本発明は、哺乳類、より詳しくは、ヒトＢ７−Ｈ３受容体と免疫反応性のある抗体およびそれらのフラグメント、ならびに特に癌および炎症の治療におけるそれらの使用に関する。よって、本発明は特に、様々なヒト癌に関連する癌細胞に対する免疫系の活性化を媒介し得る、より好ましくは増強し得る、ヒト化Ｂ７−Ｈ３反応性抗体およびそれらの免疫反応性フラグメントに関する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｂ７−Ｈ３の細胞外ドメインと特異的に結合する可変ドメインを含み、該Ｂ７−Ｈ３との結合に関して抗体：ＢＲＣＡ６９Ｄ、ＢＲＣＡ８４ＤまたはＰＲＣＡ１５７のいずれかと競合する単離された抗体、またはその免疫反応性フラグメント。
【請求項２】
（Ａ）ＢＲＣＡ６９Ｄの軽鎖のＣＤＲ₁（配列番号２１）、ＣＤＲ₂（配列番号２３）およびＣＤＲ₃（配列番号２５）と、ＢＲＣＡ６９Ｄの重鎖のＣＤＲ₁（配列番号２９）、ＣＤＲ₂（配列番号３１）およびＣＤＲ₃（配列番号３３）；
（Ｂ）ＢＲＣＡ８４Ｄの軽鎖のＣＤＲ₁（配列番号５）、ＣＤＲ₂（配列番号７）およびＣＤＲ₃（配列番号９）と、ＢＲＣＡ８４Ｄの重鎖のＣＤＲ₁（配列番号１３）、ＣＤＲ₂（配列番号１５）およびＣＤＲ₃（配列番号１７）；または
（Ｃ）ＰＲＣＡ１５７の軽鎖のＣＤＲ₁（配列番号３７）、ＣＤＲ₂（配列番号３９）およびＣＤＲ₃（配列番号４１）と、ＰＲＣＡ１５７の重鎖のＣＤＲ₁（配列番号４５）、ＣＤＲ₂（配列番号４７）およびＣＤＲ₃（配列番号４９）
を含む可変ドメインを含む、請求項１に記載の単離された抗体、またはその免疫反応性フラグメント。
【請求項３】
癌細胞の表面で内因的に発現されたＢ７−Ｈ３と結合する、請求項１又は２に記載の単離された抗体、またはその免疫反応性フラグメント。
【請求項４】
癌細胞の表面で発現されたＢ７−Ｈ３と結合した際に内部移行を受けるＢ７−Ｈ３と結合する、請求項１又は２に記載の単離された抗体、またはその免疫反応性フラグメント。
【請求項５】
ヒト化モノクローナル抗体である、請求項１ないし４のいずれか一項に記載の単離された抗体、またはその免疫反応性フラグメント。
【請求項６】
変異型ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含む改変抗体であり、前記変異型ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域が前記抗体の親のＦｃ領域に関して少なくとも１つのアミノ酸改変を含み、前記アミノ酸改変が、ＦｃγＲとの結合に関する該変異型Ｆｃ領域の親和性または結合力を変更するアミノ酸改変を含み、その結果、前記改変抗体が前記親抗体に関してエフェクター機能の増強を示す、請求項１ないし５のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項７】
前記Ｆｃ領域改変が、
（Ａ）
（１）Ｆ２４３Ｌ；
（２）Ｄ２７０Ｅ；
（３）Ｒ２９２Ｐ；
（４）Ｓ２９８Ｎ；
（５）Ｙ３００Ｌ；
（６）Ｖ３０５Ｉ；
（７）Ａ３３０Ｖ；および
（８）Ｐ３９６Ｌ
からなる群から選択される少なくとも１つの置換；
（Ｂ）
（１）Ｆ２４３ＬとＰ３９６Ｌ；
（２）Ｆ２４３ＬとＲ２９２Ｐ；および
（３）Ｒ２９２ＰとＶ３０５Ｉ
からなる群から選択される少なくとも１つの、２つのアミノ酸残基の置換；
（Ｃ）
（１）Ｆ２４３ＬとＲ２９２ＰとＹ３００Ｌ；
（２）Ｆ２４３ＬとＲ２９２ＰとＶ３０５Ｉ；
（３）Ｆ２４３ＬとＲ２９２ＰとＰ３９６Ｌ；および
（４）Ｒ２９２ＰとＶ３０５ＩとＰ３９６Ｌ
からなる群から選択される少なくとも１つの、３つのアミノ酸残基の置換；
（Ｄ）
（１）Ｆ２４３ＬとＲ２９２ＰとＹ３００ＬとＰ３９６Ｌ；および
（２）Ｆ２４３ＬとＲ２９２ＰとＶ３０５ＩとＰ３９６Ｌ
からなる群から選択される少なくとも１つの、４つのアミノ酸残基の置換；または
（Ｅ）少なくとも、５つのアミノ酸残基：Ｆ２４３ＬとＲ２９２ＰとＹ３００ＬとＶ３０５ＩとＰ３９６の置換
を含む、請求項６に記載の抗体。
【請求項８】
（Ａ）Ｆ２４３ＬとＲ２９２ＰとＹ３００Ｌ；
（Ｂ）Ｌ２３５ＶとＦ２４３ＬとＲ２９２ＰとＹ３００ＬとＰ３９６Ｌ；または
（Ｃ）Ｆ２４３ＬとＲ２９２ＰとＹ３００ＬとＶ３０５ＩとＰ３９６Ｌ
の置換を含む、請求項７に記載の抗体。
【請求項９】
（Ａ）ＢＲＣＡ８４Ｄの軽鎖のＣＤＲ₁（配列番号５）、ＣＤＲ₂（配列番号７）およびＣＤＲ₃（配列番号９）と、ＢＲＣＡ８４Ｄの重鎖のＣＤＲ₁（配列番号１３）、ＣＤＲ₂（配列番号１５）およびＣＤＲ₃（配列番号１７）とを含む可変ドメイン、ならびに
（Ｂ）置換：Ｌ２３５Ｖ、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００ＬおよびＰ３９６Ｌを含むＦｃ領域改変
を含む、請求項８に記載の抗体。
【請求項１０】
キメラ抗体である、請求項９に記載の抗体。
【請求項１１】
ヒト化抗体である、請求項９に記載の抗体。
【請求項１２】
（Ａ）ｈＢＲＣＡ８４Ｄ−２ ＶＬの前記アミノ酸配列（配列番号８９）を有する可変軽鎖と、
（Ｂ）ｈＢＲＣＡ８４Ｄ−２ ＶＨの前記アミノ酸配列（配列番号９９）を有する可変重鎖と、
（Ｃ）置換：Ｌ２３５Ｖ、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００ＬおよびＰ３９６Ｌを有するＦｃ領域
とを含む、請求項１に記載の単離された抗体、またはその免疫反応性フラグメント。
【請求項１３】
Ｂ７−Ｈ３の細胞外ドメインと特異的に結合し、前記Ｂ７−Ｈ３との結合に関して抗体：ＢＲＣＡ６９Ｄ、ＢＲＣＡ８４ＤまたはＰＲＣＡ１５７のいずれかと競合するモノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマ。
【請求項１４】
請求項１ないし１２のいずれか一項に記載の前記単離された抗体、または請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記免疫反応性フラグメントをコードする核酸分子。
【請求項１５】
（Ａ）Ｂ７−Ｈ３との結合に特異的な免疫グロブリンＶＬエピトープ結合ドメイン、およびＢ７−Ｈ３以外の分子との結合に特異的なＶＨエピトープ結合ドメインを含む、ポリペプチド鎖Ｉと、
（Ｂ）Ｂ７−Ｈ３との結合に特異的な免疫グロブリンＶＨエピトープ結合ドメイン、および前記Ｂ７−Ｈ３以外の分子との結合に特異的なＶＬエピトープ結合ドメインを含む、ポリペプチド鎖ＩＩ
とを含み、前記ポリペプチド鎖ＩとＩＩがともに会合して、Ｂ７−Ｈ３および前記Ｂ７−Ｈ３以外の分子と結合可能な機能的エピトープ結合ドメインを形成する、二重親和性再標的化試薬（ＤＡＲＴ（商標））。
【請求項１６】
前記ＤＡＲＴ（商標）が結合し得る前記Ｂ７−Ｈ３以外の分子がハプテンである、請求項１５に記載の二重親和性再標的化試薬（ＤＡＲＴ（商標））。
【請求項１７】
前記ハプテンがフルオレセインイソチオシアネートである、請求項１６に記載の二重親和性再標的化試薬（ＤＡＲＴ（商標））。
【請求項１８】
前記ＤＡＲＴ（商標）が結合し得る前記Ｂ７−Ｈ３以外の分子がＴ細胞受容体またはＮＫＧ２Ｄ受容体である、請求項１５に記載の二重親和性再標的化試薬（ＤＡＲＴ（商標））。
【請求項１９】
前記ＤＡＲＴ（商標）が結合し得る前記Ｂ７−Ｈ３以外の分子が腫瘍関連抗原である、請求項１５に記載の二重親和性再標的化試薬（ＤＡＲＴ（商標））。
【請求項２０】
前記腫瘍関連抗原がＡ３３；ＡＤＡＭ−９；ＡＬＣＡＭ；ＢＡＧＥ；β−カテニン；ＣＡ１２５；カルボキシペプチダーゼＭ；ＣＤ１０３；ＣＤ１９；ＣＤ２０；ＣＤ２２；ＣＤ２３；ＣＤ２５；ＣＤ２７；ＣＤ２８；ＣＤ３６；ＣＤ４０／ＣＤ１５４；ＣＤ４５；ＣＤ４６；ＣＤ５；ＣＤ５６；ＣＤ７９ａ／ＣＤ７９ｂ；ＣＤＫ４；ＣＥＡ；ＣＴＬＡ４；サイトケラチン８；ＥＧＦ−Ｒ；ＥｐｈＡ２；ＥｒｂＢ１；ＥｒｂＢ３；ＥｒｂＢ４；ＧＡＧＥ−１；ＧＡＧＥ−２；ＧＤ２／ＧＤ３／ＧＭ２；ｇｐ１００；ＨＥＲ−２／ｎｅｕ；ヒト乳頭腫ウイルス−Ｅ６；ヒト乳頭腫ウイルス−Ｅ７；インテグリンα−Ｖ−Β−６；ＪＡＭ−３；ＫＩＤ３；ＫＩＤ３１；ＫＳＡ（１７−１Ａ）；ＬＵＣＡ−２；ＭＡＧＥ−１；ＭＡＧＥ−３；ＭＡＲＴ；ＭＵＣ−１；ＭＵＭ−１；Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ；オンコスタチンＭ；ｐ１５；ＰＩＰＡ；ＰＳＡ；ＰＳＭＡ；ＲＯＲ１；ｓＴｎ；ＴＮＦ−β受容体；ＴＮＦ−α受容体；ＴＮＦ−γ受容体；トランスフェリン受容体；およびＶＥＧＦ受容体からなる群から選択される、請求項１９に記載の二重親和性再標的化試薬（ＤＡＲＴ（商標））。
【請求項２１】
請求項１５ないし２０のいずれか一項に記載の前記二重親和性再標的化試薬（ＤＡＲＴ（商標））のポリペプチド鎖をコードする核酸分子。
【請求項２２】
（ｉ）治療上有効な量の請求項１〜１２のいずれか一項に記載の前記単離された抗体、または請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記免疫反応性フラグメント、または請求項１５〜２０のいずれか一項に記載の前記二重親和性再標的化試薬（ＤＡＲＴ（商標））と、（ｉｉ）薬学上許容される担体とを含む、医薬組成物。
【請求項２３】
前記抗体が、
（Ａ）ＢＲＣＡ８４Ｄの軽鎖のＣＤＲ₁（配列番号５）、ＣＤＲ₂（配列番号７）およびＣＤＲ₃（配列番号９）と、ＢＲＣＡ８４Ｄの重鎖のＣＤＲ₁（配列番号１３）、ＣＤＲ₂（配列番号１５）およびＣＤＲ₃（配列番号１７）とを含む可変ドメイン、ならびに
（Ｂ）置換：Ｌ２３５Ｖ、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００ＬおよびＰ３９６Ｌを含むＦｃ領域改変
を含むヒト化抗体である、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記抗体が、
（Ａ）ｈＢＲＣＡ８４Ｄ−２ ＶＬの前記アミノ酸配列（配列番号８９）を有する可変軽鎖と、
（Ｂ）ｈＢＲＣＡ８４Ｄ−２ ＶＨの前記アミノ酸配列（配列番号９９）を有する可変重鎖と、
（Ｃ）置換：Ｌ２３５Ｖ、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００ＬおよびＰ３９６Ｌを有するＦｃ領域
とを含むヒト化抗体である、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
１種以上の付加的抗癌薬をさらに含む、請求項２２ないし２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
前記付加的抗癌薬が化学療法薬、放射線療法薬、ホルモン療法薬、毒素または免疫療法薬である、請求項２２ないし２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記付加的抗癌薬がタキサン、メイタンシノイド、オーリスタチン、カリケアマイシン、アントラサイクリン、ＣＣ−１０６５類似体、ドセタキセル、カテプシン、リシン、ゲロニン、シュードモナス外毒素、ジフテリア毒素、ＲＮアーゼおよび有毒放射性同位元素からなる群から選択される毒素である、請求項２２ないし２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
癌の診断における請求項１ないし１２のいずれか一項に記載の前記単離された抗体、または請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記免疫反応性フラグメント、または請求項１５〜２０のいずれか一項に記載の前記二重親和性再標的化試薬（ＤＡＲＴ（商標））の使用であって、前記単離された抗体、免疫反応性フラグメントまたはＤＡＲＴ（商標）が検出可能に標識されている、使用。
【請求項２９】
前記癌が、副腎腫瘍、ＡＩＤＳ関連癌、胞状軟部肉腫、星状細胞系腫瘍、膀胱癌、骨癌、脳および脊髄癌、転移性脳腫瘍、乳癌、頚動脈小体腫瘍、子宮頚癌、軟骨肉腫、脊索腫、嫌色素性腎細胞癌、明細胞癌腫、結腸癌、結腸直腸癌、皮膚良性線維性組織球腫、線維形成性小円形細胞腫瘍、脳室上衣細胞腫、ユーイング腫瘍、骨外性粘液性軟骨肉腫、線維形成不全骨、線維性骨形成異常、胆嚢または胆管癌、胃癌、妊娠性絨毛性疾患、生殖細胞腫瘍、頭頚部癌、肝細胞癌、膵島細胞腫瘍、カポジ肉腫、腎臓癌、白血病、脂肪腫／良性脂肪性腫瘍、脂肪肉腫／悪性脂肪性腫瘍、肝臓癌、リンパ腫、肺癌、髄芽細胞腫、黒色腫、髄膜腫、多発性内分泌腺腫症、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、神経芽腫、神経内分泌腫瘍、卵巣癌、膵臓癌、甲状腺乳頭癌、副甲状腺腫瘍、小児癌、末梢神経鞘腫瘍、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、前立腺癌、後部ブドウ膜黒色腫、稀な血液疾患、転移性腎臓癌、ラブドイド腫瘍、横紋筋肉腫、肉腫、皮膚癌、軟部組織肉腫、扁平上皮細胞癌、胃癌、滑膜肉腫、精巣癌、胸腺癌、胸腺腫、転移性甲状腺癌および子宮癌の細胞からなる群から選択される癌細胞の存在を特徴とする、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
患者の癌治療のための薬剤の製造における、請求項１ないし１２のいずれか一項に記載の前記単離された抗体、または請求項１ないし５のいずれか一項に記載の前記免疫反応性フラグメント、または請求項１５ないし２０のいずれか一項に記載の前記二重親和性再標的化試薬（ＤＡＲＴ（商標））、または請求項２２ないし２７のいずれか一項に記載の前記医薬組成物の使用。
【請求項３１】
前記癌が、副腎腫瘍、ＡＩＤＳ関連癌、胞状軟部肉腫、星状細胞系腫瘍、膀胱癌、骨癌、脳および脊髄癌、転移性脳腫瘍、乳癌、頚動脈小体腫瘍、子宮頚癌、軟骨肉腫、脊索腫、嫌色素性腎細胞癌、明細胞癌腫、結腸癌、結腸直腸癌、皮膚良性線維性組織球腫、線維形成性小円形細胞腫瘍、脳室上衣細胞腫、ユーイング腫瘍、骨外性粘液性軟骨肉腫、線維形成不全骨、線維性骨形成異常、胆嚢または胆管癌、胃癌、妊娠性絨毛性疾患、生殖細胞腫瘍、頭頚部癌、肝細胞性癌腫、膵島細胞腫瘍、カポジ肉腫、腎臓癌、白血病、脂肪腫／良性脂肪性腫瘍、脂肪肉腫／悪性脂肪性腫瘍、肝臓癌、リンパ腫、肺癌、髄芽細胞腫、黒色腫、髄膜腫、多発性内分泌腺腫症、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、神経芽腫、神経内分泌腫瘍、卵巣癌、膵臓癌、甲状腺乳頭癌、副甲状腺腫瘍、小児癌、末梢神経鞘腫瘍、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、前立腺癌、後部ブドウ膜黒色腫、稀な血液疾患、転移性腎臓癌、ラブドイド腫瘍、横紋筋肉腫、肉腫、皮膚癌、軟部組織肉腫、扁平上皮細胞癌、胃癌、滑膜肉腫、精巣癌、胸腺癌、胸腺腫、転移性甲状腺癌および子宮癌の細胞からなる群から選択される癌細胞の存在を特徴とする、請求項２９ないし３０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項３２】
化学療法、免疫療法、放射線療法、ホルモン療法および手術からなる群から選択される１以上の付加的癌療法の投与をさらに含む、請求項２９ないし３１のいずれか一項に記載の使用。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図２】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図５Ｃ】

【図５Ｄ】

【図５Ｅ】

【図５Ｆ】

【図５Ｇ】

【図５Ｈ】

【図５Ｉ】

【図５Ｊ】

【図５Ｋ】

【図５Ｌ】

【図５Ｍ】

【図５Ｎ】

【図５Ｏ】

【図５Ｐ】

【図５Ｑ】

【図５Ｒ】

【図５Ｓ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図６Ｄ】

【図６Ｅ】

【図６Ｆ】

【図６Ｇ】

【図６Ｈ】

【図６Ｉ】

【図７】

【図８】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１０Ｃ】

【図１０Ｄ】

【図１０Ｅ】

【図１０Ｆ】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７Ａ】

【図１７Ｂ】

【図１７Ｃ】

【図１７Ｄ】

【図１８Ａ】

【図１８Ｂ】

【図１８Ｃ】

【図１９】

【図２０】

【図２１Ａ】

【図２１Ｂ】

【図２１Ｃ】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８Ａ】

【図２８Ｂ】

【図２８Ｃ】

【図２９】

【図３０Ａ】

【図３０Ｂ】

【図３０Ｃ】

【図３１】

【図３２】

【図３３Ａ】

【図３３Ｂ】

【図３４】

【公表番号】特表２０１３−５２０９９４（Ｐ２０１３−５２０９９４Ａ）
【公表日】平成２５年６月１０日（２０１３．６．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５５６１７３（Ｐ２０１２−５５６１７３）
【出願日】平成２３年３月１日（２０１１．３．１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０２６６８９
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／１０９４００
【国際公開日】平成２３年９月９日（２０１１．９．９）
【出願人】（５０４４３８７２７）マクロジェニクス，インコーポレーテッド (23)
【Ｆターム（参考）】