【課題】本発明は、複数のウイルスを標的とするまたは複数の腫瘍抗原に特異的である、細胞傷害性Ｔリンパ球の作製と使用のための方法および組成物を包含する。
【解決手段】特定の実施形態では、この作製方法は、活性化Ｔ細胞集団での増殖を促進し、細胞死を減少させるための特定のサイトカイン類の使用を採用し、および／またはガス透過性膜を有する特定のバイオリアクターを採用する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
２つ以上のウイルスから少なくとも１つの抗原を標的とする細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）を作製する方法において、
（１）個体からの樹状細胞（ＤＣ）の集団を複数のプラスミドでヌクレオフェクションし、ここで、複数の各プラスミドは、２つ以上のウイルスの１つからの少なくとも１つの抗原をコードし、それによって、２つ以上のウイルスから少なくとも１つの抗原を発現し、そして提示する樹状細胞の集団を生成する工程；または、
（２）個体からのＤＣの集団をペプチドのライブラリーと接触させ、ここで、前記ペプチドは、全ウイルス抗原の一部または全部をスパンする配列において重複し、それによって、２つ以上の異なる抗原からの少なくとも１つのエピトープを提示するＤＣ（ＡＰＣ）の集団を生成する工程；および
個体からの末梢血単核球細胞（ＰＢＭＣ）を、ヌクレオフェクションされたＤＣ（ＡＰＣ）と接触させて、２つ以上のウイルスからの少なくとも１つの抗原に応答することのできる抗原特異的Ｔリンパ球を生成する工程；および
気体透過性膜を有する容器内の培地中で、抗原特異的Ｔリンパ球を培養し、ここで、培地成分が、ＩＬ−４とＩＬ−７を含み、２つ以上のウイルスから少なくとも１つの抗原を標的とする細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）を生成する工程；
のいずれかを含む方法。
【請求項２】
前記ＣＴＬが、免疫不全の個体に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記個体が、同種間幹細胞移植を受けた、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記ウイルスが、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、メタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、西ナイルウイルス、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記細胞が、注射で投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
前記注射が、静脈内である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
２つ以上の腫瘍抗原を標的とする細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）を作製する方法において、
（１）個体からのＤＣの集団を複数のプラスミドでヌクレオフェクションし、ここで、複数の各プラスミドは、１つ以上の腫瘍抗原の少なくとも１つのエピトープをコードし、それによって、２つ以上の腫瘍抗原から少なくとも１つのエピトープを発現し、そして提示するＤＣ（ＡＰＣ）の集団を生成する工程；または、
（２）個体からのＤＣの集団を、ペプチドのライブラリーと接触させ、ここで、前記ペプチドは、全抗原の一部または全部をスパンする配列において重複し、それによって、２つ以上の異なる抗原からの少なくとも１つのエピトープを提示するＤＣ（ＡＰＣ）の集団を生成する工程；および
個体からの末梢血単核球細胞（ＰＢＭＣ）をＡＰＣと接触させて、２つ以上の腫瘍抗原からの少なくとも１つのエピトープに応答することのできる抗原特異的Ｔリンパ球の集団を生成する工程；および
気体透過性膜を有する容器内の培地中で、Ｔリンパ球を培養し、ここで、前記培地成分が、ＩＬ−７、ＩＬ１２、ＩＬ１５、およびＩＬ６またはＩＬ２７のいずれかを含む工程；
のいずれかを含む方法。
【請求項８】
前記個体が、リンパ腫または白血病に罹患している、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記Ｔ−リンパ球が、個体に投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記細胞が、注射によって投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記注射が、静脈内である、請求項１０に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【公表番号】特表２０１３−５０２２３５（Ｐ２０１３−５０２２３５Ａ）
【公表日】平成２５年１月２４日（２０１３．１．２４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５２６９１９（Ｐ２０１２−５２６９１９）
【出願日】平成２２年８月２４日（２０１０．８．２４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０４６５０５
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０２８５３１
【国際公開日】平成２３年３月１０日（２０１１．３．１０）
【出願人】（３９１０５８０６０）ベイラー　カレッジ　オブ　メディスン (16)
【氏名又は名称原語表記】ＢＡＹＬＯＲ　ＣＯＬＬＥＧＥ　ＯＦ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ
【出願人】（５１２０４７３２４）
【Ｆターム（参考）】