血清尿酸低減組成物
本発明は、プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有する乳酸菌または酵母、およびこれらの微生物から選ばれる少なくとも１種を含有する組成物、殊に、飲食品または医薬品としての該組成物を提供するものであって、該組成物は、高尿酸血症の予防及び改善に有効である。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
本発明は、プリン体を分解して血清尿酸値の低減を図る作用を奏する新規な乳酸菌および酵母並びにこれらを含有する組成物（飲食品形態および医薬品形態）に関する。
【背景技術】
高尿酸血症は、血液中の尿酸値が正常範囲を越えて病的に高い異常な状態が続く疾患である。該高尿酸血症患者では、結晶化した尿酸が炎症を引き起こして激痛をもたらす痛風を初めとして、腎障害、尿路結石、心血管障害、脳血管障害などの惹起されるおそれが多分にある。また、高尿酸血症は、動脈硬化のリスクファクターの一つとも考えられている。
高尿酸血症は、体内における尿酸合成が亢進することにより、また腎臓や胆嚢から体外への尿酸の排泄が低下することにより起こると考えられている。尿酸は、生体に摂取されたアデノシン、グアノシンなどのプリン体が、体内細胞の新陳代謝、エネルギー消費などによって代謝されて生成する代謝産物（老廃物）である。従って、プリン体が多く含まれる食品を摂取することによって、血清尿酸値は上昇する。
高尿酸血症の治療・予防は、古くから、食事中のプリン体を制限する食事指導によって行われている。しかしながら、全ての動植物細胞はプリンを含んでおり、殆どの食品は、これらの動植物細胞を含むことから、プリン体を含んでいる。それ故、厳密なプリン体の摂取制限は、非常に困難であり、食事から摂取される栄養バランスの保持をも困難とする。また、プリン体の一つであるイノシン酸は旨味成分として知られており、プリン酸摂取制限は該イノシン酸の摂取制限をも意味し、食事の旨味を低下させる。このため、プリン体を制限する食事を長期間持続させることは不可能に近い。
【発明の開示】
本発明の目的は、新しい高尿酸血症の予防・治療法を確立すること、即ち、食事によるプリン体の摂取を制限するのではなくて、プリン体を分解する乳酸菌、酵母などの微生物を経口的に摂取させて、腸管内で食事から摂取されたプリン体を分解し、その体内への吸収を減少させ、かくして、血清尿酸値を低減させる新しい高尿酸血症の予防・治療方法を確立すること、並びにこの方法に有効な飲食品（発酵乳、乳酸菌飲料など）および医薬品を提供することにある。
本発明者は、上記目的を達成するために、まず、多種多数の微生物について、それらのプリン体分解能を検索した。次いで、検索されたプリン体分解能を有する微生物を実験動物に経口摂取させて、該実験動物の血清尿酸値を測定した。その結果、ある種の乳酸菌または酵母が、所望の血清尿酸値低減作用を奏するという新しい事実を見出した。本発明は、この知見を基礎として更に研究を重ねた結果、完成されたものである。
本発明は、下記項１−項９に記載の組成物、項１０−項１３に記載の微生物、項１４−１６に記載の血清尿酸値の低減方法および項１７−１９に記載の組成物などの使用を提供する。
項１．プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有する乳酸菌および酵母からなる群から選ばれる少なくとも１種の微生物を含有する組成物。
項２．血清尿酸低減組成物である項１に記載の組成物。
項３．飲食品形態である請求項１または項２に記載の組成物。
項４．発酵乳、乳酸菌飲料、発酵野菜飲料、発酵果実飲料または発酵豆乳飲料である項３に記載の組成物。
項５．医薬組成物である項１または２に記載の組成物。
項６．微生物が、ラクトバチルス属に属する乳酸菌である項１−５のいずれかに記載の組成物。
項７．乳酸菌が、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）およびラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）からなる群から選択される少なくとも１種である項６に記載の組成物。
項８．微生物が、サッカロマイセス属に属する酵母である項１−５のいずれかに記載の組成物。
項９．酵母が、サッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）である項８に記載の組成物。
項１０．プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有するラクトバチルス属に属する乳酸菌。
項１１．ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）またはラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）である項１０に記載の乳酸菌。
項１２．プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有するサッカロマイセス属に属する酵母。
項１３．サッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）である項１２に記載の酵母。
項１４．血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、項１−９のいずれかに記載の組成物を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
項１５．血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、項１０または項１１に記載の乳酸菌を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
項１６．血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、項１２または項１３に記載の酵母を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
項１７．血清尿酸値の低減のための項１−９のいずれかに記載の組成物の使用。
項１８．請求項１−９のいずれかに記載の組成物の製造のための項１０または項１１に記載の乳酸菌の使用。
項１９．請求項１−９のいずれかに記載の組成物の製造のための項１２または項１３に記載の酵母の使用。
本発明血清尿酸低減組成物の有効成分は、プリン体に対する分解能を有し、これに基づいて血清尿酸値低減作用を有する乳酸菌または酵母であることを必須とする。該乳酸菌または酵母は、後述するスクリーニング法により、天然物から分離・採取することができる。
本明細書において「乳酸菌」とは、乳酸発酵ができる微生物を指す。該微生物中、乳酸菌には、ラクトバチラス属、ラクトコッカス属、ストレプトッコカス属、エンテロコッカス属、ビフィドバクテリウム属、ペディオコッカス属およびリューコノストック属に属する乳酸菌が包含される。また、酵母には、サッカロマイセス属に属する酵母が包含される。
プリン体を分解して血清尿酸値を低減させる作用を有する乳酸菌または酵母の好ましい例としては、ラクトバチルス属、ペディオコッカス属およびリューコノストック属に属する乳酸菌およびサッカロマイセス属に属する酵母を挙げることができる。これらの内でも本発明者らが新たにスクリーニングし且つ寄託したラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）およびサッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）は、特に好ましい。
本明細書においてプリン体とは、プリン骨格を有する物質をいい、これには代表的にはプリンヌクレオチド、プリンヌクレオシドおよびプリン塩基が含まれる。プリンヌクレオチドには、アデニル酸、グアニル酸、イノシン酸などが含まれる。プリンヌクレオシドには、アデノシン、グアノシンおよびイノシンが含まれる。プリン塩基には、アデニン、グアニン、ヒポキサンチンおよびキサンチンが含まれる。また、プリン体には、核酸（ＡおよびＧ）を含むオリゴヌクレオチドおよびポリヌクレオチドも包含される。
以下、本発明に係る乳酸菌または酵母およびそれらを含む本発明血清尿酸低減組成物につき詳述する。
（１）微生物のスクリーニング
（１−１）起源微生物
起源微生物としては、大塚製薬株式会社大津栄養製品研究所で保存しており、ヒト腸内容物、植物性発酵物および動物性食品発酵物から分離された乳酸菌および酵母を利用する。
（１−２）スクリーニング方法
目的とする乳酸菌および酵母のスクリーニングは、（１）プリン体（イノシン、グアノシン、ヒポキサンチン、キサンチン）に対する分解能、および（２）高尿酸モデルラットの血清尿酸値低下作用を指標として実施する。該スクリーニングの各操作などの詳細は、例えば後記する実施例１および２に示すとおりである。
（２）スクリーニングされた微生物
（２−１）Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ ＯＮＲＩＣ ｂ０１８５
（ａ）肉眼的特徴
（ａ−１） ＭＲＳ寒天培地
円形からやや不規則、低凸状隆起、平滑からやや粗造、中央部白色、周縁部白色から無色。
（ａ−２） ＢＬ寒天培地
不規則，低凸状隆起、平滑からやや粗造、中央部黄褐色，周縁部白褐色。
（ｂ） 顕微鏡的特徴
桿菌で運動性を持たない。芽胞は形成しない。
（ｃ） 生育温度
３０〜３７℃で良好に生育する。
（ｄ） 生理学的、生化学的特徴
グラム染色性 ＋
Ｇｌｙｃｅｒｏｌ −
Ｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ ＋
Ｒｉｂｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｘｙｌｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｘｙｌｏｓｅ −
Ａｄｏｎｉｔｏｌ −
β−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｘｙｌｏｓｉｄｅ −
Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｆｒｕｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｅ ±
Ｌ−Ｓｏｒｂｏｓｅ −
Ｒｈａｍｎｏｓｅ −
Ｄｕｌｃｉｔｏｌ −
Ｉｎｏｓｉｔｏｌ −
Ｍａｎｎｉｔｏｌ ±
Ｓｏｒｂｉｔｏｌ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｉｄｅ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ −
Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ−Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ −
Ａｍｙｇｄａｌｉｎ −
Ａｒｂｕｔｉｎ −
Ｅｓｃｕｌｉｎ −
Ｓａｌｉｃｉｎ −
Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ −
Ｍａｌｔｏｓｅ ＋
Ｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ ＋
Ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ ＋
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ ＋
Ｉｎｕｌｉｎ −
Ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ＋
Ｓｔａｒｃｈ −
Ｇｌｙｃｏｇｅｎ −
Ｘｙｌｉｔｏｌ −
β−Ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｅ −
Ｄ−Ｔｕｒａｎｏｓｅ −
Ｄ−Ｌｙｘｏｓｅ −
Ｄ−Ｔａｇａｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｌ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ ＋
２−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
５−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
以上の諸性質から、バージィーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）に照らし、本菌株をＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍに属する菌株と同定し、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ＯＮＲＩＣ ｂ０１８５と命名した。該菌株は、平成１５年４月１５日に、日本国茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６に住所を有する独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９３１２として寄託された。また、このものは平成１６年４月７日に国際寄託に移管されており、その寄託番号はＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４である。
（２−２）Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ ＯＮＲＩＣ ｂ０１９３
（ａ） 肉眼的特徴
（ａ−１） ＭＲＳ寒天培地
円形，円錐、平滑からやや粗造、白色。
（ａ−２） ＢＬ寒天培地
円形，凸状隆起、平滑からやや粗造、褐色。
（ｂ） 顕微鏡的特徴
桿菌で運動性を持たない。芽胞は形成しない。
（ｃ） 生育温度
３０〜３７℃で良好に生育する。
（ｄ） 生理学的、生化学的特徴
グラム染色性 ＋
Ｇｌｙｃｅｒｏｌ −
Ｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｒｉｂｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｘｙｌｏｓｅ ±
Ｌ−Ｘｙｌｏｓｅ −
Ａｄｏｎｉｔｏｌ −
β−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｘｙｌｏｓｉｄｅ −
Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｆｒｕｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｓｏｒｂｏｓｅ −
Ｒｈａｍｎｏｓｅ −
Ｄｕｌｃｉｔｏｌ −
Ｉｎｏｓｉｔｏｌ −
Ｍａｎｎｉｔｏｌ −
Ｓｏｒｂｉｔｏｌ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｉｄｅ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ −
Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ−Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ −
Ａｍｙｇｄａｌｉｎ −
Ａｒｂｕｔｉｎ −
Ｅｓｃｕｌｉｎ −
Ｓａｌｉｃｉｎ −
Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ −
Ｍａｌｔｏｓｅ ＋
Ｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ ＋
Ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ ＋
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ −
Ｉｎｕｌｉｎ −
Ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ＋
Ｓｔａｒｃｈ −
Ｇｌｙｃｏｇｅｎ −
Ｘｙｌｉｔｏｌ −
β−Ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｅ −
Ｄ−Ｔｕｒａｎｏｓｅ −
Ｄ−Ｌｙｘｏｓｅ −
Ｄ−Ｔａｇａｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｌ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
２−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
５−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
以上の諸性質から、バージィーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）に照らし、本菌株をＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍに属する菌株と同定し、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ＯＮＲＩＣ ｂ０１９３と命名した。該菌株は、平成１５年４月１５日に、日本国茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６に住所を有する独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９３１３として寄託された。また、このものは平成１６年４月７日に国際寄託に移管されており、その寄託番号はＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５である。
（２−３）Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ ＯＮＲＩＣ ｂ０１９５
（ａ） 肉眼的特徴
（ａ−１） ＭＲＳ寒天培地
円形、半球形、平滑からやや粗造、白色。
（ａ−２） ＢＬ寒天培地
円形、凸状隆起、平滑からやや粗造、中央部赤褐色、周縁部白褐色。
（ｂ） 顕微鏡的特徴
桿菌で運動性を持たない。芽胞は形成しない。
（ｃ） 生育温度
３０〜３７℃で良好に生育する。
（ｄ） 生理学的、生化学的特徴
グラム染色性 ＋
Ｇｌｙｃｅｒｏｌ −
Ｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｒｉｂｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｘｙｌｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｘｙｌｏｓｅ −
Ａｄｏｎｉｔｏｌ −
β−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｘｙｌｏｓｉｄｅ −
Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｆｒｕｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｓｏｒｂｏｓｅ −
Ｒｈａｍｎｏｓｅ −
Ｄｕｌｃｉｔｏｌ −
Ｉｎｏｓｉｔｏｌ −
Ｍａｎｎｉｔｏｌ −
Ｓｏｒｂｉｔｏｌ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｉｄｅ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ −
Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ−Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ −
Ａｍｙｇｄａｌｉｎ −
Ａｒｂｕｔｉｎ −
Ｅｓｃｕｌｉｎ −
Ｓａｌｉｃｉｎ −
Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ −
Ｍａｌｔｏｓｅ ＋
Ｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ ＋
Ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ ＋
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ −
Ｉｎｕｌｉｎ −
Ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ＋
Ｓｔａｒｃｈ −
Ｇｌｙｃｏｇｅｎ −
Ｘｙｌｉｔｏｌ −
β−Ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｅ −
Ｄ−Ｔｕｒａｎｏｓｅ −
Ｄ−Ｌｙｘｏｓｅ −
Ｄ−Ｔａｇａｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｌ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ ＋
２−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
５−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
以上の諸性質から、バージィーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）に照らし、本菌株をＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍに属する菌株と同定し、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ＯＮＲＩＣ ｂ０１９５と命名した。該菌株は、平成１５年４月１５日に、日本国茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６に住所を有する独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９３１４として寄託された。また、このものは平成１６年４月７日に国際寄託に移管されており、その寄託番号はＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６である。
（２−４）Ｌ．ｐｅｎｔｏｓｕｓ ＯＮＲＩＣ ｂ０２２３
（ａ） 肉眼的特徴
（ａ−１） ＭＲＳ寒天培地
円形、半球形、平滑、白色。
（ａ−２） ＢＬ寒天培地
円形からやや不規則、台状、平滑からやや粗造、中央部褐色、周縁部白褐色。
（ｂ） 顕微鏡的特徴
桿菌で運動性を持たない。芽胞は形成しない。
（ｃ） 生育温度
３０〜３７℃で良好に生育する。
（ｄ） 生理学的、生化学的特徴
グラム染色性 ＋
Ｇｌｙｃｅｒｏｌ ＋
Ｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ ±
Ｄ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ ＋
Ｌ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ ＋
Ｒｉｂｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｘｙｌｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｘｙｌｏｓｅ ＋
Ａｄｏｎｉｔｏｌ ±
β−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｘｙｌｏｓｉｄｅ ±
Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｆｒｕｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｓｏｒｂｏｓｅ ＋
Ｒｈａｍｎｏｓｅ ＋
Ｄｕｌｃｉｔｏｌ ±
Ｉｎｏｓｉｔｏｌ ±
Ｍａｎｎｉｔｏｌ ＋
Ｓｏｒｂｉｔｏｌ ＋
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｉｄｅ ＋
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ ＋
Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ−Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ ＋
Ａｍｙｇｄａｌｉｎ ＋
Ａｒｂｕｔｉｎ ＋
Ｅｓｃｕｌｉｎ ＋
Ｓａｌｉｃｉｎ ＋
Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ ＋
Ｍａｌｔｏｓｅ ＋
Ｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ ＋
Ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ ＋
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ ＋
Ｉｎｕｌｉｎ ±
Ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ ±
Ｄ−Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ＋
Ｓｔａｒｃｈ ±
Ｇｌｙｃｏｇｅｎ ±
Ｘｙｌｉｔｏｌ ±
β−Ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｔｕｒａｎｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｌｙｘｏｓｅ ±
Ｄ−Ｔａｇａｔｏｓｅ ±
Ｄ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｌ−Ｆｕｃｏｓｅ ＋
Ｄ−Ａｒａｂｉｔｏｌ ＋
Ｌ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ ＋
２−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
５−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
以上の諸性質から、バージィーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）に照らし、本菌株をＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｅｎｔｏｓｕｓに属する菌株と同定し、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ＯＮＲＩＣ ｂ０２２３と命名した。該菌株は、平成１５年４月１５日に、日本国茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６に住所を有する独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、寄託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−１９３１５として寄託された。また、このものは平成１６年４月７日に国際寄託に移管されており、その寄託番号はＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７である。
（２−５）Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＯＮＲＩＣ ｙ００４６
（ａ）肉眼的特徴（ＹＭ寒天培地）
円形、凸状隆起、やや粗造から粗造、白色。
（ｂ）顕微鏡所見
（ｂ−１）細胞形態
レモン形。
（ｂ−２）子嚢胞子形成
形成する。
（ｂ−３）子嚢形状
球形。
（ｃ）生育温度
３０℃で良好に生育する。
（ｄ）生理学的、生化学的特徴
Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｃｙｃｌｏｈｅｘａｍｉｄｅ −
Ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ ＋
Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ−Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ −
Ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ±
Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ −
Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ＋
Ｍａｌｔｏｓｅ ＋
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ −
２−Ｋｅｔｏ−Ｃａｌｃｉｕｍ Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−α−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ −
Ｍａｎｎｉｔｏｌ −
Ｌａｃｔｏｓｅ −
Ｉｎｏｓｉｔｏｌ −
以上の諸性質から、バージィーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）に照らし、本菌株をＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅに属する菌株と同定し、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ＯＮＲＩＣ ｙ００４６と命名した。該菌株は、平成１５年４月１５日に、日本国茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６に住所を有する独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、寄託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−１９３１６として寄託された。また、このものは平成１６年４月７日に国際寄託に移管されており、その寄託番号はＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８である。
（３）本発明組成物
本発明組成物は、プリン体を分解して血清尿酸値を低減する作用を有する乳酸菌および酵母からなる群から選ばれる少なくとも１種の微生物（以下「本発明微生物」ということがある）をその有効成分として含有することを必須の要件とする。
該組成物は、通常の食品組成物乃至医薬組成物と同様に、適当な可食性担体（食品素材）および／または製剤学的に許容される賦型剤乃至希釈剤を利用して、適当な食品形態乃至医薬品形態に調製される。
本発明組成物中に配合される本発明微生物は、生菌そのものであるのが一般的であるが、特にこれに限定されず、例えば各微生物の培養液、培養物（菌体）の粗精製品乃至精製品、それらの凍結乾燥品などであってもよい。
上記微生物の培養液は、例えば次の如くして調製することができる。即ち、本発明微生物を嫌気培養するために酸素吸着剤と共に密閉容器に入れ、各微生物に適した培地、例えば乳酸菌の場合はＭＲＳ培地、酵母の場合はＹＭ培地などを用いて、２８℃で４８時間程度培養することにより得ることができる。また、菌体は、上記培養後に、例えば培養液を３０００回転／分、４℃、１０分間遠心分離して集菌することによって得ることができる。これらは常法に従い精製することができる。また、上記培養液及び培養物（菌体）は、凍結乾燥することもできる。かくして得られる凍結乾燥品、凍結乾燥菌体も、本発明組成物の有効成分として利用することができる。
本発明組成物は、上記培養液、培養物（菌体）、それらの精製品及び凍結乾燥品そのものからなっていてもよく、必要に応じて、更に、本発明微生物の維持、増殖などに適した栄養成分を含有させてなっていてもよい。該栄養成分の具体例としては、前述したように各微生物の培養のための培養培地を挙げることができる。その他の栄養成分としては、例えば乳果オリゴ糖、大豆オリゴ糖、ラクチュロース、ラクチトール、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖などの各種オリゴ糖を例示できる。これらのオリゴ糖の配合量は、特に限定されるものではないが、通常本発明組成物中に１−３重量％程度が含まれる量範囲から選ばれるのが好ましい。
また、本発明組成物中には、必要に応じて、各種ビタミン類、微量金属元素などを適宜添加配合することもできる。該ビタミン類としては、例えばビタミンＢ、ビタミンＤ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＫなどを例示できる。微量金属元素としては、例えば亜鉛、セレンなどを例示できる。
飲食品形態の本発明組成物の具体例としては、例えば発酵乳、乳酸菌飲料、発酵野菜飲料、発酵果実飲料、発酵豆乳飲料等を挙げることができる。ここで「発酵乳」および「乳酸菌飲料」なる用語は、旧厚生省「乳及び乳製品の成分等に関する省令」第二条３７「はつ酵乳」および３８「乳酸菌飲料」の定義に従うものとする。即ち、「発酵乳」とは、乳または乳製品を乳酸菌または酵母で発酵させた糊状または液状にしたものをいう。従って該発酵乳には飲料形態と共にヨーグルト形態が包含される。また「乳酸菌飲料」とは、乳または乳製品を乳酸菌または酵母で発酵させた糊状または液状にしたものを主原料としてこれを水に薄めた飲料をいう。発酵野菜飲料、発酵果実飲料および発酵豆乳飲料については後述するとおりである。
本発明組成物がとり得る他の飲食品形態の例としては、菌含有マイクロカプセル形態、固形食品形態（顆粒、粉末（発酵乳凍結乾燥粉末などを含む）、錠剤、発泡製剤、ガム、グミ、プディングなど）、前記発酵乳および乳酸菌飲料以外の乳製品などを挙げることができる。
これらの飲食品形態の本発明組成物中には、該組成物に飲食に適した味などを付与するための、可食性担体、例えば好ましくは甘味料などの口当たりのよい味覚改善効果のある担体を適宜添加配合することができる。
医薬品形態の具体例としては、製剤学的に許容される賦形剤、希釈剤などの担体を配合してなる経口投与用製剤形態（水溶液、乳化液、顆粒、粉末、カプセル、錠剤など）を挙げることができる。
これら各形態への調製は、常法に従うことができる。各形態への調製およびその際利用される可食性担体乃至製剤学的に許容される担体などの詳細は、後記（４）および（５）に記述する。
本発明組成物中への微生物の配合量は、一般には、本発明組成物１００ｇ中に、菌数が１０８〜１０１１個前後（生菌数として）となる量から適宜選択することができる。該菌数の測定は、菌培養用の寒天培地に希釈した試料を塗布して３７℃下で嫌気培養を行い、生育したコロニー数を計測することにより算出するものである。上記微生物の配合量は、上記量を目安として、調製される本発明組成物の形態、利用する微生物の種類などに応じて適宜変更することができる。
尚、上記の通り、本発明組成物は、微生物（主に生菌）を含有させるものであるため、該組成物の製品化に当たっては、加熱、加圧などの条件の採用はあまり好ましくない。本発明組成物を例えば固形食品形態に調整するに当たっては、微生物を凍結乾燥菌体として直接処方するか、凍結乾燥菌体を適当なコーティング剤で加工して用いるのが好ましい。
（４）飲食品形態組成物
本発明血清尿酸低減組成物のとり得る好ましい飲食品形態としては、代表的には発酵乳、乳酸菌飲料、発酵野菜飲料、発酵果実飲料、発酵豆乳飲料などを挙げることができる。以下、発酵野菜飲料、発酵果実飲料および発酵豆乳飲料につき詳述すれば、これら各形態への調製は、微生物の栄養源を含む適当な発酵用原料物質、例えば野菜類、果実類、豆乳（大豆乳化液）などの液中で、微生物を培養して該原料物質を発酵させることによって行うことができる。発酵用原料物質としての野菜類および果実類には、各種野菜および果実の切断物、破砕物、磨砕物、搾汁、酵素処理物、それらの希釈物および濃縮物が含まれる。野菜類には、カボチャ、ニンジン、トマト、ピーマン、セロリ、ホウレンソウ、有色サツマイモ、コーン、ビート、ケール、パセリ、キャベツ、ブロッコリーなどが含まれる。果実類にはリンゴ、モモ、バナナ、イチゴ、ブドウ、スイカ、オレンジ、ミカンなどが含まれる。
野菜および果実の切断物、破砕物および磨砕類は、例えば上記野菜類または果実類を洗浄後、必要に応じて熱湯に入れるなどのブランチング処理した後、クラッシャー、ミキサー、フードプロセッサー、パルパーフィッシャー、マイコロイダーなどを用いて切断、破砕、磨砕することによって得ることができる。搾汁は、例えばフィルタープレス、ジューサーミキサーなどを用いて調製することができる。また上記磨砕物を濾布などを用いて濾過することによっても搾汁を調製することができる。酵素処理物は、上記切断物、破砕物、磨砕物、搾汁などにセルラーゼ、ペクチナーゼ、プロトペクチン分解酵素などを作用させることによって調製できる。希釈物には水で１−５０倍に希釈したものが含まれる。濃縮物には、例えば凍結濃縮、減圧濃縮などの手段によって１−１００倍に濃縮したものが含まれる。
発酵用原料物質の他の具体例である豆乳は、常法に従い、大豆原料から調製することができる。該豆乳には、例えば、脱皮大豆を水に浸漬後、コロイドミルなどの適当な粉砕機を用いて湿式粉砕処理後、常法に従いホモジナイズ処理した均質化液、水溶性大豆蛋白質を水中に溶解した溶解液なども包含される。
微生物を利用した発酵は、予めバルクスターターを用意し、これを発酵用原料物質に接種して発酵させる方法が推奨される。ここでバルクスターターとしては、例えば代表的には予め９０−１２１℃、５−２０分間通常の殺菌処理を行った発酵用原料物質、酵母エキスを添加した１０％脱脂粉乳などに、本発明菌体を接種して同様の条件で培養したものを挙げることができる。このようにして得られるバルクスターターは、通常、本発明微生物を１０７−１０９個／ｇ培養物程度含んでいる。
バルクスターターに用いる発酵用原料物質には、必要に応じて本発明微生物の良好な生育のための発酵促進物質、例えばグルコース、澱粉、蔗糖、乳糖、デキストリン、ソルビトール、フラクトースなどの炭素源、酵母エキス、ペプトンなどの窒素源、ビタミン類、ミネラル類などを加えることができる。
微生物の接種量は、一般には発酵用原料物質含有液１ｃｃ中に菌体が約１×１０６個以上、好ましくは１×１０７個前後含まれるものとなる量から選ばれるのが適当である。培養条件は、一般に、発酵温度２０−４５℃程度、好ましくは２５−３７℃程度、発酵時間５−７２時間程度から選ばれる。
尚、上記の如くして得られる乳酸発酵物は、カード状形態（ヨーグルト様乃至プディング用形態）を有している場合があり、このものはそのまま固形食品として摂取することもできる。該カード状形態の乳酸発酵物は、これを更に均質化することにより、所望の飲料形態とすることができる。この均質化は、一般的な乳化機（ホモジナイザー）を用いて実施することができる。具体的には、該均質化は、例えばガウリン（ＧＡＵＬＩＮ）社製高圧ホモジナイザー（ＬＡＢ４０）を用いて、約２００−１０００ｋｇｆ／ｃｍ２、好ましくは約３００−８００ｋｇｆ／ｃｍ２の条件で、或いは三和機械工業社製ホモジナイザー（品番：ＨＡ×４５７１，Ｈ２０−Ａ２など）を用いて、１５０ｋｇ／ｃｍ２またはそれ以上の条件で実施することができる。この均質化によって、優れた食感、とくに滑らかさを有する飲料を得ることができる。尚、この均質化にあたっては、必要に応じて適当に希釈したり、ｐＨ調整のための有機酸類を添加したり、また、糖類、果汁、増粘剤、界面活性剤、香料などの飲料の製造に通常用いられる各種の添加剤を適宜添加することもできる。好ましい添加剤とその添加量（カード状発酵物重量に対する重量％）の一具体例としては、例えばグルコース８％（重量％、以下同じ）、砂糖８％、デキストリン８％、クエン酸０．１％、グリセリン脂肪酸エステル０．２％および香料０．１％を挙げることができる。
かくして得られる本発明飲料は、適当な容器に無菌的に充填して製品とすることができる。該製品は、滑らかな喉ごしの食感および風味を有している。
その投与（摂取）量は、これを摂取する生体の年齢、性別、体重、疾患の程度などに応じて適宜決定され、特に限定されるものではない。一般には微生物量が約１０６−１０９個／ｍＬとなる範囲から選ばれるのがよい。該製品は一般にその約５０−１０００ｍＬを摂取、服用させればよい。
また、食品形態の本発明組成物の他の具体例としては、発泡製剤形態のそれを挙げることができる。このものは、本発明微生物（菌体凍結乾燥物）０．０１−５０％（重量％、以下同じ）に、炭酸ナトリウムおよび（または）炭酸水素ナトリウム１０−３５％と中和剤２０−７０％とを発泡成分として配合することによって調製できる。ここで用いられる中和剤は、上記炭酸ナトリウムおよび炭酸水素ナトリウムを中和させて炭酸ガスを発生させ得る酸性化合物である。該化合物には、例えば代表的にはＬ−酒石酸、クエン酸、フマル酸、アスコルビン酸などの有機酸が包含される。
上記発泡成分の本発明発泡製剤中への配合割合は、得られる本発明製剤を水に溶解させた場合に、溶液が酸性、特にｐＨ約３．５−４．６程度の酸性を呈するものとなる割合とするのがよい。より具体的には上記割合は炭酸ナトリウムおよび（または）炭酸水素ナトリウム１０−３５％および中和剤２０−７０％の範囲から選択されるのがよい。特に炭酸ナトリウムは１１−３１％、好ましくは２２−２６％、炭酸水素ナトリウムは１０−３５％、好ましくは２０−３０％の範囲から選ばれるのがよい。その内でも炭酸水素ナトリウムを単独で２０−２５％の範囲で用いるのが最も好ましい。また中和剤は、２０−７０％、好ましくは３０−４０％の範囲から選択され、特にＬ−酒石酸を２０−２５％およびアスコルビン酸を８−１５％の範囲内で使用するのが最も好ましい。
本発泡製剤は、本発明微生物および発泡成分を必須成分として、他に通常知られている各種の添加剤成分、例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、増粘剤、表面活性剤、浸透圧調節剤、電解質、甘味料、香料、色素、ｐＨ調節剤などを必要に応じて適宜添加配合されていてもよい。上記添加剤としては、例えば小麦澱粉、馬鈴薯澱粉、コーンスターチ、デキストリンなどの澱粉類；ショ糖、ブドウ糖、果糖、麦芽糖、キシロース、乳糖などの糖類；ソルビトール、マンニトール、マルチトール、キシリトールなどの糖アルコール類；カップリングシュガー、パラチノースなどの糖転位配糖体；リン酸カルシウム、硫酸カルシウムなどの賦形剤；澱粉、糖類、ゼラチン、アラビアガム、デキストリン、メチルチセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、キサンタンガム、ペクチン、トラガントガム、カゼイン、アルギン酸などの結合剤乃至増粘剤；ロイシン、イソロイシン、Ｌ−バリン、シュガーエステル、硬化油、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、タルク、マクロゴールなどの滑沢剤；結晶セルロース（旭化成社製「アビセル」）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）、カルボキシメチルセルロースカルシウム（ＣＭＣ−Ｃａ）などの崩壊剤；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（ポリソルベート）、レシチンなどの表面活性剤；アスパラテーム、アリテームなどのジペプチド；その他ステビア、サッカリンなどの甘味料などを例示できる。これらは必須成分との関係や製剤の性質、製造法などを考慮してその適当量を適宜選択して用いることができる。
更に、本発明発泡製剤中には、ビタミン類、特にシアノコバラミンやアスコルビン酸（ビタミンＣ）などの適当量を添加配合することができる。その配合割合は、特に限定はないが、通常ビタミンＣでは３０％までの量、好ましくは約５−２５％の範囲から選ばれるのが好ましい。
本発明発泡製剤の製造法は、基本的には通常のこの種発泡錠剤の製造法と同様とすることができる。即ち、発泡錠剤形態の本発明製剤は、所定量の各成分を秤量、混合し、直接粉末圧縮法、乾式または湿式顆粒圧縮法などに従って調製することができる。
かくして得られる本発明製剤は、これを水中に投入するだけで、経口投与に適した飲料形態となり、これは経口投与される。
その投与（摂取）量は、これを適用すべき生体の年齢、性別、体重、疾患の程度などに応じて適宜決定され、特に限定されるものではないが、一般には１錠約１．５−６．０ｇに調製された本発明発泡錠剤の１−２錠を１回に水１００−３００ｍＬに溶かして服用させればよい。
（５）医薬品形態組成物
本発明血清尿酸低減組成物は、有効成分とする本発明微生物と共に、製剤学的に許容される適当な担体を用いて、一般的な医薬製剤組成物の形態に調製されて実用される。該担体としては、通常、この分野で使用されることの知られている充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤などの希釈剤あるいは賦形剤を例示できる。これらは得られる製剤の投与単位形態に応じて適宜選択使用される。
上記医薬製剤の投与単位形態としては、各種の形態が選択できる。その代表的なものとしては錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤などが挙げられる。
錠剤の形態に成形するに際しては、上記製剤担体として例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、リン酸カリウムなどの賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤；カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウムなどの崩壊剤；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリドなどの界面活性剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油などの崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウムなどの吸収促進剤；グリセリン、デンプンなどの保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸などの吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコールなどの滑沢剤などを使用できる。
更に錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。
丸剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルクなどの賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノールなどの結合剤；ラミナラン、カンテンなどの崩壊剤などを使用できる。
更に、本発明製剤中には、必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤などや他の医薬品を含有させることもできる。
本発明製剤中に含有されるべき本発明微生物の量は、特に限定されず広範囲より適宜選択される。通常、医薬製剤中に約１０７−１０１２個／投与単位形態程度含有されるものとするのがよい。
上記医薬製剤の投与方法は特に制限がなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度などに応じて決定される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤は経口投与される。
上記医薬製剤の投与量は、その用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度などにより適宜選択されるが、通常有効成分である本発明微生物の量が１日当り体重１ｋｇ当り約０．５−２０ｍｇ程度とするのがよく、該製剤は１日に１−４回に分けて投与することができる。
尚、本発明組成物はその摂取（投与）によって、該組成物中の微生物が下部消化管に到達して増殖し、常在菌として定着し、かくして所期の効果を奏し得る。特に好ましい製剤は、腸溶性錠剤形態であり、これによれば胃酸による侵襲を受けることなく微生物を腸に到達させることができる。
本発明によれば、高尿酸血症の予防・改善に有効な新しい組成物、殊に食品または医薬品形態の該組成物が提供される。
【図面の簡単な説明】
図１及び図２は、本発明実施例２に従う試験における実験動物の血清尿酸値の推移を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】
以下本発明を更に詳しく説明するため実施例を挙げる。
【実施例１】
（１） 本発明微生物のプリン体分解能試験
下記方法により、本発明微生物のプリン体に対する分解能を測定、評価した。
（１−ａ） 本発明微生物（ＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）およびＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７））のそれぞれを、嫌気培養するために酸素吸着剤（「アネロパック」（三菱ガス株式会社製））と共に密閉容器に入れ、乳酸菌はＭＲＳ培地、酵母はＹＭ培地を用いて、２８℃にて４８時間嫌気培養した。培養後、培養液を３，０００回転／分、４℃、１０分間遠心分離して集菌した。得られた全菌体にイノシンおよびグアノシンをそれぞれ１．２５ｍＭの濃度で含む０．１Ｍリン酸カリウム溶液（ｐＨ７．０）２ｍＬを添加し、得られる菌体懸濁液を「アネロパック」と共に密閉容器に入れ、３７℃で３０分間、１２０回転／分で振とう培養した。
（１−ｂ） （１−ａ）で得られた培養液を３，０００回転／分、４℃、１０分間遠心分離し、上清９０μＬに反応停止液として０．１Ｍ ＨＣｌＯ４ １０μＬを添加し、その後該液をＨＰＬＣに供した。尚、ＨＰＬＣは以下の条件で実施した。
〈分析機器〉
高速液体クロマトグラフィー：ＬＣ−６Ａ（島津製作所製）
〈分析条件〉
カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ５Ｃ１８−ＡＲ（４．６×２５０ｍｍ；Ｎａｃａｌａｉ Ｔｅｓｑｕｅ，Ｊａｐａｎ）
キャリアー・バッファー：１００ｍＭ ＮａＣｌＯ４（１％ Ｈ３ＰＯ４を含む）
オーブン温度：４０℃
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
波長：２５４ｎｍ
サンプル量：１０ｍＬ
イノシン、グアノシンおよびこれらの代謝物であるキサンチン、ヒポキサンチン、グアニンおよび尿酸を、ＨＰＬＣ保持時間により決定した。またこれら各化合物の定量を、ＨＰＬＣチャートのピーク面積値に基づき行った。更に、イノシンおよびグアノシンの各分解率を下式に従い算出した。
分解率＝［（１．２５（ｍＭ）−Ａ（ｍＭ））／１．２５（ｍＭ）］×１００
Ａ：反応後の培養上清におけるイノシンまたはグアノシンの濃度
（１−ｃ） 結果を下記表１に示す。
表１に示される結果から、本発明微生物はいずれもプリン体分解能を有することが明らかである。
（２） 本発明微生物のプリン体分解能試験
下記方法により、本発明微生物のプリン体に対する分解能を測定、評価した。
（２−ａ） 本発明微生物（ＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７））を、嫌気培養するために酸素吸着剤（「アネロパック」（三菱ガス株式会社製））と共に密閉容器に入れ、ＭＲＳ培地を用いて２８℃にて４８時間嫌気培養した。培養後、培養液を３，０００回転／分、４℃、１０分間遠心分離して集菌した。得られた菌体全部にヒポキサンチンおよびグアニンをそれぞれ０．２５ｍＭの濃度で含む０．１Ｍリン酸カリウム溶液（ｐＨ７．０）２ｍＬを添加し、得られる菌体懸濁液を「アネロパック」と共に密閉容器に入れ、３７℃で１２０分間、１２０回転／分で振とう培養した。
（２−ｂ） （２−ａ）で得られた培養液を３，０００回転／分、４℃、１０分間遠心分離し、上清９０μＬに反応停止液として０．１Ｍ ＨＣｌＯ４ １０μＬを添加し、その後該液をＨＰＬＣに供した。尚、ＨＰＬＣは以下の条件で実施した。
〈分析機器〉
高速液体クロマトグラフィー：ＬＣ−６Ａ（島津製作所製）
〈分析条件〉
カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ５Ｃ１８−ＡＲ（４．６×２５０ｍｍ；Ｎａｃａｌａｉ Ｔｅｓｑｕｅ，Ｊａｐａｎ）
キャリアー・バッファー：１００ｍＭ ＮａＣｌＯ４（１％ Ｈ３ＰＯ４を含む）
オーブン温度：４０℃
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
波長：２５４ｎｍ
サンプル量：１０ｍＬ
ヒポキサンチン、グアニンおよびこれらの代謝物であるキサンチンおよび尿酸を、ＨＰＬＣ保持時間により決定した。またこれら各化合物の定量を、ＨＰＬＣチャートのピーク面積値に基づき行った。更に、ヒポキサンチンおよびグアニンの各分解率を下式に従い算出した。
分解率＝［（０．２５（ｍＭ）−Ａ（ｍＭ））／０．２５（ｍＭ）］×１００
Ａ：反応後の培養上清におけるヒポキサンチンまたはグアニンの濃度
（２−ｃ） 結果を下記表２に示す。
表２に示す結果から、本発明微生物はプリン体分解能（ヒポキサンチン、グアニンおよびこれらの代謝物であるキサンチンおよび尿酸の分解能）を有することが明らかである。
【実施例２】
この例は、文献記載の方法（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，１３（１），４７−７４（１９７８））に従い食餌性高尿酸血症モデル動物を作出し、該動物の血清尿酸値に及ぼす本発明微生物の影響を検討したものであり、以下の通り実施された。
尚、本発明微生物としては、ＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）、ＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）およびＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）を利用した。
１．実験動物
６週齢のＷｉｓｔｅｒラット（各群５匹）を用いた。
２．飼育条件
実験動物を搬入後、１週間の検疫を行った。検疫中、飼料としてはＭＦ固形飼料（オリエンタル酵母社製）を与えた。飲水は水道水を自由摂取させた。飼育はステンレス製金網ケージを使用して、１ケージ当たり１匹を飼育した。明暗サイクルは、明期を６：００−１８：００とした。
検疫終了後、６日間の予備飼育を行った。予備飼育中、実験動物にはＡＩＮ−９３Ｇ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ（１９９３）ＡＩＮ−９３ ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｄｉｅｔｓ ｆｏｒ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｒｏｄｅｎｔｓ：ｆｉｎａｌ ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ａｄ ｈｏｃ ｗｒｉｔｉｎｇ ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｎ ｔｈｅ ｒｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＡＩＮ−７６Ａ ｒｏｄｅｎｔ ｄｉｅｔ．，Ｊ．Ｎｕｔｒ．，１２３：１９３９−１９５１）に準拠して調製した飼料（下記表１の標準飼料）を自由摂取させた。飲水は水道水を自由摂取させた。
３．試験スケジュール
予備飼育後、各群の平均体重が同じになるように８群に群分けした各群実験動物（７週齢）を、下記標準飼料およびオキソネート＋ＲＮＡ飼料のそれぞれを用いて８日間飼育した。
即ち、（１）標準飼料群（１群および２群）では飼料としてＡＩＮ−９３Ｇ（標準飼料）を用いた（予備飼育と変化なし）。（２）オキソネート＋ＲＮＡ飼料群（３−９群）では、標準飼料中のコーンスターチの一部をオキソネートカリウムとＲＮＡとに代えて、飼料当たりオキソネートカリウムが２．５ｗ／ｗ％およびＲＮＡが１．０ｗ／ｗ％含まれるように調製したオキソネート−ＲＮＡ飼料を利用した。各飼料の組成を下記表３に示す。
ＡＩＮ−９３Ｇビタミン混合は、２０ｇの重酒石酸コリン／ｋｇを含む。
ＲＮＡはシグマアルドリッチ社製カタログ番号Ｒ６６２５を使用した。
５−９群の実験動物には、試験期間中毎日１回、一夜培養した菌体（ｂ０１８５、ｂ０１９３、ｂ０１９５、ｂ０２２３およびｙ００４６株のそれぞれ、各菌体投与群をそれぞれｂ０１８５群（５群）、ｂ０１９３群（６群）、ｂ０１９５群（７群）、ｂ０２２３群（８群）およびｙ００４６群（９群）という）を遠心後、沈殿を１．０×１０９ＣＦＵ／ｍｌになるように生理食塩水で調製した菌体懸濁液の１．０ｍｌを強制的に経口投与した。尚、３群および４群（対照群）では上記菌体懸濁液の強制的経口投与は行わなかった。
４．採血
試験飼育０日目、２日目および５日目に、各群実験動物の尾静脈よりシリンジを用いて採血した。得られた血液は１，５００×ｇで２０分間遠心分離後、血清を分取し、−８０℃で保存した。
５．血清尿酸値測定
血清尿酸値は、ウリックアシッド−テストワコー（和光純薬工業株式会社製）を用いて、リンタングステン酸法にて測定した。
６．統計処理
結果は平均値±標準偏差で示した。血清尿酸値は対応のないＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定を行った。危険率５％未満を有意とした。
７．結果
図１および図２に血清尿酸値の結果を示す。
この結果より、食餌性高尿酸モデル動物の血清尿酸値に対して、ｂ０１８５株、ｂ０１９３株、ｂ０１９５株、ｂ０２２３株およびｙ００４６株をそれぞれ投与したラットは、有意に低値を示すことが明らかとなった。
【実施例３】
以下、本発明組成物の処方例を実施例として示す。
（１） 発酵豆乳飲料の調製
下記処方の各成分を秤量混合して、飲料形態の本発明組成物を調製した。
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１８５発酵豆乳 １００ｍＬ
乳果オリゴ糖（５５％含量） １０．０ｇ
ビタミン・ミネラル 適量
香料 適量
水 適量
全量 １５０ｍＬ
上記ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１８５発酵豆乳は、豆乳（蛋白質含量５ｇ／１００ｍＬ程度）１Ｌに、ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）を１０８個加えて、３７℃で４８時間発酵させたものである。その菌体含量は１×１０９個／ｍＬである。
（２） 発酵乳の調製
下記処方の各成分を秤量混合して、発酵乳形態の本発明組成物を調製した。
乳果オリゴ糖（５５％含量） １０．０ｇ
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１９３発酵乳 １００ｍＬ
ビタミン・ミネラル 適量
香料 適量
水 適量
全量 １５０ｍＬ
尚、ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１９３発酵乳は、牛乳１ＬにラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）を１０８個を加え、３７℃で２４時間発酵させたものである。その菌体含量は１×１０８個／ｍである。
（３） 発酵乳凍結乾燥粉末の調製
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）約１０７個／ｍＬの１ｍＬを用いて、牛乳１００ｇを３７℃で２４時間乳酸発酵させた後、得られた発酵産物（菌体を含む）を凍結乾燥して粉末とした。
上記粉末を用いて、下記処方の各成分を秤量混合して、発酵乳凍結乾燥粉末形の本発明組成物を調製した。その菌体含量は１×１０９個／ｇである。
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１９５発酵乳凍結乾燥粉末 ２．２ｇ
賦形剤 適量
ビタミン・ミネラル 適量
香料 適量
全量 ２０ｇ
尚、賦形剤としては、コーンスターチ１７ｇを用いた。
（４） 粉末の調製
下記処方の各成分を秤量混合して、粉末形態の本発明組成物を調製した。
カゼイン ４．５ｇ
乳果オリゴ糖（５５％含量） １０．０ｇ
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０２２３凍結乾燥粉末 １．０ｇ
ビタミン・ミネラル 適量
香料 適量
全量 ２０ｇ
尚、ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０２２３凍結乾燥粉末は、ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）を増殖可能な発酵用原料物質である１０％スキムミルク水溶液中で培養（３７℃、２４−４８時間）した後、凍結乾燥することによって得られたものであり、その菌体含量は１０９−１０１０個／ｇである。
（５） 顆粒の調製
下記処方の各成分を秤量混合して、顆粒形態の本発明組成物を調製した。
乳果オリゴ糖（５５％含量） １０．０ｇ
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０２２３凍結乾燥粉末 １．０ｇ
ソルビトール 適量
ビタミン・ミネラル 適量
香料 適量
全量 ２０ｇ
尚、ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０２２３凍結乾燥粉末としては、実施例３−（４）と同一のものを用いた。
（６） 菌含有マイクロカプセル
サッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）を実施例３−（４）と同様にして凍結乾燥して得られた凍結乾燥粉末６×１０１０個／ｇを、融点３４℃のヤシ硬化油を融解した中に乳果オリゴ糖と共に分散して、微生物、油脂およびオリゴ糖の混合比が２５％、７０％および５％である融解物を調製した。このものを同心三重ノズルの内側ノズルから平均流速０．３ｍ／ｓで、更にその外側の中間ノズルから融点４３℃のヤシ硬化油と大豆硬化油との混合物の融解液を平均流速０．３ｍ／ｓで、また最外側ノズルから皮膜となるゼラチン／ペクチン溶液（８５／１５ｖ／ｖ）を平均流速０．３ｍ／ｓで、それぞれ冷却され流動している油中に同時に滴下させることにより直径２．５ｍｍの三層構造のシームレスカプセル（１．４×１０９個／ｇカプセル）を試作した。
このものの内容物、内皮膜および該皮膜の重量比は３５：３５：３０であった。
このカプセルを通気乾燥後、更に真空乾燥または真空凍結乾燥を行うことによりカプセル中の水分活性をＡｗ値０．２０以下および熱伝導率０．１６ｋｃａｌ／ｍｈ℃以下にまで低下させた。尚、Ａｗ値は電気抵抗式水分活性測定装置（Ａｗメーター、ＷＡ−３６０、株式会社芝浦電子製作所）にて測定されたものである。また、熱伝導率はフィッチ（Ｆｉｔｃｈ）法で測定したものである。
【産業上の利用可能性】
本発明は、プリン体を分解して血清尿酸値の低減を図る作用を奏する新規な乳酸菌および酵母並びにこれらを含有する飲食品形態および医薬品形態の組成物を提供するものであり、この組成物は、高尿酸血症の予防および治療に有効である。
【図１】
【図２】
【技術分野】
本発明は、プリン体を分解して血清尿酸値の低減を図る作用を奏する新規な乳酸菌および酵母並びにこれらを含有する組成物（飲食品形態および医薬品形態）に関する。
【背景技術】
高尿酸血症は、血液中の尿酸値が正常範囲を越えて病的に高い異常な状態が続く疾患である。該高尿酸血症患者では、結晶化した尿酸が炎症を引き起こして激痛をもたらす痛風を初めとして、腎障害、尿路結石、心血管障害、脳血管障害などの惹起されるおそれが多分にある。また、高尿酸血症は、動脈硬化のリスクファクターの一つとも考えられている。
高尿酸血症は、体内における尿酸合成が亢進することにより、また腎臓や胆嚢から体外への尿酸の排泄が低下することにより起こると考えられている。尿酸は、生体に摂取されたアデノシン、グアノシンなどのプリン体が、体内細胞の新陳代謝、エネルギー消費などによって代謝されて生成する代謝産物（老廃物）である。従って、プリン体が多く含まれる食品を摂取することによって、血清尿酸値は上昇する。
高尿酸血症の治療・予防は、古くから、食事中のプリン体を制限する食事指導によって行われている。しかしながら、全ての動植物細胞はプリンを含んでおり、殆どの食品は、これらの動植物細胞を含むことから、プリン体を含んでいる。それ故、厳密なプリン体の摂取制限は、非常に困難であり、食事から摂取される栄養バランスの保持をも困難とする。また、プリン体の一つであるイノシン酸は旨味成分として知られており、プリン酸摂取制限は該イノシン酸の摂取制限をも意味し、食事の旨味を低下させる。このため、プリン体を制限する食事を長期間持続させることは不可能に近い。
【発明の開示】
本発明の目的は、新しい高尿酸血症の予防・治療法を確立すること、即ち、食事によるプリン体の摂取を制限するのではなくて、プリン体を分解する乳酸菌、酵母などの微生物を経口的に摂取させて、腸管内で食事から摂取されたプリン体を分解し、その体内への吸収を減少させ、かくして、血清尿酸値を低減させる新しい高尿酸血症の予防・治療方法を確立すること、並びにこの方法に有効な飲食品（発酵乳、乳酸菌飲料など）および医薬品を提供することにある。
本発明者は、上記目的を達成するために、まず、多種多数の微生物について、それらのプリン体分解能を検索した。次いで、検索されたプリン体分解能を有する微生物を実験動物に経口摂取させて、該実験動物の血清尿酸値を測定した。その結果、ある種の乳酸菌または酵母が、所望の血清尿酸値低減作用を奏するという新しい事実を見出した。本発明は、この知見を基礎として更に研究を重ねた結果、完成されたものである。
本発明は、下記項１−項９に記載の組成物、項１０−項１３に記載の微生物、項１４−１６に記載の血清尿酸値の低減方法および項１７−１９に記載の組成物などの使用を提供する。
項１．プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有する乳酸菌および酵母からなる群から選ばれる少なくとも１種の微生物を含有する組成物。
項２．血清尿酸低減組成物である項１に記載の組成物。
項３．飲食品形態である請求項１または項２に記載の組成物。
項４．発酵乳、乳酸菌飲料、発酵野菜飲料、発酵果実飲料または発酵豆乳飲料である項３に記載の組成物。
項５．医薬組成物である項１または２に記載の組成物。
項６．微生物が、ラクトバチルス属に属する乳酸菌である項１−５のいずれかに記載の組成物。
項７．乳酸菌が、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）およびラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）からなる群から選択される少なくとも１種である項６に記載の組成物。
項８．微生物が、サッカロマイセス属に属する酵母である項１−５のいずれかに記載の組成物。
項９．酵母が、サッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）である項８に記載の組成物。
項１０．プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有するラクトバチルス属に属する乳酸菌。
項１１．ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）またはラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）である項１０に記載の乳酸菌。
項１２．プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有するサッカロマイセス属に属する酵母。
項１３．サッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）である項１２に記載の酵母。
項１４．血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、項１−９のいずれかに記載の組成物を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
項１５．血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、項１０または項１１に記載の乳酸菌を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
項１６．血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、項１２または項１３に記載の酵母を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
項１７．血清尿酸値の低減のための項１−９のいずれかに記載の組成物の使用。
項１８．請求項１−９のいずれかに記載の組成物の製造のための項１０または項１１に記載の乳酸菌の使用。
項１９．請求項１−９のいずれかに記載の組成物の製造のための項１２または項１３に記載の酵母の使用。
本発明血清尿酸低減組成物の有効成分は、プリン体に対する分解能を有し、これに基づいて血清尿酸値低減作用を有する乳酸菌または酵母であることを必須とする。該乳酸菌または酵母は、後述するスクリーニング法により、天然物から分離・採取することができる。
本明細書において「乳酸菌」とは、乳酸発酵ができる微生物を指す。該微生物中、乳酸菌には、ラクトバチラス属、ラクトコッカス属、ストレプトッコカス属、エンテロコッカス属、ビフィドバクテリウム属、ペディオコッカス属およびリューコノストック属に属する乳酸菌が包含される。また、酵母には、サッカロマイセス属に属する酵母が包含される。
プリン体を分解して血清尿酸値を低減させる作用を有する乳酸菌または酵母の好ましい例としては、ラクトバチルス属、ペディオコッカス属およびリューコノストック属に属する乳酸菌およびサッカロマイセス属に属する酵母を挙げることができる。これらの内でも本発明者らが新たにスクリーニングし且つ寄託したラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）およびサッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）は、特に好ましい。
本明細書においてプリン体とは、プリン骨格を有する物質をいい、これには代表的にはプリンヌクレオチド、プリンヌクレオシドおよびプリン塩基が含まれる。プリンヌクレオチドには、アデニル酸、グアニル酸、イノシン酸などが含まれる。プリンヌクレオシドには、アデノシン、グアノシンおよびイノシンが含まれる。プリン塩基には、アデニン、グアニン、ヒポキサンチンおよびキサンチンが含まれる。また、プリン体には、核酸（ＡおよびＧ）を含むオリゴヌクレオチドおよびポリヌクレオチドも包含される。
以下、本発明に係る乳酸菌または酵母およびそれらを含む本発明血清尿酸低減組成物につき詳述する。
（１）微生物のスクリーニング
（１−１）起源微生物
起源微生物としては、大塚製薬株式会社大津栄養製品研究所で保存しており、ヒト腸内容物、植物性発酵物および動物性食品発酵物から分離された乳酸菌および酵母を利用する。
（１−２）スクリーニング方法
目的とする乳酸菌および酵母のスクリーニングは、（１）プリン体（イノシン、グアノシン、ヒポキサンチン、キサンチン）に対する分解能、および（２）高尿酸モデルラットの血清尿酸値低下作用を指標として実施する。該スクリーニングの各操作などの詳細は、例えば後記する実施例１および２に示すとおりである。
（２）スクリーニングされた微生物
（２−１）Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ ＯＮＲＩＣ ｂ０１８５
（ａ）肉眼的特徴
（ａ−１） ＭＲＳ寒天培地
円形からやや不規則、低凸状隆起、平滑からやや粗造、中央部白色、周縁部白色から無色。
（ａ−２） ＢＬ寒天培地
不規則，低凸状隆起、平滑からやや粗造、中央部黄褐色，周縁部白褐色。
（ｂ） 顕微鏡的特徴
桿菌で運動性を持たない。芽胞は形成しない。
（ｃ） 生育温度
３０〜３７℃で良好に生育する。
（ｄ） 生理学的、生化学的特徴
グラム染色性 ＋
Ｇｌｙｃｅｒｏｌ −
Ｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ ＋
Ｒｉｂｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｘｙｌｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｘｙｌｏｓｅ −
Ａｄｏｎｉｔｏｌ −
β−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｘｙｌｏｓｉｄｅ −
Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｆｒｕｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｅ ±
Ｌ−Ｓｏｒｂｏｓｅ −
Ｒｈａｍｎｏｓｅ −
Ｄｕｌｃｉｔｏｌ −
Ｉｎｏｓｉｔｏｌ −
Ｍａｎｎｉｔｏｌ ±
Ｓｏｒｂｉｔｏｌ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｉｄｅ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ −
Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ−Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ −
Ａｍｙｇｄａｌｉｎ −
Ａｒｂｕｔｉｎ −
Ｅｓｃｕｌｉｎ −
Ｓａｌｉｃｉｎ −
Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ −
Ｍａｌｔｏｓｅ ＋
Ｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ ＋
Ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ ＋
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ ＋
Ｉｎｕｌｉｎ −
Ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ＋
Ｓｔａｒｃｈ −
Ｇｌｙｃｏｇｅｎ −
Ｘｙｌｉｔｏｌ −
β−Ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｅ −
Ｄ−Ｔｕｒａｎｏｓｅ −
Ｄ−Ｌｙｘｏｓｅ −
Ｄ−Ｔａｇａｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｌ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ ＋
２−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
５−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
以上の諸性質から、バージィーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）に照らし、本菌株をＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍに属する菌株と同定し、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ＯＮＲＩＣ ｂ０１８５と命名した。該菌株は、平成１５年４月１５日に、日本国茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６に住所を有する独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９３１２として寄託された。また、このものは平成１６年４月７日に国際寄託に移管されており、その寄託番号はＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４である。
（２−２）Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ ＯＮＲＩＣ ｂ０１９３
（ａ） 肉眼的特徴
（ａ−１） ＭＲＳ寒天培地
円形，円錐、平滑からやや粗造、白色。
（ａ−２） ＢＬ寒天培地
円形，凸状隆起、平滑からやや粗造、褐色。
（ｂ） 顕微鏡的特徴
桿菌で運動性を持たない。芽胞は形成しない。
（ｃ） 生育温度
３０〜３７℃で良好に生育する。
（ｄ） 生理学的、生化学的特徴
グラム染色性 ＋
Ｇｌｙｃｅｒｏｌ −
Ｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｒｉｂｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｘｙｌｏｓｅ ±
Ｌ−Ｘｙｌｏｓｅ −
Ａｄｏｎｉｔｏｌ −
β−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｘｙｌｏｓｉｄｅ −
Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｆｒｕｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｓｏｒｂｏｓｅ −
Ｒｈａｍｎｏｓｅ −
Ｄｕｌｃｉｔｏｌ −
Ｉｎｏｓｉｔｏｌ −
Ｍａｎｎｉｔｏｌ −
Ｓｏｒｂｉｔｏｌ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｉｄｅ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ −
Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ−Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ −
Ａｍｙｇｄａｌｉｎ −
Ａｒｂｕｔｉｎ −
Ｅｓｃｕｌｉｎ −
Ｓａｌｉｃｉｎ −
Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ −
Ｍａｌｔｏｓｅ ＋
Ｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ ＋
Ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ ＋
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ −
Ｉｎｕｌｉｎ −
Ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ＋
Ｓｔａｒｃｈ −
Ｇｌｙｃｏｇｅｎ −
Ｘｙｌｉｔｏｌ −
β−Ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｅ −
Ｄ−Ｔｕｒａｎｏｓｅ −
Ｄ−Ｌｙｘｏｓｅ −
Ｄ−Ｔａｇａｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｌ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
２−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
５−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
以上の諸性質から、バージィーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）に照らし、本菌株をＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍに属する菌株と同定し、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ＯＮＲＩＣ ｂ０１９３と命名した。該菌株は、平成１５年４月１５日に、日本国茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６に住所を有する独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９３１３として寄託された。また、このものは平成１６年４月７日に国際寄託に移管されており、その寄託番号はＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５である。
（２−３）Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ ＯＮＲＩＣ ｂ０１９５
（ａ） 肉眼的特徴
（ａ−１） ＭＲＳ寒天培地
円形、半球形、平滑からやや粗造、白色。
（ａ−２） ＢＬ寒天培地
円形、凸状隆起、平滑からやや粗造、中央部赤褐色、周縁部白褐色。
（ｂ） 顕微鏡的特徴
桿菌で運動性を持たない。芽胞は形成しない。
（ｃ） 生育温度
３０〜３７℃で良好に生育する。
（ｄ） 生理学的、生化学的特徴
グラム染色性 ＋
Ｇｌｙｃｅｒｏｌ −
Ｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｒｉｂｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｘｙｌｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｘｙｌｏｓｅ −
Ａｄｏｎｉｔｏｌ −
β−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｘｙｌｏｓｉｄｅ −
Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｆｒｕｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｓｏｒｂｏｓｅ −
Ｒｈａｍｎｏｓｅ −
Ｄｕｌｃｉｔｏｌ −
Ｉｎｏｓｉｔｏｌ −
Ｍａｎｎｉｔｏｌ −
Ｓｏｒｂｉｔｏｌ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｉｄｅ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ −
Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ−Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ −
Ａｍｙｇｄａｌｉｎ −
Ａｒｂｕｔｉｎ −
Ｅｓｃｕｌｉｎ −
Ｓａｌｉｃｉｎ −
Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ −
Ｍａｌｔｏｓｅ ＋
Ｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ ＋
Ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ ＋
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ −
Ｉｎｕｌｉｎ −
Ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ＋
Ｓｔａｒｃｈ −
Ｇｌｙｃｏｇｅｎ −
Ｘｙｌｉｔｏｌ −
β−Ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｅ −
Ｄ−Ｔｕｒａｎｏｓｅ −
Ｄ−Ｌｙｘｏｓｅ −
Ｄ−Ｔａｇａｔｏｓｅ −
Ｄ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｌ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｄ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｌ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ ＋
２−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
５−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
以上の諸性質から、バージィーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）に照らし、本菌株をＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍに属する菌株と同定し、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ＯＮＲＩＣ ｂ０１９５と命名した。該菌株は、平成１５年４月１５日に、日本国茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６に住所を有する独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、寄託番号ＦＥＲＭ Ｐ−１９３１４として寄託された。また、このものは平成１６年４月７日に国際寄託に移管されており、その寄託番号はＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６である。
（２−４）Ｌ．ｐｅｎｔｏｓｕｓ ＯＮＲＩＣ ｂ０２２３
（ａ） 肉眼的特徴
（ａ−１） ＭＲＳ寒天培地
円形、半球形、平滑、白色。
（ａ−２） ＢＬ寒天培地
円形からやや不規則、台状、平滑からやや粗造、中央部褐色、周縁部白褐色。
（ｂ） 顕微鏡的特徴
桿菌で運動性を持たない。芽胞は形成しない。
（ｃ） 生育温度
３０〜３７℃で良好に生育する。
（ｄ） 生理学的、生化学的特徴
グラム染色性 ＋
Ｇｌｙｃｅｒｏｌ ＋
Ｅｒｙｔｈｒｉｔｏｌ ±
Ｄ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ ＋
Ｌ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ ＋
Ｒｉｂｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｘｙｌｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｘｙｌｏｓｅ ＋
Ａｄｏｎｉｔｏｌ ±
β−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｘｙｌｏｓｉｄｅ ±
Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｆｒｕｃｔｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｅ ＋
Ｌ−Ｓｏｒｂｏｓｅ ＋
Ｒｈａｍｎｏｓｅ ＋
Ｄｕｌｃｉｔｏｌ ±
Ｉｎｏｓｉｔｏｌ ±
Ｍａｎｎｉｔｏｌ ＋
Ｓｏｒｂｉｔｏｌ ＋
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｍａｎｎｏｓｉｄｅ ＋
α−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ ＋
Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ−Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ ＋
Ａｍｙｇｄａｌｉｎ ＋
Ａｒｂｕｔｉｎ ＋
Ｅｓｃｕｌｉｎ ＋
Ｓａｌｉｃｉｎ ＋
Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ ＋
Ｍａｌｔｏｓｅ ＋
Ｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｍｅｌｉｂｉｏｓｅ ＋
Ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ ＋
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ ＋
Ｉｎｕｌｉｎ ±
Ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ ±
Ｄ−Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ＋
Ｓｔａｒｃｈ ±
Ｇｌｙｃｏｇｅｎ ±
Ｘｙｌｉｔｏｌ ±
β−Ｇｅｎｔｉｏｂｉｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｔｕｒａｎｏｓｅ ＋
Ｄ−Ｌｙｘｏｓｅ ±
Ｄ−Ｔａｇａｔｏｓｅ ±
Ｄ−Ｆｕｃｏｓｅ −
Ｌ−Ｆｕｃｏｓｅ ＋
Ｄ−Ａｒａｂｉｔｏｌ ＋
Ｌ−Ａｒａｂｉｔｏｌ −
Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ ＋
２−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
５−Ｋｅｔｏ−Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
以上の諸性質から、バージィーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）に照らし、本菌株をＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｅｎｔｏｓｕｓに属する菌株と同定し、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ＯＮＲＩＣ ｂ０２２３と命名した。該菌株は、平成１５年４月１５日に、日本国茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６に住所を有する独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、寄託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−１９３１５として寄託された。また、このものは平成１６年４月７日に国際寄託に移管されており、その寄託番号はＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７である。
（２−５）Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＯＮＲＩＣ ｙ００４６
（ａ）肉眼的特徴（ＹＭ寒天培地）
円形、凸状隆起、やや粗造から粗造、白色。
（ｂ）顕微鏡所見
（ｂ−１）細胞形態
レモン形。
（ｂ−２）子嚢胞子形成
形成する。
（ｂ−３）子嚢形状
球形。
（ｃ）生育温度
３０℃で良好に生育する。
（ｄ）生理学的、生化学的特徴
Ｇａｌａｃｔｏｓｅ ＋
Ｃｙｃｌｏｈｅｘａｍｉｄｅ −
Ｓａｃｃｈａｒｏｓｅ ＋
Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ−Ｇｌｕｃｏｓａｍｉｎｅ −
Ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ±
Ａｒａｂｉｎｏｓｅ −
Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ −
Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ ＋
Ｍａｌｔｏｓｅ ＋
Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ −
２−Ｋｅｔｏ−Ｃａｌｃｉｕｍ Ｇｌｕｃｏｎａｔｅ −
α−Ｍｅｔｈｙｌ−α−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ −
Ｍａｎｎｉｔｏｌ −
Ｌａｃｔｏｓｅ −
Ｉｎｏｓｉｔｏｌ −
以上の諸性質から、バージィーズ・マニュアル・オブ・システマティック・バクテリオロジー（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ）に照らし、本菌株をＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅに属する菌株と同定し、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ＯＮＲＩＣ ｙ００４６と命名した。該菌株は、平成１５年４月１５日に、日本国茨城県つくば市東１−１−１ 中央第６に住所を有する独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、寄託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−１９３１６として寄託された。また、このものは平成１６年４月７日に国際寄託に移管されており、その寄託番号はＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８である。
（３）本発明組成物
本発明組成物は、プリン体を分解して血清尿酸値を低減する作用を有する乳酸菌および酵母からなる群から選ばれる少なくとも１種の微生物（以下「本発明微生物」ということがある）をその有効成分として含有することを必須の要件とする。
該組成物は、通常の食品組成物乃至医薬組成物と同様に、適当な可食性担体（食品素材）および／または製剤学的に許容される賦型剤乃至希釈剤を利用して、適当な食品形態乃至医薬品形態に調製される。
本発明組成物中に配合される本発明微生物は、生菌そのものであるのが一般的であるが、特にこれに限定されず、例えば各微生物の培養液、培養物（菌体）の粗精製品乃至精製品、それらの凍結乾燥品などであってもよい。
上記微生物の培養液は、例えば次の如くして調製することができる。即ち、本発明微生物を嫌気培養するために酸素吸着剤と共に密閉容器に入れ、各微生物に適した培地、例えば乳酸菌の場合はＭＲＳ培地、酵母の場合はＹＭ培地などを用いて、２８℃で４８時間程度培養することにより得ることができる。また、菌体は、上記培養後に、例えば培養液を３０００回転／分、４℃、１０分間遠心分離して集菌することによって得ることができる。これらは常法に従い精製することができる。また、上記培養液及び培養物（菌体）は、凍結乾燥することもできる。かくして得られる凍結乾燥品、凍結乾燥菌体も、本発明組成物の有効成分として利用することができる。
本発明組成物は、上記培養液、培養物（菌体）、それらの精製品及び凍結乾燥品そのものからなっていてもよく、必要に応じて、更に、本発明微生物の維持、増殖などに適した栄養成分を含有させてなっていてもよい。該栄養成分の具体例としては、前述したように各微生物の培養のための培養培地を挙げることができる。その他の栄養成分としては、例えば乳果オリゴ糖、大豆オリゴ糖、ラクチュロース、ラクチトール、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖などの各種オリゴ糖を例示できる。これらのオリゴ糖の配合量は、特に限定されるものではないが、通常本発明組成物中に１−３重量％程度が含まれる量範囲から選ばれるのが好ましい。
また、本発明組成物中には、必要に応じて、各種ビタミン類、微量金属元素などを適宜添加配合することもできる。該ビタミン類としては、例えばビタミンＢ、ビタミンＤ、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＫなどを例示できる。微量金属元素としては、例えば亜鉛、セレンなどを例示できる。
飲食品形態の本発明組成物の具体例としては、例えば発酵乳、乳酸菌飲料、発酵野菜飲料、発酵果実飲料、発酵豆乳飲料等を挙げることができる。ここで「発酵乳」および「乳酸菌飲料」なる用語は、旧厚生省「乳及び乳製品の成分等に関する省令」第二条３７「はつ酵乳」および３８「乳酸菌飲料」の定義に従うものとする。即ち、「発酵乳」とは、乳または乳製品を乳酸菌または酵母で発酵させた糊状または液状にしたものをいう。従って該発酵乳には飲料形態と共にヨーグルト形態が包含される。また「乳酸菌飲料」とは、乳または乳製品を乳酸菌または酵母で発酵させた糊状または液状にしたものを主原料としてこれを水に薄めた飲料をいう。発酵野菜飲料、発酵果実飲料および発酵豆乳飲料については後述するとおりである。
本発明組成物がとり得る他の飲食品形態の例としては、菌含有マイクロカプセル形態、固形食品形態（顆粒、粉末（発酵乳凍結乾燥粉末などを含む）、錠剤、発泡製剤、ガム、グミ、プディングなど）、前記発酵乳および乳酸菌飲料以外の乳製品などを挙げることができる。
これらの飲食品形態の本発明組成物中には、該組成物に飲食に適した味などを付与するための、可食性担体、例えば好ましくは甘味料などの口当たりのよい味覚改善効果のある担体を適宜添加配合することができる。
医薬品形態の具体例としては、製剤学的に許容される賦形剤、希釈剤などの担体を配合してなる経口投与用製剤形態（水溶液、乳化液、顆粒、粉末、カプセル、錠剤など）を挙げることができる。
これら各形態への調製は、常法に従うことができる。各形態への調製およびその際利用される可食性担体乃至製剤学的に許容される担体などの詳細は、後記（４）および（５）に記述する。
本発明組成物中への微生物の配合量は、一般には、本発明組成物１００ｇ中に、菌数が１０８〜１０１１個前後（生菌数として）となる量から適宜選択することができる。該菌数の測定は、菌培養用の寒天培地に希釈した試料を塗布して３７℃下で嫌気培養を行い、生育したコロニー数を計測することにより算出するものである。上記微生物の配合量は、上記量を目安として、調製される本発明組成物の形態、利用する微生物の種類などに応じて適宜変更することができる。
尚、上記の通り、本発明組成物は、微生物（主に生菌）を含有させるものであるため、該組成物の製品化に当たっては、加熱、加圧などの条件の採用はあまり好ましくない。本発明組成物を例えば固形食品形態に調整するに当たっては、微生物を凍結乾燥菌体として直接処方するか、凍結乾燥菌体を適当なコーティング剤で加工して用いるのが好ましい。
（４）飲食品形態組成物
本発明血清尿酸低減組成物のとり得る好ましい飲食品形態としては、代表的には発酵乳、乳酸菌飲料、発酵野菜飲料、発酵果実飲料、発酵豆乳飲料などを挙げることができる。以下、発酵野菜飲料、発酵果実飲料および発酵豆乳飲料につき詳述すれば、これら各形態への調製は、微生物の栄養源を含む適当な発酵用原料物質、例えば野菜類、果実類、豆乳（大豆乳化液）などの液中で、微生物を培養して該原料物質を発酵させることによって行うことができる。発酵用原料物質としての野菜類および果実類には、各種野菜および果実の切断物、破砕物、磨砕物、搾汁、酵素処理物、それらの希釈物および濃縮物が含まれる。野菜類には、カボチャ、ニンジン、トマト、ピーマン、セロリ、ホウレンソウ、有色サツマイモ、コーン、ビート、ケール、パセリ、キャベツ、ブロッコリーなどが含まれる。果実類にはリンゴ、モモ、バナナ、イチゴ、ブドウ、スイカ、オレンジ、ミカンなどが含まれる。
野菜および果実の切断物、破砕物および磨砕類は、例えば上記野菜類または果実類を洗浄後、必要に応じて熱湯に入れるなどのブランチング処理した後、クラッシャー、ミキサー、フードプロセッサー、パルパーフィッシャー、マイコロイダーなどを用いて切断、破砕、磨砕することによって得ることができる。搾汁は、例えばフィルタープレス、ジューサーミキサーなどを用いて調製することができる。また上記磨砕物を濾布などを用いて濾過することによっても搾汁を調製することができる。酵素処理物は、上記切断物、破砕物、磨砕物、搾汁などにセルラーゼ、ペクチナーゼ、プロトペクチン分解酵素などを作用させることによって調製できる。希釈物には水で１−５０倍に希釈したものが含まれる。濃縮物には、例えば凍結濃縮、減圧濃縮などの手段によって１−１００倍に濃縮したものが含まれる。
発酵用原料物質の他の具体例である豆乳は、常法に従い、大豆原料から調製することができる。該豆乳には、例えば、脱皮大豆を水に浸漬後、コロイドミルなどの適当な粉砕機を用いて湿式粉砕処理後、常法に従いホモジナイズ処理した均質化液、水溶性大豆蛋白質を水中に溶解した溶解液なども包含される。
微生物を利用した発酵は、予めバルクスターターを用意し、これを発酵用原料物質に接種して発酵させる方法が推奨される。ここでバルクスターターとしては、例えば代表的には予め９０−１２１℃、５−２０分間通常の殺菌処理を行った発酵用原料物質、酵母エキスを添加した１０％脱脂粉乳などに、本発明菌体を接種して同様の条件で培養したものを挙げることができる。このようにして得られるバルクスターターは、通常、本発明微生物を１０７−１０９個／ｇ培養物程度含んでいる。
バルクスターターに用いる発酵用原料物質には、必要に応じて本発明微生物の良好な生育のための発酵促進物質、例えばグルコース、澱粉、蔗糖、乳糖、デキストリン、ソルビトール、フラクトースなどの炭素源、酵母エキス、ペプトンなどの窒素源、ビタミン類、ミネラル類などを加えることができる。
微生物の接種量は、一般には発酵用原料物質含有液１ｃｃ中に菌体が約１×１０６個以上、好ましくは１×１０７個前後含まれるものとなる量から選ばれるのが適当である。培養条件は、一般に、発酵温度２０−４５℃程度、好ましくは２５−３７℃程度、発酵時間５−７２時間程度から選ばれる。
尚、上記の如くして得られる乳酸発酵物は、カード状形態（ヨーグルト様乃至プディング用形態）を有している場合があり、このものはそのまま固形食品として摂取することもできる。該カード状形態の乳酸発酵物は、これを更に均質化することにより、所望の飲料形態とすることができる。この均質化は、一般的な乳化機（ホモジナイザー）を用いて実施することができる。具体的には、該均質化は、例えばガウリン（ＧＡＵＬＩＮ）社製高圧ホモジナイザー（ＬＡＢ４０）を用いて、約２００−１０００ｋｇｆ／ｃｍ２、好ましくは約３００−８００ｋｇｆ／ｃｍ２の条件で、或いは三和機械工業社製ホモジナイザー（品番：ＨＡ×４５７１，Ｈ２０−Ａ２など）を用いて、１５０ｋｇ／ｃｍ２またはそれ以上の条件で実施することができる。この均質化によって、優れた食感、とくに滑らかさを有する飲料を得ることができる。尚、この均質化にあたっては、必要に応じて適当に希釈したり、ｐＨ調整のための有機酸類を添加したり、また、糖類、果汁、増粘剤、界面活性剤、香料などの飲料の製造に通常用いられる各種の添加剤を適宜添加することもできる。好ましい添加剤とその添加量（カード状発酵物重量に対する重量％）の一具体例としては、例えばグルコース８％（重量％、以下同じ）、砂糖８％、デキストリン８％、クエン酸０．１％、グリセリン脂肪酸エステル０．２％および香料０．１％を挙げることができる。
かくして得られる本発明飲料は、適当な容器に無菌的に充填して製品とすることができる。該製品は、滑らかな喉ごしの食感および風味を有している。
その投与（摂取）量は、これを摂取する生体の年齢、性別、体重、疾患の程度などに応じて適宜決定され、特に限定されるものではない。一般には微生物量が約１０６−１０９個／ｍＬとなる範囲から選ばれるのがよい。該製品は一般にその約５０−１０００ｍＬを摂取、服用させればよい。
また、食品形態の本発明組成物の他の具体例としては、発泡製剤形態のそれを挙げることができる。このものは、本発明微生物（菌体凍結乾燥物）０．０１−５０％（重量％、以下同じ）に、炭酸ナトリウムおよび（または）炭酸水素ナトリウム１０−３５％と中和剤２０−７０％とを発泡成分として配合することによって調製できる。ここで用いられる中和剤は、上記炭酸ナトリウムおよび炭酸水素ナトリウムを中和させて炭酸ガスを発生させ得る酸性化合物である。該化合物には、例えば代表的にはＬ−酒石酸、クエン酸、フマル酸、アスコルビン酸などの有機酸が包含される。
上記発泡成分の本発明発泡製剤中への配合割合は、得られる本発明製剤を水に溶解させた場合に、溶液が酸性、特にｐＨ約３．５−４．６程度の酸性を呈するものとなる割合とするのがよい。より具体的には上記割合は炭酸ナトリウムおよび（または）炭酸水素ナトリウム１０−３５％および中和剤２０−７０％の範囲から選択されるのがよい。特に炭酸ナトリウムは１１−３１％、好ましくは２２−２６％、炭酸水素ナトリウムは１０−３５％、好ましくは２０−３０％の範囲から選ばれるのがよい。その内でも炭酸水素ナトリウムを単独で２０−２５％の範囲で用いるのが最も好ましい。また中和剤は、２０−７０％、好ましくは３０−４０％の範囲から選択され、特にＬ−酒石酸を２０−２５％およびアスコルビン酸を８−１５％の範囲内で使用するのが最も好ましい。
本発泡製剤は、本発明微生物および発泡成分を必須成分として、他に通常知られている各種の添加剤成分、例えば賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、増粘剤、表面活性剤、浸透圧調節剤、電解質、甘味料、香料、色素、ｐＨ調節剤などを必要に応じて適宜添加配合されていてもよい。上記添加剤としては、例えば小麦澱粉、馬鈴薯澱粉、コーンスターチ、デキストリンなどの澱粉類；ショ糖、ブドウ糖、果糖、麦芽糖、キシロース、乳糖などの糖類；ソルビトール、マンニトール、マルチトール、キシリトールなどの糖アルコール類；カップリングシュガー、パラチノースなどの糖転位配糖体；リン酸カルシウム、硫酸カルシウムなどの賦形剤；澱粉、糖類、ゼラチン、アラビアガム、デキストリン、メチルチセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、キサンタンガム、ペクチン、トラガントガム、カゼイン、アルギン酸などの結合剤乃至増粘剤；ロイシン、イソロイシン、Ｌ−バリン、シュガーエステル、硬化油、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、タルク、マクロゴールなどの滑沢剤；結晶セルロース（旭化成社製「アビセル」）、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ−Ｎａ）、カルボキシメチルセルロースカルシウム（ＣＭＣ−Ｃａ）などの崩壊剤；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（ポリソルベート）、レシチンなどの表面活性剤；アスパラテーム、アリテームなどのジペプチド；その他ステビア、サッカリンなどの甘味料などを例示できる。これらは必須成分との関係や製剤の性質、製造法などを考慮してその適当量を適宜選択して用いることができる。
更に、本発明発泡製剤中には、ビタミン類、特にシアノコバラミンやアスコルビン酸（ビタミンＣ）などの適当量を添加配合することができる。その配合割合は、特に限定はないが、通常ビタミンＣでは３０％までの量、好ましくは約５−２５％の範囲から選ばれるのが好ましい。
本発明発泡製剤の製造法は、基本的には通常のこの種発泡錠剤の製造法と同様とすることができる。即ち、発泡錠剤形態の本発明製剤は、所定量の各成分を秤量、混合し、直接粉末圧縮法、乾式または湿式顆粒圧縮法などに従って調製することができる。
かくして得られる本発明製剤は、これを水中に投入するだけで、経口投与に適した飲料形態となり、これは経口投与される。
その投与（摂取）量は、これを適用すべき生体の年齢、性別、体重、疾患の程度などに応じて適宜決定され、特に限定されるものではないが、一般には１錠約１．５−６．０ｇに調製された本発明発泡錠剤の１−２錠を１回に水１００−３００ｍＬに溶かして服用させればよい。
（５）医薬品形態組成物
本発明血清尿酸低減組成物は、有効成分とする本発明微生物と共に、製剤学的に許容される適当な担体を用いて、一般的な医薬製剤組成物の形態に調製されて実用される。該担体としては、通常、この分野で使用されることの知られている充填剤、増量剤、結合剤、付湿剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤などの希釈剤あるいは賦形剤を例示できる。これらは得られる製剤の投与単位形態に応じて適宜選択使用される。
上記医薬製剤の投与単位形態としては、各種の形態が選択できる。その代表的なものとしては錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤などが挙げられる。
錠剤の形態に成形するに際しては、上記製剤担体として例えば乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、リン酸カリウムなどの賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤；カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウムなどの崩壊剤；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリドなどの界面活性剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油などの崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウムなどの吸収促進剤；グリセリン、デンプンなどの保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸などの吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコールなどの滑沢剤などを使用できる。
更に錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。
丸剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルクなどの賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノールなどの結合剤；ラミナラン、カンテンなどの崩壊剤などを使用できる。
更に、本発明製剤中には、必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤などや他の医薬品を含有させることもできる。
本発明製剤中に含有されるべき本発明微生物の量は、特に限定されず広範囲より適宜選択される。通常、医薬製剤中に約１０７−１０１２個／投与単位形態程度含有されるものとするのがよい。
上記医薬製剤の投与方法は特に制限がなく、各種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度などに応じて決定される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤は経口投与される。
上記医薬製剤の投与量は、その用法、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程度などにより適宜選択されるが、通常有効成分である本発明微生物の量が１日当り体重１ｋｇ当り約０．５−２０ｍｇ程度とするのがよく、該製剤は１日に１−４回に分けて投与することができる。
尚、本発明組成物はその摂取（投与）によって、該組成物中の微生物が下部消化管に到達して増殖し、常在菌として定着し、かくして所期の効果を奏し得る。特に好ましい製剤は、腸溶性錠剤形態であり、これによれば胃酸による侵襲を受けることなく微生物を腸に到達させることができる。
本発明によれば、高尿酸血症の予防・改善に有効な新しい組成物、殊に食品または医薬品形態の該組成物が提供される。
【図面の簡単な説明】
図１及び図２は、本発明実施例２に従う試験における実験動物の血清尿酸値の推移を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】
以下本発明を更に詳しく説明するため実施例を挙げる。
【実施例１】
（１） 本発明微生物のプリン体分解能試験
下記方法により、本発明微生物のプリン体に対する分解能を測定、評価した。
（１−ａ） 本発明微生物（ＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）およびＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７））のそれぞれを、嫌気培養するために酸素吸着剤（「アネロパック」（三菱ガス株式会社製））と共に密閉容器に入れ、乳酸菌はＭＲＳ培地、酵母はＹＭ培地を用いて、２８℃にて４８時間嫌気培養した。培養後、培養液を３，０００回転／分、４℃、１０分間遠心分離して集菌した。得られた全菌体にイノシンおよびグアノシンをそれぞれ１．２５ｍＭの濃度で含む０．１Ｍリン酸カリウム溶液（ｐＨ７．０）２ｍＬを添加し、得られる菌体懸濁液を「アネロパック」と共に密閉容器に入れ、３７℃で３０分間、１２０回転／分で振とう培養した。
（１−ｂ） （１−ａ）で得られた培養液を３，０００回転／分、４℃、１０分間遠心分離し、上清９０μＬに反応停止液として０．１Ｍ ＨＣｌＯ４ １０μＬを添加し、その後該液をＨＰＬＣに供した。尚、ＨＰＬＣは以下の条件で実施した。
〈分析機器〉
高速液体クロマトグラフィー：ＬＣ−６Ａ（島津製作所製）
〈分析条件〉
カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ５Ｃ１８−ＡＲ（４．６×２５０ｍｍ；Ｎａｃａｌａｉ Ｔｅｓｑｕｅ，Ｊａｐａｎ）
キャリアー・バッファー：１００ｍＭ ＮａＣｌＯ４（１％ Ｈ３ＰＯ４を含む）
オーブン温度：４０℃
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
波長：２５４ｎｍ
サンプル量：１０ｍＬ
イノシン、グアノシンおよびこれらの代謝物であるキサンチン、ヒポキサンチン、グアニンおよび尿酸を、ＨＰＬＣ保持時間により決定した。またこれら各化合物の定量を、ＨＰＬＣチャートのピーク面積値に基づき行った。更に、イノシンおよびグアノシンの各分解率を下式に従い算出した。
分解率＝［（１．２５（ｍＭ）−Ａ（ｍＭ））／１．２５（ｍＭ）］×１００
Ａ：反応後の培養上清におけるイノシンまたはグアノシンの濃度
（１−ｃ） 結果を下記表１に示す。
表１に示される結果から、本発明微生物はいずれもプリン体分解能を有することが明らかである。
（２） 本発明微生物のプリン体分解能試験
下記方法により、本発明微生物のプリン体に対する分解能を測定、評価した。
（２−ａ） 本発明微生物（ＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７））を、嫌気培養するために酸素吸着剤（「アネロパック」（三菱ガス株式会社製））と共に密閉容器に入れ、ＭＲＳ培地を用いて２８℃にて４８時間嫌気培養した。培養後、培養液を３，０００回転／分、４℃、１０分間遠心分離して集菌した。得られた菌体全部にヒポキサンチンおよびグアニンをそれぞれ０．２５ｍＭの濃度で含む０．１Ｍリン酸カリウム溶液（ｐＨ７．０）２ｍＬを添加し、得られる菌体懸濁液を「アネロパック」と共に密閉容器に入れ、３７℃で１２０分間、１２０回転／分で振とう培養した。
（２−ｂ） （２−ａ）で得られた培養液を３，０００回転／分、４℃、１０分間遠心分離し、上清９０μＬに反応停止液として０．１Ｍ ＨＣｌＯ４ １０μＬを添加し、その後該液をＨＰＬＣに供した。尚、ＨＰＬＣは以下の条件で実施した。
〈分析機器〉
高速液体クロマトグラフィー：ＬＣ−６Ａ（島津製作所製）
〈分析条件〉
カラム：Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ５Ｃ１８−ＡＲ（４．６×２５０ｍｍ；Ｎａｃａｌａｉ Ｔｅｓｑｕｅ，Ｊａｐａｎ）
キャリアー・バッファー：１００ｍＭ ＮａＣｌＯ４（１％ Ｈ３ＰＯ４を含む）
オーブン温度：４０℃
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
波長：２５４ｎｍ
サンプル量：１０ｍＬ
ヒポキサンチン、グアニンおよびこれらの代謝物であるキサンチンおよび尿酸を、ＨＰＬＣ保持時間により決定した。またこれら各化合物の定量を、ＨＰＬＣチャートのピーク面積値に基づき行った。更に、ヒポキサンチンおよびグアニンの各分解率を下式に従い算出した。
分解率＝［（０．２５（ｍＭ）−Ａ（ｍＭ））／０．２５（ｍＭ）］×１００
Ａ：反応後の培養上清におけるヒポキサンチンまたはグアニンの濃度
（２−ｃ） 結果を下記表２に示す。
表２に示す結果から、本発明微生物はプリン体分解能（ヒポキサンチン、グアニンおよびこれらの代謝物であるキサンチンおよび尿酸の分解能）を有することが明らかである。
【実施例２】
この例は、文献記載の方法（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，１３（１），４７−７４（１９７８））に従い食餌性高尿酸血症モデル動物を作出し、該動物の血清尿酸値に及ぼす本発明微生物の影響を検討したものであり、以下の通り実施された。
尚、本発明微生物としては、ＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）、ＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）およびＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）を利用した。
１．実験動物
６週齢のＷｉｓｔｅｒラット（各群５匹）を用いた。
２．飼育条件
実験動物を搬入後、１週間の検疫を行った。検疫中、飼料としてはＭＦ固形飼料（オリエンタル酵母社製）を与えた。飲水は水道水を自由摂取させた。飼育はステンレス製金網ケージを使用して、１ケージ当たり１匹を飼育した。明暗サイクルは、明期を６：００−１８：００とした。
検疫終了後、６日間の予備飼育を行った。予備飼育中、実験動物にはＡＩＮ−９３Ｇ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ（１９９３）ＡＩＮ−９３ ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｄｉｅｔｓ ｆｏｒ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｒｏｄｅｎｔｓ：ｆｉｎａｌ ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ａｄ ｈｏｃ ｗｒｉｔｉｎｇ ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｎ ｔｈｅ ｒｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＡＩＮ−７６Ａ ｒｏｄｅｎｔ ｄｉｅｔ．，Ｊ．Ｎｕｔｒ．，１２３：１９３９−１９５１）に準拠して調製した飼料（下記表１の標準飼料）を自由摂取させた。飲水は水道水を自由摂取させた。
３．試験スケジュール
予備飼育後、各群の平均体重が同じになるように８群に群分けした各群実験動物（７週齢）を、下記標準飼料およびオキソネート＋ＲＮＡ飼料のそれぞれを用いて８日間飼育した。
即ち、（１）標準飼料群（１群および２群）では飼料としてＡＩＮ−９３Ｇ（標準飼料）を用いた（予備飼育と変化なし）。（２）オキソネート＋ＲＮＡ飼料群（３−９群）では、標準飼料中のコーンスターチの一部をオキソネートカリウムとＲＮＡとに代えて、飼料当たりオキソネートカリウムが２．５ｗ／ｗ％およびＲＮＡが１．０ｗ／ｗ％含まれるように調製したオキソネート−ＲＮＡ飼料を利用した。各飼料の組成を下記表３に示す。
ＡＩＮ−９３Ｇビタミン混合は、２０ｇの重酒石酸コリン／ｋｇを含む。
ＲＮＡはシグマアルドリッチ社製カタログ番号Ｒ６６２５を使用した。
５−９群の実験動物には、試験期間中毎日１回、一夜培養した菌体（ｂ０１８５、ｂ０１９３、ｂ０１９５、ｂ０２２３およびｙ００４６株のそれぞれ、各菌体投与群をそれぞれｂ０１８５群（５群）、ｂ０１９３群（６群）、ｂ０１９５群（７群）、ｂ０２２３群（８群）およびｙ００４６群（９群）という）を遠心後、沈殿を１．０×１０９ＣＦＵ／ｍｌになるように生理食塩水で調製した菌体懸濁液の１．０ｍｌを強制的に経口投与した。尚、３群および４群（対照群）では上記菌体懸濁液の強制的経口投与は行わなかった。
４．採血
試験飼育０日目、２日目および５日目に、各群実験動物の尾静脈よりシリンジを用いて採血した。得られた血液は１，５００×ｇで２０分間遠心分離後、血清を分取し、−８０℃で保存した。
５．血清尿酸値測定
血清尿酸値は、ウリックアシッド−テストワコー（和光純薬工業株式会社製）を用いて、リンタングステン酸法にて測定した。
６．統計処理
結果は平均値±標準偏差で示した。血清尿酸値は対応のないＳｔｕｄｅｎｔのｔ検定を行った。危険率５％未満を有意とした。
７．結果
図１および図２に血清尿酸値の結果を示す。
この結果より、食餌性高尿酸モデル動物の血清尿酸値に対して、ｂ０１８５株、ｂ０１９３株、ｂ０１９５株、ｂ０２２３株およびｙ００４６株をそれぞれ投与したラットは、有意に低値を示すことが明らかとなった。
【実施例３】
以下、本発明組成物の処方例を実施例として示す。
（１） 発酵豆乳飲料の調製
下記処方の各成分を秤量混合して、飲料形態の本発明組成物を調製した。
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１８５発酵豆乳 １００ｍＬ
乳果オリゴ糖（５５％含量） １０．０ｇ
ビタミン・ミネラル 適量
香料 適量
水 適量
全量 １５０ｍＬ
上記ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１８５発酵豆乳は、豆乳（蛋白質含量５ｇ／１００ｍＬ程度）１Ｌに、ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）を１０８個加えて、３７℃で４８時間発酵させたものである。その菌体含量は１×１０９個／ｍＬである。
（２） 発酵乳の調製
下記処方の各成分を秤量混合して、発酵乳形態の本発明組成物を調製した。
乳果オリゴ糖（５５％含量） １０．０ｇ
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１９３発酵乳 １００ｍＬ
ビタミン・ミネラル 適量
香料 適量
水 適量
全量 １５０ｍＬ
尚、ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１９３発酵乳は、牛乳１ＬにラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）を１０８個を加え、３７℃で２４時間発酵させたものである。その菌体含量は１×１０８個／ｍである。
（３） 発酵乳凍結乾燥粉末の調製
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）約１０７個／ｍＬの１ｍＬを用いて、牛乳１００ｇを３７℃で２４時間乳酸発酵させた後、得られた発酵産物（菌体を含む）を凍結乾燥して粉末とした。
上記粉末を用いて、下記処方の各成分を秤量混合して、発酵乳凍結乾燥粉末形の本発明組成物を調製した。その菌体含量は１×１０９個／ｇである。
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０１９５発酵乳凍結乾燥粉末 ２．２ｇ
賦形剤 適量
ビタミン・ミネラル 適量
香料 適量
全量 ２０ｇ
尚、賦形剤としては、コーンスターチ１７ｇを用いた。
（４） 粉末の調製
下記処方の各成分を秤量混合して、粉末形態の本発明組成物を調製した。
カゼイン ４．５ｇ
乳果オリゴ糖（５５％含量） １０．０ｇ
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０２２３凍結乾燥粉末 １．０ｇ
ビタミン・ミネラル 適量
香料 適量
全量 ２０ｇ
尚、ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０２２３凍結乾燥粉末は、ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）を増殖可能な発酵用原料物質である１０％スキムミルク水溶液中で培養（３７℃、２４−４８時間）した後、凍結乾燥することによって得られたものであり、その菌体含量は１０９−１０１０個／ｇである。
（５） 顆粒の調製
下記処方の各成分を秤量混合して、顆粒形態の本発明組成物を調製した。
乳果オリゴ糖（５５％含量） １０．０ｇ
ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０２２３凍結乾燥粉末 １．０ｇ
ソルビトール 適量
ビタミン・ミネラル 適量
香料 適量
全量 ２０ｇ
尚、ラクトバチルスＯＮＲＩＣｂ０２２３凍結乾燥粉末としては、実施例３−（４）と同一のものを用いた。
（６） 菌含有マイクロカプセル
サッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）を実施例３−（４）と同様にして凍結乾燥して得られた凍結乾燥粉末６×１０１０個／ｇを、融点３４℃のヤシ硬化油を融解した中に乳果オリゴ糖と共に分散して、微生物、油脂およびオリゴ糖の混合比が２５％、７０％および５％である融解物を調製した。このものを同心三重ノズルの内側ノズルから平均流速０．３ｍ／ｓで、更にその外側の中間ノズルから融点４３℃のヤシ硬化油と大豆硬化油との混合物の融解液を平均流速０．３ｍ／ｓで、また最外側ノズルから皮膜となるゼラチン／ペクチン溶液（８５／１５ｖ／ｖ）を平均流速０．３ｍ／ｓで、それぞれ冷却され流動している油中に同時に滴下させることにより直径２．５ｍｍの三層構造のシームレスカプセル（１．４×１０９個／ｇカプセル）を試作した。
このものの内容物、内皮膜および該皮膜の重量比は３５：３５：３０であった。
このカプセルを通気乾燥後、更に真空乾燥または真空凍結乾燥を行うことによりカプセル中の水分活性をＡｗ値０．２０以下および熱伝導率０．１６ｋｃａｌ／ｍｈ℃以下にまで低下させた。尚、Ａｗ値は電気抵抗式水分活性測定装置（Ａｗメーター、ＷＡ−３６０、株式会社芝浦電子製作所）にて測定されたものである。また、熱伝導率はフィッチ（Ｆｉｔｃｈ）法で測定したものである。
【産業上の利用可能性】
本発明は、プリン体を分解して血清尿酸値の低減を図る作用を奏する新規な乳酸菌および酵母並びにこれらを含有する飲食品形態および医薬品形態の組成物を提供するものであり、この組成物は、高尿酸血症の予防および治療に有効である。
【図１】
【図２】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有する乳酸菌および酵母からなる群から選ばれる少なくとも１種の微生物を含有する組成物。
【請求項２】
血清尿酸低減組成物である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
飲食品形態である請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
発酵乳、乳酸菌飲料、発酵野菜飲料、発酵果実飲料または発酵豆乳飲料である請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
医薬組成物である請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
微生物が、ラクトバチルス属に属する乳酸菌である請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
乳酸菌が、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）およびラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）からなる群から選択される少なくとも１種である請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
微生物が、サッカロマイセス属に属する酵母である請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
酵母が、サッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）である請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有するラクトバチルス属に属する乳酸菌。
【請求項１１】
ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）またはラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）である請求項１０に記載の乳酸菌。
【請求項１２】
プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有するサッカロマイセス属に属する酵母。
【請求項１３】
サッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）である請求項１２に記載の酵母。
【請求項１４】
血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、請求項１に記載の組成物を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
【請求項１５】
血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、請求項１０に記載の乳酸菌を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
【請求項１６】
血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、請求項１２に記載の酵母を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
【請求項１７】
血清尿酸値の低減のための請求項１に記載の組成物の使用。
【請求項１８】
請求項１に記載の組成物の製造のための、請求項１０に記載の乳酸菌の使用。
【請求項１９】
請求項１に記載の組成物の製造のための、請求項１２に記載の酵母の使用。
【請求項１】
プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有する乳酸菌および酵母からなる群から選ばれる少なくとも１種の微生物を含有する組成物。
【請求項２】
血清尿酸低減組成物である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
飲食品形態である請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
発酵乳、乳酸菌飲料、発酵野菜飲料、発酵果実飲料または発酵豆乳飲料である請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
医薬組成物である請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
微生物が、ラクトバチルス属に属する乳酸菌である請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
乳酸菌が、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）およびラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）からなる群から選択される少なくとも１種である請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
微生物が、サッカロマイセス属に属する酵母である請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
酵母が、サッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）である請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有するラクトバチルス属に属する乳酸菌。
【請求項１１】
ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１８５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００４）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００５）、ラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０１９５（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００６）またはラクトバチルスＯＮＲＩＣ ｂ０２２３（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００７）である請求項１０に記載の乳酸菌。
【請求項１２】
プリン体に対する分解能を有し、血清尿酸値の低減作用を有するサッカロマイセス属に属する酵母。
【請求項１３】
サッカロマイセスＯＮＲＩＣ ｙ００４６（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０００８）である請求項１２に記載の酵母。
【請求項１４】
血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、請求項１に記載の組成物を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
【請求項１５】
血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、請求項１０に記載の乳酸菌を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
【請求項１６】
血清尿酸値の低減処置を要求される患者に、請求項１２に記載の酵母を摂取させる、血清尿酸値の低減方法。
【請求項１７】
血清尿酸値の低減のための請求項１に記載の組成物の使用。
【請求項１８】
請求項１に記載の組成物の製造のための、請求項１０に記載の乳酸菌の使用。
【請求項１９】
請求項１に記載の組成物の製造のための、請求項１２に記載の酵母の使用。
【国際公開番号】ＷＯ２００４／１１２８０９
【国際公開日】平成１６年１２月２９日（２００４．１２．２９）
【発行日】平成１８年７月２０日（２００６．７．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００５−５０７３１９（Ｐ２００５−５０７３１９）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／００９２１２
【国際出願日】平成１６年６月２３日（２００４．６．２３）
【出願人】（０００２０６９５６）大塚製薬株式会社 (230)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１６年１２月２９日（２００４．１２．２９）
【発行日】平成１８年７月２０日（２００６．７．２０）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００４／００９２１２
【国際出願日】平成１６年６月２３日（２００４．６．２３）
【出願人】（０００２０６９５６）大塚製薬株式会社 (230)
【Ｆターム（参考）】
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