【課題】
本発明は、改善された親和性及び／又は結合活性でインターロイキン−６受容体（ＩＬ−６Ｒ）に指向性を有し及び／又はこれと特異的に結合することができ、及び／又は改善された有効性及び／又は効力を有し、またＩＬ−６／ＩＬ−６Ｒ相互作用を（一部又は好ましくは完全に）遮断することが可能であり、及び／又はＩＬ−６、ＩＬ−６Ｒ及び／又はＩＬ−６／ＩＬ−６Ｒ複合体を介したシグナル伝達を阻害するアミノ酸配列に関する。本発明は、１つ又は複数のこのようなアミノ酸配列を含むか、又はこれから本質的になる化合物又は構築物、特にタンパク質及びポリペプチドにさらに関する。本発明は、このようなアミノ酸配列及びポリペプチドをコードする核酸に、このようなアミノ酸配列及びポリペプチドを調製する方法に、このようなアミノ酸配列又はポリペプチドを発現する、又は発現することができる宿主細胞に、このようなアミノ酸配列、ポリペプチド、核酸及び／又は宿主細胞を含む組成物、特に薬学的組成物に、並びに特に予防目的、治療目的又は診断目的のためのこのようなアミノ酸配列又はポリペプチド、核酸、宿主細胞及び／又は組成物の使用にも関する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＬ−６Ｒに指向性を有するアミノ酸配列であって、
ａ）配列番号８０〜配列番号８２、若しくは
ｂ）配列番号８０〜配列番号８２のうちの１つとわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有するアミノ酸残基ストレッチであって、表面プラズモン共鳴により測定されるＩＬ−６Ｒに対する結合親和性を比較したときに、２つ若しくは１つのアミノ酸差異を有しないアミノ酸残基ストレッチを含むアミノ酸配列と同程度か若しくは高い親和性を示す、アミノ酸残基ストレッチ、
及び／又は
ｃ）配列番号８４〜配列番号９１、若しくは
ｄ）配列番号８４〜配列番号９１のうちの１つとわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有するアミノ酸残基ストレッチであって、表面プラズモン共鳴により測定されるＩＬ−６Ｒに対する結合親和性を比較したときに、２つ若しくは１つのアミノ酸差異を有しないアミノ酸残基ストレッチを含むアミノ酸配列と比較して同程度か若しくは高い親和性を示す、アミノ酸残基ストレッチ、
及び／又は
ｅ）配列番号９３〜配列番号９５、若しくは
ｆ）配列番号９３〜配列番号９５のうちの１つとわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有するアミノ酸残基ストレッチであって、表面プラズモン共鳴により測定されるＩＬ−６Ｒに対する結合親和性を比較したときに、２つ若しくは１つのアミノ酸差異を有しないアミノ酸残基ストレッチを含むアミノ酸配列と比較して同程度か若しくは高い親和性を示す、アミノ酸残基ストレッチ
から選択される１つ又は複数のアミノ酸残基ストレッチを含む、アミノ酸配列。
【請求項２】
配列番号８０、配列番号８４及び配列番号９３を含む、請求項１に記載のアミノ酸配列。
【請求項３】
ａ）配列番号６０〜配列番号６９、
ｂ）配列番号６０〜配列番号６９のうちの１つのＣＤＲの１つ、２つ又は全てにおいてわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有する配列であって、表面プラズモン共鳴により測定されるＩＬ−６Ｒに対する結合親和性を比較したときに、ＣＤＲの１つ、２つ又は全てにおいてわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有するアミノ酸配列は、配列番号６０〜配列番号６９のうちの１つによる結合と比較して同程度か又は高い親和性を示す、配列、
ｃ）配列番号６０〜配列番号６９のうちの１つとわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有する配列であって、表面プラズモン共鳴により測定されるＩＬ−６Ｒに対する結合親和性を比較したときに、配列番号６０〜配列番号６９のうちの１つとわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有するアミノ酸配列は、配列番号６０〜配列番号６９のうちの１つによる結合と比較して同程度か又は高い親和性を示す、配列
からなる群から選択される、請求項１又は２に記載のアミノ酸配列。
【請求項４】
化合物又は構築物であって、１つ又は複数の請求項１〜３のいずれか一項に記載のアミノ酸配列を含むか、又はこれから本質的になり、任意で１つ又は複数のリンカーを介して連結した、１つ又は複数の他の基、残基、部分又は結合単位を任意でさらに含む、化合物又は構築物。
【請求項５】
前記１つ又は複数の他の基、残基、部分又は結合単位は半減期が増大した化合物又は構築物を提供し、かつ前記１つ又は複数の他の基、残基、部分又は結合単位が、血清アルブミン（例えばヒト血清アルブミン）若しくは血清免疫グロブリン（例えばＩｇＧ）と結合することができる、ドメイン抗体、ドメイン抗体としての使用に好適なアミノ酸配列、単一ドメイン抗体、単一ドメイン抗体としての使用に好適なアミノ酸配列、「ｄＡｂ」、ｄＡｂとしての使用に好適なアミノ酸配列、又はナノボディからなる群から選択される、請求項４に記載の化合物又は構築物。
【請求項６】
ポリペプチド配列が
ａ）配列番号７０〜配列番号７２、
ｂ）配列番号７０〜配列番号７２のうちの１つの本発明のＣＤＲの１つ、２つ又は全てにおいてわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有するポリペプチド配列であって、表面プラズモン共鳴により測定されるＩＬ−６Ｒに対する結合親和性を比較したときに、本発明のＣＤＲの１つ、２つ又は全てにおいてわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有するポリペプチド配列は、配列番号７０〜配列番号７２のうちの１つによる結合と比較して同程度又は高い親和性を示す、ポリペプチド配列、
ｃ）配列番号７０〜配列番号７２のうちの１つとわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有するポリペプチド配列であって、表面プラズモン共鳴により測定されるＩＬ−６Ｒに対する結合親和性を比較したときに、配列番号７０〜配列番号７２のうちの１つとわずか２つ、好ましくはわずか１つのアミノ酸差異を有するアミノ酸配列は、配列番号７０〜配列番号７２のうちの１つによる結合と比較して同程度又は高い親和性を示す、ポリペプチド配列
から選択される、請求項４又は５に記載の化合物又は構築物。
【請求項７】
配列番号７０のアミノ酸配列又は配列番号７１のアミノ酸配列を有するか、又はこれから本質的になる、請求項４〜６のいずれか一項に記載の化合物又は構築物。
【請求項８】
１ｎＭ〜１ｐＭ（モル／Ｌ）以下、好ましくは５００ｐＭ〜１ｐＭ（モル／Ｌ）以下、より好ましくは１００ｐＭ〜１ｐＭ（モル／Ｌ）以下、さらにより好ましくは約５０ｐＭ〜１ｐＭ以下の解離定数（Ｋ_Ｄ）でｈＩＬ−６Ｒと特異的に結合する、請求項４〜７のいずれか一項に記載の化合物又は構築物。
【請求項９】
請求項１〜３のいずれか一項に記載のうちの１つのアミノ酸配列を含むか、又はこれから本質的になる一価構築物。
【請求項１０】
請求項４〜７のいずれか一項に記載の多価の化合物又は構築物を調製する方法であって、請求項１〜３のいずれか一項に記載の１つのアミノ酸配列又は請求項９に記載の一価構築物と、１つ又は複数の基、残基、部分又は結合単位とを連結することを含む、方法。
【請求項１１】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の１つのアミノ酸配列、これをコードする核酸若しくはヌクレオチド配列の発現により得ることができる請求項４〜８のいずれか一項に記載の化合物若しくは構築物、又は請求項９に記載の一価構築物をコードする核酸又はヌクレオチド配列であって、前記核酸が任意で遺伝子構築物の形態である、核酸又はヌクレオチド配列。
【請求項１２】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の１つのアミノ酸配列、これをコードする核酸若しくはヌクレオチド配列の発現により得ることができる請求項４〜８のいずれか一項に記載の化合物若しくは構築物、又は請求項９に記載の一価構築物を発現し、又は好適な環境下で発現することができる宿主又は宿主細胞、及び／又は請求項１１に記載の核酸若しくはヌクレオチド配列又は遺伝子構築物を含む、宿主又は宿主細胞。
【請求項１３】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の１つのアミノ酸配列、これをコードする核酸若しくはヌクレオチド配列の発現により得ることができる請求項４〜８のいずれか一項に記載の化合物若しくは構築物、又は請求項９に記載の一価構築物を産生する方法であって、
ａ）好適な宿主細胞若しくは宿主生物において又は別の好適な発現系において、請求項１１に記載の核酸若しくはヌクレオチド配列又は遺伝子構築物を発現する工程、又は
請求項１２に記載の宿主又は宿主細胞が、少なくとも１つの請求項１〜３のいずれか一項に記載の１つのアミノ酸配列、これをコードする核酸若しくはヌクレオチド配列の発現により得ることができる請求項４〜８のいずれか一項に記載の化合物若しくは構築物、又は請求項９に記載の一価構築物を発現及び／又は産生するような条件下で、前記宿主又は宿主細胞を培養及び／又は維持する工程、任意でその後に
ｂ）このようにして得られた、請求項１〜３のいずれか一項に記載の１つのアミノ酸配列、これをコードする核酸若しくはヌクレオチド配列の発現により得ることができる請求項４〜８のいずれか一項に記載の化合物若しくは構築物、又は請求項９に記載の一価構築物を単離及び／又は精製する工程
を少なくとも含む、方法。
【請求項１４】
少なくとも請求項１〜３のいずれか一項に記載の１つのアミノ酸配列、請求項４〜８のいずれか一項に記載の化合物若しくは構築物、請求項９に記載の一価構築物、又は請求項１１に記載の核酸若しくはヌクレオチド配列を含む、薬学的組成物のような組成物。
【請求項１５】
敗血症、様々な形態のがん、骨吸収、骨粗鬆症、悪液質、乾癬、メサンギウム増殖性糸球体腎炎、カポジ肉腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫及び炎症性疾患からなる群から選択される、ＩＬ−６に、ＩＬ−６Ｒに、ＩＬ−６／ＩＬ−６Ｒ複合体に、並びに／又は、ＩＬ−６、ＩＬ−６Ｒ及び／若しくはＩＬ−６／ＩＬ−６Ｒ複合体が関与するシグナル伝達経路及び／又は生物学的機能及び応答に関連がある疾患及び障害のうちの少なくとも１つを予防及び／又は治療する方法であって、薬学的に活性のある量の少なくとも１つの請求項１〜３のいずれか一項に記載の１つのアミノ酸配列、請求項４〜８のいずれか一項に記載の化合物若しくは構築物、又は請求項９に記載の一価構築物、又は請求項１４に記載の組成物をこれを必要とする被験体に投与することを含む、方法。

【図１】

【図２】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６Ａ】

【図１６Ｂ】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２Ａ】

【図２２Ｂ】

【図２２Ｃ】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８Ａ】

【図２８Ｂ】

【図２９】

【図３０Ａ】

【図３０Ｂ】

【図３０Ｃ】

【図３１】

【図３２】

【図３３Ａ】

【図３３Ｂ】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【図４４】

【図４５】

【図４６】

【図４７】

【図４８】

【図４８Ａ】

【図４９】

【図５０】

【図５０Ａ】

【図５１】

【図５２】

【図５２Ａ】

【図５３】

【図５４】

【図５５】

【図５６】

【図５７】

【図５８】

【図５９】

【図６０】

【図６１】

【図６２】

【図６３】

【図６４Ａ】

【図６４Ｂ】

【図６５Ａ】

【図６５Ｂ】

【図６５Ｃ】

【図６５Ｄ】

【図６６Ａ】

【図６６Ｂ】

【図６７】

【図６８】

【図６９】

【図７０】

【公表番号】特表２０１２−５２３２２６（Ｐ２０１２−５２３２２６Ａ）
【公表日】平成２４年１０月４日（２０１２．１０．４）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−５０４０３５（Ｐ２０１２−５０４０３５）
【出願日】平成２２年４月１２日（２０１０．４．１２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２０１０／０５４７６４
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／１１５９９８
【国際公開日】平成２２年１０月１４日（２０１０．１０．１４）
【出願人】（５０５１６６２２５）アブリンクス　エン．ヴェー． (28)
【Ｆターム（参考）】