ＦＴＹ７２０のハロゲン化誘導体
新たなヨードまたはブロモ化合物、ならびにＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害のための診断薬および造影剤としてのそれらの使用が提供される。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物、特に新規放射性化合物、それらの調製、ならびに自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患、例えば多発性硬化症などの、Ｓ１Ｐ受容体に関連する疾患または障害の分野における造影技術および診断ツールのための放射性トレーサー／マーカーとしてのこのような新規放射性化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
多発性硬化症（ＭＳ）は、若年成人における神経学的障害の主要原因であり、最も多い中枢神経系の脱髄性障害である。ＭＳは、いくつかの形態をとり、ほとんどすべての神経学的症状が出現する可能性がある。こうした症状は、不連続の発作において（再発型）、または時間とともに徐々に増大しながら（進行型）、出現する。発作の中間で症状は消失することもあるが、特に疾患が進行するにつれて永続的な神経学的障害が出現することが多い。ＭＳの徴候および症状は、多くの他の医学的問題に類似している可能性があるので、この疾患は診断するのが困難である。診断過程を容易にし、標準化するために、脱髄領域（ＭＳ病変またはプラーク）を視覚化し追跡するための脳および脊椎の神経造影分析および磁気共鳴造影（ＭＲＩ）を含む診断基準が確立されている。
しかし、現在のところ、ＭＳに対して完全に特異的である診断検査は存在せず、生検または死後検査のみが、絶対的に確実な診断をもたらすことができる。したがって、多発性硬化症を診断するのに有効な方法が医学において大いに必要とされている。
【０００３】
非侵襲性の核造影技術は、実験動物、患者および志願者を含む生存対象の生理学および生化学に関する情報を得るのに使用することができる。これらの技術は、生存対象に投与された放射性トレーサーから放出される放射線を検出できる造影装置の使用に依拠する。得られた情報を再構成して、放射性トレーサーの分布および／または濃度を時間の関数として明らかにする平面画像および断層画像を提供することができる。多発性硬化症、脳疾患または脱髄性疾患にとってとりわけ興味深いこのような技術の例は、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、三次元画像を作り出す核医学造影技術、または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、ガンマ線を使用する核医学断層造影技術である。
【０００４】
これらの技術を使用するための要件の１つが、適切なトレーサーを利用できることである。このようなトレーサーは、例えば、特定の臓器または組織中に蓄積することができ、そのため、投与後にトレーサーを視覚化すると、これらの組織または臓器を視覚化することを可能にする。あるいは、トレーサーは、疾患または障害の場合に（例えば、このような特定の受容体がこれらの疾患または障害に関連している場合に）分布される、または何らかの形で変更される特徴的な活性（例えば、特定の受容体に対する結合力を有する）を有することができ、そのため、体中のトレーサーを視覚化すると、このような疾患または障害を検出し、段階付け、または追跡することが可能になる。視覚化するため、その化合物を放射性標識する。したがって、放射性標識は、その化合物の特定の特性を変えないことが必須である。
【０００５】
多くの疾患または障害は、スフィンゴシン１−リン酸（Ｓ１Ｐ）の受容体に何らかの形で関連していることが知られているか、または推測されている。Ｓ１Ｐは、増殖、細胞骨格の組織化などの多様な細胞応答を仲介し、免疫細胞の輸送、血管の恒常性、または中枢神経系における細胞間情報伝達の調節などの現象に関連している生物活性のあるスフィンゴ脂質である。Ｓ１Ｐは、体液および組織中に様々な濃度で含まれ、炎症部位での多面発現性メディエーターの過剰産生は、種々の病理学的状態に関与している可能性がある。遺伝子欠損研究および逆薬理学は、Ｓ１Ｐの多くの効果が５種のＧタンパク質共役型Ｓ１Ｐ受容体サブタイプ（Ｓ１Ｐ受容体）を介して仲介されるという証拠を提供した。受容体サブタイプＳ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ２およびＳ１Ｐ３は、広範に発現され、心血管系で優位な受容体である。Ｓ１Ｐ１は、また、リンパ球上の優位な受容体であり、二次リンパ器官からのそれらの放出を調節する。Ｓ１Ｐ４受容体はリンパ系で、Ｓ１Ｐ５は中枢神経系（ＣＮＳ）の白質路中で発現される。
【０００６】
合成リガンドとこれらのＳ１Ｐ受容体との相互作用は、広範な治療的用途のための新規な戦略を提供する。
【０００７】
プロトタイプのＳ１Ｐ受容体モジュレーター、ＦＴＹ７２０（フィンゴリモド、２−アミノ−２−［２−（４−オクチルフェニル）エチル］プロパン−１，３−ジオール）は、５種のＳ１Ｐ受容体サブタイプ中の４種を標的とし、リンパ球性および内皮性Ｓ１Ｐ１を介するリンパ球輸送、ならびにおそらくはさらなるＳ１Ｐ受容体サブタイプによる他の炎症過程を調節するようにいくつかのレベルで作用することができる。ＦＴＹ７２０は、Ｓ１Ｐ１（０．３ｎＭ）、Ｓ１Ｐ４（０．６ｎＭ）およびＳ１Ｐ５（０．３ｎＭ）に高い親和性で、Ｓ１Ｐ３（３．１ｎＭ）にはより低い約１０分の１の親和性で結合するが、Ｓ１Ｐ２には結合しない。進行中の臨床試験は、ＦＴＹ７２０が再発性−寛解性の多発性硬化症の効果的な治療を提供できることを指摘している（例えば、「ＦＴＹ７２０療法は多発性硬化症におけるＴ細胞部分集合に対して種々の効果を発揮する（FTY720 therapy exerts differential effects on T cell subsets in multiple sclerosis）」Mehling Mら、Neurology.2008年10月14日;71(16):1261〜7）中に記載されている）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ＦＴＹ７２０の治療作用をさらに明らかにするために、例えば、その薬物動態および患者での臓器内分布を定量化するために、該薬物を模倣するのに使用され得る、ＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体を調製する必要もある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
驚くべきことに、本発明者らは、放射性同位体であってもよい原子を含有するＦＴＹ７２０誘導体を特定した。このような誘導体は、ＦＴＹ７２０の薬物動態および物理化学的活性を模倣することができる。例えば、それらの誘導体は、ＦＴＹ７２０の次の特性：臓器内分布、Ｓ１Ｐ受容体に対する親和性および選択性、リン酸化の速度論のうちの１つまたは複数を模倣することができる。
【００１０】
ＦＴＹ７２０の特性から考えて、トレーサーまたは造影剤として使用することのできる、すなわち、１つまたは複数の放射性同位元素を導入してもＦＴＹ７２０の特性を模倣することのできるＦＴＹ７２０誘導体を開発する必要がある。
【００１１】
ヨウ素および臭素（それぞれ、約１２７および８０Ｄａの原子量を有する）は、特にＦＴＹ７２０（分子量は３０７．５）に対比して著しく重い原子である。したがって、化合物の物理化学的および薬物動態学的特性を変化させると予想されるこのようなハロゲン原子の導入にもかかわらず、ハロゲン原子を導入しても同様の薬物動態学的特性を維持しながらＦＴＹ７２０に近い親和性および選択性のプロフィールでＳ１Ｐ受容体に結合することのできるＦＴＹ７２０誘導体を調製することが可能であることは驚くべきことである。放射性標識の後、これらの化合物はインビトロおよびインビボでの造影用途のために使用することができる。同位体で適切に標識されている場合、これらの薬剤は、Ｓ１Ｐ受容体の選択的標識のための、例えばサブタイプＳ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５の少なくとも１種のための組織病理学的標識剤、造影剤、および／またはバイオマーカーとして貴重な特性を提示する。より詳細には、本発明の化合物は、Ｓ１Ｐ受容体をインビトロまたはインビボで標識するための、とりわけサブタイプＳ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５受容体の少なくとも１種をインビトロまたはインビボで標識するためのマーカーまたは放射性トレーサーとして有用である。
【００１２】
さらに、これらの化合物は、おそらくは、Ｓ１Ｐ受容体に対するそれらの親和性とは無関係である、ミエリンシート中への挿入などの機構によって、ミエリン中に蓄積する傾向がある。それゆえ、それらの化合物は、ミエリンシートに異常のある疾患および障害における、例えば脱髄性疾患におけるミエリンを造影するのにも適している。
【００１３】
本発明の化合物中に組み込むことのできる適切な放射性核種としては、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒまたは７６Ｂｒが挙げられる。化合物中に組み込むべき放射性核種の選択は、具体的な分析用途または薬学的用途によって決まる。したがって、インビトロでＳ１Ｐ受容体を標識する場合、および競合アッセイの場合には、１２５Ｉまたは１３１Ｉを組み込んだ化合物が好ましい。本発明の特定の実施形態において、診断および研究用の造影剤（陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ））の場合には、それぞれ１２４Ｉまたは１２３Ｉを組み込んだ化合物が好ましい。
【００１４】
これらのトレーサーは、組織断面中のＳ１Ｐ受容体をインビトロまたはインビボで造影するために、例えばＳ１Ｐ受容体に対して親和性を有する化合物の受容体占有率を分析するために使用することができ、したがって、このような化合物の潜在的な治療的用途を評価することができる。
【００１５】
このようなトレーサーは、また、Ｓ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす疾患および障害、例えば自己免疫疾患または多発性硬化症などの脱髄性疾患を診断または段階付けるために使用することができる。それらは、また、Ｓ１Ｐ受容体との相互作用を介して作用する薬物での治療による利益を受けやすい患者集団を評価するのに、または特定の患者集団におけるＦＴＹ７２０の分布を推定するのに使用することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明の化合物
本発明は、ＦＴＹ７２０の新たな誘導体、とりわけＦＴＹ７２０の新たな放射性誘導体、すなわち、ＦＴＹ７２０の放射性標識誘導体、診断および治療的用途における医学的画像化のためのトレーサーとしてのＦＴＹ７２０の放射性標識誘導体の使用を提供する。
【００１７】
前述で定義したように、「ＦＴＹ７２０の誘導体」は、ＦＴＹ７２０またはＦＴＹ７２０−リン酸塩に同一または類似した構造を有し、さらに少なくとも１つのヨウ素または臭素原子、例えば、ヨウ素または臭素の少なくとも１つの放射性同位体を含む化合物を指す。
【００１８】
ＦＴＹ７２０は、下記に示す通りの２−アミノ−２−［２−（４−オクチルフェニル）エチル］プロパン−１，３−ジオールである：
【００１９】
【化１】
【００２０】
ＦＴＹ７２０−リン酸塩は、下記に示す通りのＦＴＹ７２０のリン酸化された形態を指す：
【００２１】
【化２】
【００２２】
用語「ＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体」および「本発明の放射性標識された化合物」は、放射性である、すなわち少なくとも１つのヨウ素または臭素原子が、ヨウ素または臭素の放射性同位体で、例えば対応する放射性同位体で置換されている、例えば置き換えられている、本明細書に記載の通りのＦＴＹ７２０誘導体を指す。すなわち、本発明の放射性標識された化合物は、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子、例えば１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含むことができる。
【００２３】
本発明によるＦＴＹ７２０誘導体、およびＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体は、式Ｉの化合物である：
【００２４】
【化３】
［式中、
Ｘａは、Ｃ１〜１０アルキルまたはＯＣ１〜９アルキル、例えばＣ８アルキル、例えばｎ−オクチルであり、
Ｒ１は、ＨもしくはＣ１〜６アルキル、またはＰＯ３Ｈ２であり、
ここで、少なくとも１つの水素原子、例えば、炭素原子に連結された少なくとも１つの水素原子は、ヨウ素または臭素原子で置き換えられている］。
【００２５】
式ＩのＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体において、少なくとも１つの水素原子、例えば、炭素原子に連結された少なくとも１つの水素原子は、ヨウ素または臭素の放射性同位体で、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される原子で、例えば１２３Ｉまたは１２４Ｉで処理、例えば、置き換えられる。
特定の実施形態において、式ＩのＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体は、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を、例えば、１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有し、例えば、１２３Ｉまたは１２４Ｉを含有する。
【００２６】
好ましくは、放射性同位体で置換される、例えば置き換えられる水素原子は放射性標識される炭素原子に連結されている。
【００２７】
ヨウ素または臭素原子は、分子中のアリール環上の置換基として組み込むことができ、この場合、該誘導体は、「ヨウ素化アリールＦＴＹ７２０誘導体」または「臭素化アリールＦＴＹ７２０誘導体」と呼ばれる。このようなアリールＦＴＹ７２０誘導体は、１つまたは複数のヨウ素または臭素原子を、例えばヨウ素または臭素の少なくとも１種の放射性同位体を含有することができる。
【００２８】
本発明は、式Ｉａの化合物、例えば、放射性標識された化合物を提供する：
【００２９】
【化４】
［式中、
Ｒ１は、前述で定義した通りであり、
Ａ１およびＢ１の少なくとも一方は、Ｉ（ヨウ素）またはＢｒであり、他方はＨであり、
Ｘ１は、Ｃ１〜１０アルキルまたはＯＣ１〜９アルキルであり、例えば、Ｘ１はＣ８アルキルである］。
【００３０】
１つの特定の実施形態において、Ｒ１は、ＨまたはＰＯ３Ｈ２である。
【００３１】
別の実施形態において、Ｘ１は、ｎ−オクチルまたはｎ−ヘプチルオキシである。
例えば、Ｒ１はＨであり、Ｘ１はｎ−オクチルであるか、またはＲ１はＰＯ３Ｈ２であり、Ｘ１はｎ−オクチルである。
【００３２】
さらに別の実施形態において、Ａ１は、Ｉ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択され、Ｂ１がＨであるか、またはＡ１はＨであり、Ｂ１がＩ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択されるかのいずれかである。
【００３３】
好ましくは、
Ｒ１は、ＨまたはＰＯ３Ｈ２であり、
少なくとも１つのＡ１およびＢ１はＩ（ヨウ素）であり、他方はＨであり、
Ｘ１は、ｎ−オクチルまたはｎ−ヘプチルオキシである。
【００３４】
式Ｉａの放射性標識された化合物において、少なくとも１つのヨウ素または臭素原子は、ヨウ素または臭素の放射性同位体で、例えば、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１２３Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される、例えば、１２５Ｉおよび１２４Ｉから選択される放射性同位体で置換、例えば置き換えられている。
【００３５】
別の実施形態において、ＦＴＹ７２０誘導体のアルキル鎖は、二重結合で終結しており、ここで、その炭素原子の少なくとも１つは、１つのヨウ素または臭素で置換、例えば置き換えられており、それゆえ、該誘導体は、「ヨウ素化アリルＦＴＹ７２０誘導体」または「臭素化アリルＦＴＹ７２０誘導体」と呼ばれる。
【００３６】
本発明は、さらに、式Ｉｂの化合物、例えば、放射性標識された化合物を提供する：
【００３７】
【化５】
［式中、
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、またはＰＯ３Ｈ２であり、
Ｅ、ＦおよびＧの少なくとも１つは、Ｉ（ヨウ素）またはＢｒであり、残りはＨであり、例えば、ＦおよびＧの少なくとも一方は、Ｉ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択され、残りはＨであり、
Ｘ２は、Ｃ１〜８アルキルまたはＯＣ１〜７アルキルである］。
【００３８】
別の実施形態において、Ｘ２は、１，６−ｎ−ペンチレンまたはオキシ−ｎ−ブチルである。
【００３９】
一実施形態において、Ｒ２は、ＨまたはＰＯ３Ｈ２である。
【００４０】
別の実施形態において、Ｅ、ＦまたはＧのいずれかは、Ｉ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択され、残りはＨであり、例えば、ＥおよびＧはＨであり、Ｆは、Ｉ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択される。
【００４１】
よりさらなる実施形態において、Ｒ２はＰＯ３Ｈ２であり、Ｅ、ＦおよびＧの少なくとも１つはＩ（ヨウ素）またはブロモであり、残りはＨである。例えば、Ｒ２がＰＯ３Ｈ２であり、ＥがＨであって、ＧがＩ（ヨウ素）またはブロモであり、ＦがＨであるか、または逆に、ＧがＨであり、ＦがＩ（ヨウ素）またはブロモであるかのいずれかである。
【００４２】
別の実施形態において、Ｅは、Ｉ（ヨウ素）およびブロモからなる群から選択され、ＧおよびＨは双方ともＨである。
【００４３】
式Ｉａの放射性標識された化合物において、少なくとも１つのヨウ素または臭素原子は、ヨウ素または臭素の放射性同位体で、例えば、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１２３Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される、例えば、１２５Ｉおよび１２４Ｉから選択される放射性同位体で置換、例えば置き換えられている。
【００４４】
本明細書に記載の式Ｉ、ＩａおよびＩｂの化合物の定義中で、用語ヨウ素（「Ｉ」）および臭素（「Ｂｒ」）は、それぞれ、ヨウ素および臭素の原子を指し、このような原子のすべての同位体を包含する。
【００４５】
したがって、式Ｉ、ＩａおよびＩｂの化合物は、放射性標識された化合物であってもよく、例えば、ヨウ素原子は、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１２３Ｉおよび１３１Ｉから選択することができ、臭素原子は、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択することができる。
【００４６】
好ましくは、本発明の化合物は、少なくとも１つの放射性標識された原子、例えば、１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される原子を含有する。
【００４７】
式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物が、分子中に１つまたは複数の不斉中心を有する場合、本発明は、種々の光学異性体、ならびにラセミ化合物、ジアステレオ異性体、およびこれらの混合物を包含すると理解されたい。式ＩａまたはＩｂの化合物は、アミノ基を所持する炭素原子が不斉である場合、好ましくは、この炭素原子の位置でＳ−配置を有する。
式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物は、遊離または塩の形態で存在することができる。式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の薬学的に許容される塩の例としては、無機酸との塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩および硫酸塩；有機酸との塩、例えば、酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、メタンスルホン酸塩およびベンゼンスルホン酸塩；あるいは適切なら、ナトリウム、カリウム、カルシウムおよびアルミニウムなどの金属との塩；トリエチルアミンなどのアミンとの塩；ならびにリシンなどの二塩基性アミノ酸との塩が挙げられる。本発明の化合物およびその塩は、水和物および溶媒和物の形態を包含する。
【００４８】
式Ｉａの化合物、例えば式Ｉａの放射性標識された化合物の例としては、次の化合物がある：
【００４９】
【化６】
【化７】
【００５０】
式Ｉｂの化合物、例えば式Ｉａの放射性標識された化合物の例としては、次の化合物がある：
【００５１】
【化８】
【化９】
【００５２】
前に例示した化合物において、原子Ｉは、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒまたは７６Ｂｒのいずれか１つで、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉまたは１３１Ｉで、例えば、７５Ｂｒまたは７６Ｂｒで、あるいは例えば、１２３Ｉまたは１２４Ｉで置換、例えば置き換えることができる。この場合、該化合物は、ＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体である。
【００５３】
方法
Ｉｂの化合物、例えば、化合物Ｉ〜Ｎは、次のように要約される方法１により得られる。
【００５４】
【化１０】
【００５５】
該方法を以下でより詳細に説明する。
【００５６】
ステップ１
式（ＶＩＩ）の化合物は、式（Ｖ）の化合物を式（ＶＩ）の化合物と、適切なカップリング試薬、例えば、ＤＩＡＤまたはＤＥＡＤおよびＰＰｈ３の存在下に、溶媒または溶媒混合物、例えば、ジオキサン、ＴＨＦの存在下で反応させることによって得られる。
【００５７】
ステップ２
式Ｉ、ＪまたはＮの化合物は、式（ＶＩＩ）の化合物を、適切な酸、例えば、濃塩酸、濃硫酸またはトリフルオロ酢酸の存在下に、溶媒、例えば、ジオキサン、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨの存在下で反応させることによって得られる。
【００５８】
ステップ３
式（ＶＩＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩ）の化合物をリン酸化剤、例えば、ホスホロクロリデート、ジフェニルクロルホスフェート、シアノエチルホスフェート、ホスホルアミダイト（ジ−ｔｅｒｔブチルジエチルホスホルアミダイトなど）と、溶媒または溶媒混合物、例えば、ＤＣＭ、ＴＨＦまたはジオキサンの存在下で反応させること、続いて酸化剤、例えばＨ２Ｏ２での酸化反応によって得られる。
【００５９】
ステップ４
式Ｋ、ＬまたはＭの化合物は、式（ＶＩＩＩ）の化合物を、適切な酸、例えば、濃塩酸、濃硫酸またはトリフルオロ酢酸の存在下に、溶媒または溶媒混合物、例えば、ジオキサン、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨの存在下で反応させることによって得られる。
【００６０】
式Ｉａの化合物、例えば、化合物Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＨは、次のスキームによって要約される方法２により得られる。
【００６１】
【化１１】
【化１２】
【００６２】
ステップ５
式Ａ、ＢまたはＤの化合物は、式（ＩＸ）の化合物を、ヨウ素、適切な酸、例えば、濃塩酸、濃硫酸またはトリフルオロ酢酸の存在下に、溶媒または溶媒混合物、例えば、ＣＨ３ＣＮ、ジオキサン、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨの存在下で反応させることによって得られる。
【００６３】
ステップ６
式（Ｘ）の化合物は、式Ａ、ＢまたはＤの化合物を、クロロギ酸ベンジル、適切な塩基、例えば、水酸化ナトリウムの存在下に、溶媒または溶媒混合物、例えば、ＣＨ３ＣＮ、ジオキサン、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨの存在下で反応させることによって得られる。
【００６４】
ステップ７
式（ＸＩ）の化合物は、式（Ｘ）の化合物をリン酸化剤、例えば、ホスホロクロリデート、ジフェニルクロルホスフェート、シアノエチルホスフェート、ホスホルアミダイト（ジ−ｔｅｒｔブチルジエチルホスホルアミダイトなど）と、溶媒または溶媒混合物、例えば、ＤＣＭ、ＴＨＦまたはジオキサンの存在下で反応させること、続いて酸化剤、例えばＨ２Ｏ２での酸化反応によって得られる。
【００６５】
ステップ８
式Ｅ、ＦまたはＨの化合物は、式（ＸＩ）の化合物を、適切な酸、例えば、濃塩酸、濃硫酸またはトリフルオロ酢酸の存在下に、溶媒または溶媒混合物、例えば、ジオキサン、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨの存在下で反応させることによって得られる。
【００６６】
本発明は、また、式（ＩＩＩａ）または（ＩＶａ）の放射性標識された化合物を提供する：
【００６７】
【化１３】
【００６８】
式（ＩＩＩａ）および（ＩＶａ）の化合物は、対応するスタナンまたはボランを、放射性ハロゲン化アルカリ金属の供給源の存在下で反応させることによって得られる。式（ＩＩＩａ）および（ＩＶａ）の化合物の標識は、いくつかの技術によって達成され得る。例えば、標識は、式（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）の化合物のトリアルキルスタナン前駆体、ボラン前駆体、またはボロン前駆体、ならびにＮａ１２３Ｉ、Ｎａ１２４Ｉ、Ｎａ１２５Ｉ、Ｎａ１３１Ｉ、Ｎａ７５ＢｒまたはＮａ７６Ｂｒなどのハロゲン化アルカリ金属を、クロラミン−Ｔ、過酢酸または過酸化水素水溶液などの酸化剤、および塩酸、酢酸または酸性緩衝液などの酸の存在下に、好ましくは外界温度でおよび適切な溶媒中で反応させることによって実施することができる。標識は、また、酸性媒質中での非放射性ヨウ化分子と放射性ハロゲン化アルカリ金属との間の交換によって行うことができる。
【００６９】
本発明者らの取組みは、放射性ハロゲン化されたヨード−ＦＴＹ７２０誘導体に対する前駆体としての有機ホウ素化合物（ボロン酸、ピナコール−ボロネート、トリフルオロボロネートおよびボロン酸ネオペンチル）の使用を基礎にした。
【００７０】
放射性標識された式Ｉａの化合物、例えば、化合物Ａ、ＢおよびＤは、次のスキームによって要約される方法３により得ることができる。
【００７１】
【化１４】
【００７２】
ステップ９
式（ＸＩＩ）の化合物は、化合物Ａを、Ｇｒｅｅｎｅらによって記載されているような適切な保護基（Protective groups in Organic Synthesis,Wiley）、例えば、アルキルｔ−ブチルカルボネート、アセトニド、酢酸エステルの存在下に、適切な塩基、例えば、水酸化ナトリウムの存在下において、適切な溶媒または溶媒混合物、例えば、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ジオキサンの存在下で反応させることによって得られる。
【００７３】
ステップ１０
式（ＸＩＩＩ）の化合物は、式（ＸＩＩ）の化合物を、適切なパラジウム触媒、例えば、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２−２ＰＰｈ３、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）の存在下に、適切な塩基、例えば、Ｋ２ＣＯ３、ＫＯＡｃの存在下に、適切な溶媒または溶媒混合物、例えば、ジオキサン、ＤＭＳＯの存在下で、適切なジボロン化合物、例えば、ビス（ピナコラト）ジボロン、ビス（ネオペンチル）ジボロンのクロスカップリング反応を介して反応させること、続いて、適切な酸、例えば塩酸またはフッ化水素カリウムの存在下で加水分解することによって得られる。
【００７４】
ステップ１１
式（ＸＩＶ）の化合物は、式（ＸＩＩＩ）の化合物を、ヨウ素の供給源、例えばＮａＩの存在下に、適切な酸化剤、例えば、クロラミン−Ｔ、過酢酸または過酸化水素水溶液の存在下に、適切な塩基の存在下に、適切な溶媒または溶媒混合物、例えば、Ｈ２Ｏ、ＴＨＦ、ジオキサンの存在下で反応させること、続いて、保護基を適切な酸、例えば、塩酸、トリフルオロ酢酸で除去することによって得られる。
【００７５】
放射性標識された式Ｉｂの化合物、例えば、化合物Ｉ、ＪおよびＮは、方法３に類似の合成スキームに従って得られる。
【００７６】
疾患
前述で定義したように、「Ｓ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす疾患または障害」は、１種または複数のＳ１Ｐ受容体の、例えば、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ４、Ｓ１Ｐ５およびＳ１Ｐ３受容体のいずれか１種の不均衡または機能不全をもたらす疾患または障害を指す。
例えば、このような疾患としては、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、神経変性疾患、脳疾患、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、癌、またはＳ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす任意の疾患が挙げられる。
【００７７】
本明細書中で定義する場合、自己免疫疾患には、限定はされないが、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節炎、リウマチ様関節炎、糖尿病（例えば、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型成人発症糖尿病）、ブドウ膜炎が含まれる。
【００７８】
本明細書中で定義する場合、心血管疾患には、限定はされないが、高血圧症、心拍数調節不全が含まれる。
【００７９】
本明細書中で定義する場合、脱髄性疾患には、限定はされないが、多発性硬化症、およびそれに付随する障害、例えば、視神経炎およびギラン・バレー症候群が含まれる。
【００８０】
本明細書中で定義する場合、神経変性疾患には、限定はされないが、進行性認知症、β−アミロイド関連炎症性疾患、アルツハイマー病、アミロイドーシス、レビー小体病、多発脳梗塞性認知症、ピック病、または脳動脈硬化症が含まれる。
【００８１】
本発明は、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、神経変性疾患、脳疾患、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、および癌から選択される疾患、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、神経変性疾患、および脳疾患から選択される疾患に罹患したまたは患う患者にとりわけ適合している。
別の実施形態において、本発明は、このような疾患を患っていると疑われる患者に向けられる。
【００８２】
診断および造影での使用
前に述べたように、本発明は、本明細書中で前に定義したような新規ＦＴＹ７２０誘導体、例えば、とりわけ脳または脊髄の造影のための適切な造影装置を使用するインビトロおよびインビボでの造影の用途のための、ミエリンシートまたはＳ１Ｐ受容体のトレーサーとして使用することのできる、ヨウ素化または臭素化されたＦＴＹ７２０誘導体、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物を提供する。
【００８３】
ＰＥＴ／ＳＰＥＣＴ造影と確立済のＭＲＩ技術との間には、いくつかの相違が存在し、両方法は、相補的と考えることができる。ＭＲＩは、例えば多発性硬化症中の病変を造影するのに使用することができるが、限界があり、ＰＥＴ／ＳＰＥＣＴのトレーサーはその限界を克服することができる。例えば、ＭＲＩ法は、組織の水分含有量に基づくものであり、発作、出血、または炎症過程に続く、例えば、神経変性に由来するＴ２強調ＭＲＩ超強度画像を明瞭には識別しない。対照的に、本発明の化合物は、ミエリンシート中への挿入に続いて、またはミエリン中に発現されたＳ１Ｐ受容体への結合によって、特定のミエリンの造影を可能にする。
さらに、ＰＥＴ／ＳＰＥＣＴ造影は、例えば、慢性病変と急性（活性）病変とを区別するのにＧｄをベースにしたコントラスト増強剤の使用を必要としない。最後に、ＭＲＩは、金属インプラント、心臓ペースメーカー、人工内耳、旧世代の動脈瘤クリップ、埋め込み型刺激装置、または眼内金属性外来物を有する患者で禁忌である。
【００８４】
本明細書中で前述で定義したように、「造影装置」は、生存対象に投与された放射性トレーサーから放出される放射線を検出することができ、得られた情報を再構成して平面画像および断層画像を提供することのできる装置を指す。このような画像は、放射性トレーサーの分布および／または濃度を時間の関数として明らかにすることができる。好ましくは、本発明の「造影装置」は、限定はされないが、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を指す。
【００８５】
これらのトレーサーは、組織断面中の、特に脳中のＳ１Ｐ受容体をインビトロまたはインビボで造影するために、例えば、Ｓ１Ｐ受容体に対して、例えば、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４および／またはＳ１Ｐ５受容体に対して親和性を有する化合物の受容体占有率を分析するために使用することができる。本発明の化合物は、例えば、このような受容体に作用する薬物のＳ１Ｐ受容体阻害のレベルを測定するのに有用である。
【００８６】
それらのトレーサーは、このような化合物の潜在的な治療的用途を評価するのに使用することができる。それらは、このような疾患の薬物療法の有効性を監視するのに有用であり得る。
【００８７】
これらのトレーサーは、本明細書中で定義するようなＳ１Ｐ関連疾患または障害、例えば、自己免疫疾患、または多発性硬化症などの脱髄性疾患の所見を診断またはそれを検査するのに使用することができる。
【００８８】
これらのトレーサーは、患者が、Ｓ１Ｐ受容体との相互作用を介して作用する薬物で治療されることに、例えばＦＴＹ７２０で治療されることに感受性であるかどうかを評価するのに使用することができる。
【００８９】
一連の実施形態において、本発明は、以下を提供する：
１．１
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体、例えばＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、例えば、式ＩａおよびＩｂの化合物；あるいはその対応する放射性標識された誘導体、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物、例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含む式ＩａまたはＩｂの化合物。好ましくは、化合物Ａ〜Ｈ、例えば、化合物Ａ、Ｃ、Ｅおよび／またはＧ、あるいはその対応する放射性標識された化合物。好ましくは、化合物Ａおよび化合物Ｅのいずれか１つから選択される化合物、ならびにその対応する放射性標識された化合物。
１．２
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物；あるいはその対応する放射性標識された化合物、例えば、式Ｉ、ＩａおよびＩｂの放射性標識された化合物、例えば、Ｓ１Ｐ受容体を標識するための、例えばＳ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５受容体の少なくとも１つを標識するための、例えば、Ｓ１Ｐ１および／またはＳ１Ｐ５受容体を標識するためのマーカーとしての式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物。
１．３
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物；およびその対応する放射性標識された化合物、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物、例えば、Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患から選択される疾患、例えば多発性硬化症のためのマーカーとしての式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物。
２．１
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物の；あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、例えば陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）のための放射性トレーサーとしての使用。
２．２
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいはその対応する放射性標識された化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患から選択される疾患、例えば多発性硬化症を診断するための使用。
３．
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物の；あるいはその対応する放射性標識された化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、例えば、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患、例えば多発性硬化症に罹患しているまたはそれを有する疑いのある患者における、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いる、インビトロまたはインビボでの造影用途、例えば脳または脊髄造影のための使用。
４．１
対象におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、自己免疫疾患または脱髄性疾患の所見を診断する方法であって、前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体、例えば前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識されたヨードまたはブロモ誘導体、例えば前述で定義した式ＩａまたはＩｂの化合物を使用するステップを含む方法。
４．２
対象におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害をＰＥＴまたはＳＰＥＣＴを使用して診断する、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患または脱髄性疾患を診断する方法であって、前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体、例えば前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体、例えば、前述で定義した式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物を放射性標識するステップを含む方法。
４．３
対象におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患または脱髄性疾患の所見を診断する方法であって、
ａ）前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体、前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識されたヨードまたはブロモ誘導体、例えば前述で定義した式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物を対象に投与するステップ、
ｂ）適切な造影装置、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いて、放射性標識された化合物から放出される放射線を検出または測定するステップ、および任意選択で
ｃ）ステップｂ）で得られた情報を再構成して、放射性標識された化合物の分布および／または濃度を時間の関数として明らかにする平面画像および断層画像を提供するステップ
を含む方法。
４．４
対象におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患または脱髄性疾患の所見を診断する、前記４．３の項目において定義した方法であって、ステップａ）の前に、
前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体を調製する、例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒからなる群から選択される原子、例えば１２３Ｉまたは１２４ＩをＦＴＹ７２０誘導体中に導入する、ステップａ１）
を含む方法。
ステップａ１）は、放射性である１つのヨウ素またはブロモ原子を含有する、例えば１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される、例えば１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される１つの原子を含有する式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物を調製するステップからなっていてもよい。
５．１
炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害に罹患している患者が、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、例えばＳ１Ｐ受容体アゴニストとして作用する化合物、例えばＦＴＹ７２０に応答するかどうかを予測する方法であって、
ａ）前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識されたヨード誘導体、例えば、少なくとも１つの放射性ヨウ素原子を含む式ＩａおよびＩｂの放射性標識された化合物を患者に投与するステップ、および
ｂ）適切な造影装置、例えば陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いて放射性標識された化合物から放出される放射線を検出または測定するステップ
を含む方法。
５．２
どの患者が、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、例えば、Ｓ１Ｐ受容体アゴニストとして作用する化合物、例えば、ＦＴＹ７２０に応答するかを予測する、前記５．１の項目において定義した方法であって、ステップａ）の前に、
前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体を調製する、例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒまたは７６Ｂｒからなる群から選択される原子、例えば１２３Ｉまたは１２４Ｉを本発明のＦＴＹ７２０誘導体中に、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物中に導入する、ステップａ１）を含む方法。ステップａ１）は、放射性である１つのヨウ素またはブロモ原子を含有する、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含有する、例えば、１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有する、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物を調製するステップからなっていてもよい。
５．３
特定の患者集団におけるＦＴＹ７２０の分布、例えば脳内分布を推定する方法であって、
ａ）前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体を調製する、例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒまたは７６Ｂｒからなる群から選択される原子、例えば１２３Ｉまたは１２４Ｉを本発明のＦＴＹ７２０誘導体中に、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物中に導入するステップ、
ｂ）例えば炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害に罹患した、またはこのような疾患に罹患するリスクのある、患者集団に前記放射性標識された化合物を投与するステップ、および
ｃ）このような患者のミエリンまたは脳におけるＦＴＹ７２０の分布を視覚化するステップ
を含む方法。
放射性標識された誘導体を調製するステップは、放射性である１つのヨウ素または臭素原子を含有する、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含有する、例えば、１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有する、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物を調製するステップからなっていてもよい。
６．１
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物の、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含有する、例えば１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有する式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、神経変性疾患、または脳疾患の薬物療法の有効性を監視するための使用。
６．２
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えばＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば式ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物の、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含有する、例えば、１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有する式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、対象におけるミエリンを造影するための、および／または脳または脊髄造影を視覚化するためのトレーサーとしての使用であって、前記方法が、
ａ）前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体、ＦＴＹ７２０の放射性標識されたヨードまたはブロモ誘導体、例えば、前述で定義した式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物を対象に投与するステップ、
ｂ）適切な造影装置、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いて放射性標識された化合物から放出される放射線を検出または測定するステップ、および任意選択で
ｃ）ステップｂ）で得られた情報を再構成して、放射性標識された化合物の分布および／または濃度を時間の関数として明らかにする平面画像および断層画像を提供するステップ
を含む使用。
６．３
ステップａ）の前に、ＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体を調製する、例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒからなる群から選択される原子、例えば１２３Ｉまたは１２４Ｉを本発明のＦＴＹ７２０誘導体中に導入するステップを含む、前記６．２の項目において定義した使用。
６．４
ステップａ）の前に、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含有する、例えば１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有する式Ｉ、ＩａまたはＩｂの、例えば式ＩａまたはＩｂの化合物を調製するステップを含む、前記６．２の項目において定義した使用。
６．５
陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を使用する、前記６．２または６．４の項目において定義した使用。
６．６
自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患、例えば多発性硬化症に罹患している、それを有する疑いのある、またはそれに罹患するリスクのある患者における、前記６．２〜６．５の項目において定義した使用。
６．７
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物の、Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば自己免疫疾患、または脱髄性疾患、例えば多発性硬化症の所見を診断するための使用。
６．８
４．３または４．４の項目において前述で定義した方法による、前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物の、疾患または障害の所見を診断するための使用。
６．９
どの患者がＳ１Ｐ受容体モジュレーターとして作用する化合物、例えばＦＴＹ７２０に応答するかを予測するための、前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいはその対応する放射性標識された化合物の使用。
６．１０
特定の患者集団におけるＦＴＹ７２０の分布、例えば脳内分布を推定するための、前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいはその対応する放射性標識された化合物の使用。
７．
対象に有効量の、前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識されたヨードまたはブロモ誘導体、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物、例えば式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物を投与するステップを含む、脳造影またはミエリン造影の方法。
８．
本発明の化合物、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体、例えば前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、あるいはその対応する放射性標識された化合物、および薬学的に許容される担体または添加剤を含む組成物。
９．
Ｓ１Ｐ受容体、例えば、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５受容体の少なくとも１種を含有する組織病理学的構造体をインビトロまたはインビボで標識するための、本発明の放射性標識された化合物の、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、あるいは８の項目において定義した組成物の使用。
【００９０】
インビトロでのオートラジオグラフィーを実施するための、および組織断面上のＳ１Ｐ受容体の分布を測定するための、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、例えば、放射性標識された化合物Ａ〜Ｍから選択される化合物の、例えば、放射性標識された化合物Ａ、Ｃ、ＥまたはＧの使用が提供される。オートラジオグラフィーは、定量的全身オートラジオグラフィー（ＱＷＢＡ）によって行うことができる。
【００９１】
本明細書中で使用する場合、「薬学的に許容される担体」としては、任意のすべての溶媒、分散媒質、被覆、抗菌および抗真菌剤、等張剤、吸収遅延剤などが挙げられる。薬学的に活性な物質へのこのような媒質および薬剤の使用は、当技術分野で周知である。本発明の化合物は、適切な希釈剤または補助剤を用いて、またはヒト血清アルブミンまたはリポソームなどの適切な担体を用いて患者に投与することができる。薬学的に許容される希釈剤としては、生理食塩水および緩衝水溶液が挙げられる。補助剤としては、レゾルシノール、非イオン性界面活性剤（ポリオキシエチレンオレイルエーテルおよびヘキサデシルポリエチレンエーテルなど）を挙げることができる。
本発明の一実施形態において、本発明の化合物、そのエナンチオマー、立体異性体、ラセミ化合物、または薬学的に許容される塩、例えば、本発明の放射性標識された化合物は、注射（静脈内、筋内または皮下）として非経口的に投与される。該化合物、そのエナンチオマー、立体異性体、ラセミ化合物、または薬学的に許容される塩は、無菌でパイロジェンフリーの非経口で許容される水溶液として製剤化することができる。しかるべきｐＨ、等張性、安定性などを有するこのような非経口で許容される溶液の調製は、当業者にとって公知である。非経口投与に適したいくつかの医薬組成物は、本発明の放射性標識された化合物を、使用直前に無菌の注射可能な溶液または分散液に再構成することのできる１種または複数の薬学的に許容される無菌粉末と組み合わせて含む。医薬組成物は、また、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、該製剤を意図した受容者の血液と等張にする溶質、または懸濁もしくは増粘剤を含むことができる。注射用製剤は、本発明の放射性標識された化合物に加えて、塩化ナトリウム溶液、リンガー溶液、デキストロース溶液、デキストロースと塩化ナトリウムとの溶液、乳酸加リンガー溶液、デキストラン溶液、ソルビトール溶液、ポリビニルアルコールを含む溶液などの等張性ビヒクル、あるいは界面活性剤および粘度増強剤、または当技術分野で公知の他のビヒクルを含む浸透圧の均衡した溶液を含むことができる。製剤は、また、安定剤、保存剤、緩衝剤、抗酸化剤、または当業者にとって公知の他の添加剤を含むことができる。
【００９２】
有効量の本発明の化合物ｄを、造影研究で使用するために薬学的に許容される担体と合わせることができる。
本明細書中で定義する場合、「有効量」は、適切な方法および利用可能な設備、例えば、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴを使用して許容される画像をもたらすのに十分な量を指す。
有効量は、１回を超える投与で投与することができる。
有効量は、治療している状態の本質および重症度、患者が受けた治療的処置の性質に基づいて診断される疾患、または診断される疾患の状態、患者の感受性の程度、患者の年齢、性別、体重、および患者の特異的応答、ならびに線量計測法などの因子に応じて変化する可能性がある。
有効量は、使用する装置およびフィルムに関連する因子に応じて変化する可能性がある。
有効量の選択およびこのような因子の最適化は、当業者にとって周知である。結局、主治医が、それぞれ個々の患者に投与する化合物の量および造影研究の継続期間を決定する。
例えば、１μｇ未満の本発明の放射性標識された化合物、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物、例えば、放射性標識された化合物Ａ〜Ｍから選択される化合物、例えば放射性標識された化合物Ａ、Ｃ、ＥまたはＧが、診断または治療目的などで投与される。本明細書中で定義されている本発明の方法において投与される本発明の放射性標識された化合物の有効量の例には、約１００ｐｇ〜約１０μｇ、例えば、約８０ｐｇ〜約１５μｇ、例えば、約５０ｐｇ〜約２０μｇ、例えば、約３０ｐｇ〜約３０μｇ、例えば、約２０ｐｇ〜約３５μｇ、例えば、約１０ｐｇ〜約４０μｇが含まれる。
例えば、本発明の放射性標識された化合物、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の有効量は、約１００ｐｇ、約５０ｐｇ、約３０ｐｇ、約２０ｐｇ、約１０ｐｇ、約１ｐｇ、約１００μｇ、約８０μｇ、約５０μｇ、約４０μｇ、約３０μｇ、約２０μｇ、約１０μｇ、約５μｇ、約１μｇでよい。
【００９３】
別の実施形態において、本発明の放射性標識された化合物、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物は、約０．１〜約１０ｍＣｉ、約０．５〜約８０ｍＣｉ、約１〜約５０ｍＣｉ、約１〜約１００ｍＣｉとして投与することができる。
このような範囲および量は、本発明の放射性標識された化合物を、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物を、例えば、放射性標識された化合物Ａ〜Ｍから選択される化合物を、例えば、放射性標識された化合物Ａ、Ｃ、ＥまたはＧを、前に記載の方法によるマーカー、例えば造影剤または診断薬として投与する場合に、あるいは後記のようなキットにおいてとりわけ適している。
【００９４】
別の態様において、前述に記載の本発明の放射性標識された化合物、そのエナンチオマー、立体異性体、ラセミ化合物、または薬学的に許容される塩を、ヒト血清アルブミンなどの担体、またはマンニトールまたはグラシエート（glaciate）などの補助分子を含む薬学的に許容される溶液と組み合わせて含むキットが提供される。キット中で使用するためのヒト血清アルブミンは、任意の方法で、例えば、ヒト血清からのタンパク質の精製を介して、またはヒト血清アルブミンをコードする遺伝子を含むベクターの組換え発現を介して作製することができる。他の物質、例えば、洗浄剤、希薄アルコール、炭水化物なども、担体として使用することができる。
【００９５】
一実施形態において、キットは、１〜約５０ｍＣｉの本発明の放射性標識された化合物、そのエナンチオマー、立体異性体、ラセミ化合物、または薬学的に許容される塩を含むことができる。
【００９６】
本発明の特定の実施形態において、キットは、キレート化剤と共有または非共有結合で結合している非標識脂肪酸の立体異性体、およびマンニトール、グルコン酸塩などの補助分子を含むことができる。非標識脂肪酸の立体異性体／キレート化剤は、溶液状または凍結乾燥された形態で提供できる。キットは、また、記載の方法の実施を容易にする他の成分を含む。例えば、緩衝剤、シリンジ、フィルム、説明書などを、開示のキットの構成要素として任意選択で含めることができる。
【００９７】
治療的使用
本発明の化合物は、前述で定義したようにＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、自己免疫疾患または脱髄性疾患、例えば多発性硬化症を治療または予防するための治療薬として使用することができる。
【００９８】
用語「治療」または「療法」（特に、Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害の）は、前記疾患、特に前述の疾患の予防的または好ましくは治療的（限定はされないが、軽減、治療、症状緩和、症状減弱を含む）処置を指す。
【００９９】
さらに、以下が提供される：
１０．それを必要とする患者におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患を治療または予防する方法であって、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物、あるいはその薬学的に許容される塩を投与するステップを含む方法。
【実施例】
【０１００】
次の非限定的実施例により、本発明を例示する。
【０１０１】
使用される省略形を次に列挙する。
Ｂｏｃ ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＣＨ３ＣＮ アセトニトリル
ＤＣＣ ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＥ ジクロロエタン
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＥｔＯＨ エタノール
Ｅｔ２Ｏ ジエチルエーテル
ｈ 時間
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
Ｋ２ＣＯ３ 炭酸カリウム
ＬＣ 液体クロマトグラフィー
ＭｅＯＨ メタノール
ｍｉｎ 分
ｍＬ ミリリットル
ｍｍｏｌ ミリモル
ＭＳ 質量分光法
ＮａＨＣＯ３ 重炭酸ナトリウム
ＮａＯＨ 水酸化ナトリウム
ＮＨ４ＯＨ 水酸化アンモニウム
ＰＧ 保護基
Ｒｔ 保持時間（ＬＣ／ＭＳ）
ＲＴ 室温
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
【０１０２】
ＬＣＭＳ／ＨＰＬＣの条件（％＝体積パーセント）
方法Ａ（ＲｔＡ＝保持時間Ａ）
Ｇｉｌｓｏｎ３３１ポンプを、Ｇｉｌｓｏｎ ＵＶ／ＶＩＳ１５２検出器およびＦｉｎｎｉｇａｎ ＡＱＡ分光計（ＥＳＩ）に連結し、５０μＬのループ式注入バルブおよびＷａｔｅｒｓ ＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８ ３．５μｍ ４．６×５０ｍｍカラムで、９５／５〜１０／９０の水＋０．０５％ＴＦＡ／アセトニトリル＋０．０５％ＴＦＡのグラジエントを８分間にわたり１．５ｍＬ／分の流速で実行した。
方法Ｂ（ＲｔＢ＝保持時間Ｂ）
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ２．５μｍ、３×３０ｍｍ；グラジエント：Ａ（水＋５％アセトニトリル＋０．５〜１．０％ＨＣＯ２Ｈ）／Ｂ（アセトニトリル＋０．５〜１．０％ＨＣＯ２Ｈ）で、０分に１０Ｂ、１．７０分に９５Ｂ、２．４０分に９５Ｂ、２．４５分に１０Ｂ；流速＝１．２ｍｌ／分；カラム温度＝５０℃。
方法Ｃ（ＲｔＣ＝保持時間Ｃ）
Ｔｈａｒ ＳＦＣ２００；Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ、３０×２５０ｍｍ；一定濃度：ＣＯ２／２−プロパノール／２−プロピルアミン＝７５：２５：０．２５；流速＝９０ｇ／分；ＢＰＲ＝１５０バール。
方法Ｄ（ＲｔＤ＝保持時間Ｄ）
ＵＰＬＣ−ＺＱ２０００；カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＨＳＳ−Ｔ３、１．８μｍ、２．１×５０ｍｍ；グラジエント：Ａ（水＋５％アセトニトリル＋０．５〜１．０％ＨＣＯ２Ｈ）／Ｂ（アセトニトリル＋０．５〜１．０％ＨＣＯ２Ｈ）で０分に２Ｂ、４．３分に９８Ｂ、５．０分に９８Ｂ、５．１０分に２Ｂ、６．０分に２Ｂ；流速＝１．０ｍｌ／分。
【０１０３】
分取ＨＰＬＣ
Ｇｉｌｓｏｎ Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎ ＬＣ
カラム：ＳｕｎＦｉｒｅ Ｃ１８、３０×１００ｍｍ、５μｍ
溶離液：水（＋０．１％ＴＦＡ）：アセトニトリル（＋０．１％ＴＦＡ）を１６分間で８５／１５〜６５／３５；流速＝５０ｍＬ／分。
【０１０４】
１Ｈ−ＮＭＲ装置：Ｂｒｕｋｅｒ（３６０ＭＨｚ）、Ｖａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ（４００ＭＨｚ）、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｄｖａｎｃｅ（６００ＭＨｚ）。
【０１０５】
（実施例Ａ）
２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩
ステップ１：（４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール
【０１０６】
【化１５】
０℃で、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の４−［２−（４−ヒドロキシメチル−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−エチル］−フェノール（２６０ｍｇ、１．１ミリモル）、（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エン−１−オール（２５０ｍｇ、１．０当量）およびトリフェニルホスフィン（２９０ｍｇ、１．０当量）の混合物に、ＤＩＡＤ（０．２１５ｍＬ、１．０当量）を添加する。生じる混合物を、室温で１８時間、５０℃で２４時間撹拌する。０．３当量のＤＩＡＤおよびＰＰｈ３を添加し、混合物を５０℃でさらに７２時間撹拌する。０．５当量のＤＩＡＤおよびＰＰｈ３を添加し、混合物を５０℃でさらに１時間撹拌する。混合物を、ＡｃＯＥｔと飽和ＮＨ４Ｃｌとの間に分配する。有機相を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空で濃縮してベージュ色の粗オイル（１．５４ｇ）を得る。粗生成物を、溶媒系としてＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００／０〜９０／１０）を使用するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製する。精製により、（４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノールが無色のオイルとして単離される。
LC/MS : RtA 4.84分, m/z : 444.0 [M+H]
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.08 (d, 2H); 6.79 (d, 2H); 6.52 (m, 1H); 6.01 (d, 2H); 5.30 (s, 1H); 4.27 (m, 1H); 4.09 (m, 1H); 3.92 (t, 2H); 3.72 (m, 1H); 3.45 (m, 1H); 2.54 (m, 2H); 2.12 (m, 2H); 2.06 (s, 3H); 1.88 (m, 1H); 1.75 (m, 3H); 1.57 (m, 2H).
ステップ２：２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩
【０１０７】
【化１６】
（４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール（６０ｍｇ、０．１３５ミリモル）のＥｔＯＨ（２ｍＬ）溶液に濃塩酸（２．０５ｍＬ）を添加する。生じる混合物を８５℃で２．５時間撹拌する。溶媒を真空で除去して、ベージュ色のペーストを得る。Ｅｔ２Ｏ中での沈殿の後、２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩が、ベージュ色の粉末として単離される。
LC/MS : RtA 4.62分, m/z : 419.9 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.80 (bs, 3H); 7.09 (d, 2H); 6.83 (d, 2H); 6.52 (m, 1H); 6.22 (d, 2H); 5.37 (t, 1H); 3.90 (t, 2H); 3.50 (m, 4H); 2.08 (m, 2H); 1.75 (m, 2H); 1.65 (m, 2H); 1.50 (m, 2H).
【０１０８】
（実施例Ｂ）
（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
ステップ３：（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステル
【０１０９】
【化１７】
０℃で、（４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール（２３０ｍｇ、０．５２ミリモル）のＤＣＭ／ＴＨＦ（２ｍＬ／２ｍＬ）溶液に、１Ｈ−テトラゾール（１８２ｍｇ、５．０当量）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジエチルホスホルアミダイト（０．４３３ｍＬ、３．０当量）を添加する。生じる混合物を室温で６時間撹拌する。次いで、３０ｗｔ％Ｈ２Ｏ２水溶液（０．１５９ｍＬ、１０当量）を添加し、混合物を室温で１．５時間撹拌する。１Ｎチオ硫酸ナトリウム溶液（１０ｍＬ）を注意して添加して反応混合物を失活させる。水相をＤＣＭで抽出する。有機相を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空で濃縮して、粗オイル（５００ｍｇ）を得る。粗オイルを、溶媒系としてＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００／０〜９０／１０）を使用するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製する。精製すると、（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステル（１０７ｍｇ）が、約５０％の純度の澄明オイルとして単離され、そのまま次のステップに使用される。
LC/MS:RtA 5.53分、m/z:636.1[M+H]
ステップ４：（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
【０１１０】
【化１８】
（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステル（１０７ｍｇ、０．１６８ミリモル）のＥｔＯＨ（２．５ｍＬ）溶液に濃塩酸（２．５６ｍＬ）を添加する。生じる混合物を８５℃で２．５時間撹拌する。溶媒を真空で除去してベージュ色のペーストを得る。Ｅｔ２Ｏ中での沈殿の後、（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステルが、ベージュ色の粉末として単離される。
LC/MS : RtA 4.53分, m/z : 500.0 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.09 (d, 2H); 6.82 (d, 2H); 6.52 (m, 1H); 6.22 (d, 1H); 3.89 (m, 4H); 3.53 (m, 2H); 2.08 (m, 2H); 1.78 (m, 2H); 1.65 (m, 2H); 1.49 (m, 2H)
【０１１１】
（実施例Ｃ）
２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＴＦＡ塩
ステップ１：（４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール
【０１１２】
【化１９】
４−［２−（４−ヒドロキシメチル−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−エチル］−フェノール（４００ｍｇ、１．７ミリモル）、（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エン−１−オール（２５０ｍｇ、１．０当量）を用いて、実施例Ａのステップ１に類似の合成を開始する。（４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール（４０３ｍｇ）が、澄明オイルとして単離される。
LC/MS:RtA 4.76分、m/z:443.9[M+H]
ステップ２：２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＴＦＡ塩
【０１１３】
【化２０】
（４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノールを用いて、実施例Ａのステップ２に類似の合成を開始する。逆相分取ＨＰＬＣで精製すると、２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＴＦＡ塩が、白色粉末として得られる。
LC/MS : RtA 4.42分, m/z : 420.0 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.77 (bs, 3H); 7.08 (d, 2H); 6.84 (d, 2H); 6.40 (m, 1H); 6.29 (m, 1H); 5.40 (t, 1H); 3.92 (t, 2H); 3.50 (m, 4H); 2.13 (m, 2H); 1.72 (m, 4H); 1.53 (m, 2H).
【０１１４】
（実施例Ｄ）
（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
ステップ３：（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステル
【０１１５】
【化２１】
（４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノールを用いて、実施例Ｂのステップ３に類似の合成を開始する。反応を後処理した後、（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステルを、そのまま次のステップに使用する。
ステップ４：（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
【０１１６】
【化２２】
（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステルを用いて、実施例Ｂのステップ４に類似の合成を開始する。（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステルが、白色粉末として単離される。
LC/MS : RtA 4.44分, m/z : 500.1 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.09 (d, 2H); 6.82 (d, 2H); 6.40 (m, 1H); 6.30 (m, 1H); 3.91 (m, 3H); 3.80 (m, 2H); 3.52 (m, 2H); 3.33 (bs, 2H); 2.52 (m, 2H); 2.12 (m, 2H); 1.72 (m, 4H); 1.54 (m, 2H)
【０１１７】
（実施例Ｅ）
２−アミノ−２−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩
ステップ１：（４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール
【０１１８】
【化２３】
４−［２−（４−ヒドロキシメチル−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−エチル］−フェノール（５０５ｍｇ、２．１５ミリモル）、５−ヨード−ヘキサ−５−エン−１−オール（７２８ｍｇ、１．５当量）を用いて、実施例Ａのステップ１に類似の合成を開始する。（４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノールが、澄明オイルとして単離される。
LC/MS:RtA 4.76分、m/z:444.0[M+H]
ステップ２：２−アミノ−２−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩
【０１１９】
【化２４】
（４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール（６３ｍｇ、０．１４２ミリモル）を用いて、実施例Ａのステップ２に類似の合成を開始する。反応は、ジオキサン中、５０℃で２０時間、次いで７０℃で４時間実施される。２−アミノ−２−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩が、ベージュ色の粉末として得られる。
LC/MS : RtA 4.64分, m/z : 420.0 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.77 (bs, 3H); 7.09 (d, 2H); 6.84 (d, 2H); 6.18 (s, 1H); 5.60 (s, 1H); 5.36 (t, 2H); 3.93 (t, 2H); 3.50 (m, 4H); 2.43 (m, 2H); 1.75-1.50 (m, 6H).
【０１２０】
（実施例Ｆ）
（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
ステップ３：（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステル
【０１２１】
【化２５】
（４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノールを用いて、実施例Ｂのステップ３に類似の合成を開始する。フラッシュクロマトグラフィーで精製した後、（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステルを、そのまま次のステップに使用する。
ステップ４：（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
【０１２２】
【化２６】
４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステルを用いて、実施例２のステップｂに類似の合成を開始する。反応は、ジオキサン中、５０℃で４時間実施される。逆相分取ＨＰＬＣで精製すると、（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステルが、ベージュ色の粉末として単離される。
LC/MS : RtA 4.45分, m/z : 499.9 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.09 (d, 2H); 6.84 (d, 2H); 6.19 (s, 1H); 5.71 (s, 1H); 3.95-3.3.82 (m, 4H); 3.55-3.20 (m, 6H); 2.43 (m, 2H); 1.8-1.5 (m, 6H).
【０１２３】
（実施例ＧおよびＨ）
２−アミノ−２−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］−１，３−プロパンジオールおよび２−アミノ−２−［２−（２−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］−１，３−プロパンジオール
【０１２４】
【化２７】
ＦＴＹ７２０（３．２ｇ、１０．４ミリモル）の湿り（wet）塩化メチレン（１００ｍＬ）溶液に、硫酸銀（３．２５ｇ、１０．４ミリモル）およびヨウ素（２．６４ｇ、１０．４１ミリモル）を添加する。トリフルオロメタンスルホン酸銀（０．１３ｇ、０．５２ミリモル）を室温で添加し、生じる混合物を室温で１８時間撹拌する。黄色固体状のヨウ化銀を濾過して除去する。有機相を、１５％ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、蒸発乾固する。
残留物を、シリカゲルカラムで精製し、乾燥後にヨード化合物７および８の混合物を得る。クロマトグラフィー（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ、３０×２５０ｍｍ、移動相：ＣＯ２／２−プロパノール／２−プロピルアミン＝７５／２５／０．２５（一定濃度））で精製して、白色固体として表題化合物を得る。
実施例G:
LCMS RtB = 1.28分, [M]+ = 433.9
SFC RtC = 4.82分
1H-NMR (500MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.62 (d, 1H); 7.01-7.20 (m, 2H); 4.43 (t, 2H); 3.11-3.27 (m, 4H); 2.55-2.63 (m, 2H); 2.45-2.52 (m, 2H); 1.38-1.57 (m, 4H); 1.16-1.35 (m, 12H); 0.76-0.93 (m, 3H)
実施例H:
LCMS RtB = 1.29分, [M]+ = 433.9
SFC RtC = 5.58分
1H-NMR (500MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.56 (d, 1H); 7.06-7.21 (m, 2H); 4.40 (t, 2H); 3.17-3.27 (m, 4H); 2.58-2.64 (m, 2H); 2.41-2.47 (m, 2H); 1.39-1.42 (m, 2H); 1.20-1.31 (m, 12H); 0.77-0.89 (m, 3H)
【０１２５】
（実施例Ｉ）
２−アミノ−２−［２−［３−ヨード−４−（ヘプチルオキシ）フェニル］エチル］−１，３−プロパンジオール
【０１２６】
【化２８】
実施例Ｇの合成について記載した手順と同様にして、表題化合物が、２−アミノ−２−［２−［４−（ヘプチルオキシ）フェニル］エチル］−１，３−プロパンジオールから調製される。
LCMS RtB= 1.20分; [M]+ = 436.0
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.60 (s, 1H); 7.12-7.18 (m, 1H); 6.8-6.78 (m, 1H); 4.42 (br s, 2H); 3.92 (m, 2H); 3.09-3.25 (m, 4H); 2.6-2.67 (m, 2H); 1.62-1.73 (m, 2H); 1.38-1.56 (m, 4H); 1.2-1.36 (m, 6H); 0.81-0.88 (m, 3H).
【０１２７】
（実施例Ｊ）
リン酸モノ［（Ｓ）−２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−３−ヨード−４−オクチルフェニル）ブチル］エステル
【０１２８】
【化２９】
【化３０】
ａ）４−ヒドロキシメチル−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］オキサゾリジン−２−オン
実施例７に記載の化合物（１ｇ、２．３ミリモル）の２Ｎ ＮａＯＨ（１０ｍＬ）懸濁液にクロロギ酸ベンジル（０．３７ｍＬ、２．４７ミリモル）を添加する。混合物を室温で一夜保持する。次いで、混合物を、１Ｎ ＨＣｌで酸性とし、塩化メチレンで抽出する。有機相を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮する。残留物をシリカゲルカラムで精製して、白色粉末として表題化合物を得る。
UPLCMS RtD= 3.36分; [M+H]+ = 460
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.65 (s, 1H); 7.59 (d, 1H); 7.04-7.23 (m, 2H); 5.08 (t, 1H); 4.16 (d, 1H); 4.06 (d, 1H); 3.30-3.41 (m, 2H); 2.55-2.69 (m, 2H); 2.42-2.47 (m, 2H); 1.63 (dd, 2H); 1.47-1.52 (m., 2H); 1.18-1.25 (m, 10H); 0.74-0.91 (m, 3H)
ｂ）リン酸モノ−｛（Ｒ／Ｓ）−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］オキサゾリジン−２−オン｝エステル
４−ヒドロキシメチル−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］オキサゾリジン−２−オン（８１５ｍｇ、１．７７ミリモル）のジクロロメタン（５ｍＬ）とＴＨＦ（５ｍＬ）との溶液に、０℃で１Ｈ−テトラゾール（６２１ｍｇ、８．８７ミリモル）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジエチル−ホスホルアミダイト（１．５９ｍＬ、５．３２ミリモル）を添加する。室温で１８時間後、３０％過酸化水素水溶液（０．５４ｍＬ、１７．７ミリモル）を滴加し、次いで、混合物を室温でさらに９０分間撹拌する。反応混合物を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３で失活させ、水相をジクロロメタンで抽出する。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮する。粗生成物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、黄色オイルとして化合物を得る。
UPLCMS RtD = 4.56分; [M]+ = 651
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm7.87 (s, 1H); 7.67 (s, 1H); 7.08-7.25 (m, 2H); 4.06-4.21 (m, 2H); 3.78 (d, 2H); 1.65-1.86 (m, 2H); 1.46-1.52 (m, 2H); 1.40 (s, 18H); 1.17-1.34 (m, 14H); 0.84 (t, 3H)
ｃ）リン酸モノ−｛（Ｒ／Ｓ）−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］オキサゾリジン−２−オン｝エステルのエナンチオマーの分離を、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−ＰＲＥＰカラムでのＨＰＬＣ（移動層としてヘプタン／ｉＥｔＯＨ／ＭｅＯＨ＝８０／１０／１０）によって分取スケールで実施する。
ｄ）リン酸モノ−｛（Ｓ）−２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）ブチル］｝エステル
リン酸モノ−｛（Ｓ）−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］オキサゾリジン−２−オン｝エステル（３０ｍｇ、０．０４６ミリモル）のエタノール（０．５ｍＬ）溶液に、１０％水酸化リチウム溶液（０．５ｍＬ、２．０９ミリモル）を添加する。６０℃で２０時間後、反応混合物を室温まで冷却し、２日間撹拌する。濃ＨＣｌ（０．５ｍＬ）を添加し、溶液を室温で１時間撹拌する。混合物をＮａＯＨ ４Ｎで中和し、濃縮する。残留物を、ジクロロメタン（２ｍＬ）に取り、Ｈｙｆｌｏ上で濾過し、濾滓をジクロロメタンで２回洗浄する。溶液を濃縮し、白色粉末として表題化合物を得る。
LCMS RtB=1.41分、[M]+=514
【０１２９】
（実施例Ｋ）
リン酸モノ−｛（Ｓ）−２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［２−（２−ヨード−４−オクチルフェニル）ブチル］｝エステル
【０１３０】
【化３１】
実施例Ｊの合成について記載した手順と同様にして、２−アミノ−２−［２−（２−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］−１，３−プロパンジオールから表題化合物を調製する。
LCMS RtB=1.32分、[M]+=513.8
【０１３１】
（実施例Ｌ）
リン酸モノ−｛（Ｓ）−２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［２−（３−ヨード−４−（ヘプチルオキシ）フェニル）ブチル］｝エステル
【０１３２】
【化３２】
実施例Ｊの合成について記載した手順と同様にして、２−アミノ−２−［２−［３−ヨード−４−（ヘプチルオキシ）フェニル］エチル］−１，３−プロパンジオールから表題化合物を調製する。
LCMS RtB=1.28分、[M+H]+=516.0
【０１３３】
（実施例Ｍ）
アリールボロン酸ネオペンチル前駆体の調製
【０１３４】
【化３３】
ａ）［１，１−ビス−ヒドロキシメチル−３−（２−ヨード−４−オクチル−フェニル）−プロピル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ジオキサン（５ｍＬ）中の２−アミノ−２−［２−（２−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］−１，３−プロパンジオール（１１０ｍｇ、０．２５ミリモル）、（Ｂｏｃ）２Ｏ（０．０９ｍＬ、０．３８ミリモル）およびＮａＯＨ １Ｍ（０．２８ｍＬ、０．２８ミリモル）の混合物を、室温で一夜撹拌する。反応混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、濃縮する。粗生成物を、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、無色のオイルとして表題化合物を得る。
LCMS RtB = 1.99分; [M]+ = 533.8
1H-NMR (360MHz, CDCl3) δ ppm 7.67 (s, 1H); 7.07-7.15 (m, 2H); 5.06 (s, 1H); 3.90 (dd, 2H); 3.67 (dd, 2H); 3.42 (bs, 2H); 2.63-2.74 (m, 2H); 2.49-2.63 (m, 2H); 1.81-1.96 (m, 2H); 1.56-1.60 (m, 2H); 1.49 (s, 9H); 1.30-1.43 (m, 10H); 0.87-0.96 (m, 3H)
ｂ）｛５−［２−（２−ヨード−４−オクチル−フェニル）−エチル］−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−５−イル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
［１，１−ビス−ヒドロキシメチル−３−（２−ヨード−４−オクチル−フェニル）−プロピル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２３０ｍｇ、０．４３ミリモル）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、２，２−ジメトキシ−プロパン（５．３ｍＬ、４３．１ミリモル）、アセトン（３．２ｍＬ、４３．１ミリモル）およびｐＴｓＯＨ．Ｈ２Ｏ（８．２ｍｇ、０．０４３ミリモル）を室温で添加する。次いで、反応混合物を１時間撹拌する。溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で失活させ、酢酸エチルで抽出し、次いで、有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮する。粗生成物を、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、無色のオイルとして２４０ｍｇの表題化合物を得る。
LCMS RtB = 1.92分; [M+H]+ = 574.2
1H NMR (360MHz, CDCl3) δ ppm 7.55 (s, 1H) 6.93-7.08 (m, 2H) 4.90 (br. s., 1H) 3.82 (d, 2H) 3.60 (d, 2H) 2.49-2.64 (m, 2H) 2.30-2.47 (m, 2H) 1.77-1.94 (m, 2H) 1.44-1.46 (m, 2H) 1.37-1.43 (m, 9H) 1.36 (s, 3H) 1.34 (s, 3H) 1.16-1.30 (m, 10H) 0.66-0.92 (m, 3H).
ｃ）（２，２−ジメチル−５−｛２−［４−オクチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニル］−エチル｝−［１，３］ジオキサン−５−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
２５ｍＬの２首丸底フラスコにＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（１４．２ｍｇ、０．０１７ミリモル）、ＫＯＡｃ（５１．３ｍｇ、０．５２ミリモル）およびビス−（ネオペンチルグリカト）ジボロン（４３．３ｍｇ、０．１９ミリモル）を仕込み、窒素でフラッシュする。｛５−［２−（２−ヨード−４−オクチル−フェニル）−エチル］−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−５−イル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１００ｍｇ、０．１７ミリモル）のＤＭＳＯ（１ｍＬ）溶液を添加し、溶液を５０℃で３時間撹拌する。生成物を、酢酸エチル中に抽出し、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥する。有機溶媒を減圧下で除去し、生成物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製して白色固体として、表題化合物を得る。
LCMS RtB=2.18分、[M+H]+=560.2
【０１３５】
（実施例Ｎ）
ボロン酸ピナコール前駆体：（２，２−ジメチル−５−｛２−［４−オクチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニル］−エチル｝−［１，３］ジオキサン−５−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
２０ｍＬのＳｕｐｅｌｃｏバイアル瓶に１，１'−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン−パラジウム（ＩＩ）ジクロリドジクロロメタン錯体（８．５４ｍｇ、１０．４６マイクロモル）、酢酸カリウム（１０３ｍｇ、１．０４６ミリモル）およびビス（ピナコラト）ジボロン（９７ｍｇ、０．３８ミリモル）を仕込み、アルゴンでフラッシュする。｛５−［２−（２−ヨード−４−オクチル−フェニル）−エチル］−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−５−イル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２００ｍｇ、０．３４９ミリモル）のＤＭＳＯ（６ｍＬ）溶液を添加し、溶液を８０℃で４時間撹拌する。反応混合物をＨ２Ｏで失活させ、酢酸エチルで抽出する。有機層を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、粗生成物を、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、白色粉末として表題化合物を得る。
LCMS RtD= 1.90分; [M+H]+ = 574.4
1H NMR (360MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.44-7.46 (m, 1H); 7.21 (d, 1H); 7.00 (d, 1H); 6.51 (br. s., 1H); 3.92 (d, 2H); 3.69 (d, 2H) 2.64-2.72 (m, 2H); 2.52-2.56 (m, 2H); 1.78-1.85 (m, 2H); 1.49-1.58 (m., 2H); 1.41-1.46 (m, 9H); 1.34-1.36 (m, 6H); 1.30-1.32 (m, 12H); 1.25-1.29 (m, 10H); 0.84-0.90 (m, 3H).
【０１３６】
（実施例Ｏ）
ボロン酸トリフルオロ前駆体：（２，２−ジメチル−５−｛２−［４−オクチル−２−（トリフルオロボロラン−２−イル）−フェニル］−エチル｝−［１，３］ジオキサン−５−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
ボロン酸ピナコリル（２００ｍｇ、０．３５ミリモル）のメタノール（２ｍＬ）溶液にフッ化水素カリウム水溶液（０．４５ｍＬ、１．９７ミリモル）を添加する。生じるスラリーを室温で１５分間撹拌し、真空で濃縮し、次いで、熱アセトンに溶解し、濾過し、真空で濃縮する。濾液を、熱メタノールから再結晶させて、白色固体として表題化合物を得る。
LCMS RtD= 1.75分; [M-K]+ = 514,3
1H NMR (360MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.16 (s, 1H); 6.75 (s, 2H); 6.39 (br. s., 1H); 3.98 (d, 2H); 3.59 (d, 2H); 2.52-2.56 (m, 2H); 2.39-2.46 (m, 2H); 1.75-1.82 (m, 2H); 1.48-1.56 (m, 2H); 1.43 (s, 9H); 1.31-1.34 (m, 6H); 1.23-1.30 (m, 10H); 0.82-0.92 (t, 3H)
【０１３７】
（実施例Ｐ）
ボロン酸前駆体を経由する１２３Ｉを用いた標識生成物の一般的調製手順
担体非添加のＮａ１２３Ｉ（７４ＭＢｑ、０．１％ＮａＯＨ水溶液中）を、アリールボロン酸前駆体（５０％ＴＨＦ水溶液中の４×１０−２Ｍ溶液１００ｍＬ）を入れた２ｍＬのＷｈｅａｔｏｎバイアル瓶中に入れる。反応バイアル瓶を密封し、アルミホイルで覆い、混合物を室温で５分間撹拌する。１滴の１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液を添加して過剰のヨウ素を分解する。１２３Ｉ含有中間体を、酢酸エチル中の３Ｎ ＨＣｌの存在下で脱保護して、所望の１２３Ｉ含有化合物を得る。放射性ヨウ素化生成物を、溶離液としてペンタン：ＥｔＯＡｃ（５０：１）を使用してシリカゲルＳｅｐ−ｐａｋカートリッジを通過させることによって単離する。
【０１３８】
Ｓ１Ｐ受容体／ＣＨＯ膜調製物を使用するＧＴＰγＳ結合アッセイ
該アッセイは、ＳＰＡ技術（Ａｍｅｒｓｈａｍ社）に基づき、９６ウェルのフォーマットで実行される。膜は、対象とするＳ１Ｐ受容体を安定的に発現しているＣＨＯ細胞から調製される。アリコートは−８０℃で貯蔵される。２５μｇ／ｍＬサポニンおよび１０μＭ ＧＤＰを含むアッセイ緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、および０．１％脂肪不含ＢＳＡ）中に再懸濁された膜（５〜１０μｇ／ウェル）を、ＷＧＡで被覆されたＳＰＡビーズ（最終濃度１ｍｇ／ウェル）と混合する。リガンドおよび［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ（１２５０Ｃｉ／ミリモル、最終濃度０．２ｎＭ）を添加し、プレートを密封する。一定に振とうしながら室温で１２０分間インキュベートした後、プレートを１０００×ｇで１０分間遠心し、ＳＰＡビーズをペレット化する。次いで、プレートを、ＴｏｐＣｏｕｎｔ ＮＸＴ装置（Ｐａｃｋａｒｄ社）中で測定し、ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭソフトウェアを使用してデータを解析する。
【０１３９】
とりわけ、各種Ｓ１Ｐ受容体での次の化合物に関するＥＣ５０値（ｎＭ）を下表に示す：
【０１４０】
【表１】
【０１４１】
Ｌｅｗｉｓラットにおけるリンパ球減少のパーセント
リンパ球ホーミング特性は、次の血中リンパ球減少アッセイで測定することができる：
Ｓ１Ｐ受容体アゴニストまたはビヒクルをラットに静脈内投与する。血液学的監視のための尾部血を、個々のベースライン値を得るために適用の１日前に、そして適用の２、４、８、２４および４８時間後に採取する。このアッセイで、Ｓ１Ｐ受容体アゴニストは、例えば２０ｍｇ／ｋｇ未満の用量で投与した場合、末梢血中リンパ球を例えば５０％減少させる。好ましいＳ１Ｐ受容体アゴニストは、それらのＳ１Ｐ結合特性に加えて、さらにＳ１Ｐ受容体を内部移行／脱感作し、それによって、リゾリン脂質、すなわちスフィンゴシン１−リン酸（Ｓ１Ｐ）、スフィンゴホスホリルコリン（ＳＰＣ）、リゾホスファチジン酸（ＬＰＡ）などを含むリゾリン脂質によって促進される脈管系細胞、例えば内皮細胞上での炎症過程に拮抗する化合物である。化合物の内部移行／脱感作能力は、ヒトのｍｙｃでタグ化されたＳ１Ｐ受容体をトランスフェクトされたＣＨＯ細胞を使用して測定される。
【０１４２】
【表２】
【０１４３】
本発明の放射性標識されたＦＴＹ７２０誘導体を使用し、例えば、ラットにおける生体外(ex vivo)での、またはヒト以外の霊長類および人間におけるインビボでのそれらの分布および濃度を、当業者に公知の方法、例えばＰａｕｗｅｌｓら（Current Pharmaceutical Design 2009,15,928〜934）またはBergstroemら（Eur J Nucl Med 1997,24,596〜601）に記載されているように使用することによって測定することができる。
【０１４４】
当業者は、本発明の精神および本質的特徴から逸脱することなしに、本明細書中に記載されたものの変形、修正および他の実施を思いつくであろう。したがって、本発明の範囲は、前述の例示的説明および実施例によってではなく後述の特許請求の範囲によって定義されるべきであり、該特許請求の範囲の意味および同義の範囲に包含されるすべての変更は、その中に包含されると解釈される。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規化合物、特に新規放射性化合物、それらの調製、ならびに自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患、例えば多発性硬化症などの、Ｓ１Ｐ受容体に関連する疾患または障害の分野における造影技術および診断ツールのための放射性トレーサー／マーカーとしてのこのような新規放射性化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
多発性硬化症（ＭＳ）は、若年成人における神経学的障害の主要原因であり、最も多い中枢神経系の脱髄性障害である。ＭＳは、いくつかの形態をとり、ほとんどすべての神経学的症状が出現する可能性がある。こうした症状は、不連続の発作において（再発型）、または時間とともに徐々に増大しながら（進行型）、出現する。発作の中間で症状は消失することもあるが、特に疾患が進行するにつれて永続的な神経学的障害が出現することが多い。ＭＳの徴候および症状は、多くの他の医学的問題に類似している可能性があるので、この疾患は診断するのが困難である。診断過程を容易にし、標準化するために、脱髄領域（ＭＳ病変またはプラーク）を視覚化し追跡するための脳および脊椎の神経造影分析および磁気共鳴造影（ＭＲＩ）を含む診断基準が確立されている。
しかし、現在のところ、ＭＳに対して完全に特異的である診断検査は存在せず、生検または死後検査のみが、絶対的に確実な診断をもたらすことができる。したがって、多発性硬化症を診断するのに有効な方法が医学において大いに必要とされている。
【０００３】
非侵襲性の核造影技術は、実験動物、患者および志願者を含む生存対象の生理学および生化学に関する情報を得るのに使用することができる。これらの技術は、生存対象に投与された放射性トレーサーから放出される放射線を検出できる造影装置の使用に依拠する。得られた情報を再構成して、放射性トレーサーの分布および／または濃度を時間の関数として明らかにする平面画像および断層画像を提供することができる。多発性硬化症、脳疾患または脱髄性疾患にとってとりわけ興味深いこのような技術の例は、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、三次元画像を作り出す核医学造影技術、または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、ガンマ線を使用する核医学断層造影技術である。
【０００４】
これらの技術を使用するための要件の１つが、適切なトレーサーを利用できることである。このようなトレーサーは、例えば、特定の臓器または組織中に蓄積することができ、そのため、投与後にトレーサーを視覚化すると、これらの組織または臓器を視覚化することを可能にする。あるいは、トレーサーは、疾患または障害の場合に（例えば、このような特定の受容体がこれらの疾患または障害に関連している場合に）分布される、または何らかの形で変更される特徴的な活性（例えば、特定の受容体に対する結合力を有する）を有することができ、そのため、体中のトレーサーを視覚化すると、このような疾患または障害を検出し、段階付け、または追跡することが可能になる。視覚化するため、その化合物を放射性標識する。したがって、放射性標識は、その化合物の特定の特性を変えないことが必須である。
【０００５】
多くの疾患または障害は、スフィンゴシン１−リン酸（Ｓ１Ｐ）の受容体に何らかの形で関連していることが知られているか、または推測されている。Ｓ１Ｐは、増殖、細胞骨格の組織化などの多様な細胞応答を仲介し、免疫細胞の輸送、血管の恒常性、または中枢神経系における細胞間情報伝達の調節などの現象に関連している生物活性のあるスフィンゴ脂質である。Ｓ１Ｐは、体液および組織中に様々な濃度で含まれ、炎症部位での多面発現性メディエーターの過剰産生は、種々の病理学的状態に関与している可能性がある。遺伝子欠損研究および逆薬理学は、Ｓ１Ｐの多くの効果が５種のＧタンパク質共役型Ｓ１Ｐ受容体サブタイプ（Ｓ１Ｐ受容体）を介して仲介されるという証拠を提供した。受容体サブタイプＳ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ２およびＳ１Ｐ３は、広範に発現され、心血管系で優位な受容体である。Ｓ１Ｐ１は、また、リンパ球上の優位な受容体であり、二次リンパ器官からのそれらの放出を調節する。Ｓ１Ｐ４受容体はリンパ系で、Ｓ１Ｐ５は中枢神経系（ＣＮＳ）の白質路中で発現される。
【０００６】
合成リガンドとこれらのＳ１Ｐ受容体との相互作用は、広範な治療的用途のための新規な戦略を提供する。
【０００７】
プロトタイプのＳ１Ｐ受容体モジュレーター、ＦＴＹ７２０（フィンゴリモド、２−アミノ−２−［２−（４−オクチルフェニル）エチル］プロパン−１，３−ジオール）は、５種のＳ１Ｐ受容体サブタイプ中の４種を標的とし、リンパ球性および内皮性Ｓ１Ｐ１を介するリンパ球輸送、ならびにおそらくはさらなるＳ１Ｐ受容体サブタイプによる他の炎症過程を調節するようにいくつかのレベルで作用することができる。ＦＴＹ７２０は、Ｓ１Ｐ１（０．３ｎＭ）、Ｓ１Ｐ４（０．６ｎＭ）およびＳ１Ｐ５（０．３ｎＭ）に高い親和性で、Ｓ１Ｐ３（３．１ｎＭ）にはより低い約１０分の１の親和性で結合するが、Ｓ１Ｐ２には結合しない。進行中の臨床試験は、ＦＴＹ７２０が再発性−寛解性の多発性硬化症の効果的な治療を提供できることを指摘している（例えば、「ＦＴＹ７２０療法は多発性硬化症におけるＴ細胞部分集合に対して種々の効果を発揮する（FTY720 therapy exerts differential effects on T cell subsets in multiple sclerosis）」Mehling Mら、Neurology.2008年10月14日;71(16):1261〜7）中に記載されている）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
ＦＴＹ７２０の治療作用をさらに明らかにするために、例えば、その薬物動態および患者での臓器内分布を定量化するために、該薬物を模倣するのに使用され得る、ＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体を調製する必要もある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
驚くべきことに、本発明者らは、放射性同位体であってもよい原子を含有するＦＴＹ７２０誘導体を特定した。このような誘導体は、ＦＴＹ７２０の薬物動態および物理化学的活性を模倣することができる。例えば、それらの誘導体は、ＦＴＹ７２０の次の特性：臓器内分布、Ｓ１Ｐ受容体に対する親和性および選択性、リン酸化の速度論のうちの１つまたは複数を模倣することができる。
【００１０】
ＦＴＹ７２０の特性から考えて、トレーサーまたは造影剤として使用することのできる、すなわち、１つまたは複数の放射性同位元素を導入してもＦＴＹ７２０の特性を模倣することのできるＦＴＹ７２０誘導体を開発する必要がある。
【００１１】
ヨウ素および臭素（それぞれ、約１２７および８０Ｄａの原子量を有する）は、特にＦＴＹ７２０（分子量は３０７．５）に対比して著しく重い原子である。したがって、化合物の物理化学的および薬物動態学的特性を変化させると予想されるこのようなハロゲン原子の導入にもかかわらず、ハロゲン原子を導入しても同様の薬物動態学的特性を維持しながらＦＴＹ７２０に近い親和性および選択性のプロフィールでＳ１Ｐ受容体に結合することのできるＦＴＹ７２０誘導体を調製することが可能であることは驚くべきことである。放射性標識の後、これらの化合物はインビトロおよびインビボでの造影用途のために使用することができる。同位体で適切に標識されている場合、これらの薬剤は、Ｓ１Ｐ受容体の選択的標識のための、例えばサブタイプＳ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５の少なくとも１種のための組織病理学的標識剤、造影剤、および／またはバイオマーカーとして貴重な特性を提示する。より詳細には、本発明の化合物は、Ｓ１Ｐ受容体をインビトロまたはインビボで標識するための、とりわけサブタイプＳ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５受容体の少なくとも１種をインビトロまたはインビボで標識するためのマーカーまたは放射性トレーサーとして有用である。
【００１２】
さらに、これらの化合物は、おそらくは、Ｓ１Ｐ受容体に対するそれらの親和性とは無関係である、ミエリンシート中への挿入などの機構によって、ミエリン中に蓄積する傾向がある。それゆえ、それらの化合物は、ミエリンシートに異常のある疾患および障害における、例えば脱髄性疾患におけるミエリンを造影するのにも適している。
【００１３】
本発明の化合物中に組み込むことのできる適切な放射性核種としては、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒまたは７６Ｂｒが挙げられる。化合物中に組み込むべき放射性核種の選択は、具体的な分析用途または薬学的用途によって決まる。したがって、インビトロでＳ１Ｐ受容体を標識する場合、および競合アッセイの場合には、１２５Ｉまたは１３１Ｉを組み込んだ化合物が好ましい。本発明の特定の実施形態において、診断および研究用の造影剤（陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ））の場合には、それぞれ１２４Ｉまたは１２３Ｉを組み込んだ化合物が好ましい。
【００１４】
これらのトレーサーは、組織断面中のＳ１Ｐ受容体をインビトロまたはインビボで造影するために、例えばＳ１Ｐ受容体に対して親和性を有する化合物の受容体占有率を分析するために使用することができ、したがって、このような化合物の潜在的な治療的用途を評価することができる。
【００１５】
このようなトレーサーは、また、Ｓ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす疾患および障害、例えば自己免疫疾患または多発性硬化症などの脱髄性疾患を診断または段階付けるために使用することができる。それらは、また、Ｓ１Ｐ受容体との相互作用を介して作用する薬物での治療による利益を受けやすい患者集団を評価するのに、または特定の患者集団におけるＦＴＹ７２０の分布を推定するのに使用することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明の化合物
本発明は、ＦＴＹ７２０の新たな誘導体、とりわけＦＴＹ７２０の新たな放射性誘導体、すなわち、ＦＴＹ７２０の放射性標識誘導体、診断および治療的用途における医学的画像化のためのトレーサーとしてのＦＴＹ７２０の放射性標識誘導体の使用を提供する。
【００１７】
前述で定義したように、「ＦＴＹ７２０の誘導体」は、ＦＴＹ７２０またはＦＴＹ７２０−リン酸塩に同一または類似した構造を有し、さらに少なくとも１つのヨウ素または臭素原子、例えば、ヨウ素または臭素の少なくとも１つの放射性同位体を含む化合物を指す。
【００１８】
ＦＴＹ７２０は、下記に示す通りの２−アミノ−２−［２−（４−オクチルフェニル）エチル］プロパン−１，３−ジオールである：
【００１９】
【化１】
【００２０】
ＦＴＹ７２０−リン酸塩は、下記に示す通りのＦＴＹ７２０のリン酸化された形態を指す：
【００２１】
【化２】
【００２２】
用語「ＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体」および「本発明の放射性標識された化合物」は、放射性である、すなわち少なくとも１つのヨウ素または臭素原子が、ヨウ素または臭素の放射性同位体で、例えば対応する放射性同位体で置換されている、例えば置き換えられている、本明細書に記載の通りのＦＴＹ７２０誘導体を指す。すなわち、本発明の放射性標識された化合物は、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子、例えば１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含むことができる。
【００２３】
本発明によるＦＴＹ７２０誘導体、およびＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体は、式Ｉの化合物である：
【００２４】
【化３】
［式中、
Ｘａは、Ｃ１〜１０アルキルまたはＯＣ１〜９アルキル、例えばＣ８アルキル、例えばｎ−オクチルであり、
Ｒ１は、ＨもしくはＣ１〜６アルキル、またはＰＯ３Ｈ２であり、
ここで、少なくとも１つの水素原子、例えば、炭素原子に連結された少なくとも１つの水素原子は、ヨウ素または臭素原子で置き換えられている］。
【００２５】
式ＩのＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体において、少なくとも１つの水素原子、例えば、炭素原子に連結された少なくとも１つの水素原子は、ヨウ素または臭素の放射性同位体で、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される原子で、例えば１２３Ｉまたは１２４Ｉで処理、例えば、置き換えられる。
特定の実施形態において、式ＩのＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体は、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を、例えば、１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有し、例えば、１２３Ｉまたは１２４Ｉを含有する。
【００２６】
好ましくは、放射性同位体で置換される、例えば置き換えられる水素原子は放射性標識される炭素原子に連結されている。
【００２７】
ヨウ素または臭素原子は、分子中のアリール環上の置換基として組み込むことができ、この場合、該誘導体は、「ヨウ素化アリールＦＴＹ７２０誘導体」または「臭素化アリールＦＴＹ７２０誘導体」と呼ばれる。このようなアリールＦＴＹ７２０誘導体は、１つまたは複数のヨウ素または臭素原子を、例えばヨウ素または臭素の少なくとも１種の放射性同位体を含有することができる。
【００２８】
本発明は、式Ｉａの化合物、例えば、放射性標識された化合物を提供する：
【００２９】
【化４】
［式中、
Ｒ１は、前述で定義した通りであり、
Ａ１およびＢ１の少なくとも一方は、Ｉ（ヨウ素）またはＢｒであり、他方はＨであり、
Ｘ１は、Ｃ１〜１０アルキルまたはＯＣ１〜９アルキルであり、例えば、Ｘ１はＣ８アルキルである］。
【００３０】
１つの特定の実施形態において、Ｒ１は、ＨまたはＰＯ３Ｈ２である。
【００３１】
別の実施形態において、Ｘ１は、ｎ−オクチルまたはｎ−ヘプチルオキシである。
例えば、Ｒ１はＨであり、Ｘ１はｎ−オクチルであるか、またはＲ１はＰＯ３Ｈ２であり、Ｘ１はｎ−オクチルである。
【００３２】
さらに別の実施形態において、Ａ１は、Ｉ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択され、Ｂ１がＨであるか、またはＡ１はＨであり、Ｂ１がＩ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択されるかのいずれかである。
【００３３】
好ましくは、
Ｒ１は、ＨまたはＰＯ３Ｈ２であり、
少なくとも１つのＡ１およびＢ１はＩ（ヨウ素）であり、他方はＨであり、
Ｘ１は、ｎ−オクチルまたはｎ−ヘプチルオキシである。
【００３４】
式Ｉａの放射性標識された化合物において、少なくとも１つのヨウ素または臭素原子は、ヨウ素または臭素の放射性同位体で、例えば、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１２３Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される、例えば、１２５Ｉおよび１２４Ｉから選択される放射性同位体で置換、例えば置き換えられている。
【００３５】
別の実施形態において、ＦＴＹ７２０誘導体のアルキル鎖は、二重結合で終結しており、ここで、その炭素原子の少なくとも１つは、１つのヨウ素または臭素で置換、例えば置き換えられており、それゆえ、該誘導体は、「ヨウ素化アリルＦＴＹ７２０誘導体」または「臭素化アリルＦＴＹ７２０誘導体」と呼ばれる。
【００３６】
本発明は、さらに、式Ｉｂの化合物、例えば、放射性標識された化合物を提供する：
【００３７】
【化５】
［式中、
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、またはＰＯ３Ｈ２であり、
Ｅ、ＦおよびＧの少なくとも１つは、Ｉ（ヨウ素）またはＢｒであり、残りはＨであり、例えば、ＦおよびＧの少なくとも一方は、Ｉ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択され、残りはＨであり、
Ｘ２は、Ｃ１〜８アルキルまたはＯＣ１〜７アルキルである］。
【００３８】
別の実施形態において、Ｘ２は、１，６−ｎ−ペンチレンまたはオキシ−ｎ−ブチルである。
【００３９】
一実施形態において、Ｒ２は、ＨまたはＰＯ３Ｈ２である。
【００４０】
別の実施形態において、Ｅ、ＦまたはＧのいずれかは、Ｉ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択され、残りはＨであり、例えば、ＥおよびＧはＨであり、Ｆは、Ｉ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択される。
【００４１】
よりさらなる実施形態において、Ｒ２はＰＯ３Ｈ２であり、Ｅ、ＦおよびＧの少なくとも１つはＩ（ヨウ素）またはブロモであり、残りはＨである。例えば、Ｒ２がＰＯ３Ｈ２であり、ＥがＨであって、ＧがＩ（ヨウ素）またはブロモであり、ＦがＨであるか、または逆に、ＧがＨであり、ＦがＩ（ヨウ素）またはブロモであるかのいずれかである。
【００４２】
別の実施形態において、Ｅは、Ｉ（ヨウ素）およびブロモからなる群から選択され、ＧおよびＨは双方ともＨである。
【００４３】
式Ｉａの放射性標識された化合物において、少なくとも１つのヨウ素または臭素原子は、ヨウ素または臭素の放射性同位体で、例えば、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１２３Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される、例えば、１２５Ｉおよび１２４Ｉから選択される放射性同位体で置換、例えば置き換えられている。
【００４４】
本明細書に記載の式Ｉ、ＩａおよびＩｂの化合物の定義中で、用語ヨウ素（「Ｉ」）および臭素（「Ｂｒ」）は、それぞれ、ヨウ素および臭素の原子を指し、このような原子のすべての同位体を包含する。
【００４５】
したがって、式Ｉ、ＩａおよびＩｂの化合物は、放射性標識された化合物であってもよく、例えば、ヨウ素原子は、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１２３Ｉおよび１３１Ｉから選択することができ、臭素原子は、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択することができる。
【００４６】
好ましくは、本発明の化合物は、少なくとも１つの放射性標識された原子、例えば、１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される原子を含有する。
【００４７】
式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物が、分子中に１つまたは複数の不斉中心を有する場合、本発明は、種々の光学異性体、ならびにラセミ化合物、ジアステレオ異性体、およびこれらの混合物を包含すると理解されたい。式ＩａまたはＩｂの化合物は、アミノ基を所持する炭素原子が不斉である場合、好ましくは、この炭素原子の位置でＳ−配置を有する。
式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物は、遊離または塩の形態で存在することができる。式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の薬学的に許容される塩の例としては、無機酸との塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩および硫酸塩；有機酸との塩、例えば、酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、メタンスルホン酸塩およびベンゼンスルホン酸塩；あるいは適切なら、ナトリウム、カリウム、カルシウムおよびアルミニウムなどの金属との塩；トリエチルアミンなどのアミンとの塩；ならびにリシンなどの二塩基性アミノ酸との塩が挙げられる。本発明の化合物およびその塩は、水和物および溶媒和物の形態を包含する。
【００４８】
式Ｉａの化合物、例えば式Ｉａの放射性標識された化合物の例としては、次の化合物がある：
【００４９】
【化６】
【化７】
【００５０】
式Ｉｂの化合物、例えば式Ｉａの放射性標識された化合物の例としては、次の化合物がある：
【００５１】
【化８】
【化９】
【００５２】
前に例示した化合物において、原子Ｉは、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒまたは７６Ｂｒのいずれか１つで、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉまたは１３１Ｉで、例えば、７５Ｂｒまたは７６Ｂｒで、あるいは例えば、１２３Ｉまたは１２４Ｉで置換、例えば置き換えることができる。この場合、該化合物は、ＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体である。
【００５３】
方法
Ｉｂの化合物、例えば、化合物Ｉ〜Ｎは、次のように要約される方法１により得られる。
【００５４】
【化１０】
【００５５】
該方法を以下でより詳細に説明する。
【００５６】
ステップ１
式（ＶＩＩ）の化合物は、式（Ｖ）の化合物を式（ＶＩ）の化合物と、適切なカップリング試薬、例えば、ＤＩＡＤまたはＤＥＡＤおよびＰＰｈ３の存在下に、溶媒または溶媒混合物、例えば、ジオキサン、ＴＨＦの存在下で反応させることによって得られる。
【００５７】
ステップ２
式Ｉ、ＪまたはＮの化合物は、式（ＶＩＩ）の化合物を、適切な酸、例えば、濃塩酸、濃硫酸またはトリフルオロ酢酸の存在下に、溶媒、例えば、ジオキサン、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨの存在下で反応させることによって得られる。
【００５８】
ステップ３
式（ＶＩＩＩ）の化合物は、式（ＶＩＩ）の化合物をリン酸化剤、例えば、ホスホロクロリデート、ジフェニルクロルホスフェート、シアノエチルホスフェート、ホスホルアミダイト（ジ−ｔｅｒｔブチルジエチルホスホルアミダイトなど）と、溶媒または溶媒混合物、例えば、ＤＣＭ、ＴＨＦまたはジオキサンの存在下で反応させること、続いて酸化剤、例えばＨ２Ｏ２での酸化反応によって得られる。
【００５９】
ステップ４
式Ｋ、ＬまたはＭの化合物は、式（ＶＩＩＩ）の化合物を、適切な酸、例えば、濃塩酸、濃硫酸またはトリフルオロ酢酸の存在下に、溶媒または溶媒混合物、例えば、ジオキサン、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨの存在下で反応させることによって得られる。
【００６０】
式Ｉａの化合物、例えば、化合物Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅ、ＦおよびＨは、次のスキームによって要約される方法２により得られる。
【００６１】
【化１１】
【化１２】
【００６２】
ステップ５
式Ａ、ＢまたはＤの化合物は、式（ＩＸ）の化合物を、ヨウ素、適切な酸、例えば、濃塩酸、濃硫酸またはトリフルオロ酢酸の存在下に、溶媒または溶媒混合物、例えば、ＣＨ３ＣＮ、ジオキサン、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨの存在下で反応させることによって得られる。
【００６３】
ステップ６
式（Ｘ）の化合物は、式Ａ、ＢまたはＤの化合物を、クロロギ酸ベンジル、適切な塩基、例えば、水酸化ナトリウムの存在下に、溶媒または溶媒混合物、例えば、ＣＨ３ＣＮ、ジオキサン、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨの存在下で反応させることによって得られる。
【００６４】
ステップ７
式（ＸＩ）の化合物は、式（Ｘ）の化合物をリン酸化剤、例えば、ホスホロクロリデート、ジフェニルクロルホスフェート、シアノエチルホスフェート、ホスホルアミダイト（ジ−ｔｅｒｔブチルジエチルホスホルアミダイトなど）と、溶媒または溶媒混合物、例えば、ＤＣＭ、ＴＨＦまたはジオキサンの存在下で反応させること、続いて酸化剤、例えばＨ２Ｏ２での酸化反応によって得られる。
【００６５】
ステップ８
式Ｅ、ＦまたはＨの化合物は、式（ＸＩ）の化合物を、適切な酸、例えば、濃塩酸、濃硫酸またはトリフルオロ酢酸の存在下に、溶媒または溶媒混合物、例えば、ジオキサン、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨの存在下で反応させることによって得られる。
【００６６】
本発明は、また、式（ＩＩＩａ）または（ＩＶａ）の放射性標識された化合物を提供する：
【００６７】
【化１３】
【００６８】
式（ＩＩＩａ）および（ＩＶａ）の化合物は、対応するスタナンまたはボランを、放射性ハロゲン化アルカリ金属の供給源の存在下で反応させることによって得られる。式（ＩＩＩａ）および（ＩＶａ）の化合物の標識は、いくつかの技術によって達成され得る。例えば、標識は、式（ＩＩＩａ）、（ＩＶａ）の化合物のトリアルキルスタナン前駆体、ボラン前駆体、またはボロン前駆体、ならびにＮａ１２３Ｉ、Ｎａ１２４Ｉ、Ｎａ１２５Ｉ、Ｎａ１３１Ｉ、Ｎａ７５ＢｒまたはＮａ７６Ｂｒなどのハロゲン化アルカリ金属を、クロラミン−Ｔ、過酢酸または過酸化水素水溶液などの酸化剤、および塩酸、酢酸または酸性緩衝液などの酸の存在下に、好ましくは外界温度でおよび適切な溶媒中で反応させることによって実施することができる。標識は、また、酸性媒質中での非放射性ヨウ化分子と放射性ハロゲン化アルカリ金属との間の交換によって行うことができる。
【００６９】
本発明者らの取組みは、放射性ハロゲン化されたヨード−ＦＴＹ７２０誘導体に対する前駆体としての有機ホウ素化合物（ボロン酸、ピナコール−ボロネート、トリフルオロボロネートおよびボロン酸ネオペンチル）の使用を基礎にした。
【００７０】
放射性標識された式Ｉａの化合物、例えば、化合物Ａ、ＢおよびＤは、次のスキームによって要約される方法３により得ることができる。
【００７１】
【化１４】
【００７２】
ステップ９
式（ＸＩＩ）の化合物は、化合物Ａを、Ｇｒｅｅｎｅらによって記載されているような適切な保護基（Protective groups in Organic Synthesis,Wiley）、例えば、アルキルｔ−ブチルカルボネート、アセトニド、酢酸エステルの存在下に、適切な塩基、例えば、水酸化ナトリウムの存在下において、適切な溶媒または溶媒混合物、例えば、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ジオキサンの存在下で反応させることによって得られる。
【００７３】
ステップ１０
式（ＸＩＩＩ）の化合物は、式（ＸＩＩ）の化合物を、適切なパラジウム触媒、例えば、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２−２ＰＰｈ３、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）の存在下に、適切な塩基、例えば、Ｋ２ＣＯ３、ＫＯＡｃの存在下に、適切な溶媒または溶媒混合物、例えば、ジオキサン、ＤＭＳＯの存在下で、適切なジボロン化合物、例えば、ビス（ピナコラト）ジボロン、ビス（ネオペンチル）ジボロンのクロスカップリング反応を介して反応させること、続いて、適切な酸、例えば塩酸またはフッ化水素カリウムの存在下で加水分解することによって得られる。
【００７４】
ステップ１１
式（ＸＩＶ）の化合物は、式（ＸＩＩＩ）の化合物を、ヨウ素の供給源、例えばＮａＩの存在下に、適切な酸化剤、例えば、クロラミン−Ｔ、過酢酸または過酸化水素水溶液の存在下に、適切な塩基の存在下に、適切な溶媒または溶媒混合物、例えば、Ｈ２Ｏ、ＴＨＦ、ジオキサンの存在下で反応させること、続いて、保護基を適切な酸、例えば、塩酸、トリフルオロ酢酸で除去することによって得られる。
【００７５】
放射性標識された式Ｉｂの化合物、例えば、化合物Ｉ、ＪおよびＮは、方法３に類似の合成スキームに従って得られる。
【００７６】
疾患
前述で定義したように、「Ｓ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす疾患または障害」は、１種または複数のＳ１Ｐ受容体の、例えば、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ４、Ｓ１Ｐ５およびＳ１Ｐ３受容体のいずれか１種の不均衡または機能不全をもたらす疾患または障害を指す。
例えば、このような疾患としては、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、神経変性疾患、脳疾患、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、癌、またはＳ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす任意の疾患が挙げられる。
【００７７】
本明細書中で定義する場合、自己免疫疾患には、限定はされないが、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節炎、リウマチ様関節炎、糖尿病（例えば、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型成人発症糖尿病）、ブドウ膜炎が含まれる。
【００７８】
本明細書中で定義する場合、心血管疾患には、限定はされないが、高血圧症、心拍数調節不全が含まれる。
【００７９】
本明細書中で定義する場合、脱髄性疾患には、限定はされないが、多発性硬化症、およびそれに付随する障害、例えば、視神経炎およびギラン・バレー症候群が含まれる。
【００８０】
本明細書中で定義する場合、神経変性疾患には、限定はされないが、進行性認知症、β−アミロイド関連炎症性疾患、アルツハイマー病、アミロイドーシス、レビー小体病、多発脳梗塞性認知症、ピック病、または脳動脈硬化症が含まれる。
【００８１】
本発明は、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、神経変性疾患、脳疾患、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、および癌から選択される疾患、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、神経変性疾患、および脳疾患から選択される疾患に罹患したまたは患う患者にとりわけ適合している。
別の実施形態において、本発明は、このような疾患を患っていると疑われる患者に向けられる。
【００８２】
診断および造影での使用
前に述べたように、本発明は、本明細書中で前に定義したような新規ＦＴＹ７２０誘導体、例えば、とりわけ脳または脊髄の造影のための適切な造影装置を使用するインビトロおよびインビボでの造影の用途のための、ミエリンシートまたはＳ１Ｐ受容体のトレーサーとして使用することのできる、ヨウ素化または臭素化されたＦＴＹ７２０誘導体、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物を提供する。
【００８３】
ＰＥＴ／ＳＰＥＣＴ造影と確立済のＭＲＩ技術との間には、いくつかの相違が存在し、両方法は、相補的と考えることができる。ＭＲＩは、例えば多発性硬化症中の病変を造影するのに使用することができるが、限界があり、ＰＥＴ／ＳＰＥＣＴのトレーサーはその限界を克服することができる。例えば、ＭＲＩ法は、組織の水分含有量に基づくものであり、発作、出血、または炎症過程に続く、例えば、神経変性に由来するＴ２強調ＭＲＩ超強度画像を明瞭には識別しない。対照的に、本発明の化合物は、ミエリンシート中への挿入に続いて、またはミエリン中に発現されたＳ１Ｐ受容体への結合によって、特定のミエリンの造影を可能にする。
さらに、ＰＥＴ／ＳＰＥＣＴ造影は、例えば、慢性病変と急性（活性）病変とを区別するのにＧｄをベースにしたコントラスト増強剤の使用を必要としない。最後に、ＭＲＩは、金属インプラント、心臓ペースメーカー、人工内耳、旧世代の動脈瘤クリップ、埋め込み型刺激装置、または眼内金属性外来物を有する患者で禁忌である。
【００８４】
本明細書中で前述で定義したように、「造影装置」は、生存対象に投与された放射性トレーサーから放出される放射線を検出することができ、得られた情報を再構成して平面画像および断層画像を提供することのできる装置を指す。このような画像は、放射性トレーサーの分布および／または濃度を時間の関数として明らかにすることができる。好ましくは、本発明の「造影装置」は、限定はされないが、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を指す。
【００８５】
これらのトレーサーは、組織断面中の、特に脳中のＳ１Ｐ受容体をインビトロまたはインビボで造影するために、例えば、Ｓ１Ｐ受容体に対して、例えば、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４および／またはＳ１Ｐ５受容体に対して親和性を有する化合物の受容体占有率を分析するために使用することができる。本発明の化合物は、例えば、このような受容体に作用する薬物のＳ１Ｐ受容体阻害のレベルを測定するのに有用である。
【００８６】
それらのトレーサーは、このような化合物の潜在的な治療的用途を評価するのに使用することができる。それらは、このような疾患の薬物療法の有効性を監視するのに有用であり得る。
【００８７】
これらのトレーサーは、本明細書中で定義するようなＳ１Ｐ関連疾患または障害、例えば、自己免疫疾患、または多発性硬化症などの脱髄性疾患の所見を診断またはそれを検査するのに使用することができる。
【００８８】
これらのトレーサーは、患者が、Ｓ１Ｐ受容体との相互作用を介して作用する薬物で治療されることに、例えばＦＴＹ７２０で治療されることに感受性であるかどうかを評価するのに使用することができる。
【００８９】
一連の実施形態において、本発明は、以下を提供する：
１．１
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体、例えばＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、例えば、式ＩａおよびＩｂの化合物；あるいはその対応する放射性標識された誘導体、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物、例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含む式ＩａまたはＩｂの化合物。好ましくは、化合物Ａ〜Ｈ、例えば、化合物Ａ、Ｃ、Ｅおよび／またはＧ、あるいはその対応する放射性標識された化合物。好ましくは、化合物Ａおよび化合物Ｅのいずれか１つから選択される化合物、ならびにその対応する放射性標識された化合物。
１．２
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物；あるいはその対応する放射性標識された化合物、例えば、式Ｉ、ＩａおよびＩｂの放射性標識された化合物、例えば、Ｓ１Ｐ受容体を標識するための、例えばＳ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５受容体の少なくとも１つを標識するための、例えば、Ｓ１Ｐ１および／またはＳ１Ｐ５受容体を標識するためのマーカーとしての式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物。
１．３
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物；およびその対応する放射性標識された化合物、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物、例えば、Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患から選択される疾患、例えば多発性硬化症のためのマーカーとしての式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物。
２．１
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物の；あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、例えば陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）のための放射性トレーサーとしての使用。
２．２
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいはその対応する放射性標識された化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患から選択される疾患、例えば多発性硬化症を診断するための使用。
３．
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物の；あるいはその対応する放射性標識された化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、例えば、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患、例えば多発性硬化症に罹患しているまたはそれを有する疑いのある患者における、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いる、インビトロまたはインビボでの造影用途、例えば脳または脊髄造影のための使用。
４．１
対象におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、自己免疫疾患または脱髄性疾患の所見を診断する方法であって、前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体、例えば前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識されたヨードまたはブロモ誘導体、例えば前述で定義した式ＩａまたはＩｂの化合物を使用するステップを含む方法。
４．２
対象におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害をＰＥＴまたはＳＰＥＣＴを使用して診断する、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患または脱髄性疾患を診断する方法であって、前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体、例えば前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体、例えば、前述で定義した式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物を放射性標識するステップを含む方法。
４．３
対象におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患または脱髄性疾患の所見を診断する方法であって、
ａ）前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体、前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識されたヨードまたはブロモ誘導体、例えば前述で定義した式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物を対象に投与するステップ、
ｂ）適切な造影装置、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いて、放射性標識された化合物から放出される放射線を検出または測定するステップ、および任意選択で
ｃ）ステップｂ）で得られた情報を再構成して、放射性標識された化合物の分布および／または濃度を時間の関数として明らかにする平面画像および断層画像を提供するステップ
を含む方法。
４．４
対象におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患または脱髄性疾患の所見を診断する、前記４．３の項目において定義した方法であって、ステップａ）の前に、
前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体を調製する、例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒからなる群から選択される原子、例えば１２３Ｉまたは１２４ＩをＦＴＹ７２０誘導体中に導入する、ステップａ１）
を含む方法。
ステップａ１）は、放射性である１つのヨウ素またはブロモ原子を含有する、例えば１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される、例えば１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される１つの原子を含有する式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物を調製するステップからなっていてもよい。
５．１
炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害に罹患している患者が、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、例えばＳ１Ｐ受容体アゴニストとして作用する化合物、例えばＦＴＹ７２０に応答するかどうかを予測する方法であって、
ａ）前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識されたヨード誘導体、例えば、少なくとも１つの放射性ヨウ素原子を含む式ＩａおよびＩｂの放射性標識された化合物を患者に投与するステップ、および
ｂ）適切な造影装置、例えば陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いて放射性標識された化合物から放出される放射線を検出または測定するステップ
を含む方法。
５．２
どの患者が、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーター、例えば、Ｓ１Ｐ受容体アゴニストとして作用する化合物、例えば、ＦＴＹ７２０に応答するかを予測する、前記５．１の項目において定義した方法であって、ステップａ）の前に、
前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体を調製する、例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒまたは７６Ｂｒからなる群から選択される原子、例えば１２３Ｉまたは１２４Ｉを本発明のＦＴＹ７２０誘導体中に、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物中に導入する、ステップａ１）を含む方法。ステップａ１）は、放射性である１つのヨウ素またはブロモ原子を含有する、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含有する、例えば、１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有する、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物を調製するステップからなっていてもよい。
５．３
特定の患者集団におけるＦＴＹ７２０の分布、例えば脳内分布を推定する方法であって、
ａ）前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体を調製する、例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒまたは７６Ｂｒからなる群から選択される原子、例えば１２３Ｉまたは１２４Ｉを本発明のＦＴＹ７２０誘導体中に、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物中に導入するステップ、
ｂ）例えば炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害に罹患した、またはこのような疾患に罹患するリスクのある、患者集団に前記放射性標識された化合物を投与するステップ、および
ｃ）このような患者のミエリンまたは脳におけるＦＴＹ７２０の分布を視覚化するステップ
を含む方法。
放射性標識された誘導体を調製するステップは、放射性である１つのヨウ素または臭素原子を含有する、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含有する、例えば、１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有する、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物を調製するステップからなっていてもよい。
６．１
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物の、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含有する、例えば１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有する式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、神経変性疾患、または脳疾患の薬物療法の有効性を監視するための使用。
６．２
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えばＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば式ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物の、例えば、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含有する、例えば、１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有する式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、対象におけるミエリンを造影するための、および／または脳または脊髄造影を視覚化するためのトレーサーとしての使用であって、前記方法が、
ａ）前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体、ＦＴＹ７２０の放射性標識されたヨードまたはブロモ誘導体、例えば、前述で定義した式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物を対象に投与するステップ、
ｂ）適切な造影装置、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いて放射性標識された化合物から放出される放射線を検出または測定するステップ、および任意選択で
ｃ）ステップｂ）で得られた情報を再構成して、放射性標識された化合物の分布および／または濃度を時間の関数として明らかにする平面画像および断層画像を提供するステップ
を含む使用。
６．３
ステップａ）の前に、ＦＴＹ７２０の放射性標識された誘導体を調製する、例えば、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒからなる群から選択される原子、例えば１２３Ｉまたは１２４Ｉを本発明のＦＴＹ７２０誘導体中に導入するステップを含む、前記６．２の項目において定義した使用。
６．４
ステップａ）の前に、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒから選択される少なくとも１つの原子を含有する、例えば１２３Ｉおよび１２４Ｉから選択される少なくとも１つの原子を含有する式Ｉ、ＩａまたはＩｂの、例えば式ＩａまたはＩｂの化合物を調製するステップを含む、前記６．２の項目において定義した使用。
６．５
陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を使用する、前記６．２または６．４の項目において定義した使用。
６．６
自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患、例えば多発性硬化症に罹患している、それを有する疑いのある、またはそれに罹患するリスクのある患者における、前記６．２〜６．５の項目において定義した使用。
６．７
前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物の、Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば自己免疫疾患、または脱髄性疾患、例えば多発性硬化症の所見を診断するための使用。
６．８
４．３または４．４の項目において前述で定義した方法による、前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物の、疾患または障害の所見を診断するための使用。
６．９
どの患者がＳ１Ｐ受容体モジュレーターとして作用する化合物、例えばＦＴＹ７２０に応答するかを予測するための、前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいはその対応する放射性標識された化合物の使用。
６．１０
特定の患者集団におけるＦＴＹ７２０の分布、例えば脳内分布を推定するための、前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体の、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体の、例えば、式ＩａまたはＩｂの化合物の、あるいはその対応する放射性標識された化合物の使用。
７．
対象に有効量の、前述で定義したＦＴＹ７２０の放射性標識されたヨードまたはブロモ誘導体、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物、例えば式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物を投与するステップを含む、脳造影またはミエリン造影の方法。
８．
本発明の化合物、例えば、前述で定義したＦＴＹ７２０誘導体、例えば前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、あるいはその対応する放射性標識された化合物、および薬学的に許容される担体または添加剤を含む組成物。
９．
Ｓ１Ｐ受容体、例えば、Ｓ１Ｐ１、Ｓ１Ｐ３、Ｓ１Ｐ４およびＳ１Ｐ５受容体の少なくとも１種を含有する組織病理学的構造体をインビトロまたはインビボで標識するための、本発明の放射性標識された化合物の、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、例えば、式ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、あるいは８の項目において定義した組成物の使用。
【００９０】
インビトロでのオートラジオグラフィーを実施するための、および組織断面上のＳ１Ｐ受容体の分布を測定するための、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の、例えば、放射性標識された化合物Ａ〜Ｍから選択される化合物の、例えば、放射性標識された化合物Ａ、Ｃ、ＥまたはＧの使用が提供される。オートラジオグラフィーは、定量的全身オートラジオグラフィー（ＱＷＢＡ）によって行うことができる。
【００９１】
本明細書中で使用する場合、「薬学的に許容される担体」としては、任意のすべての溶媒、分散媒質、被覆、抗菌および抗真菌剤、等張剤、吸収遅延剤などが挙げられる。薬学的に活性な物質へのこのような媒質および薬剤の使用は、当技術分野で周知である。本発明の化合物は、適切な希釈剤または補助剤を用いて、またはヒト血清アルブミンまたはリポソームなどの適切な担体を用いて患者に投与することができる。薬学的に許容される希釈剤としては、生理食塩水および緩衝水溶液が挙げられる。補助剤としては、レゾルシノール、非イオン性界面活性剤（ポリオキシエチレンオレイルエーテルおよびヘキサデシルポリエチレンエーテルなど）を挙げることができる。
本発明の一実施形態において、本発明の化合物、そのエナンチオマー、立体異性体、ラセミ化合物、または薬学的に許容される塩、例えば、本発明の放射性標識された化合物は、注射（静脈内、筋内または皮下）として非経口的に投与される。該化合物、そのエナンチオマー、立体異性体、ラセミ化合物、または薬学的に許容される塩は、無菌でパイロジェンフリーの非経口で許容される水溶液として製剤化することができる。しかるべきｐＨ、等張性、安定性などを有するこのような非経口で許容される溶液の調製は、当業者にとって公知である。非経口投与に適したいくつかの医薬組成物は、本発明の放射性標識された化合物を、使用直前に無菌の注射可能な溶液または分散液に再構成することのできる１種または複数の薬学的に許容される無菌粉末と組み合わせて含む。医薬組成物は、また、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、該製剤を意図した受容者の血液と等張にする溶質、または懸濁もしくは増粘剤を含むことができる。注射用製剤は、本発明の放射性標識された化合物に加えて、塩化ナトリウム溶液、リンガー溶液、デキストロース溶液、デキストロースと塩化ナトリウムとの溶液、乳酸加リンガー溶液、デキストラン溶液、ソルビトール溶液、ポリビニルアルコールを含む溶液などの等張性ビヒクル、あるいは界面活性剤および粘度増強剤、または当技術分野で公知の他のビヒクルを含む浸透圧の均衡した溶液を含むことができる。製剤は、また、安定剤、保存剤、緩衝剤、抗酸化剤、または当業者にとって公知の他の添加剤を含むことができる。
【００９２】
有効量の本発明の化合物ｄを、造影研究で使用するために薬学的に許容される担体と合わせることができる。
本明細書中で定義する場合、「有効量」は、適切な方法および利用可能な設備、例えば、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴを使用して許容される画像をもたらすのに十分な量を指す。
有効量は、１回を超える投与で投与することができる。
有効量は、治療している状態の本質および重症度、患者が受けた治療的処置の性質に基づいて診断される疾患、または診断される疾患の状態、患者の感受性の程度、患者の年齢、性別、体重、および患者の特異的応答、ならびに線量計測法などの因子に応じて変化する可能性がある。
有効量は、使用する装置およびフィルムに関連する因子に応じて変化する可能性がある。
有効量の選択およびこのような因子の最適化は、当業者にとって周知である。結局、主治医が、それぞれ個々の患者に投与する化合物の量および造影研究の継続期間を決定する。
例えば、１μｇ未満の本発明の放射性標識された化合物、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物、例えば、放射性標識された化合物Ａ〜Ｍから選択される化合物、例えば放射性標識された化合物Ａ、Ｃ、ＥまたはＧが、診断または治療目的などで投与される。本明細書中で定義されている本発明の方法において投与される本発明の放射性標識された化合物の有効量の例には、約１００ｐｇ〜約１０μｇ、例えば、約８０ｐｇ〜約１５μｇ、例えば、約５０ｐｇ〜約２０μｇ、例えば、約３０ｐｇ〜約３０μｇ、例えば、約２０ｐｇ〜約３５μｇ、例えば、約１０ｐｇ〜約４０μｇが含まれる。
例えば、本発明の放射性標識された化合物、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物の有効量は、約１００ｐｇ、約５０ｐｇ、約３０ｐｇ、約２０ｐｇ、約１０ｐｇ、約１ｐｇ、約１００μｇ、約８０μｇ、約５０μｇ、約４０μｇ、約３０μｇ、約２０μｇ、約１０μｇ、約５μｇ、約１μｇでよい。
【００９３】
別の実施形態において、本発明の放射性標識された化合物、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物は、約０．１〜約１０ｍＣｉ、約０．５〜約８０ｍＣｉ、約１〜約５０ｍＣｉ、約１〜約１００ｍＣｉとして投与することができる。
このような範囲および量は、本発明の放射性標識された化合物を、例えば、式Ｉ、ＩａまたはＩｂの放射性標識された化合物を、例えば、放射性標識された化合物Ａ〜Ｍから選択される化合物を、例えば、放射性標識された化合物Ａ、Ｃ、ＥまたはＧを、前に記載の方法によるマーカー、例えば造影剤または診断薬として投与する場合に、あるいは後記のようなキットにおいてとりわけ適している。
【００９４】
別の態様において、前述に記載の本発明の放射性標識された化合物、そのエナンチオマー、立体異性体、ラセミ化合物、または薬学的に許容される塩を、ヒト血清アルブミンなどの担体、またはマンニトールまたはグラシエート（glaciate）などの補助分子を含む薬学的に許容される溶液と組み合わせて含むキットが提供される。キット中で使用するためのヒト血清アルブミンは、任意の方法で、例えば、ヒト血清からのタンパク質の精製を介して、またはヒト血清アルブミンをコードする遺伝子を含むベクターの組換え発現を介して作製することができる。他の物質、例えば、洗浄剤、希薄アルコール、炭水化物なども、担体として使用することができる。
【００９５】
一実施形態において、キットは、１〜約５０ｍＣｉの本発明の放射性標識された化合物、そのエナンチオマー、立体異性体、ラセミ化合物、または薬学的に許容される塩を含むことができる。
【００９６】
本発明の特定の実施形態において、キットは、キレート化剤と共有または非共有結合で結合している非標識脂肪酸の立体異性体、およびマンニトール、グルコン酸塩などの補助分子を含むことができる。非標識脂肪酸の立体異性体／キレート化剤は、溶液状または凍結乾燥された形態で提供できる。キットは、また、記載の方法の実施を容易にする他の成分を含む。例えば、緩衝剤、シリンジ、フィルム、説明書などを、開示のキットの構成要素として任意選択で含めることができる。
【００９７】
治療的使用
本発明の化合物は、前述で定義したようにＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、自己免疫疾患または脱髄性疾患、例えば多発性硬化症を治療または予防するための治療薬として使用することができる。
【００９８】
用語「治療」または「療法」（特に、Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害の）は、前記疾患、特に前述の疾患の予防的または好ましくは治療的（限定はされないが、軽減、治療、症状緩和、症状減弱を含む）処置を指す。
【００９９】
さらに、以下が提供される：
１０．それを必要とする患者におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、神経変性疾患、脳疾患、または脱髄性疾患を治療または予防する方法であって、前述で定義したＦＴＹ７２０のヨードまたはブロモ誘導体、例えば式Ｉ、ＩａまたはＩｂの化合物、あるいは前述で定義したその対応する放射性標識された化合物、あるいはその薬学的に許容される塩を投与するステップを含む方法。
【実施例】
【０１００】
次の非限定的実施例により、本発明を例示する。
【０１０１】
使用される省略形を次に列挙する。
Ｂｏｃ ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＣＨ３ＣＮ アセトニトリル
ＤＣＣ ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＥ ジクロロエタン
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＥｔＯＨ エタノール
Ｅｔ２Ｏ ジエチルエーテル
ｈ 時間
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
Ｋ２ＣＯ３ 炭酸カリウム
ＬＣ 液体クロマトグラフィー
ＭｅＯＨ メタノール
ｍｉｎ 分
ｍＬ ミリリットル
ｍｍｏｌ ミリモル
ＭＳ 質量分光法
ＮａＨＣＯ３ 重炭酸ナトリウム
ＮａＯＨ 水酸化ナトリウム
ＮＨ４ＯＨ 水酸化アンモニウム
ＰＧ 保護基
Ｒｔ 保持時間（ＬＣ／ＭＳ）
ＲＴ 室温
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
【０１０２】
ＬＣＭＳ／ＨＰＬＣの条件（％＝体積パーセント）
方法Ａ（ＲｔＡ＝保持時間Ａ）
Ｇｉｌｓｏｎ３３１ポンプを、Ｇｉｌｓｏｎ ＵＶ／ＶＩＳ１５２検出器およびＦｉｎｎｉｇａｎ ＡＱＡ分光計（ＥＳＩ）に連結し、５０μＬのループ式注入バルブおよびＷａｔｅｒｓ ＸＴｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８ ３．５μｍ ４．６×５０ｍｍカラムで、９５／５〜１０／９０の水＋０．０５％ＴＦＡ／アセトニトリル＋０．０５％ＴＦＡのグラジエントを８分間にわたり１．５ｍＬ／分の流速で実行した。
方法Ｂ（ＲｔＢ＝保持時間Ｂ）
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００シリーズ；カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ２．５μｍ、３×３０ｍｍ；グラジエント：Ａ（水＋５％アセトニトリル＋０．５〜１．０％ＨＣＯ２Ｈ）／Ｂ（アセトニトリル＋０．５〜１．０％ＨＣＯ２Ｈ）で、０分に１０Ｂ、１．７０分に９５Ｂ、２．４０分に９５Ｂ、２．４５分に１０Ｂ；流速＝１．２ｍｌ／分；カラム温度＝５０℃。
方法Ｃ（ＲｔＣ＝保持時間Ｃ）
Ｔｈａｒ ＳＦＣ２００；Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ、３０×２５０ｍｍ；一定濃度：ＣＯ２／２−プロパノール／２−プロピルアミン＝７５：２５：０．２５；流速＝９０ｇ／分；ＢＰＲ＝１５０バール。
方法Ｄ（ＲｔＤ＝保持時間Ｄ）
ＵＰＬＣ−ＺＱ２０００；カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＨＳＳ−Ｔ３、１．８μｍ、２．１×５０ｍｍ；グラジエント：Ａ（水＋５％アセトニトリル＋０．５〜１．０％ＨＣＯ２Ｈ）／Ｂ（アセトニトリル＋０．５〜１．０％ＨＣＯ２Ｈ）で０分に２Ｂ、４．３分に９８Ｂ、５．０分に９８Ｂ、５．１０分に２Ｂ、６．０分に２Ｂ；流速＝１．０ｍｌ／分。
【０１０３】
分取ＨＰＬＣ
Ｇｉｌｓｏｎ Ｔｒｉｌｕｔｉｏｎ ＬＣ
カラム：ＳｕｎＦｉｒｅ Ｃ１８、３０×１００ｍｍ、５μｍ
溶離液：水（＋０．１％ＴＦＡ）：アセトニトリル（＋０．１％ＴＦＡ）を１６分間で８５／１５〜６５／３５；流速＝５０ｍＬ／分。
【０１０４】
１Ｈ−ＮＭＲ装置：Ｂｒｕｋｅｒ（３６０ＭＨｚ）、Ｖａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ（４００ＭＨｚ）、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｄｖａｎｃｅ（６００ＭＨｚ）。
【０１０５】
（実施例Ａ）
２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩
ステップ１：（４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール
【０１０６】
【化１５】
０℃で、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の４−［２−（４−ヒドロキシメチル−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−エチル］−フェノール（２６０ｍｇ、１．１ミリモル）、（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エン−１−オール（２５０ｍｇ、１．０当量）およびトリフェニルホスフィン（２９０ｍｇ、１．０当量）の混合物に、ＤＩＡＤ（０．２１５ｍＬ、１．０当量）を添加する。生じる混合物を、室温で１８時間、５０℃で２４時間撹拌する。０．３当量のＤＩＡＤおよびＰＰｈ３を添加し、混合物を５０℃でさらに７２時間撹拌する。０．５当量のＤＩＡＤおよびＰＰｈ３を添加し、混合物を５０℃でさらに１時間撹拌する。混合物を、ＡｃＯＥｔと飽和ＮＨ４Ｃｌとの間に分配する。有機相を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空で濃縮してベージュ色の粗オイル（１．５４ｇ）を得る。粗生成物を、溶媒系としてＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００／０〜９０／１０）を使用するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製する。精製により、（４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノールが無色のオイルとして単離される。
LC/MS : RtA 4.84分, m/z : 444.0 [M+H]
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm 7.08 (d, 2H); 6.79 (d, 2H); 6.52 (m, 1H); 6.01 (d, 2H); 5.30 (s, 1H); 4.27 (m, 1H); 4.09 (m, 1H); 3.92 (t, 2H); 3.72 (m, 1H); 3.45 (m, 1H); 2.54 (m, 2H); 2.12 (m, 2H); 2.06 (s, 3H); 1.88 (m, 1H); 1.75 (m, 3H); 1.57 (m, 2H).
ステップ２：２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩
【０１０７】
【化１６】
（４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール（６０ｍｇ、０．１３５ミリモル）のＥｔＯＨ（２ｍＬ）溶液に濃塩酸（２．０５ｍＬ）を添加する。生じる混合物を８５℃で２．５時間撹拌する。溶媒を真空で除去して、ベージュ色のペーストを得る。Ｅｔ２Ｏ中での沈殿の後、２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩が、ベージュ色の粉末として単離される。
LC/MS : RtA 4.62分, m/z : 419.9 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.80 (bs, 3H); 7.09 (d, 2H); 6.83 (d, 2H); 6.52 (m, 1H); 6.22 (d, 2H); 5.37 (t, 1H); 3.90 (t, 2H); 3.50 (m, 4H); 2.08 (m, 2H); 1.75 (m, 2H); 1.65 (m, 2H); 1.50 (m, 2H).
【０１０８】
（実施例Ｂ）
（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
ステップ３：（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステル
【０１０９】
【化１７】
０℃で、（４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール（２３０ｍｇ、０．５２ミリモル）のＤＣＭ／ＴＨＦ（２ｍＬ／２ｍＬ）溶液に、１Ｈ−テトラゾール（１８２ｍｇ、５．０当量）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジエチルホスホルアミダイト（０．４３３ｍＬ、３．０当量）を添加する。生じる混合物を室温で６時間撹拌する。次いで、３０ｗｔ％Ｈ２Ｏ２水溶液（０．１５９ｍＬ、１０当量）を添加し、混合物を室温で１．５時間撹拌する。１Ｎチオ硫酸ナトリウム溶液（１０ｍＬ）を注意して添加して反応混合物を失活させる。水相をＤＣＭで抽出する。有機相を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空で濃縮して、粗オイル（５００ｍｇ）を得る。粗オイルを、溶媒系としてＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１００／０〜９０／１０）を使用するシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製する。精製すると、（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステル（１０７ｍｇ）が、約５０％の純度の澄明オイルとして単離され、そのまま次のステップに使用される。
LC/MS:RtA 5.53分、m/z:636.1[M+H]
ステップ４：（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
【０１１０】
【化１８】
（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステル（１０７ｍｇ、０．１６８ミリモル）のＥｔＯＨ（２．５ｍＬ）溶液に濃塩酸（２．５６ｍＬ）を添加する。生じる混合物を８５℃で２．５時間撹拌する。溶媒を真空で除去してベージュ色のペーストを得る。Ｅｔ２Ｏ中での沈殿の後、（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｅ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステルが、ベージュ色の粉末として単離される。
LC/MS : RtA 4.53分, m/z : 500.0 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.09 (d, 2H); 6.82 (d, 2H); 6.52 (m, 1H); 6.22 (d, 1H); 3.89 (m, 4H); 3.53 (m, 2H); 2.08 (m, 2H); 1.78 (m, 2H); 1.65 (m, 2H); 1.49 (m, 2H)
【０１１１】
（実施例Ｃ）
２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＴＦＡ塩
ステップ１：（４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール
【０１１２】
【化１９】
４−［２−（４−ヒドロキシメチル−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−エチル］−フェノール（４００ｍｇ、１．７ミリモル）、（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エン−１−オール（２５０ｍｇ、１．０当量）を用いて、実施例Ａのステップ１に類似の合成を開始する。（４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール（４０３ｍｇ）が、澄明オイルとして単離される。
LC/MS:RtA 4.76分、m/z:443.9[M+H]
ステップ２：２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＴＦＡ塩
【０１１３】
【化２０】
（４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノールを用いて、実施例Ａのステップ２に類似の合成を開始する。逆相分取ＨＰＬＣで精製すると、２−アミノ−２−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＴＦＡ塩が、白色粉末として得られる。
LC/MS : RtA 4.42分, m/z : 420.0 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.77 (bs, 3H); 7.08 (d, 2H); 6.84 (d, 2H); 6.40 (m, 1H); 6.29 (m, 1H); 5.40 (t, 1H); 3.92 (t, 2H); 3.50 (m, 4H); 2.13 (m, 2H); 1.72 (m, 4H); 1.53 (m, 2H).
【０１１４】
（実施例Ｄ）
（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
ステップ３：（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステル
【０１１５】
【化２１】
（４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノールを用いて、実施例Ｂのステップ３に類似の合成を開始する。反応を後処理した後、（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステルを、そのまま次のステップに使用する。
ステップ４：（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
【０１１６】
【化２２】
（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステルを用いて、実施例Ｂのステップ４に類似の合成を開始する。（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（（Ｚ）−６−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステルが、白色粉末として単離される。
LC/MS : RtA 4.44分, m/z : 500.1 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.09 (d, 2H); 6.82 (d, 2H); 6.40 (m, 1H); 6.30 (m, 1H); 3.91 (m, 3H); 3.80 (m, 2H); 3.52 (m, 2H); 3.33 (bs, 2H); 2.52 (m, 2H); 2.12 (m, 2H); 1.72 (m, 4H); 1.54 (m, 2H)
【０１１７】
（実施例Ｅ）
２−アミノ−２−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩
ステップ１：（４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール
【０１１８】
【化２３】
４−［２−（４−ヒドロキシメチル−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−エチル］−フェノール（５０５ｍｇ、２．１５ミリモル）、５−ヨード−ヘキサ−５−エン−１−オール（７２８ｍｇ、１．５当量）を用いて、実施例Ａのステップ１に類似の合成を開始する。（４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノールが、澄明オイルとして単離される。
LC/MS:RtA 4.76分、m/z:444.0[M+H]
ステップ２：２−アミノ−２−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩
【０１１９】
【化２４】
（４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノール（６３ｍｇ、０．１４２ミリモル）を用いて、実施例Ａのステップ２に類似の合成を開始する。反応は、ジオキサン中、５０℃で２０時間、次いで７０℃で４時間実施される。２−アミノ−２−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−プロパン−１，３−ジオールＨＣｌ塩が、ベージュ色の粉末として得られる。
LC/MS : RtA 4.64分, m/z : 420.0 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.77 (bs, 3H); 7.09 (d, 2H); 6.84 (d, 2H); 6.18 (s, 1H); 5.60 (s, 1H); 5.36 (t, 2H); 3.93 (t, 2H); 3.50 (m, 4H); 2.43 (m, 2H); 1.75-1.50 (m, 6H).
【０１２０】
（実施例Ｆ）
（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
ステップ３：（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステル
【０１２１】
【化２５】
（４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イル）−メタノールを用いて、実施例Ｂのステップ３に類似の合成を開始する。フラッシュクロマトグラフィーで精製した後、（Ｒ／Ｓ）−リン酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステルを、そのまま次のステップに使用する。
ステップ４：（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステル
【０１２２】
【化２６】
４−｛２−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−エチル｝−２−メチル−４，５−ジヒドロ−オキサゾール−４−イルメチルエステルを用いて、実施例２のステップｂに類似の合成を開始する。反応は、ジオキサン中、５０℃で４時間実施される。逆相分取ＨＰＬＣで精製すると、（Ｒ／Ｓ）−リン酸モノ−｛２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［４−（５−ヨード−ヘキサ−５−エニルオキシ）−フェニル］−ブチル｝エステルが、ベージュ色の粉末として単離される。
LC/MS : RtA 4.45分, m/z : 499.9 [M+H]
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.09 (d, 2H); 6.84 (d, 2H); 6.19 (s, 1H); 5.71 (s, 1H); 3.95-3.3.82 (m, 4H); 3.55-3.20 (m, 6H); 2.43 (m, 2H); 1.8-1.5 (m, 6H).
【０１２３】
（実施例ＧおよびＨ）
２−アミノ−２−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］−１，３−プロパンジオールおよび２−アミノ−２−［２−（２−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］−１，３−プロパンジオール
【０１２４】
【化２７】
ＦＴＹ７２０（３．２ｇ、１０．４ミリモル）の湿り（wet）塩化メチレン（１００ｍＬ）溶液に、硫酸銀（３．２５ｇ、１０．４ミリモル）およびヨウ素（２．６４ｇ、１０．４１ミリモル）を添加する。トリフルオロメタンスルホン酸銀（０．１３ｇ、０．５２ミリモル）を室温で添加し、生じる混合物を室温で１８時間撹拌する。黄色固体状のヨウ化銀を濾過して除去する。有機相を、１５％ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、蒸発乾固する。
残留物を、シリカゲルカラムで精製し、乾燥後にヨード化合物７および８の混合物を得る。クロマトグラフィー（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ、３０×２５０ｍｍ、移動相：ＣＯ２／２−プロパノール／２−プロピルアミン＝７５／２５／０．２５（一定濃度））で精製して、白色固体として表題化合物を得る。
実施例G:
LCMS RtB = 1.28分, [M]+ = 433.9
SFC RtC = 4.82分
1H-NMR (500MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.62 (d, 1H); 7.01-7.20 (m, 2H); 4.43 (t, 2H); 3.11-3.27 (m, 4H); 2.55-2.63 (m, 2H); 2.45-2.52 (m, 2H); 1.38-1.57 (m, 4H); 1.16-1.35 (m, 12H); 0.76-0.93 (m, 3H)
実施例H:
LCMS RtB = 1.29分, [M]+ = 433.9
SFC RtC = 5.58分
1H-NMR (500MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.56 (d, 1H); 7.06-7.21 (m, 2H); 4.40 (t, 2H); 3.17-3.27 (m, 4H); 2.58-2.64 (m, 2H); 2.41-2.47 (m, 2H); 1.39-1.42 (m, 2H); 1.20-1.31 (m, 12H); 0.77-0.89 (m, 3H)
【０１２５】
（実施例Ｉ）
２−アミノ−２−［２−［３−ヨード−４−（ヘプチルオキシ）フェニル］エチル］−１，３−プロパンジオール
【０１２６】
【化２８】
実施例Ｇの合成について記載した手順と同様にして、表題化合物が、２−アミノ−２−［２−［４−（ヘプチルオキシ）フェニル］エチル］−１，３−プロパンジオールから調製される。
LCMS RtB= 1.20分; [M]+ = 436.0
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.60 (s, 1H); 7.12-7.18 (m, 1H); 6.8-6.78 (m, 1H); 4.42 (br s, 2H); 3.92 (m, 2H); 3.09-3.25 (m, 4H); 2.6-2.67 (m, 2H); 1.62-1.73 (m, 2H); 1.38-1.56 (m, 4H); 1.2-1.36 (m, 6H); 0.81-0.88 (m, 3H).
【０１２７】
（実施例Ｊ）
リン酸モノ［（Ｓ）−２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−３−ヨード−４−オクチルフェニル）ブチル］エステル
【０１２８】
【化２９】
【化３０】
ａ）４−ヒドロキシメチル−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］オキサゾリジン−２−オン
実施例７に記載の化合物（１ｇ、２．３ミリモル）の２Ｎ ＮａＯＨ（１０ｍＬ）懸濁液にクロロギ酸ベンジル（０．３７ｍＬ、２．４７ミリモル）を添加する。混合物を室温で一夜保持する。次いで、混合物を、１Ｎ ＨＣｌで酸性とし、塩化メチレンで抽出する。有機相を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮する。残留物をシリカゲルカラムで精製して、白色粉末として表題化合物を得る。
UPLCMS RtD= 3.36分; [M+H]+ = 460
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.65 (s, 1H); 7.59 (d, 1H); 7.04-7.23 (m, 2H); 5.08 (t, 1H); 4.16 (d, 1H); 4.06 (d, 1H); 3.30-3.41 (m, 2H); 2.55-2.69 (m, 2H); 2.42-2.47 (m, 2H); 1.63 (dd, 2H); 1.47-1.52 (m., 2H); 1.18-1.25 (m, 10H); 0.74-0.91 (m, 3H)
ｂ）リン酸モノ−｛（Ｒ／Ｓ）−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］オキサゾリジン−２−オン｝エステル
４−ヒドロキシメチル−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］オキサゾリジン−２−オン（８１５ｍｇ、１．７７ミリモル）のジクロロメタン（５ｍＬ）とＴＨＦ（５ｍＬ）との溶液に、０℃で１Ｈ−テトラゾール（６２１ｍｇ、８．８７ミリモル）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジエチル−ホスホルアミダイト（１．５９ｍＬ、５．３２ミリモル）を添加する。室温で１８時間後、３０％過酸化水素水溶液（０．５４ｍＬ、１７．７ミリモル）を滴加し、次いで、混合物を室温でさらに９０分間撹拌する。反応混合物を飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３で失活させ、水相をジクロロメタンで抽出する。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮する。粗生成物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、黄色オイルとして化合物を得る。
UPLCMS RtD = 4.56分; [M]+ = 651
1H-NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm7.87 (s, 1H); 7.67 (s, 1H); 7.08-7.25 (m, 2H); 4.06-4.21 (m, 2H); 3.78 (d, 2H); 1.65-1.86 (m, 2H); 1.46-1.52 (m, 2H); 1.40 (s, 18H); 1.17-1.34 (m, 14H); 0.84 (t, 3H)
ｃ）リン酸モノ−｛（Ｒ／Ｓ）−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］オキサゾリジン−２−オン｝エステルのエナンチオマーの分離を、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−ＰＲＥＰカラムでのＨＰＬＣ（移動層としてヘプタン／ｉＥｔＯＨ／ＭｅＯＨ＝８０／１０／１０）によって分取スケールで実施する。
ｄ）リン酸モノ−｛（Ｓ）−２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）ブチル］｝エステル
リン酸モノ−｛（Ｓ）−４−［２−（３−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］オキサゾリジン−２−オン｝エステル（３０ｍｇ、０．０４６ミリモル）のエタノール（０．５ｍＬ）溶液に、１０％水酸化リチウム溶液（０．５ｍＬ、２．０９ミリモル）を添加する。６０℃で２０時間後、反応混合物を室温まで冷却し、２日間撹拌する。濃ＨＣｌ（０．５ｍＬ）を添加し、溶液を室温で１時間撹拌する。混合物をＮａＯＨ ４Ｎで中和し、濃縮する。残留物を、ジクロロメタン（２ｍＬ）に取り、Ｈｙｆｌｏ上で濾過し、濾滓をジクロロメタンで２回洗浄する。溶液を濃縮し、白色粉末として表題化合物を得る。
LCMS RtB=1.41分、[M]+=514
【０１２９】
（実施例Ｋ）
リン酸モノ−｛（Ｓ）−２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［２−（２−ヨード−４−オクチルフェニル）ブチル］｝エステル
【０１３０】
【化３１】
実施例Ｊの合成について記載した手順と同様にして、２−アミノ−２−［２−（２−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］−１，３−プロパンジオールから表題化合物を調製する。
LCMS RtB=1.32分、[M]+=513.8
【０１３１】
（実施例Ｌ）
リン酸モノ−｛（Ｓ）−２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−４−［２−（３−ヨード−４−（ヘプチルオキシ）フェニル）ブチル］｝エステル
【０１３２】
【化３２】
実施例Ｊの合成について記載した手順と同様にして、２−アミノ−２−［２−［３−ヨード−４−（ヘプチルオキシ）フェニル］エチル］−１，３−プロパンジオールから表題化合物を調製する。
LCMS RtB=1.28分、[M+H]+=516.0
【０１３３】
（実施例Ｍ）
アリールボロン酸ネオペンチル前駆体の調製
【０１３４】
【化３３】
ａ）［１，１−ビス−ヒドロキシメチル−３−（２−ヨード−４−オクチル−フェニル）−プロピル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ジオキサン（５ｍＬ）中の２−アミノ−２−［２−（２−ヨード−４−オクチルフェニル）エチル］−１，３−プロパンジオール（１１０ｍｇ、０．２５ミリモル）、（Ｂｏｃ）２Ｏ（０．０９ｍＬ、０．３８ミリモル）およびＮａＯＨ １Ｍ（０．２８ｍＬ、０．２８ミリモル）の混合物を、室温で一夜撹拌する。反応混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、濃縮する。粗生成物を、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、無色のオイルとして表題化合物を得る。
LCMS RtB = 1.99分; [M]+ = 533.8
1H-NMR (360MHz, CDCl3) δ ppm 7.67 (s, 1H); 7.07-7.15 (m, 2H); 5.06 (s, 1H); 3.90 (dd, 2H); 3.67 (dd, 2H); 3.42 (bs, 2H); 2.63-2.74 (m, 2H); 2.49-2.63 (m, 2H); 1.81-1.96 (m, 2H); 1.56-1.60 (m, 2H); 1.49 (s, 9H); 1.30-1.43 (m, 10H); 0.87-0.96 (m, 3H)
ｂ）｛５−［２−（２−ヨード−４−オクチル−フェニル）−エチル］−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−５−イル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
［１，１−ビス−ヒドロキシメチル−３−（２−ヨード−４−オクチル−フェニル）−プロピル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２３０ｍｇ、０．４３ミリモル）のＤＭＦ（２ｍＬ）溶液に、２，２−ジメトキシ−プロパン（５．３ｍＬ、４３．１ミリモル）、アセトン（３．２ｍＬ、４３．１ミリモル）およびｐＴｓＯＨ．Ｈ２Ｏ（８．２ｍｇ、０．０４３ミリモル）を室温で添加する。次いで、反応混合物を１時間撹拌する。溶液を、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で失活させ、酢酸エチルで抽出し、次いで、有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、濾過し、濃縮する。粗生成物を、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、無色のオイルとして２４０ｍｇの表題化合物を得る。
LCMS RtB = 1.92分; [M+H]+ = 574.2
1H NMR (360MHz, CDCl3) δ ppm 7.55 (s, 1H) 6.93-7.08 (m, 2H) 4.90 (br. s., 1H) 3.82 (d, 2H) 3.60 (d, 2H) 2.49-2.64 (m, 2H) 2.30-2.47 (m, 2H) 1.77-1.94 (m, 2H) 1.44-1.46 (m, 2H) 1.37-1.43 (m, 9H) 1.36 (s, 3H) 1.34 (s, 3H) 1.16-1.30 (m, 10H) 0.66-0.92 (m, 3H).
ｃ）（２，２−ジメチル−５−｛２−［４−オクチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニル］−エチル｝−［１，３］ジオキサン−５−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
２５ｍＬの２首丸底フラスコにＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（１４．２ｍｇ、０．０１７ミリモル）、ＫＯＡｃ（５１．３ｍｇ、０．５２ミリモル）およびビス−（ネオペンチルグリカト）ジボロン（４３．３ｍｇ、０．１９ミリモル）を仕込み、窒素でフラッシュする。｛５−［２−（２−ヨード−４−オクチル−フェニル）−エチル］−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−５−イル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１００ｍｇ、０．１７ミリモル）のＤＭＳＯ（１ｍＬ）溶液を添加し、溶液を５０℃で３時間撹拌する。生成物を、酢酸エチル中に抽出し、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥する。有機溶媒を減圧下で除去し、生成物をシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーで精製して白色固体として、表題化合物を得る。
LCMS RtB=2.18分、[M+H]+=560.2
【０１３５】
（実施例Ｎ）
ボロン酸ピナコール前駆体：（２，２−ジメチル−５−｛２−［４−オクチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］ジオキサボロラン−２−イル）−フェニル］−エチル｝−［１，３］ジオキサン−５−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
２０ｍＬのＳｕｐｅｌｃｏバイアル瓶に１，１'−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン−パラジウム（ＩＩ）ジクロリドジクロロメタン錯体（８．５４ｍｇ、１０．４６マイクロモル）、酢酸カリウム（１０３ｍｇ、１．０４６ミリモル）およびビス（ピナコラト）ジボロン（９７ｍｇ、０．３８ミリモル）を仕込み、アルゴンでフラッシュする。｛５−［２−（２−ヨード−４−オクチル−フェニル）−エチル］−２，２−ジメチル−［１，３］ジオキサン−５−イル｝−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２００ｍｇ、０．３４９ミリモル）のＤＭＳＯ（６ｍＬ）溶液を添加し、溶液を８０℃で４時間撹拌する。反応混合物をＨ２Ｏで失活させ、酢酸エチルで抽出する。有機層を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、粗生成物を、シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、白色粉末として表題化合物を得る。
LCMS RtD= 1.90分; [M+H]+ = 574.4
1H NMR (360MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.44-7.46 (m, 1H); 7.21 (d, 1H); 7.00 (d, 1H); 6.51 (br. s., 1H); 3.92 (d, 2H); 3.69 (d, 2H) 2.64-2.72 (m, 2H); 2.52-2.56 (m, 2H); 1.78-1.85 (m, 2H); 1.49-1.58 (m., 2H); 1.41-1.46 (m, 9H); 1.34-1.36 (m, 6H); 1.30-1.32 (m, 12H); 1.25-1.29 (m, 10H); 0.84-0.90 (m, 3H).
【０１３６】
（実施例Ｏ）
ボロン酸トリフルオロ前駆体：（２，２−ジメチル−５−｛２−［４−オクチル−２−（トリフルオロボロラン−２−イル）−フェニル］−エチル｝−［１，３］ジオキサン−５−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルの調製
ボロン酸ピナコリル（２００ｍｇ、０．３５ミリモル）のメタノール（２ｍＬ）溶液にフッ化水素カリウム水溶液（０．４５ｍＬ、１．９７ミリモル）を添加する。生じるスラリーを室温で１５分間撹拌し、真空で濃縮し、次いで、熱アセトンに溶解し、濾過し、真空で濃縮する。濾液を、熱メタノールから再結晶させて、白色固体として表題化合物を得る。
LCMS RtD= 1.75分; [M-K]+ = 514,3
1H NMR (360MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.16 (s, 1H); 6.75 (s, 2H); 6.39 (br. s., 1H); 3.98 (d, 2H); 3.59 (d, 2H); 2.52-2.56 (m, 2H); 2.39-2.46 (m, 2H); 1.75-1.82 (m, 2H); 1.48-1.56 (m, 2H); 1.43 (s, 9H); 1.31-1.34 (m, 6H); 1.23-1.30 (m, 10H); 0.82-0.92 (t, 3H)
【０１３７】
（実施例Ｐ）
ボロン酸前駆体を経由する１２３Ｉを用いた標識生成物の一般的調製手順
担体非添加のＮａ１２３Ｉ（７４ＭＢｑ、０．１％ＮａＯＨ水溶液中）を、アリールボロン酸前駆体（５０％ＴＨＦ水溶液中の４×１０−２Ｍ溶液１００ｍＬ）を入れた２ｍＬのＷｈｅａｔｏｎバイアル瓶中に入れる。反応バイアル瓶を密封し、アルミホイルで覆い、混合物を室温で５分間撹拌する。１滴の１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液を添加して過剰のヨウ素を分解する。１２３Ｉ含有中間体を、酢酸エチル中の３Ｎ ＨＣｌの存在下で脱保護して、所望の１２３Ｉ含有化合物を得る。放射性ヨウ素化生成物を、溶離液としてペンタン：ＥｔＯＡｃ（５０：１）を使用してシリカゲルＳｅｐ−ｐａｋカートリッジを通過させることによって単離する。
【０１３８】
Ｓ１Ｐ受容体／ＣＨＯ膜調製物を使用するＧＴＰγＳ結合アッセイ
該アッセイは、ＳＰＡ技術（Ａｍｅｒｓｈａｍ社）に基づき、９６ウェルのフォーマットで実行される。膜は、対象とするＳ１Ｐ受容体を安定的に発現しているＣＨＯ細胞から調製される。アリコートは−８０℃で貯蔵される。２５μｇ／ｍＬサポニンおよび１０μＭ ＧＤＰを含むアッセイ緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、および０．１％脂肪不含ＢＳＡ）中に再懸濁された膜（５〜１０μｇ／ウェル）を、ＷＧＡで被覆されたＳＰＡビーズ（最終濃度１ｍｇ／ウェル）と混合する。リガンドおよび［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ（１２５０Ｃｉ／ミリモル、最終濃度０．２ｎＭ）を添加し、プレートを密封する。一定に振とうしながら室温で１２０分間インキュベートした後、プレートを１０００×ｇで１０分間遠心し、ＳＰＡビーズをペレット化する。次いで、プレートを、ＴｏｐＣｏｕｎｔ ＮＸＴ装置（Ｐａｃｋａｒｄ社）中で測定し、ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭソフトウェアを使用してデータを解析する。
【０１３９】
とりわけ、各種Ｓ１Ｐ受容体での次の化合物に関するＥＣ５０値（ｎＭ）を下表に示す：
【０１４０】
【表１】
【０１４１】
Ｌｅｗｉｓラットにおけるリンパ球減少のパーセント
リンパ球ホーミング特性は、次の血中リンパ球減少アッセイで測定することができる：
Ｓ１Ｐ受容体アゴニストまたはビヒクルをラットに静脈内投与する。血液学的監視のための尾部血を、個々のベースライン値を得るために適用の１日前に、そして適用の２、４、８、２４および４８時間後に採取する。このアッセイで、Ｓ１Ｐ受容体アゴニストは、例えば２０ｍｇ／ｋｇ未満の用量で投与した場合、末梢血中リンパ球を例えば５０％減少させる。好ましいＳ１Ｐ受容体アゴニストは、それらのＳ１Ｐ結合特性に加えて、さらにＳ１Ｐ受容体を内部移行／脱感作し、それによって、リゾリン脂質、すなわちスフィンゴシン１−リン酸（Ｓ１Ｐ）、スフィンゴホスホリルコリン（ＳＰＣ）、リゾホスファチジン酸（ＬＰＡ）などを含むリゾリン脂質によって促進される脈管系細胞、例えば内皮細胞上での炎症過程に拮抗する化合物である。化合物の内部移行／脱感作能力は、ヒトのｍｙｃでタグ化されたＳ１Ｐ受容体をトランスフェクトされたＣＨＯ細胞を使用して測定される。
【０１４２】
【表２】
【０１４３】
本発明の放射性標識されたＦＴＹ７２０誘導体を使用し、例えば、ラットにおける生体外(ex vivo)での、またはヒト以外の霊長類および人間におけるインビボでのそれらの分布および濃度を、当業者に公知の方法、例えばＰａｕｗｅｌｓら（Current Pharmaceutical Design 2009,15,928〜934）またはBergstroemら（Eur J Nucl Med 1997,24,596〜601）に記載されているように使用することによって測定することができる。
【０１４４】
当業者は、本発明の精神および本質的特徴から逸脱することなしに、本明細書中に記載されたものの変形、修正および他の実施を思いつくであろう。したがって、本発明の範囲は、前述の例示的説明および実施例によってではなく後述の特許請求の範囲によって定義されるべきであり、該特許請求の範囲の意味および同義の範囲に包含されるすべての変更は、その中に包含されると解釈される。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
−式Ｉの化合物
【化３４】
［式中、
Ｘａは、Ｃ１〜１０アルキルまたはＯＣ１〜９アルキル、例えば、Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１は、ＨもしくはＣ１〜６アルキル、またはＰＯ３Ｈ２であり、
ここで、少なくとも１つの水素原子は、ヨウ素または臭素原子で置き換えられている］、
−式Ｉａの化合物
【化３５】
［式中、
Ｒ１は、前述で定義した通りであり、
Ａ１およびＢ１の少なくとも一方はＩ（ヨウ素）またはＢｒであり、他方はＨであり、
Ｘ１は、Ｃ１〜１０アルキルまたはＯＣ１〜９アルキルであり、例えば、Ｘ１は、Ｃ８アルキルである］、
−式Ｉｂの化合物
【化３６】
［式中、
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、またはＰＯ３Ｈ２であり、
Ｅ、ＦおよびＧの少なくとも１つはＩ（ヨウ素）またはＢｒであり、残りはＨであり、例えば、ＦおよびＧの少なくとも一方はＩ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択され、残りはＨであり、
Ｘ２は、Ｃ１〜８アルキルまたはＯＣ１〜７アルキルである］
から選択される化合物。
【請求項２】
化合物が、
【化３７】
【化３８】
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
化合物が、
【化３９】
【化４０】
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒからなる群から選択される少なくとも１つの原子を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
化合物Ａ、Ｃ、ＥおよびＧから選択され、１２３Ｉまたは１２４Ｉであるヨウ素原子を含有する、請求項２または３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｓ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害のための診断薬としての、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項７】
前記疾患が多発性硬化症である、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
Ｓ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす疾患または障害、例えば、から選択される疾患または障害のための造影剤としての、例えば、脳または脊髄造影剤としての、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項９】
Ｓ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害のためのトレーサーとしての、請求項２から５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１０】
陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、ガンマ線を使用する核医学断層造影技術から選択される技術、例えばＰＥＴまたはＳＰＥＣＴを使用する、請求項６から９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１１】
対象におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害の所見を患者において診断する方法であって、前記患者に有効量の請求項２から５のいずれか一項に記載の化合物を投与するステップを含む方法。
【請求項１２】
炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害に罹患している患者が、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターとして作用する化合物、例えばＦＴＹ７２０に応答するかどうかを予測する方法であって、
ａ）前記患者に有効量の請求項２から５のいずれか一項に記載の化合物を投与するステップ、および
ｂ）適切な造影装置、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いて、前記放射性標識された化合物から放出される放射線を検出または測定するステップ
を含む方法。
【請求項１３】
Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、神経変性疾患、または脳疾患から選択される疾患または障害の薬物療法の患者における有効性を監視する方法であって、
ａ）前記患者に有効量の請求項２から５のいずれか一項に記載の化合物を投与するステップ、および
ｂ）適切な造影装置、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いて、前記放射性標識された化合物から放出される放射線を検出または測定するステップ
を含む方法。
【請求項１４】
前記化合物が、請求項２で定義した化合物Ａまたは化合物Ｂである、請求項１１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物が、請求項２で定義した化合物Ａまたは化合物Ｂである、請求項６から１０のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１】
−式Ｉの化合物
【化３４】
［式中、
Ｘａは、Ｃ１〜１０アルキルまたはＯＣ１〜９アルキル、例えば、Ｃ８アルキルであり、
Ｒ１は、ＨもしくはＣ１〜６アルキル、またはＰＯ３Ｈ２であり、
ここで、少なくとも１つの水素原子は、ヨウ素または臭素原子で置き換えられている］、
−式Ｉａの化合物
【化３５】
［式中、
Ｒ１は、前述で定義した通りであり、
Ａ１およびＢ１の少なくとも一方はＩ（ヨウ素）またはＢｒであり、他方はＨであり、
Ｘ１は、Ｃ１〜１０アルキルまたはＯＣ１〜９アルキルであり、例えば、Ｘ１は、Ｃ８アルキルである］、
−式Ｉｂの化合物
【化３６】
［式中、
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１〜６アルキル、またはＰＯ３Ｈ２であり、
Ｅ、ＦおよびＧの少なくとも１つはＩ（ヨウ素）またはＢｒであり、残りはＨであり、例えば、ＦおよびＧの少なくとも一方はＩ（ヨウ素）およびＢｒからなる群から選択され、残りはＨであり、
Ｘ２は、Ｃ１〜８アルキルまたはＯＣ１〜７アルキルである］
から選択される化合物。
【請求項２】
化合物が、
【化３７】
【化３８】
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
化合物が、
【化３９】
【化４０】
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
１２３Ｉ、１２５Ｉ、１２４Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒおよび７６Ｂｒからなる群から選択される少なくとも１つの原子を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
化合物Ａ、Ｃ、ＥおよびＧから選択され、１２３Ｉまたは１２４Ｉであるヨウ素原子を含有する、請求項２または３に記載の化合物。
【請求項６】
Ｓ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害のための診断薬としての、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項７】
前記疾患が多発性硬化症である、請求項６に記載の使用。
【請求項８】
Ｓ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす疾患または障害、例えば、から選択される疾患または障害のための造影剤としての、例えば、脳または脊髄造影剤としての、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項９】
Ｓ１Ｐ受容体発現に影響を及ぼす疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害のためのトレーサーとしての、請求項２から５のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１０】
陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、ガンマ線を使用する核医学断層造影技術から選択される技術、例えばＰＥＴまたはＳＰＥＣＴを使用する、請求項６から９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１１】
対象におけるＳ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害の所見を患者において診断する方法であって、前記患者に有効量の請求項２から５のいずれか一項に記載の化合物を投与するステップを含む方法。
【請求項１２】
炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、および脳疾患から選択される疾患または障害に罹患している患者が、Ｓ１Ｐ受容体モジュレーターとして作用する化合物、例えばＦＴＹ７２０に応答するかどうかを予測する方法であって、
ａ）前記患者に有効量の請求項２から５のいずれか一項に記載の化合物を投与するステップ、および
ｂ）適切な造影装置、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いて、前記放射性標識された化合物から放出される放射線を検出または測定するステップ
を含む方法。
【請求項１３】
Ｓ１Ｐ受容体発現が変化する疾患または障害、例えば、炎症性疾患、自己免疫疾患、脱髄性疾患、神経変性疾患、または脳疾患から選択される疾患または障害の薬物療法の患者における有効性を監視する方法であって、
ａ）前記患者に有効量の請求項２から５のいずれか一項に記載の化合物を投与するステップ、および
ｂ）適切な造影装置、例えば、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、または単一光子放射断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）を用いて、前記放射性標識された化合物から放出される放射線を検出または測定するステップ
を含む方法。
【請求項１４】
前記化合物が、請求項２で定義した化合物Ａまたは化合物Ｂである、請求項１１から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記化合物が、請求項２で定義した化合物Ａまたは化合物Ｂである、請求項６から１０のいずれか一項に記載の使用。
【公表番号】特表２０１３−５１３５７１（Ｐ２０１３−５１３５７１Ａ）
【公表日】平成２５年４月２２日（２０１３．４．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５４２５３６（Ｐ２０１２−５４２５３６）
【出願日】平成２２年１２月８日（２０１０．１２．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２０１０／０６９１６９
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０７００６６
【国際公開日】平成２３年６月１６日（２０１１．６．１６）
【出願人】（５０４３８９９９１）ノバルティス アーゲー (806)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２５年４月２２日（２０１３．４．２２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２２年１２月８日（２０１０．１２．８）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２０１０／０６９１６９
【国際公開番号】ＷＯ２０１１／０７００６６
【国際公開日】平成２３年６月１６日（２０１１．６．１６）
【出願人】（５０４３８９９９１）ノバルティス アーゲー (806)
【Ｆターム（参考）】
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