質量スペクトル測定における複数イオン注入
本発明は、質量分析の段階のうちの少なくとも１つにイオン・トラッピングを含む質量スペクトル測定に関する。特に、排他的ではないが、本発明は、イオン貯蔵内に、分析されることになる１つのタイプのイオンの標本を蓄積し、前記イオン貯蔵内に、分析されることになる別のタイプのイオンの標本を蓄積し、前記イオンの組み合わされた標本を質量分析する質量スペクトル測定の方法であって、それぞれのタイプのイオンの以前の測定の結果を基礎としてイオンの目標数を達成するように前記１つのタイプのイオンの前記標本および／または別のタイプのイオンの前記標本を蓄積することを特徴とする。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、質量分析の段階のうちの少なくとも１つにイオン・トラッピングを含む質量スペクトル測定に関する。特に、排他的ではないが、本発明は、先駆物質イオンおよびフラグメント・イオンが分析されるタンデム質量スペクトル測定に関する。
【背景技術】
【０００２】
概して言えば、質量スペクトル計は、分析されることになる分子からイオンを生成するためのイオン源、およびイオンを質量分析器に案内するためのイオン・オプティクスを包含する。タンデム質量スペクトル計は、さらに、第２の質量分析器を包含する。タンデム質量スペクトル測定においては、質量スペクトルの収集によってイオン化分子の構造的解明を行い、その後、第１の質量分析器を使用して１つまたは複数の所望の先駆物質イオンを質量スペクトルから選択してイオンの断片化を生じさせ、その後、第２の質量分析器を使用してフラグメント・イオンの質量分析を行う。概して言えば、第２の質量分析器には精密質量ケイパビリティを伴う質量分析器が好ましい。しばしば、先駆物質イオンの質量スペクトルを獲得するためにも精密質量分析器を使用すること、言い換えると断片化なしに先駆物質の標本を精密質量分析器に渡すことが望ましい。
【０００３】
その方法を、１つまたは複数の追加の断片化の段階（すなわち、フラグメント・イオンの断片化およびそれの断片化等々）を提供するべく拡張することが可能である。これは、一般にＭＳｎと呼ばれ、ｎは、イオンの生成の数を表す。したがって、ＭＳ２は、タンデム質量スペクトル測定に対応する。
【０００４】
タンデム質量スペクトル計は、３つのタイプに分類することが可能である。
（１）空間的に連続、伝送質量分析器の組み合わせに対応する（たとえば、磁気セクタ、クワドラポール、飛行時間型（ＴＯＦ）、通常はそれらの間に衝突セルを伴う）。
（２）時間的に連続、スタンドアロン・トラッピング質量分析器に対応する（たとえば、クワドラポール、リニア、フーリエ変換イオン・サイクロトロン共振（ＦＴ−ＩＣＲ）、静電トラップ）；および
（３）時間的空間的に連続、トラップまたはトラップのハイブリッドと伝送質量分析器のハイブリッドに対応。
【０００５】
本発明は、パルス化精密質量分析器、たとえばＴＯＦ分析器、ＦＴ ＩＣＲ分析器、およびオービトラップ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）質量分析器等の静電トラップ（ＥＳＴ）分析器との使用に特に適している。
【０００６】
これらの分析器の多くは、短い注入サイクルおよびそれに続く比較的長い質量分析段階を有し、特に高分解能における動作時にそれが言える。したがって、それらの感度は、ＲＦマルチポール等の中間イオン貯蔵の使用から大きな利益を得る。
【０００７】
たとえば上記のタンデム質量スペクトル測定のように、精密質量分析器に質量分析の段階が先行することは少なくない。それらの第１段階の質量スペクトル測定は、クワドラポール・トラップまたはそのほかの周知の任意の質量分析器内にイオン・トラッピングを含むことがある。それらの場合、中間イオン貯蔵の使用が、異なる段階の間の反復レートおよびイオン・ビーム・パラメータにおける差異によって生じるイオン損失を回避する。中間イオン貯蔵を含むタンデム質量スペクトル計の例は、ジャーナル・オブ・プロテオメ・リサーチ（Ｊ． Ｐｒｏｔｅｏｍｅ Ｒｅｓ．）（３（３）（２００４年）、ｐｐ６２１〜６２６）、アナリティカル・ケミストリ（Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ．）（７３（２００１年）ｐ２５３）、ＷＯ２００４／０６８５２３、米国特許出願第２００２／０１２１５９４号、米国特許出願第２００２／００３０１５９号、ＷＯ９９／３０３５０、およびＷＯ０２／０７８０４６の中に見られる。そのほかのタンデム構成もまた可能である。
【０００８】
質量分析器として使用されるイオン・トラップは、常に、その中に導入されてトラップされるイオンの総数に敏感である。明らかに、可能な限り多くのイオンを蓄積することが、収集されるデータの統計を向上させるために望ましい。しかしながら、この願望は、より高いイオン濃度においては飽和が存在し、それが空間電荷効果を生むという事実と相容れない。これらの空間電荷効果は質量の分解能を制限し、測定される質量対電荷比のシフトを生じさせ、その結果、質量、さらには強度の不正確な割り当てを導く。特に、イオンによる中間イオン貯蔵の過充填は、その後に続いて獲得される質量スペクトルにおけるピークのシフト、トラッピング質量分析器における質量精度の損失、およびＴＯＦ質量分析器内の検出器の飽和を、中間イオン貯蔵自体の中の質量抑圧効果のほかに生じさせる。
【０００９】
この問題に取り組む１つのテクニックは、一般に自動利得コントロール（ＡＧＣ）と呼ばれている。ＡＧＣは、質量分析器に収容できるイオンの量を調整するための到来イオン・ストリームの情報の使用に対する一般的な名前である。この情報は、スペクトル情報に基づいて質量範囲を選択するためにも使用できる。イオン・トラップ内に蓄積される総イオン存在量は、次のようにしてコントロールできる。最初にイオンが既知の時間期間にわたって蓄積され、迅速な総イオン存在量測定が実行される。その時間期間およびそのトラップ内の総イオン存在量の知識は、その後に続くイオン充填がセル内に最適イオン存在量を作り出すための適切な充填時間の選択を可能にする。このテクニックは、米国特許第５，１０７，１０９号の中でさらに詳細に述べられている。
【００１０】
初期イオン存在量を測定する別の変形も知られており、それには、先行するスペクトル内の総イオン電流の使用（米国特許第５，５５９，３２５号）、トラップを通して検出器に向けてイオンが伝送される短いプレスキャンの使用（ＷＯ０３／０１９６１４）、およびＦＴ ＩＣＲに先行して貯蔵マルチポール内に貯蔵されるイオンの一部の測定（米国特許第６，５５５，８１４号）が含まれる。
【００１１】
精密質量分析器を伴うタンデム質量スペクトル計のほとんどにおいては、蓄積されるイオン母集団がまったくコントロールされていない。ジャーナル・オブ・プロテオメ・リサーチ（Ｊ． Ｐｒｏｔｅｏｍｅ Ｒｅｓ．）（３（３）（２００４年）、ｐｐ６２１〜６２６）の場合では、精密質量分析器内への注入に先行して総イオン数だけが、自動利得コントロールを使用してコントロールされ得る。ＷＯ２００４／０６８５２３は、ＦＴ ＩＣＲ質量分析器にすべてのイオンを注入する前に、線形トラップから１つのイオン・タイプの複数充填を蓄積するために使用される中間イオン貯蔵を含む実施態様を開示している。各充填は、中間イオン貯蔵内へのイオンの注入に先行する、それ独自の自動利得コントロール・プレスキャンを有する。しかしながら、その主要な応用は、単一イオン・トラップの動作に関する総イオン貯蔵容量の増加に過ぎない。
【００１２】
これは、いくつかの現実の問題を手つかずのまま残す。しばしば、単一タイプのイオン、すなわち単一のｍ／ｚ値またはｍ／ｚ範囲を有するイオンを超えて分析することが望まれる。異なるタイプのイオンが、任意の個々の実験に従った異なる要求から導かれることがある。たとえば、異なるタイプのイオンが、ある標本内に存在する異なる分子から、タンデム質量スペクトル測定において断片化された標本イオン（すなわち、先駆物質およびフラグメント・イオンの分析）から、または標本イオンおよび較正物質イオン（すなわち、質量スペクトルの補正のために使用されるロック・マス）から生じることがある。最後のケースは、内部較正物質の使用が、追加されるかまたは到来する標本内に本来的に存在する分析物を使用する、質量精度（特に、ＴＯＦおよびＥＳＴについて）を改善するもっとも信頼できる方法の１つであるとして知られていることから非常に重要である。しかしながら、たとえば質量スペクトル計に結合される液体分離の場合のように分析物の信号が急速に変化するときには、内部較正物質の所望の存在量を得ることが非常に困難である。これは、較正物質の存在量の精度が非常に重要であることから、有意な問題を呈する。つまり、存在量が低すぎるときには、その較正物質が質量精度を改善するための役に立たず、存在量が高すぎるときには、その較正物質が中間イオン貯蔵内の空間電荷容量のほとんどを占有し、したがって標本の利用度を低減する。また、選択候補の成分（たとえば、関心不純物）を用いたイオン母集団の選択的な富化も非常に困難である。
【００１３】
質量スペクトルの内部較正をねらいとして、２またはそれより多くのイオン源からのイオンを組み合わせる２つの方法が開発された。ウインジャー（Ｗｉｎｇｅｒ）ほか著「アメリカン・ソサエティ・フォア・マス・スペクトロメトリ（Ａｍｅｒ． Ｓｏｃ． Ｍａｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．）」（第４４回カンファレンス会報、ポートランド、１９９６年、ｐ．１１３４）は、２つの方向からＩＣＲセル内に導入される２つのソースからのイオンの同時トラッピングをはじめ、外部的に注入されるイオンを伴うＩＣＲセル内の電子イオン化によって生成されるイオンの組み合わせを明らかにした。米国特許第５，８２５，０２６号は、２つのイオン源からのイオンが質量分析器内への導入のために選択されることを可能にする機械的に切り替え可能な構造を明らかにしている。
【００１４】
【非特許文献１】ジャーナル・オブ・プロテオメ・リサーチ（Ｊ． Ｐｒｏｔｅｏｍｅ Ｒｅｓ．）（３（３）（２００４年）、ｐｐ６２１〜６２６）、アナリティカル・ケミストリ（Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ．）（７３（２００１年）ｐ２５３）
【非特許文献２】ウインジャー（Ｗｉｎｇｅｒ）ほか著「アメリカン・ソサエティ・フォア・マス・スペクトロメトリ（Ａｍｅｒ． Ｓｏｃ． Ｍａｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．）」（第４４回カンファレンス会報、ポートランド、１９９６年、ｐ．１１３４）
【特許文献１】ＷＯ２００４／０６８５２３
【特許文献２】ＷＯ９９／３０３５０
【特許文献３】ＷＯ０２／０７８０４６
【特許文献４】米国特許第５，１０７，１０９号
【特許文献５】米国特許第５，５５９，３２５号
【特許文献６】ＷＯ０３／０１９６１４
【特許文献７】米国特許第６，５５５，８１４号
【特許文献８】米国特許第５，８２５，０２６号
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
この背景に対して、また第１の態様から、本発明の方法は、イオン貯蔵内に、分析されることになる１つのタイプのイオンの標本を蓄積し、前記イオン貯蔵内に、分析されることになる別のタイプのイオンの標本を蓄積し、前記イオンの組み合わされた標本を質量分析する質量スペクトル測定の方法であって、それぞれのタイプのイオンの以前の測定の結果を基礎としてイオンの目標数を達成するように前記１つのタイプのイオンの前記標本および／または別のタイプのイオンの前記標本を蓄積することを特徴とする。
【００１６】
本発明は、質量分析のために使用されるイオン蓄積のうちの少なくとも１つが、ほかの蓄積と実質的に異なるイオン組成を有する方法を導入することによって従来技術の有用性を拡張する。イオンの『タイプ』は、単一のｍ／ｚ値またはｍ／ｚ値の範囲に対応することができる。ｍ／ｚ値の範囲は、単一のイオン種を占めるべく、またはその範囲内に入る類似のｍ／ｚ値を有する２またはそれより多くのイオン種を含めるべく選択できる。基本的に、２つのタイプのイオンは、繰り返し述べているｍ／ｚ値または範囲に単に対応するというよりは、異なる組成を有する必要がある。
【００１７】
イオン貯蔵の逐次充填の使用は、いくつかの利益を提供する。各充填について充填条件（伝送およびイオン貯蔵内における取り込み）を独立に最適化でき、非常に異なる質量を伴ったイオンの貯蔵が要求されている場合（たとえば小分子に対するタンパク質）には特に有用である。また逐次充填は、異なる充填のために選択された異なる質量範囲の独立操作も可能にする。たとえば、ＲＦ電位を使用して、ある充填のための低質量カットオフ（たとえばマトリクスまたは溶剤イオンの除去）を増加し、その後、その次の充填のために低減することができる。本発明は、単一の入口開口だけが利用可能な場合に、正および負のイオン両方のトラッピングも可能にする。また、狭い質量の窓だけ（たとえば、先駆物質の選択について、それが線形トラップまたはクワドラポールを使用して獲得されたか否か）を伝送するべく動作する質量分析の段階が手前にある場合には、この方法が、いくつかの異なる質量の窓（または対応する先駆物質の断片）の貯蔵を可能にする。
【００１８】
これはまた、システムのコンポーネントの並列動作が望まれており、システムの異なる部分が異なるタイミング要件を有する場合、たとえば同時検出のために、より多くの異なるイオンを蓄積することによって関連する遅延を使用し、それによって遅い検出を伴うシステムを適合させる場合にも有用である。
【００１９】
マトリックス支援レーザ脱離イオン化法（ＭＡＬＤＩ）のようなパルス化イオン源の場合には、逐次充填が、標本スポットからの分析物のイオンの最初の充填、および別の標本スポットからの較正物質化合物のイオンの２番目の充填を可能にする（充填の間の時間は、標本スライドを一方の標本から他方に移動させるに充分である）。
【００２０】
イオンは、異なる方法で準備でき、たとえば１つのタイプのイオンを先駆物質イオンとし、別のタイプをフラグメント・イオンとすることができる。反応タイプおよび条件の選択等のイオンを生成する条件は、各タイプについて最適化でき、たとえばＣＩＤ、ＩＲＭＰＤ、ＥＣＤのような衝突方法における衝突エネルギおよび断片化における多衝突および単衝突のいずれも変更することができる。
【００２１】
先行する測定、またはテスト測定は多くの異なる方法で実行でき、それには、電流検知グリッドの使用、誘導電流、散乱イオン、２次電子、または質量スペクトル計によって以前に獲得された１つまたは複数の質量スペクトルの使用が含まれる。オプションとして、この方法は、第１および第２のタイプのイオンのうちの特定のタイプについて、分析されることになる前記特定のタイプのイオンのテスト標本をテスト注入時間にわたって蓄積し、そのようにして蓄積された前記特定のタイプのイオンの存在量を測定し、前記テスト注入時間および前記特定のタイプのイオンの前記測定された存在量を基礎として前記特定のタイプのイオンの所望の目標存在量を結果としてもたらすことになる目標注入時間を決定し、前記特定のタイプのイオンは、前記組み合わされた標本の質量分析の前に前記目標注入時間にわたって前記イオン貯蔵内に蓄積されることを含む。
【００２２】
この方法においては、充填の間に獲得される存在量が自動利得コントロール（ＡＧＣ）を使用してコントロールされる。このアプローチは、本発明の好ましい実施態様に適用されているとおり、以下の実験的な発見に基づいている。衝突冷却に起因して、蓄積されたイオンの最終エネルギおよび空間分布が、先行するイオンの処理、たとえばどのように自動利得コントロール・プレスキャンが獲得されるか、充填の数、充填の順序等に依存しない。この最終エネルギおよび空間分布は、イオン母集団の組成に依存し得るが、ほとんどの精密質量分析器の質量精度に掛かるもっとも重要な影響は、注入されたイオンの総数によって示される。この数がコントロールの下にあれば、直ちに高い質量精度が達成可能になる。
【００２３】
それに加えて、これは、別々に収集されたイオンの存在量を、測定器のダイナミック・レンジと整合させる補助となる。
【００２４】
１つのイオン・タイプの蓄積時におけるＡＧＣの実装をはじめ、ＡＧＣは、同様に別のイオン・タイプの蓄積のためにも実装できる。さらに、以下に述べるＡＧＣに対するオプションの改良は、第１または第２のイオン・タイプのいずれか、または両方に関して実装できる。
【００２５】
方法ステップの順序は、本発明の範囲から逸脱することなく変更できる。たとえば、第１のイオン・タイプが蓄積され、第１の目標注入時間が決定され、それに第２のイオン・タイプの蓄積および第２の目標注入時間の決定が続き、その後に第１および第２のイオン・タイプが、それぞれの目標注入時間に従って蓄積されてもよい。それに代わり、第２のイオン・タイプのための目標イオン注入時間の決定に先行して、第１のイオン・タイプが、その目標注入時間に従って蓄積されてもよい。
【００２６】
テスト標本および特定のタイプのイオンは、異なるイオン貯蔵に蓄積できる。たとえば、テスト標本をイオン・トラップ内に蓄積できる。このイオン・トラップは、その後、その特定のタイプに属する選択されたイオンが、質量分析器または中間イオン貯蔵に渡され、そこでそれらが蓄積されることを可能にするべく使用できる。
【００２７】
オプションとして、この方法は、イオン源を動作させて特定のタイプのイオンを生成させ、その後、生成されたイオンを、テスト注入時間だけ、または目標注入時間だけのいずれかにわたるか、またはその両方にわたる蓄積のためにイオン貯蔵に直接伝送することを包含できる。ソースから直接イオンを蓄積するのではなく、イオンを別の処理から蓄積してもよい。たとえば、特定のタイプのイオンを生成するべく反応セル内においてイオンが反応され、その後それらが蓄積されてもよい。専用反応セルを使用してもよく、その場合においては、特定イオンが、テスト注入時間および／または目標注入時間にわたって蓄積されるべくイオン貯蔵に向けられる。それに代わり、特定のタイプのイオンが反応結果として蓄積されるように、共通構造がイオン貯蔵および反応セルの両方を提供することもできる。この場合においては、テスト注入時間および／または目標注入時間にわたって反応が進行することを可能にできる。反応は、反応セル内に存在する気相との標本イオンの反応等のように、多くの形式を取ることができる。
【００２８】
好適には、特定のタイプのイオンおよびそのほかのタイプのイオンの、組み合わされた所望の目標存在量が、イオン貯蔵の貯蔵容量または最終質量分析器の動作のためのイオンの最適数と実質的に整合する。イオン貯蔵の貯蔵容量は、要求されるイオン貯蔵のパフォーマンスに関係する傾向にある。たとえば、低下したパフォーマンスが許容可能であれば、より高い容量を使用することができる。この方法においては、イオン貯蔵内に蓄積されるイオンの総数が最適、言い換えれば空間電荷効果が許容不能となることなく最大可能となるか、かつ／または検出器のダイナミック・レンジが最適に使用されるように、トラップされたイオンの量が分配される。
【００２９】
好ましくはこの方法が、単一イオン源を動作させて両方のタイプのイオンを生成することを包含する。イオン源は、２つのタイプのイオンを生成するために共通ソース材料を使用することさえできる。たとえば、２つのタイプのそれぞれを、そのイオン源によって生成されるイオンの範囲から代わるがわる選択してもよい。当然のことながら、別体のイオン源を使用して２つのタイプのイオンのそれぞれを生成してもよい。
【００３０】
質量スペクトル計は、それぞれの蓄積期間にわたって両方のタイプのイオンの蓄積に有利な条件の下に動作させることができる。言い換えると、質量スペクトル計は、部分的に、または全体的に、１つまたは別のタイプのイオンの生成または選択が有利であるように動作させることができる。
【００３１】
質量スペクトル計には多くの異なる動作パラメータがあり、いずれかの特定イオン・タイプの蓄積が有利であるように調整できる。たとえば、質量スペクトル計のイオン源は、１つまたは別のタイプのイオンを優先して生成するべく動作させることができる。これは、イオン貯蔵ステップにおけるそのイオンの蓄積と同時に行われてもよく、そのようでなくてもよい。この点を明らかにするため、蓄積されるイオンが、その後に中間イオン貯蔵に排出される前に、最初に、イオン源によって逐次的に生成されるイオンがまとめてイオン・トラップにトラップされると考えることができる。この方法の拡張として、第１のイオン源が第１のタイプのイオンを生成するべく動作され、およびその後に続いて第２のイオン源が第２のタイプのイオンを生成するべく動作されるようにできる。
【００３２】
どのようにして質量スペクトル計が１つのイオン・タイプの蓄積に有利であるように動作され得るかについての追加の例として、１つまたは別のタイプのイオンを選択するべく質量フィルタを動作させることができる。質量フィルタは、多くの形式の１つをとることができる。質量フィルタは、アイソレーション・モードで動作するイオン・トラップに対応することができ、言い換えると、イオンがトラップされ、電圧が印加され、それが結果として、特定のｍ／ｚ範囲内のイオンのみの選択をもたらす。質量フィルタは、たとえば、必要なｍ／ｚ値のイオンだけが通過できるようにＤＣおよび／またはＡＣ電圧を設定することによって第１のタイプおよび／または第２のタイプのイオンを優先して伝送するべく動作されるイオン・オプティクスに対応できる。
【００３３】
オプションとして、イオンのテスト標本のいずれかまたは両方が追加のイオン貯蔵内に蓄積され、その後、質量分析のための別体の質量分析器に排出されるようにしてもよい。
【００３４】
本発明の応用においては、イオン・タイプのうちの１つが内部較正物質になり、別のイオン・タイプが分析されるべき標本になる。
【００３５】
この方法は、タンデム質量スペクトル測定およびＭＳｎに使用できる。したがって、１つのタイプのイオンが親イオンになり、別のタイプが生成物イオン（または断片化、これらの用語は同義語である）になる。オプションとして、１より多くのタイプの親イオンからの生成物イオンが蓄積されるようにできる。
【００３６】
上記の方法は、２より多くの蓄積および２より多くのタイプのイオンに拡張できる。たとえば、３またはそれより多いタイプのイオンを逐次的に蓄積できる。さらに、単一より多くの蓄積を使用して、特定のタイプのイオンを得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３７】
本発明がより容易に理解され得るように、例示の手段としてのみ、添付図面を参照して好ましい実施態様を説明する。
【００３８】
本発明を、そのいくつかの態様に従って実施できる周知のタンデム質量スペクトル計を図１に示す。パルス化または連続イオン源１０からのイオンが、質量分析および質量選択機能を有し、かつオプションとして断片化を実行できる質量分析器２０に収容される。それに代えて、断片化の実行に別体の反応セルが使用されてもよい。イオン源１０は、ＭＡＬＤＩ源、エレクトロスプレイ源、または任意のそのほかのタイプのイオン源とすることができる。それに加えて、複数のイオン源を使用してもよい。また質量分析器２０の手前には、任意数の質量分析段および／またはイオン操作を先行させることができる。
【００３９】
本発明のすべての実施態様は、自動利得コントロール検出器３０を伴い、適切な数のイオンをトラップするべく動作できる。周知の任意のＡＧＣ方法を使用して、その後に続く充填のための最適イオン化時間を決定できる。この出願においてはＡＧＣが、もっとも一般的に、イオンのセットのサンプリングに基づいて最適充填時間を決定する方法として解釈される。したがって、これは、プレスキャンまたは以前のスキャンからの情報を基礎とする方法を含むだけでなく、そのほかの、イオン・ビームを（好ましくは一様に）インタセプトする電流検知グリッド等のイオンの数を測定する方法も含まれる。例えば、誘導電流を検知する方法、開口上の散乱イオンを検知する方法、２次電子を検知する方法、および質量分析器２０によって行われた以前の分析的スキャンを使用する方法などが含まれる。また可能な方法には、ここで以前に述べたものも含まれる。最適イオン化時間を使用して生成されたイオンは、質量分析器２０内において、たとえば衝突誘導解離によって断片化され得る。イオンは、質量分析器２０から転送オプティクス（たとえば、ＲＦマルチポール４０）を介して中間イオン貯蔵５０内に転送され、それにおいてそれらが取り込まれ、トラップされる。中間イオン貯蔵５０の後には、精密質量分析器６０が続く。
【００４０】
本発明の第１の実施態様は、概ね図１に類似の、図２に示されているタンデム質量スペクトル計上において実施される。この実施態様においては、質量分析器２０がイオン・トラップ２１に対応する。イオン・トラップ２１は、米国特許出願第２００３／０１８３７５９号内に記述されているとおりの、デュアル検出器（３０’および３０”）に対するラジアル排出を伴う線形セグメント化クワドラポールである。中間イオン貯蔵５０は、ＲＦ電圧で動作してトラッピング・フィールドを作り出すマルチポール５１を含む。マルチポール５１の両端の電極は、それぞれゲーティング電極５２およびトラッピング電極５３として動作する。中間イオン貯蔵５０は、管５４を介して、好ましくは１０−２ｍｂａｒより低い気体が充填される。イオンが貯蔵５０内に蓄積されるとき、トラッピング電極５３およびゲーティング電極５２に掛けられる高い電圧によって反射され、その結果、それらがマルチポール５１内に残存する。反射間の遷移の間に、トラップされたイオンは、それらのエネルギを衝突で失う。
【００４１】
ここで注意する必要があるが、より低い、たとえば１０−３ｍｂａｒに満たない圧力においては、イオンがトラップ２１からマルチポール５１へ、単一より多くの通路を必要とすることがあり、言い換えるとイオンが、トラップ２１の端とマルチポール５１の間において複数の反射を必要とすることがある。本件出願人の同時係属特許出願ＧＢ０５０６２８７．２は、その種の反射トラッピングを述べている。基本的に、イオンは、衝突を通じてエネルギを失い、最小のポテンシャル・ウェルと所望のロケーションの一致を確保することによってそのロケーションに蓄積される（この場合は中間イオン貯蔵５０内）。
【００４２】
標本の質量分析は、図２の質量分析器６０を使用し、以下のとおり、本発明の実施態様に従って実行される。
【００４３】
イオン源１０によって生成された第１のタイプのイオンの標本が、あらかじめ決定済みの時間間隔にわたって第１の質量分析器２０内に収容される。質量分析器２０内の総イオン存在量が、その後、ＡＧＣ検出器３０を使用して測定される。
【００４４】
プロセッサまたはその類（図示せず）が所望のイオン存在量の達成に求められる必要時間間隔を計算する。概して言えば、このイオン存在量は、あらゆる特定トラッピング・ボリュームの過充填の結果として招かれる空間電荷効果を念頭に置いた精密質量分析器６０または中間イオン貯蔵５０のための最適イオン存在量に関係する。第１のタイプのイオンについての所望のイオン存在量は、その後に続くほかのタイプのイオンの充填を考慮して、全体の最適イオン存在量の部分になる。質量分析器２０が、中間イオン貯蔵５０および／または質量分析器６０より小さい容量を有する場合には、所望のイオン存在量の達成に質量分析器２０の充填が１回を超えて必要になることがある。
【００４５】
したがって、イオン源１０が、所望のイオン存在量を達成するべく必要な時間間隔にわたって再び質量分析器２０を充填し、そこでそれらがトラップされる。その後、イオンがイオン・オプティクス４０を介して中間イオン貯蔵５０に排出され、そこでそれらが再度トラップされる。したがって、イオン処理の第１サイクルは、中間イオン貯蔵５０内にトラップされるイオンの第１のタイプの所望の存在量を伴って完了する。
【００４６】
この動作の次のサイクルにおいては、イオン・トラップ２１が、異なる実験シーケンス、たとえば単一ｍ／ｚ比の分離、気体衝突における断片化等を実行できる。この実験もまた、結果として得られるイオンの数がコントロールされて第２のタイプのイオンについて所望の存在量が達成されるように、ＡＧＣコントロールの下において実行される。このシーケンスが終了した後に、イオンが中間イオン貯蔵５０に転送されるが、そこには、以前のサイクルからのイオンが存在している。第２の充填からのイオンは、衝突の中でそれらのエネルギを失い、第１の充填からのイオンとまったく同じ方法で貯蔵される。中間イオン貯蔵５０のマルチポール５１内にすでに貯蔵されているイオンの数が、その空間電荷容量に近くない限り、貯蔵プロセスが同じ方法で行われる。しかしながら、マルチポール５１の空間電荷容量は、通常、１０７イオンまたはそれを超える。これは、一般に精密質量分析器の許容可能な動作に許されているより高い。イオンは、その後、質量分析のために精密質量分析器６０に排出される。
【００４７】
質量分析器２０は、イオン・トラップ２１として上で述べられている。質量分析器２０が伝送タイプ（たとえば、クワドラポール質量スペクトル計）のものである場合には、イオン・オプティクス４０が、ＡＧＣプレスキャンの間に、イオンが中間イオン貯蔵５０に入ることを止め、イオンの流れを変えてＡＧＣ検出器３０に到達させるような方法で構成される必要がある。
【００４８】
伝送タイプの質量分析器２２を伴う質量スペクトル計の実施態様が図３に示されている。この実施態様においては、好適に、クワドラポール質量分析器２２にＲＦ専用衝突セル２３が続いている。中間イオン貯蔵５０の適切な充填時間が、ＡＧＣ検出器３０によってとられるイオン存在量測定から導き出される。その後、イオン・オプティクス４０が伝送モードに切り替えられて、イオンが、この持続時間にわたって中間イオン貯蔵５０のマルチポール５１に入ることが許され、それにおいてそれらが前述のとおりにトラップされる。その後、イオン・オプティクス４０が再び拒絶モードに切り替えられて、そこで第１の充填が終わる。
【００４９】
トラッピング質量分析器２２に関して前述した充填プロセスとの唯一の相違は、質量分析器２２とマルチポール５１の間における複数の経路の提供という、よりおおきな困難によって述べられる。したがって、衝突セル２３が存在しないときには、より高い気体圧力がマルチポール５１内において好ましい。
【００５０】
第２の充填については、質量分析器２２が、異なるｍ／ｚ値またはｍ／ｚ範囲を伝送するべく切り替えられ、マルチポール５１の充填を行うサイクルが反復される。各充填は、それ独自のＡＧＣプレスキャンを、イオンが中間イオン貯蔵５０に入ることが許される前に有し、各イオン・タイプについて所望のイオン存在量が達成されることが保証される。
【００５１】
マルチポール５１内における衝突冷却に起因して、トラップされたイオンの最終エネルギおよび空間分布は、質量分析器２２のタイプ、充填の数、充填の順序等に依存しない。しかしながら、それが、イオン母集団の組成、衝突気体、および中間イオン貯蔵５０の動作パラメータに依存することはある。特に重要なことは、貯蔵されたイオンと衝突気体内の揮発性汚染物質の間にコントロールされていない相互作用が存在しないことの確保である。
【００５２】
必要な数の充填（２より多いこともある）の後、中間イオン貯蔵５０の電圧が、すべての貯蔵済みイオンが一斉に精密質量分析器６０内に注入されるような方法で変更される。中間イオン貯蔵５０の実際の実施態様は、対応する質量分析器６０の受け入れと整合しなければならない。
【００５３】
ＦＴ ＩＣＲ質量分析器７０を伴うタンデム質量スペクトル計の好ましい実施態様が図４に示されている。イオン源１０、質量分析器２０（トラッピング・タイプ２１または伝送タイプ２２のものとすることができる）、ＡＧＣ検出器３０、およびイオン・オプティクス４０が略図的に示されており、それらは、図２または３のいずれかに従う。図４の中間イオン貯蔵５０は、好ましくは２つのセグメント５１’および５１”を包含するマルチポール５１を含む。後者は、よりトラッピング電極５３の近くに配置される。貯蔵の間は、この後者のセグメント５１”が、より低いＤＣオフセット（正イオン用）を有し、その結果、イオンが主としてその長さに沿って滞留する。ＦＴ ＩＣＲセル内へのイオン注入については、電極５３上の電圧がセグメント５１”のオフセットより下に下げられ、すべての貯蔵済みイオンがイオン案内６１内に、さらにその後、磁石８０（好ましくは超電導磁石）の中央にあるＦＴ ＩＣＲセル７０内に収容される。イオンがセル７０に入った後は、それらが従来的な方法で、すなわち端の電極７１、７２上の電圧を上昇することによってトラップされる。検出およびデータ処理が、周知の従来技術に従ってそれに続く。
【００５４】
オービトラップ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）質量分析器等の静電トラップ分析器１００を伴うタンデム質量スペクトル計の好ましい実施態様が図５に示されている。この実施態様においては、中間イオン貯蔵５０が、内側電極５６内にスロットを伴う湾曲したクワドラポール５５を含む。イオン注入に先行して、開口５２および５３上の電圧を上昇させることによってクワドラポール５５の軸に沿ってイオンを絞ることができる。オービトラップ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）質量分析器１００へのイオン注入については、クワドラポール５５のＲＦ電圧が、周知のとおりオフに切り替えられる。パルスが電極５６、５７、および５８に印加され、その結果、横行電界がイオンを湾曲したイオン・オプティクス９０内に加速する。結果として得られる収束イオン・ビームが注入スロット１０１を通ってオービトラップ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）質量分析器１００に入る。イオン・ビームは、中心電極１０２上の増加する電圧により軸に向かって絞られる。注入スロット１０１の時間的空間的集束に起因して、イオンがコヒーレントな軸方向発振を開始する。これらの発振は、電極１０３上にイメージ電流を生成し、それが、ＷＯ０２／０７８０４６および米国特許第５，８８６，３４６号の中で述べられているとおりに増幅され、処理される。
【００５５】
ＴＯＦ質量分析器１２０を伴うタンデム質量スペクトル計の好ましい実施態様が図６に示されている。この実施態様において、中間イオン貯蔵５０の構成および動作は、図５のそれに類似である。図５の実施態様とは対照的に、追加の集束イオン・オプティクス１１０が、収束イオン・ビームを、より小さい角度の広がりを伴うビームに変換する。このビームは、その後、周知の任意のタイプとすることができ、かつ単一または複数の反射のいずれかを伴うＴＯＦ質量分析器１２０内において分析される。また、非常に浅い湾曲を伴って、すなわちまっすぐまたはほとんどまっすぐなロッドを伴って中間イオン貯蔵５０内にクワドラポール５５を使用することも可能である。
【００５６】
本発明に従ったタンデム質量スペクトル計の別の好ましい実施態様が図７に示されている。イオン源１０からのイオンが、オプションのイオン案内またはイオン・オプティクス１２を通って第１のイオン・トラッピング質量分析器２０、３０に案内される。これは、前述したとおり、プレスキャンの実行、検出器３０を用いたＡＧＣの実行、イオンの処理の選択および操作に使用できる。質量分析器２０から、オプションのイオン案内またはイオン・オプティクス４０を通って中間トラップ５０にイオンが転送される。転送方法は、たとえば、本件出願人の同時係属特許出願ＧＢ ０５０６２８７．２の中で述べられている多反射トラッピング方法、本件出願人の同時係属特許出願ＷＯ２００４／０８１９６８の高速ワイドレンジ注入、移動仮想イオン・トラップ転送、またはそのほかの任意の適切な転送方法とすることが可能である。中間トラップ５０は、超電導磁石８０の内側において、好ましくはワンチェク（Ｗａｎｃｚｅｋ）ほか（インターナショナル・ジャーナル・オブ・マス・スペクトロメトリ（Ｉｎｔ． Ｊ． Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．）「イオン・プロセシーズ（Ｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ）」、８７（１９８９年）、２３７〜２４７）によって提案されているとおり、ＩＣＲセル１４０の近くに配置される。中間トラップ５０は、磁気トラップ、ＲＦトラップ、または好ましくはＲＦ貯蔵および強い磁界を伴ういわゆる『組み合わせトラップ』、たとえば両端にトラッピング・プレートを伴う短セグメント化マルチポールＲＦイオン案内とすることが可能である。
【００５７】
この中間トラップ５０は、コンポーネント１２〜５０によって準備され、選択されたイオン源１０からの複数の注入の収集に使用される。所望のイオン母集団に到達すると、イオンが、オプションのイオン・オプティクス、イオン案内、および差動圧力段を通ってＩＣＲセル１４０に向けて、その後に続く貯蔵および検出のために排出される。本発明のほかの利点に加えて、この構成は、特に、一般にＦＴ−ＩＣＲ内に見られる飛行時間問題の回避に適しており、したがってＦＴ−ＩＣＲセル１４０内に、広い質量範囲をカバーし、かつ注入される成分の期待強度比を有することが可能なイオン母集団を作ることを可能にする。
【００５８】
この実施態様に従った中間イオン貯蔵５０の複数貯蔵の可能性のある応用は、限定ではないが以下を含む。
【００５９】
１． 内部較正物質の信頼できる導入
この場合、イオン貯蔵の１つが、内部較正物質のイオンの蓄積だけに供される。
【００６０】
『ロック・マス』としても知られる内部較正物質の使用は、多くの質量スペクトル計の質量精度を向上させる。ロック・マスは、多様な方法で導入可能である。たとえば、内部較正物質を、分析されることになる標本と同じイオン・ストリーム内に存在し、それだけが富化または除去される、たとえばクロマトグラフィ内に遍在する背景イオンとすることができる。それに代えて、化学反応を使用して較正物質が生成されてもよい。内部較正物質がイオン噴霧器または『デュアル噴霧器』等の異なるイオン・ストリームから獲得されてもよく、ＣＩによるロック・マスの生成または強度において整合されるようにできる。システムに導入されるロック・マスの量が分析物の量に対して適合可能であることが望ましい。
【００６１】
質量スペクトル計は、（ｉ）標本がＡＧＣを使用して所望の存在量まで導入され、（ｉｉ）基準がＡＧＣを使用して所望の存在量まで導入され、かつ（ｉｉｉ）以前に導入されたイオンがともに質量分析されるように動作させることができる。
【００６２】
質量分析器２０は、必要なイオン存在量が達成されるまで、較正物質に対応する狭いｍ／ｚ窓（好ましくは１Ｔｈ）だけを選択する。この必要イオン存在量は、総イオン存在量の固定比（たとえば１０％）とすることが可能であるが、必要質量精度によって負わされる最小値（通常、質量分析器に応じて、質量精度０．５〜２ｐｐｍに対し、１，０００〜１０，０００イオン）より小さくするべきではない。
【００６３】
ロック・マスおよび標本は、異なる『目標』イオン存在量を有することができ、その場合においては、１より多くのロック・マスの使用が有利となることがある。複数のロック・マスは１つのソース／注入からの獲得、および適切な波形による選択ができる（マルチ−イオン分離、たとえばＳＷＩＦＴ）。この複数ロック・マスは、別々に注入されてもよい。
【００６４】
基準を使用して質量スペクトルを改善することができ、またオプションとして、解釈がユーザにとってより好都合となるように基準質量の表示を抑圧することもできる。
【００６５】
複数親ＭＳ／ＭＳ、質量範囲の拡張、およびＭＳ／ＭＳスキャンにおける較正イオンとしての親スペクトル（フル・スキャン）からの追加の質量の使用（選択されたイオン（１つまたは複数）および異なるイオン（１つまたは複数）のＭＳ／ＭＳを収集する）といった、より高度な実験が可能である。このほかの、ＡＧＣの使用を利用するスキームを実装してもよい。たとえば、較正物質（１つまたは複数）のための目標存在量の計算を、プレスキャン情報、スイフト波形またはそのほかの、基準質量パラメータの選択、またはスマートなプレスキャン順序に応じて行うことができる。
【００６６】
先駆物質スキャン・イオンまたはそのほかの較正イオンを生成物イオンとともに収集することは、現在のほとんどのＭＳｎデバイスに見られる重要な問題を解決する。この問題は、生成物スペクトル内への較正質量の導入であり、通常は、較正質量が分離または断片化の間に失われる。
【００６７】
２． 精密質量分析器の単一スペクトル内における複数ＭＳ／ＭＳ実験
この場合においては各充填が、異なるエネルギ、または選択された先駆物質イオンの衝突活性化の方法にまで対応する。たとえば、最初の充填が、共振励起によって質量分析器２０内に形成されるフラグメントのために行われることが可能であり、それが、より高い質量のフラグメントの高められた表現を提供する。２番目の充填はＷＯ２００４／０６８５２３内に述べられているとおり、より高い運動エネルギ（好ましくは０．０３０ｅＶ／Ｔｈ超）において中間イオン貯蔵５０内に注入される先駆物質イオンのために行われることが可能である。後者がインモニウムおよび低質量フラグメントのより良好な表現を提供することから、最良の全体的カバレッジが達成される。
【００６８】
各充填は、最終イオン母集団が全体の活性化／衝突エネルギ範囲に対応するように、活性化または衝突エネルギにおける増分変化に対応することができる。この方法は、質量分析器の単一スペクトル内における『衝突エネルギ・スキャン』の獲得を可能にし、シーケンスのカバレッジを最大化する。また、いくつかの充填のために、追加の断片化方法、たとえばＩＲマルチ−フォトン解離、電子転送解離、電子取り込み解離等を使用することも可能である。後者は、質量分析器２０、イオン・オプティクス４０、または中間イオン貯蔵５０内にアレンジすることが可能である。構造的情報の追加の次元を提供するこれらの方法は、ペプチドおよびタンパク質の新たなシーケンシングのための強力なツールとして複数充填と組み合わせて使用することができる。
【００６９】
イオン数の増加とともに、質量分析器２０は、高い分解能（たとえば１Ｔｈ）を用いて先駆物質イオンを選択する能力を失う。これに対し、貯蔵されるイオンの数が大きいことは、低強度の断片化生成物の識別にとって非常に有用となり得る。複数充填は、必要な総イオン存在量を、それぞれが高分解能選択の空間電荷限界内となるいくつかのより小さいサブセットに分割することによってこの問題が回避されることを可能にしている。
【００７０】
３． 精密質量分析器の単一スペクトル内における複数親ＭＳ／ＭＳ
全体の質量範囲がいくつかの部分範囲に分割され、それぞれが、それ独自の先駆物質イオンに対応する。質量分析器２０の各ＭＳ／ＭＳサイクル内においては、対応するｍ／ｚ範囲のフラグメント・イオンだけが貯蔵され、その後、中間イオン貯蔵５０に転送される。それらの複数充填からのすべてのイオンが精密質量分析器６０内に注入された後は、各先駆物質イオンを、その正確な質量および対応する部分範囲からのその部分的なシーケンスに従って識別することができる。数値的な例としては、１００〜２０００Ｔｈの全質量範囲を、１００〜２００、２００〜４００、４００〜６００、．．．１８００〜２０００Ｔｈの部分範囲に分割できる。これらの範囲のそれぞれは、少なくとも先駆物質イオンおよび１ないし３のそのフラグメントを含む上で充分に広い。この方法においては、たとえばリン酸塩群の損失も容易に識別される。全体的にみてこの種のアプローチは、識別の特定性を保持しつつ、大きさの位数でＭＳ／ＭＳスループットを増加する。
【００７１】
別の好ましい実施態様は、精密質量分析器６０を使用する複数反応監視である。この場合における測定の目的は、それぞれが既知のｍ／ｚ（または中立損失等）を有する先駆物質および１つまたは複数のそのフラグメント両方を監視することによって特定の分析物の存在を確認することである。イオン・トラップ２０は、あらかじめ決定済みの数の特定の先駆物質イオンを選択し、その後それらが、その先駆物質のための最適衝突条件において断片化され、中間イオン貯蔵５０内に貯蔵される。このサイクルが複数の先駆物質イオンについて反復され、その結果、中間イオン貯蔵５０内の最終的な母集団が複数の（好ましくは５〜５０の）先駆物質のＭＳ／ＭＳフラグメントを含むが、それにおいて各セットのフラグメントは、異なる衝突条件において生成できる。結果として得られる母集団は、その後、精密質量分析器６０に注入されて、そこで検出される。特定の反応の監視は、対応する先駆物質および関心フラグメント・イオンの正確な質量（またはそれらの差）を使用して行われる。可能性のある質量ピークのオーバーラップは、高分解能（好ましくは１０，０００〜１００，０００または１０，０００〜１，０００，０００）の質量分析器６０の使用をはじめ、その単一の精密質量スペクトル内のイオンのすべての目標セット間における各関心ｍ／ｚの一様性の予備チェックによって回避される。
【００７２】
複数充填のこの応用、および前述した精密質量分析器の単一スペクトル内における複数ＭＳ／ＭＳ実験は、検出時間が収集時間より有意に長いときにもっとも有用となる。これら２つの応用についての別の使用は、最初に完全スキャンを行い、その後、親イオンの特定量の注入を含むＭＳ／ＭＳスキャンを行う。これは、ＭＳ／ＭＳスキャンの内部較正を可能にする。
【００７３】
４． 中間イオン貯蔵内のイオン−イオン反応
中間イオン貯蔵５０内のＲＦマルチポール５１が（図４に示されているように）セグメント５１’および５１”からなる場合には、反対の極性のイオンをトラップすることが可能である。セグメント５１”上のＤＣオフセットをセグメント５１’および開口５３のそれより低く設定することは、前者のセグメント５１”の長さに沿って正イオンが貯蔵されることを可能にする。イオン源１０、質量分析器２０、およびイオン・オプティクス４０の極性が反転される場合には、負イオンを導入することが可能になる。この場合に負イオンは、開口５２とセグメント５１”の間に貯蔵されることになる。最後に、開口５２および５３のＤＣ電圧がＲＦ電圧によって置き換えられ、５１’および５１”上のオフセットが開口５２および５３のＤＣオフセットと同じレベルに切り替えられる。反応物イオンの数が既知であることから、最終的なイオンの数もより低い精度を通じて予測可能である（以下を参照）。その後、一方の極性の生成物イオンが精密質量分析器６０内に注入される。
【００７４】
負と正のイオンの間の切り替え速度を向上させるために、高い電圧の切り替えを避けることが好ましい。エレクトロスプレイ源の場合には、大気圧から真空へのオリフィスに関し、一方は正の高電圧において、他方は負の高電圧において並列に動作する２つの噴霧器を使用することによってこれを達成することができる。両方の噴霧器は連続かつ安定したモードで動作するが、一方の極性のイオンだけが第１の質量分析器２０に到達できる。
【００７５】
５． 質量分析器２０外の断片化のためのイオン数コントロールの改善
イオン母集団がＡＧＣ検出器３０の下流において何らかの方法で変更される場合には、質量精度への有害な影響を伴ってイオン存在量のコントロールが一層悪化する。これを回避するために、結果として得られるイオン存在量のオンライン較正が必要になる。これは、結果として得られるイオンを中間イオン貯蔵５０からＡＧＣ検出器３０に逆転送し、総イオン存在量を測定した後、それに応じて到来イオン電流を変更することによって行われる。その種の、ＡＧＣ検出器３０の下流におけるイオン変更は以下を含む。中間イオン貯蔵５０内における高エネルギ衝突誘導解離、前述のとおりのイオン対イオン反応または追加の外部イオン源を用いる反応、中性気体を用いる反応（単一荷電種またはクラスタの除去、同位元素でラベル付けされた気体を用いる反応、分析物固有の反応等）、表面誘導解離、ＩＲマルチ−フォトン解離、電子取り込みまたは電子転送解離、またはこのほかの断片化のタイプ。タイプは、イオン・タイプに従って選択され、そのイオン・タイプについて最適に動作させることができる。
【００７６】
このＡＧＣ検出器３０に向けた逆転送は、特に、複数の注入方法を伴って有用となる。
【００７７】
６． スペクトルの継ぎ合わせにおける改善
本発明は、スペクトルの継ぎ合わせ、すなわち１つの質量分析器によって獲得された１より多くの質量スペクトルを組み合わせて単一の質量スペクトルとして呈示することへの代替を提供する。本発明は、２またはそれより多くの質量範囲がイオン・ストリームから選択されることを可能にし、強いピークの除外、低い強度のエリアの富化、または増加された質量範囲を含むことができる。異なるイオン数を提供するべく異なる質量範囲を蓄積すること、およびその後に続いて獲得される質量スペクトルを、それに応じて調整されたピークの相対強度を用いて呈示することができる。その質量範囲は、その後、質量分析器内においてまとめて蓄積し、かつまとめて分析することができ、別々のスペクトルの獲得およびその後のプロセッシング手段を用いた組み合わせが行われなければならないということはない。
【００７８】
質量スペクトル内のピークの調整は、ここに述べられている「スペクトルの継ぎ合わせ」だけでなく、多くの応用の中で使用され得る。たとえば、関心ピークが強められること、または不要／自明なピークが減衰されるか、さらには除去されることが、それらのピークの原因である流入イオンの数の適切なコントロールによってできる。それに加えて、これらのピークは、質量分析器６０のデータの獲得に先行してそれらのイオンが処理される場合に、ストア済みの動作パラメータの使用を通じて質量スペクトルとして表示されるときに操作できる。
【００７９】
７． 分析物の有用性における改善
中間イオン貯蔵５０に続く質量分析器６０は、注入されるイオンの少なくともいくつかが中間イオン貯蔵５０に戻されてさらに蓄積されるような方法で動作させることができる。これは、ＴＯＦタイプの質量分析器、および主として質量分析のその先の段階が下流において企図されているときに特に適している。このアプローチは、低強度信号の有用性を改善する。
【００８０】
上記の場合のそれぞれについて、質量スペクトルが獲得されることになるイオンのタイプの選択は、以前の質量スペクトルから獲得された情報に基づくことができる。たとえばこの情報は、質量、電荷、ｍ／ｚ、イオン電流、質量スペクトル内のランク、同位元素パターン、総イオン電流、クロマトグラフィのピークの立ち上がり時間、およびこれらの類のいずれかまたはいずれかの組み合わせを含むことがある。以前の質量スペクトルは、ＷＯ０３／０１９６１４の中で述べられている方法と同様に、イオンがイオン・トラップ２０を通って質量分析器６０に向けて伝送される短いプレスキャンに対応できる。
【００８１】
本件出願人の特許出願ＰＣＴ／ＥＰ０４／０１０７３５の中で述べられているとおり、イオンの並列処理を採用して質量分析器のスループットを増加できる。たとえば、以前の反応済みイオンのセットからの質量スペクトルの獲得と同時に、以前の蓄積済みイオンのセットの反応が行われている間にイオンの生成および蓄積が行われるように、イオン処理の異なる部分を同時に実行することができる。
【００８２】
当業者によって認識されるとおり、上に述べた実施態様に対する変形を、本発明の範囲から逸脱することなく行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【００８３】
【図１】従来技術に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図２】本発明の第１の実施態様に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図３】本発明の第２の実施態様に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図４】本発明の第３の実施態様に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図５】本発明の第４の実施態様に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図６】本発明の第５の実施態様に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図７】本発明の第６の実施態様に従ったタンデム質量分析器の概略図である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、質量分析の段階のうちの少なくとも１つにイオン・トラッピングを含む質量スペクトル測定に関する。特に、排他的ではないが、本発明は、先駆物質イオンおよびフラグメント・イオンが分析されるタンデム質量スペクトル測定に関する。
【背景技術】
【０００２】
概して言えば、質量スペクトル計は、分析されることになる分子からイオンを生成するためのイオン源、およびイオンを質量分析器に案内するためのイオン・オプティクスを包含する。タンデム質量スペクトル計は、さらに、第２の質量分析器を包含する。タンデム質量スペクトル測定においては、質量スペクトルの収集によってイオン化分子の構造的解明を行い、その後、第１の質量分析器を使用して１つまたは複数の所望の先駆物質イオンを質量スペクトルから選択してイオンの断片化を生じさせ、その後、第２の質量分析器を使用してフラグメント・イオンの質量分析を行う。概して言えば、第２の質量分析器には精密質量ケイパビリティを伴う質量分析器が好ましい。しばしば、先駆物質イオンの質量スペクトルを獲得するためにも精密質量分析器を使用すること、言い換えると断片化なしに先駆物質の標本を精密質量分析器に渡すことが望ましい。
【０００３】
その方法を、１つまたは複数の追加の断片化の段階（すなわち、フラグメント・イオンの断片化およびそれの断片化等々）を提供するべく拡張することが可能である。これは、一般にＭＳｎと呼ばれ、ｎは、イオンの生成の数を表す。したがって、ＭＳ２は、タンデム質量スペクトル測定に対応する。
【０００４】
タンデム質量スペクトル計は、３つのタイプに分類することが可能である。
（１）空間的に連続、伝送質量分析器の組み合わせに対応する（たとえば、磁気セクタ、クワドラポール、飛行時間型（ＴＯＦ）、通常はそれらの間に衝突セルを伴う）。
（２）時間的に連続、スタンドアロン・トラッピング質量分析器に対応する（たとえば、クワドラポール、リニア、フーリエ変換イオン・サイクロトロン共振（ＦＴ−ＩＣＲ）、静電トラップ）；および
（３）時間的空間的に連続、トラップまたはトラップのハイブリッドと伝送質量分析器のハイブリッドに対応。
【０００５】
本発明は、パルス化精密質量分析器、たとえばＴＯＦ分析器、ＦＴ ＩＣＲ分析器、およびオービトラップ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）質量分析器等の静電トラップ（ＥＳＴ）分析器との使用に特に適している。
【０００６】
これらの分析器の多くは、短い注入サイクルおよびそれに続く比較的長い質量分析段階を有し、特に高分解能における動作時にそれが言える。したがって、それらの感度は、ＲＦマルチポール等の中間イオン貯蔵の使用から大きな利益を得る。
【０００７】
たとえば上記のタンデム質量スペクトル測定のように、精密質量分析器に質量分析の段階が先行することは少なくない。それらの第１段階の質量スペクトル測定は、クワドラポール・トラップまたはそのほかの周知の任意の質量分析器内にイオン・トラッピングを含むことがある。それらの場合、中間イオン貯蔵の使用が、異なる段階の間の反復レートおよびイオン・ビーム・パラメータにおける差異によって生じるイオン損失を回避する。中間イオン貯蔵を含むタンデム質量スペクトル計の例は、ジャーナル・オブ・プロテオメ・リサーチ（Ｊ． Ｐｒｏｔｅｏｍｅ Ｒｅｓ．）（３（３）（２００４年）、ｐｐ６２１〜６２６）、アナリティカル・ケミストリ（Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ．）（７３（２００１年）ｐ２５３）、ＷＯ２００４／０６８５２３、米国特許出願第２００２／０１２１５９４号、米国特許出願第２００２／００３０１５９号、ＷＯ９９／３０３５０、およびＷＯ０２／０７８０４６の中に見られる。そのほかのタンデム構成もまた可能である。
【０００８】
質量分析器として使用されるイオン・トラップは、常に、その中に導入されてトラップされるイオンの総数に敏感である。明らかに、可能な限り多くのイオンを蓄積することが、収集されるデータの統計を向上させるために望ましい。しかしながら、この願望は、より高いイオン濃度においては飽和が存在し、それが空間電荷効果を生むという事実と相容れない。これらの空間電荷効果は質量の分解能を制限し、測定される質量対電荷比のシフトを生じさせ、その結果、質量、さらには強度の不正確な割り当てを導く。特に、イオンによる中間イオン貯蔵の過充填は、その後に続いて獲得される質量スペクトルにおけるピークのシフト、トラッピング質量分析器における質量精度の損失、およびＴＯＦ質量分析器内の検出器の飽和を、中間イオン貯蔵自体の中の質量抑圧効果のほかに生じさせる。
【０００９】
この問題に取り組む１つのテクニックは、一般に自動利得コントロール（ＡＧＣ）と呼ばれている。ＡＧＣは、質量分析器に収容できるイオンの量を調整するための到来イオン・ストリームの情報の使用に対する一般的な名前である。この情報は、スペクトル情報に基づいて質量範囲を選択するためにも使用できる。イオン・トラップ内に蓄積される総イオン存在量は、次のようにしてコントロールできる。最初にイオンが既知の時間期間にわたって蓄積され、迅速な総イオン存在量測定が実行される。その時間期間およびそのトラップ内の総イオン存在量の知識は、その後に続くイオン充填がセル内に最適イオン存在量を作り出すための適切な充填時間の選択を可能にする。このテクニックは、米国特許第５，１０７，１０９号の中でさらに詳細に述べられている。
【００１０】
初期イオン存在量を測定する別の変形も知られており、それには、先行するスペクトル内の総イオン電流の使用（米国特許第５，５５９，３２５号）、トラップを通して検出器に向けてイオンが伝送される短いプレスキャンの使用（ＷＯ０３／０１９６１４）、およびＦＴ ＩＣＲに先行して貯蔵マルチポール内に貯蔵されるイオンの一部の測定（米国特許第６，５５５，８１４号）が含まれる。
【００１１】
精密質量分析器を伴うタンデム質量スペクトル計のほとんどにおいては、蓄積されるイオン母集団がまったくコントロールされていない。ジャーナル・オブ・プロテオメ・リサーチ（Ｊ． Ｐｒｏｔｅｏｍｅ Ｒｅｓ．）（３（３）（２００４年）、ｐｐ６２１〜６２６）の場合では、精密質量分析器内への注入に先行して総イオン数だけが、自動利得コントロールを使用してコントロールされ得る。ＷＯ２００４／０６８５２３は、ＦＴ ＩＣＲ質量分析器にすべてのイオンを注入する前に、線形トラップから１つのイオン・タイプの複数充填を蓄積するために使用される中間イオン貯蔵を含む実施態様を開示している。各充填は、中間イオン貯蔵内へのイオンの注入に先行する、それ独自の自動利得コントロール・プレスキャンを有する。しかしながら、その主要な応用は、単一イオン・トラップの動作に関する総イオン貯蔵容量の増加に過ぎない。
【００１２】
これは、いくつかの現実の問題を手つかずのまま残す。しばしば、単一タイプのイオン、すなわち単一のｍ／ｚ値またはｍ／ｚ範囲を有するイオンを超えて分析することが望まれる。異なるタイプのイオンが、任意の個々の実験に従った異なる要求から導かれることがある。たとえば、異なるタイプのイオンが、ある標本内に存在する異なる分子から、タンデム質量スペクトル測定において断片化された標本イオン（すなわち、先駆物質およびフラグメント・イオンの分析）から、または標本イオンおよび較正物質イオン（すなわち、質量スペクトルの補正のために使用されるロック・マス）から生じることがある。最後のケースは、内部較正物質の使用が、追加されるかまたは到来する標本内に本来的に存在する分析物を使用する、質量精度（特に、ＴＯＦおよびＥＳＴについて）を改善するもっとも信頼できる方法の１つであるとして知られていることから非常に重要である。しかしながら、たとえば質量スペクトル計に結合される液体分離の場合のように分析物の信号が急速に変化するときには、内部較正物質の所望の存在量を得ることが非常に困難である。これは、較正物質の存在量の精度が非常に重要であることから、有意な問題を呈する。つまり、存在量が低すぎるときには、その較正物質が質量精度を改善するための役に立たず、存在量が高すぎるときには、その較正物質が中間イオン貯蔵内の空間電荷容量のほとんどを占有し、したがって標本の利用度を低減する。また、選択候補の成分（たとえば、関心不純物）を用いたイオン母集団の選択的な富化も非常に困難である。
【００１３】
質量スペクトルの内部較正をねらいとして、２またはそれより多くのイオン源からのイオンを組み合わせる２つの方法が開発された。ウインジャー（Ｗｉｎｇｅｒ）ほか著「アメリカン・ソサエティ・フォア・マス・スペクトロメトリ（Ａｍｅｒ． Ｓｏｃ． Ｍａｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．）」（第４４回カンファレンス会報、ポートランド、１９９６年、ｐ．１１３４）は、２つの方向からＩＣＲセル内に導入される２つのソースからのイオンの同時トラッピングをはじめ、外部的に注入されるイオンを伴うＩＣＲセル内の電子イオン化によって生成されるイオンの組み合わせを明らかにした。米国特許第５，８２５，０２６号は、２つのイオン源からのイオンが質量分析器内への導入のために選択されることを可能にする機械的に切り替え可能な構造を明らかにしている。
【００１４】
【非特許文献１】ジャーナル・オブ・プロテオメ・リサーチ（Ｊ． Ｐｒｏｔｅｏｍｅ Ｒｅｓ．）（３（３）（２００４年）、ｐｐ６２１〜６２６）、アナリティカル・ケミストリ（Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ．）（７３（２００１年）ｐ２５３）
【非特許文献２】ウインジャー（Ｗｉｎｇｅｒ）ほか著「アメリカン・ソサエティ・フォア・マス・スペクトロメトリ（Ａｍｅｒ． Ｓｏｃ． Ｍａｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．）」（第４４回カンファレンス会報、ポートランド、１９９６年、ｐ．１１３４）
【特許文献１】ＷＯ２００４／０６８５２３
【特許文献２】ＷＯ９９／３０３５０
【特許文献３】ＷＯ０２／０７８０４６
【特許文献４】米国特許第５，１０７，１０９号
【特許文献５】米国特許第５，５５９，３２５号
【特許文献６】ＷＯ０３／０１９６１４
【特許文献７】米国特許第６，５５５，８１４号
【特許文献８】米国特許第５，８２５，０２６号
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１５】
この背景に対して、また第１の態様から、本発明の方法は、イオン貯蔵内に、分析されることになる１つのタイプのイオンの標本を蓄積し、前記イオン貯蔵内に、分析されることになる別のタイプのイオンの標本を蓄積し、前記イオンの組み合わされた標本を質量分析する質量スペクトル測定の方法であって、それぞれのタイプのイオンの以前の測定の結果を基礎としてイオンの目標数を達成するように前記１つのタイプのイオンの前記標本および／または別のタイプのイオンの前記標本を蓄積することを特徴とする。
【００１６】
本発明は、質量分析のために使用されるイオン蓄積のうちの少なくとも１つが、ほかの蓄積と実質的に異なるイオン組成を有する方法を導入することによって従来技術の有用性を拡張する。イオンの『タイプ』は、単一のｍ／ｚ値またはｍ／ｚ値の範囲に対応することができる。ｍ／ｚ値の範囲は、単一のイオン種を占めるべく、またはその範囲内に入る類似のｍ／ｚ値を有する２またはそれより多くのイオン種を含めるべく選択できる。基本的に、２つのタイプのイオンは、繰り返し述べているｍ／ｚ値または範囲に単に対応するというよりは、異なる組成を有する必要がある。
【００１７】
イオン貯蔵の逐次充填の使用は、いくつかの利益を提供する。各充填について充填条件（伝送およびイオン貯蔵内における取り込み）を独立に最適化でき、非常に異なる質量を伴ったイオンの貯蔵が要求されている場合（たとえば小分子に対するタンパク質）には特に有用である。また逐次充填は、異なる充填のために選択された異なる質量範囲の独立操作も可能にする。たとえば、ＲＦ電位を使用して、ある充填のための低質量カットオフ（たとえばマトリクスまたは溶剤イオンの除去）を増加し、その後、その次の充填のために低減することができる。本発明は、単一の入口開口だけが利用可能な場合に、正および負のイオン両方のトラッピングも可能にする。また、狭い質量の窓だけ（たとえば、先駆物質の選択について、それが線形トラップまたはクワドラポールを使用して獲得されたか否か）を伝送するべく動作する質量分析の段階が手前にある場合には、この方法が、いくつかの異なる質量の窓（または対応する先駆物質の断片）の貯蔵を可能にする。
【００１８】
これはまた、システムのコンポーネントの並列動作が望まれており、システムの異なる部分が異なるタイミング要件を有する場合、たとえば同時検出のために、より多くの異なるイオンを蓄積することによって関連する遅延を使用し、それによって遅い検出を伴うシステムを適合させる場合にも有用である。
【００１９】
マトリックス支援レーザ脱離イオン化法（ＭＡＬＤＩ）のようなパルス化イオン源の場合には、逐次充填が、標本スポットからの分析物のイオンの最初の充填、および別の標本スポットからの較正物質化合物のイオンの２番目の充填を可能にする（充填の間の時間は、標本スライドを一方の標本から他方に移動させるに充分である）。
【００２０】
イオンは、異なる方法で準備でき、たとえば１つのタイプのイオンを先駆物質イオンとし、別のタイプをフラグメント・イオンとすることができる。反応タイプおよび条件の選択等のイオンを生成する条件は、各タイプについて最適化でき、たとえばＣＩＤ、ＩＲＭＰＤ、ＥＣＤのような衝突方法における衝突エネルギおよび断片化における多衝突および単衝突のいずれも変更することができる。
【００２１】
先行する測定、またはテスト測定は多くの異なる方法で実行でき、それには、電流検知グリッドの使用、誘導電流、散乱イオン、２次電子、または質量スペクトル計によって以前に獲得された１つまたは複数の質量スペクトルの使用が含まれる。オプションとして、この方法は、第１および第２のタイプのイオンのうちの特定のタイプについて、分析されることになる前記特定のタイプのイオンのテスト標本をテスト注入時間にわたって蓄積し、そのようにして蓄積された前記特定のタイプのイオンの存在量を測定し、前記テスト注入時間および前記特定のタイプのイオンの前記測定された存在量を基礎として前記特定のタイプのイオンの所望の目標存在量を結果としてもたらすことになる目標注入時間を決定し、前記特定のタイプのイオンは、前記組み合わされた標本の質量分析の前に前記目標注入時間にわたって前記イオン貯蔵内に蓄積されることを含む。
【００２２】
この方法においては、充填の間に獲得される存在量が自動利得コントロール（ＡＧＣ）を使用してコントロールされる。このアプローチは、本発明の好ましい実施態様に適用されているとおり、以下の実験的な発見に基づいている。衝突冷却に起因して、蓄積されたイオンの最終エネルギおよび空間分布が、先行するイオンの処理、たとえばどのように自動利得コントロール・プレスキャンが獲得されるか、充填の数、充填の順序等に依存しない。この最終エネルギおよび空間分布は、イオン母集団の組成に依存し得るが、ほとんどの精密質量分析器の質量精度に掛かるもっとも重要な影響は、注入されたイオンの総数によって示される。この数がコントロールの下にあれば、直ちに高い質量精度が達成可能になる。
【００２３】
それに加えて、これは、別々に収集されたイオンの存在量を、測定器のダイナミック・レンジと整合させる補助となる。
【００２４】
１つのイオン・タイプの蓄積時におけるＡＧＣの実装をはじめ、ＡＧＣは、同様に別のイオン・タイプの蓄積のためにも実装できる。さらに、以下に述べるＡＧＣに対するオプションの改良は、第１または第２のイオン・タイプのいずれか、または両方に関して実装できる。
【００２５】
方法ステップの順序は、本発明の範囲から逸脱することなく変更できる。たとえば、第１のイオン・タイプが蓄積され、第１の目標注入時間が決定され、それに第２のイオン・タイプの蓄積および第２の目標注入時間の決定が続き、その後に第１および第２のイオン・タイプが、それぞれの目標注入時間に従って蓄積されてもよい。それに代わり、第２のイオン・タイプのための目標イオン注入時間の決定に先行して、第１のイオン・タイプが、その目標注入時間に従って蓄積されてもよい。
【００２６】
テスト標本および特定のタイプのイオンは、異なるイオン貯蔵に蓄積できる。たとえば、テスト標本をイオン・トラップ内に蓄積できる。このイオン・トラップは、その後、その特定のタイプに属する選択されたイオンが、質量分析器または中間イオン貯蔵に渡され、そこでそれらが蓄積されることを可能にするべく使用できる。
【００２７】
オプションとして、この方法は、イオン源を動作させて特定のタイプのイオンを生成させ、その後、生成されたイオンを、テスト注入時間だけ、または目標注入時間だけのいずれかにわたるか、またはその両方にわたる蓄積のためにイオン貯蔵に直接伝送することを包含できる。ソースから直接イオンを蓄積するのではなく、イオンを別の処理から蓄積してもよい。たとえば、特定のタイプのイオンを生成するべく反応セル内においてイオンが反応され、その後それらが蓄積されてもよい。専用反応セルを使用してもよく、その場合においては、特定イオンが、テスト注入時間および／または目標注入時間にわたって蓄積されるべくイオン貯蔵に向けられる。それに代わり、特定のタイプのイオンが反応結果として蓄積されるように、共通構造がイオン貯蔵および反応セルの両方を提供することもできる。この場合においては、テスト注入時間および／または目標注入時間にわたって反応が進行することを可能にできる。反応は、反応セル内に存在する気相との標本イオンの反応等のように、多くの形式を取ることができる。
【００２８】
好適には、特定のタイプのイオンおよびそのほかのタイプのイオンの、組み合わされた所望の目標存在量が、イオン貯蔵の貯蔵容量または最終質量分析器の動作のためのイオンの最適数と実質的に整合する。イオン貯蔵の貯蔵容量は、要求されるイオン貯蔵のパフォーマンスに関係する傾向にある。たとえば、低下したパフォーマンスが許容可能であれば、より高い容量を使用することができる。この方法においては、イオン貯蔵内に蓄積されるイオンの総数が最適、言い換えれば空間電荷効果が許容不能となることなく最大可能となるか、かつ／または検出器のダイナミック・レンジが最適に使用されるように、トラップされたイオンの量が分配される。
【００２９】
好ましくはこの方法が、単一イオン源を動作させて両方のタイプのイオンを生成することを包含する。イオン源は、２つのタイプのイオンを生成するために共通ソース材料を使用することさえできる。たとえば、２つのタイプのそれぞれを、そのイオン源によって生成されるイオンの範囲から代わるがわる選択してもよい。当然のことながら、別体のイオン源を使用して２つのタイプのイオンのそれぞれを生成してもよい。
【００３０】
質量スペクトル計は、それぞれの蓄積期間にわたって両方のタイプのイオンの蓄積に有利な条件の下に動作させることができる。言い換えると、質量スペクトル計は、部分的に、または全体的に、１つまたは別のタイプのイオンの生成または選択が有利であるように動作させることができる。
【００３１】
質量スペクトル計には多くの異なる動作パラメータがあり、いずれかの特定イオン・タイプの蓄積が有利であるように調整できる。たとえば、質量スペクトル計のイオン源は、１つまたは別のタイプのイオンを優先して生成するべく動作させることができる。これは、イオン貯蔵ステップにおけるそのイオンの蓄積と同時に行われてもよく、そのようでなくてもよい。この点を明らかにするため、蓄積されるイオンが、その後に中間イオン貯蔵に排出される前に、最初に、イオン源によって逐次的に生成されるイオンがまとめてイオン・トラップにトラップされると考えることができる。この方法の拡張として、第１のイオン源が第１のタイプのイオンを生成するべく動作され、およびその後に続いて第２のイオン源が第２のタイプのイオンを生成するべく動作されるようにできる。
【００３２】
どのようにして質量スペクトル計が１つのイオン・タイプの蓄積に有利であるように動作され得るかについての追加の例として、１つまたは別のタイプのイオンを選択するべく質量フィルタを動作させることができる。質量フィルタは、多くの形式の１つをとることができる。質量フィルタは、アイソレーション・モードで動作するイオン・トラップに対応することができ、言い換えると、イオンがトラップされ、電圧が印加され、それが結果として、特定のｍ／ｚ範囲内のイオンのみの選択をもたらす。質量フィルタは、たとえば、必要なｍ／ｚ値のイオンだけが通過できるようにＤＣおよび／またはＡＣ電圧を設定することによって第１のタイプおよび／または第２のタイプのイオンを優先して伝送するべく動作されるイオン・オプティクスに対応できる。
【００３３】
オプションとして、イオンのテスト標本のいずれかまたは両方が追加のイオン貯蔵内に蓄積され、その後、質量分析のための別体の質量分析器に排出されるようにしてもよい。
【００３４】
本発明の応用においては、イオン・タイプのうちの１つが内部較正物質になり、別のイオン・タイプが分析されるべき標本になる。
【００３５】
この方法は、タンデム質量スペクトル測定およびＭＳｎに使用できる。したがって、１つのタイプのイオンが親イオンになり、別のタイプが生成物イオン（または断片化、これらの用語は同義語である）になる。オプションとして、１より多くのタイプの親イオンからの生成物イオンが蓄積されるようにできる。
【００３６】
上記の方法は、２より多くの蓄積および２より多くのタイプのイオンに拡張できる。たとえば、３またはそれより多いタイプのイオンを逐次的に蓄積できる。さらに、単一より多くの蓄積を使用して、特定のタイプのイオンを得ることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３７】
本発明がより容易に理解され得るように、例示の手段としてのみ、添付図面を参照して好ましい実施態様を説明する。
【００３８】
本発明を、そのいくつかの態様に従って実施できる周知のタンデム質量スペクトル計を図１に示す。パルス化または連続イオン源１０からのイオンが、質量分析および質量選択機能を有し、かつオプションとして断片化を実行できる質量分析器２０に収容される。それに代えて、断片化の実行に別体の反応セルが使用されてもよい。イオン源１０は、ＭＡＬＤＩ源、エレクトロスプレイ源、または任意のそのほかのタイプのイオン源とすることができる。それに加えて、複数のイオン源を使用してもよい。また質量分析器２０の手前には、任意数の質量分析段および／またはイオン操作を先行させることができる。
【００３９】
本発明のすべての実施態様は、自動利得コントロール検出器３０を伴い、適切な数のイオンをトラップするべく動作できる。周知の任意のＡＧＣ方法を使用して、その後に続く充填のための最適イオン化時間を決定できる。この出願においてはＡＧＣが、もっとも一般的に、イオンのセットのサンプリングに基づいて最適充填時間を決定する方法として解釈される。したがって、これは、プレスキャンまたは以前のスキャンからの情報を基礎とする方法を含むだけでなく、そのほかの、イオン・ビームを（好ましくは一様に）インタセプトする電流検知グリッド等のイオンの数を測定する方法も含まれる。例えば、誘導電流を検知する方法、開口上の散乱イオンを検知する方法、２次電子を検知する方法、および質量分析器２０によって行われた以前の分析的スキャンを使用する方法などが含まれる。また可能な方法には、ここで以前に述べたものも含まれる。最適イオン化時間を使用して生成されたイオンは、質量分析器２０内において、たとえば衝突誘導解離によって断片化され得る。イオンは、質量分析器２０から転送オプティクス（たとえば、ＲＦマルチポール４０）を介して中間イオン貯蔵５０内に転送され、それにおいてそれらが取り込まれ、トラップされる。中間イオン貯蔵５０の後には、精密質量分析器６０が続く。
【００４０】
本発明の第１の実施態様は、概ね図１に類似の、図２に示されているタンデム質量スペクトル計上において実施される。この実施態様においては、質量分析器２０がイオン・トラップ２１に対応する。イオン・トラップ２１は、米国特許出願第２００３／０１８３７５９号内に記述されているとおりの、デュアル検出器（３０’および３０”）に対するラジアル排出を伴う線形セグメント化クワドラポールである。中間イオン貯蔵５０は、ＲＦ電圧で動作してトラッピング・フィールドを作り出すマルチポール５１を含む。マルチポール５１の両端の電極は、それぞれゲーティング電極５２およびトラッピング電極５３として動作する。中間イオン貯蔵５０は、管５４を介して、好ましくは１０−２ｍｂａｒより低い気体が充填される。イオンが貯蔵５０内に蓄積されるとき、トラッピング電極５３およびゲーティング電極５２に掛けられる高い電圧によって反射され、その結果、それらがマルチポール５１内に残存する。反射間の遷移の間に、トラップされたイオンは、それらのエネルギを衝突で失う。
【００４１】
ここで注意する必要があるが、より低い、たとえば１０−３ｍｂａｒに満たない圧力においては、イオンがトラップ２１からマルチポール５１へ、単一より多くの通路を必要とすることがあり、言い換えるとイオンが、トラップ２１の端とマルチポール５１の間において複数の反射を必要とすることがある。本件出願人の同時係属特許出願ＧＢ０５０６２８７．２は、その種の反射トラッピングを述べている。基本的に、イオンは、衝突を通じてエネルギを失い、最小のポテンシャル・ウェルと所望のロケーションの一致を確保することによってそのロケーションに蓄積される（この場合は中間イオン貯蔵５０内）。
【００４２】
標本の質量分析は、図２の質量分析器６０を使用し、以下のとおり、本発明の実施態様に従って実行される。
【００４３】
イオン源１０によって生成された第１のタイプのイオンの標本が、あらかじめ決定済みの時間間隔にわたって第１の質量分析器２０内に収容される。質量分析器２０内の総イオン存在量が、その後、ＡＧＣ検出器３０を使用して測定される。
【００４４】
プロセッサまたはその類（図示せず）が所望のイオン存在量の達成に求められる必要時間間隔を計算する。概して言えば、このイオン存在量は、あらゆる特定トラッピング・ボリュームの過充填の結果として招かれる空間電荷効果を念頭に置いた精密質量分析器６０または中間イオン貯蔵５０のための最適イオン存在量に関係する。第１のタイプのイオンについての所望のイオン存在量は、その後に続くほかのタイプのイオンの充填を考慮して、全体の最適イオン存在量の部分になる。質量分析器２０が、中間イオン貯蔵５０および／または質量分析器６０より小さい容量を有する場合には、所望のイオン存在量の達成に質量分析器２０の充填が１回を超えて必要になることがある。
【００４５】
したがって、イオン源１０が、所望のイオン存在量を達成するべく必要な時間間隔にわたって再び質量分析器２０を充填し、そこでそれらがトラップされる。その後、イオンがイオン・オプティクス４０を介して中間イオン貯蔵５０に排出され、そこでそれらが再度トラップされる。したがって、イオン処理の第１サイクルは、中間イオン貯蔵５０内にトラップされるイオンの第１のタイプの所望の存在量を伴って完了する。
【００４６】
この動作の次のサイクルにおいては、イオン・トラップ２１が、異なる実験シーケンス、たとえば単一ｍ／ｚ比の分離、気体衝突における断片化等を実行できる。この実験もまた、結果として得られるイオンの数がコントロールされて第２のタイプのイオンについて所望の存在量が達成されるように、ＡＧＣコントロールの下において実行される。このシーケンスが終了した後に、イオンが中間イオン貯蔵５０に転送されるが、そこには、以前のサイクルからのイオンが存在している。第２の充填からのイオンは、衝突の中でそれらのエネルギを失い、第１の充填からのイオンとまったく同じ方法で貯蔵される。中間イオン貯蔵５０のマルチポール５１内にすでに貯蔵されているイオンの数が、その空間電荷容量に近くない限り、貯蔵プロセスが同じ方法で行われる。しかしながら、マルチポール５１の空間電荷容量は、通常、１０７イオンまたはそれを超える。これは、一般に精密質量分析器の許容可能な動作に許されているより高い。イオンは、その後、質量分析のために精密質量分析器６０に排出される。
【００４７】
質量分析器２０は、イオン・トラップ２１として上で述べられている。質量分析器２０が伝送タイプ（たとえば、クワドラポール質量スペクトル計）のものである場合には、イオン・オプティクス４０が、ＡＧＣプレスキャンの間に、イオンが中間イオン貯蔵５０に入ることを止め、イオンの流れを変えてＡＧＣ検出器３０に到達させるような方法で構成される必要がある。
【００４８】
伝送タイプの質量分析器２２を伴う質量スペクトル計の実施態様が図３に示されている。この実施態様においては、好適に、クワドラポール質量分析器２２にＲＦ専用衝突セル２３が続いている。中間イオン貯蔵５０の適切な充填時間が、ＡＧＣ検出器３０によってとられるイオン存在量測定から導き出される。その後、イオン・オプティクス４０が伝送モードに切り替えられて、イオンが、この持続時間にわたって中間イオン貯蔵５０のマルチポール５１に入ることが許され、それにおいてそれらが前述のとおりにトラップされる。その後、イオン・オプティクス４０が再び拒絶モードに切り替えられて、そこで第１の充填が終わる。
【００４９】
トラッピング質量分析器２２に関して前述した充填プロセスとの唯一の相違は、質量分析器２２とマルチポール５１の間における複数の経路の提供という、よりおおきな困難によって述べられる。したがって、衝突セル２３が存在しないときには、より高い気体圧力がマルチポール５１内において好ましい。
【００５０】
第２の充填については、質量分析器２２が、異なるｍ／ｚ値またはｍ／ｚ範囲を伝送するべく切り替えられ、マルチポール５１の充填を行うサイクルが反復される。各充填は、それ独自のＡＧＣプレスキャンを、イオンが中間イオン貯蔵５０に入ることが許される前に有し、各イオン・タイプについて所望のイオン存在量が達成されることが保証される。
【００５１】
マルチポール５１内における衝突冷却に起因して、トラップされたイオンの最終エネルギおよび空間分布は、質量分析器２２のタイプ、充填の数、充填の順序等に依存しない。しかしながら、それが、イオン母集団の組成、衝突気体、および中間イオン貯蔵５０の動作パラメータに依存することはある。特に重要なことは、貯蔵されたイオンと衝突気体内の揮発性汚染物質の間にコントロールされていない相互作用が存在しないことの確保である。
【００５２】
必要な数の充填（２より多いこともある）の後、中間イオン貯蔵５０の電圧が、すべての貯蔵済みイオンが一斉に精密質量分析器６０内に注入されるような方法で変更される。中間イオン貯蔵５０の実際の実施態様は、対応する質量分析器６０の受け入れと整合しなければならない。
【００５３】
ＦＴ ＩＣＲ質量分析器７０を伴うタンデム質量スペクトル計の好ましい実施態様が図４に示されている。イオン源１０、質量分析器２０（トラッピング・タイプ２１または伝送タイプ２２のものとすることができる）、ＡＧＣ検出器３０、およびイオン・オプティクス４０が略図的に示されており、それらは、図２または３のいずれかに従う。図４の中間イオン貯蔵５０は、好ましくは２つのセグメント５１’および５１”を包含するマルチポール５１を含む。後者は、よりトラッピング電極５３の近くに配置される。貯蔵の間は、この後者のセグメント５１”が、より低いＤＣオフセット（正イオン用）を有し、その結果、イオンが主としてその長さに沿って滞留する。ＦＴ ＩＣＲセル内へのイオン注入については、電極５３上の電圧がセグメント５１”のオフセットより下に下げられ、すべての貯蔵済みイオンがイオン案内６１内に、さらにその後、磁石８０（好ましくは超電導磁石）の中央にあるＦＴ ＩＣＲセル７０内に収容される。イオンがセル７０に入った後は、それらが従来的な方法で、すなわち端の電極７１、７２上の電圧を上昇することによってトラップされる。検出およびデータ処理が、周知の従来技術に従ってそれに続く。
【００５４】
オービトラップ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）質量分析器等の静電トラップ分析器１００を伴うタンデム質量スペクトル計の好ましい実施態様が図５に示されている。この実施態様においては、中間イオン貯蔵５０が、内側電極５６内にスロットを伴う湾曲したクワドラポール５５を含む。イオン注入に先行して、開口５２および５３上の電圧を上昇させることによってクワドラポール５５の軸に沿ってイオンを絞ることができる。オービトラップ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）質量分析器１００へのイオン注入については、クワドラポール５５のＲＦ電圧が、周知のとおりオフに切り替えられる。パルスが電極５６、５７、および５８に印加され、その結果、横行電界がイオンを湾曲したイオン・オプティクス９０内に加速する。結果として得られる収束イオン・ビームが注入スロット１０１を通ってオービトラップ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）質量分析器１００に入る。イオン・ビームは、中心電極１０２上の増加する電圧により軸に向かって絞られる。注入スロット１０１の時間的空間的集束に起因して、イオンがコヒーレントな軸方向発振を開始する。これらの発振は、電極１０３上にイメージ電流を生成し、それが、ＷＯ０２／０７８０４６および米国特許第５，８８６，３４６号の中で述べられているとおりに増幅され、処理される。
【００５５】
ＴＯＦ質量分析器１２０を伴うタンデム質量スペクトル計の好ましい実施態様が図６に示されている。この実施態様において、中間イオン貯蔵５０の構成および動作は、図５のそれに類似である。図５の実施態様とは対照的に、追加の集束イオン・オプティクス１１０が、収束イオン・ビームを、より小さい角度の広がりを伴うビームに変換する。このビームは、その後、周知の任意のタイプとすることができ、かつ単一または複数の反射のいずれかを伴うＴＯＦ質量分析器１２０内において分析される。また、非常に浅い湾曲を伴って、すなわちまっすぐまたはほとんどまっすぐなロッドを伴って中間イオン貯蔵５０内にクワドラポール５５を使用することも可能である。
【００５６】
本発明に従ったタンデム質量スペクトル計の別の好ましい実施態様が図７に示されている。イオン源１０からのイオンが、オプションのイオン案内またはイオン・オプティクス１２を通って第１のイオン・トラッピング質量分析器２０、３０に案内される。これは、前述したとおり、プレスキャンの実行、検出器３０を用いたＡＧＣの実行、イオンの処理の選択および操作に使用できる。質量分析器２０から、オプションのイオン案内またはイオン・オプティクス４０を通って中間トラップ５０にイオンが転送される。転送方法は、たとえば、本件出願人の同時係属特許出願ＧＢ ０５０６２８７．２の中で述べられている多反射トラッピング方法、本件出願人の同時係属特許出願ＷＯ２００４／０８１９６８の高速ワイドレンジ注入、移動仮想イオン・トラップ転送、またはそのほかの任意の適切な転送方法とすることが可能である。中間トラップ５０は、超電導磁石８０の内側において、好ましくはワンチェク（Ｗａｎｃｚｅｋ）ほか（インターナショナル・ジャーナル・オブ・マス・スペクトロメトリ（Ｉｎｔ． Ｊ． Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒｏｍ．）「イオン・プロセシーズ（Ｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ）」、８７（１９８９年）、２３７〜２４７）によって提案されているとおり、ＩＣＲセル１４０の近くに配置される。中間トラップ５０は、磁気トラップ、ＲＦトラップ、または好ましくはＲＦ貯蔵および強い磁界を伴ういわゆる『組み合わせトラップ』、たとえば両端にトラッピング・プレートを伴う短セグメント化マルチポールＲＦイオン案内とすることが可能である。
【００５７】
この中間トラップ５０は、コンポーネント１２〜５０によって準備され、選択されたイオン源１０からの複数の注入の収集に使用される。所望のイオン母集団に到達すると、イオンが、オプションのイオン・オプティクス、イオン案内、および差動圧力段を通ってＩＣＲセル１４０に向けて、その後に続く貯蔵および検出のために排出される。本発明のほかの利点に加えて、この構成は、特に、一般にＦＴ−ＩＣＲ内に見られる飛行時間問題の回避に適しており、したがってＦＴ−ＩＣＲセル１４０内に、広い質量範囲をカバーし、かつ注入される成分の期待強度比を有することが可能なイオン母集団を作ることを可能にする。
【００５８】
この実施態様に従った中間イオン貯蔵５０の複数貯蔵の可能性のある応用は、限定ではないが以下を含む。
【００５９】
１． 内部較正物質の信頼できる導入
この場合、イオン貯蔵の１つが、内部較正物質のイオンの蓄積だけに供される。
【００６０】
『ロック・マス』としても知られる内部較正物質の使用は、多くの質量スペクトル計の質量精度を向上させる。ロック・マスは、多様な方法で導入可能である。たとえば、内部較正物質を、分析されることになる標本と同じイオン・ストリーム内に存在し、それだけが富化または除去される、たとえばクロマトグラフィ内に遍在する背景イオンとすることができる。それに代えて、化学反応を使用して較正物質が生成されてもよい。内部較正物質がイオン噴霧器または『デュアル噴霧器』等の異なるイオン・ストリームから獲得されてもよく、ＣＩによるロック・マスの生成または強度において整合されるようにできる。システムに導入されるロック・マスの量が分析物の量に対して適合可能であることが望ましい。
【００６１】
質量スペクトル計は、（ｉ）標本がＡＧＣを使用して所望の存在量まで導入され、（ｉｉ）基準がＡＧＣを使用して所望の存在量まで導入され、かつ（ｉｉｉ）以前に導入されたイオンがともに質量分析されるように動作させることができる。
【００６２】
質量分析器２０は、必要なイオン存在量が達成されるまで、較正物質に対応する狭いｍ／ｚ窓（好ましくは１Ｔｈ）だけを選択する。この必要イオン存在量は、総イオン存在量の固定比（たとえば１０％）とすることが可能であるが、必要質量精度によって負わされる最小値（通常、質量分析器に応じて、質量精度０．５〜２ｐｐｍに対し、１，０００〜１０，０００イオン）より小さくするべきではない。
【００６３】
ロック・マスおよび標本は、異なる『目標』イオン存在量を有することができ、その場合においては、１より多くのロック・マスの使用が有利となることがある。複数のロック・マスは１つのソース／注入からの獲得、および適切な波形による選択ができる（マルチ−イオン分離、たとえばＳＷＩＦＴ）。この複数ロック・マスは、別々に注入されてもよい。
【００６４】
基準を使用して質量スペクトルを改善することができ、またオプションとして、解釈がユーザにとってより好都合となるように基準質量の表示を抑圧することもできる。
【００６５】
複数親ＭＳ／ＭＳ、質量範囲の拡張、およびＭＳ／ＭＳスキャンにおける較正イオンとしての親スペクトル（フル・スキャン）からの追加の質量の使用（選択されたイオン（１つまたは複数）および異なるイオン（１つまたは複数）のＭＳ／ＭＳを収集する）といった、より高度な実験が可能である。このほかの、ＡＧＣの使用を利用するスキームを実装してもよい。たとえば、較正物質（１つまたは複数）のための目標存在量の計算を、プレスキャン情報、スイフト波形またはそのほかの、基準質量パラメータの選択、またはスマートなプレスキャン順序に応じて行うことができる。
【００６６】
先駆物質スキャン・イオンまたはそのほかの較正イオンを生成物イオンとともに収集することは、現在のほとんどのＭＳｎデバイスに見られる重要な問題を解決する。この問題は、生成物スペクトル内への較正質量の導入であり、通常は、較正質量が分離または断片化の間に失われる。
【００６７】
２． 精密質量分析器の単一スペクトル内における複数ＭＳ／ＭＳ実験
この場合においては各充填が、異なるエネルギ、または選択された先駆物質イオンの衝突活性化の方法にまで対応する。たとえば、最初の充填が、共振励起によって質量分析器２０内に形成されるフラグメントのために行われることが可能であり、それが、より高い質量のフラグメントの高められた表現を提供する。２番目の充填はＷＯ２００４／０６８５２３内に述べられているとおり、より高い運動エネルギ（好ましくは０．０３０ｅＶ／Ｔｈ超）において中間イオン貯蔵５０内に注入される先駆物質イオンのために行われることが可能である。後者がインモニウムおよび低質量フラグメントのより良好な表現を提供することから、最良の全体的カバレッジが達成される。
【００６８】
各充填は、最終イオン母集団が全体の活性化／衝突エネルギ範囲に対応するように、活性化または衝突エネルギにおける増分変化に対応することができる。この方法は、質量分析器の単一スペクトル内における『衝突エネルギ・スキャン』の獲得を可能にし、シーケンスのカバレッジを最大化する。また、いくつかの充填のために、追加の断片化方法、たとえばＩＲマルチ−フォトン解離、電子転送解離、電子取り込み解離等を使用することも可能である。後者は、質量分析器２０、イオン・オプティクス４０、または中間イオン貯蔵５０内にアレンジすることが可能である。構造的情報の追加の次元を提供するこれらの方法は、ペプチドおよびタンパク質の新たなシーケンシングのための強力なツールとして複数充填と組み合わせて使用することができる。
【００６９】
イオン数の増加とともに、質量分析器２０は、高い分解能（たとえば１Ｔｈ）を用いて先駆物質イオンを選択する能力を失う。これに対し、貯蔵されるイオンの数が大きいことは、低強度の断片化生成物の識別にとって非常に有用となり得る。複数充填は、必要な総イオン存在量を、それぞれが高分解能選択の空間電荷限界内となるいくつかのより小さいサブセットに分割することによってこの問題が回避されることを可能にしている。
【００７０】
３． 精密質量分析器の単一スペクトル内における複数親ＭＳ／ＭＳ
全体の質量範囲がいくつかの部分範囲に分割され、それぞれが、それ独自の先駆物質イオンに対応する。質量分析器２０の各ＭＳ／ＭＳサイクル内においては、対応するｍ／ｚ範囲のフラグメント・イオンだけが貯蔵され、その後、中間イオン貯蔵５０に転送される。それらの複数充填からのすべてのイオンが精密質量分析器６０内に注入された後は、各先駆物質イオンを、その正確な質量および対応する部分範囲からのその部分的なシーケンスに従って識別することができる。数値的な例としては、１００〜２０００Ｔｈの全質量範囲を、１００〜２００、２００〜４００、４００〜６００、．．．１８００〜２０００Ｔｈの部分範囲に分割できる。これらの範囲のそれぞれは、少なくとも先駆物質イオンおよび１ないし３のそのフラグメントを含む上で充分に広い。この方法においては、たとえばリン酸塩群の損失も容易に識別される。全体的にみてこの種のアプローチは、識別の特定性を保持しつつ、大きさの位数でＭＳ／ＭＳスループットを増加する。
【００７１】
別の好ましい実施態様は、精密質量分析器６０を使用する複数反応監視である。この場合における測定の目的は、それぞれが既知のｍ／ｚ（または中立損失等）を有する先駆物質および１つまたは複数のそのフラグメント両方を監視することによって特定の分析物の存在を確認することである。イオン・トラップ２０は、あらかじめ決定済みの数の特定の先駆物質イオンを選択し、その後それらが、その先駆物質のための最適衝突条件において断片化され、中間イオン貯蔵５０内に貯蔵される。このサイクルが複数の先駆物質イオンについて反復され、その結果、中間イオン貯蔵５０内の最終的な母集団が複数の（好ましくは５〜５０の）先駆物質のＭＳ／ＭＳフラグメントを含むが、それにおいて各セットのフラグメントは、異なる衝突条件において生成できる。結果として得られる母集団は、その後、精密質量分析器６０に注入されて、そこで検出される。特定の反応の監視は、対応する先駆物質および関心フラグメント・イオンの正確な質量（またはそれらの差）を使用して行われる。可能性のある質量ピークのオーバーラップは、高分解能（好ましくは１０，０００〜１００，０００または１０，０００〜１，０００，０００）の質量分析器６０の使用をはじめ、その単一の精密質量スペクトル内のイオンのすべての目標セット間における各関心ｍ／ｚの一様性の予備チェックによって回避される。
【００７２】
複数充填のこの応用、および前述した精密質量分析器の単一スペクトル内における複数ＭＳ／ＭＳ実験は、検出時間が収集時間より有意に長いときにもっとも有用となる。これら２つの応用についての別の使用は、最初に完全スキャンを行い、その後、親イオンの特定量の注入を含むＭＳ／ＭＳスキャンを行う。これは、ＭＳ／ＭＳスキャンの内部較正を可能にする。
【００７３】
４． 中間イオン貯蔵内のイオン−イオン反応
中間イオン貯蔵５０内のＲＦマルチポール５１が（図４に示されているように）セグメント５１’および５１”からなる場合には、反対の極性のイオンをトラップすることが可能である。セグメント５１”上のＤＣオフセットをセグメント５１’および開口５３のそれより低く設定することは、前者のセグメント５１”の長さに沿って正イオンが貯蔵されることを可能にする。イオン源１０、質量分析器２０、およびイオン・オプティクス４０の極性が反転される場合には、負イオンを導入することが可能になる。この場合に負イオンは、開口５２とセグメント５１”の間に貯蔵されることになる。最後に、開口５２および５３のＤＣ電圧がＲＦ電圧によって置き換えられ、５１’および５１”上のオフセットが開口５２および５３のＤＣオフセットと同じレベルに切り替えられる。反応物イオンの数が既知であることから、最終的なイオンの数もより低い精度を通じて予測可能である（以下を参照）。その後、一方の極性の生成物イオンが精密質量分析器６０内に注入される。
【００７４】
負と正のイオンの間の切り替え速度を向上させるために、高い電圧の切り替えを避けることが好ましい。エレクトロスプレイ源の場合には、大気圧から真空へのオリフィスに関し、一方は正の高電圧において、他方は負の高電圧において並列に動作する２つの噴霧器を使用することによってこれを達成することができる。両方の噴霧器は連続かつ安定したモードで動作するが、一方の極性のイオンだけが第１の質量分析器２０に到達できる。
【００７５】
５． 質量分析器２０外の断片化のためのイオン数コントロールの改善
イオン母集団がＡＧＣ検出器３０の下流において何らかの方法で変更される場合には、質量精度への有害な影響を伴ってイオン存在量のコントロールが一層悪化する。これを回避するために、結果として得られるイオン存在量のオンライン較正が必要になる。これは、結果として得られるイオンを中間イオン貯蔵５０からＡＧＣ検出器３０に逆転送し、総イオン存在量を測定した後、それに応じて到来イオン電流を変更することによって行われる。その種の、ＡＧＣ検出器３０の下流におけるイオン変更は以下を含む。中間イオン貯蔵５０内における高エネルギ衝突誘導解離、前述のとおりのイオン対イオン反応または追加の外部イオン源を用いる反応、中性気体を用いる反応（単一荷電種またはクラスタの除去、同位元素でラベル付けされた気体を用いる反応、分析物固有の反応等）、表面誘導解離、ＩＲマルチ−フォトン解離、電子取り込みまたは電子転送解離、またはこのほかの断片化のタイプ。タイプは、イオン・タイプに従って選択され、そのイオン・タイプについて最適に動作させることができる。
【００７６】
このＡＧＣ検出器３０に向けた逆転送は、特に、複数の注入方法を伴って有用となる。
【００７７】
６． スペクトルの継ぎ合わせにおける改善
本発明は、スペクトルの継ぎ合わせ、すなわち１つの質量分析器によって獲得された１より多くの質量スペクトルを組み合わせて単一の質量スペクトルとして呈示することへの代替を提供する。本発明は、２またはそれより多くの質量範囲がイオン・ストリームから選択されることを可能にし、強いピークの除外、低い強度のエリアの富化、または増加された質量範囲を含むことができる。異なるイオン数を提供するべく異なる質量範囲を蓄積すること、およびその後に続いて獲得される質量スペクトルを、それに応じて調整されたピークの相対強度を用いて呈示することができる。その質量範囲は、その後、質量分析器内においてまとめて蓄積し、かつまとめて分析することができ、別々のスペクトルの獲得およびその後のプロセッシング手段を用いた組み合わせが行われなければならないということはない。
【００７８】
質量スペクトル内のピークの調整は、ここに述べられている「スペクトルの継ぎ合わせ」だけでなく、多くの応用の中で使用され得る。たとえば、関心ピークが強められること、または不要／自明なピークが減衰されるか、さらには除去されることが、それらのピークの原因である流入イオンの数の適切なコントロールによってできる。それに加えて、これらのピークは、質量分析器６０のデータの獲得に先行してそれらのイオンが処理される場合に、ストア済みの動作パラメータの使用を通じて質量スペクトルとして表示されるときに操作できる。
【００７９】
７． 分析物の有用性における改善
中間イオン貯蔵５０に続く質量分析器６０は、注入されるイオンの少なくともいくつかが中間イオン貯蔵５０に戻されてさらに蓄積されるような方法で動作させることができる。これは、ＴＯＦタイプの質量分析器、および主として質量分析のその先の段階が下流において企図されているときに特に適している。このアプローチは、低強度信号の有用性を改善する。
【００８０】
上記の場合のそれぞれについて、質量スペクトルが獲得されることになるイオンのタイプの選択は、以前の質量スペクトルから獲得された情報に基づくことができる。たとえばこの情報は、質量、電荷、ｍ／ｚ、イオン電流、質量スペクトル内のランク、同位元素パターン、総イオン電流、クロマトグラフィのピークの立ち上がり時間、およびこれらの類のいずれかまたはいずれかの組み合わせを含むことがある。以前の質量スペクトルは、ＷＯ０３／０１９６１４の中で述べられている方法と同様に、イオンがイオン・トラップ２０を通って質量分析器６０に向けて伝送される短いプレスキャンに対応できる。
【００８１】
本件出願人の特許出願ＰＣＴ／ＥＰ０４／０１０７３５の中で述べられているとおり、イオンの並列処理を採用して質量分析器のスループットを増加できる。たとえば、以前の反応済みイオンのセットからの質量スペクトルの獲得と同時に、以前の蓄積済みイオンのセットの反応が行われている間にイオンの生成および蓄積が行われるように、イオン処理の異なる部分を同時に実行することができる。
【００８２】
当業者によって認識されるとおり、上に述べた実施態様に対する変形を、本発明の範囲から逸脱することなく行うことができる。
【図面の簡単な説明】
【００８３】
【図１】従来技術に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図２】本発明の第１の実施態様に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図３】本発明の第２の実施態様に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図４】本発明の第３の実施態様に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図５】本発明の第４の実施態様に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図６】本発明の第５の実施態様に従ったタンデム質量スペクトル計の概略図である。
【図７】本発明の第６の実施態様に従ったタンデム質量分析器の概略図である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
イオン貯蔵内に、分析されることになる１つのタイプのイオンの標本を蓄積し、
前記イオン貯蔵内に、分析されることになる別のタイプのイオンの標本を蓄積し、
前記イオンの組み合わされた標本を質量分析する質量スペクトル測定の方法であって、
それぞれのタイプのイオンの以前の測定の結果を基礎としてイオンの目標数を達成するように前記１つのタイプのイオンの前記標本および／または別のタイプのイオンの前記標本を蓄積することを特徴とする方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、
第１および第２のタイプのイオンのうちの特定のタイプについて、分析されることになる前記特定のタイプのイオンのテスト標本をテスト注入時間にわたって蓄積し、
そのようにして蓄積された前記特定のタイプのイオンの存在量を測定し、
前記テスト注入時間および前記特定のタイプのイオンの前記測定された存在量を基礎として前記特定のタイプのイオンの所望の目標存在量を結果としてもたらすことになる目標注入時間を決定し、
前記特定のタイプのイオンは、前記組み合わされた標本の質量分析の前に前記目標注入時間にわたって前記イオン貯蔵内に蓄積されることを特徴とする方法。
【請求項３】
請求項２に記載の方法であって、
前記テスト標本および前記特定のタイプのイオンは、異なるイオン貯蔵内に蓄積されることを特徴とする方法。
【請求項４】
請求項２または請求項３に記載の方法であって、
前記特定のタイプのイオンを生成するべくイオン源を動作させ、
前記生成されたイオンを、前記テスト注入時間にわたる蓄積のためおよび前記目標注入時間にわたる蓄積のためにイオン貯蔵に指向することを特徴とする方法。
【請求項５】
請求項２または請求項３に記載の方法であって、
イオンを生成するべくイオン源を動作させ、
前記生成されたイオンを反応セルに指向し、それらが前記イオンの母集団を変化させて前記特定のタイプのイオンを形成する反応を受けることを特徴とする方法。
【請求項６】
請求項５に記載の方法であって、
前記イオン貯蔵が前記反応セルを形成することを特徴とする方法。
【請求項７】
請求項５または請求項６に記載の方法であって、
前記イオンを反応させることが、前記イオンを断片化することおよび前記イオン貯蔵内に生成物イオンを蓄積することを含むことを特徴とする方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法であって、
先駆物質イオン・タイプを選択し、それらのイオンを断片化し、および前記イオン貯蔵内に生成物イオンを蓄積することを特徴とする方法。
【請求項９】
請求項８に記載の方法であって、
複数の先駆物質イオン・タイプを選択し、それらのイオンを断片化し、および前記イオン貯蔵内に生成物イオンを蓄積することを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法であって、
前記反応セルの状態を、断片化されている前記先駆物質イオンに従って変更することを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項５から１０のいずれかに記載の方法であって、
前記特定のタイプのイオンを、前記テスト注入時間にわたる蓄積のため、および前記目標注入時間にわたる蓄積のためにイオン貯蔵に指向することを特徴とする方法。
【請求項１２】
請求項５から１１のいずれかに記載の方法であって、
前記イオン貯蔵が前記反応セルを提供し、
前記テスト注入時間および前記目標注入時間にわたって継続し、それによって前記特定のタイプのイオンを蓄積する反応を可能にすることを特徴とする方法。
【請求項１３】
請求項４から１２のいずれかに記載の方法であって、
前記イオンを前記反応セル内に存在する気相と反応させることを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項２から１３のいずれかに記載の方法であって、
前記特定のタイプのイオンに関して請求項２に定義されているステップを、ほかのタイプのイオンについて反復することを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法であって、
前記特定のタイプのイオンに関して請求項３から１４に定義されているステップのうちのいずれかを、ほかのタイプのイオンについて反復することを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１４または請求項１５に記載の方法であって、
前記特定のタイプおよび前記ほかのタイプのイオンの前記組み合わされた所望の目標存在量が、必要なパフォーマンスのための前記イオン貯蔵の貯蔵容量と実質的に整合することを特徴とする方法。
【請求項１７】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
両方のタイプのイオンを生成するべく前記質量スペクトル計の単一のイオン源を動作させることを特徴とする方法。
【請求項１８】
請求項１から１６のいずれかに記載の方法であって、
１つの前記タイプのイオンを生成するべく第１のイオン源を動作させ、
その後に続いて別の前記タイプのイオンを生成するべく第２のイオン源を動作させることを特徴とする方法。
【請求項１９】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
１つのタイプのイオンおよび／または前記別のタイプのイオンの前記標本を、以前に蓄積されたイオンの組み合わされたセットの質量分析と同時に蓄積することを特徴とする方法。
【請求項２０】
請求項１９に記載の方法であって、
以前に蓄積されたイオンの別の組み合わされたセットを、前記イオンの蓄積および以前に蓄積されたイオンの前記組み合わされたセットの質量分析と同時に反応させることを特徴とする方法。
【請求項２１】
請求項１８から２０のいずれかに記載の方法であって、
電極装置に第１の電圧を印加して電界を作り出し、前記第１のイオン源によって生成されたイオンを前記イオン貯蔵に案内すること、および前記電極装置に第２の電圧を印加して電界を作り出し、前記第２のイオン源によって生成されたイオンを前記イオン貯蔵に案内することを特徴とする方法。
【請求項２２】
請求項１８から２０のいずれかに記載の方法であって、
磁石装置に第１の電流を印加して磁界を作り出し、前記第１のイオン源によって生成されたイオンを前記イオン貯蔵に案内すること、および前記磁石装置に第２の電流を印加して磁界を作り出し、前記第２のイオン源によって生成されたイオンを前記イオン貯蔵に案内することを特徴とする方法。
【請求項２３】
請求項２１または請求項２２に記載の方法であって、
前記電界または磁界の間の切り替えは、前記電極装置または磁石装置の移動を伴わずに実行されることを特徴とする方法。
【請求項２４】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
いずれかのタイプのイオンの蓄積に有利となる条件の下に前記質量スペクトル計を動作させることを特徴とする方法。
【請求項２５】
請求項１から１８のいずれかに記載の方法であって、
それぞれの蓄積期間の間に、両方のタイプのイオンの蓄積に有利となる条件の下に前記質量スペクトル計を動作させることを特徴とする方法。
【請求項２６】
請求項２４または請求項２５に記載の方法であって、
質量フィルタを動作させ、前記イオン貯蔵内に貯蔵されることになるいずれかのタイプのイオンまたは両方のタイプのイオンを優先して選択することを特徴とする方法。
【請求項２７】
請求項２４から２６のいずれかに記載の方法であって、イオン・オプティクスを動作させ、いずれかのタイプのイオンまたは両方のタイプのイオンを優先して前記イオン貯蔵に伝送することを特徴とする方法。
【請求項２８】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
前記イオン・タイプの１つが内部較正物質であり、前記別のイオン・タイプが分析されることになる標本であることを特徴とする方法。
【請求項２９】
請求項２８に記載の方法であって、
単一のイオン源を使用して前記内部較正物質イオンおよび前記標本イオンをともに生成することを特徴とする方法。
【請求項３０】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
前記タイプのイオンのうちの１つを反応させて内部較正物質を形成することを特徴とする方法。
【請求項３１】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
親イオンに断片化を生じさせて生成物イオンを形成することを包含し、それにおいて前記イオン・タイプの１つが親イオンに対応し、前記別のイオン・タイプが生成物イオンに対応することを特徴とする方法。
【請求項３２】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
前記２つのタイプのイオンは、異なる質量範囲を有することを特徴とする方法。
【請求項３３】
請求項３２に記載の方法であって、
前記異なる質量範囲は、隣接しているか、分かれているか、またはオーバーラップしていることを特徴とする方法。
【請求項３４】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
前記２つのタイプのイオンを前記質量分析の実行に先行して互いに反応させることを特徴とする方法。
【請求項３５】
請求項３４に記載の方法であって、
前記２つのタイプのイオンは、反対の極性のものであることを特徴とする方法。
【請求項３６】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
蓄積されることになる前記タイプのイオンは、以前に獲得された質量スペクトルから得られた情報に従って選択されることを特徴とする方法。
【請求項３７】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
ＭＳｎスペクトル測定を実行することを特徴とする方法。
【請求項３８】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
前記イオン貯蔵から質量分析のための別体の質量分析器に前記組み合わされたイオンの標本を排出することを特徴とする方法。
【請求項３９】
請求項３８に記載の方法であって、
前記質量分析器は、フーリエ変換イオン・サイクロトロン共振タイプ、オービトラップ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）を含む多反射静電トラップ・タイプ、または単または複反射飛行時間タイプのうちのいずれかであることを特徴とする方法。
【請求項４０】
請求項３８または請求項３９に記載の方法であって、
前記組み合わされたイオンの標本の前記注入の後にイオンが前記別体の質量分析器から前記イオン貯蔵に戻されることを特徴とする方法。
【請求項４１】
先行するいずれかの請求項に記載の方法に従って動作するべく構成された質量スペクトル計。
【請求項４２】
請求項４１に記載の質量スペクトル計であって、
請求項１から４０のいずれかに記載の方法に従って前記質量スペクトル計を動作させるべくプログラムされたプログラマブル・コントローラを含むことを特徴とする質量スペクトル計。
【請求項４３】
請求項４２に記載のコントローラ上において実行されるときに、前記質量スペクトル計を、請求項１から４０のいずれかに記載の方法に従って動作させるコンピュータ・プログラム・インストラクションを包含するコンピュータ・プログラム。
【請求項１】
イオン貯蔵内に、分析されることになる１つのタイプのイオンの標本を蓄積し、
前記イオン貯蔵内に、分析されることになる別のタイプのイオンの標本を蓄積し、
前記イオンの組み合わされた標本を質量分析する質量スペクトル測定の方法であって、
それぞれのタイプのイオンの以前の測定の結果を基礎としてイオンの目標数を達成するように前記１つのタイプのイオンの前記標本および／または別のタイプのイオンの前記標本を蓄積することを特徴とする方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法であって、
第１および第２のタイプのイオンのうちの特定のタイプについて、分析されることになる前記特定のタイプのイオンのテスト標本をテスト注入時間にわたって蓄積し、
そのようにして蓄積された前記特定のタイプのイオンの存在量を測定し、
前記テスト注入時間および前記特定のタイプのイオンの前記測定された存在量を基礎として前記特定のタイプのイオンの所望の目標存在量を結果としてもたらすことになる目標注入時間を決定し、
前記特定のタイプのイオンは、前記組み合わされた標本の質量分析の前に前記目標注入時間にわたって前記イオン貯蔵内に蓄積されることを特徴とする方法。
【請求項３】
請求項２に記載の方法であって、
前記テスト標本および前記特定のタイプのイオンは、異なるイオン貯蔵内に蓄積されることを特徴とする方法。
【請求項４】
請求項２または請求項３に記載の方法であって、
前記特定のタイプのイオンを生成するべくイオン源を動作させ、
前記生成されたイオンを、前記テスト注入時間にわたる蓄積のためおよび前記目標注入時間にわたる蓄積のためにイオン貯蔵に指向することを特徴とする方法。
【請求項５】
請求項２または請求項３に記載の方法であって、
イオンを生成するべくイオン源を動作させ、
前記生成されたイオンを反応セルに指向し、それらが前記イオンの母集団を変化させて前記特定のタイプのイオンを形成する反応を受けることを特徴とする方法。
【請求項６】
請求項５に記載の方法であって、
前記イオン貯蔵が前記反応セルを形成することを特徴とする方法。
【請求項７】
請求項５または請求項６に記載の方法であって、
前記イオンを反応させることが、前記イオンを断片化することおよび前記イオン貯蔵内に生成物イオンを蓄積することを含むことを特徴とする方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法であって、
先駆物質イオン・タイプを選択し、それらのイオンを断片化し、および前記イオン貯蔵内に生成物イオンを蓄積することを特徴とする方法。
【請求項９】
請求項８に記載の方法であって、
複数の先駆物質イオン・タイプを選択し、それらのイオンを断片化し、および前記イオン貯蔵内に生成物イオンを蓄積することを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項９に記載の方法であって、
前記反応セルの状態を、断片化されている前記先駆物質イオンに従って変更することを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項５から１０のいずれかに記載の方法であって、
前記特定のタイプのイオンを、前記テスト注入時間にわたる蓄積のため、および前記目標注入時間にわたる蓄積のためにイオン貯蔵に指向することを特徴とする方法。
【請求項１２】
請求項５から１１のいずれかに記載の方法であって、
前記イオン貯蔵が前記反応セルを提供し、
前記テスト注入時間および前記目標注入時間にわたって継続し、それによって前記特定のタイプのイオンを蓄積する反応を可能にすることを特徴とする方法。
【請求項１３】
請求項４から１２のいずれかに記載の方法であって、
前記イオンを前記反応セル内に存在する気相と反応させることを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項２から１３のいずれかに記載の方法であって、
前記特定のタイプのイオンに関して請求項２に定義されているステップを、ほかのタイプのイオンについて反復することを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法であって、
前記特定のタイプのイオンに関して請求項３から１４に定義されているステップのうちのいずれかを、ほかのタイプのイオンについて反復することを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１４または請求項１５に記載の方法であって、
前記特定のタイプおよび前記ほかのタイプのイオンの前記組み合わされた所望の目標存在量が、必要なパフォーマンスのための前記イオン貯蔵の貯蔵容量と実質的に整合することを特徴とする方法。
【請求項１７】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
両方のタイプのイオンを生成するべく前記質量スペクトル計の単一のイオン源を動作させることを特徴とする方法。
【請求項１８】
請求項１から１６のいずれかに記載の方法であって、
１つの前記タイプのイオンを生成するべく第１のイオン源を動作させ、
その後に続いて別の前記タイプのイオンを生成するべく第２のイオン源を動作させることを特徴とする方法。
【請求項１９】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
１つのタイプのイオンおよび／または前記別のタイプのイオンの前記標本を、以前に蓄積されたイオンの組み合わされたセットの質量分析と同時に蓄積することを特徴とする方法。
【請求項２０】
請求項１９に記載の方法であって、
以前に蓄積されたイオンの別の組み合わされたセットを、前記イオンの蓄積および以前に蓄積されたイオンの前記組み合わされたセットの質量分析と同時に反応させることを特徴とする方法。
【請求項２１】
請求項１８から２０のいずれかに記載の方法であって、
電極装置に第１の電圧を印加して電界を作り出し、前記第１のイオン源によって生成されたイオンを前記イオン貯蔵に案内すること、および前記電極装置に第２の電圧を印加して電界を作り出し、前記第２のイオン源によって生成されたイオンを前記イオン貯蔵に案内することを特徴とする方法。
【請求項２２】
請求項１８から２０のいずれかに記載の方法であって、
磁石装置に第１の電流を印加して磁界を作り出し、前記第１のイオン源によって生成されたイオンを前記イオン貯蔵に案内すること、および前記磁石装置に第２の電流を印加して磁界を作り出し、前記第２のイオン源によって生成されたイオンを前記イオン貯蔵に案内することを特徴とする方法。
【請求項２３】
請求項２１または請求項２２に記載の方法であって、
前記電界または磁界の間の切り替えは、前記電極装置または磁石装置の移動を伴わずに実行されることを特徴とする方法。
【請求項２４】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
いずれかのタイプのイオンの蓄積に有利となる条件の下に前記質量スペクトル計を動作させることを特徴とする方法。
【請求項２５】
請求項１から１８のいずれかに記載の方法であって、
それぞれの蓄積期間の間に、両方のタイプのイオンの蓄積に有利となる条件の下に前記質量スペクトル計を動作させることを特徴とする方法。
【請求項２６】
請求項２４または請求項２５に記載の方法であって、
質量フィルタを動作させ、前記イオン貯蔵内に貯蔵されることになるいずれかのタイプのイオンまたは両方のタイプのイオンを優先して選択することを特徴とする方法。
【請求項２７】
請求項２４から２６のいずれかに記載の方法であって、イオン・オプティクスを動作させ、いずれかのタイプのイオンまたは両方のタイプのイオンを優先して前記イオン貯蔵に伝送することを特徴とする方法。
【請求項２８】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
前記イオン・タイプの１つが内部較正物質であり、前記別のイオン・タイプが分析されることになる標本であることを特徴とする方法。
【請求項２９】
請求項２８に記載の方法であって、
単一のイオン源を使用して前記内部較正物質イオンおよび前記標本イオンをともに生成することを特徴とする方法。
【請求項３０】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
前記タイプのイオンのうちの１つを反応させて内部較正物質を形成することを特徴とする方法。
【請求項３１】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
親イオンに断片化を生じさせて生成物イオンを形成することを包含し、それにおいて前記イオン・タイプの１つが親イオンに対応し、前記別のイオン・タイプが生成物イオンに対応することを特徴とする方法。
【請求項３２】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
前記２つのタイプのイオンは、異なる質量範囲を有することを特徴とする方法。
【請求項３３】
請求項３２に記載の方法であって、
前記異なる質量範囲は、隣接しているか、分かれているか、またはオーバーラップしていることを特徴とする方法。
【請求項３４】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
前記２つのタイプのイオンを前記質量分析の実行に先行して互いに反応させることを特徴とする方法。
【請求項３５】
請求項３４に記載の方法であって、
前記２つのタイプのイオンは、反対の極性のものであることを特徴とする方法。
【請求項３６】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
蓄積されることになる前記タイプのイオンは、以前に獲得された質量スペクトルから得られた情報に従って選択されることを特徴とする方法。
【請求項３７】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
ＭＳｎスペクトル測定を実行することを特徴とする方法。
【請求項３８】
先行するいずれかの請求項に記載の方法であって、
前記イオン貯蔵から質量分析のための別体の質量分析器に前記組み合わされたイオンの標本を排出することを特徴とする方法。
【請求項３９】
請求項３８に記載の方法であって、
前記質量分析器は、フーリエ変換イオン・サイクロトロン共振タイプ、オービトラップ（Ｏｒｂｉｔｒａｐ）を含む多反射静電トラップ・タイプ、または単または複反射飛行時間タイプのうちのいずれかであることを特徴とする方法。
【請求項４０】
請求項３８または請求項３９に記載の方法であって、
前記組み合わされたイオンの標本の前記注入の後にイオンが前記別体の質量分析器から前記イオン貯蔵に戻されることを特徴とする方法。
【請求項４１】
先行するいずれかの請求項に記載の方法に従って動作するべく構成された質量スペクトル計。
【請求項４２】
請求項４１に記載の質量スペクトル計であって、
請求項１から４０のいずれかに記載の方法に従って前記質量スペクトル計を動作させるべくプログラムされたプログラマブル・コントローラを含むことを特徴とする質量スペクトル計。
【請求項４３】
請求項４２に記載のコントローラ上において実行されるときに、前記質量スペクトル計を、請求項１から４０のいずれかに記載の方法に従って動作させるコンピュータ・プログラム・インストラクションを包含するコンピュータ・プログラム。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公表番号】特表２００８−５４２７３９（Ｐ２００８−５４２７３９Ａ）
【公表日】平成２０年１１月２７日（２００８．１１．２７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５１４１８６（Ｐ２００８−５１４１８６）
【出願日】平成１８年５月３１日（２００６．５．３１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００６／００１９７６
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１２９０８３
【国際公開日】平成１８年１２月７日（２００６．１２．７）
【出願人】（５０１１９２０５９）サーモ フィニガン リミテッド ライアビリティ カンパニー (42)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年１１月２７日（２００８．１１．２７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１８年５月３１日（２００６．５．３１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００６／００１９７６
【国際公開番号】ＷＯ２００６／１２９０８３
【国際公開日】平成１８年１２月７日（２００６．１２．７）
【出願人】（５０１１９２０５９）サーモ フィニガン リミテッド ライアビリティ カンパニー (42)
【Ｆターム（参考）】
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