本発明の開示内容は、単離されたモノクローナル抗体、特に高親和性にてGlypican-3に特異的に結合するヒトモノクローナル抗体を提供する。Glypican-3抗体を発現するための、Glypican-3抗体をコードしている核酸分子、発現ベクター、宿主細胞および方法もまた提供される。その免疫複合体、二重特異的分子およびGlypican-3抗体を含む医薬組成物もまた提供される。Glypican-3を検出するための方法、ならびに肝細胞癌などの種々のGlypican-3に関連する症状を処置するための方法が開示される。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体が1x10^-7M以下のK_DにてヒトGlypican-3に結合する、単離されたモノクローナル抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項２】
ヒト抗体である、請求項1記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項３】
キメラまたはヒト化抗体である、請求項1記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項４】
IgG1またはIgG4アイソタイプの完全長抗体である、請求項2記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項５】
抗体断片または単鎖抗体である、請求項2記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項６】
抗体が5x10^-8M以下のK_DにてヒトGlypican-3に結合する、請求項2記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項７】
抗体が5x10^-9M以下のK_DにてヒトGlypican-3に結合する、請求項2記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項８】
ヒトGlypican-3が配列番号 36[ジーンバンク・アクセッション番号NM_004484]として示されるアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む、請求項2記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項９】
抗体がHep-3BまたはHep-G2腫瘍細胞に実質的に結合する、請求項2記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項１０】
Glypican-3への結合について参照抗体と交差競合し、K_D1x10^-7M以下にてヒトGlypican-3に結合する、
単離されたモノクローナル抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項１１】
参照抗体が、
a)配列番号 19のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
b)配列番号 22のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、
請求項10記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項１２】
参照抗体が、
a)配列番号 20のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
b)配列番号 23のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、
請求項10記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項１３】
参照抗体が
a)配列番号 21のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および
b)配列番号 24のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、
請求項10記載の抗体、またはその抗原結合部分。
【請求項１４】
ヒトV_H5-51遺伝子の産物であるか、またはヒトV_H5-51遺伝子から得られる重鎖可変領域を含む単離されたモノクローナル抗体、またはその抗原結合部分、
ここで、該抗体がGlypican-3に特異的に結合する。
【請求項１５】
ヒトV_KA27遺伝子産物であるか、またはヒトV_KA27遺伝子から得られる軽鎖可変領域を含む単離されたモノクローナル抗体、またはその抗原結合部分、
ここで、該抗体がGlypican-3に特異的に結合する。
【請求項１６】
ヒトV_H5-51遺伝子の産物であるか、またはヒトV_H5-51遺伝子から得られる重鎖可変領域をさらに含む、請求項15記載の単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項１７】
a)配列番号 1を含む重鎖可変領域CDR1;
b)配列番号 4を含む重鎖可変領域CDR2;
c)配列番号 7を含む重鎖可変領域CDR3;
d)配列番号 10を含む軽鎖可変領域CDR1;
e)配列番号 13を含む軽鎖可変領域CDR2；および
f)配列番号 16を含む軽鎖可変領域CDR3、
を含む、請求項1記載の抗体。
【請求項１８】
a)配列番号 2を含む重鎖可変領域CDR1;
b)配列番号 5を含む重鎖可変領域CDR2;
c)配列番号 8を含む重鎖可変領域CDR3;
d)配列番号 11を含む軽鎖可変領域CDR1;
e)配列番号 14を含む軽鎖可変領域CDR2；および
f)配列番号 17を含む軽鎖可変領域CDR3、
を含む、請求項1記載の抗体。
【請求項１９】
a)配列番号 3を含む重鎖可変領域CDR1;
b)配列番号 6を含む重鎖可変領域CDR2;
c)配列番号 9を含む重鎖可変領域CDR3;
d)配列番号 12を含む軽鎖可変領域CDR1;
e)配列番号 15を含む軽鎖可変領域CDR2；および
f)配列番号 18を含む軽鎖可変領域CDR3、
を含む、請求項1記載の抗体。
【請求項２０】
a)配列番号 19、20、および21からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域；および
b)配列番号 22、23、および24からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む単離されたモノクローナル抗体、またはその抗原結合部分、
ここで、該抗体がGlypican-3に特異的に結合する。
【請求項２１】
a)配列番号 19のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域；および
b)配列番号 22のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２２】
a)配列番号 20のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域：および
b)配列番号 23のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２３】
a)配列番号 21のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域；および
b)配列番号 24のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む、単離されたモノクローナル抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２４】
請求項1記載の抗体、またはその抗原結合部分、および医薬上許容される担体を含む、組成物。
【請求項２５】
治療剤と結合された、請求項1記載の抗体、またはその抗原結合部分を含む免疫複合体。
【請求項２６】
請求項25記載の免疫複合体および医薬上許容される担体を含む、組成物。
【請求項２７】
治療剤が細胞毒素である、請求項25記載の免疫複合体。
【請求項２８】
請求項27記載の免疫複合体および医薬上許容される担体を含む、組成物。
【請求項２９】
治療剤が放射性同位体である、請求項25記載の免疫複合体。
【請求項３０】
請求項29記載の免疫複合体および医薬上許容される担体を含む、組成物。
【請求項３１】
請求項1記載の抗体、またはその抗原結合部分の重鎖をコードしている、単離された核酸分子。
【請求項３２】
単離された核酸分子が、配列番号 25、26、および27からなるリストから選択されたV領域を含む、請求項31記載の単離された核酸分子。
【請求項３３】
請求項1記載の抗体、またはその抗原結合部分の軽鎖をコードしている単離された核酸分子。
【請求項３４】
単離された核酸分子が、配列番号 28、29、および30からなるリストから選択されたV領域を含む、請求項33記載の単離された核酸分子。
【請求項３５】
請求項31から34のいずれか一項記載の核酸分子を含む、発現ベクター。
【請求項３６】
請求項35記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項３７】
a)請求項1記載の抗体をコードしている１以上の核酸分子を含む宿主細胞を得ること、
b)宿主細胞培養において宿主細胞を増殖させること、
c)１以上の核酸分子が発現する宿主細胞培養条件を提供すること、および
d)宿主細胞または宿主細胞培養物から抗体を回収すること、
を含む、抗Glypican-3抗体を製造する方法。
【請求項３８】
細胞を、腫瘍細胞の増殖を阻害するのに有効な量の請求項1記載の抗体またはその抗原結合部分と接触させることを含む、Glypican-3を発現する腫瘍細胞の増殖を阻害する方法。
【請求項３９】
腫瘍細胞が肝臓組織から得られる、請求項38記載の方法。
【請求項４０】
抗体、またはその抗原結合部分が免疫複合体である、請求項38記載の方法。
【請求項４１】
抗体、またはその抗原結合部分を含む免疫複合体が治療剤に結合されている、請求項40記載の方法。
【請求項４２】
治療剤が細胞毒素である、請求項41記載の方法。
【請求項４３】
治療剤が放射性同位体である、請求項41記載の方法。

【図１Ａ】

【図１Ｂ】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【公表番号】特表２０１０−５３３４９８（Ｐ２０１０−５３３４９８Ａ）
【公表日】平成２２年１０月２８日（２０１０．１０．２８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１０−５１７１６１（Ｐ２０１０−５１７１６１）
【出願日】平成２０年７月１７日（２００８．７．１７）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００８／０７０３４４
【国際公開番号】ＷＯ２００９／０１２３９４
【国際公開日】平成２１年１月２２日（２００９．１．２２）
【出願人】（５０２０６６６４９）メダレックス，　インコーポレイテッド (13)
【Ｆターム（参考）】