ＨＩＶ結合阻害剤の最適な送達のための安定な医薬組成物
医薬組成物は、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、および少なくとも約１００ｃＰの粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を含むものであって、前記組成物は酵素阻害剤を含まないものである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＨＩＶ感染の治療のために好適な薬物動態（ＰＫ）プロファイルを提供する新規な製剤、より詳細には、ＨＩＶに対して有効である酵素阻害剤を含まないＨＩＶ結合阻害剤およびヒドロキシプロピルメチルセルロースを含む高度に安定な持続放出製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＨＩＶ−１（ヒト免疫不全ウイルス−１）感染は、２００７年末において世界中で４５００万人近くの人々が感染した主な医学上の問題である。ＨＩＶおよびＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）の症例数は急激に上昇している。２００５年には、例えば、およそ５００万人の新たな感染が報告され、３１０万人の人々がＡＩＤＳにかかり死亡した。ＨＩＶの治療に現在利用可能な薬物は、ヌクレオシド逆転写酵素（RT）阻害剤または認可された単一錠剤の組み合わせ：ジドブジン（またはAZTもしくはレトロビル（登録商標））、ディダノシン（またはヴァイデックス（登録商標））、スタブジン（またはゼリット（登録商標））、ラミブジン（または3TCもしくはエピビル（登録商標））、ザルシタビン（またはDDCもしくはハイビッド（登録商標））、コハク酸アバカビル（またはザイアジェン（登録商標））、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（またはビリアード（登録商標））、エムトリシタビン（またはFTCもしくはエムトリバ（登録商標））、コンビビル（登録商標）（-3TCとAZTを含む）、トリジビル（登録商標）（アバカビル、ラミブジン、およびジドブジンを含む）、エプジコム（登録商標）（アバカビルおよびラミブジンを含む）、ツルバダ（登録商標）（ビリアード（登録商標）およびエムトリバ（登録商標）を含む）；非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤：ネビラピン（またはビラミューン（登録商標））、デラビルジン（またはレスクリプター（登録商標））およびエファビレンツ（またはサスティバ)（登録商標））、アトリプラ（登録商標）（ツルバダ（登録商標）＋サスティバ（登録商標））、およびエトラビリン、ならびにペプチド模倣プロテアーゼ阻害剤または認可された製剤： サキナビル、インジナビル、リトナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、ロピナビル、カレトラ（登録商標）（ロピナビルおよびリトナビル）、ダルナビル、アタザナビル（レイアタッツ（登録商標））、およびチプラナビル（アプティバス（登録商標））、およびラルテグラビル（アイセントレス（登録商標））などのインテグラーゼ阻害剤、およびエンフビルチド（T-20）（フゼオン（登録商標））およびマラビロク（シーエルセントリ（登録商標））などの侵入阻害剤を含む。
【０００３】
さらに、ＨＩＶ結合阻害剤は、ＨＩＶ表面糖タンパク質ｇｐ１２０に結合し、表面タンパク質ｇｐ１２０と宿主細胞受容体ＣＤ４の相互作用を妨げる抗ウイルス化合物の新規なサブクラスである。それゆえ、それらは、ＨＩＶがヒトＣＤ４ Ｔ細胞に結合することを妨げ、ＨＩＶのライフサイクルの最初の段階でＨＩＶ複製を阻害する。ＨＩＶ結合阻害剤の特性は、抗ウイルス薬としての有用性および有効性を最大にする化合物を得るために改善がなされている。
【０００４】
１つのＨＩＶ結合阻害剤の化合物は現在、特に、ＨＩＶに対して極めて優れた能力を示している。この化合物は、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンとして知られている。それは、米国特許第20050209246号にて説明され、記載されており、出典明示により全体が本明細書に取り込まれる。この化合物は、以下の式：
【化１】
により表される。
上記化合物は、以下の親化合物、1-(4-ベンゾイル-ピペラジン-1-イル)-2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-[1,2,4]トリアゾール-1-イル)-1H-ピラロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-エタン-1,2-ジオンのリン酸エステルプロドラッグであり、米国特許第7,354,924号にて説明され、記載されており、その全体が本明細書に取り込まれる：
【化２】
【０００５】
上記リン酸エステルプロドラッグは、吸収直前に内在性アルカリホスファターゼにより親化合物に加水分解されるように設計されている。アルカリホスファターゼは、小腸および大腸において結合および非結合の両方の状態で存在する。腸または大腸の環境において結合していない酵素がマトリックス錠などの持続放出製剤に取り込まれると、この酵素は、理論上、プロドラッグの早期の加水分解をインシトゥーで引き起こすこともある。プロドラッグが錠剤中で加水分解されると、体内での親化合物の続く適正な吸収を妨げることもある。このことは、その結果、さらなる投薬またはより悪い失敗した治療を意味することとなり得る。
【０００６】
それゆえ、ＨＩＶ結合阻害剤プロドラッグ化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンを含む製剤は、当該技術分野で必要とされている。この製剤は、安定であり、持続放出に適しており、望ましくは、酵素阻害剤を含まず、さらにプロドラッグ化合物を経口投与後の製剤内での加水分解から保護すべきである。上記で同定されたプロドラッグ化合物の安定な錠剤の形態を用いるＨＩＶ感染に対する新規な治療方法もまた、必要とされている。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、および少なくとも約１００ｃＰの粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を含む医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものである医薬組成物を提供する。
【０００８】
本発明はまた、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、および少なくとも約１００ｃＰの粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を含む医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まず、該プロドラッグを投与前後の親化合物への早期の変換から保護するものである医薬組成物を提供する。
【０００９】
さらなる具体例において、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、少なくとも約２０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣ、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムから本質的になる医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものである医薬組成物が提供される。
【００１０】
化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、少なくとも約３０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣ、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムから本質的になる医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものであって、さらに、前記組成物中の前記化合物が、酵素アルカリホスファターゼによる加水分解に実質的に抵抗性を示すものである医薬組成物もまた、本明細書で提供される。
【００１１】
ＨＩＶウイルスに感染した哺乳動物を治療する方法であって、前記哺乳動物に、抗ウイルス有効量の１種類またはそれ以上の上記で示される組成物を投与することを特徴とする方法がさらに提供される。
【００１２】
さらに、酵素阻害剤の非存在下において、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンを、少なくとも約２０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣと共に混合することを含む医薬組成物を製造する方法が示される。
【００１３】
本発明は、後述するこれらのならびにその他の重要な目的を対象とする。
【００１４】
その様々な具体例による本発明の組成物は、インビトロおよびインビボの両方にてＨＩＶ結合阻害剤プロドラッグの持続放出を可能にする。さらに、本発明の組成物は、製剤中のＨＩＶ結合阻害剤プロドラッグを酵素加水分解から保護する。結果として得られたインビボ放出プロファイルは、最適な血漿時間（plasma-time）プロファイルを生じる。保護のメカニズムは複雑であり、全体として製剤に関連しており、１種類の賦形剤にのみ関連しているわけではないようである。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンとして知られるＨＩＶ結合阻害剤化合物は、以下：
【化３】
に示されるごときリン酸エステルプロドラッグである。
それは、吸収直前に内在性アルカリホスファターゼにより以下の親化合物：
【化４】
に加水分解されるように設計されている。
リン酸エステルプロドラッグは現在、アルカリホスファターゼが溶液中に存在する場合、親化合物に急速に加水分解することが示されている。投薬の頻度を減らすために、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンは現在、安定な親水性マトリックスの持続放出錠剤内に処方されている。錠剤製剤は、水媒体に曝露されると、膨潤し、ゲルを形成することが示されている。そして、リン酸エステルプロドラッグ化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンは、水和した錠剤から長期間にわたる拡散および／または浸食工程を経て溶液に放出される。
【００１６】
現在、錠剤の親水性マトリックスは、リン酸エステルプロドラッグを、水和した錠剤中の親化合物に対するインシトゥー加水分解から保護することも示されている。このことは、プロドラッグの放出を長時間にわたり生じ、酵素阻害剤を製剤に含ませることなく所望の薬物動態プロファイルを生じさせる。仮にプロドラッグが錠剤中で加水分解された場合、生じる親化合物は吸収に利用されず、所望の薬物動態プロファイルは得られないであろう。
【００１７】
それゆえ、本発明の組成物は、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンを含む持続放出製剤を提供する。製剤は、前記化合物の約２０〜９０重量％を含む。さらに好ましい具体例において、前記化合物の約５０〜８５重量％で提供される。なおより好ましくは、製剤は、プロドラッグエステル化合物の約６０〜７５重量％を含む。
【００１８】
リン酸エステルプロドラッグのさまざまな別の水溶性塩が用いられてもよいが、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンのトリス塩形態が、特に、本明細書における使用に好ましい。
【００１９】
ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）もまた、製剤中に含まれる。ＨＰＭＣは、持続放出製剤を生成するときに利用される医薬グレード（grade）ポリマーである。ＨＰＭＣは、組成物の約１０〜５０重量％の量で組成物中に存在する。より好ましくは、ＨＰＭＣの量は、約１５〜４０重量％である。なおより望ましくは、前記組成物は、ＨＰＭＣの約２０〜３０重量％を含む。
【００２０】
本発明の組成物の一部として利用するＨＰＭＣは、比較的高い水和粘度を有することが好ましい。好ましくは、水中におけるＨＰＭＣの２％溶液の粘度は、少なくとも約１００センチポイズ（ｃＰ）であるべきである。なおより好ましくは、粘度は、少なくとも約２０００ｃＰであるべきである。より望ましくは、製剤中に含まれるＨＰＭＣの粘度は、少なくとも約３０００ｃＰであるべきである。いくつかの具体例において、ＨＰＭＣが少なくとも約４０００ｃＰの粘度を有することがなおより好ましい。ＨＰＭＣの粘度が約１００００ｃＰを超えないこともまた好ましいが、ある適用において、約５００００ｃＰ、または約１２００００ｃＰの上限粘度でさえ好適となり得る。
【００２１】
本発明の一部として用いるＨＰＭＣが分子上にヒドロキシプロポキシ置換度より実質的に高いメトキシ置換を有することもまた好ましい。例えば、約２２％のメトキシ置換および約８％のヒドロキシプロポキシ置換を有するＨＰＭＣが、本明細書における使用に非常に好ましい。
【００２２】
ＨＰＭＣを含む前記成分に加えて、本発明の組成物は、１種類またはそれ以上のさらなる賦形剤を含む。これらの賦形剤は、望ましくは、最終的な製剤マトリックスの開発において役立つよう選択される。賦形剤は、充填剤、流動補助剤（flow aid）、流動促進剤、滑沢剤、結合剤、希釈剤、崩壊剤、防腐剤などを含む。これらは、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムからなる群から選択されてもよい。医薬グレードのフィルムコーティング材料（film-coating material）が利用されてもよい。当業者にとって入手可能なその他の賦形剤もまた本明細書で利用されてもよい。これらのさらなる賦形剤は、製剤の約０．０１から１５重量％の量で製剤中に存在する。より好ましくは、さらなる賦形剤の量は、最終製剤の約０．５から１０重量％の範囲内である。
【００２３】
約６００ｍｇより低い錠剤の効能が必要とされるさらなる具体例において、ラクトースまたはその他の水溶性賦形剤の量がプロドラッグの代わりに製剤中に含まれてもよい。
【００２４】
上記に示されるように、製剤は酵素阻害剤を全く含まない。驚くべきことに、酵素アルカリホスファターゼによる加水分解に対して通常では高度な感受性を示すプロドラッグ化合物が、最終製剤中で安定であり、錠剤マトリックス中にてインシトゥーで加水分解されないことが示されている。あるいは、本化合物は、親化合物への適正な変換、およびその後の体内への吸収のために、錠剤から長時間にわたり適切に放出され得る。この親化合物への変換は、吸収直前にのみ生じ、製剤自体の中では生じない。
【００２５】
本明細書に記載され、示されている組成物は、プロドラッグ化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンを、当該技術分野で利用可能な方法に従って、さらなる賦形剤と共に混合することによって製造されてもよい。その後、ＨＰＬＣは、その他の成分と一緒にされてもよく、最終製剤は、打錠機を用いて錠剤中に圧縮されてもよい。別の具体例において、ＨＰＭＣは、プロドラッグおよびさらなる賦形剤と共に同時に混合される。フィルムコーティング材料はまた、所望であれば、生成した錠剤の表面上に適用されてもよい。
【００２６】
錠剤製剤は、極めて保存に安定であり、また、プロドラッグエステルを、腸において長期間にわたり、好ましくは、約４から２４時間にわたり、より好ましくは、約８から２４時間、なおより好ましくは、約１２から２４時間にわたり錠剤マトリックスから確実に放出させることができる。
【００２７】
上記で示されるように、本明細書で示される組成物中のプロドラッグ化合物は、酵素アルカリホスファターゼによる加水分解に対して実質的に耐性を示す。このことは、約１ｍｇ／ｍＬの濃度の（ブタの腸に由来する）アルカリホスファターゼ量に対する約５時間の曝露後の錠剤マトリックス中でのプロドラッグ化合物の約１％より低い変換を意味する。
【００２８】
本発明の組成物は、通常、数日、数週、数か月またはさらに数年の長期間にわたり、分割投与で約１から１００ｍｇ／ｋｇ体重の用量範囲にてヒトに経口で投与されてもよい。１つの好ましい用量範囲は、１日１回または数回に分けて経口で約１から２０ｍｇ／ｋｇ体重である。別の好ましい用量範囲は、１日１回または数回に分けて約１から４０ｍｇ／ｋｇ体重である。なお別の好ましい用量範囲は、合計１日２回で約６００〜１２００ｍｇである。しかしながら、ある一定の患者に対する具体的な用量レベルおよび投薬頻度は、変化されてもよく、化合物の活性、その化合物の代謝安定性および作用時間、年齢、体重、全体的な健康、性別、食事、投与様式および時間、排出速度、薬物の組み合わせ、その具体的な症状の重症度、および患者が受けている療法を含む様々な因子に依存すると理解される。
【００２９】
ＡＩＤＳの治療に有用な１種類またはそれ以上のその他の薬物と共に、その様々な具体例に従って、本明細書で示される製剤の併用もまた、本明細書において意図されている。例えば、本開示の組成物は、本明細書の背景技術にて説明されるものを含む、有効量の当該技術分野で利用可能なＡＩＤＳ抗ウイルス薬、免疫賦活剤、抗感染薬、またはワクチンと組み合わせて、曝露前および／または曝露後のいずれかの時期に効果的に投与されてもよい。
【００３０】
以下の実施例は、本発明の１つのまたは好ましい態様を例示するが、その範囲を限定するものとして解釈されるべきではない：
【実施例１】
【００３１】
実施例１：６００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表１】
＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３２】
実施例２：別の６００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表２】
＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３３】
実施例３：別の６００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表３】
＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３４】
実施例４：別の６００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表４】
＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３５】
実施例５：２００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表５】
＊２００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３６】
実施例６：６００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表６】
＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３７】
実施例７：ＵＳＰタイプ１装置（１００ｒｐｍ、回転バスケット、ｐＨ６．８のリン酸緩衝液）を用いた、実施例の持続放出錠剤製剤に関するインビトロ薬物放出プロファイル
実施例１から６に由来する錠剤は、１０から２４時間にわたり薬物を放出させる。このゆっくりした放出は、親化合物の血漿濃度が治療レベルで長時間維持できるように設計されている。即時放出カプセルの放出プロファイルを例示のために含めた。
【表７】
【００３８】
実施例８：ヒトボランティアに対して単回用量として投与した実施例１に由来する錠剤は所望の血漿濃度−時間プロファイルを生じた。
【表８】
持続放出錠剤は、１２時間の投与期間にわたって治療レベルで親化合物の血漿濃度を維持する。これは、即時放出カプセルの投与を介しては達成されない（例示のために上記に示すプロファイル）。さらに、持続放出錠剤は、即時放出カプセルと比較してより低いピーク濃度（Ｃｍａｘ）を送達する。これは、有害事象に関するＣｍａｘを最小にすることが望まれるものである。
【００３９】
実施例９：アルカリホスファターゼはｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液中でプロドラッグを親化合物に急速に変換することが示される。
リン酸エステルプロドラッグをｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液で０．７２ｍｇ／ｍＬの濃度まで溶解させた。ブタアルカリホスファターゼ（１ｍｇ／ｍＬ）を一定分量（aliquot）の溶液に添加した。酵素添加の２．５時間後にサンプルを解析した。以下の表における結果は、アルカリホスファターゼがｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液中で活性であり、リン酸エステルプロドラッグを親化合物に急速に加水分解することを確認する。
【表９】
＊は、プロドラッグおよび親について、全ピーク領域と比較したパーセントとして表す
【００４０】
実施例１０：アルカリホスファターゼは水和したＨＰＭＣゲルマトリックス中に浸透し、生物学的活性を保持することが示される。
水和したＨＰＭＣポリマーが酵素のゲル層への侵入に対して障壁（barrier）として作用するかどうか調べるために、酵素基質を含むＨＰＭＣディスク（Disc）を調製した。5-ブロモ-4-クロロ-3-インドイル二ナトリウム、ＢＣＩＰ(酵素基質）および4-ニトロブルーテトラゾリウムクロライド、ＮＢＴ（発色試薬）を含むＨＰＭＣ（粘度４０００ｃＰ）のコンパクト（compact）を、１ｍｇ／ｍＬのアルカリホスファターゼを含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液で水和させた。３時間後のゲル内に紫色の沈殿物が見られ、コンパクト中でＢＣＩＰ基質に対する酵素活性を確認した。このことは、アルカリホスファターゼが溶液からＨＰＭＣゲルに侵入することができ、そこで生物学的活性を示すことを立証する。それゆえ、ＨＰＭＣは薬物に対して拡散障壁として作用することはない。
【００４１】
実施例１１：リン酸エステルプロドラッグの安定性は、アルカリホスファターゼの存在下において実施例３の水和錠剤中にて示される。
実施例３の錠剤を、ブタアルカリホスファターゼ（１ｍｇ／ｍＬ）を含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液を用いる溶出試験にて用いた。ＵＳＰタイプ１装置を、１００ｒｐｍで回転バスケットと共に用いた。実験開始２．５時間および４．５時間後に、錠剤を緩衝液から取り出し、破砕および溶媒抽出にかけてプロドラッグおよび親化合物を解析した。溶出溶媒サンプルもまた解析した。
【００４２】
以下の表は、錠剤および緩衝溶液サンプルに由来するプロドラッグおよび親化合物に関するＨＰＬＣピーク領域を示す。緩衝溶液サンプル中での親ピーク領域のプロドラッグピーク領域に対する高い比率は、酵素を含む溶液中でのプロドラッグの親化合物への急速な変換を立証する。錠剤からの抽出後における親ピーク領域のプロドラッグピーク領域への極めて低い比率は、プロドラッグの親化合物への実質的な変換が実験期間にわたり水和錠剤中でほとんど生じなかったことを示す。このことは、水和した錠剤中でアルカリホスファターゼが介在する変換からのプロドラッグの保護を裏付ける。
【表１０】
＊は、プロドラッグおよび親について、全ピーク領域と比較したパーセントとして表す。
【００４３】
実施例１２：リン酸エステルプロドラッグの安定性は、アルカリホスファターゼの存在下において実施例４の水和錠剤中で示される。
実施例４の錠剤を、実施例１１に記載されるように、ブタアルカリホスファターゼ（１ｍｇ／ｍＬ）を含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液を用いる溶出試験で用いた。錠剤および溶出溶媒サンプルを実験開始３時間後および７時間後に取り出した。
【００４４】
以下の表は、錠剤および緩衝溶液サンプルに由来するプロドラッグおよび親化合物に関するＨＰＬＣピーク領域を示す。実施例１１と同様に、プロドラッグの親への急速な変換が溶出溶媒中で見られ、プロドラッグの親への実質的な変換が水和錠剤中で見られなかった。このことは、異なる粘度グレードのＨＰＭＣを含む製剤およびそれによる異なる粘度の水和ゲル層中でのアルカリホスファターゼからのプロドラッグの保護を立証する。
【表１１】
＊は、プロドラッグおよび親について、全ピーク領域と比較したパーセントとして表す
【００４５】
実施例１３：実施例４のリン酸エステルプロドラッグの安定性は、局所ｐＨ効果に依存しないことが示される。
０．５％の万能指示薬を含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液中で行ったインビトロ薬物放出実験は、実施例４の錠剤の水和ゲル層が酸性（およそｐＨ３）であることを示す。酸性ｐＨが酵素を阻害するかどうか確認するために、以下に示すように、錠剤製剤内にて酸性プロドラッグを塩基性トリスで置き換えることによって塩基性の実施例４の錠剤を調製した。ｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液で水和させた場合、これらの錠剤は弱い塩基性ゲル層（およそｐＨ８）を有することが示された。このｐＨは、酵素活性についての許容範囲内であると考えられる。
【表１２】
＊４８９ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
＊＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００４６】
塩基性の実施例４の錠剤を、実施例１２に記載されるように、ブタアルカリホスファターゼ（１ｍｇ／ｍＬ）を含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液を用いる溶出試験で用いた。錠剤および溶出溶媒サンプルを実験開始３時間後および７時間後に取り出し、解析した。
【００４７】
以下の結果は、プロドラッグの親への実質的な変換が塩基性錠剤中で生じていないことを示す。このことは、予想されていたように、ゲル層内でのプロドラッグの安定性がｐＨによって変化されなかったことを立証する。
【表１３】
＊は、プロドラッグおよび親について、全ピーク領域と比較したパーセントとして表す
【００４８】
実施例１４：アルカリホスファターゼは、プロドラッグが親化合物に置き換わっている製剤中で活性であることが示される。
酵素活性の阻害がプロドラッグ以外の原薬を含む錠剤中で見られるかどうか調べるために、持続放出製剤中に親薬物および酵素基質であるＢＣＩＰ／ＮＢＴを含む、２００ｍｇの重量であるコンパクトを調製した。ＢＣＩＰ／ＮＢＴを含ませて製剤中のアルカリホスファターゼ活性を検出した。プロドラッグを含むコンパクトもまた、比較のために調製した。プロドラッグ製剤において、トリスを前記製剤に含ませて酵素活性の許容範囲内までｐＨ（およそｐＨ８）を調整する。これは、ｐＨがすでに許容範囲内であると考えられるときには、親薬物製剤において必要ではない。トリス−ＨＣｌ緩衝液中で示した酵素活性（実施例９参照）は、トリス自体が酵素阻害剤でないことを強く示唆し、酵素活性に対する直接の影響を与えることが考えられないであろう。
【表１４】
【００４９】
コンパクトを、１ｍｇ／ｍＬのブタアルカリホスファターゼを含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液で水和させた。３時間の水和後、親分子を含むコンパクトにてゲル全体に強い青／紫色の発色が観察され、そこでの高いレベルの酵素活性が示された。対照的に、プロドラッグを含むコンパクトにおいて、ごくわずかな発色が観察され、非常に低いレベルの酵素活性が示された。これらの結果は、アルカリホスファターゼが親薬物を含む製剤中で活性であり、プロドラッグを含む製剤中で活性ではないことを確認する。
【００５０】
以上を考慮すると、実施例９から１４の結果は、ＨＩＶ結合プロドラッグ分子を含む持続放出製剤内でアルカリホスファターゼ活性の予想外の阻害が生じる複雑なシステムを示唆している。
【００５１】
前記明細書は、単に例示であって、本発明の範囲または基本的な原理を決して限定して理解されるべきではない。実際、本発明の様々な改変は、本明細書で示され、記載されるものに加えて、前記明細書および実施例から当業者にとって明らかとなっている。かかる改変はまた、添付の特許請求の範囲に含まれるものとされる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＨＩＶ感染の治療のために好適な薬物動態（ＰＫ）プロファイルを提供する新規な製剤、より詳細には、ＨＩＶに対して有効である酵素阻害剤を含まないＨＩＶ結合阻害剤およびヒドロキシプロピルメチルセルロースを含む高度に安定な持続放出製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＨＩＶ−１（ヒト免疫不全ウイルス−１）感染は、２００７年末において世界中で４５００万人近くの人々が感染した主な医学上の問題である。ＨＩＶおよびＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）の症例数は急激に上昇している。２００５年には、例えば、およそ５００万人の新たな感染が報告され、３１０万人の人々がＡＩＤＳにかかり死亡した。ＨＩＶの治療に現在利用可能な薬物は、ヌクレオシド逆転写酵素（RT）阻害剤または認可された単一錠剤の組み合わせ：ジドブジン（またはAZTもしくはレトロビル（登録商標））、ディダノシン（またはヴァイデックス（登録商標））、スタブジン（またはゼリット（登録商標））、ラミブジン（または3TCもしくはエピビル（登録商標））、ザルシタビン（またはDDCもしくはハイビッド（登録商標））、コハク酸アバカビル（またはザイアジェン（登録商標））、テノホビルジソプロキシルフマル酸塩（またはビリアード（登録商標））、エムトリシタビン（またはFTCもしくはエムトリバ（登録商標））、コンビビル（登録商標）（-3TCとAZTを含む）、トリジビル（登録商標）（アバカビル、ラミブジン、およびジドブジンを含む）、エプジコム（登録商標）（アバカビルおよびラミブジンを含む）、ツルバダ（登録商標）（ビリアード（登録商標）およびエムトリバ（登録商標）を含む）；非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤：ネビラピン（またはビラミューン（登録商標））、デラビルジン（またはレスクリプター（登録商標））およびエファビレンツ（またはサスティバ)（登録商標））、アトリプラ（登録商標）（ツルバダ（登録商標）＋サスティバ（登録商標））、およびエトラビリン、ならびにペプチド模倣プロテアーゼ阻害剤または認可された製剤： サキナビル、インジナビル、リトナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、ロピナビル、カレトラ（登録商標）（ロピナビルおよびリトナビル）、ダルナビル、アタザナビル（レイアタッツ（登録商標））、およびチプラナビル（アプティバス（登録商標））、およびラルテグラビル（アイセントレス（登録商標））などのインテグラーゼ阻害剤、およびエンフビルチド（T-20）（フゼオン（登録商標））およびマラビロク（シーエルセントリ（登録商標））などの侵入阻害剤を含む。
【０００３】
さらに、ＨＩＶ結合阻害剤は、ＨＩＶ表面糖タンパク質ｇｐ１２０に結合し、表面タンパク質ｇｐ１２０と宿主細胞受容体ＣＤ４の相互作用を妨げる抗ウイルス化合物の新規なサブクラスである。それゆえ、それらは、ＨＩＶがヒトＣＤ４ Ｔ細胞に結合することを妨げ、ＨＩＶのライフサイクルの最初の段階でＨＩＶ複製を阻害する。ＨＩＶ結合阻害剤の特性は、抗ウイルス薬としての有用性および有効性を最大にする化合物を得るために改善がなされている。
【０００４】
１つのＨＩＶ結合阻害剤の化合物は現在、特に、ＨＩＶに対して極めて優れた能力を示している。この化合物は、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンとして知られている。それは、米国特許第20050209246号にて説明され、記載されており、出典明示により全体が本明細書に取り込まれる。この化合物は、以下の式：
【化１】
により表される。
上記化合物は、以下の親化合物、1-(4-ベンゾイル-ピペラジン-1-イル)-2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-[1,2,4]トリアゾール-1-イル)-1H-ピラロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-エタン-1,2-ジオンのリン酸エステルプロドラッグであり、米国特許第7,354,924号にて説明され、記載されており、その全体が本明細書に取り込まれる：
【化２】
【０００５】
上記リン酸エステルプロドラッグは、吸収直前に内在性アルカリホスファターゼにより親化合物に加水分解されるように設計されている。アルカリホスファターゼは、小腸および大腸において結合および非結合の両方の状態で存在する。腸または大腸の環境において結合していない酵素がマトリックス錠などの持続放出製剤に取り込まれると、この酵素は、理論上、プロドラッグの早期の加水分解をインシトゥーで引き起こすこともある。プロドラッグが錠剤中で加水分解されると、体内での親化合物の続く適正な吸収を妨げることもある。このことは、その結果、さらなる投薬またはより悪い失敗した治療を意味することとなり得る。
【０００６】
それゆえ、ＨＩＶ結合阻害剤プロドラッグ化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンを含む製剤は、当該技術分野で必要とされている。この製剤は、安定であり、持続放出に適しており、望ましくは、酵素阻害剤を含まず、さらにプロドラッグ化合物を経口投与後の製剤内での加水分解から保護すべきである。上記で同定されたプロドラッグ化合物の安定な錠剤の形態を用いるＨＩＶ感染に対する新規な治療方法もまた、必要とされている。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、および少なくとも約１００ｃＰの粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を含む医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものである医薬組成物を提供する。
【０００８】
本発明はまた、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、および少なくとも約１００ｃＰの粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を含む医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まず、該プロドラッグを投与前後の親化合物への早期の変換から保護するものである医薬組成物を提供する。
【０００９】
さらなる具体例において、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、少なくとも約２０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣ、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムから本質的になる医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものである医薬組成物が提供される。
【００１０】
化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、少なくとも約３０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣ、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムから本質的になる医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものであって、さらに、前記組成物中の前記化合物が、酵素アルカリホスファターゼによる加水分解に実質的に抵抗性を示すものである医薬組成物もまた、本明細書で提供される。
【００１１】
ＨＩＶウイルスに感染した哺乳動物を治療する方法であって、前記哺乳動物に、抗ウイルス有効量の１種類またはそれ以上の上記で示される組成物を投与することを特徴とする方法がさらに提供される。
【００１２】
さらに、酵素阻害剤の非存在下において、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンを、少なくとも約２０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣと共に混合することを含む医薬組成物を製造する方法が示される。
【００１３】
本発明は、後述するこれらのならびにその他の重要な目的を対象とする。
【００１４】
その様々な具体例による本発明の組成物は、インビトロおよびインビボの両方にてＨＩＶ結合阻害剤プロドラッグの持続放出を可能にする。さらに、本発明の組成物は、製剤中のＨＩＶ結合阻害剤プロドラッグを酵素加水分解から保護する。結果として得られたインビボ放出プロファイルは、最適な血漿時間（plasma-time）プロファイルを生じる。保護のメカニズムは複雑であり、全体として製剤に関連しており、１種類の賦形剤にのみ関連しているわけではないようである。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンとして知られるＨＩＶ結合阻害剤化合物は、以下：
【化３】
に示されるごときリン酸エステルプロドラッグである。
それは、吸収直前に内在性アルカリホスファターゼにより以下の親化合物：
【化４】
に加水分解されるように設計されている。
リン酸エステルプロドラッグは現在、アルカリホスファターゼが溶液中に存在する場合、親化合物に急速に加水分解することが示されている。投薬の頻度を減らすために、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンは現在、安定な親水性マトリックスの持続放出錠剤内に処方されている。錠剤製剤は、水媒体に曝露されると、膨潤し、ゲルを形成することが示されている。そして、リン酸エステルプロドラッグ化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンは、水和した錠剤から長期間にわたる拡散および／または浸食工程を経て溶液に放出される。
【００１６】
現在、錠剤の親水性マトリックスは、リン酸エステルプロドラッグを、水和した錠剤中の親化合物に対するインシトゥー加水分解から保護することも示されている。このことは、プロドラッグの放出を長時間にわたり生じ、酵素阻害剤を製剤に含ませることなく所望の薬物動態プロファイルを生じさせる。仮にプロドラッグが錠剤中で加水分解された場合、生じる親化合物は吸収に利用されず、所望の薬物動態プロファイルは得られないであろう。
【００１７】
それゆえ、本発明の組成物は、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンを含む持続放出製剤を提供する。製剤は、前記化合物の約２０〜９０重量％を含む。さらに好ましい具体例において、前記化合物の約５０〜８５重量％で提供される。なおより好ましくは、製剤は、プロドラッグエステル化合物の約６０〜７５重量％を含む。
【００１８】
リン酸エステルプロドラッグのさまざまな別の水溶性塩が用いられてもよいが、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンのトリス塩形態が、特に、本明細書における使用に好ましい。
【００１９】
ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）もまた、製剤中に含まれる。ＨＰＭＣは、持続放出製剤を生成するときに利用される医薬グレード（grade）ポリマーである。ＨＰＭＣは、組成物の約１０〜５０重量％の量で組成物中に存在する。より好ましくは、ＨＰＭＣの量は、約１５〜４０重量％である。なおより望ましくは、前記組成物は、ＨＰＭＣの約２０〜３０重量％を含む。
【００２０】
本発明の組成物の一部として利用するＨＰＭＣは、比較的高い水和粘度を有することが好ましい。好ましくは、水中におけるＨＰＭＣの２％溶液の粘度は、少なくとも約１００センチポイズ（ｃＰ）であるべきである。なおより好ましくは、粘度は、少なくとも約２０００ｃＰであるべきである。より望ましくは、製剤中に含まれるＨＰＭＣの粘度は、少なくとも約３０００ｃＰであるべきである。いくつかの具体例において、ＨＰＭＣが少なくとも約４０００ｃＰの粘度を有することがなおより好ましい。ＨＰＭＣの粘度が約１００００ｃＰを超えないこともまた好ましいが、ある適用において、約５００００ｃＰ、または約１２００００ｃＰの上限粘度でさえ好適となり得る。
【００２１】
本発明の一部として用いるＨＰＭＣが分子上にヒドロキシプロポキシ置換度より実質的に高いメトキシ置換を有することもまた好ましい。例えば、約２２％のメトキシ置換および約８％のヒドロキシプロポキシ置換を有するＨＰＭＣが、本明細書における使用に非常に好ましい。
【００２２】
ＨＰＭＣを含む前記成分に加えて、本発明の組成物は、１種類またはそれ以上のさらなる賦形剤を含む。これらの賦形剤は、望ましくは、最終的な製剤マトリックスの開発において役立つよう選択される。賦形剤は、充填剤、流動補助剤（flow aid）、流動促進剤、滑沢剤、結合剤、希釈剤、崩壊剤、防腐剤などを含む。これらは、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムからなる群から選択されてもよい。医薬グレードのフィルムコーティング材料（film-coating material）が利用されてもよい。当業者にとって入手可能なその他の賦形剤もまた本明細書で利用されてもよい。これらのさらなる賦形剤は、製剤の約０．０１から１５重量％の量で製剤中に存在する。より好ましくは、さらなる賦形剤の量は、最終製剤の約０．５から１０重量％の範囲内である。
【００２３】
約６００ｍｇより低い錠剤の効能が必要とされるさらなる具体例において、ラクトースまたはその他の水溶性賦形剤の量がプロドラッグの代わりに製剤中に含まれてもよい。
【００２４】
上記に示されるように、製剤は酵素阻害剤を全く含まない。驚くべきことに、酵素アルカリホスファターゼによる加水分解に対して通常では高度な感受性を示すプロドラッグ化合物が、最終製剤中で安定であり、錠剤マトリックス中にてインシトゥーで加水分解されないことが示されている。あるいは、本化合物は、親化合物への適正な変換、およびその後の体内への吸収のために、錠剤から長時間にわたり適切に放出され得る。この親化合物への変換は、吸収直前にのみ生じ、製剤自体の中では生じない。
【００２５】
本明細書に記載され、示されている組成物は、プロドラッグ化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンを、当該技術分野で利用可能な方法に従って、さらなる賦形剤と共に混合することによって製造されてもよい。その後、ＨＰＬＣは、その他の成分と一緒にされてもよく、最終製剤は、打錠機を用いて錠剤中に圧縮されてもよい。別の具体例において、ＨＰＭＣは、プロドラッグおよびさらなる賦形剤と共に同時に混合される。フィルムコーティング材料はまた、所望であれば、生成した錠剤の表面上に適用されてもよい。
【００２６】
錠剤製剤は、極めて保存に安定であり、また、プロドラッグエステルを、腸において長期間にわたり、好ましくは、約４から２４時間にわたり、より好ましくは、約８から２４時間、なおより好ましくは、約１２から２４時間にわたり錠剤マトリックスから確実に放出させることができる。
【００２７】
上記で示されるように、本明細書で示される組成物中のプロドラッグ化合物は、酵素アルカリホスファターゼによる加水分解に対して実質的に耐性を示す。このことは、約１ｍｇ／ｍＬの濃度の（ブタの腸に由来する）アルカリホスファターゼ量に対する約５時間の曝露後の錠剤マトリックス中でのプロドラッグ化合物の約１％より低い変換を意味する。
【００２８】
本発明の組成物は、通常、数日、数週、数か月またはさらに数年の長期間にわたり、分割投与で約１から１００ｍｇ／ｋｇ体重の用量範囲にてヒトに経口で投与されてもよい。１つの好ましい用量範囲は、１日１回または数回に分けて経口で約１から２０ｍｇ／ｋｇ体重である。別の好ましい用量範囲は、１日１回または数回に分けて約１から４０ｍｇ／ｋｇ体重である。なお別の好ましい用量範囲は、合計１日２回で約６００〜１２００ｍｇである。しかしながら、ある一定の患者に対する具体的な用量レベルおよび投薬頻度は、変化されてもよく、化合物の活性、その化合物の代謝安定性および作用時間、年齢、体重、全体的な健康、性別、食事、投与様式および時間、排出速度、薬物の組み合わせ、その具体的な症状の重症度、および患者が受けている療法を含む様々な因子に依存すると理解される。
【００２９】
ＡＩＤＳの治療に有用な１種類またはそれ以上のその他の薬物と共に、その様々な具体例に従って、本明細書で示される製剤の併用もまた、本明細書において意図されている。例えば、本開示の組成物は、本明細書の背景技術にて説明されるものを含む、有効量の当該技術分野で利用可能なＡＩＤＳ抗ウイルス薬、免疫賦活剤、抗感染薬、またはワクチンと組み合わせて、曝露前および／または曝露後のいずれかの時期に効果的に投与されてもよい。
【００３０】
以下の実施例は、本発明の１つのまたは好ましい態様を例示するが、その範囲を限定するものとして解釈されるべきではない：
【実施例１】
【００３１】
実施例１：６００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表１】
＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３２】
実施例２：別の６００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表２】
＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３３】
実施例３：別の６００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表３】
＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３４】
実施例４：別の６００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表４】
＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３５】
実施例５：２００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表５】
＊２００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３６】
実施例６：６００ｍｇの持続放出錠剤製剤
【表６】
＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００３７】
実施例７：ＵＳＰタイプ１装置（１００ｒｐｍ、回転バスケット、ｐＨ６．８のリン酸緩衝液）を用いた、実施例の持続放出錠剤製剤に関するインビトロ薬物放出プロファイル
実施例１から６に由来する錠剤は、１０から２４時間にわたり薬物を放出させる。このゆっくりした放出は、親化合物の血漿濃度が治療レベルで長時間維持できるように設計されている。即時放出カプセルの放出プロファイルを例示のために含めた。
【表７】
【００３８】
実施例８：ヒトボランティアに対して単回用量として投与した実施例１に由来する錠剤は所望の血漿濃度−時間プロファイルを生じた。
【表８】
持続放出錠剤は、１２時間の投与期間にわたって治療レベルで親化合物の血漿濃度を維持する。これは、即時放出カプセルの投与を介しては達成されない（例示のために上記に示すプロファイル）。さらに、持続放出錠剤は、即時放出カプセルと比較してより低いピーク濃度（Ｃｍａｘ）を送達する。これは、有害事象に関するＣｍａｘを最小にすることが望まれるものである。
【００３９】
実施例９：アルカリホスファターゼはｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液中でプロドラッグを親化合物に急速に変換することが示される。
リン酸エステルプロドラッグをｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液で０．７２ｍｇ／ｍＬの濃度まで溶解させた。ブタアルカリホスファターゼ（１ｍｇ／ｍＬ）を一定分量（aliquot）の溶液に添加した。酵素添加の２．５時間後にサンプルを解析した。以下の表における結果は、アルカリホスファターゼがｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液中で活性であり、リン酸エステルプロドラッグを親化合物に急速に加水分解することを確認する。
【表９】
＊は、プロドラッグおよび親について、全ピーク領域と比較したパーセントとして表す
【００４０】
実施例１０：アルカリホスファターゼは水和したＨＰＭＣゲルマトリックス中に浸透し、生物学的活性を保持することが示される。
水和したＨＰＭＣポリマーが酵素のゲル層への侵入に対して障壁（barrier）として作用するかどうか調べるために、酵素基質を含むＨＰＭＣディスク（Disc）を調製した。5-ブロモ-4-クロロ-3-インドイル二ナトリウム、ＢＣＩＰ(酵素基質）および4-ニトロブルーテトラゾリウムクロライド、ＮＢＴ（発色試薬）を含むＨＰＭＣ（粘度４０００ｃＰ）のコンパクト（compact）を、１ｍｇ／ｍＬのアルカリホスファターゼを含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液で水和させた。３時間後のゲル内に紫色の沈殿物が見られ、コンパクト中でＢＣＩＰ基質に対する酵素活性を確認した。このことは、アルカリホスファターゼが溶液からＨＰＭＣゲルに侵入することができ、そこで生物学的活性を示すことを立証する。それゆえ、ＨＰＭＣは薬物に対して拡散障壁として作用することはない。
【００４１】
実施例１１：リン酸エステルプロドラッグの安定性は、アルカリホスファターゼの存在下において実施例３の水和錠剤中にて示される。
実施例３の錠剤を、ブタアルカリホスファターゼ（１ｍｇ／ｍＬ）を含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液を用いる溶出試験にて用いた。ＵＳＰタイプ１装置を、１００ｒｐｍで回転バスケットと共に用いた。実験開始２．５時間および４．５時間後に、錠剤を緩衝液から取り出し、破砕および溶媒抽出にかけてプロドラッグおよび親化合物を解析した。溶出溶媒サンプルもまた解析した。
【００４２】
以下の表は、錠剤および緩衝溶液サンプルに由来するプロドラッグおよび親化合物に関するＨＰＬＣピーク領域を示す。緩衝溶液サンプル中での親ピーク領域のプロドラッグピーク領域に対する高い比率は、酵素を含む溶液中でのプロドラッグの親化合物への急速な変換を立証する。錠剤からの抽出後における親ピーク領域のプロドラッグピーク領域への極めて低い比率は、プロドラッグの親化合物への実質的な変換が実験期間にわたり水和錠剤中でほとんど生じなかったことを示す。このことは、水和した錠剤中でアルカリホスファターゼが介在する変換からのプロドラッグの保護を裏付ける。
【表１０】
＊は、プロドラッグおよび親について、全ピーク領域と比較したパーセントとして表す。
【００４３】
実施例１２：リン酸エステルプロドラッグの安定性は、アルカリホスファターゼの存在下において実施例４の水和錠剤中で示される。
実施例４の錠剤を、実施例１１に記載されるように、ブタアルカリホスファターゼ（１ｍｇ／ｍＬ）を含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液を用いる溶出試験で用いた。錠剤および溶出溶媒サンプルを実験開始３時間後および７時間後に取り出した。
【００４４】
以下の表は、錠剤および緩衝溶液サンプルに由来するプロドラッグおよび親化合物に関するＨＰＬＣピーク領域を示す。実施例１１と同様に、プロドラッグの親への急速な変換が溶出溶媒中で見られ、プロドラッグの親への実質的な変換が水和錠剤中で見られなかった。このことは、異なる粘度グレードのＨＰＭＣを含む製剤およびそれによる異なる粘度の水和ゲル層中でのアルカリホスファターゼからのプロドラッグの保護を立証する。
【表１１】
＊は、プロドラッグおよび親について、全ピーク領域と比較したパーセントとして表す
【００４５】
実施例１３：実施例４のリン酸エステルプロドラッグの安定性は、局所ｐＨ効果に依存しないことが示される。
０．５％の万能指示薬を含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液中で行ったインビトロ薬物放出実験は、実施例４の錠剤の水和ゲル層が酸性（およそｐＨ３）であることを示す。酸性ｐＨが酵素を阻害するかどうか確認するために、以下に示すように、錠剤製剤内にて酸性プロドラッグを塩基性トリスで置き換えることによって塩基性の実施例４の錠剤を調製した。ｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液で水和させた場合、これらの錠剤は弱い塩基性ゲル層（およそｐＨ８）を有することが示された。このｐＨは、酵素活性についての許容範囲内であると考えられる。
【表１２】
＊４８９ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
＊＊６００ｍｇの遊離酸に相当するトリス塩
【００４６】
塩基性の実施例４の錠剤を、実施例１２に記載されるように、ブタアルカリホスファターゼ（１ｍｇ／ｍＬ）を含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液を用いる溶出試験で用いた。錠剤および溶出溶媒サンプルを実験開始３時間後および７時間後に取り出し、解析した。
【００４７】
以下の結果は、プロドラッグの親への実質的な変換が塩基性錠剤中で生じていないことを示す。このことは、予想されていたように、ゲル層内でのプロドラッグの安定性がｐＨによって変化されなかったことを立証する。
【表１３】
＊は、プロドラッグおよび親について、全ピーク領域と比較したパーセントとして表す
【００４８】
実施例１４：アルカリホスファターゼは、プロドラッグが親化合物に置き換わっている製剤中で活性であることが示される。
酵素活性の阻害がプロドラッグ以外の原薬を含む錠剤中で見られるかどうか調べるために、持続放出製剤中に親薬物および酵素基質であるＢＣＩＰ／ＮＢＴを含む、２００ｍｇの重量であるコンパクトを調製した。ＢＣＩＰ／ＮＢＴを含ませて製剤中のアルカリホスファターゼ活性を検出した。プロドラッグを含むコンパクトもまた、比較のために調製した。プロドラッグ製剤において、トリスを前記製剤に含ませて酵素活性の許容範囲内までｐＨ（およそｐＨ８）を調整する。これは、ｐＨがすでに許容範囲内であると考えられるときには、親薬物製剤において必要ではない。トリス−ＨＣｌ緩衝液中で示した酵素活性（実施例９参照）は、トリス自体が酵素阻害剤でないことを強く示唆し、酵素活性に対する直接の影響を与えることが考えられないであろう。
【表１４】
【００４９】
コンパクトを、１ｍｇ／ｍＬのブタアルカリホスファターゼを含むｐＨ７．０のトリス−ＨＣｌ緩衝液で水和させた。３時間の水和後、親分子を含むコンパクトにてゲル全体に強い青／紫色の発色が観察され、そこでの高いレベルの酵素活性が示された。対照的に、プロドラッグを含むコンパクトにおいて、ごくわずかな発色が観察され、非常に低いレベルの酵素活性が示された。これらの結果は、アルカリホスファターゼが親薬物を含む製剤中で活性であり、プロドラッグを含む製剤中で活性ではないことを確認する。
【００５０】
以上を考慮すると、実施例９から１４の結果は、ＨＩＶ結合プロドラッグ分子を含む持続放出製剤内でアルカリホスファターゼ活性の予想外の阻害が生じる複雑なシステムを示唆している。
【００５１】
前記明細書は、単に例示であって、本発明の範囲または基本的な原理を決して限定して理解されるべきではない。実際、本発明の様々な改変は、本明細書で示され、記載されるものに加えて、前記明細書および実施例から当業者にとって明らかとなっている。かかる改変はまた、添付の特許請求の範囲に含まれるものとされる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＨＩＶ結合阻害剤のリン酸エステルプロドラッグ、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、および少なくとも約１００ｃＰの水和した（hydrated）粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を含む医薬組成物であって、ヒトに投与する場合に親化合物の所望の持続吸収を供し、投与後の条件下で製剤内に残存するアルカリホスファターゼに対するプロドラッグの安定性を供するものであって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものである医薬組成物
【請求項２】
前記化合物が、約２０〜９０重量％の量で前記組成物中に存在する、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
前記化合物が、約５０〜８５重量％の量で存在する、請求項２記載の組成物。
【請求項４】
前記化合物が、約６０〜７５重量％の量で存在する、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
前記ＨＰＭＣが、約１０〜５０重量％の量で前記組成物中に存在する、請求項１記載の組成物。
【請求項６】
前記ＨＰＭＣが、約１５〜４０重量％の量で存在する、請求項５記載の組成物。
【請求項７】
前記ＨＰＭＣが、約２０〜３０重量％の量で存在する、請求項６記載の組成物。
【請求項８】
前記ＨＰＭＣが、少なくとも約２０００ｃＰの粘度を有する、請求項１記載の組成物。
【請求項９】
前記ＨＰＭＣが、少なくとも約３０００ｃＰの粘度を有する、請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
前記ＨＰＭＣが、少なくとも約４０００ｃＰの粘度を有する、請求項８記載の組成物。
【請求項１１】
１種類またはそれ以上のさらなる賦形剤をさらに含む、請求項１記載の組成物。
【請求項１２】
前記さらなる賦形剤が、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムからなる群から選択される、請求項１１記載の組成物。
【請求項１３】
前記さらなる賦形剤が、前記組成物の約５〜１５重量％の量で存在する、請求項１２記載の組成物。
【請求項１４】
前記化合物が、錠剤の形態である、請求項１記載の組成物。
【請求項１５】
前記ＨＰＭＣの粘度が、約１２００００ｃＰを超えるものではない、請求項１記載の組成物。
【請求項１６】
前記化合物が、トリス塩の形態である、請求項１記載の組成物。
【請求項１７】
化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、少なくとも約２０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣ、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムから本質的になる医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものである医薬組成物。
【請求項１８】
前記ＨＰＭＣが、約４０００ｃＰの粘度を有する、請求項１７記載の組成物。
【請求項１９】
前記化合物が、約６０〜７０重量％の量で存在する、請求項１８記載の組成物。
【請求項２０】
ＨＩＶによる感染を治療するに有用である請求項１記載の組成物であって、
（ａ）ＡＩＤＳ抗ウイルス薬；
（ｂ）抗感染薬；
（ｃ）免疫賦活剤；および
（ｄ）その他のＨＩＶ侵入阻害剤
からなる群から選択される抗ウイルス有効量のＡＩＤＳ治療薬をさらに含む、組成物。
【請求項２１】
化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、少なくとも約３０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣ、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムから本質的になる医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものであって、さらに、前記組成物中の前記化合物が、酵素アルカリホスファターゼによる加水分解に実質的に抵抗性を示すものである、医薬組成物。
【請求項２２】
酵素阻害剤の非存在下において、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンを、少なくとも約２０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣと共に混合することを含む、医薬組成物を製造する方法。
【請求項２３】
前記組成物を錠剤中に圧縮する工程をさらに含む、請求項２１記載の方法。
【請求項２４】
ＨＩＶウイルスに感染した哺乳動物を治療する方法であって、前記哺乳動物に、抗ウイルス有効量の請求項１記載の組成物を投与することを特徴とする方法。
【請求項２５】
前記哺乳動物に、ＡＩＤＳ抗ウイルス薬；抗感染薬；免疫賦活剤；およびその他のＨＩＶ侵入阻害剤からなる群から選択される抗ウイルス有効量のＡＩＤＳ治療薬と組み合わせて、抗ウイルス有効量の前記組成物を投与することを特徴とする、請求項２３記載の方法。
【請求項２６】
リン酸エステルプロドラッグをアルカリホスファターゼによるインシトゥー加水分解から保護し、プロドラッグの最適なインビボ放出を提供して所望のインビボ薬物動態プロファイルを生じる、新規な持続放出製剤。
【請求項２７】
ＨＩＶ結合阻害剤のリン酸エステルプロドラッグ、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、および少なくとも約１００ｃＰの粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を含む医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものであって、さらに、前記組成物が前記リン酸エステルプロドラッグの親化合物を全く含まないものである、医薬組成物。
【請求項１】
ＨＩＶ結合阻害剤のリン酸エステルプロドラッグ、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、および少なくとも約１００ｃＰの水和した（hydrated）粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を含む医薬組成物であって、ヒトに投与する場合に親化合物の所望の持続吸収を供し、投与後の条件下で製剤内に残存するアルカリホスファターゼに対するプロドラッグの安定性を供するものであって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものである医薬組成物
【請求項２】
前記化合物が、約２０〜９０重量％の量で前記組成物中に存在する、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
前記化合物が、約５０〜８５重量％の量で存在する、請求項２記載の組成物。
【請求項４】
前記化合物が、約６０〜７５重量％の量で存在する、請求項３記載の組成物。
【請求項５】
前記ＨＰＭＣが、約１０〜５０重量％の量で前記組成物中に存在する、請求項１記載の組成物。
【請求項６】
前記ＨＰＭＣが、約１５〜４０重量％の量で存在する、請求項５記載の組成物。
【請求項７】
前記ＨＰＭＣが、約２０〜３０重量％の量で存在する、請求項６記載の組成物。
【請求項８】
前記ＨＰＭＣが、少なくとも約２０００ｃＰの粘度を有する、請求項１記載の組成物。
【請求項９】
前記ＨＰＭＣが、少なくとも約３０００ｃＰの粘度を有する、請求項８記載の組成物。
【請求項１０】
前記ＨＰＭＣが、少なくとも約４０００ｃＰの粘度を有する、請求項８記載の組成物。
【請求項１１】
１種類またはそれ以上のさらなる賦形剤をさらに含む、請求項１記載の組成物。
【請求項１２】
前記さらなる賦形剤が、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムからなる群から選択される、請求項１１記載の組成物。
【請求項１３】
前記さらなる賦形剤が、前記組成物の約５〜１５重量％の量で存在する、請求項１２記載の組成物。
【請求項１４】
前記化合物が、錠剤の形態である、請求項１記載の組成物。
【請求項１５】
前記ＨＰＭＣの粘度が、約１２００００ｃＰを超えるものではない、請求項１記載の組成物。
【請求項１６】
前記化合物が、トリス塩の形態である、請求項１記載の組成物。
【請求項１７】
化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、少なくとも約２０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣ、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムから本質的になる医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものである医薬組成物。
【請求項１８】
前記ＨＰＭＣが、約４０００ｃＰの粘度を有する、請求項１７記載の組成物。
【請求項１９】
前記化合物が、約６０〜７０重量％の量で存在する、請求項１８記載の組成物。
【請求項２０】
ＨＩＶによる感染を治療するに有用である請求項１記載の組成物であって、
（ａ）ＡＩＤＳ抗ウイルス薬；
（ｂ）抗感染薬；
（ｃ）免疫賦活剤；および
（ｄ）その他のＨＩＶ侵入阻害剤
からなる群から選択される抗ウイルス有効量のＡＩＤＳ治療薬をさらに含む、組成物。
【請求項２１】
化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、少なくとも約３０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣ、微結晶性セルロース、二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムから本質的になる医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものであって、さらに、前記組成物中の前記化合物が、酵素アルカリホスファターゼによる加水分解に実質的に抵抗性を示すものである、医薬組成物。
【請求項２２】
酵素阻害剤の非存在下において、化合物1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジンを、少なくとも約２０００ｃＰの粘度を有するＨＰＭＣと共に混合することを含む、医薬組成物を製造する方法。
【請求項２３】
前記組成物を錠剤中に圧縮する工程をさらに含む、請求項２１記載の方法。
【請求項２４】
ＨＩＶウイルスに感染した哺乳動物を治療する方法であって、前記哺乳動物に、抗ウイルス有効量の請求項１記載の組成物を投与することを特徴とする方法。
【請求項２５】
前記哺乳動物に、ＡＩＤＳ抗ウイルス薬；抗感染薬；免疫賦活剤；およびその他のＨＩＶ侵入阻害剤からなる群から選択される抗ウイルス有効量のＡＩＤＳ治療薬と組み合わせて、抗ウイルス有効量の前記組成物を投与することを特徴とする、請求項２３記載の方法。
【請求項２６】
リン酸エステルプロドラッグをアルカリホスファターゼによるインシトゥー加水分解から保護し、プロドラッグの最適なインビボ放出を提供して所望のインビボ薬物動態プロファイルを生じる、新規な持続放出製剤。
【請求項２７】
ＨＩＶ結合阻害剤のリン酸エステルプロドラッグ、1-ベンゾイル-4-[2-[4-メトキシ-7-(3-メチル-1H-1,2,4-トリアゾール-1-イル)-1-[(ホスホノオキシ)メチル]-1H-ピロロ[2,3-c]ピリジン-3-イル]-1,2-ジオキソエチル]-ピペラジン、および少なくとも約１００ｃＰの粘度を有するヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）を含む医薬組成物であって、前記組成物が酵素阻害剤を全く含まないものであって、さらに、前記組成物が前記リン酸エステルプロドラッグの親化合物を全く含まないものである、医薬組成物。
【公表番号】特表２０１２−５０２０４２（Ｐ２０１２−５０２０４２Ａ）
【公表日】平成２４年１月２６日（２０１２．１．２６）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５２６１８１（Ｐ２０１１−５２６１８１）
【出願日】平成２１年９月３日（２００９．９．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０５５８２０
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０２８１０８
【国際公開日】平成２２年３月１１日（２０１０．３．１１）
【出願人】（３９１０１５７０８）ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー (494)
【氏名又は名称原語表記】ＢＲＩＳＴＯＬ−ＭＹＥＲＳ ＳＱＵＩＢＢ ＣＯＭＰＡＮＹ
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２４年１月２６日（２０１２．１．２６）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年９月３日（２００９．９．３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０５５８２０
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０２８１０８
【国際公開日】平成２２年３月１１日（２０１０．３．１１）
【出願人】（３９１０１５７０８）ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー (494)
【氏名又は名称原語表記】ＢＲＩＳＴＯＬ−ＭＹＥＲＳ ＳＱＵＩＢＢ ＣＯＭＰＡＮＹ
【Ｆターム（参考）】
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