ＧＬＰ−１及びインスリンの分泌持続調整剤
【課題】ＧＬＰ−１（ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ ｐｅｐｔｉｄｅ−１）の分泌及びインスリンの分泌を促進し、さらにこれらの血中濃度を高い状態で長時間にわたって持続させることができる、ＧＬＰ−１ひいてはインスリンの分泌持続調整剤を提供すること、またあわせて、該分泌持続調整剤を含有する食品組成物を提供することを目的とする。
【解決手段】ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を利用し、さらに該遊離脂肪酸を乳化物化、即ち、該遊離脂肪酸を乳化物に含有させて投与することにより、血中におけるＧＬＰ−１及びインスリンの分泌を促進し、さらにＧＬＰ−１ひいてはインスリンを血中において高濃度で長時間持続させることができる。
【解決手段】ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を利用し、さらに該遊離脂肪酸を乳化物化、即ち、該遊離脂肪酸を乳化物に含有させて投与することにより、血中におけるＧＬＰ−１及びインスリンの分泌を促進し、さらにＧＬＰ−１ひいてはインスリンを血中において高濃度で長時間持続させることができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＧＬＰ−１及びインスリンの分泌持続調整剤に関し、詳しくはＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を有効成分として含有する乳化物を含むＧＬＰ−１及びインスリンの分泌持続調整剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代社会において、糖尿病患者数の増加は著しく、その治療のために必要とされる社会的、経済的コストは莫大な金額にのぼり、医療分野における重大問題として、早期解決が望まれている。糖尿病は、血液中に存在するグルコースを正常に代謝することができず、いわゆる高血糖状態を持続させ、身体機能に様々な悪影響を及ぼすものである。糖尿病の主な合併症として、網膜症、腎症、神経障害、動脈硬化等が挙げられ、これらの合併症はさらに、失明、尿毒症、脳卒中、心筋梗塞等の深刻な病態を招く危険性を有している。
【０００３】
糖尿病の治療方法としては、食事療法、運動療法等により代謝機能の正常化を図る方法の他、グルコース代謝に必要とされるインスリンを注射により投与する方法が行われている。
【０００４】
また、近年、インスリンを直接投与する方法の他にも、インスリンの生成、インスリンの分泌等を促進することにより、血糖値の低下を実現させる方法等の研究も活発に行われている。
【０００５】
インスリン分泌を調節するペプチドホルモンとして、ＧＬＰ−１（ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ ｐｅｐｔｉｄｅ−１；グルカゴン様ペプチド１）が注目を浴びつつある。ＧＬＰ−１は、回腸、大腸等に存在する腸内分泌細胞であるＬ細胞において生成されるプログルカゴンから翻訳後プロセッシングされて生じるペプチドホルモンである（非特許文献１）。グルコース濃度に応答してインスリンの分泌を誘導することから、特にＩＩ型（インスリン非依存型）糖尿病の治療に効果を示す可能性が指摘されてきた（非特許文献２及び３）。さらに、β細胞の増殖、又は幹細胞からのβ細胞の新生を誘導する効果等も報告されており、ＩＩ型糖尿病におけるβ細胞のアポトーシスの遅延や、Ｉ型糖尿病に対する膵島移植の効果継続に有効であると推測される。その他にも、中枢の視床下部に作用して満腹感の刺激、及び摂食の低減を誘導することが明らかとなっており（非特許文献４及び５）、糖尿病のみならず、肥満症を含む摂食障害への治療効果が期待されている。さらに、胃内容排出、胃酸分泌の抑制、肝糖放出抑制、心筋保護、学習記憶能向上等もＧＬＰ−１の作用として報告されており、多様な健康維持増進効果が期待できる。
【０００６】
しかし、ＧＬＰ−１を治療に適用するにあたり、ペプチドであるが故に経口投与が出来ず注射による投与方法を取らざるを得ないこと、及び生体内における半減期が非常に短い（非特許文献２及び３）ために頻繁な投与を要することが障害となっていた。
【０００７】
このような問題点を克服する方法として、いくつかの検討が為されている。例えば、血中にインスリン分泌促進作用は残しつつ半減期を延長させたＧＬＰ−１アナログを投与する方法（特許文献１）、ＧＬＰ−１の血中への投与時にＧＬＰ−１を分解する酵素であるＤＰＰ−ＩＶを阻害する方法（特許文献２）がある。
【０００８】
また、血中のＧＬＰ−１濃度を高めるには内在性のＧＬＰ−１の分泌を促進する方法も考えられている。最近、ヒトＧＴ０１タンパク質とそのアゴニストの作用により、ＧＬＰ−１の分泌が促進され、インスリンの分泌も促進されること、さらに、上記アゴニストが遊離脂肪酸であることが見出された（特許文献３、非特許文献６）。
【０００９】
ヒトＧＴ０１タンパク質は、７回膜貫通型のＧタンパク質共役型レセプターである。Ｇタンパク質共役型レセプターは、生体内の各機能細胞表面に存在し、それらの機能を調節するリガンド分子の標的となっており、該リガンド分子との結合を介して細胞内にシグナルを伝達している。伝達されたシグナルを受け取った細胞は、その細胞機能の活性化又は抑制化を受け、その結果、種々の生体内反応を惹起していく。
【００１０】
ヒトＧＴ０１タンパク質のアゴニストである遊離脂肪酸を投与することにより、ＧＬＰ−１の分泌が促進され、またインスリンの分泌も促進され、これらの血中濃度を一時的に上昇させることができる。しかしながら、該遊離脂肪酸を投与してから数時間が経過した後にはその分泌促進効果は薄れ、ＧＬＰ−１及びインスリンの血中濃度も投与前の状態に戻ってしまう。
【００１１】
これについて、例えば糖尿病患者においては、血糖は一時的に下げれば良いというものではなく、持続的に正常域にコントロールされることが望まれる。高血糖が一日のうち数時間であっても、長い年月に亘りその状態が継続すれば、合併症発生のリスクにさらされる。すなわち、高い血中ＧＬＰ−１ひいては血中インスリン濃度を長時間維持させることが望まれる。しかし、遊離脂肪酸等のＧＴ０１タンパク質アゴニストを１日に何度も投与することは利便性の面から適当でない。
【００１２】
また、該遊離脂肪酸は、ヒトＧＴ０１タンパク質に対する特異的なリガンドとして作用することは知られているが、ＧＬＰ−１の分泌、ひいてはインスリンの分泌を促進し、さらにはＧＬＰ−１ひいてはインスリンの血中濃度を高い状態で長時間維持するために、該脂肪酸を乳化物とすることは知られていない。
【００１３】
したがって、遊離脂肪酸のようなヒトＧＴ０１タンパク質アゴニストの投与において、単回投与あたりのＧＬＰ−１及びインスリンの血中持続時間を延長させること、及びこれを経口又は経管で投与させることは、効果的な糖尿病及び肥満症の治療又は予防において強く要求されるところであり、その開発が望まれている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】特表２００２−５０６７９２号公報
【特許文献２】特表２００４−５３５４３３号公報
【特許文献３】国際公開第２００５／０８３０７０号パンフレット
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】Drucker, Diabetes 47: 159-169, 1998
【非特許文献２】Drucker, Endocrinology 142: 521-527, 2001
【非特許文献３】Thorens and Waeber, Diabetes 42: 1219-1225, 1993
【非特許文献４】Turton et al., Nature 379: 69-72, 1996
【非特許文献５】Flint et al., J. Clin. Invest. 101: 515-520, 1998
【非特許文献６】Hirasawa et al., Nat Med. 11: 90-94, 2005
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
上記のように、内在性ＧＬＰ−１ひいてはインスリンの分泌を促進させるにあたり、ヒトＧＴ０１タンパク質のアゴニストである遊離脂肪酸は有用であるが、しかしその分泌促進効果の持続時間は、例えば、糖尿病又は肥満症の治療又は予防に十分とは言えない。そこで本発明は、ＧＬＰ−１分泌及びインスリン分泌を促進し、さらにこれらの血中濃度を高い状態で長時間にわたって持続させることができる、ＧＬＰ−１ひいてはインスリンの分泌持続調整剤を提供することを目的とする。またあわせて、該分泌持続調整剤を含有する食品、飼料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
上記の課題を解決すべく本発明者らは鋭意検討した結果、まず、本発明者らはヒトＧＴ０１タンパク質が腸内分泌細胞の表面に分布していることに着目した。そして、該ヒトＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を如何にして腸管内で有効に持続させることができるかについて種々の検討を行ったところ、該遊離脂肪酸を乳化物化して、即ち、該遊離脂肪酸を乳化物に含有させて投与することにより、血中におけるＧＬＰ−１を高濃度で長時間持続させることができ、これによりインスリンを血中において高濃度で長時間持続できることを見出した。また、該遊離脂肪酸を乳化物に含有させれば、同時に経口投与又は経管投与によって該遊離脂肪酸を腸管に投与できることをさらに見出し、本発明を完成した。
【００１８】
即ち、本発明は下記の通りである。
（１）ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を有効成分として含有する乳化物を含むＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（２）遊離脂肪酸が、シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂の加水分解生成物である、（１）記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（３）シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂が、しそ油及び／又はえごま油である、（２）記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（４）乳化物が、５０〜１０００ｎｍの平均粒子径を有する、（１）〜（３）のいずれかに記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（５）経口投与用又は経管投与用である、（１）〜（４）のいずれかに記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（６）糖尿病の予防及び／又は治療剤である、（１）〜（５）のいずれかに記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（７）（１）〜（６）のいずれかに記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤を含有する食品組成物。
（８）ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を有効成分として含有する乳化物を含むインスリン分泌持続調整剤。
（９）遊離脂肪酸が、シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂の加水分解生成物である、（８）記載のインスリン分泌持続調整剤。
（１０）シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂が、しそ油及び／又はえごま油である、（９）記載のインスリン分泌持続調整剤。
（１１）乳化物が、５０〜１０００ｎｍの平均粒子径を有する、（８）〜（１０）のいずれかに記載のインスリン分泌持続調整剤。
（１２）経口投与用又は経管投与用である、（８）〜（１１）のいずれかに記載のインスリン分泌持続調整剤。
（１３）糖尿病の予防及び／又は治療剤である、（８）〜（１２）のいずれかに記載のインスリン分泌持続調整剤。
（１４）（８）〜（１４）のいずれかに記載のインスリン分泌持続調整剤を含有する食品組成物。
【発明の効果】
【００１９】
本発明により提供されるＧＬＰ−１及びインスリンの分泌持続調整剤を用いることにより、細胞からのＧＬＰ−１分泌ひいてはインスリン分泌を促進し、さらにこれらの血中濃度を高い状態で長時間にわたって持続させることができる。その結果、持続的に血糖をコントロールすることが可能となる。
【００２０】
また、膵臓のβ細胞からのインスリンの分泌の促進、β細胞の増殖、幹細胞からのβ細胞の新生誘導、ＩＩ型糖尿病におけるβ細胞のアポトーシスの遅延、Ｉ型糖尿病に対する膵島移植の効果継続等の効果が期待でき、血糖値の低減を介した糖尿病の治療又は予防に更なる効果が期待できる。
【００２１】
さらに、本発明により提供されるＧＬＰ−１及びインスリンの分泌持続調整剤により、「満腹感」を生じさせて摂食の低減を誘導することが可能となり、肥満を抑制することも期待できる。肥満は、高血糖、高血圧、脂質代謝異常の集積するいわゆるメタボリックシンドロームの共通基盤であるという知見があり、即ち、肥満を抑制することにより糖尿病のみならず広く動脈硬化性疾患の予防及び治療に効果を発揮することも期待できる。あわせて、胃内容排出、胃酸分泌の抑制、肝糖放出抑制、心筋保護、学習記憶能向上等もＧＬＰ−１の作用として報告されており、これらの効果も期待できる。
【００２２】
そして、これらの効果を有し得る本発明のＧＬＰ−１及びインスリン分泌持続調整剤は、経口又は経管で体内に投与をすることができ、医薬の分野のみならず、食品の分野にも利用することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】マウスに遊離脂肪酸乳化物及び遊離脂肪酸ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）包含物を与えたことによる、マウス門脈（ｐｏｒｔａｌ ｖｅｉｎ）中のＧＬＰ−１濃度の変動を示す図である。ネガティブコントロールとして、乳化物担体のみ及び担体（ＰＥＧ）のみを与えた場合についても測定した結果を示す図である。
【図２】マウスに遊離脂肪酸乳化物及び遊離脂肪酸ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）包含物を与えたことによる、マウス門脈（ｐｏｒｔａｌ ｖｅｉｎ）中のインスリン濃度の変動を示す図である。ネガティブコントロールとして、乳化物担体のみ及び担体（ＰＥＧ）のみを与えた場合についても測定した結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明は、ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を含有する乳化物を含むＧＬＰ−１及びインスリン分泌持続調整剤である。
【００２５】
ＧＴ０１タンパク質とは、上記でも述べた通り、膜貫通型タンパク質であり、その中のヒトＧＴ０１タンパク質は、７回膜貫通型のＧタンパク質共役型レセプターである。このＧタンパク質共役型レセプターは、生体内の各機能細胞表面に存在し、それらの機能を調節するリガンド分子の標的となっており、該リガンド分子との結合を介して細胞内にシグナルを伝達している。伝達されたシグナルを受け取った細胞は、その細胞機能の活性化又は抑制化を受け、その結果、種々の生体内反応を惹起していく。なお、ヒトＧＴ０１タンパク質は、ＧＰＲ１２０と称されており、ＮＰ＿８５９５２９としてＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列と同一である。また、ラットＧＴ０１タンパク質はＮＰ＿００１０４０５５３としてＧｅｎＢａｎｋに登録されており、マウス等のその他の種も含め、自体公知の方法により該タンパク質を単離することができる。
【００２６】
また、本発明におけるリガンドとは、受容体に適合する化学分子のことであり、アゴニスト及びアンタゴニストの両方の概念のうち、本発明ではアゴニストであることを意味する。具体的には、本発明におけるリガンド（アゴニスト）とは、ＧＴ０１タンパク質の生物学的活性（リガンドの結合により、ＧＬＰ−１及びインスリンの分泌のためのシグナルを細胞内に伝達する活性）を誘導する作用を有するものを意味する。
【００２７】
本発明において、ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸としては、化学合成されたものでも、油脂等の脂肪酸誘導体から分解して得られたものでも良く、１種のみでも２種以上の混合物でも良い。ここで、遊離脂肪酸とは、カルボキシル基が他の官能基と共有結合をしていない状態の脂肪酸をいい、結合型の脂肪酸を酸若しくはアルカリ触媒、又は酵素等による化学反応によって得られるものも含まれる。
【００２８】
本発明における遊離脂肪酸について、化学合成されたものとしては、直鎖又は分岐の脂肪酸群から選択することができ、その炭素数は通常４〜３０であり、好ましくは８〜２６である。その中でも、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ペンタデカノイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキン酸、ベヘン酸、マルガリン酸、パルミトレイン酸、エイコサトリエノイン酸、エライジン酸、ペトロセリニン酸、オレイン酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、ホモγリノレン酸、アラキドン酸、エイコサジエン酸、エイコサトリエン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、リノール酸、エイコサテトラエン酸、又はバクセン酸のような直鎖の脂肪酸が好ましく、これらを単独で、又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。またこれらのうち、ＧＬＰ−１及びインスリンの産生促進能が高く、さらに好ましいものは、α−リノレン酸、パルミトレイン酸、及びドコサヘキサエン酸であり、最も好ましいものは、α−リノレン酸である。本発明においては、これらの遊離脂肪酸が脂肪酸組成中に１０質量％以上含まれていることが好ましく、特に、α−リノレン酸が５０質量％以上含まれていることが好ましい。
【００２９】
また、該遊離脂肪酸に異性体が存在する場合は、全ての異性体を含むものとするが、例えば、エイコサトリエノイン酸では、ｃｉｓ−５，８，１１−エイコサトリエノイン酸が好ましく、エイコサジエン酸では、ｃｉｓ−１１，１４−エイコサジエン酸が好ましく、エイコサトリエン酸では、ｃｉｓ−１１，１４，１７−エイコサトリエン酸が好ましく、エイコサテトラエン酸では、ｃｉｓ−７，１０，１３，１６−エイコサテトラエン酸が好ましく、エイコサペンタエン酸では、ｃｉｓ−５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸及びａｌｌ−ｃｉｓ−７，１０，１３，１６，１９−エイコサペンタエン酸が好ましく、ドコサヘキサエン酸では、ｃｉｓ−４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸が好ましい。
【００３０】
本発明における遊離脂肪酸について、脂肪酸誘導体から分解して得られたものとしては、精製した単独の脂肪酸を使用することができるが、例えば、天然の油脂を加水分解して得られた混合脂肪酸であっても構わず、さらに混合脂肪酸から濃縮又は精製したものであっても構わない。
【００３１】
油脂から分解して得る場合の原料油脂としては特に制限は無く、適宜選択して用いることができる。油脂の例としては、菜種油、大豆油、ヤシ油、オリーブ油、しそ油、えごま油、亜麻仁油、コーン油、マカデミア油等の植物油；牛脂、ラード、魚油等の動物油；及びこれら天然から得られる油脂の硬化油、分別油、エステル交換油等を挙げることができ、これらのうち１種のみを用いても２種以上を組み合わせて用いても良い。特に、しそ油、えごま油、亜麻仁油、マカデミア油、及び魚油は、夫々α−リノレン酸、パルミトレイン酸、及びドコサヘキサエン酸を豊富に含有しているため好ましく、これらの中でも、しそ油、えごま油、及び亜麻仁油がさらに好ましい。なお、しそ油及びえごま油はシソ科シソ属の植物の種子から得られる油脂であり、α−リノレン酸を該油脂の脂肪酸組成中に５０質量％以上含有する。また、亜麻仁油はアマ科アマ属の植物（アマ）の種子から得られる油脂であり、α−リノレン酸を該油脂の脂肪酸組成中に５０質量％以上含有する。
【００３２】
油脂等の脂肪酸誘導体を分解する方法としては特に制限は無く、定法から適宜選択して用いることができる。例として、酸分解、アルカリ分解、高圧加水分解、リパーゼ等を用いた酵素分解等の加水分解方法を用いることができる。
【００３３】
上記の遊離脂肪酸の形態は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、又はアンモニウム等の塩の形態とすることができる。また、該遊離脂肪酸は、トリアシルグリセロール、ジアシルグリセロール等の油脂類と混合して使用することができる。この場合、他の油脂類と遊離脂肪酸を合わせたうち、他の油脂類の量は、両者を合わせた質量に対して０〜９９質量％とすることができ、好ましくは０〜５０質量％、より好ましくは０〜２０質量％とすることができる。
【００３４】
本発明は、上記のような遊離脂肪酸を乳化物（水中油型）に含有させることを特徴とするものであり、その乳化物については、平均粒子径が５０〜１０００ｎｍの乳化物とすることが好ましい。また、該乳化物の平均粒子径は、好ましくは１００ｎｍ以上９００ｎｍ未満、より好ましくは１００ｎｍ以上７００ｎｍ未満である。平均粒子径が１０００ｎｍを超える場合は乳化安定性が悪くなる傾向があり、また５０ｎｍ未満では乳化物の腸管吸収性が高くなる傾向があり、該遊離脂肪酸が腸管細胞上のＧＴ０１タンパク質を十分に活性化する前に吸収されるため好ましくない。該遊離脂肪酸の、ＧＬＰ−１及びインスリンの産出効率の観点からは、乳化物の平均粒子径は１００ｎｍ以上であることが好ましく、２００ｎｍ以上であることがより好ましい。なお、本発明における平均粒子径は、後述の調製例２に記載の方法によって測定したものである。
【００３５】
本発明における乳化物について、全固形分中に占める該遊離脂肪酸の含量は、通常５〜９０質量％であり、好ましくは５〜８０質量％、より好ましくは１０〜８０質量％である。全固形分中に占める遊離脂肪酸の含量が５質量％未満である場合、遊離脂肪酸のＧＬＰ−１及びインスリン分泌促進効果を得るにあたって乳化物としての摂取量が増える傾向があるため好ましくなく、全固形分中に占める遊離脂肪酸の含量が９０質量％を超えると、乳化安定性が悪くなりやすく、ＧＬＰ−１及びインスリン分泌の持続効果が十分発揮されなくなる傾向がある。
【００３６】
本発明における乳化物は、遊離脂肪酸を水等の溶媒に加えて均質に乳化して製造することができる。当該溶媒としては食用に適し、且つ乳化を阻害しないものであれば特に限定されないが、例えば、注射用蒸留水、リン酸緩衝液、生理食塩水、水道水、酢酸緩衝液等を挙げることができる。乳化させる方法としては、通常用いられる均質乳化方法であれば特に制限なく使用することができ、例えば、ホモジナイザーを用いる方法や、コロイドミルを用いる方法、ホモミキサーを用いる方法等が挙げられる。なお、本発明における５０〜１０００ｎｍの平均粒子径の乳化物は、後述の調製例２に記載の方法によって調製したものである。
【００３７】
また、本発明については、乳化性を向上させるために乳化剤を用いることができ、該乳化剤としては、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、レシチン、ショ糖脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル等が挙げられる。これらのうち、グリセリン脂肪酸エステルが好ましく、その中でもモノグリセリドがより好ましく、さらにカゼインナトリウムとの相性の観点から、ステアリン酸モノグリセリド又はパルミチン酸モノグリセリドが特に好ましい。なお、これらの乳化剤は１種又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。
【００３８】
また、本発明における乳化物には、安定化剤を加えることができる。該安定化剤としては、経口又は経管投与等により腸管に導入し得る安定性を付与できる成分であれば特に制限なく使用することができるが、タンパク質や乳化性糖質が特に好ましく挙げられ、これらを単独で、又は組み合わせて使用することができる。該タンパク質としては、例えば、カゼイン、カゼイン塩（カゼインナトリウム等）、乳清タンパク質、脱脂粉乳、牛乳等の乳製品由来のタンパク質；ゼラチン等の動物性タンパク質；大豆、コーン、小麦等由来の植物性タンパク質が挙げられ、これらの中で、好ましくはカゼイン又はその塩が用いられる。なお、これらのタンパク質は、１種又は２種以上を組み合わせて用いることができる。また、該乳化性糖質としては、アラビアガム、サイクロデキストリン、クラスターデキストリン等が挙げられる。以上のうち、安定性の付与の点からは、タンパク質の使用がより好ましく、カゼイン又はカゼインナトリウムの使用が特に好ましい。
【００３９】
該安定化剤の添加量は、通常全固形分の１〜７０質量％であり、該安定化剤がタンパク質の場合は１〜２０質量％とし、該安定化剤が乳化性糖質の場合は１０〜７０質量％とすることが好ましい。該被覆材の添加量が１質量％未満となる場合は、遊離脂肪酸のうち特に不飽和脂肪酸の酸化安定性及び乳化安定性が悪くなるおそれがある。
【００４０】
また、本発明については、本発明の効果を損なわない範囲において、乳化性糖質以外の糖質類や無機塩等を配合することができる。該糖質類としては、ショ糖、ブドウ糖、麦芽糖、乳糖、果糖、水あめ、馬鈴薯デンプン、コーンスターチ、デキストリン、オリゴ糖、小麦デンプン、グアーガム、キサンタンガム、トラガントガム等が挙げられる。また、該無機塩としては、リン酸塩やクエン酸塩等が挙げられ、具体的には、リン酸３ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、ヘキサメタリン酸ナトリウム、クエン酸３ナトリウム等が挙げられる。これらのうち、好ましくは、リン酸３ナトリウム又はヘキサメタリン酸ナトリウムを用いることができる。さらに、該糖質類の他にも、抗酸化剤、着色料、香料、ビタミン類、微量金属成分等のその他の成分を配合してもよい。以上の成分は、単独で、又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。
【００４１】
本発明における乳化物を含むＧＬＰ−１分泌持続調整剤及びインスリン分泌持続調整剤は、そのまま乳化液として使用する以外に、例えば、噴霧乾燥法等により水分を除去して乾燥粉末として使用することもできる。該乾燥粉末を服用又は摂取した場合、生体内の水分に溶解して、同様に乳化物となる。
【００４２】
本発明のＧＬＰ−１及びインスリン分泌持続調整剤は、それぞれ、体内におけるＧＬＰ−１濃度及びインスリン濃度を長時間にわたって高い状態で持続させるものである。このとき、長時間とは例えば３時間以上、好ましくは１時間以上であり、濃度が高い状態とは、該分泌持続調整剤を投与する前よりも濃度が高い状態を意味する。なお、体内については、特に血中であることが好ましい。
【００４３】
本発明のＧＬＰ−１分泌持続調整剤及びインスリン分泌持続調整剤は、経口、経鼻、経腸、腎ろう等の投与経路又は経管による投与経路にて投与することができる。これらの投与経路のうち、経口又は経管による投与が最も好ましい。また、その投与量は、対象とするヒト又は動物の種類や状態等にもよるが、遊離脂肪酸として対象の体重当たり０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ／ｋｇとすることができ、好ましくは１０ｍｇ〜１００ｍｇ／ｋｇとすることができる。
【００４４】
また、本発明のＧＬＰ−１及びインスリン分泌持続調整剤は、ヒト又はヒト以外の動物に適用することができる。該動物としては、例えば、家畜（ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ等）、又はペット動物（イヌ、ネコ等）等の哺乳動物が挙げられる。
【００４５】
本発明のＧＬＰ−１及びインスリン分泌持続調整剤は、医薬品として、さらにはそれ自体を食品、飼料として、さらにまた食品又は飼料に配合して摂取することも可能である。
【００４６】
医薬としては、糖尿病、肥満症、食後高血糖（隠れ糖尿病）、潰瘍性大腸炎等のような種々の効果が期待できる中で、特に糖尿病及び／又は肥満症の治療及び予防を目的とする医薬、即ち、糖尿病及び／又は肥満症の予防治療剤とすることが好ましい。本発明の医薬の剤型としては、例えば、錠剤（舌下錠、口腔内崩壊錠を含む）、カプセル剤（ソフトカプセル、マイクロカプセルを含む）、散剤、顆粒剤、トローチ剤、シロップ剤等の経口剤、経腸栄養剤等を挙げることができる。
【００４７】
また、本発明のＧＬＰ−１分泌持続調整剤及びインスリン分泌持続調整剤を食品、飼料とする場合も、糖尿病、肥満症、食後高血糖（隠れ糖尿病）、潰瘍性大腸炎等のような種々の期待される効果の中から、特に糖尿病及び／又は肥満症の治療又は予防を目的とすることが好ましい。該食品の形態としては、特に限定されることはないが、例えば、錠剤形、粉末状、顆粒状、シロップ、カプセル状等の健康食品；パン類、菓子類、クッキー、ビスケット等の穀類加工品；牛乳、ヨーグルト、アイスクリーム等の乳製品類；炭酸飲料、清涼飲料、果汁入り清涼飲料、果汁入り飲料、薬系ドリンク等の飲料；大豆、魚肉、畜肉等を使用した惣菜や加工食品；マーガリン、ファットスプレッド、ショートニング等の油脂加工食品；粉末飲料、粉末スープ等の粉末食品；又は経腸流動食等が挙げられる。これらのうち、特に好適な形態として、飲料、経腸栄養剤、又は経腸流動食とすることができる。
【００４８】
本発明の食品は、いわゆる健康食品を含む一般食品、さらには厚生労働省の定める保険機能食品、特定保険用食品、栄養機能食品、栄養補助食品とすることができる。
【実施例】
【００４９】
以下の実施例は、本発明を例示するためにのみ提供されるものであって、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【００５０】
［調製例１］
遊離脂肪酸の調製
えごま油１０ｇを、８．３Ｎ水酸化カリウム水溶液とエタノールを６：４４の比で混合して調製したアルカリ性含水エタノール１００ｇ中にて、８０℃で１時間分解し、遊離脂肪酸の塩を含む水溶液を得た。これを塩酸で中和した後水洗し、エバポレーターを用いて減圧脱水してえごま油遊離脂肪酸を得た。シリカゲル薄層クロマトグラフィー用プレートにて展開溶媒（ヘキサン：ジエチルエーテル：酢酸が３０：７０：１）で分析を行った結果、遊離脂肪酸純度は９８％を超えるものであった。また、得られた脂肪酸組成を表１に示す。
【００５１】
【表１】
【００５２】
［調製例２］
遊離脂肪酸含有乳化物の調製
えごま油遊離脂肪酸１４４５ｍｇ、乳糖２７０ｍｇ、デキストリン２２０ｍｇ、カゼインナトリウム８０ｍｇ、グリセリン脂肪酸エステル２０ｍｇ、ヘキサメタリン酸ナトリウム１０ｍｇに精製水を加えて１００ｍｌとし、混合して７０℃に加熱し、ポリトロン（ＫＩＮＥＭＡＴＩＣＡ社）にてホモジナイズして均一な液体状の乳化物（乳化液）を得た。この乳化物の平均粒子径は３１７．０ｎｍであった。なお、平均粒子径は、サブミクロン粒子分析装置（ＣＯＵＬＴＥＲ Ｎ５型 ベックマン・コールター（株）製）を用いて、当該装置が検出できる濃度に希釈し、室温にて測定した。
【００５３】
［調製例３］
遊離脂肪酸ポリエチレングリコール包含物の調製
えごま油遊離脂肪酸を４１．７５６ｇ秤量し、最終調製量の１／１０量のポリエチレングリコール（重量平均分子量４００、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ Ｉｎｃ．）を加え、十分に振とう及び攪拌して均一な混合物が調製されたことを目視により確認し、続けて最終調製量が５ｍＬになるようにポリエチレングリコールを加え、さらに十分に振とう及び攪拌して均一な混合物を調製した。目視にて均一であることを確認後、投与に用いる注射筒へ移し、金属製ゾンデを装着した。サンプルは、用時調製した。
【実施例１】
【００５４】
ｉｎ ｖｉｖｏにおける脂肪酸乳化物のＧＬＰ−１分泌への影響
ｉｎ ｖｉｖｏにおけるＧＬＰ−１の分泌に対する、遊離脂肪酸乳化物の影響を検討した。
オスの８週齢Ｃ５７／Ｂ６マウス（Ｓａｎｋｙｏ Ｌａｂ）に対し、２ｍｇ／ｇ体重のグルコースを負荷し、３０分後に、１７２ｎｍｏｌ／ｇ体重（α−リノレン酸として１００ｎｍｏｌ／ｇ体重）の、調製例２及び３で得た遊離脂肪酸乳化物及び遊離脂肪酸ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）包含物をそれぞれチューブを介して胃内投与した。また、ネガティブコントロールとして、遊離脂肪酸を含有しない乳化物担体及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のみをそれぞれ同様に投与した。各種被検物質の投与後、３０、６０、９０、１２０、１８０分後に、ジエチルエーテルで麻酔したのち、ヘパリナイズしたシリンジを用いて門脈より血液を採取した。血漿は、ヘパリン化された血液を遠心分離（４℃、２０分、１２００×ｇ）することで調製し、ＧＬＰ−１の酵素免役アッセイ（（株）矢内原研究所にて実施）を行った。全ての実験は施設の認可されたガイドラインに従って行った。その結果を図１に示す。
【００５５】
図１の結果より、遊離脂肪酸ＰＥＧ包含物を投与した場合は、ＧＬＰ−１の血漿中濃度が６０分後に最大値に達した後、１２０分後には初期値に戻ったのに対し、遊離脂肪酸乳化物を投与した場合では、１８０分後でもＧＬＰ−１の血漿中濃度が初期値より高い状態を維持していた。これらの結果より、遊離脂肪酸を乳化物に含有させて投与することにより、長時間にわたってＧＬＰ−１の分泌が持続されることが示唆された。
【実施例２】
【００５６】
ｉｎ ｖｉｖｏにおける脂肪酸乳化物のインスリン分泌への影響
ｉｎ ｖｉｖｏにおけるインスリンの分泌に対する、遊離脂肪酸乳化物の影響を検討した。
実施例１と同様に、オスの８週齢Ｃ５７／Ｂ６マウス（Ｓａｎｋｙｏ Ｌａｂ）に対し、２ｍｇ／ｇ体重のグルコースを負荷し、３０分後に、１７２ｎｍｏｌ／ｇ体重（α−リノレン酸として１００ｎｍｏｌ／ｇ体重）の、調製例２及び３で得た遊離脂肪酸乳化物及び遊離脂肪酸ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）包含物をそれぞれチューブを介して胃内投与した。また、ネガティブコントロールとして、遊離脂肪酸を含有しない乳化物担体及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のみをそれぞれ同様に投与した。各種被検物質の投与後、３０、６０、９０、１２０、１８０分後に、ジエチルエーテルで麻酔したのち、ヘパリナイズしたシリンジを用いて門脈より血液を採取した。血漿は、ヘパリン化された血液を遠心分離（４℃、２０分、１２００×ｇ）することで調製し、インスリンの酵素免役アッセイキット（（株）森永生科学研究所）を用いてインスリンの定量を行った。全ての実験は施設の認可されたガイドラインに従って行った。その結果を図２に示す。
【００５７】
図２の結果より、遊離脂肪酸乳化物において遊離脂肪酸ＰＥＧ包含物よりも高い濃度−時間曲線下面積が見られた。この結果は、遊離脂肪酸を乳化物に含有させて投与することによって、インスリン分泌の促進を長時間にわたって継続することを示唆している。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
本発明によれば、血中におけるＧＬＰ−１、ひいてはインスリンの分泌を促進し、さらにこれらの血中濃度を高い状態で長時間持続させることが可能となる。これにより、医薬分野における糖尿病や肥満症等の効果的な予防又は治療剤を提供することができ、更には経口投与可能な点を利用して、医薬分野のみならず、糖尿病や肥満症等の予防又は治療を目的とする食品や飼料としても提供することができる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＧＬＰ−１及びインスリンの分泌持続調整剤に関し、詳しくはＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を有効成分として含有する乳化物を含むＧＬＰ−１及びインスリンの分泌持続調整剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代社会において、糖尿病患者数の増加は著しく、その治療のために必要とされる社会的、経済的コストは莫大な金額にのぼり、医療分野における重大問題として、早期解決が望まれている。糖尿病は、血液中に存在するグルコースを正常に代謝することができず、いわゆる高血糖状態を持続させ、身体機能に様々な悪影響を及ぼすものである。糖尿病の主な合併症として、網膜症、腎症、神経障害、動脈硬化等が挙げられ、これらの合併症はさらに、失明、尿毒症、脳卒中、心筋梗塞等の深刻な病態を招く危険性を有している。
【０００３】
糖尿病の治療方法としては、食事療法、運動療法等により代謝機能の正常化を図る方法の他、グルコース代謝に必要とされるインスリンを注射により投与する方法が行われている。
【０００４】
また、近年、インスリンを直接投与する方法の他にも、インスリンの生成、インスリンの分泌等を促進することにより、血糖値の低下を実現させる方法等の研究も活発に行われている。
【０００５】
インスリン分泌を調節するペプチドホルモンとして、ＧＬＰ−１（ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ ｐｅｐｔｉｄｅ−１；グルカゴン様ペプチド１）が注目を浴びつつある。ＧＬＰ−１は、回腸、大腸等に存在する腸内分泌細胞であるＬ細胞において生成されるプログルカゴンから翻訳後プロセッシングされて生じるペプチドホルモンである（非特許文献１）。グルコース濃度に応答してインスリンの分泌を誘導することから、特にＩＩ型（インスリン非依存型）糖尿病の治療に効果を示す可能性が指摘されてきた（非特許文献２及び３）。さらに、β細胞の増殖、又は幹細胞からのβ細胞の新生を誘導する効果等も報告されており、ＩＩ型糖尿病におけるβ細胞のアポトーシスの遅延や、Ｉ型糖尿病に対する膵島移植の効果継続に有効であると推測される。その他にも、中枢の視床下部に作用して満腹感の刺激、及び摂食の低減を誘導することが明らかとなっており（非特許文献４及び５）、糖尿病のみならず、肥満症を含む摂食障害への治療効果が期待されている。さらに、胃内容排出、胃酸分泌の抑制、肝糖放出抑制、心筋保護、学習記憶能向上等もＧＬＰ−１の作用として報告されており、多様な健康維持増進効果が期待できる。
【０００６】
しかし、ＧＬＰ−１を治療に適用するにあたり、ペプチドであるが故に経口投与が出来ず注射による投与方法を取らざるを得ないこと、及び生体内における半減期が非常に短い（非特許文献２及び３）ために頻繁な投与を要することが障害となっていた。
【０００７】
このような問題点を克服する方法として、いくつかの検討が為されている。例えば、血中にインスリン分泌促進作用は残しつつ半減期を延長させたＧＬＰ−１アナログを投与する方法（特許文献１）、ＧＬＰ−１の血中への投与時にＧＬＰ−１を分解する酵素であるＤＰＰ−ＩＶを阻害する方法（特許文献２）がある。
【０００８】
また、血中のＧＬＰ−１濃度を高めるには内在性のＧＬＰ−１の分泌を促進する方法も考えられている。最近、ヒトＧＴ０１タンパク質とそのアゴニストの作用により、ＧＬＰ−１の分泌が促進され、インスリンの分泌も促進されること、さらに、上記アゴニストが遊離脂肪酸であることが見出された（特許文献３、非特許文献６）。
【０００９】
ヒトＧＴ０１タンパク質は、７回膜貫通型のＧタンパク質共役型レセプターである。Ｇタンパク質共役型レセプターは、生体内の各機能細胞表面に存在し、それらの機能を調節するリガンド分子の標的となっており、該リガンド分子との結合を介して細胞内にシグナルを伝達している。伝達されたシグナルを受け取った細胞は、その細胞機能の活性化又は抑制化を受け、その結果、種々の生体内反応を惹起していく。
【００１０】
ヒトＧＴ０１タンパク質のアゴニストである遊離脂肪酸を投与することにより、ＧＬＰ−１の分泌が促進され、またインスリンの分泌も促進され、これらの血中濃度を一時的に上昇させることができる。しかしながら、該遊離脂肪酸を投与してから数時間が経過した後にはその分泌促進効果は薄れ、ＧＬＰ−１及びインスリンの血中濃度も投与前の状態に戻ってしまう。
【００１１】
これについて、例えば糖尿病患者においては、血糖は一時的に下げれば良いというものではなく、持続的に正常域にコントロールされることが望まれる。高血糖が一日のうち数時間であっても、長い年月に亘りその状態が継続すれば、合併症発生のリスクにさらされる。すなわち、高い血中ＧＬＰ−１ひいては血中インスリン濃度を長時間維持させることが望まれる。しかし、遊離脂肪酸等のＧＴ０１タンパク質アゴニストを１日に何度も投与することは利便性の面から適当でない。
【００１２】
また、該遊離脂肪酸は、ヒトＧＴ０１タンパク質に対する特異的なリガンドとして作用することは知られているが、ＧＬＰ−１の分泌、ひいてはインスリンの分泌を促進し、さらにはＧＬＰ−１ひいてはインスリンの血中濃度を高い状態で長時間維持するために、該脂肪酸を乳化物とすることは知られていない。
【００１３】
したがって、遊離脂肪酸のようなヒトＧＴ０１タンパク質アゴニストの投与において、単回投与あたりのＧＬＰ−１及びインスリンの血中持続時間を延長させること、及びこれを経口又は経管で投与させることは、効果的な糖尿病及び肥満症の治療又は予防において強く要求されるところであり、その開発が望まれている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】特表２００２−５０６７９２号公報
【特許文献２】特表２００４−５３５４３３号公報
【特許文献３】国際公開第２００５／０８３０７０号パンフレット
【非特許文献】
【００１５】
【非特許文献１】Drucker, Diabetes 47: 159-169, 1998
【非特許文献２】Drucker, Endocrinology 142: 521-527, 2001
【非特許文献３】Thorens and Waeber, Diabetes 42: 1219-1225, 1993
【非特許文献４】Turton et al., Nature 379: 69-72, 1996
【非特許文献５】Flint et al., J. Clin. Invest. 101: 515-520, 1998
【非特許文献６】Hirasawa et al., Nat Med. 11: 90-94, 2005
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
上記のように、内在性ＧＬＰ−１ひいてはインスリンの分泌を促進させるにあたり、ヒトＧＴ０１タンパク質のアゴニストである遊離脂肪酸は有用であるが、しかしその分泌促進効果の持続時間は、例えば、糖尿病又は肥満症の治療又は予防に十分とは言えない。そこで本発明は、ＧＬＰ−１分泌及びインスリン分泌を促進し、さらにこれらの血中濃度を高い状態で長時間にわたって持続させることができる、ＧＬＰ−１ひいてはインスリンの分泌持続調整剤を提供することを目的とする。またあわせて、該分泌持続調整剤を含有する食品、飼料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
上記の課題を解決すべく本発明者らは鋭意検討した結果、まず、本発明者らはヒトＧＴ０１タンパク質が腸内分泌細胞の表面に分布していることに着目した。そして、該ヒトＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を如何にして腸管内で有効に持続させることができるかについて種々の検討を行ったところ、該遊離脂肪酸を乳化物化して、即ち、該遊離脂肪酸を乳化物に含有させて投与することにより、血中におけるＧＬＰ−１を高濃度で長時間持続させることができ、これによりインスリンを血中において高濃度で長時間持続できることを見出した。また、該遊離脂肪酸を乳化物に含有させれば、同時に経口投与又は経管投与によって該遊離脂肪酸を腸管に投与できることをさらに見出し、本発明を完成した。
【００１８】
即ち、本発明は下記の通りである。
（１）ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を有効成分として含有する乳化物を含むＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（２）遊離脂肪酸が、シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂の加水分解生成物である、（１）記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（３）シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂が、しそ油及び／又はえごま油である、（２）記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（４）乳化物が、５０〜１０００ｎｍの平均粒子径を有する、（１）〜（３）のいずれかに記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（５）経口投与用又は経管投与用である、（１）〜（４）のいずれかに記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（６）糖尿病の予防及び／又は治療剤である、（１）〜（５）のいずれかに記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
（７）（１）〜（６）のいずれかに記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤を含有する食品組成物。
（８）ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を有効成分として含有する乳化物を含むインスリン分泌持続調整剤。
（９）遊離脂肪酸が、シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂の加水分解生成物である、（８）記載のインスリン分泌持続調整剤。
（１０）シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂が、しそ油及び／又はえごま油である、（９）記載のインスリン分泌持続調整剤。
（１１）乳化物が、５０〜１０００ｎｍの平均粒子径を有する、（８）〜（１０）のいずれかに記載のインスリン分泌持続調整剤。
（１２）経口投与用又は経管投与用である、（８）〜（１１）のいずれかに記載のインスリン分泌持続調整剤。
（１３）糖尿病の予防及び／又は治療剤である、（８）〜（１２）のいずれかに記載のインスリン分泌持続調整剤。
（１４）（８）〜（１４）のいずれかに記載のインスリン分泌持続調整剤を含有する食品組成物。
【発明の効果】
【００１９】
本発明により提供されるＧＬＰ−１及びインスリンの分泌持続調整剤を用いることにより、細胞からのＧＬＰ−１分泌ひいてはインスリン分泌を促進し、さらにこれらの血中濃度を高い状態で長時間にわたって持続させることができる。その結果、持続的に血糖をコントロールすることが可能となる。
【００２０】
また、膵臓のβ細胞からのインスリンの分泌の促進、β細胞の増殖、幹細胞からのβ細胞の新生誘導、ＩＩ型糖尿病におけるβ細胞のアポトーシスの遅延、Ｉ型糖尿病に対する膵島移植の効果継続等の効果が期待でき、血糖値の低減を介した糖尿病の治療又は予防に更なる効果が期待できる。
【００２１】
さらに、本発明により提供されるＧＬＰ−１及びインスリンの分泌持続調整剤により、「満腹感」を生じさせて摂食の低減を誘導することが可能となり、肥満を抑制することも期待できる。肥満は、高血糖、高血圧、脂質代謝異常の集積するいわゆるメタボリックシンドロームの共通基盤であるという知見があり、即ち、肥満を抑制することにより糖尿病のみならず広く動脈硬化性疾患の予防及び治療に効果を発揮することも期待できる。あわせて、胃内容排出、胃酸分泌の抑制、肝糖放出抑制、心筋保護、学習記憶能向上等もＧＬＰ−１の作用として報告されており、これらの効果も期待できる。
【００２２】
そして、これらの効果を有し得る本発明のＧＬＰ−１及びインスリン分泌持続調整剤は、経口又は経管で体内に投与をすることができ、医薬の分野のみならず、食品の分野にも利用することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】マウスに遊離脂肪酸乳化物及び遊離脂肪酸ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）包含物を与えたことによる、マウス門脈（ｐｏｒｔａｌ ｖｅｉｎ）中のＧＬＰ−１濃度の変動を示す図である。ネガティブコントロールとして、乳化物担体のみ及び担体（ＰＥＧ）のみを与えた場合についても測定した結果を示す図である。
【図２】マウスに遊離脂肪酸乳化物及び遊離脂肪酸ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）包含物を与えたことによる、マウス門脈（ｐｏｒｔａｌ ｖｅｉｎ）中のインスリン濃度の変動を示す図である。ネガティブコントロールとして、乳化物担体のみ及び担体（ＰＥＧ）のみを与えた場合についても測定した結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明は、ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を含有する乳化物を含むＧＬＰ−１及びインスリン分泌持続調整剤である。
【００２５】
ＧＴ０１タンパク質とは、上記でも述べた通り、膜貫通型タンパク質であり、その中のヒトＧＴ０１タンパク質は、７回膜貫通型のＧタンパク質共役型レセプターである。このＧタンパク質共役型レセプターは、生体内の各機能細胞表面に存在し、それらの機能を調節するリガンド分子の標的となっており、該リガンド分子との結合を介して細胞内にシグナルを伝達している。伝達されたシグナルを受け取った細胞は、その細胞機能の活性化又は抑制化を受け、その結果、種々の生体内反応を惹起していく。なお、ヒトＧＴ０１タンパク質は、ＧＰＲ１２０と称されており、ＮＰ＿８５９５２９としてＧｅｎＢａｎｋに登録されているアミノ酸配列と同一である。また、ラットＧＴ０１タンパク質はＮＰ＿００１０４０５５３としてＧｅｎＢａｎｋに登録されており、マウス等のその他の種も含め、自体公知の方法により該タンパク質を単離することができる。
【００２６】
また、本発明におけるリガンドとは、受容体に適合する化学分子のことであり、アゴニスト及びアンタゴニストの両方の概念のうち、本発明ではアゴニストであることを意味する。具体的には、本発明におけるリガンド（アゴニスト）とは、ＧＴ０１タンパク質の生物学的活性（リガンドの結合により、ＧＬＰ−１及びインスリンの分泌のためのシグナルを細胞内に伝達する活性）を誘導する作用を有するものを意味する。
【００２７】
本発明において、ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸としては、化学合成されたものでも、油脂等の脂肪酸誘導体から分解して得られたものでも良く、１種のみでも２種以上の混合物でも良い。ここで、遊離脂肪酸とは、カルボキシル基が他の官能基と共有結合をしていない状態の脂肪酸をいい、結合型の脂肪酸を酸若しくはアルカリ触媒、又は酵素等による化学反応によって得られるものも含まれる。
【００２８】
本発明における遊離脂肪酸について、化学合成されたものとしては、直鎖又は分岐の脂肪酸群から選択することができ、その炭素数は通常４〜３０であり、好ましくは８〜２６である。その中でも、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、ペンタデカノイン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキン酸、ベヘン酸、マルガリン酸、パルミトレイン酸、エイコサトリエノイン酸、エライジン酸、ペトロセリニン酸、オレイン酸、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、ホモγリノレン酸、アラキドン酸、エイコサジエン酸、エイコサトリエン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、リノール酸、エイコサテトラエン酸、又はバクセン酸のような直鎖の脂肪酸が好ましく、これらを単独で、又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。またこれらのうち、ＧＬＰ−１及びインスリンの産生促進能が高く、さらに好ましいものは、α−リノレン酸、パルミトレイン酸、及びドコサヘキサエン酸であり、最も好ましいものは、α−リノレン酸である。本発明においては、これらの遊離脂肪酸が脂肪酸組成中に１０質量％以上含まれていることが好ましく、特に、α−リノレン酸が５０質量％以上含まれていることが好ましい。
【００２９】
また、該遊離脂肪酸に異性体が存在する場合は、全ての異性体を含むものとするが、例えば、エイコサトリエノイン酸では、ｃｉｓ−５，８，１１−エイコサトリエノイン酸が好ましく、エイコサジエン酸では、ｃｉｓ−１１，１４−エイコサジエン酸が好ましく、エイコサトリエン酸では、ｃｉｓ−１１，１４，１７−エイコサトリエン酸が好ましく、エイコサテトラエン酸では、ｃｉｓ−７，１０，１３，１６−エイコサテトラエン酸が好ましく、エイコサペンタエン酸では、ｃｉｓ−５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸及びａｌｌ−ｃｉｓ−７，１０，１３，１６，１９−エイコサペンタエン酸が好ましく、ドコサヘキサエン酸では、ｃｉｓ−４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸が好ましい。
【００３０】
本発明における遊離脂肪酸について、脂肪酸誘導体から分解して得られたものとしては、精製した単独の脂肪酸を使用することができるが、例えば、天然の油脂を加水分解して得られた混合脂肪酸であっても構わず、さらに混合脂肪酸から濃縮又は精製したものであっても構わない。
【００３１】
油脂から分解して得る場合の原料油脂としては特に制限は無く、適宜選択して用いることができる。油脂の例としては、菜種油、大豆油、ヤシ油、オリーブ油、しそ油、えごま油、亜麻仁油、コーン油、マカデミア油等の植物油；牛脂、ラード、魚油等の動物油；及びこれら天然から得られる油脂の硬化油、分別油、エステル交換油等を挙げることができ、これらのうち１種のみを用いても２種以上を組み合わせて用いても良い。特に、しそ油、えごま油、亜麻仁油、マカデミア油、及び魚油は、夫々α−リノレン酸、パルミトレイン酸、及びドコサヘキサエン酸を豊富に含有しているため好ましく、これらの中でも、しそ油、えごま油、及び亜麻仁油がさらに好ましい。なお、しそ油及びえごま油はシソ科シソ属の植物の種子から得られる油脂であり、α−リノレン酸を該油脂の脂肪酸組成中に５０質量％以上含有する。また、亜麻仁油はアマ科アマ属の植物（アマ）の種子から得られる油脂であり、α−リノレン酸を該油脂の脂肪酸組成中に５０質量％以上含有する。
【００３２】
油脂等の脂肪酸誘導体を分解する方法としては特に制限は無く、定法から適宜選択して用いることができる。例として、酸分解、アルカリ分解、高圧加水分解、リパーゼ等を用いた酵素分解等の加水分解方法を用いることができる。
【００３３】
上記の遊離脂肪酸の形態は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、又はアンモニウム等の塩の形態とすることができる。また、該遊離脂肪酸は、トリアシルグリセロール、ジアシルグリセロール等の油脂類と混合して使用することができる。この場合、他の油脂類と遊離脂肪酸を合わせたうち、他の油脂類の量は、両者を合わせた質量に対して０〜９９質量％とすることができ、好ましくは０〜５０質量％、より好ましくは０〜２０質量％とすることができる。
【００３４】
本発明は、上記のような遊離脂肪酸を乳化物（水中油型）に含有させることを特徴とするものであり、その乳化物については、平均粒子径が５０〜１０００ｎｍの乳化物とすることが好ましい。また、該乳化物の平均粒子径は、好ましくは１００ｎｍ以上９００ｎｍ未満、より好ましくは１００ｎｍ以上７００ｎｍ未満である。平均粒子径が１０００ｎｍを超える場合は乳化安定性が悪くなる傾向があり、また５０ｎｍ未満では乳化物の腸管吸収性が高くなる傾向があり、該遊離脂肪酸が腸管細胞上のＧＴ０１タンパク質を十分に活性化する前に吸収されるため好ましくない。該遊離脂肪酸の、ＧＬＰ−１及びインスリンの産出効率の観点からは、乳化物の平均粒子径は１００ｎｍ以上であることが好ましく、２００ｎｍ以上であることがより好ましい。なお、本発明における平均粒子径は、後述の調製例２に記載の方法によって測定したものである。
【００３５】
本発明における乳化物について、全固形分中に占める該遊離脂肪酸の含量は、通常５〜９０質量％であり、好ましくは５〜８０質量％、より好ましくは１０〜８０質量％である。全固形分中に占める遊離脂肪酸の含量が５質量％未満である場合、遊離脂肪酸のＧＬＰ−１及びインスリン分泌促進効果を得るにあたって乳化物としての摂取量が増える傾向があるため好ましくなく、全固形分中に占める遊離脂肪酸の含量が９０質量％を超えると、乳化安定性が悪くなりやすく、ＧＬＰ−１及びインスリン分泌の持続効果が十分発揮されなくなる傾向がある。
【００３６】
本発明における乳化物は、遊離脂肪酸を水等の溶媒に加えて均質に乳化して製造することができる。当該溶媒としては食用に適し、且つ乳化を阻害しないものであれば特に限定されないが、例えば、注射用蒸留水、リン酸緩衝液、生理食塩水、水道水、酢酸緩衝液等を挙げることができる。乳化させる方法としては、通常用いられる均質乳化方法であれば特に制限なく使用することができ、例えば、ホモジナイザーを用いる方法や、コロイドミルを用いる方法、ホモミキサーを用いる方法等が挙げられる。なお、本発明における５０〜１０００ｎｍの平均粒子径の乳化物は、後述の調製例２に記載の方法によって調製したものである。
【００３７】
また、本発明については、乳化性を向上させるために乳化剤を用いることができ、該乳化剤としては、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、レシチン、ショ糖脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル等が挙げられる。これらのうち、グリセリン脂肪酸エステルが好ましく、その中でもモノグリセリドがより好ましく、さらにカゼインナトリウムとの相性の観点から、ステアリン酸モノグリセリド又はパルミチン酸モノグリセリドが特に好ましい。なお、これらの乳化剤は１種又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。
【００３８】
また、本発明における乳化物には、安定化剤を加えることができる。該安定化剤としては、経口又は経管投与等により腸管に導入し得る安定性を付与できる成分であれば特に制限なく使用することができるが、タンパク質や乳化性糖質が特に好ましく挙げられ、これらを単独で、又は組み合わせて使用することができる。該タンパク質としては、例えば、カゼイン、カゼイン塩（カゼインナトリウム等）、乳清タンパク質、脱脂粉乳、牛乳等の乳製品由来のタンパク質；ゼラチン等の動物性タンパク質；大豆、コーン、小麦等由来の植物性タンパク質が挙げられ、これらの中で、好ましくはカゼイン又はその塩が用いられる。なお、これらのタンパク質は、１種又は２種以上を組み合わせて用いることができる。また、該乳化性糖質としては、アラビアガム、サイクロデキストリン、クラスターデキストリン等が挙げられる。以上のうち、安定性の付与の点からは、タンパク質の使用がより好ましく、カゼイン又はカゼインナトリウムの使用が特に好ましい。
【００３９】
該安定化剤の添加量は、通常全固形分の１〜７０質量％であり、該安定化剤がタンパク質の場合は１〜２０質量％とし、該安定化剤が乳化性糖質の場合は１０〜７０質量％とすることが好ましい。該被覆材の添加量が１質量％未満となる場合は、遊離脂肪酸のうち特に不飽和脂肪酸の酸化安定性及び乳化安定性が悪くなるおそれがある。
【００４０】
また、本発明については、本発明の効果を損なわない範囲において、乳化性糖質以外の糖質類や無機塩等を配合することができる。該糖質類としては、ショ糖、ブドウ糖、麦芽糖、乳糖、果糖、水あめ、馬鈴薯デンプン、コーンスターチ、デキストリン、オリゴ糖、小麦デンプン、グアーガム、キサンタンガム、トラガントガム等が挙げられる。また、該無機塩としては、リン酸塩やクエン酸塩等が挙げられ、具体的には、リン酸３ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、ヘキサメタリン酸ナトリウム、クエン酸３ナトリウム等が挙げられる。これらのうち、好ましくは、リン酸３ナトリウム又はヘキサメタリン酸ナトリウムを用いることができる。さらに、該糖質類の他にも、抗酸化剤、着色料、香料、ビタミン類、微量金属成分等のその他の成分を配合してもよい。以上の成分は、単独で、又は２種以上を適宜組み合わせて用いることができる。
【００４１】
本発明における乳化物を含むＧＬＰ−１分泌持続調整剤及びインスリン分泌持続調整剤は、そのまま乳化液として使用する以外に、例えば、噴霧乾燥法等により水分を除去して乾燥粉末として使用することもできる。該乾燥粉末を服用又は摂取した場合、生体内の水分に溶解して、同様に乳化物となる。
【００４２】
本発明のＧＬＰ−１及びインスリン分泌持続調整剤は、それぞれ、体内におけるＧＬＰ−１濃度及びインスリン濃度を長時間にわたって高い状態で持続させるものである。このとき、長時間とは例えば３時間以上、好ましくは１時間以上であり、濃度が高い状態とは、該分泌持続調整剤を投与する前よりも濃度が高い状態を意味する。なお、体内については、特に血中であることが好ましい。
【００４３】
本発明のＧＬＰ−１分泌持続調整剤及びインスリン分泌持続調整剤は、経口、経鼻、経腸、腎ろう等の投与経路又は経管による投与経路にて投与することができる。これらの投与経路のうち、経口又は経管による投与が最も好ましい。また、その投与量は、対象とするヒト又は動物の種類や状態等にもよるが、遊離脂肪酸として対象の体重当たり０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ／ｋｇとすることができ、好ましくは１０ｍｇ〜１００ｍｇ／ｋｇとすることができる。
【００４４】
また、本発明のＧＬＰ−１及びインスリン分泌持続調整剤は、ヒト又はヒト以外の動物に適用することができる。該動物としては、例えば、家畜（ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ等）、又はペット動物（イヌ、ネコ等）等の哺乳動物が挙げられる。
【００４５】
本発明のＧＬＰ−１及びインスリン分泌持続調整剤は、医薬品として、さらにはそれ自体を食品、飼料として、さらにまた食品又は飼料に配合して摂取することも可能である。
【００４６】
医薬としては、糖尿病、肥満症、食後高血糖（隠れ糖尿病）、潰瘍性大腸炎等のような種々の効果が期待できる中で、特に糖尿病及び／又は肥満症の治療及び予防を目的とする医薬、即ち、糖尿病及び／又は肥満症の予防治療剤とすることが好ましい。本発明の医薬の剤型としては、例えば、錠剤（舌下錠、口腔内崩壊錠を含む）、カプセル剤（ソフトカプセル、マイクロカプセルを含む）、散剤、顆粒剤、トローチ剤、シロップ剤等の経口剤、経腸栄養剤等を挙げることができる。
【００４７】
また、本発明のＧＬＰ−１分泌持続調整剤及びインスリン分泌持続調整剤を食品、飼料とする場合も、糖尿病、肥満症、食後高血糖（隠れ糖尿病）、潰瘍性大腸炎等のような種々の期待される効果の中から、特に糖尿病及び／又は肥満症の治療又は予防を目的とすることが好ましい。該食品の形態としては、特に限定されることはないが、例えば、錠剤形、粉末状、顆粒状、シロップ、カプセル状等の健康食品；パン類、菓子類、クッキー、ビスケット等の穀類加工品；牛乳、ヨーグルト、アイスクリーム等の乳製品類；炭酸飲料、清涼飲料、果汁入り清涼飲料、果汁入り飲料、薬系ドリンク等の飲料；大豆、魚肉、畜肉等を使用した惣菜や加工食品；マーガリン、ファットスプレッド、ショートニング等の油脂加工食品；粉末飲料、粉末スープ等の粉末食品；又は経腸流動食等が挙げられる。これらのうち、特に好適な形態として、飲料、経腸栄養剤、又は経腸流動食とすることができる。
【００４８】
本発明の食品は、いわゆる健康食品を含む一般食品、さらには厚生労働省の定める保険機能食品、特定保険用食品、栄養機能食品、栄養補助食品とすることができる。
【実施例】
【００４９】
以下の実施例は、本発明を例示するためにのみ提供されるものであって、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【００５０】
［調製例１］
遊離脂肪酸の調製
えごま油１０ｇを、８．３Ｎ水酸化カリウム水溶液とエタノールを６：４４の比で混合して調製したアルカリ性含水エタノール１００ｇ中にて、８０℃で１時間分解し、遊離脂肪酸の塩を含む水溶液を得た。これを塩酸で中和した後水洗し、エバポレーターを用いて減圧脱水してえごま油遊離脂肪酸を得た。シリカゲル薄層クロマトグラフィー用プレートにて展開溶媒（ヘキサン：ジエチルエーテル：酢酸が３０：７０：１）で分析を行った結果、遊離脂肪酸純度は９８％を超えるものであった。また、得られた脂肪酸組成を表１に示す。
【００５１】
【表１】
【００５２】
［調製例２］
遊離脂肪酸含有乳化物の調製
えごま油遊離脂肪酸１４４５ｍｇ、乳糖２７０ｍｇ、デキストリン２２０ｍｇ、カゼインナトリウム８０ｍｇ、グリセリン脂肪酸エステル２０ｍｇ、ヘキサメタリン酸ナトリウム１０ｍｇに精製水を加えて１００ｍｌとし、混合して７０℃に加熱し、ポリトロン（ＫＩＮＥＭＡＴＩＣＡ社）にてホモジナイズして均一な液体状の乳化物（乳化液）を得た。この乳化物の平均粒子径は３１７．０ｎｍであった。なお、平均粒子径は、サブミクロン粒子分析装置（ＣＯＵＬＴＥＲ Ｎ５型 ベックマン・コールター（株）製）を用いて、当該装置が検出できる濃度に希釈し、室温にて測定した。
【００５３】
［調製例３］
遊離脂肪酸ポリエチレングリコール包含物の調製
えごま油遊離脂肪酸を４１．７５６ｇ秤量し、最終調製量の１／１０量のポリエチレングリコール（重量平均分子量４００、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ Ｉｎｃ．）を加え、十分に振とう及び攪拌して均一な混合物が調製されたことを目視により確認し、続けて最終調製量が５ｍＬになるようにポリエチレングリコールを加え、さらに十分に振とう及び攪拌して均一な混合物を調製した。目視にて均一であることを確認後、投与に用いる注射筒へ移し、金属製ゾンデを装着した。サンプルは、用時調製した。
【実施例１】
【００５４】
ｉｎ ｖｉｖｏにおける脂肪酸乳化物のＧＬＰ−１分泌への影響
ｉｎ ｖｉｖｏにおけるＧＬＰ−１の分泌に対する、遊離脂肪酸乳化物の影響を検討した。
オスの８週齢Ｃ５７／Ｂ６マウス（Ｓａｎｋｙｏ Ｌａｂ）に対し、２ｍｇ／ｇ体重のグルコースを負荷し、３０分後に、１７２ｎｍｏｌ／ｇ体重（α−リノレン酸として１００ｎｍｏｌ／ｇ体重）の、調製例２及び３で得た遊離脂肪酸乳化物及び遊離脂肪酸ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）包含物をそれぞれチューブを介して胃内投与した。また、ネガティブコントロールとして、遊離脂肪酸を含有しない乳化物担体及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のみをそれぞれ同様に投与した。各種被検物質の投与後、３０、６０、９０、１２０、１８０分後に、ジエチルエーテルで麻酔したのち、ヘパリナイズしたシリンジを用いて門脈より血液を採取した。血漿は、ヘパリン化された血液を遠心分離（４℃、２０分、１２００×ｇ）することで調製し、ＧＬＰ−１の酵素免役アッセイ（（株）矢内原研究所にて実施）を行った。全ての実験は施設の認可されたガイドラインに従って行った。その結果を図１に示す。
【００５５】
図１の結果より、遊離脂肪酸ＰＥＧ包含物を投与した場合は、ＧＬＰ−１の血漿中濃度が６０分後に最大値に達した後、１２０分後には初期値に戻ったのに対し、遊離脂肪酸乳化物を投与した場合では、１８０分後でもＧＬＰ−１の血漿中濃度が初期値より高い状態を維持していた。これらの結果より、遊離脂肪酸を乳化物に含有させて投与することにより、長時間にわたってＧＬＰ−１の分泌が持続されることが示唆された。
【実施例２】
【００５６】
ｉｎ ｖｉｖｏにおける脂肪酸乳化物のインスリン分泌への影響
ｉｎ ｖｉｖｏにおけるインスリンの分泌に対する、遊離脂肪酸乳化物の影響を検討した。
実施例１と同様に、オスの８週齢Ｃ５７／Ｂ６マウス（Ｓａｎｋｙｏ Ｌａｂ）に対し、２ｍｇ／ｇ体重のグルコースを負荷し、３０分後に、１７２ｎｍｏｌ／ｇ体重（α−リノレン酸として１００ｎｍｏｌ／ｇ体重）の、調製例２及び３で得た遊離脂肪酸乳化物及び遊離脂肪酸ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）包含物をそれぞれチューブを介して胃内投与した。また、ネガティブコントロールとして、遊離脂肪酸を含有しない乳化物担体及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のみをそれぞれ同様に投与した。各種被検物質の投与後、３０、６０、９０、１２０、１８０分後に、ジエチルエーテルで麻酔したのち、ヘパリナイズしたシリンジを用いて門脈より血液を採取した。血漿は、ヘパリン化された血液を遠心分離（４℃、２０分、１２００×ｇ）することで調製し、インスリンの酵素免役アッセイキット（（株）森永生科学研究所）を用いてインスリンの定量を行った。全ての実験は施設の認可されたガイドラインに従って行った。その結果を図２に示す。
【００５７】
図２の結果より、遊離脂肪酸乳化物において遊離脂肪酸ＰＥＧ包含物よりも高い濃度−時間曲線下面積が見られた。この結果は、遊離脂肪酸を乳化物に含有させて投与することによって、インスリン分泌の促進を長時間にわたって継続することを示唆している。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
本発明によれば、血中におけるＧＬＰ−１、ひいてはインスリンの分泌を促進し、さらにこれらの血中濃度を高い状態で長時間持続させることが可能となる。これにより、医薬分野における糖尿病や肥満症等の効果的な予防又は治療剤を提供することができ、更には経口投与可能な点を利用して、医薬分野のみならず、糖尿病や肥満症等の予防又は治療を目的とする食品や飼料としても提供することができる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を有効成分として含有する乳化物を含むＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項２】
遊離脂肪酸が、シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂の加水分解生成物である、請求項１に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項３】
シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂が、しそ油及び／又はえごま油である、請求項２に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項４】
乳化物が、５０〜１０００ｎｍの平均粒子径を有する、請求項１〜３のいずれか１項に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項５】
経口投与用又は経管投与用である、請求項１〜４のいずれか１項に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項６】
糖尿病の予防及び／又は治療剤である、請求項１〜５のいずれか１項に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤を含有する食品組成物。
【請求項８】
ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を有効成分として含有する乳化物を含むインスリン分泌持続調整剤。
【請求項９】
遊離脂肪酸が、シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂の加水分解生成物である、請求項８に記載のインスリン分泌持続調整剤。
【請求項１０】
シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂が、しそ油及び／又はえごま油である、請求項９に記載のインスリン分泌持続調整剤。
【請求項１１】
乳化物が、５０〜１０００ｎｍの平均粒子径を有する、請求項８〜１０のいずれか１項に記載のインスリン分泌持続調整剤。
【請求項１２】
経口投与用又は経管投与用である、請求項８〜１１のいずれか１項に記載のインスリン分泌持続調整剤。
【請求項１３】
糖尿病の予防及び／又は治療剤である、請求項８〜１２のいずれか１項に記載のインスリン分泌持続調整剤。
【請求項１４】
請求項８〜１４のいずれか１項に記載のインスリン分泌持続調整剤を含有する食品組成物。
【請求項１】
ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を有効成分として含有する乳化物を含むＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項２】
遊離脂肪酸が、シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂の加水分解生成物である、請求項１に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項３】
シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂が、しそ油及び／又はえごま油である、請求項２に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項４】
乳化物が、５０〜１０００ｎｍの平均粒子径を有する、請求項１〜３のいずれか１項に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項５】
経口投与用又は経管投与用である、請求項１〜４のいずれか１項に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項６】
糖尿病の予防及び／又は治療剤である、請求項１〜５のいずれか１項に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載のＧＬＰ−１分泌持続調整剤を含有する食品組成物。
【請求項８】
ＧＴ０１タンパク質に対するリガンドとして作用する遊離脂肪酸を有効成分として含有する乳化物を含むインスリン分泌持続調整剤。
【請求項９】
遊離脂肪酸が、シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂の加水分解生成物である、請求項８に記載のインスリン分泌持続調整剤。
【請求項１０】
シソ科シソ属植物の種子から得られる油脂が、しそ油及び／又はえごま油である、請求項９に記載のインスリン分泌持続調整剤。
【請求項１１】
乳化物が、５０〜１０００ｎｍの平均粒子径を有する、請求項８〜１０のいずれか１項に記載のインスリン分泌持続調整剤。
【請求項１２】
経口投与用又は経管投与用である、請求項８〜１１のいずれか１項に記載のインスリン分泌持続調整剤。
【請求項１３】
糖尿病の予防及び／又は治療剤である、請求項８〜１２のいずれか１項に記載のインスリン分泌持続調整剤。
【請求項１４】
請求項８〜１４のいずれか１項に記載のインスリン分泌持続調整剤を含有する食品組成物。
【図１】
【図２】
【図２】
【公開番号】特開２０１１−４６６６８（Ｐ２０１１−４６６６８Ａ）
【公開日】平成２３年３月１０日（２０１１．３．１０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１９８１８３（Ｐ２００９−１９８１８３）
【出願日】平成２１年８月２８日（２００９．８．２８）
【出願人】（０００００４３４１）日油株式会社 (896)
【出願人】（５０６１８００４０）ファルマフロンティア株式会社 (9)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２３年３月１０日（２０１１．３．１０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年８月２８日（２００９．８．２８）
【出願人】（０００００４３４１）日油株式会社 (896)
【出願人】（５０６１８００４０）ファルマフロンティア株式会社 (9)
【Ｆターム（参考）】
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