２−アシルアミノチアゾール誘導体固定化マトリックス、及びその製造方法
【課題】 タンパク質の分析又は精製のためのマトリックスを提供すること。
【解決手段】 タンパク質の分析または精製に有用な、一般式（１）
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基であることを表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｍはマトリックスを表す。）で表されるチアゾール誘導体固定化マトリックスを提供するものである。
【解決手段】 タンパク質の分析または精製に有用な、一般式（１）
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基であることを表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｍはマトリックスを表す。）で表されるチアゾール誘導体固定化マトリックスを提供するものである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、各種タンパク質、特に免疫グロブリンの分析又は精製に利用可能なチアゾール誘導体を結合させたマトリックス、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、医療用タンパク質の需要は拡大しつつあり、その簡便で大規模に実施できる工業的精製技術の確立が切望されている。一般にタンパク質精製技術には、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、およびアフィニティークロマトグラフィーなどのクロマトグラフィー分離技術があるが、医療用タンパク質の精製を工業的に実施する場合には、実験室で用いられるような分離剤や装置を使用したのでは経済性に乏しく、実用的とは言い難い。また、医療用タンパク質を工業的に製造する過程では多種類のタンパク質が混在しているため、上記の中の一つの精製技術を用いて、目的とするタンパク質を純粋に得ることは極めて困難である。そのため通常はいくつかの技術を複合させた精製プロセスが採用されている（特許文献１）。
【０００３】
近年、医療用タンパク質の一つである免疫グロブリンを精製するための低分子化合物とそれらが結合したマトリックスが数多く開示されており、スルホン誘導体（特許文献２）、トリアジン誘導体（特許文献３）、メルカプト複素環式化合物（特許文献４）、４−ピリジルエチルチオアルキル誘導体（非特許文献１）等の低分子化合物が結合したマトリックスが知られている。しかしながら、本発明のマトリックスの製造に用いるチアゾール誘導体（１ａ）が免疫グロブリンを精製するための低分子化合物として有用であると記載した文献はない。また、特許文献５や非特許文献２に本発明のマトリックスの製造に用いるチアゾール誘導体（１ａ）に類似の化学構造を有するチアゾール誘導体が報告されているものの、これらの文献に記載のチアゾール誘導体の化学構造は、チアゾール環の２位がアミノ基あるいはアルキル基に限定されており、本発明のマトリックスの製造に用いるチアゾール誘導体（１ａ）のように２位にアリールカルボニルアミノ基を有する化合物についての記載はない。とりわけ非特許文献２に記載の化合物は、本発明のマトリックスの製造に用いるチアゾール誘導体（１ａ）に類似のチアゾール誘導体ではあるものの、それらの用途はヒスタミンＨ２レセプターアゴニストに限定されており、免疫グロブリンを精製するための用途についての記載はない。
【０００４】
なお、特許文献６にはチアゾール環の２位にベンゾイルアミノ基が置換したチアゾール誘導体が記載されているが、これらの化合物におけるチアゾール環の４位の置換基はカルボニル基、５位は無置換にそれぞれ限定されており、用途も消化管運動改善作用を有する医薬の有効成分である。更には特許文献６の化合物はマトリックスに固定化されたものではなく、免疫グロブリンを精製するための用途についての記載もない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】ＷＯ２００４／０８７７６１号
【特許文献２】米国特許４６９６９８０号
【特許文献３】米国特許６１１７９９６号
【特許文献４】特許第３８４４４９６号
【特許文献５】ＷＯ１９９１／１０６５６号
【特許文献６】ＷＯ１９９８／１７６５４号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｂｉｏｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，９（４），２１１−２２１，２０００
【非特許文献２】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３５（１７），３２３９−３２４６，１９９２
【非特許文献３】化学大辞典、７巻、４７９、共立出版
【非特許文献４】はじめてのリガンドカップリングハンドブック、アマシャムバイオサイエンス社、２００５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明が解決しようとする課題は、タンパク質、特に免疫グロブリンの分析又は精製に有用なチアゾール誘導体を固定化したマトリックス、及びその製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、本発明の下記一般式（１）で示されるチアゾール誘導体固定化マトリックスが、タンパク質、特に免疫グロブリンの簡便な分析又は精製を可能にすることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
即ち本発明は、一般式（１）
【００１０】
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基（−ＯＮＨ−）を表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｍはマトリックスを表す。）で表されるチアゾール誘導体固定化マトリックスに関するものである。
【００１１】
また本発明は、一般式（１）
【００１２】
【化２】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ａｒ、ｎ及びＭは前記と同じ意味を表す。）において、Ｍのマトリックスがビニル重合体、多糖、金属酸化物であることを特徴とするチアゾール誘導体固定化マトリックスに関するものである。
【００１３】
また本発明は、一般式（１ａ）
【００１４】
【化３】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｒ４はヒドロキシ基、ホルミル基、メルカプト基、カルボキシル基又はアミノキシ基（−ＯＮＨ２）を表す。）で示されるチアゾール誘導体と、活性化基含有マトリックスとを反応させることを特徴とする、一般式（１）
【００１５】
【化４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ａｒ、ｎ及びＭは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体固定化マトリックスの製造方法に関するものである。
【００１６】
また本発明は、一般式（１）
【００１７】
【化５】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ａｒ、ｎ及びＭは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体固定化マトリックスを使用し、タンパク質の分析又は精製を行なう方法に関するものである。
【００１８】
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
【００１９】
本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスで用いるチアゾール誘導体における、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａｒで表される置換基の定義を以下に示す。
【００２０】
Ｒ１及びＲ２で表される置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基としては、直鎖状もしくは分枝状のいずれであってもよく、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソアミル基、ネオペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基を例示することができる。また、これらの炭素数１から６のアルキル基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、さらに具体的にはジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、パーフルオロブチル基、ヒドロキシメチル基、カルボキシメチル基、メチルチオメチル基、４−モルホリノカルボニルメチル基等を例示することができる。免疫グロブリンの分析又は精製において良好な性能を示す点で、Ｒ１はメチル基が好ましく、Ｒ２は水素原子が好ましい。
【００２１】
Ａｒで表される芳香族基は特に制限はないが、フラン−２−イル基、フラン−３−イル基、チオフェン−２−イル基、チオフェン−３−イル基、ピロール−２−イル基、ピロール−３−イル基、ピラゾール−３−イル基、ピラゾール−４−イル基、イソチアゾール−３−イル基、イソチアゾール−４−イル基、イソキサゾール−３−イル基、イソキサゾール−４−イル基、イミダゾール−２−イル基、イミダゾール−４−イル基、イミダゾール−５−イル基、オキサゾール−２−イル基、オキサゾール−４−イル基、オキサゾール−５−イル基、チアゾール−２−イル基、チアゾール−４−イル基、チアゾール−５−イル基、１，２，４−トリアゾール−３−イル基、フェニル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基、２−ピリミジル基、４−ピリミジル基、５−ピリミジル基、１，２，４−トリアジン−３−イル基、１，２，４−トリアジン−５−イル基、１，２，４−トリアジン−６−イル基、ベンゾジオキソラン−３−イル基、ベンゾフラン−２−イル基、ベンゾフラン−３−イル基、ベンゾフラン−４−イル基、ベンゾフラン−５−イル基、ベンゾフラン−６−イル基、ベンゾフラン−７−イル基、ベンゾチオフェン−２−イル基、ベンゾチオフェン−３−イル基、ベンゾチオフェン−４−イル基、ベンゾチオフェン−５−イル基、ベンゾチオフェン−６−イル基、ベンゾチオフェン−７−イル基、インドール−２−イル基、インドール−３−イル基、インドール−４−イル基、インドール−５−イル基、インドール−６−イル基、インドール−７−イル基、ベンゾチアゾール−２−イル基、ベンゾチアゾール−４−イル基、ベンゾチアゾール−５−イル基、ベンゾチアゾール−６−イル基、ベンゾチアゾール−７−イル基、インダゾール−３−イル基、インダゾール−４−イル基、インダゾール−５−イル基、インダゾール−６−イル基、インダゾール−７−イル基、ベンズイソキサゾール−３−イル基、ベンズイソキサゾール−４−イル基、ベンズイソキサゾール−５−イル基、ベンズイソキサゾール−６−イル基、ベンズイソキサゾール−７−イル基、ナフタレン−１−イル基、ナフタレン−２−イル基、キノリン−２−イル基、キノリン−３−イル基、キノリン−４−イル基、キノリン−５−イル基、キノリン−６−イル基、キノリン−７−イル基、キノリン−８−イル基、キノキサリニル基、キノキサリン−５−イル基、キノキサリン−６−イル基、キナゾリニル基、キナゾリン−４−イル基、キナゾリン−５−イル基、キナゾリン−６−イル基、キナゾリン−７−イル基、キナゾリン−８−イル基、ベンゾオキサジン−５−イル基、ベンゾオキサジン−６−イル基、ベンゾオキサジン−７−イル基、ベンゾオキサジン−８−イル基、ベンゾチアジン−５−イル基、ベンゾチアジン−６−イル基、ベンゾチアジン−７−イル基、ベンゾチアジン−８−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−６−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−７−イル基、アントラセン−１−イル基を例示できる。特に、免疫グロブリンの分析又は精製において良好な性能を示す点で、Ａｒはフェニル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基又はフラン−２−イル基が好ましい。
【００２２】
Ａｒで表される置換されていてもよい芳香族基の置換基としては特に制限はないが、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、ヒドロキシ基又はシアノ基が好ましい。
【００２３】
Ａｒの置換基としてのハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を例示することができる。
【００２４】
Ａｒの置換基としての炭素数１から６のアルキル基としては、直鎖状、分枝状もしくは環状のいずれであってもよく、メチル基、エチル基、シクロプロピル基、プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソアミル基、ネオペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、２−メチルブチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基を例示することができる。また、これらのアルキル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、アシル基、置換されていてもよい芳香族基で１個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチル基、３−クロロプロピル基、ジフルオロメチル基、３−フルオロプロピル基、メトキシメチル基、２−エトキシエチル基、シクロプロピルメチル基、シクロペンチルメチル基、シクロヘキシルメチル基、２−メチルチオエチル基、２−エチルチオエチル基、２−アリルチオエチル基、２−プロパルギルチオエチル基、２−ベンジルチオエチル基、２−（２−クロロベンジル）チオエチル基、２−（２，４−ジクロロベンジル）チオエチル基、２−メチルスルフィニルエチル基、２−メチルスルホニルエチル基、メトキシメチル基、エトキシメチル基、２−メトキシエチル基、２−クロロエトキシメチル基、メトキシカルボニルメチル基、エトキシカルボニルメチル基、１−メトキシカルボニルエチル基、１−エトキシカルボニルエチル基、２−エトキシカルボニルエチル基、カルボキシメチル基、アセトニル基、１−アセチルエチル基、３−アセチルプロピル基、フェナシル基、４−クロロフェナシル基、２，４−ジフルオロフェナシル基、４−メチルフェナシル基、４−イソプロピルフェナシル基、４−イソブチルフェナシル基、４−シクロヘキシルフェナシル基、４−シアノフェナシル基、４−ニトロフェナシル基、チオフェン−２−イル基、２−（チオフェン−２−イル）エチル基、２−（チオフェン−３−イル）エチル基、フルフリル基、（５−メチルフラン−２−イル）メチル基、（５−エチルフラン−２−イル）メチル基、（５−クロロフラン−２−イル）メチル基、２−（５−フルオロフラン−２−イル）エチル基、テトラヒドロフルフリル基、２−ピリジルメチル基、３−ピリジルメチル基、４−ピリジルメチル基、２−（ピリジン−２−イル）エチル基、２−（ピリジン−３−イル）エチル基、２−（ピリジン−４−イル）エチル基、３−（ピリジン−２−イル）プロピル基、３−（ピリジン−３−イル）プロピル基、３−（ピリジン−４−イル）プロピル基を例示することができる。
【００２５】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基としては、直鎖状もしくは分枝状のいずれであってもよく、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブトキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ−ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソアミルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、２−ペンチルオキシ基、３−ペンチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシルオキシ基、デセニルオキシ基を例示することができる。また、これらのアルコキシ基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、アシル基、置換されていてもよい芳香族基等で１個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエトキシ基、３−クロロプロピルオキシ基、ジフルオロメトキシ基、４−トリフルオロメトキシ基、３−フルオロプロピルオキシ基、シクロプロピルメトキシ基、シクロペンチルメトキシ基、シクロヘキシルメトキシ基、２−メチルチオエトキシ基、２−エチルチオエトキシ基、２−アリルチオエトキシ基、２−プロパルギルチオエトキシ基、２−ベンジルチオエトキシ基、２−（２−クロロベンジル）チオエトキシ基、２−（２，４−ジクロロベンジル）チオエトキシ基、２−メチルスルフィニルエトキシ基、２−メチルスルホニルエトキシ基、メトキシメトキシ基、エトキシメトキシ基、２−メトキシエトキシ基、２−クロロエトキシメトキシ基、メトキシカルボニルメトキシ基、エトキシカルボニルメトキシ基、１−メトキシカルボニルエトキシ基、１−エトキシカルボニルエトキシ基、２−エトキシカルボニルエトキシ基、カルボキシメトキシ基、１−アセチルエトキシ基、３−アセチルプロポキシ基、２−ピリジルメトキシ基、３−ピリジルメトキシ基、４−ピリジルメトキシ基、２−（ピリジン−２−イル）エトキシ基、２−（ピリジン−３−イル）エトキシ基、２−（ピリジン−４−イル）エトキシ基、３−（ピリジン−２−イル）プロポキシ基、３−（ピリジン−３−イル）プロポキシ基、ベンジルオキシ基を例示することができる。
【００２６】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基としては、シクロプロピルオキシ基、シクロブチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、２−メチルシクロブチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、２−メチルシクロペンチルオキシ基、３−メチルシクロペンチルオキシ基、４−メチルシクロペンチルオキシ基、シクロオクチルオキシ基を例示することができる。
【００２７】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基としては、アリルオキシ基、２−メチル−２−プロペニルオキシ基、２−ブテニルオキシ基、１−ブテン−３−イルオキシ基、３−ブテニルオキシ基、４−ペンテニルオキシ基、５−ヘキセニルオキシ基を例示することができる。これらのアルケニルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、３，３−ジフルオロアリルオキシ基、３，３−ジクロロアリルオキシ基、３，３−ジブロモアリルオキシ基を例示することができる。
【００２８】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基としては、プロパルギルオキシ基、１−ブチン−３−イルオキシ基、２−ブチニルオキシ基、３−ブチニルオキシ基、２−ペンチニルオキシ基、３−ペンチニルオキシ基、４−ペンチニルオキシ基、２−ヘキシニルオキシ基、３−ヘキシニルオキシ基、４−ヘキシニルオキシ基、５−ヘキシニルオキシ基を例示することができ、これらのアルキニルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、４，４，４−トリフルオロブチン−２−イル基等を例示することができる。
【００２９】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基としては、アセトキシ基、プロピオニルオキシ基を例示することができ、これらのアシルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、トリフルオロアセトキシ基や２，２，２−トリフルオロプロピオニルオキシ基等を例示することができる。
【００３０】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基としては、メチルチオ基、エチルチオ基、プロピルチオ基、イソプロピルチオ基、ブチルチオ基、イソブチルチオ基、ｓｅｃ−ブチルチオ基、ペンチルチオ基、イソアミルチオ基、ネオペンチルチオ基、２−ペンチルチオ基、３−ペンチルチオ基、２−メチルブチルチオ基、ヘキシルチオ基、イソヘキシルチオ基、３−メチルペンチルチオ基、２−メチルペンチルチオ基を例示することができる。また、これらのアルキルチオ基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルチオ基、３−クロロプロピルチオ基、ジフルオロメチルチオ基、３−フルオロプロピルチオ基、シクロプロピルメチルチオ基、シクロペンチルメチルチオ基、シクロヘキシルメチルチオ基を例示することができる。
【００３１】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基としては、メチルスルフィニル基、エチルスルフィニル基、プロピルスルフィニル基、イソプロピルスルフィニル基、ブチルスルフィニル基、イソブチルスルフィニル基、ｓｅｃ−ブチルスルフィニル基、ペンチルスルフィニル基、イソアミルスルフィニル基、ネオペンチルスルフィニル基、２−ペンチルスルフィニル基、３−ペンチルスルフィニル基、２−メチルブチルスルフィニル基、ヘキシルスルフィニル基、イソヘキシルスルフィニル基、３−メチルペンチルスルフィニル基、２−メチルペンチルスルフィニル基を例示することができる。また、これらのアルキルスルフィニル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルスルフィニル基、３−クロロプロピルスルフィニル基、ジフルオロメチルスルフィニル基、３−フルオロプロピルスルフィニル基、シクロプロピルメチルスルフィニル基、シクロペンチルメチルスルフィニル基、シクロヘキシルメチルスルフィニル基を例示することができる。
【００３２】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基としては、メチルスルホニル基、エチルスルホニル基、プロピルスルホニル基、イソプロピルスルホニル基、ブチルスルホニル基、イソブチルスルホニル基、ｓｅｃ−ブチルスルホニル基、ペンチルスルホニル基、イソアミルスルホニル基、ネオペンチルスルホニル基、２−ペンチルスルホニル基、３−ペンチルスルホニル基、２−メチルブチルスルホニル基、ヘキシルスルホニル基、イソヘキシルスルホニル基、３−メチルペンチルスルホニル基、２−メチルペンチルスルホニル基を例示することができる。また、これらのアルキルスルホニル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルスルホニル基、３−クロロプロピルスルホニル基、ジフルオロメチルスルホニル基、３−フルオロプロピルスルホニル基、シクロプロピルメチルスルホニル基、シクロペンチルメチルスルホニル基、シクロヘキシルメチルスルホニル基を例示することができる。
【００３３】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基としては、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、ヘキシルオキシカルボニル基、ドデシルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を例示することができ、これらのアルコキシカルボニル基はハロゲン原子等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的にはトリフルオロメトキシカルボニル基、２，２，２−トリフルオロエトキシカルボニル基等を例示することができる。
【００３４】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよいアミノ基としては、アミノ基、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、ジエチルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−プロピルアミノ基、２，２，２−トリフルオロエチルアミノ基、ジプロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−イソプロピルアミノ基、ブチルアミノ基、Ｎ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、イソブチルアミノ基、ｓｅｃ−ブチルアミノ基、ペンチルアミノ基、イソアミルアミノ基、ネオペンチルアミノ基、２−ペンチルアミノ基、３−ペンチルアミノ基、２−メチルブチルアミノ基、ヘキシルアミノ基、イソヘキシルアミノ基、４−メチルペンチルアミノ基、ベンゼンスルホニルアミノ基、Ｎ−ベンゼンスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、ｐ−トルエンスルホニルアミノ基、４−クロロベンゼンスルホニルアミノ基、４−ニトロベンゼンスルホニルアミノ基、メチルスルホニルアミノ基、クロロメチルスルホニルアミノ基、トリフルオロメチルスルホニルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−エチルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−プロピルアミノ基、エチルスルホニルアミノ基、Ｎ−エチルスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−エチルスルホニル−Ｎ−エチルアミノ基、メトキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基を例示することができる。
【００３５】
Ａｒで表される置換されていてもよい芳香族基の具体例として、フラン−２−イル基、５−ブロモフラン−２−イル基、５−メチルフラン−２−イル基、フラン−３−イル基、チオフェン−２−イル基、５−クロロチオフェン−２−イル基、５−ブロモチオフェン−２−イル基、５−メチルチオフェン−２−イル基、５−メトキシチオフェン−２−イル基、５−エトキシチオフェン−２−イル基、チオフェン−３−イル基、５−メチルチオフェン−３−イル基、５−メトキシチオフェン−３−イル基、５−エトキシチオフェン−３−イル基、１−メチルピロール−２−イル基、１−メチルピロール−３−イル基、１−エチルピラゾール−３−イル基、ピラゾール−２−イル基、３−エトキシ−１−メチルピラゾール−２−イル基、１−エチル−４−メトキシピラゾール−３−イル基、イソチアゾール−３−イル基、５−メトキシイソチアゾール−３−イル基、イソチアゾール−４−イル基、イソキサゾール−３−イル基、イソキサゾール−４−イル基、１−メチルイミダゾール−２−イル基、１−メチルイミダゾール−４−イル基、１−メチルイミダゾール−５−イル基、オキサゾール−２−イル基、オキサゾール−４−イル基、オキサゾール−５−イル基、チアゾール−２−イル基、３−メトキシチアゾール−２−イル基、４−メトキシチアゾール−２−イル基、チアゾール−４−イル基、チアゾール−５−イル基、１，２，４−トリアゾール−３−イル基、１，２，４−トリアゾール−５−イル基、フェニル基、２−フルオロフェニル基、３−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、２，３−ジフルオロフェニル基、３，５−ジフルオロフェニル基、３，４，５−トリフルオロフェニル基、２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル基、３−フルオロ−４−メチルフェニル基、４−トリフルオロメトキシフェニル基、２−クロロフェニル基、３−クロロフェニル基、４−クロロフェニル基、４−クロロ−３−メチルフェニル基、４−クロロ−３−エチルフェニル基、４−クロロ−３−メトキシフェニル基、４−クロロ−３−エトキシフェニル基、２，３−ジクロロフェニル基、３，５−ジクロロフェニル基、３，４，５−トリクロロフェニル基、３−トリフルオロメチルフェニル基、４−トリフルオロメチルフェニル基、３−ブロモフェニル基、４−ブロモフェニル基、４−ブロモ−３−メチルフェニル基、４−ブロモ−３−エチルフェニル基、４−ブロモ−３−メトキシフェニル基、４−ブロモ−３−エトキシフェニル基、３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル基、３−ヨードフェニル基、４−ヨードフェニル基、４−ヨード−３−メチルフェニル基、４−ヨード−３−エチルフェニル基、４−ヨード−３−メトキシフェニル基、４−ヨード−３−エトキシフェニル基、２−メチルフェニル基、３−メチルフェニル基、４−メチルフェニル基、３，４−ジメチルフェニル基、３，４，５−トリメチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル基、２−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、３−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、４−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、４−メトキシメチルフェニル基、３，４−ジエトキシフェニル基、３−エチル−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、３，４−ジエチルフェニル基、４−プロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、３−ブチルフェニル基、４−ブチルフェニル基、４−イソブチルフェニル基、４−（ｓｅｃ−ブチル）フェニル基、４−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル基、４−ペンチルフェニル基、４−イソアミルフェニル基、４−ネオペンチルフェニル基、４−（２−ペンチル）フェニル基、４−（３−ペンチル）フェニル基、４−（２−メチルブチル）フェニル基、４−（ｔｅｒｔ−ペンチル）フェニル基、４−ヘキシルフェニル基、４−イソヘキシルフェニル基、４−（２−クロロエチル）フェニル基、４−（３−クロロプロピル）フェニル基、４−（ジフルオロメチル）フェニル基、４−（３−フルオロプロピル）フェニル基、４−メトキシメチルフェニル基、４−エトキシメチルフェニル基、４−シクロプロピルメチルフェニル基、４−シクロペンチルメチルフェニル基、シクロヘキシルメチルフェニル基、４−（２−メチルチオエチル）フェニル基、４−（２−エチルチオエチル）フェニル基、４−（２−アリルチオエチル）フェニル基、４−（２−プロパルギルチオエチル）フェニル基、４−（２−ベンジルチオエチル）フェニル基、３−メトキシフェニル基、３−メトキシ−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メトキシフェニル基、３−メトキシ−４−プロピルフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−メトキシ−３−メトキシフェニル基、３，４−ジメトキシフェニル基、３−エトキシ−４−メトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メトキシフェニル基、４−イソプロピルオキシ−３−メトキシフェニル基、３−イソプロピルオキシ−４−メトキシフェニル基、３−エトキシフェニル基、４−エトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メチルフェニル基、４−エトキシ−３−エチルフェニル基、４−エトキシ−３−プロピルフェニル基、４−エトキシ−３−イソプロピルフェニル基、４−プロピルオキシフェニル基、４−イソプロピルオキシフェニル基、４−ブトキシフェニル基、４−イソブチルオキシフェニル基、４−（ｓｅｃ−ブチルオキシ）フェニル基、３−（２−クロロエトキシ）フェニル基、３−（２−クロロエトキシ）フェニル基、４−（２−クロロエトキシ）フェニル基、３−（３−クロロプロピルオキシ）フェニル基、４−（３−クロロプロピルオキシ）フェニル基、３−ジフルオロメトキシフェニル基、４−ジフルオロメトキシフェニル基、４−（３−フルオロプロピルオキシ）フェニル基、４−シクロプロピルメトキシフェニル基、４−シクロペンチルメトキシ基、４−シクロヘキシルメトキシ基、３−シクロプロピルオキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシ−３−メトキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシ−３−メチルフェニル基、４−シクロブチルオキシフェニル基、４−シクロペンチルオキシフェニル基、４−（２−メチルシクロブチルオキシ）フェニル基、４−シクロヘキシルオキシフェニル、４−アリルオキシフェニル基、４−（３，３−ジクロロアリルオキシ）フェニル基、４−プロパルギルオキシフェニル基、３−メチル−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−エチル−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−メトキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−エトキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−プロポキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、４−（１−ブチン−３−イルオキシ）フェニル基、４−（２−ブチニルオキシ）フェニル基、３−メチルチオフェニル基、４−メチルチオフェニル基、４−メチル−３−メチルチオフェニル基、３−メチル−４−メチルチオフェニル基、４−メトキシ−３−メチルチオフェニル基、３−エトキシ−４−メチルチオフェニル基、４−エトキシ−３−メチルチオフェニル基、３−プロポキシ−４−メチルチオフェニル基、４−エチルチオフェニル基、３−プロピルチオフェニル基、４−イソプロピルチオフェニル基、４−ブチルチオフェニル基、４−イソブチルチオフェニル基、２−（ｓｅｃ−ブチルチオ）フェニル基、２−ペンチルチオフェニル基、２−イソアミルチオフェニル基、４−ネオペンチルチオフェニル基、４−（２−クロロエチルチオ）フェニル基、３−（３−クロロプロピルチオ）フェニル基、ジフルオロメチルチオフェニル基、３−アセトキシフェニル基、４−アセトキシフェニル基、３−メチルスルフィニルフェニル基、４−メチルスルフィニルフェニル基、４−メトキシ−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−メトキシ−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−エトキシ−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−エトキシ−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−メチル−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−エチル−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−（２−クロロエチルスルフィニル）フェニル基、４−（３−クロロプロピルスルフィニル）フェニル基、４−（ジフルオロメチルスルフィニル）フェニル基、３−メチルスルホニルフェニル基、４−メチルスルホニルフェニル基、４−メチル−３−メチルスルホニルフェニル基、４−エチル−３−メチルスルホニルフェニル基、４−メトキシ−３−メチルスルホニルフェニル基、４−エトキシ−３−メチルスルホニルフェニル基、３−メトキシ−４−メチルスルホニルフェニル基、３−エトキシ−４−メチルスルホニルフェニル基、エチルスルホニルフェニル基、プロピルスルホニルフェニル基、イソプロピルスルホニルフェニル基、ブチルスルホニルフェニル基、２−クロロエチルスルホニルフェニル基、３−クロロプロピルスルホニルフェニル基、ジフルオロメチルスルホニルフェニル基、４−カルボキシフェニル基、４−メトキシカルボニルフェニル基、４−エトキシカルボニルフェニル基、３−メチルアミノフェニル基、４−メチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−メチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−メチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−メチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−メチルアミノフェニル基、４−メチル−３−メチルアミノフェニル基、３−メチル−４−メチルアミノフェニル基、４−エチル−３−メチルアミノフェニル基、３−エチル−４−メチルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノフェニル基、４−ジメチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−ジメチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−ジメチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−ジメチルアミノフェニル基、４−メチル−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジメチルアミノフェニル基、４−エチル−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジメチルアミノフェニル基、３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−メトキシ−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メトキシ−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−エトキシ−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−エトキシ−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−メチル−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メチル−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−エチル−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メチル−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−ジエチルアミノフェニル基、４−ジエチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−ジエチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−ジエチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−ジエチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−ジエチルアミノフェニル基、４−メチル−３−ジエチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジエチルアミノフェニル基、４−エチル−３−ジエチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジエチルアミノフェニル基、４−メチルスルホニルアミノフェニル基、４−トリフルオロメチルスルホニルアミノフェニル基、４−アセチルアミノフェニル基、２−ヒドロキシフェニル基、３−ヒドロキシフェニル基、４−ヒドロキシフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−エチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル基、４−ヒドロキシ−３−メチルフェニル基、４−ヒドロキシ−３−エチルフェニル基、４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル基、２−シアノフェニル基、３−シアノフェニル基、４−シアノフェニル基、２−ニトロフェニル基、３−ニトロフェニル基、３−ニトロ−４−メチルフェニル基、４−ニトロフェニル基、ピリジン−２−イル基、５−クロロピリジン−２−イル基、５−メチルピリジン−２−イル基、５−エチルピリジン−２−イル基、５−メトキシピリジン−２−イル基、５−エトキシピリジン−２−イル基、２，３−ジメチルピリジン−６−イル基、２，３−ジメトキシピリジン−６−イル基、ピ
リジル−３−イル基、２−クロロピリジン−５−イル基、２−メチルピリジン−５−イル基、２−エチルピリジン−５−イル基、２−メトキシピリジン−５−イル基、２−エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、ピリジル−４−イル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、２−ピリミジル基、５−メチルピリミジン−２−イル基、５−エチルピリミジン−２−イル基、２−エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、５−クロロピリミジン−２−イル基、５−ブロモピリミジン−２−イル基、５−メトキシピリミジン−２−イル基、ピリミジル−４−イル基、ピリミジル−５−イル基、１，２，４−トリアジン−３−イル基、１，２，４−トリアジン−５−イル基、１，２，４−トリアジン−６−イル基、ベンゾジオキソラン−３−イル基、ベンゾフラン−２−イル基、ベンゾフラン−３−イル基、ベンゾフラン−４−イル基、ベンゾフラン−５−イル基、ベンゾフラン−６−イル基、ベンゾフラン−７−イル基、ベンゾチオフェン−２−イル基、ベンゾチオフェン−３−イル基、ベンゾチオフェン−４−イル基、ベンゾチオフェン−５−イル基、ベンゾチオフェン−６−イル基、ベンゾチオフェン−７−イル基、１−メチルインドール−２−イル基、ベンゾチアゾール−２−イル基、ベンゾチアゾール−４−イル基、ベンゾチアゾール−５−イル基、ベンゾチアゾール−６−イル基、ベンゾチアゾール−７−イル基、ベンズイソキサゾール−３−イル基、ベンズイソキサゾール４−イル基、ベンズイソキサゾール−５−イル基、ベンズイソキサゾール−６−イル基、ベンズイソキサゾール−７−イル基、ナフタレン−１−イル基、ナフタレン−２−イル基、キノリン−２−イル基、キノリン−３−イル基、キノリン−４−イル基、キノリン−５−イル基、キノリン−６−イル基、キノリン−７−イル基、キノリン−８−イル基、キノキサリン−５−イル基、キノキサリン−６−イル基、キナゾリン−４−イル基、キナゾリン−５−イル基、キナゾリン−６−イル基、キナゾリン−７−イル基、キナゾリン−８−イル基、ベンゾオキサジン−５−イル基、ベンゾオキサジン−６−イル基、ベンゾオキサジン−７−イル基、ベンゾオキサジン−８−イル基、ベンゾチアジン−５−イル基、ベンゾチアジン−６−イル基、ベンゾチアジン−７−イル基、ベンゾチアジン−８−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル基、アントラセン−１−イル基等があげられる。
【００３６】
免疫グロブリンの分析又は精製において良好な性能を示す点で、Ａｒは４−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、３，４−ジメチルフェニル基、３−エチル−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メチルフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−エトキシフェニル基、３，４−ジメトキシフェニル基、３，４−ジエトキシフェニル基、３−エトキシ−４−メトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メトキシフェニル基、４−メトキシ−３−メチルフェニル基、４−メチル−３−エトキシフェニル基、４−ジメチルアミノフェニル基、２−メトキシピリジン−５−イル基、２−エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、４−ピリジル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、２−クロロピリジン−５−イル基が好ましい。
【００３７】
Ｍで表されるマトリックスの材質としては特に限定はなく、一般式（１ａ）に示すチアゾール誘導体と共有結合を形成するものであればよい。該チアゾール誘導体は二価の官能基であるメチレン鎖とＲ３とを介した共有結合によってマトリックスに固定化される。チアゾール誘導体固定化マトリックスの性能として、タンパク質を含む溶液から分析や精製の対象となるタンパク質を選択的に吸着し、簡単な処理によって該吸着タンパク質を脱離できるものが好ましく選択される。
【００３８】
マトリックスの形態としては、前記タンパク質を含む溶液に対して不溶性のゲルが好ましく、前記ゲルであれば粒状物または非粒状物、多孔性または非多孔性、いずれの性質であってもよい。本発明におけるＭで表されるマトリックスは有機高分子化合物、無機化合物、又はそれらの複合体の中から適宜選択することができる。なお、前記ゲルは前記タンパク質を含む溶液に懸濁させて用いてもよいし、またカラム管に充填後、前記タンパク質を含む溶液を通液して用いてもよい。
【００３９】
有機高分子化合物のゲルとしては、天然高分子であっても合成高分子であってもよい。天然高分子としては、架橋結合アルブミン等のポリペプチドまたはタンパク質、アガロース、アルギネート、カラゲナン、キチン、セルロース、デキストリン、デキストランまたは澱粉等の多糖及びそれらの架橋体があげられる。一方、合成高分子としては、ビニルポリマー、ポリエステル、ポリアミド、ポリエーテルまたはポリウレタン及びそれらの共重合体を例示でき、これらの架橋体を用いてもよい。また、前記重合体の側鎖を反応させたものも、後述する活性化基含有マトリックスとして用いることができる。
【００４０】
なお本発明において、ビニルポリマーとは非特許文献３に記載のとおり、ビニルモノマーやビニリデンモノマーの単独重合体、または、それらの共重合体である。前記モノマーとしては、アクリル酸またはメタクリル酸及びそれらのアミド、エステル、アクロレイン、メタクロレイン、各種カルボン酸のビニルエステル、スチレン等があげられる。メタクリル酸のエステルとしては、メタクリル酸−２−ヒドロキシエチルが例示できる。
【００４１】
また、天然高分子に合成高分子や天然高分子をグラフト重合したもの、合成高分子に合成高分子や天然高分子をグラフト重合としたもの、無機化合物から有機モノマーの重合鎖を伸ばしたものであっても、本発明におけるＭで表されるマトリックスに含まれる。
【００４２】
無機化合物のゲルとしては、シリカ、アルミナ、ジルコニアまたは酸化鉄といった金属酸化物、ガラス、多孔質珪藻土等が例示される。また、前記無機化合物にカップリング剤で処理したものも、後述する活性化基含有マトリックスとして用いることができる。前記カップリング剤としては、活性化基又はその前駆体となる官能基を有するシランカップリング剤、アルミネートカップリング剤、チタネートカップリング剤等があげられる。
【００４３】
本発明におけるＭで表されるマトリックスとしては、操作の容易さや回収率の高さの観点から、アガロース、キトサン、デキストランまたはセルロース等の多糖類、ポリスチレンやトヨパール（商品名）（東ソー株式会社製）等のビニルポリマー及びそれらの架橋体、シリカ等の無機化合物が好ましい。
【００４４】
なお、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスは、タンパク質を含む溶液から特定のタンパク質を吸着した後、分離ができれば、液状であってもよい。例えば、水性二相分配法で使用されるデキストラン、ポリエチレングリコ−ル、ポリビニルアルコール若しくは加水分解澱粉といった水溶性の高分子を包含するマトリックス、又はエマルジョンを形成するのに使用されるペルフルオロデカリン等の化合物を包含するマトリックスがあげられる。
【００４５】
本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスにおいて、チアゾール環とＭとは、一般式（４）に示すように、メチレン基がｎであり、二価の原子あるいは二価の基Ｒ３を介して共有結合している。
【００４６】
Ｍ−Ｒ３−（ＣＨ２）ｎ−（チアゾール環） （４）
ｎについては、１から１２の整数から適宜選択することができるが、抗体の捕捉能が高く夾雑タンパクとの選択性がよい点で、３、４、５又は６が好ましい。
【００４７】
Ｒ３の構造は、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスの製法に依存する。本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスは、一般式（１ａ）に示すチアゾール誘導体の反応性官能基Ｒ４をマトリックスの活性化基と反応させることによって製造される。ここで、Ｒ４は、ヒドロキシ基、ホルミル基、メルカプト基、カルボキシル基又はアミノキシ基（−ＯＮＨ２）からなる群より選択される。
【００４８】
次に、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスの製造方法を詳細に説明する。
【００４９】
【化６】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａｒ、Ｍ及びｎは前記と同じ意味を表す。）
ここで言う活性化基とは、一般式（１ａ）のＲ４で定義されるヒドロキシ基、ホルミル基、メルカプト基、カルボキシル基又はアミノキシ基（−ＯＮＨ２）を必要に応じて塩基や還元剤の存在下に反応させた時に容易に共有結合を形成できる官能基のことで、例えば、スクシンイミドオキシカルボニル基、１−メチルピリジニウム−２−オキシカルボニル基、ホルミル基、カルボキシル基、２，２，２−トリフルオロエチルスルホニルオキシ基（トレシル基）、スルホニル基、トシル基、ビニルスルホニル基、エポキシ基、アミノ基、ジチオ−２−ピリジル基、ヒドラジノ基をあげることができる。中でも導入の容易さの観点から、スクシンイミドオキシカルボニル基、エポキシ基、ホルミル基、アミノ基、ジチオ−２−ピリジル基、ヒドラジノ基、カルボキシル基が好ましい。チアゾール誘導体の固定化反応及び固定化反応によって形成されるＲ３を一般式（５）から（１２）に例示する。これらの式において、Ｍ’は活性化基をもつマトリックスのうちの活性化基以外の部分を指し、Ｒは式（１ａ）のＲ４以外の部分を指す。
【００５０】
【化７】
【００５１】
【化８】
【００５２】
【化９】
【００５３】
【化１０】
【００５４】
【化１１】
【００５５】
【化１２】
【００５６】
【化１３】
【００５７】
【化１４】
また、コハク酸ジヒドラジド、ピメルイミド酸ジメチル、ジビニルスルホン、カルボニルジイミダゾール等の２官能性試薬を用いてマトリックスの活性化基の種類を変換することもできる。
【００５８】
活性化基含有マトリックスにチアゾール誘導体（１ａ）を固定化して導いたチアゾール誘導体固定化マトリックス（１）は、タンパク質（特に免疫グロブリン）、またはこれらの類縁体、フラグメント、融合体の精製に用いることかできる。特に、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックス（１）は、免疫グロブリンのうち、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）の分析や精製に有用である。
【００５９】
次に、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスを用いてタンパク質を分析、分離、または単離、精製する方法について説明する。
【００６０】
本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスをカラム管に充填し、溶離液として緩衝液、金属塩の水溶液、アミノ酸溶液、アルコール溶液等の溶液を通液することで、タンパク質の分析、分離、単離又は精製を行なうことができる。この方法が適用できるタンパク質としては、血漿タンパク質成分や乳タンパク質成分をあげることができ、天然に存在するものでは血漿中の免疫グロブリン、血清アルブミン、血液凝固因子、ラクトアルブミン、ラクトフェリンを例示できる。またペプチドホルモン、インターフェロン、インターロイキン、成長因子、成長抑制因子、ワクチンも例示できる。特に本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスは、免疫グロブリンの精製に好ましい。通液する緩衝液としては、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、Ｔｒｉｓ、ＰＩＰＥＳ、ＡＣＥＳ、ＢＥＳ、ＭＯＰＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＥＳを例示でき、金属塩としては硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、硫酸リチウム、硫酸マグネシウム、硫酸アンモニウム、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウムを例示でき、アミノ酸としてはグリシン、アルギニン、ベータアラニン、ガンマアミノ酪酸を例示でき、アルコールとしてはエタノール、イソプロピルアルコール、グリセロール、エチレングリコールを例示できる。また、これらを混合したものを溶離液として用いることもできる。ｐＨは３から１１の範囲内で目的とするタンパク質を分析、分離、単離又は精製することができるが、特に５から９の範囲内で精製することが好ましい。また、ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）等のクロマトグラフィー装置を使用して、タンパク質を分析、分離、単離又は精製することもできる。チアゾール誘導体固定化マトリックスを用いて免疫グロブリン若しくはこれらの類縁体、フラグメント、融合体を分析又は精製する場合は、硫酸ナトリウムや硫酸アンモニウムを含むリン酸緩衝液を通液し、ｐＨは５から９の範囲で、疎水性相互作用を利用したクロマトグラフィーを行なうのが好ましい。ここでいう免疫グロブリンの類縁体とは、免疫グロブリンの構造や機能が少なくとも部分的に保持された天然若しくは人工的に作られたタンパク質又はタンパク質コンジュゲートを指し、免疫グロブリンのフラグメントとは、酵素的な処理又は遺伝子工学的な設計によって作製された免疫グロブリンの部分構造を持ったタンパク質を指し、免疫グロブリンの融合体とは、各種サイトカイン又はサイトカイン受容体等の生物活性をもったタンパク質の機能部分を免疫グロブリンの全部又は一部と遺伝子工学的に融合させて作製したものを指す。
【００６１】
本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスは、水酸化ナトリウム水溶液、水酸化カリウム水溶液等のアルカリ性水溶液、塩酸水溶液、硫酸水溶液、硝酸水溶液、リン酸水溶液等の酸性水溶液、塩酸グアニジン水溶液、尿素水溶液等のタンパク変性剤水溶液、アルギニンやヒスチジン等のアミノ酸を含んだ水溶液、ＳＤＳ、Ｔｗｅｅｎ等の界面活性剤水溶液、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセロール、エチレングリコール等のアルコール溶液、又は、これらを含んだ混合水溶液を用いて洗浄することによって、初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用することができる。
【００６２】
次に、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスの製造に用いるチアゾール誘導体の製造方法を詳細に説明する。
【００６３】
製造方法１
【００６４】
【化１５】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｒ３ａはフタルイミドオキシ基、アセトキシ基、カルボキシル基又はアルコキシチオカルボニルチオ基を表し、Ｙはハロゲン原子を表す。）
製造方法１はα−ハロケトン体（２）をアシルチオウレア誘導体（３）と反応させ、チアゾール誘導体（１ａ’）を製造する方法である。本反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができる。溶媒としてはジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、１，２−ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド類、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、水又はこれらの混合溶媒が例示でき、中でも収率がよい点で、ＤＭＦを用いるのが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができ、収率がよい点で６０℃から１５０℃の範囲で反応させるのが好ましい。本工程では、塩基存在下に行なうこともでき、塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、トリエチルアミン、トリブチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、ジメチルアニリン等の有機アミン類を用いることができる。塩基の使用量は特に制限はないが、反応基質に対して１当量以上用いて反応を実施することにより、収率よく目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィー又は再結晶等の方法により精製することもできる。
【００６５】
製造方法２
【００６６】
【化１６】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）
製造方法２はチアゾール誘導体（１ａａ）を水存在下にてヘキサカルボニルモリブテンで処理し、５−ヒドロキシアルキルチアゾール誘導体（１ａｂ）を製造する方法である。水及びヘキサカルボニルモリブテンの使用量は反応基質（１ａａ）に対して１当量以上用いて反応を実施することにより、収率よく目的物（１ａｂ）を得ることができる。本反応は溶媒中で行なうのが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができる。溶媒としてはジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド系溶媒、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール系溶媒、ＤＭＳＯ、又はこれらの混合溶媒が例示でき、中でも収率がよい点や後処理が簡便である点でアセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類溶媒を用いることが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィー又は再結晶等の方法により精製することもできる。
【００６７】
製造方法３
【００６８】
【化１７】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｒ５は炭素数１から６のアルキル基を表す。）
製造方法３はチアゾール誘導体（１ａｃ）を塩基で処理し、５−メルカプトアルキルチアゾール誘導体（１ａｄ）を製造する方法である。本反応で用いることができる塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、メチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン等の有機アミン類又はアンモニアを用いることができる。塩基の使用量に特に制限はないものの、反応基質（１ａｃ）に対して１当量以上用いて反応を実施することにより、収率よく目的物（１ａｄ）を得ることができる。本反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができる。溶媒としてはジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド類、ＤＭＳＯ、水又はこれらの混合溶媒が例示でき、中でも収率がよい点で、ＤＭＦを用いるのが好ましい。また、塩基としてアンモニアを用い、使用する溶媒として水とエタノールの混合溶媒を用いて実施しても収率がよい点で好ましい。また、反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができ、収率がよい点で０℃から１００℃の範囲で反応させることが好ましい。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィー又は再結晶等の方法により精製することもできる。
【００６９】
製造方法４
【００７０】
【化１８】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）
製造方法４は５−ヒドロキシアルキルチアゾール誘導体（１ａｂ）のヒドロキシ基を酸化し、５−ホルミルアルキルチアゾール誘導体（１ａｅ）を製造する方法である。本反応は一般的な酸化反応を行なうことによって容易に目的物を得ることができ、酸化剤としては、ピリジニウムクロロクロマート、ピリジニウムジクロロクロマート、二酸化マンガン、過マンガン酸カリウム等があげられる。また、Ｓｗｅｒｎ酸化、Ｃｏｒｅｙ−Ｋｉｍ酸化、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ酸化、向山酸化、Ｏｐｐｅｎａｕｅｒ酸化、ＴＥＭＰＯ酸化、パラジウム錯体を用いた酸素酸化等の酸化反応によっても容易に目的物を得ることができるが、収率がよい点でＳｗｅｒｎ酸化を用いることが好ましい。本反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができる。溶媒としてはジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒、ジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド類、ＤＭＳＯ、水又はこれらの混合溶媒が例示でき、中でも収率がよい点で、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒を用いるのが好ましい。反応温度については特に制限はないが、−７８℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィー又は再結晶等により精製することもできる。
【００７１】
製造方法５
【００７２】
【化１９】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）
製造方法５はチアゾール誘導体（１ａａ）を塩基で処理し、５−アミノキシアルキルチアゾール誘導体（１ａａａ）を製造する方法である。塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、メチルアミン、エチルアミン、ジメチルアミン等の有機アミン類、ヒドラジン類を用いることができ、収率がよい点でヒドラジン又はメチルアミンが好ましい。塩基の使用量は反応基質（１ａａ）に対して２当量以上用いて反応を実施することにより、収率よく目的物（１ａａａ）を得ることができる。本反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができる。溶媒としてはジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド系溶媒、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール系溶媒、ＤＭＳＯ、水又はこれらの混合溶媒が例示でき、中でも収率がよい点や後処理が簡便である点で、メタノールやエタノール等のアルコール系溶媒を用いることが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィー又は再結晶等の方法により精製することもできる。
【発明の効果】
【００７３】
本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスは、タンパク質、特に免疫グロブリンの分析および精製に有用な耐久性に富む選択的な吸脱着剤となることから医療用タンパク質、特に免疫グロブリンの工業的な精製において極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００７４】
【図１】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物７５の結果）。
【図２】チアゾール誘導体固定化ビニルポリマーゲルを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物９５の結果）。
【図３】チアゾール誘導体固定化ビニルポリマーゲルを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物１１０の結果）。
【実施例】
【００７５】
以下、実施例及び参考例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明がこれらに限定されるものではない。
【００７６】
参考例１ チアゾール誘導体の合成
（合成例１）
【００７７】
【化２０】
Ｎ−［（５−オキソヘキサン−１−イル）オキシ］フタルイミド（１．０ｇ，３．８３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液に臭化銅（ＩＩ）（１．７１ｇ，７．６６ｍｍｏｌ）を加え、２時間加熱還流した。反応液をセライト濾過により固体を瀘別し、濾液の溶媒を減圧留去して油状物を得た。得られた油状物をＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶解し、３，４−ジメトキシベンゾイルチオウレア（０．９２ｇ，３．８３ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で８時間反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去して得られた粗生成物に１Ｍ塩酸（３０ｍＬ）と酢酸エチル（３０ｍＬ）を加え固体を析出させた。固体を瀘別し、酢酸エチルとエーテルによって充分洗浄し、灰色固体の３，４−ジメトキシ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．５７ｇ，３１％）を得た。
ｍ．ｐ．２１１℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．１０（ｍ，２Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），４．０４（ｓ，３Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７６から７．８８（ｍ，５Ｈ），７．９９（ｄｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００７８】
（合成例２）
合成例１と同様にして、３−フルオロ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドを合成した。
灰色固体、４６％；ｍ．ｐ．１３５から１３７℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０４（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｄ，ＪＨＦ＝１．８Ｈｚ，３Ｈ），２．９９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｄｄ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ １０Ｈｚ，１Ｈ）．７．７３から７．８８（ｍ，６Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００７９】
（合成例３）
合成例１と同様にして、２−クロロ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
白色固体、３９％；ｍ．ｐ．１７５から１７８℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．９７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３２から７．４９（ｍ，３Ｈ），７．７３から７．８７（ｍ，５Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８０】
（合成例４）
合成例１と同様にして、３−クロロ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
淡黄色固体、５３％；ｍ．ｐ．１４７から１５５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．９９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５０から７．５５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７２から７．９９（ｍ，６Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８１】
（合成例５）
合成例１と同様にして、Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］−４−ヨードベンズアミドを合成した。
淡黄色固体，２９％；ｍ．ｐ．１９２から２００℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．９９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７４から７．７７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８２から７．８７（ｍ，４Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８２】
（合成例６）
合成例１と同様にして、Ｎ−［４−メチル−５−｛７−（フタルイミドオキシ）ヘプチル｝チアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドを合成した。
黄色固体、５８％；ｍ．ｐ．９５から９９℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．３５から１．４４（ｍ，４Ｈ），１．４４から１．５７（ｍ，２Ｈ），１．５７から１．７０（ｍ，２Ｈ），１．７４から１．８４（ｍ，２Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．６５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．１７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７２から７．８５（ｍ，６Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８３】
（合成例７）
合成例１と同様にして、４−シクロプロピル−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
茶色固体；ｍ．ｐ．１８１から１８２℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ０．７８から０．８５（ｍ，２Ｈ），１．０７から１．１４（ｍ，２Ｈ），１．９４から２．０１（ｍ，１Ｈ），２．０５から２．１５（ｍ，２Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７４から７．８８（ｍ，４Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８４】
（合成例８）
合成例１と同様にして、４−エトキシ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１５１から１５４℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４６（ｔ，３Ｈ），２．１０（ｍ，２Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），３．１２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．１３（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７６から７．８８（ｍ，４Ｈ），８．２７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８５】
（合成例９）
合成例１と同様にして、３−エトキシ−４−メトキシ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．８１から８８℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），２．０６から２．１７（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），４．１３（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９２（ｄ，１Ｈ），７．４４から７．５０（ｍ，２Ｈ），７．７３から７．８７（ｍ，４Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８６】
（合成例１０）
合成例１と同様にして、４−メチル−３−メトキシ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１２５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３から２．１８（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄｄ，Ｊ＝２．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．７３から７．８７（ｍ，４Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８７】
（合成例１１）
合成例１と同様にして、Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ナフタレン−１−カルボキサミドを合成した。
黄色固体、６．３％；ｍ．ｐ．１５０から１５２℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８３（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．９３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４３から７．６２（ｍ，３Ｈ），７．７３から７．８１（ｍ，３Ｈ），７．８３から７．９１（ｍ，３Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝２．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．４４（ｄｄ，Ｊ＝２．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８８】
（合成例１２）
合成例１と同様にして、Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］チオフェン−２−カルボキサミドを合成した。
灰色固体、４２％；ｍ．ｐ．１５３から１５５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），３．１１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７５から７．８０（ｍ，３Ｈ），７．８３から７．８９（ｍ，２Ｈ），８．４９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８９】
（合成例１３）
合成例１と同様にして、Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］フラン−２−カルボキサミドを合成した。
灰色固体、３１％；ｍ．ｐ．２２０から２２３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），３．１１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．６２から６．６７（ｍ，１Ｈ），７．７３から７．８０（ｍ，４Ｈ），７．８３から７．８９（ｍ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００９０】
（合成例１４）
【００９１】
【化２１】
３，４−ジメトキシ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．４７ｇ，０．９８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（７．８ｍＬ）と水（０．８ｍＬ）の混合溶液に、ヘキサカルボニルモリブデン（０．２６ｇ，０．９８ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（２．０５ｍＬ，１４．７ｍｍｏｌ）を加え、２時間加熱還流した。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（１００ｍＬ）を加え酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３００ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製することで、白色固体のＮ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−３，４−ジメトキシ−ベンズアミド（０．２１ｇ，６３％）を得た。
白色固体；ｍ．ｐ．１３１℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８４から１．９４（ｍ，２Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ， ２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），６．９０（ｄｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５０から７．５３（ｍ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９２】
（合成例１５）
合成例１４と同様にして、３−フルオロ−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシフタルイミドプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチルベンズアミドを合成した。
白色固体、５９％；ｍ．ｐ．１４２から１５０℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｄ，ＪＨＦ＝１．８Ｈｚ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２２（ｄｄ，Ｊ＝１０ ａｎｄ １０Ｈｚ，１Ｈ），７．５７から７．６１（ｍ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９３】
（合成例１６）
合成例１４と同様にして、２−クロロ−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
黄色粘張性、４６％；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８２（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．７７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３４から７．４７（ｍ，３Ｈ），７．７８（ｄｄ，Ｊ＝１．８ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９４】
（合成例１７）
合成例１４と同様にして、３−クロロ−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシフタルイミドプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体、５４％；ｍ．ｐ．１１４から１１７℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８１（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３９（ｄｄ，Ｊ＝８．０ ａｎｄ ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝１．８， １．８ ａｎｄ ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．８， １．８ ａｎｄ ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９３（ｄｄ，Ｊ＝１．８ ａｎｄ １．８Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９５】
（合成例１８）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−ヨードベンズアミドを合成した。
黄色粘稠性、５５％；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８６（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９６】
（合成例１９）
合成例１４と同様にして、４−シクロプロピル−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１１８℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ０．７４から０．８１（ｍ，２Ｈ），１．０３から１．１１（ｍ，２Ｈ），１．８４から１．９７（ｍ，３Ｈ），２．１１（ｓ，３Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．１５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９７】
（合成例２０）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（７−ヒドロキシヘプチル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチルベンズアミドを合成した。
白色固体、３２％；ｍ．ｐ．１３５から１４５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．００から１．３９（ｍ，６Ｈ），１．５０から１．６７（ｍ，４Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．６５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９８】
（合成例２１）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−３−メトキシ−４−メチルベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１２４から１２７℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８２から１．９２（ｍ，５Ｈ），２．２５（ｓ，３Ｈ），２．７７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９９】
（合成例２２）
合成例１４と同様にして、４−エトキシ−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１４９から１５３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．８３から１．９４（ｍ，２Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．０９（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１００】
（合成例２３）
合成例１４と同様にして、３−エトキシ−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メトキシベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１４３から１４４℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），１．８３から１．９４（ｍ，２Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝６．２５Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），４．０３（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０１】
（合成例２４）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシフタルイミドプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ナフタレン−２−カルボキサミドを合成した。
黄色粘張性、６２％；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．７４（ｓ，３Ｈ），１．８１（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４３から７．６１（ｍ，３Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝１．０ ａｎｄ ７．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８６から７．９１（ｍ，１Ｈ），７．９９（ｄｄ，Ｊ＝１．０ ａｎｄ ７．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４４から８．４９（ｍ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０２】
（合成例２５）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝チオフェン−２−カルボキサミドを合成した。
黄色粘稠性、２１％；ｍ．ｐ．１４２から１５０℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．１０から７．１４（ｍ，１Ｈ），７．５７から７．６２（ｍ，１Ｈ），７．７３から７．７５（ｍ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０３】
（合成例２６）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝フラン−２−カルボキサミドを合成した。
黄色粘稠性、１３％；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．５７から６．５９（ｍ，１Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝１．０ ａｎｄ ３．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５５から７．６０（ｍ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０４】
（合成例２７） Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチル−Ｎ−メチルベンズアミドの合成
【０１０５】
【化２２】
Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチル−Ｎ−メチルベンズアミド（３００ｍｇ，１．０３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ヨウ化メチル（１７６ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（１７１ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間反応させた。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（２０ｍＬ）を加え酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製することで、白色固体のＮ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチル−Ｎ−メチルベンズアミド（４６ｍｇ，１５％）を得た。
白色固体；ｍ．ｐ．１６４から１６６℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．７７から１．８８（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ），２．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。ヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０６】
（合成例２８）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−アセトキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチルベンズアミドを合成した。
茶褐色油状：１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．９０から２．０１（ｍ，２Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．０９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１０７】
（合成例２９） ２，４−ジフルオロ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミドの合成
【０１０８】
【化２３】
［５−｛３−（アセトキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］−２，４−ジフルオロベンズアミド（５１２ｍｇ，１．４４ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（５９７ｍｇ，４．３２ｍｍｏｌ）を加え、３０分加熱還流した。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（２０ｍＬ）を加え酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製することで、黄色固体の２，４−ジフルオロ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミド（９４ｍｇ，２１％）を得た。
黄色油状；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８４から１．９３（ｍ，２Ｈ），２．２５（ｓ，３Ｈ），２．８３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９１から７．１０（ｍ，２Ｈ），８．１２から８．２２（ｍ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０９】
（合成例３０）
合成例１４と同様にして、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−ヨードベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートを合成した。
黄色粘稠性、３５％；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．３９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．９８（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６１（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１１０】
（合成例３１）
合成例１４と同様にして、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−ブロモベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートを合成した。
黄色固体、５３％；ｍ．ｐ．７６から８０℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．３９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．９８（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６１（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１１１】
（合成例３２）
合成例１４と同様にして、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（２，４−ジフルオロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートを合成した。
褐色油状物；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：１．４２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．９９から２．１０（ｍ，２Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），２．８４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９２から７．００（ｍ，１Ｈ），７．０１から７．１２（ｍ，１Ｈ），８．１９から８．２９（ｍ，１Ｈ），９．６９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。
【０１１２】
（合成例３３）
合成例１４と同様にして、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−エトキシベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートを合成した。
褐色油状物；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．３９から１．４８（ｍ，６Ｈ），１．９８から２．０９（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．１０（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１１３】
（合成例３４）
合成例１４と同様にして、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（３−エトキシ−４−メトキシベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートを合成した。
褐色粘稠性；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４２から１．５１（ｍ，６Ｈ），２．０１から２．１２（ｍ，２Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），４．１１（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄｄ，Ｊ＝２．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１１４】
（合成例３５） Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−クロロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートの合成
【０１１５】
【化２４】
Ｏ−エチル−Ｓ−３−（２−アミノ−４−メチルチアゾール−５−イル）プロピルジチオカーボネート（０．７０ｇ，２．５３ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液に氷冷下４−クロロベンゾイルクロリド（０．４２ｍＬ，３．２９ ｍｍｏｌ）を滴下した。次いでトリエチルアミン（０．５ｍＬ，７．９８ｍｍｏｌ）のクロロホルム（５ｍＬ）溶液を加え、一晩反応させた。反応終了後、反応混合物を１Ｍ塩酸（２０ｍＬ）で２回洗浄し、飽和食塩水（２０ｍＬ）で２回洗浄して、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製し、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−クロロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートの白色固体（０．３２９ｇ，３１％）を得た。
白色固体；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．９９から２．０５（ｍ，５Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１１．１８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。
【０１１６】
（合成例３６） Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−メチルベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートの合成
【０１１７】
【化２５】
Ｏ−エチル−Ｓ−５−オキシヘキシルチオカーボネート（２．０ｇ，９．０８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に臭化銅（ＩＩ）（３．８５ｇ，１７．３ｍｍｏｌ）を加え１時間加熱還流したところ白色の沈澱物が生成した。沈澱物をろ過し、ろ液をエバポレーターで減圧濃縮し、黄色の油状物を得た。この油状物にエタノール（５０ｍＬ）とＮ−４−メチルベンゾイルチオウレア（１．７６ｇ，９．０８ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で８時間反応させた。反応終了後、沈澱物をろ過し、クロロホルム（２０ｍＬ）とエタノール（２０ｍＬ）の混合溶媒で洗浄した。ろ液を合わせて減圧留去し、得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製し、褐色油状のＯ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−メチルベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルチオカーボネート（０．４３６ｇ，１２％）を得た。
褐色油状物；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：１．４２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），２．０１から２．０９（ｍ，５Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１１８】
（合成例３７） Ｓ−３−（２−アミノ−４−メチルチアゾール５−イル）−Ｏ−エチルプロピルジチオカーボネートの合成
【０１１９】
【化２６】
Ｏ−エチル−Ｓ−５−オキシヘキシルチオカーボネート（４．０ｇ，１８．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液に臭化銅（ＩＩ）（７．７０ｇ，３４．６ｍｍｏｌ）を加え１．５時間加熱還流したところ白色の沈澱物が生成した。沈澱物をろ過し、ろ液をエバポレーターで減圧濃縮し、黄色の油状物を得た。この油状物にエタノール（４０ｍＬ）とチオウレア（１．３８ｇ，１８．２ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で８時間反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去し，反応混合物に１Ｍ塩酸（３０ｍＬ）を加え酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製し、得られた白色固体を少量の酢酸エチル／エタノールの混合溶媒で洗浄することによって、白色固体のＯ−エチル−Ｓ−３−（２−アミノ−４−メチルチアゾール−５−イル）プロピルジチオカーボネート（１．５６ｇ，３１％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．８２から２．０２（ｍ，２Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），２．６８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），８．６５（ｂｒ ｓ，２Ｈ）。
【０１２０】
（合成例３８） ４−クロロ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの合成
【０１２１】
【化２７】
Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−クロロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネート（０．０８ｇ，０．２４１ｍｍｏｌ）のエタノール（１ｍＬ）溶液に２８％アンモニア水（０．８ｍＬ）を加え常温で一晩反応させた。反応終了後、４Ｍ塩酸（１０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製し、４−クロロ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（０．０４３ｇ，５５％）を得た。
白色固体；ｍ．ｐ．１８０から１８３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：１．９９から２．０５（ｍ，５Ｈ），２．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１０．８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。メルカプト基のプロトンは帰属できなかった。
【０１２２】
（合成例３９）
合成例３８と同様にして、２，４−ジフルオロ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
褐色固体；ｍ．ｐ．１５１から１５５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．９８から２．１４（ｍ，２Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．７２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９１から７．００（ｍ，１Ｈ），７．０３から７．１１（ｍ，１Ｈ），８．１５から８．２７（ｍ，１Ｈ），９．８８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。メルカプト基のプロトンは帰属できなかった。
【０１２３】
（合成例４０）
合成例３８と同様にして、４−エトキシ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
褐色固体；ｍ．ｐ．１８０から１８３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），２．０７から２．１４（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．０９（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドとメルカプト基のプロトンは帰属できなかった。
【０１２４】
（合成例４１）
合成例３８と同様にして、３−エトキシ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メトキシベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．８９から９４℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．９９から２．１０（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），４．１２（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｄｄ，Ｊ＝１．０ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ），１０．１（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。メルカプト基のプロトンは帰属できなかった。
【０１２５】
（合成例４２） Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドの合成
【０１２６】
【化２８】
Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−メチルベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネート（０．４１６ｇ，１．０５ｍｍｏｌ）のエタノール（４ｍＬ）溶液に２８％アンモニア水（１ｍＬ）を加え常温で一晩反応させた。反応終了後、４Ｍ塩酸（１０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製し、Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドの白色固体（０．１４３ｇ，４５％）を得た。
白色固体；ｍ．ｐ．１８０から１８３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．９６から２．１４（ｍ，５Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１０．２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。メルカプト基のプロトンは帰属できなかった。
【０１２７】
（合成例４３） ４−ヨード−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの合成
【０１２８】
【化２９】
Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−ヨードベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネート（０．２５ｇ，０．４９ｍｍｏｌ）のエタノール（２ｍＬ）懸濁液に２８％アンモニア水（１ｍＬ）を加え、室温で一晩撹拌した。反応終了後、反応液に１Ｎ塩酸（１０ｍＬ）と酢酸エチル（１０ｍＬ）を加えて抽出し、有機層を水（１０ｍＬ）で洗浄した。得られた有機層に硫酸マグネシウムを加えて乾燥させた後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、４−ヨード−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの淡黄色固体（７１％，０．１６ｇ）を得た。
ｍ．ｐ．１３０から１４０℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．９９（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．６７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）。メルカプト基のプロトンとアミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１２９】
（合成例４４） ４−ブロモ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの合成
【０１３０】
【化３０】
Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−ブロモベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネート（０．３０ｇ，０．６５ｍｍｏｌ）のエタノール（２ｍＬ）懸濁液に２８％アンモニア水（１ｍＬ）を加え、室温で一晩撹拌した。反応終了後、反応液に１Ｎ塩酸（１０ｍＬ）と酢酸エチル（１０ｍＬ）を加えて抽出し、有機層を水（１０ｍＬ）で洗浄した。得られた有機層に硫酸マグネシウムを加えて乾燥させた後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、４−ブロモ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（６０％，０．１５ｇ）を得た。
ｍ．ｐ．９９から１０５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．９６（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），２．６７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）。メルカプト基のプロトンとアミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１３１】
（合成例４５） ４−シクロプロピル−Ｎ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝−Ｎ−メチルチオメチルベンズアミドの合成
【０１３２】
【化３１】
二塩化オキサリル（４１６ｍｇ，３．２８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５ｍＬ）溶液にＤＭＳＯ（１７６ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５ｍＬ）溶液を加え、−７８℃で３０分間撹拌した後、４−シクロプロピル−Ｎ−｛４−メチル−５−（３−ヒドロキシプロピル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド（８２８ｍｇ，２．６２ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２０ｍＬ）溶液を滴下した。３０分間撹拌した後に、トリエチルアミンを（１．４６ｇ，１４．４ｍｍｏｌ）を加えて−７８℃で３時間反応させた。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（４０ｍＬ）を加え、クロロホルム（１０ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製することで、黄色油状の４−シクロプロピル−Ｎ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド（２５１ｍｇ，３９％）と黄色油状の４−シクロプロピル−Ｎ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝−Ｎ−メチルチオメチルベンズアミド（３８６ｍｇ，３０％）を得た。
【０１３３】
４−シクロプロピル−Ｎ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド；黄色油状；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ０．７４から０．８０（ｍ，２Ｈ），１．０１から１．０８（ｍ，２Ｈ），１．９１から１．９８（ｍ，４Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．１１（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），９．８２（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１３４】
４−シクロプロピル−Ｎ−メチルチオメチル−Ｎ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド；黄色油状：１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ０．７２から０．７８（ｍ，２Ｈ），１．００から１．０８（ｍ，２Ｈ），１．８８から１．９６（ｍ，１Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），９．８１（ｓ，１Ｈ）。
【０１３５】
（合成例４６）
合成例４５と同様にして、４−メトキシ−３−エトキシ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
黄色油状；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４６（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，３Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），４．０８（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｓ，１Ｈ），９．８３（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１３６】
（合成例４７）
合成例４５と同様にして、４−メトキシ−３−エトキシ−Ｎ−メチルチオメチル−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１０３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），４．１１（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），５．２６（ｓ，２Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．１１から７．１８（ｍ，２Ｈ），９．８１（ｓ，１Ｈ）。
【０１３７】
（合成例４８）
合成例４５と同様にして、４−エトキシ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
黄色固体；ｍ．ｐ．１１０から１１４℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．００（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．１０（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），９．８２（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１３８】
（合成例４９）
合成例４５と同様にして、４−メチル−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１３３から１３５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０５（ｓ，３Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），９．８３（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１３９】
（合成例５０）
合成例４５と同様にして、４−メチル−Ｎ−メチルチオメチル−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．９３から９９℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．１４（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），７．２５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），９．８１（ｓ，１Ｈ）。
【０１４０】
（合成例５１） Ｎ−［５−（３−アミノキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドの合成
【０１４１】
【化３２】
Ｎ−［５−（３−フタルイミドオキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］４−メチルベンズアミド（１．７０ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）のエタノール（２０ｍＬ）溶液に、ヒドラジン一水和物（０．４５ｍＬ、８９．９ｍｍｏｌ）を室温にて加え、一晩撹拌した。反応終了後、反応溶液を減圧留去し、得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製；アミノプロピルシリカゲルを使用）で精製し、Ｎ−［５−（３−アミノキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドの淡黄色油状物（０．９７５ｇ，収率：８２％）を得た。
淡黄色油状物；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８４から１．９９（ｍ，２Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．７６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），５．２８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１０．１（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。
【０１４２】
（合成例５２） ８−（２−トルイルアミノ−４−メチルチアゾール−５−イル）オクテン酸の合成
【０１４３】
【化３３】
１０−オキソウンデカン酸（１．０ｇ，４．９９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に臭化銅（ＩＩ）（２．２３ｇ，９．９８ｍｍｏｌ）を加え、３時間加熱還流したところ白色の沈澱物が生成した。沈澱物をろ過し、ろ液をエバポレーターで減圧濃縮し、黄色の油状物を得た。この油状物にＤＭＦ（２０ｍＬ）と４−メチルベンゾイルチオウレア（０．７７５ｇ，３．９９ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で１２時間反応させた。反応終了後反応混合物に１Ｍ塩酸（１００ｍＬ）を加え酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて水（２００ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去し、固体を析出させた。得られた固体をエーテルで洗浄することによって、白色固体の８−［２−（４−メチルベンゾイル）アミノ−４−メチルチアゾール−５−イル］オクテン酸（０．２８５ｇ，１５％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．３０から１．３８（ｍ，６Ｈ），１．５８から１．６４（ｍ，４Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．６７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとカルボン酸のプロトンは帰属できなかった。
【０１４４】
（合成例５３）
合成例１４と同様にして、Ｎ−［５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドを合成した。
灰色固体；ｍ．ｐ．１０３から１０５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：１．８３から１．９５（ｍ，２Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１４５】
前述の合成方法に準じて、表１から１０に記載のチアゾール誘導体を得た。
【０１４６】
【化３４】
【０１４７】
【表１】
【０１４８】
【表２】
【０１４９】
【表３】
【０１５０】
【表４】
【０１５１】
【表５】
【０１５２】
【表６】
【０１５３】
【表７】
【０１５４】
【表８】
【０１５５】
【表９】
【０１５６】
【表１０】
以下の実施例では、本発明のチアゾール誘導体を活性化基含有マトリックスに固定化し、免疫グロブリンの分析又は精製を行なった。なお、化合物番号は表１から１０記載の化合物番号に対応する。
【０１５７】
固定化されたチアゾール誘導体量は、固定化反応に用いた溶液中のチアゾール誘導体量と固定化反応後に回収された溶液（洗浄液を含み、以下、回収液という）中のチアゾール誘導体量を測定し、比較することで算出した。チアゾール誘導体の濃度は、Ｕ−２９００スペクトロフォトメーター（商品名）（日立製作所製）を用いて前記誘導体の紫外吸収極大波長における吸光度を測定して（以下、吸光度法という）、又は高速液体クロマトグラフィーを用いて前記誘導体の紫外吸収クロマトグラムにおけるピーク面積を測定して（以下、ＨＰＬＣ法という）求めた。ＨＰＬＣ法では、カラムとしてＴＳＫ−ＧＥＬ ＯＤＳ−８０ＴＭ（商品名）（東ソー社製）を用い、溶離液としてアセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸＝４５／５５／０．０５（体積比）（以下、単に溶離液という）を用いた。
【０１５８】
実施例１ 化合物７５のアガロースゲルへの固定化（その１）
Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（以下、ＮＨＳという）で活性化されたアガロースゲルであるＨｉＴｒａｐ ＮＨＳ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ ＨＰカラム（１ｍＬ）（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製、スクシンイミドオキシカルボニル基含量：１０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）、以下、ＨｉＴｒａｐカラムという）を活性化基含有マトリックス充填カラムとして用いた。
【０１５９】
ＨｉＴｒａｐカラムに、まず氷冷した１ｍＭ ＨＣｌを５ｍＬ通液した。コハク酸ジヒドラジドを１００ｍＭになるように０．５Ｍ ＮａＣｌを含む０．２Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．３）に溶解し、その２ｍＬをＨｉＴｒａｐカラムに通液した。１時間静置後、１０ｍＬの０．５Ｍ ＮａＣｌを含む０．２Ｍ 炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．３）を通液した。次に純水１０ｍＬを通液した後、ＤＭＳＯを５ｍＬ通液した。次いで、化合物７５を１０ｍＭになるようにＤＭＳＯに溶解し、その２ｍＬを通液した。２時間静置後、３ｍＬのＤＭＳＯを通液した。次にピリジン−ボランのＤＭＳＯ溶液（２０ｍＭ）２ｍＬを通液し、１４時間静置した後、５ｍＬのＤＭＳＯを通液した。最後にカラムに純水１０ｍＬを通液することで、化合物７５を固定化したゲルを得た。
【０１６０】
化合物７５の固定化量は、カラムに添加した化合物７５の量（２０μｍｏｌ）からカラムから回収された化合物７５の量を減ずることより算出した。吸光度法（検出波長３０６ｎｍ）によって測定した化合物７５の固定化量は７．３μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１６１】
実施例２ 化合物７５を固定化したアガロースゲルを用いた免疫グロブリンの吸脱着
実施例１に記載の方法にて調製した、化合物７５を固定化したＨｉＴｒａｐカラムを、クロマトグラフィー装置であるＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）に取り付け、０．７Ｍ硫酸ナトリウムを含む１０ｍＭリン酸ナトリウム−１０ｍＭクエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）（以下、緩衝液Ａという）を流速１ｍＬ／ｍｉｎで通液してカラムを平衡化した。次に緩衝液Ａに溶解した１ｍｇ／ｍＬヒト血漿由来免疫グロブリン製剤（化血研製）０．５ｍＬをカラムに添加して、緩衝液Ａを１０ｍＬ通液後、緩衝液Ａから１０ｍＭリン酸ナトリウム−１０ｍＭクエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）への硫酸ナトリウムの濃度勾配クロマトグラフィーを行なった。
【０１６２】
カラムから溶出された免疫グロブリンの検出は、２８０ｎｍにおける吸光度を測定することにより行なった。溶出液は１ｍＬずつ分画し、Ｕ−２９００スペクトロフォトメーター（商品名）（日立製作所製）により各フラクションの２８０ｎｍにおける吸光度を測定し、それらを合算した値をカラムに添加した免疫グロブリンの２８０ｎｍにおける吸光度と比較することにより回収率を算出した。クロマトグラフィーの結果を図１に示す。このクロマトグラフィーにおける免疫グロブリンの回収率は１００％であった。
【０１６３】
吸脱着操作後、０．１Ｍ水酸化ナトリウムを１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。化合物７５を固定化したＨｉＴｒａｐカラムは前記再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【０１６４】
実施例３ 化合物７５のビニルポリマーゲルへの固定化
ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ａｍｉｎｏ−６５０Ｍ（商品名）（東ソー社製、アミノ基含量：８９μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物７５の固定化を行なった。
【０１６５】
０．１Ｍ Ｎ−シクロヘキシル−２−アミノエタンスルホン酸（以下、ＣＨＥＳという）−ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ９．０）とアセトニトリルとの混合溶媒（体積比１：１）に化合物７５を２２ｍＭになるよう溶解し、この溶液９．０ｍＬとＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ａｍｉｎｏ−６５０Ｍゲル２．０ｍＬを混合して振とうした。３０分振とう後、ピリジン−ボランを０．１１ｍＬ（１．１ｍｍｏｌ）添加し、更に２５℃で１６時間振とうし、吸引濾過で固定化反応後のゲルを濾別した。濾別したゲルを５ｍＬのアセトニトリルで５回洗浄することにより、化合物７５を固定化したゲルを得た。なお、この濾液と洗浄液とをあわせたものを回収液とした。
【０１６６】
別途、ピリジン−ボランと化合物７５とを含む溶液を溶離液で希釈し、ＨＰＬＣ法で分析したところ、化合物７５は還元されて化合物６７となっていた。このことに留意して、反応液をＨＰＬＣ法（検出波長３００ｎｍ）で分析した。その結果、回収液中に化合物６７が９０μｍｏｌ存在することが分かった。すなわち、固定化反応によって消費された化合物７５は１０８μｍｏｌであり、化合物７５の固定化量は５４μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１６７】
実施例４ 化合物７５のアガロースゲルへの固定化（その２）
ＥＡＨ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製、アミノ基含量：１２μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物７５の固定化を行なった。
【０１６８】
ＥＡＨ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂゲル３．２ｍＬに、実施例３と同じ組成からなる化合物７５の溶液を５ｍＬ加え、更にピリジン−ボランを０．２９ｍＬ（２．９ｍｍｏｌ）加えた後、２５℃で８時間振とうした。固定化反応後のゲルを吸引濾過で濾別し、そのゲルを５ｍＬのアセトニトリルで５回洗浄することで、化合物７５を固定化したゲルを得た。
【０１６９】
濾液及び洗浄液をあわせた回収液を実施例３と同じ方法で分析した結果、化合物７５の固定化量は２７μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１７０】
実施例５ 化合物９５のビニルポリマーゲルへの固定化
ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｅｐｏｘｙ−６５０Ｍ（商品名）（東ソー社製、エポキシ基含量：５０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物９５の固定化を行なった。
【０１７１】
化合物９５（５０．６ｍｇ）にＤＭＳＯ（５．５ｍＬ）、蒸留水（４．１８ｍＬ）、１Ｍ ＮａＯＨ水溶液（１．３２ｍＬ）を添加して、化合物９５を１５ｍＭ含有する溶液を調製した。この溶液１０ｍＬとＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｅｐｏｘｙ−６５０Ｍゲル３ｍＬを遠沈管中で混合し、４０℃で７０時間振とうした。反応後、遠沈管を１分間遠心（１００×ｇ）し、ゲルと上清を分離した。上清を除いた後、ゲルに１０ｍＬのＤＭＳＯを添加し撹拌混合後、１分間遠心（１００×ｇ）し、ゲルと上清を分離することでゲルの洗浄を行ない、前記操作を３回行なった。反応液上清と洗浄液を混合し、ＤＭＳＯにより４０ｍＬにメスアップしたものを回収液とした。ＤＭＳＯで洗浄した後のゲルに蒸留水（３０ｍＬ）を添加し撹拌混合後、１分間遠心（１００×ｇ）し、ゲルと上清を分離後、上清を吸引除去した。前記操作を５回行ない、化合物９５を固定化したゲルを得た。
【０１７２】
吸光度法（検出波長３４８ｎｍ）によって測定した化合物９５の固定化量は３０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１７３】
実施例６ 化合物９５を固定化したビニルポリマーゲルを用いた免疫グロブリンの吸脱着
実施例５に記載の方法にて調製した、化合物９５を固定化したＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｅｐｏｘｙ−６５０Ｍゲル１ｍＬをＴＲＩＣＯＲＮカラム（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）に充填し、ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）に取り付け、実施例２と同様、０．５ｍｇのヒト血漿由来免疫グロブリン製剤を硫酸ナトリウム濃度勾配のクロマトグラフィーで分離した。クロマトグラフィーの結果を図２に示す。
【０１７４】
吸脱着操作後、０．１Ｍ水酸化ナトリウムを１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。化合物９５を固定化したエポキシトヨパールゲルはこの再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【０１７５】
実施例７ 化合物９５のアガロースゲルへの固定化
Ｅｐｏｘｙ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製、エポキシ基含量：１９から４０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物９５の固定化を行なった。
【０１７６】
７０ｍＭ水酸化ナトリウムとＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドの混合溶媒（体積比１：１）に化合物９５を１６ｍＭになるように溶解し、この溶液６．０ｍＬとＥｐｏｘｙ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂゲル３．１ｍＬを混合して４０℃で２時間振とうした。反応後、ゲルを吸引濾過で濾別し、そのゲルを５ｍＬの前記混合溶媒で５回洗浄した。これらの濾液及び洗浄液をあわせて回収液とした。前記混合溶媒で洗浄後のゲルは更に１０ｍＬの水で２回洗浄することで、化合物９５を固定化したゲルを得た。
【０１７７】
吸光度法（検出波長３０５ｎｍ）によって測定した化合物９５の固定化量は３２μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１７８】
実施例８ 化合物１０７のビニルポリマーゲルへの固定化
ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ａｍｉｎｏ−６５０Ｍ（商品名）（東ソー社製、アミノ基含量：８９μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物１０７の固定化を行なった。
【０１７９】
脱水ＤＭＦ（和光純薬社製）に化合物１０７が２１ｍＭ、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩が４１ｍＭ、ＮＨＳが４２ｍＭになるように溶解し、この溶液１５ｍＬとＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ａｍｉｎｏ−６５０Ｍゲル２．１ｍＬを混合して２５℃で４日間振とうした。反応後、ゲルを吸引濾過で濾別し、５ｍＬのＤＭＦによる洗浄を５回行なった。この濾液と洗浄液とをあわせて回収液とした。洗浄後のゲルを無水酢酸のＤＭＦ溶液（無水酢酸／ＤＭＦ溶液＝１／４（体積比））５ｍＬに懸濁して、２５℃で２時間振とうした。次にゲルを吸引濾過、水洗することにより、化合物１０７を固定化したゲルを得た。
【０１８０】
吸光度法（検出波長３０５ｎｍ）によって測定した化合物１０７の固定化量は１１μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１８１】
実施例９ 化合物１１０のアガロースゲルへの固定化
ＨｉＴｒａｐカラムにＤＭＳＯを５ｍＬ通液した後、化合物１１０が１０ｍＭ、トリエチルアミンが４０ｍＭになるようにＤＭＳＯに溶解した溶液２ｍＬを通液した。１時間静置後、３ｍＬのＤＭＳＯを通液し、未反応の化合物１１０を除去した。反応に用いた化合物１１０溶液のカラムからの漏出液と、洗浄に用いたＤＭＳＯのカラムからの漏出液をあわせて回収液とした。
【０１８２】
化合物１１０の固定化量は、カラムに添加した化合物１１０の量（２０μｍｏｌ）からカラムから回収された化合物１１０の量を減ずることより算出した。固定化前に調製した化合物１１０のＤＭＳＯ溶液及び回収液を、非特許文献４に記載された方法のうち「Ｂ．酸性条件法」に従って適宜希釈し３０６ｎｍにおける吸光度を測定した。この方法より、ＨｉＴｒａｐカラムに固定化された化合物１１０の量は、２．３μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１８３】
実施例１０ 化合物１１０のビニルポリマーゲルへの固定化
ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｆｏｒｍｙｌ−６５０Ｍ（商品名、東ソー社製、ホルミル基含量６０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物１１０の固定化を行なった。
【０１８４】
０．１Ｍ ＣＨＥＳ−ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ９．０）とアセトニトリルとの混合溶媒（体積比１：１）に化合物１１０を３６ｍＭになるように溶解し、この溶液５．８ｍＬとＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｆｏｒｍｙｌ−６５０Ｍゲル３．０ｍＬを混合して振とうし、３０分後にピリジン−ボラン０．１７ｍＬ（１．７ｍｍｏｌ）を添加して２５℃で１６時間振とうすることで反応後、ゲルを吸引濾過で濾別し、濾別したゲルを５ｍＬのアセトニトリルで５回洗浄した。前記濾液と洗浄液とをあわせたものを回収液とした。前記洗浄後のゲルは更に１０ｍＬの水で２回洗浄することで、化合物１１０を固定化したゲルを得た。
【０１８５】
ＨＰＬＣ法（検出波長２５４ｎｍ）によって測定した化合物１０７の固定化量は４０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１８６】
実施例１１ 化合物１１０を固定化したビニルポリマーゲルを用いた免疫グロブリンの吸脱着
実施例１０に記載の方法にて調製した、化合物１１０を固定化したＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｆｏｒｍｙｌ−６５０Ｍゲル１ｍＬをＴＲＩＣＯＲＮカラムに充填し、ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）に取り付け、実施例２と同様にして、０．５ｍｇのヒト血漿由来免疫グロブリン製剤を硫酸ナトリウム濃度勾配のクロマトグラフィーで分離した。クロマトグラフィーの結果を図３に示す。
【０１８７】
吸脱着操作後に０．１Ｍ水酸化ナトリウムを１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。化合物１１０を固定化したＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｆｏｒｍｙｌ−６５０Ｍゲルはこの再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、各種タンパク質、特に免疫グロブリンの分析又は精製に利用可能なチアゾール誘導体を結合させたマトリックス、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、医療用タンパク質の需要は拡大しつつあり、その簡便で大規模に実施できる工業的精製技術の確立が切望されている。一般にタンパク質精製技術には、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、およびアフィニティークロマトグラフィーなどのクロマトグラフィー分離技術があるが、医療用タンパク質の精製を工業的に実施する場合には、実験室で用いられるような分離剤や装置を使用したのでは経済性に乏しく、実用的とは言い難い。また、医療用タンパク質を工業的に製造する過程では多種類のタンパク質が混在しているため、上記の中の一つの精製技術を用いて、目的とするタンパク質を純粋に得ることは極めて困難である。そのため通常はいくつかの技術を複合させた精製プロセスが採用されている（特許文献１）。
【０００３】
近年、医療用タンパク質の一つである免疫グロブリンを精製するための低分子化合物とそれらが結合したマトリックスが数多く開示されており、スルホン誘導体（特許文献２）、トリアジン誘導体（特許文献３）、メルカプト複素環式化合物（特許文献４）、４−ピリジルエチルチオアルキル誘導体（非特許文献１）等の低分子化合物が結合したマトリックスが知られている。しかしながら、本発明のマトリックスの製造に用いるチアゾール誘導体（１ａ）が免疫グロブリンを精製するための低分子化合物として有用であると記載した文献はない。また、特許文献５や非特許文献２に本発明のマトリックスの製造に用いるチアゾール誘導体（１ａ）に類似の化学構造を有するチアゾール誘導体が報告されているものの、これらの文献に記載のチアゾール誘導体の化学構造は、チアゾール環の２位がアミノ基あるいはアルキル基に限定されており、本発明のマトリックスの製造に用いるチアゾール誘導体（１ａ）のように２位にアリールカルボニルアミノ基を有する化合物についての記載はない。とりわけ非特許文献２に記載の化合物は、本発明のマトリックスの製造に用いるチアゾール誘導体（１ａ）に類似のチアゾール誘導体ではあるものの、それらの用途はヒスタミンＨ２レセプターアゴニストに限定されており、免疫グロブリンを精製するための用途についての記載はない。
【０００４】
なお、特許文献６にはチアゾール環の２位にベンゾイルアミノ基が置換したチアゾール誘導体が記載されているが、これらの化合物におけるチアゾール環の４位の置換基はカルボニル基、５位は無置換にそれぞれ限定されており、用途も消化管運動改善作用を有する医薬の有効成分である。更には特許文献６の化合物はマトリックスに固定化されたものではなく、免疫グロブリンを精製するための用途についての記載もない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】ＷＯ２００４／０８７７６１号
【特許文献２】米国特許４６９６９８０号
【特許文献３】米国特許６１１７９９６号
【特許文献４】特許第３８４４４９６号
【特許文献５】ＷＯ１９９１／１０６５６号
【特許文献６】ＷＯ１９９８／１７６５４号
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｂｉｏｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，９（４），２１１−２２１，２０００
【非特許文献２】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３５（１７），３２３９−３２４６，１９９２
【非特許文献３】化学大辞典、７巻、４７９、共立出版
【非特許文献４】はじめてのリガンドカップリングハンドブック、アマシャムバイオサイエンス社、２００５
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明が解決しようとする課題は、タンパク質、特に免疫グロブリンの分析又は精製に有用なチアゾール誘導体を固定化したマトリックス、及びその製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、本発明の下記一般式（１）で示されるチアゾール誘導体固定化マトリックスが、タンパク質、特に免疫グロブリンの簡便な分析又は精製を可能にすることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
即ち本発明は、一般式（１）
【００１０】
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基（−ＯＮＨ−）を表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｍはマトリックスを表す。）で表されるチアゾール誘導体固定化マトリックスに関するものである。
【００１１】
また本発明は、一般式（１）
【００１２】
【化２】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ａｒ、ｎ及びＭは前記と同じ意味を表す。）において、Ｍのマトリックスがビニル重合体、多糖、金属酸化物であることを特徴とするチアゾール誘導体固定化マトリックスに関するものである。
【００１３】
また本発明は、一般式（１ａ）
【００１４】
【化３】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｒ４はヒドロキシ基、ホルミル基、メルカプト基、カルボキシル基又はアミノキシ基（−ＯＮＨ２）を表す。）で示されるチアゾール誘導体と、活性化基含有マトリックスとを反応させることを特徴とする、一般式（１）
【００１５】
【化４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ａｒ、ｎ及びＭは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体固定化マトリックスの製造方法に関するものである。
【００１６】
また本発明は、一般式（１）
【００１７】
【化５】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ａｒ、ｎ及びＭは前記と同じ意味を表す。）で示されるチアゾール誘導体固定化マトリックスを使用し、タンパク質の分析又は精製を行なう方法に関するものである。
【００１８】
以下、本発明をさらに詳細に説明する。
【００１９】
本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスで用いるチアゾール誘導体における、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａｒで表される置換基の定義を以下に示す。
【００２０】
Ｒ１及びＲ２で表される置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基としては、直鎖状もしくは分枝状のいずれであってもよく、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソアミル基、ネオペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基を例示することができる。また、これらの炭素数１から６のアルキル基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、さらに具体的にはジフルオロメチル基、トリフルオロメチル基、２，２，２−トリフルオロエチル基、パーフルオロブチル基、ヒドロキシメチル基、カルボキシメチル基、メチルチオメチル基、４−モルホリノカルボニルメチル基等を例示することができる。免疫グロブリンの分析又は精製において良好な性能を示す点で、Ｒ１はメチル基が好ましく、Ｒ２は水素原子が好ましい。
【００２１】
Ａｒで表される芳香族基は特に制限はないが、フラン−２−イル基、フラン−３−イル基、チオフェン−２−イル基、チオフェン−３−イル基、ピロール−２−イル基、ピロール−３−イル基、ピラゾール−３−イル基、ピラゾール−４−イル基、イソチアゾール−３−イル基、イソチアゾール−４−イル基、イソキサゾール−３−イル基、イソキサゾール−４−イル基、イミダゾール−２−イル基、イミダゾール−４−イル基、イミダゾール−５−イル基、オキサゾール−２−イル基、オキサゾール−４−イル基、オキサゾール−５−イル基、チアゾール−２−イル基、チアゾール−４−イル基、チアゾール−５−イル基、１，２，４−トリアゾール−３−イル基、フェニル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基、２−ピリミジル基、４−ピリミジル基、５−ピリミジル基、１，２，４−トリアジン−３−イル基、１，２，４−トリアジン−５−イル基、１，２，４−トリアジン−６−イル基、ベンゾジオキソラン−３−イル基、ベンゾフラン−２−イル基、ベンゾフラン−３−イル基、ベンゾフラン−４−イル基、ベンゾフラン−５−イル基、ベンゾフラン−６−イル基、ベンゾフラン−７−イル基、ベンゾチオフェン−２−イル基、ベンゾチオフェン−３−イル基、ベンゾチオフェン−４−イル基、ベンゾチオフェン−５−イル基、ベンゾチオフェン−６−イル基、ベンゾチオフェン−７−イル基、インドール−２−イル基、インドール−３−イル基、インドール−４−イル基、インドール−５−イル基、インドール−６−イル基、インドール−７−イル基、ベンゾチアゾール−２−イル基、ベンゾチアゾール−４−イル基、ベンゾチアゾール−５−イル基、ベンゾチアゾール−６−イル基、ベンゾチアゾール−７−イル基、インダゾール−３−イル基、インダゾール−４−イル基、インダゾール−５−イル基、インダゾール−６−イル基、インダゾール−７−イル基、ベンズイソキサゾール−３−イル基、ベンズイソキサゾール−４−イル基、ベンズイソキサゾール−５−イル基、ベンズイソキサゾール−６−イル基、ベンズイソキサゾール−７−イル基、ナフタレン−１−イル基、ナフタレン−２−イル基、キノリン−２−イル基、キノリン−３−イル基、キノリン−４−イル基、キノリン−５−イル基、キノリン−６−イル基、キノリン−７−イル基、キノリン−８−イル基、キノキサリニル基、キノキサリン−５−イル基、キノキサリン−６−イル基、キナゾリニル基、キナゾリン−４−イル基、キナゾリン−５−イル基、キナゾリン−６−イル基、キナゾリン−７−イル基、キナゾリン−８−イル基、ベンゾオキサジン−５−イル基、ベンゾオキサジン−６−イル基、ベンゾオキサジン−７−イル基、ベンゾオキサジン−８−イル基、ベンゾチアジン−５−イル基、ベンゾチアジン−６−イル基、ベンゾチアジン−７−イル基、ベンゾチアジン−８−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−６−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−７−イル基、アントラセン−１−イル基を例示できる。特に、免疫グロブリンの分析又は精製において良好な性能を示す点で、Ａｒはフェニル基、２−ピリジル基、３−ピリジル基、４−ピリジル基又はフラン−２−イル基が好ましい。
【００２２】
Ａｒで表される置換されていてもよい芳香族基の置換基としては特に制限はないが、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、ヒドロキシ基又はシアノ基が好ましい。
【００２３】
Ａｒの置換基としてのハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を例示することができる。
【００２４】
Ａｒの置換基としての炭素数１から６のアルキル基としては、直鎖状、分枝状もしくは環状のいずれであってもよく、メチル基、エチル基、シクロプロピル基、プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソアミル基、ネオペンチル基、２−ペンチル基、３−ペンチル基、２−メチルブチル基、ｔｅｒｔ−ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基を例示することができる。また、これらのアルキル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、アシル基、置換されていてもよい芳香族基で１個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチル基、３−クロロプロピル基、ジフルオロメチル基、３−フルオロプロピル基、メトキシメチル基、２−エトキシエチル基、シクロプロピルメチル基、シクロペンチルメチル基、シクロヘキシルメチル基、２−メチルチオエチル基、２−エチルチオエチル基、２−アリルチオエチル基、２−プロパルギルチオエチル基、２−ベンジルチオエチル基、２−（２−クロロベンジル）チオエチル基、２−（２，４−ジクロロベンジル）チオエチル基、２−メチルスルフィニルエチル基、２−メチルスルホニルエチル基、メトキシメチル基、エトキシメチル基、２−メトキシエチル基、２−クロロエトキシメチル基、メトキシカルボニルメチル基、エトキシカルボニルメチル基、１−メトキシカルボニルエチル基、１−エトキシカルボニルエチル基、２−エトキシカルボニルエチル基、カルボキシメチル基、アセトニル基、１−アセチルエチル基、３−アセチルプロピル基、フェナシル基、４−クロロフェナシル基、２，４−ジフルオロフェナシル基、４−メチルフェナシル基、４−イソプロピルフェナシル基、４−イソブチルフェナシル基、４−シクロヘキシルフェナシル基、４−シアノフェナシル基、４−ニトロフェナシル基、チオフェン−２−イル基、２−（チオフェン−２−イル）エチル基、２−（チオフェン−３−イル）エチル基、フルフリル基、（５−メチルフラン−２−イル）メチル基、（５−エチルフラン−２−イル）メチル基、（５−クロロフラン−２−イル）メチル基、２−（５−フルオロフラン−２−イル）エチル基、テトラヒドロフルフリル基、２−ピリジルメチル基、３−ピリジルメチル基、４−ピリジルメチル基、２−（ピリジン−２−イル）エチル基、２−（ピリジン−３−イル）エチル基、２−（ピリジン−４−イル）エチル基、３−（ピリジン−２−イル）プロピル基、３−（ピリジン−３−イル）プロピル基、３−（ピリジン−４−イル）プロピル基を例示することができる。
【００２５】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基としては、直鎖状もしくは分枝状のいずれであってもよく、メトキシ基、エトキシ基、プロピルオキシ基、イソプロピルオキシ基、ブトキシ基、イソブチルオキシ基、ｓｅｃ−ブチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソアミルオキシ基、ネオペンチルオキシ基、２−ペンチルオキシ基、３−ペンチルオキシ基、ｔｅｒｔ−ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基、イソヘキシルオキシ基、２−ヘキシルオキシ基、３−ヘキシルオキシ基、デセニルオキシ基を例示することができる。また、これらのアルコキシ基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基、炭素数１から６のアルコキシ基、炭素数１から６のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、アシル基、置換されていてもよい芳香族基等で１個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエトキシ基、３−クロロプロピルオキシ基、ジフルオロメトキシ基、４−トリフルオロメトキシ基、３−フルオロプロピルオキシ基、シクロプロピルメトキシ基、シクロペンチルメトキシ基、シクロヘキシルメトキシ基、２−メチルチオエトキシ基、２−エチルチオエトキシ基、２−アリルチオエトキシ基、２−プロパルギルチオエトキシ基、２−ベンジルチオエトキシ基、２−（２−クロロベンジル）チオエトキシ基、２−（２，４−ジクロロベンジル）チオエトキシ基、２−メチルスルフィニルエトキシ基、２−メチルスルホニルエトキシ基、メトキシメトキシ基、エトキシメトキシ基、２−メトキシエトキシ基、２−クロロエトキシメトキシ基、メトキシカルボニルメトキシ基、エトキシカルボニルメトキシ基、１−メトキシカルボニルエトキシ基、１−エトキシカルボニルエトキシ基、２−エトキシカルボニルエトキシ基、カルボキシメトキシ基、１−アセチルエトキシ基、３−アセチルプロポキシ基、２−ピリジルメトキシ基、３−ピリジルメトキシ基、４−ピリジルメトキシ基、２−（ピリジン−２−イル）エトキシ基、２−（ピリジン−３−イル）エトキシ基、２−（ピリジン−４−イル）エトキシ基、３−（ピリジン−２−イル）プロポキシ基、３−（ピリジン−３−イル）プロポキシ基、ベンジルオキシ基を例示することができる。
【００２６】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基としては、シクロプロピルオキシ基、シクロブチルオキシ基、シクロペンチルオキシ基、２−メチルシクロブチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基、２−メチルシクロペンチルオキシ基、３−メチルシクロペンチルオキシ基、４−メチルシクロペンチルオキシ基、シクロオクチルオキシ基を例示することができる。
【００２７】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基としては、アリルオキシ基、２−メチル−２−プロペニルオキシ基、２−ブテニルオキシ基、１−ブテン−３−イルオキシ基、３−ブテニルオキシ基、４−ペンテニルオキシ基、５−ヘキセニルオキシ基を例示することができる。これらのアルケニルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、３，３−ジフルオロアリルオキシ基、３，３−ジクロロアリルオキシ基、３，３−ジブロモアリルオキシ基を例示することができる。
【００２８】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基としては、プロパルギルオキシ基、１−ブチン−３−イルオキシ基、２−ブチニルオキシ基、３−ブチニルオキシ基、２−ペンチニルオキシ基、３−ペンチニルオキシ基、４−ペンチニルオキシ基、２−ヘキシニルオキシ基、３−ヘキシニルオキシ基、４−ヘキシニルオキシ基、５−ヘキシニルオキシ基を例示することができ、これらのアルキニルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、４，４，４−トリフルオロブチン−２−イル基等を例示することができる。
【００２９】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基としては、アセトキシ基、プロピオニルオキシ基を例示することができ、これらのアシルオキシ基はハロゲン原子等で置換されていてもよく、トリフルオロアセトキシ基や２，２，２−トリフルオロプロピオニルオキシ基等を例示することができる。
【００３０】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基としては、メチルチオ基、エチルチオ基、プロピルチオ基、イソプロピルチオ基、ブチルチオ基、イソブチルチオ基、ｓｅｃ−ブチルチオ基、ペンチルチオ基、イソアミルチオ基、ネオペンチルチオ基、２−ペンチルチオ基、３−ペンチルチオ基、２−メチルブチルチオ基、ヘキシルチオ基、イソヘキシルチオ基、３−メチルペンチルチオ基、２−メチルペンチルチオ基を例示することができる。また、これらのアルキルチオ基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルチオ基、３−クロロプロピルチオ基、ジフルオロメチルチオ基、３−フルオロプロピルチオ基、シクロプロピルメチルチオ基、シクロペンチルメチルチオ基、シクロヘキシルメチルチオ基を例示することができる。
【００３１】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基としては、メチルスルフィニル基、エチルスルフィニル基、プロピルスルフィニル基、イソプロピルスルフィニル基、ブチルスルフィニル基、イソブチルスルフィニル基、ｓｅｃ−ブチルスルフィニル基、ペンチルスルフィニル基、イソアミルスルフィニル基、ネオペンチルスルフィニル基、２−ペンチルスルフィニル基、３−ペンチルスルフィニル基、２−メチルブチルスルフィニル基、ヘキシルスルフィニル基、イソヘキシルスルフィニル基、３−メチルペンチルスルフィニル基、２−メチルペンチルスルフィニル基を例示することができる。また、これらのアルキルスルフィニル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルスルフィニル基、３−クロロプロピルスルフィニル基、ジフルオロメチルスルフィニル基、３−フルオロプロピルスルフィニル基、シクロプロピルメチルスルフィニル基、シクロペンチルメチルスルフィニル基、シクロヘキシルメチルスルフィニル基を例示することができる。
【００３２】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基としては、メチルスルホニル基、エチルスルホニル基、プロピルスルホニル基、イソプロピルスルホニル基、ブチルスルホニル基、イソブチルスルホニル基、ｓｅｃ−ブチルスルホニル基、ペンチルスルホニル基、イソアミルスルホニル基、ネオペンチルスルホニル基、２−ペンチルスルホニル基、３−ペンチルスルホニル基、２−メチルブチルスルホニル基、ヘキシルスルホニル基、イソヘキシルスルホニル基、３−メチルペンチルスルホニル基、２−メチルペンチルスルホニル基を例示することができる。また、これらのアルキルスルホニル基はハロゲン原子、炭素数３から８のシクロアルキル基で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的には２−クロロエチルスルホニル基、３−クロロプロピルスルホニル基、ジフルオロメチルスルホニル基、３−フルオロプロピルスルホニル基、シクロプロピルメチルスルホニル基、シクロペンチルメチルスルホニル基、シクロヘキシルメチルスルホニル基を例示することができる。
【００３３】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基としては、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、ブトキシカルボニル基、ヘキシルオキシカルボニル基、ドデシルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を例示することができ、これらのアルコキシカルボニル基はハロゲン原子等で一個以上置換されていてもよく、さらに具体的にはトリフルオロメトキシカルボニル基、２，２，２−トリフルオロエトキシカルボニル基等を例示することができる。
【００３４】
Ａｒの置換基としての置換されていてもよいアミノ基としては、アミノ基、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ基、ジエチルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−プロピルアミノ基、Ｎ−エチル−Ｎ−プロピルアミノ基、２，２，２−トリフルオロエチルアミノ基、ジプロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、Ｎ−メチル−Ｎ−イソプロピルアミノ基、ブチルアミノ基、Ｎ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ基、イソブチルアミノ基、ｓｅｃ−ブチルアミノ基、ペンチルアミノ基、イソアミルアミノ基、ネオペンチルアミノ基、２−ペンチルアミノ基、３−ペンチルアミノ基、２−メチルブチルアミノ基、ヘキシルアミノ基、イソヘキシルアミノ基、４−メチルペンチルアミノ基、ベンゼンスルホニルアミノ基、Ｎ−ベンゼンスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、ｐ−トルエンスルホニルアミノ基、４−クロロベンゼンスルホニルアミノ基、４−ニトロベンゼンスルホニルアミノ基、メチルスルホニルアミノ基、クロロメチルスルホニルアミノ基、トリフルオロメチルスルホニルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−エチルアミノ基、Ｎ−メチルスルホニル−Ｎ−プロピルアミノ基、エチルスルホニルアミノ基、Ｎ−エチルスルホニル−Ｎ−メチルアミノ基、Ｎ−エチルスルホニル−Ｎ−エチルアミノ基、メトキシカルボニルアミノ基、エトキシカルボニルアミノ基を例示することができる。
【００３５】
Ａｒで表される置換されていてもよい芳香族基の具体例として、フラン−２−イル基、５−ブロモフラン−２−イル基、５−メチルフラン−２−イル基、フラン−３−イル基、チオフェン−２−イル基、５−クロロチオフェン−２−イル基、５−ブロモチオフェン−２−イル基、５−メチルチオフェン−２−イル基、５−メトキシチオフェン−２−イル基、５−エトキシチオフェン−２−イル基、チオフェン−３−イル基、５−メチルチオフェン−３−イル基、５−メトキシチオフェン−３−イル基、５−エトキシチオフェン−３−イル基、１−メチルピロール−２−イル基、１−メチルピロール−３−イル基、１−エチルピラゾール−３−イル基、ピラゾール−２−イル基、３−エトキシ−１−メチルピラゾール−２−イル基、１−エチル−４−メトキシピラゾール−３−イル基、イソチアゾール−３−イル基、５−メトキシイソチアゾール−３−イル基、イソチアゾール−４−イル基、イソキサゾール−３−イル基、イソキサゾール−４−イル基、１−メチルイミダゾール−２−イル基、１−メチルイミダゾール−４−イル基、１−メチルイミダゾール−５−イル基、オキサゾール−２−イル基、オキサゾール−４−イル基、オキサゾール−５−イル基、チアゾール−２−イル基、３−メトキシチアゾール−２−イル基、４−メトキシチアゾール−２−イル基、チアゾール−４−イル基、チアゾール−５−イル基、１，２，４−トリアゾール−３−イル基、１，２，４−トリアゾール−５−イル基、フェニル基、２−フルオロフェニル基、３−フルオロフェニル基、４−フルオロフェニル基、２，３−ジフルオロフェニル基、３，５−ジフルオロフェニル基、３，４，５−トリフルオロフェニル基、２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェニル基、３−フルオロ−４−メチルフェニル基、４−トリフルオロメトキシフェニル基、２−クロロフェニル基、３−クロロフェニル基、４−クロロフェニル基、４−クロロ−３−メチルフェニル基、４−クロロ−３−エチルフェニル基、４−クロロ−３−メトキシフェニル基、４−クロロ−３−エトキシフェニル基、２，３−ジクロロフェニル基、３，５−ジクロロフェニル基、３，４，５−トリクロロフェニル基、３−トリフルオロメチルフェニル基、４−トリフルオロメチルフェニル基、３−ブロモフェニル基、４−ブロモフェニル基、４−ブロモ−３−メチルフェニル基、４−ブロモ−３−エチルフェニル基、４−ブロモ−３−メトキシフェニル基、４−ブロモ−３−エトキシフェニル基、３，５−ジブロモ−４−ヒドロキシフェニル基、３−ヨードフェニル基、４−ヨードフェニル基、４−ヨード−３−メチルフェニル基、４−ヨード−３−エチルフェニル基、４−ヨード−３−メトキシフェニル基、４−ヨード−３−エトキシフェニル基、２−メチルフェニル基、３−メチルフェニル基、４−メチルフェニル基、３，４−ジメチルフェニル基、３，４，５−トリメチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル基、２−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、３−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、４−トリフルオロフェニルメチルフェニル基、４−メトキシメチルフェニル基、３，４−ジエトキシフェニル基、３−エチル−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、３，４−ジエチルフェニル基、４−プロピルフェニル基、４−イソプロピルフェニル基、３−ブチルフェニル基、４−ブチルフェニル基、４−イソブチルフェニル基、４−（ｓｅｃ−ブチル）フェニル基、４−（ｔｅｒｔ−ブチル）フェニル基、４−ペンチルフェニル基、４−イソアミルフェニル基、４−ネオペンチルフェニル基、４−（２−ペンチル）フェニル基、４−（３−ペンチル）フェニル基、４−（２−メチルブチル）フェニル基、４−（ｔｅｒｔ−ペンチル）フェニル基、４−ヘキシルフェニル基、４−イソヘキシルフェニル基、４−（２−クロロエチル）フェニル基、４−（３−クロロプロピル）フェニル基、４−（ジフルオロメチル）フェニル基、４−（３−フルオロプロピル）フェニル基、４−メトキシメチルフェニル基、４−エトキシメチルフェニル基、４−シクロプロピルメチルフェニル基、４−シクロペンチルメチルフェニル基、シクロヘキシルメチルフェニル基、４−（２−メチルチオエチル）フェニル基、４−（２−エチルチオエチル）フェニル基、４−（２−アリルチオエチル）フェニル基、４−（２−プロパルギルチオエチル）フェニル基、４−（２−ベンジルチオエチル）フェニル基、３−メトキシフェニル基、３−メトキシ−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メトキシフェニル基、３−メトキシ−４−プロピルフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−メトキシ−３−メトキシフェニル基、３，４−ジメトキシフェニル基、３−エトキシ−４−メトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メトキシフェニル基、４−イソプロピルオキシ−３−メトキシフェニル基、３−イソプロピルオキシ−４−メトキシフェニル基、３−エトキシフェニル基、４−エトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メチルフェニル基、４−エトキシ−３−エチルフェニル基、４−エトキシ−３−プロピルフェニル基、４−エトキシ−３−イソプロピルフェニル基、４−プロピルオキシフェニル基、４−イソプロピルオキシフェニル基、４−ブトキシフェニル基、４−イソブチルオキシフェニル基、４−（ｓｅｃ−ブチルオキシ）フェニル基、３−（２−クロロエトキシ）フェニル基、３−（２−クロロエトキシ）フェニル基、４−（２−クロロエトキシ）フェニル基、３−（３−クロロプロピルオキシ）フェニル基、４−（３−クロロプロピルオキシ）フェニル基、３−ジフルオロメトキシフェニル基、４−ジフルオロメトキシフェニル基、４−（３−フルオロプロピルオキシ）フェニル基、４−シクロプロピルメトキシフェニル基、４−シクロペンチルメトキシ基、４−シクロヘキシルメトキシ基、３−シクロプロピルオキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシ−３−メトキシフェニル基、４−シクロプロピルオキシ−３−メチルフェニル基、４−シクロブチルオキシフェニル基、４−シクロペンチルオキシフェニル基、４−（２−メチルシクロブチルオキシ）フェニル基、４−シクロヘキシルオキシフェニル、４−アリルオキシフェニル基、４−（３，３−ジクロロアリルオキシ）フェニル基、４−プロパルギルオキシフェニル基、３−メチル−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−エチル−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−メトキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−エトキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、３−プロポキシ−４−プロパルギルオキシフェニル基、４−（１−ブチン−３−イルオキシ）フェニル基、４−（２−ブチニルオキシ）フェニル基、３−メチルチオフェニル基、４−メチルチオフェニル基、４−メチル−３−メチルチオフェニル基、３−メチル−４−メチルチオフェニル基、４−メトキシ−３−メチルチオフェニル基、３−エトキシ−４−メチルチオフェニル基、４−エトキシ−３−メチルチオフェニル基、３−プロポキシ−４−メチルチオフェニル基、４−エチルチオフェニル基、３−プロピルチオフェニル基、４−イソプロピルチオフェニル基、４−ブチルチオフェニル基、４−イソブチルチオフェニル基、２−（ｓｅｃ−ブチルチオ）フェニル基、２−ペンチルチオフェニル基、２−イソアミルチオフェニル基、４−ネオペンチルチオフェニル基、４−（２−クロロエチルチオ）フェニル基、３−（３−クロロプロピルチオ）フェニル基、ジフルオロメチルチオフェニル基、３−アセトキシフェニル基、４−アセトキシフェニル基、３−メチルスルフィニルフェニル基、４−メチルスルフィニルフェニル基、４−メトキシ−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−メトキシ−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−エトキシ−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−エトキシ−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−メチル−３−メチルスルフィニルフェニル基、３−エチル−４−メチルスルフィニルフェニル基、４−（２−クロロエチルスルフィニル）フェニル基、４−（３−クロロプロピルスルフィニル）フェニル基、４−（ジフルオロメチルスルフィニル）フェニル基、３−メチルスルホニルフェニル基、４−メチルスルホニルフェニル基、４−メチル−３−メチルスルホニルフェニル基、４−エチル−３−メチルスルホニルフェニル基、４−メトキシ−３−メチルスルホニルフェニル基、４−エトキシ−３−メチルスルホニルフェニル基、３−メトキシ−４−メチルスルホニルフェニル基、３−エトキシ−４−メチルスルホニルフェニル基、エチルスルホニルフェニル基、プロピルスルホニルフェニル基、イソプロピルスルホニルフェニル基、ブチルスルホニルフェニル基、２−クロロエチルスルホニルフェニル基、３−クロロプロピルスルホニルフェニル基、ジフルオロメチルスルホニルフェニル基、４−カルボキシフェニル基、４−メトキシカルボニルフェニル基、４−エトキシカルボニルフェニル基、３−メチルアミノフェニル基、４−メチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−メチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−メチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−メチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−メチルアミノフェニル基、４−メチル−３−メチルアミノフェニル基、３−メチル−４−メチルアミノフェニル基、４−エチル−３−メチルアミノフェニル基、３−エチル−４−メチルアミノフェニル基、３−ジメチルアミノフェニル基、４−ジメチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−ジメチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−ジメチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−ジメチルアミノフェニル基、４−メチル−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジメチルアミノフェニル基、４−エチル−３−ジメチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジメチルアミノフェニル基、３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−メトキシ−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メトキシ−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−エトキシ−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−エトキシ−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−メチル−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メチル−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、４−エチル−３−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−メチル−４−（Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）フェニル基、３−ジエチルアミノフェニル基、４−ジエチルアミノフェニル基、４−メトキシ−３−ジエチルアミノフェニル基、３−メトキシ−４−ジエチルアミノフェニル基、４−エトキシ−３−ジエチルアミノフェニル基、３−エトキシ−４−ジエチルアミノフェニル基、４−メチル−３−ジエチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジエチルアミノフェニル基、４−エチル−３−ジエチルアミノフェニル基、３−メチル−４−ジエチルアミノフェニル基、４−メチルスルホニルアミノフェニル基、４−トリフルオロメチルスルホニルアミノフェニル基、４−アセチルアミノフェニル基、２−ヒドロキシフェニル基、３−ヒドロキシフェニル基、４−ヒドロキシフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−エチルフェニル基、３−ヒドロキシ−４−メトキシフェニル基、４−ヒドロキシ−３−メチルフェニル基、４−ヒドロキシ−３−エチルフェニル基、４−ヒドロキシ−３−メトキシフェニル基、２−シアノフェニル基、３−シアノフェニル基、４−シアノフェニル基、２−ニトロフェニル基、３−ニトロフェニル基、３−ニトロ−４−メチルフェニル基、４−ニトロフェニル基、ピリジン−２−イル基、５−クロロピリジン−２−イル基、５−メチルピリジン−２−イル基、５−エチルピリジン−２−イル基、５−メトキシピリジン−２−イル基、５−エトキシピリジン−２−イル基、２，３−ジメチルピリジン−６−イル基、２，３−ジメトキシピリジン−６−イル基、ピ
リジル−３−イル基、２−クロロピリジン−５−イル基、２−メチルピリジン−５−イル基、２−エチルピリジン−５−イル基、２−メトキシピリジン−５−イル基、２−エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、ピリジル−４−イル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、２−ピリミジル基、５−メチルピリミジン−２−イル基、５−エチルピリミジン−２−イル基、２−エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、５−クロロピリミジン−２−イル基、５−ブロモピリミジン−２−イル基、５−メトキシピリミジン−２−イル基、ピリミジル−４−イル基、ピリミジル−５−イル基、１，２，４−トリアジン−３−イル基、１，２，４−トリアジン−５−イル基、１，２，４−トリアジン−６−イル基、ベンゾジオキソラン−３−イル基、ベンゾフラン−２−イル基、ベンゾフラン−３−イル基、ベンゾフラン−４−イル基、ベンゾフラン−５−イル基、ベンゾフラン−６−イル基、ベンゾフラン−７−イル基、ベンゾチオフェン−２−イル基、ベンゾチオフェン−３−イル基、ベンゾチオフェン−４−イル基、ベンゾチオフェン−５−イル基、ベンゾチオフェン−６−イル基、ベンゾチオフェン−７−イル基、１−メチルインドール−２−イル基、ベンゾチアゾール−２−イル基、ベンゾチアゾール−４−イル基、ベンゾチアゾール−５−イル基、ベンゾチアゾール−６−イル基、ベンゾチアゾール−７−イル基、ベンズイソキサゾール−３−イル基、ベンズイソキサゾール４−イル基、ベンズイソキサゾール−５−イル基、ベンズイソキサゾール−６−イル基、ベンズイソキサゾール−７−イル基、ナフタレン−１−イル基、ナフタレン−２−イル基、キノリン−２−イル基、キノリン−３−イル基、キノリン−４−イル基、キノリン−５−イル基、キノリン−６−イル基、キノリン−７−イル基、キノリン−８−イル基、キノキサリン−５−イル基、キノキサリン−６−イル基、キナゾリン−４−イル基、キナゾリン−５−イル基、キナゾリン−６−イル基、キナゾリン−７−イル基、キナゾリン−８−イル基、ベンゾオキサジン−５−イル基、ベンゾオキサジン−６−イル基、ベンゾオキサジン−７−イル基、ベンゾオキサジン−８−イル基、ベンゾチアジン−５−イル基、ベンゾチアジン−６−イル基、ベンゾチアジン−７−イル基、ベンゾチアジン−８−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−４−イル基、１，３−ベンゾジオキソール−５−イル基、アントラセン−１−イル基等があげられる。
【００３６】
免疫グロブリンの分析又は精製において良好な性能を示す点で、Ａｒは４−メチルフェニル基、４−エチルフェニル基、３，４−ジメチルフェニル基、３−エチル−４−メチルフェニル基、４−エチル−３−メチルフェニル基、４−メトキシフェニル基、４−エトキシフェニル基、３，４−ジメトキシフェニル基、３，４−ジエトキシフェニル基、３−エトキシ−４−メトキシフェニル基、４−エトキシ−３−メトキシフェニル基、４−メトキシ−３−メチルフェニル基、４−メチル−３−エトキシフェニル基、４−ジメチルアミノフェニル基、２−メトキシピリジン−５−イル基、２−エトキシピリジン−５−イル基、２，３−ジメチルピリジン−５−イル基、４−ピリジル基、２−メチルピリジン−４−イル基、２−エチルピリジン−４−イル基、２−メトキシピリジン−４−イル基、２−エトキシピリジン−４−イル基、２−クロロピリジン−５−イル基が好ましい。
【００３７】
Ｍで表されるマトリックスの材質としては特に限定はなく、一般式（１ａ）に示すチアゾール誘導体と共有結合を形成するものであればよい。該チアゾール誘導体は二価の官能基であるメチレン鎖とＲ３とを介した共有結合によってマトリックスに固定化される。チアゾール誘導体固定化マトリックスの性能として、タンパク質を含む溶液から分析や精製の対象となるタンパク質を選択的に吸着し、簡単な処理によって該吸着タンパク質を脱離できるものが好ましく選択される。
【００３８】
マトリックスの形態としては、前記タンパク質を含む溶液に対して不溶性のゲルが好ましく、前記ゲルであれば粒状物または非粒状物、多孔性または非多孔性、いずれの性質であってもよい。本発明におけるＭで表されるマトリックスは有機高分子化合物、無機化合物、又はそれらの複合体の中から適宜選択することができる。なお、前記ゲルは前記タンパク質を含む溶液に懸濁させて用いてもよいし、またカラム管に充填後、前記タンパク質を含む溶液を通液して用いてもよい。
【００３９】
有機高分子化合物のゲルとしては、天然高分子であっても合成高分子であってもよい。天然高分子としては、架橋結合アルブミン等のポリペプチドまたはタンパク質、アガロース、アルギネート、カラゲナン、キチン、セルロース、デキストリン、デキストランまたは澱粉等の多糖及びそれらの架橋体があげられる。一方、合成高分子としては、ビニルポリマー、ポリエステル、ポリアミド、ポリエーテルまたはポリウレタン及びそれらの共重合体を例示でき、これらの架橋体を用いてもよい。また、前記重合体の側鎖を反応させたものも、後述する活性化基含有マトリックスとして用いることができる。
【００４０】
なお本発明において、ビニルポリマーとは非特許文献３に記載のとおり、ビニルモノマーやビニリデンモノマーの単独重合体、または、それらの共重合体である。前記モノマーとしては、アクリル酸またはメタクリル酸及びそれらのアミド、エステル、アクロレイン、メタクロレイン、各種カルボン酸のビニルエステル、スチレン等があげられる。メタクリル酸のエステルとしては、メタクリル酸−２−ヒドロキシエチルが例示できる。
【００４１】
また、天然高分子に合成高分子や天然高分子をグラフト重合したもの、合成高分子に合成高分子や天然高分子をグラフト重合としたもの、無機化合物から有機モノマーの重合鎖を伸ばしたものであっても、本発明におけるＭで表されるマトリックスに含まれる。
【００４２】
無機化合物のゲルとしては、シリカ、アルミナ、ジルコニアまたは酸化鉄といった金属酸化物、ガラス、多孔質珪藻土等が例示される。また、前記無機化合物にカップリング剤で処理したものも、後述する活性化基含有マトリックスとして用いることができる。前記カップリング剤としては、活性化基又はその前駆体となる官能基を有するシランカップリング剤、アルミネートカップリング剤、チタネートカップリング剤等があげられる。
【００４３】
本発明におけるＭで表されるマトリックスとしては、操作の容易さや回収率の高さの観点から、アガロース、キトサン、デキストランまたはセルロース等の多糖類、ポリスチレンやトヨパール（商品名）（東ソー株式会社製）等のビニルポリマー及びそれらの架橋体、シリカ等の無機化合物が好ましい。
【００４４】
なお、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスは、タンパク質を含む溶液から特定のタンパク質を吸着した後、分離ができれば、液状であってもよい。例えば、水性二相分配法で使用されるデキストラン、ポリエチレングリコ−ル、ポリビニルアルコール若しくは加水分解澱粉といった水溶性の高分子を包含するマトリックス、又はエマルジョンを形成するのに使用されるペルフルオロデカリン等の化合物を包含するマトリックスがあげられる。
【００４５】
本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスにおいて、チアゾール環とＭとは、一般式（４）に示すように、メチレン基がｎであり、二価の原子あるいは二価の基Ｒ３を介して共有結合している。
【００４６】
Ｍ−Ｒ３−（ＣＨ２）ｎ−（チアゾール環） （４）
ｎについては、１から１２の整数から適宜選択することができるが、抗体の捕捉能が高く夾雑タンパクとの選択性がよい点で、３、４、５又は６が好ましい。
【００４７】
Ｒ３の構造は、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスの製法に依存する。本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスは、一般式（１ａ）に示すチアゾール誘導体の反応性官能基Ｒ４をマトリックスの活性化基と反応させることによって製造される。ここで、Ｒ４は、ヒドロキシ基、ホルミル基、メルカプト基、カルボキシル基又はアミノキシ基（−ＯＮＨ２）からなる群より選択される。
【００４８】
次に、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスの製造方法を詳細に説明する。
【００４９】
【化６】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ａｒ、Ｍ及びｎは前記と同じ意味を表す。）
ここで言う活性化基とは、一般式（１ａ）のＲ４で定義されるヒドロキシ基、ホルミル基、メルカプト基、カルボキシル基又はアミノキシ基（−ＯＮＨ２）を必要に応じて塩基や還元剤の存在下に反応させた時に容易に共有結合を形成できる官能基のことで、例えば、スクシンイミドオキシカルボニル基、１−メチルピリジニウム−２−オキシカルボニル基、ホルミル基、カルボキシル基、２，２，２−トリフルオロエチルスルホニルオキシ基（トレシル基）、スルホニル基、トシル基、ビニルスルホニル基、エポキシ基、アミノ基、ジチオ−２−ピリジル基、ヒドラジノ基をあげることができる。中でも導入の容易さの観点から、スクシンイミドオキシカルボニル基、エポキシ基、ホルミル基、アミノ基、ジチオ−２−ピリジル基、ヒドラジノ基、カルボキシル基が好ましい。チアゾール誘導体の固定化反応及び固定化反応によって形成されるＲ３を一般式（５）から（１２）に例示する。これらの式において、Ｍ’は活性化基をもつマトリックスのうちの活性化基以外の部分を指し、Ｒは式（１ａ）のＲ４以外の部分を指す。
【００５０】
【化７】
【００５１】
【化８】
【００５２】
【化９】
【００５３】
【化１０】
【００５４】
【化１１】
【００５５】
【化１２】
【００５６】
【化１３】
【００５７】
【化１４】
また、コハク酸ジヒドラジド、ピメルイミド酸ジメチル、ジビニルスルホン、カルボニルジイミダゾール等の２官能性試薬を用いてマトリックスの活性化基の種類を変換することもできる。
【００５８】
活性化基含有マトリックスにチアゾール誘導体（１ａ）を固定化して導いたチアゾール誘導体固定化マトリックス（１）は、タンパク質（特に免疫グロブリン）、またはこれらの類縁体、フラグメント、融合体の精製に用いることかできる。特に、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックス（１）は、免疫グロブリンのうち、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）の分析や精製に有用である。
【００５９】
次に、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスを用いてタンパク質を分析、分離、または単離、精製する方法について説明する。
【００６０】
本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスをカラム管に充填し、溶離液として緩衝液、金属塩の水溶液、アミノ酸溶液、アルコール溶液等の溶液を通液することで、タンパク質の分析、分離、単離又は精製を行なうことができる。この方法が適用できるタンパク質としては、血漿タンパク質成分や乳タンパク質成分をあげることができ、天然に存在するものでは血漿中の免疫グロブリン、血清アルブミン、血液凝固因子、ラクトアルブミン、ラクトフェリンを例示できる。またペプチドホルモン、インターフェロン、インターロイキン、成長因子、成長抑制因子、ワクチンも例示できる。特に本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスは、免疫グロブリンの精製に好ましい。通液する緩衝液としては、リン酸緩衝液、クエン酸緩衝液、Ｔｒｉｓ、ＰＩＰＥＳ、ＡＣＥＳ、ＢＥＳ、ＭＯＰＳ、ＴＥＳ、ＨＥＰＥＳを例示でき、金属塩としては硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、硫酸リチウム、硫酸マグネシウム、硫酸アンモニウム、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウムを例示でき、アミノ酸としてはグリシン、アルギニン、ベータアラニン、ガンマアミノ酪酸を例示でき、アルコールとしてはエタノール、イソプロピルアルコール、グリセロール、エチレングリコールを例示できる。また、これらを混合したものを溶離液として用いることもできる。ｐＨは３から１１の範囲内で目的とするタンパク質を分析、分離、単離又は精製することができるが、特に５から９の範囲内で精製することが好ましい。また、ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）等のクロマトグラフィー装置を使用して、タンパク質を分析、分離、単離又は精製することもできる。チアゾール誘導体固定化マトリックスを用いて免疫グロブリン若しくはこれらの類縁体、フラグメント、融合体を分析又は精製する場合は、硫酸ナトリウムや硫酸アンモニウムを含むリン酸緩衝液を通液し、ｐＨは５から９の範囲で、疎水性相互作用を利用したクロマトグラフィーを行なうのが好ましい。ここでいう免疫グロブリンの類縁体とは、免疫グロブリンの構造や機能が少なくとも部分的に保持された天然若しくは人工的に作られたタンパク質又はタンパク質コンジュゲートを指し、免疫グロブリンのフラグメントとは、酵素的な処理又は遺伝子工学的な設計によって作製された免疫グロブリンの部分構造を持ったタンパク質を指し、免疫グロブリンの融合体とは、各種サイトカイン又はサイトカイン受容体等の生物活性をもったタンパク質の機能部分を免疫グロブリンの全部又は一部と遺伝子工学的に融合させて作製したものを指す。
【００６１】
本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスは、水酸化ナトリウム水溶液、水酸化カリウム水溶液等のアルカリ性水溶液、塩酸水溶液、硫酸水溶液、硝酸水溶液、リン酸水溶液等の酸性水溶液、塩酸グアニジン水溶液、尿素水溶液等のタンパク変性剤水溶液、アルギニンやヒスチジン等のアミノ酸を含んだ水溶液、ＳＤＳ、Ｔｗｅｅｎ等の界面活性剤水溶液、メタノール、エタノール、イソプロパノール、グリセロール、エチレングリコール等のアルコール溶液、又は、これらを含んだ混合水溶液を用いて洗浄することによって、初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用することができる。
【００６２】
次に、本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスの製造に用いるチアゾール誘導体の製造方法を詳細に説明する。
【００６３】
製造方法１
【００６４】
【化１５】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｒ３ａはフタルイミドオキシ基、アセトキシ基、カルボキシル基又はアルコキシチオカルボニルチオ基を表し、Ｙはハロゲン原子を表す。）
製造方法１はα−ハロケトン体（２）をアシルチオウレア誘導体（３）と反応させ、チアゾール誘導体（１ａ’）を製造する方法である。本反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができる。溶媒としてはジエチルエーテル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、１，２−ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド類、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、水又はこれらの混合溶媒が例示でき、中でも収率がよい点で、ＤＭＦを用いるのが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができ、収率がよい点で６０℃から１５０℃の範囲で反応させるのが好ましい。本工程では、塩基存在下に行なうこともでき、塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、トリエチルアミン、トリブチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、ジメチルアニリン等の有機アミン類を用いることができる。塩基の使用量は特に制限はないが、反応基質に対して１当量以上用いて反応を実施することにより、収率よく目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィー又は再結晶等の方法により精製することもできる。
【００６５】
製造方法２
【００６６】
【化１６】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）
製造方法２はチアゾール誘導体（１ａａ）を水存在下にてヘキサカルボニルモリブテンで処理し、５−ヒドロキシアルキルチアゾール誘導体（１ａｂ）を製造する方法である。水及びヘキサカルボニルモリブテンの使用量は反応基質（１ａａ）に対して１当量以上用いて反応を実施することにより、収率よく目的物（１ａｂ）を得ることができる。本反応は溶媒中で行なうのが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができる。溶媒としてはジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド系溶媒、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール系溶媒、ＤＭＳＯ、又はこれらの混合溶媒が例示でき、中でも収率がよい点や後処理が簡便である点でアセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類溶媒を用いることが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィー又は再結晶等の方法により精製することもできる。
【００６７】
製造方法３
【００６８】
【化１７】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表し、Ｒ５は炭素数１から６のアルキル基を表す。）
製造方法３はチアゾール誘導体（１ａｃ）を塩基で処理し、５−メルカプトアルキルチアゾール誘導体（１ａｄ）を製造する方法である。本反応で用いることができる塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、メチルアミン、エチルアミン、プロピルアミン、ジメチルアミン、ジエチルアミン等の有機アミン類又はアンモニアを用いることができる。塩基の使用量に特に制限はないものの、反応基質（１ａｃ）に対して１当量以上用いて反応を実施することにより、収率よく目的物（１ａｄ）を得ることができる。本反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができる。溶媒としてはジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド類、ＤＭＳＯ、水又はこれらの混合溶媒が例示でき、中でも収率がよい点で、ＤＭＦを用いるのが好ましい。また、塩基としてアンモニアを用い、使用する溶媒として水とエタノールの混合溶媒を用いて実施しても収率がよい点で好ましい。また、反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができ、収率がよい点で０℃から１００℃の範囲で反応させることが好ましい。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィー又は再結晶等の方法により精製することもできる。
【００６９】
製造方法４
【００７０】
【化１８】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）
製造方法４は５−ヒドロキシアルキルチアゾール誘導体（１ａｂ）のヒドロキシ基を酸化し、５−ホルミルアルキルチアゾール誘導体（１ａｅ）を製造する方法である。本反応は一般的な酸化反応を行なうことによって容易に目的物を得ることができ、酸化剤としては、ピリジニウムクロロクロマート、ピリジニウムジクロロクロマート、二酸化マンガン、過マンガン酸カリウム等があげられる。また、Ｓｗｅｒｎ酸化、Ｃｏｒｅｙ−Ｋｉｍ酸化、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ酸化、向山酸化、Ｏｐｐｅｎａｕｅｒ酸化、ＴＥＭＰＯ酸化、パラジウム錯体を用いた酸素酸化等の酸化反応によっても容易に目的物を得ることができるが、収率がよい点でＳｗｅｒｎ酸化を用いることが好ましい。本反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができる。溶媒としてはジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒、ジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド類、ＤＭＳＯ、水又はこれらの混合溶媒が例示でき、中でも収率がよい点で、ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒を用いるのが好ましい。反応温度については特に制限はないが、−７８℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィー又は再結晶等により精製することもできる。
【００７１】
製造方法５
【００７２】
【化１９】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ及びｎは前記と同じ意味を表す。）
製造方法５はチアゾール誘導体（１ａａ）を塩基で処理し、５−アミノキシアルキルチアゾール誘導体（１ａａａ）を製造する方法である。塩基としては、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウム−ｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属塩基、メチルアミン、エチルアミン、ジメチルアミン等の有機アミン類、ヒドラジン類を用いることができ、収率がよい点でヒドラジン又はメチルアミンが好ましい。塩基の使用量は反応基質（１ａａ）に対して２当量以上用いて反応を実施することにより、収率よく目的物（１ａａａ）を得ることができる。本反応は溶媒中で行なうことが好ましく、反応に害を及ぼさない溶媒であれば使用することができる。溶媒としてはジエチルエーテル、ＴＨＦ、ＤＭＥ、ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトン、メチルエチルケトン等のケトン系溶媒、酢酸エチル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素系溶媒、ＤＭＦ、Ｎ−メチルピロリドン等のアミド系溶媒、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等のアルコール系溶媒、ＤＭＳＯ、水又はこれらの混合溶媒が例示でき、中でも収率がよい点や後処理が簡便である点で、メタノールやエタノール等のアルコール系溶媒を用いることが好ましい。反応温度については特に制限はないが、０℃から１５０℃の範囲から適宜選ばれた温度で反応させることにより目的物を得ることができる。反応終了後は、通常の後処理操作により目的物を得ることができるが、必要であればカラムクロマトグラフィー又は再結晶等の方法により精製することもできる。
【発明の効果】
【００７３】
本発明のチアゾール誘導体固定化マトリックスは、タンパク質、特に免疫グロブリンの分析および精製に有用な耐久性に富む選択的な吸脱着剤となることから医療用タンパク質、特に免疫グロブリンの工業的な精製において極めて有用である。
【図面の簡単な説明】
【００７４】
【図１】チアゾール誘導体固定化ＨｉＴｒａｐカラムを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物７５の結果）。
【図２】チアゾール誘導体固定化ビニルポリマーゲルを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物９５の結果）。
【図３】チアゾール誘導体固定化ビニルポリマーゲルを用いた免疫グロブリンのクロマトグラフィー結果（化合物１１０の結果）。
【実施例】
【００７５】
以下、実施例及び参考例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明がこれらに限定されるものではない。
【００７６】
参考例１ チアゾール誘導体の合成
（合成例１）
【００７７】
【化２０】
Ｎ−［（５−オキソヘキサン−１−イル）オキシ］フタルイミド（１．０ｇ，３．８３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液に臭化銅（ＩＩ）（１．７１ｇ，７．６６ｍｍｏｌ）を加え、２時間加熱還流した。反応液をセライト濾過により固体を瀘別し、濾液の溶媒を減圧留去して油状物を得た。得られた油状物をＤＭＦ（２０ｍＬ）に溶解し、３，４−ジメトキシベンゾイルチオウレア（０．９２ｇ，３．８３ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で８時間反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去して得られた粗生成物に１Ｍ塩酸（３０ｍＬ）と酢酸エチル（３０ｍＬ）を加え固体を析出させた。固体を瀘別し、酢酸エチルとエーテルによって充分洗浄し、灰色固体の３，４−ジメトキシ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．５７ｇ，３１％）を得た。
ｍ．ｐ．２１１℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．１０（ｍ，２Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），４．０４（ｓ，３Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７６から７．８８（ｍ，５Ｈ），７．９９（ｄｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００７８】
（合成例２）
合成例１と同様にして、３−フルオロ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドを合成した。
灰色固体、４６％；ｍ．ｐ．１３５から１３７℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０４（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．３５（ｄ，ＪＨＦ＝１．８Ｈｚ，３Ｈ），２．９９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｄｄ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ １０Ｈｚ，１Ｈ）．７．７３から７．８８（ｍ，６Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００７９】
（合成例３）
合成例１と同様にして、２−クロロ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
白色固体、３９％；ｍ．ｐ．１７５から１７８℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．９７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３２から７．４９（ｍ，３Ｈ），７．７３から７．８７（ｍ，５Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８０】
（合成例４）
合成例１と同様にして、３−クロロ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
淡黄色固体、５３％；ｍ．ｐ．１４７から１５５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），２．９９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５０から７．５５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．７２から７．９９（ｍ，６Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８１】
（合成例５）
合成例１と同様にして、Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］−４−ヨードベンズアミドを合成した。
淡黄色固体，２９％；ｍ．ｐ．１９２から２００℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．９９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７４から７．７７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８２から７．８７（ｍ，４Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８２】
（合成例６）
合成例１と同様にして、Ｎ−［４−メチル−５−｛７−（フタルイミドオキシ）ヘプチル｝チアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドを合成した。
黄色固体、５８％；ｍ．ｐ．９５から９９℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．３５から１．４４（ｍ，４Ｈ），１．４４から１．５７（ｍ，２Ｈ），１．５７から１．７０（ｍ，２Ｈ），１．７４から１．８４（ｍ，２Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．６５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．１７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７２から７．８５（ｍ，６Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８３】
（合成例７）
合成例１と同様にして、４−シクロプロピル−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
茶色固体；ｍ．ｐ．１８１から１８２℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ０．７８から０．８５（ｍ，２Ｈ），１．０７から１．１４（ｍ，２Ｈ），１．９４から２．０１（ｍ，１Ｈ），２．０５から２．１５（ｍ，２Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７４から７．８８（ｍ，４Ｈ），８．１９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８４】
（合成例８）
合成例１と同様にして、４−エトキシ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１５１から１５４℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４６（ｔ，３Ｈ），２．１０（ｍ，２Ｈ），２．５１（ｓ，３Ｈ），３．１２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．１３（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７６から７．８８（ｍ，４Ｈ），８．２７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８５】
（合成例９）
合成例１と同様にして、３−エトキシ−４−メトキシ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．８１から８８℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），２．０６から２．１７（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｓ，３Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），４．１３（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９２（ｄ，１Ｈ），７．４４から７．５０（ｍ，２Ｈ），７．７３から７．８７（ｍ，４Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８６】
（合成例１０）
合成例１と同様にして、４−メチル−３−メトキシ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１２５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３から２．１８（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），４．２６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄｄ，Ｊ＝２．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．７３から７．８７（ｍ，４Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８７】
（合成例１１）
合成例１と同様にして、Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ナフタレン−１−カルボキサミドを合成した。
黄色固体、６．３％；ｍ．ｐ．１５０から１５２℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８３（ｓ，３Ｈ），２．０１（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．９３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４３から７．６２（ｍ，３Ｈ），７．７３から７．８１（ｍ，３Ｈ），７．８３から７．９１（ｍ，３Ｈ），８．００（ｄｄ，Ｊ＝２．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），８．４４（ｄｄ，Ｊ＝２．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８８】
（合成例１２）
合成例１と同様にして、Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］チオフェン−２−カルボキサミドを合成した。
灰色固体、４２％；ｍ．ｐ．１５３から１５５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），３．１１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２３（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７５から７．８０（ｍ，３Ｈ），７．８３から７．８９（ｍ，２Ｈ），８．４９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００８９】
（合成例１３）
合成例１と同様にして、Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］フラン−２−カルボキサミドを合成した。
灰色固体、３１％；ｍ．ｐ．２２０から２２３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），３．１１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．６２から６．６７（ｍ，１Ｈ），７．７３から７．８０（ｍ，４Ｈ），７．８３から７．８９（ｍ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【００９０】
（合成例１４）
【００９１】
【化２１】
３，４−ジメトキシ−Ｎ−［４−メチル−５−｛３−（フタルイミドオキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］ベンズアミド（０．４７ｇ，０．９８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（７．８ｍＬ）と水（０．８ｍＬ）の混合溶液に、ヘキサカルボニルモリブデン（０．２６ｇ，０．９８ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（２．０５ｍＬ，１４．７ｍｍｏｌ）を加え、２時間加熱還流した。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（１００ｍＬ）を加え酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３００ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製することで、白色固体のＮ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−３，４−ジメトキシ−ベンズアミド（０．２１ｇ，６３％）を得た。
白色固体；ｍ．ｐ．１３１℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８４から１．９４（ｍ，２Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ， ２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８６（ｓ，３Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），６．９０（ｄｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５０から７．５３（ｍ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９２】
（合成例１５）
合成例１４と同様にして、３−フルオロ−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシフタルイミドプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチルベンズアミドを合成した。
白色固体、５９％；ｍ．ｐ．１４２から１５０℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．０９（ｓ，３Ｈ），２．３２（ｄ，ＪＨＦ＝１．８Ｈｚ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２２（ｄｄ，Ｊ＝１０ ａｎｄ １０Ｈｚ，１Ｈ），７．５７から７．６１（ｍ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９３】
（合成例１６）
合成例１４と同様にして、２−クロロ−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
黄色粘張性、４６％；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８２（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．７７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３４から７．４７（ｍ，３Ｈ），７．７８（ｄｄ，Ｊ＝１．８ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９４】
（合成例１７）
合成例１４と同様にして、３−クロロ−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシフタルイミドプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体、５４％；ｍ．ｐ．１１４から１１７℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８１（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．３９（ｄｄ，Ｊ＝８．０ ａｎｄ ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄｄｄ，Ｊ＝１．８， １．８ ａｎｄ ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄｄｄ，Ｊ＝１．８， １．８ ａｎｄ ８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９３（ｄｄ，Ｊ＝１．８ ａｎｄ １．８Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９５】
（合成例１８）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−ヨードベンズアミドを合成した。
黄色粘稠性、５５％；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８６（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９６】
（合成例１９）
合成例１４と同様にして、４−シクロプロピル−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１１８℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ０．７４から０．８１（ｍ，２Ｈ），１．０３から１．１１（ｍ，２Ｈ），１．８４から１．９７（ｍ，３Ｈ），２．１１（ｓ，３Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．１５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９７】
（合成例２０）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（７−ヒドロキシヘプチル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチルベンズアミドを合成した。
白色固体、３２％；ｍ．ｐ．１３５から１４５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．００から１．３９（ｍ，６Ｈ），１．５０から１．６７（ｍ，４Ｈ），２．１９（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．６５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９８】
（合成例２１）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−３−メトキシ−４−メチルベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１２４から１２７℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８２から１．９２（ｍ，５Ｈ），２．２５（ｓ，３Ｈ），２．７７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【００９９】
（合成例２２）
合成例１４と同様にして、４−エトキシ−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１４９から１５３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．８３から１．９４（ｍ，２Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．０９（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１００】
（合成例２３）
合成例１４と同様にして、３−エトキシ−Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メトキシベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１４３から１４４℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），１．８３から１．９４（ｍ，２Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝６．２５Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），４．０３（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０１】
（合成例２４）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシフタルイミドプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ナフタレン−２−カルボキサミドを合成した。
黄色粘張性、６２％；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．７４（ｓ，３Ｈ），１．８１（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４３から７．６１（ｍ，３Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝１．０ ａｎｄ ７．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８６から７．９１（ｍ，１Ｈ），７．９９（ｄｄ，Ｊ＝１．０ ａｎｄ ７．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４４から８．４９（ｍ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０２】
（合成例２５）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝チオフェン−２−カルボキサミドを合成した。
黄色粘稠性、２１％；ｍ．ｐ．１４２から１５０℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．１０から７．１４（ｍ，１Ｈ），７．５７から７．６２（ｍ，１Ｈ），７．７３から７．７５（ｍ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０３】
（合成例２６）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝フラン−２−カルボキサミドを合成した。
黄色粘稠性、１３％；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８３（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．５７から６．５９（ｍ，１Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝１．０ ａｎｄ ３．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５５から７．６０（ｍ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０４】
（合成例２７） Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチル−Ｎ−メチルベンズアミドの合成
【０１０５】
【化２２】
Ｎ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチル−Ｎ−メチルベンズアミド（３００ｍｇ，１．０３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、ヨウ化メチル（１７６ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（１７１ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ）を加え、室温で１２時間反応させた。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（２０ｍＬ）を加え酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製することで、白色固体のＮ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチル−Ｎ−メチルベンズアミド（４６ｍｇ，１５％）を得た。
白色固体；ｍ．ｐ．１６４から１６６℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．７７から１．８８（ｍ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．３９（ｓ，３Ｈ），２．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。ヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０６】
（合成例２８）
合成例１４と同様にして、Ｎ−｛５−（３−アセトキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝−４−メチルベンズアミドを合成した。
茶褐色油状：１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．９０から２．０１（ｍ，２Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．０９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１０７】
（合成例２９） ２，４−ジフルオロ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミドの合成
【０１０８】
【化２３】
［５−｛３−（アセトキシ）プロピル｝チアゾール−２−イル］−２，４−ジフルオロベンズアミド（５１２ｍｇ，１．４４ｍｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（５９７ｍｇ，４．３２ｍｍｏｌ）を加え、３０分加熱還流した。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（２０ｍＬ）を加え酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製することで、黄色固体の２，４−ジフルオロ−｛５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル｝ベンズアミド（９４ｍｇ，２１％）を得た。
黄色油状；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８４から１．９３（ｍ，２Ｈ），２．２５（ｓ，３Ｈ），２．８３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９１から７．１０（ｍ，２Ｈ），８．１２から８．２２（ｍ，１Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１０９】
（合成例３０）
合成例１４と同様にして、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−ヨードベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートを合成した。
黄色粘稠性、３５％；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．３９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．９８（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６１（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１１０】
（合成例３１）
合成例１４と同様にして、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−ブロモベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートを合成した。
黄色固体、５３％；ｍ．ｐ．７６から８０℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．３９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．９８（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ），２．７９（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６１（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１１１】
（合成例３２）
合成例１４と同様にして、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（２，４−ジフルオロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートを合成した。
褐色油状物；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：１．４２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．９９から２．１０（ｍ，２Ｈ），２．２８（ｓ，３Ｈ），２．８４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９２から７．００（ｍ，１Ｈ），７．０１から７．１２（ｍ，１Ｈ），８．１９から８．２９（ｍ，１Ｈ），９．６９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。
【０１１２】
（合成例３３）
合成例１４と同様にして、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−エトキシベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートを合成した。
褐色油状物；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．３９から１．４８（ｍ，６Ｈ），１．９８から２．０９（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．１０（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。
【０１１３】
（合成例３４）
合成例１４と同様にして、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（３−エトキシ−４−メトキシベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートを合成した。
褐色粘稠性；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４２から１．５１（ｍ，６Ｈ），２．０１から２．１２（ｍ，２Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），４．１１（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄｄ，Ｊ＝２．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１１４】
（合成例３５） Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−クロロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートの合成
【０１１５】
【化２４】
Ｏ−エチル−Ｓ−３−（２−アミノ−４−メチルチアゾール−５−イル）プロピルジチオカーボネート（０．７０ｇ，２．５３ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１０ｍＬ）溶液に氷冷下４−クロロベンゾイルクロリド（０．４２ｍＬ，３．２９ ｍｍｏｌ）を滴下した。次いでトリエチルアミン（０．５ｍＬ，７．９８ｍｍｏｌ）のクロロホルム（５ｍＬ）溶液を加え、一晩反応させた。反応終了後、反応混合物を１Ｍ塩酸（２０ｍＬ）で２回洗浄し、飽和食塩水（２０ｍＬ）で２回洗浄して、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製し、Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−クロロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートの白色固体（０．３２９ｇ，３１％）を得た。
白色固体；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．９９から２．０５（ｍ，５Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１１．１８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。
【０１１６】
（合成例３６） Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−メチルベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネートの合成
【０１１７】
【化２５】
Ｏ−エチル−Ｓ−５−オキシヘキシルチオカーボネート（２．０ｇ，９．０８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に臭化銅（ＩＩ）（３．８５ｇ，１７．３ｍｍｏｌ）を加え１時間加熱還流したところ白色の沈澱物が生成した。沈澱物をろ過し、ろ液をエバポレーターで減圧濃縮し、黄色の油状物を得た。この油状物にエタノール（５０ｍＬ）とＮ−４−メチルベンゾイルチオウレア（１．７６ｇ，９．０８ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で８時間反応させた。反応終了後、沈澱物をろ過し、クロロホルム（２０ｍＬ）とエタノール（２０ｍＬ）の混合溶媒で洗浄した。ろ液を合わせて減圧留去し、得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製し、褐色油状のＯ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−メチルベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルチオカーボネート（０．４３６ｇ，１２％）を得た。
褐色油状物；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：１．４２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），２．０１から２．０９（ｍ，５Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１１８】
（合成例３７） Ｓ−３−（２−アミノ−４−メチルチアゾール５−イル）−Ｏ−エチルプロピルジチオカーボネートの合成
【０１１９】
【化２６】
Ｏ−エチル−Ｓ−５−オキシヘキシルチオカーボネート（４．０ｇ，１８．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液に臭化銅（ＩＩ）（７．７０ｇ，３４．６ｍｍｏｌ）を加え１．５時間加熱還流したところ白色の沈澱物が生成した。沈澱物をろ過し、ろ液をエバポレーターで減圧濃縮し、黄色の油状物を得た。この油状物にエタノール（４０ｍＬ）とチオウレア（１．３８ｇ，１８．２ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で８時間反応させた。反応終了後、溶媒を減圧留去し，反応混合物に１Ｍ塩酸（３０ｍＬ）を加え酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製し、得られた白色固体を少量の酢酸エチル／エタノールの混合溶媒で洗浄することによって、白色固体のＯ−エチル−Ｓ−３−（２−アミノ−４−メチルチアゾール−５−イル）プロピルジチオカーボネート（１．５６ｇ，３１％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．８２から２．０２（ｍ，２Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），２．６８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．１５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．６５（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），８．６５（ｂｒ ｓ，２Ｈ）。
【０１２０】
（合成例３８） ４−クロロ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの合成
【０１２１】
【化２７】
Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−クロロベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネート（０．０８ｇ，０．２４１ｍｍｏｌ）のエタノール（１ｍＬ）溶液に２８％アンモニア水（０．８ｍＬ）を加え常温で一晩反応させた。反応終了後、４Ｍ塩酸（１０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製し、４−クロロ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（０．０４３ｇ，５５％）を得た。
白色固体；ｍ．ｐ．１８０から１８３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：１．９９から２．０５（ｍ，５Ｈ），２．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１０．８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。メルカプト基のプロトンは帰属できなかった。
【０１２２】
（合成例３９）
合成例３８と同様にして、２，４−ジフルオロ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
褐色固体；ｍ．ｐ．１５１から１５５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．９８から２．１４（ｍ，２Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ），２．７２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９１から７．００（ｍ，１Ｈ），７．０３から７．１１（ｍ，１Ｈ），８．１５から８．２７（ｍ，１Ｈ），９．８８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。メルカプト基のプロトンは帰属できなかった。
【０１２３】
（合成例４０）
合成例３８と同様にして、４−エトキシ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドを合成した。
褐色固体；ｍ．ｐ．１８０から１８３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），２．０７から２．１４（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｓ，３Ｈ），２．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．０９（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドとメルカプト基のプロトンは帰属できなかった。
【０１２４】
（合成例４１）
合成例３８と同様にして、３−エトキシ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メトキシベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．８９から９４℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．９９から２．１０（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），４．１２（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｄｄ，Ｊ＝１．０ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ），１０．１（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。メルカプト基のプロトンは帰属できなかった。
【０１２５】
（合成例４２） Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドの合成
【０１２６】
【化２８】
Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−メチルベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネート（０．４１６ｇ，１．０５ｍｍｏｌ）のエタノール（４ｍＬ）溶液に２８％アンモニア水（１ｍＬ）を加え常温で一晩反応させた。反応終了後、４Ｍ塩酸（１０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ）で抽出し、有機相を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製し、Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドの白色固体（０．１４３ｇ，４５％）を得た。
白色固体；ｍ．ｐ．１８０から１８３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．９６から２．１４（ｍ，５Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１０．２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。メルカプト基のプロトンは帰属できなかった。
【０１２７】
（合成例４３） ４−ヨード−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの合成
【０１２８】
【化２９】
Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−ヨードベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネート（０．２５ｇ，０．４９ｍｍｏｌ）のエタノール（２ｍＬ）懸濁液に２８％アンモニア水（１ｍＬ）を加え、室温で一晩撹拌した。反応終了後、反応液に１Ｎ塩酸（１０ｍＬ）と酢酸エチル（１０ｍＬ）を加えて抽出し、有機層を水（１０ｍＬ）で洗浄した。得られた有機層に硫酸マグネシウムを加えて乾燥させた後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、４−ヨード−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの淡黄色固体（７１％，０．１６ｇ）を得た。
ｍ．ｐ．１３０から１４０℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．９９（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．０６（ｓ，３Ｈ），２．６７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）。メルカプト基のプロトンとアミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１２９】
（合成例４４） ４−ブロモ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの合成
【０１３０】
【化３０】
Ｏ−エチル−Ｓ−３−［２−（４−ブロモベンゾイルアミノ）−４−メチルチアゾール−５−イル］プロピルジチオカーボネート（０．３０ｇ，０．６５ｍｍｏｌ）のエタノール（２ｍＬ）懸濁液に２８％アンモニア水（１ｍＬ）を加え、室温で一晩撹拌した。反応終了後、反応液に１Ｎ塩酸（１０ｍＬ）と酢酸エチル（１０ｍＬ）を加えて抽出し、有機層を水（１０ｍＬ）で洗浄した。得られた有機層に硫酸マグネシウムを加えて乾燥させた後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製することにより、４−ブロモ−Ｎ−［５−（３−メルカプトプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］ベンズアミドの白色固体（６０％，０．１５ｇ）を得た。
ｍ．ｐ．９９から１０５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．９６（ｔｔ，Ｊ＝７．５ ａｎｄ ７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），２．６７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．５９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）。メルカプト基のプロトンとアミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１３１】
（合成例４５） ４−シクロプロピル−Ｎ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝−Ｎ−メチルチオメチルベンズアミドの合成
【０１３２】
【化３１】
二塩化オキサリル（４１６ｍｇ，３．２８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５ｍＬ）溶液にＤＭＳＯ（１７６ｍｇ，１．２４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（５ｍＬ）溶液を加え、−７８℃で３０分間撹拌した後、４−シクロプロピル−Ｎ−｛４−メチル−５−（３−ヒドロキシプロピル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド（８２８ｍｇ，２．６２ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２０ｍＬ）溶液を滴下した。３０分間撹拌した後に、トリエチルアミンを（１．４６ｇ，１４．４ｍｍｏｌ）を加えて−７８℃で３時間反応させた。反応終了後、反応混合物に１Ｍ塩酸（４０ｍＬ）を加え、クロロホルム（１０ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去した。得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製）で精製することで、黄色油状の４−シクロプロピル−Ｎ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド（２５１ｍｇ，３９％）と黄色油状の４−シクロプロピル−Ｎ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝−Ｎ−メチルチオメチルベンズアミド（３８６ｍｇ，３０％）を得た。
【０１３３】
４−シクロプロピル−Ｎ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド；黄色油状；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ０．７４から０．８０（ｍ，２Ｈ），１．０１から１．０８（ｍ，２Ｈ），１．９１から１．９８（ｍ，４Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．１１（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），９．８２（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１３４】
４−シクロプロピル−Ｎ−メチルチオメチル−Ｎ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミド；黄色油状：１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ０．７２から０．７８（ｍ，２Ｈ），１．００から１．０８（ｍ，２Ｈ），１．８８から１．９６（ｍ，１Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），９．８１（ｓ，１Ｈ）。
【０１３５】
（合成例４６）
合成例４５と同様にして、４−メトキシ−３−エトキシ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
黄色油状；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４６（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，３Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），４．０８（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｓ，１Ｈ），９．８３（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１３６】
（合成例４７）
合成例４５と同様にして、４−メトキシ−３−エトキシ−Ｎ−メチルチオメチル−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１０３℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），２．２０（ｓ，３Ｈ），２．３１（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ），４．１１（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），５．２６（ｓ，２Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．１１から７．１８（ｍ，２Ｈ），９．８１（ｓ，１Ｈ）。
【０１３７】
（合成例４８）
合成例４５と同様にして、４−エトキシ−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
黄色固体；ｍ．ｐ．１１０から１１４℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．４４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），２．０３（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．００（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），４．１０（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），９．８２（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１３８】
（合成例４９）
合成例４５と同様にして、４−メチル−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．１３３から１３５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．０５（ｓ，３Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．８０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），９．８３（ｓ，１Ｈ）。アミドのプロトンは帰属できなかった。
【０１３９】
（合成例５０）
合成例４５と同様にして、４−メチル−Ｎ−メチルチオメチル−｛４−メチル−５−（２−ホルミルエチル）チアゾール−２−イル｝ベンズアミドを合成した。
白色固体；ｍ．ｐ．９３から９９℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ ２．１４（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ），２．４０（ｓ，３Ｈ），２．７８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．０２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ），７．２５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），９．８１（ｓ，１Ｈ）。
【０１４０】
（合成例５１） Ｎ−［５−（３−アミノキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドの合成
【０１４１】
【化３２】
Ｎ−［５−（３−フタルイミドオキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］４−メチルベンズアミド（１．７０ｇ、３．９０ｍｍｏｌ）のエタノール（２０ｍＬ）溶液に、ヒドラジン一水和物（０．４５ｍＬ、８９．９ｍｍｏｌ）を室温にて加え、一晩撹拌した。反応終了後、反応溶液を減圧留去し、得られた混合物を自動設定中圧カラムクロマトグラフィーシステム（山善社製；アミノプロピルシリカゲルを使用）で精製し、Ｎ−［５−（３−アミノキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドの淡黄色油状物（０．９７５ｇ，収率：８２％）を得た。
淡黄色油状物；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．８４から１．９９（ｍ，２Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．４３（ｓ，３Ｈ），２．７６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），５．２８（ｂｒ ｓ，２Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１０．１（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。
【０１４２】
（合成例５２） ８−（２−トルイルアミノ−４−メチルチアゾール−５−イル）オクテン酸の合成
【０１４３】
【化３３】
１０−オキソウンデカン酸（１．０ｇ，４．９９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に臭化銅（ＩＩ）（２．２３ｇ，９．９８ｍｍｏｌ）を加え、３時間加熱還流したところ白色の沈澱物が生成した。沈澱物をろ過し、ろ液をエバポレーターで減圧濃縮し、黄色の油状物を得た。この油状物にＤＭＦ（２０ｍＬ）と４−メチルベンゾイルチオウレア（０．７７５ｇ，３．９９ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で１２時間反応させた。反応終了後反応混合物に１Ｍ塩酸（１００ｍＬ）を加え酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出し、有機層を合わせて水（２００ｍＬ）で２回洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、乾燥剤を濾別し溶媒を減圧留去し、固体を析出させた。得られた固体をエーテルで洗浄することによって、白色固体の８−［２−（４−メチルベンゾイル）アミノ−４−メチルチアゾール−５−イル］オクテン酸（０．２８５ｇ，１５％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：δ １．３０から１．３８（ｍ，６Ｈ），１．５８から１．６４（ｍ，４Ｈ），２．２２（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．６７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとカルボン酸のプロトンは帰属できなかった。
【０１４４】
（合成例５３）
合成例１４と同様にして、Ｎ−［５−（３−ヒドロキシプロピル）−４−メチルチアゾール−２−イル］−４−メチルベンズアミドを合成した。
灰色固体；ｍ．ｐ．１０３から１０５℃；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，ＴＭＳ，ｐｐｍ）：１．８３から１．９５（ｍ，２Ｈ），２．１０（ｓ，３Ｈ），２．４２（ｓ，３Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），３．７１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）。アミドのプロトンとヒドロキシ基のプロトンは帰属できなかった。
【０１４５】
前述の合成方法に準じて、表１から１０に記載のチアゾール誘導体を得た。
【０１４６】
【化３４】
【０１４７】
【表１】
【０１４８】
【表２】
【０１４９】
【表３】
【０１５０】
【表４】
【０１５１】
【表５】
【０１５２】
【表６】
【０１５３】
【表７】
【０１５４】
【表８】
【０１５５】
【表９】
【０１５６】
【表１０】
以下の実施例では、本発明のチアゾール誘導体を活性化基含有マトリックスに固定化し、免疫グロブリンの分析又は精製を行なった。なお、化合物番号は表１から１０記載の化合物番号に対応する。
【０１５７】
固定化されたチアゾール誘導体量は、固定化反応に用いた溶液中のチアゾール誘導体量と固定化反応後に回収された溶液（洗浄液を含み、以下、回収液という）中のチアゾール誘導体量を測定し、比較することで算出した。チアゾール誘導体の濃度は、Ｕ−２９００スペクトロフォトメーター（商品名）（日立製作所製）を用いて前記誘導体の紫外吸収極大波長における吸光度を測定して（以下、吸光度法という）、又は高速液体クロマトグラフィーを用いて前記誘導体の紫外吸収クロマトグラムにおけるピーク面積を測定して（以下、ＨＰＬＣ法という）求めた。ＨＰＬＣ法では、カラムとしてＴＳＫ−ＧＥＬ ＯＤＳ−８０ＴＭ（商品名）（東ソー社製）を用い、溶離液としてアセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸＝４５／５５／０．０５（体積比）（以下、単に溶離液という）を用いた。
【０１５８】
実施例１ 化合物７５のアガロースゲルへの固定化（その１）
Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（以下、ＮＨＳという）で活性化されたアガロースゲルであるＨｉＴｒａｐ ＮＨＳ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ ＨＰカラム（１ｍＬ）（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製、スクシンイミドオキシカルボニル基含量：１０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）、以下、ＨｉＴｒａｐカラムという）を活性化基含有マトリックス充填カラムとして用いた。
【０１５９】
ＨｉＴｒａｐカラムに、まず氷冷した１ｍＭ ＨＣｌを５ｍＬ通液した。コハク酸ジヒドラジドを１００ｍＭになるように０．５Ｍ ＮａＣｌを含む０．２Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．３）に溶解し、その２ｍＬをＨｉＴｒａｐカラムに通液した。１時間静置後、１０ｍＬの０．５Ｍ ＮａＣｌを含む０．２Ｍ 炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．３）を通液した。次に純水１０ｍＬを通液した後、ＤＭＳＯを５ｍＬ通液した。次いで、化合物７５を１０ｍＭになるようにＤＭＳＯに溶解し、その２ｍＬを通液した。２時間静置後、３ｍＬのＤＭＳＯを通液した。次にピリジン−ボランのＤＭＳＯ溶液（２０ｍＭ）２ｍＬを通液し、１４時間静置した後、５ｍＬのＤＭＳＯを通液した。最後にカラムに純水１０ｍＬを通液することで、化合物７５を固定化したゲルを得た。
【０１６０】
化合物７５の固定化量は、カラムに添加した化合物７５の量（２０μｍｏｌ）からカラムから回収された化合物７５の量を減ずることより算出した。吸光度法（検出波長３０６ｎｍ）によって測定した化合物７５の固定化量は７．３μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１６１】
実施例２ 化合物７５を固定化したアガロースゲルを用いた免疫グロブリンの吸脱着
実施例１に記載の方法にて調製した、化合物７５を固定化したＨｉＴｒａｐカラムを、クロマトグラフィー装置であるＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）に取り付け、０．７Ｍ硫酸ナトリウムを含む１０ｍＭリン酸ナトリウム−１０ｍＭクエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）（以下、緩衝液Ａという）を流速１ｍＬ／ｍｉｎで通液してカラムを平衡化した。次に緩衝液Ａに溶解した１ｍｇ／ｍＬヒト血漿由来免疫グロブリン製剤（化血研製）０．５ｍＬをカラムに添加して、緩衝液Ａを１０ｍＬ通液後、緩衝液Ａから１０ｍＭリン酸ナトリウム−１０ｍＭクエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ７．５）への硫酸ナトリウムの濃度勾配クロマトグラフィーを行なった。
【０１６２】
カラムから溶出された免疫グロブリンの検出は、２８０ｎｍにおける吸光度を測定することにより行なった。溶出液は１ｍＬずつ分画し、Ｕ−２９００スペクトロフォトメーター（商品名）（日立製作所製）により各フラクションの２８０ｎｍにおける吸光度を測定し、それらを合算した値をカラムに添加した免疫グロブリンの２８０ｎｍにおける吸光度と比較することにより回収率を算出した。クロマトグラフィーの結果を図１に示す。このクロマトグラフィーにおける免疫グロブリンの回収率は１００％であった。
【０１６３】
吸脱着操作後、０．１Ｍ水酸化ナトリウムを１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。化合物７５を固定化したＨｉＴｒａｐカラムは前記再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【０１６４】
実施例３ 化合物７５のビニルポリマーゲルへの固定化
ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ａｍｉｎｏ−６５０Ｍ（商品名）（東ソー社製、アミノ基含量：８９μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物７５の固定化を行なった。
【０１６５】
０．１Ｍ Ｎ−シクロヘキシル−２−アミノエタンスルホン酸（以下、ＣＨＥＳという）−ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ９．０）とアセトニトリルとの混合溶媒（体積比１：１）に化合物７５を２２ｍＭになるよう溶解し、この溶液９．０ｍＬとＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ａｍｉｎｏ−６５０Ｍゲル２．０ｍＬを混合して振とうした。３０分振とう後、ピリジン−ボランを０．１１ｍＬ（１．１ｍｍｏｌ）添加し、更に２５℃で１６時間振とうし、吸引濾過で固定化反応後のゲルを濾別した。濾別したゲルを５ｍＬのアセトニトリルで５回洗浄することにより、化合物７５を固定化したゲルを得た。なお、この濾液と洗浄液とをあわせたものを回収液とした。
【０１６６】
別途、ピリジン−ボランと化合物７５とを含む溶液を溶離液で希釈し、ＨＰＬＣ法で分析したところ、化合物７５は還元されて化合物６７となっていた。このことに留意して、反応液をＨＰＬＣ法（検出波長３００ｎｍ）で分析した。その結果、回収液中に化合物６７が９０μｍｏｌ存在することが分かった。すなわち、固定化反応によって消費された化合物７５は１０８μｍｏｌであり、化合物７５の固定化量は５４μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１６７】
実施例４ 化合物７５のアガロースゲルへの固定化（その２）
ＥＡＨ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製、アミノ基含量：１２μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物７５の固定化を行なった。
【０１６８】
ＥＡＨ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂゲル３．２ｍＬに、実施例３と同じ組成からなる化合物７５の溶液を５ｍＬ加え、更にピリジン−ボランを０．２９ｍＬ（２．９ｍｍｏｌ）加えた後、２５℃で８時間振とうした。固定化反応後のゲルを吸引濾過で濾別し、そのゲルを５ｍＬのアセトニトリルで５回洗浄することで、化合物７５を固定化したゲルを得た。
【０１６９】
濾液及び洗浄液をあわせた回収液を実施例３と同じ方法で分析した結果、化合物７５の固定化量は２７μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１７０】
実施例５ 化合物９５のビニルポリマーゲルへの固定化
ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｅｐｏｘｙ−６５０Ｍ（商品名）（東ソー社製、エポキシ基含量：５０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物９５の固定化を行なった。
【０１７１】
化合物９５（５０．６ｍｇ）にＤＭＳＯ（５．５ｍＬ）、蒸留水（４．１８ｍＬ）、１Ｍ ＮａＯＨ水溶液（１．３２ｍＬ）を添加して、化合物９５を１５ｍＭ含有する溶液を調製した。この溶液１０ｍＬとＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｅｐｏｘｙ−６５０Ｍゲル３ｍＬを遠沈管中で混合し、４０℃で７０時間振とうした。反応後、遠沈管を１分間遠心（１００×ｇ）し、ゲルと上清を分離した。上清を除いた後、ゲルに１０ｍＬのＤＭＳＯを添加し撹拌混合後、１分間遠心（１００×ｇ）し、ゲルと上清を分離することでゲルの洗浄を行ない、前記操作を３回行なった。反応液上清と洗浄液を混合し、ＤＭＳＯにより４０ｍＬにメスアップしたものを回収液とした。ＤＭＳＯで洗浄した後のゲルに蒸留水（３０ｍＬ）を添加し撹拌混合後、１分間遠心（１００×ｇ）し、ゲルと上清を分離後、上清を吸引除去した。前記操作を５回行ない、化合物９５を固定化したゲルを得た。
【０１７２】
吸光度法（検出波長３４８ｎｍ）によって測定した化合物９５の固定化量は３０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１７３】
実施例６ 化合物９５を固定化したビニルポリマーゲルを用いた免疫グロブリンの吸脱着
実施例５に記載の方法にて調製した、化合物９５を固定化したＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｅｐｏｘｙ−６５０Ｍゲル１ｍＬをＴＲＩＣＯＲＮカラム（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）に充填し、ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）に取り付け、実施例２と同様、０．５ｍｇのヒト血漿由来免疫グロブリン製剤を硫酸ナトリウム濃度勾配のクロマトグラフィーで分離した。クロマトグラフィーの結果を図２に示す。
【０１７４】
吸脱着操作後、０．１Ｍ水酸化ナトリウムを１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。化合物９５を固定化したエポキシトヨパールゲルはこの再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【０１７５】
実施例７ 化合物９５のアガロースゲルへの固定化
Ｅｐｏｘｙ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製、エポキシ基含量：１９から４０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物９５の固定化を行なった。
【０１７６】
７０ｍＭ水酸化ナトリウムとＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドの混合溶媒（体積比１：１）に化合物９５を１６ｍＭになるように溶解し、この溶液６．０ｍＬとＥｐｏｘｙ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂゲル３．１ｍＬを混合して４０℃で２時間振とうした。反応後、ゲルを吸引濾過で濾別し、そのゲルを５ｍＬの前記混合溶媒で５回洗浄した。これらの濾液及び洗浄液をあわせて回収液とした。前記混合溶媒で洗浄後のゲルは更に１０ｍＬの水で２回洗浄することで、化合物９５を固定化したゲルを得た。
【０１７７】
吸光度法（検出波長３０５ｎｍ）によって測定した化合物９５の固定化量は３２μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１７８】
実施例８ 化合物１０７のビニルポリマーゲルへの固定化
ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ａｍｉｎｏ−６５０Ｍ（商品名）（東ソー社製、アミノ基含量：８９μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物１０７の固定化を行なった。
【０１７９】
脱水ＤＭＦ（和光純薬社製）に化合物１０７が２１ｍＭ、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩が４１ｍＭ、ＮＨＳが４２ｍＭになるように溶解し、この溶液１５ｍＬとＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ａｍｉｎｏ−６５０Ｍゲル２．１ｍＬを混合して２５℃で４日間振とうした。反応後、ゲルを吸引濾過で濾別し、５ｍＬのＤＭＦによる洗浄を５回行なった。この濾液と洗浄液とをあわせて回収液とした。洗浄後のゲルを無水酢酸のＤＭＦ溶液（無水酢酸／ＤＭＦ溶液＝１／４（体積比））５ｍＬに懸濁して、２５℃で２時間振とうした。次にゲルを吸引濾過、水洗することにより、化合物１０７を固定化したゲルを得た。
【０１８０】
吸光度法（検出波長３０５ｎｍ）によって測定した化合物１０７の固定化量は１１μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１８１】
実施例９ 化合物１１０のアガロースゲルへの固定化
ＨｉＴｒａｐカラムにＤＭＳＯを５ｍＬ通液した後、化合物１１０が１０ｍＭ、トリエチルアミンが４０ｍＭになるようにＤＭＳＯに溶解した溶液２ｍＬを通液した。１時間静置後、３ｍＬのＤＭＳＯを通液し、未反応の化合物１１０を除去した。反応に用いた化合物１１０溶液のカラムからの漏出液と、洗浄に用いたＤＭＳＯのカラムからの漏出液をあわせて回収液とした。
【０１８２】
化合物１１０の固定化量は、カラムに添加した化合物１１０の量（２０μｍｏｌ）からカラムから回収された化合物１１０の量を減ずることより算出した。固定化前に調製した化合物１１０のＤＭＳＯ溶液及び回収液を、非特許文献４に記載された方法のうち「Ｂ．酸性条件法」に従って適宜希釈し３０６ｎｍにおける吸光度を測定した。この方法より、ＨｉＴｒａｐカラムに固定化された化合物１１０の量は、２．３μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１８３】
実施例１０ 化合物１１０のビニルポリマーゲルへの固定化
ＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｆｏｒｍｙｌ−６５０Ｍ（商品名、東ソー社製、ホルミル基含量６０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ））を活性化基含有マトリックスとして用いて化合物１１０の固定化を行なった。
【０１８４】
０．１Ｍ ＣＨＥＳ−ＮａＯＨ緩衝液（ｐＨ９．０）とアセトニトリルとの混合溶媒（体積比１：１）に化合物１１０を３６ｍＭになるように溶解し、この溶液５．８ｍＬとＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｆｏｒｍｙｌ−６５０Ｍゲル３．０ｍＬを混合して振とうし、３０分後にピリジン−ボラン０．１７ｍＬ（１．７ｍｍｏｌ）を添加して２５℃で１６時間振とうすることで反応後、ゲルを吸引濾過で濾別し、濾別したゲルを５ｍＬのアセトニトリルで５回洗浄した。前記濾液と洗浄液とをあわせたものを回収液とした。前記洗浄後のゲルは更に１０ｍＬの水で２回洗浄することで、化合物１１０を固定化したゲルを得た。
【０１８５】
ＨＰＬＣ法（検出波長２５４ｎｍ）によって測定した化合物１０７の固定化量は４０μｍｏｌ／ｍＬ（ｇｅｌ）であった。
【０１８６】
実施例１１ 化合物１１０を固定化したビニルポリマーゲルを用いた免疫グロブリンの吸脱着
実施例１０に記載の方法にて調製した、化合物１１０を固定化したＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｆｏｒｍｙｌ−６５０Ｍゲル１ｍＬをＴＲＩＣＯＲＮカラムに充填し、ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ ｐｌｕｓ（商品名）（ＧＥヘルスケアバイオサイエンス社製）に取り付け、実施例２と同様にして、０．５ｍｇのヒト血漿由来免疫グロブリン製剤を硫酸ナトリウム濃度勾配のクロマトグラフィーで分離した。クロマトグラフィーの結果を図３に示す。
【０１８７】
吸脱着操作後に０．１Ｍ水酸化ナトリウムを１０ｍＬ通液してカラムの再生を行なった。化合物１１０を固定化したＴＯＹＯＰＥＡＲＬ ＡＦ−Ｆｏｒｍｙｌ−６５０Ｍゲルはこの再生処理によって初期状態に復帰させることができ、繰り返し使用によってもその特性は変化しなかった。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基（−ＯＮＨ−）を表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｍはマトリックスを表す。）で表されるチアゾール誘導体固定化マトリックス。
【請求項２】
Ａｒの置換基が、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、ヒドロキシ基又はシアノ基である請求項１に記載のチアゾール誘導体固定化マトリックス。
【請求項３】
Ａｒが、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、ヒドロキシ基又はシアノ基から選ばれた１つ以上の置換基で置換されていてもよい請求項１に記載のチアゾール誘導体固定化マトリックス。
【請求項４】
一般式（１）
【化２】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基（−ＯＮＨ−）を表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｍはマトリックスを表す。）においてＭのマトリックスがビニル重合体、多糖、金属酸化物であることを特徴とする請求項１から３に記載のチアゾール誘導体固定化マトリックス。
【請求項５】
一般式（１ａ）
【化３】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｒ４はヒドロキシ基、ホルミル基、メルカプト基、カルボキシル基又はアミノキシ基（−ＯＮＨ２）を表す。）で示されるチアゾール誘導体と、活性化基含有マトリックスとを反応させることを特徴とする、一般式（１）
【化４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ、ｎ及びＭは前記と同じ意味を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基（−ＯＮＨ−）を表す。）で示されるチアゾール誘導体固定化マトリックスの製造方法。
【請求項６】
活性化基含有マトリックスの活性化基がスクシンイミドオキシカルボニル基、エポキシ基、ホルミル基、アミノ基、ジチオ−２−ピリジル基、ヒドラジノ基、カルボキシル基のいずれかであることを特徴とする請求項５に記載のチアゾール誘導体固定化マトリックスの製造方法。
【請求項７】
一般式（１）
【化５】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基（−ＯＮＨ−）を表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｍはマトリックスを表す。）で示されるチアゾール誘導体固定化マトリックスを使用し、タンパク質の分析または精製を行なう方法。
【請求項８】
タンパク質が免疫グロブリン、またはこれらの類縁体、フラグメント、融合体であることを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
免疫グロブリンが免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）であることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基（−ＯＮＨ−）を表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｍはマトリックスを表す。）で表されるチアゾール誘導体固定化マトリックス。
【請求項２】
Ａｒの置換基が、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、ヒドロキシ基又はシアノ基である請求項１に記載のチアゾール誘導体固定化マトリックス。
【請求項３】
Ａｒが、ハロゲン原子、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から８のシクロアルコキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルケニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数３から６のアルキニルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアシルオキシ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルチオ基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルフィニル基、置換されていてもよい炭素数１から６のアルキルスルホニル基、置換されていてもよい炭素数１から１２のアルコキシカルボニル基、カルボキシル基、ニトロ基、置換されていてもよいアミノ基、ヒドロキシ基又はシアノ基から選ばれた１つ以上の置換基で置換されていてもよい請求項１に記載のチアゾール誘導体固定化マトリックス。
【請求項４】
一般式（１）
【化２】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基（−ＯＮＨ−）を表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｍはマトリックスを表す。）においてＭのマトリックスがビニル重合体、多糖、金属酸化物であることを特徴とする請求項１から３に記載のチアゾール誘導体固定化マトリックス。
【請求項５】
一般式（１ａ）
【化３】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｒ４はヒドロキシ基、ホルミル基、メルカプト基、カルボキシル基又はアミノキシ基（−ＯＮＨ２）を表す。）で示されるチアゾール誘導体と、活性化基含有マトリックスとを反応させることを特徴とする、一般式（１）
【化４】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ａｒ、ｎ及びＭは前記と同じ意味を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基（−ＯＮＨ−）を表す。）で示されるチアゾール誘導体固定化マトリックスの製造方法。
【請求項６】
活性化基含有マトリックスの活性化基がスクシンイミドオキシカルボニル基、エポキシ基、ホルミル基、アミノ基、ジチオ−２−ピリジル基、ヒドラジノ基、カルボキシル基のいずれかであることを特徴とする請求項５に記載のチアゾール誘導体固定化マトリックスの製造方法。
【請求項７】
一般式（１）
【化５】
（式中、Ｒ１及びＲ２は水素原子又は置換されていてもよい炭素数１から６のアルキル基を表し、Ｒ３は酸素原子、メチレン基、硫黄原子、カルボニル基又はイミノキシ基（−ＯＮＨ−）を表し、Ａｒは置換されていてもよい芳香族基を表し、ｎは１から１２の整数を表し、Ｍはマトリックスを表す。）で示されるチアゾール誘導体固定化マトリックスを使用し、タンパク質の分析または精製を行なう方法。
【請求項８】
タンパク質が免疫グロブリン、またはこれらの類縁体、フラグメント、融合体であることを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
免疫グロブリンが免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）であることを特徴とする請求項８に記載の方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図２】
【図３】
【公開番号】特開２０１１−５１９３４（Ｐ２０１１−５１９３４Ａ）
【公開日】平成２３年３月１７日（２０１１．３．１７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−２０２４６９（Ｐ２００９−２０２４６９）
【出願日】平成２１年９月２日（２００９．９．２）
【出願人】（０００１７３７６２）公益財団法人相模中央化学研究所 (151)
【出願人】（０００００３３００）東ソー株式会社 (1,901)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年３月１７日（２０１１．３．１７）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年９月２日（２００９．９．２）
【出願人】（０００１７３７６２）公益財団法人相模中央化学研究所 (151)
【出願人】（０００００３３００）東ソー株式会社 (1,901)
【Ｆターム（参考）】
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