Ｎ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体
式
（式中、Ｒ１は水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基又はハロゲン原子を示し、ＡはＣ１−１０アルキレン基又は式
（式中、ｍ、ｎ及びｐは各々０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、ＲはＮ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基、ジオキサニル基、Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基、Ｃ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基又は式
（式中、ｓ及びｔは各々１〜４の整数を示し、Ｂはメチレン基、酸素原子、硫黄原子、窒素原子、Ｃ１−４アルキル基で置換された窒素原子、フェニル基で置換された窒素原子又はベンジル基で置換された窒素原子を示し、Ｒ２は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し、ｒは０〜２の整数を示す。）で表される基を示す。）で表されるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
本発明は、腎臓、脳血管等の主要臓器における微小血管収縮、拡張作用、細胞増殖惹起作用等に関与している２０−ＨＥＴＥの産生酵素を阻害する薬剤を提供するものである。
（式中、Ｒ１は水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基又はハロゲン原子を示し、ＡはＣ１−１０アルキレン基又は式
（式中、ｍ、ｎ及びｐは各々０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、ＲはＮ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基、ジオキサニル基、Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基、Ｃ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基又は式
（式中、ｓ及びｔは各々１〜４の整数を示し、Ｂはメチレン基、酸素原子、硫黄原子、窒素原子、Ｃ１−４アルキル基で置換された窒素原子、フェニル基で置換された窒素原子又はベンジル基で置換された窒素原子を示し、Ｒ２は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し、ｒは０〜２の整数を示す。）で表される基を示す。）で表されるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
本発明は、腎臓、脳血管等の主要臓器における微小血管収縮、拡張作用、細胞増殖惹起作用等に関与している２０−ＨＥＴＥの産生酵素を阻害する薬剤を提供するものである。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
本発明は、アラキドン酸から生合成される２０−ヒドロキシエイコサテトラエン酸（２０−ＨＥＴＥ）の産生酵素を阻害するＮ−（４−アルキル置換フェニル）−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジン誘導体に関する。
【背景技術】
アラキドン酸から産生される生理活性物質として、シクロオキシゲナーゼによって産生されるプロスタグランジン類及びリポキシゲナーゲによって産生されるロイコトリエン類が広く知られている。しかし、近年、チトクロームｐ４５０属に属する酵素によってアラキドン酸から産生される２０−ＨＥＴＥが生体内で多彩な働きをしていることが明らかとされつつある。これまでに２０−ＨＥＴＥは腎臓、脳血管等の主要臓器において微小血管を収縮又は拡張させることや細胞増殖を惹起することが明らかにされており、生体内で重要な生理作用を演じていると共に各種腎疾患、脳血管疾患、循環器疾患等の病態に深く関与していることが示唆されている（Ｊ．Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，第３２巻，７９頁，１９９５年、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，第２７７巻，Ｒ６０７頁，１９９９年、Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．，第８２巻，１３１頁，２００２年）。
この様な背景の中で、Ｎ’−ヒドロキシフェニルホルムアミジン誘導体やカルボン酸誘導体に強い２０−ＨＥＴＥ産生酵素阻害作用（国際特許公開ＷＯ０１３２１６４、ＷＯ０１０９６３０９、ＷＯ０１６８６１０号明細書、日本公開特許公報ＪＰ０１３５４６５８、ＪＰ０１３５４６４６号明細書）があると報告されている。
【発明の開示】
本発明は、腎臓、脳血管等の主要臓器における微小血管収縮又は拡張、あるいは細胞増殖惹起等に関与する２０−ＨＥＴＥの産生を阻害する薬剤を提供することを目的としている。
本発明者らは前記課題を解決する目的で鋭意探索研究した結果、ある特異な部分構造を有する芳香族化合物、すなわちＮ−（４−アルキル置換フェニル）−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジン誘導体が意外にも選択的に２０−ＨＥＴＥの産生酵素の阻害作用を有することを見出し、本発明を完成した。すなわち、本発明は、下記式
（式中、Ｒ１は水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基又はハロゲン原子を示し、ＡはＣ１−１０アルキレン基又は式
（式中、ｍ、ｎ及びｐは各々０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、ＲはＮ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基、ジオキサニル基、Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基、Ｃ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基又は式
（式中、ｓ及びｔは各々１〜４の整数を示し、Ｂはメチレン基、酸素原子、硫黄原子、窒素原子、Ｃ１−４アルキル基で置換された窒素原子、フェニル基で置換された窒素原子又はベンジル基で置換された窒素原子を示し、Ｒ２は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し、ｒは０〜２の整数を示す。）で表される基を示す。）で表されるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を提供するものである。
他の本発明は、下記式
（式中、Ａ′はＣ１−１０アルキレン基であり、Ｒ′はＮ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基、ピロリジニル基、ジオキサニル基、Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基又はＣ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基である。）で表されるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を提供するものである。
他の本発明は、Ｎ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を有効成分とする医薬を提供するものである。
他の本発明は、２０−ＨＥＴＥの産生酵素の阻害剤であるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体を提供するものである。
他の本発明は、Ｎ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を有効成分とする腎疾患、脳血管疾患又は循環器疾患治療薬を提供するものである。
本発明において使用される用語が以下に定義される。
本発明において、「Ｃｘ−ｙ」とは、その後に続く基がｘ〜ｙ個の炭素原子を有することを示す。
Ｃ１−４アルキル基は、炭素原子を１〜４個有する直鎖状又は分枝状のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基などが挙げられる。Ｃ１−４アルコキシ基は、炭素原子を１〜４個有する直鎖状又は分枝状のアルコキシ基を意味し、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基などが挙げられる。
Ｎ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ基などが挙げられる。
式
で表される基とはＣ３−７のシクロアルカンに２つのアルキレン基もしくは結合手が結合した基であり、好ましくはｐは０〜３であり、ｍ及びｎは１〜３であり、例えば、下記に示す基などを示す。
ジオキサニル基は、ヘテロ原子として酸素原子を２個有する飽和六員環（ジオキサン）、好ましくは１，３−ジオキサンの環から水素を除いて誘導される１価の基を意味する。
Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基は、その基の環がＣ１−６アルキル基で置換されていてもよく、例えば、５，５−ジメチル−１，３−ジオキサン−２−イル基などである。
Ｃ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基は、Ｃ１−４アルコキシ基とＣ１−４アルコキシ基が複合した形態を有するものである。例えば、メトキシエトキシ基、エトキシエトキシ基、ｎ−ブトキシエトキシ基、イソブトキシエトキシ基などが好ましい。
Ｃ１−１０アルキレン基は、炭素原子を１〜１０個有する直鎖状又は分枝状のアルキレン基を意味し、例えば、メチレン基、メチルメチレン基、エチレン基、プロピレン基、ヘプチレン基、２，２−ジメチルプロピレン基、３，３−ジメチルプロピレン基、ヘキシレン基などが挙げられる。中でも、エチレン基、３，３−ジメチルプロピレン基が好ましい。
式
で表される基とは、例えば、ピロリジノ基、ピペリジノ基、モルホリノ基、チオモルホリノ基、４−メチルピペラジン−１−イル基、３，５−ジメチルモルホリノ基などである。
また、製薬学的に許容される塩とは、アルカリ金属類、アルカリ土類金属類、アンモニウム、アルキルアンモニウムなどとの塩、鉱酸又は有機酸との塩であり、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、アルミニウム塩、トリエチルアンモニウム塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、ぎ酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、ラクトビオン酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、アジピン酸塩、システインとの塩、Ｎ−アセチルシステインとの塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、よう化水素酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、ピクリン酸塩、チオシアン酸塩、ウンデカン酸塩、アクリル酸ポリマーとの塩、カルボキシビニルポリマーとの塩などを挙げることができる。
本発明化合物は、例えば以下に示す方法によって合成することができる。
製造法１
（式中、Ｂ、Ｒ１、Ｒ２、ｒ、ｓ及びｔは前記と同意義であり、Ｒ２１及びＲ２２はＣ１−４アルキル基あるいは両者が一体となってＣ３−７シクロアルカン環を形成する。）
Ｍａｎｎｉｃｈ反応を利用して合成したアルデヒド１とベンジルホスホン酸ジエチル等のＨｏｒｎｅｒ−Ｅｍｏｎｓ試薬を、適当な溶媒（テトラヒドロフラン、エーテル、トルエン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、適当な塩基（ｎ−ブチルリチウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、水素化ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ｔ−ブトキシカリウム等）の存在下、−７８℃〜室温にて１〜２４時間反応し、化合物２を製造することができる。次に、化合物２とパラジウム活性炭、水酸化パラジウム等の触媒の存在下、適当な溶媒（メタノール、エタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル等）中、水素雰囲気下で反応し、化合物３を製造することができる。次に、化合物３を発煙硝酸−濃硫酸、硝酸カリウム−濃硫酸、又は硝酸２アンモニウムセリウム（ＩＶ）−濃硫酸、等の条件でニトロ化し、ニトロ誘導体４を製造することができる。次に、化合物４を適当な溶媒（メタノール、エタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル等）中、還元剤（パラジウム活性炭／水素雰囲気下、パラジウム活性炭／ヒドラジン水和物、パラジウム活性炭／ぎ酸アンモニウム、塩化スズ（ＩＩ）１水和物、鉄／塩化アンモニウム、ラネーニッケル／ヒドラジン水和物等、好ましくはパラジウム活性炭／水素雰囲気下）を用いてニトロ基を還元することでアニリン誘導体５を製造することができる。
次に、化合物５を適当な溶媒中（メタノール、エタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル等）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールと室温〜１５０℃、好ましくは７０℃〜１００℃で２〜７２時間反応する。ここで得られる中間体を適当な溶媒中（メタノール、エタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル等）、塩化ヒドロキシアンモニウムと処理することによって、本発明化合物６を製造することができる。あるいは、化合物５をオルト蟻酸トリメチル、オルト蟻酸トリエチル等のオルト蟻酸エステル類と、触媒量の酢酸等の有機酸、塩酸等の鉱酸あるいはピリジン塩酸塩等の存在下あるいは非存在下に反応して中間体得る。反応温度は室温〜１５０℃、好ましくは７０℃〜１００℃で、反応時間は２〜７２時間である。これを単離あるいは単離せずにヒドロキシルアミンと適当な溶媒中（メタノール、エタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル等）で処理し、本発明化合物６を製造することができる。
また、文献（Ｊ Ｏｒｇ Ｃｈｅｍ 第５３巻、第３３０９項、１９８８年）に記載された方法に準じて合成した、式
（式中、Ｒ２１及びＲ２２は前記と同意義である。）で示される化合物と式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ及びｔは前記と同意義である）で示されるアミン類との還元的アルキル化反応によって得た合成中間体３を用いて同様の方法で本発明化合物６を製造することができる。
製造法２
文献（Ｏｒｇ Ｌｅｔｔｅｒ 第４巻、第１９５１項、２００２年）に記載された方法に準じて合成した式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ及びｔは前記と同意義であり、Ｒ３１及びＲ３２はＣ１−４アルキル基あるいは両者が一体となってＣ３−７シクロアルカン環を形成する。）
で示される化合物のＷｏｌｆｆ−Ｋｉｓｈｎｅｒ反応等による還元もしくは、文献（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、第４６巻、第２１１１項、１９９０年）に記載された方法に準じて合成した、式
（式中、Ｒ３１及びＲ３２は前記と同意義である。）で示される化合物と式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ及びｔは前記と同意義である。）で示されるアミン類との還元的アルキル化反応によって得た式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ、ｔ、Ｒ３１及びＲ３２は前記と同意義）で示される合成中間体を用いて、製造法１で示した方法を用いて式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ、ｔ、Ｒ３１及びＲ３２は前記と同意義である。）で示される本発明の化合物を合成することができる。
製造法３
２−（４−ニトロフェニル）マロニックアシッド ジメチルエステル（７）と式Ｒ２３ＯＨ；（式中、Ｒ２３は、Ｃ１−４アルコキシＣ１−３アルキル基、Ｎ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノＣ１−９アルキル基又は式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ、ｔ、ｍ及びｐは前記と同意義であり、ｑは０〜３の整数を示す。）で示されるアルコールとを光延反応を利用して縮合し、化合物８を合成することができる（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，第４２巻，第８３９５項，２００１年）。次に、化合物８を適当な溶媒（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ＤＭＳＯ、ＤＭＳＯ−Ｈ２Ｏ等）中、ＮａＣｌあるいはＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏを作用させ化合物９を合成することができる。反応温度は１００〜１５０℃、反応時間は５〜２４時間である（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第１２巻，第１６５９項，２０００年）。次に、製造法１に記載した同じ方法でニトロ基を還元し、アニリン誘導体１０を合成することができる。最後に、製造法１に記載した同じ方法でヒドロキシホルムアミジンを構築し、本発明化合物１１を製造することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳しく説明する。
【実施例１】
Ｎ−［４−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ−３，３−ジメチル−ブチル）フェニル］−Ｎ’−ヒドロキシフォルムアミジンの製造
（１）塩酸ジメチルアミン（１０．８ｇ，０．１３２ｍｏｌ）と２−プロパノール（６２ｍｌ）の混合物にパラホルムアルデヒド（８．７ｇ）とイソブチルアルデヒド（１２ｍｌ，０．１３２ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を加熱還流下、一中夜攪拌した。室温に冷却した後に、反応液を濃縮した。残査に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチル（１００ｍｌ×５）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、減圧濃縮し、３−ジメチルアミノ−２，２−ジメチルプロピオンアルデヒド（８．４ｇ）を無色油状物質として得た。
（２）ベンジルホスホン酸ジエチル（７．４ｇ，０．０３２５ｍｏｌ）とＴＨＦ（３２ｍｌ）の混合物を−７８℃に冷却し、窒素気流下で１．６Ｍ ｎ−ＢｕＬｉのｎ−ヘキサン溶液（１９．４ｍＬ，０．０３１１ｍｏｌ）を加えた。１５分後３−ジメチルアミノ−２，２−ジメチルプロピオンアルデヒド（３．５ｇ，０．０２７１ｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（２０ｍｌ）を滴下した。３０分攪拌した後に、反応液を室温まで昇温し、水（５０ｍｌ）を加え、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝９６：４）で精製し、（２，２−ジメチル−４−フェニル−３−ブテニル）ジメチルアミン（３．３ｇ）を無色油状物質として得た。
（３）（２，２−ジメチル−４−フェニル−３−ブテニル）ジメチルアミン（３．０ｇ，０．０１５ｍｏｌ）のメタノール溶液に１０％パラジウム活性炭（０．３ｇ）を加え、水素雰囲気下で一中夜攪拌した。不溶物をセライトを通して濾過し、そのろ液を濃縮し、（２，２−ジメチル−４−フェニルブチル）ジメチルアミン（２．９ｇ）を無色結晶として得た。
（４）（２，２−ジメチル−４−フェニルブチル）ジメチルアミン（２．９ｇ，０．０１４ｍｏｌ）、濃硫酸（１５ｍｌ）とクロロホルム（２９ｍｌ）の混合物に、氷冷下、激しく攪拌しながら発煙硝酸（０．５８ｍｌ，０．０１４ｍｏｌ）をゆっくり滴下した。１０分後、反応液に５Ｍ水酸化ナトリウム（９０ｍｌ）を加え、反応液をｐＨ８．０に調製した。さらに、反応液に水（５００ｍｌ）を加え、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝９２：８）で精製し、［２，２−ジメチル−４−（４−ニトロフェニル）ブチル］ジメチルアミンと［２，２−ジメチル−４−（２−ニトロフェニル）ブチル］ジメチルアミンの混合物（１０：１；０．４５ｇ）を黄色油状物質として得た。
（４）［２，２−ジメチル−４−（４−ニトロフェニル）ブチル］ジメチルアミン（４００ｍｇ，１．６０ｍｍｏｌ）のメタノール溶液に１０％パラジウム活性炭（４０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下で３時間攪拌した。不溶物をセライトを通して濾過し、そのろ液を濃縮し、４−（４−ジメチルアミノ−３，３−ジメチルブチル）アニリン（２９０ｍｇ）を赤色油状物として得た。
次に、４−（４−ジメチルアミノ−３，３−ジメチルブチル）アニリン（２００ｍｇ，０．９０８ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（４ｍｌ）にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド ジメチルアセタール（０．４８ｍｌ，３．６ｍｍｏｌ）を加え、加熱還流下、一中夜攪拌した。反応液を室温に冷却した後に、塩化ヒドロキシアンモニウム（３１５ｍｇ，４．５４ｍｍｏｌ）を加え、室温で７８時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、２．５Ｍ水酸化ナトリウムを加え、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をヘキサン−酢酸エチルの混合溶媒から再結晶し、無色粉末状の標題化合物（６８ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
０．８７（ｓ，６Ｈ），１．３９−１．４５（ｍ，２Ｈ），２．０８（ｓ，２Ｈ），２．２３（ｓ，６Ｈ），２．３８−２．４４（ｍ，２Ｈ），６．９８−７．０５（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），９．７３（ｓ，１Ｈ）
融点１２４．０〜１２６．０℃
【実施例２】
Ｎ−［４−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−３，３−ジメチル−ブチル）フェニル］−Ｎ’−ヒドロキシフォルムアミジンの製造
実施例１と同様な方法を用いて標題化合物を合成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
０．８６（ｓ，６Ｈ），０．９３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，６Ｈ），１．４２−１．３６（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｓ，２Ｈ），２．３９−２．４５（ｍ，２Ｈ），２．４７−３．３１（ｍ，４Ｈ），６．９８−７．０５（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），９．７５（ｓ，１Ｈ）
融点９５．５〜９７．５℃（無色粉末）
【実施例３】
Ｎ−［４−（４−ピロリジン−１−イル−３，３−ジメチル−ブチル）フェニル］−Ｎ’−ヒドロキシフォルムアミジンの製造
実施例１と同様な方法を用いて標題化合物を合成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
１．４０−１．４６（ｍ，２Ｈ），１．６４−１．６８（ｍ，４Ｈ），２．２９（ｓ，２Ｈ），２．５３−２．５８（ｍ，２Ｈ），６．９８−７．０５（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），９．７５（ｓ，１Ｈ）
融点１２０．０〜１２１．５℃（無色粉末）
【実施例４】
Ｎ−［４−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノブチル）フェニル］−Ｎ’−ヒドロキシフォルムアミジンの製造
（１）４−（４−ニトロフェニル）酪酸（１．０ｇ，４．７８ｍｍｏｌ）とジエチルアミン（０．６９９ｇ，９．５６ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液にＮ−エチル−Ｎ’−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸（１．３７ｇ，７．１７ｍｍｏｌ）と１−ヒドロキシベンゾトリアゾール１水和物（０．９６９ｇ，７．１７ｍｍｏｌ）を加え室温にて２４時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、滅圧濃縮し、Ｎ，Ｎ−ジエチル−４−（４−ニトロフェニル）ブチルアミド（１．４ｇ）を淡黄色油状物質として得た。
Ｎ，Ｎ−ジエチル−４−（４−ニトロフェニル）ブチルアミド（１．４ｇ）とＴＨＦ（１４ｍｌ）の混合物に１Ｍ ＢＨ３・ＴＨＦ（９．６ｍｌ）を滴下し、室温にて一中夜攪拌した。さらに１Ｍ ＢＨ３・ＴＨＦ（７．０ｍｌ）を滴下し、室温にて６時間攪拌した後に、反応液に５０％酢酸（３ｍｌ）を加えた。反応液を濃縮し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、ジエチル−［４−（４−ニトロフェニル）ブチル］アミン（１．７４ｇ）を淡黄色油状物質として得た。
（３）ジエチル−［４−（４−ニトロフェニル）ブチル］アミン（１．７４ｇ）のメタノール溶液に１０％パラジウム活性炭（０．３ｇ）を加え、水素雰囲気下で３時間攪拌した。不溶物をセライトを通して濾過し、そのろ液を濃縮した。残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、４−（４−ジエチルアミノブチル）−アニリン（９９８ｍｇ）を油状物質として得た。
（４）４−（４−ジエチルアミノブチル）−アニリン（６７６ｍｇ，３．１２ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（４ｍｌ）にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（０．８３ｍｌ，６．２ｍｍｏｌ）を加え、加熱還流下、１時間攪拌した。反応液を室温に冷却した後に、塩化ヒドロキシアンモニウム（４３３ｍｇ，６．２４ｍｍｏｌ）を加え、室温で９０時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回、クロロホルムで５回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５：９５）で精製した。得られた固体を、ヘキサン−酢酸エチルの混合溶媒から再結晶し、無色粉末状の標題化合物（３１４ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
０．９２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，６Ｈ），１．２４−１．６０（ｍ，４Ｈ），２．２６−２．４５（ｍ，８Ｈ），６．９９−７．０８（ｍ，４Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ），９．７７（ｓ，１Ｈ）
融点１１０．０〜１１３．０℃
【実施例５】
Ｎ−｛４−［３−（２−メトキシエトキシ）プロピル］フェニル｝−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジンの製造
（１）トリフェニルホスフィン（４．８１ｇ，１８．３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に、０℃に冷却後、ジエチルアゾジカルボキシレート（４０％トルエン溶液；７．９９ｇ，１８．３ｍｍｏｌ）とジエチレングリコールモノメチルエーテル（２．２１ｇ，１８．４ｍｍｏｌ）を順次加えた。室温まで昇温し、３０分間攪拌した。再び０℃に冷却し、２−（４−ニトロフェニル）マロニックアシッド ジメチルエステル（３．１０ｇ，１２．２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（５０ｍｌ）を滴下した。室温まで昇温後、室温で一晩攪拌し、次いで６０℃で５．５時間反応させた。反応混合物に酢酸エチルを加え、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１〜２：１）、次いでＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製し、２−［２−（２−メトキシエトキシ）エチル］−２−（４−ニトロフェニル）マロニックアシッド ジメチルエステル（１．８０ｇ）を淡黄色油状物質として得た。
（２）２−［２−（２−メトキシエトキシ）エチル］−２−（４−ニトロフェニル）マロニックアシッド ジメチルエステル（１．１３ｇ，３．２ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（６ｍｌ）溶液に、塩化マグネシウム・６水和物（１．３０ｇ，６．４ｍｍｏｌ）を加え、１５０℃で１０時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、酢酸エチルを加え、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１〜２：１）で精製し、１−［３−（２−メトキシエトキシ）プロピル］−４−ニトロベンゼン（０．５２ｇ）を黄色油状物質として得た。
（３）１−［３−（２−メトキシエトキシ）プロピル］−４−ニトロベンゼン（０．４９ｇ，２．１ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍｌ）溶液に、５％パラジウム−活性炭（０．２０ｇ）を加え、水素雰囲気下、室温にて１時間攪拌した。ＴＬＣ分析により原料の消失を確認した後に、セライトを用いて不溶物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝７：３〜１：１）で精製し、４−［３−（２−メトキシエトキシ）プロピル］フェニルアミン（０．３８ｇ）を淡黄色油状物質として得た。
（４）４−［３−（２−メトキシエトキシ）プロピル］フェニルアミン（０．２０ｇ，０．９７ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（０．２４ｇ，２．０ｍｍｏｌ）を加え、１００℃で４．５時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、ヒドロキシルアミン１塩酸（０．１４ｇ，１．９ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩攪拌した。さらにヒドロキシルアミン１塩酸（０．０６７ｇ，０．９６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１．５時間、５０℃で５．５時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１〜１：２）で精製し、標題化合物（０．１４ｇ）を淡緑色油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
１．６６−１．７８（ｍ，２Ｈ），３．２５（ｓ，３Ｈ），３．２６−３．３９（ｍ，４Ｈ），３．４０−３．５１（ｍ，４Ｈ），７．００−７．１０（ｍ，４Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），９．７６（ｓ，１Ｈ）
【実施例６】
Ｎ−｛４−［６−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ヘキシル］フェニル｝−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジンの製造
ジエチレングリコール モノメチルエーテルの代わりに５−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ペンタノールを出発原料に用いて実施例５と同様な方法にて標題化合物を合成した。
融点９６．０〜９７．０℃（無色粉末）
【実施例７】
Ｎ−｛４−［２−（５，５−ジメチル−［１，３］ジオキサン−２−イル）エチル］フェニル｝−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジンの製造
（１）エチル ４−ニトロシンナメート（３．１８ｇ，１４．４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）溶液に、−７８℃で水素化ジイソブチルアルミニウム（１．０Ｍトルエン溶液；１４．４ｍｌ，１４．４ｍｍｏｌ）を滴下し、−７８℃でそのまま１時間攪拌した。さらに水素化ジイソブチルアルミニウム（１．０Ｍトルエン溶液；２８．７ｍｌ，２８．７ｍｍｏｌ）を加え、−７８℃で３０分間反応させた。反応液に１Ｍ塩酸水溶液を徐々に加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮後、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１〜１：３）で精製し、３−（４−ニトロフェニル）プロピル−２−エン−１−オール（２．１６ｇ）を黄色粉末として得た。
融点１２４．５〜１２６．０℃
（２）３−（４−ニトロフェニル）プロピル−２−エン−１−オール（０．６７ｇ，３．８ｍｍｏｌ）のメチレンクロライド（４０ｍｌ）溶液に、活性二酸化マンガン（５．０１ｇ）を加え、室温で２時間反応させた。不溶物をセライトで濾過し、不溶物をクロロホルムで洗浄した。濾液を減圧濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝６：１〜３：１）で精製し、３−（４−ニトロフェニル）プロペナール（０．５５ｇ）を淡黄色粉末として得た。
融点１４０．０〜１４１．５℃
（３）３−（４−ニトロフェニル）プロペナール（０．５１ｇ，２．９ｍｍｏｌ）のベンゼン（４０ｍｌ）溶液に、ｐ−トルエンスルホン酸１水和物（０．０５９ｇ，０．３ｍｍｏｌ）、２，２−ジメチルプロパン−１，３−ジオール（０．３６ｇ，３．５ｍｍｏｌ）を加え、還流加熱下、５時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍｌ）を加え、酢酸エチル（１００ｍｌ）で２回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝９：１〜６：１）で精製し、５，５−ジメチル−２−［２−（４−ニトロフェニル）ビニル］−［１，３］ジオキサン（０．７３ｇ）を無色粉末として得た。
融点８６．５〜８８．５℃
（４）５，５−ジメチル−２−［２−（４−ニトロフェニル）ビニル］−［１，３］ジオキサン（０．６４ｇ，２．４ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍｌ）溶液に、５％パラジウム−活性炭（０．２６ｇ）を加え、水素雰囲気下、室温にて４時間攪拌した。ＴＬＣ分析により原料の消失を確認した後に、セライトを用いて不溶物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１〜２：１）で精製し、４−［２−（５，５−ジメチル−［１，３］ジオキサン−２−イル）エチル］フェニルアミン（０．４８ｇ）を無色粉末として得た。
融点９３．５〜９４．５℃
（５）４−［２−（５，５−ジメチル−［１，３］ジオキサン−２−イル）エチル］フェニルアミン（０．３２ｇ，１．４ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（０．３３ｇ，２．８ｍｍｏｌ）を加え、１００℃で４時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、ヒドロキシルアミン１塩酸（０．１４ｇ，１．９ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩攪拌した。さらに塩化ヒドロキシアンモニウム（０．１９ｇ，２．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間、６０℃で６．５時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１〜１：２）で精製し、標題化合物（０．２５ｇ）を無色粉末として得た。
融点１５９．０〜１６０．０℃
【実施例８】
Ｎ−｛４−［３−（５，５−ジメチル−［１，３］ジオキサン−２−イル）プロピル］フェニル｝−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジンの製造
エチル４−ニトロシンナメートの代わりに４−（４−ニトロフェニル）ブチリックアシドを出発原料に用いて実施例７と同様な方法にて標題化合物を合成した。
融点１３８．０〜１４０．０℃（無色粉末）
実施例１〜８で合成した化合物の構造式を以下に示す。
試験例［ヒト腎ミクロソーム由来２０−ＨＥＴＥ産生酵素の阻害作用］
上記表記載の化合物について、２０−ＨＥＴＥ産生阻害作用を試験した。
本試験はＪ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，第２６８巻，４７４頁，１９９４年に記載の方法に準拠して行った。
ＤＭＳＯで１μＭに調製した被験薬溶液を、５ｍＭの塩化マグネシウム及び１ｍＭのエチレンジアミンテトラアセティックアシッド ジソディウムソルト（ＥＤＴＡ）を含む５０ｍＭの３−モルホリノプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）（ｐＨ７．４）緩衝液に加え、酵素源としてヒト腎ミクロソーム画分（Ｈｕｍａｎ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ，Ａｎａｔｏｍｉｃ Ｇｉｆｔ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）、基質として［５，６，８，９，１１，１２，１４，１５］トリチウム−アラキドン酸、そして補酵素としてＮＡＤＰＨを添加し、３７度で１．５時間反応させた。反応液にギ酸を添加して反応を停止させた後、アセトニトリル（終濃度５０％）を加えた。ＯＤＳカラム（バイオシルＣ１８，バイオラッド社製）を装着した放射性物質検出器付き高速液体クロマトグラフィーを用いて２０−ＨＥＴＥの産生量を測定した。化合物無添加時の２０−ＨＥＴＥの産生量を１００％とし、化合物を添加した時の２０−ＨＥＴＥ産生が５０％阻害される化合物濃度（ＩＣ５０値）を算出した。その結果について表１に示す。
【産業上の利用可能性】
本発明に係る化合物は２０−ＨＥＴＥ産生阻害作用を有し、ヒト及び動物における２０−ＨＥＴＥが関わる疾病、例えば各種腎疾患、脳血管疾患、各種循環器疾患治療薬として有用である。
【技術分野】
本発明は、アラキドン酸から生合成される２０−ヒドロキシエイコサテトラエン酸（２０−ＨＥＴＥ）の産生酵素を阻害するＮ−（４−アルキル置換フェニル）−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジン誘導体に関する。
【背景技術】
アラキドン酸から産生される生理活性物質として、シクロオキシゲナーゼによって産生されるプロスタグランジン類及びリポキシゲナーゲによって産生されるロイコトリエン類が広く知られている。しかし、近年、チトクロームｐ４５０属に属する酵素によってアラキドン酸から産生される２０−ＨＥＴＥが生体内で多彩な働きをしていることが明らかとされつつある。これまでに２０−ＨＥＴＥは腎臓、脳血管等の主要臓器において微小血管を収縮又は拡張させることや細胞増殖を惹起することが明らかにされており、生体内で重要な生理作用を演じていると共に各種腎疾患、脳血管疾患、循環器疾患等の病態に深く関与していることが示唆されている（Ｊ．Ｖａｓｃｕｌａｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，第３２巻，７９頁，１９９５年、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，第２７７巻，Ｒ６０７頁，１９９９年、Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．，第８２巻，１３１頁，２００２年）。
この様な背景の中で、Ｎ’−ヒドロキシフェニルホルムアミジン誘導体やカルボン酸誘導体に強い２０−ＨＥＴＥ産生酵素阻害作用（国際特許公開ＷＯ０１３２１６４、ＷＯ０１０９６３０９、ＷＯ０１６８６１０号明細書、日本公開特許公報ＪＰ０１３５４６５８、ＪＰ０１３５４６４６号明細書）があると報告されている。
【発明の開示】
本発明は、腎臓、脳血管等の主要臓器における微小血管収縮又は拡張、あるいは細胞増殖惹起等に関与する２０−ＨＥＴＥの産生を阻害する薬剤を提供することを目的としている。
本発明者らは前記課題を解決する目的で鋭意探索研究した結果、ある特異な部分構造を有する芳香族化合物、すなわちＮ−（４−アルキル置換フェニル）−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジン誘導体が意外にも選択的に２０−ＨＥＴＥの産生酵素の阻害作用を有することを見出し、本発明を完成した。すなわち、本発明は、下記式
（式中、Ｒ１は水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基又はハロゲン原子を示し、ＡはＣ１−１０アルキレン基又は式
（式中、ｍ、ｎ及びｐは各々０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、ＲはＮ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基、ジオキサニル基、Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基、Ｃ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基又は式
（式中、ｓ及びｔは各々１〜４の整数を示し、Ｂはメチレン基、酸素原子、硫黄原子、窒素原子、Ｃ１−４アルキル基で置換された窒素原子、フェニル基で置換された窒素原子又はベンジル基で置換された窒素原子を示し、Ｒ２は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し、ｒは０〜２の整数を示す。）で表される基を示す。）で表されるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を提供するものである。
他の本発明は、下記式
（式中、Ａ′はＣ１−１０アルキレン基であり、Ｒ′はＮ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基、ピロリジニル基、ジオキサニル基、Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基又はＣ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基である。）で表されるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を提供するものである。
他の本発明は、Ｎ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を有効成分とする医薬を提供するものである。
他の本発明は、２０−ＨＥＴＥの産生酵素の阻害剤であるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体を提供するものである。
他の本発明は、Ｎ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を有効成分とする腎疾患、脳血管疾患又は循環器疾患治療薬を提供するものである。
本発明において使用される用語が以下に定義される。
本発明において、「Ｃｘ−ｙ」とは、その後に続く基がｘ〜ｙ個の炭素原子を有することを示す。
Ｃ１−４アルキル基は、炭素原子を１〜４個有する直鎖状又は分枝状のアルキル基を意味し、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基などが挙げられる。Ｃ１−４アルコキシ基は、炭素原子を１〜４個有する直鎖状又は分枝状のアルコキシ基を意味し、例えば、メトキシ基、エトキシ基、ｎ−プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ−ブトキシ基などが挙げられる。
Ｎ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基としては、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ基、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ基などが挙げられる。
式
で表される基とはＣ３−７のシクロアルカンに２つのアルキレン基もしくは結合手が結合した基であり、好ましくはｐは０〜３であり、ｍ及びｎは１〜３であり、例えば、下記に示す基などを示す。
ジオキサニル基は、ヘテロ原子として酸素原子を２個有する飽和六員環（ジオキサン）、好ましくは１，３−ジオキサンの環から水素を除いて誘導される１価の基を意味する。
Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基は、その基の環がＣ１−６アルキル基で置換されていてもよく、例えば、５，５−ジメチル−１，３−ジオキサン−２−イル基などである。
Ｃ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基は、Ｃ１−４アルコキシ基とＣ１−４アルコキシ基が複合した形態を有するものである。例えば、メトキシエトキシ基、エトキシエトキシ基、ｎ−ブトキシエトキシ基、イソブトキシエトキシ基などが好ましい。
Ｃ１−１０アルキレン基は、炭素原子を１〜１０個有する直鎖状又は分枝状のアルキレン基を意味し、例えば、メチレン基、メチルメチレン基、エチレン基、プロピレン基、ヘプチレン基、２，２−ジメチルプロピレン基、３，３−ジメチルプロピレン基、ヘキシレン基などが挙げられる。中でも、エチレン基、３，３−ジメチルプロピレン基が好ましい。
式
で表される基とは、例えば、ピロリジノ基、ピペリジノ基、モルホリノ基、チオモルホリノ基、４−メチルピペラジン−１−イル基、３，５−ジメチルモルホリノ基などである。
また、製薬学的に許容される塩とは、アルカリ金属類、アルカリ土類金属類、アンモニウム、アルキルアンモニウムなどとの塩、鉱酸又は有機酸との塩であり、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、アルミニウム塩、トリエチルアンモニウム塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、ぎ酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、ラクトビオン酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプトン酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、アジピン酸塩、システインとの塩、Ｎ−アセチルシステインとの塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、よう化水素酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、ピクリン酸塩、チオシアン酸塩、ウンデカン酸塩、アクリル酸ポリマーとの塩、カルボキシビニルポリマーとの塩などを挙げることができる。
本発明化合物は、例えば以下に示す方法によって合成することができる。
製造法１
（式中、Ｂ、Ｒ１、Ｒ２、ｒ、ｓ及びｔは前記と同意義であり、Ｒ２１及びＲ２２はＣ１−４アルキル基あるいは両者が一体となってＣ３−７シクロアルカン環を形成する。）
Ｍａｎｎｉｃｈ反応を利用して合成したアルデヒド１とベンジルホスホン酸ジエチル等のＨｏｒｎｅｒ−Ｅｍｏｎｓ試薬を、適当な溶媒（テトラヒドロフラン、エーテル、トルエン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）中、適当な塩基（ｎ−ブチルリチウム、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、水素化ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ｔ−ブトキシカリウム等）の存在下、−７８℃〜室温にて１〜２４時間反応し、化合物２を製造することができる。次に、化合物２とパラジウム活性炭、水酸化パラジウム等の触媒の存在下、適当な溶媒（メタノール、エタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル等）中、水素雰囲気下で反応し、化合物３を製造することができる。次に、化合物３を発煙硝酸−濃硫酸、硝酸カリウム−濃硫酸、又は硝酸２アンモニウムセリウム（ＩＶ）−濃硫酸、等の条件でニトロ化し、ニトロ誘導体４を製造することができる。次に、化合物４を適当な溶媒（メタノール、エタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル等）中、還元剤（パラジウム活性炭／水素雰囲気下、パラジウム活性炭／ヒドラジン水和物、パラジウム活性炭／ぎ酸アンモニウム、塩化スズ（ＩＩ）１水和物、鉄／塩化アンモニウム、ラネーニッケル／ヒドラジン水和物等、好ましくはパラジウム活性炭／水素雰囲気下）を用いてニトロ基を還元することでアニリン誘導体５を製造することができる。
次に、化合物５を適当な溶媒中（メタノール、エタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル等）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールと室温〜１５０℃、好ましくは７０℃〜１００℃で２〜７２時間反応する。ここで得られる中間体を適当な溶媒中（メタノール、エタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル等）、塩化ヒドロキシアンモニウムと処理することによって、本発明化合物６を製造することができる。あるいは、化合物５をオルト蟻酸トリメチル、オルト蟻酸トリエチル等のオルト蟻酸エステル類と、触媒量の酢酸等の有機酸、塩酸等の鉱酸あるいはピリジン塩酸塩等の存在下あるいは非存在下に反応して中間体得る。反応温度は室温〜１５０℃、好ましくは７０℃〜１００℃で、反応時間は２〜７２時間である。これを単離あるいは単離せずにヒドロキシルアミンと適当な溶媒中（メタノール、エタノール、プロパノール、テトラヒドロフラン、ジオキサン、トルエン、塩化メチレン、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル等）で処理し、本発明化合物６を製造することができる。
また、文献（Ｊ Ｏｒｇ Ｃｈｅｍ 第５３巻、第３３０９項、１９８８年）に記載された方法に準じて合成した、式
（式中、Ｒ２１及びＲ２２は前記と同意義である。）で示される化合物と式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ及びｔは前記と同意義である）で示されるアミン類との還元的アルキル化反応によって得た合成中間体３を用いて同様の方法で本発明化合物６を製造することができる。
製造法２
文献（Ｏｒｇ Ｌｅｔｔｅｒ 第４巻、第１９５１項、２００２年）に記載された方法に準じて合成した式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ及びｔは前記と同意義であり、Ｒ３１及びＲ３２はＣ１−４アルキル基あるいは両者が一体となってＣ３−７シクロアルカン環を形成する。）
で示される化合物のＷｏｌｆｆ−Ｋｉｓｈｎｅｒ反応等による還元もしくは、文献（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、第４６巻、第２１１１項、１９９０年）に記載された方法に準じて合成した、式
（式中、Ｒ３１及びＲ３２は前記と同意義である。）で示される化合物と式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ及びｔは前記と同意義である。）で示されるアミン類との還元的アルキル化反応によって得た式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ、ｔ、Ｒ３１及びＲ３２は前記と同意義）で示される合成中間体を用いて、製造法１で示した方法を用いて式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ、ｔ、Ｒ３１及びＲ３２は前記と同意義である。）で示される本発明の化合物を合成することができる。
製造法３
２−（４−ニトロフェニル）マロニックアシッド ジメチルエステル（７）と式Ｒ２３ＯＨ；（式中、Ｒ２３は、Ｃ１−４アルコキシＣ１−３アルキル基、Ｎ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノＣ１−９アルキル基又は式
（式中、Ｂ、Ｒ２、ｒ、ｓ、ｔ、ｍ及びｐは前記と同意義であり、ｑは０〜３の整数を示す。）で示されるアルコールとを光延反応を利用して縮合し、化合物８を合成することができる（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，第４２巻，第８３９５項，２００１年）。次に、化合物８を適当な溶媒（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ＤＭＳＯ、ＤＭＳＯ−Ｈ２Ｏ等）中、ＮａＣｌあるいはＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏを作用させ化合物９を合成することができる。反応温度は１００〜１５０℃、反応時間は５〜２４時間である（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，第１２巻，第１６５９項，２０００年）。次に、製造法１に記載した同じ方法でニトロ基を還元し、アニリン誘導体１０を合成することができる。最後に、製造法１に記載した同じ方法でヒドロキシホルムアミジンを構築し、本発明化合物１１を製造することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
以下、実施例を挙げて本発明を更に詳しく説明する。
【実施例１】
Ｎ−［４−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ−３，３−ジメチル−ブチル）フェニル］−Ｎ’−ヒドロキシフォルムアミジンの製造
（１）塩酸ジメチルアミン（１０．８ｇ，０．１３２ｍｏｌ）と２−プロパノール（６２ｍｌ）の混合物にパラホルムアルデヒド（８．７ｇ）とイソブチルアルデヒド（１２ｍｌ，０．１３２ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を加熱還流下、一中夜攪拌した。室温に冷却した後に、反応液を濃縮した。残査に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチル（１００ｍｌ×５）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、減圧濃縮し、３−ジメチルアミノ−２，２−ジメチルプロピオンアルデヒド（８．４ｇ）を無色油状物質として得た。
（２）ベンジルホスホン酸ジエチル（７．４ｇ，０．０３２５ｍｏｌ）とＴＨＦ（３２ｍｌ）の混合物を−７８℃に冷却し、窒素気流下で１．６Ｍ ｎ−ＢｕＬｉのｎ−ヘキサン溶液（１９．４ｍＬ，０．０３１１ｍｏｌ）を加えた。１５分後３−ジメチルアミノ−２，２−ジメチルプロピオンアルデヒド（３．５ｇ，０．０２７１ｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（２０ｍｌ）を滴下した。３０分攪拌した後に、反応液を室温まで昇温し、水（５０ｍｌ）を加え、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝９６：４）で精製し、（２，２−ジメチル−４−フェニル−３−ブテニル）ジメチルアミン（３．３ｇ）を無色油状物質として得た。
（３）（２，２−ジメチル−４−フェニル−３−ブテニル）ジメチルアミン（３．０ｇ，０．０１５ｍｏｌ）のメタノール溶液に１０％パラジウム活性炭（０．３ｇ）を加え、水素雰囲気下で一中夜攪拌した。不溶物をセライトを通して濾過し、そのろ液を濃縮し、（２，２−ジメチル−４−フェニルブチル）ジメチルアミン（２．９ｇ）を無色結晶として得た。
（４）（２，２−ジメチル−４−フェニルブチル）ジメチルアミン（２．９ｇ，０．０１４ｍｏｌ）、濃硫酸（１５ｍｌ）とクロロホルム（２９ｍｌ）の混合物に、氷冷下、激しく攪拌しながら発煙硝酸（０．５８ｍｌ，０．０１４ｍｏｌ）をゆっくり滴下した。１０分後、反応液に５Ｍ水酸化ナトリウム（９０ｍｌ）を加え、反応液をｐＨ８．０に調製した。さらに、反応液に水（５００ｍｌ）を加え、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝９２：８）で精製し、［２，２−ジメチル−４−（４−ニトロフェニル）ブチル］ジメチルアミンと［２，２−ジメチル−４−（２−ニトロフェニル）ブチル］ジメチルアミンの混合物（１０：１；０．４５ｇ）を黄色油状物質として得た。
（４）［２，２−ジメチル−４−（４−ニトロフェニル）ブチル］ジメチルアミン（４００ｍｇ，１．６０ｍｍｏｌ）のメタノール溶液に１０％パラジウム活性炭（４０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下で３時間攪拌した。不溶物をセライトを通して濾過し、そのろ液を濃縮し、４−（４−ジメチルアミノ−３，３−ジメチルブチル）アニリン（２９０ｍｇ）を赤色油状物として得た。
次に、４−（４−ジメチルアミノ−３，３−ジメチルブチル）アニリン（２００ｍｇ，０．９０８ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（４ｍｌ）にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド ジメチルアセタール（０．４８ｍｌ，３．６ｍｍｏｌ）を加え、加熱還流下、一中夜攪拌した。反応液を室温に冷却した後に、塩化ヒドロキシアンモニウム（３１５ｍｇ，４．５４ｍｍｏｌ）を加え、室温で７８時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、２．５Ｍ水酸化ナトリウムを加え、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をヘキサン−酢酸エチルの混合溶媒から再結晶し、無色粉末状の標題化合物（６８ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
０．８７（ｓ，６Ｈ），１．３９−１．４５（ｍ，２Ｈ），２．０８（ｓ，２Ｈ），２．２３（ｓ，６Ｈ），２．３８−２．４４（ｍ，２Ｈ），６．９８−７．０５（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），９．７３（ｓ，１Ｈ）
融点１２４．０〜１２６．０℃
【実施例２】
Ｎ−［４−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−３，３−ジメチル−ブチル）フェニル］−Ｎ’−ヒドロキシフォルムアミジンの製造
実施例１と同様な方法を用いて標題化合物を合成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
０．８６（ｓ，６Ｈ），０．９３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，６Ｈ），１．４２−１．３６（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｓ，２Ｈ），２．３９−２．４５（ｍ，２Ｈ），２．４７−３．３１（ｍ，４Ｈ），６．９８−７．０５（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），９．７５（ｓ，１Ｈ）
融点９５．５〜９７．５℃（無色粉末）
【実施例３】
Ｎ−［４−（４−ピロリジン−１−イル−３，３−ジメチル−ブチル）フェニル］−Ｎ’−ヒドロキシフォルムアミジンの製造
実施例１と同様な方法を用いて標題化合物を合成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
１．４０−１．４６（ｍ，２Ｈ），１．６４−１．６８（ｍ，４Ｈ），２．２９（ｓ，２Ｈ），２．５３−２．５８（ｍ，２Ｈ），６．９８−７．０５（ｍ，４Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），９．７５（ｓ，１Ｈ）
融点１２０．０〜１２１．５℃（無色粉末）
【実施例４】
Ｎ−［４−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノブチル）フェニル］−Ｎ’−ヒドロキシフォルムアミジンの製造
（１）４−（４−ニトロフェニル）酪酸（１．０ｇ，４．７８ｍｍｏｌ）とジエチルアミン（０．６９９ｇ，９．５６ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）溶液にＮ−エチル−Ｎ’−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸（１．３７ｇ，７．１７ｍｍｏｌ）と１−ヒドロキシベンゾトリアゾール１水和物（０．９６９ｇ，７．１７ｍｍｏｌ）を加え室温にて２４時間攪拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、滅圧濃縮し、Ｎ，Ｎ−ジエチル−４−（４−ニトロフェニル）ブチルアミド（１．４ｇ）を淡黄色油状物質として得た。
Ｎ，Ｎ−ジエチル−４−（４−ニトロフェニル）ブチルアミド（１．４ｇ）とＴＨＦ（１４ｍｌ）の混合物に１Ｍ ＢＨ３・ＴＨＦ（９．６ｍｌ）を滴下し、室温にて一中夜攪拌した。さらに１Ｍ ＢＨ３・ＴＨＦ（７．０ｍｌ）を滴下し、室温にて６時間攪拌した後に、反応液に５０％酢酸（３ｍｌ）を加えた。反応液を濃縮し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗い、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、ジエチル−［４−（４−ニトロフェニル）ブチル］アミン（１．７４ｇ）を淡黄色油状物質として得た。
（３）ジエチル−［４−（４−ニトロフェニル）ブチル］アミン（１．７４ｇ）のメタノール溶液に１０％パラジウム活性炭（０．３ｇ）を加え、水素雰囲気下で３時間攪拌した。不溶物をセライトを通して濾過し、そのろ液を濃縮した。残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、４−（４−ジエチルアミノブチル）−アニリン（９９８ｍｇ）を油状物質として得た。
（４）４−（４−ジエチルアミノブチル）−アニリン（６７６ｍｇ，３．１２ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（４ｍｌ）にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（０．８３ｍｌ，６．２ｍｍｏｌ）を加え、加熱還流下、１時間攪拌した。反応液を室温に冷却した後に、塩化ヒドロキシアンモニウム（４３３ｍｇ，６．２４ｍｍｏｌ）を加え、室温で９０時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで２回、クロロホルムで５回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５：９５）で精製した。得られた固体を、ヘキサン−酢酸エチルの混合溶媒から再結晶し、無色粉末状の標題化合物（３１４ｍｇ）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
０．９２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，６Ｈ），１．２４−１．６０（ｍ，４Ｈ），２．２６−２．４５（ｍ，８Ｈ），６．９９−７．０８（ｍ，４Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ），９．７７（ｓ，１Ｈ）
融点１１０．０〜１１３．０℃
【実施例５】
Ｎ−｛４−［３−（２−メトキシエトキシ）プロピル］フェニル｝−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジンの製造
（１）トリフェニルホスフィン（４．８１ｇ，１８．３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に、０℃に冷却後、ジエチルアゾジカルボキシレート（４０％トルエン溶液；７．９９ｇ，１８．３ｍｍｏｌ）とジエチレングリコールモノメチルエーテル（２．２１ｇ，１８．４ｍｍｏｌ）を順次加えた。室温まで昇温し、３０分間攪拌した。再び０℃に冷却し、２−（４−ニトロフェニル）マロニックアシッド ジメチルエステル（３．１０ｇ，１２．２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（５０ｍｌ）を滴下した。室温まで昇温後、室温で一晩攪拌し、次いで６０℃で５．５時間反応させた。反応混合物に酢酸エチルを加え、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮して得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１〜２：１）、次いでＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）で精製し、２−［２−（２−メトキシエトキシ）エチル］−２−（４−ニトロフェニル）マロニックアシッド ジメチルエステル（１．８０ｇ）を淡黄色油状物質として得た。
（２）２−［２−（２−メトキシエトキシ）エチル］−２−（４−ニトロフェニル）マロニックアシッド ジメチルエステル（１．１３ｇ，３．２ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（６ｍｌ）溶液に、塩化マグネシウム・６水和物（１．３０ｇ，６．４ｍｍｏｌ）を加え、１５０℃で１０時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、酢酸エチルを加え、飽和食塩水で洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１〜２：１）で精製し、１−［３−（２−メトキシエトキシ）プロピル］−４−ニトロベンゼン（０．５２ｇ）を黄色油状物質として得た。
（３）１−［３−（２−メトキシエトキシ）プロピル］−４−ニトロベンゼン（０．４９ｇ，２．１ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍｌ）溶液に、５％パラジウム−活性炭（０．２０ｇ）を加え、水素雰囲気下、室温にて１時間攪拌した。ＴＬＣ分析により原料の消失を確認した後に、セライトを用いて不溶物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝７：３〜１：１）で精製し、４−［３−（２−メトキシエトキシ）プロピル］フェニルアミン（０．３８ｇ）を淡黄色油状物質として得た。
（４）４−［３−（２−メトキシエトキシ）プロピル］フェニルアミン（０．２０ｇ，０．９７ｍｍｏｌ）のメタノール（５ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（０．２４ｇ，２．０ｍｍｏｌ）を加え、１００℃で４．５時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、ヒドロキシルアミン１塩酸（０．１４ｇ，１．９ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩攪拌した。さらにヒドロキシルアミン１塩酸（０．０６７ｇ，０．９６ｍｍｏｌ）を加え、室温で１．５時間、５０℃で５．５時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１〜１：２）で精製し、標題化合物（０．１４ｇ）を淡緑色油状物質として得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：
１．６６−１．７８（ｍ，２Ｈ），３．２５（ｓ，３Ｈ），３．２６−３．３９（ｍ，４Ｈ），３．４０−３．５１（ｍ，４Ｈ），７．００−７．１０（ｍ，４Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），８．４２（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ），９．７６（ｓ，１Ｈ）
【実施例６】
Ｎ−｛４−［６−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ヘキシル］フェニル｝−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジンの製造
ジエチレングリコール モノメチルエーテルの代わりに５−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ペンタノールを出発原料に用いて実施例５と同様な方法にて標題化合物を合成した。
融点９６．０〜９７．０℃（無色粉末）
【実施例７】
Ｎ−｛４−［２−（５，５−ジメチル−［１，３］ジオキサン−２−イル）エチル］フェニル｝−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジンの製造
（１）エチル ４−ニトロシンナメート（３．１８ｇ，１４．４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３０ｍｌ）溶液に、−７８℃で水素化ジイソブチルアルミニウム（１．０Ｍトルエン溶液；１４．４ｍｌ，１４．４ｍｍｏｌ）を滴下し、−７８℃でそのまま１時間攪拌した。さらに水素化ジイソブチルアルミニウム（１．０Ｍトルエン溶液；２８．７ｍｌ，２８．７ｍｍｏｌ）を加え、−７８℃で３０分間反応させた。反応液に１Ｍ塩酸水溶液を徐々に加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧濃縮後、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１〜１：３）で精製し、３−（４−ニトロフェニル）プロピル−２−エン−１−オール（２．１６ｇ）を黄色粉末として得た。
融点１２４．５〜１２６．０℃
（２）３−（４−ニトロフェニル）プロピル−２−エン−１−オール（０．６７ｇ，３．８ｍｍｏｌ）のメチレンクロライド（４０ｍｌ）溶液に、活性二酸化マンガン（５．０１ｇ）を加え、室温で２時間反応させた。不溶物をセライトで濾過し、不溶物をクロロホルムで洗浄した。濾液を減圧濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝６：１〜３：１）で精製し、３−（４−ニトロフェニル）プロペナール（０．５５ｇ）を淡黄色粉末として得た。
融点１４０．０〜１４１．５℃
（３）３−（４−ニトロフェニル）プロペナール（０．５１ｇ，２．９ｍｍｏｌ）のベンゼン（４０ｍｌ）溶液に、ｐ−トルエンスルホン酸１水和物（０．０５９ｇ，０．３ｍｍｏｌ）、２，２−ジメチルプロパン−１，３−ジオール（０．３６ｇ，３．５ｍｍｏｌ）を加え、還流加熱下、５時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍｌ）を加え、酢酸エチル（１００ｍｌ）で２回抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝９：１〜６：１）で精製し、５，５−ジメチル−２−［２−（４−ニトロフェニル）ビニル］−［１，３］ジオキサン（０．７３ｇ）を無色粉末として得た。
融点８６．５〜８８．５℃
（４）５，５−ジメチル−２−［２−（４−ニトロフェニル）ビニル］−［１，３］ジオキサン（０．６４ｇ，２．４ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍｌ）溶液に、５％パラジウム−活性炭（０．２６ｇ）を加え、水素雰囲気下、室温にて４時間攪拌した。ＴＬＣ分析により原料の消失を確認した後に、セライトを用いて不溶物を濾過し、濾液を減圧濃縮した。得られた残査をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝４：１〜２：１）で精製し、４−［２−（５，５−ジメチル−［１，３］ジオキサン−２−イル）エチル］フェニルアミン（０．４８ｇ）を無色粉末として得た。
融点９３．５〜９４．５℃
（５）４−［２−（５，５−ジメチル−［１，３］ジオキサン−２−イル）エチル］フェニルアミン（０．３２ｇ，１．４ｍｍｏｌ）のメタノール（１０ｍｌ）溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（０．３３ｇ，２．８ｍｍｏｌ）を加え、１００℃で４時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、ヒドロキシルアミン１塩酸（０．１４ｇ，１．９ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩攪拌した。さらに塩化ヒドロキシアンモニウム（０．１９ｇ，２．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間、６０℃で６．５時間反応させた。反応液を室温まで冷却後、飽和食塩水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮して得られた残査をＮＨシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１〜１：２）で精製し、標題化合物（０．２５ｇ）を無色粉末として得た。
融点１５９．０〜１６０．０℃
【実施例８】
Ｎ−｛４−［３−（５，５−ジメチル−［１，３］ジオキサン−２−イル）プロピル］フェニル｝−Ｎ’−ヒドロキシホルムアミジンの製造
エチル４−ニトロシンナメートの代わりに４−（４−ニトロフェニル）ブチリックアシドを出発原料に用いて実施例７と同様な方法にて標題化合物を合成した。
融点１３８．０〜１４０．０℃（無色粉末）
実施例１〜８で合成した化合物の構造式を以下に示す。
試験例［ヒト腎ミクロソーム由来２０−ＨＥＴＥ産生酵素の阻害作用］
上記表記載の化合物について、２０−ＨＥＴＥ産生阻害作用を試験した。
本試験はＪ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，第２６８巻，４７４頁，１９９４年に記載の方法に準拠して行った。
ＤＭＳＯで１μＭに調製した被験薬溶液を、５ｍＭの塩化マグネシウム及び１ｍＭのエチレンジアミンテトラアセティックアシッド ジソディウムソルト（ＥＤＴＡ）を含む５０ｍＭの３−モルホリノプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）（ｐＨ７．４）緩衝液に加え、酵素源としてヒト腎ミクロソーム画分（Ｈｕｍａｎ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ，Ａｎａｔｏｍｉｃ Ｇｉｆｔ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ）、基質として［５，６，８，９，１１，１２，１４，１５］トリチウム−アラキドン酸、そして補酵素としてＮＡＤＰＨを添加し、３７度で１．５時間反応させた。反応液にギ酸を添加して反応を停止させた後、アセトニトリル（終濃度５０％）を加えた。ＯＤＳカラム（バイオシルＣ１８，バイオラッド社製）を装着した放射性物質検出器付き高速液体クロマトグラフィーを用いて２０−ＨＥＴＥの産生量を測定した。化合物無添加時の２０−ＨＥＴＥの産生量を１００％とし、化合物を添加した時の２０−ＨＥＴＥ産生が５０％阻害される化合物濃度（ＩＣ５０値）を算出した。その結果について表１に示す。
【産業上の利用可能性】
本発明に係る化合物は２０−ＨＥＴＥ産生阻害作用を有し、ヒト及び動物における２０−ＨＥＴＥが関わる疾病、例えば各種腎疾患、脳血管疾患、各種循環器疾患治療薬として有用である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
（式中、Ｒ１は水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基又はハロゲン原子を示し、ＡはＣ１−１０アルキレン基又は式
（式中、ｍ、ｎ及びｐは各々０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、ＲはＮ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基、ジオキサニル基、Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基、Ｃ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基又は式
（式中、ｓ及びｔは各々１〜４の整数を示し、Ｂはメチレン基、酸素原子、硫黄原子、窒素原子、Ｃ１−４アルキル基で置換された窒素原子、フェニル基で置換された窒素原子又はベンジル基で置換された窒素原子を示し、Ｒ２は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し、ｒは０〜２の整数を示す。）で表される基を示す。）で表されるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項２】
式
（式中、Ａ′はＣ１−１０アルキレン基であり、Ｒ′はＮ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基、ピロリジニル基、ジオキサニル基、Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基又はＣ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基である。）で表されるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項３】
請求の範囲１又は２記載のＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を有効成分とする医薬。
【請求項４】
２０−ＨＥＴＥ産生酵素阻害剤である請求項３記載の医薬。
【請求項５】
腎疾患、脳血管疾患又は循環器疾患治療薬である請求項３記載の医薬。
【請求項１】
式
（式中、Ｒ１は水素原子、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基又はハロゲン原子を示し、ＡはＣ１−１０アルキレン基又は式
（式中、ｍ、ｎ及びｐは各々０〜４の整数を示す。）で表される基を示し、ＲはＮ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基、ジオキサニル基、Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基、Ｃ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基又は式
（式中、ｓ及びｔは各々１〜４の整数を示し、Ｂはメチレン基、酸素原子、硫黄原子、窒素原子、Ｃ１−４アルキル基で置換された窒素原子、フェニル基で置換された窒素原子又はベンジル基で置換された窒素原子を示し、Ｒ２は水素原子又はＣ１−４アルキル基を示し、ｒは０〜２の整数を示す。）で表される基を示す。）で表されるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項２】
式
（式中、Ａ′はＣ１−１０アルキレン基であり、Ｒ′はＮ，Ｎ−ジＣ１−６アルキルアミノ基、ピロリジニル基、ジオキサニル基、Ｃ１−４アルキル基で置換されたジオキサニル基又はＣ１−４アルコキシＣ１−４アルコキシ基である。）で表されるＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項３】
請求の範囲１又は２記載のＮ−ヒドロキシホルムアミジン誘導体又はその製薬学的に許容される塩を有効成分とする医薬。
【請求項４】
２０−ＨＥＴＥ産生酵素阻害剤である請求項３記載の医薬。
【請求項５】
腎疾患、脳血管疾患又は循環器疾患治療薬である請求項３記載の医薬。
【国際公開番号】ＷＯ２００４／０２４６７７
【国際公開日】平成１６年３月２５日（２００４．３．２５）
【発行日】平成１８年１月５日（２００６．１．５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００４−５３５９４０（Ｐ２００４−５３５９４０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００３／０１１６０３
【国際出願日】平成１５年９月１１日（２００３．９．１１）
【出願人】（０００００２８１９）大正製薬株式会社 (437)
【Ｆターム（参考）】
【国際公開日】平成１６年３月２５日（２００４．３．２５）
【発行日】平成１８年１月５日（２００６．１．５）
【国際特許分類】
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＪＰ２００３／０１１６０３
【国際出願日】平成１５年９月１１日（２００３．９．１１）
【出願人】（０００００２８１９）大正製薬株式会社 (437)
【Ｆターム（参考）】
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