本発明は部分的に、骨リモデリングのプロセスと関係がある特有かつ新たに同定した遺伝的ポリヌクレオチド;そのポリヌクレオチドおよび対応するポリペプチドの変異体および誘導体;ポリヌクレオチド、ポリペプチド、変異体および誘導体の使用;ならびに骨リモデリング障害によって引き起こされる症状を改善するための方法および組成物に関する。特に開示するのは、破骨活性と関係があるポリヌクレオチド、ポリペプチド、変異体および誘導体の単離および同定、同定したポリヌクレオチドの治療用標的としてのそれらの能力の確認、ならびに病状の改善および研究目的でのポリヌクレオチド、ポリペプチド、変異体および誘導体の使用である。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
未分化破骨前駆細胞と比較して分化破骨細胞において示差的に発現される単離ポリヌクレオチドであって、
a)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つを含むポリヌクレオチド、
b)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つのオープンリーディングフレームを含むポリヌクレオチド、
c)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つの転写可能部分を含むポリヌクレオチド、
d)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つの翻訳可能部分を含むポリヌクレオチド、
e)a)〜d)のいずれか1つと実質的に同一である配列を含むポリヌクレオチド、
f)a)〜e)のいずれか1つと実質的に相補的である配列を含むポリヌクレオチド、および
g)a)〜f)のいずれか1つの断片
からなる群から選択される1種を含む単離ポリヌクレオチド。
【請求項２】
前記実質的に同一であるポリヌクレオチドが配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つの変異体である、請求項1に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項３】
前記実質的に同一であるポリヌクレオチドが単離した非ヒトオルソログである、請求項1または2に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項４】
前記非ヒトオルソログが配列番号35を含む、請求項3に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項５】
前記断片が、配列番号1〜33、85または86のいずれか1つの核酸配列と実質的に相補的である少なくとも10ヌクレオチドの配列を含む、請求項1に記載のポリヌクレオチド。
【請求項６】
前記断片が配列番号42〜45のいずれか1つからなる群から選択される、請求項5に記載のポリヌクレオチド。
【請求項７】
RNA分子である、請求項1から6のいずれか一項に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項８】
DNA分子である、請求項1から6のいずれか一項に記載の単離ポリヌクレオチド。
【請求項９】
請求項7または8のいずれか一項に記載のDNAまたはRNA分子を含むベクター。
【請求項１０】
発現ベクターである、請求項9に記載のベクター。
【請求項１１】
未分化破骨前駆細胞と比較して分化破骨細胞において示差的に発現されるポリヌクレオチド配列のライブラリーであって、
a)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つを含むポリヌクレオチド、
b)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つのオープンリーディングフレームを含むポリヌクレオチド、
c)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つの転写可能部分を含むポリヌクレオチド、
d)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つの翻訳可能部分を含むポリヌクレオチド、
e)a)〜d)のいずれか1つと実質的に同一である配列を含むポリヌクレオチド、
f)a)〜e)のいずれか1つと実質的に相補的である配列を含むポリヌクレオチド、および
g)a)〜f)のいずれか1つの断片
からなる群から選択される少なくとも1種を含むライブラリー。
【請求項１２】
請求項11に記載のポリヌクレオチドのライブラリーを含む発現ライブラリーであって、前記ポリヌクレオチドのそれぞれが発現ベクター内に含まれる発現ライブラリー。
【請求項１３】
請求項11に記載のポリヌクレオチド配列のライブラリーを含むアレイ。
【請求項１４】
骨疾患を予防するための医薬組成物であって、
a)請求項1に記載の単離ポリヌクレオチドおよび
b)薬剤として許容される担体
を含む医薬組成物。
【請求項１５】
それを必要とする哺乳動物における骨疾患を予防するための方法であって、請求項1に記載の単離ポリヌクレオチドまたは請求項14に記載の医薬組成物を前記哺乳動物に投与するステップを含む方法。
【請求項１６】
前記哺乳動物が、骨粗しょう症、骨減少症、骨軟化症、副甲状腺機能亢進症、甲状腺機能亢進症、性腺機能低下症、甲状腺中毒症、全身性肥満細胞症、成人型低ホスファターゼ症、副腎皮質機能亢進症、骨形成不全症、パジェット病、クッシング病/症候群、チューマー症候群、ゴーシェ病、エーラース-ダンロス症候群、マルファン症候群、メンケス症候群、ファンコニー症候群、多発性骨髄腫、高カルシウム血症、低カルシウム血症、関節炎症、歯周病、くる病、繊維形成不全症骨、ピクノディスオストーシスなどの骨硬化症障害、およびマクロファージ媒介性炎症プロセスによって引き起こされる障害からなる群から選択される状態に罹患している、請求項15に記載の方法。
【請求項１７】
骨疾患を治療するための医薬品を調製するための、請求項1に記載の単離ポリヌクレオチドの使用。
【請求項１８】
a)請求項1に記載の単離ポリヌクレオチドおよび
b)薬剤として許容される担体
を含む医薬組成物。
【請求項１９】
骨疾患の診断における、
a)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つを含むポリヌクレオチド、
b)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つのオープンリーディングフレームを含むポリヌクレオチド、
c)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つの転写可能部分を含むポリヌクレオチド、
d)配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つの翻訳可能部分を含むポリヌクレオチド、
e)a)〜d)のいずれか1つと実質的に同一である配列を含むポリヌクレオチド、
f)a)〜e)のいずれか1つと実質的に相補的である配列を含むポリヌクレオチド、
g)a)〜f)のいずれか1つの断片および;
h)a)〜g)のいずれか1つを含むライブラリー
からなる群から選択される少なくとも1つのポリヌクレオチドの使用。
【請求項２０】
骨リモデリングと関連がある状態を診断するためのキットであって、配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つと実質的に相補的である少なくとも1つの配列、配列番号1〜配列番号33、85または86のいずれか1つのオープンリーディングフレーム、およびそれら断片を含むキット。
【請求項２１】
未分化破骨前駆細胞と比較して分化破骨細胞において示差的に発現される単離ポリペプチド配列であって、単離ポリペプチドが、
a)配列番号48〜80のいずれか1つ、
b)配列番号1〜33、配列番号85または86のいずれか1つによってコードされているポリペプチド、
c)a)またはb)のいずれか1つの生物活性断片、
d)a)またはb)のいずれか1つの生物活性類似体
からなる群から選択される配列を含む、単離ポリペプチド配列。
【請求項２２】
前記生物活性類似体が、前記配列中に少なくとも1つのアミノ酸置換を含む、請求項21に記載の単離ポリペプチド。
【請求項２３】
請求項21または22のいずれか一項に記載のポリペプチドおよび薬剤として許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２４】
骨疾患を治療するための医薬品を調製するための、請求項21または22に記載の単離ポリペプチドの使用。
【請求項２５】
それを必要とする個体における骨疾患を治療するための方法であって、配列番号48〜80または配列番号1〜33、配列番号85または86のいずれか1つによってコードされているポリペプチドからなる群から選択されるポリペプチドの活性または発現を妨害することができる化合物を投与するステップを含む方法。
【請求項２６】
前記哺乳動物が、骨粗しょう症、骨減少症、骨軟化症、副甲状腺機能亢進症、甲状腺機能亢進症、性腺機能低下症、甲状腺中毒症、全身性肥満細胞症、成人型低ホスファターゼ症、副腎皮質機能亢進症、骨形成不全症、パジェット病、クッシング病/症候群、チューマー症候群、ゴーシェ病、エーラース-ダンロス症候群、マルファン症候群、メンケス症候群、ファンコニー症候群、多発性骨髄腫、高カルシウム血症、低カルシウム血症、関節炎症、歯周病、くる病、繊維形成不全症骨、ピクノディスオストーシスなどの骨硬化症障害、およびマクロファージ媒介性炎症プロセスによって引き起こされる障害からなる群から選択される状態に罹患している、請求項25に記載の方法。
【請求項２７】
配列番号48〜80または配列番号1〜33、配列番号85または86のいずれか1つによってコードされているポリペプチドからなる群から選択されるポリペプチドの機能または発現を損なうことができる阻害化合物を同定するための方法であって、前記ポリペプチドまたは前記ポリペプチドを発現する細胞を候補化合物と接触させるステップ、および前記ポリペプチドの機能または発現を測定するステップを含み、それにより前記ポリペプチドの機能または活性の低下によって適切な阻害化合物が明確に同定される方法。
【請求項２８】
前記損われる機能または活性が、破骨細胞の分化を促進する前記ポリペプチドの低下した能力と関係がある、請求項27に記載の方法。
【請求項２９】
前記破骨細胞の分化が誘導される、請求項28に記載の方法。
【請求項３０】
前記細胞が前記ポリペプチドを自然に発現しない、また自然に発現されるポリペプチド類似体の発現が抑制される、請求項27または28に記載の方法。
【請求項３１】
外因性型の請求項1から8のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドまたは請求項21もしくは22のいずれか一項に記載のポリペプチドを発現する細胞。
【請求項３２】
骨細胞である、請求項31に記載の細胞。
【請求項３３】
破骨細胞である、請求項32に記載の細胞。
【請求項３４】
a)配列番号48〜80のいずれか1つを含む、またはそれからなるポリペプチド、および
b)配列番号1〜33もしくは配列番号85もしくは86のいずれか1つによってコードされているポリペプチド、または前記ポリペプチドの少なくとも6アミノ酸の断片
からなる群から選択されるポリペプチド配列を含むポリペプチドと特異的に結合することができる、単離または精製抗体およびその抗原結合断片。
【請求項３５】
配列番号85または86のいずれか1つによってコードされているポリペプチド配列を含むポリペプチド、または前記ポリペプチドの少なくとも6アミノ酸の断片と特異的に結合することができる、請求項35に記載の抗体。
【請求項３６】
a)配列番号48〜80のいずれか1つを含む、またはそれからなるポリペプチド、および
b)配列番号1〜33または配列番号85または86のいずれか1つによってコードされているポリペプチド、または前記ポリペプチドの少なくとも6アミノ酸の断片
からなる群から選択されるポリペプチドと特異的に結合することができる抗体を産生するハイブリドーマ細胞。
【請求項３７】
請求項34または35のいずれか一項に記載の抗体を含む組成物。
【請求項３８】
a)配列番号48〜80のいずれか1つを含む、またはそれからなるポリペプチド、および
b)配列番号1〜33もしくは配列番号85もしくは86のいずれか1つによってコードされているポリペプチド、または前記ポリペプチドの少なくとも6アミノ酸の断片
からなる群から選択されるポリペプチドの免疫原性断片で非ヒト動物を免疫処置するステップを含む、抗体を作製する方法。
【請求項３９】
前記ポリペプチドが配列番号85または86のいずれか1つによってコードされている、請求項38に記載の方法。
【請求項４０】
ポリペプチドと特異的に結合する抗体を検出するための、請求項21または22に記載のポリペプチドの使用。
【請求項４１】
請求項21または22に記載の少なくとも1つのポリペプチドと特異的に結合する抗体を検出するためのイムノアッセイであって、
a)哺乳動物由来の生物体液サンプルのサンプルを前記ポリペプチドと接触させるステップ、および
b)前記サンプル中のポリペプチドと抗体の免疫複合体の形成を検出するステップを含むイムノアッセイ。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【公表番号】特表２００９−５２５７３０（Ｐ２００９−５２５７３０Ａ）
【公表日】平成２１年７月１６日（２００９．７．１６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５５３５９２（Ｐ２００８−５５３５９２）
【出願日】平成１９年２月１３日（２００７．２．１３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＣＡ２００７／０００２１０
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０９３０４２
【国際公開日】平成１９年８月２３日（２００７．８．２３）
【出願人】（５０７１９６４９１）アレシア・バイオセラピューティクス・インコーポレーテッド (7)
【Ｆターム（参考）】