難溶性アミノ酸類微細粒子、難溶性アミノ酸類含有混合組成物及びこれらの製造方法並びに皮膚外用剤及び食品添加物
【課題】本発明の目的は、難溶性アミノ酸類を改質することなく、難溶性アミノ酸類の本来の性質を保ったまま、化粧料に配合し易く、皮膚になじみ易く、さらには吸収性の優れたかつ安全な難溶性アミノ酸類微細粒子並びにその製造方法を提供することである。さらには、皮膚吸収に優れ、飽和濃度以上の使用濃度で澄明感のある化粧料、並びに食品添加剤を提供することである。
【解決手段】本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法は、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類を湿式粉砕法によって物理的に細分化させて、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径を１．０μｍ以下とすることを特徴とする。
【解決手段】本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法は、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類を湿式粉砕法によって物理的に細分化させて、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径を１．０μｍ以下とすることを特徴とする。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は難溶性アミノ酸類微細粒子及びその製造方法に係わり、さらに化粧品を含めた皮膚外用剤及び食品添加剤に及ぶ。なお、本発明では、アミノ酸又はアミノ酸誘導体或いはそれらの塩を総称して、アミノ酸類と呼ぶ。
【背景技術】
【０００２】
アミノ酸は、一つの分子の中に、アミノ基‐ＮＨ２とカルボキシル基‐ＣＯＯＨをもっている化合物を指すが、水に溶けるアミノ酸が多い。従って、アミノ酸は、溶液の形態で各種用途に利用できることから、アミノ酸を敢えて微細粒子の状態で利用しようとするニーズはほとんどない。溶解性に優れるアミノ酸類の乾燥粉末を製造するためにアミノ酸類含水溶液から噴霧乾燥して粉末を製造する方法が提案されている程度である（例えば特許文献１を参照。）。
【０００３】
しかし、アミノ酸の中にも、水、アルコール、有機溶媒等の溶媒にほとんど溶解しないアミノ酸が存在する。例えば、Ｌ‐シスチン及びＬ‐チロジンは、水、アルコール、その他の有機溶媒にほとんど溶けない。Ｌ‐シスチン及びＬ‐チロジンは、２０℃での水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下である（例えば、非特許文献１又は２を参照。）。本明細書中、Ｌ‐シスチン、Ｌ‐チロジン等の難溶性アミノ酸類を、「２０℃での水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下であるアミノ酸およびその誘導体及びその塩」と定義する。なお、塩酸や水酸化ナトリウムなどの強酸や強アルカリの水溶液には溶解するが、それらの溶液は皮膚に対する刺激性が強く、人体へ適用するには好ましくない。
【０００４】
Ｌ‐シスチンは、Ｌ‐システインの酸化体（２量体）であり、体内に吸収されると酵素シスチンレダクターゼや補酵素ＮＡＤＨなどの作用で還元されＬ‐システインになる。そのため、Ｌ‐システインと同様に抗酸化作用やチロシナーゼ活性阻害作用が期待され、メラニンの生成を抑制して美白効果、皮膚の老化を予防又は防止する効果が知られている。また、L‐シスチンは毛髪のタンパクであるケラチンの主要なアミノ酸であり、育毛に必要なアミノ酸であることが知られている。しかし、難溶性であることから添加濃度が極めて低く、その効果はあまり期待されない。このため水溶性を高めた誘導体のいくつかが開発され化粧料に使用されている（例えば特許文献２を参照。）。
【０００５】
Ｌ‐シスチンの食品用途では、パン、パスタ、麺、練り製品に小麦粉（グルテン）の品質改良剤、老化改良剤、日持ち向上剤として添加されている。また、粉ミルクにはメチオニンの代用栄養素として添加されている。これらに用いられるＬ‐シスチンは粉体で配合される。他成分との混合性やグルテンとの反応性を高めるために予め結晶を粗粉砕したものが市場に供給されている（例えば特許文献３〜５を参照。）。
【０００６】
チロジンはそれ自体に皮膚保湿作用があり皮膚保護剤と成り得ることが知られている。また、チロジン自体は生体内でメラニンの原料となり、Ｌ‐シスチン同様に育毛剤に配合することで張りのある黒髪の育成を促進することが知られている。さらにはその誘導体にはチロシナーゼ阻害作用によるメラニン生成抑制効果を持つものが多く皮膚美白効果を持つ皮膚外用剤として一般に期待されている。
【０００７】
難溶性アミノ酸類は、水溶性アミノ酸と比較して非常に使用しづらいため、各種改善が試みられている。例えば、経皮及び細胞膜透過性を高めるため脂溶性誘導体が提案されている（例えば特許文献６を参照。）
【０００８】
【非特許文献１】Ｄｕｎｎ，Ｍ．Ｓ．ａｎｄ Ｒｏｃｋｌａｎｄ，Ｌ．Ｂ．：“Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，”Ｖｏｌ．ＩＩＩ，ｐ．３５７(Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９４７)
【非特許文献２】Ｊｏｓｅｌｏｗ，Ｍ．，ａｎｄ Ｄａｗｓｏｎ，Ｃ．Ｒ．：Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９１，１１(１９５１)
【特許文献１】特開２００３‐５６８９９６号公報
【特許文献２】特開平６‐１２８１４３号公報
【特許文献３】特公昭６３‐６３１７０号公報
【特許文献４】特公平１‐４７３０号公報
【特許文献５】特開２００３‐２１０１２６号公報
【特許文献６】特開平９‐３０９５３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上記のようにＬ‐シスチン及びチロジンは優れた効果が期待されるものの、水、アルコール類、有機溶媒又は油剤に極めて難溶であり、使用されているとしても添加量は極めて少ない。また配合方法が難しく、固体状のまま配合できるファンデーションや用時振とうして用いるローション剤などに使用が限られている。澄明度を問わない乳液やクリームなどに配合して強制分散しての使用も考えられるが、粒子を極めて細かにする必要があり、実際には用いられていない。
【００１０】
また特許文献６に記載の脂溶性誘導体は油溶性であり、水にほとんど溶けない。さらに、これらの誘導体化には煩雑な合成工程と高いコストが必要となり、工業的に利用しにくい。これらの誘導体化では、溶解度を上げるための親水性基又は親油性基などを導入したため、本来のアミノ酸の化学構造から遠ざかり、期待されるアミノ酸としての効果が得にくく、生体外化合物として人体への安全性が問われる結果となってしまった。安全面を考慮すると生体内物質としての化学構造を持つアミノ酸を適用するのが望ましい。
【００１１】
Ｌ‐シスチンやチロジンは主に抽出法、酵素法又は醗酵法で製造される。その製造された際の平均粒子径は、一般的に粉体として取り扱い易い約５０．０〜３００．０μｍである。また、通常用いられる粉体の粉砕方法では、ハンマーミルや振動ミル等の粉砕機が乾式で用いられるが、それらの衝撃粉砕から得られる平均粒子径は、本発明者らの検討に拠れば、通常１０．０〜１００．０μｍで、例えばＬ‐シスチンをハンマーミルで粉砕したとき、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径（以下、単に「平均粒子径」という）は、５０．３μｍであり、粒度径は２．０μｍから４５１．６μｍの範囲であった。
【００１２】
平均粒子径１０．０μｍ以下の粒子を得ようとするなら、強い機械的衝撃を加える通常型の粉砕機ではもはや無理であり、更なる手段としてジェットミルが用いられる。しかし、このジェットミルでの超微細粉砕で得られる平均粒子径は１．０μｍを超えて３０．０μｍ以下の範囲で、平均粒子径で１．０μｍ以下の微細粒子を得たことはなく、平均粒子径で１．０μｍ以下の微細粒子（ナノ粒子）を得ることは不可能とされている。このジェットミルを用いて製造した難溶性アミノ酸の１．０μｍを超えて３０．０μｍ以下の微細粒子からなる粉体であっても、その極少量を溶媒に加え分散させると、強い白濁性の懸濁液となり、乳液やクリームなどの澄明度を問わない液体製剤か固形粉体製剤にしか用いることができない。
【００１３】
また、溶解性に優れるアミノ酸類の乾燥粉末を製造するためにアミノ酸類含水溶液から噴霧乾燥して粉末を製造する特許文献１に記載の方法であっても平均粒径０.１μｍ以下のアミノ酸類粉末は得られていない。しかも、Ｌ‐シスチンなど溶解度の極めて低いアミノ酸にとっては、その水溶液の濃度は極めて低く、噴霧乾燥により粉末を製造することは、大量の溶液を処理するため、大量の熱エネルギーが消費されるばかりではなく、収率は極めて低いため、実用性がない。
【００１４】
そのため、Ｌ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類を含めて、現在、アミノ酸の微粉末は、殆んど物理的に細分化する方法、すなわち粉砕法によって製造されている。一般的には粉砕の手法は乾式法と湿式法に分けられる。従来、アミノ酸の粉砕方法としては乾式法が常識とされる。すなわち空気中や窒素など不活性ガス雰囲気中で粉砕を行なう手法が採用されているが、このような粉砕法によって平均粒子径１．０μｍ以下の難溶性アミノ酸微細粒子を商業的に得た例がない。
【００１５】
従って、本発明の目的は、難溶性アミノ酸類の化学構造に親水性基又は親油性基を導入する改質をすることなく、難溶性アミノ酸類の本来の性質を保ったまま、化粧料に配合し易く、皮膚になじみ易く、さらには吸収性の優れかつ安全な難溶性アミノ酸類微細粒子並びにその製造方法を提供することにある。さらには、その難溶性アミノ酸類微細粒子を用いて皮膚吸収に優れ、飽和濃度以上の使用濃度で澄明感のある化粧料、並びに食品添加剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明者らは、これらの課題を解決するため鋭意研究した結果、通常流通している粒度の難溶性アミノ酸結晶を湿式粉砕法、すなわち水、アルコール又は有機溶媒などの液体中で粉砕を行なうことによって、Ｌ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類を超微細化し、平均粒子径で１.０μｍ以下の微細粒子が得られることが可能であることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法は、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類を湿式粉砕法によって物理的に細分化させて、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径を１．０μｍ以下とすることを特徴とする。
【００１７】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法の形態として、前記難溶性アミノ酸類が、（化１）の一般式で表されるシスチン又はシスチン誘導体或いはそれらの塩である形態がある。
【化１】
（化１）中、Ｒ１は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル脂肪酸残基又はアルケニル脂肪酸残基、炭素原子数1〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜１８のヒドロキシアルキル基を表し、Ｒ２は水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。
【００１８】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法の形態として、前記難溶性アミノ酸類が、（化２）の一般式で表されるチロジン又はチロジン誘導体或いはそれらの塩である形態がある。
【化２】
（化２）中、Ｒ３は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル脂肪酸残基又はアルケニル脂肪酸残基、炭素原子数1〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜１８のヒドロキシアルキル基を表し、Ｒ４は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。Ｒ５は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。
【００１９】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法では、直径３ｍｍ以下のビーズを粉砕媒体とし、水を分散媒として湿式粉砕を行なうことが好ましい。
【００２０】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法では、直径３ｍｍ以下のビーズを粉砕媒体とし、アルコール類、有機溶媒、動植物油又は鉱物油を分散媒として湿式粉砕を行なうこととしても良い。
【００２１】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法では、前記難溶性アミノ酸類に、ダイヤモンド微細粒子又は無機粒子或いはその両方を加えて、湿式粉砕法によって混合粉砕することとしても良い。本発明は、精密研磨に使用され、また、化粧品に添加される可能性も考えられるダイヤモンド微細粒子又はすでに化粧品に使われている酸化チタン、アルミナ、酸化亜鉛などの機能性無機粒子を難溶性アミノ酸と混合粉砕することによって、難溶性アミノ酸結晶粒子の微細化をより効率的に進められる。また得られた組成物が安定的である。そして、化粧料組成物に配合されるほかの機能性微細粒子をワン・ステップで均一に難溶性アミノ酸類微細粒子と混合することができる。
【００２２】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子は、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子において、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径が１．０μｍ以下であることを特徴とする。
【００２３】
本発明に係る難溶性アミノ酸類含有混合組成物は、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子と、ダイヤモンド微細粒子又は無機微細粒子或いはその両方との混合微細粒子を含む難溶性アミノ酸類含有混合組成物であって、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径が１．０μｍ以下であることを特徴とする。
【００２４】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物は、本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法によって得られたことを特徴とする。
【００２５】
本発明に係る難溶性アミノ酸類含有混合組成物は、形態がクリーム状である場合が包含される。本発明は、湿式粉砕における難溶性アミノ酸の濃度を増やすことにより、ゾルとゲルの中間状態に当たる安定的なクリーム状（糊状）の難溶性アミノ酸分散体が得られた。また、ナノダイヤモンドに限定する必要はないが、ナノダイヤモンド微細粒子を添加すると、クリーム状の難溶性アミノ酸分散体の生成が促進され、得られたクリーム状の難溶性アミノ酸分散体がより安定的である。
【００２６】
本発明に係る皮膚外用剤は、本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物を配合した化粧料を含むことを特徴とする。
【００２７】
本発明に係る食品添加物は、本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子（ただし、難溶性アミノ酸はＬ‐シスチン又はＬ‐チロジンであり、かつ、水、エタノール、グリセリン、グリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール又は動植物油を分散媒とする。）を含むことを特徴とする。
【発明の効果】
【００２８】
本発明によれば、難溶性アミノ酸類の化学構造に親水性基又は親油性基を導入する改質をすることなく、難溶性アミノ酸類の本来の性質を保ったまま、微細粒子化することができる。得られた難溶性アミノ酸類微細粒子は、化粧料に配合し易く、皮膚になじみ易く、さらには吸収性の優れかつ安全性が高い。さらに、得られた難溶性アミノ酸類微細粒子を用いて、皮膚吸収に優れ、飽和濃度以上の使用濃度で澄明感のある感触の良い化粧料、並びに食品添加剤を提供することも可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２９】
本発明の実施の形態を説明する。以下に説明する実施の形態は本発明の構成の例であり、本発明は、以下の実施の形態に制限されるものではない。本発明の効果を奏する限り、種々の形態変更をしてもよい。
【００３０】
まず、難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法について説明する。本実施形態に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法は、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類を湿式粉砕法によって物理的に細分化させて、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径を１．０μｍ以下とする。粉砕対象は、難溶性アミノ酸類であり、具体的には、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下のアミノ酸又はアミノ酸誘導体或いはそれらの塩である。この場合、水を湿式粉砕時の溶媒として使用することができる。また、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセリン、プロピレングリコール等のアルコール類、アセトン等の有機溶媒を湿式粉砕時の溶媒として使用することができ、この場合、２０℃のこれらの溶媒１００ｇに対する溶解度が０．５ｇ以下のアミノ酸類であれば、本実施形態における難溶性アミノ酸類である。なお、揮発性の有機溶媒を分散媒とすれば、粉砕後に容易に除去でき、粉末が残る。
【００３１】
難溶性アミノ酸類としては、例えば、（化１）の一般式で表されるシスチン又はシスチン誘導体或いはそれらの塩であり、（化２）の一般式で表されるチロジン又はチロジン誘導体或いはそれらの塩である。さらに具体的には、例えば、Ｌ‐シスチン ジベンジルエステル、Ｌ‐シスチン ジ‐ｔｅｒ‐ブチルエステル、Ｎ，Ｎ‐ジベンジルオキシカルボニル‐Ｌ‐シスチン、Ｎ，Ｏ‐ベンジルチロジン、Ｂｏｃ‐Ｌ‐チロジンエチルエステルである。これらの難溶性アミノ酸類は、水のみならず、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセリン、プロピレングリコール等のアルコール類、アセトンなどの有機溶媒或いは動植物油又は鉱物油等の油類に対しても上記の難溶性を示す場合も多く、湿式粉砕時の溶媒として水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセリン、プロピレングリコール等のアルコール類、アセトンなどの有機溶媒或いは動植物油又は鉱物油等の油類を選択して使用できる。なお、粉砕時における難溶性アミノ酸類は、１種類に限定されず、２種以上の混合物としてから粉砕を行なっても良い。
【００３２】
難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法において、湿式粉砕法を採用する理由は次に説明するとおりである。アミノ酸のほとんどが水溶性であるため、アミノ酸を粉砕し、微細粒子化するために湿式粉砕法を用いるという考えは一般的ではなかった。その影響により、Ｌ‐シスチンやＬ‐チロジンなどの難溶性アミノ酸に限って湿式粉砕法を用いた例は今までに無い。従来のアミノ酸の粉砕では、衝撃法によるハンマーミルやボールミルなど粉砕装置を用いて空気中や不活性ガスでの乾式粉砕が多く試みられてきたが、いずれも平均粒子径１.０μｍ以下のアミノ酸微細粉体を得ることはできなかった。本発明者らの試みによって、ジェットミルによる乾式粉砕法でＬ‐シスチンを粉砕したところ、通常、平均粒子径１０μｍのＬ‐シスチンが得られ、粉砕条件をより細かくなるように厳しくして１．６μｍのＬ‐シスチンが得られたのが、微細化の限界であった。
【００３３】
微細粒子化技術としての粉砕操作は、製造過程が簡単でコストが低いなどの特徴があり、多くの産業分野で活用されている。粉砕法によって塊状ないしは粒状固体を砕いて数百あるいは数十ミクロンサイズの砕成物を得るのはそれほど難しくない。しかし、粉砕法によって１．０μｍ以下の微細粒子を得るのは容易ではない。また、一般的には、乾式粉砕よりも液体中での粉砕すなわち湿式粉砕法は、より細かい粒子が得られることが知られている。しかし、アミノ酸類微細粉末の製造に関しては、ほとんどのアミノ酸類は可溶性であるため、これまでＬ‐シスチンなど難溶性アミノ酸を含むアミノ酸類の粉砕は乾式法によって行われ、湿式法は適用できないという常識があった。本発明者らが乾式粉砕法を検討した際のＬ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類の粉砕に用いた粉砕装置及びその原理を表１に示す。
【００３４】
【表１】
【００３５】
本発明者らは、適切な粉砕条件で、Ｌ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類を湿式粉砕法によって平均粒子径１．０μｍ以下、さらに、０．１μｍ以下に微細粒子化することが可能であることを見出した。すなわち、Ｌ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類を湿式粉砕するには、粉砕媒体を用いる粉砕方式が望ましい。また、望ましい粉砕媒体は球形の微小ボールである。さらに望ましい粉砕媒体が耐磨耗性のよいジルコニア製のもので、その直径が３ｍｍ以下、粉砕効率の向上の観点から好ましくは１ｍｍ以下、より好ましくは０．１〜１．０ｍｍのビーズである。また、粉砕装置内で難溶性アミノ酸類粒子と接触するミル本体の材質も粉砕媒体と同一のものであることが望ましい。通常市販されている遊星ボールミルなどの回転型ボール又はビーズミルなど媒体撹拌型ミルが適用できるが、これらの粉砕装置に限定する必要がない。また、適切な粉砕条件としては、粉砕溶媒１００ｍlに対し粉砕媒体のジルコニアビーズの使用量は１００ｇ〜４００ｇ、望ましいのは２００ｇ〜３００ｇ、さらに望ましいのは２４０ｇ〜２６０ｇ、また、粉砕溶媒１００ｍｌに対してＬ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類の仕込み量は０．１ｇ〜３０ｇ、望ましいのは０．５ｇ〜２０ｇ、さらに望ましいのは１ｇ〜１５ｇである。
【００３６】
本実施形態では、粉砕時の分散媒として例えば、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセリン、プロピレングリコール等のアルコール類、アセトンなどの有機溶媒或いは動植物油又は鉱物油等の油類を使用するが、これらに限定する必要はない。これらの種類は難溶性アミノ酸類微細粒子の使用目的によって適宜選択する。例えば、食品用途とするのであれば、分散媒は水、エタノール、グリセリン、グリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール又は動植物油とする。難溶性アミノ酸類微細粒子は、湿式粉砕法によって粉砕され、分散媒にほとんど溶解しないことから、細分化され平均粒子径だけが小さくなっていき、難溶性アミノ酸類自体の分解又は変質を起こさず、それ自身の本来の構造と性質を維持することができる。
【００３７】
本実施形態において、平均粒子径とは、前述のとおり、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径とする。難溶性アミノ酸類微細粒子は、凝集して二次粒子を形成している場合があるので、本発明における平均粒子径の測定対象は、次の操作によって分散を図った懸濁液とする。すなわち、粒度分布測定用のサンプルは、湿式粉砕によって得られた懸濁液について、測定のために凝集を防ぎ、分散性を維持するために界面活性剤（花王（株）製界面活性剤デモールＮの０．１％水溶液）を加えて更に粉砕操作を５分間運転処理し、処理済み懸濁液を高強度超音波ホモジナイザー（例えばＶＣＸ‐７５０型、周波数２０ｋＨｚ、米国ＳＯＮＩＣＳ ＆ ＭＡＴＥＲＩＡＬＳ，ＩＮＣ．製）を用いて振幅コントロールを５０％にセットし、２分間で分散処理した後、測定を行なったものとした。なお、平均粒子径の定義において、０．１μｍ以下の微細粒子を対象とする場合には、レーザー光子相関法（Ｂｅｃｋｍａｎ・Ｃｏｕｌｔｅｒ：ＤｅｌｓａＮａｎｏ Ｃ）によって粒度分布を測定し、粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径を平均粒子径として併用しても良い。この場合、本実施形態において、難溶性アミノ酸類微細粉末又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物は、レーザー光子相関法によって得られた粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの平均粒子径を１００ｎｍ以下とすることが好ましい。
【００３８】
このように難溶性アミノ酸類の細分化を進めることで、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子において、平均粒子径が１．０μｍ以下である難溶性アミノ酸類微細粒子が得られる。さらに好ましくは全ての粒子が１００ｎｍ以下の難溶性アミノ酸類微細粒子が得られる（この場合は、前記レーザー光子相関法による。）。
【００３９】
本発明の難溶性アミノ酸類微細粒子の重要な用途の一つとして、化粧品組成物の成分がある。一般的に、化粧品における微細粒子の主な役割は、微細粒子がもつ被覆性、着色性、吸油性、吸水性、保湿性、溶解性、皮膚における展延性など性質の利用である。また、近年、紫外線の有害性が広く認識されるようになり、紫外線から皮膚を守る目的のために、ナノ化された酸化チタンなど機能性微細粒子が配合され利用されている。すなわち、微細粒子は化粧品における重要な原料の一つである。さらに、化粧品においては一般に複数種類の微細粒子が同時に利用されていることから、これらの異なる微細粒子間の混合又は分散の均一性、及び、配合性は化粧品（化粧料）の品質に影響を与える。
【００４０】
一般的には、化粧品の製造プロセスは、粉砕と分散が重要な操作単位となる。例えば、メーキャップ化粧品のファンデーションなどは粉末化粧品であり、その製造は、着色顔料と体積顔料を混合機（例えば、ミキサー）で均一に混合したあと、粉砕機（例えば、ハンマーミル）で粉砕する。粉砕後、混合機にて少量の油分を混合する。その後、再度粉砕を行い均一な混合を図る。これを容器に充填して製品とする。また、油性化粧品の製造は、顔料を一部の油分とともに混練機（例えば、ロールミル）を用いて混合粉砕したあと、ワックスなどの残り油分と溶解混合する。そして脱気後、容器又は皿に充填して製品とする。このように、粉砕と分散は化粧品の製造プロセスにおいて重要な操作単位である。一般的には、微細粒子のサイズは細かくなるほど、均一な分散・混合は難しくなる。そこで、難溶性アミノ酸類の湿式粉砕においては、難溶性アミノ酸類に、ダイヤモンド微細粒子（例えば、ナノダイヤモンド微細粒子）又は無機粒子或いはその両方を加えて、混合粉砕することとしてもよい。難溶性アミノ酸類よりも硬度の高い粒子を添加して混合粉砕することによって、難溶性アミノ酸類の細分化過程をより効率的に進めることが可能であり、より安定したＬ‐シスチンなど難溶性アミノ酸の微細粒子を含有する組成物が得られる。無機粒子としては、例えば、酸化チタン、酸化亜鉛、酸化鉄、タルク、アルミナ、シリカ、マイカであるが、これらに限定する必要なない。化粧品によく使われている無機粒子は、例えば、酸化チタン、酸化鉄、酸化鉄、酸化亜鉛、酸化チタン溶融物などがあげられる。これらの粒子は、紫外線防止効果を高めることと、透明性を上げることなどの目的のために、一般に直径０．１μｍ以下の超微細粒子を用いることが求められる。しかし、これらの超微細粒子の使用上の問題点は一次粒子への分散が容易でなく、凝集によって透明性や紫外線防止効果を低下させることがある。本発明は、これらの超微細粒子の分散を難溶性アミノ酸類粒子の超微粉砕と同時に進めることで、結果としてｏｎｅ‐ｓｔｅｐでしかも低コストで均一に分散混合した平均粒子径１．０μｍ以下の難溶性アミノ酸類微細粒子を含む組成物を提供することを可能とした。無機微細粒子の均一分散と均一混合がなされているため、化粧品の紫外線防止効果及び透明性の両者をより上げることが可能である。また、化粧料以外の用途においても、難溶性アミノ酸類微細粒子は必ずしも他の成分微細粒子と分離する必要はなく、その混合組成物が原料として、またそのまま製品として利用できる。また、湿式粉砕の際には、二種類以上の無機粒子を同時に添加することも可能である。さらに、無機粒子のほか、難溶性アミノ酸よりも硬度が高い有機微細粒子、例えばポリアミド系重合物などを添加することも効果がある。無機粒子の投入時の平均粒子径は、湿式粉砕機に投入できる大きさであれば制限はなく、例えば１００μｍを超える粗粒子でもよい。湿式粉砕によって、無機粒子も粉砕が進んでいき、無機微細粒子となるからである。もちろん、当初に直径０．１μｍ以下の超微細粒子を添加しても良い。なお、ダイヤモンド微細粒子は、粉砕されにくいので、ナノダイヤモンド粒子からなる微細粒子が好ましい。このように硬度の高い微細粒子を添加して混合粉砕して難溶性アミノ酸類の細分化を進めることで、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子と、ダイヤモンド微細粒子又は無機微細粒子或いはその両方との混合微細粒子を含む難溶性アミノ酸類含有混合組成物であって、平均粒子径が１．０μｍ以下である難溶性アミノ酸類含有混合組成物が得られる。さらに好ましくは１００ｎｍ以下の粒子を含む平均粒子径１．０μｍ以下の難溶性アミノ酸類含有混合組成物が得られる。
【００４１】
平均粒子径が１．０μｍ以下、好ましくは平均粒子径０．５μｍ以下、さらに好ましくは平均粒子径０．１μｍ以下の難溶性アミノ酸類微細粒子又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物は、与えられた微細性によって化粧品としての使い勝手が向上している。例えば、難溶性アミノ酸類の粒子径を１００ｎｍ以下（以下、ナノ粒子またはナノサイズという。）とすることによって、難溶性アミノ酸類微細粒子の利用価値を向上させると共に、数十μｍ〜数百μｍサイズの従来の大きい粒子の難溶性アミノ酸（以下、難溶性アミノ酸粗大粒子という）ではできなかった新たな利用を可能にする。粒子径が可視光の波長（約４００〜８００ｎｍ）よりかなり小さいと可視光の散乱が少なく透明性が上がる。メーキャップ化粧品であるファンデーション成分として、皮膚吸収に優れ、飽和濃度以上の濃度でより澄明感のある化粧料、より光学特性に優れた化粧料となる。また、肌の角質細胞の隙間は、おおよそ４０．０〜１００．０ｎｍと言われている。また、顔に約２０万個が存在している毛穴の直径はおおよそ１００．０〜２００．０μｍ、汗腺は３０．０〜８０．０μｍとされている。従って、それ以下のサイズの粒子ならば、物理的に皮膚角質層の深部まで到達できるということになる。すなわち、粒子径１００ｎｍ以下の粒子を含む平均粒子径１．０μｍ以下の粉体ならば、角質細胞の隙間に浸透し、又は毛穴、汗腺を経由してその効力を皮膚細胞に与え、うるおいを与え、バリアー機能を補うことができると考えられる。さらに微細化されているため、皮膚や毛髪への付着性、伸展性（延び）、すべり、べたつきなどの使用感が改良される。
【００４２】
本発明における重要な発見の一つとして、前記に述べたダイヤモンド微細粒子又は無機粒子との混合粉砕において、難溶性アミノ酸類の固形分濃度を増やすと同時に少量のダイヤモンド微細粒子又は無機粒子を添加することよりクリーム状物質が得られ、長時間放置しても安定であることが見出された。その配合は、例えば、難溶性アミノ酸類の固形１００質量部に対して、ダイヤモンド微細粒子又は無機粒子１〜５質量部である。形態がクリーム状となり、かつ、安定であるそのメカニズムは不明であるが、従来の難溶性アミノ酸類粗大粒子を、プロペラ撹拌機又はホモミキサー又は万能ミキサーを用いて５時間まで撹拌分散してもクリーム状分散物が得られないことから、本発明に特有なメカニズムにより生じたと考えられる。結果として出来た難溶性アミノ酸類を含有するクリーム状分散物は、触感改善効果、粘度の増加効果、乳化安定性効果、分離防止効果があり、化粧料に用いると皮膚や毛髪から脱落しにくく、皮膚や毛髪との接触面積が大きいことから皮膚や毛髪への付着、のび、べたつきなどの使用感が優れているため、化粧料の組成物に適する。
【００４３】
難溶性アミノ酸類微細粒子（ただし、難溶性アミノ酸はＬ‐シスチン又はＬ‐チロジンであり、かつ、水、エタノール、グリセリン、グリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール又は動植物油を分散媒とする。）は、食品添加物としても使用できる。微細粒子であるため、吸収性に優れている。さらに、製品への配合性及び混合性に優れ、調理などの加熱などによる酵素を介した反応性に富み、かつ、食感を改善する。
【実施例】
【００４４】
以下、非限定的に本発明の詳細を例示する。
（実施例１）Ｌ‐シスチンの微細粒子化
純度９９％以上のＬ‐シスチン０.２ｇを精製水２０ｍｌに分散させて直径１ｍｍのジルコニアビーズ５０ｇと共に容量４５ｍｌのジルコニア容器に入れ、遊星ボ−ルミル（ドイツ・フリッチュ社製Ｐ‐７型、以下使用するミルは同じものである）を用いて７５０ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で５時間粉砕した。得られた微細粒子の懸濁液の凝集を防ぎ、分散性を維持するために界面活性剤（花王（株）製界面活性剤デモールＮの０．１％水溶液）を加えて更に５分間運転処理した。前記懸濁液をレーザー回折/散乱式粒子径分布測定装置（ＨＯＲＩＢＡ ＬＡ‐９２０、以下使用する測定装置は同じものである）で平均粒子径を測定すると、０．４３８μｍ、かつ最大粒子径１．９８１μｍであった。図１にこの時の粒子径分布図を示す。またこのＬ‐シスチン微細粒子を走査型電子顕微鏡で観察すると粒子径は５０〜１，０００ｎｍであることが確認された。図２にＳＥＭ画像を示す。更に、このＬ‐シスチン微細粒子について薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣプレート：メルク・シリカゲル６０Ｆ２５６、展開溶媒；水：ブタノール：酢酸＝２:１:１）及び赤外吸収スペクトル（ＩＲ装置：Ｔｈｅｒｍｏ Ｎｉｃｏｌｅｔ ３８０ ＦＴ‐ＩＲ、臭化カリウム錠剤法）を測定し、それらの結果と、未粉砕のＬ‐シスチンのＴＬＣスポット及びＪＩＳのＬ‐シスチンのＩＲスペクトルとを比較して、Ｌ‐シスチンであることが確認できた。図３に薄層クロマトグラフィの結果を示した。図４に赤外吸収スペクトルの比較を示した。図１に示した粒子径分布測定装置での結果は、粉砕微細粒子のうちかなりの量を占めると思われる凝集体を反映しており、実際には、図２のＳＥＭ写真で見られるように５０ｎｍ以下の粒子も多く含まれていた。得られた微細粒子は、薄層クロマトグラフィ及び赤外吸収スペクトルでＬ‐シスチンであることが確認され、当粉砕方法を用いても分解しないことが分った。同様の粉砕操作でＬ‐シスチンの平均粒子径が１．０μｍ以下、かつ最大粒子径２．５mｍ以下の粒子も得ることができた。
【００４５】
（実施例２）有機溶媒中でのＬ‐シスチンの微細粒子化
純度９９％以上のＬ‐シスチン１.０ｇをアセトン２０ｍｌに分散させて遊星ボールミルに入れ、直径１ｍｍのジルコニアのビーズを用いて７５０ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で合計３時間粉砕した。溶媒を蒸発除去してＬ‐シスチンの粉体を得た。この粉体０.２ｇを取り、メタノ−ル２０ｍｌに分散させて遊星ボ−ルミルに入れ直径０.２ｍｍのジルコニアのビーズを用いて８００ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で合計２時間粉砕した。この分散液をレーザー回折/散乱式粒子径分布測定装置で平均粒子径を測定すると、一次粒子又は凝集体の平均粒子径０.５２３μｍ、かつ最大粒子径２.２６９μｍの微細粒子を得ることができた。図５に粒子径分布図を示した。
【００４６】
（実施例３）実施例２の他形態
実施例２においてアセトンを蒸発させて得られた微細粒子状Ｌ‐シスチン０.２ｇに精製水２０ｍｌを加え、遊星ボ−ルミルに入れて直径０.２ｍｍのジルコニア材質のビーズを用いて８００ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で合計２時間粉砕処理を行った。得られた懸濁液を、高強度超音波ホモジナイザーを用いて振幅コントロールを５０％にセットし、２分間で分散処理した。レーザー回折粒度分布測定器で粒子径を測定すると、最大粒子径２．２６９μｍ、平均粒子径０.４９２μｍの粒度分布を持つことが確認できた。図６に粒子径分布図を示した。
【００４７】
（実施例４）他の粒度測定法による検証
純度９９％以上のＬ‐シスチン１.０ｇを精製水２０ｍｌに分散させて遊星ボ−ルミルに入れ直径１ｍｍのジルコニアのビーズを用いて７５０ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で合計３時間粉砕し、ペースト状のＬ‐シスチンを得た。このペースト２.０ｇを取り再び精製水１５ｍｌに分散させて遊星ボ−ルミルに入れ直径０.２ｍｍのジルコニアのビーズを用いて回転数８００ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で合計２時間粉砕した後、精製水５ｍｌを加え更に５分間で粉砕を行い、Ｌ−シスチン分散した懸濁液を得た。粒度分布を測定するため、この懸濁液２ｇに花王（株）製界面活性剤デモールＮの０．１％水溶液８ｇを添加し、高強度超音波ホモジナイザーを用いてで振幅コントロールを５０％にセットし、２分間で分散処理した。得られた微細粒子の懸濁液をレーザー光子相関法（Ｂｅｃｋｍａｎ・Ｃｏｕｌｔｅｒ：ＤｅｌｓａＮａｎｏ Ｃ）によって粒度分布を測定すると、６９．９ｎｍから９０．６ｎｍの範囲の粒子で平均粒子径７６.６nｍの粒子であることが分った。図７に粒子径分布図を示した。ここで、平均粒子径とは、レーザー光子相関法によるＢｅｃｋｍａｎ・Ｃｏｕｌｔｅｒ：ＤｅｌｓａＮａｎｏ Ｃを用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径のことである。本実施例によれば、適切な粉砕条件と界面活性剤を選択することで全てのＬ‐シスチン粒子のサイズを１００ｎｍ以下にすること、すなわち、Ｌ‐シスチンのナノサイズ化が可能であることがわかった。
【００４８】
（実施例５）ナノダイヤモンド微細粒子との混合粉砕によるＬ‐シスチンの微細粒子化
純度９９％以上のＬ‐シスチン０．５ｇに爆発法ナノダイヤモンド微細粒子（製品名；Ｎａｎｏｄｉａｍｏｎｄ Ｐｏｗｄｅｒ、Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｐａｎｙｕ Ｇｕａｎｇｄａ Ｅｌｅｃｔｒｏｍｅｃｈａｎｉｃａ Ｃｏ．Ｌｔｄ，Ｐａｎｙｕ ｄｉｓｔｒｃｔ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，ｃｈｉｎａ社製、；平均粒子径５ｎｍダイヤモンド粒子で構成した凝集体で、爆発法ナノダイヤモンドとも呼ぶ。精密研磨加工分野で利用される。参考文献：砥粒加工学会誌、４７巻８号、ｐ４１４）０．２ｇを加え、更に精製水２０ｍｌを加え分散させて遊星ボ−ルミルに入れ直径１ｍｍのジルコニアのボールを用いて７５０ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で３時間をかけて混合粉砕を行った。得られた混合粉砕物を、走査型電子顕微鏡で観察した結果、Ｌ‐シスチンが１．０μｍ以下に粉砕されたことが確認できた。また、レーザー回折粒度分布測定器で粒子径を測定すると、最大粒子径が１．００５μｍで、平均粒子径０.３２２μｍの粒度分布を持つことが確認できた。図８にＳＥＭ画像を示した。図９に粒子径分布図を示した。また、本実施例で使用した爆発法ナノダイヤモンドは、メーカーが提供した成績書によると、その一次粒子の直径は粒径３〜１０ｎｍ、比表面積は２７８〜３３５ｍ２／ｇ、形状は球形のものである。爆発法ナノダイヤモンドは爆薬を原料にした合成ダイヤモンドで、黒鉛を原料にした従来の工業用ダイヤモンドよりも細かく、既に化粧品などに応用されているフラーレン（Ｃ６０）と同様に球形なナノカーボンである。また、爆発法ナノダイヤモンドが生体に対して安全性に問題がないと示唆する研究報告も出された（非特許文献３を参照。）。これらのことから、本実施例で示した難溶性アミノ酸を含有する組成物が化粧品へ応用できることや爆発法ナノダイヤモンドはフラーレン（Ｃ６０）と類似な効果・機能（例えば、抗酸化効果）が発見できることが示唆される。これを支持する下記の実験結果が本発明者らによって得られた。
（実験結果）
ＳＯＤ Ａｓｓａｙ ｋｉｔ‐ＷＳＴ（同仁化学）を用いて爆発法ナノダイヤモンドのスーパーオキシドアニオン消去率を測定したところ、ＩＣ５０値０．２（Ｗ／Ｖ％）という値を得た。
【非特許文献３】Ａｒｅ ｄｉａｍｏｎｄ ｎａｎｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ？，Ｓｃｈｒａｎｄ，Ａ．Ｍ．；Ｈｕａｎｇ，Ｈ．；Ｃａｒｌｓｏｎ，Ｃ．；Ｓｃｈｌａｇｅｒ，Ｊ．Ｊ．；Ｏｓａｗａ，Ｅ．＋Ｈｕｓｓａｉｎ，Ｓ．Ｍ．；Ｄａｉ，Ｌ．；Ｊ．Ｐｈｙｓ．ｃｈｅｍ．Ｂ．２００７，１１１［１］，２‐７
【００４９】
（実施例６）アルミナ微細粒子との混合粉砕によるＬ‐シスチンの微細粒子化
実施例５のナノダイヤモンドの替わりに、純アルミナ微細粒子（メラー社製、ロット：１０１１Ｎ、平均粒子径０．０６μｍ）を用いて実施例５と同じ条件で混合粉砕を行った。得られた混合粉砕物を、走査型電子顕微鏡で観察した結果、Ｌ‐シスチンが１．０μｍ以下に粉砕されたことが確認できた。また、レーザー回折粒度分布測定器で粒子径を測定すると、最大粒子径が３．４０９μｍで、平均粒子径０．５０５μｍの粒度分布を持つことを確認できた。図１０にＳＥＭ画像を示した。図１１に粒子径分布図を示した。
【００５０】
（実施例７）酸化チタン微細粒子との混合粉砕によるＬ‐シスチンの微細粒子化
実施例５のナノダイヤモンドの替わりに、酸化チタン微細粒子（ルチル型、関東化学提供、製品番号４０９８‐３０、粒子径約０．１〜０．３μｍ）を用いて実施例５と同じ条件で混合粉砕を行った。得られた混合粉砕物を、走査型電子顕微鏡で観察した結果、Ｌ‐シスチンが１．０μｍ以下に粉砕されたことが確認できた。また、レーザー回折粒度分布測定器で粒子径を測定すると、最大粒子径が１１．５６５μｍで、平均粒子径０．２６２μｍの粒度分布を持つことが確認できた。図１２にＳＥＭ画像を示した。図１３に粒子径分布図を示した。
【００５１】
（実施例８）粉砕により得られた安定的なクリーム状シスチン組成物
純度９９％以上のＬ‐シスチン３．０ｇに爆発法ナノダイヤモンド０．０６ｇを加え、分散させて遊星ボールミルに入れ直径３ｍｍのジルコニアのボールを用いて６６０ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で３０分をかけて混合粉砕を行った後、さらに、更に精製水２０ｍｌを加え続けて３０分間粉砕を行った結果、流動性のないクリーム状組成物が得られた。また、２ヶ月放置しても状態の変化がないことが確認された。図１４にクリーム状組成物の画像を示した。右は横方向からの画像、左は上からの画像である。
【００５２】
（実施例９）実施例８との比較対照
実施例８に対する対比対象として、爆発法ナノダイヤモンドを添加しない、同様な条件で粉砕を行った結果、流動性のある牛乳状の組成物が得られた。図１５に牛乳状の組成物の画像を示した。右は横方向からの画像、左は上からの画像である。
【００５３】
（比較例１）
図１６に通常の流通品であるＬ‐シスチン粒子（粉砕前）の画像を示した。図１７に粒子径分布図を示した。
【００５４】
（比較例２）
図１８にＬ‐シスチン粒子（ハンマーミル粉砕品）の粒子径分布図を示した。これは粉砕品として流通しているものである。
【００５５】
（比較例３）
図１９にＬ‐シスチン粒子（ジェットミル粉砕品）の粒子径分布図を示した。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】粒子径分布図を示した。
【図２】ＳＥＭ画像を示した。
【図３】薄層クロマトグラフィの結果を示した。
【図４】赤外吸収スペクトルの比較を示した。
【図５】粒子径分布図を示した。
【図６】粒子径分布図を示した。
【図７】粒子径分布図を示した。
【図８】ＳＥＭ画像を示した。
【図９】粒子径分布図を示した。
【図１０】ＳＥＭ画像を示した。
【図１１】粒子径分布図を示した。
【図１２】ＳＥＭ画像を示した。
【図１３】粒子径分布図を示した。
【図１４】クリーム状組成物の画像であり、右は横方向からの画像、左は上からの画像である。
【図１５】牛乳状の組成物の画像であり、右は横方向からの画像、左は上からの画像である。
【図１６】通常の流通品であるＬ‐シスチン粒子（粉砕前）の画像を示した。
【図１７】粒子径分布図を示した。
【図１８】Ｌ‐シスチン粒子（ハンマーミル粉砕品）の粒子径分布図を示した。
【図１９】Ｌ‐シスチン粒子（ジェットミル粉砕品）の粒子径分布図を示した。
【技術分野】
【０００１】
本発明は難溶性アミノ酸類微細粒子及びその製造方法に係わり、さらに化粧品を含めた皮膚外用剤及び食品添加剤に及ぶ。なお、本発明では、アミノ酸又はアミノ酸誘導体或いはそれらの塩を総称して、アミノ酸類と呼ぶ。
【背景技術】
【０００２】
アミノ酸は、一つの分子の中に、アミノ基‐ＮＨ２とカルボキシル基‐ＣＯＯＨをもっている化合物を指すが、水に溶けるアミノ酸が多い。従って、アミノ酸は、溶液の形態で各種用途に利用できることから、アミノ酸を敢えて微細粒子の状態で利用しようとするニーズはほとんどない。溶解性に優れるアミノ酸類の乾燥粉末を製造するためにアミノ酸類含水溶液から噴霧乾燥して粉末を製造する方法が提案されている程度である（例えば特許文献１を参照。）。
【０００３】
しかし、アミノ酸の中にも、水、アルコール、有機溶媒等の溶媒にほとんど溶解しないアミノ酸が存在する。例えば、Ｌ‐シスチン及びＬ‐チロジンは、水、アルコール、その他の有機溶媒にほとんど溶けない。Ｌ‐シスチン及びＬ‐チロジンは、２０℃での水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下である（例えば、非特許文献１又は２を参照。）。本明細書中、Ｌ‐シスチン、Ｌ‐チロジン等の難溶性アミノ酸類を、「２０℃での水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下であるアミノ酸およびその誘導体及びその塩」と定義する。なお、塩酸や水酸化ナトリウムなどの強酸や強アルカリの水溶液には溶解するが、それらの溶液は皮膚に対する刺激性が強く、人体へ適用するには好ましくない。
【０００４】
Ｌ‐シスチンは、Ｌ‐システインの酸化体（２量体）であり、体内に吸収されると酵素シスチンレダクターゼや補酵素ＮＡＤＨなどの作用で還元されＬ‐システインになる。そのため、Ｌ‐システインと同様に抗酸化作用やチロシナーゼ活性阻害作用が期待され、メラニンの生成を抑制して美白効果、皮膚の老化を予防又は防止する効果が知られている。また、L‐シスチンは毛髪のタンパクであるケラチンの主要なアミノ酸であり、育毛に必要なアミノ酸であることが知られている。しかし、難溶性であることから添加濃度が極めて低く、その効果はあまり期待されない。このため水溶性を高めた誘導体のいくつかが開発され化粧料に使用されている（例えば特許文献２を参照。）。
【０００５】
Ｌ‐シスチンの食品用途では、パン、パスタ、麺、練り製品に小麦粉（グルテン）の品質改良剤、老化改良剤、日持ち向上剤として添加されている。また、粉ミルクにはメチオニンの代用栄養素として添加されている。これらに用いられるＬ‐シスチンは粉体で配合される。他成分との混合性やグルテンとの反応性を高めるために予め結晶を粗粉砕したものが市場に供給されている（例えば特許文献３〜５を参照。）。
【０００６】
チロジンはそれ自体に皮膚保湿作用があり皮膚保護剤と成り得ることが知られている。また、チロジン自体は生体内でメラニンの原料となり、Ｌ‐シスチン同様に育毛剤に配合することで張りのある黒髪の育成を促進することが知られている。さらにはその誘導体にはチロシナーゼ阻害作用によるメラニン生成抑制効果を持つものが多く皮膚美白効果を持つ皮膚外用剤として一般に期待されている。
【０００７】
難溶性アミノ酸類は、水溶性アミノ酸と比較して非常に使用しづらいため、各種改善が試みられている。例えば、経皮及び細胞膜透過性を高めるため脂溶性誘導体が提案されている（例えば特許文献６を参照。）
【０００８】
【非特許文献１】Ｄｕｎｎ，Ｍ．Ｓ．ａｎｄ Ｒｏｃｋｌａｎｄ，Ｌ．Ｂ．：“Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，”Ｖｏｌ．ＩＩＩ，ｐ．３５７(Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９４７)
【非特許文献２】Ｊｏｓｅｌｏｗ，Ｍ．，ａｎｄ Ｄａｗｓｏｎ，Ｃ．Ｒ．：Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９１，１１(１９５１)
【特許文献１】特開２００３‐５６８９９６号公報
【特許文献２】特開平６‐１２８１４３号公報
【特許文献３】特公昭６３‐６３１７０号公報
【特許文献４】特公平１‐４７３０号公報
【特許文献５】特開２００３‐２１０１２６号公報
【特許文献６】特開平９‐３０９５３号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上記のようにＬ‐シスチン及びチロジンは優れた効果が期待されるものの、水、アルコール類、有機溶媒又は油剤に極めて難溶であり、使用されているとしても添加量は極めて少ない。また配合方法が難しく、固体状のまま配合できるファンデーションや用時振とうして用いるローション剤などに使用が限られている。澄明度を問わない乳液やクリームなどに配合して強制分散しての使用も考えられるが、粒子を極めて細かにする必要があり、実際には用いられていない。
【００１０】
また特許文献６に記載の脂溶性誘導体は油溶性であり、水にほとんど溶けない。さらに、これらの誘導体化には煩雑な合成工程と高いコストが必要となり、工業的に利用しにくい。これらの誘導体化では、溶解度を上げるための親水性基又は親油性基などを導入したため、本来のアミノ酸の化学構造から遠ざかり、期待されるアミノ酸としての効果が得にくく、生体外化合物として人体への安全性が問われる結果となってしまった。安全面を考慮すると生体内物質としての化学構造を持つアミノ酸を適用するのが望ましい。
【００１１】
Ｌ‐シスチンやチロジンは主に抽出法、酵素法又は醗酵法で製造される。その製造された際の平均粒子径は、一般的に粉体として取り扱い易い約５０．０〜３００．０μｍである。また、通常用いられる粉体の粉砕方法では、ハンマーミルや振動ミル等の粉砕機が乾式で用いられるが、それらの衝撃粉砕から得られる平均粒子径は、本発明者らの検討に拠れば、通常１０．０〜１００．０μｍで、例えばＬ‐シスチンをハンマーミルで粉砕したとき、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径（以下、単に「平均粒子径」という）は、５０．３μｍであり、粒度径は２．０μｍから４５１．６μｍの範囲であった。
【００１２】
平均粒子径１０．０μｍ以下の粒子を得ようとするなら、強い機械的衝撃を加える通常型の粉砕機ではもはや無理であり、更なる手段としてジェットミルが用いられる。しかし、このジェットミルでの超微細粉砕で得られる平均粒子径は１．０μｍを超えて３０．０μｍ以下の範囲で、平均粒子径で１．０μｍ以下の微細粒子を得たことはなく、平均粒子径で１．０μｍ以下の微細粒子（ナノ粒子）を得ることは不可能とされている。このジェットミルを用いて製造した難溶性アミノ酸の１．０μｍを超えて３０．０μｍ以下の微細粒子からなる粉体であっても、その極少量を溶媒に加え分散させると、強い白濁性の懸濁液となり、乳液やクリームなどの澄明度を問わない液体製剤か固形粉体製剤にしか用いることができない。
【００１３】
また、溶解性に優れるアミノ酸類の乾燥粉末を製造するためにアミノ酸類含水溶液から噴霧乾燥して粉末を製造する特許文献１に記載の方法であっても平均粒径０.１μｍ以下のアミノ酸類粉末は得られていない。しかも、Ｌ‐シスチンなど溶解度の極めて低いアミノ酸にとっては、その水溶液の濃度は極めて低く、噴霧乾燥により粉末を製造することは、大量の溶液を処理するため、大量の熱エネルギーが消費されるばかりではなく、収率は極めて低いため、実用性がない。
【００１４】
そのため、Ｌ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類を含めて、現在、アミノ酸の微粉末は、殆んど物理的に細分化する方法、すなわち粉砕法によって製造されている。一般的には粉砕の手法は乾式法と湿式法に分けられる。従来、アミノ酸の粉砕方法としては乾式法が常識とされる。すなわち空気中や窒素など不活性ガス雰囲気中で粉砕を行なう手法が採用されているが、このような粉砕法によって平均粒子径１．０μｍ以下の難溶性アミノ酸微細粒子を商業的に得た例がない。
【００１５】
従って、本発明の目的は、難溶性アミノ酸類の化学構造に親水性基又は親油性基を導入する改質をすることなく、難溶性アミノ酸類の本来の性質を保ったまま、化粧料に配合し易く、皮膚になじみ易く、さらには吸収性の優れかつ安全な難溶性アミノ酸類微細粒子並びにその製造方法を提供することにある。さらには、その難溶性アミノ酸類微細粒子を用いて皮膚吸収に優れ、飽和濃度以上の使用濃度で澄明感のある化粧料、並びに食品添加剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明者らは、これらの課題を解決するため鋭意研究した結果、通常流通している粒度の難溶性アミノ酸結晶を湿式粉砕法、すなわち水、アルコール又は有機溶媒などの液体中で粉砕を行なうことによって、Ｌ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類を超微細化し、平均粒子径で１.０μｍ以下の微細粒子が得られることが可能であることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法は、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類を湿式粉砕法によって物理的に細分化させて、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径を１．０μｍ以下とすることを特徴とする。
【００１７】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法の形態として、前記難溶性アミノ酸類が、（化１）の一般式で表されるシスチン又はシスチン誘導体或いはそれらの塩である形態がある。
【化１】
（化１）中、Ｒ１は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル脂肪酸残基又はアルケニル脂肪酸残基、炭素原子数1〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜１８のヒドロキシアルキル基を表し、Ｒ２は水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。
【００１８】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法の形態として、前記難溶性アミノ酸類が、（化２）の一般式で表されるチロジン又はチロジン誘導体或いはそれらの塩である形態がある。
【化２】
（化２）中、Ｒ３は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル脂肪酸残基又はアルケニル脂肪酸残基、炭素原子数1〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜１８のヒドロキシアルキル基を表し、Ｒ４は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。Ｒ５は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。
【００１９】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法では、直径３ｍｍ以下のビーズを粉砕媒体とし、水を分散媒として湿式粉砕を行なうことが好ましい。
【００２０】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法では、直径３ｍｍ以下のビーズを粉砕媒体とし、アルコール類、有機溶媒、動植物油又は鉱物油を分散媒として湿式粉砕を行なうこととしても良い。
【００２１】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法では、前記難溶性アミノ酸類に、ダイヤモンド微細粒子又は無機粒子或いはその両方を加えて、湿式粉砕法によって混合粉砕することとしても良い。本発明は、精密研磨に使用され、また、化粧品に添加される可能性も考えられるダイヤモンド微細粒子又はすでに化粧品に使われている酸化チタン、アルミナ、酸化亜鉛などの機能性無機粒子を難溶性アミノ酸と混合粉砕することによって、難溶性アミノ酸結晶粒子の微細化をより効率的に進められる。また得られた組成物が安定的である。そして、化粧料組成物に配合されるほかの機能性微細粒子をワン・ステップで均一に難溶性アミノ酸類微細粒子と混合することができる。
【００２２】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子は、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子において、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径が１．０μｍ以下であることを特徴とする。
【００２３】
本発明に係る難溶性アミノ酸類含有混合組成物は、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子と、ダイヤモンド微細粒子又は無機微細粒子或いはその両方との混合微細粒子を含む難溶性アミノ酸類含有混合組成物であって、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径が１．０μｍ以下であることを特徴とする。
【００２４】
本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物は、本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法によって得られたことを特徴とする。
【００２５】
本発明に係る難溶性アミノ酸類含有混合組成物は、形態がクリーム状である場合が包含される。本発明は、湿式粉砕における難溶性アミノ酸の濃度を増やすことにより、ゾルとゲルの中間状態に当たる安定的なクリーム状（糊状）の難溶性アミノ酸分散体が得られた。また、ナノダイヤモンドに限定する必要はないが、ナノダイヤモンド微細粒子を添加すると、クリーム状の難溶性アミノ酸分散体の生成が促進され、得られたクリーム状の難溶性アミノ酸分散体がより安定的である。
【００２６】
本発明に係る皮膚外用剤は、本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物を配合した化粧料を含むことを特徴とする。
【００２７】
本発明に係る食品添加物は、本発明に係る難溶性アミノ酸類微細粒子（ただし、難溶性アミノ酸はＬ‐シスチン又はＬ‐チロジンであり、かつ、水、エタノール、グリセリン、グリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール又は動植物油を分散媒とする。）を含むことを特徴とする。
【発明の効果】
【００２８】
本発明によれば、難溶性アミノ酸類の化学構造に親水性基又は親油性基を導入する改質をすることなく、難溶性アミノ酸類の本来の性質を保ったまま、微細粒子化することができる。得られた難溶性アミノ酸類微細粒子は、化粧料に配合し易く、皮膚になじみ易く、さらには吸収性の優れかつ安全性が高い。さらに、得られた難溶性アミノ酸類微細粒子を用いて、皮膚吸収に優れ、飽和濃度以上の使用濃度で澄明感のある感触の良い化粧料、並びに食品添加剤を提供することも可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２９】
本発明の実施の形態を説明する。以下に説明する実施の形態は本発明の構成の例であり、本発明は、以下の実施の形態に制限されるものではない。本発明の効果を奏する限り、種々の形態変更をしてもよい。
【００３０】
まず、難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法について説明する。本実施形態に係る難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法は、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類を湿式粉砕法によって物理的に細分化させて、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径を１．０μｍ以下とする。粉砕対象は、難溶性アミノ酸類であり、具体的には、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下のアミノ酸又はアミノ酸誘導体或いはそれらの塩である。この場合、水を湿式粉砕時の溶媒として使用することができる。また、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセリン、プロピレングリコール等のアルコール類、アセトン等の有機溶媒を湿式粉砕時の溶媒として使用することができ、この場合、２０℃のこれらの溶媒１００ｇに対する溶解度が０．５ｇ以下のアミノ酸類であれば、本実施形態における難溶性アミノ酸類である。なお、揮発性の有機溶媒を分散媒とすれば、粉砕後に容易に除去でき、粉末が残る。
【００３１】
難溶性アミノ酸類としては、例えば、（化１）の一般式で表されるシスチン又はシスチン誘導体或いはそれらの塩であり、（化２）の一般式で表されるチロジン又はチロジン誘導体或いはそれらの塩である。さらに具体的には、例えば、Ｌ‐シスチン ジベンジルエステル、Ｌ‐シスチン ジ‐ｔｅｒ‐ブチルエステル、Ｎ，Ｎ‐ジベンジルオキシカルボニル‐Ｌ‐シスチン、Ｎ，Ｏ‐ベンジルチロジン、Ｂｏｃ‐Ｌ‐チロジンエチルエステルである。これらの難溶性アミノ酸類は、水のみならず、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセリン、プロピレングリコール等のアルコール類、アセトンなどの有機溶媒或いは動植物油又は鉱物油等の油類に対しても上記の難溶性を示す場合も多く、湿式粉砕時の溶媒として水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセリン、プロピレングリコール等のアルコール類、アセトンなどの有機溶媒或いは動植物油又は鉱物油等の油類を選択して使用できる。なお、粉砕時における難溶性アミノ酸類は、１種類に限定されず、２種以上の混合物としてから粉砕を行なっても良い。
【００３２】
難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法において、湿式粉砕法を採用する理由は次に説明するとおりである。アミノ酸のほとんどが水溶性であるため、アミノ酸を粉砕し、微細粒子化するために湿式粉砕法を用いるという考えは一般的ではなかった。その影響により、Ｌ‐シスチンやＬ‐チロジンなどの難溶性アミノ酸に限って湿式粉砕法を用いた例は今までに無い。従来のアミノ酸の粉砕では、衝撃法によるハンマーミルやボールミルなど粉砕装置を用いて空気中や不活性ガスでの乾式粉砕が多く試みられてきたが、いずれも平均粒子径１.０μｍ以下のアミノ酸微細粉体を得ることはできなかった。本発明者らの試みによって、ジェットミルによる乾式粉砕法でＬ‐シスチンを粉砕したところ、通常、平均粒子径１０μｍのＬ‐シスチンが得られ、粉砕条件をより細かくなるように厳しくして１．６μｍのＬ‐シスチンが得られたのが、微細化の限界であった。
【００３３】
微細粒子化技術としての粉砕操作は、製造過程が簡単でコストが低いなどの特徴があり、多くの産業分野で活用されている。粉砕法によって塊状ないしは粒状固体を砕いて数百あるいは数十ミクロンサイズの砕成物を得るのはそれほど難しくない。しかし、粉砕法によって１．０μｍ以下の微細粒子を得るのは容易ではない。また、一般的には、乾式粉砕よりも液体中での粉砕すなわち湿式粉砕法は、より細かい粒子が得られることが知られている。しかし、アミノ酸類微細粉末の製造に関しては、ほとんどのアミノ酸類は可溶性であるため、これまでＬ‐シスチンなど難溶性アミノ酸を含むアミノ酸類の粉砕は乾式法によって行われ、湿式法は適用できないという常識があった。本発明者らが乾式粉砕法を検討した際のＬ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類の粉砕に用いた粉砕装置及びその原理を表１に示す。
【００３４】
【表１】
【００３５】
本発明者らは、適切な粉砕条件で、Ｌ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類を湿式粉砕法によって平均粒子径１．０μｍ以下、さらに、０．１μｍ以下に微細粒子化することが可能であることを見出した。すなわち、Ｌ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類を湿式粉砕するには、粉砕媒体を用いる粉砕方式が望ましい。また、望ましい粉砕媒体は球形の微小ボールである。さらに望ましい粉砕媒体が耐磨耗性のよいジルコニア製のもので、その直径が３ｍｍ以下、粉砕効率の向上の観点から好ましくは１ｍｍ以下、より好ましくは０．１〜１．０ｍｍのビーズである。また、粉砕装置内で難溶性アミノ酸類粒子と接触するミル本体の材質も粉砕媒体と同一のものであることが望ましい。通常市販されている遊星ボールミルなどの回転型ボール又はビーズミルなど媒体撹拌型ミルが適用できるが、これらの粉砕装置に限定する必要がない。また、適切な粉砕条件としては、粉砕溶媒１００ｍlに対し粉砕媒体のジルコニアビーズの使用量は１００ｇ〜４００ｇ、望ましいのは２００ｇ〜３００ｇ、さらに望ましいのは２４０ｇ〜２６０ｇ、また、粉砕溶媒１００ｍｌに対してＬ‐シスチンなど難溶性アミノ酸類の仕込み量は０．１ｇ〜３０ｇ、望ましいのは０．５ｇ〜２０ｇ、さらに望ましいのは１ｇ〜１５ｇである。
【００３６】
本実施形態では、粉砕時の分散媒として例えば、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセリン、プロピレングリコール等のアルコール類、アセトンなどの有機溶媒或いは動植物油又は鉱物油等の油類を使用するが、これらに限定する必要はない。これらの種類は難溶性アミノ酸類微細粒子の使用目的によって適宜選択する。例えば、食品用途とするのであれば、分散媒は水、エタノール、グリセリン、グリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール又は動植物油とする。難溶性アミノ酸類微細粒子は、湿式粉砕法によって粉砕され、分散媒にほとんど溶解しないことから、細分化され平均粒子径だけが小さくなっていき、難溶性アミノ酸類自体の分解又は変質を起こさず、それ自身の本来の構造と性質を維持することができる。
【００３７】
本実施形態において、平均粒子径とは、前述のとおり、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径とする。難溶性アミノ酸類微細粒子は、凝集して二次粒子を形成している場合があるので、本発明における平均粒子径の測定対象は、次の操作によって分散を図った懸濁液とする。すなわち、粒度分布測定用のサンプルは、湿式粉砕によって得られた懸濁液について、測定のために凝集を防ぎ、分散性を維持するために界面活性剤（花王（株）製界面活性剤デモールＮの０．１％水溶液）を加えて更に粉砕操作を５分間運転処理し、処理済み懸濁液を高強度超音波ホモジナイザー（例えばＶＣＸ‐７５０型、周波数２０ｋＨｚ、米国ＳＯＮＩＣＳ ＆ ＭＡＴＥＲＩＡＬＳ，ＩＮＣ．製）を用いて振幅コントロールを５０％にセットし、２分間で分散処理した後、測定を行なったものとした。なお、平均粒子径の定義において、０．１μｍ以下の微細粒子を対象とする場合には、レーザー光子相関法（Ｂｅｃｋｍａｎ・Ｃｏｕｌｔｅｒ：ＤｅｌｓａＮａｎｏ Ｃ）によって粒度分布を測定し、粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径を平均粒子径として併用しても良い。この場合、本実施形態において、難溶性アミノ酸類微細粉末又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物は、レーザー光子相関法によって得られた粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの平均粒子径を１００ｎｍ以下とすることが好ましい。
【００３８】
このように難溶性アミノ酸類の細分化を進めることで、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子において、平均粒子径が１．０μｍ以下である難溶性アミノ酸類微細粒子が得られる。さらに好ましくは全ての粒子が１００ｎｍ以下の難溶性アミノ酸類微細粒子が得られる（この場合は、前記レーザー光子相関法による。）。
【００３９】
本発明の難溶性アミノ酸類微細粒子の重要な用途の一つとして、化粧品組成物の成分がある。一般的に、化粧品における微細粒子の主な役割は、微細粒子がもつ被覆性、着色性、吸油性、吸水性、保湿性、溶解性、皮膚における展延性など性質の利用である。また、近年、紫外線の有害性が広く認識されるようになり、紫外線から皮膚を守る目的のために、ナノ化された酸化チタンなど機能性微細粒子が配合され利用されている。すなわち、微細粒子は化粧品における重要な原料の一つである。さらに、化粧品においては一般に複数種類の微細粒子が同時に利用されていることから、これらの異なる微細粒子間の混合又は分散の均一性、及び、配合性は化粧品（化粧料）の品質に影響を与える。
【００４０】
一般的には、化粧品の製造プロセスは、粉砕と分散が重要な操作単位となる。例えば、メーキャップ化粧品のファンデーションなどは粉末化粧品であり、その製造は、着色顔料と体積顔料を混合機（例えば、ミキサー）で均一に混合したあと、粉砕機（例えば、ハンマーミル）で粉砕する。粉砕後、混合機にて少量の油分を混合する。その後、再度粉砕を行い均一な混合を図る。これを容器に充填して製品とする。また、油性化粧品の製造は、顔料を一部の油分とともに混練機（例えば、ロールミル）を用いて混合粉砕したあと、ワックスなどの残り油分と溶解混合する。そして脱気後、容器又は皿に充填して製品とする。このように、粉砕と分散は化粧品の製造プロセスにおいて重要な操作単位である。一般的には、微細粒子のサイズは細かくなるほど、均一な分散・混合は難しくなる。そこで、難溶性アミノ酸類の湿式粉砕においては、難溶性アミノ酸類に、ダイヤモンド微細粒子（例えば、ナノダイヤモンド微細粒子）又は無機粒子或いはその両方を加えて、混合粉砕することとしてもよい。難溶性アミノ酸類よりも硬度の高い粒子を添加して混合粉砕することによって、難溶性アミノ酸類の細分化過程をより効率的に進めることが可能であり、より安定したＬ‐シスチンなど難溶性アミノ酸の微細粒子を含有する組成物が得られる。無機粒子としては、例えば、酸化チタン、酸化亜鉛、酸化鉄、タルク、アルミナ、シリカ、マイカであるが、これらに限定する必要なない。化粧品によく使われている無機粒子は、例えば、酸化チタン、酸化鉄、酸化鉄、酸化亜鉛、酸化チタン溶融物などがあげられる。これらの粒子は、紫外線防止効果を高めることと、透明性を上げることなどの目的のために、一般に直径０．１μｍ以下の超微細粒子を用いることが求められる。しかし、これらの超微細粒子の使用上の問題点は一次粒子への分散が容易でなく、凝集によって透明性や紫外線防止効果を低下させることがある。本発明は、これらの超微細粒子の分散を難溶性アミノ酸類粒子の超微粉砕と同時に進めることで、結果としてｏｎｅ‐ｓｔｅｐでしかも低コストで均一に分散混合した平均粒子径１．０μｍ以下の難溶性アミノ酸類微細粒子を含む組成物を提供することを可能とした。無機微細粒子の均一分散と均一混合がなされているため、化粧品の紫外線防止効果及び透明性の両者をより上げることが可能である。また、化粧料以外の用途においても、難溶性アミノ酸類微細粒子は必ずしも他の成分微細粒子と分離する必要はなく、その混合組成物が原料として、またそのまま製品として利用できる。また、湿式粉砕の際には、二種類以上の無機粒子を同時に添加することも可能である。さらに、無機粒子のほか、難溶性アミノ酸よりも硬度が高い有機微細粒子、例えばポリアミド系重合物などを添加することも効果がある。無機粒子の投入時の平均粒子径は、湿式粉砕機に投入できる大きさであれば制限はなく、例えば１００μｍを超える粗粒子でもよい。湿式粉砕によって、無機粒子も粉砕が進んでいき、無機微細粒子となるからである。もちろん、当初に直径０．１μｍ以下の超微細粒子を添加しても良い。なお、ダイヤモンド微細粒子は、粉砕されにくいので、ナノダイヤモンド粒子からなる微細粒子が好ましい。このように硬度の高い微細粒子を添加して混合粉砕して難溶性アミノ酸類の細分化を進めることで、２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子と、ダイヤモンド微細粒子又は無機微細粒子或いはその両方との混合微細粒子を含む難溶性アミノ酸類含有混合組成物であって、平均粒子径が１．０μｍ以下である難溶性アミノ酸類含有混合組成物が得られる。さらに好ましくは１００ｎｍ以下の粒子を含む平均粒子径１．０μｍ以下の難溶性アミノ酸類含有混合組成物が得られる。
【００４１】
平均粒子径が１．０μｍ以下、好ましくは平均粒子径０．５μｍ以下、さらに好ましくは平均粒子径０．１μｍ以下の難溶性アミノ酸類微細粒子又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物は、与えられた微細性によって化粧品としての使い勝手が向上している。例えば、難溶性アミノ酸類の粒子径を１００ｎｍ以下（以下、ナノ粒子またはナノサイズという。）とすることによって、難溶性アミノ酸類微細粒子の利用価値を向上させると共に、数十μｍ〜数百μｍサイズの従来の大きい粒子の難溶性アミノ酸（以下、難溶性アミノ酸粗大粒子という）ではできなかった新たな利用を可能にする。粒子径が可視光の波長（約４００〜８００ｎｍ）よりかなり小さいと可視光の散乱が少なく透明性が上がる。メーキャップ化粧品であるファンデーション成分として、皮膚吸収に優れ、飽和濃度以上の濃度でより澄明感のある化粧料、より光学特性に優れた化粧料となる。また、肌の角質細胞の隙間は、おおよそ４０．０〜１００．０ｎｍと言われている。また、顔に約２０万個が存在している毛穴の直径はおおよそ１００．０〜２００．０μｍ、汗腺は３０．０〜８０．０μｍとされている。従って、それ以下のサイズの粒子ならば、物理的に皮膚角質層の深部まで到達できるということになる。すなわち、粒子径１００ｎｍ以下の粒子を含む平均粒子径１．０μｍ以下の粉体ならば、角質細胞の隙間に浸透し、又は毛穴、汗腺を経由してその効力を皮膚細胞に与え、うるおいを与え、バリアー機能を補うことができると考えられる。さらに微細化されているため、皮膚や毛髪への付着性、伸展性（延び）、すべり、べたつきなどの使用感が改良される。
【００４２】
本発明における重要な発見の一つとして、前記に述べたダイヤモンド微細粒子又は無機粒子との混合粉砕において、難溶性アミノ酸類の固形分濃度を増やすと同時に少量のダイヤモンド微細粒子又は無機粒子を添加することよりクリーム状物質が得られ、長時間放置しても安定であることが見出された。その配合は、例えば、難溶性アミノ酸類の固形１００質量部に対して、ダイヤモンド微細粒子又は無機粒子１〜５質量部である。形態がクリーム状となり、かつ、安定であるそのメカニズムは不明であるが、従来の難溶性アミノ酸類粗大粒子を、プロペラ撹拌機又はホモミキサー又は万能ミキサーを用いて５時間まで撹拌分散してもクリーム状分散物が得られないことから、本発明に特有なメカニズムにより生じたと考えられる。結果として出来た難溶性アミノ酸類を含有するクリーム状分散物は、触感改善効果、粘度の増加効果、乳化安定性効果、分離防止効果があり、化粧料に用いると皮膚や毛髪から脱落しにくく、皮膚や毛髪との接触面積が大きいことから皮膚や毛髪への付着、のび、べたつきなどの使用感が優れているため、化粧料の組成物に適する。
【００４３】
難溶性アミノ酸類微細粒子（ただし、難溶性アミノ酸はＬ‐シスチン又はＬ‐チロジンであり、かつ、水、エタノール、グリセリン、グリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール又は動植物油を分散媒とする。）は、食品添加物としても使用できる。微細粒子であるため、吸収性に優れている。さらに、製品への配合性及び混合性に優れ、調理などの加熱などによる酵素を介した反応性に富み、かつ、食感を改善する。
【実施例】
【００４４】
以下、非限定的に本発明の詳細を例示する。
（実施例１）Ｌ‐シスチンの微細粒子化
純度９９％以上のＬ‐シスチン０.２ｇを精製水２０ｍｌに分散させて直径１ｍｍのジルコニアビーズ５０ｇと共に容量４５ｍｌのジルコニア容器に入れ、遊星ボ−ルミル（ドイツ・フリッチュ社製Ｐ‐７型、以下使用するミルは同じものである）を用いて７５０ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で５時間粉砕した。得られた微細粒子の懸濁液の凝集を防ぎ、分散性を維持するために界面活性剤（花王（株）製界面活性剤デモールＮの０．１％水溶液）を加えて更に５分間運転処理した。前記懸濁液をレーザー回折/散乱式粒子径分布測定装置（ＨＯＲＩＢＡ ＬＡ‐９２０、以下使用する測定装置は同じものである）で平均粒子径を測定すると、０．４３８μｍ、かつ最大粒子径１．９８１μｍであった。図１にこの時の粒子径分布図を示す。またこのＬ‐シスチン微細粒子を走査型電子顕微鏡で観察すると粒子径は５０〜１，０００ｎｍであることが確認された。図２にＳＥＭ画像を示す。更に、このＬ‐シスチン微細粒子について薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣプレート：メルク・シリカゲル６０Ｆ２５６、展開溶媒；水：ブタノール：酢酸＝２:１:１）及び赤外吸収スペクトル（ＩＲ装置：Ｔｈｅｒｍｏ Ｎｉｃｏｌｅｔ ３８０ ＦＴ‐ＩＲ、臭化カリウム錠剤法）を測定し、それらの結果と、未粉砕のＬ‐シスチンのＴＬＣスポット及びＪＩＳのＬ‐シスチンのＩＲスペクトルとを比較して、Ｌ‐シスチンであることが確認できた。図３に薄層クロマトグラフィの結果を示した。図４に赤外吸収スペクトルの比較を示した。図１に示した粒子径分布測定装置での結果は、粉砕微細粒子のうちかなりの量を占めると思われる凝集体を反映しており、実際には、図２のＳＥＭ写真で見られるように５０ｎｍ以下の粒子も多く含まれていた。得られた微細粒子は、薄層クロマトグラフィ及び赤外吸収スペクトルでＬ‐シスチンであることが確認され、当粉砕方法を用いても分解しないことが分った。同様の粉砕操作でＬ‐シスチンの平均粒子径が１．０μｍ以下、かつ最大粒子径２．５mｍ以下の粒子も得ることができた。
【００４５】
（実施例２）有機溶媒中でのＬ‐シスチンの微細粒子化
純度９９％以上のＬ‐シスチン１.０ｇをアセトン２０ｍｌに分散させて遊星ボールミルに入れ、直径１ｍｍのジルコニアのビーズを用いて７５０ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で合計３時間粉砕した。溶媒を蒸発除去してＬ‐シスチンの粉体を得た。この粉体０.２ｇを取り、メタノ−ル２０ｍｌに分散させて遊星ボ−ルミルに入れ直径０.２ｍｍのジルコニアのビーズを用いて８００ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で合計２時間粉砕した。この分散液をレーザー回折/散乱式粒子径分布測定装置で平均粒子径を測定すると、一次粒子又は凝集体の平均粒子径０.５２３μｍ、かつ最大粒子径２.２６９μｍの微細粒子を得ることができた。図５に粒子径分布図を示した。
【００４６】
（実施例３）実施例２の他形態
実施例２においてアセトンを蒸発させて得られた微細粒子状Ｌ‐シスチン０.２ｇに精製水２０ｍｌを加え、遊星ボ−ルミルに入れて直径０.２ｍｍのジルコニア材質のビーズを用いて８００ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で合計２時間粉砕処理を行った。得られた懸濁液を、高強度超音波ホモジナイザーを用いて振幅コントロールを５０％にセットし、２分間で分散処理した。レーザー回折粒度分布測定器で粒子径を測定すると、最大粒子径２．２６９μｍ、平均粒子径０.４９２μｍの粒度分布を持つことが確認できた。図６に粒子径分布図を示した。
【００４７】
（実施例４）他の粒度測定法による検証
純度９９％以上のＬ‐シスチン１.０ｇを精製水２０ｍｌに分散させて遊星ボ−ルミルに入れ直径１ｍｍのジルコニアのビーズを用いて７５０ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で合計３時間粉砕し、ペースト状のＬ‐シスチンを得た。このペースト２.０ｇを取り再び精製水１５ｍｌに分散させて遊星ボ−ルミルに入れ直径０.２ｍｍのジルコニアのビーズを用いて回転数８００ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で合計２時間粉砕した後、精製水５ｍｌを加え更に５分間で粉砕を行い、Ｌ−シスチン分散した懸濁液を得た。粒度分布を測定するため、この懸濁液２ｇに花王（株）製界面活性剤デモールＮの０．１％水溶液８ｇを添加し、高強度超音波ホモジナイザーを用いてで振幅コントロールを５０％にセットし、２分間で分散処理した。得られた微細粒子の懸濁液をレーザー光子相関法（Ｂｅｃｋｍａｎ・Ｃｏｕｌｔｅｒ：ＤｅｌｓａＮａｎｏ Ｃ）によって粒度分布を測定すると、６９．９ｎｍから９０．６ｎｍの範囲の粒子で平均粒子径７６.６nｍの粒子であることが分った。図７に粒子径分布図を示した。ここで、平均粒子径とは、レーザー光子相関法によるＢｅｃｋｍａｎ・Ｃｏｕｌｔｅｒ：ＤｅｌｓａＮａｎｏ Ｃを用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径のことである。本実施例によれば、適切な粉砕条件と界面活性剤を選択することで全てのＬ‐シスチン粒子のサイズを１００ｎｍ以下にすること、すなわち、Ｌ‐シスチンのナノサイズ化が可能であることがわかった。
【００４８】
（実施例５）ナノダイヤモンド微細粒子との混合粉砕によるＬ‐シスチンの微細粒子化
純度９９％以上のＬ‐シスチン０．５ｇに爆発法ナノダイヤモンド微細粒子（製品名；Ｎａｎｏｄｉａｍｏｎｄ Ｐｏｗｄｅｒ、Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｐａｎｙｕ Ｇｕａｎｇｄａ Ｅｌｅｃｔｒｏｍｅｃｈａｎｉｃａ Ｃｏ．Ｌｔｄ，Ｐａｎｙｕ ｄｉｓｔｒｃｔ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，ｃｈｉｎａ社製、；平均粒子径５ｎｍダイヤモンド粒子で構成した凝集体で、爆発法ナノダイヤモンドとも呼ぶ。精密研磨加工分野で利用される。参考文献：砥粒加工学会誌、４７巻８号、ｐ４１４）０．２ｇを加え、更に精製水２０ｍｌを加え分散させて遊星ボ−ルミルに入れ直径１ｍｍのジルコニアのボールを用いて７５０ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で３時間をかけて混合粉砕を行った。得られた混合粉砕物を、走査型電子顕微鏡で観察した結果、Ｌ‐シスチンが１．０μｍ以下に粉砕されたことが確認できた。また、レーザー回折粒度分布測定器で粒子径を測定すると、最大粒子径が１．００５μｍで、平均粒子径０.３２２μｍの粒度分布を持つことが確認できた。図８にＳＥＭ画像を示した。図９に粒子径分布図を示した。また、本実施例で使用した爆発法ナノダイヤモンドは、メーカーが提供した成績書によると、その一次粒子の直径は粒径３〜１０ｎｍ、比表面積は２７８〜３３５ｍ２／ｇ、形状は球形のものである。爆発法ナノダイヤモンドは爆薬を原料にした合成ダイヤモンドで、黒鉛を原料にした従来の工業用ダイヤモンドよりも細かく、既に化粧品などに応用されているフラーレン（Ｃ６０）と同様に球形なナノカーボンである。また、爆発法ナノダイヤモンドが生体に対して安全性に問題がないと示唆する研究報告も出された（非特許文献３を参照。）。これらのことから、本実施例で示した難溶性アミノ酸を含有する組成物が化粧品へ応用できることや爆発法ナノダイヤモンドはフラーレン（Ｃ６０）と類似な効果・機能（例えば、抗酸化効果）が発見できることが示唆される。これを支持する下記の実験結果が本発明者らによって得られた。
（実験結果）
ＳＯＤ Ａｓｓａｙ ｋｉｔ‐ＷＳＴ（同仁化学）を用いて爆発法ナノダイヤモンドのスーパーオキシドアニオン消去率を測定したところ、ＩＣ５０値０．２（Ｗ／Ｖ％）という値を得た。
【非特許文献３】Ａｒｅ ｄｉａｍｏｎｄ ｎａｎｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ？，Ｓｃｈｒａｎｄ，Ａ．Ｍ．；Ｈｕａｎｇ，Ｈ．；Ｃａｒｌｓｏｎ，Ｃ．；Ｓｃｈｌａｇｅｒ，Ｊ．Ｊ．；Ｏｓａｗａ，Ｅ．＋Ｈｕｓｓａｉｎ，Ｓ．Ｍ．；Ｄａｉ，Ｌ．；Ｊ．Ｐｈｙｓ．ｃｈｅｍ．Ｂ．２００７，１１１［１］，２‐７
【００４９】
（実施例６）アルミナ微細粒子との混合粉砕によるＬ‐シスチンの微細粒子化
実施例５のナノダイヤモンドの替わりに、純アルミナ微細粒子（メラー社製、ロット：１０１１Ｎ、平均粒子径０．０６μｍ）を用いて実施例５と同じ条件で混合粉砕を行った。得られた混合粉砕物を、走査型電子顕微鏡で観察した結果、Ｌ‐シスチンが１．０μｍ以下に粉砕されたことが確認できた。また、レーザー回折粒度分布測定器で粒子径を測定すると、最大粒子径が３．４０９μｍで、平均粒子径０．５０５μｍの粒度分布を持つことを確認できた。図１０にＳＥＭ画像を示した。図１１に粒子径分布図を示した。
【００５０】
（実施例７）酸化チタン微細粒子との混合粉砕によるＬ‐シスチンの微細粒子化
実施例５のナノダイヤモンドの替わりに、酸化チタン微細粒子（ルチル型、関東化学提供、製品番号４０９８‐３０、粒子径約０．１〜０．３μｍ）を用いて実施例５と同じ条件で混合粉砕を行った。得られた混合粉砕物を、走査型電子顕微鏡で観察した結果、Ｌ‐シスチンが１．０μｍ以下に粉砕されたことが確認できた。また、レーザー回折粒度分布測定器で粒子径を測定すると、最大粒子径が１１．５６５μｍで、平均粒子径０．２６２μｍの粒度分布を持つことが確認できた。図１２にＳＥＭ画像を示した。図１３に粒子径分布図を示した。
【００５１】
（実施例８）粉砕により得られた安定的なクリーム状シスチン組成物
純度９９％以上のＬ‐シスチン３．０ｇに爆発法ナノダイヤモンド０．０６ｇを加え、分散させて遊星ボールミルに入れ直径３ｍｍのジルコニアのボールを用いて６６０ｒ．ｐ．ｍ．の回転数で３０分をかけて混合粉砕を行った後、さらに、更に精製水２０ｍｌを加え続けて３０分間粉砕を行った結果、流動性のないクリーム状組成物が得られた。また、２ヶ月放置しても状態の変化がないことが確認された。図１４にクリーム状組成物の画像を示した。右は横方向からの画像、左は上からの画像である。
【００５２】
（実施例９）実施例８との比較対照
実施例８に対する対比対象として、爆発法ナノダイヤモンドを添加しない、同様な条件で粉砕を行った結果、流動性のある牛乳状の組成物が得られた。図１５に牛乳状の組成物の画像を示した。右は横方向からの画像、左は上からの画像である。
【００５３】
（比較例１）
図１６に通常の流通品であるＬ‐シスチン粒子（粉砕前）の画像を示した。図１７に粒子径分布図を示した。
【００５４】
（比較例２）
図１８にＬ‐シスチン粒子（ハンマーミル粉砕品）の粒子径分布図を示した。これは粉砕品として流通しているものである。
【００５５】
（比較例３）
図１９にＬ‐シスチン粒子（ジェットミル粉砕品）の粒子径分布図を示した。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】粒子径分布図を示した。
【図２】ＳＥＭ画像を示した。
【図３】薄層クロマトグラフィの結果を示した。
【図４】赤外吸収スペクトルの比較を示した。
【図５】粒子径分布図を示した。
【図６】粒子径分布図を示した。
【図７】粒子径分布図を示した。
【図８】ＳＥＭ画像を示した。
【図９】粒子径分布図を示した。
【図１０】ＳＥＭ画像を示した。
【図１１】粒子径分布図を示した。
【図１２】ＳＥＭ画像を示した。
【図１３】粒子径分布図を示した。
【図１４】クリーム状組成物の画像であり、右は横方向からの画像、左は上からの画像である。
【図１５】牛乳状の組成物の画像であり、右は横方向からの画像、左は上からの画像である。
【図１６】通常の流通品であるＬ‐シスチン粒子（粉砕前）の画像を示した。
【図１７】粒子径分布図を示した。
【図１８】Ｌ‐シスチン粒子（ハンマーミル粉砕品）の粒子径分布図を示した。
【図１９】Ｌ‐シスチン粒子（ジェットミル粉砕品）の粒子径分布図を示した。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類を湿式粉砕法によって物理的に細分化させて、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径を１．０μｍ以下とすることを特徴とする難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【請求項２】
前記難溶性アミノ酸類は、（化１）の一般式で表されるシスチン又はシスチン誘導体或いはそれらの塩であることを特徴とする請求項１に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【化１】
（化１）中、Ｒ１は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル脂肪酸残基又はアルケニル脂肪酸残基、炭素原子数1〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜１８のヒドロキシアルキル基を表し、Ｒ２は水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。
【請求項３】
前記難溶性アミノ酸類は、（化２）の一般式で表されるチロジン又はチロジン誘導体或いはそれらの塩であることを特徴とする請求項１に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【化２】
（化２）中、Ｒ３は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル脂肪酸残基又はアルケニル脂肪酸残基、炭素原子数1〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜１８のヒドロキシアルキル基を表し、Ｒ４は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。Ｒ５は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。
【請求項４】
直径３ｍｍ以下のビーズを粉砕媒体とし、水を分散媒として湿式粉砕を行なうことを特徴とする請求項１、２又は３に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【請求項５】
直径３ｍｍ以下のビーズを粉砕媒体とし、アルコール類、有機溶媒、動植物油又は鉱物油を分散媒として湿式粉砕を行なうことを特徴とする請求項１、２又は３に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【請求項６】
前記難溶性アミノ酸類に、ダイヤモンド微細粒子又は無機粒子或いはその両方を加えて、湿式粉砕法によって混合粉砕することを特徴とする請求項１、２、３、４又は５に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【請求項７】
２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子において、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径が１．０μｍ以下であることを特徴とする難溶性アミノ酸類微細粒子。
【請求項８】
２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子と、ダイヤモンド微細粒子又は無機微細粒子或いはその両方との混合微細粒子を含む難溶性アミノ酸類含有混合組成物であって、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径が１．０μｍ以下であることを特徴とする難溶性アミノ酸類含有混合組成物。
【請求項９】
請求項１、２、３、４、５又は６に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法によって得られたことを特徴とする難溶性アミノ酸類微細粒子又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物。
【請求項１０】
形態がクリーム状であることを特徴とする請求項８に記載の難溶性アミノ酸類含有混合組成物。
【請求項１１】
請求項７、８、９又は１０に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物を配合した化粧料を含むことを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項１２】
請求項７又は９に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子（ただし、難溶性アミノ酸はＬ‐シスチン又はＬ‐チロジンであり、かつ、水、エタノール、グリセリン、グリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール又は動植物油を分散媒とする。）を含むことを特徴とする食品添加物。
【請求項１】
２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類を湿式粉砕法によって物理的に細分化させて、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径を１．０μｍ以下とすることを特徴とする難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【請求項２】
前記難溶性アミノ酸類は、（化１）の一般式で表されるシスチン又はシスチン誘導体或いはそれらの塩であることを特徴とする請求項１に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【化１】
（化１）中、Ｒ１は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル脂肪酸残基又はアルケニル脂肪酸残基、炭素原子数1〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜１８のヒドロキシアルキル基を表し、Ｒ２は水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。
【請求項３】
前記難溶性アミノ酸類は、（化２）の一般式で表されるチロジン又はチロジン誘導体或いはそれらの塩であることを特徴とする請求項１に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【化２】
（化２）中、Ｒ３は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル脂肪酸残基又はアルケニル脂肪酸残基、炭素原子数1〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜１８のヒドロキシアルキル基を表し、Ｒ４は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。Ｒ５は、水素原子、炭素原子数１〜１８の直鎖若しくは分岐したアルキル基又はアルケニル基、或いは、炭素原子数２〜２２のヒドロキシアルキル基を表す。
【請求項４】
直径３ｍｍ以下のビーズを粉砕媒体とし、水を分散媒として湿式粉砕を行なうことを特徴とする請求項１、２又は３に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【請求項５】
直径３ｍｍ以下のビーズを粉砕媒体とし、アルコール類、有機溶媒、動植物油又は鉱物油を分散媒として湿式粉砕を行なうことを特徴とする請求項１、２又は３に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【請求項６】
前記難溶性アミノ酸類に、ダイヤモンド微細粒子又は無機粒子或いはその両方を加えて、湿式粉砕法によって混合粉砕することを特徴とする請求項１、２、３、４又は５に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法。
【請求項７】
２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子において、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径が１．０μｍ以下であることを特徴とする難溶性アミノ酸類微細粒子。
【請求項８】
２０℃の水に対する溶解度が０．５ｇ／１００ｇ以下の難溶性アミノ酸類の微細粒子と、ダイヤモンド微細粒子又は無機微細粒子或いはその両方との混合微細粒子を含む難溶性アミノ酸類含有混合組成物であって、レーザー回折／散乱式粒度分布測定装置を用いて測定した粒子径分布曲線における下限若しくは上限からの頻度の累積値が５０％になったところの粒子径である平均粒子径が１．０μｍ以下であることを特徴とする難溶性アミノ酸類含有混合組成物。
【請求項９】
請求項１、２、３、４、５又は６に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子の製造方法によって得られたことを特徴とする難溶性アミノ酸類微細粒子又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物。
【請求項１０】
形態がクリーム状であることを特徴とする請求項８に記載の難溶性アミノ酸類含有混合組成物。
【請求項１１】
請求項７、８、９又は１０に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子又は難溶性アミノ酸類含有混合組成物を配合した化粧料を含むことを特徴とする皮膚外用剤。
【請求項１２】
請求項７又は９に記載の難溶性アミノ酸類微細粒子（ただし、難溶性アミノ酸はＬ‐シスチン又はＬ‐チロジンであり、かつ、水、エタノール、グリセリン、グリセリン脂肪酸エステル、プロピレングリコール又は動植物油を分散媒とする。）を含むことを特徴とする食品添加物。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１７】
【図１８】
【図１９】
【公開番号】特開２００９−２８６７５５（Ｐ２００９−２８６７５５Ａ）
【公開日】平成２１年１２月１０日（２００９．１２．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−１４３１０７（Ｐ２００８−１４３１０７）
【出願日】平成２０年５月３０日（２００８．５．３０）
【出願人】（０００２３２８２９）日本理化学薬品株式会社 (6)
【出願人】（５０６２０９４２２）地方独立行政法人 東京都立産業技術研究センター (134)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２１年１２月１０日（２００９．１２．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２０年５月３０日（２００８．５．３０）
【出願人】（０００２３２８２９）日本理化学薬品株式会社 (6)
【出願人】（５０６２０９４２２）地方独立行政法人 東京都立産業技術研究センター (134)
【Ｆターム（参考）】
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