Ｂａｘ媒介性アポトーシスを調節する方法及び組成物
細胞のアポトーシス及び細胞の寿命を調節する方法及び組成物をここに提供する。これらは、加齢に関係する異常や癌を治療又は防止するために用いられよう。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミノ酸残基K317、K338、K539、K542、K544、K553 又は K556から成る群より選択されるアミノ酸残基を含む単離されたKu70たんぱく質又はその部分と、単離された脱アセチル化酵素又はその生物学的活性部分とを含む、組成物。
【請求項２】
前記脱アセチル化酵素がクラスI/II ヒストンデアセチラーゼである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記脱アセチル化酵素がサーチュインである、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記サーチュインがSIRT1である、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記Ku70たんぱく質又はその部分がアミノ酸残基K539 又は K542を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記アミノ酸残基がアセチル化している、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記アミノ酸残基K539 又はK542 がアセチル化しており、前記脱アセチル化酵素がSIRT1である、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
前記Ku70たんぱく質又はその部分と、前記脱アセチル化酵素又はその生物学的活性部分とが複合体を形成する、請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
前記Ku70たんぱく質又はその部分がアミノ酸残基K539 又は K542 を含み、そして前記脱アセチル化酵素がSIRT1である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
Ku70たんぱく質と脱アセチル化酵素との間の相互作用を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項６に記載の組成物を、検査化合物に、Ku70たんぱく質又はその部分と脱アセチル化酵素又はその生物学的活性部分との間の相互作用が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）Ku70たんぱく質又はその部分と脱アセチル化酵素又はその生物学的活性部分との間の相互作用のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのKu70たんぱく質又はその部分と脱アセチル化酵素又はその生物学的活性部分との間の相互作用のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質と脱アセチル化酵素との間の相互作用を調節することの指標である、ステップとを含む、方法。
【請求項１１】
前記脱アセチル化酵素がクラス I/II ヒストンデアセチラーゼである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記脱アセチル化酵素がサーチュインである、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１３】
前記サーチュインがSIRT1である、請求項３に記載の組成物。
【請求項１４】
Ku70たんぱく質の脱アセチル化を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項６に記載の組成物を、検査化合物に、前記Ku70たんぱく質又はその部分の脱アセチル化が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）Ku70たんぱく質又はその部分の脱アセチル化のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのKu70たんぱく質又はその部分の脱アセチル化のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質の脱アセチル化を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項１５】
Ku70たんぱく質のアミノ酸残基K539又はK542の脱アセチル化を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項７に記載の組成物を、検査化合物に、K539又はK542の脱アセチル化が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）K539又はK542の脱アセチル化のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのK539又はK542の脱アセチル化のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質のアミノ酸残基K539又はK542の脱アセチル化を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項１６】
アポトーシスを調節する作用物質を特定するための、請求項１０乃至１５のいずれかに記載の方法であって、細胞のアポトーシスに対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの、前記作用物質の存在下でのアポトーシスの増加又は減少は、前記作用物質がアポトーシスを調節することの指標である、方法。
【請求項１７】
腫瘍の成長又は腫瘍のサイズを阻害する又は減少させる作用物質を特定するための、請求項１０乃至１５のいずれかに記載の方法であって、腫瘍に対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの、前記作用物質の存在下での腫瘍の成長又はサイズの減少は、前記作用物質が腫瘍の成長又は腫瘍のサイズを阻害する又は減少させることの指標である、方法。
【請求項１８】
寿命伸長を調節する作用物質を特定するための、請求項１０乃至１５のいずれかに記載の方法であって、細胞の寿命に対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの、前記作用物質の存在下での寿命の増加又は減少は、前記作用物質が細胞の寿命を調節することの指標である、方法。
【請求項１９】
アミノ酸残基K317、K338、K539、K542、K544、K553 又は K556から成る群より選択されるアミノ酸残基を含む単離されたKu70たんぱく質又はその部分と、単離されたアセチルトランスフェラーゼ又はその生物学的活性部分とを含む、組成物。
【請求項２０】
前記アセチルトランスフェラーゼがCREB結合たんぱく質(CBP)又はp300/CBP-関連因子 (PCAF)である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記Ku70たんぱく質又はその部分がアミノ酸残基K539 又はK542を含む、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
前記Ku70たんぱく質又はその部分と、前記アセチルトランスフェラーゼ又はその生物学的活性部分とが複合体を形成する、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２３】
Ku70たんぱく質とアセチルトランスフェラーゼとの間の相互作用を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項１９に記載の組成物を、検査化合物に、Ku70たんぱく質又はその部分とアセチルトランスフェラーゼ又はその生物学的活性部分との間の相互作用が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）Ku70たんぱく質又はその部分とアセチルトランスフェラーゼ又はその生物学的活性部分との間の相互作用のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのKu70たんぱく質又はその部分とアセチルトランスフェラーゼ又はその生物学的活性部分との間の相互作用のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質とアセチルトランスフェラーゼとの間の相互作用を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項２４】
前記アセチルトランスフェラーゼがCBP 又はPCAFである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
Ku70たんぱく質のアセチル化を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項１９に記載の組成物を、検査化合物に、Ku70たんぱく質のアセチル化が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）Ku70たんぱく質又はその部分のアセチル化のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのKu70たんぱく質又はその部分のアセチル化のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質のアセチル化を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項２６】
前記アセチルトランスフェラーゼがCBP 又はPCAFである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
Ku70のアミノ酸残基K539又はK542のアセチル化を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項２１に記載の組成物を、検査化合物に、K539又はK542のアセチル化が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）アミノ酸残基K539又はK542のアセチル化のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのアミノ酸残基K539又はK542のアセチル化のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質のアミノ酸残基K539又はK542のアセチル化を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項２８】
Ku70たんぱく質のアミノ酸残基K539又はK542のアセチル化を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項１９に記載の組成物を含む細胞を、検査化合物及びアポトーシス性刺激に、前記アポトーシス性刺激が、Ku70たんぱく質又はその部分のK539又はK542のアセチル化を前記検査化合物の非存在下でも誘導する条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）Ku70たんぱく質又はその部分のK539又はK542のアセチル化のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのK539又はK542のアセチル化のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質のアミノ酸残基K539又はK542のアセチル化を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項２９】
前記アポトーシス性刺激が紫外線暴露、電離性放射線、又はスタウロスポリンである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
アポトーシスを調節する作用物質を特定するための、請求項２３乃至２９のいずれかに記載の方法であって、細胞のアポトーシスに対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの前記作用物質の存在下でのアポトーシスの増加又は減少は、前記作用物質がアポトーシスを調節することの指標である、方法。
【請求項３１】
腫瘍の成長又は腫瘍のサイズを阻害する又は減少させるための作用物質を特定するための、請求項２３乃至２９のいずれかに記載の方法であって、腫瘍に対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの前記作用物質の存在下での腫瘍の成長又はサイズの減少は、前記作用物質が腫瘍の成長又は腫瘍のサイズを阻害する又は減少させることの指標である、方法。
【請求項３２】
寿命の伸長を調節する作用物質を特定するための、請求項２３乃至２９のいずれかに記載の方法であって、細胞の寿命に対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの前記作用物質の存在下での寿命の増加又は減少は、前記作用物質が細胞の寿命を調節することの指標である、方法。
【請求項３３】
アミノ酸残基K317、K338、K539、K542、K544、K553 又は K556から成る群より選択されるアセチル化アミノ酸残基を含む、単離されたアセチル化Ku70たんぱく質又はその部分。
【請求項３４】
SEQ ID NO: 2に少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の単離されたKu70たんぱく質であって、アセチル化していないときにはBax又はアセチルトランスフェラーゼと、あるいはアセチル化しているときには脱アセチル化酵素と、相互作用する、単離されたKu70たんぱく質。
【請求項３５】
SEQ ID NO: 2を含む、請求項３４に記載の単離されたKu70たんぱく質。
【請求項３６】
アセチル化残基K539 又は K542を含む、請求項３４に記載の単離されたKu70たんぱく質又はその部分。
【請求項３７】
アミノ酸残基K317、K338、K539、K542、K544、K553 又は K556から成る群より選択されるアセチル化したアミノ酸を含むKu70たんぱく質又はその部分に特異的に結合する抗体。
【請求項３８】
Ku70たんぱく質又はその部分がアセチル化した残基K539 又は K542を含む、請求項３７に記載の抗体。
【請求項３９】
モノクローナル抗体である、請求項３８に記載の抗体。
【請求項４０】
K539、K542、K544、K553、及びK556 から成る群より選択されるリジン残基のアルギニンとの置換を含む変異型Ku70たんぱく質又はその部分をコードする核酸。
【請求項４１】
リジン残基K539 及び／又は K542 のアルギニンとの置換を含む変異型Ku70たんぱく質又はその部分をコードする核酸。
【請求項４２】
請求項４０に記載の核酸にコードされた変異型Ku70たんぱく質又はその部分。
【請求項４３】
請求項４０に記載の核酸を含む細胞。
【請求項４４】
請求項４３に記載の細胞を、変異型Ku70たんぱく質又はその部分が前記細胞で発現するような条件下で培養するステップと、前記変異型Ku70たんぱく質又はその部分を培養物から単離するステップとを含む、変異型Ku70たんぱく質又はその部分を調製する方法。
【請求項４５】
アセチル化Ku70たんぱく質、その変異型、又はその部分、あるいはそれに特異的に結合する抗体、を含む、キット。
【請求項４６】
細胞内でKu70たんぱく質のK539 又は K542 のアセチル化を誘導する、又は、脱アセチル化を阻害する、ステップを含む、細胞内でアポトーシスを誘導する方法。
【請求項４７】
Ku70たんぱく質のK539 又はK542 の脱アセチル化を阻害するステップを含む、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
クラスI/IIデアセチラーゼのたんぱく質又は活性レベルを減少させるステップを含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
サーチュインのたんぱく質又は活性レベルを減少させるステップを含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項５０】
細胞を、サーチュインの活性を阻害する作用物質に接触させるステップを含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記作用物質が、式１５−２４から成る群より選択される式を有する、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
クラスI/IIデアセチラーゼのたんぱく質又は活性レベルを減少させる作用物質に細胞を接触させるステップを更に含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５３】
細胞内のCBP 又は PCAF のたんぱく質又は活性レベルを増加させるステップを含む、請求項４６に記載の方法。
【請求項５４】
Ku70たんぱく質のK539又はK542のアセチル化を誘導する、又は、脱アセチル化を阻害する、作用物質を、必要のある対象に投与するステップを含む、対象の腫瘍の成長又はサイズを減らす方法。
【請求項５５】
サーチュインのたんぱく質レベル又は活性を減らす作用物質を対象に投与するステップを含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
クラスI/II デアセチラーゼのたんぱく質レベル又は活性を減らす作用物質を対象に投与するステップを更に含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
対象の細胞内のKu70たんぱく質のK539 又は K542 のアセチル化のレベルを判定するステップを更に含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５８】
細胞内のKu70たんぱく質のK539又はK542のアセチル化を阻害する、又は、脱アセチル化を誘導する、ステップを含む、細胞のアポトーシスを阻害する方法。
【請求項５９】
細胞内のKu70たんぱく質のK539又はK542の脱アセチル化を誘導するステップを含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項６０】
サーチュインのたんぱく質レベル又は活性を増加させる作用物質に細胞を接触させるステップを含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
作用物質が、式２６乃至２７及び３０乃至３７から成る群より選択される式を有する、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
細胞内のCBP 又はPCAF のたんぱく質又は活性レベルを減らすステップを含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
クラスI/IIデアセチラーゼのたんぱく質レベル又は活性を増す作用物質に細胞を接触させるステップを更に含む、請求項６０に記載の方法。
【請求項６４】
Ku70たんぱく質のK539又はK542のアセチル化を阻害する、又は、脱アセチル化を誘導する、作用物質に細胞を接触させるステップを含む、哺乳動物細胞の寿命を伸長する方法。
【請求項６５】
サーチュインのたんぱく質レベル又は活性を増す作用物質、及び、クラスI/IIデアセチラーゼのたんぱく質レベル又は活性を増す作用物質、に細胞を接触させるステップを含む、細胞の寿命を伸長する方法。
【請求項６６】
Ku70たんぱく質のK539又はK542のアセチル化を誘導する、又は、脱アセチル化を阻害する、作用物質に細胞を接触させるステップを含む、哺乳動物細胞の寿命を減らす方法。
【請求項６７】
サーチュインのたんぱく質レベル又は活性を減らす作用物質、及び、クラスI/IIデアセチラーゼのたんぱく質レベル又は活性を減らす作用物質、に細胞を接触させるステップを含む、細胞の寿命を減らす方法。
【請求項６８】
サーチュイン阻害剤及びクラスI/IIデアセチラーゼ阻害剤を含む医薬組成物。
【請求項１】
アミノ酸残基K317、K338、K539、K542、K544、K553 又は K556から成る群より選択されるアミノ酸残基を含む単離されたKu70たんぱく質又はその部分と、単離された脱アセチル化酵素又はその生物学的活性部分とを含む、組成物。
【請求項２】
前記脱アセチル化酵素がクラスI/II ヒストンデアセチラーゼである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記脱アセチル化酵素がサーチュインである、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記サーチュインがSIRT1である、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記Ku70たんぱく質又はその部分がアミノ酸残基K539 又は K542を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記アミノ酸残基がアセチル化している、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記アミノ酸残基K539 又はK542 がアセチル化しており、前記脱アセチル化酵素がSIRT1である、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
前記Ku70たんぱく質又はその部分と、前記脱アセチル化酵素又はその生物学的活性部分とが複合体を形成する、請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
前記Ku70たんぱく質又はその部分がアミノ酸残基K539 又は K542 を含み、そして前記脱アセチル化酵素がSIRT1である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
Ku70たんぱく質と脱アセチル化酵素との間の相互作用を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項６に記載の組成物を、検査化合物に、Ku70たんぱく質又はその部分と脱アセチル化酵素又はその生物学的活性部分との間の相互作用が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）Ku70たんぱく質又はその部分と脱アセチル化酵素又はその生物学的活性部分との間の相互作用のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのKu70たんぱく質又はその部分と脱アセチル化酵素又はその生物学的活性部分との間の相互作用のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質と脱アセチル化酵素との間の相互作用を調節することの指標である、ステップとを含む、方法。
【請求項１１】
前記脱アセチル化酵素がクラス I/II ヒストンデアセチラーゼである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記脱アセチル化酵素がサーチュインである、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１３】
前記サーチュインがSIRT1である、請求項３に記載の組成物。
【請求項１４】
Ku70たんぱく質の脱アセチル化を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項６に記載の組成物を、検査化合物に、前記Ku70たんぱく質又はその部分の脱アセチル化が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）Ku70たんぱく質又はその部分の脱アセチル化のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのKu70たんぱく質又はその部分の脱アセチル化のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質の脱アセチル化を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項１５】
Ku70たんぱく質のアミノ酸残基K539又はK542の脱アセチル化を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項７に記載の組成物を、検査化合物に、K539又はK542の脱アセチル化が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）K539又はK542の脱アセチル化のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのK539又はK542の脱アセチル化のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質のアミノ酸残基K539又はK542の脱アセチル化を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項１６】
アポトーシスを調節する作用物質を特定するための、請求項１０乃至１５のいずれかに記載の方法であって、細胞のアポトーシスに対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの、前記作用物質の存在下でのアポトーシスの増加又は減少は、前記作用物質がアポトーシスを調節することの指標である、方法。
【請求項１７】
腫瘍の成長又は腫瘍のサイズを阻害する又は減少させる作用物質を特定するための、請求項１０乃至１５のいずれかに記載の方法であって、腫瘍に対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの、前記作用物質の存在下での腫瘍の成長又はサイズの減少は、前記作用物質が腫瘍の成長又は腫瘍のサイズを阻害する又は減少させることの指標である、方法。
【請求項１８】
寿命伸長を調節する作用物質を特定するための、請求項１０乃至１５のいずれかに記載の方法であって、細胞の寿命に対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの、前記作用物質の存在下での寿命の増加又は減少は、前記作用物質が細胞の寿命を調節することの指標である、方法。
【請求項１９】
アミノ酸残基K317、K338、K539、K542、K544、K553 又は K556から成る群より選択されるアミノ酸残基を含む単離されたKu70たんぱく質又はその部分と、単離されたアセチルトランスフェラーゼ又はその生物学的活性部分とを含む、組成物。
【請求項２０】
前記アセチルトランスフェラーゼがCREB結合たんぱく質(CBP)又はp300/CBP-関連因子 (PCAF)である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記Ku70たんぱく質又はその部分がアミノ酸残基K539 又はK542を含む、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
前記Ku70たんぱく質又はその部分と、前記アセチルトランスフェラーゼ又はその生物学的活性部分とが複合体を形成する、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２３】
Ku70たんぱく質とアセチルトランスフェラーゼとの間の相互作用を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項１９に記載の組成物を、検査化合物に、Ku70たんぱく質又はその部分とアセチルトランスフェラーゼ又はその生物学的活性部分との間の相互作用が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）Ku70たんぱく質又はその部分とアセチルトランスフェラーゼ又はその生物学的活性部分との間の相互作用のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのKu70たんぱく質又はその部分とアセチルトランスフェラーゼ又はその生物学的活性部分との間の相互作用のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質とアセチルトランスフェラーゼとの間の相互作用を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項２４】
前記アセチルトランスフェラーゼがCBP 又はPCAFである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
Ku70たんぱく質のアセチル化を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項１９に記載の組成物を、検査化合物に、Ku70たんぱく質のアセチル化が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）Ku70たんぱく質又はその部分のアセチル化のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのKu70たんぱく質又はその部分のアセチル化のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質のアセチル化を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項２６】
前記アセチルトランスフェラーゼがCBP 又はPCAFである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
Ku70のアミノ酸残基K539又はK542のアセチル化を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項２１に記載の組成物を、検査化合物に、K539又はK542のアセチル化が前記検査化合物の非存在下でも可能な条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）アミノ酸残基K539又はK542のアセチル化のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのアミノ酸残基K539又はK542のアセチル化のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質のアミノ酸残基K539又はK542のアセチル化を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項２８】
Ku70たんぱく質のアミノ酸残基K539又はK542のアセチル化を調節する作用物質を特定する方法であって、
（ｉ）請求項１９に記載の組成物を含む細胞を、検査化合物及びアポトーシス性刺激に、前記アポトーシス性刺激が、Ku70たんぱく質又はその部分のK539又はK542のアセチル化を前記検査化合物の非存在下でも誘導する条件下で、接触させるステップと、
（ｉｉ）Ku70たんぱく質又はその部分のK539又はK542のアセチル化のレベルを判定するステップであって、前記検査化合物の非存在下に比較したときの、前記検査化合物の存在下でのK539又はK542のアセチル化のレベルの違いは、前記検査化合物が、Ku70たんぱく質のアミノ酸残基K539又はK542のアセチル化を調節することの指標である、ステップと
を含む、方法。
【請求項２９】
前記アポトーシス性刺激が紫外線暴露、電離性放射線、又はスタウロスポリンである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
アポトーシスを調節する作用物質を特定するための、請求項２３乃至２９のいずれかに記載の方法であって、細胞のアポトーシスに対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの前記作用物質の存在下でのアポトーシスの増加又は減少は、前記作用物質がアポトーシスを調節することの指標である、方法。
【請求項３１】
腫瘍の成長又は腫瘍のサイズを阻害する又は減少させるための作用物質を特定するための、請求項２３乃至２９のいずれかに記載の方法であって、腫瘍に対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの前記作用物質の存在下での腫瘍の成長又はサイズの減少は、前記作用物質が腫瘍の成長又は腫瘍のサイズを阻害する又は減少させることの指標である、方法。
【請求項３２】
寿命の伸長を調節する作用物質を特定するための、請求項２３乃至２９のいずれかに記載の方法であって、細胞の寿命に対する前記作用物質の効果を判定するステップを更に含み、この場合、前記作用物質の非存在下に比較したときの前記作用物質の存在下での寿命の増加又は減少は、前記作用物質が細胞の寿命を調節することの指標である、方法。
【請求項３３】
アミノ酸残基K317、K338、K539、K542、K544、K553 又は K556から成る群より選択されるアセチル化アミノ酸残基を含む、単離されたアセチル化Ku70たんぱく質又はその部分。
【請求項３４】
SEQ ID NO: 2に少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項３３に記載の単離されたKu70たんぱく質であって、アセチル化していないときにはBax又はアセチルトランスフェラーゼと、あるいはアセチル化しているときには脱アセチル化酵素と、相互作用する、単離されたKu70たんぱく質。
【請求項３５】
SEQ ID NO: 2を含む、請求項３４に記載の単離されたKu70たんぱく質。
【請求項３６】
アセチル化残基K539 又は K542を含む、請求項３４に記載の単離されたKu70たんぱく質又はその部分。
【請求項３７】
アミノ酸残基K317、K338、K539、K542、K544、K553 又は K556から成る群より選択されるアセチル化したアミノ酸を含むKu70たんぱく質又はその部分に特異的に結合する抗体。
【請求項３８】
Ku70たんぱく質又はその部分がアセチル化した残基K539 又は K542を含む、請求項３７に記載の抗体。
【請求項３９】
モノクローナル抗体である、請求項３８に記載の抗体。
【請求項４０】
K539、K542、K544、K553、及びK556 から成る群より選択されるリジン残基のアルギニンとの置換を含む変異型Ku70たんぱく質又はその部分をコードする核酸。
【請求項４１】
リジン残基K539 及び／又は K542 のアルギニンとの置換を含む変異型Ku70たんぱく質又はその部分をコードする核酸。
【請求項４２】
請求項４０に記載の核酸にコードされた変異型Ku70たんぱく質又はその部分。
【請求項４３】
請求項４０に記載の核酸を含む細胞。
【請求項４４】
請求項４３に記載の細胞を、変異型Ku70たんぱく質又はその部分が前記細胞で発現するような条件下で培養するステップと、前記変異型Ku70たんぱく質又はその部分を培養物から単離するステップとを含む、変異型Ku70たんぱく質又はその部分を調製する方法。
【請求項４５】
アセチル化Ku70たんぱく質、その変異型、又はその部分、あるいはそれに特異的に結合する抗体、を含む、キット。
【請求項４６】
細胞内でKu70たんぱく質のK539 又は K542 のアセチル化を誘導する、又は、脱アセチル化を阻害する、ステップを含む、細胞内でアポトーシスを誘導する方法。
【請求項４７】
Ku70たんぱく質のK539 又はK542 の脱アセチル化を阻害するステップを含む、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
クラスI/IIデアセチラーゼのたんぱく質又は活性レベルを減少させるステップを含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
サーチュインのたんぱく質又は活性レベルを減少させるステップを含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項５０】
細胞を、サーチュインの活性を阻害する作用物質に接触させるステップを含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記作用物質が、式１５−２４から成る群より選択される式を有する、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
クラスI/IIデアセチラーゼのたんぱく質又は活性レベルを減少させる作用物質に細胞を接触させるステップを更に含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５３】
細胞内のCBP 又は PCAF のたんぱく質又は活性レベルを増加させるステップを含む、請求項４６に記載の方法。
【請求項５４】
Ku70たんぱく質のK539又はK542のアセチル化を誘導する、又は、脱アセチル化を阻害する、作用物質を、必要のある対象に投与するステップを含む、対象の腫瘍の成長又はサイズを減らす方法。
【請求項５５】
サーチュインのたんぱく質レベル又は活性を減らす作用物質を対象に投与するステップを含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
クラスI/II デアセチラーゼのたんぱく質レベル又は活性を減らす作用物質を対象に投与するステップを更に含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
対象の細胞内のKu70たんぱく質のK539 又は K542 のアセチル化のレベルを判定するステップを更に含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５８】
細胞内のKu70たんぱく質のK539又はK542のアセチル化を阻害する、又は、脱アセチル化を誘導する、ステップを含む、細胞のアポトーシスを阻害する方法。
【請求項５９】
細胞内のKu70たんぱく質のK539又はK542の脱アセチル化を誘導するステップを含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項６０】
サーチュインのたんぱく質レベル又は活性を増加させる作用物質に細胞を接触させるステップを含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
作用物質が、式２６乃至２７及び３０乃至３７から成る群より選択される式を有する、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
細胞内のCBP 又はPCAF のたんぱく質又は活性レベルを減らすステップを含む、請求項５９に記載の方法。
【請求項６３】
クラスI/IIデアセチラーゼのたんぱく質レベル又は活性を増す作用物質に細胞を接触させるステップを更に含む、請求項６０に記載の方法。
【請求項６４】
Ku70たんぱく質のK539又はK542のアセチル化を阻害する、又は、脱アセチル化を誘導する、作用物質に細胞を接触させるステップを含む、哺乳動物細胞の寿命を伸長する方法。
【請求項６５】
サーチュインのたんぱく質レベル又は活性を増す作用物質、及び、クラスI/IIデアセチラーゼのたんぱく質レベル又は活性を増す作用物質、に細胞を接触させるステップを含む、細胞の寿命を伸長する方法。
【請求項６６】
Ku70たんぱく質のK539又はK542のアセチル化を誘導する、又は、脱アセチル化を阻害する、作用物質に細胞を接触させるステップを含む、哺乳動物細胞の寿命を減らす方法。
【請求項６７】
サーチュインのたんぱく質レベル又は活性を減らす作用物質、及び、クラスI/IIデアセチラーゼのたんぱく質レベル又は活性を減らす作用物質、に細胞を接触させるステップを含む、細胞の寿命を減らす方法。
【請求項６８】
サーチュイン阻害剤及びクラスI/IIデアセチラーゼ阻害剤を含む医薬組成物。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【公表番号】特表２００８−５０３４７９（Ｐ２００８−５０３４７９Ａ）
【公表日】平成２０年２月７日（２００８．２．７）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−５１６７５５（Ｐ２００７−５１６７５５）
【出願日】平成１７年６月１６日（２００５．６．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０２１３７２
【国際公開番号】ＷＯ２００６／００７４１１
【国際公開日】平成１８年１月１９日（２００６．１．１９）
【出願人】（５９２２５７３１０）プレジデント・アンド・フェロウズ・オブ・ハーバード・カレッジ (31)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２０年２月７日（２００８．２．７）
【国際特許分類】
【出願日】平成１７年６月１６日（２００５．６．１６）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００５／０２１３７２
【国際公開番号】ＷＯ２００６／００７４１１
【国際公開日】平成１８年１月１９日（２００６．１．１９）
【出願人】（５９２２５７３１０）プレジデント・アンド・フェロウズ・オブ・ハーバード・カレッジ (31)
【Ｆターム（参考）】
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