ＰＬＧＡマトリックス中に分散された熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントを製造するための可塑剤としてのエタノールの使用
押出し成形による、ＰＬＧＡベースのマトリックス中に分散された活性成分を含有する皮下インプラントの製造に可塑剤としてエタノールを使用することによって、一般に７５℃より高い押出し成形温度を、ＰＬＧＡのＴｇよりも高いが、エタノールの沸点よりも低い温度に下げることができ、従って７０℃未満の温度に下げることができる。このように、熱不安定性活性成分、例えばタンパク質を含有する皮下インプラントを製造することができる。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＰＬＧＡマトリックス中に分散された熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントを製造するための可塑剤としてのエタノールの使用に関する。
【０００２】
現況技術
最新の現況技術において、ＰＬＧＡの押出し成形温度は７５℃よりも高い。通常、押出し成形中の温度は、押出し成形されるべきポリマーのＴｇを４０〜５０℃超える温度でなければならない。この種の技術を用いて、ポリ乳酸グリコール酸（ＰＬＧＡ）マトリックス中に分散された熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントを製造するのは不可能である。
【０００３】
この種の活性成分を有する皮下インプラントを製造するため、このような技術を使用するためには、押出し成形温度を下げなければならない。一般に、押出し成形温度を下げるためには、可塑剤が広く一般に使用されており、可塑剤によって、そのＴｇの低下に次いで、ポリマーのたわみ性および加工性が向上する。ポリマーに添加される可塑剤の量は、所望の効果の関数として変化する。
【０００４】
可塑剤に必須の条件は、不揮発性である。一般的な現代の可塑剤は合成有機化合物であり；ほとんどの場合には、それらはアジピン酸エステルおよびフタル酸エステルなどのエステルである。これらの種類の生成物は生体適合性ではなく、したがって、一般にヒトおよび哺乳動物に適用する皮下インプラントには使用することができない。
【０００５】
トリアセチン、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、グリセロールおよびホルムアルデヒドなどの他の種類の可塑剤に関しては、ヒトおよび哺乳動物に対するその毒性が完全に確かめられていない。
【０００６】
したがって、前記の種類の皮下インプラントの製造において、ＰＬＧＡの押出し成形温度を低減することができ、現況技術の欠点を示さず、かつ無毒の可塑剤の必要性が感じられていた。
【０００７】
発明の概要
特に、本出願人は、揮発性物質であるエタノールは迅速かつ均一に、エタノールのＴｇよりも高い温度、かつエタノールの沸点よりも低い温度で粉砕ＰＬＧＡ中に拡散するため、外部（external）可塑剤としてエタノールを使用して皮下インプラントを製造することができることを見出した。
【０００８】
「外部可塑剤」という用語は、押出し成形により皮下インプラントを製造する方法ではなく、前述の製造の前の段階で、というよりむしろ、その後に皮下インプラントの製造に使用されるであろう「可塑化」ポリマーの製造段階において使用される可塑剤を意味する。
【０００９】
したがって、本発明の他の態様は、可塑剤としてエタノールを含有する可塑化ＰＬＧＡである。
【００１０】
したがって、この可塑化ポリマーは、以下の段階：
ａ）ＰＬＧＡを粉砕して、その粒子が２５０μｍ未満の寸法を有する粉砕物を得る段階；
ｂ）上記の段階で得られた粉砕物に、ＰＬＧＡに対して５〜２０重量部の濃度でエタノールを添加し、次いで、粘性かつ安定性のゲルが得られるまで、得られた混合物を４５〜６５℃の温度に加熱する段階；
ｃ）段階（ｂ）で得られたゲルを乾燥させる段階；
ｄ）−２０〜＋５℃の温度で段階（ｃ）から得た乾燥生成物を粉砕する段階；
ｅ）上記の段階から得た生成物を、２５０μｍ未満の寸法の粉砕物が得られるまで予め粉砕されたＰＬＧＡ自体と、それぞれ重量比１０：９０〜９９：１にて、温度−２０〜＋５℃で任意に混合する段階；
ｆ）７５℃で前述の混合物を押出し成形する段階；
ｇ）温度−２０〜＋５℃で押出物を粉砕して、本発明に従ってエタノールで可塑化されたＰＬＧＡが得られる段階；を含む方法を用いて製造される。
【００１１】
本発明の他の態様は、本発明に従ってエタノールで可塑化されたＰＬＧＡをベースとするマトリックス中に分散された活性成分を含有する皮下インプラントである。
【００１２】
本発明の詳細な説明
本発明の可塑化ＰＬＧＡは一般に、ＰＬＧＡの重量に対して、２〜１５重量％、好ましくは３〜１０重量％、さらに好ましくは５〜１０重量％の濃度でエタノールを含有する。
【００１３】
本出願人は実際に、２〜３重量％の濃度でエタノールを含有する可塑化ＰＬＧＡを使用することによって、ポリマーのＴｇを下げることができ、その結果として、押出し成形温度を７０℃より低い温度に下げることができ；３〜４重量％よりも高い濃度でエタノールを使用することによって、この温度を６０℃よりも低い値に下げることができることを見出した。
【００１４】
本出願人は、可塑化ポリマーの重量に対して５〜１０％の濃度でエタノールを使用することによって、押出し成形温度を４０℃（つまり、大部分の熱不安定性生物活性成分と適合する温度）に下げることができるもまた見出した。
【００１５】
したがって、本発明による可塑化ポリマーは、熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントの組成物の製造に使用される場合、好ましくは５〜１０％の濃度でエタノールを含有する。段階（ｂ）において添加されるエタノールの量は、ＰＬＧＡに対して１０重量部に等しいことが好ましい。
【００１６】
段階（ｃ）において、ＰＬＧＡの重量に対して好ましくは１０〜３０重量％、さらに好ましくは２０重量％で構成される、ＰＬＧＡ中のエタノール濃度が得られるまで、乾燥が行われる。段階（ｃ）における乾燥は、２０〜２５℃で構成される温度で空気流下にて行われることが好ましい。
【００１７】
段階（ｄ）、（ｅ）および（ｇ）における粉砕温度は好ましくは−１０℃であり、段階（ｄ）から得られるＰＬＧＡ／ＰＬＧＡ自体の重量比は好ましくは、１６：８４〜４０：６０である。
【００１８】
段階（ｅ）において、未処理のＰＬＧＡに対して、エタノールで処理したＰＬＧＡの濃度（重量による）を増加することによって、その後の皮下インプラントの製造段階の押出し成形温度が低減される。
【００１９】
本発明の他の態様である皮下インプラントは、以下の段階：
ｉ）−２０℃〜＋５℃の温度で活性成分を本発明の可塑化ＰＬＧＡと混合する段階；
ｉｉ）７０℃未満、好ましくは６０℃未満の温度で段階（ｉ）から得た粉砕物を押出し成形する段階；を含む方法によって製造される。
【００２０】
上述のように、段階（ｉ）で使用される可塑化ポリマーがエタノールを５〜１０％含有する場合、段階（ｉｉ）における押出し成形温度は約４０℃である。
【００２１】
この場合には、前述の方法は、熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントの製造に特に適している。「熱不安定性活性成分」という用語は、低温で保存しなければならない活性成分、特にタンパク質（ホルモン、成長因子、酵素等）、遺伝子治療用のワクチン、抗体およびベクターを意味する。
【００２２】
本発明に従ってエタノールで可塑化されたポリマーは、非熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントの製造に使用することもできるが、いずれにしても、念のために、急な温度変化にそれをさらさないほうがよい。
【００２３】
エタノールで可塑化されたＰＬＧＡを含有し、かつ熱不安定性活性成を含有する本発明の皮下インプラントの製造と共に、本発明のエタノールを含有する可塑化ポリマーの製造の例示的であるが、非制限的ないくつかの例が、本明細書において以下に記載されている。
【００２４】
実施例１−組換えヒト顆粒球コロニー刺激因（ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
以下の特徴：
クロロホルム中（ｃ＝０．１ｇ／ｄｌ）で２５℃で測定されたインヘレント粘度０．１９ｄｌ／ｇ；
ラクチド／グリコリドのモル比：５３／４７；
Ｔｇ：４０℃；
を有するＰＬＧＡ。
【００２５】
０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比４０：６０で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率８％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００２６】
ｂ）皮下インプラントの製造
以下の特徴：
タンパク質含有率（比色定量−Ｂｒａｄｆｏｒｄ）：２．１〜２．６％（質量／質量）；
生物学的効力（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ−Ｓｔｄ ＷＨＯ＃８８／５０２）：２１〜３１×１０6ＩＵ／ｍｇタンパク質；
賦形剤；マンニトール／ポリソルベート８０／第一リン酸ナトリウム／第二リン酸ナトリウム十二水和物／ヒトアルブミン（それぞれ９３．４％／０．０１％／１．９％／０．５％／１．９％（質量／質量））；
を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３１：６９で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を４０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を６．６×１０6ＩＵに等しい量で含有する円筒形の被覆物（deposit）を形成した。
【００２７】
実施例２−組換えヒト顆粒球コロニー刺激因（ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
実施例１に記載のＰＬＧＡと同じ特徴を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比３２．５：６７．５で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率６．５％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００２８】
ｂ）皮下インプラントの製造
実施例１に記載のものと同じ特徴を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３０：７０で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を５０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を６．６×１０6ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。
【００２９】
実施例３−組換えヒト顆粒球コロニー刺激因（ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
実施例１に記載のＰＬＧＡと同じ特徴を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比１６：８４で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率３．２％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００３０】
ｂ）皮下インプラントの製造
実施例１に記載のものと同じ特徴を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３０：７０で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を６０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を６．６×１０6ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。
【００３１】
実施例４−組換えヒト成長ホルモン（ｒ−Ｈｕ−ＧＨ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
以下の特徴：
クロロホルム中（ｃ＝０．１ｇ／ｄｌ）で２５℃で測定されたインヘレント粘度０．１９ｄｌ／ｇ；
ラクチド／グリコリドのモル比：５３／４７；
Ｔｇ：４０℃；
を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比４０：６０で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率８％％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００３２】
ｂ）皮下インプラントの製造
以下の特徴：
関連タンパク質（モノグラフ「ソマトロピン」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ ０９５１による液体クロマトグラフィー）：最大１３％（ピーク面積）；
二量体および高分子量の関連物質（モノグラフ「ソマトロピン」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ ０９５１によるサイズ排除クロマトグラフィー）：最大６％（ピーク面積）；
タンパク質含有率（モノグラフ「ソマトロピン」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ ０９５１によるサイズ排除クロマトグラフィー）：４．５〜５．３％（質量／質量）；
生物学的効力：（モノグラフ「ソマトロピン」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ ０９５１によるサイズ排除クロマトグラフィー）：２．７×３．２ＩＵ／ｍｇタンパク質；
賦形剤：グリシン／第一リン酸ナトリウム／第二リン酸ナトリウム十二水和物（それぞれ９１．４％／１．０％／２．５％（質量／質量））；
を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−ＧＨからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３０：７０で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を４０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を１．８ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。
【００３３】
被覆物内のタンパク質の完全性を以下の分析パッケージ：
ヨーロッパ薬局方の第４版のモノグラフ「ソマトロピン」（Ｎｒ ０９５１）に従った液体クロマトグラフィーによる関連タンパク質；
ヨーロッパ薬局方の第４版のモノグラフ「ソマトロピン」（Ｎｒ ０９５１）に従ったサイズ排除クロマトグラフィーによる、二量体および高分子量の関連物質；
ヨーロッパ薬局方の第４版のモノグラフ「ソマトロピン」（Ｎｒ ０９５１）に従ったサイズ排除クロマトグラフィーによるアッセイ；
によって調べた。
【００３４】
実施例５−組換えヒト成長ホルモン（ｒ−Ｈｕ−ＧＨ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
実施例４に記載のＰＬＧＡと同じ特徴を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比３２．５：６７．５で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率６．５％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００３５】
ｂ）皮下インプラントの製造
実施例４に記載のものと同じ特徴を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３０：７０で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を５０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を１．８ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。実施例４に記載のものと同じ分析パッケージによって、被覆物内のタンパク質の完全性を調べた。
【００３６】
実施例６−組換えヒト成長ホルモン（ｒ−Ｈｕ−ＧＨ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
実施例４に記載のＰＬＧＡと同じ特徴を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比１６：８４で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率３．２％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００３７】
ｂ）皮下インプラントの製造
実施例４に記載のものと同じ特徴を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３０：７０で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を６０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を１．８ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。
【００３８】
実施例７−インターフェロンα−２ａを含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
以下の特徴：
クロロホルム中（ｃ＝０．１ｇ／ｄｌ）で２５℃で測定されたインヘレント粘度０．１９ｄｌ／ｇ；
ラクチド／グリコリドのモル比：５３／４７；
Ｔｇ：４０℃；
を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比４０：６０で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率８％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００３９】
ｂ）皮下インプラントの製造
以下の特徴：
関連タンパク質（モノグラフ「インターフェロンα−２濃厚溶液」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ １１１０による液体クロマトグラフィー）：最大５％（ピーク面積）；
タンパク質含有率：１．８％（質量／質量）；
生物学的効力：（モノグラフ「インターフェロンα−２濃厚溶液」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ １１１０によるサイズ排除クロマトグラフィー）：２．３×１０8ＩＵ／ｍｇタンパク質；
賦形剤；酢酸ナトリウム／塩化ナトリウム／トレハロース（それぞれ５．９％／８．４％／８３．９％（質量／質量））；
を有するタンパク質インターフェロンα−２ａからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比２５：７５で−１０℃でよく混合した。
【００４０】
このようにして得られた粉末を４０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を４０×１０6ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。
【００４１】
デポー（depot）内のタンパク質の完全性を以下の分析パッケージ：
ヨーロッパ薬局方の第４版のモノグラフ「インターフェロンα−２濃厚溶液」（Ｎｒ １１１０）に従った液体クロマトグラフィーによる関連タンパク質；によって調べた。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＰＬＧＡマトリックス中に分散された熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントを製造するための可塑剤としてのエタノールの使用に関する。
【０００２】
現況技術
最新の現況技術において、ＰＬＧＡの押出し成形温度は７５℃よりも高い。通常、押出し成形中の温度は、押出し成形されるべきポリマーのＴｇを４０〜５０℃超える温度でなければならない。この種の技術を用いて、ポリ乳酸グリコール酸（ＰＬＧＡ）マトリックス中に分散された熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントを製造するのは不可能である。
【０００３】
この種の活性成分を有する皮下インプラントを製造するため、このような技術を使用するためには、押出し成形温度を下げなければならない。一般に、押出し成形温度を下げるためには、可塑剤が広く一般に使用されており、可塑剤によって、そのＴｇの低下に次いで、ポリマーのたわみ性および加工性が向上する。ポリマーに添加される可塑剤の量は、所望の効果の関数として変化する。
【０００４】
可塑剤に必須の条件は、不揮発性である。一般的な現代の可塑剤は合成有機化合物であり；ほとんどの場合には、それらはアジピン酸エステルおよびフタル酸エステルなどのエステルである。これらの種類の生成物は生体適合性ではなく、したがって、一般にヒトおよび哺乳動物に適用する皮下インプラントには使用することができない。
【０００５】
トリアセチン、Ｎ−メチル−２−ピロリドン、グリセロールおよびホルムアルデヒドなどの他の種類の可塑剤に関しては、ヒトおよび哺乳動物に対するその毒性が完全に確かめられていない。
【０００６】
したがって、前記の種類の皮下インプラントの製造において、ＰＬＧＡの押出し成形温度を低減することができ、現況技術の欠点を示さず、かつ無毒の可塑剤の必要性が感じられていた。
【０００７】
発明の概要
特に、本出願人は、揮発性物質であるエタノールは迅速かつ均一に、エタノールのＴｇよりも高い温度、かつエタノールの沸点よりも低い温度で粉砕ＰＬＧＡ中に拡散するため、外部（external）可塑剤としてエタノールを使用して皮下インプラントを製造することができることを見出した。
【０００８】
「外部可塑剤」という用語は、押出し成形により皮下インプラントを製造する方法ではなく、前述の製造の前の段階で、というよりむしろ、その後に皮下インプラントの製造に使用されるであろう「可塑化」ポリマーの製造段階において使用される可塑剤を意味する。
【０００９】
したがって、本発明の他の態様は、可塑剤としてエタノールを含有する可塑化ＰＬＧＡである。
【００１０】
したがって、この可塑化ポリマーは、以下の段階：
ａ）ＰＬＧＡを粉砕して、その粒子が２５０μｍ未満の寸法を有する粉砕物を得る段階；
ｂ）上記の段階で得られた粉砕物に、ＰＬＧＡに対して５〜２０重量部の濃度でエタノールを添加し、次いで、粘性かつ安定性のゲルが得られるまで、得られた混合物を４５〜６５℃の温度に加熱する段階；
ｃ）段階（ｂ）で得られたゲルを乾燥させる段階；
ｄ）−２０〜＋５℃の温度で段階（ｃ）から得た乾燥生成物を粉砕する段階；
ｅ）上記の段階から得た生成物を、２５０μｍ未満の寸法の粉砕物が得られるまで予め粉砕されたＰＬＧＡ自体と、それぞれ重量比１０：９０〜９９：１にて、温度−２０〜＋５℃で任意に混合する段階；
ｆ）７５℃で前述の混合物を押出し成形する段階；
ｇ）温度−２０〜＋５℃で押出物を粉砕して、本発明に従ってエタノールで可塑化されたＰＬＧＡが得られる段階；を含む方法を用いて製造される。
【００１１】
本発明の他の態様は、本発明に従ってエタノールで可塑化されたＰＬＧＡをベースとするマトリックス中に分散された活性成分を含有する皮下インプラントである。
【００１２】
本発明の詳細な説明
本発明の可塑化ＰＬＧＡは一般に、ＰＬＧＡの重量に対して、２〜１５重量％、好ましくは３〜１０重量％、さらに好ましくは５〜１０重量％の濃度でエタノールを含有する。
【００１３】
本出願人は実際に、２〜３重量％の濃度でエタノールを含有する可塑化ＰＬＧＡを使用することによって、ポリマーのＴｇを下げることができ、その結果として、押出し成形温度を７０℃より低い温度に下げることができ；３〜４重量％よりも高い濃度でエタノールを使用することによって、この温度を６０℃よりも低い値に下げることができることを見出した。
【００１４】
本出願人は、可塑化ポリマーの重量に対して５〜１０％の濃度でエタノールを使用することによって、押出し成形温度を４０℃（つまり、大部分の熱不安定性生物活性成分と適合する温度）に下げることができるもまた見出した。
【００１５】
したがって、本発明による可塑化ポリマーは、熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントの組成物の製造に使用される場合、好ましくは５〜１０％の濃度でエタノールを含有する。段階（ｂ）において添加されるエタノールの量は、ＰＬＧＡに対して１０重量部に等しいことが好ましい。
【００１６】
段階（ｃ）において、ＰＬＧＡの重量に対して好ましくは１０〜３０重量％、さらに好ましくは２０重量％で構成される、ＰＬＧＡ中のエタノール濃度が得られるまで、乾燥が行われる。段階（ｃ）における乾燥は、２０〜２５℃で構成される温度で空気流下にて行われることが好ましい。
【００１７】
段階（ｄ）、（ｅ）および（ｇ）における粉砕温度は好ましくは−１０℃であり、段階（ｄ）から得られるＰＬＧＡ／ＰＬＧＡ自体の重量比は好ましくは、１６：８４〜４０：６０である。
【００１８】
段階（ｅ）において、未処理のＰＬＧＡに対して、エタノールで処理したＰＬＧＡの濃度（重量による）を増加することによって、その後の皮下インプラントの製造段階の押出し成形温度が低減される。
【００１９】
本発明の他の態様である皮下インプラントは、以下の段階：
ｉ）−２０℃〜＋５℃の温度で活性成分を本発明の可塑化ＰＬＧＡと混合する段階；
ｉｉ）７０℃未満、好ましくは６０℃未満の温度で段階（ｉ）から得た粉砕物を押出し成形する段階；を含む方法によって製造される。
【００２０】
上述のように、段階（ｉ）で使用される可塑化ポリマーがエタノールを５〜１０％含有する場合、段階（ｉｉ）における押出し成形温度は約４０℃である。
【００２１】
この場合には、前述の方法は、熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントの製造に特に適している。「熱不安定性活性成分」という用語は、低温で保存しなければならない活性成分、特にタンパク質（ホルモン、成長因子、酵素等）、遺伝子治療用のワクチン、抗体およびベクターを意味する。
【００２２】
本発明に従ってエタノールで可塑化されたポリマーは、非熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントの製造に使用することもできるが、いずれにしても、念のために、急な温度変化にそれをさらさないほうがよい。
【００２３】
エタノールで可塑化されたＰＬＧＡを含有し、かつ熱不安定性活性成を含有する本発明の皮下インプラントの製造と共に、本発明のエタノールを含有する可塑化ポリマーの製造の例示的であるが、非制限的ないくつかの例が、本明細書において以下に記載されている。
【００２４】
実施例１−組換えヒト顆粒球コロニー刺激因（ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
以下の特徴：
クロロホルム中（ｃ＝０．１ｇ／ｄｌ）で２５℃で測定されたインヘレント粘度０．１９ｄｌ／ｇ；
ラクチド／グリコリドのモル比：５３／４７；
Ｔｇ：４０℃；
を有するＰＬＧＡ。
【００２５】
０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比４０：６０で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率８％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００２６】
ｂ）皮下インプラントの製造
以下の特徴：
タンパク質含有率（比色定量−Ｂｒａｄｆｏｒｄ）：２．１〜２．６％（質量／質量）；
生物学的効力（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ−Ｓｔｄ ＷＨＯ＃８８／５０２）：２１〜３１×１０6ＩＵ／ｍｇタンパク質；
賦形剤；マンニトール／ポリソルベート８０／第一リン酸ナトリウム／第二リン酸ナトリウム十二水和物／ヒトアルブミン（それぞれ９３．４％／０．０１％／１．９％／０．５％／１．９％（質量／質量））；
を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３１：６９で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を４０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を６．６×１０6ＩＵに等しい量で含有する円筒形の被覆物（deposit）を形成した。
【００２７】
実施例２−組換えヒト顆粒球コロニー刺激因（ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
実施例１に記載のＰＬＧＡと同じ特徴を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比３２．５：６７．５で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率６．５％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００２８】
ｂ）皮下インプラントの製造
実施例１に記載のものと同じ特徴を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３０：７０で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を５０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を６．６×１０6ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。
【００２９】
実施例３−組換えヒト顆粒球コロニー刺激因（ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
実施例１に記載のＰＬＧＡと同じ特徴を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比１６：８４で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率３．２％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００３０】
ｂ）皮下インプラントの製造
実施例１に記載のものと同じ特徴を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３０：７０で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を６０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を６．６×１０6ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。
【００３１】
実施例４−組換えヒト成長ホルモン（ｒ−Ｈｕ−ＧＨ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
以下の特徴：
クロロホルム中（ｃ＝０．１ｇ／ｄｌ）で２５℃で測定されたインヘレント粘度０．１９ｄｌ／ｇ；
ラクチド／グリコリドのモル比：５３／４７；
Ｔｇ：４０℃；
を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比４０：６０で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率８％％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００３２】
ｂ）皮下インプラントの製造
以下の特徴：
関連タンパク質（モノグラフ「ソマトロピン」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ ０９５１による液体クロマトグラフィー）：最大１３％（ピーク面積）；
二量体および高分子量の関連物質（モノグラフ「ソマトロピン」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ ０９５１によるサイズ排除クロマトグラフィー）：最大６％（ピーク面積）；
タンパク質含有率（モノグラフ「ソマトロピン」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ ０９５１によるサイズ排除クロマトグラフィー）：４．５〜５．３％（質量／質量）；
生物学的効力：（モノグラフ「ソマトロピン」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ ０９５１によるサイズ排除クロマトグラフィー）：２．７×３．２ＩＵ／ｍｇタンパク質；
賦形剤：グリシン／第一リン酸ナトリウム／第二リン酸ナトリウム十二水和物（それぞれ９１．４％／１．０％／２．５％（質量／質量））；
を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−ＧＨからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３０：７０で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を４０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を１．８ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。
【００３３】
被覆物内のタンパク質の完全性を以下の分析パッケージ：
ヨーロッパ薬局方の第４版のモノグラフ「ソマトロピン」（Ｎｒ ０９５１）に従った液体クロマトグラフィーによる関連タンパク質；
ヨーロッパ薬局方の第４版のモノグラフ「ソマトロピン」（Ｎｒ ０９５１）に従ったサイズ排除クロマトグラフィーによる、二量体および高分子量の関連物質；
ヨーロッパ薬局方の第４版のモノグラフ「ソマトロピン」（Ｎｒ ０９５１）に従ったサイズ排除クロマトグラフィーによるアッセイ；
によって調べた。
【００３４】
実施例５−組換えヒト成長ホルモン（ｒ−Ｈｕ−ＧＨ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
実施例４に記載のＰＬＧＡと同じ特徴を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比３２．５：６７．５で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率６．５％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００３５】
ｂ）皮下インプラントの製造
実施例４に記載のものと同じ特徴を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３０：７０で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を５０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を１．８ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。実施例４に記載のものと同じ分析パッケージによって、被覆物内のタンパク質の完全性を調べた。
【００３６】
実施例６−組換えヒト成長ホルモン（ｒ−Ｈｕ−ＧＨ）を含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
実施例４に記載のＰＬＧＡと同じ特徴を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比１６：８４で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率３．２％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００３７】
ｂ）皮下インプラントの製造
実施例４に記載のものと同じ特徴を有するタンパク質ｒ−Ｈｕ−Ｇ−ＣＳＦからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比３０：７０で−１０℃でよく混合した。このようにして得られた粉末を６０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を１．８ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。
【００３８】
実施例７−インターフェロンα−２ａを含有する皮下インプラントの製造
ａ）エタノールで可塑化されたＰＬＧＡの製造
以下の特徴：
クロロホルム中（ｃ＝０．１ｇ／ｄｌ）で２５℃で測定されたインヘレント粘度０．１９ｄｌ／ｇ；
ラクチド／グリコリドのモル比：５３／４７；
Ｔｇ：４０℃；
を有するＰＬＧＡを、２５０μｍ未満の粒径が得られるまで粉砕する。０．１２ｇ／ｍｌに等しい、エタノール中のＰＬＧＡの濃度が得られるまで、粉砕物に過剰量のエタノールを添加し、４５℃に加熱した水浴に入れて、１分間攪拌する。エタノールがポリマー中に拡散し、粘性のゲルが形成される。このゲルを３分間、エタノール中で維持する。これに続いて、２０％（重量／重量）に等しい量のエタノールを含有するＰＬＧＡが得られるまで、２０℃で乾燥させる。このようにして得られたポリマーを未処理の同じ種類のポリマー自体と、−１０℃にて重量比４０：６０で混合し、次いで、前記混合物を７５℃で押出し成形する。次いで、押出物を−１０℃で粉砕して、エタノール含有率８％（質量／質量）の可塑化ＰＬＧＡが得られる。
【００３９】
ｂ）皮下インプラントの製造
以下の特徴：
関連タンパク質（モノグラフ「インターフェロンα−２濃厚溶液」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ １１１０による液体クロマトグラフィー）：最大５％（ピーク面積）；
タンパク質含有率：１．８％（質量／質量）；
生物学的効力：（モノグラフ「インターフェロンα−２濃厚溶液」−ヨーロッパ薬局方の第４版のＮｒ １１１０によるサイズ排除クロマトグラフィー）：２．３×１０8ＩＵ／ｍｇタンパク質；
賦形剤；酢酸ナトリウム／塩化ナトリウム／トレハロース（それぞれ５．９％／８．４％／８３．９％（質量／質量））；
を有するタンパク質インターフェロンα−２ａからなる活性成分と、可塑化ポリマー（ＰＬＧＡ）とを、それぞれ重量比２５：７５で−１０℃でよく混合した。
【００４０】
このようにして得られた粉末を４０℃で押出し成形した。次いで、得られた押出物（直径１．５ｍｍ）を長さ１８ｍｍに切断し、それぞれ重量４０ｍｇであり、タンパク質を４０×１０6ＩＵに等しい量で含有する円筒形被覆物を形成した。
【００４１】
デポー（depot）内のタンパク質の完全性を以下の分析パッケージ：
ヨーロッパ薬局方の第４版のモノグラフ「インターフェロンα−２濃厚溶液」（Ｎｒ １１１０）に従った液体クロマトグラフィーによる関連タンパク質；によって調べた。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性成分がＰＬＧＡのマトリックス中に分散された、皮下インプラントを製造するための、外部可塑剤としてのエタノールの使用。
【請求項２】
前記エタノールの濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して２〜１５重量％であることを特徴とする、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して３〜１０重量％であることを特徴とする、請求項２に記載の使用。
【請求項４】
前記濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して５〜１０重量％であることを特徴とする、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントを製造するための、請求項４に記載のエタノールの使用。
【請求項６】
エタノールで可塑化されたＰＬＧＡ。
【請求項７】
ＰＬＧＡの重量に対して２〜１５重量％の濃度でエタノールを含有する、請求項６に記載の可塑化ＰＬＧＡ。
【請求項８】
前記濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して３〜１０重量％で構成される、請求項８に記載の可塑化ＰＬＧＡ。
【請求項９】
前記濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して５〜１０重量％である、請求項８に記載の可塑化ＰＬＧＡ。
【請求項１０】
以下の段階：
ａ）ＰＬＧＡを粉砕して、その粒子が２５０μｍ未満の寸法を有する粉砕物を得る段階；
ｂ）上記の段階で得られた粉砕物に、ＰＬＧＡに対して５〜２０重量部の濃度でエタノールを添加し、次いで、粘性かつ安定性のゲルが得られるまで、得られた混合物を４５〜６５℃の温度に加熱する段階；
ｃ）段階（ｂ）で得られた生成物を乾燥させる段階；
ｄ）範囲−２０〜＋５℃の温度で乾燥生成物を粉砕する段階；
ｅ）上記の段階から得た生成物を、粒径２５０μｍ未満の粉砕物が得られるまで予め粉砕されたＰＬＧＡ自体と、それぞれ重量比１０：９０〜９９：１にて、温度−２０〜＋５℃で任意に混合する段階；
ｆ）７５℃で前述の混合物を押出し成形する段階；
ｇ）温度−２０〜＋５℃で押出物を粉砕する段階；
を含む、請求項６から９のいずれか一項に記載の可塑化ＰＬＧＡを製造する方法。
【請求項１１】
段階（ｂ）において、エタノールが、ＰＬＧＡに対して１０重量部の量で添加されることを特徴とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
段階（ｃ）において、ＰＬＧＡの重量に対して１０〜３０重量％で構成される、ＰＬＧＡ中のエタノールの濃度が得られるまで、乾燥が行われることを特徴とする、請求項１０から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記エタノールの濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して２０重量％である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記乾燥が、２０〜２５℃で構成される温度で空気流下にて行われることを特徴とする、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１５】
段階（ｄ）、（ｅ）および（ｇ）における粉砕温度が−１０℃であることを特徴とする、請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
段階（ｅ）において、段階（ｄ）から得られるＰＬＧＡと、ＰＬＧＡ自体との重量比が、１６：８４〜４０：６０で構成されることを特徴とする、請求項１０から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
請求項６から９のいずれか一項に記載のエタノールで可塑化されたＰＬＧＡ中に分散された活性成分を含有する皮下インプラント。
【請求項１８】
請求項６から９のいずれか一項に記載の可塑化ＰＬＧＡ中に分散された熱不安定性活性成分を含有する、請求項１７に記載の皮下インプラント。
【請求項１９】
前記熱不安定性活性成分が、遺伝子治療用のタンパク質、ワクチン、抗体およびベクターからなる種類から選択されることを特徴とする、請求項１８に記載の皮下インプラント。
【請求項２０】
以下の段階：
ｉ）温度−２０〜＋５℃にて、請求項６から９のいずれか一項に記載の可塑化ＰＬＧＡと、活性成分を混合する段階；
ｉｉ）段階（ｉ）から得られた粉砕物を７０℃未満の温度で押出し成形する段階；
を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の皮下インプラントの製造方法。
【請求項２１】
段階（ｉ）の温度が−１０℃であることを特徴とする、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
ＰＬＧＡの重量に対して３〜４重量％の濃度でエタノールを含有する可塑化ＰＬＧＡが段階（ｉ）で使用される場合に、段階（ｉｉ）の温度が６０℃未満であることを特徴とする、請求項２０から２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
ＰＬＧＡの重量に対して５〜１０重量％の濃度でエタノールを含有する可塑化ＰＬＧＡが使用される場合に、段階（ｉｉ）の温度が４０℃に等しいことを特徴とする、請求項２０から２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１】
活性成分がＰＬＧＡのマトリックス中に分散された、皮下インプラントを製造するための、外部可塑剤としてのエタノールの使用。
【請求項２】
前記エタノールの濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して２〜１５重量％であることを特徴とする、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して３〜１０重量％であることを特徴とする、請求項２に記載の使用。
【請求項４】
前記濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して５〜１０重量％であることを特徴とする、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
熱不安定性活性成分を含有する皮下インプラントを製造するための、請求項４に記載のエタノールの使用。
【請求項６】
エタノールで可塑化されたＰＬＧＡ。
【請求項７】
ＰＬＧＡの重量に対して２〜１５重量％の濃度でエタノールを含有する、請求項６に記載の可塑化ＰＬＧＡ。
【請求項８】
前記濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して３〜１０重量％で構成される、請求項８に記載の可塑化ＰＬＧＡ。
【請求項９】
前記濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して５〜１０重量％である、請求項８に記載の可塑化ＰＬＧＡ。
【請求項１０】
以下の段階：
ａ）ＰＬＧＡを粉砕して、その粒子が２５０μｍ未満の寸法を有する粉砕物を得る段階；
ｂ）上記の段階で得られた粉砕物に、ＰＬＧＡに対して５〜２０重量部の濃度でエタノールを添加し、次いで、粘性かつ安定性のゲルが得られるまで、得られた混合物を４５〜６５℃の温度に加熱する段階；
ｃ）段階（ｂ）で得られた生成物を乾燥させる段階；
ｄ）範囲−２０〜＋５℃の温度で乾燥生成物を粉砕する段階；
ｅ）上記の段階から得た生成物を、粒径２５０μｍ未満の粉砕物が得られるまで予め粉砕されたＰＬＧＡ自体と、それぞれ重量比１０：９０〜９９：１にて、温度−２０〜＋５℃で任意に混合する段階；
ｆ）７５℃で前述の混合物を押出し成形する段階；
ｇ）温度−２０〜＋５℃で押出物を粉砕する段階；
を含む、請求項６から９のいずれか一項に記載の可塑化ＰＬＧＡを製造する方法。
【請求項１１】
段階（ｂ）において、エタノールが、ＰＬＧＡに対して１０重量部の量で添加されることを特徴とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
段階（ｃ）において、ＰＬＧＡの重量に対して１０〜３０重量％で構成される、ＰＬＧＡ中のエタノールの濃度が得られるまで、乾燥が行われることを特徴とする、請求項１０から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記エタノールの濃度が、ＰＬＧＡの重量に対して２０重量％である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記乾燥が、２０〜２５℃で構成される温度で空気流下にて行われることを特徴とする、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１５】
段階（ｄ）、（ｅ）および（ｇ）における粉砕温度が−１０℃であることを特徴とする、請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
段階（ｅ）において、段階（ｄ）から得られるＰＬＧＡと、ＰＬＧＡ自体との重量比が、１６：８４〜４０：６０で構成されることを特徴とする、請求項１０から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
請求項６から９のいずれか一項に記載のエタノールで可塑化されたＰＬＧＡ中に分散された活性成分を含有する皮下インプラント。
【請求項１８】
請求項６から９のいずれか一項に記載の可塑化ＰＬＧＡ中に分散された熱不安定性活性成分を含有する、請求項１７に記載の皮下インプラント。
【請求項１９】
前記熱不安定性活性成分が、遺伝子治療用のタンパク質、ワクチン、抗体およびベクターからなる種類から選択されることを特徴とする、請求項１８に記載の皮下インプラント。
【請求項２０】
以下の段階：
ｉ）温度−２０〜＋５℃にて、請求項６から９のいずれか一項に記載の可塑化ＰＬＧＡと、活性成分を混合する段階；
ｉｉ）段階（ｉ）から得られた粉砕物を７０℃未満の温度で押出し成形する段階；
を含む、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の皮下インプラントの製造方法。
【請求項２１】
段階（ｉ）の温度が−１０℃であることを特徴とする、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
ＰＬＧＡの重量に対して３〜４重量％の濃度でエタノールを含有する可塑化ＰＬＧＡが段階（ｉ）で使用される場合に、段階（ｉｉ）の温度が６０℃未満であることを特徴とする、請求項２０から２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
ＰＬＧＡの重量に対して５〜１０重量％の濃度でエタノールを含有する可塑化ＰＬＧＡが使用される場合に、段階（ｉｉ）の温度が４０℃に等しいことを特徴とする、請求項２０から２２のいずれか一項に記載の方法。
【公表番号】特表２００９−５１３１６５（Ｐ２００９−５１３１６５Ａ）
【公表日】平成２１年４月２日（２００９．４．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００６−５１６１８３（Ｐ２００６−５１６１８３）
【出願日】平成１６年６月２４日（２００４．６．２４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００４／０５１２２６
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０００２７７
【国際公開日】平成１７年１月６日（２００５．１．６）
【出願人】（５０５４７２７８０）メディオラニューム ファーマシューティカルス リミテッド (2)
【Ｆターム（参考）】
【公表日】平成２１年４月２日（２００９．４．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成１６年６月２４日（２００４．６．２４）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＥＰ２００４／０５１２２６
【国際公開番号】ＷＯ２００５／０００２７７
【国際公開日】平成１７年１月６日（２００５．１．６）
【出願人】（５０５４７２７８０）メディオラニューム ファーマシューティカルス リミテッド (2)
【Ｆターム（参考）】
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