本発明は、ｍが０、１、または２であり、ＸがＯ、Ｓ、またはＮ−ＣＮであり、ＲがＦ、Ｃｌ、またはＣＮであり、Ａが、Ｃ_１〜４アルキル基で置換されていてもよいＣ_３〜_６シクロアルキレン基であり、Ｂが単結合またはＣ_１〜２アルキレン基である式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグを提供する。この化合物は、ＰＤＥ７阻害剤であり、特に疼痛、とりわけ神経因性疼痛の治療においていくつかの治療用途を有する。

【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、スピロ環式誘導体、ならびにそのような誘導体の調製方法、その調製で使用する中間体、それを含有する組成物、およびその使用に関する。
【０００２】
本発明のスピロ環式誘導体は、ＰＤＥ７阻害剤であり、特に疼痛、特に神経因性疼痛の治療においていくつかの治療用途を有する。
【背景技術】
【０００３】
ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）は、セカンドメッセンジャー分子のｃＡＭＰおよびｃＧＭＰを対応する不活性な５’−一リン酸ヌクレオチドに加水分解し、それによりその生理的なレベルを調節する過程によって、様々な細胞内シグナル伝達過程に影響を及ぼす酵素のファミリーである。二次的なメッセンジャーであるｃＡＭＰおよびｃＧＭＰは、数多くの細胞内過程の調節を司る。ＰＤＥファミリーは、少なくとも１１種あり、ｃＡＭＰに特異的なもの（ＰＤＥ３、４、７、８）もあれば、ｃＧＭＰに特異的なもの（ＰＤＥ５、６、および９）もある。
【０００４】
ＰＤＥ７は、ＰＤＥファミリーの一員であり、２種のサブクラスメンバーＰＤＥ７ＡおよびＢを含む。ＰＤＥ７のｍＲＮＡは、Ｔ細胞関連障害などのいくつかの疾患の病因において重要であることがわかっている様々な組織および細胞型で発現される。特にＰＤＥ７Ａおよびそのスプライスバリアントは、活性化型Ｔ細胞中（Ｌ．Ｌｉ、Ｃ．Ｙｅｅ、およびＪ．Ａ．Ｂｅａｖｏ、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９９年）、第２８３巻、８４８〜８５１ページ）およびＢリンパ球中（Ｒ．Ｌｅｅ、Ｓ．Ｗｏｌｄａ、Ｅ．Ｍｏｏｎ、Ｊ．Ｅｓｓｅｌｓｔｙｎ、Ｃ．Ｈｅｒｔｅｌ、およびＡ．Ｌｅｒｎｅｒ、Ｃｅｌｌ．Ｓｉｇｎａｌ（２００２年）、第１４巻、２７７〜２８４ページ）、自己免疫疾患（Ｌ．Ｌｉら、上記）、ならびに気道疾患（Ｓ．Ｊ．Ｓｍｉｔｈら、Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｌｕｎｇ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．（２００３年）、第２８４巻、Ｌ２７９〜Ｌ２８９ページ）で上方制御される。したがって、ＰＤＥ７の選択的阻害剤は、免疫抑制剤として、また呼吸器の状態、たとえば慢性閉塞性肺疾患および喘息の治療薬として広範な用途を有することが予想される（Ｎ．Ａ．Ｇｌａｖａｓ、Ｃ．Ｏｓｔｅｎｓｏｎ、Ｊ．Ｂ．Ｓｃｈａｅｆｅｒ、Ｖ．Ｖａｓｔａ、およびＪ．Ａ．Ｂｅａｖｏ．ＰＮＡＳ（２００１年）、第９８巻、６３１９〜６３２４ページ）。
【０００５】
ラットでの研究は、ＰＤＥ７Ａ ｍＲＮＡが、ラット脳のニューロンおよび非ニューロンの両方の細胞集団中に広く分布しているという知見を示している。最高濃度は嗅球、嗅結節、海馬、小脳、内側手綱核、松果体、最後野、および脈絡叢で認められる。ＰＤＥ７Ａ ｍＲＮＡは、他の非脳組織でも広く検出される。これらの結果は、ＰＤＥ７Ａが多くの脳機能においてｃＡＭＰシグナル伝達の調節に関与していることと一致し、ＰＤＥ７Ａが、記憶、うつ病、および嘔吐に対して効果を有するかもしれないことを示唆している（Ｘ．Ｍｉｒｏ、Ｓ．Ｐｅｒｅｚ−Ｔｏｒｒｅｓ、Ｊ．Ｍ．Ｐａｌａｃｉｏｓ、Ｐ．Ｐｕｉｇｄｏｍｅｎｅｃｈ、Ｇ．Ｍｅｎｇｏｄ、Ｓｙｎａｐｓｅ（２００１年）、第４０巻、２０１〜２１４ページ）。アルツハイマー病との関連も示唆されている（Ｓ．Ｐｅｒｅｚ Ｔｏｒｒｅｓら、Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ（２００３年）第１８２巻、３２２〜３３４ページ）。ＰＤＥ７はさらに、受精障害（ＷＯ０１／８３７７２）および白血病（Ｒ．Ｌｅｅら、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ（２００２年）第１４巻、２７７〜２８４ページ）とも関連付けられている。
【０００６】
ＰＤＥ７Ａは、酵母（Ｔ．Ｍｉｃｈａｅｌｉら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９３年）第２６８巻、１２９２５〜１２９３２ページ）、ヒト（Ｐ．Ｈａｎ、Ｚ．Ｘｉａｏｙａｎ、およびＭ．Ｔａｍａｒ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（１９９７年）第２７２巻、１６１５２〜１６１５７ページ）、マウス（Ｔ．ＢｌｏｏｍおよびＪ．Ａ．Ｂｅａｖｏ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（１９９６年）、第９３巻、１４１８８〜１４１９２ページ）から単離されており、ＰＤＥ７Ａレベルの上方制御は、ヒトＴリンパ球中で見られる（Ｍ．ＩｃｈｉｍｕｒａおよびＨ．Ｋａｓｅ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．（１９９３年）、第１９３巻、９８５〜９９０ページ）。
【０００７】
ＰＤＥ７ファミリーの第２のメンバーであるＰＤＥ７Ｂは、Ｃ末端の触媒ドメインにおいてＰＤＥ７Ａと７０％のアミノ酸相同性を共有している（Ｎ末端ドメインは、ＰＤＥファミリー全体に保存されている、リン酸化部位を含有する調節性ドメインである）。ＰＤＥ７Ｂは、ｃＡＭＰに特異的であり、マウス（受託番号−ＡＪ２５１８５８）およびヒト（受託番号−ＡＪ２５１８６０）供給源からクローン化されている（Ｃ．Ｇａｒｄｎｅｒ、Ｎ．Ｒｏｂａｓ、Ｄ．Ｃａｗｋｉｌｌ、およびＭ．Ｆｉｄｏｃｋ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．（２０００年）、第２７２巻、１８６〜１９２ページ）。ＰＤＥ７Ｂは、広範な種類の組織、すなわち脳の尾状核、被殻、および後頭葉、末梢では心臓、卵巣、下垂体、腎臓、肝臓、小腸、および胸腺、さらには骨格筋、大腸、膀胱、子宮、前立腺、胃、副腎、および甲状腺で発現されることが示されている。ＰＤＥ７Ｂは、いくつかの一般のＰＤＥ阻害剤を識別することも示されている（Ｊ．Ｍ．Ｈｅｔｍａｎ、Ｓ．Ｈ．Ｓｏｄｅｒｌｉｎｇ、Ｎ．Ａ．Ｇｌａｖａｓ、およびＪ．Ａ．Ｂｅａｖｏ、ＰＮＡＳ（２０００年）、第９７巻、４７２〜４７６ページ）。しかし、ザプリナスト、ロリプラム、ミルリノンなどの多くの標準的ＰＤＥ阻害剤は、ＰＤＥ７Ｂを特異的には阻害しない。
【０００８】
ＰＤＥ７の阻害剤は、様々なＰＤＥ７関連疾患の治療で使用されることが知られている。たとえば、ＷＯ０２／０７４７５４は、次式の化合物
【０００９】
【化１】

ならびにＴ細胞関連疾患、自己免疫疾患、骨関節炎、多発性硬化症、骨粗鬆症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、癌、後天性免疫不全症候群、アレルギー、または炎症性腸疾患などのＰＤＥ７関連障害の治療におけるその使用を記載している。
【００１０】
ＷＯ２００４／０２６８１８は、次式の化合物
【００１１】
【化２】

【００１２】
およびＰＤＥ７関連障害の治療におけるその使用を記載している。
【００１３】
ＷＯ２００６／０９２６９１は、神経因性疼痛の治療におけるＰＤＥ７阻害剤の使用を記載している。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
発明者らは、驚いたことに、ＷＯ０２／０７４７５４の一般の開示内に含まれるが、その中で詳細には開示または例示されていない１クラスの化合物が、ＷＯ０２／０７４７５４で例示されている最も近い化合物と比べて予想外に優れた薬物動態特性を示すことを見出した。これらの化合物は、低い身体からのクリアランスを示すことが予想され、１日１回投与したときに治療効果を実現する可能性を有している。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、式（Ｉ）の化合物
【００１６】
【化３】

［式中、
ｍは、０、１、または２であり、
Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮ−ＣＮであり、
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、またはＣＮであり、
Ａは、Ｃ_１〜４アルキル基で置換されていてもよいＣ_３〜６シクロアルキレン基であり、
Ｂは、単結合またはＣ_１〜_２アルキレン基である］
または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグを提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
本発明の文脈では、用語「アルキレン」とは、１または２個の炭素原子を有する二価の飽和炭化水素鎖を示す。アルキレン基の例には、メチレン、エチレン、およびメチルメチレンが含まれ、メチレンが好ましい。
【００１８】
用語「シクロアルキレン」とは、３〜６個の炭素原子を有する二価の飽和炭素環を示す。シクロアルキレン基の例には、シクロプロピレン（たとえば、１，１−シクロプロピレン、シス−およびトランス−１，２−シクロプロピレン）、シクロブチレン（たとえば、１，１−シクロブチレン、シス−およびトランス−１，２−シクロブチレン、シス−およびトランス−１，３−シクロブチレン）、シクロペンチレン（たとえば、１，１−シクロペンチレン、シス−およびトランス−１，２−シクロペンチレン、シス−およびトランス−１，３−シクロペンチレン）、ならびにシクロヘキシレン（たとえば、１，１−シクロヘキシレン、シス−およびトランス−１，２−シクロヘキシレン、シス−およびトランス−１，３−シクロヘキシレン、シス−およびトランス−１，４−シクロヘキシレン）が含まれる。好ましい例には、シクロブチレンおよびシクロヘキシレン、より好ましくはシクロブチレン、さらにより好ましくは１，３−シクロブチレン、最も好ましくはトランス−１，３−シクロブチレンが含まれる。
【００１９】
用語「アルキル」とは、１〜４個の炭素原子を含有している直線状または分枝状の一価の飽和炭化水素鎖を示す。アルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、およびｔ−ブチルが含まれる。好ましい例には、メチルおよびエチル、特にメチルが含まれる。
【００２０】
シクロアルキレン基は、Ｃ_１〜４アルキル基で置換されていてもよい。存在するならば、アルキル置換基は、メチルまたはエチル基、より好ましくはメチル基であることが好ましい。存在するならば、アルキル置換基は、環上のどの位置に存在してもよいが、１位（すなわちカルボン酸基と同位置）に存在することが好ましい。
【００２１】
ｍは、好ましくは１または２、より好ましくは１である。
【００２２】
Ｘは、好ましくはＯまたはＮ−ＣＮ、より好ましくはＯである。
【００２３】
Ｒは、好ましくはＦまたはＣｌ、より好ましくはＣｌである。
【００２４】
Ａは、好ましくは、メチル基で置換されていてもよいシクロブチレンまたはシクロヘキシレン基である。Ａは、より好ましくはシクロブチレン基である。Ａは、さらにより好ましくは１，３−シクロブチレン基、特にトランス−１，３−シクロブチレン基である。
【００２５】
Ｂは、好ましくは単結合またはメチレン基である。Ｂは、より好ましくは単結合である。
【００２６】
本発明の特に好ましい化合物には、式（Ｉ）中の各可変基が、各可変基について好適かつ／または好ましい基から選択されるものが含まれる。本発明のより一層好ましい化合物には、式（Ｉ）中の各可変基が、各可変基についてより好ましいまたは最も好ましい基から選択されるものが含まれる。
【００２７】
以下の化合物が特に好ましい。
シス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
３−［（８’−フルオロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシメチル］シクロブタンカルボン酸、
トランス−３−［（８’−シアノ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
１−［（８’−フルオロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシメチル］シクロブタンカルボン酸、
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘプチル−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロペンチル−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
ならびにこれらの薬学的に許容できる塩、溶媒和物、およびプロドラッグ。
【００２８】
以下の化合物が特に好ましい。
シス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
ならびにこれらの薬学的に許容できる塩、溶媒和物、多形体、およびプロドラッグ。
【００２９】
特に以下で記載する溶媒和していない結晶形態（Ａ型）として、および以下で記載する酢酸溶媒和物としてのトランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸化合物、ならびに薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、およびプロドラッグが最も好ましい。
【００３０】
一実施形態では、本発明は、Ｃｕ Ｋα放射線照射（波長＝１．５４０６Å）を使用して測定したとき以下の粉末Ｘ線回折ピーク、すなわち６．３、１７．８、２１．５、２２．１、２２．４、２６．３（２θ、±０．１°の度数）を特徴とする、溶媒和していない結晶形態（Ａ型）のトランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］−シクロブタンカルボン酸化合物を含む。
【００３１】
別の実施形態では、本発明は、Ｃｕ Ｋα放射線照射（波長＝１．５４０６Å）を使用して測定したとき以下の粉末Ｘ線回折ピーク、すなわち８．３、１０．８、１６．６、１７．１、１９．５、２０．５、２３．７（２θ、±０．１°の度数）を特徴とする、酢酸溶媒和物としてのトランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］−シクロブタンカルボン酸化合物を含む。
【００３２】
本発明はさらに、その最も広い態様もしくは好ましい態様の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグと、薬学的に許容できる担体または希釈剤とを含む医薬組成物を含む。
【００３３】
本発明はさらに、医薬として使用するための、その最も広い態様もしくは好ましい態様の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグを含む。
【００３４】
本発明はさらに、ＰＤＥ７阻害剤による治療が適切である疾患または状態を治療する医薬の製造における、その最も広い態様もしくは好ましい態様の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグの使用を含む。
【００３５】
本発明はさらに、ＰＤＥ７阻害剤による治療が適切である疾患または状態の治療方法であって、その最も広い態様もしくは好ましい態様の有効量の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグの投与を含む方法を含む。
【００３６】
ＰＤＥ７阻害剤である式（Ｉ）の化合物は、ある範囲の障害の治療において潜在的に有用である。疼痛、詳細には神経因性疼痛の治療が好ましい使用である。
【００３７】
生理的な痛みは、外部環境からの有害な可能性のある刺激の危険を警告するように設計された重要な防御機構である。このシステムは、特定のセットの一次感覚ニューロンを通して作動し、侵害刺激によって、末梢の変換機構を介して活性化される（総説については、Ｍｉｌｌａｎ、Ｐｒｏｇ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．、（１９９９年）、第５７巻、１〜１６４ページを参照されたい）。これらの感覚線維は、侵害受容器として知られており、伝導速度の緩徐な直径の小さい軸索を特徴とする。侵害受容器は、侵害刺激の強度、持続時間、および質、さらにはその組織分布的に系統立てられた脊髄への投射によって刺激の位置をコードする。侵害受容器は、Ａδ線維（有髄）およびＣ線維（無随）を主要な２タイプとする侵害受容性神経線維上に見られる。侵害受容器による入力によって生成された活性は、後角での複雑な処理の後、直接にまたは脳幹中継核を介して、視床基底複側、次いで皮質へと伝達され、皮質で痛みの感覚が生じる。
【００３８】
疼痛は、一般に急性または慢性として分類することができる。急性痛は、突如始まり、短命（通常は１２週間以下）である。急性痛は、通常は特定の損傷などの特定の原因に関連し、しばしば鋭く激しい。急性痛は、手術、歯科作業、挫傷、または捻挫の結果として生じる特定の損傷の後に起こり得る種類の疼痛である。急性痛は一般に、どんな持続的な心理的応答ももたらさない。対照的に、慢性痛は、通常は３ヶ月間より長い間持続し、著しい心理的および情緒的問題をもたらす長期間の疼痛である。慢性痛の一般的な例は、神経因性疼痛（たとえば、有痛性の糖尿病性ニューロパチー、ヘルペス後神経痛）、手根管症候群、背痛、頭痛、癌性疼痛、関節炎疼痛、および慢性の術後疼痛である。
【００３９】
疾患または外傷によって体組織に相当な損傷が起こると、侵害受容器活性化の特性は変更され、感作は、末梢で、損傷周囲で局所的に、また侵害受容器が終わる中枢で起こる。これらの影響は、疼痛の感覚を強める。急性痛では、これらの機序は、修復過程が起こるのを一層可能にし得る保護的な挙動を促進する点で有用な場合がある。通常の予想では、損傷が治癒してしまえば、その敏感性が正常に戻るということになる。しかし、多くの慢性疼痛状態では、過敏性は、治癒過程よりはるかに長く残り、しばしば神経系損傷を原因とする。この損傷はしばしば、適応不良および異常な活動に関連する感覚神経繊維の異常をもたらす（Ｗｏｏｌｆ＆Ｓａｌｔｅｒ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、（２０００年）、第２８８巻、１７６５〜１７６８ページ）。
【００４０】
患者の症状の中で不快感および異常な敏感性が特徴となっているとき、臨床上の痛みが存在する。患者は、全く均一でない傾向があり、様々な痛み症状で診察を受けにくる場合がある。そのような症状には、１）鈍い、焼けるような、または刺すようであるといえる自発痛、２）侵害刺激に対する疼痛反応の悪化（痛覚過敏）、および３）通常は非侵害性の刺激によって生じる痛み（異痛症−Ｍｅｙｅｒら、１９９４、Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐａｉｎ、１３〜４４ページ）が含まれる。様々な形態の急性痛および慢性痛に罹患している患者が同様の症状を有することがあるとしても、根底にある機序は異なる場合があり、したがって異なる治療戦略が必要となり得る。したがって、痛みは、異なる病態生理に従って、侵害受容性、炎症性、および神経因性の疼痛を含むいくつかの異なるサブタイプに分けることができる。
【００４１】
侵害受容性疼痛は、組織損傷、または損傷を引き起こす潜在性のある激しい刺激によって誘発される。痛みの求心性は、損傷部位での侵害受容器による刺激の伝達によって活性化され、それが終結するレベルにある脊髄のニューロンを活性化する。次いで、これが脊髄路を上って脳へと中継され、そこで痛みが知覚される（Ｍｅｙｅｒら、１９９４年、Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐａｉｎ、１３〜４４ページ）。侵害受容器の活性化は、２タイプの求心性神経線維を活性化する。有髄のＡδ線維は、急速な伝達を行い、鋭く刺すような痛覚を司るのに対し、無髄のＣ線維は、より緩慢な速度で伝達を行い、鈍いまたはうずくような痛みを伝える。中程度から重度の急性侵害受容性疼痛は、中枢神経系外傷、挫傷／捻挫、火傷、心筋梗塞、および急性膵炎の疼痛、術後疼痛（任意のタイプの手術手順後の疼痛）、外傷後疼痛、腎疝痛、癌性疼痛、および背痛からくる疼痛の顕著な特色である。癌性疼痛は、腫瘍関連疼痛（たとえば、骨痛、頭痛、顔面痛、または内臓痛）や、癌治療に関連する疼痛（たとえば、化学療法後症候群、慢性術後疼痛症候群、または放射線照射後症候群）などの慢性痛であるといえる。癌性疼痛は、化学療法、免疫療法、ホルモン療法、または放射線療法に応答して起こる場合もある。背痛は、椎間板ヘルニアもしくは椎間板破裂、または腰椎椎間関節、仙腸関節、傍脊椎筋、もしくは後縦方向靱帯の異常によるものであるといえる。背痛は、自然に消散することもあるが、これが１２週間を超えて持続する一部の患者では、特に消耗性となり得る慢性状態になる。
【００４２】
神経因性疼痛は現在、神経系の一次病巣または機能不全によって始まる、または引き起こされる疼痛であると定義されている。神経損傷は、外傷および疾患によって引き起こされる場合があり、したがって用語「神経因性疼痛」は、病因の多様な多くの障害を包含する。これらには、末梢性神経障害、糖尿病性ニューロパチー、ヘルペス後神経痛、三叉神経痛、背痛、癌性ニューロパチー、ＨＩＶニューロパチー、幻肢痛、手根管症候群、中心性卒中後痛、ならびに慢性アルコール中毒、甲状腺機能低下、尿毒症、多発性硬化症、脊椎損傷、パーキンソン病、てんかん、およびビタミン欠乏に関連する疼痛が含まれるがこの限りでない。保護的な役割をもたない神経因性疼痛は病的である。神経因性疼痛はしばしば、もとの原因が消失した後も多分に存在し、患者の生活の質を著しく低下させながら、一般的に何年間も持続する（Ｗｏｏｌｆ ａｎｄ Ｍａｎｎｉｏｎ、Ｌａｎｃｅｔ、（１９９９年）第３５３巻、１９５９〜１９６４ページ）。神経因性疼痛の症状は、同じ疾患の患者間でさえもしばしば均一でないので、治療が難しい（Ｗｏｏｌｆ＆Ｄｅｃｏｓｔｅｒｄ、Ｐａｉｎ Ｓｕｐｐ．（１９９９年）、第６巻、Ｓ１４１〜Ｓ１４７ページ；ＷｏｏｌｆおよびＭａｎｎｉｏｎ、上記）。神経因性疼痛の症状には、持続的になることのある自発痛、ならびに痛覚過敏（侵害刺激に対する敏感性の増大）や異痛症（通常は非侵害性の刺激に対する敏感性）などの発作性または異常性の誘発痛が含まれる。
【００４３】
炎症の過程は、組織損傷または異物の存在に応答して活性化される、腫れおよび痛みをもたらす一連の複雑な生化学的および細胞性の事象である（ＬｅｖｉｎｅおよびＴａｉｗｏ、１９９４年、Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐａｉｎ、４５〜５６ページ）。関節炎疼痛は、最も一般的な炎症性疼痛である。リウマチ様疾患は、先進諸国において最も一般的な慢性炎症状態の１つであり、関節リウマチは、身体障害の一般的な原因である。関節リウマチの正確な病因は不明であるが、現在の仮説は、遺伝的要因と微生物学的要因の両方が重要である可能性があることを示唆している（Ｇｒｅｎｎａｎ＆Ｊａｙｓｏｎ、１９９４年、Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐａｉｎ、３９７〜４０７ページ）。ほぼ１６００万人のアメリカ人が症候性の骨関節炎（ＯＡ）または変形性関節疾患に罹患し、その大部分が６０才を超えていることが推定されており、集団の年齢が増すにつれてこれが４０００万人に増えることが想定され、そのためこれが重要性の非常に大きい公衆衛生問題になっている（Ｈｏｕｇｅ ＆ Ｍｅｒｓｆｅｌｄｅｒ、Ａｎｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ．（２００２年）、第３６巻、６７９〜６８６ページ；ＭｃＣａｒｔｈｙら、１９９４年、Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐａｉｎ、３８７〜３９５ページ）。ほとんどの変形性関節炎患者は、それに伴う疼痛のために医学的な対応処置を捜し求める。関節炎は、心理社会的および身体的な機能に著しい影響を及ぼし、後の人生で身体障害の主な原因となることが知られている。強直性脊椎炎も、脊椎および仙腸関節の関節炎を引き起こすリウマチ性疾患である。強直性脊椎炎は、生涯にわたって起こる背痛の断続的なエピソードから、脊椎、末梢の関節、および他の身体臓器を襲う重度の慢性疾患に至るまで様々である。
【００４４】
別のタイプの炎症性疼痛は内臓痛であり、これには、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）に関連する疼痛が含まれる。内臓痛は、腹腔の臓器を包含する内臓に関連する疼痛である。これらの臓器には、生殖器、脾臓、および消化器系の一部が含まれる。内臓に関連する疼痛は、消化系の内臓痛および非消化系の内臓痛に分けることができる。一般的に遭遇する、疼痛を引き起こす胃腸（ＧＩ）障害には、機能性腸障害（ＦＢＤ）および炎症性腸疾患（ＩＢＤ）が含まれる。これらのＧＩ障害には、ＦＢＤに関しては胃食道逆流症、消化不良、過敏性大腸症候群（ＩＢＳ）、および機能性腹痛症候群（ＦＡＰＳ）、ＩＢＤに関してはクローン病、回腸炎、および潰瘍性大腸炎を含めて、すべてが定期的に内臓痛を生じる、現在中等度にしかコントロールされない広範囲な疾患状態が含まれる。他のタイプの内臓痛には、月経困難症、膀胱炎、および膵炎に関連する疼痛、ならびに骨盤痛が含まれる。
【００４５】
一部のタイプの疼痛は、複数の病因を有し、すなわち複数の領域に分類される場合があり、たとえば背痛および癌性疼痛は、侵害受容性および神経障害性の両方の構成要素を有することに留意されたい。
【００４６】
他のタイプの疼痛には、以下のものが含まれる。
・筋肉痛、線維筋痛、椎骨炎、血清反応陰性（非リウマチ様）関節症、非関節性リウマチ、ジストロフィノパチー、グリコーゲン分解、多発性筋炎、および化膿性筋炎を含む筋骨格障害の結果として生じる疼痛、
・狭心症、心筋梗塞、僧帽弁狭窄、心外膜炎、レイノー現象、浮腫性硬化症、および骨格筋虚血によって引き起こされる疼痛を含む心臓および血管の疼痛、
・偏頭痛（前兆を伴う偏頭痛および前兆を伴わない偏頭痛を含む）、群発性頭痛、筋緊張型頭痛、混合型頭痛、および血管性障害に関連する頭痛などの頭痛、ならびに
・歯痛、耳痛、口腔内灼熱症候群、および側頭下顎の筋筋膜痛を含む口腔顔面痛。
【００４７】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、疼痛以外の状態の治療においても有用である。特に、本発明の式（Ｉ）の化合物は、Ｔ細胞関連疾患、自己免疫疾患、多発性硬化症、骨粗鬆症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、癌、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、アレルギー、および炎症性腸疾患の治療において有用である。
【００４８】
本発明はさらに、疼痛（特に神経因性疼痛）、Ｔ細胞関連疾患、自己免疫疾患、多発性硬化症、骨粗鬆症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、癌、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、アレルギー、および炎症性腸疾患から選択される状態または障害を治療するための医薬の製造における、その最も広い態様もしくは好ましい態様の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグの使用を含む。
【００４９】
本発明はさらに、疼痛（特に神経因性疼痛）、Ｔ細胞関連疾患、自己免疫疾患、多発性硬化症、骨粗鬆症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、癌、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、アレルギー、または炎症性腸疾患から選択される疾患または状態の治療方法であって、その最も広い態様もしくは好ましい態様の有効量の式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグを投与することを含む方法を含む。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容できる塩には、その酸付加塩および塩基の塩が含まれる。
【００５１】
好適な酸付加塩は、非毒性の塩を形成する酸から生成されるものである。例には、酢酸塩、アジピン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、炭酸水素塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、ホウ酸塩、カンシル酸塩、クエン酸塩、シクラミン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、塩酸塩／塩化物、臭化水素酸塩／臭化物、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフチル酸塩、２−ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロト酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素塩／リン酸二水素塩、ピログルタミン酸塩、糖酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、トリフルオロ酢酸塩、およびキシノホ酸塩（ｘｉｎｏｆｏａｔｅ）が含まれる。
【００５２】
好適な塩基の塩は、非毒性の塩を形成する塩基から生成されるものである。例には、アルミニウム、アルギニン、ベンザチン、カルシウム、コリン、ジエチルアミン、ジオールアミン、グリシン、リジン、マグネシウム、メグルミン、オールアミン、カリウム、ナトリウム、トロメタミン、および亜鉛の塩が含まれる。
【００５３】
酸および塩基の半塩、たとえば半硫酸塩および半カルシウム塩を生成してもよい。
【００５４】
好適な塩に関する総説については、ＳｔａｈｌおよびＷｅｒｍｕｔｈによる「Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ」（Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、２００２年）を参照されたい。
【００５５】
式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容できる塩は、次の３つの方法の１つまたは複数によって調製することができる。
（ｉ）式（Ｉ）の化合物を所望の酸または塩基と反応させることによる方法、
（ｉｉ）式（Ｉ）の化合物の好適な前駆体から、酸もしくは塩基に不安定な保護基を除去する、または所望の酸もしくは塩基を使用して好適な環状前駆体、たとえばラクトンもしくはラクタムを開環することによる方法、または
（ｉｉｉ）式（Ｉ）の化合物の塩を、適切な酸もしくは塩基との反応によって、または好適なイオン交換カラムによって別の塩に変換することによる方法。
【００５６】
３つの反応はすべて、通常は溶液中で実施する。生じる塩が析出することもあり、濾過によって収集してもよいし、または溶媒を蒸発させて回収してもよい。得られる塩のイオン化の程度は、完全にイオン化したものからほとんどイオン化していないものまで様々となり得る。
【００５７】
本発明の化合物は、完全な非晶質から完全な結晶性に至る範囲の一連の固体状態で存在し得る。用語「非晶質」とは、材料が分子レベルで長いきちんとした序列を欠き、温度に応じて固体または液体の物理的性質を示し得る状態を指す。通常、そのような材料は、特有のＸ線回折パターンを与えず、固体の性質を示しながらもより正式には液体であると記述される。加熱すると、固体の性質から液体の性質への変化が起こるが、これは通常、二次の状態変化（「ガラス転移」）を特徴とする。用語「結晶性」とは、材料が、分子レベルで規則的な整った内部構造を有し、明確なピークを伴う特有のＸ線回折パターンを与える固相を指す。十分に加熱したとき、そのような材料も液体の性質を示すが、固体から液体への変化は、通常は一次の相変化（「融点」）を特徴とする。
【００５８】
本発明の化合物はまた、溶媒和していない形態および溶媒和した形態で存在する場合がある。用語「溶媒和物」は、本明細書では、本発明の化合物と、薬学的に許容できる１つまたは複数の溶媒分子、たとえばエタノールとを含む分子複合体について述べるのに使用する。用語「水和物」は、前記溶媒が水であるときに使用する。本発明は、溶媒和していない形態とすべての溶媒和形態の両方を含む。
【００５９】
現在受け入れられている有機水和物の分類系統は、隔離部位水和物、チャネル水和物、または金属イオン配位水和物を規定するものである。Ｋ．Ｒ．Ｍｏｒｒｉｓによる「Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｏｌｉｄｓ」（Ｈ．Ｇ．Ｂｒｉｔｔａｉｎ編、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、１９９５年）を参照されたい。隔離部位水和物は、水分子が介在する有機分子によって互いの直接の接触から隔離されているものである。チャネル水和物では、水分子は格子チャネルにあり、そこで他の水分子と隣り合っている。金属イオン配位水和物では、水分子は金属イオンに結合している。
【００６０】
溶媒または水が堅く結合しているとき、複合体は、湿度に関係なく明確な化学量論性を有する。しかし、チャネル溶媒和物および吸湿性化合物でのように溶媒または水が弱く結合しているとき、水／溶媒含有量は湿度および乾燥条件に左右される。そのような場合では、非化学量論性が標準となる。
【００６１】
以下では、式（Ｉ）の化合物へのすべての言及は、その塩および溶媒和物への言及ならびにその塩の溶媒和物を含む。
【００６２】
本発明の化合物には、そのすべての多形体および晶癖、以下で定義するそのプロドラッグおよび異性体（光学異性体、幾何異性体、および互変異性体を含む）、ならびに同位体標識された式（Ｉ）の化合物を含めて、上で規定した式（Ｉ）の化合物が含まれる。
【００６３】
指摘したように、式（Ｉ）の化合物のいわゆる「プロドラッグ」も、本発明の範囲内にある。したがって、それ自体は薬理活性をほとんどまたは全くもたなくてもよい式（Ｉ）の化合物の特定の誘導体は、身体中または身体上に投与されたとき、たとえば加水分解による切断によって、所望の活性を有する式（Ｉ）の化合物に変換され得る。そのような誘導体を「プロドラッグ」と呼ぶ。プロドラッグの使用についてのそれ以上の情報は、「Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ ａｓ Ｎｏｖｅｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ」、第１４巻、ＡＣＳ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓ（Ｔ．ＨｉｇｕｃｈｉおよびＷ．Ｓｔｅｌｌａ）および「Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ」、Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ、１９８７年（Ｅ．Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編、米国薬剤師会）で見ることができる。
【００６４】
本発明によるプロドラッグは、たとえば、たとえばＨ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄによる「Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、１９８５年）に記載されているように、式（Ｉ）の化合物中に存在する適切な官能基を、当業者に「ｐｒｏ−部分」として知られている特定の部分と交換することによって生成することができる。
【００６５】
本発明の式（Ｉ）の化合物は、カルボン酸官能基（−ＣＯＯＨ）を含有する。したがって、好適なプロドラッグは、式（Ｉ）の化合物のカルボン酸官能基の水素がエステル残基によって置換されている、そのエステルを含む。用語「エステル残基」とは、加水分解などの生物学的方法によってｉｎ ｖｉｖｏで切断することができ、遊離のカルボン酸基を有する式（Ｉ）の化合物またはその塩を生成するエステル基を意味する。
【００６６】
化合物がそのようなプロドラッグであるか否かは、たとえば、それをラットやマウスなどの実験動物に静脈内注射によって投与し、次いで動物の体液を調査して、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容できるその塩が検出できるか否かを判定することによって決定することができる。
【００６７】
エステル残基の好ましい例には、以下のものが含まれる。
メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシル、テトラデシル、ペンタデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オクタデシル、ノナデシル、イコサニルなどの直鎖または分枝鎖のアルキル基でよい、Ｃ_１〜２０アルキル基、特にＣ_１〜１２アルキル基、好ましくはＣ_１〜８アルキル基、より好ましくはＣ_１〜６アルキル基、最も好ましくは上で定義し例示したものなどのＣ_１〜４アルキル基、
Ｃ_１〜１０ハロアルキル基（１個または複数のハロゲン原子、好ましくはフッ素または塩素原子、より好ましくはフッ素原子で置換されたアルキル基であると定義される）、好ましくはＣ_１〜８ハロアルキル基、より好ましくはＣ_１〜_６ハロアルキル基、最も好ましくはＣ_１〜４ハロアルキル基、たとえば、モノ−、ジ−、またはトリフルオロメチル、モノ−、ジ−、またはトリクロロメチル、ブロモメチル、２−フルオロエチル、２，２−ジフルオロエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、２−クロロエチル、２，２−ジクロロエチル、２，２，２−トリクロロエチル、ペルフルオロエチル、ペルフルオロプロピル、ペルフルオロブチルなど、
Ｃ_１〜１０ヒドロキシアルキル基（ヒドロキシ（−ＯＨ）基で置換されたアルキル基であると定義される）、好ましくはＣ_１〜８ヒドロキシアルキル基、より好ましくはＣ_１〜６ヒドロキシアルキル基、最も好ましくはＣ_１〜４ヒドロキシアルキル基、たとえば、ヒドロキシメチル、１−または２−ヒドロキシエチル、１−、２−、または３−ヒドロキシプロピル、１−、２−、３−、または４−ヒドロキシブチルなど、
（Ｃ_１〜１０アルコキシ）Ｃ_１〜１０アルキル基（アルコキシ基で置換されたアルキル基であると定義される）、好ましくは（Ｃ_１〜６アルコキシ）Ｃ_１〜６アルキル基、より好ましくは（Ｃ_１〜４アルコキシ）Ｃ_１〜４アルキル基、最も好ましくは（Ｃ_１〜４アルコキシ）メチル基、たとえば、メトキシメチル、１，１−ジメチル−１−メトキシメチル、エトキシメチル、プロポキシメチル、イソプロポキシメチル、ブトキシメチル、ｔ−ブトキシメチル基など、
Ｃ_１〜６アルコキシル化された（Ｃ_１〜６アルコキシ）メチル基、たとえば、２−メトキシエトキシメチル基など、
ハロ（Ｃ_１〜６アルコキシ）メチル基、たとえば、２，２，２−トリクロロエトキシメチルやビス（２−クロロエトキシ）メチル基など、
Ｃ_３〜８シクロアルキル基、たとえば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル基など、
アラルキル基、たとえば、１〜３個のＣ_６〜１４アリール基で置換されたＣ_１〜６アルキル基（アリール部分は、フェニル、ナフチル、アントリル、およびフェナントリルから選択される）、たとえば、ベンジル、α−ナフチルメチル、β−ナフチルメチル、ジフェニルメチル、トリフェニルメチル、α−ナフチルジフェニルメチル、９−アントリルメチル基など；ならびに１〜３個の置換Ｃ_６〜１４アリール基で置換されたＣ_１〜６アルキル基（アリール基の１個または複数は、１個または複数（好ましくは１〜３個、より好ましくは１個のみ）のＣ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜６アルコキシ、ニトロ、ハロゲン、またはシアノ置換基で置換されている）、たとえば、４−メチルベンジル、２，４，６−トリメチルベンジル、３，４，５−トリメチルベンジル、４−メトキシベンジル、４−メトキシフェニルジフェニルメチル、２−ニトロベンジル、４−ニトロベンジル、４−クロロベンジル、４−ブロモベンジル、４−シアノベンジル基など；特にベンジル基、
ハロおよびＣ_１〜６アルコキシから選択される置換基で置換されていてもよいテトラヒドロピラニルまたはテトラヒドロチオピラニル基、たとえば、テトラヒドロピラン−２−イル、３−ブロモテトラヒドロピラン−２−イル、４−メトキシ−テトラヒドロピラン−４−イル、テトラヒドロチオピラン−２−イル、４−メトキシ−テトラヒドロチオピラン−４−イル基など、
ハロおよびＣ_１〜６アルコキシから選択される置換基で置換されていてもよいテトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロチオフラニル基、たとえば、テトラヒドロフラン−２−イル基やテトラヒドロチオフラン−２−イル基など、
Ｃ_２〜１０アルケニル基、たとえば、ビニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル基など、ならびに
Ｃ_２〜１０アルキニル基、たとえば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニル基など。
【００６８】
前述の例に従う置換基のこれ以上の例、および他のプロドラッグタイプの例は、上述の参考文献で見ることができる。
【００６９】
また、特定の式（Ｉ）の化合物は、それ自体が他の式（Ｉ）の化合物のプロドラッグとして働く場合もある。
【００７０】
１個または複数の不斉炭素原子を含有している式（Ｉ）の化合物は、２種以上の立体異性体として存在する場合がある。式（Ｉ）の化合物は、シクロアルキレン基を含有しているので、ＣＯ_２Ｈ基およびＢ基が同じ炭素上にないとき、シス／トランス異性体が考えられる。構造異性体が低いエネルギー障壁で相互変換可能である場合、互変異性体異性（「互変異性」）が起こり得る。互変異性は、環状尿素、チオ尿素、またはシアノグアニジン基を含有している式（Ｉ）の化合物ではプロトン互変異性の形態、または芳香族部分を含有している化合物ではいわゆる原子価互変異性の形態を取り得る。これは、単一の化合物が１種類に留まらない異性を示す場合もあるということである。
【００７１】
本発明の範囲内には、１種類を超える異性を示す化合物を含めて、式（Ｉ）の化合物のすべての立体異性体、ジアステレオ異性体（特にシス／トランス異性体）、および互変異性体形態、ならびにこれらの１種または複数の混合物が含まれる。また、酸付加塩または塩基の塩において対イオンが光学活性を有するもの、たとえばｄ−乳酸塩もしくはｌ−リジン、またはラセミ体であるもの、たとえばｄｌ−酒石酸塩もしくはｄｌ−アルギニンも含まれる。
【００７２】
シス／トランス異性体は、当業者によく知られている従来の技術、たとえば、クロマトグラフィーおよび分別結晶によって分離することができる。
【００７３】
個々の鏡像異性体を調製／単離するための従来の技術には、光学的に純粋な好適な前駆体からのキラル合成、またはたとえば、キラルな高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を使用するラセミ体（または塩もしくは誘導体のラセミ体）の分割が含まれる。
【００７４】
別法として、ラセミ体（またはラセミ前駆体）を、光学活性を有する好適な化合物、たとえばアルコールと、または式（Ｉ）の化合物が酸性もしくは塩基性の部分を含有している場合には１−フェニルエチルアミンや酒石酸などの塩基もしくは酸と反応させることができる。得られるジアステレオ異性体混合物は、クロマトグラフィーおよび／または分別結晶によって分離し、当業者によく知られる方法によってジアステレオ異性体の一方または両方を対応する純粋な鏡像異性体に変換することができる。
【００７５】
本発明のキラルな化合物（およびそのキラルな前駆体）は、０〜５０体積％、通常は２％〜２０％のイソプロパノール、および０〜５体積％のアルキルアミン、通常は０．１％のジエチルアミンを含有する炭化水素、通常はヘプタンまたはヘキサンからなる移動相を用いる不斉樹脂でのクロマトグラフィー、通常はＨＰＬＣを使用して、鏡像異性体を豊富に含む形で得ることができる。溶出液を濃縮すると、濃縮された混合物が得られる。
【００７６】
ラセミ体が結晶化するとき、異なる２タイプの結晶が考えられる。第１のタイプは、両方の鏡像異性体を等モル量で含有する１つの均質な形態の結晶が生成する、上で言及したラセミ化合物（真のラセミ体）である。第２のタイプは、それぞれ単一の鏡像異性体を含む２形態の結晶が等モル量で生成する、ラセミ混合物または集晶体である。
【００７７】
ラセミ混合物中に存在する結晶形は両方とも同一の物理的性質を有するが、これらは真のラセミ体と比較すると異なる物理的性質を有する場合もある。ラセミ混合物は、当業者に知られている従来の技術によって分離することができる。たとえば、Ｅ．Ｌ．ＥｌｉｅｌおよびＳ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎによる「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」（Ｗｉｌｅｙ、１９９４年）を参照されたい。
【００７８】
本発明は、１個または複数の原子が、原子番号が同じであるが、原子質量または質量数が自然界で優位を占める原子質量または質量数と異なっている原子によって置換されている、薬学的に許容できるすべての同位体標識された式（Ｉ）の化合物を含む。
【００７９】
本発明の化合物中に含めるのに好適な同位体の例には、^２Ｈや^３Ｈなどの水素、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃなどの炭素、^３６Ｃｌなどの塩素、^１８Ｆなどのフッ素、^１２３Ｉや^１２５Ｉなどのヨウ素、^１３Ｎや^１５Ｎなどの窒素、^１５Ｏ、^１７Ｏ、^１８Ｏなどの酸素、^３２Ｐなどのリン、および^３５Ｓなどの硫黄の同位体が含まれる。
【００８０】
特定の同位体標識された式（Ｉ）の化合物、たとえば放射性同位体が組み込まれているものは、薬物および／または基質の組織分布調査において有用である。放射性同位体トリチウム、すなわち^３Ｈ、およびカーボン１４、すなわち^１４Ｃは、組込みが容易であり、検出手段が整っていることを考えて、この目的に特に有用である。
【００８１】
ジュウテリウム、すなわち^２Ｈなどのより重い同位体で置換すると、より高い代謝安定性の結果として生じる特定の治療上の利点、たとえば、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期の延長または投与必要量の減少がもたらされる場合もあり、したがってある状況で好ましいといえる。
【００８２】
^１１Ｃ、^１８Ｆ、^１５Ｏ、^１３Ｎなどの陽電子放射同位体での置換は、基質受容体占有率を調べる陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）研究において有用となり得る。
【００８３】
同位体標識された式（Ｉ）の化合物は一般に、以前から用いられる標識されていない試薬の代わりに同位体標識された適切な試薬を使用して、当業者に知られている従来の技術によって、または添付の実施例および調製例に記載のものと類似の方法によって調製することができる。
【００８４】
本発明による薬学的に許容できる溶媒和物には、結晶化の溶媒が同位体によって置換されているもの、たとえばＤ_２Ｏ、ｄ_６−アセトン、ｄ_６−ＤＭＳＯでよいものが含まれる。
【００８５】
上で規定した式（Ｉ）の中間体化合物、上で式（Ｉ）の化合物について定義したようなそのすべての塩、溶媒和物、および複合体、ならびにその塩のすべての溶媒和物および複合体も、本発明の範囲内にある。本発明は、上述の化学種およびその晶癖のすべての多形体を含む。
【００８６】
本発明に従って式（Ｉ）の化合物を調製するとき、当業者は、この目的のために最高の特徴の組合せをもたらす式（Ｉ）の化合物の形態を常法どおりに選択することができる。そのような特徴には、融点、溶解性、加工性、および中間体形態の収率、ならびにその結果としての、生成物を単離時に容易に精製できることが含まれる。
【００８７】
式（Ｉ）の化合物は、提案された適応症を治療するのに最も適切な剤形および投与経路を選択するために、（全ｐＨでの）溶解性および溶液安定性、透過性などのその生物薬剤学的な性質について評価すべきである。
【００８８】
医薬としての使用を目的とする本発明の化合物は、結晶性または非晶質の生成物として投与することができる。そのような本発明の化合物は、沈殿、結晶化、凍結乾燥、噴霧乾燥、または蒸発乾燥などの方法によって、たとえば、固体充填物、粉末、またはフィルムとして得ることができる。マイクロ波または高周波乾燥をこの目的のために使用してもよい。
【００８９】
化合物は、単独で、または１種または複数の他の本発明化合物と組み合わせて、または１種または複数の他の薬物と組み合わせて（またはこれらの任意の組合せとして）投与することができる。一般に、化合物は、１種または複数の薬学的に許容できる賦形剤と合同で製剤として投与される。用語「賦形剤」は、本明細書では、本発明の化合物以外の任意の成分について述べるのに使用する。賦形剤の選択は、大部分は、特定の投与方式、賦形剤が溶解性および安定性に及ぼす影響、剤形の性質などの要素に応じて決まる。
【００９０】
本発明の化合物の送達に好適な医薬組成物およびその調製方法は、当業者には言うまでもない。そのような組成物およびその調製方法は、たとえば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」第１９版（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９５年）で見ることができる。
【００９１】
経口投与
本発明の化合物は、経口投与することができる。経口投与は、化合物がＧＩに入るように飲み込むものでもよいし、および／または化合物がそれによって口から直接血流に入る頬側、舌側、もしくは舌下投与を含むものでもよい。
【００９２】
経口投与に好適な製剤には、錠剤；多粒子もしくはナノ粒子、液体、または粉末を含有する軟または硬カプセル剤；ロゼンジ（液体充填型を含む）；咀嚼剤；ゲル；急速分散型剤形；フィルム；膣坐剤；スプレー；ならびに頬側／粘膜付着性パッチなどの、固体、半固体、および液体の系が含まれる。
【００９３】
液体製剤には、懸濁液、溶液、シロップ、およびエリキシルが含まれる。このような製剤は、（たとえばゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース製の）軟もしくは硬カプセル中に充填剤として用いることもでき、通常は、担体、たとえば、水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロース、または好適な油と、１種または複数の乳化剤および／または懸濁化剤とを含む。液体製剤は、たとえば小袋から出した固体を再構成して、調製することもできる。
【００９４】
本発明の化合物は、ＬｉａｎｇおよびＣｈｅｎによるＥｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐａｔｅｎｔｓ、第１１巻（６）、９８１〜９８６ページ（２００１年）に記載のものなどの急速溶解急速崩壊型の剤形にして使用してもよい。
【００９５】
錠剤剤形では、薬物は、用量に応じて、剤形の１重量％〜８０重量％、より典型的な例では剤形の５重量％〜６０重量％を占めてよい。錠剤は一般に、薬物に加えて崩壊剤を含有する。崩壊剤の例には、ナトリウムデンプングリコラート、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、微結晶セルロース、低級アルキル置換されたヒドロキシプロピルセルロース、デンプン、α化デンプン、およびアルギン酸ナトリウムが含まれる。一般に、崩壊剤は、剤形の１重量％〜２５重量％、好ましくは５重量％〜２０重量％を占める。
【００９６】
結合剤は一般に、錠剤製剤に粘着性の性質を付与するために使用する。好適な結合剤には、微結晶セルロース、ゼラチン、糖、ポリエチレングリコール、天然および合成のゴム、ポリビニルピロリドン、α化デンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースが含まれる。錠剤は、ラクトース（一水和物、噴霧乾燥一水和物、無水物など）、マンニトール、キシリトール、デキストロース、スクロース、ソルビトール、微結晶セルロース、デンプン、第二リン酸カルシウム二水和物などの希釈剤も含有する場合がある。
【００９７】
錠剤は、ラウリル硫酸ナトリウムやポリソルベート８０などの界面活性剤、および二酸化ケイ素やタルクなどの滑剤を場合により含むこともある。存在するとき、界面活性剤は錠剤の０．２重量％〜５重量％を占めてよく、滑剤は錠剤の０．２重量％〜１重量％を占めてよい。
【００９８】
錠剤は一般に、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、フマル酸ステアリルナトリウム、ステアリン酸マグネシウムとラウリル硫酸ナトリウムの混合物などの滑沢剤も含有する。滑沢剤は一般に、錠剤の０．２５重量％〜１０重量％、好ましくは０．５重量％〜３重量％を占める。
【００９９】
他の考えられる成分には、抗酸化剤、着色剤、着香剤、保存剤、および矯味剤が含まれる。
【０１００】
好例となる錠剤は、約８０％までの薬物、約１０重量％〜約９０重量％の結合剤、約０重量％〜約８５重量％の希釈剤、約２重量％〜約１０重量％の崩壊剤、および約０．２５重量％〜約１０重量％の滑沢剤を含有する。
【０１０１】
錠剤ブレンドを直接にまたはローラーによって圧縮すると、錠剤を生成することができる。別法として、錠剤ブレンドまたはブレンドの一部分を、湿式、乾式、もしくは溶融造粒、溶融凝固、または押出し成形処理した後に打錠してもよい。最終製剤は、１重または複数の層を含むこともあり、コーティングされていてもされていなくてもよく、カプセル封入されていてもよい。
【０１０２】
錠剤の製剤については、Ｈ．ＬｉｅｂｅｒｍａｎおよびＬ．Ｌａｃｈｍａｎによる「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ」、第１巻（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、ニューヨーク、１９８０年）で論述されている。
【０１０３】
ヒトまたは獣医学で使用する摂取可能な経口フィルムは通常、急速溶解型または粘膜付着性でよい可撓性の水溶性または水膨張性薄膜剤形であり、通常は式（Ｉ）の化合物、フィルム形成ポリマー、結合剤、溶媒、湿潤剤、可塑剤、安定剤または乳化剤、粘度調整剤、ならびに溶媒を含む。製剤の一部の構成要素が複数の機能を果たす場合もある。
【０１０４】
式（Ｉ）の化合物は、水溶性である場合もあれば不溶性である場合もある。水溶性の化合物は通常、溶質の１重量％〜８０重量％、より典型的な例では２０重量％〜５０重量％を占める。それほど可溶性でない化合物は、組成物のより高い割合、通常は溶質の８８重量％までを占めてよい。別法として、式（Ｉ）の化合物を多粒子ビーズの形にしてもよい。
【０１０５】
フィルム形成ポリマーは、天然の多糖類、タンパク質、または合成の親水コロイドから選択されるものでよく、通常は０．０１〜９９重量％の範囲、より典型的な例では３０〜８０重量％の範囲で存在する。
【０１０６】
他の考えられる成分には、抗酸化剤、着色剤、着香剤、および香味剤、保存剤、唾液腺刺激剤、冷却剤、共溶媒（油を含む）、緩和剤、増量剤、消泡剤、界面活性剤、および矯味剤が含まれる。
【０１０７】
本発明によるフィルムは通常、可剥性の支持担体または紙上にコーティングした薄い水性フィルムを蒸発乾燥して調製する。これは、乾燥オーブンもしくは乾燥トンネル、通常は複合塗工乾燥機で、または凍結乾燥もしくは減圧によって行うことができる。
【０１０８】
経口投与用の固体製剤は、即時型および／または変更型の放出がなされるように製剤することができる。変更型放出製剤には、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的指向性放出、およびプログラム放出が含まれる。
【０１０９】
本発明の目的に好適な変更型放出製剤は、米国特許第６１０６８６４号に記載されている。高エネルギー分散や浸透性粒子および被覆粒子などの他の好適な放出技術の詳細は、ＶｅｒｍａらによるＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｏｎ−ｌｉｎｅ、第２５巻（２）、１〜１４ページ（２００１年）で見られる。制御放出を実現するためのチューインガムの使用は、ＷＯ００／３５２９８に記載されている。
【０１１０】
非経口投与
本発明の化合物は、血流中、筋肉中、または内臓中に直接投与することもできる。非経口投与に好適な手段には、静脈内、動脈内、腹腔内、くも膜下腔内、側脳室内、尿道内、胸骨内、脳内、筋肉内、滑液包内、および皮下が含まれる。非経口投与に好適な装置には、（微細針を含む）針注射器、無針注射器、および注入技術が含まれる。
【０１１１】
非経口製剤は通常、塩、炭水化物、（好ましくはｐＨ３〜９にする）緩衝剤などの賦形剤を含有することもある水溶液であるが、一部の適用例では、無菌の非水性溶液として、または発熱物質を含まない無菌水などの好適な媒体と共に使用する乾燥形態としてより適切に製剤してもよい。
【０１１２】
たとえば凍結乾燥による無菌条件下での非経口製剤の調製は、当業者によく知られている標準の製薬技術を使用して容易に実現することができる。
【０１１３】
非経口溶液の調製で使用する式（Ｉ）の化合物の溶解性は、溶解性改善剤を混ぜるなどの適切な製剤技術を使用して増大させることができる。
【０１１４】
非経口投与用の製剤は、即時型および／または変更型の放出がなされるように製剤することができる。変更型放出製剤には、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的指向性放出、およびプログラム放出が含まれる。したがって、本発明の化合物は、懸濁液として、または活性化合物の変更型放出をもたらす移植デポー剤として投与するための固体、半固体、もしくは揺変性液体として製剤することができる。そのような製剤の例には、薬物でコーティングされたステント、ならびに薬物を載せたｄｌ−乳酸−グリコール酸共重合体（ＰＧＬＡ）ミクロスフェアを含む半固体および懸濁液が含まれる。
【０１１５】
局所投与
本発明の化合物は、皮膚または粘膜に局所的に、（皮内）皮膚上に、または経皮的に投与することもできる。この目的のための典型的な製剤には、ゲル、ヒドロゲル、ローション、溶液、クリーム、軟膏、散粉剤、包帯剤、フォーム、フィルム、皮膚パッチ、ウェーハ、植込錠、スポンジ、線維、絆創膏、およびマイクロエマルジョンが含まれる。リポソームを使用してもよい。典型的な担体には、アルコール、水、鉱油、流動パラフィン、白色ワセリン、グリセリン、ポリエチレングリコール、およびプロピレングリコールが含まれる。浸透性改善剤を混ぜてもよい。たとえば、ＦｉｎｎｉｎおよびＭｏｒｇａｎによるＪ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、第８８巻（１０）、９５５〜９５８ページ（１９９９年１０月）を参照されたい。
【０１１６】
他の局所投与手段には、電気穿孔法、イオン導入法、音波泳動法、超音波導入法、ならびに微細針または無針（たとえばＰｏｗｄｅｒｊｅｃｔ（商標）、Ｂｉｏｊｅｃｔ（商標）など）注射による送達が含まれる。
【０１１７】
局所投与用の製剤は、即時型および／または変更型の放出がなされるように製剤することができる。変更型放出製剤には、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的指向性放出、およびプログラム放出が含まれる。
【０１１８】
吸入投与／鼻腔内投与
本発明の化合物は通常、乾燥粉末吸入器から（単独で、たとえばラクトースとの乾燥ブレンドにした混合物として、またはたとえばホスファチジルコリンなどのリン脂質と混合した混合型成分粒子としての）乾燥粉末の形で、加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザー（好ましくは電気水力学を使用して微細な霧を生成するアトマイザー）、もしくはネブライザーから、１，１，１，２−テトラフルオロエタンや１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパンなどの好適な噴射剤を使用しまたは使用せずにエアロゾルスプレーとして、または点鼻液として、鼻腔内にまたは吸入によって投与することもできる。鼻腔内の使用では、粉末は、生体接着剤、たとえばキトサンまたはシクロデキストリンを含んでもよい。
【０１１９】
加圧容器、ポンプ、スプレー、アトマイザー、またはネブライザーは、たとえばエタノール、エタノール水溶液、または活性物を分散させ、可溶化し、もしくはその放出を延長するのに好適な別の薬剤を含む本発明の化合物の溶液または懸濁液、溶媒としての噴射剤、ならびにトリオレイン酸ソルビタン、オレイン酸、オリゴ乳酸などのオプションの界面活性剤を含有する。
【０１２０】
薬物製品は、乾燥粉末または懸濁液製剤中に使用する前に、吸入による送達に好適なサイズ（通常は５ミクロン未満）に微粒子化する。これは、スパイラルジェット粉砕、流動層ジェット粉砕、ナノ粒子を生成するための超臨界流体処理、高圧ホモジナイズ、噴霧乾燥などの任意の適切な微粉砕法によって実現することができる。
【０１２１】
吸入器または注入器に入れて使用する（たとえばゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース製の）カプセル、ブリスター、およびカートリッジは、本発明の化合物、ラクトースやデンプンなどの好適な粉末基剤、およびｌ−ロイシン、マンニトール、ステアリン酸マグネシウムなどの性能調節剤の粉末混合物を含有するように製剤することができる。ラクトースは、無水でも一水和物の形でもよいが、後者が好ましい。他の好適な賦形剤には、デキストラン、グルコース、マルトース、ソルビトール、キシリトール、フルクトース、スクロース、およびトレハロースが含まれる。
【０１２２】
電気水力学を使用して微細な霧を生成するアトマイザーに入れて使用するのに好適な溶液製剤は、１作動あたり１μｇ〜２０ｍｇの本発明の化合物を含有するものでよく、作動体積は１μｌ〜１００μｌと様々でよい。典型的な製剤は、式（Ｉ）の化合物、プロピレングリコール、滅菌水、エタノール、および塩化ナトリウムを含む。プロピレングリコールの代わりに使用することのできる別の溶媒には、グリセロールおよびポリエチレングリコールが含まれる。
【０１２３】
メントールやｌ−メントールなどの好適な着香剤、またはサッカリンやサッカリンナトリウムなどの甘味剤を、吸入投与／鼻腔内投与を目的とする本発明の製剤に加えてもよい。
【０１２４】
吸入投与／鼻腔内投与用の製剤は、たとえばＰＧＬＡを使用して、即時型および／または変更型の放出がなされるように製剤することができる。変更型放出製剤には、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的指向性放出、およびプログラム放出が含まれる。
【０１２５】
直腸／膣内投与
本発明の化合物は、たとえば坐剤、膣坐剤、または浣腸の形で直腸にまたは経膣的に投与することができる。カカオ脂が伝統的な坐剤基剤であるが、様々な代替品を適宜使用することができる。
【０１２６】
直腸／経膣投与用の製剤は、即時型および／または変更型の放出がなされるように製剤することができる。変更型放出製剤には、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的指向性放出、およびプログラム放出が含まれる。
【０１２７】
眼／耳への投与
本発明の化合物は、通常は、等張性のｐＨ調整された無菌食塩水中の微粒子化された懸濁液または溶液の液滴の形で眼または耳に直接投与することもできる。眼および耳への投与に好適な他の製剤には、軟膏、ゲル、生分解性（たとえば吸収性のゲルスポンジ、コラーゲン）および非生分解性（たとえばケイ素樹脂）の植込錠、ウェーハ、レンズ、ならびにニオソームやリポソームなどの微粒子系またはベシクル系が含まれる。架橋ポリアクリル酸、ポリビニルアルコール、ヒアルロン酸などのポリマー；セルロース系ポリマー、たとえば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、もしくはメチルセルロース；またはヘテロ多糖ポリマー、たとえばゲランガムを、塩化ベンザルコニウムなどの保存剤と共に混ぜることができる。このような製剤は、イオン導入法によって送達してもよい。
【０１２８】
眼／耳への投与用の製剤は、即時型および／または変更型の放出がなされるように製剤することができる。変更型放出製剤には、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的指向性放出、またはプログラム放出が含まれる。
【０１２９】
他の技術
本発明の化合物は、上述の投与様式のいずれかで使用するため、その溶解性、溶出速度、矯味、バイオアベイラビリティおよび／または安定性を改善するためにシクロデキストリンおよびその好適な誘導体やポリエチレングリコール含有ポリマーなどの可溶性の高分子実在物と混ぜ合わせてもよい。
【０１３０】
たとえば、薬物−シクロデキストリン複合体は、一般にほとんどの剤形および投与経路に有用であることがわかっている。包接複合体および非包接複合体の両方を使用することができる。シクロデキストリンは、薬物との直接の複合体形成に代わるものとして、補助添加剤、すなわち担体、希釈剤、または可溶化剤として使用してもよい。これらの目的のために最も一般に使用されるのは、α、β、およびγシクロデキストリンであり、その例は、ＷＯ９１／１１１７２、ＷＯ９４／０２５１８、およびＷＯ９８／５５１４８で見ることができる。
【０１３１】
成分キット
たとえばある特定の疾患または状態を治療する目的のために活性化合物の組合せを投与することが望ましい場合もあるので、その少なくとも１種が本発明による化合物を含有する２種以上の医薬組成物を、組成物の共投与に好適なキットの形で好都合に組み合わせてよいことは、本発明の範囲内である。
【０１３２】
したがって、本発明のキットは、その少なくとも１種が本発明による式（Ｉ）の化合物を含有する２種以上の別個の医薬組成物と、容器、分割されたボトル、または分割されたホイル製袋などの、前記組成物を別々に保持するための手段とを含む。そのようなキットの例は、錠剤、カプセルなどの包装に使用される見慣れたブリスターパックである。
【０１３３】
本発明のキットは、たとえば経口と非経口の異なる剤形を投与する、別個の組成物を異なる投与間隔で投与する、または別個の組成物を互いに対して滴定するのに特に好適である。服薬遵守を援助するために、キットは通常、投与の説明書を含み、いわゆるメモリーエイドを添えて提供することができる。
【０１３４】
投与量
ヒト患者への投与について、本発明の化合物の合計１日量は通常、当然ながら投与方式に応じて１０ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲にある。たとえば、経口投与には１０ｍｇ〜１０００ｍｇの合計１日量が必要である場合があり、静脈内用量には１０ｍｇ〜１０００ｍｇが必要となる場合がある。合計１日量は、１回で、または数回に分けて投与することができ、医師の裁量で、本明細書で示す典型的な範囲の範囲外になることもある。
【０１３５】
これらの投与量は、体重が約６０ｋｇ〜７０ｋｇである平均的なヒト対象に基づく。医師は、小児や高齢者などの、体重がこの範囲外にある対象のための用量を容易に決定することができよう。
【０１３６】
疑義を避けるために、本明細書における「治療」への言及は、治療的、姑息的、および予防的な治療への言及を含む。
【０１３７】
式（Ｉ）の化合物はすべて、以下で述べる一般法に記載の手順によって、または実施例の項および調製例の項に記載の特定の方法によって、またはその常法どおりの変更形態によって調製することができる。本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の調製方法のいずれか１つまたは複数に加えて、その中で使用する任意の新規な中間体も包含する。
【０１３８】
一般法
以下の略語を使用する。
ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド
ＴＥＭＰＯ＝２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−Ｎ−オキシド
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＤＣＭ＝ジクロロメタン
【０１３９】
式（Ｉ）の化合物は、以下のスキーム１に示すとおりに調製することができる。
【０１４０】
【化４】

【０１４１】
スキーム１において、Ｐはヒドロキシ保護基を表し、その好適な例は、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｗｕｔｓによる「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、１９９１年に記載されており、ＬＧは、ハロゲン、（Ｃ_１〜６アルキル）スルホニルオキシ（たとえばメタン−スルホニルオキシ）、（Ｃ_１〜６ハロアルキル）スルホニルオキシ（たとえばトリフルオロメタンスルホニルオキシ）、またはベンゼンもしくはトルエンスルホニルオキシ（たとえばｐ−トルエンスルホニルオキシ）などの好適な脱離基を表す。Ｐがベンジルであり、ＬＧがｐ−トルエンスルホニルオキシであることが好ましい。
【０１４２】
ステップ（ａ）：式（ＩＩＩ）の化合物は、化合物（ＩＩ）と、ヒドロキシ基を脱離基に変換することのできる適切な薬剤、通常はスルホニル化試薬（たとえば塩化メタンスルホニルまたは塩化ｐ−トルエンスルホニル）とから、塩基（たとえばトリエチルアミンまたはピリジン）の存在下、好適な溶媒（たとえばピリジンまたはジクロロメタン）中にて、０℃から室温で１５分間〜２４時間かけて調製することができる。
【０１４３】
好ましい条件は次のとおりである。ジクロロメタン中の１当量の化合物（ＩＩ）、１．２当量の塩化ｐ−トルエンスルホニル、２当量のピリジン、室温で１８時間。
【０１４４】
ステップ（ｂ）：式（ＩＶ）の化合物は、化合物（ＩＩＩ）と式（ＶＩ）のヒドロキシ化合物とから、好適な溶媒（たとえばＤＭＦ、ＤＭＳＯ）中にて、好適な塩基（たとえばＣｓ_２ＣＯ_３、Ｋ_２ＣＯ_３）の存在下、場合によりクラウンエーテル（たとえば１８−クラウン−６）の存在下、５０〜１２０℃で一晩かけて調製することができる。
【０１４５】
好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（ＶＩ）、１．１当量の化合物（ＩＩＩ）、１．２当量のＣｓ_２ＣＯ_３、ＤＭＦ中にて８０℃で２４時間。
【０１４６】
式（ＶＩ）の化合物は、ＷＯ０２／０７４７５４に一般に記載されている。ＸがＯであり、ｍが１であり、ＲがＣｌである特定の式（ＶＩ）の化合物は、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．（２００４年）、第１４巻（１８）、４６２７〜３２ページに記載のとおり、または以下のスキーム５で概略を述べるとおりに調製することができる。
【０１４７】
ステップ（ｃ）：式（ＩＶ）の化合物を好適な溶媒中で脱保護剤と反応させて脱保護すると、式（Ｖ）の化合物を得ることができる。好適な試薬および方法は、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（前掲書）に記載されている。Ｐがベンジルであるとき、好適な試薬の例には、三塩化ホウ素または塩化鉄（ＩＩＩ）が含まれる。
【０１４８】
好ましい条件は次のとおりである。ジクロロメタン中の１当量の化合物（ＩＶ）、４当量のＢＣｌ_３、室温で１８時間。
【０１４９】
ステップ（ｄ）：好適な溶媒中で酸化剤を使用して式（Ｖ）の化合物を酸化することにより、式（Ｉ）の化合物を調製することができる。典型的な試薬および条件としては、三酸化クロムおよび過ヨウ素酸（Ｈ_５ＩＯ_６）を触媒とし、アセトニトリルなどの溶媒中にて室温から５０℃で１８〜３６時間、または別法としてＮａＯＣｌおよびＮａＣｌＯ_２、触媒のＴＥＭＰＯの存在下、アセトニトリルなどの溶媒中にて０℃〜室温で１８〜３６時間が挙げられる。
【０１５０】
好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（Ｖ）、２．５当量の過ヨウ素酸、０．０２当量のＣｒＯ_３、０．７５％アセトニトリル水溶液中にて４０℃で２４時間。
【０１５１】
別法として、式（Ｉ）の化合物は、スキーム２に示すように、式（Ｖ）の化合物を、式（ＶＩＩ）のアルデヒドを介する二段階の手順で酸化して調製することができる。
【０１５２】
【化５】

【０１５３】
ステップ（ａ）：アルコール（Ｖ）をアルデヒド（ＶＩＩ）にする酸化は通常、触媒としてのＴＥＭＰＯと共にＮａＯＣｌを使用し、好適な溶媒、たとえばアセトニトリル、アセトン中にて０℃から室温で２〜１８時間、または別法として、ＤＭＳＯと共に三酸化物硫黄−ピリジン錯体を使用し、ＴＨＦなどの溶媒中にて０℃から室温で２〜１８時間実施する。
【０１５４】
ステップ（ｂ）：アルデヒド（ＶＩＩ）を酸（Ｉ）にするさらなる酸化は通常、ＮａＣｌＯ_２を使用し、リン酸カリウムの存在下、ｔ−ブタノール水溶液などの溶媒中にて０℃から室温で２〜１８時間、または別法として、触媒としてのＴＥＭＰＯと共にトリクロロイソシアニル酸を使用し、好適な溶媒、たとえばアセトンまたはアセトニトリル中にて０℃から室温で２〜１８時間実施する。
【０１５５】
式（ＩＩ）の化合物は文献で知られている。たとえば、Ａがシス−１，３−シクロブチレン基であり、Ｂが単結合である式（ＩＩ）の化合物は、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．、Ｐｅｒｋｉｎ Ｔｒａｎｓ．１（１９９５年）、第１８巻、２２８１〜７ページに記載のとおりに調製することができる。
【０１５６】
別法として、Ａがシス−またはトランス−１，３−シクロブチレン基であり、Ｂが単結合である式（Ｉ）の化合物である式（Ｉｂ）の化合物は、化合物（ＶＩＩＩ）または化合物（ＩＸ）から、スキーム３に示すような標準の方法によって調製することができる。トランス化合物（ＩＩ）および（Ｘ）は、それぞれシス化合物（ＩＩ）および（Ｘ）から、Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９８１年）、第１巻に記載のものと類似の光延化学を使用する反転によって得ることができる。
【０１５７】
【化６】

【０１５８】
スキーム３において、Ｒ^ａはエステル残基であり、その好適な例は、上でプロドラッグに関して述べ、また「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（前掲書）に記載されており（たとえば、（Ｃ_１〜６）アルキル、ベンジル、または（＋）もしくは（−）−メンチル）、ＬＧは、ハロゲン、（Ｃ_１〜６アルキル）スルホニルオキシ（たとえばメタンスルホニルオキシ）、（Ｃ_１〜６ハロアルキル）スルホニルオキシ（たとえばトリフルオロメタンスルホニルオキシ）、またはベンゼン−もしくはトルエンスルホニルオキシ（たとえばｐ−トルエンスルホニルオキシ）などの脱離基である。
【０１５９】
ステップ（ａ）：式（ＩＸ）の化合物は、化合物（ＶＩＩＩ）と式Ｒ^ａＯＨの好適なアルコール（たとえばメタノール、ｔ−ブタノール、ベンジルアルコール、または（−）メントール）とを、様々な条件下で反応させて調製することができ、その好適な例は、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（前掲書）に記載されている。
【０１６０】
好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（ＶＩＩＩ）、１．１当量の１，１’−カルボニルジイミダゾール、酢酸エチル中にて還流温度で１時間、その後１当量のＲ^ａＯＨ、室温で４時間。
【０１６１】
ステップ（ｂ）：化合物（ＩＸ）をアルコール（Ｘ）にする還元は、ＴＨＦなどの好適な溶媒中で、好適な還元剤、たとえば水素化ホウ素ナトリウムまたはＬ−Ｓｅｌｅｃｔｒｉｄｅ（登録商標）を使用して実施することができる。
【０１６２】
好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（ＩＸ）、０．５当量のＮａＢＨ_４、２０：１のＴＨＦ：メタノール中にて０℃で２０分間。
【０１６３】
ステップ（ｃ）：式（ＸＩ）の化合物は、化合物（Ｘ）から、スキーム１ステップ（ａ）に記載のものと同様の試薬および条件を使用して調製することができる。
【０１６４】
好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（Ｘ）、１．０５当量の塩化ｐ−トルエンスルホニル、ピリジン中、０℃から室温。
【０１６５】
ステップ（ｄ）：式（Ｉａ）の化合物は、化合物（ＸＩ）と式（ＶＩ）のヒドロキシ化合物とから、スキーム１ステップ（ｂ）に記載のものと同様の試薬および条件を使用して調製することができる。
【０１６６】
好ましい条件は次のとおりである。１．２当量の化合物（ＸＩ）、１．０当量の化合物（ＶＩ）、１．５当量のＣｓ_２ＣＯ_３、ＤＭＦ中にて８０℃で１８時間。
【０１６７】
ステップ（ｅ）：式（Ｉａ）の化合物を加水分解すると、式（Ｉｂ）の化合物を得ることができる。この反応は、様々な条件下で実現することができ、その好適な例は、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（前掲書）に記載されている。好ましい条件は次のとおりである。化合物（Ｉａ）、２当量のＮａＯＨ、１：１のエタノール：水中にて６０℃で２時間。
【０１６８】
化合物（ＶＩＩＩ）は、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、（１９８１年）、第５３巻、３８４１〜４３ページに記載されており、Ｒ^ａがメチル基である化合物（ＩＸ）は、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、（１９９４年）、第５９巻、２１３２〜３４ページに記載されている。
【０１６９】
【化７】

【０１７０】
Ｂがメチレン基である式（Ｉ）の化合物である式（Ｉｄ）の化合物は、スキーム４に示すとおりに調製することができる。
【０１７１】
【化８】

【０１７２】
スキーム４において、Ｒ^ａはエステル残基であり、その好適な例は、上でプロドラッグに関して述べており、また「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（前掲書）に記載されており（たとえば（Ｃ_１〜６）アルキルまたはベンジル）、ＬＧは、ハロゲン、（Ｃ_１〜６アルキル）スルホニルオキシ（たとえばメタンスルホニルオキシ）、（Ｃ_１〜６ハロアルキル）スルホニルオキシ（たとえばトリフルオロメタンスルホニルオキシ）、またはベンゼン−もしくはトルエンスルホニルオキシ（たとえばｐ−トルエンスルホニルオキシ）などの脱離基である。Ｒ^ａがベンジルであり、ＬＧがｐ−トルエンスルホニルオキシであることが好ましい。式（ＸＩＩ）の化合物は、市販品として得ることができる。
【０１７３】
ステップ（ａ）：式（ＸＩＩＩ）の化合物は、酸性または塩基性条件下、たとえば、メタノール、エタノール、１，４−ジオキサンなどを好適な共溶媒とする水酸化ナトリウム水溶液中で、またはエタノールや１，４−ジオキサンなどを場合により好適な共溶媒とする塩酸もしくは硫酸水溶液中で、式（ＸＩＩ）の化合物を加水分解することにより調製できる。
【０１７４】
好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（ＸＩＩ）、４当量のＮａＯＨ、１：１のエタノール：水中にて還流温度で２．５時間。
【０１７５】
ステップ（ｂ）：式（ＸＩＶ）の化合物は、式（ＸＩＩＩ）の化合物と式Ｒ^ａＯＨの好適なアルコール（たとえばメタノール、ｔ−ブタノール、ベンジルアルコール）とを、様々な条件下で反応させて調製することができ、その条件の好適な例は、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（前掲書）に記載されている。好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（ＸＩＩＩ）、１．１当量の１，１’−カルボニルジイミダゾール、酢酸エチル中、約１時間、その後１．２当量のベンジルアルコール、室温で１８時間。
【０１７６】
ステップ（ｃ）：式（ＸＶ）の化合物は、ＴＨＦなどの好適な溶媒中にて、０℃から室温で、式（ＸＩＶ）の化合物をボラン−ジメチルスルフィド、カテコールボラン、９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナン（９−ＢＢＮ）などのヒドロホウ素化剤で処理した後、ｉｎ ｓｉｔｕで、室温から６０℃にて、過酸化水素、過ホウ酸ナトリウム、トリメチルアミン−Ｎ−オキシドなどの酸化剤で酸化して調製することができる。
【０１７７】
好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（ＸＩＶ）、０．５当量のボラン−ジメチルスルフィド、ＴＨＦ中にて室温で１時間、その後１．２当量の過ホウ酸ナトリウム、６０℃で１時間の加熱。
【０１７８】
ステップ（ｄ）：式（ＸＶＩ）の化合物は、式（ＸＶ）の化合物から、スキーム１ステップ（ａ）に記載のものと同様の試薬および条件を使用して調製することができる。
【０１７９】
好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（ＸＶ）、１．３当量の塩化ｐ−トルエンスルホニル、２．６当量のピリジン、ＤＣＭ中、０℃から室温。
【０１８０】
ステップ（ｅ）：式（Ｉｃ）の化合物は、式（ＸＶＩ）の化合物と式（ＶＩ）のヒドロキシ化合物とから、スキーム１ステップ（ｂ）に記載のものと同様の試薬および条件を使用して調製することができる。
【０１８１】
好ましい条件は次のとおりである。１．２当量の化合物（ＸＶＩ）、１．０当量の化合物（ＶＩ）、１．５当量のＣｓ_２ＣＯ_３、ＤＭＦ中にて８０℃で１８時間。
【０１８２】
ステップ（ｆ）：式（Ｉｃ）の化合物を加水分解すると、式（Ｉｄ）の化合物を得ることができる。この反応は、様々な条件下で実現することができ、その好適な例は、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（前掲書）に記載されている。
【０１８３】
好ましい条件は次のとおりである。化合物（Ｉｃ）、過剰のＮａＯＨ、１：１のエタノール：水中にて６０℃で２時間。
【０１８４】
式（ＶＩ）の化合物は、ＷＯ０２／０７４７５４に一般に記載されている。ＸがＯまたはＳである式（ＶＩ）の化合物である特定の式（ＶＩａ）の化合物は、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．、（２００４年）、第１４巻（１８）、４６２７〜３２ページに記載のとおりに、または以下のスキーム５で概略を述べるとおりに調製することができる。
【０１８５】
【化９】

【０１８６】
スキーム５において、Ｒ^ｂは（Ｃ_１〜６）アルキルまたはベンジルである。
【０１８７】
ステップ（ａ）：式（ＸＶＩＩＩ）の化合物は、アニリン（ＸＶＩＩ）とナトリウムまたはカリウムのシアン酸塩またはチオシアン酸塩とを、マレイン酸や酢酸などの酸の存在下、好適な溶媒または溶媒混合物中、たとえばジクロロメタンまたは酢酸：水中で反応させて調製することができる。別法として、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物は、アニリン（ＸＶＩＩ）とイソシアン酸またはチオシアン酸塩トリメチルシリルとを、ジクロロメタンなどの溶媒中で反応させた後、ｉｎ ｓｉｔｕで水によって加水分解して調製することができる。
【０１８８】
ＸがＯであるときの好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（ＸＶＩＩ）、酢酸：水（９：１）中、その後１．２当量のシアン酸カリウム、水中、滴下、４０℃で１時間保つ。
【０１８９】
ステップ（ｂ）：式（ＸＩＸ）の化合物は、式（ＸＶＩＩＩ）の尿素と適切なケトンとを、ポリリン酸やＥａｔｏｎ試薬（メタンスルホン酸中７．５％Ｐ_２Ｏ_５）などの脱水剤の存在下、５０℃〜１００℃の間で反応させて調製することができる。
【０１９０】
好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（ＸＶＩＩＩ）、Ｅａｔｏｎ試薬（３０ｇ／ｇ）、６０℃、その後２当量のケトン、８０℃で１時間の加熱。
【０１９１】
ステップ（ｃ）：式（ＶＩａ）の化合物は、式（ＸＩＸ）の化合物を、ジクロロメタンなどの好適な溶媒中にて室温で三臭化ホウ素などのルイス酸と反応させ、または高温で強酸と、たとえば１１０℃で臭化水素酸と反応させることにより調製できる。
【０１９２】
好ましい条件は次のとおりである。１当量の化合物（ＸＩＸ）、２０当量の４８％臭化水素水溶液、酢酸中にて１１０℃で４日間。
【０１９３】
式（Ｉ）のＰＤＥ７阻害剤は、特に疼痛の治療において、もう１種の薬理活性のある化合物、または２種以上の他の薬理活性のある化合物と有益に組み合わせることができる。たとえば、上で定義した、式（Ｉ）のＰＤＥ７阻害剤、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグは、以下のものから選択される１種または複数の薬剤と組み合わせて、同時、逐次、または別々に投与することができる。
・オピオイド鎮痛薬、たとえば、モルヒネ、ヘロイン、ヒドロモルフォン、オキシモルフォン、レボルファノール、レバロルファン、メサドン、メペリジン、フェンタニル、コカイン、コデイン、ジヒドロコデイン、オキシコドン、ハイドロコドン、プロポキシフェン、ナルメフェン、ナロルフィン、ナロキソン、ナルトレキソン、ブプレノルフィン、ブトルファノール、ナルブフィン、またはペンタゾシン、
・非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、たとえば、アスピリン、ジクロフェナク、ジフルシナル（ｄｉｆｌｕｓｉｎａｌ）、エトドラク、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルフェニサール（ｆｌｕｆｅｎｉｓａｌ）、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ケトロラック、メクロフェナム酸、メフェナム酸、メロキシカム、ナブメトン、ナプロキセン、ニメスリド、ニトロフルルビプロフェン、オルサラジン、オキサプロジン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、スルファサラジン、スリンダク、トルメチン、またはゾメピラク、
・バルビツール酸系鎮静薬、たとえば、アモバルビタール、アプロバルビタール、ブタバルビタール、ブタビタール（ｂｕｔａｂｉｔａｌ）、メフォバルビタール、メタルビタール、メトヘキシタール、ペントバルビタール、フェノバルチタール（ｐｈｅｎｏｂａｒｔｉｔａｌ）、セコバルビタール、タルブタール、テアミラル（ｔｈｅａｍｙｌａｌ）、またはチオペンタール、
・鎮静作用を有するベンゾジアゼピン、たとえば、クロルジアゼポキシド、クロラゼプ酸、ジアゼパム、フルラゼパム、ロラゼパム、オキサゼパム、テマゼパム、またはトリアゾラム、
・鎮静作用を有するＨ_１拮抗薬、たとえば、ジフェンヒドラミン、ピリラミン、プロメタジン、クロルフェニラミン、またはクロルシクリジン、
・鎮静薬、たとえば、グルテチミド、メプロバメート、メタカロン、またはジクロラールフェナゾンなど、
・骨格筋弛緩薬、たとえば、バクロフェン、カリソプロドール、クロルゾキサゾン、シクロベンザプリン、メトカルバモール、またはオルフレナジン（ｏｒｐｈｒｅｎａｄｉｎｅ）、
・ＮＭＤＡ受容体拮抗薬、たとえば、デキストロメトルファン（（＋）−３−ヒドロキシ−Ｎ−メチルモルヒナン）もしくはその代謝産物デキストロルファン（（＋）−３−ヒドロキシ−Ｎ−メチルモルヒナン）、ケタミン、メマンチン、ピロロキノリンキニン、シス−４−（ホスホノメチル）−２−ピペリジンカルボン酸、ブジピン、ＥＮ−３２３１（ＭｏｒｐｈｉＤｅｘ（登録商標）、モルヒネとデキストロメトルファンの合剤）、トピラメート、ネラメキサン（ｎｅｒａｍｅｘａｎｅ）、またはペルジンフォテル（ｐｅｒｚｉｎｆｏｔｅｌ）（ＮＲ２Ｂ拮抗薬、たとえば、イフェンプロジル、トラキソプロジル（ｔｒａｘｏｐｒｏｄｉｌ）、または（−）−（Ｒ）−６−｛２−［４−（３−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−１−ピペリジニル］−１−ヒドロキシエチル−３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−キノリノンを含む）、
・α−アドレナリン作動薬、たとえば、ドキサゾシン、タムスロシン、クロニジン、グァンファシン、デクスメタトミジン（ｄｅｘｍｅｔａｔｏｍｉｄｉｎｅ）、モダフィニル、または４−アミノ−６，７−ジメトキシ−２−（５−メタン−スルホンアミド−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノール−２−イル）−５−（２−ピリジル）キナゾリン、
・三環系抗うつ薬、たとえば、デシプラミン、イミプラミン、アミトリプチリン、またはノルトリプチリン、
・抗痙攣薬、たとえば、カルバマゼピン、ラモトリジン、トピラトメート（ｔｏｐｉｒａｔｍａｔｅ）、またはバルプロエート、
・タキキニン（ＮＫ）拮抗薬、特にＮＫ−３、ＮＫ−２、またはＮＫ−１拮抗薬、たとえば、（αＲ，９Ｒ）−７−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）ベンジル］−８，９，１０，１１−テトラヒドロ−９−メチル−５−（４−メチルフェニル）−７Ｈ−［１，４］ジアゾシノ［２，１−ｇ］［１，７］−ナフチリジン−６−１３−ジオン（ＴＡＫ−６３７）、５−［［（２Ｒ，３Ｓ）−２−［（１Ｒ）−１−［３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］エトキシ−３−（４−フルオロフェニル）−４−モルホリニル］−メチル］−１，２−ジヒドロ−３Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−オン（ＭＫ−８６９）、アプレピタント、ラネピタント、ダピタント、または３−［［２−メトキシ−５−（トリフルオロメトキシ）フェニル］−メチルアミノ］−２−フェニルピペリジン（２Ｓ，３Ｓ）、
・ムスカリン性拮抗薬、たとえば、オキシブチニン、トルテロジン、プロピベリン、塩化トロプシウム（ｔｒｏｐｓｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ダリフェナシン、ソリフェナシン、テミベリン、およびイプラトロピウム、
・ＣＯＸ−２選択的阻害剤、たとえば、セレコキシブ、ロフェコキシブ、パレコキシブ、バルデコキシブ、デラコキシブ（ｄｅｒａｃｏｘｉｂ）、エトリコキシブ、またはルミラコキシブ、
・コールタール鎮痛薬、特にパラセタモール、
・神経弛緩薬、たとえば、ドロペリドール、クロルプロマジン、ハロペリドール、ペルフェナジン、チオリダジン、メソリダジン、トリフルオペラジン、フルフェナジン、クロザピン、オランザピン、リスペリドン、ジプラシドン、クエチアピン、セルチンドール、アリピプラゾール、ソネピプラゾール、ブロナンセリン、イロペリドン、ペロスピロン、ラクロプライド、ゾテピン、ビフェプルノックス、アセナピン、ルラシドン、アミスルプリド、バラペリドン、パリンドーレ（ｐａｌｉｎｄｏｒｅ）、エプリバンセリン、オサネタント、リモナバント、メクリネルタント（ｍｅｃｌｉｎｅｒｔａｎｔ）、Ｍｉｒａｘｉｏｎ（登録商標）、サリゾタン（ｓａｒｉｚｏｔａｎ）など、
・バニロイド受容体作動薬（たとえばレシンフェラトキシン（ｒｅｓｉｎｆｅｒａｔｏｘｉｎ））または拮抗薬（たとえばカプサゼピン）、
・プロプラノロールなどのβ−アドレナリン作動薬、
・メキシレチンなどの局所麻酔薬、
・デキサメタゾンなどの副腎皮質ステロイド、
・５−ＨＴ受容体作動薬または拮抗薬、特に、エレトリプタン、スマトリプタン、ナラトリプタン、ゾルミトリプタン、リザトリプタンなどの５−ＨＴ_１Ｂ／_１Ｄ作動薬、
・Ｒ（＋）−α−（２，３−ジメトキシ−フェニル）−１−［２−（４−フルオロフェニルエチル）］−４−ピペリジンメタノール（ＭＤＬ−１００９０７）などの５−ＨＴ_２Ａ受容体拮抗薬、
・コリン作用性（ニコチン性）鎮痛薬、たとえば、イスプロニクリン（ＴＣ−１７３４）、（Ｅ）−Ｎ−メチル−４−（３−ピリジニル）−３−ブテン−１−アミン（ＲＪＲ−２４０３）、（Ｒ）−５−（２−アゼチジニルメトキシ）−２−クロロピリジン（ＡＢＴ−５９４）、ニコチンなど、
・Ｔｒａｍａｄｏｌ（登録商標）、
・ＰＤＥＶ阻害剤、たとえば、５−［２−エトキシ−５−（４−メチル−１−ピペラジニル−スルホニル）フェニル］−１−メチル−３−ｎ−プロピル−１，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン（シルデナフィル）、（６Ｒ，１２ａＲ）−２，３，６，７，１２，１２ａ−ヘキサヒドロ−２−メチル−６−（３，４−メチレンジオキシフェニル）−ピラジノ［２’，１’：６，１］−ピリド［３，４−ｂ］インドール−１，４−ジオン（ＩＣ−３５１またはタダラフィル）、２−［２−エトキシ−５−（４−エチル−ピペラジン−１−イル−１−スルホニル）−フェニル］−５−メチル−７−プロピル−３Ｈ−イミダゾ［５，１−ｆ］［１，２，４］トリアジン−４−オン（バルデナフィル）、５−（５−アセチル−２−ブトキシ−３−ピリジニル）−３−エチル−２−（１−エチル−３−アゼチジニル）−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン、５−（５−アセチル−２−プロポキシ−３−ピリジニル）−３−エチル−２−（１−イソプロピル−３−アゼチジニル）−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン、５−［２−エトキシ−５−（４−エチルピペラジン−１−イルスルホニル）ピリジン−３−イル］−３−エチル−２−［２−メトキシエチル］−２，６−ジヒドロ−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−７−オン、４−［（３−クロロ−４−メトキシベンジル）アミノ］−２−［（２Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（ピリミジン−２−イルメチル）ピリミジン−５−カルボキサミド、３−（１−メチル−７−オキソ−３−プロピル−６，７−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−５−イル）−Ｎ−［２−（１−メチルピロリジン−２−イル）エチル］−４−プロポキシベンゼンスルホンアミドなど、
・α−２−δリガンド、たとえば、ギャバペンチン、プレガバリン、３−メチルギャバペンチン、（１α，３α，５α）（３−アミノ−メチル−ビシクロ［３．２．０］ヘプタ−３−イル）−酢酸、（３Ｓ，５Ｒ）−３−アミノメチル−５−メチル−ヘプタン酸、（３Ｓ，５Ｒ）−３−アミノ−５−メチル−ヘプタン酸、（３Ｓ，５Ｒ）−３−アミノ−５−メチル−オクタン酸、（２Ｓ，４Ｓ）−４−（３−クロロフェノキシ）プロリン、（２Ｓ，４Ｓ）−４−（３−フルオロベンジル）−プロリン、［（１Ｒ，５Ｒ，６Ｓ）−６−（アミノメチル）ビシクロ［３．２．０］ヘプタ−６−イル］酢酸、３−（１−アミノメチル−シクロヘキシルメチル）−４Ｈ−［１，２，４］オキサジアゾール−５−オン、Ｃ−［１−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）−シクロヘプチル］−メチルアミン、（３Ｓ，４Ｓ）−（１−アミノメチル−３，４−ジメチル−シクロペンチル）−酢酸、（３Ｓ，５Ｒ）−３−アミノメチル−５−メチル−オクタン酸、（３Ｓ，５Ｒ）−３−アミノ−５−メチル−ノナン酸、（３Ｓ，５Ｒ）−３−アミノ−５−メチル−オクタン酸、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−アミノ−４，５−ジメチル−ヘプタン酸、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）−３−アミノ−４，５−ジメチル−オクタン酸など、
・カンナビノイド、
・代謝調節型グルタミン酸サブタイプ１受容体（ｍＧｌｕＲ１）拮抗薬、
・セロトニン再取込み阻害剤、たとえばセルトラリン、セルトラリン代謝産物のデメチルセルトラリン、フルオキセチン、ノルフルオキセチン（フルオキセチンデスメチル代謝産物）、フルボキサミン、パロキセチン、シタロプラム、シタロプラム代謝産物のデスメチルシタロプラム、エスシタロプラム、ｄ，ｌ−フェンフルラミン、フェモキセチン、イフォキセチン（ｉｆｏｘｅｔｉｎｅ）、シアノドチエピン（ｃｙａｎｏｄｏｔｈｉｅｐｉｎ）、リトキセチン、ダポキセチン、ネファゾドン、セリクラミン、トラゾドンなど、
・ノルアドレナリン（ノルエピネフリン）再取込み阻害剤、たとえば、マプロチリン、ロフェプラミン、ミルタゼピン（ｍｉｒｔａｚｅｐｉｎｅ）、オキサプロチリン、フェゾラミン、トモキセチン、ミアンセリン、ブプロプリオン、ブプロプリオン代謝産物のヒドロキシブプロプリオン、ノミフェンシン、ビロキサジン（Ｖｉｖａｌａｎ（登録商標））など、特に選択的ノルアドレナリン再取込み阻害剤、たとえばレボキセチン、特に（Ｓ，Ｓ）−レボキセチンなど、
・セロトニン−ノルアドレナリン再取込み二重阻害剤、たとえば、ベンラフェキシン、ベンラフェキシン代謝産物のＯ−デスメチルベンラフェキシン、クロミプラミン、クロミプラミン代謝産物のデスメチルクロミプラミン、デュロキセチン、ミルナシプラン、イミプラミンなど、
・誘導型一酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）阻害剤、たとえば、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−Ｌ−ホモシステイン、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）−アミノ］エチル］−４，４−ジオキソ−Ｌ−システイン、Ｓ−［２−［（１−イミノエチル）アミノ］エチル］−２−メチル−Ｌ−システイン、（２Ｓ，５Ｚ）−２−アミノ−２−メチル−７−［（１−イミノエチル）アミノ］−５−ヘプテン酸、２−［［（１Ｒ，３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−（５−チアゾリル）−ブチル］チオ］−５−クロロ−３−ピリジンカルボニトリル、２−［［（１Ｒ，３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−（５−チアゾリル）ブチル］チオ］−４−クロロベンゾニトリル、（２Ｓ，４Ｒ）−２−アミノ−４−［［２−クロロ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］チオ］−５−チアゾールブタノール、２−［［（１Ｒ，３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−（５−チアゾリル）ブチル］チオ］−６−（トリフルオロメチル）−３ピリジンカルボニトリル、２−［［（１Ｒ，３Ｓ）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−（５−チアゾリル）ブチル］チオ］−５−クロロベンゾニトリル、Ｎ−［４−［２−（３−クロロベンジルアミノ）エチル］フェニル］チオフェン−２−カルボキサミジン、グアニジノエチルジスルフィドなど、
・ドネペジルなどのアセチルコリンエステラーゼ阻害剤、
・プロスタグランジンＥ_２サブタイプ４（ＥＰ４）拮抗薬、たとえば、Ｎ−［（｛２−［４−（２−エチル−４，６−ジメチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジン−１−イル）フェニル］エチル｝アミノ）−カルボニル］−４−メチルベンゼンスルホンアミドや４−［（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（３−フルオロフェノキシ）ピリジン−３−イル］カルボニル｝アミノ）エチル］安息香酸など、
・ロイコトリエンＢ４拮抗薬、たとえば、１−（３−ビフェニル−４−イルメチル−４−ヒドロキシ−クロマン−７−イル）−シクロペンタンカルボン酸（ＣＰ−１０５６９６）、５−［２−（２−カルボキシエチル）−３−［６−（４−メトキシフェニル）−５Ｅ−ヘキセニル］オキシフェノキシ］−吉草酸（ＯＮＯ−４０５７）、ＤＰＣ−１１８７０など、
・５−リポキシゲナーゼ阻害剤、たとえば、ジロートン、６−［（３−フルオロ−５−［４−メトキシ−３，４，５，６−テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル］）フェノキシ−メチル］−１−メチル−２−キノロン（ＺＤ−２１３８）、２，３，５−トリメチル−６−（３−ピリジルメチル），１，４−ベンゾキノン（ＣＶ−６５０４）など、
・リドカインなどのナトリウムチャネル遮断薬、
・オンダンセトロンなどの５−ＨＴ３拮抗薬、
ならびにこれらの薬学的に許容できる塩および溶媒和物。
【０１９４】
式（Ｉ）の化合物のＰＤＥ７阻害能は、以下のアッセイプロトコルを使用して測定することができる。
【０１９５】
ＰＤＥ７ＡおよびＰＤＥ７Ｂ酵素は、３’，５’−環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）を５’アデノシン一リン酸酸、すなわち５’ＡＭＰにする加水分解を触媒する。マルチウェルプレートにおいて、ＰＤＥ酵素、［^３Ｈ］−ｃＡＭＰ、および試験化合物を室温でインキュベートする。硫酸亜鉛を含有する市販のケイ酸イットリウムシンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）ビーズを加えて、インキュベートを終了する。ケイ酸イットリウムビーズは、直鎖状のヌクレオチドを優先的に結合し、したがって酵素反応の産物である［^３Ｈ］−５’ＡＭＰがこのビーズに結合して、光シグナルを生成し、これがシンチレーション計数器によって検出される。生成されたシグナルの量は、生成された産物の量、すなわち酵素の活性と直接に相関する。酵素および基質を単独でインキュベートする場合に最大のシグナルが得られる。酵素を含有しないウェル、または最大上濃度の既知のＰＤＥ７Ａ／Ｂ阻害剤を含有するウェルからのバックグラウンドシグナルを測定する。精製した各酵素バッチを品質管理下に置き、そのＫ_ｍ、Ｖ_ｍａｘ、および比活性を動力学的研究から求めた後、化合物阻害研究で使用する。試験化合物による酵素の阻害を、最大反応およびバックグラウンド反応と比較して算出する。これらのデータを使用し、得られた最大値および最小値と比較して％阻害値を算出する。
【０１９６】
作用溶液の調製
以下の表１に示す成分から、１０００ｍｌの保存緩衝液を調製した。
【０１９７】
【表１】

【０１９８】
保存緩衝液を室温でｐＨ７．４に調整し、次いで０．２μｍフィルターで濾過した。保存緩衝液は、４℃で調製日から１ヶ月間安定である。
【０１９９】
実験日に、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ、Ｓｉｇｍａから入手可能）を必要な体積の緩衝液に加えて、０．００６２５％のＢＳＡ最終溶液を作った。これは、保存１０％ＢＳＡ溶液を次のように調製することにより実現した。
【０２００】
保存１０％ＢＳＡ溶液の調製
１ｇのＢＳＡを１０ｍｌの精製水に溶解させ、反転させて混合し、確実に均質になるようにし、適切にラベルを貼った管に１００μｌ体積で等分した。１０％ＢＳＡ溶液は、−２０℃で最長６ヶ月間安定である。
【０２０１】
一定分量の保存１０％ＢＳＡ保存液を保管所から取り出し、使用する前に室温で解凍して、以下の表２に示すようにＢＳＡ作用溶液を作った。
【０２０２】
１０ｍｌの作用ＢＳＡアッセイ緩衝液の調製
【０２０３】
【表２】

【０２０４】
標準化合物および対照の調製
ＷＯ０２／０７４７５４の実施例７５の化合物、すなわち５’−カルボキシプロポキシ−８’−クロロ−スピロ［シクロヘキサン−１−４’−（３’，４’−ジヒドロ）キナゾリン］−２’（１’Ｈ）−オン（以下では「化合物Ａ」）を標準物質として使用した。
【０２０５】
１００％ＤＭＳＯ中に調製した４ｍＭの保存液は、４℃で保存することができる。ＤＭＳＯの体積は、次のように算出することができる。
【０２０６】
【数１】

【０２０７】
３０倍最大対照は、１００％ＤＭＳＯの溶液である。酵素活性をもたらさない３０倍最小対照は、３０μＭの１００％ＤＭＳＯ中化合物Ａを使用して実現する。１００％ＤＭＳＯ４．９６２ｍｌを４ｍＭの化合物Ａ３７．５μｌに加えて、化合物Ａの３０μＭ溶液５ｍｌを調製することができる。
【０２０８】
方法
アッセイ日に、前もって詳述したとおりに１倍の最終アッセイ緩衝液を調製し、必要になるまで氷上で保存した。
【０２０９】
動力学的研究
それぞれの新たな酵素バッチについて、Ｋ_ｍを求め、反応進行曲線の線形部分に残る間、４５分間で約１０００ｃｐｍのシグナルを得るのに必要な酵素の量を評価した。アッセイの過程の間に＜１０％の利用可能な［^３Ｈ］−ｃＡＭＰが加水分解されることが理想的である。
【０２１０】
酵素溶液
このアッセイの最適化は、全長ＰＤＥ７ＡおよびＰＤＥ７Ｂ酵素を含有する細胞溶解液を使用して実施している。この細胞溶解物サンプル中の酵素の濃度は不明であるので、細胞溶解物の比活性を尺度として用いて、濃度／活性のバッチごとのどんな差異にもかかわらず、確実にウェルあたり同一の活性が使用されるようにする。
【０２１１】
ＰＤＥ７Ａ／Ｂ酵素の調製
ＰＤＥ７保存酵素を調製し、凍結／解凍サイクルの数を減らすために適切にサイズ分けされた一定分量にして−２０℃で保存した。以下の表３は、９ｍｌのＰＤＥ７Ａ／Ｂ酵素溶液を生成するのに必要な体積を示す。ＰＤＥ７Ａは１／８０００に、ＰＤＥ７Ｂは１／１００００に希釈する。
【０２１２】
【表３】

【０２１３】
酵素溶液を調製したならば、それを使用前に氷上で保存した。
【０２１４】
５０ｎＭのアデノシン３’，５’環状リン酸（ｃＡＭＰ）基質溶液の調製
基質は、未標識ｃＡＭＰとトリチウムで放射標識したｃＡＭＰ（［^３Ｈ］−ｃＡＭＰ）の混合物から構成されるものである。［^３Ｈ］−ｃＡＭＰ保存物の規格によって、使用する体積が決まる。
【０２１５】
１ｍＣｉ／ｍｌおよび２４Ｃｉ／ｍｍｏｌ（したがって４１．６６μＭ）である［^３Ｈ］−ｃＡＭＰ保存物を使用する９ｍｌの基質溶液の調製について以下で述べる。
【０２１６】
酵素バッチのＫ_ｍは、これまでのところ以下のとおりである。
ＰＤＥ７Ａ−２０ｎＭ ＰＤＥ７Ｂ−１００ｎＭ
【０２１７】
アッセイでは、１５μｌの基質溶液が、分注されて３０μｌの合計アッセイ体積になる、すなわちアッセイプレートで２倍希釈が行われる必要がある。
【０２１８】
約２５ｎＭの最終アッセイ［ｃＡＭＰ］が必要となるので、約５０ｎＭの［^３Ｈ］−ｃＡＭＰを調製した。
【０２１９】
１０．８μｌの［^３Ｈ］−ｃＡＭＰ（Ａｍｅｒｓｈａｍから入手可能）と８９７５μｌのアッセイ緩衝液とを混合して、９ｍｌの基質溶液を調製した。
【０２２０】
３本のシンチレーションバイアルに１５μｌのサンプルを取って、ｃＡＭＰの正確な濃度を決定した。次いで、４ｍｌのＳｔａｒｓｃｉｎｔ（登録商標）（シンチレーションカクテル、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒから入手可能）を加え、管をｄｐｍプログラムによるβカウンターでのカウントにかけた。
【０２２１】
放射性リガンドの濃度は、以下の式によって求める。
【０２２２】
【数２】

【０２２３】
次いで、濃度を２で割って、アッセイプレートで２倍希釈が行われていることを計算に入れる。
【０２２４】
６．６ｍｇ／ｍｌのケイ酸イットリウムＰＤＥ ＳＰＡビーズの調製
ホスホジエステラーゼＳＰＡビーズ（ケイ酸イットリウム）は、Ａｍｅｒｓｈａｍから入手可能である。
【０２２５】
製造者の推奨に従い、２８ｍｌの蒸留水または脱イオン水（約２０ｍｇ／ｍｌ）を使用して、ビーズのバイアルを再構成した。再構成されたビーズは、２〜８℃で保存したとき、１ヶ月間安定である。アッセイ用のビーズを調製するために、再構成されたビーズを無菌二重蒸留水（約６．６ｍｇ／ｍｌ）中に３倍希釈した。ビーズを安定させることができるので、分注しながら一定にかき混ぜた／攪拌した（ｓｔｉｒｒｅｄ／ａｇｉｔａｔｅｄ）。
【０２２６】
約６．６ｍｇ／ｍｌのビーズ３０μｌを３０μｌのアッセイに加えて、最終ビーズ濃度を約０．２ｍｇ／ウェルとする。
【０２２７】
化合物希釈物および「バックグラウンド」ウェルは、アッセイプレートにおいて必要となるものの３０倍にしてあるので、１μｌの化合物を２９μｌの他のアッセイ構成要素（１４μｌの酵素および１５μｌの放射性リガンド）によって希釈した。すなわち、最終アッセイ濃度１０μＭでは、化合物は、化合物添加プレートにおいて３００μＭでなければならない。化合物の４ｍＭ保存物は、１００％ＤＭＳＯ中に供給される（または粉末提出物から４ｍＭで作られる）。これには、ＤＭＳＯ中で１／１３．３３希釈を行う必要がある。
【０２２８】
アッセイプロトコル
１μｌの試験化合物を、試薬のアッセイ付加の直前に好適なマルチウェルアッセイプレートに移し、次いで１４μｌの酵素溶液をアッセイプレートに加えた後、１５μｌの基質溶液を加えた（すなわち、最終アッセイ体積３０μｌ、最終スクリーニング化合物濃度１μＭ）。次いで、プレートシーラーを使用してプレートをシールし、プレート振盪機に載せて室温で４５分間インキュベートした。
【０２２９】
次いで、３０μｌのケイ酸イットリウムＰＤＥ４ ＳＰＡビーズを加え、ビーズを一定に攪拌してアッセイプレート中に確実に一様な分布が得られるようにした。次いで、プレートシーラーを使用してプレートをシールし、プレート振盪機に載せて室温で３０分間インキュベートした。次いで、ビーズを３０分間安定させた後、プレートを２００ｇで１分間回転させた。
【０２３０】
次いで、好適な放射能カウンター、たとえばＮＸＴ−ＴｏｐＣｏｕｎｔ（商標）（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒから入手可能）によって、関連するプロトコル（ウェルあたり３０秒の読み時間）を使用してプレートを読み取った。
【０２３１】
最小二乗アルゴリズムを使用して、データをシグモイド曲線に適合させた。
【０２３２】
次のＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｓｏｆの式を使用して、ＩＣ_５０値をＫ_ｉ値に変換した。
【０２３３】
【数３】

【０２３４】
実施例１〜７の化合物のＰＤＥ７阻害活性を、上記プロトコルに従って試験した。得られたＫ_ｉ値を以下の表４に示す。
【０２３５】
【表４】

【０２３６】
ヒト肝細胞データの概要
本出願の実施例１〜７の化合物のヒト肝代謝安定性を、以下で述べるモデルで評価した。最も近い現況技術を表すと考えられるＷＯ０２／０７４７５４の実施例７５の化合物５’−カルボキシプロポキシ−８’−クロロ−スピロ［シクロヘキサン−１−４’−（３’，４’−ジヒドロ）キナゾリン］−２’（１’Ｈ）−オン（以下では「化合物Ａ」）を比較として使用した。
【０２３７】
方法
肝細胞をｉｎ ｖｉｔｒｏ系として使用して、肝代謝をモニターする。というのは、これらの無処置細胞は、シトクロムＰ４５０オキシダーゼ（ＣＹＰ）、アルデヒドオキシダーゼ、モノアミンオキシダーゼ（ＭＡＯ）などの第一相酵素、およびＵＤＰ−グルクロニルトランスフェラーゼやスルホトランスフェラーゼなどの第二相酵素を含む、ｉｎ ｖｉｖｏで見出されるすべての肝酵素を含有している。凍結保存したヒト肝細胞を５人のドナーから調製し、ＷｉｌｌｉａｍｓのＥ培地に懸濁させた。４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）を加えて最終濃度を５０ｍＭとし、ｐＨを７．４に調整する。試験基質をＤＭＳＯに溶解し、肝細胞に加えて、基質濃度を１μＭとし、インキュベートにおける最終ＤＭＳＯ濃度は０．１％より低くする。実験は、９６または３８４ウェルプレートにおいて、肝細胞密度を５０万生存細胞／ｍＬとして３７℃で実施する。１０、２０、３０、６０、９０、および１２０分のサンプル採取時間を使用し、分析の定量化はＬＣ−ＭＳ／ＭＳによるものとする。次式を使用して、固有クリアランス（見かけ上）を算出する。
ＣＬｉｎｔ，ａｐｐ＝［−勾配／０．５Ｍ細胞／ｍＬ］・１０００μＬ／ｍＬ＝μＬ／分／Ｍ細胞
【０２３８】
本発明の化合物のヒト肝代謝安定性を、上記プロトコルに従って試験した。得られた固有クリアランス値を以下の表５に示す。
【０２３９】
【表５】

【０２４０】
上の表５に示すデータは、固有の肝代謝安定性に関して、本出願の実施例１〜７の化合物と、最も近い従来技術の化合物Ａとの明らかな差異を示す。したがって、上記データに基づき、本出願の実施例１〜７の化合物は、肝クリアランスが低下しているので、化合物Ａと比べてヒトにおける半減期の改善された化合物をもたらすと思われる。
【０２４１】
ラットＩＶ薬物動態の概要
実施例１および２の化合物の薬物動態学的性質を、以下で述べるラットモデルで試験した。最も近い現況技術であると考えられるＷＯ０２／０７４７５４の実施例７５の化合物５’−カルボキシプロポキシ−８’−クロロ−スピロ［シクロヘキサン−１−４’−（３’，４’−ジヒドロ）キナゾリン］−２’（１’Ｈ）−オン（以下では「化合物Ａ」）を比較として使用した。
【０２４２】
方法
試験化合物を雄のラットに１ｍｇ／ｋｇ（実施例１の化合物については０．０８ｍｇ／ｋｇ）の投与量で尾静脈から投与した（各ラットに１種類の化合物を与える）。投与後の所定の時点で、外科的に移植した頸静脈カニューレを介してラットから血液サンプルを抜き取り、遠心分離して血漿を生成した。血漿中の薬物を定量化するために、血漿サンプルを特定のＬＣ−ＭＳ／ＭＳアッセイによって分析した。各化合物の性質を理解するために、得られる血漿濃度−時間曲線を、非コンパートメントの薬物動態分析を使用して調べた。その後、得られる出力を使用して、確からしいヒト薬物動態プロフィールを以下で述べるとおりに推定した。
【０２４３】
実施例１および２の化合物ならびに化合物Ａを１ｍｇ／ｋｇで静脈内投与した後の、投与量で正規化した平均薬物動態プロフィールを以下の表６および図１に示す。
【０２４４】
【表６】

【０２４５】
表６では次の略語を使用する。
Ｃｌはラットクリアランスであり、
Ｔ_１／_２は半減期であり、
Ｖ_ｄはラットにおける分布体積であり、
ｆｕｐはラット血漿中の非結合画分であり、
Ｃｌ_ｕは非結合ラット血漿クリアランスであり、Ｃｌ_ｕ＝ＣＩ／ｆｕｐである。
【０２４６】
ヒト薬物動態の推定
ラットにおける上記薬物動態学的データに基づき、実施例１および２の化合物ならびに化合物Ａの確からしいヒト薬物動態は、以下のとおりに推定できる。
【０２４７】
・以下の関係式を使用して、静脈内投与後に観察された非結合ラット血漿クリアランス（Ｃｌ_ｕラット）を基準化して、非結合ヒト血漿クリアランス（Ｃｌ_ｕヒト）を推定する。
Ｃｌ_ｕヒト＝Ｃｌ_ｕラット^＊（ＢＷ_ヒト／ＢＷ_ラット）^０．７５
［式中、ＢＷ_ヒトおよびＢＷ_ラットは、それぞれヒト（７０ｋｇ）およびラット（０．２５ｋｇ）の平均体重であり、クリアランスの単位はｍｌ／分である。］
【０２４８】
・Ｃｌ_ｕヒトをヒトにおける推定合計血液クリアランス（Ｃｌ_ヒト）に変換する。
Ｃｌ_ヒト＝［（Ｃｌ_ｕヒト）^＊ｆ_ｕｐ］／Ｂ：Ｐ
［式中、ｆ_ｕｐは、血漿中の非結合薬物の遊離画分であり、Ｂ：Ｐは、ヒト血液中の血液対血漿比である。］
【０２４９】
・次の関係式を使用して導かれるヒト半減期の推定値を各化合物について示す。
Ｔ_１／２＝［ｌｎ（２）^＊Ｖ_ｄ］／Ｃｌ
［式中、Ｔ_１／_２は時間での推定ヒト半減期であり、Ｖ_ｄはヒトにおける分布体積であり（この系列の物理化学により０．２Ｌ／ｋｇであると仮定される）、Ｃｌはヒトクリアランスである。］
【０２５０】
推定ヒト薬物動態の概要を以下の表７に示す。
【０２５１】
【表７】

【０２５２】
上記表６および７に示すデータでは、ラットにおける観察された薬物動態および推定ヒト薬物動態の両方に関して、従来技術の化合物Ａと比べて、本出願の実施例２の化合物間に明らかな差異が示されている。このことは、約１時間のヒトでの半減期を示すと思われる化合物Ａと比べて、実施例２の化合物では１０時間であると推定された突出したヒト半減期に現れている。
【０２５３】
したがって、上記データに基づき、本出願の実施例２の化合物の薬物動態は、臨床現場では１日１回または２回の投薬に相応しいであろうと思われる。本出願の実施例１の化合物の薬物動態は、１日２回または３回の投薬に相応しいといえる。これは、その短い半減期のために同じようにして投与するのには適さないと思われる、最も近い従来技術の化合物Ａに優る著しい進歩である。
【０２５４】
神経因性疼痛の治療における本発明による式（Ｉ）の化合物の活性は、以下の試験プロトコルに従って測定することができる。
【０２５５】
動物：雄のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラット（平均体重５００ｇ）を１２のグループにして収容する。動物はすべて、１２時間の明／暗サイクル（７時間００分点灯）で、食物および水を自由に与えながら飼育する。実験はすべて、治療について知らない観察者によって、またＨｏｍｅ Ｏｆｆｉｃｅ Ａｎｉｍａｌｓ（Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ）Ａｃｔ １９８６に従って実施する。
【０２５６】
神経因性疼痛の慢性絞縮傷（ＣＣＩ）ラットモデル
坐骨神経のＣＣＩは、以前に記載されているとおりに実施する（Ｇ．Ｊ．ＢｅｎｎｅｔｔおよびＹ．Ｋ．Ｘｉｅ、Ｐａｉｎ（１９８８年）第３３巻、８７〜１０７ページ）。動物を２％イソフルオラン（ｉｓｏｆｌｕｏｒａｎｅ）／Ｏ_２混合物で麻酔した。右後部大腿を剪毛し、１％ヨウ素で拭く。次いで、手順を続ける間動物を恒温性のブランケットに移し、手術中はノーズコーンから麻酔を維持する。皮膚を大腿骨の線に沿って切開する。大腿二頭筋の鈍的切開によって総坐骨神経を大腿の中央で露出させる。神経の下に鉗子を挿入して、坐骨の三分岐の近位にある約７ｍｍの神経をほどき、その神経を大腿から穏やかに引き上げる。鉗子を使用して、縫合糸を、神経をくぐらせて引っ張り、わずかな抵抗が感じられるまで一重結びで結び、次いで二重結びする。４本の結紮糸（４−０絹糸）が神経の周りに約１ｍｍ間隔で緩く結ばれるまで、この手順を繰り返す。切開を重ねて閉じ、創傷を局所用の抗生物質で処理する。
【０２５７】
ラットにおけるストレプトゾシン（ＳＴＺ）誘発糖尿病ニューロパチー
０．９％の無菌食塩水に新たに溶解させたストレプトゾトシン（５０ｍｇ／ｋｇ）の単回腹腔内投与によって、糖尿病を誘発する。ストレプトゾトシン注射は、少なくとも７週間持続する再現可能な機械的異痛症を３週間以内に誘発する（Ｓ．Ｒ．ＣｈｅｎおよびＨ．Ｌ．Ｐａｎ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐｈｙｓｉｏｌ．（２００２年）、第８７巻、２７２６〜２７３３ページ）。
【０２５８】
静的および動的な異痛症の評価
静的な異痛症
異痛症評価の前に、動物を底面がワイヤーの試験ケージに慣らす。静的な異痛症は、ｖｏｎ Ｆｒｅｙ毛（Ｓｔｏｅｌｔｉｎｇ、米国イリノイ州ウッドデール）を弱い力から順に（０．６、１、１．４、２、４、６、８、１０、１５、および２６グラム）後足の足底面に適用して評価する。各ｖｏｎ Ｆｒｅｙ毛を、引っ込め応答が生じるまで最長で６秒間足に適用する。一度ｖｏｎ Ｆｒｅｙ毛に対する引っ込め応答が確立したならば、引っ込め動作を生じたものより細いフィラメントから出発して、その後残りのフィラメントで強い力から順に引っ込め動作が生じなくなるまで足を試験し直す。最高の力である２６ｇは、応答を誘発するだけでなく足を持ち上げ、すなわちカットオフポイントとなる。各動物の両方の後足をこのようにして試験する。応答を誘発するのに必要な最低量の力を足引っ込め動作閾値（ＰＷＴ）としてグラムで記録する。動物が無処置のラットでは非侵害性である４ｇ以下の刺激に応答したならば、静的な異痛症が存在すると定められている（Ｍ．Ｊ．Ｆｉｅｌｄら、Ｐａｉｎ（１９９９年）、第８３巻、３０３〜１１ページ）。
【０２５９】
動的な異痛症
動的な異痛症は、後足の足底表面を綿棒で軽くなでて評価する。一般の運動能を記録しないようにするために、活発でなかった完全に慣らされたラットでこの手順を実施するように注意する。各時点で少なくとも２回の測定を行い、その平均値が足引っ込め動作待ち時間（ＰＷＬ）となる。１５秒以内に反応を示さない場合、手順を終了し、動物をその引っ込め動作時間に割り振る。痛み引っ込め応答はしばしば、繰り返される尻込み動作または足舐め動作を伴う。動物がなで始めてから８秒以内に綿による刺激に応答するならば、動的な異痛症が存在するとみなされる（Ｆｉｅｌｄら、１９９９年、前掲書）。
【実施例】
【０２６０】
^１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、すべての場合において、提案した構造と一致した。特徴的な化学シフト（δ）を、主要なピークの呼称については従来の略語、たとえばｓ：一重線、ｄ：二重線、ｔ：三重線、ｑ：四重線、ｍ：多重線、ｂｒ：ブロードを使用して、テトラメチルシランから低磁場方向への百万分率（ｐｐｍ）で示す。質量スペクトル（ｍ／ｚ）は、エレクトロスプレーイオン化（ＥＳもしくはＥＳＩ）または大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）のいずれかを使用して記録した。一般的な溶媒については次の略語、すなわち、ＣＤＣｌ_３：重水素化クロロホルム、Ｄ_６−ＤＭＳＯ：６重水素化ジメチルスルホキシドを使用した。
【０２６１】
単結晶Ｘ線回折実験
実施例２の化合物の酢酸溶媒和物の結晶構造を、Ｂｒｕｋｅｒ ＳＭＡＲＴ ＡＰＥＸ単結晶Ｘ線回折計およびＭｏ Ｋα放射線照射を使用する室温での単結晶Ｘ線回折によって決定した。ＳＭＡＲＴ ｖ５．６２２（制御）およびＳＡＩＮＴ ｖ６．０２（積分）ソフトウェア（Ｂｒｕｋｅｒ ＡＸＳ Ｉｎｃ．、米国ウィスコンシン州マディソン、１９９４年）を使用して、ωにおいて各照射が０．３°をカバーする数本の照射から、照射時間を６０秒とし、合計データセットを半球より多くして強度を積分した。マルチスキャン法（ＳＡＤＡＢＳ、エリアディテクターデータの基準化および補正のためのプログラム、Ｇ．Ｍ．Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ、ゲッティゲン大学、１９９７年；Ｒ．Ｈ．Ｂｌｅｓｓｉｎｇ、Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．１９９５年、Ａ５１、３３〜３８ページの方法に基づくもの）を使用して、吸収に関してデータを補正した。
【０２６２】
結晶構造は、空間群Ｃ２／ｃにおいてＳＨＥＬＸＳ−９７（結晶構造解明のためのプログラム、Ｇ．Ｍ．Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ、ドイツ国ゲッティゲン大学、１９９７年、リリース９７−２）を使用する直接的な方法によって首尾よく解明し、ＳＨＥＬＸＬ−９７（結晶構造高精度化のためのプログラム、Ｇ．Ｍ．Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ、ドイツ国ゲッティゲン大学、１９９７年、リリース９７−２）を使用する最小二乗法によって精度を高めた。この結晶構造高精度化手順によって、非対称ユニット内に実施例２の化合物一分子と酢酸一分子が存在することが明らかになった。したがって、この構造は、実施例２の化合物の１：１の酢酸溶媒和物と呼ぶことができる。
【０２６３】
実施例２ステップ（ｂ）（酢酸溶媒和物）の結晶構造からの粉末Ｘ線回折パターンの算出
実施例２の化合物の酢酸溶媒和物の単結晶構造から、Ａｃｃｅｌｒｙｓ ＭＳ Ｍｏｄｅｌｌｉｎｇ（商標）［バージョン３．０］の「反射粉末回折」モジュールを使用して、２θ角度および相対強度（以下の表８を参照されたい）を算出した。関連するシミュレーションパラメータは以下のとおりである。
波長＝１．５４０６Å（Ｃｕ Ｋα）
偏光因子＝０．５
Ｐｓｅｕｄｏ−Ｖｏｉｇｔプロフィール（Ｕ＝０．０１、Ｖ＝−０．００１、Ｗ＝０．００２）
【０２６４】
算出したパターンは、単結晶構造から得られるので、実施例２化合物の酢酸溶媒和物の純粋な相のパターンを表す。算出したパターンと予測したパターンの比較を図２に示すが、大部分に単結晶構造が表われていることを示している。ピーク強度のわずかな不一致は、測定したパターンにおける好ましい配向効果のためであるとすることができる。
【０２６５】
粉末Ｘ線回折
自動サンプル変更装置、θ−θゴニオメーター、自動ビームダイバージェンススリット、およびＰＳＤ Ｖａｎｔｅｃ−１検出器を装着したＢｒｕｋｅｒ−ＡＸＳ Ｌｔｄ．Ｄ４粉末Ｘ線回折計を使用して、実施例２の化合物の溶媒和していない結晶形態（形態Ａ）の粉末Ｘ線回折パターンを決定した。正確なピーク位置を測定するために、最初にケイ素でドープ処理することによって、分析用のサンプルを調製し、その後低バックグラウンドのシリコンウェーハ検体取付台に載せた。検体を回転させながら、Ｘ線管を４０ｋＶ／３０ｍＡで作動させて銅Ｋ−α_１Ｘ線（波長＝１．５４０６オングストローム）を照射した。分析は、ゴニオメーターを、２°〜５５°の２θ範囲にわたり、０．０１８°の１ステップあたり０．２秒のカウントにセットした連続的な方式で作動させて実施した。真空乾燥した溶媒和物サンプルのＰＸＲＤパターンも、この回折計で同じパラメータを使用して収集したが、これらのサンプルはケイ素でドープ処理しなかった。
【０２６６】
他の粉末Ｘ線回折パターンはすべて、平らなシリコンウェーハに載せたサンプルについて、Ｇｏｂｅｌ光学鏡、単一のサンプルステージ、および高感度位置検出器（ＰＳＤ）を装着したＢｒｕｋｅｒ ＡＸＳ Ｌｔｄ．Ｄ８ Ａｄｖａｎｃｅ粉末Ｘ線回折計を使用して記録した。Ｘ線管を４０ｋＶ／４０ｍＡで作動させて、各検体に銅Ｋ−α_１Ｘ線（波長＝１．５４０６Å）を照射した。分析は、ゴニオメーターを、３°〜３５°の２θ範囲にわたり、０．０１４°の１ステップあたり０．２秒のカウントにセットした連続的な走査方式で作動させて実施した。
【０２６７】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
ＤＳＣ測定は、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ Ｄｉａｍｏｎｄ示差走査熱量計を使用して行った。サンプルを５０μｌ容脱気孔付きアルミニウム受皿において周囲温度から３００℃に２０℃／分で加熱した。流動ガスは４０ｍｌ／分の窒素とした。
【０２６８】
熱重量分析（ＴＧＡ）
溶媒和物のＴＧＡ測定は、ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ ＴＧＡ２９５０ Ｈｉ−Ｒｅｓ熱重量分析装置を使用して、窒素パージガスを７５ｃｍ^３／分の速度で使用しながら、２０℃／分の加熱速度で周囲温度から脱溶媒和温度（１５０℃〜１８０℃）で行った。次いで、サンプルをその後のＰＸＲＤ分析に向けて室温に冷却した。
【０２６９】
（実施例１）
シス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸
【０２７０】
【化１０】

調製例８のアルコール（５０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を９９．２５：０．７５のアセトニトリル：水（２ｍｌ）に溶かした溶液に、過ヨウ素酸（８２ｍｇ、０．３５９ｍｍｏｌ）および酸化クロム（ＶＩ）（１．６ｍｇ、０．０１６ｍｍｏｌ）を９９．２５：０．７５のアセトニトリル：水（２ｍｌ）に溶かした溶液を加え、反応温度を５℃より低く保った。反応混合物を室温で１８時間攪拌した。反応混合物を濾過し、残渣を９９．２５：０．７５のアセトニトリル：水、２Ｎ塩酸：メタノール（５：１）、水、およびメタノールで洗浄した。残渣を真空乾燥して、表題化合物を白色固体（２８ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ、５５％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．１７（ｍ，１Ｈ）、１．４０〜１．６５（ｍ，５Ｈ）、１．７９（ｍ，２Ｈ）、２．１６（ｍ，２Ｈ）、２．４８（ｍ，２Ｈ）、２．７２（ｍ，３Ｈ）、４．６４（ｍ，１Ｈ）、６．４３（ｄ，１Ｈ）、７．０（ｓ，１Ｈ）、７．２１（ｄ，１Ｈ）、７．９０（ｓ，１Ｈ）、１２．２６（ｂｓ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＡＰＣＩ）：３６５［Ｍ＋Ｈ］^＋、４０６［Ｍ＋ＣＨ_３ＣＮ＋Ｈ］^＋
【０２７１】
（実施例２）
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸
【０２７２】
【化１１】

方法Ａ
調製例１１のアルコール（２．０５ｇ、５．８４ｍｍｏｌ）を０．７５％の水を含有するアセトニトリル（５０ｍｌ）に溶かした溶液に、酸化クロム（ＶＩ）（１２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）および過ヨウ素酸（３．３３ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）の溶液を加え、反応混合物を４０℃で９６時間攪拌した。水（１００ｍｌ）を加え、懸濁液を２時間攪拌した。得られる沈殿を濾過によって収集し、水で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（１．９０ｇ、５．２ｍｍｏｌ、８９％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．２（ｍ，１Ｈ）、１．２（ｍ，２Ｈ）、１．６（ｍ，２Ｈ）、１．８（ｍ，２Ｈ）、２．３（ｍ，２Ｈ）、２．６（ｍ，２Ｈ）、３．１（ｍ，１Ｈ）、３．２（ｓ，１Ｈ）、４．０（ｂｓ，１Ｈ）、４．８（ｍ，１Ｈ）、６．４（ｄ，１Ｈ）、７．０（ｓ，１Ｈ）、７．２（ｄ，１Ｈ）、７．９（ｓ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＡＰＣＩ）３６５［ＭＨ］^＋
【０２７３】
方法Ｂ
ステップ（ａ）
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸ｔ−ブチルエステル
【０２７４】
【化１２】

調製例２７ステップ（ｂ）の化合物（３４．１ｇ、１３０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３００ｍｌ）に懸濁させ、スラリーを３５℃に温めた。炭酸セシウム（６３ｇ、１９０ｍｍｏｌ）を一度に加えた。調製例２２の化合物をＤＭＦ（９０ｍｌ）に溶解させ、反応液に加えた。反応液を１時間かけて９０℃に加熱し、８時間維持した。反応液を７３℃に冷却し、水（１６０ｍｌ）を加え、その間温度は６５℃より高く保った。得られるスラリーを３５℃に冷却し、その後酢酸エチル（２６０ｍｌ）を一度に加えた。室温に冷却した後、スラリーを濾過し、生成物を酢酸エチル（２×１００ｍｌ）で洗浄した。得られる白色固体を６０℃で１６時間真空乾燥して、表題化合物を白色固体（４４．４ｇ、１０５ｍｍｏｌ、８２％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１．３（ｍ，１Ｈ）、１．４（ｍ，１Ｈ）、１．５（ｓ，９Ｈ）、１．６（ｍ，１Ｈ）、１．７（ｂｍ，１Ｈ）、１．８（ｂｍ，２Ｈ）、１．８（ｂｍ，１Ｈ）、２．４（ｍ，２Ｈ）、２．６（ｔ，２Ｈ）、２．７（ｍ，２Ｈ）３．１（ｍ，１Ｈ）、３．２（ｍ，１Ｈ）、４．８（ｍ，１Ｈ）、５．５（ｓ，１Ｈ）、６．２（ｄ，１Ｈ）、６．９（ｓ，１Ｈ）、７．１（ｄ，１Ｈ）。
ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）：２２．６分 １１．８（％）｛シス異性体｝ｍ／ｚ ４２２［ＭＨ^＋］、２３．１分 ８８．２（％）｛トランス異性体｝ｍ／ｚ ４２２［ＭＨ^＋］。
【０２７５】
ステップ（ｂ）
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸酢酸溶媒和物
【０２７６】
【化１３】

ステップ（ａ）の生成物（２０７ｇ、０．４９２ ｍｏｌ）を酢酸（３１００ｍｌ）中にスラリー化し、６０℃に加熱した。温度を６０℃に保ちながら、４８％の臭化水素酸（４．９３ｍｏｌ）を滴下した。溶液を６０℃で３０分間攪拌した。温度を５５℃より高く保ちながら、水（７００ｍｌ）を滴下した。スラリーを２０℃に冷却し、さらに３０分間攪拌し、その後これを濾過し、酢酸：水（２０００ｍｌ）および水（１０００ｍｌ）で洗浄した後、真空オーブンに入れて６０℃で一晩乾燥させて、表題化合物の白色固体を酢酸溶媒和物（１５３．６ｇ、７３．５％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．２（ｍ，１Ｈ）、１．２（ｍ，２Ｈ）、１．６（ｍ，２Ｈ）、１．８（ｍ，２Ｈ）、１．９（ｓ，３Ｈ，ＣＨ_３ＣＯＯＨ）、２．３（ｍ，２Ｈ）、２．６（ｍ，２Ｈ）、３．１（ｍ，１Ｈ）、３．２（ｓ，１Ｈ）、４．０（ｂｓ，１Ｈ）、４．８ （ｍ，１Ｈ）、６．４（ｄ，１Ｈ）、７．０（ｓ，１Ｈ）、７．２（ｄ，１Ｈ）、７．９（ｓ，１Ｈ）、９．９ （ｓ，１Ｈ，ＣＨ_３ＣＯＯＨ）。
ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）：１８．０分 １．６５（％）｛シス異性体｝ｍ／ｚ ３６５［ＭＨ^＋］、
１８．３分 ９８．４（％）｛トランス異性体｝ｍ／ｚ ３６５［ＭＨ^＋］。
【０２７７】
上記酢酸溶媒和物は、単結晶Ｘ線回折の方法によって決定されたその結晶構造からわかるように、１：１の化学量論比で結晶化することがわかった。図２は、上記酢酸溶媒和物バッチについて測定した粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターン（Ａ）、ならびに単結晶構造から予測したシミュレーションによるＰＸＲＤパターン（Ｂ）を示す。２つのパターンのピーク位置が非常によく一致することがわかる。回折ピークの相対強度および幅に差異があれば、それぞれ好ましい配向効果および粒径効果のためであるとすることができる。上記酢酸溶媒和物についての特徴的な２θＸ線回折ピークおよびその相対強度を以下の表８で一覧にする。
【０２７８】
【表８】

【０２７９】
酢酸溶媒和物は、熱重量分析（ＴＧＡ）によって示されるように、１１５℃付近で熱によって脱溶媒することがわかったが、ＴＧＡでは、この温度で１モル当量の酢酸に等しい約１５％のはっきりした重量減少が認められる。ＴＧＡプロットを図３に示す。上記溶媒和物は、脱溶媒すると、図４に示すＰＸＲＤプロットによって示されるように、再結晶化して（以下のステップ（ｃ）に記載の）脱溶媒和形態Ａになる。
【０２８０】
ステップ（ｃ）
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸
ステップ（ｂ）の酢酸溶媒和物（１５７ｇ、３６９ｍｍｏｌ）を室温で一晩かけて水（５２００ｍｌ）中にスラリー化した。次いで、スラリーを濾過し、水（４×５００ｍｌ）で洗浄した後、真空オーブンに入れて６０℃で一晩乾燥させて、溶媒和していない表題化合物を白色固体（１３０ｇ、３５７ｍｍｏｌ、９６％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．２（ｍ，１Ｈ）、１．２（ｍ，２Ｈ）、１．６（ｍ，２Ｈ）、１．８（ｍ，２Ｈ）、２．３（ｍ，２Ｈ）、２．６（ｍ，２Ｈ）、３．１（ｍ，１Ｈ）、３．２（ｓ，１Ｈ）、４．０（ｂｓ，１Ｈ）、４．８（ｍ，１Ｈ）、６．４（ｄ，１Ｈ）、７．０（ｓ，１Ｈ）、７．２（ｄ，１Ｈ）、７．９（ｓ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＡＰＣＩ）３６５［ＭＨ］^＋
【０２８１】
この化合物は、図５に示す特徴的な粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）パターンを有する溶媒和していない形態（形態Ａ）で結晶化することもわかった。特徴的な２θＸ線回折ピークおよびその相対強度を以下の表９で一覧にする。この結晶形態は、図６で例示する示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によって求められるとおり、融点が２５０℃である。
【０２８２】
【表９】

【０２８３】
実施例２の化合物は、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、ピリジン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、およびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）との溶媒和物として結晶化することもわかった。これらの溶媒和物はそれぞれ、図７に示すような特徴的なＰＸＲＤパターンを有する。
【０２８４】
これらの溶媒和物のＴＧＡ測定では、ピリジンおよびＴＨＦ溶媒和物が１：１の化学量論比を有することが明らかになったが（図８および９）、ＤＭＡＣ溶媒和物は、２：１の溶媒対化合物化学量論比を有することが示された（図１０）。ＤＭＳＯ溶媒和物は脆い性質であるので、その化学量論比は求められないということになった。
【０２８５】
ピリジン、ＴＨＦ、ＤＭＡＣ、およびＤＭＳＯ溶媒和物はそれぞれ、脱溶媒すると、それぞれ図１１、１２、１３、および１４に示されるＰＸＲＤ分析に示すように、無水形態Ａに再結晶化する。
【０２８６】
（実施例３）
３−［（８’−フルオロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシメチル］シクロブタンカルボン酸
【０２８７】
【化１４】

（ａ）３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシメチル］シクロブタンカルボン酸ベンジルエステル
【０２８８】
【化１５】

８’−フルオロ−５’−ヒドロキシ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン（１４０ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）（ＷＯ２００４／０２６８１８に記載のとおりに調製したもの、中間体ｃ）および炭酸セシウム（３０１ｍｇ、０．９２５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍｌ）中で合わせ、調製例１５の化合物（２２０ｍｇ、０．５８８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２ｍｌ）溶液を加え、混合物を８０℃で１８時間攪拌した。次いで、水（３５ｍｌ）を加え、生成物を酢酸エチル（２×２５ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合わせて飽和ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を蒸発させると、褐色のゴム質である表題化合物がシス異性体とトランス異性体の約５：４の混合物（２０４ｍｇ、８０％）として得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１．２９（ｍ，１Ｈ）、１．６６（ｍ，７Ｈ）、２．２１（ｍ，２Ｈ）、２．４１（ｍ，２Ｈ）、２．５９（ｍ，２Ｈ）、２．８＆２．９０（２×ｍ，１Ｈ）、３．２（ｍ，１Ｈ）、３．９６＆４．００（２×ｄ，２Ｈ）、５．１３（２×ｓ，２Ｈ）、６．６（ｍ，１Ｈ）、６．９５（ｍ，１Ｈ）、７．３３（ｍ，５Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳ）４５３［ＭＨ］^＋
【０２８９】
（ｂ）３−［（８’−フルオロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシメチル］シクロブタンカルボン酸
ステップ（ａ）の生成物（２００ｍｇ、０．４４２ｍｍｏｌ）をメタノール（２ｍｌ）に溶解させ、２Ｍ ＮａＯＨ（２ｍｌ、４．０ｍｍｏｌ）を加え、褐色の乳濁液を６０℃で１．５時間攪拌した後冷却した。２Ｎ ＨＣｌ（２ｍｌ、４．０ｍｍｏｌ）を加え、得られる懸濁液を１．５時間攪拌した。クリーム色の固体を濾過によって収集し、水でよく洗浄して、真空乾燥後に表題化合物（１３６ｍｇ、８５％）を得た。
【０２９０】
Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、１５％イソプロパノール：８５％ヘキサン＋０．１％トリフルオロ酢酸でのキラルＨＰＬＣによって、４３：５７の異性体比率が示される（保持時間１３．６９分および１５．２７分）。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１．１６（ｍ，１Ｈ）、１．４３（ｍ，２Ｈ）、１．５７（ｍ，３Ｈ）、１．７６（ｍ，２Ｈ）、２．０５（ｍ，２Ｈ）、２．２８（ｍ，２Ｈ）、２．４３（ｍ，２Ｈ）、２．６８（２×ｍ，１Ｈ）、３．０３（２×ｍ，１Ｈ）、３．８８＆３．９７（２×ｄ，２Ｈ）、６．４８（ｍ，１Ｈ）、６．７６（ｍ，１Ｈ）、６．９８（ｍ，１Ｈ）、８．７９（ｓ，１Ｈ）、１２．０６（ｂｒ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳ）３６３［ＭＨ］^＋
【０２９１】
（実施例４）
トランス−３−［（８’−シアノ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸
【０２９２】
【化１６】

調製例１６の化合物（１０１ｍｇ、０．２９６ｍｍｏｌ）から出発し、酸化クロム（ＶＩ）（０．５ｍｇ、０．００５ｍｍｏｌ）および過ヨウ素酸（１６７ｍｇ、０．７３３ｍｍｏｌ）を使用する実施例１の方法によって、表題化合物（７６ｍｇ、７２％）が得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）δ：１．１〜１．８５（ｍ，８Ｈ）、２．３〜２．７（ｍ，６Ｈ）、３．１０（ｍ，１Ｈ）、４．９２（ｍ，１Ｈ）、６．４７（ｄ，１Ｈ）、７．１４（ｓ，１Ｈ）、７．５１（ｄ，１Ｈ）、８．５１（ｓ，１Ｈ）。
ＬＣ−ＭＳ：保持時間＝２．４９分（１００％）、ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３５６［ＭＨ^＋］
【０２９３】
（実施例５）
１−［（８’−フルオロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシメチル］シクロブタンカルボン酸
【０２９４】
【化１７】

（ａ）１−［（８’−フルオロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシメチル］シクロブタンカルボン酸メチルエステル
【０２９５】
【化１８】

８’−フルオロ−５’−ヒドロキシ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン（１２０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）（ＷＯ２００４／０２６８１８に記載のもの）の室温のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液に、炭酸セシウム（２３４ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を１０分間攪拌した後、調製例１８の化合物（１７２ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍｌ）溶液を加えた。反応混合物を１８時間かけて８０℃に加熱し、次いで室温に冷却した。混合物を酢酸エチル（２０ｍｌ）および水（２０ｍｌ）で希釈し、有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２０ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせて水（２×２０ｍｌ）およびブライン（２×２０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。淡褐色の油状物をジエチルエーテル（１０ｍｌ）から摩砕し、表題化合物を淡褐色の固体として得た（０．３ｍｏｌのＤＭＦを含有する１４０ｍｇの溶媒和物、０．３５ｍｍｏｌ、７３％）。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．１６（ｍ，１Ｈ）、１．３５（ｍ，２Ｈ）、１．４９（ｍ，３Ｈ）、１．７２（ｍ，２Ｈ）、１．９０（ｍ，１Ｈ）、２．０３（ｍ，３Ｈ）、２．２６（ｍ，２Ｈ）、２．４２（ｍ，２Ｈ）、３．６０（ｓ，３Ｈ）、４．２２（ｓ，２Ｈ）、６．５２（ｄｄ，１Ｈ）、６．７９（ｓ，１Ｈ）、７．０１（ｔ，１Ｈ）、８．８５（ｓ，１Ｈ）。
【０２９６】
（ｂ）１−［（８’−フルオロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシメチル］シクロブタンカルボン酸
ステップ（ａ）の生成物（１４０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）をメタノール／水（１：１、２ｍｌ）に溶かした部分溶液に、水酸化ナトリウム（２８ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃で２４時間攪拌した。混合物を室温に冷却し、さらに６日間攪拌した後、２Ｎ塩酸水溶液（２ｍｌ）で処理した。得られるクリーム色の固体を濾過によって収集し、水で洗浄し、真空乾燥して、表題化合物（８３ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、６５％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．２５（ｍ，１Ｈ）、１．３７（ｍ，２Ｈ）、１．４９（ｍ，３Ｈ）、１．７１（ｍ，２Ｈ）、１．９０（ｍ，１Ｈ）、２．０１（ｍ，３Ｈ）、２．３８（ｍ，４Ｈ）、４．１８（ｓ，２Ｈ）、６．５２（ｄｄ，１Ｈ）、６．７１（ｓ，１Ｈ）、７．００（ｄｄ，１Ｈ）、８．７８（ｓ，１Ｈ）、１２．４３（ｓ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）３７７［Ｍ＋Ｈ］^＋
【０２９７】
（実施例６）
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘプチル−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸
【０２９８】
【化１９】

（ａ）トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘプチル−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸エチルエステル
【０２９９】
【化２０】

調製例２０の化合物（１００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５７ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、および１８−クラウン−６（１１０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）の８０℃のジメチルホルムアミド（３ｍｌ）懸濁液に、３−（トルエン−４−スルホニルオキシ）−シス−シクロブタンカルボン酸エチルエステル（調製例２２の化合物と類似の方法によって調製したもの）（１２３ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１ｍｌ）溶液を加え、反応混合物を８０℃で１８時間攪拌した。混合物を室温に冷却し、水（３０ｍｌ）から酢酸エチル（２×２０ｍｌ）に２回抽出した。有機層を合わせてブライン（２×２０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。油性の残渣をメタノールから再蒸発させ、ジエチルエーテルで摩砕して、表題化合物をクリーム色の固体（７５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、５１％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．１９（ｔ，３Ｈ）、１．４３〜１．７７（ｍ，１０Ｈ）、２．２４（ｍ，２Ｈ）、２．３８（ｍ，２Ｈ）、２．６３（ｍ，２Ｈ）、３．１４（ｍ，１Ｈ）、４．０９（ｑ，２Ｈ）、４．８２（ｍ，１Ｈ）、６．３６（ｄ，１Ｈ）、７．１７（ｄ，１Ｈ）、７．２９（ｓ，１Ｈ）、８．０５（ｓ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）４０７［ＭＨ］^＋
【０３００】
（ｂ）トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘプチル−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸
ステップ（ａ）の化合物（７０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のメタノール（１ｍｌ）懸濁液に、水酸化ナトリウム（１４ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の水（１ｍｌ）溶液を加え、得られる懸濁液を４０℃で２時間攪拌した。メタノールを真空中で除去し、得られる溶液のｐＨを、２Ｎ ＨＣｌ水溶液（５ｍｌ）を滴下して約１に調整した。得られる固体を濾別し、イソプロパノール（１．５ｍｌ）で洗浄して、表題化合物を白色固体（２５ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ、４０％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．４３〜１．７７（ｍ，１０Ｈ）、２．２３（ｍ，２Ｈ）、２．３４（ｍ，２Ｈ）、２．６１（ｍ，２Ｈ）、３．０６（ｍ，１Ｈ）、４．８１（ｑ，１Ｈ）、６．３６（ｄ，１Ｈ）、７．１７（ｄ，１Ｈ）、７．２９（ｓ，１Ｈ）、８．０５（ｓ，１Ｈ）、１２．３５（ｓ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）７５５［２Ｍ−Ｈ］⁻
【０３０１】
（実施例７）
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロペンチル−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸
【０３０２】
【化２１】

（ａ）トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロペンチル−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸ｔ−ブチルエステル
【０３０３】
【化２２】

（ａ）調製例２４の化合物（３００ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３ｍｌ）に溶かした部分溶液に、炭酸セシウム（５５９ｍｇ、１．７２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を１０分間かけて４０℃に加熱した後、調製例２２の粗製の化合物（５２３ｍｇ、１．６０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液を一度に加えた。反応混合物をさらに９時間かけて８０℃に加熱し、室温に冷ました。次いで、反応混合物に水（３ｍｌ）を加えた後、酢酸エチル（５ｍｌ）を加え、得られる沈殿を収集しようとしたが成功しなかった。その後直ちに完全に溶解させ、反応混合物を真空中で２ｍｌに濃縮し、水（５ｍＬ）を加えて、結晶化を誘発し、得られる生成物を濾別し、真空乾燥して、表題化合物（３１０ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ、６７％）を得た。ＬＣ−ＭＳによって、１０％の出発材料フェノールが残存することが示された。この材料をそれ以上精製せずにステップ（ｂ）で使用した。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）４０７［Ｍ＋Ｈ］^＋
【０３０４】
（ｂ）トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロペンチル−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸
ステップ（ａ）の生成物（３１０ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）の６０℃の酢酸（３ｍｌ）溶液に、４８％の臭化水素酸水溶液（０．５ｍｌ）を加え、反応液を室温で３０分間攪拌した。わずかな濁りが認められるまで水（０．１ｍｌ）を滴下して、混合物を失活させた。反応液を室温に冷ました後、得られる沈殿を濾別して、淡褐色の固体（１３０ｍｇ）を得た。酢酸（１．５ｍｌ）／水（０．１ｍｌ）で再結晶化することにより精製を実現して、表題化合物をオフホワイトの固体（３５ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ、９％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．７０（ｍ，４Ｈ）、１．８２（ｍ，２Ｈ）、２．２７（ｍ，２Ｈ）、２．６０（ｍ，２Ｈ）、３．０４（ｍ，２Ｈ）、４．８１（ｍ，１Ｈ）、６．３５（ｄ，１Ｈ）、７．１８（ｄ，１Ｈ）、７．３０（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｓ，１Ｈ）、１２．１４（ｓ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３５１［Ｍ＋Ｈ］^＋
【０３０５】
調製例
調製例１
３−［（ベンジルオキシ）メチル］−２，２−ジクロロシクロブタノン
【０３０６】
【化２３】

亜鉛末（６．５４ｇ、０．１ｍｏｌ）を水（３０ｍｌ）に懸濁させ、アルゴンを懸濁液に１５分間バブルした後、硫酸銅（ＩＩ）（７８０ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物をアルゴン中にて室温で３０分間攪拌した。アルゴン流中で混合物を濾別し、固体を水（１００ｍｌ）、アセトン（１００ｍｌ）で洗浄し、４時間真空乾燥した。得られる亜鉛／銅の対をアルゴン中でエチルエーテル：１，２−ジメトキシエタン（７０ｍｌ：１０ｍｌ）に懸濁させ、アリルベンジルエーテル（４．６ｍｌ、３０ｍｍｏｌ）を加えた。塩化トリクロロアセチル（９ｍｌ、８１ｍｍｏｌ）のジエチルエーテル：１，２−ジメトキシエタン（５８ｍｌ：７ｍｌ）溶液を４５分間かけて滴下し、反応混合物を４８時間加熱還流した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、塩をジエチルエーテル（３×７０ｍｌ）で洗浄した。濾液を真空中で蒸発させ、残渣をヘキサン（１５０ｍｌ）に溶解し直した。残りの固体を濾過によって除去し、濾液を炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（２×１００ｍｌ）、ブライン（８０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。粗製材料を、１０〜２５％のヘキサン：ジエチルエーテルを溶離液とするシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物が黄色の油状物（７．０３ｇ、２７．３ｍｍｏｌ、９１％）として得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ３．１１〜３．２１（ｍ，２Ｈ）、３．４８（ｍ，１Ｈ）、３．７０（ｍ，１Ｈ）、３．８５（ｍ，１Ｈ）、７．３５（ｍ，５Ｈ）、４．５８（ｓ，２Ｈ）。
【０３０７】
調製例２
３−［（ベンジルオキシ）メチル］シクロブタノン
【０３０８】
【化２４】

調製例１のジクロロシクロブタノン（５．９８ｇ、２３．０８ｍｍｏｌ）を塩化アンモニウムで飽和させたメタノール（９０ｍｌ）に溶かした溶液に、亜鉛粉末（９．２５ｇ、１４２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で２時間攪拌した。塩化アンモニウムを加え、反応混合物を室温でさらに６時間攪拌した。混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、塩をジエチルエーテル（５０ｍｌ）で洗浄した。濾液を真空中で濃縮し、残渣をジエチルエーテル（２００ｍｌ）と水（１００ｍｌ）とに分配した。混合物を濾過し、有機相を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。表題化合物が黄色の油状物（３．７ｇ、１９．５ｍｍｏｌ、８４％）として得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ２．６９（ｍ，１Ｈ）、２．９０（ｍ，２Ｈ）、３．１１（ｍ，２Ｈ）、３．６０（ｄ，２Ｈ）、４．５６（ｓ，２Ｈ）、７．３４（ｍ，５Ｈ）。
【０３０９】
調製例３
シス−３−［（ベンジルオキシ）メチル］シクロブタノール
【０３１０】
【化２５】

調製例２のシクロブタノン（１．１６６ｇ、６．１３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフランに溶かした、−７０℃で攪拌中の溶液に、トリ−ｓ−ブチル水素化ホウ素リチウムの１Ｍテトラヒドロフラン（４０ｍｌ）溶液を滴下し、反応温度を−６５℃より低く保った。反応液を１８時間かけて室温に温めた。反応混合物を炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（２５ｍｌ）で失活させ、次いで５℃に冷却した。３０％過酸化水素水溶液（４ｍｌ）を滴下し、反応温度を１０℃より低く保った。混合物を水から酢酸エチル（５０ｍｌ）中に抽出し、有機相を合わせてブライン（３０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。粗製材料を、２５〜５０％の酢酸エチル：ペンタンを溶離液とするシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製して、無色の油状物（１．０５ｇ、５．５ｍｍｏｌ、８９％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲでは、１５：１の比のシス：トランス異性体が得られたことが示された。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ１．７０（ｍ，２Ｈ）、２．１０（ｍ，１Ｈ）、２．４６（ｍ，２Ｈ）、３．４５（ｄ，２Ｈ）、４．１５（ｑ，１Ｈ）、４．５２（ｓ，２Ｈ）、７．３３（ｍ，５Ｈ）。
【０３１１】
調製例４
４−ニトロ安息香酸トランス−３−［（ベンジルオキシ）メチル］シクロブチル
【０３１２】
【化２６】

調製例３のシクロブチルアルコール（１．０５ｇ、５．４７ｍｍｏｌ）、４−ニトロ安息香酸（１．８２ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）、およびトリフェニルホスフィン（３．０１６ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）に溶かした攪拌した溶液に、０℃でアゾジカルボン酸ジエチル（２ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５ｍｌ）溶液を滴下した。反応混合物を室温で１８時間攪拌した。溶媒を真空中で蒸発にさせ、残渣をジエチルエーテル（３０ｍｌ）に溶解し直した。残りの固体を濾過によって除去し、濾液を真空中で蒸発させた。粗製材料を、１：１０〜１：３の酢酸エチル：ペンタンを溶離液とするシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製して、無色の油状物（１．６４ｇ、４．８ｍｍｏｌ、８８％）を得た。^１Ｈ−ＮＭＲでは、１５：１の比のトランス：シス異性体が得られたことが示された。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ２．４０（ｍ，４Ｈ）、２．６７（ｍ，１Ｈ）、３．５３（ｄ，２Ｈ）、４．５７（ｓ，２Ｈ）、５．３６（ｑ，１Ｈ）、７．３７（ｍ，５Ｈ）、８．２０（ｄ，２Ｈ）、８．２９（ｄ，２Ｈ）。
【０３１３】
調製例５
トランス−３−［（ベンジルオキシ）メチル］シクロブタノール
【０３１４】
【化２７】

調製例４のｐ−ニトロエステル（１．６４ｇ、４．８ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（３５ｍｌ）溶液に、水酸化ナトリウム（３８５ｍｇ、９．６ｍｍｏｌ）の水（２５ｍｌ）溶液を加え、反応混合物を室温で３０分間攪拌した。酢酸（０．４ｍｌ、７ｍｍｏｌ）を加え、混合物を真空中で濃縮した。残渣を、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液から酢酸エチル（２０ｍｌ）中に抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。表題化合物が黄色の油状物（８５０ｍｇ、４．４ｍｍｏｌ、９２％）として得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ２．０８（ｍ，２Ｈ）、２．２０（ｍ，２Ｈ）、２．４７（ｍ，１Ｈ）、３．４７（ｄ，２Ｈ）、４．３９（ｑ，１Ｈ）、４．５２（ｓ，２Ｈ）、７．３４（ｍ，５Ｈ）。
【０３１５】
調製例６
ｐ−トルエンスルホン酸トランス−３−［（ベンジルオキシ）メチル］シクロブチル
【０３１６】
【化２８】

調製例５のシクロブタノール（８５０ｍｇ、４．４２ｍｍｏｌ）をピリジン（５ｍｌ）に溶かした攪拌した溶液に、０℃で塩化ｐ−トルエンスルホニル（１．１８ｇ、６．２ｍｍｏｌ）を少量ずつ加え、反応混合物を室温で１８時間攪拌した。溶媒を真空中で濃縮し、残渣酢酸エチル（３０ｍｌ）に溶解し直し、２Ｎ塩酸（３０ｍｌ）、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（３０ｍｌ）、ブライン（３０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。粗製材料を、ジクロロメタンを溶離液とするシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物が無色の油状物（１．５３ｇ、４．４ｍｍｏｌ）として得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ２．１５（ｍ，２Ｈ）、２．３１（ｍ，２Ｈ）、２．４４（ｓ，３Ｈ）、２．４９（ｍ，１Ｈ）、３．４（ｄ，２Ｈ）、４．４９（ｓ，２Ｈ）、４．９３（ｑ，１Ｈ）、７．３２（ｍ，７Ｈ）、７．７５（ｄ，２Ｈ）。
【０３１７】
調製例７
５’−（｛シス−３−［（ベンジルオキシ）メチル］シクロブチル｝オキシ）−８’−クロロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン
【０３１８】
【化２９】

８’−クロロ−５’−ヒドロキシ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン（Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ（２００４年）、第１４巻（１８）、４６２７〜４６３２ページに記載のとおりに調製したもの）（６４０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４００ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）、および１８−クラウン−６（７６７ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（８ｍｌ）中で合わせ、反応混合物を８０℃に加熱した。調製例６のトシラート（１ｇ、２．９ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド溶液を３回で加え、混合物をさらに１８時間８０℃で加熱した。反応混合物を酢酸エチル（１００ｍｌ）と水（１５０ｍｌ）とに分配し、固体を濾過によって収集した。相を分離し、水相を酢酸エチルで抽出し直し、ブラインで希釈し、再び酢酸エチル中に抽出した。有機相を合わせて真空中で濃縮し、残渣を水およびメタノールで摩砕した。粗生成物を合わせて、ジクロロメタンからジクロロメタン：酢酸エチル（１：１）を溶離液とするシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物をオフホワイトの固体（６８５ｍｇ、１．１５６ｍｍｏｌ、６４％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_６−ＤＭＳＯ、４００ＭＨｚ）：δ１．１（ｍ，１Ｈ）、１．４（ｍ，２Ｈ）、１．６（ｍ，３Ｈ）、１．７（ｍ，２Ｈ）、１．８（ｍ，２Ｈ）、２．３（ｍ，１Ｈ）、２．５（ｍ，４Ｈ）、３．４（ｓ，２Ｈ）、４．４（ｓ，２Ｈ）、４．６（ｍ，１Ｈ）、６．４（ｄ，１Ｈ）、７．０（ｓ，１Ｈ）、７．２（ｄ，１Ｈ）、７．３（ｍ，５Ｈ）、７．８（ｓ，１Ｈ）。
【０３１９】
調製例８
８’−クロロ−５’−｛［シス−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル］オキシ｝−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン
【０３２０】
【化３０】

調製例７のベンジルアルコール（４００ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１０ｍｌ）懸濁液に、三塩化ホウ素−ジメチルスルフィド錯体の２Ｍジクロロメタン溶液（１．８ｍｌ、３．６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜攪拌した。炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（１０ｍｌ）を加え、混合物を５分間攪拌した。ジクロロメタンおよび水を加え、得られる固体を濾過によって収集した。表題化合物が白色固体（２３０ｍｇ、０．６５７ｍｍｏｌ、７３％）として得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_６−ＤＭＳＯ、４００ＭＨｚ）：δ１．１７（ｍ，１Ｈ）、１．４２（ｍ，２Ｈ）、１．５７（ｍ，３Ｈ）、１．８２（ｍ，４Ｈ）、２．０５（ｍ，１Ｈ）、２．４５（ｍ，４Ｈ）、３．３８（ｔ，２Ｈ）、４．５８（ｍ，２Ｈ）、６．４１（ｄ，１Ｈ）、６．９９（ｓ，１Ｈ）、７．２０（ｄ，１Ｈ）、７．８６（ｓ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＡＰＣＩ）３５１［ＭＨ］^＋
【０３２１】
調製例９
ｐ−トルエンスルホン酸シス−３−［（ベンジルオキシ）メチル］シクロブチル
【０３２２】
【化３１】

調製例３のアルコール（１７ｇ、８８．４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（９０ｍｌ）に溶かした、５℃で攪拌中の溶液に、ピリジン（１４．３ｍｌ、１７６ｍｍｏｌ）および塩化ｐ−トルエンスルホニル（２０．２ｇ、１０５．９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で１８時間攪拌した。反応混合物をジクロロメタン（５０ｍｌ）で希釈し、２Ｎ塩酸（５０ｍｌ）、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。粗製材料を、ペンタン：酢酸エチル（１９：１、９：１、４：１）を溶離液とするシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製した。表題化合物が無色の油状物（２４．８ｇ、７１．６ｍｍｏｌ、８１％）として得られた。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ１．９５（ｍ，２Ｈ）、２．１（ｍ，１Ｈ）、２．３５（ｍ，２Ｈ）、２．４５（ｓ，３Ｈ）、３．４（ｍ，２Ｈ）、４．５（ｓ，２Ｈ）、４．７（ｍ，１Ｈ）、７．３（ｍ，７Ｈ）、７．８（ｍ，２Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）３４７［ＭＨ］^＋
【０３２３】
調製例１０
５’−（｛トランス−３−［（ベンジルオキシ）メチル］シクロブチル｝オキシ）−８’−クロロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン
【０３２４】
【化３２】

方法Ａ
８’−クロロ−５’−ヒドロキシ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン（５００ｍｇ、１．８７ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（２ｍｌ）に懸濁させた攪拌した懸濁液に、炭酸セシウム（７３０ｍｇ、２．２４ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を８０℃に加熱した。５分後、調製例９のトシラート（７１０ｍｇ、２．０５ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（１ｍｌ）溶液を加え、反応混合物を８０℃で１８時間加熱した。混合物をブライン（６０ｍｌ）から酢酸エチル（１×８０ｍｌ、２×３０ｍｌ）中に抽出し、ブライン（３×１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。表題化合物が、わずかに不純なクリーム色の固体（８００ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ、９６％）として得られた。
【０３２５】
方法Ｂ
８’−クロロ−５’−ヒドロキシ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン（９５０ｍｇ、３．５６ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（１２ｍｌ）に溶かした、８０℃で攪拌中の溶液に、炭酸カリウム（５９０ｍｇ、４．２７ｍｍｏｌ）および１８−クラウン−６（１．１ｇ、４．２７ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１０分間攪拌した後、調製例９のトシラート（１．４８ｇ、４．２７ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（３ｍｌ）溶液を加えた。反応混合物を８０℃で２４時間加熱した。混合物を水：メタノール（７５ｍｌ：２５ｍｌ）上に注ぎ、１０分間攪拌し、得られる沈殿を濾過によって収集し、メタノールで洗浄した。固体をジクロロメタンに溶解させ、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、得られる濾液を真空中で蒸発にさせて、表題化合物をトランス：シス異性体の９：１混合物（８８７ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ、５６％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ１．３（ｍ，１Ｈ）、１．５〜１．９（ｍ，９Ｈ）、２．４（ｍ，３Ｈ）、２．６（ｍ，２Ｈ）、３．５（ｄ，２Ｈ）、４．６（ｓ，２Ｈ）、４．７５（ｍ，１Ｈ）、５．８５（ｂｓ，１Ｈ）、６．２５（ｄ，１Ｈ）、７．０５（ｂｓ，１Ｈ）、７．１（ｄ，１Ｈ）、７．３〜７．４（ｍ，５Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）４４１［ＭＨ］^＋
【０３２６】
調製例１１
８’−クロロ−５’−｛［トランス−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル］オキシ｝−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン
【０３２７】
【化３３】

三塩化ホウ素−ジメチルスルフィド錯体をジクロロメタン（１５ｍｌ）に溶かした２Ｍの溶液を、調製例１０のベンジルエーテル（３．５ｇ、７．９ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（８０ｍｌ）溶液に滴下し、反応混合物を室温で１８時間攪拌した。この混合物を、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（２００ｍｌ）中に注ぎ、泡立ちが止むまで攪拌した。混合物をジクロロメタン（１×２００ｍｌ、２×１００ｍｌ）中に抽出し、ブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発させた。粗製材料をアセトニトリルから再結晶化して、表題化合物を９１：９の比のトランス：シス生成物（２．３３ｇ、６．６５ｍｍｏｌ、８４％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ１．３（ｍ，１Ｈ）、１．５（ｍ，２Ｈ）、１．８（ｍ，５Ｈ）、２．４（ｍ，４Ｈ）、２．６（ｍ，３Ｈ）、３．８（ｄ，２Ｈ）、４．８（ｍ，１Ｈ）、５．７（ｂｓ，１Ｈ）、６．２５（ｄ，１Ｈ）、７．０（ｂｓ，１Ｈ）、７．１（ｄ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）３５１［ＭＨ］^＋
【０３２８】
調製例１２
３−メチレンシクロブタンカルボン酸
【０３２９】
【化３４】

水酸化カリウム（１７．３７ｇ、２１４．７ｍｍｏｌ）を水（２０ｍｌ）に溶解させ、エタノール（２０ｍｌ）を加えた。この溶液を冷たいときに３−メチレン−シクロブタンカルボニトリル（５．０ｇ、５３．７ｍｍｏｌ）に加え、得られる溶液を２．５時間加熱還流し、冷まし、真空中で蒸発にさせて、クリーム色の固体とした。固体を水（１５ｍｌ）に溶解させ、氷浴で冷却し、濃ＨＣｌを加えてｐＨ１とし、ジエチルエーテル（３×２０ｍｌ）で抽出した。エーテル抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で蒸発にさせて、表題化合物を淡黄色の液体（５．６ｇ、９３％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ２．９５（ｍ，２Ｈ）、３．０２（ｍ，２Ｈ）、３．１７（ｍ，１Ｈ）、４．８２（ｍ，２Ｈ）（交換可能な１プロトンが見られなかった）。
【０３３０】
調製例１３
３−メチレンシクロブタンカルボン酸ベンジルエステル
【０３３１】
【化３５】

調製例１２の生成物（１ｇ、８．９ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（５ｍｌ）溶液に、１，１’−カルボニルジイミダゾール（１．５９ｇ、９．８１ｍｍｏｌ）の酢酸エチル（５ｍｌ）懸濁液を数回に分けて加えた。穏やかな泡立ちが認められた。混合物を約１．５時間室温で攪拌し、ベンジルアルコール（１．１１ｍｌ、１０．７ｍｍｏｌ）を加え、終夜攪拌を続けた。溶液をジエチルエーテル（２０ｍｌ）で希釈し、水（２×１０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で蒸発にさせて無色の液体とし、これを、ジクロロメタンを溶離液としながら１０ｇのＳｉＯ_２で濾過して精製して、表題化合物を無色の油状物（１．２４６ｇ、６９％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ２．９２（ｍ，２Ｈ）、３．０２（ｍ，２Ｈ）、３．１６（ｍ，２Ｈ）、４．８０（ｍ，２Ｈ）、５．１５（ｓ，２Ｈ）、７．３６（ｍ，５Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）２０３［ＭＨ］^＋
【０３３２】
調製例１４
３−（ヒドロキシメチル）シクロブタンカルボン酸ベンジルエステル
【０３３３】
【化３６】

ボラン−ジメチルスルフィド（０．０７ｍｌ、０．７２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１ｍｌ）で希釈し、調製例１３の化合物（３００ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１ｍｌ）に溶かした攪拌した溶液に室温で滴下した。無色の溶液を室温で１時間攪拌し、次いで過ホウ酸ナトリウム（１４５ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）の水（１ｍｌ）溶液を、泡立ちを制御する速度で滴下した。加え終えたなら、混合物を１，４−ジオキサン（１ｍｌ）で希釈し、得られる溶液を６０℃で１時間温め、水（５ｍｌ）を加えて失活させ、酢酸エチル（１０ｍｌ）で抽出した。酢酸エチル抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で蒸発にさせて、無色の油状物（２２６ｍｇ、６９％）を得、これを次のステップでそれ自体として使用した。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ２．０５（ｍ，２Ｈ）、２．３３（ｍ，２Ｈ）、２．４５（ｍ，１Ｈ）、３．１１（ｍ，１Ｈ）、３．６２（ｄｄ，２Ｈ）、５．１３（ｄ，２Ｈ）、７．３５（ｍ，５Ｈ）。
【０３３４】
調製例１５
３−（ｐ−トルエンスルホニルオキシメチル）シクロブタン−１−カルボン酸ベンジルエステル
【０３３５】
【化３７】

調製例１４の化合物（２７５ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．２６ｍｌ、３．２５ｍｍｏｌ）の攪拌した溶液に、室温で塩化ｐ−トルエンスルホニル（３０９ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍｌ）溶液を滴下し、３日間攪拌を続けた。混合物をジクロロメタン（２０ｍｌ）と水（２×２０ｍｌ）とに分配し、ジクロロメタン抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で蒸発にさせて無色の油状物とし、これを、ジクロロメタンから１：１のジエチルエーテル：ジクロロメタンを溶離液とするシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物（２２６ｍｇ、４８％）を無色の油状物としてを得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ２．０２（ｍ，２Ｈ）、２．２５〜２．４１（ｍ，２Ｈ）、２．４４（ｓ，３Ｈ）、２．５５〜２．７５（ｍ，１Ｈ）、３．０７（ｍ，１Ｈ）、４．００（２×ｄ，２Ｈ）、５．１０（ｄ，２Ｈ）、７．３４（ｍ，７Ｈ）、７．７８（ｍ，２Ｈ）。
【０３３６】
調製例１６
５’−｛［トランス−３−（ヒドロキシメチル）シクロブチル］オキシ｝−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−８’−カルボニトリル
【０３３７】
【化３８】

調製例１１の化合物（１００ｍｇ、０．２８５ｍｍｏｌ）のＮ−メチルピロリジノン（１．５ｍＬ）懸濁液に、シアン化ナトリウム（２７．９ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）を加えた後、臭化ニッケル（６２．３ｍｇ、０．２８５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をマイクロ波反応器に入れて２００℃で１０分間加熱した。混合物をジエチルエーテル（２×２０ｍｌ）と水（１０ｍＬ）とに分配し、有機抽出物を合わせて硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、表題化合物を淡い橙色／赤色の固体（２７．８ｍｇ）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１．４〜１．８５（ｍ，９Ｈ）、２．３〜２．７（ｍ，６Ｈ）、３．７３（ｄ，２Ｈ）、４．８３（ｍ，１Ｈ）、５．６０（ｓ，１Ｈ）、６．３３（ｄ，１Ｈ）、６．９８（ｓ，１Ｈ）、７．３６（ｄ，１Ｈ）。
ＬＣ−ＭＳ：保持時間＝２．５４分（１００％）、ＬＲＭＳ ｍ／ｚ ３４２［ＭＨ^＋］
【０３３８】
調製例１７
１−（ヒドロキシメチル）−シクロブタンカルボン酸メチルエステル
【０３３９】
【化３９】

１，１−シクロブタンジカルボン酸ジメチルエステル（英国Ｌａｎｃａｓｔｅｒ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｌｔｄから入手可能）（２．０ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に、室温で水素化トリ−ｔ−ブトキシアルミニウムリチウム（１Ｍのテトラヒドロフラン溶液２５．５ｍｌ、２５．５ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴下した。反応混合物を加熱して、３時間穏やかに還流させ、室温に冷却し、１８時間攪拌した。得られる懸濁液を塩化アンモニウム飽和水溶液（３０ｍｌ）で希釈し、１５分間激しく攪拌してから濾過した。固体をジエチルエーテル（５０ｍｌ）で洗浄し、有機層を分離し、水層をジエチルエーテル（５０ｍｌ）で抽出した。有機抽出物を合わせて硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で蒸発にさせて、表題化合物を無色の油状物（１．８ｇ）として得た。
【０３４０】
調製例１８
１−（ｐ−トルエンスルホニルオキシメチル）−シクロブタンカルボン酸メチルエステル
【０３４１】
【化４０】

調製例１７の粗製の化合物（１．６ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍｌ）溶液に、塩化ｐ−トルエンスルホニル（４．２ｇ、２２．０ｍｍｏｌ）を加えた後、ピリジン（２．７ｍｌ、３３．０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で１８時間攪拌した。次いで、反応混合物をジクロロメタン（３０ｍｌ）で希釈し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液（２×２５ｍｌ）、重炭酸ナトリウム飽和水溶液（５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で蒸発させた。粗製の橙色油状物（５ｇ）を、酢酸エチル：ペンタン（１：５）を溶離液とするシリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物を無色の油状物（１．７ｇ、５．７ｍｍｏｌ、４９％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ１．９６（ｍ，４Ｈ）、２．４０（ｍ，２Ｈ）、２．４５（ｓ，３Ｈ）、３．６２（ｓ，３Ｈ）、４．２４（ｓ，２Ｈ）、７．３５（ｄ，２Ｈ）、７．７９（ｄ，２Ｈ）。
【０３４２】
調製例１９
８’クロロ−５’−メトキシ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘプチル−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン
【０３４３】
【化４１】

２−クロロ−５−メトキシフェニル尿素（ＷＯ０２／０７４７５４、中間体５）（１７．９ｇ、８９．５ｍｍｏｌ）のシクロヘプタノン（６０ｍｌ、０．５１ｍｏｌ）溶液を、１００℃で２０分間かけてポリリン酸（２１３ｇ）に滴下し（１２７℃までの発熱が認められた）、１時間加熱した。混合物を攪拌しながら水（３リットル）および酢酸エチル（１リットル）中に注いだ。得られる固体を濾過によって収集し、酢酸エチルでよく洗浄し、乾燥させた。乾燥させた固体をクロロホルムに溶解させ、重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、表題化合物を白色固体（１０．２ｇ、３４ｍｍｏｌ、３９％）として得た。
【０３４４】
二相性の濾液を分離し、酢酸エチル相を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をｔ−ブチルメチルエーテルで摩砕し、得られる白色固体を濾過によって収集し、別のｔ−ブチルメチルエーテルで洗浄し、乾燥させて、次の分の表題化合物（９．０ｇ、３０．６ｍｍｏｌ、３４％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１．５３〜１．８４（複合，１０Ｈ）、２．４６（ｍ，２Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、５．３３（ｂｒ，１Ｈ）、６．４６（ｄ，１Ｈ）、７．０３（ｂｒ，１Ｈ）、７．１８（ｄ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ ２９５［Ｍ＋Ｈ］^＋
【０３４５】
調製例２０
８’−クロロ−５’−ヒドロキシ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘプタン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン
【０３４６】
【化４２】

調製例１９の化合物（１９．０ｇ、６４．６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５００ｍｌ）溶液に、三臭化ホウ素の１Ｍジクロロメタン溶液（１２９ｍｌ、１２９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３日間攪拌した。反応混合物を水（１．５リットル）および酢酸エチル（１リットル）中に注いだ。白色固体を濾過によって収集し、相を分離し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、褐色の固体を得た。濾過した白色固体をエタノールから再結晶化して、表題化合物（７．４ｇ、２６．４ｍｍｏｌ、４１％）を得た。再結晶からの母液を褐色の固体と合わせ、混合物をエタノール中で攪拌し、濾過し、乾燥させて、２番目のバッチの生成物（７．０ｇ、２５ｍｍｏｌ、３９％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．３８〜１．７８（複合，１０Ｈ）、２．２６（ｍ，２Ｈ）、６．４０（ｄ，１Ｈ）、７．０２（ｄ，１Ｈ）、７．２０（ｂｒ，１Ｈ）、７．８０（ｂｒ，１Ｈ）、９．８４（ｂｒ，１Ｈ）。
【０３４７】
調製例２１
シス−３−ヒドロキシシクロブチルカルボン酸ｔ−ブチルエステル
【０３４８】
【化４３】

方法Ａ
３−オキソシクロブタンカルボン酸ｔ−ブチル（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（１９９３年）第５８巻、１１０ページ）（３．１０ｇ、１８．２ｍｍｏｌ）を窒素中でテトラヒドロフラン：メタノール（２０：１、３０ｍｌ）に溶解させ、５℃に冷却した。水素化ホウ素ナトリウム（３４５ｍｇ）を数回に分けて加え、得られる透明な溶液を５℃で１５分間攪拌した後、水（１３５ｍｌ）、次いで酢酸エチル（１３５ｍｌ）を滴下して希釈した。水相を分離し、酢酸エチル（２×２５ｍｌ）で洗浄した。有機相を合わせてブライン（２０ｍｌ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、表題化合物をかすかに黄色の油状物（３．０５ｇ、１７．７ｍｍｏｌ、９７％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ１．４６（ｓ，９Ｈ）、２．１２（ｍ，２Ｈ）、２．５５（ｍ，３Ｈ）、４．１７（ｍ，１Ｈ）。
ＧＣ分析（アセトニトリル中サンプル）：保持時間４．５７分（９１．５％面積）。
【０３４９】
方法Ｂ
３−オキソシクロブタンカルボン酸（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．（１９９３年）第５８巻、１１０ページ）（１０．０ｇ、８８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍｌ）に溶解させ、５℃に冷却した。４−ジメチルアミノピリジン（８．６ｇ、７０ｍｍｏｌ）を少量ずつ加えた後、ｔ−ブタノール（１３．０ｇ、１７６ｍｍｏｌ）を一度に加えた。Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドの１Ｍジクロロメタン（９６ｍｌ、９６ｍｍｏｌ）溶液を、温度を０℃〜５℃の間に保ちながら滴下した。得られるスラリーを室温に温め、終夜攪拌した。濾過した後、濾液を５℃で２Ｍの塩酸（５０ｍｌ）に滴下した。得られる相を分離し、下方の有機層を室温に温め、水（５０ｍｌ）および重炭酸ナトリウム飽和溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。下方の有機相を蒸留によって濃縮し、溶媒をテトラヒドロフランと交換した。最終反応体積を３０ｍｌとした。メタノール（６ｍｌ）を加えた。その間、水素化ホウ素ナトリウム（１．６５ｇ、４４ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（３９ｍｌ）に懸濁させ、５℃に冷却した。この中間体のテトラヒドロフラン溶液を、温度を０℃〜５℃の間に保ちながら水素化ホウ素ナトリウムのスラリーに滴下した。次いで、反応液を０〜５℃で２時間攪拌した。温度を０℃〜５℃の間に保ちながら水を滴下した。酢酸エチル（７５ｍｌ）を加え、相を分離した。下方の水層を室温に温め、酢酸エチル（３７ｍｌ）で洗浄した。有機層を合わせて濃縮し、ブライン（３７ｍｌ）、次いで水（３７ｍｌ）でさらに洗浄した。上方の有機層を真空中で抜き取って、表題化合物を黄色の油状物（１０．１ｇ、５８．６ｍｍｏｌ、６７％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３、４００ＭＨｚ）：δ１．４６（ｓ，９Ｈ）、２．１２（ｍ，２Ｈ）、２．５５（ｍ，３Ｈ）、４．１７（ｍ，１Ｈ）。
ＧＣ分析：保持時間９．０２分（シス異性体）（８７．５％面積）、保持時間９．０７分（トランス異性体）（１０．０％面積）。
【０３５０】
調製例２２
３−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）−シクロブタンカルボン酸ｔ−ブチルエステル
【０３５１】
【化４４】

方法Ａ
調製例２１の化合物（３．０２ｇ、１７．３５ｍｍｏｌ）を窒素中でピリジン（１５ｍｌ）に溶解させ、０℃に冷却した。塩化ｐ−トルエンスルホニル（３．５ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）を一度に加え、溶液を室温で７２時間攪拌した。得られる、白色の懸濁した材料を含有するピンク色の溶液を真空中で濃縮し、２Ｎ ＨＣｌ水溶液（３０ｍｌ）と酢酸エチル（３０ｍｌ）とに分配し、水層を酢酸エチル（１５ｍｌ）で再び洗浄した。有機層を合わせて２Ｎ ＨＣｌ水溶液（１５ｍｌ）、重炭酸ナトリウム飽和水溶液（１５ｍｌ）、およびブライン（３０ｍｌ）で洗浄し、真空中で濃縮して、表題化合物を橙色の油状物（５．１５ｇ、１５．７ｍｍｏｌ、９０％）として得たが、この油状物は静置すると凝固した。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１．４３（ｓ，９Ｈ）、２．３２〜２．５７（複合，５Ｈ）、２．４６（ｓ，３Ｈ）、４．７３（ｍ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，２Ｈ）、７．７９（ｄ，２Ｈ）。
ＬＣ−ＭＳ：シス異性体 保持時間２１．７８分（８１％）、ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３２７［ＭＨ^＋］、トランス異性体 保持時間２２．０８分（７．３％）、ＬＲＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ ３２７［ＭＨ^＋］。
【０３５２】
方法Ｂ
調製例２１の化合物（１０．０、５８ｍｍｏｌ）を窒素中でピリジン（２５ｍｌ）に溶解させ、０℃に冷却した。塩化ｐ−トルエンスルホニル（１６．６ｇ、８７ｍｍｏｌ）をピリジン（２５ｍｌ）に溶解させ、温度を０℃〜５℃の間に保ちながら滴下した。次いで、反応液を室温に温め、終夜攪拌した。
【０３５３】
反応液を濃縮して固体にし、酢酸エチル（５０ｍｌ）中にスラリー化した。スラリーを０〜５℃に冷却し、２Ｍの塩酸（７５ｍｌ）で洗浄し、相を分離した。下方の水相を再び酢酸エチル（５０ｍｌ）で抽出した。有機相を合わせて水（５０ｍｌ）および炭酸水素ナトリウム溶液（５０ｍｌ）で洗浄した。有機相を濃縮し、０〜５℃に冷却した。Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン（３．５ｇ、４０ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を２Ｍの塩酸（７５ｍｌ）で洗浄した。上方の有機相を水（７５ｍｌ）およびブライン（７５ｍｌ）で洗浄した。有機相を濃縮して淡黄色の油状物としたが、これを静置すると結晶化した（１５．５ｇ、４７ｍｍｏｌ、８２％）。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１．４３（ｓ，９Ｈ）、２．３２〜２．５７（複合，５Ｈ）、２．４６（ｓ，３Ｈ）、４．７３（ｍ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，２Ｈ）、７．７９（ｄ，２Ｈ）。
ＧＣ分析：保持時間１５．９８分（シス異性体）（９４．１％面積）、保持時間１５．８２分（トランス異性体）（５．９％面積）。
【０３５４】
調製例２３
８’クロロ−５’−メトキシ−１’Ｈ−スピロ［シクロペンチル−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン
【０３５５】
【化４５】

２−クロロ−５−メトキシフェニル尿素（ＷＯ０２／０７４７５４、中間体５）（２２．０４ｇ、０．１１ｍｏｌ）にＥａｔｏｎ試薬（７．７重量％の酸化リン（Ｖ）のメタンスルホン酸溶液）（４４０．８ｍｌ）を加えた後、シクロペンタノン（１９．５ｍｌ、０．２２ｍｏｌ）を加え、得られる溶液を８５℃で４時間加熱した。反応液を約５℃に冷却し、温度を２０〜３０℃の間に保ちながら慎重に水を加えた。次いで、ジクロロメタン（全体で４００ｍｌ）およびブライン（２００ｍｌ）を加え、相を分離した。水相をジクロロメタン（２×１００ｍｌ）で洗浄し、有機抽出物を合わせ、真空中で蒸発にさせて、暗色の油状物を得、これを、ジクロロメタン：メタノール（９５：５→９０：１０）を溶離液としながらシリカのクロマトグラフィーカラムで精製して、生成物を暗褐色の固体として得た。固体をジエチルエーテルおよびペンタンで摩砕し、濾過によって収集し、乾燥させて、表題化合物を褐色の固体（２７．１７ｇ、０．１ｍｏｌ、９２％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１．７〜１．８（ｍ，６Ｈ）、２．４〜２．５（ｍ，２Ｈ）、３．７（ｓ，３Ｈ）、５．７５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、６．４（ｄ，１Ｈ）、７．０５（ｓ，１Ｈ）、７．１５（ｄ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＡＰＣＩ）２６７［Ｍ＋Ｈ］^＋
【０３５６】
調製例２４
８’−クロロ−５’−ヒドロキシ−１’Ｈ−スピロ［シクロペンタン−１，４’−キナゾリン］−２’（３’Ｈ）−オン
【０３５７】
【化４６】

調製例２３の化合物（２５ｇ、０．０９３ｍｏｌ）に、酢酸（２５０ｍｌ）を加えた後、４８％の臭化水素酸水溶液（２０７ｍｌ、１．８６ｍｏｌ）を一度に加え、得られる溶液を１１５℃で７日間攪拌した。反応混合物を１００℃に冷却し、水（２０７ｍｌ）を滴下した。混合物を真空中で濃縮して、褐色の固体を沈殿させ、これを濾過によって収集し、水（２×１００ｍｌ）で洗浄した。静置すると、濾液から次の分の生成物が得られた。合わせた分の生成物を、トルエン（１５０ｍｌ）とのスラリーによって、また真空中で３回溶媒を除去することにより乾燥させて、灰色の固体を得、これをシリカに予め吸収させ、ジクロロメタン：メタノール（９８：２→９５：５→８０：２０）を溶離液とするカラムクロマトグラフィーによって精製した。生成物の画分を真空中で濃縮し、得られる固体をペンタンで摩砕し、濾過して、表題化合物を褐色の固体（１０ｇ、０．０３９５ｍｏｌ、４２％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）δ１．６〜１．８（ｍ，６Ｈ）、２．３〜２．４（ｍ，２Ｈ）、６．４（ｄ，１Ｈ）、７．１１（ｄ，１Ｈ）、７．２（ｓ，１Ｈ）、７．８（ｓ，１Ｈ）、９．９（ｓ，１Ｈ）。
ＬＲＭＳ ｍ／ｚ（ＥＳＩ）２５３［Ｍ＋Ｈ］^＋
【０３５８】
調製例２５
（２−クロロ−５−メトキシフェニル）尿素
【０３５９】
【化４７】

塩酸２−クロロ−５−メトキシアニリン（２６ｇ、１３４ｍｍｏｌ）を酢酸（１１７ｍｌ）および水（１３ｍｌ）に加えた。スラリーを３０℃に温めた。シアン酸カリウム（１３ｇ、１６１ｍｍｏｌ）の水（１０４ｍｌ）溶液を滴下した。４０℃で１時間経過後、反応液を２０℃に冷却し、濾過し、水（７８ｍｌ）で洗浄した。生成物を６０℃の真空中で一晩乾燥させて、表題化合物を白色固体（２１．８ｇ、８１％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ３．７１（ｓ，３Ｈ）、６．４１（ｓ，２Ｈ）、６．５３（ｄ，１Ｈ）、７．２６（ｄ，１Ｈ）、７．８５（ｓ，１Ｈ）、７．９８（ｓ，１Ｈ）。
ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）：１０．９分 ９９．４（％）、ｍ／ｚ ２０１［ＭＨ^＋］
【０３６０】
調製例２６
８’−クロロ−５’−メトキシスピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（１’Ｈ）−オン
【０３６１】
【化４８】

調製例２５の化合物（５．０ｇ、２５ｍｍｏｌ）をＥａｔｏｎ試薬（７％ｗ／ｗのＰ_２Ｏ_５メタンスルホン酸溶液）（１５０ｇ）に加えて溶液を生成し、次いでこれを６０℃に加熱した。シクロヘキサノン（４．９ｇ、５０ｍｍｏｌ）を１０分間かけて加え、次いで、反応液を８０℃に温め、１時間その温度に保った。次いで、反応混合物を５℃に冷却し、水を加えた（１５０ｍｌ）。次いで、反応混合物をジクロロメタン（１００ｍｌ）で抽出し、上方の水相をジクロロメタン（２×１０ｍｌ）で洗浄した。有機相を合わせて濃縮した後、２−プロパノール（１１０ｍｌ）を加えた。反応混合物をさらに大気圧下で濃縮して、残りのジクロロメタンを除去した。反応液を冷却して生成物を結晶化し、５℃で１時間攪拌した。生成物を濾過によって収集し、２−プロパノール（１５ｍｌ）で洗浄した後、５０℃で１８時間かけて乾燥させて、表題化合物を白色固体（５．２ｇ、１９ｍｍｏｌ、７６％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、Ｄ_６−ＤＭＳＯ）：δ１．２（ｍ，１Ｈ）、１．４（ｍ，２Ｈ）、１．５（ｍ，１Ｈ）、１．６（ｍ，２Ｈ）、１．７（ｍ，１Ｈ）、１．８（ｍ，１Ｈ）、２．４（ｔ，２Ｈ）、３．７９（ｓ，３Ｈ）、６．６４（ｄ，１Ｈ）、６．９７（ｓ，１Ｈ）、７．２６（ｄ，１Ｈ）、７．９１（ｓ，１Ｈ）。
ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）：１８．５分 ９７．４（％）、ｍ／ｚ ２８１［ＭＨ^＋］
【０３６２】
調製例２７
８’−クロロ−５’−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（１’Ｈ）−オン
【０３６３】
【化４９】

ステップ（ａ）
８’−クロロ−５’−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（１’Ｈ）−オン酢酸溶媒和物
調製例２６の化合物（３５０ｇ、１．２４ｍｏｌ）を酢酸（３５００ｍｌ）中にスラリー化した。スラリーに室温で臭化水素酸（水中４８％ｗ／ｗ）（２８００ｍｌ、２４．８ｍｏｌ）を加えた。次いで、このスラリーを還流温度に温め、４日間攪拌した。反応液を１００℃に冷却し、１時間かけて水（２８００ｍｌ）を滴下した。スラリーを１０℃に冷却し、１時間攪拌した後、濾過し、水（１１００ｍｌ）で洗浄し、真空オーブンに入れて終夜乾燥させて、表題化合物を白色固体（３４４ｇ、１．２８ｍｏｌ、１０３％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_６−ＤＭＳＯ、３００ＭＨｚ）：δ１．２（ｍ，１Ｈ）、１．４（ｍ，２Ｈ）、１．５（ｍ，１Ｈ）、１．６（ｍ，２Ｈ）、１．７（ｍ，１Ｈ）、１．８（ｍ，１Ｈ）、１．９（ｓ，３Ｈ，ＣＨ_３ＣＯＯＨ）、２．４（ｔ，２Ｈ）、６．４５（ｄ，１Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ）、７．１（ｄ，１Ｈ）、７．７５（ｓ，１Ｈ）、９．９（ｓ，１Ｈ，ＣＨ_３ＣＯＯＨ）。
ＬＣ−ＭＳ（ＥＳＩ）：１４．２分 ９９．１（％）、ｍ／ｚ ２６７［ＭＨ^＋］。
【０３６４】
ステップ（ｂ）
８’−クロロ−５’−ヒドロキシスピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−２’（１’Ｈ）−オン
ステップ（ａ）の酢酸溶媒和物（３３０ｇ、１．２４ｍｏｌ）を、室温で６時間かけてアセトン（７３０ｍｌ）中にスラリー化した。次いで、生成物を濾過によって収集し、アセトン（３３０ｍｌ）で洗浄した後、６０℃で１８時間乾燥させて、溶媒和していない表題化合物を白色固体（２３８ｇ、０．８９ｍｏｌ、７２％）として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_６−ＤＭＳＯ、３００ＭＨｚ）：δ１．２（ｍ，１Ｈ）、１．４（ｍ，２Ｈ）、１．５（ｍ，１Ｈ）、１．６（ｍ，２Ｈ）、１．７（ｍ，１Ｈ）、１．８（ｍ，１Ｈ）、２．４（ｔ，２Ｈ）、６．４５（ｄ，１Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ）、７．１（ｄ，１Ｈ）、７．７５（ｓ，１Ｈ）。
【図面の簡単な説明】
【０３６５】
【図１】本発明の実施例１および２の化合物、ならびにＷＯ０２／０７４７５４の実施例７５の化合物（化合物Ａ）の、１ｍｇ／ｋｇで静脈内投与した後の、投与量で正規化した平均の薬物動態プロフィールを示す濃度／時間のグラフである。
【図２】実施例２の化合物の酢酸溶媒和物についての測定したパターン（Ａ）およびシミュレートしたパターン（Ｂ）の粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）プロットを示す図である。
【図３】実施例２の化合物の酢酸溶媒和物について、熱重量分析（ＴＧＡ）を使用して加熱した後の質量減少のプロットを示すグラフである（示される１５．０５％の質量減少は、１モル当量の酢酸に等しい）。
【図４】ケイ素でドープ処理した実施例２の化合物の脱溶媒和形態（形態Ａ）（Ａ）、ＴＧＡ分析前（Ｂ）およびＴＧＡ分析後（Ｃ）のこの化合物の酢酸溶媒和物のＰＸＲＤパターンを示す図である。
【図５】ケイ素標準物質を基準として補正した、実施例２の化合物の溶媒和していない結晶形態（形態Ａ）のＰＸＲＤパターンを示す図である。
【図６】実施例２の化合物の溶媒和していない結晶形態（形態Ａ）についての示差走査熱量測定（ＤＳＣ）トレースである。
【図７】実施例２の化合物の結晶性の溶媒和していない形態（形態Ａ）、ならびにジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）（Ｂ）、ピリジン（Ｃ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（Ｄ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（Ｅ）、および酢酸（Ｆ）溶媒和物についてのＰＸＲＤプロットを示す図である。
【図８】実施例２の化合物のピリジン溶媒和物のＴＧＡトレースを示すグラフであり、示される１７．３％の質量減少は、溶媒対化合物の比が１：１であることに等しい。
【図９】実施例２の化合物のテトラヒドロフラン溶媒和物のＴＧＡトレースを示すグラフであり、１４．７％の合計質量減少は、化合物対ＴＨＦ溶媒の比が１：１であることに相当する（加熱後の溶媒減少の段階的な性質は、恐らく、中間体の半ＴＨＦ溶媒和物形態の存在を示唆する）。
【図１０】実施例２の化合物のジメチルアセトアミド溶媒和物のＴＧＡトレースを示すグラフであり、３３．０％の合計質量減少は、溶媒対化合物の比が２：１であることに等しい。
【図１１】実施例２の化合物のピリジン溶媒和物（Ａ）、ＴＧＡ後のピリジン溶媒和物（Ｂ）、および形態Ａ（Ｃ）のＰＸＲＤパターンを示す図である。
【図１２】実施例２の化合物のテトラヒドロフラン溶媒和物（Ａ）、ＴＧＡ後のＴＨＦ溶媒和物（Ｂ）、および形態Ａ（Ｃ）のＰＸＲＤパターンを示す図である。
【図１３】実施例２の化合物のジメチルアセトアミド溶媒和物（Ａ）、ＴＧＡ後のジメチルアセトアミド溶媒和物（Ｂ）、および形態Ａ（Ｃ）のＰＸＲＤパターンを示す図である。
【図１４】実施例２の化合物のジメチルスルホキシド溶媒和物（Ａ）、真空乾燥後のＤＭＳＯ溶媒和物（Ｂ）、および形態Ａ（Ｃ）のＰＸＲＤパターンを示す図である。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物
【化１】

［式中、
ｍは、０、１、または２であり、
Ｘは、Ｏ、Ｓ、またはＮ−ＣＮであり、
Ｒは、Ｆ、Ｃｌ、またはＣＮであり、
Ａは、Ｃ_１〜４アルキル基で置換されていてもよいＣ_３〜６シクロアルキレン基であり、
Ｂは、単結合またはＣ_１〜２アルキレン基である］
または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグ。
【請求項２】
ｍが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＸがＯである、請求項１または請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ＲがＣｌである、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ａがシクロブチレン基である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ａが１，３−シクロブチレン基である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ａがトランス−１，３−シクロブチレン基である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｂが単結合である、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
シス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
３−［（８’−フルオロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシメチル］シクロブタンカルボン酸、
トランス−３−［（８’−シアノ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
１−［（８’−フルオロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘキサン−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシメチル］シクロブタンカルボン酸、
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロヘプチル−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸、
トランス−３−［（８’−クロロ−２’−オキソ−２’，３’−ジヒドロ−１’Ｈ−スピロ［シクロペンチル−１，４’−キナゾリン］−５’−イル）オキシ］シクロブタンカルボン酸
から選択される化合物または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグ。
【請求項１０】
請求項１から９のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグと、薬学的に許容できる担体または希釈剤とを含む医薬組成物。
【請求項１１】
医薬として使用するための、請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグ。
【請求項１２】
ＰＤＥ７阻害剤による治療が適切である疾患または状態を治療するための医薬の製造における、請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグの使用。
【請求項１３】
前記疾患または状態が、疼痛、Ｔ細胞関連疾患、自己免疫疾患、多発性硬化症、骨粗鬆症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、癌、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、アレルギー、または炎症性腸疾患から選択される、請求項１２に記載の使用。
【請求項１４】
前記疾患または状態が疼痛である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
前記疼痛が神経因性疼痛である、請求項１４に記載の使用。
【請求項１６】
有効量の請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩、溶媒和物、多形体、もしくはプロドラッグを投与することを含む、ＰＤＥ７阻害剤による治療が適切である疾患または状態の治療方法。
【請求項１７】
前記疾患または状態が、疼痛、Ｔ細胞関連疾患、自己免疫疾患、多発性硬化症、骨粗鬆症、慢性閉塞性肺疾患、喘息、癌、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、アレルギー、または炎症性腸疾患から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記疾患または状態が疼痛である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記疼痛が神経因性疼痛である、請求項１８に記載の方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【公表番号】特表２００９−５１７４５３（Ｐ２００９−５１７４５３Ａ）
【公表日】平成２１年４月３０日（２００９．４．３０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００８−５４２８５５（Ｐ２００８−５４２８５５）
【出願日】平成１８年１１月２３日（２００６．１１．２３）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＩＢ２００６／００３３８８
【国際公開番号】ＷＯ２００７／０６３３９１
【国際公開日】平成１９年６月７日（２００７．６．７）
【出願人】（５９７０１４５０１）ファイザー・リミテッド (107)
【氏名又は名称原語表記】Ｐｆｉｚｅｒ　Ｌｉｍｉｔｅｄ
【住所又は居所原語表記】Ｒａｍｓｇａｔｅ　Ｒｏａｄ，　Ｓａｎｄｗｉｃｈ，　Ｋｅｎｔ，　Ｅｎｇｌａｎｄ
【Ｆターム（参考）】