黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）抗原の安定な免疫原性組成物

【課題】黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）感染症に対するワクチンだけでなく、特に増強された抗原安定性を有するワクチンの提供。
【解決手段】（ａ）単離した黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）クランピング因子Ａ（ＣｌｆＡ）ポリペプチド、単離した黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）クランピング因子Ｂ（ＣｌｆＢ）ポリペプチド、５型莢膜多糖（ＣＰ５）−タンパク質のコンジュゲート、８型莢膜多糖（ＣＰ８）−タンパク質のコンジュゲート、および単離した黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）ＭｎｔＣポリペプチドからなる群から選択される少なくとも３つの構成要素、（ｂ）６．０±０．６のｐＫａを有する緩衝液、ならびに（ｃ）充填剤を含み、前記ＣｌｆＡポリペプチドが、少なくとも１カ月間、３７℃で実質的に分解されずに保たれる、凍結乾燥した免疫原性組成物。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）単離した黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）クランピング因子Ａ（ＣｌｆＡ）ポリペプチド、単離した黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）クランピング因子Ｂ（ＣｌｆＢ）ポリペプチド、５型莢膜多糖（ＣＰ５）−タンパク質のコンジュゲート、８型莢膜多糖（ＣＰ８）−タンパク質のコンジュゲート、および単離した黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）ＭｎｔＣポリペプチドからなる群から選択される少なくとも３つの構成要素、
（ｂ）６．０±０．６のｐＫａを有する緩衝液、ならびに
（ｃ）充填剤
を含み、前記ＣｌｆＡポリペプチドが、少なくとも１カ月間、３７℃で実質的に分解されずに保たれる、凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項２】
（ａ）単離した黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）クランピング因子Ａ（ＣｌｆＡ）ポリペプチド、
（ｂ）５型莢膜多糖（ＣＰ５）−タンパク質のコンジュゲート、
（ｃ）８型莢膜多糖（ＣＰ８）−タンパク質のコンジュゲート、
（ｄ）６．０±０．６のｐＫａを有する緩衝液、ならびに
（ｅ）充填剤
を含み、前記ＣｌｆＡポリペプチドが、少なくとも１カ月間、３７℃で実質的に分解されずに保たれる、凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項３】
単離した黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）ＭｎｔＣポリペプチドをさらに含む、請求項２に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項４】
単離した黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）クランピング因子Ｂ（ＣｌｆＢ）をさらに含む、請求項２または請求項３に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項５】
ＣｌｆＡポリペプチドがＮドメインを含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項６】
ＣｌｆＡポリペプチドがフィブリノーゲン結合ドメインを含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項７】
フィブリノーゲン結合ドメインが、フィブリノーゲンとＣｌｆＡのネイティブフィブリノーゲン結合ドメインとの観察された結合と比較して低下したレベルでフィブリノーゲンと結合するように変更されている、請求項１から６のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項８】
フィブリノーゲン結合ドメインが、Ｔｙｒ３３８、Ｔｙｒ２５６、Ｐｒｏ３３６、Ｌｙｓ３８９、Ａｌａ２５４およびＩｌｅ３８７のうちの１つまたは複数でのアミノ酸置換を有することによって、フィブリノーゲンとの低下した結合を示す、請求項１から７のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項９】
Ｔｙｒ３３８、Ｔｙｒ２５６、Ｐｒｏ３３６、Ｌｙｓ３８９、Ａｌａ２５４およびＩｌｅ３８７のうちの１つまたは複数でのアミノ酸置換が、ＡｌａまたはＳｅｒへの置換である、請求項８に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項１０】
Ｔｙｒ３３８がＡｌａに置換されている、請求項９に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項１１】
ＣＰ５−タンパク質のコンジュゲートが、ＣＰ５−ＣＲＭ_１９７、ＣＰ５−ニューモリシン、またはＣＰ５−連鎖球菌Ｃ５ａペプチダーゼ（ＳＣＰ）である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項１２】
ＣＰ８−タンパク質のコンジュゲートが、ＣＰ８−ＣＲＭ_１９７、ＣＰ８−ニューモリシン、またはＣＰ８−連鎖球菌Ｃ５ａペプチダーゼ（ＳＣＰ）である、請求項１から１１のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項１３】
免疫原性組成物の全重量の３重量パーセント未満（％ｗ／ｗ）の水を含み、ＣｌｆＡポリペプチドが０．０９％±０．０２７％〜０．８５％±０．２６％ｗ／ｗであり、ＣＰ５−タンパク質のコンジュゲートが０．０４％±０．０１３％〜０．４２±０．１３％ｗ／ｗであり、ＣＰ８−タンパク質のコンジュゲートが０．０４％±０．０１３％〜０．４２±０．１３％ｗ／ｗであり、緩衝液が２．５４％±０．７６％ｗ／ｗである、請求項１から１２のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項１４】
緩衝液がｐＨ６．０±０．５のヒスチジンを含む、請求項１から１３のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項１５】
充填剤が、スクロース、トレハロース、マンニトール、グリシン、およびソルビトールからなる群から選択される、請求項１から１４のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項１６】
充填剤がスクロースである、請求項１５に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項１７】
充填剤が９６％±０．０６０％ｗ／ｗのスクロースである、請求項１６に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項１８】
界面活性剤をさらに含む、請求項１から１７のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項１９】
界面活性剤が、ポロキサマー、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、およびポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルからなる群から選択される、請求項１８に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項２０】
ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルがポリソルベート８０である、請求項１９に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項２１】
ポリソルベート８０が０．２０％±０．０４１％ｗ／ｗである、請求項２０に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項２２】
アジュバントをさらに含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項２３】
アジュバントがＩＳＣＯＭＡＴＲＩＸ（商標）である、請求項２２に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物。
【請求項２４】
請求項１から２３のいずれか一項に記載の凍結乾燥した免疫原性組成物を水性希釈剤で再構成することによって調製される、６．０±０．５の最終ｐＨを有する液体免疫原性組成物。
【請求項２５】
水性希釈剤が水である、請求項２４に記載の液体免疫原性組成物。
【請求項２６】
（ａ）４０μｇ／ｍｌ±４μｇ／ｍｌ〜８００μｇ／ｍｌ±８０μｇ／ｍｌの濃度のＣｌｆＡポリペプチド、
（ｂ）２０μｇ／ｍｌ±２μｇ／ｍｌ〜４００μｇ／ｍｌ±４０μｇ／ｍｌの濃度のＣＰ５−タンパク質のコンジュゲート、
（ｃ）２０μｇ／ｍｌ±２μｇ／ｍｌ〜４００μｇ／ｍｌ±４０μｇ／ｍｌの濃度のＣＰ８−タンパク質のコンジュゲート、
（ｄ）１０ｍＭ±５ｍＭの濃度のヒスチジン緩衝液、
（ｅ）０．１％±０．０５％重量対体積（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート８０、および
（ｆ）９％±４．５％ｗ／ｖの濃度のスクロース
を含む、請求項２４または請求項２５に記載の液体免疫原性組成物。
【請求項２７】
４０μｇ／ｍｌ±４μｇ／ｍｌ〜８００μｇ／ｍｌ±８０μｇ／ｍｌの濃度のＭｎｔＣポリペプチドをさらに含む、請求項２４から２６のいずれか一項に記載の液体免疫原性組成物。
【請求項２８】
４０μｇ／ｍｌ±４μｇ／ｍｌ〜８００μｇ／ｍｌ±８０μｇ／ｍｌの濃度のＣｌｆＢポリペプチドをさらに含む、請求項２４から２７のいずれか一項に記載の液体免疫原性組成物。

【図１】