本明細書は、加齢関連状態または代謝障害の予防または処置するための方法、キットおよび組成物に関する。本明細書の融合ポリペプチドは、ＦＧＦ２３またはその活性なフラグメントを含む。１つの態様において、融合ポリペプチドは、（ａ）線維芽細胞増殖因子２３（ＦＧＦ２３）またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、ＦＧＦ２３が、Ｑ１５６、Ｃ２０６およびＣ２４４の１つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、および（ｂ）減少したＦｃ−ガンマ−受容体に対する親和性および／もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたＦｃフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも１つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望により（ｃ）リンカーを含む。クロトー融合タンパク質は、種々の加齢関連状態および代謝障害の処置および予防において有用である。別の態様において、融合ポリペプチドは、ＦＧＦ（例えば、ＦＧＦ２３）またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および修飾されたＦｃフラグメントまたはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含む。融合ポリペプチドの種々の態様において、ＦＧＦ２３は、凝集およびプロテアーゼ介在開裂を減少させる変異を有する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）線維芽細胞増殖因子２３（ＦＧＦ２３）またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、ＦＧＦ２３が、Ｑ１５６、Ｃ２０６およびＣ２４４の１つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、および（ｂ）減少したＦｃ−ガンマ−受容体に対する親和性および／もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたＦｃフラグメント、またはクロトー(Klotho)タンパク質の少なくとも１つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望により（ｃ）リンカーを含む、融合ポリペプチド。
【請求項２】
（ａ）のポリペプチドが、（ｂ）のポリペプチドのＮ−末端に作動可能に連結している、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項３】
（ｂ）のポリペプチドが、（ａ）のポリペプチドのＮ−末端に作動可能に連結している、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項４】
（ａ）のポリペプチドおよび（ｂ）のポリペプチドが、ポリペプチドリンカーにより連結している、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項５】
ポリペプチドリンカーが、配列番号：１１、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号：１５、配列番号：１６、配列番号：１７および配列番号：１８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項４に記載の融合ポリペプチド。
【請求項６】
ポリペプチドリンカーが、配列番号：１２、配列番号：１３、配列番号：１４、配列番号：１５、配列番号：１６、配列番号：１７および配列番号：１８からなる群から選択されるアミノ酸配列の少なくとも１、最大約３０の繰り返しを含む、請求項４に記載の融合ポリペプチド。
【請求項７】
（ａ）のポリペプチドが、該ポリペプチドリンカーのＮ−末端にペプチド結合により連結しており、（ｂ）のポリペプチドが、該ポリペプチドリンカーのＣ−末端にペプチド結合により連結している、請求項４に記載の融合ポリペプチド。
【請求項８】
（ａ）のポリペプチドが、該ポリペプチドリンカーのＣ−末端にペプチド結合により連結しており、（ｂ）のポリペプチドが、該ポリペプチドリンカーのＮ−末端にペプチド結合により連結している、請求項４に記載の融合ポリペプチド。
【請求項９】
クロトータンパク質の細胞外サブドメインが、ＫＬ−Ｄ１ドメインまたはＫＬ−Ｄ２ドメインである、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項１０】
（ａ）のポリペプチドが、クロトータンパク質の少なくとも２つの細胞外サブドメインを含む、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項１１】
クロトータンパク質の少なくとも２つの細胞外サブドメインが、タンデムリピートにおける少なくとも２つのＫＬ−Ｄ１ドメインである、請求項１０に記載の融合ポリペプチド。
【請求項１２】
クロトータンパク質の少なくとも２つの細胞外サブドメインが、タンデムリピートにおける少なくとも２つのＫＬ−Ｄ２ドメインである、請求項１０に記載の融合ポリペプチド。
【請求項１３】
クロトータンパク質の少なくとも２つの細胞外サブドメインが、ＫＬ−Ｄ１ドメインおよびＫＬ−Ｄ２ドメインを含む、請求項１０に記載の融合ポリペプチド。
【請求項１４】
（ａ）のポリペプチドが、クロトータンパク質の細胞外ドメインである、請求項１に記載の融合ポリペプチド
【請求項１５】
シグナルペプチドをさらに含む、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項１６】
シグナルペプチドがクロトーシグナルペプチドである、請求項１５に記載の融合ポリペプチド。
【請求項１７】
シグナルペプチドがＩｇＧシグナルペプチドである、請求項１５に記載の融合ポリペプチド。
【請求項１８】
線維芽細胞増殖因子受容体に特異的に結合する、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項１９】
クロトータンパク質がアルファ−クロトーである、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項２０】
クロトータンパク質がベータ−クロトーである、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項２１】
線維芽細胞増殖因子が、線維芽細胞増殖因子−２３（ＦＧＦ２３）または線維芽細胞増殖因子−２３変異体（Ｒ１７９Ｑ）である、請求項１９に記載の融合ポリペプチド。
【請求項２２】
線維芽細胞増殖因子が、線維芽細胞増殖因子−１９または線維芽細胞増殖因子−２１である、請求項２０に記載の融合ポリペプチド。
【請求項２３】
配列番号：５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７または６８のアミノ酸配列と９５％以上同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項２４】
配列番号：５８または配列番号：６８のアミノ酸配列を有する、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項２５】
ＦｃＬＡＬＡを含む、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項２６】
請求項１に記載の融合ポリペプチドおよび薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２７】
請求項１に記載の融合ポリペプチドをコードする配列を含む核酸。
【請求項２８】
請求項２７に記載の核酸を含む宿主細胞。
【請求項２９】
請求項２７に記載の核酸を含むベクター。
【請求項３０】
（ａ）線維芽細胞増殖因子２３（ＦＧＦ２３）またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、ＦＧＦ２３が、Ｑ１５６、Ｃ２０６およびＣ２４４の１つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、および（ｂ）減少したＦｃ−ガンマ−受容体に対する親和性および／もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたＦｃフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも１つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望により（ｃ）リンカーを含む、融合ポリペプチドを含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む、個体における加齢関連状態を処置または予防するための方法。
【請求項３１】
加齢関連状態が、サルコペニア、皮膚萎縮、筋肉疲労、脳萎縮、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、肺気腫、骨粗鬆症、骨関節症、免疫不全、高血圧、認知症、ハンチントン病、アルツハイマー病、白内障、加齢黄斑変性症、前立腺癌、卒中、期待寿命の低下(diminished life expectancy)、記憶障害、しわ、腎機能障害および加齢性難聴からなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
クロトータンパク質がアルファクロトータンパク質である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
加齢関連状態が筋肉疲労であり、クロトータンパク質がアルファクロトータンパク質であり、線維芽細胞増殖因子が線維芽細胞増殖因子２３である、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
（ａ）線維芽細胞増殖因子２３（ＦＧＦ２３）またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、ＦＧＦ２３が、Ｑ１５６、Ｃ２０６およびＣ２４４の１つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、および（ｂ）減少したＦｃ−ガンマ−受容体に対する親和性および／もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたＦｃフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも１つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望により（ｃ）リンカーを含む、融合ポリペプチドを含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む、個体における代謝障害を処置または予防するための方法。
【請求項３５】
代謝障害が、ＩＩ型糖尿病、メタボリック・シンドローム、高血糖および肥満からなる群から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
融合ポリペプチドが、（ａ）ベータ−クロトータンパク質の少なくとも１つの細胞外サブドメインを含むポリペプチド、および（ｂ）線維芽細胞増殖因子２１を含むポリペプチドを含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
（ａ）線維芽細胞増殖因子２３（ＦＧＦ２３）またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、ＦＧＦ２３が、Ｑ１５６、Ｃ２０６およびＣ２４４の１つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、および（ｂ）減少したＦｃ−ガンマ−受容体に対する親和性および／もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたＦｃフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも１つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望により（ｃ）リンカーを含む、融合ポリペプチドを含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む、個体における高リン血症または石灰沈着症を処置または予防するための方法。
【請求項３８】
融合ポリペプチドが、（ａ）アルファクロトータンパク質の少なくとも１つの細胞外サブドメインを含むポリペプチド、および（ｂ）線維芽細胞増殖因子２３を含むポリペプチドを含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
（ａ）線維芽細胞増殖因子２３（ＦＧＦ２３）またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、ＦＧＦ２３が、Ｑ１５６、Ｃ２０６およびＣ２４４の１つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、および（ｂ）減少したＦｃ−ガンマ−受容体に対する親和性および／もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたＦｃフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも１つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望により（ｃ）リンカーを含む、融合ポリペプチドを含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む、個体における慢性腎臓疾患または慢性腎不全を処置または予防するための方法。
【請求項４０】
クロトータンパク質がアルファクロトータンパク質である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
（ａ）線維芽細胞増殖因子２３（ＦＧＦ２３）またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、ＦＧＦ２３が、Ｑ１５６、Ｃ２０６およびＣ２４４の１つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、および（ｂ）減少したＦｃ−ガンマ−受容体に対する親和性および／もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたＦｃフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも１つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望により（ｃ）リンカーを含む、融合ポリペプチドを含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む、個体における癌を処置または予防するための方法。
【請求項４２】
癌が乳癌である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
クロトータンパク質がアルファクロトータンパク質である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
クロトータンパク質がヒトクロトータンパク質である、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項４５】
筋萎縮の処置または予防における使用のための、請求項１に記載の融合ポリペプチド。
【請求項４６】
配列番号：４７または配列番号：４９の可溶性クロトー融合タンパク質を含む治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む（本質的にからなる、またはからなる）、筋萎縮を処置または予防する方法。
【請求項４７】
（ａ）線維芽細胞増殖因子２３（ＦＧＦ２３）またはその機能的に活性な変異体もしくは誘導体を含むポリペプチドであって、ＦＧＦ２３が、Ｑ１５６、Ｃ２０６およびＣ２４４の１つ以上の位置で変異を有するポリペプチド、および（ｂ）減少したＦｃ−ガンマ−受容体に対する親和性および／もしくは増加した血清半減期を有する修飾されたＦｃフラグメント、またはクロトータンパク質の少なくとも１つの細胞外サブドメインを含むポリペプチドのいずれか、またはそれらの機能的に活性な変異体もしくは誘導体、および、所望により（ｃ）リンカーを含む、治療有効用量の医薬組成物を必要とする個体に投与することを含む（本質的にからなる、またはからなる）、筋萎縮を処置または予防する方法。

【図４】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０Ａ】

【図１０Ｂ】

【図１１】

【図１２】

【公表番号】特表２０１３−５１７７８１（Ｐ２０１３−５１７７８１Ａ）
【公表日】平成２５年５月２０日（２０１３．５．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５５０４３７（Ｐ２０１２−５５０４３７）
【出願日】平成２３年１月２７日（２０１１．１．２７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２０１１／０５１１１２
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０９２２３４
【国際公開日】平成２３年８月４日（２０１１．８．４）
【出願人】（５０４３８９９９１）ノバルティス　アーゲー (806)
【Ｆターム（参考）】