本発明は、MDA-7を含む組成物および方法に関する。より詳しく述べると、本発明は、癌および他の血管新生関連障害の診断、予後、および治療的治療の組成物および治療法（抗血管新生療法）に向けられる。本発明はまた、MDA-7の精製法にも向けられる。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
MDA-7タンパク質を含む細胞抽出物または上清にアフィニティクロマトグラフィーを行うことを含む、細胞からMDA-7タンパク質を精製する方法。
【請求項２】
MDA-7タンパク質が少なくとも20％均一まで精製され、活性である、請求項1記載の方法。
【請求項３】
MDA-7タンパク質がグリコシル化され、タンパク質の分泌型である、請求項1記載の方法。
【請求項４】
アフィニティクロマトグラフィーを行う前、あいだ、または後に抽出物または上清にタンパク質担体を加える段階をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項５】
得られたMDA-7タンパク質が少なくとも30％均一まで精製され、活性である、アフィニティ精製MDA-7タンパク質に陰イオン交換クロマトグラフィーを行う段階をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項６】
陰イオン交換クロマトグラフィーが濃度1.0 Mまでの塩の段階的勾配を含む、請求項5記載の方法。
【請求項７】
MDA-7タンパク質が塩濃度約0.9〜1.0 Mの溶液において溶出される、請求項6記載の方法。
【請求項８】
得られたタンパク質が50％〜70％均一まで精製される、請求項5記載の方法。
【請求項９】
得られたタンパク質が70％〜90％均一まで精製される、請求項8記載の方法。
【請求項１０】
得られたタンパク質が少なくとも90％均一まで精製される、請求項9記載の方法。
【請求項１１】
得られたタンパク質が少なくとも95％均一まで精製される、請求項10記載の方法。
【請求項１２】
アフィニティクロマトグラフィーが少なくとも一つの抗MDA-7ポリクローナル抗体を含むアフィニティ樹脂を含む、請求項1記載の方法。
【請求項１３】
アフィニティクロマトグラフィーが少なくとも一つの抗MDA-7モノクローナル抗体を含むアフィニティ樹脂を含む、請求項1記載の方法。
【請求項１４】
アフィニティクロマトグラフィーが、細胞抽出物または上清をアフィニティ樹脂に接触させること、樹脂を洗浄すること、およびMDA-7タンパク質を樹脂から溶出することを含む、請求項1記載の方法。
【請求項１５】
MDA-7タンパク質が1 Mの塩およびpH 5.0未満を含む溶液から溶出される、請求項14記載の方法。
【請求項１６】
溶出されたMDA-7タンパク質を緩衝液によって中和する段階をさらに含む、請求項14記載の方法。
【請求項１７】
溶出されたMDA-7タンパク質をプロテインAと共にインキュベートする段階をさらに含む、請求項14記載の方法。
【請求項１８】
プロテインAが非反応性材料に共役または結合される、請求項17記載の方法。
【請求項１９】
アフィニティクロマトグラフィー精製MDA-7タンパク質にサイズ分離精製を行う段階をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項２０】
サイズ分離精製が陰イオン交換クロマトグラフィーの前および／または後に行われる、請求項19記載の方法。
【請求項２１】
サイズ分離精製がタンパク質ゲルまたはサイズ排除カラムを含む、請求項19記載の方法。
【請求項２２】
以下を含む細胞から活性な、グリコシル化された、分泌型MDA-7タンパク質を精製する方法：
a）分泌型MDA-7タンパク質を含む細胞抽出物または上清に、抗MDA-7抗体を含むアフィニティクロマトグラフィーを行う段階；
b）アフィニティクロマトグラフィー精製MDA-7タンパク質にサイズ分離精製を行う段階；および
c）サイズ分離精製MDA-7に陰イオン交換クロマトグラフィーを行う段階。
【請求項２３】
MDA-7タンパク質が少なくとも80％均一まで精製される、請求項22記載の方法。
【請求項２４】
活性である精製MDA-7タンパク質。
【請求項２５】
少なくとも約25％均一まで精製される、請求項24記載の精製MDA-7タンパク質。
【請求項２６】
少なくとも約40％均一まで精製される、請求項25記載のMDA-7タンパク質。
【請求項２７】
少なくとも約50％均一まで精製される、請求項26記載のMDA-7タンパク質。
【請求項２８】
少なくとも約60％均一まで精製される、請求項27記載のMDA-7タンパク質。
【請求項２９】
少なくとも約70％均一まで精製される、請求項28記載のMDA-7タンパク質。
【請求項３０】
少なくとも約80％均一まで精製される、請求項29記載のMDA-7タンパク質。
【請求項３１】
少なくとも約90％均一まで精製される、請求項30記載のMDA-7タンパク質。
【請求項３２】
少なくとも約95％均一まで精製される、請求項31記載のMDA-7タンパク質。
【請求項３３】
請求項24記載の精製された分泌型MDA-7タンパク質を含む薬学的に許容される組成物の有効量を患者に投与することを含む、癌患者を治療する方法。
【請求項３４】
MDA-7タンパク質が活性であって、組成物中のタンパク質に関して少なくとも約80％均一である、請求項33記載の方法。
【請求項３５】
患者に放射線療法または化学療法を行うことをさらに含む、請求項33記載の方法。
【請求項３６】
癌患者が上皮細胞癌を有する、請求項35記載の方法。
【請求項３７】
癌患者が黒色腫または膵臓癌を有する、請求項33記載の方法。
【請求項３８】
核酸が細胞において機能的なプロモーターの制御下に存在する、MDA-7をコードする核酸を含むアデノウイルスベクターの有効量を細胞に投与することを含む、癌細胞を放射線増感する方法。
【請求項３９】
癌細胞が上皮細胞である、請求項38記載の方法。
【請求項４０】
アデノウイルスベクターの投与後72時間以内に癌細胞に放射線照射を行うことをさらに含む、請求項38記載の方法。
【請求項４１】
NF-κB阻害剤と、MDA-7タンパク質またはプロモーターの制御下でMDA-7をコードする核酸を含むアデノウイルスベクターのいずれかを含む組成物とを患者に投与することを含む、患者における癌を治療する方法。
【請求項４２】
NF-κB阻害剤がスリンダクである、請求項41記載の方法。
【請求項４３】
配列番号：2のアミノ酸100〜206位および小胞体ターゲティング配列を含むタンパク質。
【請求項４４】
MDA-7が、癌の局所浸潤および／または転移を阻害または防止する、MDA-7タンパク質を含む薬学的に許容される組成物の有効量を患者に投与することを含む、患者における癌の局所浸潤および／または転移を阻害または防止する方法。
【請求項４５】
癌が黒色腫、肺の非小細胞、肺の小細胞、肺、肝癌、網膜芽種、星状細胞腫、神経膠芽腫、歯肉、舌、白血病、神経芽腫、頭部、頚部、乳腺、膵臓、前立腺、腎臓、骨、精巣、卵巣、中皮種、頚部、消化管、リンパ腫、脳、結腸、または膀胱である、請求項44記載の方法。
【請求項４６】
癌が肺癌である、請求項45記載の方法。
【請求項４７】
MDA-7タンパク質が癌の局所浸潤および／または転移を阻害または防止する、MDA-7タンパク質をコードするポリヌクレオチドを含む薬学的に許容される組成物の有効量を患者に投与することを含む、患者における癌の局所浸潤および／または転移を阻害または防止する方法。
【請求項４８】
MDA-7タンパク質をコードするポリヌクレオチドが発現構築物を含む、請求項47記載の方法。
【請求項４９】
発現構築物が、プロモーターの制御下でMDA-7タンパク質をコードする核酸を含むアデノウイルスベクターを含む、請求項48記載の方法。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性である精製MDA-7タンパク質。
【請求項２】
少なくとも約25％均一まで精製される、請求項１記載の精製MDA-7タンパク質。
【請求項３】
少なくとも約40％均一まで精製される、請求項２記載のMDA-7タンパク質。
【請求項４】
少なくとも約50％均一まで精製される、請求項３記載のMDA-7タンパク質。
【請求項５】
少なくとも約60％均一まで精製される、請求項４記載のMDA-7タンパク質。
【請求項６】
少なくとも約70％均一まで精製される、請求項５記載のMDA-7タンパク質。
【請求項７】
少なくとも約80％均一まで精製される、請求項６記載のMDA-7タンパク質。
【請求項８】
少なくとも約90％均一まで精製される、請求項７記載のMDA-7タンパク質。
【請求項９】
少なくとも約95％均一まで精製される、請求項８記載のMDA-7タンパク質。
【請求項１０】
活性タンパク質がアポトーシスを誘導する能力を有する、請求項１記載の精製MDA-7タンパク質。
【請求項１１】
活性タンパク質が血管新生を阻害する能力を有する、請求項１記載の精製MDA-7タンパク質。
【請求項１２】
活性タンパク質がIL-22受容体に結合する能力を有する、請求項１記載の精製MDA-7タンパク質。
【請求項１３】
活性タンパク質がSTAT3を活性化する能力を有する、請求項１記載の精製MDA-7タンパク質。
【請求項１４】
多量体である、請求項１記載の精製MDA-7タンパク質。
【請求項１５】
グリコシル化されている、請求項１記載の精製MDA-7タンパク質。
【請求項１６】
薬学的に許容される組成物に製剤化されている、請求項１記載の精製MDA-7タンパク質。
【請求項１７】
配列番号：2のアミノ酸100〜206位および小胞体ターゲティング配列を含むタンパク質。
【請求項１８】
請求項１記載の精製された分泌型MDA-7タンパク質を含む薬学的に許容される組成物の有効量を患者に投与することを含む、癌患者を治療する方法。
【請求項１９】
MDA-7タンパク質が活性であって、組成物中のタンパク質に関して少なくとも約80％均一である、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
患者に放射線療法または化学療法を行うことをさらに含む、請求項１８記載の方法。
【請求項２１】
癌患者が上皮細胞癌を有する、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
癌患者が黒色腫または膵臓癌を有する、請求項１８記載の方法。
【請求項２３】
核酸が細胞において機能的なプロモーターの制御下に存在する、MDA-7をコードする核酸を含むアデノウイルスベクターの有効量を細胞に投与することを含む、癌細胞を放射線増感する方法。
【請求項２４】
癌細胞が上皮細胞である、請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
アデノウイルスベクターの投与後72時間以内に癌細胞に放射線照射を行うことをさらに含む、請求項２３記載の方法。
【請求項２６】
NF-κB阻害剤と、MDA-7タンパク質またはプロモーターの制御下でMDA-7をコードする核酸を含むアデノウイルスベクターのいずれかを含む組成物とを患者に投与することを含む、患者における癌を治療する方法。
【請求項２７】
NF-κB阻害剤がスリンダクである、請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
MDA-7が、癌の局所浸潤および／または転移を阻害または防止する、MDA-7タンパク質を含む薬学的に許容される組成物の有効量を患者に投与することを含む、患者における癌の局所浸潤および／または転移を阻害または防止する方法。
【請求項２９】
癌が黒色腫、肺の非小細胞、肺の小細胞、肺、肝癌、網膜芽種、星状細胞腫、神経膠芽腫、歯肉、舌、白血病、神経芽腫、頭部、頚部、乳腺、膵臓、前立腺、腎臓、骨、精巣、卵巣、中皮種、頚部、消化管、リンパ腫、脳、結腸、または膀胱である、請求項２８記載の方法。
【請求項３０】
癌が肺癌である、請求項２９記載の方法。
【請求項３１】
MDA-7タンパク質が癌の局所浸潤および／または転移を阻害または防止する、MDA-7タンパク質をコードするポリヌクレオチドを含む薬学的に許容される組成物の有効量を患者に投与することを含む、患者における癌の局所浸潤および／または転移を阻害または防止する方法。
【請求項３２】
MDA-7タンパク質をコードするポリヌクレオチドが発現構築物を含む、請求項３１記載の方法。
【請求項３３】
発現構築物が、プロモーターの制御下でMDA-7タンパク質をコードする核酸を含むアデノウイルスベクターを含む、請求項３２記載の方法。

【図２】

【図３】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図４Ｃ】

【図４Ｄ】

【図５】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図６Ｄ】

【図６Ｅ】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９Ａ】

【図１９Ｂ】

【図１９Ｃ】

【図１９Ｄ】

【図２０Ａ】

【図２０Ｂ】

【図２０Ｃ】

【図２０Ｄ】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【図３０】

【図３１】

【図３２Ａ】

【図３２Ｂ】

【図３２Ｃ】

【図３３】

【図３４】

【図３５】

【図３６】

【図３７】

【図３８】

【図３９Ａ】

【図３９Ｂ】

【図４０】

【図４１】

【図４２】

【図４３】

【図４４】

【図４５】

【図４６】

【図４７】

【図４８】

【図４９Ａ】

【図４９Ｂ】

【図４９Ｃ】

【図４９Ｄ】

【図５０】

【図５１】

【図５２】

【図５３】

【図５４Ａ】

【図５４Ｂ】

【図５５】

【図５６】

【図５７Ａ】

【図５７Ｂ】

【図５７Ｃ】

【図５８】

【図５９Ａ】

【図５９Ｂ】

【図５９Ｃ】

【図６０】

【図６１】

【図６２】

【図６３】

【図６４】

【図６５Ａ】

【図６５Ｂ】

【図６６】

【図６７】

【図６８】

【図６９】

【図７０】

【図７１Ａ】

【図７１Ｂ】

【図７１Ｃ】

【図７２】

【図７３】

【図７４】

【公表番号】特表２００６−５２３２２７（Ｐ２００６−５２３２２７Ａ）
【公表日】平成１８年１０月１２日（２００６．１０．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５０８９３７（Ｐ２００６−５０８９３７）
【出願日】平成１６年３月２日（２００４．３．２）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００４／００６１４７
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０７８１２４
【国際公開日】平成１６年９月１６日（２００４．９．１６）
【出願人】（５０５０７３０９３）ボード　オブ　リージェンツ　ザ　ユニバーシティー　オブ　テキサス　システム (5)
【出願人】（５００４３５００１）イントロジェン・セラピューティクス，インコーポレイテッド (3)
【Ｆターム（参考）】