ＦｃγＲＩＩＢ特異的抗体とその利用法
本発明は、FcγRIIA、特にヒトFcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIB、特にヒトFcγRIIBと特異的に結合する抗体またはそのフラグメントに関する。本発明は、治療抗体のエフェクター機能を増強する本発明の抗体を投与することにより、治療抗体の治療効果を増強する方法を提供する。本発明はまた、本発明の抗体を投与することにより、ワクチン組成物の効力を増強する方法も提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
未変性FcγRIIAと結合するより大きい親和性で未変性FcγRIIBと特異的に結合する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項２】
上記結合がFcγRIIBの少なくとも１つの活性を作動する、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
上記活性がＢ細胞受容体を介するシグナル伝達の抑制である、請求項２に記載の抗体。
【請求項４】
上記活性がFcεRIに誘導される肥満細胞活性化の抑制である、請求項２に記載の抗体。
【請求項５】
Ｂ細胞の活性化、Ｂ細胞増殖、抗体産生、細胞内カルシウム流入、またはFcγRIIBシグナル伝達経路における１以上の下流シグナル伝達分子の活性を抑制する、請求項２に記載の抗体。
【請求項６】
上記下流シグナル伝達分子がPLCγ、MAPK、Btk、またはAktである、請求項５に記載の抗体。
【請求項７】
FcγRIIBのリン酸化および／またはFcγRIIBシグナル伝達経路における１以上の下流シグナル伝達分子の補充を増強する、請求項２に記載の抗体。
【請求項８】
上記下流シグナル伝達分子がSHIPである、請求項７に記載の抗体。
【請求項９】
上記結合がFcγRIIBの少なくとも１つの活性を拮抗する、請求項１に記載の抗体。
【請求項１０】
上記活性がＢ細胞受容体を介するシグナル伝達の活性化である、請求項９に記載の抗体。
【請求項１１】
上記活性がFcεRIに誘導される肥満細胞活性化の活性化である、請求項９に記載の抗体。
【請求項１２】
Ｂ細胞活性、Ｂ細胞増殖、抗体産生、細胞内カルシウム流入、またはFcγRIIBシグナル伝達経路における１以上の下流シグナル伝達分子の活性を増強する、請求項９に記載の抗体。
【請求項１３】
上記下流シグナル伝達分子がBtkキナーゼ、PLCγ、MAPK、またはAktである、請求項１２に記載の抗体。
【請求項１４】
FcγRIIBのリン酸化および／またはFcγRIIBシグナル伝達経路における１以上の下流シグナル伝達分子の補充を低下させる、請求項９に記載の抗体。
【請求項１５】
上記下流シグナル伝達分子がSHIPである、請求項１４に記載の抗体。
【請求項１６】
上記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項１７】
上記抗体がヒト化抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項１８】
上記抗体がヒト抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項１９】
上記フラグメントがF(ab')2フラグメントである、請求項１に記載の抗体フラグメント。
【請求項２０】
上記フラグメントがF(ab)フラグメントである、請求項１に記載の抗体フラグメント。
【請求項２１】
上記抗体が１本鎖抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項２２】
FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する第１の重鎖-軽鎖対および腫瘍抗原と特異的に結合する第２の重鎖-軽鎖対を含む、二特異的抗体。
【請求項２３】
未変性FcγRIIAと結合するより少なくとも２倍大きい親和性で未変性FcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項２４】
異種ポリペプチドと機能しうる形で連結された、請求項１に記載の抗体。
【請求項２５】
上記異種ポリペプチドが細胞表面受容体と免疫特異的に結合する抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項２６】
上記異種ポリペプチドが腫瘍抗原と免疫特異的に結合する抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項２７】
上記抗体が治療薬とコンジュゲートしている、請求項１に記載の抗体。
【請求項２８】
上記治療薬が細胞毒である、請求項２７に記載の抗体。
【請求項２９】
上記細胞毒がパクリタキセル、サイトカラシンB、グラミシジンD、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンD、1-デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ピューロマイシン、エピルビシン（epirubicin）、またはシクロホスファミドである、請求項２８に記載の抗体。
【請求項３０】
Ig-FcのFcγRIIBとの結合をブロックする、請求項１に記載の抗体。
【請求項３１】
免疫応答を増強する、請求項３０に記載の抗体。
【請求項３２】
上記免疫応答の増強が抗体依存性細胞応答の増加である、請求項３１に記載の抗体。
【請求項３３】
FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合するモノクローナル抗体を産生する方法であって、
(a)精製FcγRIIBまたはその免疫原性フラグメントを用いてFcγRIIAトランスジェニックマウスを免疫感作するステップ；
(b)上記マウスの脾細胞からハイブリドーマ培養細胞株を産生させるステップ；および
(c)上記ハイブリドーマ培養細胞株を、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体を産生する１以上のハイブリドーマ培養細胞株についてスクリーニングするステップを含む上記方法。
【請求項３４】
請求項３３に記載の方法により産生される抗体。
【請求項３５】
上記免疫原性フラグメントがFcγRIIBの可溶性細胞外ドメインである、請求項３３の方法。
【請求項３６】
ATCC受託番号PTA-4592を有するクローン3H7より産生されるマウスモノクローナル抗体。
【請求項３７】
ヒト化されている、請求項３６に記載の抗体。
【請求項３８】
ATCC受託番号PTA-4591を有するクローン2B6より産生されるマウスモノクローナル抗体。
【請求項３９】
請求項36の抗体との結合について競合し、かつFcγRIIAと結合するより大きい親和性で未変性FcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項４０】
ATCC受託番号PTA-4592を有するハイブリドーマ培養細胞株3H7。
【請求項４１】
ヒト化されている、請求項３８に記載の抗体。
【請求項４２】
請求項38の抗体との結合について競合し、かつFcγRIIAと結合するより大きい親和性で未変性FcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項４３】
ATCC受託番号PTA-4591を有するハイブリドーマ培養細胞株2B6。
【請求項４４】
請求項１の抗体またはそのフラグメントの重鎖または軽鎖をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項４５】
請求項４４に記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項４６】
重鎖をコードする第１の核酸分子および軽鎖をコードする第２の核酸分子を含むベクターであって、上記重鎖および上記軽鎖が請求項１の抗体またはそのフラグメントである上記ベクター。
【請求項４７】
発現ベクターである請求項４５に記載のベクター。
【請求項４８】
請求項４５のベクターを含有する宿主細胞。
【請求項４９】
異種プロモーターと機能しうる形で連結された第１の核酸および同じもしくは異なる異種プロモーターと機能しうる形で連結された第２の核酸を含有する宿主細胞であって、上記第１の核酸および第２の核酸がそれぞれ請求項１の抗体の重鎖および軽鎖をコードする上記宿主細胞。
【請求項５０】
FcγRIIB特異的抗体を遺伝子組換えにより産生する方法であって、(i)培地で請求項４８の宿主細胞を、上記抗体の発現に好適な条件のもとで培養するステップ；および(ii)上記培地から上記抗体を回収するステップを含む上記方法。
【請求項５１】
癌抗原により特徴付けられる癌を有する患者において癌を治療する方法であって、上記患者に、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する第１の抗体またはそのフラグメント、および上記癌抗原と特異的に結合しかつ細胞傷害性である第２抗体の治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項５２】
上記癌が乳、卵巣、前立腺、子宮頚部または膵臓癌である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
上記細胞傷害性抗体がHerceptin（登録商標）、Rituxan（登録商標）、IC14、PANOREXTM、IMC-225、VITAXINTM、Campath LH/LDP-03、LYMPHOCIDETM、またはZEVLINTMである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
上記癌抗原がMAGE-1、MAGE-3、BAGE、GAGE-1、GAGE-2、N-アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、pI5、β-カテニン、MUM-1、CDK4、HER-2/neu、ヒトパピローマウイルスウイルス-E6、ヒトパピローマウイルスウイルス-E7、またはMUC-1である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
上記癌抗原が乳、卵巣、前立腺、子宮頚部、または膵臓癌抗原である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５６】
さらに１以上のさらなる癌治療の実施を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５７】
上記のさらなる癌治療が化学治療、免疫治療、放射治法、ホルモン治療、または外科手術からなる群から選ばれる、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
上記患者がヒトである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５９】
上記第１の抗体がヒト抗体またはヒト化抗体である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
(i)FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量；(ii)癌抗原と特異的に結合する細胞傷害性抗体；および(iii)製薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項６１】
上記第１の抗体がヒトまたはヒト化抗体である、請求項６０に記載の医薬組成物
【請求項６２】
上記第２の抗体がヒトまたはヒト化抗体である、請求項６０または６１に記載の医薬組成物。
【請求項６３】
さらに１以上のさらなる抗癌薬を含む、請求項６０に記載の医薬組成物。
【請求項６４】
上記抗癌薬が化学治療薬、放射治療薬、ホルモン治療薬、または免疫治療薬である、請求項６３に記載の医薬組成物。
【請求項６５】
それを必要とする患者における自己免疫障害を治療する方法であって、上記患者に請求項１に記載の抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項６６】
上記自己免疫障害が慢性関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、ライター症候群、乾癬、またはエリテマトーデスである、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
さらに上記患者に１以上の抗炎症薬の治療上有効な量を投与することを含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
さらに上記患者に１以上の免疫応答調節薬の治療上有効な量を投与することを含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項６９】
少なくとも１つの免疫応答調節薬が小有機分子である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
小有機分子がメトトレキセート、レフルノミド、シクロホスファミド、シクロスポリンA、FK506、ミコフェノール酸モフェチル、ラパマイシン、ミゾリビン、デオキシスパグアリン（deooxyspergualin）、ブレキナール（brequinar）、マロノニトリルアミンド、ステロイド、または副腎皮質ステロイドである、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
少なくとも１つの抗炎症薬が非ステロイド抗炎症薬である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７２】
非ステロイド抗炎症薬がアスピリン、イブプロフェン、ジクロフェナク、ナブメントン（nabumentone）、ナプロキセン、またはケトプロテンである、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
それを必要とする患者においてIgEを介するアレルギー障害を治療または予防する方法であって、上記患者に、請求項２に記載の抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項７４】
上記IgEを介するアレルギー障害が喘息、アレルギー鼻炎、胃腸アレルギー、好酸球増加症、結膜炎,または糸球体腎炎である、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
上記患者がヒトである、請求項６５または請求項７３に記載の方法。
【請求項７６】
上記抗体がヒト化抗体またはヒト抗体である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
細胞傷害性抗体を用いて治療される被験者において抗体を介する細胞傷害性効果を増強する方法であって、上記患者に、請求項１に記載の抗体またはそのフラグメントを上記細胞傷害性抗体の細胞傷害性効果を増強するのに十分な量だけ投与することを含む上記方法。
【請求項７８】
被験者の自己免疫疾患を診断する方法であって、(a)上記被験者からの生物学的サンプルを請求項１に記載の抗体またはそのフラグメントの有効な量と接触させるステップ；および(b)上記抗体またはそのフラグメントの結合を検出し、上記検出可能なマーカーのバックグラウンドまたは標準レベルを超える検出は上記被験者が自己免疫疾患ステップを有することを示すとするステップを含む上記方法。
【請求項７９】
上記検出可能なマーカーが化学発光、酵素、蛍光、または放射標識である、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
被験者においてワクチン組成物に対する免疫応答を増強する方法であって、上記被験者に、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体またはそのフラグメント、およびワクチン組成物を投与することを含み、上記抗体またはそのフラグメントが上記被験者において上記ワクチン組成物に対する免疫応答を増強するのに有効な量だけ投与される、上記方法。
【請求項８１】
FcγRIIAと結合するより４倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８２】
FcγRIIAと結合するより６倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８３】
FcγRIIAと結合するより８倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合、する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８４】
FcγRIIAと結合するより10倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８５】
FcγRIIAと結合するより100倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８６】
FcγRIIAと結合するより1000倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８７】
FcγRIIAと結合するより104倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８８】
FcγRIIAと結合するより105倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８９】
FcγRIIAと結合するより106倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項９０】
(i)FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する治療上有効な量の抗体またはそのフラグメント；および(ii)製薬上許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項９１】
FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合するモノクローナル抗体を産生する方法であって、
(a)FcγRIIAトランスジェニックマウスを精製したFcγRIIBまたはその免疫原性フラグメントを用いて免疫感作するステップ；
(b)上記マウスを免疫応答を誘発するのに十分な時間、追加免疫感作するステップ；
(c)上記マウスの脾細胞からハイブリドーマ培養細胞株を作るステップ；
(d)上記ハイブリドーマ培養細胞株を、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体を産生する１以上のハイブリドーマ培養細胞株についてスクリーニングするステップを含む上記方法。
【請求項９２】
上記マウスを少なくとも４回、４ヶ月間にわたり追加免疫感作する、請求項９１に記載の方法。
【請求項９３】
患者の癌を治療する方法であって、上記患者にFcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項９４】
患者のＢ細胞悪性腫瘍を治療する方法であって、上記患者にFcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項９５】
上記Ｂ細胞悪性腫瘍が非ホジキンリンパ腫である、請求項９４に記載の方法。
【請求項９６】
患者の疾患を治療する方法であって、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する第１の抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量、およびその治療効果を細胞死滅によらないで媒介する第２の抗体を投与することを含む上記方法。
【請求項９７】
上記第２の抗体が抗Fas抗体である、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
腫瘍部位におけるマクロファージの集団の浸潤により特徴付けられる腫瘍を有する患者の固体腫瘍を治療する方法であって、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する第１の抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量を投与することを含み、ここで上記抗体がマクロファージの集団を低減することを特徴とする上記方法。
【請求項９９】
上記抗体がマクロファージの集団を少なくとも80％だけ低減する、請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
癌抗原により特徴付けられる癌を有する患者の癌を治療する方法であって、上記患者にFcγRIIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する第１の抗体またはそのフラグメント、および上記癌抗原と結合しない第２抗体の治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項１０１】
上記第２の抗体が腫瘍細胞周囲の細胞上に発現される癌抗原と結合する、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
上記細胞が線維芽細胞またはストローマ細胞である、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
上記癌抗原が線維芽細胞活性化タンパク質である、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０４】
さらに少なくとも1つの改変をFc域に含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１０５】
上記抗体が改変されたFcγRに対する親和性を有する、請求項１０４に記載の抗体。
【請求項１０６】
野生型Fc域を含む比較しうる抗体がFcγRIIIAと結合するより高い親和性でFcγRIIIAと結合する、請求項１０４に記載の抗体。
【請求項１０７】
野生型Fc域を含む比較しうる抗体と比較して、抗体を介するエフェクター機能が増強されている、請求項１０４に記載の抗体。
【請求項１】
未変性FcγRIIAと結合するより大きい親和性で未変性FcγRIIBと特異的に結合する単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項２】
上記結合がFcγRIIBの少なくとも１つの活性を作動する、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
上記活性がＢ細胞受容体を介するシグナル伝達の抑制である、請求項２に記載の抗体。
【請求項４】
上記活性がFcεRIに誘導される肥満細胞活性化の抑制である、請求項２に記載の抗体。
【請求項５】
Ｂ細胞の活性化、Ｂ細胞増殖、抗体産生、細胞内カルシウム流入、またはFcγRIIBシグナル伝達経路における１以上の下流シグナル伝達分子の活性を抑制する、請求項２に記載の抗体。
【請求項６】
上記下流シグナル伝達分子がPLCγ、MAPK、Btk、またはAktである、請求項５に記載の抗体。
【請求項７】
FcγRIIBのリン酸化および／またはFcγRIIBシグナル伝達経路における１以上の下流シグナル伝達分子の補充を増強する、請求項２に記載の抗体。
【請求項８】
上記下流シグナル伝達分子がSHIPである、請求項７に記載の抗体。
【請求項９】
上記結合がFcγRIIBの少なくとも１つの活性を拮抗する、請求項１に記載の抗体。
【請求項１０】
上記活性がＢ細胞受容体を介するシグナル伝達の活性化である、請求項９に記載の抗体。
【請求項１１】
上記活性がFcεRIに誘導される肥満細胞活性化の活性化である、請求項９に記載の抗体。
【請求項１２】
Ｂ細胞活性、Ｂ細胞増殖、抗体産生、細胞内カルシウム流入、またはFcγRIIBシグナル伝達経路における１以上の下流シグナル伝達分子の活性を増強する、請求項９に記載の抗体。
【請求項１３】
上記下流シグナル伝達分子がBtkキナーゼ、PLCγ、MAPK、またはAktである、請求項１２に記載の抗体。
【請求項１４】
FcγRIIBのリン酸化および／またはFcγRIIBシグナル伝達経路における１以上の下流シグナル伝達分子の補充を低下させる、請求項９に記載の抗体。
【請求項１５】
上記下流シグナル伝達分子がSHIPである、請求項１４に記載の抗体。
【請求項１６】
上記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項１７】
上記抗体がヒト化抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項１８】
上記抗体がヒト抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項１９】
上記フラグメントがF(ab')2フラグメントである、請求項１に記載の抗体フラグメント。
【請求項２０】
上記フラグメントがF(ab)フラグメントである、請求項１に記載の抗体フラグメント。
【請求項２１】
上記抗体が１本鎖抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項２２】
FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する第１の重鎖-軽鎖対および腫瘍抗原と特異的に結合する第２の重鎖-軽鎖対を含む、二特異的抗体。
【請求項２３】
未変性FcγRIIAと結合するより少なくとも２倍大きい親和性で未変性FcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項２４】
異種ポリペプチドと機能しうる形で連結された、請求項１に記載の抗体。
【請求項２５】
上記異種ポリペプチドが細胞表面受容体と免疫特異的に結合する抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項２６】
上記異種ポリペプチドが腫瘍抗原と免疫特異的に結合する抗体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項２７】
上記抗体が治療薬とコンジュゲートしている、請求項１に記載の抗体。
【請求項２８】
上記治療薬が細胞毒である、請求項２７に記載の抗体。
【請求項２９】
上記細胞毒がパクリタキセル、サイトカラシンB、グラミシジンD、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミトラマイシン、アクチノマイシンD、1-デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ピューロマイシン、エピルビシン（epirubicin）、またはシクロホスファミドである、請求項２８に記載の抗体。
【請求項３０】
Ig-FcのFcγRIIBとの結合をブロックする、請求項１に記載の抗体。
【請求項３１】
免疫応答を増強する、請求項３０に記載の抗体。
【請求項３２】
上記免疫応答の増強が抗体依存性細胞応答の増加である、請求項３１に記載の抗体。
【請求項３３】
FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合するモノクローナル抗体を産生する方法であって、
(a)精製FcγRIIBまたはその免疫原性フラグメントを用いてFcγRIIAトランスジェニックマウスを免疫感作するステップ；
(b)上記マウスの脾細胞からハイブリドーマ培養細胞株を産生させるステップ；および
(c)上記ハイブリドーマ培養細胞株を、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体を産生する１以上のハイブリドーマ培養細胞株についてスクリーニングするステップを含む上記方法。
【請求項３４】
請求項３３に記載の方法により産生される抗体。
【請求項３５】
上記免疫原性フラグメントがFcγRIIBの可溶性細胞外ドメインである、請求項３３の方法。
【請求項３６】
ATCC受託番号PTA-4592を有するクローン3H7より産生されるマウスモノクローナル抗体。
【請求項３７】
ヒト化されている、請求項３６に記載の抗体。
【請求項３８】
ATCC受託番号PTA-4591を有するクローン2B6より産生されるマウスモノクローナル抗体。
【請求項３９】
請求項36の抗体との結合について競合し、かつFcγRIIAと結合するより大きい親和性で未変性FcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項４０】
ATCC受託番号PTA-4592を有するハイブリドーマ培養細胞株3H7。
【請求項４１】
ヒト化されている、請求項３８に記載の抗体。
【請求項４２】
請求項38の抗体との結合について競合し、かつFcγRIIAと結合するより大きい親和性で未変性FcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項４３】
ATCC受託番号PTA-4591を有するハイブリドーマ培養細胞株2B6。
【請求項４４】
請求項１の抗体またはそのフラグメントの重鎖または軽鎖をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸。
【請求項４５】
請求項４４に記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項４６】
重鎖をコードする第１の核酸分子および軽鎖をコードする第２の核酸分子を含むベクターであって、上記重鎖および上記軽鎖が請求項１の抗体またはそのフラグメントである上記ベクター。
【請求項４７】
発現ベクターである請求項４５に記載のベクター。
【請求項４８】
請求項４５のベクターを含有する宿主細胞。
【請求項４９】
異種プロモーターと機能しうる形で連結された第１の核酸および同じもしくは異なる異種プロモーターと機能しうる形で連結された第２の核酸を含有する宿主細胞であって、上記第１の核酸および第２の核酸がそれぞれ請求項１の抗体の重鎖および軽鎖をコードする上記宿主細胞。
【請求項５０】
FcγRIIB特異的抗体を遺伝子組換えにより産生する方法であって、(i)培地で請求項４８の宿主細胞を、上記抗体の発現に好適な条件のもとで培養するステップ；および(ii)上記培地から上記抗体を回収するステップを含む上記方法。
【請求項５１】
癌抗原により特徴付けられる癌を有する患者において癌を治療する方法であって、上記患者に、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する第１の抗体またはそのフラグメント、および上記癌抗原と特異的に結合しかつ細胞傷害性である第２抗体の治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項５２】
上記癌が乳、卵巣、前立腺、子宮頚部または膵臓癌である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
上記細胞傷害性抗体がHerceptin（登録商標）、Rituxan（登録商標）、IC14、PANOREXTM、IMC-225、VITAXINTM、Campath LH/LDP-03、LYMPHOCIDETM、またはZEVLINTMである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
上記癌抗原がMAGE-1、MAGE-3、BAGE、GAGE-1、GAGE-2、N-アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、pI5、β-カテニン、MUM-1、CDK4、HER-2/neu、ヒトパピローマウイルスウイルス-E6、ヒトパピローマウイルスウイルス-E7、またはMUC-1である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５５】
上記癌抗原が乳、卵巣、前立腺、子宮頚部、または膵臓癌抗原である、請求項５１に記載の方法。
【請求項５６】
さらに１以上のさらなる癌治療の実施を含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項５７】
上記のさらなる癌治療が化学治療、免疫治療、放射治法、ホルモン治療、または外科手術からなる群から選ばれる、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
上記患者がヒトである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５９】
上記第１の抗体がヒト抗体またはヒト化抗体である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
(i)FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量；(ii)癌抗原と特異的に結合する細胞傷害性抗体；および(iii)製薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項６１】
上記第１の抗体がヒトまたはヒト化抗体である、請求項６０に記載の医薬組成物
【請求項６２】
上記第２の抗体がヒトまたはヒト化抗体である、請求項６０または６１に記載の医薬組成物。
【請求項６３】
さらに１以上のさらなる抗癌薬を含む、請求項６０に記載の医薬組成物。
【請求項６４】
上記抗癌薬が化学治療薬、放射治療薬、ホルモン治療薬、または免疫治療薬である、請求項６３に記載の医薬組成物。
【請求項６５】
それを必要とする患者における自己免疫障害を治療する方法であって、上記患者に請求項１に記載の抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項６６】
上記自己免疫障害が慢性関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、ライター症候群、乾癬、またはエリテマトーデスである、請求項６５に記載の方法。
【請求項６７】
さらに上記患者に１以上の抗炎症薬の治療上有効な量を投与することを含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項６８】
さらに上記患者に１以上の免疫応答調節薬の治療上有効な量を投与することを含む、請求項６５に記載の方法。
【請求項６９】
少なくとも１つの免疫応答調節薬が小有機分子である、請求項６８に記載の方法。
【請求項７０】
小有機分子がメトトレキセート、レフルノミド、シクロホスファミド、シクロスポリンA、FK506、ミコフェノール酸モフェチル、ラパマイシン、ミゾリビン、デオキシスパグアリン（deooxyspergualin）、ブレキナール（brequinar）、マロノニトリルアミンド、ステロイド、または副腎皮質ステロイドである、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
少なくとも１つの抗炎症薬が非ステロイド抗炎症薬である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７２】
非ステロイド抗炎症薬がアスピリン、イブプロフェン、ジクロフェナク、ナブメントン（nabumentone）、ナプロキセン、またはケトプロテンである、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
それを必要とする患者においてIgEを介するアレルギー障害を治療または予防する方法であって、上記患者に、請求項２に記載の抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項７４】
上記IgEを介するアレルギー障害が喘息、アレルギー鼻炎、胃腸アレルギー、好酸球増加症、結膜炎,または糸球体腎炎である、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
上記患者がヒトである、請求項６５または請求項７３に記載の方法。
【請求項７６】
上記抗体がヒト化抗体またはヒト抗体である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
細胞傷害性抗体を用いて治療される被験者において抗体を介する細胞傷害性効果を増強する方法であって、上記患者に、請求項１に記載の抗体またはそのフラグメントを上記細胞傷害性抗体の細胞傷害性効果を増強するのに十分な量だけ投与することを含む上記方法。
【請求項７８】
被験者の自己免疫疾患を診断する方法であって、(a)上記被験者からの生物学的サンプルを請求項１に記載の抗体またはそのフラグメントの有効な量と接触させるステップ；および(b)上記抗体またはそのフラグメントの結合を検出し、上記検出可能なマーカーのバックグラウンドまたは標準レベルを超える検出は上記被験者が自己免疫疾患ステップを有することを示すとするステップを含む上記方法。
【請求項７９】
上記検出可能なマーカーが化学発光、酵素、蛍光、または放射標識である、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
被験者においてワクチン組成物に対する免疫応答を増強する方法であって、上記被験者に、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体またはそのフラグメント、およびワクチン組成物を投与することを含み、上記抗体またはそのフラグメントが上記被験者において上記ワクチン組成物に対する免疫応答を増強するのに有効な量だけ投与される、上記方法。
【請求項８１】
FcγRIIAと結合するより４倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８２】
FcγRIIAと結合するより６倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８３】
FcγRIIAと結合するより８倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合、する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８４】
FcγRIIAと結合するより10倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８５】
FcγRIIAと結合するより100倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８６】
FcγRIIAと結合するより1000倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８７】
FcγRIIAと結合するより104倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８８】
FcγRIIAと結合するより105倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項８９】
FcγRIIAと結合するより106倍大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメント。
【請求項９０】
(i)FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する治療上有効な量の抗体またはそのフラグメント；および(ii)製薬上許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項９１】
FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合するモノクローナル抗体を産生する方法であって、
(a)FcγRIIAトランスジェニックマウスを精製したFcγRIIBまたはその免疫原性フラグメントを用いて免疫感作するステップ；
(b)上記マウスを免疫応答を誘発するのに十分な時間、追加免疫感作するステップ；
(c)上記マウスの脾細胞からハイブリドーマ培養細胞株を作るステップ；
(d)上記ハイブリドーマ培養細胞株を、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体を産生する１以上のハイブリドーマ培養細胞株についてスクリーニングするステップを含む上記方法。
【請求項９２】
上記マウスを少なくとも４回、４ヶ月間にわたり追加免疫感作する、請求項９１に記載の方法。
【請求項９３】
患者の癌を治療する方法であって、上記患者にFcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項９４】
患者のＢ細胞悪性腫瘍を治療する方法であって、上記患者にFcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項９５】
上記Ｂ細胞悪性腫瘍が非ホジキンリンパ腫である、請求項９４に記載の方法。
【請求項９６】
患者の疾患を治療する方法であって、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する第１の抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量、およびその治療効果を細胞死滅によらないで媒介する第２の抗体を投与することを含む上記方法。
【請求項９７】
上記第２の抗体が抗Fas抗体である、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
腫瘍部位におけるマクロファージの集団の浸潤により特徴付けられる腫瘍を有する患者の固体腫瘍を治療する方法であって、FcγRIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する第１の抗体またはそのフラグメントの治療上有効な量を投与することを含み、ここで上記抗体がマクロファージの集団を低減することを特徴とする上記方法。
【請求項９９】
上記抗体がマクロファージの集団を少なくとも80％だけ低減する、請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
癌抗原により特徴付けられる癌を有する患者の癌を治療する方法であって、上記患者にFcγRIIIAと結合するより大きい親和性でFcγRIIBと特異的に結合する第１の抗体またはそのフラグメント、および上記癌抗原と結合しない第２抗体の治療上有効な量を投与することを含む上記方法。
【請求項１０１】
上記第２の抗体が腫瘍細胞周囲の細胞上に発現される癌抗原と結合する、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
上記細胞が線維芽細胞またはストローマ細胞である、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
上記癌抗原が線維芽細胞活性化タンパク質である、請求項１０２に記載の方法。
【請求項１０４】
さらに少なくとも1つの改変をFc域に含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項１０５】
上記抗体が改変されたFcγRに対する親和性を有する、請求項１０４に記載の抗体。
【請求項１０６】
野生型Fc域を含む比較しうる抗体がFcγRIIIAと結合するより高い親和性でFcγRIIIAと結合する、請求項１０４に記載の抗体。
【請求項１０７】
野生型Fc域を含む比較しうる抗体と比較して、抗体を介するエフェクター機能が増強されている、請求項１０４に記載の抗体。
【図１Ａ】
【図１Ｂ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９Ａ】
【図９Ｂ】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【図１Ｂ】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９Ａ】
【図９Ｂ】
【図１０】
【図１１】
【図１２】
【図１３】
【図１４】
【図１５】
【図１６】
【公表番号】特表２００６−５０６９７７（Ｐ２００６−５０６９７７Ａ）
【公表日】平成１８年３月２日（２００６．３．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５２９３８２（Ｐ２００４−５２９３８２）
【出願日】平成１５年８月１４日（２００３．８．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０２５３９９
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０１６７５０
【国際公開日】平成１６年２月２６日（２００４．２．２６）
【出願人】（５０４４３８７２７）マクロジェニクス，インコーポレーテッド (23)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成１８年３月２日（２００６．３．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１５年８月１４日（２００３．８．１４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００３／０２５３９９
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０１６７５０
【国際公開日】平成１６年２月２６日（２００４．２．２６）
【出願人】（５０４４３８７２７）マクロジェニクス，インコーポレーテッド (23)
【Ｆターム（参考）】
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