載された最初のプロトオンコジーンタンパク質)は、非レセプターチロシンキナーゼである。ＳＲＣ及びＡＢＬインヒビターのＢＭＳ−３５４８２５及びＡＰ２３４６４(表１)は、イマチニブ耐性と関係するある種の臨床的に一般的な変異を含むＢＣＲ−ＡＢＬの阻害において、ピリド[２，３−ｄ]ピリミジンに類似した活性を示している(Shah等、Science, 305, 399-401 (2004)及びO'Hare等、Blood, 104, 2532-39 (2004))。
【００３１】
ＩＩＩ．α，β−不飽和スルホン、スルホキシド及びスルホンアミド
ある種のα，β−不飽和スルホン、スルホキシド及びスルホンアミド、特に、スチリルベンジルスルホン、スチリルベンジルスルホキシド及びスチリルスルホンアミドは、抗増殖性、放射線防護的及び化学防護的活性を有することが示されている。米国特許第６，５９９，９３２号、６，５７６，６７３号、６，５４８，５５３号、６，５４１，４７５号、６，４８６，２１０号、６，４１４，０３４号、６，３５９，０１３号、６，２０１，１５４号、６，６５６，９７３号及び６，７６２，２０７号を参照されたい。しかしながら、これらのα，β−不飽和スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドの何れも、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターを用いる治療に耐性のキナーゼ依存性の増殖性疾患の治療において活性を有することは報告されていない。
【００３２】
キナーゼ変異により引き起こされる薬物耐性の克服において幾らかの進歩がなされた。しかしながら、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性の増殖性疾患特に癌を治療することができ、かかる耐性の発生を防止することのできる新しい治療法が必要とされている。加えて、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性の増殖性疾患特に癌の発生を防止又は遅延させることのできる新しい治療法が必要とされている。
【００３３】
発明の概要
この発明の一具体例により、個人における、ＡＴＰ競合性のキナーゼインヒビターを用いる治療に耐性の、キナーゼ依存性の増殖性疾患特に癌を治療する方法を提供する。この方法は、かかる治療の必要な個人に、有効量の少なくとも一種の下記式Ｉの化合物を投与することを含む：
【化１】
(式中、Ａｒ1及びＡｒ2は、独立に、置換された及びされてないアリール及び置換された及びされてないヘテロアリールから選択し；
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
ｎは、１又は２であり；
Ｒは、−Ｈ又は−(Ｃ1〜Ｃ8)ヒドロカルビルであり；そして
*は、ＸがＣＨで且つＲが−Ｈ以外の場合には、Ｘの炭素原子上の置換基のコンホメーションが、Ｒ−、Ｓ−又はＲ−とＳ−の任意の混合物であり；又はその塩であることを示し;
但し、ＸがＮである場合には、ｎは２である)。
【００３４】
この発明の他の具体例により、キナーゼ依存性の増殖性疾患を病んでいる個人において、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの投与を含む治療に対する耐性の発生を防ぎ又は遅延させる方法を提供する。この方法は、かかる治療を必要とする個人に、有効量の上記の式Ｉに従う少なくとも一種の化合物を投与することを含む。一具体例によれば、この方法は、更に、有効量の少なくとも一種のＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの投与を含む。
【００３５】
キナーゼ依存性の増殖性疾患の、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターを用いる治療に対する耐性は、キナーゼ依存性の増殖性疾患と関連するキナーゼのタンパク質配列中の突然変異から生じる。
【００３６】
この発明の一具体例によれば、この治療されるキナーゼ依存性の増殖性疾患は、少なくとも一種のＡＴＰ競合性ＢＣＲ−ＡＢＬインヒビターに耐性である。
【００３７】
この発明の一具体例によれば、ＢＣＲ−ＡＢＬのＡＴＰ競合性インヒビターに対する耐性は、ＢＣＲ−ＡＢＬタンパク質のキナーゼドメイン内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変異から生じる。幾つかの具体例によれば、この耐性は、ＢＣＲ−ＡＢＬのｐ−ループ内の少なくとも一つの残基の突然変異から生じる。特定の具体例によれば、この変異は、ＢＣＲ−ＡＢＬのＴｙｒ２５３又はＧｌｕ２５５の変化を含む。他の具体例によれば、この耐性は、ＢＣＲ−ＡＢＬの活性化ループ内の少なくとも一つの残基の変異から生じる。特定の具体例によれば、この変異は、Ｈｉｓ３９６の変化である。
【００３８】
好適具体例によれば、ＡＴＰ競合性ＢＣＲ−ＡＢＬインヒビターは、イマチニブである。
【００３９】
他の具体例によれば、ＢＣＲ−ＡＢＬのＡＴＰ競合性インヒビターに対する耐性は、Ｆ３１７Ｌ、Ｈ３９６Ｒ、Ｍ３５１Ｔ、Ｈ３９６Ｐ、Ｙ２５３Ｈ、Ｍ２４４Ｖ、Ｅ３５５Ｇ、Ｆ３５９Ｖ、Ｇ２５０Ｅ、Ｙ２５３Ｆ、Ｆ３１１Ｌ、Ｔ３１５Ｉ、Ｅ２５５Ｖ、Ｑ２５２Ｈ、Ｌ３８７Ｍ、Ｅ２５５Ｋよりなる群から選択する少なくとも一つの変異を含むＢＣＲ−ＡＢＬタンパク質内の突然変異から生じる。
【００４０】
この発明の幾つかの具体例により、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性のキナーゼ依存性の増殖性疾患は、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性リンパ腫、特発性肺線維症、特発性好酸球増加症候群、慢性骨髄性単球性白血病、悪性線維性組織球腫、前立腺癌、アンドロゲン依存性前立腺癌、皮膚線維肉腫、子宮内膜癌、子宮乳頭漿液性癌、脊索腫、グリオーマ、悪性星状細胞腫、グリア芽細胞腫細胞、胃腸間質腫瘍、髄芽細胞腫、子宮平滑筋肉腫、及び非小細胞肺癌よりなる群から選択する。
【００４１】
この発明の一具体例により、キナーゼ依存性の増殖性疾患は、ＫＩＴの少なくとも一のＡＴＰ競合性インヒビターに対して耐性であり、この耐性は、ＫＩＴタンパク質内の少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる。一具体例により、この変異は、ＫＩＴキナーゼドメイン内にある。
【００４２】
ある具体例により、このＫＩＴタンパク質内の変異は、Ｔｈｒ６７０、Ｔｙｒ８２３又はＡｓｐ８１６の少なくとも一つの変化を含む。他の具体例によれば、このＫＩＴタンパク質内の変異は、Ｔ６７０Ｉ、Ｙ８２３Ｄ及びＤ８１６Ｖよりなる群から選択する少なくとも一つの変異を含む。
【００４３】
この発明の一具体例により、キナーゼ依存性の増殖性疾患は、ＥＧＦＲの少なくとも一つのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性であり、この耐性は、ＥＧＦＲタンパク質内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変異から生じる。一具体例によれば、この変異は、ＥＧＦＲキナーゼドメイン内にある。
【００４４】
ある具体例により、ＥＧＦＲ変異は、Ｔｈｒ７６６の変化を含む。一つのかかる変異は、変異Ｔ７６６Ｍである。
【００４５】
この発明の他の具体例によれば、このキナーゼ依存性の増殖性疾患は、ＰＤＧＦＲαの少なくとも一つのインヒビターに耐性であり、この耐性は、ＰＤＧＦＲαタンパク質内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変異から生じる。一具体例によれば、この変異は、ＰＤＧＦＲαキナーゼドメイン内にある。
【００４６】
ある具体例によれば、このＰＤＧＦＲα変異は、Ｔｈｒ６７４の変化を含む。一つのかかる変異は、Ｔ６７４Ｉの変異である。
【００４７】
この発明の他の具体例によれば、このキナーゼ依存性の増殖性疾患は、ＰＤＧＦＲβの少なくとも一つに耐性であり、その耐性は、ＰＤＧＦＲβタンパク質内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変異から生じる。一具体例により、この変異は、ＰＤＧＦＲαキナーゼドメイン内にある。
【００４８】
ある具体例によれば、このＰＤＧＦＲβ変異は、Ｔｈｒ６８１の変化を含む。一つのかかる変異は、Ｔ６８１Ｉの変異である。
【００４９】
この発明の一具体例により、式Ｉ中の置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ1上の置換基は、独立に、ハロゲン、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ2、−ＮＲ22、−ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｒ3、−ＮＨＳＯ2Ｒ3、−ＮＨ(Ｃ2−Ｃ6)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−ＮＨＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ22、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＯＲ2、−ＯＣ(＝Ｏ)Ｒ3、−ＯＳＯ2Ｒ3、−Ｏ(Ｃ2−Ｃ6)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−ＯＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−Ｐ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2、−ＯＰ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2、−Ｏ(Ｃ2−Ｃ6アルキレン)Ｎ(Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−ＮＨＣ(＝ＮＨ)ＮＨＲ2、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル、−Ｏ(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル；−ＳＯ2ＮＨ2；及び−Ｎ＝ＣＨ−Ｒ7よりなる群から選択することができ；式Ｉ中の置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ2上の置換基は、独立に、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ2、ハロゲン、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、−ＮＲ22、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル；−ＳＯ2ＮＨ2；及び−Ｏ(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキルよりなる群から選択することができる；
(式中、
各Ｒ2は、独立に、−Ｈ及び−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビルよりなる群から選択され；
各Ｒ3は、独立に、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｏ(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、置換された及びされてないアリール、置換された及びされてないヘテロシクリル(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、置換された及びされてないヘテロアリール(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、−(Ｃ2−Ｃ10)へテロアルキル、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル、−ＣＲ2Ｒ4ＮＨＲ5、−ＮＲ22、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレンＮＨ2、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレンＮ((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−(Ｃ1−Ｃ3)ペルフルオロアルキレン−Ｎ((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｎ+((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)3、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｎ+(ＣＨ2ＣＨ2ＯＨ)3、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−ＯＲ2、−(Ｃ1−Ｃ4)アルキレン−ＣＯ2Ｒ2、−(Ｃ1−Ｃ4)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)ハロゲン、ハロ(Ｃ1−Ｃ3)アルキル−、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、及び−(Ｃ1−Ｃ4)ペルフルオロアルキレン−ＣＯ2Ｒ2よりなる群から選択され；
各Ｒ4は、独立に、−Ｈ、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−(ＣＨ2)3−ＮＨ−Ｃ(ＮＨ2)(＝ＮＨ)、−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ2、−ＣＨ2ＣＯ2Ｒ2、−ＣＨ2ＳＨ、−(ＣＨ2)Ｃ(＝Ｏ)−ＮＨ2、−(ＣＨ2)ＣＯ2Ｒ2、−ＣＨ2−(２−イミダゾリル)、−(ＣＨ2)4−ＮＨ2、−(ＣＨ2)2−Ｓ−ＣＨ3、フェニル、−ＣＨ2−フェニル、−ＣＨ2−ＯＨ、−ＣＨ(ＯＨ)−ＣＨ3、−ＣＨ2−(３−インドリル)、及び−ＣＨ2−(４−ヒドロキシフェニル)よりなる群から選択され；
各Ｒ5は、独立に、−Ｈ，−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ7)ヒドロカルビル及び１〜３アミノ酸を含むカルボキシ末端結合したペプチジル残基よりなる群から選択され、該ペプチジル残基の末端アミノ基は、−ＮＨ2、−ＮＨＣ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−ＮＨ(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−Ｎ(Ｃ1−Ｃ6アルキル)2及び−ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｏ(Ｃ1−Ｃ7)ヒドロカルビルよりなる群から選択する官能基として存在し；
各Ｒ6は、独立に、−ＯＲ2、−ＮＲ22、及び１〜３アミノ酸を含むアミノ末端結合したペプチジル残基よりなる群から選択され、該ペプチジル残基の末端カルボキシル基は、−ＣＯ2Ｒ2及び−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ22よりなる群から選択する官能基として存在し；そして
各Ｒ7は、独立に、置換された及びされてないアリール及び置換された及びされてないヘテロアリールよりなる群から選択され；
但し、Ａｒ1及びＡｒ2上の置換基の最大数は、それらの置換基が結合している環内の置換可能な水素原子の数に等しい。
【００５０】
Ｒ3又はＲ7を含む置換されたアリール又はヘテロアリール基上の置換基は、好ましくは、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−(Ｃ1−Ｃ6)アルコキシ、ハロゲン、−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−ＮＨ2、−ＮＨ(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−Ｎ(Ｃ1−Ｃ6)アルキル)2、−ＮＨＣ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−ＮＯ2、−ＣＮ、(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキレン−ＮＨ2、−ＣＯ2Ｈ、ＣＯＮＨ2、Ｃ(＝Ｎ)ＮＨ2、及びヘテロシクリル(Ｃ1−Ｃ6)アルキルよりなる群から選択され；ここに、ヘテロシクリル(Ｃ1−Ｃ6)アルキルを含むヘテロシクリル環は、適宜、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル又はＣ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキルにより置換されている。
【００５１】
Ｒ3を含む置換されたヘテロシクリル基上の置換基は、好ましくは、独立に、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−(Ｃ1−Ｃ6)アルコキシ、ハロゲン、−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−ＣＯ2Ｈ、及びＣＯＮＨ2よりなる群から選択する。
【００５２】
この発明の幾つかの好適具体例によれば、Ａｒ1は、フェニルである。この発明の他の好適具体例によれば、Ａｒ2は、フェニルである。この発明の更に別の好適具体例によれば、Ａｒ1及びＡｒ2の両者は、フェニルである。
【００５３】
好ましくは、Ａｒ1及びＡｒ2の両者がフェニルである場合には、Ａｒ1及びＡｒ2の両者は、少なくとも一置換されている。
【００５４】
この発明の幾つかの具体例によれば、式Ｉの化合物中のＡｒ1及びＡｒ2を含むアリール及びヘテロアリール基は、一、二又は三置換されている。他の具体例によれば、Ａｒ1及びＡｒ2を含むアリール及びヘテロアリール基は、すべての置換可能な位置で置換されている。
【００５５】
Ｒは、好ましくは、−Ｈ又は−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、最も好ましくは−Ｈ又は−(Ｃ1−Ｃ6)アルキルである。
【００５６】
好適具体例によれば、置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ1上の置換基は、独立に、ハロゲン、−ＮＲ22、−ＮＨＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−ＯＲ2、−ＯＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、及び−ＯＰ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2よりなる群から選択され；そして置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ2上の置換基は、独立に、(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、ハロゲン、−ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、及び−ＮＲ22よりなる群から選択される。
【００５７】
一層好適な具体例によれば、置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ1上の置換基は、独立に、ハロゲン、−ＮＨ2、−ＮＨＣＨＲ4Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、−ＯＨ、−ＯＣＨＲ4Ｃ(＝Ｏ) ＯＲ2、及び−ＯＰ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2よりなる群から選択され；そして置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ2上の置換基は、独立に、(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、ハロゲン、−ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、及び−ＮＲ22よりなる群から選択される。
【００５８】
最も好適な具体例によれば、置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ1上の置換基は、独立に、ハロゲン、−ＮＨ2、−ＮＨＣＨ(ＣＨ3)Ｃ(＝Ｏ)ＯＨ、−ＮＨＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)ＯＨ、−ＯＨ、−ＯＣＨ(ＣＨ3)Ｃ(＝Ｏ)ＯＨ、及び−ＯＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)ＯＨよりなる群から選択され；そして置換されたアリール又はヘテロアリールＡｒ2上の置換基は、独立に、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、ハロゲン、−Ｏ(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、及び−ＮＲ22よりなる群から選択される。
【００５９】
式Ｉに従う好適化合物には、例えば、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)酢酸；(ラセミ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｒ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｓ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルフィニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)酢酸；(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルフィニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｅ)−２，４，６−トリメトキシスチリル−Ｎ−(３−カルボキシメチルアミノ−４−メトキシ−フェニル)スルホンアミド；(Ｓ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；(Ｒ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；(ラセミ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−メチルプロパン酸；(Ｅ)−１−(２−(４−ブロモベンジルスルホニル)ビニル)−２，４−ジフルオロベンゼン；及び製薬上許容しうるこれらの塩が含まれる。
【００６０】
この発明のある具体例によれば、式Ｉに従う化合物は、反対のエナンチオマーを実質的に含まない単離された光学異性体を含む。一つの好適な下位具体例により、この単離された光学異性体は、*により示された原子における(Ｒ)−絶対配置を有し、実質的に(Ｓ)−エナンチオマーを含まない。他の好適な下位具体例によれば、この単離された光学異性体は、*により示された原子における(Ｓ)−絶対配置を有し、実質的に(Ｒ)−エナンチオマーを含まない。
【００６１】
この発明は又、式Ｉに従う化合物又は製薬上許容しうるその塩の、(１)個人におけるキナーゼ依存性の増殖性疾患(該疾患は、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性である)を治療し又は(２)キナーゼ依存性の増殖性疾患を病んでいる個人においてＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの投与を含む治療に対する耐性の発生を予防若しくは遅延させる医薬の製造のための利用にも向けられている。
【００６２】
定義
用語「個人」は、ヒト及び非ヒト動物を包含する。
【００６３】
表現「有効量」は、増殖性疾患特に癌を病んでいる患者の治療との関連において、異常に高速度で増殖している細胞の成長を阻止し或はかかる細胞好ましくは癌細胞のアポトーシスを誘導し、増殖性疾患特に癌を病んでいる患者に投与した場合に増殖性細胞に対する治療上有用な選択的細胞傷害性効果を生じる式Ｉの化合物の量を指す。用語「有効量」は、異常に増殖性の細胞の成長を阻止し又はかかる細胞のアポトーシスを誘導する量で、活性な代謝産物に代謝されうる式Ｉの化合物の量を含む。
【００６４】
表現「増殖性疾患」は、身体によって、異型に促進された速度で細胞が作られる疾患を意味する。表現「キナーゼ依存性の増殖性疾患」は、異常に速い細胞増殖が、プロテインキナーゼの発現によって駆動される増殖性疾患を指す。
【００６５】
用語「腫瘍」は、異常な細胞増殖から生じて、生理的機能に役立たない組織の異常な成長を意味する。腫瘍は、良性腫瘍即ち周囲組織を侵襲せず個体の生命を危険に曝さない腫瘍であってよい。腫瘍は、癌性であってよい。癌性腫瘍は、悪性即ち周囲組織を侵襲し且つ／又は転移即ち元の腫瘍の部位から離れた身体の組織に広がる傾向があるものである。
【００６６】
表現「キナーゼインヒビター」は、キナーゼのキナーゼ活性を阻害する作用をする薬剤を指す。
【００６７】
表現「ＡＴＰ競合性のキナーゼインヒビター」は、キナーゼを、そのキナーゼ上のＡＴＰ結合部位とＡＴＰを競合することによって阻害するキナーゼインヒビターを意味する。
【００６８】
用語「アルキル」は、それ自体又は他の置換基の部分として、別途示された場合を除いて、(Ｃx−Ｃy)アルキルなどの表現において示された炭素数を有する直鎖、分枝鎖又は環状鎖の飽和炭化水素基(２以上の基を含む)を意味する。表現(Ｃx−Ｃy)アルキル(式中、ｘ＜ｙ)は、最少でｘ炭素原子、最大でｙ炭素原子を含むアルキル鎖を表している。例には、下記が含まれる：メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、シクロヘキシル及びシクロプロピルメチル。好ましいのは、(Ｃ1−Ｃ3)アルキルであり、特に、エチル、メチル及びイソプロピルである。
【００６９】
用語「シクロアルキル」は、少なくとも一つの環状構造を含むアルキル基を指す。例には、シクロヘキシル、シクロペンチル、ノルボルニル、アダマンチル及びシクロプロピルメチルが含まれる。好ましいのは、(Ｃ3−Ｃ12)シクロアルキルであり、特に、シクロペンチル、ノルボルニル及びアダマンチルである。
【００７０】
用語「アルキレン」は、示された炭素数を有する２価のアルキル基を指す(即ち、(Ｃ1−Ｃ6)は、−ＣＨ2−；−ＣＨ2ＣＨ2−、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−；−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−；及び−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−を意味し、分枝した２価の構造例えば−ＣＨ2ＣＨ(ＣＨ3)ＣＨ2ＣＨ2−及び−ＣＨ(ＣＨ3)ＣＨ(ＣＨ3)−、及び２価の環状構造例えば１，３−シクロペンチルも含む)。
【００７１】
用語「アリーレン」は、それ自体又は他の置換基の部分として、別途示されていない限り、２価のアリール基を意味する。好ましいのは、２価のフェニル基即ち「フェニレン」基、特に、１，４−二価フェニル基である。
【００７２】
用語「ヘテロアリーレン」は、それ自体又は他の置換基の部分として、別途示されていない限り、２価のヘテロアリール基を意味する。好ましいのは、５員又は６員の単環式ヘテロアリーレンである。一層好ましいのは、ピリジン、ピペラジン、ピリミジン、ピラジン、フラン、チオフェン、ピロール、チアゾール、イミダゾール及びオキサゾールよりなる群から選択する二価のヘテロアリール環を含むヘテロアリーレン部分例えば２，５−二価ピロール、チオフェン、フラン、チアゾール、オキサゾール、及びイミダゾールである。
【００７３】
用語「アルコキシ」は、単独で又は他の用語と組み合わせて用いるが、別途示されていない限り、上記のように、酸素原子を介して分子の残りと結合された示された数の炭素原子を有するアルキル基例えばメトキシ、エトキシ、１−プロポキシ、２−プロポキシ(イソプロポキシ)及び一層高分子の同族体及び異性体を意味する。好ましいのは、(Ｃ1−Ｃ6)アルコキシ、特に、エトキシ及びメトキシである。
【００７４】
この発明の化合物中に出現しうるアルキル基及びアルコキシ基における炭素鎖は、環状、直鎖又は分枝していてよいが、直鎖が好ましい。表現「(Ｃ1−Ｃ6)アルキル」は、従って、１、２、３、４、５又は６炭素を含むアルキル基に及ぶ。表現「(Ｃ1−Ｃ6)アルコキシ」は、従って、１、２、３、４、５又は６炭素を含むアルコキシ基に及ぶ。
【００７５】
用語「ヒドロカルビル」は、水素及び炭素原子のみを含む任意の部分を指す。この用語は、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール及びベンジル基を包含する。好ましいのは、(Ｃ1−Ｃ7)ヒドロカルビルである。一層好ましいのは、(Ｃ1−Ｃ6)アルキル及び(Ｃ3−Ｃ12)シクロアルキルである。
【００７６】
用語「ヘテロアルキル」は、それ自体又は他の用語との組合せにおいて、別途示されない限り、示された数の炭素原子及び、Ｏ、Ｎ及びＳよりなる群から選択した１つ又は２つのヘテロ原子よりなる安定な直鎖又は分枝鎖の基を意味し、ここに、窒素及び硫黄原子は、適宜、酸化されていてよく、窒素ヘテロ原子は、適宜、四級化されていてよい。この(これらの)ヘテロ原子は、ヘテロアルキル基の任意の位置(ヘテロアルキル基の残りとそれが結合している断片との間を含む)に位置してよく、ヘテロアルキル基中の最も遠位の炭素原子に結合していてよい。例には、次が含まれる：−Ｏ−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＨ2ＣＨ2−ＯＨ、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＮＨ−ＣＨ3、−ＣＨ2−Ｓ−ＣＨ2−ＣＨ3、及び−ＣＨ2ＣＨ2−Ｓ(＝Ｏ)−ＣＨ3。最大２ヘテロ原子まで連続させることができる、例えば、−ＣＨ2−ＮＨ−ＯＣＨ3、又は−ＣＨ2−ＣＨ2−Ｓ−Ｓ−ＣＨ3。
【００７７】
用語「ハロ」又は「ハロゲン」は、それら自体又は他の置換基の部分として、別途示されない限り、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を意味する。
【００７８】
用語「芳香族の」は、少なくとも一つの芳香族性(４ｎ＋２)の非局在化π(パイ)電子を有する不飽和多環を有する炭素環又はヘテロ環を指す。用語「芳香族の」は、炭素環原子のみを含む環系を包含するだけでなく、少なくとも一つの非炭素原子を環原子として含む系をも包含することを意図している。少なくとも一つの非炭素原子を含む系は、「ヘテロアリール」又は「ヘテロ芳香族」系として知られているものであってよい。用語「芳香族の」は、従って、「アリール」及び「ヘテロアリール」環系を包含するものと認められる。
【００７９】
用語「アリール」は、単独で又は他の用語と組み合わせて用いられるが、別途示されていない限り、少なくとも一つの環(典型的には、１、２又は３環)を含む炭素環式芳香族系を意味し、かかる環は、ビフェニルのように懸垂様式で一緒に結合することができ、又はナフタレンのように融合してよい。例には、フェニル、アントラシル、及びナフチル(置換されていてもされてなくてもよい)が含まれる。前述のアリール部分の一覧は、代表することを意図したものであり、制限するものではない。
【００８０】
用語「ヘテロ環」又は「ヘテロシクリル」又は「ヘテロ環式」は、それ自体又は他の置換基の部分として、別途示されない限り、置換されてない又はされた、安定な、炭素原子及びＮ、Ｏ及びＳよりなる群から選択する少なくとも一つのヘテロ原子よりなる単環式又は多環式のヘテロ環系を意味し、ここに、窒素及び硫黄ヘテロ原子は、適宜、酸化されていてよく、窒素原子は、適宜、四級化されていてよい。このヘテロ環系は、別途示されない限り、安定な構造を与える任意のヘテロ原子又は炭素原子で結合することができる。
【００８１】
ヘテロシクリル基には、単環式及び多環式ヘテロアリール基、及び芳香族でない単環式及び多環式基例えば飽和及び部分飽和のもの並びに単環式及び多環式の部分的に飽和の単環式及び多環式基が含まれる。
【００８２】
用語「ヘテロアリール」又は「ヘテロ芳香族」は、芳香族性を有するヘテロ環を指し、単環式ヘテロアリール基と多環式ヘテロアリール基の両方を包含する。多環式ヘテロアリール基は、少なくとも一つの部分的に飽和した環を含むことができる。
【００８３】
単環式ヘテロアリール基の例には、次のものが含まれる：ピリジル；ピラジニル；ピリミジニル、特に２−及び５−ピリミジル；ピリダジニル；チエニル；フリル；ピロリル、特に２−ピロリル及び１−アルキル−２−ピロリル；イミダゾリル、特に２−イミダゾリル；チアゾリル、特に２−チアゾリル；オキサゾリル、と国２−オキサゾリル；ピラゾリル、特に３−及び５−ピラゾリル、イソチアゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，３，４−トリアゾリル、テトラゾリル、１，２，３−チアジアゾリル１，２，３−オキサジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル；及び１，３，４−オキサジアゾリル。
【００８４】
芳香族でない単環式ヘテロ環の例には、飽和単環式の群例えばアジリジン、オキシラン、チイラン、アゼチジン、オキセタン、チエタン、ピロリジン、ピロリン、イミダゾリン、ピラゾリジン、ジオキソラン、１，４−ジオキサン、１，３−ジオキサン、スルフォラン、テトラヒドロフラン、チオファン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、テトラヒドロピラン、ホモピペラジン、ホモピペリジン、１，３−ジオキセパン、ヘキサメチレンオキシド及びピペリジン；及び部分的に飽和した単環式の群例えば１，２，３，６−テトラヒドロピリジン、１，４−ジヒドロピリジン、２，３−ジヒドロフラン、２，５−ジヒドロフラン、２，３−ジヒドロピラン、１，２−ジヒドロチアゾール、１，２−ジヒドロオキサゾール、１，２−ジヒドロイミダゾール及び４，７−ジヒドロ−１，３−ジオキセピンが含まれる。
【００８５】
多環式ヘテロアリール基の例には、次のものが含まれる：インドリル、特に３−、４−、５−、６−及び７−インドリル、キノリル、イソキノリル、特に１−及び５−イソキノリル、シノリニル、キノクサリニル、特に２−及び５−キノクサリニル、キナゾリニル、フタラジニル、１，８−ナフチリジニル、１，４−ベンゾジオキサニル、クマリン、ベンゾフリル、特に３−、４−、１，５−ナフチリジニル、５−、６−及び７−ベンゾフリル、１，２−ベンズイソキサゾリル、ベンゾチエニル、特に３−、４−、５−、６−及び７−ベンゾチエニル、ベンゾキサゾリル、ベンズチアゾリル、特に２−ベンゾチアゾリル及び５−ベンゾチアゾリル、プリニル、ベンズイミダゾリル、特に２−ベンズイミダゾリル、ベンズトリアゾリル、チオキサンチニル、カルバゾリル、カルボリニル、アクリジニル、ピロリジニル、テトラヒドロキノリル、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリル、ジヒドロクマリニル、２，３−ジヒドロベンゾフリル；２，３−ジヒドロベンゾチエニル、Ｎ−メチル−２−インドリニル；及びインドリニル。
【００８６】
非芳香族多環式ヘテロ環の例には、ピロリジジニル及びキノリジジニルが含まれる。
【００８７】
非芳香族ヘテロ環式部分及びヘテロアリール部分の前述の一覧は、代表であって、制限することを意図したものではない。
【００８８】
好適なヘテロアリール基は、２−、３−及び４−ピリジル；２−及び５−ピリミジニル；３−ピリダジニル；２−及び３−チエニル；２−及び３−フリル；ピロリル；特にＮ−メチルピロール−２−イル；２−イミダゾリル；２−チアゾリル；２−オキサゾリル；ピラゾリル；特に３−及び５−ピラゾリル；イソチアゾリル；１，２，３−トリアゾリル；１，２，４−トリアゾリル；１，３，４−トリアゾリル；テトラゾリル、１，２，３−チアジアゾリル；１，２，３−オキサジアゾリル；１，３，４−チアジアゾリル及び１，３，４−オキサジアゾリル；インドリル、特に２−、３−、４−、５−、６−及び７−インドリル；シノリニル；キノクサリニル、特に２−及び５−キノクサリニル；キナゾリニル、特に２−、５−、６−、７−及び８−キナゾリニル；フタラジニル；１，８−ナフチリジニル；１，５−ナフチリジニル、特に１，５−ナフチリジン−３−イル及び１，５−ナフチリジン−４−イル；１，４−ベンゾジオキサニル；クマリニル；ベンゾフリル、特に２−、３−、５−、６−及び７−ベンゾフリル；１，２−ベンズイソキサゾリル、ベンゾチエニル、特に２−、３−、４−、５−、６−及び７−ベンゾチエニル；ベンゾキサゾリル；ベンズチアゾリル、特に２−ベンゾチアゾリル及び５−ベンゾチアゾリル；プリニル；ベンズイミダゾリル、特に２−ベンズイミダゾリル；ベンズトリアゾリル；チオキサンチニル；カルバゾリル；カルボリニル；及びアクリジニル、特に６−アクリジニルである。
【００８９】
一層好ましいヘテロアリール基は、２，３−及び４−ピリジル；２−及び３−チエニル；２−及び３−フリル；２−ピロリル；２−イミダゾリル；２−チアゾリル；２−オキサゾリル；２−及び３−インドリル；２−及び３−ベンゾフリル；３−(１，２−ベンズイソキサゾリル)；２−及び３−ベンゾチエニル；２−ベンゾキサゾリル；１−及び２−ベンズイミダゾリル、２−、３−及び４−キノリル；及び２−及び５−ベンズチアゾリルである。最も好ましいヘテロアリール基は、２−及び３−インドリル；２−及び３−ピロリル、２−及び３−ベンゾフリル；及び２−及び３−ベンゾチエニルである。
【００９０】
用語「置換された」は、原子又は原子団が、他の基に結合した置換基として水素に置き換わったことを意味する。アリール及びへテロアリール基に関して、用語「置換された」は、任意のレベルの置換即ちモノ−、ジ−、トリ−、又はペンタ−置換(かかる置換が可能な場合)を指す。これらの置換基は、独立に選択されて、置換は、化学的に許容しうる任意の位置であってよい。
【００９１】
α，β−不飽和の(アリール又はヘテロアリール)スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドは、二重結合の存在から生じる異性により特徴付けられる。この異性は、一般に、シス−トランス異性と呼ばれるが、Ｅ及びＺ命名法を用いるさらなる包括的な命名規則がある。これらの化合物は、Cahn-Ingold-Prelogシステム、ＩＵＰＡＣ１９７４推奨、区分Ｅ：立体化学、有機化学命名法、John Wiley & Sons、Inc.、New York、NY、第4版.、1992、p.127-138によって命名される。このシステムの命名法を使用し、二重結合について４個の基が一連の規則に従って優先順位が決められる。続いて、二重結合の同じ側に２個の高順位の基を有する異性体は、Ｚ（ドイツ語の単語“ｚｕｓａｍｍｅｎ”、一緒にという意味）と呼ばれる。２個のより高順位の基が二重結合の反対側にある異性体は、Ｅ（ドイツ語の単語“ｅｎｔｇｅｇｅｎ”、“反対”を意味する）と呼ばれる。従って、Ａが一番低い順位でありＤが一番高い順位として、Ａ＞Ｂ＞Ｃ＞Ｄとして炭素−炭素二重結合上の４個の基を順位付けする場合、異性体はスキーム１中のように命名される。
【化２】
【００９２】
本発明は、Ｅ配置のα，β−不飽和(アリール又はヘテロアリール)スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドを企図する。
【００９３】
式Ｉに従うα，β−不飽和(アリール又はヘテロアリール)スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドの幾つかは、ＸがＣＨで且つＲが−Ｈ以外の場合、Ｘにおけるキラル中心の存在から生じる異性により特徴付けられうる。キラル中心の存在に起因する異性体は、異性体と重ね合わせることができないペアを含み、それらは“光学異性体”と呼ばれる。純粋な化合物の単一の光学異性体は光学的に活性であり、即ち、それらは直線偏光の平面を回転することができる。単一の光学異性体はCahn-Ingold-Prelogシステムに従って指名される。マーチ、応用有機化学、第４版、（１９９２）、ｐ．１０９。一旦４個の基の優先順位が決定されると、分子は最低順位の基が観察者から見て向こう側に配置される。そして、他の基の降順が時計回りに進む場合、分子は（Ｒ）と規定され、他の基の降順が反時計回りに進む場合、分子は（Ｓ）と規定される。スキーム２の例中、Cahn-Ingold-Prelog順位はＡ＞Ｂ＞Ｃ＞Ｄである。最低順位の原子、Ｄは観察者から見て向こう側に配置される。
【化３】
【００９４】
別途示されない限り、絶対配置及びそれらの混合は、式Ｉのα，β−不飽和(アリール又はヘテロアリール)スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドの範囲に含まれる。
【００９５】
表現(Ｒ)又は(Ｓ)−エナンチオマーを「実質的に含まない」は、式Ｉに従う光学的に活性な化合物を参照して用いる場合には、この化合物の(Ｒ)及び(Ｓ)−エナンチオマーが、その組成が８０重量％以上単一のエナンチオマーであるように分離されていることを意味する。好ましくは、その組成は、９０重量％以上単一のエナンチオマーである。一層好ましくは、この組成は、９５重量％以上単一のエナンチオマーである。最も好ましくは、この組成は、９９重量％以上単一のエナンチオマーである。
【００９６】
従って、実質的に(Ｓ)−エナンチオマーを含まない式Ｉに従う化合物の(Ｒ)−エナンチオマーとは、その化合物が、８０重量％以上の(Ｒ)−エナンチオマーを含み、２０重量％以下の(Ｓ)−エナンチオマーを夾雑物として含むことを意味する。
【００９７】
単離された光学異性体は、周知のキラル分離技術によってラセミ性混合物から精製することができる。このような方法の一例によると、式Ｉの構造を有する化合物のラセミ混合物又はそのキラル中間体は、適当なキラルカラム例えばダイセル・キラルパックファミリー（商標）シリーズのメンバーのカラム(ダイセル化学工業株式会社、東京、日本)を使用したＨＰＬＣにより、９９重量％純粋な光学異性体に分離される。このカラムは製造業者の指示書によって操作される。
【００９８】
式Ｉに従う化合物に関して、一つより多いキラル中心が、分子中に存在しうる。２対のエナンチオマーが、２つのキラル中心の存在から生じる。鏡像異性体間の関係のみが、エナンチオマーと呼ばれる。単一のエナンチオマーと他の更なるキラル中心の結果として存在する異性体との間の関係は、「ジアステレオマー」と呼ばれる。ジアステレオマー対は、正常及び逆相クロマトグラフィー、及び結晶化を含む公知の分離技術によって分離することができる。２つのキラル中心を含む式Ｉに従う本発明の化合物は、単離されたジアステレオマー例えば(Ｒ，Ｒ)、(Ｒ，Ｓ)、(Ｓ，Ｒ)及び(Ｓ，Ｓ)；単離されたジアステレオマー対例えば(Ｒ，Ｒ)と(Ｒ，Ｓ)、又は(Ｓ，Ｒ)と(Ｓ，Ｓ)；及び任意の割合でのジアステレオマーの全混合物を包含すると理解される。
【００９９】
ここに開示した化合物の系統名を与えるためにここで採用した命名法は、コンピュータープログラムパッケージ、CHEMDRAW(登録商標)(CambridgeSoft Corporation, マサチューセッツ、02140 Cambridge在)を用いて得ることができる。
【０１００】
図面の説明
図１は、化合物１、イマチニブ又は塩溶液の、３２Ｄ／ＢＣＲ−ＡＢＬT315I細胞の、該細胞１×１０6を静脈注射した後の、ヌードマウスにおけるイン・ビボでの成長に対する効果のグラフである。データは、１０フィールド当たりの３２Ｄ／ＢＣＲ−ＡＢＬT315I細胞の平均数±ＳＥＭ(ｎ＝１０)としてプロットしてある。
図２は、化合物１(１００ｍｇ／ｋｇ)、イマチニブ(１００ｍｇ／ｋｇ)又は塩溶液を投与された個々のマウスの体重のプロットである。これらの３投与グループの各マウスの体重は、毎日測定された。平均体重を、出発体重のパーセントとしてプロットした。
図３は、塩溶液又は塩溶液に溶解させた化合物１(１００ｍｇ／ｋｇ)を静脈注射(尾静脈注射)したＣＤ−１マウスにおける造血コロニー形成のグラフである。
図４(ａ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＣＭＬ Ｋ５６２細胞のパーセントのプロットである。
図４(ｂ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後の生存可能なマウス３２Ｄｃｌ３．ＢＣＲ−ＡＢＬ細胞のパーセントのプロットである。
図５(ａ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｔ３１５Ｌ発現細胞のパーセントのプロットである。
図５(ｂ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｅ２５５Ｋ発現細胞のパーセントのプロットである。
図５(ｃ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｙ２５３Ｈ発現細胞のパーセントのプロットである。
図５(ｄ)は、変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｇ２５０Ｅ発現細胞のパーセントのプロットである。
図６は、ＢＣＲ−ＡＢＬの野生型又はイマチニブ耐性型を発現するようにトランスフェクトされて化合物２で処理された３２Ｄｃｌ３細胞の成長のグラフである。
図７は、野生型ＢＣＲ−ＡＢＬ、又はＢＣＲ−ＡＢＬ変異Ｇ２５０Ｅ、Ｔ３１５Ｉ又はＭ３５１Ｔを発現する生存可能な細胞の、変化する濃度の化合物４との７２時間のインキュベーション後のパーセントのプロットである。
【０１０１】
発明の詳細な説明
本発明によれば、ある種のα，β−不飽和スルホン スルホキシド及びスルホンアミド、又は製薬上許容しうるそれらの塩は、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性のキナーゼ依存性の増殖性疾患における標的細胞の増殖の阻止において有効である。
【０１０２】
これらの化合物は、標的キナーゼにおける突然変異によりＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターによる治療に耐性となった個人における増殖性疾患の治療に用いることができる。例えば、この発明の化合物は、標的キナーゼにおける点突然変異ＢＣＲ−ＡＢＬから生じたイマチニブ耐性のＣＭＬ及びＡＬＬを治療するために投与することができる。この発明の化合物は、キナーゼ変異のために治療に対して無反応性となった他のキナーゼ依存性の増殖性疾患例えばＫＩＴ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＥＧＦＲ、ＳＲＣ及びＰ３８の発現により特徴付けられる増殖性疾患に対して用いることができる。これらのキナーゼにおける突然変異は、イマチニブ及び他のＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの結合を阻止することが示されている。
【０１０３】
キナーゼ発現により駆動されうる増殖性疾患には、例えば、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性リンパ腫、特発性肺線維症、特発性好酸球増加症候群、慢性骨髄性単球性白血病、悪性線維性組織球腫、前立腺癌、アンドロゲン依存性前立腺癌、皮膚線維肉腫、子宮内膜癌、子宮乳頭漿液性癌、脊索腫、グリオーマ、悪性星状細胞腫、グリア芽細胞腫細胞、胃腸間質腫瘍、髄芽細胞腫、子宮平滑筋肉腫、及び非小細胞肺癌が含まれる。
【０１０４】
Ｉ．ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターに耐性の増殖性疾患の同定
イマチニブで治療した慢性骨髄性白血病(ＣＭＬ)におけるＢＣＲ−ＡＢＬキナーゼドメイン内の突然変異は、ＣＭＬにおけるイマチニブ耐性の獲得の主要な機構である。同様に、他のキナーゼをコードする遺伝子のキナーゼドメイン内の突然変異例えばＰＤＧＦＲ、ＫＩＴ、ＥＧＦＲ、ＳＲＣ及びＰ３８は、非変異キナーゼに対して抗増殖活性を有するプロテインキナーゼインヒビターに対する獲得された耐性の主たる機構として関係してきた。
【０１０５】
本発明の方法を用いることによる薬物耐性の症例における介入は、患者の細胞におけるキナーゼ変異の検出後に、特に患者の新生物細胞の検出後に実施することができる。変異は、例えば、標的細胞例えば新生物細胞における患者の関係するキナーゼ遺伝子を配列決定して、その配列を耐性を与える突然変異のデータバンクと比較することにより検出することができる。直接のＤＮＡ配列決定に加えて、当業者に公知の次の方法を利用してキナーゼ変異を検出することもできる：一本鎖コンホメーションの多型(ＳＳＣＰ)；変性勾配ゲル電気泳動(ＤＧＧＥ)；変性高性能液体クロマトグラフィー(ＤＨＰＬＣ)；化学的ミスマッチ開裂(ＣＭＣ)；酵素ミスマッチ開裂(ＥＭＣ)；ヘテロ二本鎖分析；及びＤＮＡマイクロアレイの利用。
【０１０６】
この発明の一具体例によれば、イマチニブで治療した患者において、ＢＣＲ−ＡＢＬｍＲＮＡの定量的ポリメラーゼ連鎖反応(ＲＱ−ＰＣＲ)を利用して、耐性の危険にある患者を検出することができる。ｂｃｒ−ａｂｌ発現の２倍以上の増加を示すイマチニブで治療した患者の相当の部分は、検出可能なＢＣＲ−ＡＢＬ変異を有し、これは、かかるＢＣＲ−ＡＢＬの上昇が、イマチニブを不活性化するＢＣＲ−ＡＢＬキナーゼドメインの突然変異について患者を調べるための主たる指示として役立ちうることを示している(Branford等、Blood, 104, 2926-32 (2004))。ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターでの治療を受けた患者の細胞における、上昇したＢＣＲ−ＡＢＬ発現は、可能な耐性付与ＢＣＲ−ＡＢＬ変異、特にＢＣＲ−ＡＢＬキナーゼドメインにおける変異を同定するための突然変異の分析の必要性を示唆している。
【０１０７】
ＩＩ．化合物の投与
これらの化合物は、経口投与及び非経口投与を含む任意の経路によって投与することができる。非経口投与には、例えば、静脈投与、筋肉内投与、動脈投与、腹腔内投与、鼻内投与、直腸投与、膣内投与、嚢(例えば、膀胱)内投与、皮内投与、局所投与又は皮下投与が含まれる。やはりこの発明の範囲内で企図されるのは、遅れて起きる薬物の全身又は局所的放出を用いる、制御された配合での患者の身体における薬物の点滴である。例えば、循環への又は腫瘍成長の局所部位への制御された放出のために薬物をデポー剤中に局在化させることができる。
【０１０８】
式Ｉの一種以上の化合物は、同時に同じ若しくは異なる経路によって投与することができ、又は治療の異なる時点で投与することができる。
【０１０９】
式Ｉの化合物及びＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの両者を患者に投与する場合には、好適なスケジュール及び投与量は、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターに好適な様式で指示される。その治療のコースは、個人間で異なり、当業者は、このＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの、所定の臨床的状況における、適当な投与量及び投与スケジュールを容易に決定することができる。
【０１１０】
式Ｉの化合物の、増殖性疾患の治療に関する治療的利益を得るための、特定の投与量は、当然、個々の患者の、大きさ、体重、年齢及び性別、増殖性疾患の性質及び段階、増殖性疾患の侵襲性、及び化合物の投与経路を含む特定の事情によって決定される。
【０１１１】
例えば、毎日の、約０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量を利用することができ、一層好ましくは、０．０５〜２５ｍｇ／ｋｇ／日の投薬量を利用することができる。特に好ましいのは、約０．５〜１０．０ｍｇ／ｋｇ／日の、例えば約５．０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量である。この投与量は、多数回の投与例えば２回の２．５ｍｇ／ｋｇの投与で与えることができる。一層多い又は少ない投与量も企図される。
【０１１２】
式Ｉの化合物及びＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの両方を患者に投与する場合には、投与の経路は、これらの２種の薬物について同じであっても異なってもよい。これらの薬物は、同じ日に投与することもできるし異なる日に投与することもできる。一具体例によれば、これらの薬物は、連続する日に投与される。同じ日に薬物を投与することは、同時又は事実上同時の投与(互いに約２４時間の時間枠内での投与)を包含する。
【０１１３】
白血病性の増殖性疾患、特に慢性骨髄性白血病に対して養生法を施与することは、下記を含みうる。
【０１１４】
ｂｃｒ−ａｂｌ遺伝子のキナーゼドメインの突然変異のためにイマチニブ耐性になっている慢性期のＣＭＬ患者に対して、治療は、式Ｉの化合物の、約１．５〜４ｍｇ／ｋｇ／日に及ぶ毎日の経口投与を含む。もし所望の治療結果が、３ヶ月の治療の後に達成されないならば、投与量を、３ヶ月ごとにモニタリングを行なって、約０．５〜１．５ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で増加させる。病気の進行が現れた場合には、投与量を、約１．０〜３．０ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で、所望の治療結果が達成されるまで増加させる。
【０１１５】
加速期又はブラスト期のＣＭＬ患者については、治療は、式Ｉの化合物の、約２．５〜４．５ｍｇ／ｋｇ／日に及ぶ毎日の経口投与を含む。もし所望の治療結果が、３ヶ月の治療の後に達成されないならば、投与量を、３ヶ月ごとにモニタリングを行なって、約０．５〜１．５ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で増加させる。病気の進行が現れた場合には、投与量を、約１．０〜３．０ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で、所望の治療結果が達成されるまで増加させる。
【０１１６】
毎日４００ｍｇのイマチニブでの治療のコース中にイマチニブ耐性となったＣＭＬ患者の治療のためには、イマチニブ投与量を、毎日６００又は８００ｍｇに増大させ、約２．０〜５．０ｍｇ／ｋｇ／日の式Ｉの化合物の経口投与量を加える。もし所望の治療結果が、３ヶ月の治療の後に達成されないならば、式Ｉの化合物の投与量を、３ヶ月ごとにモニタリングを行なって、約０．５〜１．５ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で増加させる。病気の進行が現れた場合には、式Ｉの化合物の投与量を、約１．０〜３．０ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で、所望の治療結果が達成されるまで増加させる。
【０１１７】
ＣＭＬ患者に対する第一ライン治療としては、治療は、イマチニブ及び式Ｉの化合物の組合せを含む。毎日の、４００ミリグラムのイマチニブ及び約１．０〜４．０ｍｇ／ｋｇ／日の式Ｉの化合物の経口投与量を投与する。もし所望の治療結果が、３ヶ月の治療の後に達成されないならば、式Ｉの化合物の投与量を、３ヶ月ごとにモニタリングを行なって、約０．５〜１．５ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で増加させる。病気の進行が現れた場合には、イマチニブの投与量を６００又は８００ミリグラムに増やし、式Ｉの化合物の投与量を、約１．０〜３．０ｍｇ／ｋｇ／日の増加量で、所望の治療結果が達成されるまで増加させる。
【０１１８】
上記の養生法の各々において、治療を、許容しうる毒性を前提に、患者が死亡するか又は他の因子(末期の病気など)が治療の停止を命ずるまで継続する。病状のモニタリング頻度は、当業者によって、必要に応じて調節することができる。
【０１１９】
病状のモニタリングは、当分野では、周知である。白血病性の増殖性疾患特に慢性骨髄性白血病のモニタリングのためには、病気のマーカーには、血球計数、骨髄細胞の細胞遺伝学的監視(例えば、フィラデルフィア陽性の中期のパーセント)及び分子マーカー(例えば、ＲＱ−ＰＣＲにより測定したｂｃｒ−ａｂｌ ｍＲＮＡ転写物の量又は蛍光イン・シトゥーハイブリダイゼーション(ＦＩＳＨ)による分子的再配置)が含まれるが、これらに限られない。
【０１２０】
ＩＩＩ．医薬組成物
式Ｉの化合物は、製薬上許容しうるキャリアーと組合わせた医薬組成物の形態で投与することができる。かかる配合物中の活性成分は、０．１〜９９．９９重量パーセントを含むことができる。「製薬上許容しうるキャリアー」とは、配合物の他の成分と適合性で且つレシピエントに有害でないの任意のキャリアー、希釈剤又は賦形剤を意味する。
【０１２１】
この活性剤は、好ましくは、投与経路及び標準的製薬プラクティスに基いて選択される製薬上許容しうるキャリアーと共に投与される。この活性剤は、製薬の分野における標準的プラクティスに従って投薬用の形態に配合することができる。Alphonso Gennaro 編、Remington's Pharmaceutical Sciences, 第１８版、(1990) Mack Publishing Co., ペンシルベニア、Easton。適当な投薬用形態には、例えば、錠剤、カプセル、溶液、非経口液、トローチ、座薬、又は懸濁液が含まれうる。
【０１２２】
非経口投与のためには、この活性剤を、適当なキャリアー又は希釈剤例えば水、油(特に、植物油)、エタノール、塩溶液、水性デキストロース(グルコース)及び関連糖溶液、グリセロール、又はグリコール例えばプロピレングリコール又はポリエチレングリコールと混合することができる。非経口投与のための溶液は、好ましくは、活性剤の水溶性の塩を含む。安定剤、抗酸化剤、及び防腐剤も又、加えることができる。適当な抗酸化剤には、亜硫酸塩、アスコルビン酸、クエン酸及びその塩、及びナトリウムＥＤＴＡが含まれる。適当な防腐剤には、塩化ベンザルコニウム、メチル又はプロピルパラベン、及びクロロブタノールが含まれる。この非経口投与のための組成物は、水性又は非水性の溶液、分散液、懸濁液又は乳濁液の形態をとることができる。
【０１２３】
経口投与のためには、この活性剤を、錠剤、カプセル、丸薬、粉末、顆粒又は他の適当な経口投薬形態の製造のために、一種以上の固体の不活性成分と合わせることができる。例えば、この活性剤を、少なくとも一種の賦形剤例えば充填剤、湿潤剤、崩壊剤、溶解遅延剤、吸収促進剤、湿潤剤、吸収剤又は潤滑剤と合わせることができる。一つの錠剤の具体例によれば、この活性剤を、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ステアリン酸マグネシウム、マンニトール及び澱粉と合わせてから、慣用の錠剤化方法によって錠剤に成形することができる。
【０１２４】
ＩＶ．式Ｉに従う化合物の塩
式Ｉの化合物は、塩の形態をとりうる。用語「塩」は、この発明の化合物である遊離酸又は遊離塩基の付加塩を包含する。用語「製薬上許容しうる塩」は、医薬適用において有用性を与える範囲内の毒性を有する塩を指す。
【０１２５】
適当な製薬上許容しうる酸付加塩は、無機酸又は有機酸から製造することができる。無機酸の例には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、硫酸及びリン酸が含まれる。適当な有機酸は、脂肪族、脂環式、芳香族、アリール脂肪族、ヘテロ環式、カルボン酸及びスルホン酸クラスの有機酸から選択することができ、その例には、蟻酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、グルクロン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、サリチル酸、４−ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、マンデル酸、パモ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パントテン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、スルファニル酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸、ステアリン酸、アルギン酸、γ−ヒドロキシ酪酸、ガラクタル酸及びガラクツロン酸が含まれる。
【０１２６】
式Ｉの化合物の適当な製薬上許容しうる塩基付加塩には、例えば、アルカリ金属、アルカリ土類金属及び遷移金属塩例えばカルシウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム及び亜鉛の塩を含む金属塩が含まれる。製薬上許容しうる塩基付加塩は又、塩基性アミン例えばＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン(Ｎ−メチルグルカミン)及びプロカインから作られた有機塩も包含する。
【０１２７】
これらの塩のすべては、慣用の手段によって、式Ｉに従う対応する化合物から、例えば、適当な酸又は塩基を式Ｉに従う化合物と反応させることにより製造することができる。
【０１２８】
Ｖ．この発明の実施において有用なα，β−不飽和スルホン、スルホキシド及びスルホンアミドの製造
α，β−不飽和スルホンＤ１(式中、Ａｒ1、Ａｒ2、Ｒ及び*は、式Ｉの化合物について定義した通りである)を、芳香族アルデヒドのベンジルスルホニル酢酸Ｃ１とのクネーベナーゲル縮合によって製造することができる。その手順は、Reddy等、Acta. Chim. Hung. 115:269-71 (1984)；Reddy等、Sulfur Letters 13:83-90 (1991)；Reddy等、Synthesis No. 4, 322-323 (1984)；及びReddy等、Sulfur Letters 7:43-48 (1987)により記載されており、これらの全開示を、参考として本明細書中に援用する。クネーベナーゲル縮合に従う一般的合成を、下記のスキーム３に描いた。
【化４】
【０１２９】
スキーム３で用いた出発ベンジルスルホニル酢酸Ｃ１は、対応するベンジルメルカプト酢酸Ｂの酸化によって製造することができる。この酸化は、硫黄をスルホンに酸化するのに適した任意の酸化条件を用いて達成することができる。適当な試薬には、過酸化水素などの過酸化物、メタ−クロロペルオキシ安息香酸(ＭＣＰＢＡ)などの過酸及びＯＸＯＮＥ(登録商標)(ペルオキソ一硫酸カリウム)などの過硫酸塩が含まれる。この酸化反応は、好ましくは、適当な溶媒の存在下で実施する。適当な溶媒には、例えば、水、酢酸又は非極性溶媒例えばジクロロメタン(ＤＣＭ)が含まれる。
【０１３０】
ベンジルメルカプト酢酸Ｂは、メルカプト酢酸をベンジル化合物Ａ２と反応させるか、又はハロ酢酸をベンジルメルカプタンＡ１と反応させることにより製造することができる。
【０１３１】
スキーム３に描いたように、α，β−不飽和スルホキシドは、芳香族アルデヒドのベンジルスルフィニル酢酸Ｃ２とのクネーベナーゲル縮合によって製造することができる。
【０１３２】
スルホキシドＤ２の製造において、スキーム３において用いられている出発ベンジルスルフィニル酢酸Ｃ２は、対応するベンジルメルカプト酢酸Ｂの酸化によって製造することができる。この酸化は、スルフィドをスルホキシドに酸化するのに適した任意の酸化条件を用いて達成することができる。適当な試薬には、過酸化水素などの過酸化物、メタ−クロロペルオキシ安息香酸(ＭＣＰＢＡ)などの過酸及びＯＸＯＮＥ(登録商標)(ペルオキソ一硫酸カリウム)などの過硫酸塩が含まれる。この反応は、好ましくは、適当な溶媒の存在下で実施する。適当な溶媒には、例えば、水、酢酸又はジクロロメタン(ＤＣＭ)などの非極性溶媒が含まれる。スルホキシドへの酸化は、一般に、対臨界温度例えば約１０〜２５℃で行なわれ、その酸化反応は、スルホンへの過酸化の前に反応を終了するようにモニターされる。
【０１３３】
α，β−不飽和スルホンアミドＧ(式中、Ａｒ1、Ａｒ2及びＲは、式Ｉについて定義した通りである)は、スキーム４に示したように、芳香族アルデヒドのアリールアミノスルホニル酢酸Ｆとのクネーベナーゲル縮合により製造することができる。
【化５】
【０１３４】
α，β−不飽和スルホンアミドＧは、スキーム５に描いたように、別法により、芳香族アミンＥを芳香族スルホニルハリドＨと反応させることによって製造することができる。この芳香族スルホニルハリドＨは、好ましくは、芳香族オレフィンＪを塩化スルフリルと反応させることにより製造する。
【化６】
【０１３５】
式Ｉの化合物の製造は又、次の米国特許(これらの全開示を参考として本明細書中に援用する)の少なくとも一つにも記載されている：第６，５９９，９３２号、６，５７６，６７５号、６，５４８，５５３号、６，５４１，４７５号、６，４８６，２１０号、６，４１４，０３４号、６，３５９，０１３号、６，２０１，１５４号、６，６５６，９７３号及び６，７６２，２０７号。
【０１３６】
この発明の実施を、下記の非制限的実施例により説明する：
【０１３７】
「化合物１」は、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸：
【化７】
である。
【０１３８】
「化合物２」は、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)酢酸：
【化８】
である。
【０１３９】
「化合物３」は、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−メチルプロパン酸：
【化９】
のナトリウム塩である。
【０１４０】
「化合物４」は、(Ｅ)−１−(２−(４−ブロモベンジルスルホニル)ビニル)−２，４−ジフルオロベンゼン：
【化１０】
である。
【実施例】
【０１４１】
実施例１：(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸(化合物１)の、イマチニブ耐性ＢＣＲ−ＡＢＬT315Iを発現する細胞のイン・ビボでの成長に対する効果
Ａ．３２Ｄｃｌ３細胞株
３２Ｄｃｌ３細胞(Rovera等、Oncogene, 1, 29-35 (1987))を、１０％ ＦＢＳ、１Ｕ／ｍＬ ペニシリン−ストレプトマイシン及び１０％ ＷＥＨＩ−３Ｂ調整培地(ＩＬ−３源として)(Ymer等、Nature, 317, 255-258 (1985))を補ったIscove改変ダルベッコ培地中に維持した。
【０１４２】
Ｂ．野生型及びイマチニブ耐性変異型のＢＣＲ−ＡＢＬの生成
イマチニブ耐性と関係する公開されたｂｃｒ−ａｂｌ突然変異(Shah等、Oncogene 22, 7389-85 (2003))に対応するオリゴヌクレオチドを利用して、これらの変異を、完全長のｂｃｒ−ａｂｌ ｃＤＮＡ中に、ＰＣＲベースの位置指定突然変異導入法(Myers等、PCR Technology, Erlich, H.A.編、Stockton Press, London (1989))を用いて導入した。すべての構築物を、配列分析により確認した。野生型及びイマチニブ耐性型のＢＣＲ−ＡＢＬをコードするｐＣＤＮＡ３ベースの発現プラスミドを、活発に増殖している３２Ｄｃｌ３細胞に、エレクトロポレーションによって以前に記載された(Kumar等、Mol. Cell. Biol., 23, 6631-45 (2003))ようにして導入して、細胞をＩＬ−３の非存在下で選択した。ＢＣＲ−ＡＢＬタンパク質の発現を、下記のように、ウエスタンブロット及びキナーゼアッセイにより測定した。
【０１４３】
Ｃ．Ｔ３１５Ｉ細胞のイン・ビボでの成長の分析
雌の無胸腺ヌードマウス(ｎｅｒ／ｎｅｒ)に、１×１０6の変異型ＢＣＲ−ＡＢＬT315Iを発現する３２Ｄｃｌ３細胞を尾静脈から静脈注射した。治療(投薬群ごとに１０匹のマウスよりなる３群)を、細胞注射の２４時間後に、塩溶液(ビヒクル)、化合物１(１００ｍｇ／ｋｇ)又はイマチニブ(１００ｍｇ／ｋｇ)の日々の腹腔内注射によって開始した。イマチニブ注射を、毒性のために、１０日後に停止した。
【０１４４】
(ｉ)イマチニブ及び化合物１の毒性
試験動物の体重を、２日ごとに測定した。この体重データを、図２に示してある。化合物１で治療したマウスは、毒性の徴候例えば体重減少、もつれた毛、嗜眠又は異常な糞を示さなかった。定常的に、１０日にわたるイマチニブの投与は、２０％を超える体重の減少から判断して重い毒性を生じ、これは、薬物投与の停止を生じた。
【０１４５】
(ii) Ｔ３２５Ｉ細胞のイン・ビボでの成長の分析
治療したマウスにおける血液塗抹標本作成を、治療開始後７日及び１４日に、行なった。各マウスからの一滴の血液を、スライド硝子上に塗って、風乾し且つ改変Wrightステイン(Sigma)でしみを付けた。血液中のＴ３１５Ｉ細胞は、それらのブルー染色及びサイズの差異のために容易に見ることができた。１０フィールド当たりのＴ３１５１の数を、オリンパス製の直立顕微鏡で同密度の赤血球を含む１０視野を４０倍対物レンズを用いて計数することにより測定した。この研究におけるＴ３１５Ｉ細胞のイン・ビボでの成長を図１に示した。化合物１で治療したマウスの血液中のＴ３１５Ｉ細胞の数は、７日目及び１４日目において、ビヒクル及びイマチニブ処理した群において見出された細胞数と比較して有意に減少した。
【０１４６】
実施例２：造血コロニー形成アッセイ
イン・ビボで正常な造血細胞集団に対する化合物１の効果を調べるために、この化合物の正常塩溶液(又は対照としての塩溶液のみ)中の１００ｍｇ／ｋｇの投与量を、ＣＤ−１マウス(１群当たり１０匹)に静脈注射(尾静脈注射)した。これらのマウスに由来する正常骨髄細胞のイン・ビトロでの造血コロニー形成に対する効果を、投与の２４時間後に測定した。２４時間後に骨髄細胞をマウスから抽出して、２×１０5細胞を、系統特異的なコロニー形成に適当なサイトカインを含むメチルセルロース上にプレートした。５〜１４日のインキュベーションの後にコロニーを計数した。骨髄コロニー形成アッセイについてのデータは、図３に示してある。赤血球、骨髄又はリンパ系統のコロニー形成には、化合物１の投与による減少はない。
【０１４７】
実施例３：化合物１の、ＢＣＲ−ＡＢＬを発現する細胞株に対する活性
Ａ．細胞株
Ｋ５６２細胞を、１０％ ＦＢＳ及び１Ｕ／ｍｌ ペニシリン−ストレプトマイシンを補ったＲＰＭＩ(Roswell Park Memorial Institute)培地中に維持した。
【０１４８】
３２Ｄｃｌ３細胞(Rovera等、Oncogene, 1, 29-35 (1987))を、１０％ ＦＢＳ、１Ｕ／ｍＬ ペニシリン−ストレプトマイシン及びＷＥＨＩ−３Ｂ調整培地(ＩＬ−３源として)(Ymer等、Nature, 317, 255-258 (1985))を補ったIscove改変ダルベッコ培地中に維持した。
【０１４９】
Ｂ．イマチニブ又は化合物１による治療における細胞生存力
Ｋ５６２細胞及びマウス３２Ｄｃｌ３．ＢＣＲ−ＡＢＬ細胞(野生型ｐ２１０BCR-ABL癌タンパク質を異所的に発現)を、変化する濃度の化合物１と共に７２時間にわたってインキュベートした。次いで、細胞生存力を、トリパンブルー排除により測定した。生存可能な細胞の、ビヒクルで処理した対照と比較したパーセントを測定した。両細胞株において、化合物１とのインキュベーションは、図４ａ及び４ｂに示したように、１０〜１５ｎＭのＬＤ50での、生存力の急速な喪失を生じた。この細胞生存力アッセイを、イマチニブを用いても実施した。イマチニブのＩＣ50は、１００ｎＭより大きいことが見出された(図４ａ及び４ｂ)。このイマチニブについてのデータは、公表されたデータ(O'Dwyer、同書)と一致する。
【０１５０】
化合物１及びイマチニブの両者は、ＢＣＲ−ＡＢＬ+細胞の増殖を阻止する。化合物１は、ＢＣＲ−ＡＢＬ+細胞株の増殖を、イマチニブについて示されたものより１０倍低い濃度で阻止した。
【０１５１】
実施例５：化合物１の、イマチニブ耐性腫瘍細胞株に対する活性
文献(Shah等、Oncogene, 22, 7389-7395 (2003))に公開されたものに対応する突然変異を、ｂｃｒ−ａｂｌ ｃＤＮＡ中に導入してから、活発に増殖している３２Ｄｃｌ３細胞(Rovera等、Oncogene 1, 29-35 (1987))中に下記の手順に従って導入した。
【０１５２】
イマチニブ耐性と関係する公開されたｂｃｒ−ａｂｌ突然変異(Shah等、Oncogene, 22, 7389-85 (2003))に対応するオリゴヌクレオチドを用いて、これらの変異を完全長のｂｃｒ−ａｂｌ ｃＤＮＡ中に、ＰＣＲベースの位置指定突然変異導入法(Myers等、PCR Technology, Erlich, H.A.編、Stockton Press, London (1989))を用いて導入した。すべての構築物を、配列分析により確認した。野生型及びイマチニブ耐性型のＢＣＲ−ＡＢＬをコードするｐＣＤＮＡ３ベースの発現プラスミドを、活発に増殖している３２Ｄｃｌ３細胞に、以前に記載されたようにしてエレクトロポレーション(Kumar等、Mol. Cell. Biol., 23, 6631-45 (2003))により導入して、細胞をＩＬ−３の非存在下で選択した。これらのＢＣＲ−ＡＢＬタンパク質の発現を、ウエスタンブロット及びキナーゼアッセイにより測定した。
【０１５３】
トランスフェクタントを、ＩＬ−３の非存在下で選択した。各変異型ＢＣＲ−ＡＢＬタンパク質の発現及び活性を、ウエスタンブロット分析及びキナーゼアッセイにより確認した(データは、示してない)。すべての変異体は、イマチニブ耐性を、野生型ｐ２１０BCR-ABL発現細胞と比較した場合、以前に公開された研究(Azam等、Cell, 112, 831-843 (2003))に匹敵するレベルで与えた(データは、示してない)。
【０１５４】
これらのトランスフェクトされた細胞を、次いで、様々な濃度の化合物１又はイマチニブの存在下で培養した。生存可能な細胞の総数を、処理後７２時間で、トリパンブルー排除により測定した。ビヒクルで処理した対照と比較した生存可能細胞のパーセントを測定した。トランスフェクトされた細胞株のすべて(Ｔ３１５Ｉ変異体を発現する細胞を含む)は、化合物１の成長阻害活性に極めて敏感であることが見出された。これらの細胞株の感度(ＧＩ50(５０％の成長阻害を達成する濃度)で表す)を、１６の臨床的に関係するＢＣＲ−ＡＢＬ変異につき、表２に列記した。
【表２】
【０１５５】
ＢＣＲ−ＡＢＬ変異体を発現する４つの選択した細胞株Ｔ３１５Ｉ、Ｅ２５５Ｋ、Ｙ２５３Ｈ及びＧ２５０Ｅの結果を、それぞれ、図５ａ、５ｂ、５ｃ及び５ｄに示した。
【０１５６】
実施例６：化合物２((Ｅ)-２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)-２−メトキシフェニルアミノ)酢酸)の、イマチニブ耐性腫瘍細胞株に対する活性
表２に列記した細胞株を、２５０ｎＭ 化合物２又はイマチニブの存在下で培養した。その結果を、図６に示した。これらの細胞株のすべては、化合物２の成長阻害活性に敏感であった。
【０１５７】
実施例７：慢性期のイマチニブ耐性ＣＭＬの治療
慢性骨髄性白血病と診断されたある成人の患者は、イマチニブ耐性であることが見出されている。白血病細胞により発現されるｂｃｒ−ａｂｌ遺伝子の配列決定は、そのｂｃｒ−ａｂｌキナーゼドメインにおける突然変異の存在を確認する。この患者の病気は、慢性期にある(血液又は骨髄試料において、１０％未満の芽細胞、又は合わせて２０％の芽細胞及び前骨髄細胞)。この患者を、次の投与養生法を用いて、化合物１で治療する：２００ミリグラムの化合物１を毎日一回経口投与する。治療を、病気の進行の証拠又は許容しえない毒性のない限り継続する。病気の促進期への進行の出現(骨髄又は血液試料が、１０％より多くの芽細胞を有する(又は合わせて２０％の芽細胞及び前骨髄細胞)が、３０％未満の芽細胞及び前骨髄細胞)の場合には、化合物１の毎日の投与量を、３００ミリグラムに増加させる。もし必要であれば、更なる投与量の増加を(許容しえない毒性が現れなければ)行なって、所望の治療結果を達成する。
【０１５８】
実施例８：芽細胞期のイマチニブ耐性ＣＭＬの治療
慢性骨髄性白血病と診断されたある成人の患者は、イマチニブ耐性であることが見出されている。白血病細胞により発現されるｂｃｒ−ａｂｌ遺伝子の配列決定は、そのｂｃｒ−ａｂｌキナーゼドメインにおける突然変異の存在を確認する。この患者の病気は、芽細胞期にある。芽細胞期(急性期又は芽細胞危期としても知られる)は、３０％より多くの芽細胞及び前骨髄細胞を有する骨髄及び／又は血液試料により特徴付けられる。この患者を、次の投与養生法を用いて、化合物１で治療する：３００ミリグラムの化合物１を毎日一回経口投与する。治療を、病気の進行の証拠又は許容しえない毒性のない限り継続する。病気の促進期への進行の出現の場合には、この投与量を、４００ミリグラムに増加させる(単一投与又は、適宜、２００ミリグラムの投与量を毎日２回)。もし必要であれば、更なる投与量の増加を(許容しえない毒性が現れなければ)行なって、所望の治療結果を達成する。
【０１５９】
実施例９：イマチニブによる初期治療後の、ＣＭＬの治療
慢性骨髄性白血病と診断されたある成人の患者は、先ず、イマチニブで治療される。時間が経つと、この患者の病気は、イマチニブ耐性となる。白血病細胞により発現されるｂｃｒ−ａｂｌ遺伝子の配列決定は、そのｂｃｒ−ａｂｌキナーゼドメイン内の突然変異の存在を確認する。この患者の治療養生法は、次の組合せ養生法に変えられる：イマチニブを、患者が許容する最大投与量まで増加させて、毎日２回、４００ミリグラムの投与量で投与する。３００ミリグラムの投与量の化合物１も、毎日一回、経口投与する。治療を、病気の進行の証拠又は許容しえない毒性のない限り継続する。病気の進行が現れた場合には、化合物１の量を、所望の治療結果を達成するのに必要なだけ増大させる。
【０１６０】
実施例１０：２種類の薬物によるＣＭＬの第一線の治療
ある成人の患者が、新たに、慢性骨髄性白血病と診断される。イマチニブへの感受性は、未知である。第一線の治療として、この患者には、イマチニブと化合物１の組合せを、次の投与養生法を用いて投与する：４００ミリグラムのイマチニブと１００ミリグラムの化合物１を含む一日一回の経口投与を施与する。治療を、病気の進行の証拠又は許容しえない毒性のない限り継続する。病気の進行が現れた場合には、イマチニブの投与量を、６００ミリグラムに増加させて、化合物１の投与量を、２００ミリグラムまで増加させる。もし必要であれば、イマチニブ(最大８００ミリグラム)及び化合物１の一方又は両方において、更なる投与量の増加を(許容しえない毒性が現れなければ)行なう。
【０１６１】
実施例１１：化合物３((Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−メチルプロパン酸ナトリウム塩)の、イマチニブ耐性腫瘍細胞株に対する活性
表３に列記した細胞株を、様々な濃度の化合物３((Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−メチルプロパン酸ナトリウム塩)の存在下で培養した。この野生型は、野生型ｐ２１０BCR-ABL癌タンパク質を異所的に発現した３２Ｄｃｌ３．ＢＣＲ−ＡＢＬ細胞を含む。生存可能な細胞の総数を、処理後７２時間で、トリパンブルー排除により測定した。ビヒクルで処理した対照と比較した生存可能な細胞のパーセントを測定した。これらの細胞株の、ＧＩ50で表した感受性を表３に列記した。これらの細胞株のすべては、化合物３の成長阻害活性に対して感受性であった。
【表３】
【０１６２】
実施例１２：化合物４((Ｅ)−１−(２−(４−ブロモベンジルスルホニル)ビニル)−２，４−ジフルオロベンゼン)の、イマチニブ耐性腫瘍細胞株に対する活性
野生型ｐ２１０BCR-ABL癌タンパク質(３２Ｄｃｌ３．ＢＣＲ−ＡＢＬ)又はＢＣＲ−ＡＢＬ変異Ｇ２５０Ｅ、Ｔ３１５Ｉ又はＭ３１５Ｔを発現する細胞を、変化する濃度の化合物４((Ｅ)−１−(２−(４−ブロモベンジルスルホニル)ビニル)−２，４−ジフルオロベンゼン)と共にインキュベートした。生存可能な細胞の総数を、処理後７２時間で、トリパンブルー排除により測定した。ビヒクルで処理した対照と比較した生存可能細胞のパーセントを、測定した。その結果を、図７に示した。これらの細胞株のすべては、化合物４の成長阻害活性に感受性であった。
【０１６３】
ここで論じたすべての参考文献を、参考として本明細書中に援用する。当業者は、容易に、本発明が、言及した及び内在する目的を達成し及び利益を得るためによく適合されることを認めるであろう。本発明は、そお精神又は本質的属性から離れることなく、他の特定の形態で具体化することができ、従って、この発明の範囲を示すものとしては、前述の明細書よりも、添付の請求の範囲を参照すべきである。
【図面の簡単な説明】
【０１６４】
【図１】化合物１、イマチニブ又は塩溶液の、３２Ｄ／ＢＣＲ−ＡＢＬT315I細胞の、該細胞１×１０6を静脈注射した後の、ヌードマウスにおけるイン・ビボでの成長に対する効果のグラフである。
【図２】化合物１(１００ｍｇ／ｋｇ)、イマチニブ(１００ｍｇ／ｋｇ)又は塩溶液を投与された個々のマウスの体重のプロットの図である。
【図３】塩溶液又は塩溶液に溶解させた化合物１(１００ｍｇ／ｋｇ)を静脈注射(尾静脈注射)したＣＤ−１マウスにおける造血コロニー形成のグラフである。
【図４ａ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＣＭＬ Ｋ５６２細胞のパーセントのプロットの図である。
【図４ｂ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後の生存可能なマウス３２Ｄｃｌ３．ＢＣＲ−ＡＢＬ細胞のパーセントのプロットの図である。
【図５ａ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｔ３１５Ｌ発現細胞のパーセントのプロットの図である。
【図５ｂ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｅ２５５Ｋ発現細胞のパーセントのプロットの図である。
【図５ｃ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｙ２５３Ｈ発現細胞のパーセントのプロットの図である。
【図５ｄ】変化する濃度の化合物１又はイマチニブとの７２時間のインキュベーション後に残っている生存可能なＢＣＲ−ＡＢＬ Ｇ２５０Ｅ発現細胞のパーセントのプロットの図である。
【図６】ＢＣＲ−ＡＢＬの野生型又はイマチニブ耐性型を発現するようにトランスフェクトされて化合物２で処理された３２Ｄｃｌ３細胞の成長のグラフである。
【図７】野生型ＢＣＲ−ＡＢＬ、又はＢＣＲ−ＡＢＬ変異Ｇ２５０Ｅ、Ｔ３１５Ｉ又はＭ３５１Ｔを発現する生存可能な細胞の、変化する濃度の化合物４との７２時間のインキュベーション後のパーセントのプロットの図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
個人における、ＡＴＰ競合性のキナーゼインヒビターを用いる治療に耐性のキナーゼ依存性の増殖性疾患特に癌を治療する方法であって、該方法は、かかる治療の必要な個人に、有効量の少なくとも一種の下記式Ｉの化合物を投与することを含む当該方法：
【化１】
(式中、Ａｒ1及びＡｒ2は、独立に、置換された及びされてないアリール及び置換された及びされてないヘテロアリールから選択し；
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
ｎは、１又は２であり；
Ｒは、−Ｈ又は−(Ｃ1〜Ｃ8)ヒドロカルビルであり；そして
*は、ＸがＣＨで且つＲが−Ｈ以外の場合には、Ｘの炭素原子上の置換基のコンホメーションが、Ｒ−、Ｓ−又はＲ−とＳ−の任意の混合物であり；又は製薬上許容しうるその塩であることを示し;
但し、ＸがＮである場合には、ｎは２である)。
【請求項２】
置換されたアリール及び置換されたヘテロアリールＡｒ1上の置換基を、独立に、ハロゲン、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ2、−ＮＲ22、−ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｒ3、−ＮＨＳＯ2Ｒ3、−ＮＨ(Ｃ2−Ｃ6)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−ＮＨＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ22、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＯＲ2、−ＯＣ(＝Ｏ)Ｒ3、−ＯＳＯ2Ｒ3、−Ｏ(Ｃ2−Ｃ6)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−ＯＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−Ｐ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2、−ＯＰ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2、−Ｏ(Ｃ2−Ｃ6アルキレン)Ｎ(Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−ＮＨＣ(＝ＮＨ)ＮＨＲ2、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル、−Ｏ(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル；−ＳＯ2ＮＨ2；及び−Ｎ＝ＣＨ−Ｒ7よりなる群から選択し；そして
置換されたアリール及び置換されたヘテロアリールＡｒ2上の置換基を、独立に、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ2、ハロゲン、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、−ＮＲ22、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル；−ＳＯ2ＮＨ2；及び−Ｏ(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキルよりなる群から選択する、請求項１に記載の方法
(式中、
各Ｒ2は、独立に、−Ｈ及び−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビルよりなる群から選択され；
各Ｒ3は、独立に、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｏ(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、置換された及びされてないアリール、置換された及びされてないヘテロシクリル(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、置換された及びされてないヘテロアリール(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、−(Ｃ2−Ｃ10)へテロアルキル、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル、−ＣＲ2Ｒ4ＮＨＲ5、−ＮＲ22、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレンＮＨ2、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレンＮ((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−(Ｃ1−Ｃ3)ペルフルオロアルキレン−Ｎ((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｎ+((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)3、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｎ+(ＣＨ2ＣＨ2ＯＨ)3、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−ＯＲ2、−(Ｃ1−Ｃ4)アルキレン−ＣＯ2Ｒ2、−(Ｃ1−Ｃ4)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)ハロゲン、ハロ(Ｃ1−Ｃ3)アルキル−、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、及び−(Ｃ1−Ｃ4)ペルフルオロアルキレン−ＣＯ2Ｒ2よりなる群から選択され；
各Ｒ4は、独立に、−Ｈ、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−(ＣＨ2)3−ＮＨ−Ｃ(ＮＨ2)(＝ＮＨ)、−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ2、−ＣＨ2ＣＯ2Ｒ2、−ＣＨ2ＳＨ、−(ＣＨ2)Ｃ(＝Ｏ)−ＮＨ2、−(ＣＨ2)ＣＯ2Ｒ2、−ＣＨ2−(２−イミダゾリル)、−(ＣＨ2)4−ＮＨ2、−(ＣＨ2)2−Ｓ−ＣＨ3、フェニル、−ＣＨ2−フェニル、−ＣＨ2−ＯＨ、−ＣＨ(ＯＨ)−ＣＨ3、−ＣＨ2−(３−インドリル)、及び−ＣＨ2−(４−ヒドロキシフェニル)よりなる群から選択され；
各Ｒ5は、独立に、−Ｈ，−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ7)ヒドロカルビル及び１〜３アミノ酸を含むカルボキシ末端結合したペプチジル残基よりなる群から選択され、該ペプチジル残基の末端アミノ基は、−ＮＨ2、−ＮＨＣ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−ＮＨ(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−Ｎ(Ｃ1−Ｃ6アルキル)2及び−ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｏ(Ｃ1−Ｃ7)ヒドロカルビルよりなる群から選択する官能基として存在し；
各Ｒ6は、独立に、−ＯＲ2、−ＮＲ22、及び１〜３アミノ酸を含むアミノ末端結合したペプチジル残基よりなる群から選択され、該ペプチジル残基の末端カルボキシル基は、−ＣＯ2Ｒ2及び−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ22よりなる群から選択する官能基として存在し；そして
各Ｒ7は、独立に、置換された及びされてないアリール及び置換された及びされてないヘテロアリールよりなる群から選択され；
但し、Ａｒ1及びＡｒ2上の置換基の最大数は、それらの置換基が結合している環内の置換可能な水素原子の数に等しい)。
【請求項３】
式１に従う化合物を、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)酢酸；(ラセミ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｒ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｓ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルフィニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)酢酸；(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルフィニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｅ)−２，４，６−トリメトキシスチリル−Ｎ−(３−カルボキシメチルアミノ−４−メトキシ−フェニル)スルホンアミド；(Ｓ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；(Ｒ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；(ラセミ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；及び製薬上許容しうるこれらの塩よりなる群から選択する、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
式Ｉに従う化合物を、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−メチルプロパン酸；(Ｅ)−１−(２−(４−ブロモベンジルスルホニル)ビニル)−２，４−ジフルオロベンゼン；及び製薬上許容しうるこれらの塩よりなる群から選択する、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
式Ｉに従う化合物が、反対のエナンチオマーを実質的に含まない単離された光学異性体を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
単離された光学異性体が、*により示された原子における(Ｒ)−絶対配置を有し、実質的に(Ｓ)−エナンチオマーを含まない、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
単離された光学異性体が、*により示された原子における(Ｓ)−絶対配置を有し、実質的に(Ｒ)−エナンチオマーを含まない、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
キナーゼ依存性の増殖性疾患が、ＰＤ１８０９７０、ＢＭＳ−３５４８２５、イマチニブ、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＳＵ１１２４８、ＡＰ２３４６４、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ＰＤ１５３０３５、及びＳＢ２０３５８０よりなる群から選択する少なくとも一つの化合物による治療に耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
増殖性疾患が、ＢＣＲ−ＡＢＬのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
ＡＴＰ競合性ＢＣＲ−ＡＢＬインヒビターに対する耐性が、ＢＣＲ−ＡＢＬの少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ＢＣＲ−ＡＢＬのＡＴＰ競合性インヒビターがイマチニブである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
突然変異が、ＢＣＲ−ＡＢＬ ｐ−ループ内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変化を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
突然変異が、Ｔｙｒ２５３又はＧｌｕ２５５の変化を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
突然変異が、ＢＣＲ−ＡＢＬ活性化ループ内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変化を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
突然変異が、Ｈｉｓ３９６の変化を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
突然変異が、Ｆ３１７Ｌ、Ｈ３９６Ｒ、Ｍ３５１Ｔ、Ｈ３９６Ｐ、Ｙ２５３Ｈ、Ｍ２４４Ｖ、Ｅ３５５Ｇ、Ｆ３５９Ｖ、Ｇ２５０Ｅ、Ｙ２５３Ｆ、Ｆ３１１Ｌ、Ｔ３１５Ｉ、Ｅ２５５Ｖ、Ｑ２５２Ｈ、Ｌ３８７Ｍ、及びＥ２５５Ｋよりなる群から選択する少なくとも一つの変異を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１７】
増殖性疾患を、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性リンパ腫、特発性肺線維症、特発性好酸球増加症候群、慢性骨髄性単球性白血病、悪性線維性組織球腫、前立腺癌、アンドロゲン依存性前立腺癌、皮膚線維肉腫、子宮内膜癌、子宮乳頭漿液性癌、脊索腫、グリオーマ、悪性星状細胞腫、グリア芽細胞腫細胞、胃腸間質腫瘍、髄芽細胞腫、子宮平滑筋肉腫、及び非小細胞肺癌よりなる群から選択する、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
増殖性疾患が、ＫＩＴのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
ＡＴＰ競合性ＫＩＴインヒビターに対する耐性が、ＫＩＴの少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
突然変異を、Ｔ６７０Ｉ、Ｙ８２３Ｄ及びＤ８１６Ｖよりなる群から選択する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
増殖性疾患が、上皮成長因子レセプターのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
ＡＴＰ競合性上皮成長因子レセプターのインヒビターに対する耐性が、上皮成長因子レセプターの少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
突然変異が、突然変異Ｔ７６６Ｍを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
増殖性疾患が、ＰＤＧＦＲαのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
ＰＤＧＦＲαのＡＴＰ競合性インヒビターに対する耐性が、ＰＤＧＦＲαの少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
突然変異が、突然変異Ｔ６７４Ｉを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
増殖性疾患が、ＰＤＧＦＲβのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
ＰＤＧＦＲβのＡＴＰ競合性インヒビターに対する耐性が、ＰＤＧＦＲβの少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
突然変異が、Ｔ６８１Ｉを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
キナーゼ依存性の増殖性疾患を病んでいる個人において、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの投与を含む治療に対する耐性の発生を防ぎ又は遅延させる方法であって、該方法は、かかる治療を必要とする個人に、有効量の式Ｉに従う少なくとも一種の化合物を投与することを含む当該方法：
【化２】
(式中、Ａｒ1及びＡｒ2は、独立に、置換された及びされてないアリール及び置換された及びされてないヘテロアリールから選択し；
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
ｎは、０、１又は２であり；
Ｒは、−Ｈ又は−(Ｃ1〜Ｃ8)ヒドロカルビルであり；そして
*は、ＸがＣＨで且つＲが−Ｈ以外の場合には、Ｘの炭素原子上の置換基のコンホメーションが、Ｒ−、Ｓ−又はＲ−とＳ−の任意の混合物であり；又は製薬上許容しうるその塩であることを示し;
但し、ＸがＮである場合には、ｎは２である)。
【請求項３１】
有効量の少なくとも一種のＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターを投与することを更に含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
キナーゼ依存性の増殖性疾患が、ＰＤ１８０９７０、ＢＭＳ−３５４８２５、イマチニブ、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＳＵ１１２４８、ＡＰ２３４６４、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ＰＤ１５３０３５、及びＳＢ２０３５８０よりなる群から選択する少なくとも一つの化合物による治療に耐性である、請求項３１に記載の方法。
【請求項１】
個人における、ＡＴＰ競合性のキナーゼインヒビターを用いる治療に耐性のキナーゼ依存性の増殖性疾患特に癌を治療する方法であって、該方法は、かかる治療の必要な個人に、有効量の少なくとも一種の下記式Ｉの化合物を投与することを含む当該方法：
【化１】
(式中、Ａｒ1及びＡｒ2は、独立に、置換された及びされてないアリール及び置換された及びされてないヘテロアリールから選択し；
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
ｎは、１又は２であり；
Ｒは、−Ｈ又は−(Ｃ1〜Ｃ8)ヒドロカルビルであり；そして
*は、ＸがＣＨで且つＲが−Ｈ以外の場合には、Ｘの炭素原子上の置換基のコンホメーションが、Ｒ−、Ｓ−又はＲ−とＳ−の任意の混合物であり；又は製薬上許容しうるその塩であることを示し;
但し、ＸがＮである場合には、ｎは２である)。
【請求項２】
置換されたアリール及び置換されたヘテロアリールＡｒ1上の置換基を、独立に、ハロゲン、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ2、−ＮＲ22、−ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｒ3、−ＮＨＳＯ2Ｒ3、−ＮＨ(Ｃ2−Ｃ6)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−ＮＨＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ22、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＯＲ2、−ＯＣ(＝Ｏ)Ｒ3、−ＯＳＯ2Ｒ3、−Ｏ(Ｃ2−Ｃ6)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−ＯＣＲ2Ｒ4Ｃ(＝Ｏ)Ｒ6、−Ｐ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2、−ＯＰ(＝Ｏ)(ＯＲ2)2、−Ｏ(Ｃ2−Ｃ6アルキレン)Ｎ(Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−ＮＨＣ(＝ＮＨ)ＮＨＲ2、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル、−Ｏ(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル；−ＳＯ2ＮＨ2；及び−Ｎ＝ＣＨ−Ｒ7よりなる群から選択し；そして
置換されたアリール及び置換されたヘテロアリールＡｒ2上の置換基を、独立に、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ2、ハロゲン、−ＮＯ2、−ＣＮ、−ＯＲ2、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ2、−ＮＲ22、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル；−ＳＯ2ＮＨ2；及び−Ｏ(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキルよりなる群から選択する、請求項１に記載の方法
(式中、
各Ｒ2は、独立に、−Ｈ及び−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビルよりなる群から選択され；
各Ｒ3は、独立に、−(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、−Ｏ(Ｃ1−Ｃ8)ヒドロカルビル、置換された及びされてないアリール、置換された及びされてないヘテロシクリル(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、置換された及びされてないヘテロアリール(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、−(Ｃ2−Ｃ10)へテロアルキル、−(Ｃ1−Ｃ6)ハロアルキル、−ＣＲ2Ｒ4ＮＨＲ5、−ＮＲ22、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレンＮＨ2、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレンＮ((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−(Ｃ1−Ｃ3)ペルフルオロアルキレン−Ｎ((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)2、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｎ+((Ｃ1−Ｃ3)アルキル)3、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｎ+(ＣＨ2ＣＨ2ＯＨ)3、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−ＯＲ2、−(Ｃ1−Ｃ4)アルキレン−ＣＯ2Ｒ2、−(Ｃ1−Ｃ4)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)ハロゲン、ハロ(Ｃ1−Ｃ3)アルキル−、−(Ｃ1−Ｃ3)アルキレン−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ3)アルキル、及び−(Ｃ1−Ｃ4)ペルフルオロアルキレン−ＣＯ2Ｒ2よりなる群から選択され；
各Ｒ4は、独立に、−Ｈ、−(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−(ＣＨ2)3−ＮＨ−Ｃ(ＮＨ2)(＝ＮＨ)、−ＣＨ2Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ2、−ＣＨ2ＣＯ2Ｒ2、−ＣＨ2ＳＨ、−(ＣＨ2)Ｃ(＝Ｏ)−ＮＨ2、−(ＣＨ2)ＣＯ2Ｒ2、−ＣＨ2−(２−イミダゾリル)、−(ＣＨ2)4−ＮＨ2、−(ＣＨ2)2−Ｓ−ＣＨ3、フェニル、−ＣＨ2−フェニル、−ＣＨ2−ＯＨ、−ＣＨ(ＯＨ)−ＣＨ3、−ＣＨ2−(３−インドリル)、及び−ＣＨ2−(４−ヒドロキシフェニル)よりなる群から選択され；
各Ｒ5は、独立に、−Ｈ，−Ｃ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ7)ヒドロカルビル及び１〜３アミノ酸を含むカルボキシ末端結合したペプチジル残基よりなる群から選択され、該ペプチジル残基の末端アミノ基は、−ＮＨ2、−ＮＨＣ(＝Ｏ)(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−ＮＨ(Ｃ1−Ｃ6)アルキル、−Ｎ(Ｃ1−Ｃ6アルキル)2及び−ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｏ(Ｃ1−Ｃ7)ヒドロカルビルよりなる群から選択する官能基として存在し；
各Ｒ6は、独立に、−ＯＲ2、−ＮＲ22、及び１〜３アミノ酸を含むアミノ末端結合したペプチジル残基よりなる群から選択され、該ペプチジル残基の末端カルボキシル基は、−ＣＯ2Ｒ2及び−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ22よりなる群から選択する官能基として存在し；そして
各Ｒ7は、独立に、置換された及びされてないアリール及び置換された及びされてないヘテロアリールよりなる群から選択され；
但し、Ａｒ1及びＡｒ2上の置換基の最大数は、それらの置換基が結合している環内の置換可能な水素原子の数に等しい)。
【請求項３】
式１に従う化合物を、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)酢酸；(ラセミ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｒ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｓ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルフィニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)酢酸；(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルフィニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)プロパン酸；(Ｅ)−２，４，６−トリメトキシスチリル−Ｎ−(３−カルボキシメチルアミノ−４−メトキシ−フェニル)スルホンアミド；(Ｓ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；(Ｒ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；(ラセミ)−(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−フェニル酢酸；及び製薬上許容しうるこれらの塩よりなる群から選択する、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
式Ｉに従う化合物を、(Ｅ)−２−(５−((２，４，６−トリメトキシスチリルスルホニル)メチル)−２−メトキシフェニルアミノ)−２−メチルプロパン酸；(Ｅ)−１−(２−(４−ブロモベンジルスルホニル)ビニル)−２，４−ジフルオロベンゼン；及び製薬上許容しうるこれらの塩よりなる群から選択する、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
式Ｉに従う化合物が、反対のエナンチオマーを実質的に含まない単離された光学異性体を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
単離された光学異性体が、*により示された原子における(Ｒ)−絶対配置を有し、実質的に(Ｓ)−エナンチオマーを含まない、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
単離された光学異性体が、*により示された原子における(Ｓ)−絶対配置を有し、実質的に(Ｒ)−エナンチオマーを含まない、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
キナーゼ依存性の増殖性疾患が、ＰＤ１８０９７０、ＢＭＳ−３５４８２５、イマチニブ、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＳＵ１１２４８、ＡＰ２３４６４、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ＰＤ１５３０３５、及びＳＢ２０３５８０よりなる群から選択する少なくとも一つの化合物による治療に耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
増殖性疾患が、ＢＣＲ−ＡＢＬのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
ＡＴＰ競合性ＢＣＲ−ＡＢＬインヒビターに対する耐性が、ＢＣＲ−ＡＢＬの少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ＢＣＲ−ＡＢＬのＡＴＰ競合性インヒビターがイマチニブである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
突然変異が、ＢＣＲ−ＡＢＬ ｐ−ループ内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変化を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
突然変異が、Ｔｙｒ２５３又はＧｌｕ２５５の変化を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
突然変異が、ＢＣＲ−ＡＢＬ活性化ループ内の少なくとも一つのアミノ酸残基の変化を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
突然変異が、Ｈｉｓ３９６の変化を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
突然変異が、Ｆ３１７Ｌ、Ｈ３９６Ｒ、Ｍ３５１Ｔ、Ｈ３９６Ｐ、Ｙ２５３Ｈ、Ｍ２４４Ｖ、Ｅ３５５Ｇ、Ｆ３５９Ｖ、Ｇ２５０Ｅ、Ｙ２５３Ｆ、Ｆ３１１Ｌ、Ｔ３１５Ｉ、Ｅ２５５Ｖ、Ｑ２５２Ｈ、Ｌ３８７Ｍ、及びＥ２５５Ｋよりなる群から選択する少なくとも一つの変異を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１７】
増殖性疾患を、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性リンパ腫、特発性肺線維症、特発性好酸球増加症候群、慢性骨髄性単球性白血病、悪性線維性組織球腫、前立腺癌、アンドロゲン依存性前立腺癌、皮膚線維肉腫、子宮内膜癌、子宮乳頭漿液性癌、脊索腫、グリオーマ、悪性星状細胞腫、グリア芽細胞腫細胞、胃腸間質腫瘍、髄芽細胞腫、子宮平滑筋肉腫、及び非小細胞肺癌よりなる群から選択する、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
増殖性疾患が、ＫＩＴのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
ＡＴＰ競合性ＫＩＴインヒビターに対する耐性が、ＫＩＴの少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
突然変異を、Ｔ６７０Ｉ、Ｙ８２３Ｄ及びＤ８１６Ｖよりなる群から選択する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
増殖性疾患が、上皮成長因子レセプターのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
ＡＴＰ競合性上皮成長因子レセプターのインヒビターに対する耐性が、上皮成長因子レセプターの少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
突然変異が、突然変異Ｔ７６６Ｍを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
増殖性疾患が、ＰＤＧＦＲαのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
ＰＤＧＦＲαのＡＴＰ競合性インヒビターに対する耐性が、ＰＤＧＦＲαの少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
突然変異が、突然変異Ｔ６７４Ｉを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
増殖性疾患が、ＰＤＧＦＲβのＡＴＰ競合性インヒビターに耐性である、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
ＰＤＧＦＲβのＡＴＰ競合性インヒビターに対する耐性が、ＰＤＧＦＲβの少なくとも一つのアミノ酸残基の突然変異から生じる、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
突然変異が、Ｔ６８１Ｉを含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
キナーゼ依存性の増殖性疾患を病んでいる個人において、ＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターの投与を含む治療に対する耐性の発生を防ぎ又は遅延させる方法であって、該方法は、かかる治療を必要とする個人に、有効量の式Ｉに従う少なくとも一種の化合物を投与することを含む当該方法：
【化２】
(式中、Ａｒ1及びＡｒ2は、独立に、置換された及びされてないアリール及び置換された及びされてないヘテロアリールから選択し；
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
ｎは、０、１又は２であり；
Ｒは、−Ｈ又は−(Ｃ1〜Ｃ8)ヒドロカルビルであり；そして
*は、ＸがＣＨで且つＲが−Ｈ以外の場合には、Ｘの炭素原子上の置換基のコンホメーションが、Ｒ−、Ｓ−又はＲ−とＳ−の任意の混合物であり；又は製薬上許容しうるその塩であることを示し;
但し、ＸがＮである場合には、ｎは２である)。
【請求項３１】
有効量の少なくとも一種のＡＴＰ競合性キナーゼインヒビターを投与することを更に含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
キナーゼ依存性の増殖性疾患が、ＰＤ１８０９７０、ＢＭＳ−３５４８２５、イマチニブ、ＳＵ５４１６、ＳＵ６６６８、ＳＵ１１２４８、ＡＰ２３４６４、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ＰＤ１５３０３５、及びＳＢ２０３５８０よりなる群から選択する少なくとも一つの化合物による治療に耐性である、請求項３１に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４ａ】
【図４ｂ】
【図５ａ】
【図５ｂ】
【図５ｃ】
【図５ｄ】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４ａ】
【図４ｂ】
【図５ａ】
【図５ｂ】
【図５ｃ】
【図５ｄ】
【図６】
【図７】
【公表番号】特表２００８−５２６８５２（Ｐ２００８−５２６８５２Ａ）
【公表日】平成２０年７月２４日（２００８．７．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５５０４１７（Ｐ２００７−５５０４１７）
【出願日】平成１８年１月４日（２００６．１．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００００５９
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０７４１４９
【国際公開日】平成１８年７月１３日（２００６．７．１３）
【出願人】（５９１１３５１６３）テンプル・ユニバーシティ−オブ・ザ・コモンウェルス・システム・オブ・ハイアー・エデュケイション (11)
【氏名又は名称原語表記】ＴＥＭＰＬＥ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ−ＯＦ ＴＨＥ ＣＯＭＭＯＮＷＥＡＬＴＨ ＳＹＳＴＥＭ ＯＦ ＨＩＧＨＥＲ ＥＤＵＣＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年７月２４日（２００８．７．２４）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年１月４日（２００６．１．４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００６／００００５９
【国際公開番号】ＷＯ２００６／０７４１４９
【国際公開日】平成１８年７月１３日（２００６．７．１３）
【出願人】（５９１１３５１６３）テンプル・ユニバーシティ−オブ・ザ・コモンウェルス・システム・オブ・ハイアー・エデュケイション (11)
【氏名又は名称原語表記】ＴＥＭＰＬＥ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ−ＯＦ ＴＨＥ ＣＯＭＭＯＮＷＥＡＬＴＨ ＳＹＳＴＥＭ ＯＦ ＨＩＧＨＥＲ ＥＤＵＣＡＴＩＯＮ
【Ｆターム（参考）】
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