遺伝子サイレンシングに有用なＨＢＶおよびＨＣＶ保存配列
【課題】ｄｓＲＮＡ介在性遺伝子サイレンシングは、少なくとも部分的な二本鎖ｄｓＲＮＡを提供する組成物を利用し、極めて困難な問題である慢性ＨＢＶおよび／またはＨＣＶ感染症を含め、ＨＢＶおよび／またはＨＣＶを含むウイルス感染症に対し極めて有益な治療薬および／または予防薬を提供することが期待される。
【解決手段】哺乳動物細胞中でのウイルスの発現を阻害するのに有用である、既知のＢ型肝炎ウイルス株および既知のＣ型肝炎ウイルス株由来の保存コンセンサス配列が提供される。これらの配列はＨＢＶおよびＨＣＶの遺伝子をサイレンシングするのに有用であり、それによりヒトにおけるＨＢＶおよびＨＣＶウイルス感染症に対する治療上の有用性を提供する。
【解決手段】哺乳動物細胞中でのウイルスの発現を阻害するのに有用である、既知のＢ型肝炎ウイルス株および既知のＣ型肝炎ウイルス株由来の保存コンセンサス配列が提供される。これらの配列はＨＢＶおよびＨＣＶの遺伝子をサイレンシングするのに有用であり、それによりヒトにおけるＨＢＶおよびＨＣＶウイルス感染症に対する治療上の有用性を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する方法であって、前記細胞に、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる少なくとも１個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、方法。
【請求項２】
少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が前記細胞に投与され、各々が配列番号１８、配列番号１９、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記細胞に、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２３、および配列番号４９を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記投与するステップが、前記哺乳動物体内細胞に、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる少なくとも１個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを提供することにより達成される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記哺乳動物体内細胞に、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを提供するステップを含んでなる、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
配列番号１８、配列番号１９、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる少なくとも４個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を発現するステップを含んでなる、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記少なくとも１個の発現ベクターが、ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターからなる群より選択されるプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが１個またはそれ以上の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項４に記載の方法。
【請求項８】
前記哺乳動物細胞がヒト細胞である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、少なくとも１個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなり、各二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる、組成物。
【請求項１０】
哺乳動物細胞中での少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを含んでなる、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記発現ベクターが、ポリメラーゼＩプロモーター、ポリメラーゼＩＩＩプロモーター、Ｕ６プロモーター、Ｈ１プロモーター、７ＳＫプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが１個またはそれ以上の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
哺乳動物体内細胞中での、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１８を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子；配列番号１９を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子；配列番号２３を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子；および配列番号４９を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子；の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを含んでなる、請求項９に記載の組成物。
【請求項１３】
請求項１０に記載の発現ベクターを含んでなる哺乳動物細胞。
【請求項１４】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する方法であって、前記細胞に少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなり、各二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、Ｔに対しＵが置換される、（ａ）配列番号５４、配列番号５５、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、および配列番号６２からなる群より選択される配列、（ｂ）前記選択された配列の逆相補体、および（ｃ）場合により、配列（ａ）および（ｂ）を連結する配列、を含んでなる、方法。
【請求項１５】
前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が前記細胞に前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする少なくとも１個の発現ベクターを提供することにより投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子がヘアピンｄｓＲＮＡ分子である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記発現ベクターが、ポリメラーゼＩプロモーター、ポリメラーゼＩＩＩプロモーター、Ｕ６プロモーター、Ｈ１プロモーター、７ＳＫプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが１個またはそれ以上の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなり、各二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、Ｔに対しＵが置換される、（ａ）配列番号５４、配列番号５５、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、および配列番号６２からなる群より選択される配列、（ｂ）前記選択された配列の逆相補体、および（ｃ）場合により、配列（ａ）および（ｂ）を連結する配列、を含んでなる、組成物。
【請求項１９】
前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする少なくとも１個の発現ベクターを含んでなる、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子がヘアピンｄｓＲＮＡ分子である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記発現ベクターが、ポリメラーゼＩプロモーター、ポリメラーゼＩＩＩプロモーター、Ｕ６プロモーター、Ｈ１プロモーター、７ＳＫプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが１個またはそれ以上の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
哺乳動物体内細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する方法であって、前記細胞に、（ａ）配列位置９５１０〜９５３１、９５１０〜９５３３、９５１０〜９５３４、９５１０〜９５３５、９５１０〜９５３６、９５１４〜９５３４、９５１４〜９５３５、９５１４〜９５３６、９５１４〜９５３９、９５１４〜９５４０、９５１４〜９５４２、９５１７〜９５３９、９５１７〜９５４０、９５１７〜９５４２、９５１７〜９５４４、９５１８〜９５３９、９５１８〜９５４０、９５１８〜９５４２、９５１８〜９５４４、９５２０〜９５４０、９５２０〜９５４２、９５２０〜９５４４、９５２０〜９５４８、９５２１〜９５４２、９５２１〜９５４４、９５２１〜９５４８、９５２１〜９５４９、９５２２〜９５４２、９５２２〜９５４４、９５２２〜９５４８、９５２２〜９５４９、９５２７〜９５４８、９５２７〜９５４９、９５２７〜９５５１、９５２７〜９５５２、９５２７〜９５５３、９５２７〜９５５５、９５２８〜９５４８、９５２８〜９５４９、９５２８〜９５５１、９５２８〜９５５２、９５２８〜９５５３、９５２８〜９５５５、９５３０〜９５５１、９５３０〜９５５２、９５３０〜９５５３、９５３０〜９５５５、９５３０〜９５５７、９５３０〜９５５８、９５３２〜９５５２、９５３２〜９５５３、９５３２〜９５５５、９５３２〜９５５７、９５３２〜９５５８、９５３２〜９５５９、９５３２〜９５６０、９５３７〜９５５７、９５３７〜９５５８、９５３７〜９５５９、９５３７〜９５６０、９５３７〜９５６１、９５３７〜９５６４、９５３８〜９５５８、９５３８〜９５５９、９５３８〜９５６０、９５３８〜９５６１、９５３８〜９５６４、９５３８〜９５６６、９５４１〜９５６１、９５４１〜９５６４、９５４１〜９５６６、９５４１〜９５６８、９５４１〜９５６９、９５４３〜９５６４、９５４３〜９５６６、９５４３〜９５６８、９５４３〜９５６９、９５４３〜９５７１、９５４５〜９５６６、９５４５〜９５６８、９５４５〜９５６９、９５４５〜９５７１、９５４５〜９５７３、９５４６〜９５６４、９５４６〜９５６６、９５４６〜９５６９、９５４６〜９５７１、９５４６〜９５７３、９５４７〜９５６８、９５４７〜９５６９、９５４７〜９５７１、９５４７〜９５７３、９５４７〜９５７５、９５５０〜９５７１、９５５０〜９５７３、９５５０〜９５７５、９５５０〜９５７７、９５５０〜９５７８、９５５４〜９５７５、９５５４〜９５７７、９５５４〜９５７８、９５５４〜９５８０、９５５６〜９５７７、９５５６〜９５７８、９５５６〜９５８０、９５５６〜９５８４、９５６２〜９５８４、９５６２〜９５８６、９５６２〜９５８７、９５６２〜９５８８、９５６２〜９５８９、９５６３〜９５８４、９５６３〜９５８６、９５６３〜９５８７、９５６３〜９５８８、９５６３〜９５８９、９５６３〜９５９１、９５６５〜９５８６、９５６５〜９５８７、９５６５〜９５８８、９５６５〜９５８９、９５６５〜９５９１、９５６５〜９５９３、９５６７〜９５８７、９５６７〜９５８８、９５６７〜９５８９、９５６７〜９５９１、９５６７〜９５９３、９５６７〜９５９５、９５７０〜９５９１、９５７０〜９５９３、９５７０〜９５９５、９５７０〜９５９６、９５７０〜９５９８、９５７２〜９５９３、９５７２〜９５９５、９５７２〜９５９６、９５７２〜９５９８、９５７４〜９５９５、９５７４〜９５９６、９５７４〜９５９８、９５７４〜９６０１、９５７６〜９５９６、９５７６〜９５９８、９５７６〜９６０１、９５７６〜９６０４、９５７９〜９６０１、９５７９〜９６０４、９５８１〜９６０１、９５８１〜９６０４、および９５８３〜９６０４位からなる群より選択されるＣ型肝炎ウイルスＤＮＡコード鎖配列と等しいＲＮＡ配列、（ｂ）前記選択されたＣ型肝炎ウイルスＤＮＡコード鎖配列の逆相補体であるＲＮＡ配列、および、場合により、（ｃ）（ａ）および（ｂ）を連結する配列、を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、方法。
【請求項２３】
前記投与するステップが、前記哺乳動物細胞中での前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する１個またはそれ以上の発現ベクターを提供することにより達成される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記１個またはそれ以上の発現ベクターが、ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターより選択される少なくとも１個のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
少なくとも１個の発現ベクターが少なくとも２個の発現カセットを含んでなり、各発現カセットが、Ｕ６プロモーター、７ＳＫプロモーター、Ｈ１プロモーター、およびＭＲＰプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターを含んでなる、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記哺乳動物細胞がヒト細胞である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
哺乳動物体内細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなり、各々が、（ａ）配列位置９５１０〜９５３１、９５１０〜９５３３、９５１０〜９５３４、９５１０〜９５３５、９５１０〜９５３６、９５１４〜９５３４、９５１４〜９５３５、９５１４〜９５３６、９５１４〜９５３９、９５１４〜９５４０、９５１４〜９５４２、９５１７〜９５３９、９５１７〜９５４０、９５１７〜９５４２、９５１７〜９５４４、９５１８〜９５３９、９５１８〜９５４０、９５１８〜９５４２、９５１８〜９５４４、９５２０〜９５４０、９５２０〜９５４２、９５２０〜９５４４、９５２０〜９５４８、９５２１〜９５４２、９５２１〜９５４４、９５２１〜９５４８、９５２１〜９５４９、９５２２〜９５４２、９５２２〜９５４４、９５２２〜９５４８、９５２２〜９５４９、９５２７〜９５４８、９５２７〜９５４９、９５２７〜９５５１、９５２７〜９５５２、９５２７〜９５５３、９５２７〜９５５５、９５２８〜９５４８、９５２８〜９５４９、９５２８〜９５５１、９５２８〜９５５２、９５２８〜９５５３、９５２８〜９５５５、９５３０〜９５５１、９５３０〜９５５２、９５３０〜９５５３、９５３０〜９５５５、９５３０〜９５５７、９５３０〜９５５８、９５３２〜９５５２、９５３２〜９５５３、９５３２〜９５５５、９５３２〜９５５７、９５３２〜９５５８、９５３２〜９５５９、９５３２〜９５６０、９５３７〜９５５７、９５３７〜９５５８、９５３７〜９５５９、９５３７〜９５６０、９５３７〜９５６１、９５３７〜９５６４、９５３８〜９５５８、９５３８〜９５５９、９５３８〜９５６０、９５３８〜９５６１、９５３８〜９５６４、９５３８〜９５６６、９５４１〜９５６１、９５４１〜９５６４、９５４１〜９５６６、９５４１〜９５６８、９５４１〜９５６９、９５４３〜９５６４、９５４３〜９５６６、９５４３〜９５６８、９５４３〜９５６９、９５４３〜９５７１、９５４５〜９５６６、９５４５〜９５６８、９５４５〜９５６９、９５４５〜９５７１、９５４５〜９５７３、９５４６〜９５６４、９５４６〜９５６６、９５４６〜９５６９、９５４６〜９５７１、９５４６〜９５７３、９５４７〜９５６８、９５４７〜９５６９、９５４７〜９５７１、９５４７〜９５７３、９５４７〜９５７５、９５５０〜９５７１、９５５０〜９５７３、９５５０〜９５７５、９５５０〜９５７７、９５５０〜９５７８、９５５４〜９５７５、９５５４〜９５７７、９５５４〜９５７８、９５５４〜９５８０、９５５６〜９５７７、９５５６〜９５７８、９５５６〜９５８０、９５５６〜９５８４、９５６２〜９５８４、９５６２〜９５８６、９５６２〜９５８７、９５６２〜９５８８、９５６２〜９５８９、９５６３〜９５８４、９５６３〜９５８６、９５６３〜９５８７、９５６３〜９５８８、９５６３〜９５８９、９５６３〜９５９１、９５６５〜９５８６、９５６５〜９５８７、９５６５〜９５８８、９５６５〜９５８９、９５６５〜９５９１、９５６５〜９５９３、９５６７〜９５８７、９５６７〜９５８８、９５６７〜９５８９、９５６７〜９５９１、９５６７〜９５９３、９５６７〜９５９５、９５７０〜９５９１、９５７０〜９５９３、９５７０〜９５９５、９５７０〜９５９６、９５７０〜９５９８、９５７２〜９５９３、９５７２〜９５９５、９５７２〜９５９６、９５７２〜９５９８、９５７４〜９５９５、９５７４〜９５９６、９５７４〜９５９８、９５７４〜９６０１、９５７６〜９５９６、９５７６〜９５９８、９５７６〜９６０１、９５７６〜９６０４、９５７９〜９６０１、９５７９〜９６０４、９５８１〜９６０１、９５８１〜９６０４、および９５８３〜９６０４位からなる群より選択されるＣ型肝炎ウイルスＤＮＡコード鎖配列と等しいＲＮＡ配列、（ｂ）前記選択されたＣ型肝炎ウイルスＤＮＡコード鎖配列の逆相補体であるＲＮＡ配列、および、場合により、（ｃ）（ａ）および（ｂ）を連結する配列、を含んでなる、組成物。
【請求項２８】
請求項２７に記載の組成物をコードする発現ベクター。
【請求項２９】
請求項２８に記載の発現コンストラクトを含んでなる哺乳動物細胞。
【請求項３０】
ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターより選択される少なくとも１個のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項２８に記載の発現ベクター。
【請求項３１】
少なくとも２個の発現カセットを含んでなり、各発現カセットがＵ６プロモーター、７ＳＫプロモーター、Ｈ１プロモーター、およびＭＲＰプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターを含んでなり、前記ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターの各々が二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項３０に記載の発現ベクター。
【請求項３２】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する方法であって、前記細胞に、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０からなる群より選択される配列内由来の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、方法。
【請求項３３】
少なくとも２個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が同一哺乳動物細胞に投与される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、配列番号１〜配列番号１０のうちの２以上の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記投与するステップが、前記哺乳動物細胞中での前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する１個またはそれ以上の発現ベクターを提供することにより達成される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記１個またはそれ以上の発現ベクターが、ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターより選択されるプロモーターをさらに含んでなり、前記プロモーターが少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
哺乳動物体内細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する方法であって、前記細胞に、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１１および配列番号１２からなる群より選択される配列内由来の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、方法。
【請求項３８】
少なくとも２個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が同一哺乳動物細胞に投与される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記少なくとも２個の二本鎖エフェクター分子が、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７のうちの２以上の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記投与するステップが、前記哺乳動物細胞中での前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する１個またはそれ以上の発現ベクターを提供することにより達成される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記１個またはそれ以上の発現ベクターが、ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターより選択される１個またはそれ以上のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
少なくとも１個の発現ベクターが少なくとも２個の発現カセットを含んでなり、各発現カセットが、Ｕ６プロモーター、７ＳＫプロモーター、Ｈ１プロモーター、およびＭＲＰプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターを含んでなり、前記ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターの各々が前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
同一哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列およびＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の双方の発現を阻害する方法であって、前記細胞に、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０からなる群より選択される配列内由来の第１の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子、および、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７からなる群より選択される配列内由来の第２の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、方法。
【請求項４４】
配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子、および配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、前記同一哺乳動物体内細胞に投与される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記投与するステップが、前記哺乳動物細胞中での前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する１個またはそれ以上の発現ベクターを提供することにより達成される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
前記１個またはそれ以上の発現ベクターが、ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターより選択される１個またはそれ以上のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０からなる群より選択される配列内由来の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、組成物。
【請求項４８】
少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる組成物であって、前記エフェクター分子が配列番号１〜配列番号１０のうちの２以上の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる、請求項４７に記載の組成物。
【請求項４９】
配列番号５、配列番号６、配列番号７、および配列番号８のうちの２以上の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、請求項４８に記載の組成物。
【請求項５０】
各々が配列番号５、配列番号６、配列番号７、および配列番号８のうちの少なくとも３の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも３個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５１】
哺乳動物体内細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１１および配列番号１２からなる群より選択される配列内由来の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、組成物。
【請求項５２】
少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる組成物であって、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７のうちの２以上の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなるエフェクター分子が前記組成物中に存在する、請求項５１に記載の組成物。
【請求項５３】
哺乳動物体内細胞中での少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現コンストラクトを含んでなる、請求項５２に記載の組成物。
【請求項５４】
単一哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列およびＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の双方の発現を阻害する組成物であって、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０からなる群より選択される配列内由来の第１の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子、および、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７からなる群より選択される配列内由来の第２の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、組成物。
【請求項５５】
哺乳動物体内細胞中での少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現コンストラクトを含んでなる、請求項５４に記載の組成物。
【請求項５６】
配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子、および、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、請求項５４に記載の組成物。
【請求項５７】
前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを含んでなる、請求項５６に記載の組成物。
【請求項５８】
配列番号５、配列番号６、配列番号７、および配列番号８内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、請求項５６に記載の組成物。
【請求項５９】
哺乳動物体内細胞中での前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを含んでなる、請求項５８に記載の組成物。
【請求項６０】
配列番号１４〜配列番号２６、および配列番号４９より選択される配列を含んでなるポリヌクレオチド配列。
【請求項６１】
配列番号１４〜配列番号２６、および配列番号４９より選択される配列のヌクレオチド１〜１９、１〜２０、１〜２１、２〜２０、２〜２１、または３〜２１を含んでなるポリヌクレオチド配列。
【請求項６２】
配列番号２７〜配列番号４４、配列番号５０〜配列番号６２、および配列番号７２〜７６より選択される配列内由来の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなるポリヌクレオチド配列。
【請求項６３】
哺乳動物細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、Ｔに対しＵが置換される、配列番号２７内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、組成物。
【請求項６４】
哺乳動物細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、Ｔに対しＵが置換される、（ａ）配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４２、配列番号４４、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、および配列番号７６からなる群より選択される配列、および（ｂ）前記選択された配列の逆相補体、および、場合により、（ｃ）配列（ａ）および（ｂ）を連結する配列、を含んでなる少なくとも１個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、組成物。
【請求項６５】
前記少なくとも１個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、および配列番号７６からなる群より選択される配列を含んでなる、請求項６４に記載の組成物。
【請求項６６】
請求項６４に記載の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする発現ベクター。
【請求項１】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する方法であって、前記細胞に、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる少なくとも１個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、方法。
【請求項２】
少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が前記細胞に投与され、各々が配列番号１８、配列番号１９、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記細胞に、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２３、および配列番号４９を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記投与するステップが、前記哺乳動物体内細胞に、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる少なくとも１個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを提供することにより達成される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記哺乳動物体内細胞に、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを提供するステップを含んでなる、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
配列番号１８、配列番号１９、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる少なくとも４個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を発現するステップを含んでなる、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記少なくとも１個の発現ベクターが、ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターからなる群より選択されるプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが１個またはそれ以上の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項４に記載の方法。
【請求項８】
前記哺乳動物細胞がヒト細胞である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、少なくとも１個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなり、各二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、および配列番号４９からなる群より選択される配列を含んでなる、組成物。
【請求項１０】
哺乳動物細胞中での少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを含んでなる、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記発現ベクターが、ポリメラーゼＩプロモーター、ポリメラーゼＩＩＩプロモーター、Ｕ６プロモーター、Ｈ１プロモーター、７ＳＫプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが１個またはそれ以上の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
哺乳動物体内細胞中での、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１８を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子；配列番号１９を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子；配列番号２３を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子；および配列番号４９を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子；の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを含んでなる、請求項９に記載の組成物。
【請求項１３】
請求項１０に記載の発現ベクターを含んでなる哺乳動物細胞。
【請求項１４】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する方法であって、前記細胞に少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなり、各二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、Ｔに対しＵが置換される、（ａ）配列番号５４、配列番号５５、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、および配列番号６２からなる群より選択される配列、（ｂ）前記選択された配列の逆相補体、および（ｃ）場合により、配列（ａ）および（ｂ）を連結する配列、を含んでなる、方法。
【請求項１５】
前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が前記細胞に前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする少なくとも１個の発現ベクターを提供することにより投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子がヘアピンｄｓＲＮＡ分子である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記発現ベクターが、ポリメラーゼＩプロモーター、ポリメラーゼＩＩＩプロモーター、Ｕ６プロモーター、Ｈ１プロモーター、７ＳＫプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが１個またはそれ以上の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなり、各二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、Ｔに対しＵが置換される、（ａ）配列番号５４、配列番号５５、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、および配列番号６２からなる群より選択される配列、（ｂ）前記選択された配列の逆相補体、および（ｃ）場合により、配列（ａ）および（ｂ）を連結する配列、を含んでなる、組成物。
【請求項１９】
前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする少なくとも１個の発現ベクターを含んでなる、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子がヘアピンｄｓＲＮＡ分子である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記発現ベクターが、ポリメラーゼＩプロモーター、ポリメラーゼＩＩＩプロモーター、Ｕ６プロモーター、Ｈ１プロモーター、７ＳＫプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが１個またはそれ以上の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
哺乳動物体内細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する方法であって、前記細胞に、（ａ）配列位置９５１０〜９５３１、９５１０〜９５３３、９５１０〜９５３４、９５１０〜９５３５、９５１０〜９５３６、９５１４〜９５３４、９５１４〜９５３５、９５１４〜９５３６、９５１４〜９５３９、９５１４〜９５４０、９５１４〜９５４２、９５１７〜９５３９、９５１７〜９５４０、９５１７〜９５４２、９５１７〜９５４４、９５１８〜９５３９、９５１８〜９５４０、９５１８〜９５４２、９５１８〜９５４４、９５２０〜９５４０、９５２０〜９５４２、９５２０〜９５４４、９５２０〜９５４８、９５２１〜９５４２、９５２１〜９５４４、９５２１〜９５４８、９５２１〜９５４９、９５２２〜９５４２、９５２２〜９５４４、９５２２〜９５４８、９５２２〜９５４９、９５２７〜９５４８、９５２７〜９５４９、９５２７〜９５５１、９５２７〜９５５２、９５２７〜９５５３、９５２７〜９５５５、９５２８〜９５４８、９５２８〜９５４９、９５２８〜９５５１、９５２８〜９５５２、９５２８〜９５５３、９５２８〜９５５５、９５３０〜９５５１、９５３０〜９５５２、９５３０〜９５５３、９５３０〜９５５５、９５３０〜９５５７、９５３０〜９５５８、９５３２〜９５５２、９５３２〜９５５３、９５３２〜９５５５、９５３２〜９５５７、９５３２〜９５５８、９５３２〜９５５９、９５３２〜９５６０、９５３７〜９５５７、９５３７〜９５５８、９５３７〜９５５９、９５３７〜９５６０、９５３７〜９５６１、９５３７〜９５６４、９５３８〜９５５８、９５３８〜９５５９、９５３８〜９５６０、９５３８〜９５６１、９５３８〜９５６４、９５３８〜９５６６、９５４１〜９５６１、９５４１〜９５６４、９５４１〜９５６６、９５４１〜９５６８、９５４１〜９５６９、９５４３〜９５６４、９５４３〜９５６６、９５４３〜９５６８、９５４３〜９５６９、９５４３〜９５７１、９５４５〜９５６６、９５４５〜９５６８、９５４５〜９５６９、９５４５〜９５７１、９５４５〜９５７３、９５４６〜９５６４、９５４６〜９５６６、９５４６〜９５６９、９５４６〜９５７１、９５４６〜９５７３、９５４７〜９５６８、９５４７〜９５６９、９５４７〜９５７１、９５４７〜９５７３、９５４７〜９５７５、９５５０〜９５７１、９５５０〜９５７３、９５５０〜９５７５、９５５０〜９５７７、９５５０〜９５７８、９５５４〜９５７５、９５５４〜９５７７、９５５４〜９５７８、９５５４〜９５８０、９５５６〜９５７７、９５５６〜９５７８、９５５６〜９５８０、９５５６〜９５８４、９５６２〜９５８４、９５６２〜９５８６、９５６２〜９５８７、９５６２〜９５８８、９５６２〜９５８９、９５６３〜９５８４、９５６３〜９５８６、９５６３〜９５８７、９５６３〜９５８８、９５６３〜９５８９、９５６３〜９５９１、９５６５〜９５８６、９５６５〜９５８７、９５６５〜９５８８、９５６５〜９５８９、９５６５〜９５９１、９５６５〜９５９３、９５６７〜９５８７、９５６７〜９５８８、９５６７〜９５８９、９５６７〜９５９１、９５６７〜９５９３、９５６７〜９５９５、９５７０〜９５９１、９５７０〜９５９３、９５７０〜９５９５、９５７０〜９５９６、９５７０〜９５９８、９５７２〜９５９３、９５７２〜９５９５、９５７２〜９５９６、９５７２〜９５９８、９５７４〜９５９５、９５７４〜９５９６、９５７４〜９５９８、９５７４〜９６０１、９５７６〜９５９６、９５７６〜９５９８、９５７６〜９６０１、９５７６〜９６０４、９５７９〜９６０１、９５７９〜９６０４、９５８１〜９６０１、９５８１〜９６０４、および９５８３〜９６０４位からなる群より選択されるＣ型肝炎ウイルスＤＮＡコード鎖配列と等しいＲＮＡ配列、（ｂ）前記選択されたＣ型肝炎ウイルスＤＮＡコード鎖配列の逆相補体であるＲＮＡ配列、および、場合により、（ｃ）（ａ）および（ｂ）を連結する配列、を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、方法。
【請求項２３】
前記投与するステップが、前記哺乳動物細胞中での前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する１個またはそれ以上の発現ベクターを提供することにより達成される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記１個またはそれ以上の発現ベクターが、ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターより選択される少なくとも１個のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
少なくとも１個の発現ベクターが少なくとも２個の発現カセットを含んでなり、各発現カセットが、Ｕ６プロモーター、７ＳＫプロモーター、Ｈ１プロモーター、およびＭＲＰプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターを含んでなる、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記哺乳動物細胞がヒト細胞である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
哺乳動物体内細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなり、各々が、（ａ）配列位置９５１０〜９５３１、９５１０〜９５３３、９５１０〜９５３４、９５１０〜９５３５、９５１０〜９５３６、９５１４〜９５３４、９５１４〜９５３５、９５１４〜９５３６、９５１４〜９５３９、９５１４〜９５４０、９５１４〜９５４２、９５１７〜９５３９、９５１７〜９５４０、９５１７〜９５４２、９５１７〜９５４４、９５１８〜９５３９、９５１８〜９５４０、９５１８〜９５４２、９５１８〜９５４４、９５２０〜９５４０、９５２０〜９５４２、９５２０〜９５４４、９５２０〜９５４８、９５２１〜９５４２、９５２１〜９５４４、９５２１〜９５４８、９５２１〜９５４９、９５２２〜９５４２、９５２２〜９５４４、９５２２〜９５４８、９５２２〜９５４９、９５２７〜９５４８、９５２７〜９５４９、９５２７〜９５５１、９５２７〜９５５２、９５２７〜９５５３、９５２７〜９５５５、９５２８〜９５４８、９５２８〜９５４９、９５２８〜９５５１、９５２８〜９５５２、９５２８〜９５５３、９５２８〜９５５５、９５３０〜９５５１、９５３０〜９５５２、９５３０〜９５５３、９５３０〜９５５５、９５３０〜９５５７、９５３０〜９５５８、９５３２〜９５５２、９５３２〜９５５３、９５３２〜９５５５、９５３２〜９５５７、９５３２〜９５５８、９５３２〜９５５９、９５３２〜９５６０、９５３７〜９５５７、９５３７〜９５５８、９５３７〜９５５９、９５３７〜９５６０、９５３７〜９５６１、９５３７〜９５６４、９５３８〜９５５８、９５３８〜９５５９、９５３８〜９５６０、９５３８〜９５６１、９５３８〜９５６４、９５３８〜９５６６、９５４１〜９５６１、９５４１〜９５６４、９５４１〜９５６６、９５４１〜９５６８、９５４１〜９５６９、９５４３〜９５６４、９５４３〜９５６６、９５４３〜９５６８、９５４３〜９５６９、９５４３〜９５７１、９５４５〜９５６６、９５４５〜９５６８、９５４５〜９５６９、９５４５〜９５７１、９５４５〜９５７３、９５４６〜９５６４、９５４６〜９５６６、９５４６〜９５６９、９５４６〜９５７１、９５４６〜９５７３、９５４７〜９５６８、９５４７〜９５６９、９５４７〜９５７１、９５４７〜９５７３、９５４７〜９５７５、９５５０〜９５７１、９５５０〜９５７３、９５５０〜９５７５、９５５０〜９５７７、９５５０〜９５７８、９５５４〜９５７５、９５５４〜９５７７、９５５４〜９５７８、９５５４〜９５８０、９５５６〜９５７７、９５５６〜９５７８、９５５６〜９５８０、９５５６〜９５８４、９５６２〜９５８４、９５６２〜９５８６、９５６２〜９５８７、９５６２〜９５８８、９５６２〜９５８９、９５６３〜９５８４、９５６３〜９５８６、９５６３〜９５８７、９５６３〜９５８８、９５６３〜９５８９、９５６３〜９５９１、９５６５〜９５８６、９５６５〜９５８７、９５６５〜９５８８、９５６５〜９５８９、９５６５〜９５９１、９５６５〜９５９３、９５６７〜９５８７、９５６７〜９５８８、９５６７〜９５８９、９５６７〜９５９１、９５６７〜９５９３、９５６７〜９５９５、９５７０〜９５９１、９５７０〜９５９３、９５７０〜９５９５、９５７０〜９５９６、９５７０〜９５９８、９５７２〜９５９３、９５７２〜９５９５、９５７２〜９５９６、９５７２〜９５９８、９５７４〜９５９５、９５７４〜９５９６、９５７４〜９５９８、９５７４〜９６０１、９５７６〜９５９６、９５７６〜９５９８、９５７６〜９６０１、９５７６〜９６０４、９５７９〜９６０１、９５７９〜９６０４、９５８１〜９６０１、９５８１〜９６０４、および９５８３〜９６０４位からなる群より選択されるＣ型肝炎ウイルスＤＮＡコード鎖配列と等しいＲＮＡ配列、（ｂ）前記選択されたＣ型肝炎ウイルスＤＮＡコード鎖配列の逆相補体であるＲＮＡ配列、および、場合により、（ｃ）（ａ）および（ｂ）を連結する配列、を含んでなる、組成物。
【請求項２８】
請求項２７に記載の組成物をコードする発現ベクター。
【請求項２９】
請求項２８に記載の発現コンストラクトを含んでなる哺乳動物細胞。
【請求項３０】
ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターより選択される少なくとも１個のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項２８に記載の発現ベクター。
【請求項３１】
少なくとも２個の発現カセットを含んでなり、各発現カセットがＵ６プロモーター、７ＳＫプロモーター、Ｈ１プロモーター、およびＭＲＰプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターを含んでなり、前記ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターの各々が二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項３０に記載の発現ベクター。
【請求項３２】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する方法であって、前記細胞に、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０からなる群より選択される配列内由来の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、方法。
【請求項３３】
少なくとも２個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が同一哺乳動物細胞に投与される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、配列番号１〜配列番号１０のうちの２以上の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記投与するステップが、前記哺乳動物細胞中での前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する１個またはそれ以上の発現ベクターを提供することにより達成される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記１個またはそれ以上の発現ベクターが、ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターより選択されるプロモーターをさらに含んでなり、前記プロモーターが少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
哺乳動物体内細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する方法であって、前記細胞に、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１１および配列番号１２からなる群より選択される配列内由来の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、方法。
【請求項３８】
少なくとも２個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が同一哺乳動物細胞に投与される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記少なくとも２個の二本鎖エフェクター分子が、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７のうちの２以上の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記投与するステップが、前記哺乳動物細胞中での前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する１個またはそれ以上の発現ベクターを提供することにより達成される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記１個またはそれ以上の発現ベクターが、ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターより選択される１個またはそれ以上のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
少なくとも１個の発現ベクターが少なくとも２個の発現カセットを含んでなり、各発現カセットが、Ｕ６プロモーター、７ＳＫプロモーター、Ｈ１プロモーター、およびＭＲＰプロモーターからなる群より選択される少なくとも１個のＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターを含んでなり、前記ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターの各々が前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
同一哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列およびＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の双方の発現を阻害する方法であって、前記細胞に、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０からなる群より選択される配列内由来の第１の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子、および、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７からなる群より選択される配列内由来の第２の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を投与するステップを含んでなる、方法。
【請求項４４】
配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子、および配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、前記同一哺乳動物体内細胞に投与される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記投与するステップが、前記哺乳動物細胞中での前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する１個またはそれ以上の発現ベクターを提供することにより達成される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４６】
前記１個またはそれ以上の発現ベクターが、ＲＮＡポリメラーゼＩプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーター、Ｔ７ポリメラーゼプロモーター、ＳＰ６ポリメラーゼプロモーター、ＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーター、ｔＲＮＡプロモーター、およびミトコンドリアプロモーターより選択される１個またはそれ以上のプロモーターを含んでなり、前記プロモーターが少なくとも１個の前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする配列に操作可能に連結される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０からなる群より選択される配列内由来の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、組成物。
【請求項４８】
少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる組成物であって、前記エフェクター分子が配列番号１〜配列番号１０のうちの２以上の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる、請求項４７に記載の組成物。
【請求項４９】
配列番号５、配列番号６、配列番号７、および配列番号８のうちの２以上の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、請求項４８に記載の組成物。
【請求項５０】
各々が配列番号５、配列番号６、配列番号７、および配列番号８のうちの少なくとも３の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも３個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５１】
哺乳動物体内細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１１および配列番号１２からなる群より選択される配列内由来の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、組成物。
【請求項５２】
少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる組成物であって、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７のうちの２以上の配列内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなるエフェクター分子が前記組成物中に存在する、請求項５１に記載の組成物。
【請求項５３】
哺乳動物体内細胞中での少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現コンストラクトを含んでなる、請求項５２に記載の組成物。
【請求項５４】
単一哺乳動物体内細胞中のＢ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列およびＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の双方の発現を阻害する組成物であって、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０からなる群より選択される配列内由来の第１の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子、および、Ｔに対しＵが置換される、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７からなる群より選択される配列内由来の第２の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、組成物。
【請求項５５】
哺乳動物体内細胞中での少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現コンストラクトを含んでなる、請求項５４に記載の組成物。
【請求項５６】
配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１０内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子、および、配列番号１１、配列番号１２、および配列番号２７内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、請求項５４に記載の組成物。
【請求項５７】
前記二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを含んでなる、請求項５６に記載の組成物。
【請求項５８】
配列番号５、配列番号６、配列番号７、および配列番号８内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、請求項５６に記載の組成物。
【請求項５９】
哺乳動物体内細胞中での前記少なくとも２個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子の発現能を有する少なくとも１個の発現ベクターを含んでなる、請求項５８に記載の組成物。
【請求項６０】
配列番号１４〜配列番号２６、および配列番号４９より選択される配列を含んでなるポリヌクレオチド配列。
【請求項６１】
配列番号１４〜配列番号２６、および配列番号４９より選択される配列のヌクレオチド１〜１９、１〜２０、１〜２１、２〜２０、２〜２１、または３〜２１を含んでなるポリヌクレオチド配列。
【請求項６２】
配列番号２７〜配列番号４４、配列番号５０〜配列番号６２、および配列番号７２〜７６より選択される配列内由来の少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなるポリヌクレオチド配列。
【請求項６３】
哺乳動物細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、Ｔに対しＵが置換される、配列番号２７内に由来する少なくとも１９連続塩基対のヌクレオチド配列を含んでなる二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、組成物。
【請求項６４】
哺乳動物細胞中のＣ型肝炎ウイルスのポリヌクレオチド配列の発現を阻害する組成物であって、Ｔに対しＵが置換される、（ａ）配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４２、配列番号４４、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、および配列番号７６からなる群より選択される配列、および（ｂ）前記選択された配列の逆相補体、および、場合により、（ｃ）配列（ａ）および（ｂ）を連結する配列、を含んでなる少なくとも１個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子を含んでなる、組成物。
【請求項６５】
前記少なくとも１個の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子が、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、および配列番号７６からなる群より選択される配列を含んでなる、請求項６４に記載の組成物。
【請求項６６】
請求項６４に記載の二本鎖ＲＮＡエフェクター分子をコードする発現ベクター。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５−１】
【図１５−２】
【図１５−３】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５−１】
【図１５−２】
【図１５−３】
【公開番号】特開２０１２−２２３２０２（Ｐ２０１２−２２３２０２Ａ）
【公開日】平成２４年１１月１５日（２０１２．１１．１５）
【国際特許分類】
【外国語出願】
【出願番号】特願２０１２−１７９６３８（Ｐ２０１２−１７９６３８）
【出願日】平成２４年８月１３日（２０１２．８．１３）
【分割の表示】特願２００７−５４８３９３（Ｐ２００７−５４８３９３）の分割
【原出願日】平成１７年１２月２０日（２００５．１２．２０）
【出願人】（５０５３６９１５８）アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド (51)
【氏名又は名称原語表記】ＡＬＮＹＬＡＭ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ， ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年１１月１５日（２０１２．１１．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−１７９６３８（Ｐ２０１２−１７９６３８）
【出願日】平成２４年８月１３日（２０１２．８．１３）
【分割の表示】特願２００７−５４８３９３（Ｐ２００７−５４８３９３）の分割
【原出願日】平成１７年１２月２０日（２００５．１２．２０）
【出願人】（５０５３６９１５８）アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド (51)
【氏名又は名称原語表記】ＡＬＮＹＬＡＭ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ， ＩＮＣ．
【Ｆターム（参考）】
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