説明

Nicotiana核酸分子およびその用途

【課題】より望ましい生殖質および特に非GMO(遺伝子操作生物)型生殖質を開発するための育種計画における使用のための望ましい形質を有するタバコを含む植物生殖質の開発方法を提供する。
【解決手段】Nicotiana植物におけるNicotiana核酸配列、例えば構成的またはエチレンもしくは老化誘導性ポリペプチドをコードする配列、特にシトクロムp450酵素をコードする配列、ならびに例えば育種プロトコールを用いることにより、所望の形質を改変するための、これらの核酸配列および植物の使用方法。


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【特許請求の範囲】
【請求項1】
(a)変異体ニコチンデメチラーゼ遺伝子発現を有する第1タバコ植物を準備し、
(b)少なくとも1つの表現型形質を含有する第2タバコ植物を準備し、
(c)第1タバコ植物と第2タバコ植物とを交配させてF1後代植物を得、
(d)変異体ニコチンデメチラーゼ遺伝子発現のために該F1後代の種子を集め、
(e)該種子を発芽させて、ニコチンデメチラーゼ遺伝子の発現の低下を伴うタバコ植物を得る工程を含んでなる、ニコチンデメチラーゼ遺伝子の発現の低下を伴うタバコ植物を生産するための育種方法。
【請求項2】
第1タバコ植物が、変異を有する内因性ニコチンデメチラーゼ遺伝子を含む、請求項1記載の方法。
【請求項3】
第1タバコ植物が含む変異が欠失、置換、点変異、転座、逆位、重複または挿入である、請求項2記載の方法。
【請求項4】
第1タバコ植物が、ヌル変異を有するニコチンデメチラーゼ遺伝子を含む、請求項1記載の方法。
【請求項5】
内因性ニコチンデメチラーゼ遺伝子をサイレンシングする組換え遺伝子を含む、請求項1記載の方法。
【請求項6】
酵素活性の低下または改変を伴うニコチンデメチラーゼを含む、請求項1記載の方法。
【請求項7】
第1タバコ植物がトランスジェニック植物である、請求項1記載の方法。
【請求項8】
第1タバコ植物が、Nicotiana africana, Nicotiana amplexicaulis, Nicotiana arentsii, Nicotiana benthamiana, Nicotiana bigelovii, Nicotiana corymbosa, Nicotiana debneyi, Nicotiana excelsior, Nicotiana exigua, Nicotiana glutinosa, Nicotiana goodspeedii, Nicotiana gossei, Nicotiana hesperis, Nicotiana ingulba, Nicotiana knightiana, Nicotiana maritima, Nicotiana megalosiphon, Nicotiana miersii, Nicotiana nesophila, Nicotiana noctiflora, Nicotiana nudicaulis, Nicotiana otophora, Nicotiana palmeri, Nicotiana paniculata, Nicotiana petunioides, Nicotiana plumbaginifolia, Nicotiana repanda, Nicotiana rosulata, Nicotiana rotundifolia, Nicotiana rustica, Nicotiana setchelli, Nicotiana stocktonii, Nicotiana eastii, Nicotiana suaveolensまたはNicotiana trigonophyllaを含む、請求項1記載の方法。
【請求項9】
第1タバコ植物が、Nicotiana amplexicaulis, Nicotiana benthamiana, Nicotiana bigelovii, Nicotiana debneyi, Nicotiana excelsior, Nicotiana glutinosa, Nicotiana goodspeedii, Nicotiana gossei, Nicotiana hesperis, Nicotiana knightiana, Nicotiana maritima, Nicotiana megalosiphon, Nicotiana nudicaulis, Nicotiana paniculata, Nicotiana plumbaginifolia, Nicotiana repanda, Nicotiana rustica, Nicotiana suaveolensまたはNicotiana trigonophyllaを含む、請求項8記載の方法。
【請求項10】
第1タバコ植物がNicotiana tabacumである、請求項1記載の方法。
【請求項11】
第1タバコ植物が、オリエンタル、いぶし(dark)タバコ、火力乾燥(フルーキュアリング)もしくは空気乾燥(エアキュアリング)タバコ、バージニア、またはバーレータバコ植物である、請求項1記載の方法。
【請求項12】
第2タバコ植物がNicotiana tabacumである、請求項1記載の方法。
【請求項13】
Nicotiana tabacumが、BU 64, CC 101, CC 200, CC 27, CC 301, CC 400, CC 500, CC 600, CC 700, CC 800, CC 900, Coker 176, Coker 319, Coker 371 Gold, Coker 48, CU 263, DF911, Galpaoタバコ, GL 26H, GL 350, GL 737, GL 939, GL 973, HB 04P, K 149, K 326, K 346, K 358, K 394, K 399, K 730, KT 200, KY 10, KY 14, KY 160, KY 17, KY 171, KY 907, KY 160, Little Crittenden, McNair 373, McNair 944, msKY 14 x L8, Narrow Leaf Madole, NC 100, NC 102, NC 2000, NC 291, NC 297, NC 299, NC 3, NC 4, NC 5, NC 6, NC 606, NC 71, NC 72, NC 810, NC BH 129, OXFORD 207, 'Perique'タバコ, PVH03, PVH09, PVH19, PVH50, PVH51, R 610, R 630, R 7-11, R 7-12, RG 17, RG 81, RG H4, RG H51, RGH 4, RGH 51, RS 1410, SP 168, SP 172, SP 179, SP 210, SP 220, SP G-28, SP G-70, SP H20, SP NF3, TN 86, TN 90, TN 97, TN D94, TN D950, TR (Tom Rosson) Madole, VA 309, VA 309またはVA 359である、請求項11記載の方法。
【請求項14】
第2タバコ植物が、オリエンタル、いぶし(dark)タバコ、火力乾燥(フルーキュアリング)もしくは空気乾燥(エアキュアリング)タバコ、バージニア、またはバーレータバコ植物である、請求項1記載の方法。
【請求項15】
該表現型形質が、耐病性、高い収量、高い等級指標、乾燥性、乾燥の質、機械的収穫性、保持能(holding ability)、葉の質、丈、成熟度、柄のサイズ、または植物当たりの葉数を含む、請求項1記載の方法。
【請求項16】
雄性不稔体または工程(b)の植物との雄性不稔雑種を受粉させることを更に含む、請求項1記載の方法。
【請求項17】
工程(e)の発芽種子から得た植物を戻し交配または受粉させることを更に含む、請求項1記載の方法。
【請求項18】
a)変異体ニコチンデメチラーゼ遺伝子発現を有する第1タバコ植物を第2タバコ植物と交配させ、
b)該交配の後代タバコ植物を得、
c)後代タバコ植物からDNAサンプルを抽出し、
d)該DNAサンプルを、ニコチンデメチラーゼ遺伝子またはその断片にハイブリダイズするマーカー核酸分子と接触させ、
e)該変異体ニコチンデメチラーゼ遺伝子発現形質に関するマーカー補助育種法(marker assisted breeding method)を行う工程を含む、タバコ植物内へニコチンデメチラーゼ欠損形質を育種するための方法。
【請求項19】
該マーカー補助育種法(marker assisted breeding method)が、増幅断片長多型、制限断片長多型、ランダム増幅多型提示、一塩基多型、マイクロサテライトマーカー、またはタバコゲノムにおける標的化誘導性局所損傷(targetted induced local lesion)の利用を含む、請求項18記載の方法。
【請求項20】
Nicotiana africana, Nicotiana amplexicaulis, Nicotiana arentsii, Nicotiana benthamiana, Nicotiana bigelovii, Nicotiana corymbosa, Nicotiana debneyi, Nicotiana excelsior, Nicotiana exigua, Nicotiana glutinosa, Nicotiana goodspeedii, Nicotiana gossei, Nicotiana hesperis, Nicotiana ingulba, Nicotiana knightiana, Nicotiana maritima, Nicotiana megalosiphon, Nicotiana miersii, Nicotiana nesophila, Nicotiana noctiflora, Nicotiana nudicaulis, Nicotiana otophora, Nicotiana palmeri, Nicotiana paniculata, Nicotiana petunioides, Nicotiana plumbaginifolia, Nicotiana repanda, Nicotiana rosulata, Nicotiana rotundifolia, Nicotiana rustica, Nicotiana setchelli, Nicotiana stocktonii, Nicotiana eastii, Nicotiana suaveolensおよびNicotiana trigonophyllaよりなる群から選ばれるタバコ植物のいずれかをそれ自身と又は第2の異なるタバコと交配させることを含む、タバコ種子の生産方法。
【請求項21】
変異体ニコチンデメチラーゼ遺伝子発現を有する第1タバコ植物を第2の異なるタバコ植物と交配させることを含む、雑種タバコ種子の生産方法を含む、請求項20記載の生産方法。
【請求項22】
交配が、
(a)変異体ニコチンデメチラーゼ遺伝子発現を有するタバコ植物と第2の異なるタバコ植物との交配から得られた種子を植え、
(b)該種子からのタバコ植物を成長させて、該植物を開花させ、
(c)変異体ニコチンデメチラーゼ遺伝子発現を有するタバコ植物の花を第2のタバコ植物からの花粉で受粉させ、あるいは第2のタバコ植物の花を、変異体ニコチンデメチラーゼ遺伝子発現を有するタバコ植物の花からの花粉で受粉させ、
(d)該受粉から得られた種子を収穫する工程を含む、請求項21記載の生産方法。
【請求項23】
(a)変異体ニコチンデメチラーゼ遺伝子発現を有するタバコ植物またはその成分を準備し、
(b)タバコ植物育種技術を用いて育種材料源として該植物または成分を使用することを含む、タバコ育種計画においてタバコ植物を開発するための方法。
【請求項24】
該植物育種技術が、集団選抜(bulk selection)、戻し交配、自家受粉、移入交雑、系統選抜、純系選抜、半数体/倍加半数体育種または単粒系統法を含む、請求項23記載の方法。
【請求項25】
請求項1、18、20または23のいずれか1項に従い製造されたタバコ植物またはその成分。
【請求項26】
変異体ニコチンデメチラーゼ遺伝子発現を有するタバコ植物の生理学的および形態学的特徴のすべてを発現しうるタバコ植物を再生する、請求項1、18、20または23のいずれか1項に従い生産された植物のいずれかから得られた再生可能なタバコ細胞の組織培養。
【請求項27】
再生可能な細胞が、胚、分裂細胞、種子、花粉、葉、根、根端または花であり、あるいはそれらに由来するプロトプラストまたはカルスである、請求項26記載の組織培養。
【請求項28】
(a)請求項1、18、20または23のいずれか1項に従い生産されたタバコ植物を準備し、(b)該タバコ植物からタバコ製品を製造することを含んでなる、タバコ製品の製造方法。
【請求項29】
該タバコ製品が、乾燥した葉または茎(stem)である、請求項28記載の製造方法。
【請求項30】
該タバコ製品が無煙タバコ製品である、請求項28記載の製造方法。
【請求項31】
該タバコ製品が湿性もしくは乾燥かぎタバコ、噛みタバコ、巻きタバコ製品、葉巻製品、シガリーロ、パイプタバコまたはビーディ(bidi)である、請求項28記載のタバコ製品。
【請求項32】
(a)図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸分子の変異体遺伝子発現を含む修飾された属性を有する第1タバコ植物を準備し、
(b)少なくとも1つの表現型形質を含有する第2タバコ植物を準備し、
(c)第1タバコ植物を第2タバコ植物と交配させてF1後代植物を得、
(d)前記の修飾された属性の該F1後代の種子を集め、
(e)該種子を発芽させて、前記の修飾された属性を有するタバコ植物を得る工程を含んでなる、修飾された属性を有するタバコ植物を生産するための育種方法。
【請求項33】
第1タバコ植物が、変異を含む、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる内因性核酸分子を含む、請求項32記載の方法。
【請求項34】
第1タバコ植物が、欠失、置換、点変異、転座、逆位、重複または挿入である変異を含む、請求項33記載の方法。
【請求項35】
第1タバコ植物が、ヌル変異を含む、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる内因性核酸分子を含む、請求項32記載の方法。
【請求項36】
第1タバコ植物が、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる内因性核酸分子の発現をサイレンシングする組換え遺伝子を含む、請求項32記載の方法。
【請求項37】
第1タバコ植物は、低下または変化した酵素活性を有するポリペプチドをコードする、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる内因性核酸分子を含む、請求項32記載の方法。
【請求項38】
第1タバコ植物がトランスジェニック植物である、請求項32記載の方法。
【請求項39】
第1タバコ植物が、Nicotiana africana, Nicotiana amplexicaulis, Nicotiana arentsii, Nicotiana benthamiana, Nicotiana bigelovii, Nicotiana corymbosa, Nicotiana debneyi, Nicotiana excelsior, Nicotiana exigua, Nicotiana glutinosa, Nicotiana goodspeedii, Nicotiana gossei, Nicotiana hesperis, Nicotiana ingulba, Nicotiana knightiana, Nicotiana maritima, Nicotiana megalosiphon, Nicotiana miersii, Nicotiana nesophila, Nicotiana noctiflora, Nicotiana nudicaulis, Nicotiana otophora, Nicotiana palmeri, Nicotiana paniculata, Nicotiana petunioides, Nicotiana plumbaginifolia, Nicotiana repanda, Nicotiana rosulata, Nicotiana rotundifolia, Nicotiana rustica, Nicotiana setchelli, Nicotiana stocktonii, Nicotiana eastii, Nicotiana suaveolensまたはNicotiana trigonophyllaを含む、請求項32記載の方法。
【請求項40】
第1タバコ植物がNicotiana tabacumである、請求項32記載の方法。
【請求項41】
第1タバコ植物が、オリエンタル、いぶし(dark)タバコ、火力乾燥(フルーキュアリング)もしくは空気乾燥(エアキュアリング)タバコ、バージニア、またはバーレータバコ植物である、請求項32記載の方法。
【請求項42】
第2タバコ植物がNicotiana tabacumである、請求項32記載の方法。
【請求項43】
Nicotiana tabacumが、BU 64, CC 101, CC 200, CC 27, CC 301, CC 400, CC 500, CC 600, CC 700, CC 800, CC 900, Coker 176, Coker 319, Coker 371 Gold, Coker 48, CU 263, DF911, Galpaoタバコ, GL 26H, GL 350, GL 737, GL 939, GL 973, HB 04P, K 149, K 326, K 346, K 358, K 394, K 399, K 730, KT 200, KY 10, KY 14, KY 160, KY 17, KY 171, KY 907, KY 160, Little Crittenden, McNair 373, McNair 944, msKY 14 x L8, Narrow Leaf Madole, NC 100, NC 102, NC 2000, NC 291, NC 297, NC 299, NC 3, NC 4, NC 5, NC 6, NC 606, NC 71, NC 72, NC 810, NC BH 129, OXFORD 207, 'Perique'タバコ, PVH03, PVH09, PVH19, PVH50, PVH51, R 610, R 630, R 7-11, R 7-12, RG 17, RG 81, RG H4, RG H51, RGH 4, RGH 51, RS 1410, SP 168, SP 172, SP 179, SP 210, SP 220, SP G-28, SP G-70, SP H20, SP NF3, TN 86, TN 90, TN 97, TN D94, TN D950, TR (Tom Rosson) Madole, VA 309, VA 309またはVA 359である、請求項32記載の方法。
【請求項44】
第1タバコ植物が、オリエンタル、いぶし(dark)タバコ、火力乾燥(フルーキュアリング)もしくは空気乾燥(エアキュアリング)タバコ、バージニア、またはバーレータバコ植物である、請求項32記載の方法。
【請求項45】
該表現型形質が、耐病性、高い収量、高い等級指標、乾燥性、乾燥の質、機械的収穫性、保持能(holding ability)、葉の質、丈、植物成熟度、柄のサイズ、または植物当たりの葉数を含む、請求項32記載の方法。
【請求項46】
雄性不稔体または工程(b)の植物との雄性不稔雑種を受粉させることを更に含む、請求項32記載の方法。
【請求項47】
工程(e)の発芽種子から得た植物を戻し交配または受粉させることを更に含む、請求項32記載の方法。
【請求項48】
a)図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸分子の変異体遺伝子発現を含む修飾された属性を有する第1タバコ植物を、第2タバコ植物と交配させ、
b)該交配の後代タバコ植物を得、
c)後代タバコ植物からDNAサンプルを抽出し、
d)該DNAサンプルを、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列またはそれらの断片にハイブリダイズするマーカー核酸分子と接触させ、
e)修飾された属性に関するマーカー補助育種法(marker assisted breeding method)を行う工程を含んでなる、タバコ植物内へ属性を育種するための方法。
【請求項49】
該マーカー補助育種法(marker assisted breeding method)は、増幅断片長多型、制限断片長多型、ランダム増幅多型提示、一塩基多型、マイクロサテライトマーカー、またはタバコゲノムにおける標的化誘導性局所損傷(targetted induced local lesion)の利用を含む、請求項48記載の方法。
【請求項50】
Nicotiana africana, Nicotiana amplexicaulis, Nicotiana arentsii, Nicotiana benthamiana, Nicotiana bigelovii, Nicotiana corymbosa, Nicotiana debneyi, Nicotiana excelsior, Nicotiana exigua, Nicotiana glutinosa, Nicotiana goodspeedii, Nicotiana gossei, Nicotiana hesperis, Nicotiana ingulba, Nicotiana knightiana, Nicotiana maritima, Nicotiana megalosiphon, Nicotiana miersii, Nicotiana nesophila, Nicotiana noctiflora, Nicotiana nudicaulis, Nicotiana otophora, Nicotiana palmeri, Nicotiana paniculata, Nicotiana petunioides, Nicotiana plumbaginifolia, Nicotiana repanda, Nicotiana rosulata, Nicotiana rotundifolia, Nicotiana rustica, Nicotiana setchelli, Nicotiana stocktonii, Nicotiana eastiiおよびNicotiana suaveolensよりなる群から選ばれる第1タバコ植物を、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸分子の変異体遺伝子発現を含む修飾された属性を有する第2タバコ植物と交配させることを含む、タバコ種子の生産方法。
【請求項51】
第2タバコ植物がNicotiana tabacumである、請求項50記載の生産方法。
【請求項52】
Nicotiana tabacumが、BU 64, CC 101, CC 200, CC 27, CC 301, CC 400, CC 500, CC 600, CC 700, CC 800, CC 900, Coker 176, Coker 319, Coker 371 Gold, Coker 48, CU 263, DF911, Galpaoタバコ, GL 26H, GL 350, GL 737, GL 939, GL 973, HB 04P, K 149, K 326, K 346, K 358, K 394, K 399, K 730, KT 200, KY 10, KY 14, KY 160, KY 17, KY 171, KY 907, KY 160, Little Crittenden, McNair 373, McNair 944, msKY 14 x L8, Narrow Leaf Madole, NC 100, NC 102, NC 2000, NC 291, NC 297, NC 299, NC 3, NC 4, NC 5, NC 6, NC 606, NC 71, NC 72, NC 810, NC BH 129, OXFORD 207, 'Perique'タバコ, PVH03, PVH09, PVH19, PVH50, PVH51, R 610, R 630, R 7-11, R 7-12, RG 17, RG 81, RG H4, RG H51, RGH 4, RGH 51, RS 1410, SP 168, SP 172, SP 179, SP 210, SP 220, SP G-28, SP G-70, SP H20, SP NF3, TN 86, TN 90, TN 97, TN D94, TN D950, TR (Tom Rosson) Madole, VA 309, VA 309またはVA 359である、請求項51記載の生産方法。
【請求項53】
交配が、
(a)修飾された属性を有するタバコ植物と第2の異なるタバコ植物との交配から得られた種子を植え、
(b)該種子からのタバコ植物を成長させて、該植物を開花させ、
(c)修飾された属性を有するタバコ植物の花を第2のタバコ植物からの花粉で受粉させ、あるいは第2のタバコ植物の花を、修飾された属性を有するタバコ植物の植物からの花粉で受粉させ、
(d)該受粉から得られた種子を収穫する工程を含んでなる、請求項51記載の生産方法。
【請求項54】
(a)図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸分子の変異体遺伝子発現を含む修飾された属性を有するタバコ植物またはその成分を準備し、
(b)タバコ植物育種技術を用いて育種材料源として該植物または植物成分を使用することを含んでなる、タバコ育種計画においてタバコ植物を開発するための方法。
【請求項55】
該植物育種技術が、集団選抜(bulk selection)、戻し交配、自家受粉、移入交雑、系統選抜、純系選抜、半数体/倍加半数体育種または単粒系統法を含む、請求項54記載の方法。
【請求項56】
請求項32、48または54のいずれか1項に従い製造されたタバコ植物またはその成分。
【請求項57】
修飾された属性を有するタバコ植物の生理学的および形態学的特徴のすべてを発現しうるタバコ植物を再生する、請求項32、48、50または54のいずれか1項に従い生産された植物のいずれかから得られた再生可能なタバコ細胞の組織培養。
【請求項58】
再生可能な細胞が、胚、分裂細胞、種子、花粉、葉、根、根端または花であり、あるいはそれらに由来するプロトプラストまたはカルスである、請求項57記載の組織培養。
【請求項59】
(a)請求項32、48、50または54のいずれか1項に従い生産されたタバコ植物を準備し、(b)該タバコ植物からタバコ製品を製造することを含んでなる、タバコ製品の製造方法。
【請求項60】
該タバコ製品が、乾燥した葉または茎(stem)である、請求項59記載の製造方法。
【請求項61】
該タバコ製品が無煙タバコ製品である、請求項59記載の製造方法。
【請求項62】
該タバコ製品が湿性もしくは乾燥かぎタバコ、噛みタバコ、巻きタバコ製品、葉巻製品、シガリーロ、パイプタバコまたはビーディ(bidi)である、請求項59記載のタバコ製品。
【請求項63】
図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸配列に対して実質的に同一である核酸配列を含んでなる単離された遺伝的マーカー。
【請求項64】
該核酸配列が、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸配列に対して少なくとも70%同一である核酸配列を含んでなる、請求項63記載の単離された遺伝的マーカー。
【請求項65】
該核酸配列が、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸配列の相補体にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする配列を含む、請求項63記載の単離された遺伝的マーカー。
【請求項66】
該核酸配列が構成的またはエチレンもしくは老化誘導性である、請求項63記載の単離された遺伝的マーカー。
【請求項67】
該核酸配列が、図1、図3および4、図10〜158、図160A〜160E、図162〜170ならびに図172-1〜172-19に示すアミノ酸配列よりなる群から選ばれるアミノ酸配列と実質的に同一であるポリペプチドをコードしている、請求項63記載の単離された遺伝的マーカー。
【請求項68】
該核酸配列が異種遺伝子に機能しうる形で連結されている、請求項63記載の単離された遺伝的マーカー。
【請求項69】
該核酸配列が、誘導性、構成的、病原体もしくは創傷誘導性、環境もしくは発生調節性または細胞もしくは組織特異的プロモーターに機能しうる形で連結されている、請求項63記載の単離された遺伝的マーカー。
【請求項70】
図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸配列を含んでなり、該核酸配列によりコードされるポリペプチドの発現を導きうる発現ベクター。
【請求項71】
植物または植物成分において発現される図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる単離された核酸配列を含んでなる該植物または該植物成分。
【請求項72】
該植物または植物成分がNicotiana種である、請求項71記載の植物または植物成分。
【請求項73】
該Nicotiana種が、表8に示すNicotiana種の群から選ばれる、請求項72記載の植物または植物成分。
【請求項74】
該植物成分が葉、茎(stem)または種子である、請求項71記載の植物または植物成分。
【請求項75】
該葉が、乾燥したタバコ葉である、請求項74記載の植物または植物成分。
【請求項76】
請求項71記載の植物または植物成分を含んでなるタバコ製品。
【請求項77】
該タバコ製品が無煙タバコ製品である、請求項76記載のタバコ製品。
【請求項78】
該タバコ製品が湿性もしくは乾燥かぎタバコ、噛みタバコ、巻きタバコ製品、葉巻製品、シガリーロ、パイプタバコまたはビーディ(bidi)である、請求項76記載のタバコ製品。
【請求項79】
請求項74記載の発芽種子から生産された植物。
【請求項80】
植物細胞における内因性構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドのレベルまたは酵素活性を低下させることを含んでなる、該植物細胞における構成的またはエチレン誘導性もしくは老化誘導性タバコポリペプチドの発現または酵素活性を低下させるための方法。
【請求項81】
該タバコポリペプチドがp450である、請求項80記載の方法。
【請求項82】
該植物細胞がNicotiana種である、請求項80記載の方法。
【請求項83】
該Nicotiana種が、表8に示すNicotiana種の群から選ばれる、請求項82記載の方法。
【請求項84】
該内因性構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドのレベルを低下させることが、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸配列のアンチセンス核酸分子をコードするトランスジーンを該植物細胞において発現させることを含む、請求項80記載の方法。
【請求項85】
該構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドのレベルを低下させることが、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸配列を含むトランスジーンを発現させることを含み、該トランスジーンが、該植物細胞において構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドの二本鎖RNA分子をコードしている、請求項80記載の方法。
【請求項86】
該内因性構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドのレベルを低下させることが、該植物細胞における該構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドの共抑制(co-suppression)を含む、請求項80記載の方法。
【請求項87】
該内因性構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドのレベルを低下させることが、該植物細胞においてドミナントネガティブ遺伝子産物を発現させることを含む、請求項80記載の方法。
【請求項88】
該内因性構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドが、図1、図3および4、図10〜158、図160A〜160E、図162〜170ならびに図172-1〜172-19に示すアミノ酸配列よりなる群から選ばれるアミノ酸配列をコードする遺伝子内に変異を含む、請求項87記載の方法。
【請求項89】
該発現の低下が、転写レベル、翻訳レベルまたは翻訳後レベルにおいて生じる、請求項80記載の方法。
【請求項90】
植物細胞における内因性構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドのレベルまたは酵素活性を上昇させることを含んでなる、該植物細胞における構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドの発現または酵素活性を上昇させるための方法。
【請求項91】
該植物細胞がNicotiana種である、請求項90記載の方法。
【請求項92】
該Nicotiana種が、表8に示すNicotiana種の群から選ばれる、請求項91記載の方法。
【請求項93】
該構成的またはエチレンもしくは老化誘導性タバコポリペプチドのレベルを上昇させることが、図1、図3〜7、図10〜158、図162〜170、図172-1〜172-19および図173-1〜173-294に示す核酸配列よりなる群から選ばれる核酸配列を含むトランスジーンを該植物細胞において発現させることを含む、請求項90記載の方法。
【請求項94】
該発現の低下が、転写レベル、翻訳レベルまたは翻訳後レベルにおいて生じる、請求項90記載の方法。

【図1】
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【図2】
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【図3−1】
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【図3−2】
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【図3−3】
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【図4】
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【図5】
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【図6】
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【図7】
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【図8】
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【図9】
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【図10】
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【図11】
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【図12】
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【図13】
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【図14】
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【図15】
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【図16】
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【図17】
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【図18】
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【図19】
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【図20】
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【図21】
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【図22】
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【図23】
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【図24】
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【図25】
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【図26】
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【図30】
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【図31】
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【図34】
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【図35】
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【図36】
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【図40】
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【図41】
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【図45】
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【図46】
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【図49】
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【図50】
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【図51】
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【図52】
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【図53】
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【図55】
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【図56】
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【図57】
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【図60】
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【図65】
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【図159A】
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【図159B】
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【図159C】
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【図159D】
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【図159E】
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【図159F】
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【図159G】
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【図159H】
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【図159I】
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【図159K】
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【図160A】
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【図161】
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【図173−288】
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【図173−289】
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【図173−290】
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【図173−291】
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【図173−292】
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【図173−293】
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【図173−294】
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【公開番号】特開2011−177178(P2011−177178A)
【公開日】平成23年9月15日(2011.9.15)
【国際特許分類】
【出願番号】特願2011−62976(P2011−62976)
【出願日】平成23年3月22日(2011.3.22)
【分割の表示】特願2007−511013(P2007−511013)の分割
【原出願日】平成17年4月27日(2005.4.27)
【出願人】(398069229)ユーエス スモークレス タバコ カンパニー リミテッド ライアビリティ カンパニー (20)
【Fターム(参考)】