（１）被験化合物が基質ポリペプチドにおけるＬＲＲＫ２ポリペプチドのタンパク質キナーゼ活性を調節、例えば阻害するかどうかを決定すること；および（２）該ＬＲＲＫ２ポリペプチドタンパク質キナーゼ活性を調節、例えば阻害する化合物を選別すること；の工程を含んでなり、基質ポリペプチドは配列（Ｗ／Ｆ／Ｒ／Ｋ）（Ｗ／Ｆ／Ｒ／Ｋ）（Ｒ／Ｋ）（Ｆ／Ｗ／Ｈ／Ｒ）（Ｙ／Ｗ／Ｒ）（Ｓ／Ｔ）（Ｌ／Ｖ／Ｉ）（Ｒ／Ｋ）（Ｒ／Ｋ）（Ａ／Ｙ）または（Ｗ／Ｒ）（Ｘ）（Ｘ）（Ｆ／Ｙ／Ｈ／Ｔ）（Ｙ／Ｗ／Ｒ）（Ｔ）（Ｘ）（Ｒ／Ｔ）（Ｒ）（Ｘ）（ここでＸは任意のアミノ酸を表す）を含んでなるＬＲＲＫ２タンパク質キナーゼ活性を調節、例えば阻害するのに有用であると予期される化合物を同定する方法。そのような化合物はパーキンソン病またはパーキンソン症を処置するのに有用であり得る。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
（１）被験化合物が基質ポリペプチドにおけるＬＲＲＫ２ポリペプチドのタンパク質キナーゼ活性を調節、例えば阻害するかどうかを決定する工程；および（２）該ＬＲＲＫ２ポリペプチドタンパク質キナーゼ活性を調節、例えば阻害する化合物を選別する工程を含んでなり、前記基質ポリペプチドは配列（Ｗ／Ｆ／Ｒ／Ｋ）（Ｗ／Ｆ／Ｒ／Ｋ）（Ｒ／Ｋ）（Ｆ／Ｗ／Ｈ／Ｒ）（Ｙ／Ｗ／Ｒ）（Ｓ／Ｔ）（Ｌ／Ｖ／Ｉ）（Ｒ／Ｋ）（Ｒ／Ｋ）（Ａ／Ｙ）または（Ｗ／Ｒ）（Ｘ）（Ｘ）（Ｆ／Ｙ／Ｈ／Ｔ）（Ｙ／Ｗ／Ｒ）（Ｔ）（Ｘ）（Ｒ／Ｔ）（Ｒ）（Ｘ）（ここでＸは任意のアミノ酸を表す）を含んでなる、ＬＲＲＫ２タンパク質キナーゼ活性を調節、例えば阻害するのに有用であると予期される化合物を同定する方法。
【請求項２】
（１）被験化合物が基質ポリペプチドにおけるＬＲＲＫ２ポリペプチドのタンパク質キナーゼ活性を調節、例えば阻害するかどうかを決定する工程；および（２）該ＬＲＲＫ２ポリペプチドのタンパク質キナーゼ活性を調節、例えば阻害する化合物を選別する工程を含んでなり、前記基質ポリペプチドは請求項１にて定義されるとおりである細胞におけるＥＲＭファミリーポリペプチドのリン酸化を調節、例えば阻害するのに有用であると予期される化合物を同定する方法。
【請求項３】
（１）被験化合物が基質ポリペプチドのリン酸化を調節、例えば阻害するかどうかを決定する工程；および（２）該基質ポリペプチドのリン酸化を調節、例えば阻害する化合物を選別する工程を含んでなり、前記基質ポリペプチドは請求項１にて定義されるとおりであるパーキンソン病（ＰＤ）またはパーキンソン症（またはその他の神経変性症状）を処置または予防するのに有用であると予期される化合物を同定する方法。
【請求項４】
（１）被験化合物がＬＲＲＫ２ポリペプチドによる前記基質ポリペプチドのリン酸化を調節、例えば阻害するかどうかを決定する工程；および（２）該ＬＲＲＫ２ポリペプチドによる基質ポリペプチドのリン酸化を調節、例えば阻害する化合物を選別する工程を含んでなる請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ＬＲＲＫ２ポリペプチドはヒト野生型ＬＲＲＫ２もしくはそのフラグメント、またはそのいずれかの融合体である請求項１から４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記フラグメントがヒト野生型ＬＲＲＫ２の少なくとも残基１３２６−２５２７を含んでなる請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ＬＲＲＫ２ポリペプチドがヒト野生型ＬＲＲＫ２の自然発生変異を有するヒトＬＲＲＫ２；もしくはそのフラグメント；またはそのいずれかの融合体である請求項１から５のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記ヒトＬＲＲＫ２の自然発生変異はパーキンソン病（ＰＤ）に関連する変異である請求項７に記載の方法。
【請求項９】
ヒト野生型ＬＲＲＫ２の番号付けを用いて前記変異はＧ２０１９Ｓである請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
前記変異は、ヒト野生型ＬＲＲＫ２の番号付けを用いて、Ｒ１４４１Ｃ、Ｒ１４４１Ｇ、Ｙ１６９９Ｃ、Ｒ１９１４Ｈ、Ｉ２０１２Ｔ、Ｉ２０２０Ｔ、Ｔ２３５６Ｉ、Ｇ２３８５Ｒ、Ｋ５４４Ｅ、Ｐ７５５Ｌ、Ｒ７９３Ｍ、Ｑ９３０Ｒ、Ｓ９７３Ｎ、Ｒ１０６７Ｑ、Ｓ１０９６Ｃ、Ｉ１１２２Ｖ、Ｓ１２２８Ｔ、Ｉ１３７１Ｖ、Ｒ１４４１Ｈ、Ａ１４４２Ｐ、Ｒ１５１４Ｑ、Ｍ１８６９ＴまたはＧ２０１９Ｓである請求項７または８に記載の方法。
【請求項１１】
前記フラグメントはヒトＬＲＲＫ２の少なくとも残基１３２６−２５２７に対応する請求項７から１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記ＬＲＲＫ２ポリペプチドはＧＳＴ融合ポリペプチドである請求項１から１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記ＬＲＲＫ２ポリペプチドはＧＳＴ−ＬＲＲＫ２［１３２６−２５２７、Ｇ２０１９Ｓ］である請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＬＲＲＫ２ポリペプチドは組換え体である請求項１から１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記基質ポリペプチドは配列ＷＷＫＦＹＴＬＲＲＡ、ＷＷＲＦＹＴＬＲＫＡ、ＲＬＧＷＷＫＦＹＴＬＲＲＡＲＱＧＮＴＫＱＲ、ＲＬＧＷＷＲＦＹＴＬＲＫＡＲＱＧＮＴＫＱＲまたはＲＬＧＷＷＲＦＹＴＬＲＲＡＲＱＧＮＴＫＱＲからなるかまたは含んでなる請求項１から１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】
前記基質ポリペプチドはＧＳＴ融合ポリペプチド、例えばＧＳＴ−ＲＬＧＷＷＲＦＹＴＬＲＲＡＲＱＧＮＴＫＱＲである請求項１から１５のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
被験化合物の効果を比較化合物例えばスニチニブ；Ｙ−２７６３２またはＨ−１１５２の効果と比較する工程を含んでなる請求項１から１６のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
ｉ）ＬＲＲＫ２ポリペプチドもしくはポリヌクレオチドまたは請求項３７もしくは３８に記載の抗体およびｉｉ）請求項１から１７のいずれかで定義されるような基質ポリペプチドまたは請求項１から１７のいずれかで定義されるような基質ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド；および場合によっては請求項１７で定義されるような比較化合物を含んでなる精製された調製物またはパーツのキット。
【請求項１９】
組換えＬＲＲＫ２ポリヌクレオチドを含んでなる請求項１８に記載の調製物またはキット。
【請求項２０】
請求項１から１６のいずれかで定義されるＬＲＲＫ２ポリペプチドおよび基質ポリペプチドを発現可能な組換え細胞。
【請求項２１】
組換えＬＲＲＫ２ポリヌクレオチドおよび基質ポリペプチドをコードする組換えポリヌクレオチドを含んでなる請求項２１に記載の組換え細胞。
【請求項２２】
請求項１から１６のいずれかで定義されるＬＲＲＫ２ポリペプチドおよび基質ポリペプチドを含んでなる請求項２１に記載の組換え細胞。
【請求項２３】
請求項２０から２２のいずれかに記載の細胞からの調製物を精製する工程を含んでなる請求項１８から１９のいずれかに記載の調製物を作成する方法。
【請求項２４】
請求項２３の方法により得ることができる調製物。
【請求項２５】
配列（Ｗ／Ｆ／Ｒ／Ｋ）（Ｗ／Ｆ／Ｒ／Ｋ）（Ｒ／Ｋ）（Ｆ／Ｗ／Ｈ／Ｒ）（Ｙ／Ｗ／Ｒ）（Ｓ／Ｔ）（Ｌ／Ｖ／Ｉ）（Ｒ／Ｋ）（Ｒ／Ｋ）（Ａ／Ｙ）（Ｗ／Ｒ）（Ｘ）（Ｘ）（Ｆ／Ｙ／Ｈ／Ｔ）（Ｙ／Ｗ／Ｒ）（Ｔ）（Ｘ）（Ｒ／Ｔ）（Ｒ）（Ｘ）（Ｘは任意のアミノ酸を表す）を含んでなるペプチド。
【請求項２６】
配列ＷＷＫＦＹＴＬＲＲＡ、ＷＷＲＦＹＴＬＲＫＡ、ＲＬＧＷＷＫＦＹＴＬＲＲＡＲＱＧＮＴＫＱＲ、ＲＬＧＷＷＲＦＹＴＬＲＫＡＲＱＧＮＴＫＱＲまたはＲＬＧＷＷＲＦＹＴＬＲＲＡＲＱＧＮＴＫＱＲからなるかまたは含んでなる請求項２６に記載のポリペプチド。
【請求項２７】
前記ポリペプチドはＧＳＴ融合ポリペプチド例えばＧＳＴ−ＲＬＧＷＷＲＦＹＴＬＲＲＡＲＱＧＮＴＫＱＲである請求項２５または２６に記載のポリペプチド。
【請求項２８】
請求項２５から２７のいずれかに記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド。
【請求項２９】
基質ポリペプチドがＬＲＲＫ２ポリペプチドによりリン酸化される請求項１から１６のいずれかで定義される該基質ポリペプチドをリン酸化する方法。
【請求項３０】
請求項１から１６のいずれかで定義される基質ポリペプチドをリン酸化する方法におけるＬＲＲＫ２ポリペプチドの使用。
【請求項３１】
前記化合物が細胞全体、組織もしくは生物体でのＥＲＭファミリーポリペプチドリン酸化；または生物体でのパーキンソン症もしくはパーキンソン病の特徴を調節するかどうかを評価する工程を含んでなり、また活性または疾患の特徴を調節する化合物を選別する請求項１から１６のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
前記化合物が細胞全体、組織または生物体でのＥＲＭファミリーポリペプチドの活性を調節するかどうかを評価する工程をさらに含んでなり、また活性を調節する化合物を選別する請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
選別された化合物を合成、精製および／または配合する工程をさらに含んでなる請求項１から１６、３１または３２のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
１）請求項１から１６、３１または３２のいずれかに記載の方法を実施すること；ならびに２）選別された化合物を合成、精製および／または配合することを含んでなるＬＲＲＫ２ポリペプチドの活性を調節する化合物を調製する方法。
【請求項３５】
請求項１から１６のいずれかで定義されるＬＲＫＫ２変異体が基質ポリペプチドをリン酸化する能力を評価する工程を含んでなる、ＬＲＫＫ２変異体例えばパーキンソン病を患う患者に見出されるＬＲＲＫ２変異体を特徴付けする方法。
【請求項３６】
請求項１から１６のいずれかで定義される試料が基質ポリペプチドをリン酸化する能力を評価する工程を含んでなる、試料中のＬＲＲＫ２活性を評価する方法。
【請求項３７】
ＬＲＲＫ２の残基１００から４９８（または５００）もしくはそのフラグメントまたはそのいずれかとＬＲＲＫ２由来の配列を備えるそもの以外との融合体からなるポリペプチドの抗体の調製における使用。
【請求項３８】
ＬＲＲＫ２の残基１００から４９８（または５００）もしくはそのフラグメントまたはそのいずれかとＬＲＲＫ２由来の配列を備えるもの以外との融合体からなるポリペプチドに対する抗体を増加させる工程または前記ポリペプチドに対する結合に基づいて抗体を選別する工程を含んでなる、ＬＲＲＫ２に結合可能な抗体を調製する方法。
【請求項３９】
請求項３８に記載の方法により得られるかまたは得ることができる抗体。
【請求項４０】
ＬＲＲＫ２の残基１００から４９８（または５００）もしくはそのフラグメントまたはそのいずれかとＬＲＲＫ２由来の配列を備えるもの以外との融合体からなるポリペプチドに結合する抗体。
【請求項４１】
ＬＲＲＫ２を調製、検定または検出する方法での、本発明の抗体の使用。
【請求項４２】
ＬＲＲＫ２またはＲＯＣＫ２に関する基質を調査または同定する方法での、スニチニブ；Ｙ−２７６３２またはＨ−１１５２の使用。
【請求項４３】
ＬＲＲＫ２に関する基質を調査または同定する方法での、変異Ａ２０１６Ｔを有するヒトＬＲＲＫ２；もしくはそのフラグメント；またはそのいずれかの融合体の使用。

【図９】

【図１（Ａ）】

【図２】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３（Ａ）】

【図１３（Ｂ）】

【図１３（Ｃ）】

【図１４（Ａ）】

【図１４（Ｂ）】

【図１４（Ｃ）】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【公表番号】特表２０１２−５０２６４５（Ｐ２０１２−５０２６４５Ａ）
【公表日】平成２４年２月２日（２０１２．２．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−５２７３９１（Ｐ２０１１−５２７３９１）
【出願日】平成２１年８月２４日（２００９．８．２４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＧＢ２００９／００２０４７
【国際公開番号】ＷＯ２０１０／０３１９８８
【国際公開日】平成２２年３月２５日（２０１０．３．２５）
【出願人】（５０４１７８１４４）メディカル　リサーチ　カウンセル (3)
【Ｆターム（参考）】